CN109069553A - 用于增加瘦体重的双歧杆菌 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌，特别是但不限于动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的细菌，以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途。

Description

用于增加瘦体重的双歧杆菌
技术领域
本发明涉及包含双歧杆菌(Bifidobacterium)属的细菌，特别是但不限于动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)乳酸(lactis)亚种(菌株)420(B420)的细菌，以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物的用途。本发明还涉及含有所述细菌的食物产品、膳食补充剂和药学上可接受的制剂。
背景技术
瘦体重是身体组成的一个组分，通过从总体重中减去体脂重量来计算。瘦的总体重的百分比通常在60％-90％之间。瘦体重主要是肌肉。
肌肉通过作为氨基酸的主要储库以在没有从肠道吸收的氨基酸的情况下维持重要组织和器官中的蛋白质合成并通过提供肝糖异生前体来在全身蛋白质代谢中发挥核心作用。
此外，改变的肌肉代谢在发生中起关键作用，并且因此预防许多常见的病理状况和慢性疾病。然而，足够的肌肉质量、力量和代谢功能的维持很少(如果有的话)被作为膳食摄入推荐的相关终点的靶标(Am.J.Clin.Nutr.[美国临床营养学杂志]，2006年9月，第84卷，第3期，475-482)。
与人类衰老相关的重大改变是肌肉质量逐渐下降，即可能导致力量和功能减少的螺旋下降。
在1989年，提出术语“肌少症”来描述这种与年龄相关的肌肉质量的减少。肌少症是一种以骨骼肌质量和功能丧失为特征的病症。虽然它主要是一种老年的疾病，但它的发展可能与老年人中不常见的病症相关。肌少症是一种以骨骼肌质量和力量的逐渐和全身性丧失为特征的综合征，并且该综合征与身体残疾、生活质量差和死亡严格相关(Santilli等人，Clinical Cases in Mineral and Bone Metabolism[矿物质和骨代谢的临床病例]2014；11(3)：177-180)。
老年综合症在老年个体中是常见的、复杂的并且非常损害健康的。老年综合症是由多个系统上疾病和年龄的不完全了解的相互作用引起的，这产生了一系列体征和症状。谵妄、跌倒和失禁是老年综合症的实例。
肌少症在老年群体中很普遍。肌少症有多种影响因素：生命过程中的衰老过程、早期生活发育影响、低于最佳饮食、卧床或久坐的生活方式、慢性疾病和某些药物治疗。肌少症代表具有高个人代价(personal toll)的健康的受损状态-流动性障碍、跌倒和骨折的风险增加、进行日常生活的活动的能力受损、残疾、丧失独立性、以及死亡风险增加(AgeAgeing[年龄与衰老]，2010年7月；39(4)；412-423)。
虽然肌少症主要在老年人中观察到，但它也可以在年轻成人中发展，同样是痴呆症和骨质疏松症的情况。在一些个体中，可以鉴定肌少症的明确且单一的原因。在其他情况下，没有明显的原因可以被分离。因此，原发性肌少症和继发性肌少症的类别可能在临床实践中有用。当除了衰老本身外没有其他原因明显时，肌少症可以被认为是“原发性”(或与年龄相关)，当一个或多个其他原因明显时，肌少症可以被认为是“继发性”。在许多老年人中，肌少症的病因学是多因素的，使得可能无法将每个个体定性为具有原发性或继发性病症。这种情况与将肌少症视为多方面的老年综合症是一致的。
Prado等人，J.Parental and Enteral Nutr.[肠外与肠内营养杂志]，2014，论证了瘦体重的重要性及其与死亡率和发病率的关系。
Ruiz等人，BMJ[英国医学杂志]，2008，描述了肌肉力量和死亡率之间的联系。
肌少症的主要治疗是运动。具体而言，抗阻训练或力量训练-用重物或健身带(resistance band)增加肌肉力量和耐力的运动-已被证明可用于预防和治疗肌少症。然而，对于老年人或身体受损的人来说，可能难以或甚至不可能进行增加瘦体重所需的锻炼或使瘦体重丧失的后果最小化的锻炼。
本发明旨在提供现有技术问题的解决方案。
发明内容
在一个方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重。
特别地，本发明涉及包含益生菌双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重。
特别地，本发明涉及包含动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重。
在另一个方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重中治疗使用。
特别地，本发明涉及包含益生菌双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重中治疗使用。
特别地，本发明涉及包含动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重中治疗使用。
在又另外的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途。
特别地，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途，其中该双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
在仍另外的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途，其中该双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
在又另外的方面，本发明包括包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的非治疗用途。
特别地，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的非治疗用途，其中该双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
在仍另外的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的非治疗用途，其中该双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
在又另外的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重。
在具体的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重，并且其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
在另外的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在哺乳动物中增加了瘦体重，并且其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
