CN102370713A - 地肤子皂苷的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体为一种地肤子皂苷的制备方法。该方法采用连续逆流超声提取地肤子皂苷，将地肤子药材粉碎至20-100目，利用超声波的空化作用提取制得地肤子皂苷提取液，通过离子柱交换及大孔吸附树脂柱，加药用活性炭脱色，脱色液浓缩得浸膏，用丙酮洗涤，压力式喷雾干燥即得高纯度地肤子皂苷。本发明地肤子皂苷的制备方法提率高，处理量大，生产过程清洁卫生，节约能源，可连续运行，生产的地肤子皂苷纯度高。

Description

地肤子皂苷的制备方法

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及一种从地肤子中制备地肤子皂苷的方法。

背景技术：

地肤子为藜科植物地肤Kochia scoparia(L.)Schard.Chenopodium scoparium L.的成熟果实，又名扫帚菜，白地草，具有清热利湿、祛风止痒、利尿通淋等功效。

地肤子果实主要含三萜及其苷类、生物碱、黄酮类和脂肪油等成分，三萜皂苷包括齐墩果酸、木鳖子苷Ic(又名地肤子皂苷Ic)，木鳖子苷II c等，其中地肤子皂苷Ic(momordin Ic)为其抗疹痒、抗炎和抗过敏作用的主要有效成分。

药理实验表明地肤子皂苷具有抑菌作用，70％醇提物可抑制炎症和I、III、IV型变态反应，并对compound 48/80诱导的小鼠搔抓反应有显著的抑制作用。戴岳等研究发现地肤子可能主要通过稳定肥大细胞膜，减少组胺、5-HT等过敏介质的释放抑制速发型变态反应及DTH效应相的早期反应，其对DTH后期反应的抑制作用则可能与抗炎作用有关，地肤子皂苷为其抑制DTH的有效成分。另有实验发现地肤子总甙灌胃给药，对正常小鼠血糖无明显影响，高剂量尚使血糖略有升高，但降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的血糖水平；地肤子总甙明显抑制灌胃葡萄糖引起的小鼠血糖升高，而对腹腔注射葡萄糖所致小鼠血糖上升无显著影响；地肤子总甙剂量依赖性抑制正常小鼠胃排空，上述结果提示地肤子总甙的降糖机制可能与抑制糖在胃肠道的转运或吸收有关，该药可望用于糖尿病的治疗；进一步研究发现地肤子总甙灌胃给药，剂量依赖性抑制小鼠胃排空，表明减慢葡萄糖由胃向小肠的转运是地肤子总甙的降糖机制之一，地肤子总甙的这一作用有别于现有的降糖药物，可望用于控制糖尿病患者的饭后高血糖及减慢食物中糖分的摄取速率。刘建萍等通过药理实验发现地肤子总皂苷抑制速发型变态反应，其作用机制可能与稳定肥大细胞膜、减少组胺的释放及对抗过敏介质的致炎作用有关，而且其抗变态反应作用具有量效关系，32mg/kg为其有效阈剂量，150mg/kg为其良效剂量。

地肤子临床上内治尿痛、尿急、小便不利、荨麻疹，外治皮癣及阴囊湿疹等症，其水提物可降低小鼠单核巨噬系统的吞噬功能。主产于江苏、山东等地，分布几遍全国，资源丰富，应用前景广阔。

目前中药植物有效成分溶剂提取法常用方法有：浸渍法、煎煮法、渗漉法、回流法及连续回流法。但这些方法普遍存在提取效率低、溶剂用量大，总提时间长等缺点和不足。

超声波是指振动频率较高的物体在介质中所产生的弹性波，其频率范围为20kHz-10MHz。高功率的超声波产生强烈的振动、高的加速度、强烈的空化作用、搅拌作用和瞬时高温等，造成植物细胞壁的破坏和溶剂的快速渗透，使被提取的有效成分迅速溶解到溶剂中，从而提高提取率、缩短提取时间、节省溶剂。超声波与媒质的作用机制主要是空化作用。在液体中，当声波的功率相当大、液体收到的负压力足够强时，媒质分子间的平均距离就会增大并超过极限距离，从而将液体拉断形成空穴，在空化泡或空化的空腔激烈收缩与崩溃的瞬间，泡内可以产生局部的高压，以及数千度的高温，产生微射流和瞬时高温高压，从而形成超声空化现象。空化现象包括气泡的形成、成长和崩溃过程。空化作用是超声化学的主动力，使粒子运动速度大大加快，破坏粒子的力的形成，从而使许多物理化学和化学过程急剧加速，对乳化、分散、萃取以及其它各种工艺过程有很大作用。超声波产生的空化作用能够有效打破有效成分溶出固体时所形成的边界层，加速有效成分的扩散速度，从而提高提取速率。植物有效成分的提取过程，本质上是一个固液萃取过程，有效成分从植物细胞壁溶出提取溶剂的扩散速度与固体表面和周边溶剂的浓度差大小及边界层厚度密切相关。除空化作用外，超声波的许多次级效应也都有利于植物有效成分的转移和提取，如机械振动、扰动效应、高加速度、乳化、扩散、击碎和搅拌作用等多级效应，能够有效增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，提高固-液及液-液传质扩散速率，从而加速有效成分进入溶剂，缩短提取时间，有效提高提取率。

