CN108165599A - 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 - Google Patents
一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108165599A CN108165599A CN201810236033.4A CN201810236033A CN108165599A CN 108165599 A CN108165599 A CN 108165599A CN 201810236033 A CN201810236033 A CN 201810236033A CN 108165599 A CN108165599 A CN 108165599A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fish scale
- collagen
- extracted
- microwave
- technique
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 title claims abstract description 54
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 29
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 29
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims abstract description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 16
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 15
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 claims abstract description 15
- 235000001637 Ganoderma lucidum Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims abstract description 15
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 14
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims abstract description 12
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 12
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000010411 cooking Methods 0.000 claims abstract description 11
- 241001005836 Euchloe ausonia Species 0.000 claims abstract description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000005115 demineralization Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002328 demineralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002893 slag Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 9
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 9
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 238000010792 warming Methods 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 5
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 5
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 5
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000002801 charged material Substances 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 claims description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 5
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 3
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 18
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 abstract description 9
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 abstract description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 8
- 235000002918 Fraxinus excelsior Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000002956 ash Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 abstract description 3
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 46
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 101000693530 Staphylococcus aureus Staphylokinase Proteins 0.000 description 4
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 101710137908 Pepsin-2 Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 229910052586 apatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000013332 fish product Nutrition 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;fluoride;triphosphate Chemical compound [F-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O VSIIXMUUUJUKCM-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- -1 proline Chemical class 0.000 description 1
- 210000003786 sclera Anatomy 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P39/00—Processes involving microorganisms of different genera in the same process, simultaneously
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
Abstract
本发明公开了一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，包括1)脱矿得到酸水解鱼鳞粉；2)、微波和超声波协同加热交联，得到鱼鳞粘浆；3)、酶解得到酶解浆液，4)加热加压蒸煮得到蒸煮浆液；5)、接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在30～35℃下发酵3～4天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。本发明以鱼鳞为原料，经过特殊的微波和超声波协同加热交联和混合菌液的协调发酵处理，将胶原蛋白的收率提高至鱼鳞干重的78～84％，所得胶原蛋白肽为白色无味粉末，灰分含量小于0.2％，分子量小于1500Da的肽段占总氮的96％以上，分子量小于600Da的肽段占总氮的75％以上分子量小于500Da的肽段占总氮的60％以上，易于被人体吸收利用。
Description
技术领域
本发明属于生物提取技术领域，具体涉及到一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺。
背景技术
胶原蛋白是一种高分子功能性蛋白质。它是皮肤的主要组成部分，占皮肤真皮层80％的比重。它在皮肤中构成了一张细密的弹力网，牢固锁住水分，支撑着皮肤。胶原蛋白是由3条肽链拧成螺旋纤维状蛋白质，也是人体内含量最丰富的蛋白质，广泛分布于结缔组织、皮肤、骨骼、内脏细胞间质及肌腔、韧带、巩膜等部位，大约占人体总蛋白质的30％及以上。它富含人体需要的脯氨酸、羟脯氨酸等胶原蛋白特征氨基酸，是人体细胞特别是肌肤细胞外基质中重要组成部分，所以胶原蛋白也是在发达国家美容界流行最久的美容保健品。现有的胶原蛋白的制备原料主要来源于陆生动物的骨骼和皮。随着物价的上涨，近年来为了追求动物能够快速成长，动物饲料的化学添加剂越来越多，导致陆生动物的骨骼和皮蛋白肽含量大大降低，而且受到化学添加剂的污染严重，致使肽原蛋白的来源受到极大的影响。
鱼鳞，通常都将它刮下来当废物扔掉。其实，鱼鳞含有丰富的蛋白质、脂肪和多种维生素，还有铁、锌、钙和多种人体必需的微量元素，以及胶质。近年来，海水鱼加工业随着我国海洋鱼类产量的增长而得到了较快的发展，鱼品加工也越来越广泛。但是，许多海水鱼加工过程仅局限于对鱼体肌肉的利用，而对鱼鳞等废弃物的加工利用甚少。每年海水鱼加工业的废弃物总量达到200万吨以上，其中鱼鳞约占15％，即30万吨。在淡水鱼数量废弃物鱼鳞也有相当大部分的比例。若能合理利用，可有效减少环境污染，又可提高企业效益，因此加大对鱼鳞含有物质的利用，具有非常重大的意义。
现有的鱼鳞胶原蛋白提取方法通常为简单的酸碱或是蒸煮处理，但是鱼鳞中羟基磷灰石、蛋白质与其他物质之间已经形成网状结构，简单的酸碱处理并不能除去羟基磷灰石等其他物质，直接导致蛋白纯度低，影响产品质量。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术中鱼鳞中提取的胶原蛋白质量不高的缺陷，提供一种从鱼鳞中提取高品质胶原蛋白的工艺。
为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：
一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，步骤为：
1)、脱矿：将鱼鳞洗净、干燥、粉碎至粒径为150-200目，加入到40-50倍质量的混合酸溶液中，超声波反应40-50min，过滤，并用水洗涤至滤液pH值至中性，加入5～8体积的水，得到酸水解鱼鳞粉；
