CN102133266B - 一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法 - Google Patents

一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法，其步骤：A、取金玄痔科熏洗散方中金银花、荆芥、马齿苋混合、粉碎，过目筛，经超临界萃取后的药粉，加乙醇浸泡，以药材量的流速渗漉提取,收集渗漉液；B、将乙醇渗漉液浓缩，静置后抽虑，得到滤液；C、滤液的流速通过大孔吸附树脂柱，用树脂量的水洗脱除去杂质，再用乙醇的流速进行洗脱，得到乙醇洗脱液；D、将洗脱液回收乙醇，浓缩至相对密度，浓缩液经喷雾干燥，得金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物。该方法简单，有效物质含量较高，降低了生产成本，节约了能源，提取物中总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量之和可达70％以上。提取物具有很明显的抗炎、镇痛效果。

Description

一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法
技术领域
本发明涉及中药复方有效部位的提取纯化技术领域，更具体涉及一种金玄痔科熏洗散提取物的制备方法。
背景技术
金玄痔科熏洗散是武汉马应龙药业公司生产的中成药品种。该中药是由玄明粉、枯矾、金银花、荆芥、马齿苋等五味中药组方制备，具有消肿止痛、祛风燥湿的功效；临床用于治疗炎性外痔及痔疮术后所致肛门炎症、肿胀、疼痛等症，具有起效快、疗效好、使用方便等特点。因此，该中药品种颇受广大患者欢迎，市场前景广阔。然而，该中药复方品种为传统生产工艺制备，存在药效物质基础不明确、质量控制标准不完善、药物疗效尚不稳定、临床使用剂量较大、外用卫生条件有待改善等不足之处。
金玄痔科熏洗散复方包含金银花、荆芥、马齿苋三味植物药和两味矿物药。化学成分研究较多，金银花主要有黄酮类、三萜皂苷类、有机酸类、挥发油类等成分；荆芥主要含有挥发油类、黄酮类、酚酸类等成分；马齿苋主要含有有机酸、黄酮类、挥发油等成分；玄明粉主要含硫酸钠(Na2SO4)，枯矾为白矾煅制而成，主要成分为KAl(SO4)2。
现代药理研究表明，金银花具有抗炎、抗内毒素、抗菌抗病毒、抗肿瘤等作用，总黄酮、总皂苷和有机酸为其主要有效成分；荆芥具有抗炎镇痛、抗病毒、抗菌等作用，黄酮和酚类物质为其主要有效成分；马齿苋具有抗菌抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能、抗衰老等作用，黄酮类和有机酸类为其主要有效成分。
原金玄痔科熏洗散方中植物药中上述有效物质采用加水煎煮法提取，存在提取物所含杂质多、有效成分损失大、药效物质不稳定、成本较高、污染环境等弊端，不符合中药产业化要求。
本发明将金玄痔科熏洗散方中三味植物药视为整体，取其超临界CO2萃取后的药渣采用乙醇作为提取溶媒，渗漉法提取，提取液通过大孔吸附树脂纯化，得到较高含量的黄酮类、皂苷类和有机酸类有效物质部位，该提取纯化技术国内外未见相关资料报道。其提取纯化工艺流程简单，节约了能源，控制了环境污染，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业现代化的要求。
本发明采用正交设计试验和单因素相结合的研究方法，对金玄痔科熏洗散方中三味植物药非挥发性有效物质部位的黄酮类、皂苷类和有机酸类成分的乙醇渗漉提取工艺及D101大孔树脂纯化工艺进行了系统研究，获得了可靠的技术参数，进行了中试验证，可过渡到产业化。具有较强的应用价值。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法，该方法简单，有效物质含量较高，降低了生产成本，节约了能源，提取物中总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量之和可达70％以上。所用大孔树脂可重复利用，结果表明金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物具有很明显的抗炎、镇痛效果。
为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：
一种金玄痔科熏洗散方中三味植物药大孔树脂纯化位提取物的提取纯化方法包括：金玄痔科熏洗散三味植物药(按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛)经超临界萃取后的药粉用乙醇渗漉提取，提取液浓缩至一定体积，滤过，滤液通过大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱，继用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩，喷雾干燥。