在又另外的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的非治疗方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在哺乳动物中增加了瘦体重。
在具体的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的非治疗方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重，并且其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
在另外的方面，本发明涉及用于增加瘦体重的非治疗方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中该组合物的施用在哺乳动物中增加了瘦体重，并且其中该双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
在另外的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重。
在又另外的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重，其中该双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
在仍具体的方面，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重，其中该双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
优点
诸位发明人出人意料地发现，用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物(尤其是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌)、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物的治疗显示了在哺乳动物中瘦体重的增加。这赋予了双歧杆菌属的细菌或其混合物(尤其是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌)与一种或多种益生元和/或纤维组合用于治疗和/或预防与瘦体重丧失相关的许多疾病的潜力。
具体实施方式
细菌
用于本发明的细菌选自双歧杆菌属的细菌或其混合物。优选地，在本发明中使用的双歧杆菌是通常被认为是安全的并且优选是GRAS批准的双歧杆菌。通常被认为是安全的(GRAS)是美国食品和药物管理局(FDA)的标志数据：专家认为添加到食物中的化学物质或物质是安全的，并且因此免除了通常的联邦食品，药品和化妆品法案(FFDCA)食品添加剂耐受性要求。
在一个实施例中，本发明涉及一种组合物，该组合物包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维。
在另一个实施例中，本发明涉及用于包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，用于在哺乳动物中增加瘦体重。
在另一个实施例中，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途。
在另外的实施例中，本发明涉及用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重。
在又另外的实施例，本发明涉及包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重。
细菌可以以能够发挥本文所述的作用的任何形式使用。例如，细菌可以是有活力的、休眠的、失活的或死的细菌。优选地，细菌是有活力的细菌。
细菌可以包含完整细菌或可以包含细菌组分。此类组分的实例包括细菌细胞壁组分(例如肽聚糖)、细菌核酸(例如DNA和RNA)、细菌膜组分和细菌结构组分(例如蛋白质、碳水化合物、脂质和这些的组合(例如脂蛋白、糖脂和糖蛋白))。
细菌还可以包含或可替代地包含细菌代谢物。在本说明书中，术语“细菌代谢物”包括在益生菌产品的制造和储存期间以及在哺乳动物中的胃肠道转运期间的细菌的生长、生存、持续、转运或存在期间，作为细菌代谢的结果，由(益生菌)细菌产生或修饰的所有分子。实例包括所有有机酸、无机酸、碱、蛋白质和肽、酶和辅酶、氨基酸和核酸、碳水化合物、脂质、糖蛋白、脂蛋白、糖脂、维生素、所有生物活性化合物、含有无机组分的代谢物、以及所有小分子，例如亚硝酸分子或含有亚硫酸的分子。
优选地，细菌包含完整细菌，更优选地包含完整有活力的细菌。
优选地，根据本发明使用的双歧杆菌是适合人类和/或动物食用的双歧杆菌。本领域技术人员将容易地知道来自本文所述的属中的特定双歧杆菌物种和/或菌株，其用于食物和/或农业工业中并且其通常被认为适合于人类和/或动物食用。
在本发明中，所用的双歧杆菌可以是相同类型(物种和菌株)或可以包含物种和/或菌株的混合物。
合适的细菌选自如下物种：乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidium)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、动物双歧杆菌、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、假小链双歧杆菌(Bifidobacteriumpseudocatenulatum)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、和角双歧杆菌(Bifidobacterium angulatum)、及其任何组合。
优选地，本发明中使用的双歧杆菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。更优选地，本发明中使用的双歧杆菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
在特别优选的实施例中，本发明中使用的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)。该菌株可商购自杜邦营养生物科学公司(DuPont Nutrition BiosciencesApS)。
这种动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株也已经由杜邦营养生物科学公司(丹麦哥本哈根K区Langebrogade街1号，邮编DK-1411)(Langebrogade 1，DK-1411Copenhagen K，Denmark))，根据布达佩斯条约于2015年6月30日在莱布尼茨学院(Leibniz-Institut)德国微生物及细胞培养物保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen undZellkulturen GmbH)(DSMZ)(德国不伦瑞克38124，Inhoffenstrasse 7B(Inhoffenstrasse7B，38124Braunschweig，Germany))，保藏在参考号DGCC420下，其中它以注册号DSM 32073记录。要求生物材料只能通过向请求者指定的专家发放的样品来提供。
