CN102318843B

CN102318843B - 一种鱼鳞胶原多肽及其制备方法

Info

Publication number: CN102318843B
Application number: CN2011101916609A
Authority: CN
Inventors: 李振; 周海洋; 叶素艳; 王宝杰; 孙姝娟; 王雷; 刘梅; 蒋克勇
Original assignee: JINING HUANENG PHARMACEUTICAL FACTORY; Institute of Oceanology of CAS
Current assignee: JINING HUANENG PHARMACEUTICAL FACTORY; Institute of Oceanology of CAS
Priority date: 2011-07-01
Filing date: 2011-07-01
Publication date: 2013-08-21
Anticipated expiration: 2031-07-01
Also published as: CN102318843A

Abstract

本发明涉及生物技术，具体的说是一种利用乳酸菌发酵的鱼鳞胶原多肽及其制备方法。利用乳酸菌对鱼鳞进行发酵，即得鱼鳞胶原多肽，其主要产物为分子量分布范围1000～3000道尔顿的多肽，消化吸收率几乎达100％，其营养及生理功能显著提高。本发明实施例测定乳酸菌发酵鱼鳞粉产生的主要营养物质为游离钙和胶原多肽，其利用肠道有益菌——乳酸菌发酵天然富含胶原蛋白多肽和适宜钙磷比的鱼鳞粉，乳酸菌发酵过程成产生的酸性末端产物能够将鱼鳞中的不可溶钙(羟基磷灰石)部分转化为可溶性钙(乳酸钙，氨基酸钙)，而且胞外蛋白酶可以水解鱼鳞蛋白质提供辅助钙吸收的胶原多肽、氨基酸和磷。

Description

一种鱼鳞胶原多肽及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物技术，具体的说是一种利用乳酸菌发酵的鱼鳞胶原多肽及其制备方法。

背景技术

近年来，伴随水产业结构的调整，我国水产加工业也逐步发展壮大。加工鱼产品的同时产生大量下脚料，占加工鱼总质量30％～50％，其中约5％是鱼鳞。受技术和传统观念的制约，在较长的一段时间里，鱼鳞并没有被充分利用，而是当作垃圾被扔掉。据估计，我国每年废弃的鱼鳞达30万吨。

鱼鳞中含有人体所需的多种营养物质，除含有大量钙质，还含有大脑生长活动不可缺少的磷脂质、磷蛋白以及其它生命活动所需物质，如鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白，占20％～40％。海水鱼鳞中含有较为丰富的磷脂，占7％左右，具有提高机体免疫力、延缓衰老、增强骨细胞和神经细胞功能的作用，还与机体的生殖生理和激素的代谢密切相关。但是，如果直接应用鱼鳞粉，它的吸收率很有限。为了更有效的利用鱼鳞的营养成分，本研究将鱼鳞加工成鱼鳞粉，然后制成培养液，再接入乳酸菌经混合发酵，利用微生物及其代谢产物的作用，使原来的结合钙即羟基磷灰石变为易被机体吸收的离子钙，胶原蛋白转化为胶原多肽及氨基酸等。

要预防和改善骨质疏松，最科学的方法是同时补充钙和胶原蛋白。这样，钙才能在胶原蛋白的粘合下沉积在骨骼，加强骨的韧性、硬度。而胶原蛋白是大分子蛋白质，并不能被人体直接吸收。胶原多肽是胶原蛋白的酶解产物，分子量在1万Da以下，含有胶原蛋白全部的氨基酸，具有良好的吸收性、溶解性。钙的吸收利用不仅与摄入量有关，还与其形态和钙磷比例有关，本研究通过乳酸菌发酵，液体化鱼鳞中富集了大量的游离钙，还将胶原蛋白降解为胶原多肽，且该发酵液中的钙磷比适合人体吸收，还含有对人体有益的乳酸菌，可以制成复合补钙产品，将会在目前以人工合成钙为主要补钙方式的市场增加生物态补钙新方式。

发明内容

本发明目的在于提供一种利用乳酸菌发酵的鱼鳞胶原多肽及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种鱼鳞胶原多肽：利用乳酸菌对鱼鳞进行发酵，即得鱼鳞胶原多肽发酵物，其产物为分子量为1000～3000道尔顿。化吸收率几乎达100％，其营养及生理功能显著提高。所述乳酸菌为按体积比为1∶1混合的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。所述鱼鳞为罗非鱼、大黄鱼或真鲷加工下脚料。

鱼鳞胶原多肽的制备方法：将乳酸菌接种到含有鱼鳞的发酵培养液中42℃下培养24小时，即得到鱼鳞胶原蛋白。

将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分别在脱脂乳培养基中进行活化培养，活化培养后的利亚乳杆菌和嗜热链球菌按体积比为1∶1接种到发酵液中，每升发酵液培养液中接种1％上述活化培养后的菌种，同时加入5％的蔗糖在42℃下培养24小时，过滤后滤液即为鱼鳞胶原蛋白。

所述脱脂乳培养基为将鲜乳煮沸后在100℃下静止30min，而后自然冷却，待出现脂肪层后，取下层乳液，灭菌后待用。

发酵培养液，按重量百分比计鱼鳞15％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸铵0.2％，乙酸钠0.5％，葡萄糖2％，硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)0.058％，硫酸锰(MnSO₄·4H₂O)0.025％，吐温801.0mL/L，余量为水，pH 6.2-6.4。所述鱼鳞为罗非鱼、大黄鱼或真鲷加工下脚料。

