CN105770854A - 一种促进软骨组织生长和修复的保健品 - Google Patents
一种促进软骨组织生长和修复的保健品 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105770854A CN105770854A CN201610157648.9A CN201610157648A CN105770854A CN 105770854 A CN105770854 A CN 105770854A CN 201610157648 A CN201610157648 A CN 201610157648A CN 105770854 A CN105770854 A CN 105770854A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- milligrams
- health product
- polypeptide
- milligram
- glucosamine sulfate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 title abstract description 6
- 230000008439 repair process Effects 0.000 title abstract description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 57
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 54
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 54
- MTDHILKWIRSIHB-UHFFFAOYSA-N (5-azaniumyl-3,4,6-trihydroxyoxan-2-yl)methyl sulfate Chemical compound NC1C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C(O)C1O MTDHILKWIRSIHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 229960002849 glucosamine sulfate Drugs 0.000 claims abstract description 25
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 13
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 36
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 25
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 25
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 24
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 13
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 12
- 150000003625 trehaloses Chemical class 0.000 claims description 12
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 7
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 claims description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 claims description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 4
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 3
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 claims description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims 1
- 230000001035 methylating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 28
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 abstract 2
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 abstract 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 102100036601 Aggrecan core protein Human genes 0.000 description 13
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 108010067219 Aggrecans Proteins 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 8
- 101150082216 COL2A1 gene Proteins 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 101150091111 ACAN gene Proteins 0.000 description 5
- 102000002734 Collagen Type VI Human genes 0.000 description 5
- 108010043741 Collagen Type VI Proteins 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 5
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- 101000999998 Homo sapiens Aggrecan core protein Proteins 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 3