在一个实施例中，本发明中使用的细菌是益生菌细菌。在本说明书中，术语‘益生菌细菌’被定义为涵盖任何非致病细菌，当以足够量的活的给予时，对宿主赋予健康益处。这些益生菌菌株通常具有通过消化道上部存活的能力。它们是非致病性的、无毒的，并且一方面经由与消化道中的驻留菌群的生态相互作用以及另一方面经由“GALT”(肠道相关淋巴组织)以积极的方式影响免疫系统的能力对健康行使有益效果。根据益生菌的定义，这些细菌当以足够数量给予时具有通过肠进行生活的能力，然而它们不穿越肠屏障，因此它们的主要作用在胃肠道的内腔和/或壁中被诱导。然后它们在给予期间形成驻留菌群的一部分。这种定植(或临时定植)允许益生菌细菌行使有益效果，例如抑制存在于菌群中的潜在致病性微生物以及与肠的免疫系统相互作用。
在优选的实施例中，本发明中使用的细菌是益生菌双歧杆菌或其组合物。
剂量
根据本发明使用的双歧杆菌(例如动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株，例如动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420))可以包含从106至1012CFU的细菌/g的支持物，并且更特别地从108至1012CFU的细菌/g的支持物，优选地针对冻干形式109至1012CFU/g。
合适地，双歧杆菌(例如动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株(例如动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)))可以以从约106至约1012CFU的微生物/剂量，优选约108至约1012CFU的微生物/剂量的剂量给予。术语“每剂量”意指每天或每次摄入(优选每天)向受试者提供这种量的微生物。例如，如果微生物将在食物产品中(例如在酸奶中)给予，则酸奶将优选含有从约108至1012CFU的微生物。然而，可替代地，这种量的微生物可以分成多次给予，每次给予由较小量的微生物负荷组成-只要受试者在任何特定时间(例如每24小时期间)接受的微生物的总量是从约106至约1012CFU的微生物，优选108至约1012CFU的微生物。
根据本发明，有效量的微生物的至少一个菌株可以是至少106CFU的微生物/剂量，优选从约106至约1012CFU的微生物/剂量，优选约108至约1012CFU的微生物/剂量。
在一个实施例中，优选地，双歧杆菌(例如动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株(例如动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)))可以以从约106至约1012CFU的微生物/天，优选约108至约1012CFU的微生物/天的剂量给予。因此，在本实施例中的有效量可以为从约106至约1012CFU的微生物/天，优选约108至约1012CFU的微生物/天。
CFU代表“菌落形成单位”。“支持物”意指食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的制剂。
在一个实施例中，本发明涉及呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式的组合物，该组合物包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维。包含双歧杆菌属的细菌或其混合物(例如动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株(例如动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420))的组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
在另外的实施例中，瘦体重在躯干、腿部、腰腹部(android region)和腹臀部区域(gynoid region)中增加。
瘦体重是身体组成的一个组分，通过从总体重中减去体脂重量来计算。总体重是瘦肉加脂肪。在数学方程式中：瘦体重(LBM)＝体重(BW)-体脂(BF)。
在仍另外的实施例中，瘦体重是肌肉质量。
“肌肉”意指由能够收缩和松弛的细胞组成的组织，以在器官或器官的一部分中产生运动。
作用/受试者/医学适应症
向哺乳动物(包括例如牲畜(包括牛、马、猪和绵羊)和人类)给予本发明所涉及的组合物。在本发明的一些方面，该哺乳动物是陪伴动物(包括宠物)，例如像狗或猫。在本发明的一些方面，该受试者可以合适地是人类。
本发明涉及的组合物可适用于在哺乳动物中增加瘦体重。
尽管鸟类和家禽(包括鸡)在技术上不是哺乳动物，但本发明也可适用于鸟类和任何类型的家禽，例如鸡。
在本说明书中，术语“增加瘦体重”是指根据本发明的组合物的任何施用，并且包括在哺乳动物、鸟类或家禽中增加瘦体重。
特别地，根据本发明的组合物适用于减轻瘦体重或表现出需要增加瘦体重的哺乳动物、鸟类和家禽。该方面在以下进行更详细地讨论。
瘦体重
如上所述，用根据本发明的组合物治疗的受试者哺乳动物、鸟类或家禽可以增加它们的瘦体重，从而减轻瘦体重丧失的后果。
在被称为肌少症的过程中，成人瘦体重随着年龄的增长而下降。肌少症是由于营养不良和缺乏身体活动而加速瘦身体重的年龄相关性丧失。为了抵消这种肌肉丧失，患者应该在适当的时候摄入足够量的蛋白质。
成人瘦体重也随着某些疾病(例如肾脏疾病)而下降。
组合物
虽然可以根据本发明单独给予组合物(即没有任何支持物、稀释剂或赋形剂)，但该组合物通常并且优选地作为产品的一部分(特别是作为食物产品、膳食补充剂或药物组合物或制剂的组分)在支持物上或支持物中给予。这些产品通常含有本领域技术人员熟知的另外的组分。
“组合物”应理解为2种或更多种物质的组合。物质可以是化学物质或生物物质，例如细菌，包括具有所希望的作用的物质。
“制剂”应理解为将不同的化学和/或生物物质(包括具有所希望的作用的物质)组合以产生最终产物的方法或组合物。组合物和制剂可互换地使用。
可以从组合物中获益的任何产品都可以用于本发明。这些包括但不限于食物，特别是水果蜜饯(fruit conserve)和乳制品以及乳制品衍生产品和药品。
食物
在一个实施例中，将根据本发明的组合物在食物产品(例如食物补充剂、饮料或基于奶的粉末)中使用。此处，术语“食物”以广义使用-并且涵盖用于人类的食物以及用于动物的食物(即饲料)。在一个优选的方面，该食物用于人类食用。
食物可以是呈溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
当用作或用于制备食物(例如功能性食物)时，本发明的组合物可以与以下中的一种或多种结合使用：营养上可接受的载体、营养上可接受的稀释剂、营养上可接受的赋形剂、营养上可接受的辅剂、营养活性成分。
举例来说，本发明的组合物可以用作软饮料、果汁或饮料的成分，该软饮料、果汁或饮料包含乳清蛋白、健康茶、可可饮料、奶饮料和乳酸菌饮料、酸奶和饮用酸奶、奶酪、冰淇淋、冰糕和甜点、糕点糖果、饼干蛋糕和蛋糕混合物、休闲食物、平衡食物和饮料、水果馅料、保健釉、巧克力面包馅料、奶酪蛋糕口味馅料、水果风味蛋糕馅料、蛋糕和甜甜圈糖衣、即时烘焙填充奶油、饼干馅料、即食面包馅料、低热量馅料、成人营养饮料、酸化大豆/果汁饮料、无菌/蒸馏巧克力饮料、酒吧混合物、饮料粉剂、钙强化大豆/酸奶和巧克力奶、钙强化咖啡饮料。
