CN101642492B - 治疗慢性盆腔炎的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制备技术领域，特别是涉及一种治疗慢性盆腔炎的药物及其制备方法，所述药物用量为重量份的处方是：忍冬藤20-30，大血藤20-30，牡丹皮5-10，大黄2-8，延胡索5-10，大青叶5-10，蒲公英5-10，赤芍5-10，川楝子5-10，甘草1-5；其制备方法是将处方中的大黄单独用醇渗漉，牡丹皮水蒸汽蒸馏出丹皮酚，其余几味药物水煎煮，过滤，提取液过大孔吸附树脂富集有效成分，用醇洗脱，合并两部分醇液，回收乙醇，浓缩成浸膏，干燥，混入丹皮酚，再制成成品剂型。本方法制得的成品有效成分含量高，质量稳定，患者服用量大大减少，而且方法安全有效，树脂可重复使用，成本较低。

Description

治疗慢性盆腔炎的药物及其制备方法

技术领域

本发明属于中药及其制备技术领域，特别是涉及一种治疗慢性盆腔炎的药物及其制备方法。

背景技术

慢性盆腔炎是非常常见的妇科疾病之一，女性内生殖器及其周围的结缔组织、盆腔腹膜发生炎症时，称为盆腔炎，盆腔炎分急性和慢性两种，急性盆腔炎是较为严重的妇科疾病，多在产后、手术后、流产后由病菌感染或经期不注意卫生以及邻近器官疾病(阑尾炎等)蔓延所致；慢性盆腔炎多为急性盆腔炎治疗不及时所致。慢性盆腔炎急性发作时，严重可发展为慢性腹膜炎、败血症，甚至中毒性休克。目前由于个人卫生及医疗条件限制、或对妇科小手术的无菌操作重视不够，以及宫内节育器的广泛运用，不洁性交或性随意等原因，致使本病成为较常见的妇科疾患。治疗方法上：急性盆腔炎可以采用抗炎治疗或者手术治疗等方法；慢性盆腔炎虽然也可以用抗炎治疗和组织疗法，但是一般以中药治疗为主。

目前市场上用于治疗妇科炎症的中成药较多，其中“妇乐颗粒”是一只治疗该病较为理想的中成药。“妇乐颗粒”是杭州天目山药业股份有限公司在上世纪八十年代初首创的一只妇科良药，收载于中华人民共和国卫生部药品标准，为国家中药保护品种(现为第二次中药保护)。经临床多年使用疗效明显，获的广大妇科患者好评。由于是传统剂型，生产方法也一直沿用传统的煎煮-喷雾-包装这样的简单处理，在长期使用过程中许多患者在肯定“妇乐颗粒”疗效的同时，也反映“妇乐颗粒”存在某些缺憾。一是口感较差；二是容易受潮、贮藏难度大；三是服用剂量大，妇乐颗粒每次需服用12g(6g/袋*2袋)，一日2次，还需加水冲服，很不方便；针对“妇乐颗粒”所存在的问题，如何采用先进工艺研发新一代治疗慢性盆腔炎的药物的方法，一直是药品生产企业关注的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺设计合理、产品口感好、易保藏、服用剂量小的治疗慢性盆腔炎的药物及其方法。