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical class C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100029136 Collagen alpha-1(II) chain Human genes 0.000 description 2
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 2
- 101000771163 Homo sapiens Collagen alpha-1(II) chain Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150106167 SOX9 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 101000623895 Bos taurus Mucin-15 Proteins 0.000 description 1
- 102000004405 Collectins Human genes 0.000 description 1
- 108090000909 Collectins Proteins 0.000 description 1
- 101000711846 Homo sapiens Transcription factor SOX-9 Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 102100034204 Transcription factor SOX-9 Human genes 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000008354 tissue degradation Effects 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7008—Compounds having an amino group directly attached to a carbon atom of the saccharide radical, e.g. D-galactosamine, ranimustine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7016—Disaccharides, e.g. lactose, lactulose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/722—Chitin, chitosan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
- A61K38/014—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from connective tissue peptides, e.g. gelatin, collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
- A61K9/2063—Proteins, e.g. gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
- A61K9/4866—Organic macromolecular compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种促进软骨组织生长和修复的保健品。每单位保健品包括下列重量成分的物质:130‑150毫克多肽,60‑300毫克II型胶原蛋白,150‑750毫克硫酸氨基葡萄糖,60‑300毫克海藻糖,60‑300毫克壳聚糖,0‑1000毫克明胶。本发明不但可以提供人体所需要的硫酸氨基葡萄糖和II型胶原蛋白,以弥补这两种物质在人体内的不足,还可以提高人体相关细胞的生理活性,使人体可以充分利用这两种物质合成软骨,最终修复退化的软骨组织。
Description
技术领域
本发明涉及一种促进软骨组织修复的保健品。
背景技术
随着人体的老化,人体的软骨组织会发生退行性病变,出现僵硬甚至剧烈疼痛等症状。为防止软骨组织退化,促进软骨组织的修复,人们常服用构成软骨组织的两种基础物质硫酸氨基葡萄糖和II型胶原蛋白。在正常的生理条件下,人体的软骨细胞可以利用这些物质合成软骨组织。当软骨细胞因为损伤或者其它原因而数量减少时,平常在人体内处于“休眠状态”的间充质干细胞可以分化成为软骨细胞,使人体保持足够数量的软骨细胞,以维持人体正常的生理功能。当人体软骨细胞数量减少或者功能降低,而间充质干细胞又不能分化补充的时候,人体内即使有足够多的硫酸氨基葡萄糖和II型胶原蛋白,也不能被利用来合成软骨组织。为此,人体不但要有足够的硫酸氨基葡萄糖和II型胶原蛋白,还需要保持细胞的生理活性,以便这些物质可以被充分利用合成软骨组织。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种促进软骨组织生长和修复的保健品。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:
本发明提供的促进软骨组织生长和修复的保健品,每单位保健品包括下列重量成分的物质:30-150毫克多肽,60-300毫克II型胶原蛋白,150-750毫克硫酸氨基葡萄糖,60-300毫克海藻糖,60-300毫克壳聚糖,0-1000毫克明胶。
所述的多肽的氨基酸序列是:RGDDHLSDNYT。
优选的,本发明的多肽还可以是多肽的衍生物。所述多肽衍生物为所述的多肽的修饰产物。
进一步的,所述修饰包括甲基化修饰、烷基化修饰、PEG修饰、酰基化修饰。
进一步的,所述修饰是增加氨基酸的数量,延长多肽的分子链长度而不改变该多肽的生理功能的修饰。
本发明中,将氨基酸序列中的氨基酸残基用本技术领域中公知的单字母表述(例如,在甘氨酸残基的情况下为“G”)。
本发明提供的可以促进软骨组织生长和修复的保健品,可以制成胶囊或者片剂。
优选的,本发明提供的保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖。
优选的,本发明提供的保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖,700毫克明胶。