该组合物可以进一步用作以下食物产品中的成分：例如美国奶酪酱、用于磨碎和切碎的干酪的抗结块剂、点心盘、奶油干酪、干混鞭打无脂肪酸性稀奶油、冷冻/解冻乳制品鲜奶油、冷冻/解冻稳定的喷射奶油、低脂肪和清淡的自然切达干酪、低脂瑞士式酸奶、充气冷冻甜点、硬盒冰淇淋、标签友好的改善经济和放纵的硬盒冰淇淋、低脂冰淇淋：软冰淇淋、烧烤酱、奶酪蘸酱、松软干酪敷料、干混阿尔弗雷多(Alfredo)酱、混合奶酪酱、干混番茄酱等。
如本文中所使用的术语“乳制品”意在包括含有动物和/或植物来源的奶的培养基。作为动物来源的奶，可以提及奶牛、绵羊、山羊或水牛的奶。作为植物来源的奶，可以提及可根据本发明使用的任何植物来源的可发酵物质，特别是源自大豆、大米或谷物的可发酵物质。
仍更优选地，根据本发明使用的食物产品是发酵奶或人源化奶。
对于某些方面，优选地，本发明可以用于有关酸奶生产中，例如发酵的酸奶饮料、酸奶、饮用酸奶、奶酪、发酵奶油、基于奶的甜点等。
合适地，组合物可以进一步用作一种或多种乳酪应用、肉类应用、或包含保护性培养物的应用中的成分。
本发明还提供了制备食物或食物成分的方法，该方法包括将根据本发明的组合物与另一种食物成分混合。
有利地，本发明涉及已经与本发明的组合物(以及任选地与其他组分/成分)接触的产品，其中该组合物以能够改善该产品的营养和/或健康益处的量使用。
如本文中所使用的术语“接触”是指将本发明的组合物间接或直接应用到该产品中。可使用的应用方法的实例包括但不限于：在包含组合物的材料中处理产品、通过将组合物与产品混合而直接应用、将组合物喷洒至产品表面上或将产品浸入组合物的配制品中。
在本发明的产品是食物的情况下，本发明的组合物优选与该产品混合。可替代地，可以在食物的乳剂或原始成分中包含组合物。在另外的替代性方案中，组合物可以作为调味料、釉料、着色剂混合物等应用。
对于一些应用而言，重要的是，使组合物在待影响/处理的产品表面上可用或可用于待影响/处理的产品表面。这允许组合物能赋予如下有利特性中的一种或多种：营养和/或健康益处。
本发明的组合物可以用受控量的微生物应用于点缀、包衣和/或浸渍产品。
优选地，将组合物用于发酵奶或蔗糖强化奶或具有蔗糖和/或麦芽糖的乳酸培养基，其中所得到含有全部组合物成分的-即根据本发明的所述微生物-的培养基可以作为成分以合适的浓度-例如像以在最终产品中提供106-1010CFU的日剂量的浓度-添加到酸奶中。根据本发明的微生物可以在酸奶发酵之前或之后使用。
对于一些方面，根据本发明的组合物用作或用于制备动物饲料，例如牲畜饲料，特别是家禽(例如鸡)饲料或宠物食物。
有利地，当该产品是食物产品时，包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物应该通过正常的“最迟销售”日期或“截止”日期(在该日期期间食物产品由零售商出售)保持有效。优选地，有效时间应当超过这样的日期，直到当食物腐败变得明显时的正常新鲜期结束。期望的时间长度和正常保质期将随食物而变化，并且本领域普通技术人员将认识到，保质期时间取决于食物的种类、食物的大小、储存温度、加工条件、包装材料和包装设备而变化。
食物成分
本发明的组合物可以用作食物成分和/或饲料成分。
如本文中所使用的术语“食物成分”或“饲料成分”包括作为营养补充剂被添加到或可以添加到功能性食物或食物中的制剂。
食物成分可以是呈溶液的形式或作为固体-这取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
食物补充剂
本发明的组合物可以是-或可以添加到-膳食补充剂中，在本文中也称为食物补充剂。
此处，术语“膳食补充剂”是旨在用于摄取的产品，该产品含有旨在为(补充剂)饮食增加另外营养价值的“膳食成分”。“膳食成分”可以是以下物质中的一种或任何组合：维生素、矿物质、药草或其他植物、氨基酸、供人们通过增加总膳食摄入来补充饮食的膳食物质、浓缩物、代谢物、成分或提取物。
膳食补充剂可以以许多形式存在，例如片剂、胶囊、软凝胶、软胶囊(gel cap)、液体或粉末。一些膳食补充剂可以帮助确保你获得必需营养素的足够的膳食摄入；其他膳食补充剂可以帮助你降低疾病的风险。
功能性食物
本发明的组合物可以是-或可以添加到-功能性食物中。
如本文中所使用的术语“功能性食物”意指不仅能够提供营养效果，还能够向消费者递送另外的有益效果的食物。
因此，功能性食物是具有掺入其中的组分或成分(例如本文所述的那些)的普通食物，其赋予食物特定的功能性效果-例如医学或生理学益处-而不是纯粹的营养效果。
虽然对于功能性食物没有法律定义，大多数关注此领域的各方都同意它们是作为具有超过基本营养效果的特定健康作用而面市的食物。
一些功能性食物是保健营养品。此处，术语“保健营养品”意指不仅能够提供营养效果和/或味道满足，还能够向消费者递送治疗(或其他有益)效果的食物。保健营养品跨越了在食物和药物之间的传统分界线。
医疗食物
在一个实施例中，本发明的组合物呈医疗食物的形式。优选地，本发明的组合物(包含动物双歧杆菌乳酸亚种的菌株(例如动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)))呈医疗食物的形式。
“医疗食物”意指如下食物，该食物被配制成在有或没有医生监督的情况下食用或施用，并且旨在用于特定的饮食管理或状况，针对该饮食管理或状况，基于公认的科学原理，通过医学评估建立独特的营养需求。
药物
本发明的组合物可以用作-或者用于制备-药物制剂或药物组合物。此处，术语“药物”以广义使用-并且涵盖用于人类的药物以及用于动物的药物(即兽医应用)。在一个优选的方面，该药物用于人类使用和/或用于畜牧业。
药物可以用于治疗目的-其本质上可以是治疗的或姑息的或预防的。药物甚至可能用于诊断目的。
药学上可接受的制剂或支持物或组合物可以是呈例如压制片剂、片剂、胶囊、软膏、栓剂或可饮用溶液的形式的制剂或支持物。以下提供了其他合适的形式。
当用作或用于制备药物时，本发明的组合物可以与以下中的一种或多种结合使用：药学上可接受的载体、药学上可接受的稀释剂、药学上可接受的赋形剂、药学上可接受的辅剂、药学活性成分。
药物可以是呈溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
本发明的组合物可以用作药物成分。此处，组合物可以是唯一的活性组分，或者它可以是许多种(即2种或更多种)活性组分中的至少一种。
药物成分可以是呈溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
根据本发明，可以以任何合适的形式使用组合物-无论是单独时还是与其他组分或成分组合存在时。包含本发明的组合物和其他组分和/或成分(即成分-例如食物成分、功能性食物成分或药物成分)的组合能以任何合适的形式使用。
根据本发明，组合物可以以固体或液体配制品的形式或其替代物的形式使用。固体配制品的实例包括但不限于可以是可湿润的、喷雾干燥的或冷冻干燥的片剂、胶囊、尘剂、颗粒和粉末。液体配制品的实例包括但不限于水性、有机或水性-有机溶液、悬浮液和乳剂。
针对速释型、迟释型、调释型、缓释型、脉冲释放型或控制释放型应用，形式的合适的实例包括片剂、丸剂、胶囊、珠剂、溶液或悬浮液中的一种或多种，其可包含调味剂或染色剂。
