CN100475228C - 一种杏香兔耳风提取物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种杏香兔耳风提取物及其制备方法，本发明的提取物，是用中药杏香兔耳风作为原料，经过提取加工得到的，其制备方法由以下步骤组成：1、杀酶：选取杏香兔耳风药材，切段，加入沸水中杀酶；2、粗提：由1所得杏香兔耳风药材可采用水煎煮或95%醇加热回流提取，优选水煎煮，加入10～15倍量水，煎煮2次，每次1小时；提取物减压浓缩至生药量的3～8倍，得到杏香兔耳风浓缩液；3、精提：由2所得的浓缩液经离心或过滤，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经苯乙烯型大孔树脂吸附，经水及20～100%浓度的醇洗脱。其中优选80%以上乙醇洗脱；收集洗脱液，减压浓缩，再经自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥，除尽溶剂，即得杏香兔耳风提取物。
Description
技术领域
本发明涉及一种杏香兔耳风提取物及其制备方法，属中药制药领域。
背景技术
杏香兔耳风为一民间常用草药，为菊科植物杏香兔耳风Ainslia eafragrans champ.的干燥全草，具有清热利湿，凉血解毒等功效，用于治疗虚劳咳血、湿热黄疽、水肿、痈疽肿毒等病症。可用于治疗湿热下注之带下病，表现为白带过多，色黄稠粘；慢性宫颈炎见以上证候者。分布于江苏、浙江、江西、福建、台湾、湖南、广东等地。在中国江西省分布广泛、自南至北均有，有时在群落中占有一定优势(成片生长)，资源丰富值得开发利用。杏香兔耳风化学成分的研究始于二十世纪八十年代，有关报道较少。到目前为止，文献报道的化合物包括倍半萜内酯类，三萜类，有机酸类等，杏香兔耳风制剂包括杏香兔耳风片、复方杏香兔耳风颗粒等，均是杏香兔耳风经过简单提取后的制剂，其不足之处在于日服剂量大、有效成分含量低、价格偏高。为减小服用剂量，本发明采用新方法对杏香兔耳风进行提取，得到更加纯的提取物，提高了有效成分含量，减小了服用剂量，提高了疗效。
发明内容
本发明的目的是针对现有杏香兔耳风制剂日服剂量大、有效成分含量的不足，采用新的方法对杏香兔耳风进行提取，并对提取物进行纯化，如使用大孔树脂吸附法等技术对提取物进行了纯化，得到有效成分含量更高的提取物。
本发明的提取物，是用中药杏香兔耳风作为原料，经过提取加工得到的，其制备方法由以下步骤组成：
1、杀酶：选取杏香兔耳风药材，切段，加入沸水中杀酶；
2、粗提：由1所得杏香兔耳风药材可采用水煎煮或95％醇加热回流提取，优选水煎煮，加入10～15倍量水，煎煮2次，每次1小时；提取物减压浓缩至生药量的3～8倍，得到杏香兔耳风浓缩液；
3、精提：由2所得的浓缩液经离心或过滤，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经苯乙烯型大孔树脂吸附，经水及20～100％浓度的醇洗脱。其中优选80％以上乙醇洗脱；收集洗脱液，减压浓缩，再经自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥，除尽溶剂，即得杏香兔耳风提取物。
本发明的杏香兔耳风提取物，其特征在于其中含有黄酮和内酯类化合物。
本发明的杏香兔耳风提取物，其特征在于其中含有1～60％的总黄酮。
本发明的杏香兔耳风提取物可作为药物原料用于制备药物，如制备药物组合物，因此本发明还包括药物组合物，该组合物是以常见的单位剂量的药物制剂形式存在的，如果需要，组合物中可以假如制剂学常见的辅料和赋型剂，本发明的组合物可以按常规工艺制成符合制剂要求的口服药物剂型，如片剂、胶囊、颗粒剂、口服液，也可制成注射剂，优选的为口服药物剂型。
本发明的杏香兔耳风提取物经过药理筛选、制备工艺筛选和优化等工作基础上完成的，以下是本发明的研究工作内容。
一、杏香兔耳风提取方法的选择
采用醇提、水提醇沉法、大孔吸附树脂法三种方法得到了三种不同工艺的提取物T1、T2、T3。并采用角叉菜胶致大鼠足肿胀试验模型对其进行药理活性筛选。
T1：醇提，1g提取物相当于生药20g；
T2：水提醇沉，1g提取物相当于生药3.8g；
T3：水提过大孔树脂，1g提取物相当于生药33.3g；
实验结果见表1。
实验结果，阳性对照药物阿斯匹林在所试剂量下表现了明显的抗炎活性，药后1～5小时与对照组比较差异有高度显著性(P＜0.01)，作用高峰时间在药后2～3小时。
采用角叉菜胶致大鼠足肿胀试验模型，两批次试验，所试临床等效剂量的不同工艺提取兔耳风成分给药后均表现了不同程度的抗炎活性，其中T3在药后1～3小时与对照组比较差异有显著性和高度显著(P＜0.01或0.05)，T2和T1分别在药后2～3小时和药后3小时与对照组比较差异有显著性或高度显著性差异。
试验结果，兔耳风T3成分试验所用剂量较低，抗炎作用较强且稳定。故选用大孔吸附树脂法。
二、兔耳风提取工艺研究
根据兔耳风提取物的性质，找出对提取工艺有影响的几个因素，设计正交试验，对提取工艺进行筛选。
1.实验材料、仪器、试剂
兔耳风(汇仁制药提供)粉碎；大孔吸附树脂(AB-8型、天津南开大学化工厂生产)，HP8453型紫外分光光度计，所用试剂均为AR级。
2.优选工艺过程：
2.1工艺的正交设计
根据兔耳风提取物的性质，选定考察三个因素(A、B、C)以及每个因素的3个水平(表2)。
表2因素水平表
2.2实验过程：