优选的,本发明提供的保健品包括下列重量成分的物质:30毫克多肽,60毫克II型胶原蛋白,150毫克硫酸氨基葡萄糖,60毫克海藻糖,60毫克壳聚糖。
优选的,本发明提供的保健品包括下列重量成分的物质:150毫克多肽,300毫克II型胶原蛋白,750毫克硫酸氨基葡萄糖,300毫克海藻糖,300毫克壳聚糖,500毫克明胶。
各种组分的生物功效为:(1)硫酸氨基葡萄糖可以被人体利用合成软骨组织的重要组分聚集蛋白聚糖;(2)II型胶原蛋白可以被人体利用合成软骨组织的另一重要组分II型胶原;(3)氨基酸序列为RGDDHLSDNYT的多肽或者它的衍生物可以促进间充质干细胞向软骨细胞的分化,同时可以提高软骨细胞合成聚集蛋白聚糖和II型胶原;(4)壳聚糖可以协助提高多肽RGDDHLSDNYT的生理活性,同时提高细胞的生理活性;(5)海藻糖和壳聚糖一起可以保护多肽RGDDHLSDNYT在人体消化道内不被降解;(6)明胶是赋形剂,同时也可以参与人体软骨组织中胶原的合成。
本发明的有益效果:
本发明不但可以提供人体所需要的硫酸氨基葡萄糖和II型胶原蛋白,以弥补这两种物质在人体内的不足,还可以提高人体相关细胞的生理活性,使人体可以充分利用这两种物质合成软骨,最终修复退化的软骨组织。
本发明的保健产品,在提供人体合成软骨组织所需要的重要营养物质的同时,还可以促进间充质干细胞和软骨细胞的生理活性,提高这些物质的吸收和利用率。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供的保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖。
制备方法如下:
把II型胶原蛋白、硫酸氨基葡萄糖、多肽、海藻糖、壳聚糖等粉末混合,装入由明胶制成的胶囊中,制成口服保健品。每个成年人每天服用3次,每次1粒。
实施例2
本实施例提供的保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖,700毫克明胶。
制备方法如下:
把II型胶原蛋白、硫酸氨基葡萄糖、多肽、海藻糖、壳聚糖和明胶混合,压制成片状颗粒物。每个成年人每天服用3次,每次1片。
实施例3
本实施例提供的保健品包括下列重量成分的物质:30毫克多肽,60毫克II型胶原蛋白,150毫克硫酸氨基葡萄糖,60毫克海藻糖,60毫克壳聚糖。
制备方法如下:
把II型胶原蛋白、硫酸氨基葡萄糖、多肽、海藻糖、壳聚糖粉末混合,装入由明胶制成的胶囊中,制成口服保健品。每个成年人每天服用3次,每次1粒。
实施例4
本实施例提供的保健品包括下列重量成分的物质:150毫克多肽,300毫克II型胶原蛋白,750毫克硫酸氨基葡萄糖,300毫克海藻糖,300毫克壳聚糖,500毫克明胶。
制备方法如下:
把II型胶原蛋白、硫酸氨基葡萄糖、多肽、海藻糖、壳聚糖和明胶混合,压制成片状颗粒物。每个成年人每天服用3次,每次1片。
多肽RGDDHLSDNYT生理功能的实验验证:
实验(1):把多肽RGDDHLSDNYT溶解在诱导人体间充质干细胞向软骨细胞分化的培养液中,使最终浓度达到每毫升1微克,培养从人骨髓中提取的间充质干细胞。在培养7天、14天以后,提取细胞内的总RNA,反转录成cDNA, 通过实时定量PCR法测定表明间充质干细胞向软骨细胞分化的特征基因ACAN, COL2A1, SOX9等的表达。结果表明,在实验进行到第7天的时候,和在不加多肽的培养液中生长的细胞相比,在含有多肽的培养液中生长的细胞内ACAN基因的表达提高到3倍,COL2A1基因的表达提高到2.3倍,SOX9基因的表达提高到2.2倍,经过统计分析,证明三种基因的表达都有显著提高(p<0.05)。在实验进行到第14天的时候,和在不含多肽的培养液中生长的细胞相比,在含有多肽的培养液中生长的细胞内ACAN基因的表达提高到1.9倍,COL2A1基因的表达提高到2.7倍,SOX9基因的表达提高到1.8倍,经过统计分析,证明三种特征基因的表达都有显著提高(p<0.05)。在实验进行到21天后,通过二甲基亚甲蓝方法(DMB)定量分析分泌到细胞培养液中的粘多糖的含量,来确定细胞分泌的聚集蛋白聚糖的量的变化。实验表明,多肽可以使聚集蛋白聚糖的总分泌量提高到2.1倍,统计分析表明增加显著(p<0.05)。本实验的最终结果为重复5次后的平均结果,干细胞来自5个不同的健康捐献人。
实验(2):把多肽RGDDHLSDNYT溶解在细胞培养液中,使终浓度达到1微克/毫升,培养从人的椎间盘中分离的髓核细胞和纤维环细胞,采用和实验(1)相同的方法,分析这两种软骨细胞中结构蛋白基因ACAN, COL2A1的表达。结果表明,在细胞被培养7天后,多肽可以使髓核细胞内ACAN基因的表达提高到1.7倍,COL2A1基因的表达提高到2.8倍;使纤维环细胞内ACAN基因的表达提高到2.9倍,COL2A1基因的表达提高到1.7倍。在细胞被培养14天后,多肽可以使髓核细胞内ACAN基因的表达提高到2.2倍,COL2A1基因的表达提高到2.7倍;多肽可以使纤维环细胞内ACAN基因的表达提高到2.5倍,COL2A1基因的表达提高到1.9倍。统计分析表明,在细胞被培养7天、14天后,两种基因的表达都有显著提高(p<0.05)。在软骨细胞被培养21天后,通过二甲基亚甲蓝(DMB)染色定量分析分泌到细胞培养液中的粘多糖的含量,以此来推测细胞合成聚集蛋白聚糖的效果。实验表明,纤维环细胞分泌的聚集蛋白聚糖提高到了2.8倍,髓核细胞分泌的聚集蛋白聚糖提高到了2.3倍。统计分析表明增加显著(p<0.05)。本实验的最终结果为重复5次后的平均结果,软骨细胞来自5个不同的人体。
实验(3):把30个从牛尾分离的完整软骨组织在组织培养液中培养7天后,把其中的20个软骨组织注射75微升含有100微克胰蛋白酶的磷酸缓冲液,使组织降解,形成软骨损伤。另外10个不经过任何处理的软骨组织作为正常对照。继续培养4天后,向10个受损伤的软骨组织中注入75微升含有75微克多肽RGDDHLSDNYT的磷酸缓冲液,向另外10个受损伤的软骨组织中注射不含多肽的75微升磷酸缓冲液作为对照。继续培养14天以后,把组织取出,提取其中的蛋白质,用免疫印迹法(western blot)对聚集蛋白聚糖和II型胶原蛋白进行半定量分析。结果表明,与对照组中没有注射多肽的组织进行比较,注射了多肽的软骨组织中聚集蛋白聚糖的含量提高到了2.5倍,II型胶原蛋白的量提高到了2.1倍,统计分析表明效果显著(p<0.05)。注射了多肽的软骨组织中聚集蛋白聚糖和II型胶原蛋白的含量与没有经过任何处理的正常组织中的含量相似。通过组织切片染色分析,多肽RGDDHLSDNYT可以加快受损伤的软骨组织愈合。