举例来说，如果本发明的组合物以片剂形式使用-例如用作功能性成分-那么这些片剂也可以包含以下各项中的一种或多种：辅料，例如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸；崩解剂，例如淀粉(优选是玉米、马铃薯、木薯淀粉)、乙醇酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复杂的硅酸盐；造粒粘结剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、明胶和阿拉伯树胶；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸、山嵛酸甘油酯和滑石可以包括在内。
用于制备这些形式的营养上可接受的载体的实例包括例如水、盐溶液、醇、硅酮、蜡类、凡士林、植物油、聚乙二醇、丙二醇、脂质体、糖类、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、表面活性剂、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸甘油单酯和脂肪酸甘油二酯、石油醚(petroethrai)脂肪酸酯、羟甲基-纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。
用于这些形式的优选赋形剂包括乳糖(lactose)、淀粉、纤维素、乳糖(milksugar)或高分子量聚乙二醇。
对于水性悬浮液和/或酏剂，可将本发明的组合物与不同的甜味剂或调味剂、调色物质或染料进行组合，与乳剂和/或悬浮剂进行组合，以及与稀释剂(例如水、丙二醇和甘油及其组合))进行组合。
形式还可以包括明胶胶囊；纤维胶囊、纤维片剂等；或甚至纤维饮料。
形式的其他实例包括乳膏。对于一些方面，本发明中使用的微生物可以用于药物和/或化妆品乳膏，例如防晒乳膏和/或晒后乳膏。
在一个方面，根据本发明的组合物能以气溶胶的形式给予，例如通过鼻腔喷雾的方式，例如用于给予至呼吸道。
药物
在一个实施例中，本发明的组合物呈药物的形式。
如本文中所使用的术语“药物”涵盖在人类和兽医学中供人类和动物两者使用的药物。此外，如本文中所使用的术语“药物”意指提供治疗和/或有益效果的任何物质。如本文中所使用的术语“药物”不一定限于需要上市许可证(Marketing Approval)的物质，而是可以包括可以用于化妆品、保健营养品、食物(包括例如饲料和饮料)、益生菌培养物和天然补救剂的物质。此外，如本文中所使用的术语“药物”涵盖设计用于掺入动物饲料(例如牲畜饲料和/或宠物食物)中的产品。
益生元
在一个实施例中，本发明的组合物包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维。
益生元是一类功能性食物，被定义为通过选择性地刺激结肠中一种或有限数量的细菌(特别是但不限于益生菌、双歧杆菌和/或乳酸细菌)的生长和/或活性而有益地影响宿主的，并因此改善宿主健康的不可消化的食物成分。通常，益生元是碳水化合物(例如寡糖)，但该定义不排除非碳水化合物。益生元的最普遍的形式在营养上被归类为可溶性纤维。在某种程度上，膳食纤维的许多形式表现出一定水平的益生元作用。
在一个实施例中，益生元是选择性发酵的成分，其允许胃肠道微生物群落中的组成和/或活性的特定改变，赋予宿主安宁和健康益处。
合适地，根据本发明，益生元可以以0.01至100g/天、优选0.1至50g/天、更优选0.5至20g/天的量使用。在一个实施例中，根据本发明，益生元可以以1至10g/天、优选2至9g/天、更优选3至8g/天的量使用。在另一个实施例中，根据本发明，益生元可以以5至50g/天、优选10至25g/天的量使用。
益生元的膳食来源的实例包括大豆、菊粉来源(例如菊芋(Jerusalemartichoke)、豆薯和菊苣根)、生燕麦(raw oat)、未加工的小麦、未加工的大麦和雪莲果。
合适的益生元的实例包括藻酸盐、黄原胶、果胶、刺槐豆胶(LBG)、菊粉、瓜耳胶、半乳寡糖(GOS)、果寡糖(FOS)、多聚右旋糖(即)、乳糖醇、乳蔗糖、大豆寡糖、异麦芽酮糖(Palatinose TM)、异麦芽寡糖、葡萄糖寡糖、木寡糖、甘露寡糖、β-葡聚糖、纤维二糖、棉子糖、龙胆二糖、蜜二糖、木二糖、环糊精、异麦芽糖、海藻糖、水苏糖、潘糖、出芽短梗霉聚糖、毛蕊花糖、半乳甘露聚糖和所有形式的抗性淀粉。
益生元的特别优选的实例是多聚右旋糖。
根据本发明的组合物中存在的双歧杆菌、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合表现出协同作用(即，大于单独使用时细菌的累加作用的作用)。不希望受理论束缚，据信这种组合能够选择性地刺激结肠中双歧杆菌的生长和/或活性，并因此改善其作用和宿主健康。
在一个实施例中，与一种或多种益生元和/或纤维组合使用的双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌或其混合物。更优选地，与一种或多种益生元和/或纤维组合使用的双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌或其混合物。
在一个特别优选的实施例中，与一种或多种益生元和/或纤维组合使用的双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌或其混合物。
合适地，组合中使用的纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
在另一个实施例中，组合中使用的纤维和/或益生元是
在另外的方面，本发明包含含有组合物的食物产品，该组合物包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维。
在又另外的方面，本发明包含含有组合物的食物产品，该组合物包含双歧杆菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，其中该双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌的该双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，本发明包含含有组合物的食物产品，该组合物包含双歧杆菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，其中该双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌乳酸的该双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，本发明包含含有组合物的食物产品，该组合物包含双歧杆菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，其中该双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌乳酸(菌株)420(B420)的该双歧杆菌或其混合物。
在另外的方面，本发明包含含有组合物的膳食补充剂，该组合物包含双歧杆菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌或其混合物。
在另外的方面，本发明包含药学上可接受的组合物，该药学上可接受的组合物含有包含双歧杆菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌或其混合物。