本发明的目的是采用这样的技术解决方案实现的：所述治疗慢性盆腔炎的药物用量为重量份的原料处方是：

忍冬藤20-30，大血藤20-30，牡丹皮5-10，大黄2-8，延胡索5-10，大青叶5-10，蒲公英5-10，赤芍5-10，川楝子5-10，甘草1-5；

本发明药物的处方优选重量份配比范围是：

忍冬藤22-28，大血藤22-28，牡丹皮6-8，大黄3-7，延胡索6-8，大青叶6-8，蒲公英6-8，赤芍6-8，川楝子6-8，甘草2-4；

本发明药物的处方最佳重量份配比是：

忍冬藤24，大血藤24，牡丹皮8，大黄5，延胡索7，大青叶8，蒲公英7，赤芍7，川楝子7，甘草3；

本发明药物的制备方法是采用以下工艺步骤实现的：

一、将大黄加乙醇渗漉，得到渗漉液和残渣，备用；

二、将牡丹皮用水蒸汽蒸馏，得丹皮酚和残渣，备用；

三、其余八味药物连同步上述步骤中的残渣加水煎煮蒸馏，滤过，得水提取液；

四、将第三步骤中的水提取液通过大孔树脂富集有效成分，先水洗去杂质，再用醇洗脱，收集醇部分

五、将步骤一、四中的醇部分合并，回收乙醇，并浓缩，再加入投料量0.1％-1％的糊精喷雾干燥，得药物中间体细粉；

六、将步骤二中的丹皮酚加入喷雾干燥所得药物中间体细粉中，混匀、制粒、薄膜包衣、包装得成品。

本发明在制备过程中采用新型大孔树脂纯化工艺，对制备过程中煎煮所得的药液进行除杂精制，最大限度提取了该药的有效成分，制得一种有效成分清楚，含量高且比较稳定，质量可控的药物制剂；解决了“妇乐颗粒”存在的缺陷，薄膜包衣解决口感欠佳及易于吸潮问题，经纯化后制备的片剂每片0.3g/片，规格更小，患者携带服用更加方便。

本发明工艺方法的选择

一、大黄渗漉工艺

采用正交法研究渗漉条件对出膏量及大黄酸含量的影响。按原“妇乐颗粒”多年的生产情况，粉末仍定为粗粉，浸渍时间仍为24小时，现对乙醇浓度、乙醇用量及渗漉速度进行考察，因素水平表如表1。

表1大黄渗漉因素水平表

故采用L₉(3⁴)进行分析，结果如表2。

表2大黄渗漉正交结果分析表

(注：投料为大黄1Kg，根据预试验规定：出膏率8％为满分30分，出膏率18％为0分；大黄酸总量2000mg为满分。)

表3方差分析表

从表2和表3可以看出，A、B、C都有显著性差异，主次因素为ABC，且A₂B₃C₁为最佳工艺。从实际情况出发，规定C的范围为C₁～C₂，即60％乙醇10倍量，渗漉速度为2～3ml/min.kg。

二、牡丹皮提取工艺的确定

提取工艺的选择

牡丹皮中主要活性成分为丹皮酚、芍药甙，而丹皮酚易挥发，原工艺中用煎煮法提取率低。为较充分地提取，结合其能随水蒸汽挥发和难溶于水的特点，采用水蒸汽蒸馏法提取可能较为合适。

称取牡丹皮100g，按煎煮法、水蒸汽蒸馏法进行实验，煎液过滤、浓缩、低温烘干，水蒸汽蒸馏法在煎液烘干后混入丹皮酚。结果如表4。

表4牡丹皮提取工艺比较

从上表可以看出两种方法所得干浸膏量相近，而丹皮酚的含量存在显著性差异，水蒸汽蒸馏法中丹皮酚的含量是煎煮法的4.8倍，故采用水蒸汽蒸馏法提取丹皮酚较为合适。另考虑其余成分的作用，药渣仍与其它药物一起煎煮。

三、蒸馏工艺的确定

采用正交法研究蒸馏条件对丹皮酚提取率的影响，影响因素主要有浸泡时间、加水倍数和蒸馏时间，因素水平如表5

表5因素水平表

表6水蒸汽蒸馏正交结果

表7方差分析表

根据表6、表7可以看出，A无显著性差异，B、C有显著性差异，且B₂C₂为最佳工艺，因此确定水蒸汽蒸馏工艺为用20倍水浸泡约0.5h后蒸馏2hr。

四、吸附树脂工艺的选择

按处方比例，称取四份样品，每份100g，按原工艺、常规水煮法、水煮醇沉法、吸附树脂法进行实验，实验结果如表8。

表8四种方法提取发明药物的结果

上表说明用原工艺及常规水煮法、水煮醇沉法的浸膏制成片剂，每次服用量都相当大，只有采用吸附树脂法可大大缩小服用量，每次只需服4片，就可和原剂型相当的生药量一致。本发明采用吸附树脂法将原“妇乐颗粒”改为片剂，使贮存、携带和服用更为方便。