2)、微波和超声波协同加热交联：将步骤1)所得酸水解鱼鳞粉在微波和超声波协同加热交联，微波功率为100～600W，频率为1000～3000MHz，超声波的功率为200～600W，辐照时间控制在5～20min，得到鱼鳞粘浆；
3)、酶解向步骤2)所得的鱼鳞粘浆中添加相对于鱼鳞投料重量1％～2％的复合酶进行酶解，得到酶解浆液；
4)加热加压蒸煮将步骤3)所得的酶解浆液在90～100℃下加热加压蒸煮2～4小时，然后冷却至35℃以下，得到蒸煮浆液；
5)、发酵向步骤4)所得的蒸煮浆液中接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在30～35℃下发酵3～4天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。
进一步的，微波的功率为240～360W，将体系升温至65～80℃。
进一步的，复合蛋白酶中中性蛋白酶质量份数为8～12份，菠萝蛋白酶2～4份，胃蛋白酶1～2份，脂肪酶2～5份。
进一步的，酶解温度为40-60℃，酶解反应pH值控制在3-5，酶解2-5小时；酶解结束后升温到70-80℃，保温20-30分钟灭酶，得到酶解浆液。
进一步的，所述混合发酵液为将酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌接种在液体培养基中，在30-35℃条件下培养20-24h所得。
进一步的，所述步骤4)中加热加压蒸煮时的压力控制在1.2～1.5kg/cm2。
微波和超声波协同加热交联，利用微波和超声波与蛋白质间的相互作用，产生活化原子与活化分子，并使之与蛋白质发生一系列物理化学变化，导致蛋白质的降解、聚合与交联改性；热交联中产生自由基，该自由基作用于肽链，造成肽链断裂，产生降解，形成了分子量较小的胶原蛋白，提高人体的吸收率，以便人们更好的去利用。处理效率高、无需添加其他化学试剂以及无二次污染等特点。
酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌发酵过程中产生多样化的蛋白酶，进一步完成对鱼鳞中蛋白的降解，同时灵芝、乳酸菌协同地衣芽孢杆菌发酵，产生灵芝多糖和三萜类有效活性成分的含量，提高了免疫调节功效和抗氧化功效，将发酵速度提高2～3倍，缩短了发酵时间，提高了发酵效率，酿酒酵母可以在发酵过程中产生二氧化碳，使发酵体系膨胀，使鱼鳞中蛋白交联结构疏松，进一步增加蛋白酶对蛋白质的接触与分解，产生的蛋白质肽链长度降低，提高蛋白质断链效果，取得了意料不到的技术效果。
本发明所达到的有益效果是：
本发明以鱼鳞为原料，经过特殊的微波和超声波协同加热交联、加热加压蒸煮和酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵处理工艺，将胶原蛋白的收率提高至鱼鳞干重的78～84％，所得胶原蛋白肽为白色无味粉末，灰分含量小于0.2％，分子量小于1500Da的肽段占总氮的96％以上，分子量小于600Da的肽段占总氮的75％以上分子量小于500Da的肽段占总氮的60％以上，易于被人体吸收利用。
具体实施方式
以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，步骤为：
1)、脱矿：将鱼鳞洗净、干燥、粉碎至粒径为200目，加入到40倍质量的混合酸溶液中，超声波反应40min，过滤，并用水洗涤至滤液pH值至中性，加入5体积的水，得到酸水解鱼鳞粉；
2)、微波和超声波协同加热交联：将步骤1)所得酸水解鱼鳞粉在微波和超声波协同加热交联，微波功率为100W，频率为3000MHz，超声波的功率为600W，辐照时间控制在20min，将体系升温至65℃，得到鱼鳞粘浆；
3)、酶解向步骤2)所得的鱼鳞粘浆中添加相对于鱼鳞投料重量1％的复合酶进行酶解，得到酶解浆液；复合蛋白酶由中性蛋白酶质量份数为12份，菠萝蛋白酶2份，胃蛋白酶1份，脂肪酶2份组成，酶解温度为60℃，酶解反应pH值控制在3，酶解5小时；酶解结束后升温到80℃，保温30分钟灭酶，得到酶解浆液。
4)加热加压蒸煮将步骤3)所得的酶解浆液在90℃，1.5kg/cm2的压力下加热加压蒸煮4小时，然后冷却至35℃以下，得到蒸煮浆液；
5)、发酵向步骤4)所得的蒸煮浆液中接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在30℃下发酵4天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。所述混合发酵液为将酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的密度接种在液体培养基中，在35℃条件下培养24h所得。
实施例2
一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，步骤为：
1)、脱矿：将鱼鳞洗净、干燥、粉碎至粒径为150目，加入到50倍质量的混合酸溶液中，超声波反应50min，过滤，并用水洗涤至滤液pH值至中性，加入8体积的水，得到酸水解鱼鳞粉；
2)、微波和超声波协同加热交联：将步骤1)所得酸水解鱼鳞粉在微波和超声波协同加热交联，微波功率为600W，频率为1000MHz，超声波的功率为200W，辐照时间控制在5min，将体系升温至80℃，得到鱼鳞粘浆；
3)、酶解向步骤2)所得的鱼鳞粘浆中添加相对于鱼鳞投料重量2％的复合酶进行酶解，得到酶解浆液；复合蛋白酶由中性蛋白酶质量份数为8份，菠萝蛋白酶4份，胃蛋白酶2份，脂肪酶5份组成，酶解温度为40℃，酶解反应pH值控制在5，酶解2小时；酶解结束后升温到80℃，保温20分钟灭酶，得到酶解浆液。
4)加热加压蒸煮将步骤3)所得的酶解浆液在100℃，1.2kg/cm2的压力下加热加压蒸煮2小时，然后冷却至35℃以下，得到蒸煮浆液；
5)、发酵向步骤4)所得的蒸煮浆液中接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在35℃下发酵3天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。所述混合发酵液为将酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的密度接种在液体培养基中，在30℃条件下培养20h所得。