在又另外的方面，双歧杆菌或其混合物是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌或其混合物。
本发明的具体编号的实施例：
实施例1.一种组合物，其包含双歧杆菌(Bifidobacterium)属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，用于在哺乳动物中增加瘦体重。
实施例2.根据实施例1所述的组合物，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例3.根据实施例1至2中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例4.根据实施例1至3中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例5.根据实施例1至4中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
实施例6.根据实施例1至5中任一项所述的组合物，其中所述益生元和/或纤维是多聚右旋糖。
实施例7.根据前述实施例中任一项所述的组合物，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例8.根据实施例7所述的组合物，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例9.根据实施例7所述的组合物，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例10.根据前述实施例中任一项所述的组合物，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例11.根据实施例1至10中任一项所述的组合物，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例12.一种组合物，其包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，用于在哺乳动物中增加瘦体重中治疗使用。
实施例13.根据实施例12所述的组合物，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例14.根据实施例12至13中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例15.根据实施例12至14中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例16.根据实施例12至15中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
实施例17.根据实施例12至16中任一项所述的组合物，其中所述益生元和/或纤维是多聚右旋糖。
实施例18.根据前述实施例12-17中任一项所述的组合物，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例19.根据实施例18所述的组合物，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例20.根据实施例18所述的组合物，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例21.根据前述实施例12-20中任一项所述的组合物，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例22.根据实施例12至21中任一项所述的组合物，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例23.包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途。
实施例24.根据实施例23所述的用途，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例25.根据实施例23至24中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例26.根据实施例23至25中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例27.根据实施例23至26中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
实施例28.根据实施例23所述的用途，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
实施例29.根据实施例23至28中任一项所述的用途，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例30.根据实施例29的所述用途，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例31.根据实施例29所述的用途，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例32.根据实施例23至31中任一项所述的用途，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例33.根据实施例23至32中任一项所述的用途，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例34.包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的非治疗用途。
实施例35.根据实施例34所述的非治疗用途，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例36.根据实施例34至35中任一项所述的非治疗用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例37.根据实施例34至36中任一项所述的非治疗用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例38.根据实施例34至37中任一项所述的非治疗用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
实施例39.根据实施例34所述的非治疗用途，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
实施例40.根据实施例34至39中任一项所述的非治疗用途，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例41.根据实施例40所述的非治疗用途，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例42.根据实施例40所述的非治疗用途，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例43.根据实施例34至31中任一项所述的非治疗用途，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例44.根据实施例34至43中任一项所述的非治疗用途，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例45.一种用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重。