一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法，其步骤如下：
(a)取金玄痔科熏洗散方中金银花、荆芥、马齿苋三味植物药(按3∶4∶3比例混合、粉碎，过35-50目筛)经超临界萃取后的药粉，加2-4倍药材量(三味植物药)的30％～90％(体积比)乙醇浸泡20-30小时，加6～14倍药材量(三味植物药)的30％～90％(体积比)乙醇，以每小时1～5倍药材量(三味植物药)的流速渗漉提取，收集渗漉液；
(b)将乙醇渗漉液(50～120L)浓缩至一定体积(20～40L)，使药液体积为1～5倍药材量(三味植物药)，静置(2～10h)后抽虑，得到滤液；
(c)滤液以每小时0.5～4倍柱床体积的流速通过大孔吸附树脂柱，先用2～4倍树脂量的水洗脱除去杂质，再用2～7倍柱床体积的40～95％(体积比)乙醇以每小时0.5～4倍柱床体积的流速进行洗脱，得到乙醇洗脱液；
(d)将洗脱液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.01～1.10，浓缩液经喷雾干燥，即得金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物产品。收集干燥的提取物，密封，称重，置干燥处保存。本发明得到金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物产品中总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量之和可达70％以上。
本发明还包括提取物的药物组合物，即总黄酮、总皂苷和总有机酸，以及本发明的提取物在制备一种抗炎镇痛药物中的应用。
所述的提取物的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：熏洗剂、片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。
所述的提取物的药物组合物，在制备成药剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体可以是：淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素类及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、聚山梨酯80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等其中的一种。
本发明与现有技术比较，具有以下优点和效果：
本发明采用乙醇作为提取溶媒，提取液通过大孔吸附树脂纯化，所得有效部位提取物的制备工艺国内外未见相关资料报道。其提取纯化工艺流程简单，有效物质含量较高，降低了生产成本，节约了能源，控制了环境污染，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业现代化的要求。所制备的提取物药理试验效果明显，抗炎、镇痛作用研究如表1-表3
表1 金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物对蛋清所致大鼠足肿胀的影响
Figure BDA0000049180170000031
注：与阴性组比较，P＜0.05★，P＜0.01▲
表2 金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
Figure BDA0000049180170000032
注：与阴性组比较，P＜0.05★，P＜0.01▲
表3 金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物对热板所致小鼠痛阈的影响
Figure BDA0000049180170000033
Figure BDA0000049180170000041
注：与阴性组比较，P＜0.05★，P＜0.01▲
附图说明
图1为一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的提取纯化工艺流程图
图2为一种金玄痔科熏洗散方中三味植物药经超临界萃取后的药粉经70％乙醇渗漉提取制备的样品溶液通过D101大孔树脂柱吸附总黄酮的泄露曲线
图3为一种70％乙醇为洗脱剂洗脱树脂柱中总黄酮的洗脱曲线
图4为一种70％乙醇为洗脱剂洗脱树脂柱中总皂苷的洗脱曲线
图5为一种70％乙醇为洗脱剂洗脱树脂柱中总有机酸的洗脱曲线