实施例3
一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，步骤为：
1)、脱矿：将鱼鳞洗净、干燥、粉碎至粒径为180目，加入到45倍质量的混合酸溶液中，超声波反应45min，过滤，并用水洗涤至滤液pH值至中性，加入6体积的水，得到酸水解鱼鳞粉；
2)、微波和超声波协同加热交联：将步骤1)所得酸水解鱼鳞粉在微波和超声波协同加热交联，微波功率为300W，频率为2200MHz，超声波的功率为400W，辐照时间控制在12min，微波的功率为330W，将体系升温至65～80℃，得到鱼鳞粘浆；
3)、酶解向步骤2)所得的鱼鳞粘浆中添加相对于鱼鳞投料重量2％的复合酶进行酶解，得到酶解浆液；复合蛋白酶由中性蛋白酶质量份数为10份，菠萝蛋白酶3份，胃蛋白酶1份，脂肪酶3份组成，酶解温度为55℃，酶解反应pH值控制在4，酶解4小时；酶解结束后升温到75℃，保温30分钟灭酶，得到酶解浆液。
4)加热加压蒸煮将步骤3)所得的酶解浆液在95℃，1.4kg/cm2的压力下加热加压蒸煮3小时，然后冷却至35℃以下，得到蒸煮浆液；
5)、发酵向步骤4)所得的蒸煮浆液中接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在33℃下发酵3.5天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。所述混合发酵液为将酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的密度接种在液体培养基中，在35℃条件下培养22h所得。
由上表可见，本发明的方法可将胶原蛋白的收率提高至鱼鳞干重的78～84％，所得胶原蛋白肽为白色无味粉末，灰分含量小于0.2％，分子量小于1500Da的肽段占总氮的96％以上，分子量小于600Da的肽段占总氮的75％以上，分子量小于500Da的肽段占总氮的60％以上，易于被人体吸收利用。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，步骤为：
1)、脱矿：将鱼鳞洗净、干燥、粉碎至粒径为150-200目，加入到40-50倍质量的混合酸溶液中，超声波反应40-50min，过滤，并用水洗涤至滤液pH值至中性，加入5～8体积的水，得到酸水解鱼鳞粉；
2)、微波和超声波协同加热交联：将步骤1)所得酸水解鱼鳞粉在微波和超声波协同加热交联，微波功率为100～600W，频率为1000～3000MHz，超声波的功率为200～600W，辐照时间控制在5～20min，得到鱼鳞粘浆；
3)、酶解向步骤2)所得的鱼鳞粘浆中添加相对于鱼鳞投料重量1％～2％的复合蛋白酶进行酶解，得到酶解浆液；
4)加热加压蒸煮将步骤3)所得的酶解浆液在90～100℃下加热加压蒸煮2～4小时，然后冷却至35℃以下，得到蒸煮浆液；
5)、发酵向步骤4)所得的蒸煮浆液中接入酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌的混合发酵液在30～35℃下发酵3～4天，灭菌后去渣，将上清液干燥即得。
2.如权利要求1所述的从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，微波的功率为240～360W，将体系升温至65～80℃。
3.如权利要求1所述的从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，复合蛋白酶中中性蛋白酶质量份数为8～12份，菠萝蛋白酶2～4份，胃蛋白酶1～2份，脂肪酶2～5份。
4.如权利要求3所述的从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，酶解温度为40-60℃，酶解反应pH值控制在3-5，酶解2-5小时；酶解结束后升温到70-80℃，保温20-30分钟灭酶，得到酶解浆液。
5.如权利要求1所述的从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，所述混合发酵液为将酿酒酵母、灵芝、乳酸菌和地衣芽孢杆菌接种在液体培养基中，在30-35℃条件下培养20-24h所得。
6.如权利要求1所述的从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺，其特征在于，所述步骤4)中加热加压蒸煮时的压力控制在1.2～1.5kg/cm2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810236033.4A CN108165599A (zh) | 2018-03-21 | 2018-03-21 | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810236033.4A CN108165599A (zh) | 2018-03-21 | 2018-03-21 | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108165599A true CN108165599A (zh) | 2018-06-15 |
Family
ID=62512169
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810236033.4A Pending CN108165599A (zh) | 2018-03-21 | 2018-03-21 | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108165599A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113549665A (zh) * | 2021-07-26 | 2021-10-26 | 廖望 | 一种寡肽复合物及其制备方法和制得的抗皱修复乳液 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006000089A (ja) * | 2004-06-21 | 2006-01-05 | Jellice Co Ltd | 魚鱗からのコラーゲンペプチドの製造方法 |