目前地肤子皂苷的提纯方法多采用醇提正丁醇萃取法，该方法具有成本高、有机溶剂毒性残留的缺点。已有研究发现，用大孔吸附树脂富集，纯化黄芪、人参等总皂苷效果较理想。

发明内容：

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种具有较高提取率、耗时短的地肤子皂苷的制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

地肤子皂苷的制备方法，以地肤子为原料，粉碎成20-100目，送入超声提取机物料进口，加入碱水溶液进行搅拌混合，超声萃取0.5-2小时，得地肤子皂苷提取液，上阳离子交换柱，流出液通过大孔吸附树脂柱，吸附1-3次，用20-80％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，加药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液减压浓缩得浸膏，用丙酮洗涤多次，压力式喷雾干燥得高纯度地肤子皂苷。

所述碱可用氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠或氢氧化钾，碱水溶液pH为9-13，用量为原料质量的5-12倍。

所述阳离子交换柱为苯乙烯系大孔型树脂D61。

所述大孔树脂包括AB-8、HP20、HPD400、HZ-806、D101-I、DA201型号。大孔吸附树脂先以20％乙醇洗脱，继而用40-80％乙醇洗脱，用量为2-6倍柱体积。

所述药用活性炭用量为0.5％-1.0％(w/v)。

本发明的积极效果在于：提取方法采用连续逆流超声提取，提取时间短，提取率高，可以规模化连续生产，处理量大，成本低，产品纯度高，所用有机试剂用量较小，安全无毒。

具体实施方式：

实施例1：

取粉碎成50目的地肤子1kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为10的碳酸氢钠水溶液8L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为30kHz，萃取0.5小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣进行第二次超声提取，合并两次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过AB-8大孔吸附树脂柱，吸附3次，先用20％乙醇洗脱，再用80％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入1％的药用活性炭，加热回流0.5小时，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达88％的地肤子皂苷36.4g。

实施例2：

取粉碎成50目的地肤子8kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为9的碳酸钠水溶液48L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为40kHz，萃取2小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣进行第二次超声提取，合并两次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过HZ806大孔吸附树脂柱，吸附3次，先用20％乙醇洗脱，再用40％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入0.8％的药用活性炭，加热回流1小时，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达85％的地肤子皂苷322g。

实施例3：

取粉碎成50目的地肤子18kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为11的氢氧化钾水溶液90L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为28kHz，萃取1.5小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣进行第二次超声提取，合并两次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过D101-I大孔吸附树脂柱，吸附2次，先用20％乙醇洗脱，再用70％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入0.6％的药用活性炭，加热回流0.5小时，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达90％的地肤子皂苷710g。

实施例4：

取粉碎成50目的地肤子20kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为13的氢氧化钠水溶液240L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为45kHz，萃取1.0小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣进行第二、三次超声提取，合并三次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过HPD400大孔吸附树脂柱，吸附3次，先用20％乙醇洗脱，再用60％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入1％的药用活性炭，加热回流1小时，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达95％的地肤子皂苷772g。

实施例5：

取粉碎成50目的地肤子50kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为10的碳酸氢钠水溶液450L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为43kHz，萃取2小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣再超声提取2次，合并三次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过HP20大孔吸附树脂柱，吸附3次，先用20％乙醇洗脱，再用70％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入0.5％的药用活性炭，加热回流0.5小时，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达97％的地肤子皂苷1.98kg。

实施例6：

取粉碎成50目的地肤子100kg从提取管的一端输入，从提取管的另一端进料装置加入pH为12的碳酸钠水溶液700L作为提取溶媒，开动螺旋搅拌和超声波发生装置，超声波功率为35kHz，萃取1.5小时后液渣分离，经分离出的地肤子药渣进行第二次超声提取，合并两次提取液，通过D61大孔阳离子树脂柱，流出液再通过DA201大孔吸附树脂柱，吸附2次，先用20％乙醇洗脱，再用50％乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩至相对密度为1.1-1.2，加入0.9％的药用活性炭，加热回流40分钟，趁热过滤，将脱色液减压回收乙醇，得浸膏，用丙酮洗涤多次后，压力式喷雾干燥即得含量达91％的地肤子皂苷3.6kg。

Claims (5)

1.地肤子皂苷的制备方法，其特征在于：以地肤子为原料，粉碎成20-100目，送入超声提取机物料进口，加入碱水溶液进行搅拌混合，超声萃取2-3次，得地肤子皂苷提取液，上阳离子交换柱，流出液通过大孔吸附树脂柱，吸附1-3次，用20-80％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，加药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液减压浓缩得浸膏，用丙酮洗涤多次，压力式喷雾干燥得高纯度地肤子皂苷。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述碱可用氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠或氢氧化钾，碱水溶液pH为9-13，用量为原料质量的5-12倍。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述阳离子交换柱为苯乙烯系大孔型树脂D61。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述大孔树脂包括AB-8、HP20、HPD400、HZ-806、D101-I、DA201型号。大孔吸附树脂先以20％乙醇洗脱，继而用40-80％乙醇洗脱，用量为2-6倍柱体积。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述药用活性炭用量为0.5％-1.0％(w/v)。