本发明所具有的优点：

本发明实施例测定乳酸菌发酵鱼鳞粉产生的主要营养物质为游离钙和胶原多肽，其利用肠道有益菌——乳酸菌发酵天然富含胶原蛋白和适宜钙磷比的鱼鳞粉，乳酸菌发酵过程成产生的酸性末端产物能够将鱼鳞中的不可溶钙(羟基磷灰石)部分转化为可溶性钙(乳酸钙，氨基酸钙)，而且胞外蛋白酶可以水解鱼鳞蛋白质提供辅助钙吸收的胶原多肽、氨基酸和磷。同时，发酵过程中产生的乙醛，乙酸乙酯，双乙酰等风味物质，能改善发酵鱼鳞口服液的口感和气味，乳酸菌还是肠道有益菌，将鱼鳞经发酵后加工成含有活性菌体的补钙制品，可大大地改善肠道的消化吸收功能。鱼鳞通过乳酸菌发酵后，经过浓缩、干燥、成型，加入填充剂等不同工序，可以制成各种高营养价值、风味独特的饮品，亦可制成新型的口服液、胶囊、片剂等生物态补钙健胃整肠的新型功能食品。

具体实施方式

实施例

1)鱼鳞粉的制备：将鱼鳞用清水浸泡2天，再在浸泡的清水中加入质量体积比1％的碳酸氢钠浸泡脱脂(即质量体积比：每100ml中溶质的克数)，而后冲洗、晾干至恒重，最后粉碎到80目，待用。其中鱼鳞可为来源于罗非鱼、大黄鱼、真鲷鱼类加工下脚料。

2)菌种活化：

①脱脂乳活化培养基：将鲜乳煮沸后装入三角烧杯中，在100℃下静止30min，然后自然冷却，待出现脂肪层后，取下层乳液分装于试管中，加量于试管的1/3处，包装好，利用间歇灭菌法灭菌，冷却，低温保存，备用。间歇灭菌法即106℃，30min灭菌，每天一次，连续3天。

②将丁二酮乳酸链球菌Nisin butanedione、保加利亚乳杆菌Lactobacillusbulgaricus和嗜热链球菌Streptococcus thermophilus分别接入脱脂乳培养基中，40.5℃温箱内培养6～10h，连续活化三次。

3)发酵培养：

①发酵培养液：按重量百分比计，鱼鳞粉5-15％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸铵0.2％，乙酸钠0.5％，葡萄糖2％，硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)0.058％，硫酸锰(MnSO₄·4H₂O)0.025％，吐温801.0mL/L，余量为水，pH6.2-6.4。

②活化培养后按体积比为1∶1接种到发酵液中，每升发酵液培养液中接种1％上述活化培养后的菌种，同时加入质量体积比3-8％的蔗糖(质量体积比：每100ml中溶质的克数，即每100ml发酵液中蔗糖的克数)在42℃下培养12-48小时(步骤条件参见表1)，过滤后滤液即为鱼鳞胶原蛋白。

③将上述所得鱼鳞胶原蛋白采用EDTA滴定法进行钙离子的测定，并用双缩脲法进行可溶性蛋白的测定(参见表2)。

表1因素水平表

其中菌种为a为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌体积比1∶1的混合菌；b为嗜热链球菌；c为丁二酮乳酸链球菌。

表2正交试验表

Claims

1.一种鱼鳞胶原多肽，其特征在于：利用乳酸菌对鱼鳞进行发酵，即得鱼鳞胶原多肽发酵物，其产物分子量为1000～3000道尔顿；发酵过程为将乳酸菌接种到含有鱼鳞的发酵培养液中42℃下培养24小时，即得到鱼鳞胶原多肽；

所述乳酸菌为按体积比为1∶1混合的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。

2.按权利要求1所述的鱼鳞胶原多肽，其特征在于：所述鱼鳞为罗非鱼、大黄鱼或真鲷加工下脚料。

3.一种权利要求1所述的鱼鳞胶原多肽的制备方法，其特征在于：将乳酸菌接种到含有鱼鳞的发酵培养液中42℃下培养24小时，即得到鱼鳞胶原多肽；

4.按权利要求3所述的鱼鳞胶原多肽的制备方法，其特征在于：将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌分别在脱脂乳培养基中进行活化培养，活化培养后的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌按体积比为1∶1接种到发酵培养液中，每升发酵培养液中接种1％上述活化培养后的菌种，同时加入5％的蔗糖在42℃下培养24小时，过滤后滤液即为鱼鳞胶原多肽。

5.按权利要求4所述的鱼鳞胶原多肽的制备方法，其特征在于：所述脱脂乳培养基为将鲜乳煮沸后在100℃下静止30min，而后自然冷却，待出现脂肪层后，取下层乳液，灭菌后待用。

6.按权利要求3或4所述的鱼鳞胶原多肽的制备方法，其特征在于：发酵培养液，按重量百分比计鱼鳞粉15％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，柠檬酸铵0.2％，乙酸钠0.5％，葡萄糖2％，七水硫酸镁0.058％，四水硫酸锰0.025％，吐温80 1.0mL/L，余量为水，pH6.2-6.4。

7.按权利要求3或4所述的鱼鳞胶原多肽的制备方法，其特征在于：所述鱼鳞为罗非鱼、大黄鱼或真鲷加工下脚料。