CN108014157A - 杏香兔耳风提取物在抗菌消炎药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供提供一种杏香兔耳风提取物用于治疗消炎和抗菌药物中的应用，杏香兔耳风提取物中的主要活性成分至少包括熊果酸0.2～0.5％，芹菜素0.1～0.6％，绿原酸0.1～0.3％，柽柳素0.1～0.8％，槲皮素0.25～0.50％(质量百分比)之间。本发明所获得提取物不仅对微生物生长有抑制作用，并且在体内具有较强的抗氧化等作用，并且杏香兔耳风资源丰富价格低廉，本发明制备方法简单制备成本低，符合工业化生产要求，有开发作为药品或者保健品的实际意义和应用价值。

Description

杏香兔耳风提取物在抗菌消炎药物中的应用

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及杏香兔耳风提取物的制备方法及其在治疗消炎和抗菌药物中的应用。

背景技术

杏香兔耳风为菊科兔耳风属植物，以全草入药。夏秋采收，洗净，鲜用或晒干备用。多年生草本。根状茎短或伸长，有时可离地面近2厘米，圆柱形，直或弯曲，直径1-3毫米，根颈被褐色绒毛，具簇生细长须根。茎直立，单一，不分枝，花葶状，高25-60厘米，被褐色长柔毛。叶聚生于茎的基部，莲座状或呈假轮生，叶片厚纸质，卵形、狭卵形或卵状长圆形，长2-11厘米，宽1.5-5厘米，顶端钝或中脉延伸具一小的凸尖头，基部深心形，边全缘或具疏离的胼胝体状小齿，有向上弯拱的缘毛，上面绿色，无毛或被疏毛，下面淡绿色或有时多少带紫红色，被较密的长柔毛，脉上尤甚；基出脉5条，在下面明显增粗并凸起，中脉中上部复具1-2对侧脉，网脉略明显，网眼大；叶柄长1.5-6厘米，稀更长，无翅，密被长柔毛。

头状花序通常有小花3朵，具被短柔毛的短梗或无梗，干花葶之顶排成间断的总状花序，花序轴被深褐色的短柔毛，并有3-4毫米长的钻形苞叶；总苞圆筒形，直径3-3.5毫米；总苞片约5层，背部有纵纹，无毛，有时顶端带紫红色，外1-2层卵形，长1.8-2毫米，宽约1毫米，顶端尖，中层近椭圆形，长3-8毫米，宽1.5-2毫米，顶端钝，最内层狭椭圆形，长约11毫米，宽约2毫米，顶端渐尖，基部长渐狭，具爪，边缘干膜质；花托狭，不平，直径约0.5毫米，无毛。花全部两性，白色，开放时具杏仁香气，花冠管纤细，长约6毫米，冠檐显著扩大，于管口上方5深裂，裂片线形，与花冠管近等长；花药长约4.5毫米，顶端钝，基部箭形的尾部长约2毫米；花柱分枝伸出药筒之外，长约0.5毫米，顶端钝头。瘦果棒状圆柱形或近纺锤形，栗褐色，略压扁，长约4毫米，被8条显著的纵棱，被较密的长柔毛。冠毛多数，淡褐色，羽毛状，长约7毫米，基部联合。花期11-12月。

杏香兔耳风全草主要用于清热解毒，消积散结，止咳，止血。用于上呼吸道感染，肺脓疡，肺结核咯血，黄疸，小儿疳积，消化不良，乳腺炎；外用治中耳炎，毒蛇咬伤；虚劳骨蒸，肺痨咳血，妇女崩漏，湿热黄疸，水肿，痈疽肿毒，瘰疬结核，跌打损伤。

公开号为CN102106888A的中国专利公开了一种中药杏香兔耳风提取过程质量控制方法，包括如下步骤：步骤1、测定合格杏香兔耳风提取液中绿原酸含量，并采集近红外光谱；步骤2、采用化学计量学软件分别建立杏香兔耳风提取液近红外光谱与绿原酸含量之间的对应模型；步骤3、测定待测的绿原酸含量样品的近红外光谱；步骤4、利用对应模型，通过化学计量学软件分别获得待测的绿原酸含量样品中绿原酸含量的含量。

公开号为CN1709417的中国专利公开了一种杏香兔耳风提取物及其制备方法，是用中药杏香兔耳风作为原料，经过提取加工得到的，其制备方法由以下步骤组成：1.杀酶：选取杏香兔耳风药材，切段，加入沸水中杀酶；2.粗提：由1所得杏香兔耳风药材可采用水煎煮或95％醇加热回流提取，优选水煎煮，加入10～15倍量水，煎煮2次，每次1小时；提取物减压浓缩至生药量的3～8倍，得到杏香兔耳风浓缩液；3.精提：由2所得的浓缩液经离心或过滤，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经苯乙烯型大孔树脂吸附，经水及20～100％浓度的醇洗脱。其中优选80％以上乙醇洗脱；收集洗脱液，减压浓缩，再经自然蒸发、减压浓缩、真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥，除尽溶剂，即得杏香兔耳风提取物。