| CN102318843A (zh) * | 2011-07-01 | 2012-01-18 | 中国科学院海洋研究所 | 一种鱼鳞胶原多肽及其制备方法 |
| CN103215314A (zh) * | 2013-04-25 | 2013-07-24 | 南宁骄阳医药科技有限公司 | 一种鱼鳞经双菌种多酶系发酵生产护肤品原料的方法 |
| CN104342040A (zh) * | 2014-10-09 | 2015-02-11 | 江西师范大学 | 一种高胶融温度鱼鳞明胶的制备方法 |
| CN106834396A (zh) * | 2015-12-03 | 2017-06-13 | 威海市宇王集团有限公司 | 鱼鳞胶原活性肽的制备方法 |
| CN107723331A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-02-23 | 华南师范大学 | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 |
-
2018
- 2018-03-21 CN CN201810236033.4A patent/CN108165599A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006000089A (ja) * | 2004-06-21 | 2006-01-05 | Jellice Co Ltd | 魚鱗からのコラーゲンペプチドの製造方法 |
| CN102318843A (zh) * | 2011-07-01 | 2012-01-18 | 中国科学院海洋研究所 | 一种鱼鳞胶原多肽及其制备方法 |
| CN103215314A (zh) * | 2013-04-25 | 2013-07-24 | 南宁骄阳医药科技有限公司 | 一种鱼鳞经双菌种多酶系发酵生产护肤品原料的方法 |
| CN104342040A (zh) * | 2014-10-09 | 2015-02-11 | 江西师范大学 | 一种高胶融温度鱼鳞明胶的制备方法 |
| CN106834396A (zh) * | 2015-12-03 | 2017-06-13 | 威海市宇王集团有限公司 | 鱼鳞胶原活性肽的制备方法 |
| CN107723331A (zh) * | 2017-11-07 | 2018-02-23 | 华南师范大学 | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113549665A (zh) * | 2021-07-26 | 2021-10-26 | 廖望 | 一种寡肽复合物及其制备方法和制得的抗皱修复乳液 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108796017A (zh) | 牛骨肽及其酶解提取方法 | |
| CN103540510B (zh) | 鳄鱼骨肉保健酒及其制备方法 | |
| CN105249464B (zh) | 一种虾肽螯合钙的制备方法 | |
| CN104313098A (zh) | 一种鱼鳔胶原蛋白粉的制取方法 | |
| CN105624249A (zh) | 一种水产蛋白-植物蛋白复合型活性肽的制备方法 | |
| CN107334138A (zh) | 一种葛根膳食纤维片的制备方法 | |
| CN105707855A (zh) | 一种木瓜酵素的制备方法 | |
| CN111004829A (zh) | 一种黑木耳活性肽的制备方法 | |
| CN104783234B (zh) | 一种牡蛎粉的制备方法 | |
| CN108728509A (zh) | 一种日本黄姑鱼的鱼皮免疫调节肽的制备方法 | |
| CN107502639B (zh) | 一种龟甲胶原多肽的提取方法 | |
| CN107557236B (zh) | 一种功能肽无醇黄酒的制作工艺 | |
| CN108165599A (zh) | 一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的工艺 | |
| CN111334554A (zh) | 一种三文鱼寡肽及其制备方法 | |
| CN103540511A (zh) | 鳄鱼掌养生酒及其制备方法 | |
| CN106591407A (zh) | 一种鱼胶原蛋白粉及其制备方法 | |
| CN111264793A (zh) | 一种使用鲟鱼软骨制作胶原蛋白冻的制备方法 | |
| CN105002246A (zh) | 一种分子量分布均一的鱼多肽及其制备方法 | |
| CN108048513A (zh) | 一种胶原蛋白酶联合新型微生物蛋白酶水解制备乌参胶原蛋白低聚肽的方法 | |
| CN110236083A (zh) | 一种富含胶原蛋白即食鱼皮的制备方法 | |
| CN102524738A (zh) | 一种混合固态发酵生产复合调味汁的方法 | |
| CN108018326A (zh) | 新型微生物蛋白酶水解制备东海乌参胶原蛋白肽 | |
| CN108103133A (zh) | 从鱿鱼缠卵腺中提取的抗氧化活性多肽 | |
| CN114395599A (zh) | 一种复合多元肽的制备方法 | |
| CN106754030A (zh) | 一种营养型糯米封缸酒的酿造工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180615 |