五、水煮条件的确定

采用正交法研究煎煮条件对芍药甙总量的影响。本实验从实际出发，对饮片大小、加小倍数及煎煮时间进行考察，因素水平如表9。

表9因素水平

(注：常规饮片指各味药材均按《浙江省中药炮制规范》炮制，大饮片指各味药材为常规饮片的一倍大以上，小饮片指各味药材为常规饮片的一半以下。)故采用L₉(3⁴)进行分析，结果如表10。

表10实验安排及结果

表11方差分析表

从表10、表11可以看，A、B、C均有显著性差异，且A₂B₂C₂、A₃B₂C₂为最佳工艺，但因饮片太小大生产时易堵塞，故最后选用A₂B₂C₂，即煎煮工艺为：常规饮片，第一次加10倍水，煎2小时，第二次加8倍水，煎1小时。

六、大孔树脂吸附纯化的相关研究

1、大孔树脂吸附工艺路线的选择依据

本项目采用的吸附树脂提取工艺是使传统的中药复方水煎液经大孔吸附树脂柱，所得到的提取物仅为药材量的2～5％；吸潮性大大降低。对处方中十味中药分别用吸附工艺的方法进行研究。

单味中药水煮液、废液、吸附工艺提取样品的制备

方中十味中药，切碎，各称取10g，用200ml水浸半小时，然后加热至95℃，保持1小时，滤过，滤液等分为二份，其中一份在水浴上蒸干，作为“水煮液”样品。另一份煎液通过装有10g大孔吸附树脂的玻璃柱(φ＝2cm)，收集流出液，吸附完毕后，用10ml水洗涤，洗涤液与流出液合并，照上述“水煮液”的方法制备样品，作为“废液”样品。吸附柱用70％乙醇30ml洗脱，用10ml水洗出柱上乙醇溶液，与洗脱液合并，洗脱液在水浴上蒸干，作为“洗脱液”样品。单味中药供试品溶液和对照品溶液的制备

a)忍冬藤取忍冬藤的上述三种样品，分别加甲醇5ml，热溶，滤液浓缩为1ml，作为供试品溶液。

b)大血藤取大血藤的上述三种样品，分别加乙醇15ml，回流20min，滤液浓缩至1ml，作为供试液。

c)甘草取甘草的上述三种样品，分别加乙醇适量，热溶，滤液挥干，甲醇定容为1ml，作为供试品溶液。

d)大青叶取大青叶的上述三种样品，分别加氯仿15ml，回流20min，滤液浓缩至1ml，作为供试液。

e)蒲公英取蒲公英的上述三种样品，分别加乙醇15ml，回流20分钟，滤液加于已处理好的中性氧化铝柱(100～200目，5g，内径10mm)上，用50％甲醇25ml洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇溶解，使成1ml，作为供试品溶液。

f)牡丹皮取牡丹皮的上述三种样品，分别加乙醇超声15分钟，滤液蒸干，残渣加甲醇使成2ml，作为供试品溶液。取芍药甙加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。

g)赤芍供试液的制备同(6)。

h)川楝子取川楝子的上述三种样品，分别加乙醇适量，热溶，滤液挥干，甲醇定容为1ml，作为供试品溶液。川楝素加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。

i)延胡索取延胡索的上述三种样品，分别加80％乙醇40ml回流1hr，滤液蒸干，残渣加水溶解，浓氨试液调至碱性，乙醚萃取3次，合并乙醚液，挥去乙醚，残渣加乙醇溶解，定容为2ml，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

j)大黄取大黄的上述三种样品，分别加水15ml使溶解，再加盐酸3ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提2次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇溶解，使成2ml，作为供试品溶液。取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