公开号为CN101732382A的中国专利公开了一种杏香兔耳风提取物的新用途。该新用途为杏香兔耳风提取物在制备治疗咽喉炎的药物中的用途，所述杏香兔耳风提取物是将杏香兔耳风加水煎煮后，煎液醇沉、过滤所得的滤液，该提取物对急、慢性咽喉炎有明确的治疗作用。

公开号为CN101664427的中国专利公开了一种含杏香兔耳风提取物中药制剂的制备方法，由按重量份数计的杏香兔耳风提取物、微粉硅胶和水组成。其制备方法：将上述杏香兔耳风提取物粉碎成细粉，过筛，备用；将微粉硅胶粉碎成细粉，过筛，加水与上述提取物细粉混合，制成颗粒，直接压片，包衣，即得。通过本发明制备得到的药物，服用量大大减少，提高了患者的依从性，有利于其临床应用。

公开号为CN101380347的中国专利公开了一种杏香兔耳风总黄酮提取物及其提取方法和用途：采用杏香兔耳风为原料，以不同pH值的弱碱性溶液配制的乙醇为提取溶剂，采用回流提取，后经过石油醚萃取除杂，最后经大孔树脂分离和富集，得到总黄酮类成分纯度在50-95％之间。本发明工艺简单、操作方便安全、可重复性好，可用于工业化生产。本发明还提供了总黄酮类成分或总黄酮与药学上可接受的载体制成的制剂在制备治疗急慢性官颈炎药物中的应用。

公开号为CN101293003的中国专利公开了一种杏香兔耳风有效部位及其制备方法和应用，采用10％～80％乙醇进行渗漉或加热回流提取；用乙酸乙酯萃取或大孔吸附树脂进行纯化精制。该法采用水、酒精、乙酸乙酯等一般常用溶媒，具有操作简单、流程短、成本低、有效成分含量高等优点。该杏香兔耳风有效部位主要含绿原酸、3，5-二咖啡酰基奎宁酸等酚酸类成分，具有抑菌、抗炎作用，对乙肝病毒、艾滋病毒、人乳头瘤病毒等均具有明显抑制作用，对心血管疾病也有一定的疗效，可单独或与其它药物配合开发抗炎、抗乙肝病毒、抗艾滋病毒、抗人乳头瘤病毒、治疗心血管疾病等新型药物。

一直作为民间传统中草药，常用作清热解毒治感冒等用途，已有研究表明杏香兔耳风提取物含有大量强抗氧化活性物质，主要为黄酮类、有机酸类、鞣质及多酚类等有效成分，具有明显的抗衰老、抗肿瘤、抗HIV、抗炎等功效，并且研究表明杏香兔耳风中的多种功能都与其抗氧化作用有关。

发明内容

本发明的目的在于提供杏香兔耳风提取物的用途，具体是该提取颗粒在治疗消炎和抗菌药物中的应用，运用现代药理学模型证明其不仅对有害病菌具有显著抑制作用，并且在患者体内提高对有害病菌的免疫能力等作用。

本发明的目地是提供一种杏香兔耳风提取物用于治疗消炎和抗菌药物中的应用，杏香兔耳风提取物中的主要活性成分至少包括熊果酸0.2～0.5％，芹菜素0.1～0.6％，绿原酸0.1～0.3％，柽柳素0.1～0.8％，槲皮素0.25～0.50％(质量百分比)之间。

本发明所述杏香兔耳风提取物，包括以下杏香兔耳风粗提取物，杏香兔耳风萃取物和杏香兔耳风大孔树脂制备物三种提取物。

上述所述杏香兔耳风粗提取物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，总多酚含量在25～30％(质量百分比)之间。

上述所述杏香兔耳风萃取物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，总多酚含量在30～40％(质量百分比)之间。

上述所述杏香兔耳风大孔树脂制备物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，杏香兔耳风萃取物溶解后上已处理好的Diaion HP-20大孔树脂柱，柱子的径高比为1:5～8，上样量与树脂质量比为1:3～10，流速为3～6BV/h，依次用水和10％，20％，30％乙醇洗脱，每种溶剂冲洗2～8倍柱体积，收集30％乙醇浓度的洗脱液，经60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风大孔树脂制备物,总多酚含量在质量百分比为40～50％之间，其中BV是指倍柱体积。

所述制备方法中加入提取溶剂提取时，第一次提取时，杏香兔耳风重量kg与提取溶剂L比为1：3～5；第二次提取时，杏香兔耳风重量kg与提取溶剂L比为1：1～3。

所述喷雾干燥参数为进风温度：160～200℃，进料速度：80～100mL/min，雾化器频率：25～30Hz。

所述大孔树脂可以为离子交换大孔树脂、非极性大孔树脂、中极性大孔树脂或弱极性大孔树脂。

所述杏香兔耳风提取物可以进一步制各成的剂型包括胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、合剂、糖浆剂、凝胶剂、缓释制剂。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂等，填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等，崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羟甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等，润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等，助悬剂包括:聚乙烯砒咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等，粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等，甜味剂包括:糖精钠、阿斯巴甜、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矫味剂包括:甜味剂及各种香精，防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类。

使用本发明的制备方法可获得多酚含量在25～50％之间的杏香兔耳风提取物，其中主要活性成分占约9～17％，经实验证明所述提取物不仅对微生物生长有抑制作用，并且在体内具有较强的抗氧化等作用，并且杏香兔耳风资源丰富价格低廉，本发明制备方法简单制备成本低，符合工业化生产要求，有开发作为药品或者保健品的实际意义和应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作出进一步详细地说明，但并不因此限制本发明。

实施例1

新鲜采集杏香兔耳风100Kg，避光阴干，粉碎至60目，100Kg杏香兔耳风加入60％乙醇水溶液，在40℃下提取3.5小时，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，再次加入60％乙醇水溶液，再在40℃下提取1.5小时，再次离心过滤，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，喷雾干燥，除去溶剂后为杏香兔耳风粗提取物，总多酚含量为26.54％，可用于制备抗菌消炎类药物。

实施例2

取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，100Kg杏香兔耳风放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，总多酚含量在33.89％，可用于制备抗菌消炎类药物。

实施例3

取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，100Kg杏香兔耳风放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，杏香兔耳风萃取物溶解后上已处理好的Diaion HP-20大孔树脂柱，柱子的径高比为1:5～8，上样量与树脂质量比为1:3～10，流速为3～6BV/h，依次用水和10％，20％，30％乙醇洗脱，每种溶剂冲洗2～8倍柱体积，收集30％乙醇浓度的洗脱液，经60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风大孔树脂制备物,总多酚含量为44.17％，可用于制备抗菌消炎类药物。

表1 不同杏香兔耳风提取物对金黄色葡萄球菌生长的抑制率(n＝3)

Claims (6)

1.一种杏香兔耳风提取物用于治疗消炎和抗菌药物中的应用，杏香兔耳风提取物中的主要活性成分至少包括熊果酸0.2～0.5％，芹菜素0.1～0.6％，绿原酸0.1～0.3％，柽柳素0.1～0.8％，槲皮素0.25～0.50％之间，其中％是指质量百分比。

2.根据权利要求1所述杏香兔耳风提取物的制备方法，包括以下杏香兔耳风粗提取物，杏香兔耳风萃取物和杏香兔耳风大孔树脂制备物三种提取物：

所述杏香兔耳风粗提取物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，总多酚含量在质量百分比为25～30％之间；

所述杏香兔耳风萃取物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，总多酚含量在质量百分比为30～40％之间；

所述杏香兔耳风大孔树脂制备物的制备方法，其具体步骤包括：取杏香兔耳风避光阴干，粉碎至40-80目，放入常规提取罐中，加入40～80％乙醇水溶液，在45～55℃常压提取1～24h，重复提取1～3次，然后用板框过滤1次再经0.22μm陶瓷膜过滤1次，重复提取一次，合并滤液后于真空浓缩装置，于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至乙醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风粗提取物，把杏香兔耳风粗提取物用正丁醇或氯仿或乙酸乙酯或乙醇或甲醇进行超声波萃取1～3小时，重复萃取1～3次后，萃取液置于60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风萃取物，杏香兔耳风萃取物溶解后上已处理好的Diaion HP-20大孔树脂柱，柱子的径高比为1:5～8，上样量与树脂质量比为1:3～10，流速为3～6BV/h，依次用水和10％，20％，30％乙醇洗脱，每种溶剂冲洗2～8倍柱体积，收集30％乙醇浓度的洗脱液，经60～80℃、300±100pa真空度下减压浓缩至正丁醇完全去除，将剩余滤液经喷雾干燥即得杏香兔耳风大孔树脂制备物,总多酚含量在质量百分比为40～50％之间，其中BV是指倍柱体积。

3.根据权利要求2的方法，其中所述制备方法中加入提取溶剂提取时，第一次提取时，杏香兔耳风重量kg与提取溶剂L比为1：3～5；第二次提取时，杏香兔耳风重量kg与提取溶剂L比为1：1～3。

4.根据权利要求2的方法，其中所述喷雾干燥参数为进风温度：160～200℃，进料速度：80～100mL/min，雾化器频率：25～30Hz。

5.根据权利要求2的方法，其中所述大孔树脂可以为离子交换大孔树脂、非极性大孔树脂、中极性大孔树脂或弱极性大孔树脂。

6.根据权利要求2的方法，其中所述杏香兔耳风提取物可以进一步制各成的剂型包括胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、合剂、糖浆剂、凝胶剂、缓释制剂。