图1所示的工艺流程为：取金玄痔科熏洗散三味植物药(按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛)经超临界萃取后的药渣7.5Kg，加3倍药材量(三味植物药)的50％乙醇浸泡24小时，再加12倍药材量的50％乙醇以每小时2倍药材量的流速渗漉提取，收集渗漉液；将渗漉液浓缩至一定体积，使药液体积为3.3倍药材量(25L)，静置抽滤后，得上样药液，备用。滤液以1Bv/h的加样流速进行吸附(树脂床径高比为1∶8)，吸附完毕后，用3倍树脂床体积的蒸馏水以1Bv/h的流速冲洗，然后以5倍树脂柱体积的70％乙醇，以1Bv/h的流速进行洗脱，收集洗脱液。洗脱液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.03，喷雾干燥，收集干燥提取物，封口，放冷，称重，置阴凉处保存。
具体实施方式
实施例1：
一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法，其步骤如下：
(a)取金玄痔科熏洗散方中金银花、荆芥、马齿苋三味植物药按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛，经超临界萃取后的药粉，加2或3或4倍药材量(三味植物药)的30或35或45或56或62或68或74或79或85或90％(体积比)乙醇浸泡20或22或25或27或30小时，加6或8或10或12或14倍药材量(三味植物药)的30或36或40或48或55或60或66或70或75或80或86或90％(体积比)乙醇，以每小时1或2或3或4或5倍药材量(三味植物药)的流速渗漉提取，收集渗漉液；
(b)将乙醇渗漉液50或60或70或80或90或100或110或120L浓缩至一定体积20或30或40L，使药液体积为1或2或3或4或5倍药材量(三味植物药)，静置(2或4或6或8或10h)后抽虑，得到滤液；
(c)滤液以每小时0.5或1或2或3或4倍柱床体积的流速通过大孔吸附树脂柱，先用2或3或4倍树脂量的水洗脱除去杂质，再用2或3或4或5或6或7倍柱床体积的40或50或65或75或85或95％(体积比)乙醇以每小时0.5或1或2或3或4倍柱床体积的流速进行洗脱，得到乙醇洗脱液；
(d)将洗脱液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.01～1.10，浓缩液经喷雾干燥，即得金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物产品。收集干燥的提取物，密封，称重，置干燥处保存。本发明得到金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物产品中总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量之和可达70％以上。
上述提取纯化优选条件为：
步骤a中，加12倍药材量(三味植物药)的50％(体积比)乙醇以每小时2倍药材量(三味植物药)的流速渗漉提取，收集渗漉液。
步骤b中，乙醇渗漉液体积(100L)经优选确定为药材量的3.3倍(25L)；
步骤c中，首先将滤液以每小时1倍柱床体积的流速通过大孔吸附树脂柱吸附，然后用3倍柱床体积的水洗除杂质，继用5倍柱床体积的70％(体积比)乙醇以每小时1倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质。
步骤d中，喷雾干燥条件为：进风口温度为170℃，出风口温度为90℃，雾化盘转速为20000转/分钟)。
本发明的金玄痔科熏洗散有效部位提取物中总黄酮、总皂苷和总鞣质的含量之和可达71.1％。
本发明中所述的乙醇浓度是指100mL体积乙醇水溶液中含乙醇体积分数。
本发明还包括提取物的药物组合物，即总黄酮、总皂苷和总有机酸，以及本发明的提取物在制备一种抗炎镇痛药物中的应用。
本发明的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：熏洗剂、片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。
本发明的药物组合物，在制备成药剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体可以是：淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素类及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、聚山梨酯80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
下面结合实施例对本发明方法作进一步的说明。
实验例1：
金玄痔科熏洗散方中金银花、荆芥、马齿苋三味植物药大孔树脂纯化提取物以乙醇作溶媒的提取工艺试验
(1)乙醇渗漉提取工艺试验：本实验对金玄痔科熏洗散方中三味植物药(按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛)经超临界CO2萃取后药渣中所含有效物质，进行了渗漉提取工艺研究。采用四因素三水平正交实验方法，对提取溶媒的乙醇浓度、乙醇用量和渗漉速度等影响因素进行了优选，其考察指标为提取物中主要药效物质总黄酮及干膏得率，结果见表4-表7。
表4 试验因素水平表
  水平  A乙醇浓度(％)  B乙醇用量(倍)   C空白   D渗漉速度(BV/H)
  1  50  8   2
  2  60  10   4
  3  70  12   6
表5 正交试验设计及结果分析
Figure BDA0000049180170000061
Figure BDA0000049180170000071
表6 总黄酮量的方差分析
因素   离差平方和   自由度   均方   F值   P
A   1496.98   2   3.891
B   37928.844   2   98.579   ＜0.05
D   5899.105   2   15.332
空白(误差)   384.75   2
F0.05(2，2)＝19.00
表7 干膏得率的方差分析
  因素   离差平方和    自由度   均方   F值   P
  A   7.368    2   111.636   ＜0.05
  B   1.680    2   25.455   ＜0.05
  D   0.454    2   6.879
  空白(误差)   0.07    2
F0.05(2，2)＝19.00    F0.01(2，2)＝99.00
实验结果表明，影响因素最大的是乙醇用量，其次是乙醇浓度，渗漉速度无显著性影响，综合直观分析和方差分析，优选最佳工艺条件为A1B3D1。，即加12倍量50％乙醇，以2BV/H的速度进行渗漉。
(2)验证试验：按照正交试验优选的最佳工艺条件，进行3次重复性试验，试验结果见表8。
表8 渗漉提取验证试验结果
  试验号   药材用量(g)   金玄总黄酮量(mg)   干膏得率(％)
  1   50   1381.77   20.80
  2   50   1331.77   20.45
  3   50   1334.896   20.60
验证结果表明优选的提取工艺稳定可行。
实验例2：金玄痔科熏洗散方中三味植物药乙醇提取有效物质部位的大孔树脂纯化工艺试验
前述优选提取条件提取得到的金玄痔科熏洗散三味植物药渣的渗漉提取液进行如下纯化试验：
(1)D101大孔树脂纯化工艺试验
①吸附条件优选试验
采用正交试验方法以上样流速、药液的浓度(以样品中所含有的原药材量计)及径高比作为考察因数，应用L9(34)正交表安排试验，因素及水平安排见表6。对以下9组试验分别测定总黄酮、总皂苷、总有机酸含量，计算其比吸附量，并进行综合评价。分析结果见表9～13。
表9 因素水平表
  水平   A上样浓度(g·mL-1)   B吸附流速(BV/H)   C空白   D径高比
  1   0.1   2   1∶3
  2   0.3   4   1∶8
  3   0.5   6   1∶12
表10 金玄痔科熏洗散渗漉提取物吸附正交试验设计及结果分析表
Figure BDA0000049180170000081
Figure BDA0000049180170000091
表11 金玄痔科熏洗散总黄酮比吸附量的方差分析
  因素   离差平方和   自由度   F值   显著性
  上样浓度   50.736   2   19.225   ＜0.05
  吸附速度   7.636   2   2.894
  径高比   2.543   2   0.964
  误差   2.64   2
F0.05(2，2)＝19，F0.01(2，2)＝99.00
表12 金玄痔科熏洗散总皂苷比吸附量的方差分析
  因素   离均差平方和   自由度   F   显著性
  上样浓度   136.071   2   25.161   ＜0.05
  吸附速度   2.726   2   0.504
  径高比   3.030   2   0.560
  误差   5.41   2
F0.05(2，2)＝19，F0.01(2，2)＝99.00
表13 金玄痔科熏洗散总有机酸比吸附量的方差分析
  因素   离均差平方和   自由度   F   显著性
  上样浓度   145.043   2   6.901
  吸附速度   33.558   2   1.597
  径高比   119.506   2   5.686
  误差   21.02   2
F0.05(2，2)＝19，F0.01(2，2)＝99.00
方差分析结果表明，在金玄痔科熏洗散三味植物药乙醇提取物总黄酮、总皂苷、总有机酸的吸附过程中，上样浓度(A)因素有显著影响。直观分析表明，吸附速度和径高比没有显著性影响，综合分析得到最优工艺参数为：A3B1D2，即上样浓度为0.5g/ml，吸附速度为2BV/H，径高比为1∶8。
②上样量考察
取0.5g/ml的金玄渗漉液，加于20g已处理好的D101树脂柱上端，按上述最佳吸附条件进行吸附，每10mL为1流份接取流出液。经预试验证实，黄酮最先泄露，因此测定总黄酮的含量，以流份号为横坐标，总黄酮的吸光度为纵坐标，绘制泄漏曲线。结果见图2。图中可以看出当上样量为30mL(约为1.5倍树脂量)时，总黄酮开始泄漏，上样量为160mL时(约为8倍树脂量)达到吸附饱和状态。
③水洗条件考察
按上述最佳吸附条件进行上样吸附，上样量为30mL，再用水冲洗，每10mL下柱液为1流份，用molish反应、Liebermann反应检识，同时测定干膏重，水洗60mL后molish反应、Liebermann反应均呈阴性，干膏重量不再变化，结果表明，用60mL水洗(约3倍树脂柱体积)后树脂柱上的糖类可以基本除去。
④乙醇洗脱浓度考察
另取20g树脂共五份上柱，按上述吸附条件和水洗条件进行吸附和去杂，再各用30％，50％，70％，90％的乙醇90mL，以相同的流速进行洗脱，测定，计算总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量及解吸率，结果见表14、15、16。
表14 金玄痔科熏洗散总黄酮乙醇洗脱浓度考察结果
  乙醇浓度(％)   总黄酮解吸量(mg)   解吸率(％)   干膏重(mg)   总黄酮纯度(％)
  30   130.02   40.79   625.1   20.8
  50   285   78.5   785.2   36.3
  70   288.1   80.3   807   35.7
  90   299.6   85   886.4   33.8
表15 金玄痔科熏洗散总皂苷乙醇洗脱浓度考察结果
表16 金玄痔科熏洗散总有机酸乙醇洗脱浓度考察结果
Figure BDA0000049180170000102
以上试验结果表明，当乙醇浓度为50％以上时，总黄酮、总皂苷和总有机酸解吸率和含量都较高，其中90％乙醇洗脱液总黄酮、总皂苷、总有机酸的解吸率最高，而70％的乙醇洗脱液中总皂苷、总有机酸纯度最高。综合分析，考虑到70％乙醇的解吸率和90％乙醇相差不大，而且生产成本也较低，故本试验选70％乙醇为洗脱溶剂。
⑤洗脱速率考察
按上述条件进行动态吸附，以70％乙醇为洗脱剂，分别以1BV·H-1、2BV·H-1、4BV·H-1、6BV·H-1的速度洗脱，测定乙醇洗脱物中总黄酮、总皂苷、总有机酸的量和干膏重并计算解吸率和纯度，结果见表17、18、19。
表17 金玄痔科熏洗散总黄酮乙醇洗脱流速考察结果
Figure BDA0000049180170000112
表18 金玄痔科熏洗散总皂苷乙醇洗脱流速考察结果
Figure BDA0000049180170000113
表19 金玄痔科熏洗散总有机酸乙醇洗脱流速考察结果
Figure BDA0000049180170000114
结果表明：结果表明：1BV/H流速下，洗脱效果较好，纯度和解吸率都较高。综合分析，选择洗脱流速为1BV/H。
⑥乙醇洗脱量考察
按上述条件进行动态吸附，以70％乙醇为洗脱剂，洗脱流速为1BV·H-1，定量收集流出液并测定其中总黄酮、总皂苷和总有机酸的量，绘制洗脱曲线。结果见图3，图4，图5。
结果表明：用100mL(约5倍树脂量)70％乙醇可以完全洗脱20g树脂所吸附的黄酮类成分；用90mL(约4.5倍树脂量)70％乙醇可以完全洗脱20g树脂所吸附的皂苷类成分；用100mL(约5倍树脂量)70％乙醇可以完全洗脱20g树脂所吸附的有机酸类成分。因此采用100mL(5倍树脂量)70％乙醇以1Bv/h的流速可以使20g树脂所吸附的黄酮类、皂苷类及有机酸类成分完全洗脱。
最终优选的纯化工艺条件参数：树脂型号：D101；上样量：药材量与树脂量之比为0.75∶1；上样浓度：由于0.5g/ml的浓度上样，产生沉淀较多，损失较大，故最终选择0.3g/ml的上样浓度。吸附速率：2BV/H；径高比：1∶8；水洗量：3BV；醇洗浓度：70％；醇洗速度：1BV/H；醇洗量：5BV。
实验例3：中试放大试验
称取金玄痔科熏洗散方中三味植物药(按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛)经超临界CO2萃取后的药粉7.5kg，加3倍量50％乙醇浸泡24小时，加12倍药材量的50％乙醇，以每小时2倍药材量的流速渗漉提取，收集渗漉液；浓缩至药液体积为3.3倍药材量(25L)，抽滤得上样药液。
将10Kg药用级D101型大孔树脂用适量乙醇浸泡，湿法装柱，处理后备用。
3.2.1试验参数的调整
中试放大时，上样量和流速都放大了1000倍，必须根据试验结果及时调整试验参数。采用不同的吸附和水洗速率考察其纯化效果，结果见表20。
表20 流速考察表
Figure BDA0000049180170000121
结果表明：流速为每小时1倍柱体积时，总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量及转移率较高。因此，确定上样，水洗流速为：1BV·H-1。
3.2.2 实验方法与结果
取金玄痔科熏洗散方中三味金银花、荆芥、马齿苋适量，按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛，经超临界CO2萃取，得到药粉。取药粉7.5Kg，加适量50％乙醇浸泡24h，加12倍量50％乙醇，以2BV/H的流速渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇至一定体积，抽虑得上样药液。
将10Kg药用级D101型大孔吸附树脂用适量乙醇浸泡，湿法装柱，并用大量95％乙醇冲洗，不时检测流出液，至于水混合不呈白色浑浊为止。然后用大量蒸馏水洗去乙醇，备用。
以1BV/H的加样流速进行吸附，树脂床径高比为1∶8，吸附完毕后用3BV的蒸馏水，以1BV/H的流速洗脱至molish反应呈阴性，然后用5BV树脂体积的70％的乙醇，以1BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；洗脱液浓缩至相对密度为1.03，喷雾干燥(进风空温度170℃，出风口温度90℃，雾化盘转速20000转/分钟)。收集干燥提取物，封口、放冷、称重，置于阴凉处保存。
采用紫外-可见分光光度法测量提取物中总黄酮的含量，计算转移率(转移率＝提取物中总黄酮的含量/原药材中总黄酮的含量×100％)和收膏率(收膏率＝提取物总重量/原药材总重量×100％)。结果见表21。
表21 中试试验结果
Figure BDA0000049180170000131
结果表明：3批提取物中总黄酮、总皂苷和总有机酸的含量之和可达70％以上。表明本试验研究的工艺参数可行，工艺条件经中试进一步调整后，可过渡到产业化生产。

Claims (3)

1.一种金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物的制备方法，其步骤如下：取金玄痔科熏洗散中金银花、荆芥、马齿苋三味植物药按3∶4∶3比例混合、粉碎，过40目筛，经超临界萃取后的药渣，加3倍药材量的50％乙醇浸泡24小时，再加12倍药材量的50％乙醇以每小时2倍药材量的流速渗漉提取，收集渗漉液；将渗漉液浓缩至一定体积，使药液体积为3.3倍药材量，静置抽滤后，得上样药液，备用，滤液以1Bv/h的加样流速通过D101型大孔树脂柱进行吸附，树脂床径高比为1∶8，吸附完毕后，用3倍树脂床体积的蒸馏水以1Bv/h的流速冲洗，然后以5倍树脂柱体积的70％乙醇，以1Bv/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.03，喷雾干燥，收集干燥提取物，封口，放冷，称重，置阴凉处保存，得金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物。
2.一种用权利要求1所述制备方法得到的金玄痔科熏洗散大孔树脂纯化提取物制备药用剂型的方法，其特征在于：所述的提取物制备药用的剂型包括：熏洗剂、片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。
3.根据权利要求2所述的制备药用剂型的方法，其特征在于：所述的提取物在制备成药剂时加入药物可接受的载体，药物接受的载体是：淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、纤维素类及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、聚山梨酯80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、聚乙二醇、环糊精、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁其中的一种。 
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