各取兔耳风粗粉100g，分别按正交表加水煮提，过滤，药渣再加水煮提，过滤。合并滤液，过大孔吸附树脂柱，吸附后水洗至流出水液无色，树脂再用95％乙醇洗脱，回收乙醇、干燥、称重，紫外分光光度法在330nm处测定吸收度，计算总黄酮含量。(表3)
表3试验设计表
A1＝1.0691 B1＝1.3774 C1＝0.882
A2＝1.2299 B2＝1.2621 C2＝1.3475
A3＝1.4095 B3＝1.0689 C4＝1.4789
RA＝0.3040 RB＝0.3085 RC＝0.5969
2.3结果与分析
从试验结果分析，影响顺序为C＞B＞A，经综合考虑得出最佳工艺条件：A3B1C2。即加水量为12倍，提取时间为1小时，提取2次。
本发明的突出特点在于，本发明的提取物是经过现代科学方法加以提取、浓缩，精制而成，提高了有效成分含量，提高了疗效，减小了服用剂量和副作用，且工艺简单易行、安全无试剂污染。
具体实施方式
下面以具体实施例对本发明作详细说明。本发明所述的杏香兔耳风提取物，以及提取物的药理活性是按如下实施例所表示的方法制造或发现的，所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本发明权力要求的限制。
实施例1：
选取杏香兔耳风药材500g，切段，投入1000ml沸水中杀酶，随时将茎叶压入沸水中，待再沸后计时10min；加入12倍量水，煎煮两次，每次1小时，合并滤液；浓缩至原生药量的6倍，即3L，离心5000r，取上清液，上已预处理好的聚苯乙烯型树脂柱，用6倍量去离子水洗树脂柱至近无色，流速2BV/h，用30％浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，置水浴上蒸干，然后置真空干燥箱中干燥，称重，得杏香兔耳风提取物6.9g，其中总黄酮含量12％。
实施例2：
选取杏香兔耳风药材500g，切段，投入1000ml沸水中杀酶，随时将茎叶压入沸水中，待再沸后计时10min；加入12倍量水，煎煮两次，每次1小时，合并滤液。浓缩至原生药量的6倍，即3L，离心5000r，取上清液，上已预处理好的聚苯乙烯型树脂柱，用6倍量去离子水洗树脂柱至近无色，流速2BV/h，随后用85％以上乙醇解吸，流速1BV/h，乙醇用量约6倍生药量，减压回收乙醇、干燥、温度不高于80℃，得杏香兔耳风提取物14.7g，其中黄酮含量20％。
实施例3：
选取杏香兔耳风药材10kg，切段，投入20000ml沸水中杀酶，随时将茎叶压入沸水中，待再沸后计时10min；加入12倍量水，煎煮两次，每次1小时，合并滤液。浓缩至原生药量的6倍，即60L，离心5000r，取上清液，上已预处理好的树脂柱，用6倍量去离子水洗树脂柱至近无色，流速2BV/h，随后用85％以上乙醇解吸，流速1BV/h，乙醇用量约6倍生药量，减压回收乙醇、干燥、温度不高于80℃，得杏香兔耳风提取物300g，其中黄酮含量25％。
实施例4：杏香兔耳风片
处方：杏香兔耳风提取物80g、糊精15g、蔗糖5g、硬脂酸镁0.5g。
制法：取实施例1中所得的杏香兔耳风提取物80g，加糊精、蔗糖，混匀，制粒，80℃以下干燥，加入硬脂酸镁，混合均匀，压片，包薄膜衣，共制为200片。
实施例5：杏香兔耳风胶囊
处方：杏香提取物80g
制法：取由实施例1制备的杏香兔耳风提取物80g，装胶囊200粒。
Claims (8)
1、一种杏香兔耳风提取物，其特征在于，该提取物用以下方法制备而成：
(1)杀酶：选取杏香兔耳风药材，切段，加入沸水中杀酶；
(2)粗提：由(1)所得杏香兔耳风药材采用水煎煮提取，提取物减压浓缩至生药量的3～8倍，得到杏香兔耳风浓缩液；
(3)精提：由(2)所得的浓缩液经离心或过滤，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经苯乙烯型大孔树脂吸附，经去离子水洗近无色，再用30％或85％以上乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，再经自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥，除尽溶剂，即得杏香兔耳风提取物。
2、根据权利要求1所述的杏香兔耳风提取物，其特征在于其中含有黄酮和内酯类化合物。
3、根据权利要求2所述的杏香兔耳风提取物，其特征在于其中含有1～60％的总黄酮。
4、含有权利要求1的杏香兔耳风提取物的药物组合物，所述组合物具有抗炎作用。
5、权利要求4的药物组合物，为口服的单位剂量的药物制剂形式。
6、权利要求4的药物组合物，还含有适宜的制成药物制剂所需要的辅料。
7、权利要求5的药物组合物，是片剂、胶囊、颗粒剂或口服液。
8、权利要求1的杏香兔耳风提取物的制备方法，其特征在于由以下步骤组成：
(1)杀酶：选取杏香兔耳风药材，切段，加入沸水中杀酶；
(2)粗提：由(1)所得杏香兔耳风药材加入10～15倍量水，煎煮2次，每次1小时；提取物减压浓缩至生药量的3～8倍，得到杏香兔耳风浓缩液；
(3)精提：由(2)所得的浓缩液经离心或过滤，所得上清液或滤液经苯乙烯型大孔树脂吸附，经去离子水洗近无色，再用85％以上乙醇洗脱；收集洗脱液，减压浓缩，再经自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥，除尽溶剂，即得杏香兔耳风提取物。
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