通过处方中十味单味中药的薄层图谱分析可知，每一味药在相应的薄层层析条件下，吸附柱洗脱部分与水煮液的图谱是一致的，而废液中几乎没有活性成分的流失，说明本发明药物采用吸附工艺是可行的。

试验过程和结果

a)样品的制备：

按复方比例称取药材(大黄除外)共360g，按工艺水提二次，合并二次滤液，取二分之一水浴浓缩至稠膏状，减压干燥，称重，得复方水提样品，余下二分之一水煎液通过已处理好的新树脂柱，用70％乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，干燥，称重，得复方吸附物样品。重复上述操作再制备两批样品。

b)样品中芍药甙、甘草酸的含量测定：

芍药甙含量测定

一、仪器与试药

1、仪器：SP-8810高效液相色谱仪；SP-100紫外-可见分光光度检测器；SP-4290积分仪。

2、试药：芍药甙对照品(批号0736-200219)、由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯，水为纯化水，乙醇为分析纯。

二、方法与结果

1、色谱条件：色谱柱：sphtri-5分析柱220×4.6mm，流动相∶甲醇-水(30∶70)；检测波长230nm；进样量：10μl；流速1.0mL·L^-1，柱温为室温。

2、对照品贮备溶液的制备：精密称取干燥至恒重的芍药甙对照品16.75mg于10ml容量瓶中，加50％乙醇制成1ml含0.1675mg芍药甙的对照品溶液。

3、供试品溶液的制备：分别精密称取三批水提样品和吸附提取样品适量，置50ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，过滤，精密吸取5ml至25ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。

4、阴性对照溶液配制：按复方比例称取药材(缺赤芍、牡丹皮)，按工艺水提二次，合并二次滤液，水浴浓缩，取适量按供试品溶液制备项操作，即得。

5、线性关系考察：精密吸取对照品贮备溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml置25ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，各取10μl注入液相按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，芍药甙浓度为横坐标绘制标准曲线，数据如下：

浓度C(μg/ml)	6.7	13.4	20.1	26.8	33.5
						峰面积A	76542	179587	301416	403383	519147

回归方程：A＝-36686.8+16552.3C r＝0.9997

表明芍药甙浓度在6.7-33.5μg/ml范围内线性关系良好。

6、精密度试验

取同一芍药甙对照品(20.1μg/ml)，连续进样5次，测得结果如下：

7、空白试验：

取阴性对照溶液，通过色谱分析可知，在230nm处无吸收，证明本方法测定芍药甙无干扰。

8、重现性试验：

取同一份样品(第一次过柱后样品)，按供试品溶液制备方法配制5份样品，按色谱条件操作，测得含量如下表：

9、稳定性试验

取同一份样品，于0，2，5，8，24h分别进样，测得结果如下表

表明供试品溶液在24小时内基本稳定。

10、回收率试验

取已测知含量的样品，精密称定，精密加入芍药甙对照品3.314mg(芍药甙对照品贮备溶液20ml)，依“样品测定”方法下操作，计算回收率，结果见下表。

11、样品的测定：取供试品溶液10μl注入液相按色谱条件测定，结果见下表。

甘草酸含量测定

一、仪器与试药

1、仪器

Agilent11100高效液相色谱系统，25μl注射器，液相色谱系统二维化学工作站，1100可编程紫外检测器(Agilent公司)。

2、试药

甘草酸铵对照品(批号10731-200205，含甘草酸90.8％)由中国药品生物制品检定所提供；乙腈为色谱纯，水为纯化水，乙醇为分析纯。

二、方法与结果

1、色谱条件

色谱柱：Vydac C4(250×4.6mm)；流动相∶乙腈-10mL·L^-1(35∶65)；检测波长250nm；进样量：20μl；流速1.0mL·L^-1，柱温为室温。