实验(4):选用10只新西兰大白兔作为实验对象,把每只白兔的4个椎间盘软骨组织用注射用针头进行人工损伤后,将75微克多肽RGDDHLSDNYT溶解在50微升磷酸缓冲液中注射到2个受损伤的软骨组织内,向另外两个椎间盘内只注射50微升磷酸缓冲液,作为对照。在相同的条件下饲养大白兔30天后,把软骨组织取出进行切片染色检测。和只注射磷酸缓冲液的大白兔相比,多肽显著促进大白兔椎间盘软骨组织的愈合。提取椎间盘髓核中的蛋白质,通过免疫印迹法(western blot)对聚集蛋白聚糖和II型胶原蛋白进行半定量分析,发现在经过多肽处理后,椎间盘髓核中聚集蛋白聚糖的含量是对照组的1.9倍,II型胶原蛋白的量是对照组的2.6倍。
上述实验通过多肽RGDDHLSDNYT对间充质干细胞、软骨细胞、离体软骨组织、活体大白兔等的作用,从多方面论证了这一多肽对促进软骨组织修复的生理功效。
临床试验:
一、临床资料
根据医学诊断标准,诊断为软骨组织损伤的门诊和住院患者。共选取300例,其中男性150名,女性150名,年龄最大者78岁,最小者18岁。
二、试验方法
给予患者本发明实施例1所制备的保健品,20天为一个疗程,使用2个疗程。每天服用3次,每次1粒。
三、疗效评定标准:
疼痛观察:不痛(0分);疼痛,但不严重,不影响生活和工作(2分);疼痛尚可忍受,对生活和工作稍有影响(4分);疼痛剧烈,很难忍受,影响生活和工作(6分)。
压痛观察:无(0分);有压痛,尚可忍受(2分);压痛明显,皱眉称痛(4分);稍压即痛,拒绝触摸(6分)。肿胀测定:无(0分);轻度肿胀,不超过该部位或邻近骨突起(1分);肿胀,与该部位或邻近骨突起相平(2分);明显肿胀,超过该部位或邻近骨突起(3分)。
功能障碍测定:无(0分);轻度,即与健侧比幅度减少不超过30%(1分);中度,即与健侧比幅度减少31%~50%(2分);重度,即与健侧比幅度减少超过50%(3分)。
临床愈合:症状全部消失,功能活动恢复正常,积分为0;显效:症状明显缓解,功能活动基本恢复,能参加正常工作,积分下降6个分值以上;有效:症状有缓解,功能活动有改善,能做轻工作,积分下降3~5个分值;无效:与治疗前相比,症状、体征改善不明显,积分下降3个分值以下。
四、疗效结果
300例患者中,临床愈合276例,显效13例,有效11例,无效0例。总有效率100%。
典型病例
病例1:林某,男性,45岁。患有椎间盘软骨组织退化并有疼痛感,服用本发明实施例1的保健品1个疗程后,疼痛感减轻,继续服用2个疗程,疼痛感完全消失。
病例2:张某,男性,62岁。患有椎间盘软骨组织退化并有疼痛感,持续2年多,严重影响日常生活,服用本发明实施例1的保健品2个疗程后,疼痛感减轻,继续服用3个疗程,疼痛感完全消失,随访至今未复发。
病例3:谢某,女性,53岁。患有膝盖软骨组织退化并有疼痛感,服用本发明实施例1的保健品2个疗程后,患者的疼痛感明显减轻,继续服用2个疗程,疼痛感消失。
氨基酸序列表
<110>王宏田,冷晖
<120>一种促进软骨组织生长和修复的保健品
<160>1
<170>Patent Inversion 3.3
<210>1
<211>11
<212>PRT
<213>人工合成
<400> 1
Arg- Gly -Asp –Asp- His- Leu- Ser –Asp- Asn -Tyr -Thr
Claims (9)
1.一种促进软骨组织生长和修复的保健品,其特征在于,每单位保健品包括下列重量成分的物质:30-150毫克多肽,60-300毫克II型胶原蛋白,150-750毫克硫酸氨基葡萄糖,60-300毫克海藻糖,60-300毫克壳聚糖,0-1000毫克明胶;
所述的多肽的氨基酸序列是:RGDDHLSDNYT。
2.根据权利要求1所述的保健品,其特征在于,每单位保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖。
3.根据权利要求1所述的保健品,其特征在于,每单位保健品包括下列重量成分的物质:80毫克多肽,200毫克II型胶原蛋白,500毫克硫酸氨基葡萄糖,150毫克海藻糖,100毫克壳聚糖,700毫克明胶。
4.根据权利要求1所述的保健品,其特征在于,每单位保健品包括下列重量成分的物质:30毫克多肽,60毫克II型胶原蛋白,150毫克硫酸氨基葡萄糖,60毫克海藻糖,60毫克壳聚糖。
5.根据权利要求1所述的保健品,其特征在于,每单位保健品包括下列重量成分的物质:150毫克多肽,300毫克II型胶原蛋白,750毫克硫酸氨基葡萄糖,300毫克海藻糖,300毫克壳聚糖,500毫克明胶。
6.根据权利要求1所述的保健品,其特征在于,所述的多肽还包括它的衍生物。
7.根据权利要求6所述的保健品,其特征在于,所述多肽衍生物为所述的多肽的修饰产物。
8.根据权利要求7所述的保健品,其特征在于,所述修饰包括甲基化修饰、烷基化修饰、PEG修饰、酰基化修饰。
9.根据权利要求7所述的保健品,其特征在于,所述修饰是增加氨基酸的数量,延长多肽的分子链长度而不改变该多肽的生理功能的修饰。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610157648.9A CN105770854A (zh) | 2016-03-21 | 2016-03-21 | 一种促进软骨组织生长和修复的保健品 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610157648.9A CN105770854A (zh) | 2016-03-21 | 2016-03-21 | 一种促进软骨组织生长和修复的保健品 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105770854A true CN105770854A (zh) | 2016-07-20 |
Family
ID=56394143
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610157648.9A Pending CN105770854A (zh) | 2016-03-21 | 2016-03-21 | 一种促进软骨组织生长和修复的保健品 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105770854A (zh) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102423487A (zh) * | 2011-12-23 | 2012-04-25 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 一种骨关节保健组合物及其应用 |