实施例46.根据实施例45所述的方法，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例47.根据实施例45至46中任一项所述的方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例48.根据实施例45至47中任一项所述的方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例49.根据实施例45至48中任一项所述的方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种菌株420(B420)的双歧杆菌。
实施例50.根据实施例45所述的方法，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
实施例51.根据实施例45至50中任一项所述的方法，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例52.根据实施例51所述的方法，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例53.根据实施例51所述的方法，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例54.根据实施例45至53中任一项所述的方法，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例55.根据实施例45至54中任一项所述的方法，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例56.一种用于增加瘦体重的非治疗方法，所述方法包括向哺乳动物给予组合物，所述组合物包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，其中所述组合物的给予在所述哺乳动物中增加了瘦体重。
实施例57.根据实施例56所述的非治疗方法，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例58.根据实施例56至57中任一项所述的非治疗方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例59.根据实施例56至58中任一项所述的非治疗方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例60.根据实施例56至59中任一项所述的非治疗方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种菌株420(B420)的双歧杆菌。
实施例61.根据实施例56所述的非治疗方法，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
实施例62.根据实施例56至61中任一项所述的非治疗方法，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
实施例63.根据实施例62所述的非治疗方法，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例64.根据实施例62所述的非治疗方法，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例65.根据实施例56至64中任一项所述的非治疗方法，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例66.根据实施例56至65中任一项所述的非治疗方法，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实施例67.包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重。
实施例68.根据实施例67所述的用途，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
实施例69.根据实施例67至68中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是物种动物双歧杆菌的双歧杆菌。
实施例70.根据实施例67至69中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种的双歧杆菌。
实施例71.根据实施例67至70中任一项所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
实施例72.根据实施例67所述的用途，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
实施例73.根据实施例67的所述用途，其中所述药学上可接受的组合物是药物。
实施例74.根据实施例67所述的用途，其中所述食物产品是医疗食物产品。
实施例75.根据实施例67至74中任一项所述的用途，其中所述瘦体重在躯干、腿部、腰腹部和腹臀部区域中增加。
实施例76.根据实施例67至75中任一项所述的用途，其中所述瘦体重是肌肉质量。
实例
材料与方法
临床研究设计和筛选标准
干预是根据药物临床试验质量管理规范(Good Clinical Practice)和赫尔辛基宣言(Declaration of Helsinki)进行的双盲的、随机的、安慰剂对照的、多中心平行研究。
在芬兰南部的四个研究中心招募了一批263名超重和肥胖成人中的225人，并根据1∶1∶1∶1的比例随机分配到四组中的一组：
1)安慰剂(微晶纤维素)，12g/天；
2)多聚右旋糖(Pdx)，12g/天；
3)益生菌B420(动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420)，1010CFU/天；或
4)B420和Pdx，1010 CFU/天+12g/天。
用于研究的产品以小袋提供，参与者在其喜欢的时间每天一次将该小袋与250ml水果冰沙(smoothie)混合，持续六个月。
所有随机的参与者为18-65岁，其中体重指数(BMI，按体重[kg]除以身高[m]平方计算)在28.0-34.9之间，并且男性腰臀比≥0.88，并且女性腰臀比≥0.83。最重要的排除标准包括：诊断有代谢疾病或相关药物的使用；在过去6周内过轻泻药、纤维补充剂或益生菌的使用；肥胖外科手术史；在过去3个月内抗肥胖药物的使用，最近(过去2个月)或正在使用抗微生物剂；正在或最近参加减重计划；在过去3个月期间有3kg的体重改变；以及怀孕。
招募和研究群体
在对研究解盲之前，将225名参与者分为意向治疗(ITT)和符合方案(PP)群体。ITT群体含有在基线访问后针对任何参数进行评估的所有209名参与者。PP群体含有以80％的研究产品依从性完成了干预期，并且在干预期间没有使用全身性抗微生物剂或高剂量维生素补充剂的参与者。此外，因为未根据计划完成DXA测量，3名参与者被排除在双能X射线吸收法(DXA)分析之外，即在治疗结束后10天内，导致PP群体为131名参与者。PP群体包含所有被认为符合方案的参与者，并且因此更好地代表了研究产品的实际功效(图1)。
图1显示了在对研究解盲之前，根据遵守研究方案，将参与者分为意向治疗(ITT)群体和符合方案(PP)群体(n表示参与该过程的每个步骤的人数)。
瘦体重的测量
研究参与者在基线、2个月、4个月、6个月(干预结束)和干预结束后一个月(随访+1个月)进行双能X射线吸收法(DXA)扫描。DXA扫描由受过培训的工作人员在私人医疗中心进行。该装置从X射线测量来自动计算体脂质量、骨质量和瘦体重。因此，瘦体重主要由肌肉质量、内脏器官质量和水组成。分别收集身体各个区域(手臂、腿部、躯干、腰腹部(腰)和腹臀部(臀)区域)的总瘦体重和瘦体重的结果。
统计分析
所有如下三个活性组中从基线的平均相对改变：
-单独服用B420的组；
-服用B420和多聚右旋糖(Pdx)组合的组；和
-单独服用多聚右旋糖(Pdx)的组，
与安慰剂(作为总体作用)进行比较(协方差的单向分析，使用基线值作为协变量)。
然后使用Dunnett测试(该测试校正多重比较)将三个活性组分别与安慰剂进行比较。所有分析均用SAS分析软件(9.3版本)、使用从基线到治疗结束(6个月)的相对改变来进行。在ITT群体中，用末次观测值结转法(Last Observation Carried Forward method)处理缺失的观测值。在统计学中，Dunnett测试是加拿大统计学家Charles Dunnett开发的一种多重比较程序，用于将多种治疗方法中的每一种与单个对照进行比较。与对照的多重比较也称为多对一比较。末次观测值结转法意味着对于缺失值，在分析中使用来自先前时间点的最新测量值。低于0.05的P值被认为是统计学上显著的，这意味着不同的比较观测值的假设有95％的概率是真实的。高于0.05的P值并不能证明没有差异，而是没有足够的统计能力来自信地得出结论。
结果
在PP群体中，与安慰剂相比，服用B420和Pdx组合的组的瘦体重有统计学上显著增加(P＝0.012)，并且在ITT群体中有边缘性无显著差异(P＝0.05)(图2A-图2B)。
活性和安慰剂之间的总体差异不显著(ITT：P＝0.28；PP：P＝0.30)，最可能是由于单独服用B420和单独服用Pdx的组中没有任何作用(图2A-图2B)。服用B420和Pdx组合的组中瘦体重的改变在研究过程中逐渐发生(图2C-图2D)。
在身体的各个区域中活性和安慰剂之间没有统计学上显著差异，尽管在所有区域中，服用B420和Pdx组合的组是唯一显示与基线相比瘦体重显著增加的组(图3)。在符合方案的PP群体中，B420和Pdx组合、与安慰剂之间的差异在躯干(图3A)和腿(图3C)区域中最显著。腰腹部(腰)瘦体重没有显示B420和Pdx组合、与安慰剂之间的类似的差异，这表明在瘦体重的增加不是由于任何腹部水肿，而是由于肌肉质量的实际增加，这也得到了腿部区域(其中瘦组织质量主要由肌肉质量组成)中的瘦体重增加的支持。
图2显示了意向治疗(A)和符合方案(B)群体中总瘦体重的相对改变，以及在意向治疗(C)和符合方案(D)群体中的研究期间瘦体重的发展。在小图A和B中，P值低于0.05表示与安慰剂的统计学上显著差异。结果显示为平均值+/-95％置信区间(CI)。当95％CI与基线(实线)不重叠时，表明该组内从基线的显著改变。
图3显示了在意向治疗和符合方案群体中，从基线到治疗6个月，躯干(A)、手臂(B)、腿部(C)、和腰腹部(D)和腹臀部(E)区域中的相对改变。P值低于0.05标志着与安慰剂的显著差异。结果显示为平均值+/-95％置信区间(CI)。当95％CI与基线(实线)不重叠时，表明该组内从基线的显著改变。
表1中显示了在身体的不同区域，在干预期开始和结束时的瘦体重的绝对值。
表1.每组身体的不同区域的瘦体重。
*6个月访问(较低值)和基线访问(较高值)的参与者数量(n)。意向治疗群体中基线处的平均值包括在6个月之前退出研究的参与者，并且因此从基线的改变不会直接转化为从基线的改变，如图2-图3中所示。然而，所有数值都包括在统计分析中(末次观测值结转法技术，如前所解释的)；SD＝标准偏差。
上述说明书中提及的所有出版物通过引用结合在此。本发明的所描述的方法和系统的各种修改和变化对于本领域的技术人员将是显而易知的，而不背离本发明的范围和精神。虽然已结合特定优选实施例描述了本发明，但应当理解，要求保护的本发明不应不适当地限于这类特定实施例。实际上，对于生物化学和生物技术或相关领域的技术人员显而易见的、用于执行本发明的所描述的实施例的各种修改旨在落入如下权利要求书的范围内。

Claims (15)

1.一种组合物，其包含双歧杆菌(Bifidobacterium)属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维，所述组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述双歧杆菌是益生菌双歧杆菌或其混合物。
3.根据权利要求1至2中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)乳酸(lactis)亚种的双歧杆菌。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述益生元和/或纤维是多聚右旋糖。
6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物呈食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物的形式。
7.包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物用于在哺乳动物中增加瘦体重的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
9.根据权利要求7所述的用途，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
10.一种用于增加瘦体重的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物，其中所述组合物的施用在所述哺乳动物中增加了瘦体重。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种菌株420(B420)的双歧杆菌。
12.根据权利要求10所述的方法，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
13.包含双歧杆菌属的细菌或其混合物、以及一种或多种益生元和/或纤维的组合物在制造食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物中的用途，所述食物产品、膳食补充剂或药学上可接受的组合物用于增加瘦体重。
14.根据权利要求13所述的用途，其中所述双歧杆菌属的细菌是动物双歧杆菌乳酸亚种(菌株)420(B420)的双歧杆菌。
15.根据权利要求13所述的用途，其中所述纤维和/或益生元是多聚右旋糖。
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