2、对照品贮备溶液的制备：

精密称取干燥至恒重的甘草酸铵对照品6.8mg于100ml容量瓶中，加50％乙醇制成1ml含0.068mg甘草酸铵的对照品贮备溶液。

3、供试品溶液的制备

分别精密称取三批水提样品和吸附提取样品适量，置50ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，过滤，精密吸取5ml至25ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。

4、阴性对照溶液配制

按复方比例称取药材(缺甘草)，按工艺水提二次，合并二次滤液，水浴浓缩，取适量按供试品溶液制备项操作，即得。

5、线性关系考察

精密吸取对照品贮备溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml置25ml容量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，各取10μl注入液相按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，甘草酸铵浓度为横坐标绘制标准曲线，数据如下：

回归方程：A＝-7.44600+13.21727C r＝0.9992

表明甘草酸铵浓度在2.72-13.60μg/ml范围内线性关系良好。

6、精密度试验

取同一甘草酸铵对照品(10.88μg/ml)，连续进样5次，测得结果如下：

7、空白试验：

取阴性对照溶液，按上述色谱条件操作，在250nm处无吸收，证明本方法测定甘草酸铵无干扰。

8、重现性试验：

取同一份样品(第二次过柱前样品)，按供试品溶液制备方法配制5份样品，按上述色谱条件操作，测得含量如下表：

9、稳定性试验：

取同一份样品，于0，2，4，6，24h分别进样，测得结果如下表：

表明供试品溶液在24小时内基本稳定。

10、回收率试验

取已测知含量的样品，精密称定，精密加入甘草酸铵对照品1.020mg(甘草酸铵对照品贮备溶液10ml)，依“样品测定”方法下操作，计算回收率，结果见下表。

11、样品的测定：取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，计算甘草酸铵含量，结果见下表。

甘草酸铵对照品含甘草酸90.8％，样品中甘草酸含量见下表：

c)转移率计算

本发明药物水煮液上柱前后延芍药甙、甘草酸的含量测定

由表可知：复方水提液使用树脂上柱前后芍药甙平均转移率为93.30％，甘草酸平均转移率为86.42％，说明吸附工艺能有效地吸附妇乐片复方水提液中的有效成分，而乙醇又能将其有效成分较好地洗脱下来，证明了吸附工艺的可行性和合理性。

含量测定

(1)大黄

照高效液相色谱法：(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以10％甲醇的乙腈溶液∶水∶磷酸(44∶56∶0.2)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按大黄酸峰计算，应不低于3500。

对照品溶液的制备精密称取真空干燥24小时的大黄酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含6ug的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备取本品20片，研细，取约0.4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取3小时(至无色)，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水25ml使溶解，再加1mol/L硫酸溶液5ml，置水浴上加热回流2小时，立即冷却，用乙醚振摇提取6次(20、15、15、15、15、10ml)，合并乙醚提取液，低温蒸干，残渣用甲醇溶解并移至25ml容量瓶内，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得。

本品每片含大黄按大黄酸(C₁₅H₈O₆)计，不得少于0.12mg。

(2)牡丹皮

照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-磷酸(70∶30∶0.2)为流动相，检测波长274nm。理论板数按丹皮酚峰计算，应不低于2500。

对照品溶液的制备  精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备取本品20片，研细，取约0.1g，精密称定，用稀硫酸10ml和水20ml定量转入蒸馏器中，水蒸气蒸馏，收集馏出液约90ml，置已加入5ml乙醇的100ml量瓶中，加水稀释至刻度。使用时摇匀，用0.8μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定，即得。

本品每片含牡丹皮按丹皮酚(C₉H₁₀O₃)计，不得少于5.7mg。

具体实施方式

本发明所述药物按下述重量份配比称取原料：

忍冬藤24，大血藤24，牡丹皮8，大黄5，延胡索7，大青叶8，蒲公英7，赤芍7，川楝子7，甘草3；

制备方法如下

一、取粉碎成粗粉的大黄加60％乙醇10倍量，渗漉，得到渗漉液和残渣，备用；

二、将牡丹皮用水蒸汽蒸馏法提取，得丹皮酚和残渣，备用；

三、其余八味药物原料连同步骤二中的残渣加水煎煮二次，第一次2小时，第二次加入步骤一种大黄渗漉残渣后煎煮1小时，合并煎液，滤过，得水提取液；

四、将第三步骤中的水提取液通过大孔树脂富集有效成分，先水洗去杂质，再用70％乙醇洗脱，回收乙醇；所述大孔树脂采用型号为WLD的吸附树脂，粒度20～60目，比表面(干树脂)＞400m²/g，使用温度在150℃以下，每克干树脂在水中膨胀，自然沉降后，体积为5ml，水煎液经吸附饱和后，用70％乙醇洗脱，蒸干，提取物不得少于160mg；

五、将步骤一、四中的醇部分合并，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.02～1.05(85～90℃)的清膏，再加入投料量0.1％-1％的糊精喷雾干燥成粉；

六、将步骤二中的丹皮酚加入喷雾干燥所得细粉中，混匀、压制成每片0.3g/片±10％的片剂、薄膜包衣、包装得成品。

所述步骤一和步骤四中使用的醇为50％-90％的乙醇。

所得中药提取物可制成各口服制剂，如片剂，胶囊或者颗粒剂。

本品每片含牡丹皮按丹皮酚(C₉H₁₀O₃)计，不得少于5.7mg；每片含大黄按大黄酸(C₁₅H₈O₆)计，不得少于0.12mg。本发明药物服用方法：一次4片，一日2次，或遵医嘱，28天为一个疗程。

Claims (3)

1.治疗慢性盆腔炎的药物的制备方法，其特征在于采用以下工艺步骤实现的：

(一)、将大黄加乙醇渗漉，得到渗漉液和残渣，备用；

(二)、将牡丹皮用水蒸汽蒸馏，得丹皮酚和残渣，备用；

(三)、其余八味药物连同上述步骤中的残渣加水煎煮蒸馏，滤过，得水提取液；

(四)、将第三步骤中的水提取液通过大孔树脂富集有效成分，先水洗杂质，再用醇洗脱，收集醇部分；

(五)、将步骤一、四中的醇部分合并，回收乙醇，并浓缩，再加入投料量0.1％-1％的糊精喷雾干燥，得药物中间体细粉；

(六)、将步骤二中的丹皮酚加入喷雾干燥所得药物中间体细粉中，混匀、制粒、薄膜包衣、包装得药物成品；

所述的大孔树脂采用型号为WLD的吸附树脂，粒度为20～60目，干树脂比表面＞400m²/g，使用温度在150℃以下，每克干树脂在水中膨胀，自然沉降后，体积为5ml，水煎液经吸附饱和后，用70％乙醇洗脱，蒸干，提取物不得小于160mg；

所述治疗慢性盆腔炎的药物用量为重量份的原料处方是：忍冬藤20-30，大血藤20-30，牡丹皮5-10，大黄2-8，延胡索5-10，大青叶5-10，蒲公英5-10，赤芍5-10，川楝子5-10，甘草1-5。

2.根据权利要求1所述治疗慢性盆腔炎药物的制备方法，其特征在于所述步骤(五)中的浓缩是指将回收乙醇浓缩至80～90℃时的相对密度为1.02～1.05的清膏。

3.根据权利要求1所述治疗慢性盆腔炎药物的制备方法，其特征在于所述药物成品为0.3g/片±10％的片剂，每片含牡丹皮按丹皮酚计，不得少于5.7mg；每片含大黄按大黄酸计，不得少于0.12mg。