CN105395478A (zh) * | 2015-12-02 | 2016-03-16 | 北京康力基生物科技有限公司 | 一种稳定的氨基葡萄糖口服液及其制备工艺 |
-
2016
- 2016-03-21 CN CN201610157648.9A patent/CN105770854A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102423487A (zh) * | 2011-12-23 | 2012-04-25 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 一种骨关节保健组合物及其应用 |
CN105395478A (zh) * | 2015-12-02 | 2016-03-16 | 北京康力基生物科技有限公司 | 一种稳定的氨基葡萄糖口服液及其制备工艺 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
袁海鹰: "鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞金属蛋白酶mRNA表达的影响", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101827617B (zh) | 适用于治疗脊柱疾病、异常或病症的组合物 | |
Ma et al. | Artificial M2 macrophages for disease-modifying osteoarthritis therapeutics | |
Oliveira et al. | Polysaccharide‐based materials for cartilage tissue engineering applications | |
CA2801010C (en) | Peptide and use thereof for treatment of cartilage damage and arthritis | |
DE60105772T2 (de) | Stimulation des knorpelwachstums mit agonisten des nicht-proteolytisch aktivierten thrombin rezeptors | |
KR101889697B1 (ko) | 근섬유 단편을 사용한 근조직 재생 | |
CN103732614A (zh) | 结合透明质酸的合成肽聚糖、制备和使用方法 | |
EP2627343B1 (en) | Agents for use for promoting the synthesis of collagen and proteoglycan in intervertebral disc cells | |
EP3517144A1 (en) | Composition for cartilage regeneration and preparation method therefor | |
Fini et al. | In vitro study comparing two collageneous membranes in view of their clinical application for rotator cuff tendon regeneration | |
CN108865986A (zh) | 用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂及其制备方法和应用 | |
KR101073854B1 (ko) | 히아루론산, 글리코사미노글리칸 및/또는 콜라겐의 생합성을 촉진하는 우리딘 및 우리딘 유도체 | |
CN107001488A (zh) | 硫酸乙酰肝素 | |
Bai et al. | Coculture with partial digestion notochordal cell-rich nucleus pulposus tissue activates degenerative human nucleus pulposus cells | |
Kim et al. | Extracellular vesicles delivered by injectable collagen promote bone–tendon interface healing and prevent fatty degeneration of rotator cuff muscle | |
CN103357071A (zh) | 软骨组织培养材料 | |
US20120122791A1 (en) | Substrate for cartilage cultivation using artificial collagen, and method for cartilage regeneration treatment using the substrate | |
CN105693822A (zh) | 一种促进软骨组织修复的多肽、多肽衍生物 | |
CN105770854A (zh) | 一种促进软骨组织生长和修复的保健品 | |
Liu et al. | Construction of tissue-engineered nucleus pulposus by stimulation with periodic mechanical stress and BMP-2 | |
CN109762069A (zh) | 一种融合蛋白、其药物组合物及用途 | |
KR102518314B1 (ko) | 골관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
Kleuskens et al. | Neo‐cartilage formation using human nondegenerate versus osteoarthritic chondrocyte‐derived cartilage organoids in a viscoelastic hydrogel | |
US20220296648A1 (en) | Composition for regenerating nucleus pulposus | |
CN105734102B (zh) | 胶原蛋白肽的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160720 |
|
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |