CN103412059B - 一种妇炎康分散片质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药质量控制领域，公开了一种妇炎康分散片质量控制方法，该方法包括药物的鉴别、检查以及含量测定、指纹图谱检测等步骤。本发明通过薄层色谱法，实现了对赤芍、当归、延胡索、苦参、黄柏、丹参的薄层鉴别；采用高效液相色谱法对丹参和苦参含量的准确测定；采用指纹图谱测定以全面控制产品质量。本发明方法操作简便，线性、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好，能够有效的控制产品的质量，保证产品疗效。

Description

一种妇炎康分散片质量控制方法

技术领域

本发明属于中药质量控制领域，具体涉及一种妇炎康分散片质量控制方法。

背景技术

妇科炎症是指妇女生殖系统感染所引起的疾病，为成年女性的常见、多发病，其临床表现也多种多样，病因复杂且常伴有多种严重并发症，对女性的生活和工作有很大影响。世界卫生组织对中国妇女的调查表明：我国育龄女性人口数字约为1.5-2亿，其中约41％的女性患有不同程度的妇科炎性疾病，已婚女性发病率更高达70％。

随着社会经济文化的发展、医疗普及范围的提高以及女性自我保健意识的增强，妇科炎症患者除推介给药外，自我药疗的比例越来越高，其市场规模也随之增大。此治疗领域里，口服中成药凭借其用药副作用小、疗效确切、可长期用药等特点，赢得了众多消费者的青睐，市场领域地位稳定。

根据广州标点医药信息有限公司药品零售市场监测系统五大城市妇科炎症口服中成药零售市场数据显示：妇科炎症口服中成药市场总体仍是渐趋渐好。但妇科炎症在用药上存在一定的地域差异，在南方，湿热的气候及个人卫生环境恶劣，往往容易致使细菌、真菌等微生物滋长，妇科炎症在此种环境下极易发生，因此，季节以及生活习性都会对当地妇科炎症用药的销售产生一定的影响。以我国南方城市广州和北方城市沈阳为例。广州常年气温高、天气闷热，使得身体容易出汗和产生其它分泌物，因此，促成了南方人“好清洁”的习惯。而地处北方的沈阳，气候相对寒冷，以至于使其生活习性有异于南方。广州市场受季节因素影响，冬季妇科炎症口服中成药的使用较夏季有明显的下降，而沈阳由于冬季气候寒冷而不利于频繁地个人清洁，因此，冬季的药品销售非但没有下降，反而比夏季还略有上升。此外，片剂胶囊剂占比绝对胜出，且妇科炎症口服中成药中服用方便，疗效确切，起效迅速的分散片剂最受患者喜欢。

妇炎康分散片由赤芍、醋炙三棱、黄柏等13味中药组成，具有清热解毒、活血化瘀功效，用于湿热下注，毒瘀互阻所致带下病。症见带下量多、色黄、气臭，少腹痛、腰骶痛，口苦咽干；阴道炎、慢性腹腔炎、慢性盆腔炎见上述证候者。方中赤芍清热凉血，散瘀止痛，是为君药；当归活血止痛；醋炙延胡索活血散瘀、行气止痛；土茯苓、黄柏清热利湿，解毒疗疮，临床多用于治疗疮痛肿毒等症；醋炙三棱、醋炙莪术同为逐瘀破血之品，二者相需为用，破血逐瘀之力颇雄，又能行气散结，其效甚彰；炒川楝子行气止痛力强，且可除湿清热，增强其散结止痛的作用，苦参具有除湿清热之功，可杀虫利尿，治疗赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒等。全方组方精当，药性平和，寒温相宜，祛瘀不耗血，攻坚不伤正，为清热解毒，活血化瘀，软坚化结，消炎止痛有效之良方。分散片是一种遇水可迅速崩解形成均匀混悬液的片剂，服用方法多样，有“固体口服液”之美誉，因此备受关注。本发明就妇炎康分散片首次制定了详细的质量控制方法，具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种妇炎康分散片质量控制方法，所制定的质量检测方法能全面有效的控制该制剂的质量，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，保证用药的安全性。

本发明的实现通过下述方案而成：

土茯苓205g、苦参126g、黄柏130g、莪术128g、三棱135g、丹参215g、赤芍120g、川楝子125g、延胡索135g、香附88g、当归216g、芡实200g、山药250g、β-环糊精60g、交联聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉、低取代羟丙纤维素和微粉硅胶适量按照下述方法制备：取当归、三棱和莪术加10倍量水，蒸馏提取挥发油5小时，将上述挥发油用β-环糊精75g制成包合物(包合温度16℃，时间1.5小时)，备用；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与赤芍、土茯苓、川楝子、延胡索、芡实、苦参、黄柏、香附、山药加12倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，减压浓缩至相对密度为1.01～1.18(55℃)的清膏，冷却至40℃，加95％乙醇使含醇量达到58％，搅拌，静置20小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.22～1.26(60℃)的清膏，真空干燥，粉碎，备用；丹参加10量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.01～1.18(60℃)的清膏，药渣再以75％乙醇提取2小时，滤过，滤液冷却至室温后加入至上述清膏中，搅拌，静置18小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.22～1.26(60℃)的清膏，减压干燥，粉碎，备用；在上述干膏粉及包合物中加入0.5份滑石粉及0.5份交联聚乙烯吡咯烷酮，混匀，粉碎，过筛，制成颗粒，干燥，备用；另取0.1份低取代羟丙纤维素与0.1份微粉硅胶混匀，粉碎，过筛，与上述颗粒混匀，压制成1000片，其特征在于：所述质量控制方法包括性状、检查、鉴别、含量测定和指纹图谱测定项目；其中的鉴别是以芍药苷对照品、当归对照药材、延胡索对照药材、苦参碱对照品、黄柏对照药材和盐酸小檗碱对照品、丹参对照药材、原儿茶醛对照品和隐丹参酮对照品为对照的薄层鉴别；含量是以原儿茶醛对照品和苦参碱对照品为对照的含量测定方法；指纹图谱是以苦参碱对照品建立标准指纹图谱的测定方法；

所述的一种妇炎康分散片质量控制方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量控制方法中的鉴别方法包括以下中的一种或几种：

(1)、妇炎康分散片质量控制方法中赤芍的薄层色谱鉴别方法：

取本品5片，研细，加正丁醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液置水浴上浓缩至1ml，加适量中性氧化铝在水浴上均匀干燥，装入预先装填好的中性氧化铝小柱，以醋酸乙酯∶甲醇＝1∶1的溶液50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-乙酸(40∶2.5∶10∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)、妇炎康分散片质量控制方法中当归的薄层色谱鉴别方法：

取本品5片，研细，加石油醚100ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-乙酸(7∶3∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)、妇炎康分散片质量控制方法中延胡索的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，加氨试液调节pH9.5，再加甲苯30ml，回流2小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-甲醇-氨水(6∶2.5∶0.5∶0.3)的下层液为展开剂，用氢氧化铵饱和0.5小时后，展开，取出，晾干，碘薰后于紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)、妇炎康分散片质量控制方法中苦参的薄层色谱鉴别方法：

供试品溶液：制备方法同鉴别(3)下供试品溶液；另取苦参碱对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水(6∶0.4∶0.2)10℃以下放置24h后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(5)、妇炎康分散片质量控制方法中苦参的高效液相色谱鉴别方法：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与苦参碱对照品的主峰保留时间一致；

(6)、妇炎康分散片质量控制方法中黄柏的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，加乙醇50ml，回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加1％盐酸20ml溶解，用氨试液调pH8.5，以氯仿提取2次，合并氯仿液，蒸干，残渣加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-氨水(10∶3∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上；显相同颜色的荧光斑点；

(7)、妇炎康分散片质量控制方法中丹参的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，置索氏提取器中，加乙醚150ml，回流4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加0.2％的盐酸溶液200ml，回流提取4小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷萃取4次，每次60ml，弃去三氯甲烷层，水层加30g氯化钠振摇使溶解后，加水饱和的乙酸乙酯萃取4次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，加硅藻土3g，回流0.5小时后，过滤，除去硅藻土，续滤液蒸干，残渣加1ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取原儿茶醛、隐丹参酮对照品制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶3∶0.1)的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(8)、妇炎康分散片质量控制方法中丹参的高效液相色谱鉴别方法：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与儿茶醛对照品的主峰保留时间一致。

所述的一种妇炎康分散片质量控制方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量控制方法中的性状为：

本品为黄褐色的片；气微，味微苦；

检查为：

分散均匀性：取本品2片，照片剂项下分散均匀性(中国药典2010年版二部附录IA)检查，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；

溶出度：取本品，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录XC第二法)，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作；经15分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品适量，精密称定，以水溶解并定量稀释制成每1ml约含2.5μg的溶液，作为对照品溶液；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(PhenomenexLuna3μmC18(2)，50mm×2.0mmMercuryMS)；甲醇-水-冰乙酸(52.5∶47∶0.5)为流动相；检测波长为280nm；流速：1.0ml/min，柱温：室温；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1500；精密吸取上述两种溶液各100μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算每片的溶出量；限度为含量测定结果的80％，应符合规定。

其他：应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2010年版一部附录ID)。

所述的一种妇炎康分散片质量控制方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量控制方法中的含量测定方法包括以下：

(1)、妇炎康分散片质量控制方法中丹参的含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰乙酸(5∶94∶1)为流动相；检测波长为280nm；流速：1.0ml/min；室温：柱温；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1500；

对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品约12.5mg，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液至刻度，摇匀，即得(每1ml中含原儿茶醛约2.5μg)；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约0.6g，精密称定，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液适量使溶解，超声处理20分钟(功率250W，频率33kHz)，放冷，加1％醋酸溶液定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定；

本品每片含丹参以原儿茶醛(C₇H₆O₃)计，不得少于0.20mg；

(2)、妇炎康分散片质量控制方法中苦参的含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-乙醇-0.05％磷酸-N，N二甲基甲酰胺(62∶17.5∶0.5∶20)为流动相；检测波长为208nm；流速：1.0ml/min；室温：柱温；理论板数按苦参碱峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：取苦参碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠2ml使湿润，再加乙醇25ml，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，滤过，取滤液，再用乙醇洗涤残渣、容器及滤器4次，每次5ml，滤过，合并滤液，加在中性氧化铝柱(内径2.0cm，200～400目，装高2cm，流速2～5滴/秒)上，收集过柱乙醇液，再用50ml三氯甲烷-乙醇(7∶3)洗脱，收集洗脱液，与乙醇液合并，置水浴上蒸干，残渣用流动相溶解并转移至50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每片含苦参以苦参碱(C₁₅H₂₄N₂O)计，不得少于0.40mg。

所述的一种妇炎康分散片质量控制方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量控制方法中的指纹图谱采用高效液相色谱法以苦参碱对照品建立标准指纹图谱；

测定方法包括以下：

(1)供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约6.0g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，超声处理20分钟(功率250W，频率33kHz)，放冷，加水定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备：精密称取苦参碱对照品约10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；即得(每1ml中含苦参碱0.1mg)；

(3)色谱条件：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充料；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸溶液，梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：

0～20min，流动相A为10％～20％，流动相B为90％～80％；

20～50min，流动相A为20％～30％，流动相B为80％～70％；

50～60min，流动相A为30％～35％，流动相B为70％～65％；

60～70min，流动相A为35％～50％，流动相B为65％～50％；

70～80min，流动相A为50％～10％，流动相B为50％～90％；

流速：1.0ml/min；检测波长：203nm；柱温：40℃；进样量：10μl；

(4)测定：精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱；

(5)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以苦参碱对照品的指纹图谱的测定手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准图谱，以苦参碱色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中共有18个吸收峰，其中峰8(保留时间约为16.3min)为对照品苦参碱峰，各峰以峰8为参照峰的相对保留时间和相对峰面积如下：

相对保留时间：

峰1：0.365～0.378；峰2：0.472～0.481；峰3：0.532～0.541；峰4：0.748～0.757；峰5：0.873～0.882；峰6：0.924～0.933；峰7：0.943～0.949；峰9：1.096～1.108；峰10：1.200～1.213；峰11：1.261～1.272；峰12：1.491～1.506；峰13：1.597～1.612；峰14：1.852～1.867；峰15：1.961～1.972；峰16：2.260～2.270；峰17：2.659～2.672；峰18：3.118～3.129；

相对峰面积：峰1：0.120～0.128；峰2：0.412～0.425；峰3：0.161～0.172；峰4：0.089～0.093；峰5：0.236～0.245；峰6：0.103～0.112；峰7：0.090～0.098；峰9：0.103～0.110；峰10：0.391～0.400；峰11：0.152～0.159；峰12：0.106～0.115；峰13：0.391～0.399；峰14：0.118～0.125；峰15：0.391～0.399；峰16：0.136～0.145；峰17：0.137～0.147；峰18：0.198～0.207；

(6)以(1)～(4)所述方法作为待测妇炎康分散片的指纹图谱的测定手段，制备待测样品的指纹图谱；

(7)将待测妇炎康分散片的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部：

I计算待测妇炎康分散片中的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；

II待测妇炎康分散片的指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；

III除对照品色谱峰之外的其他共有色谱峰与对照品色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％。

与现有技术相比，本发明能更加完善一种妇炎康分散片质量控制方法。中药成分复杂，如果只用其中一、两种成分来说明其内在质量，具有一定的片面性，更无法判断其药效的指标成分。因此本申请人制定了鉴别以芍药苷对照品、当归对照药材、延胡索对照药材、苦参碱对照品、黄柏对照药材和盐酸小檗碱对照品、丹参对照药材和原儿茶醛对照品为对照的薄层鉴别；含量以原儿茶醛对照品和苦参碱对照品为对照的含量测定方法；指纹图谱以儿茶醛对照品建立标准指纹图谱的测定方法，以全面控制该妇炎康分散片的质量。

本发明的有益效果如下：

(1)与现有技术相比，本发明建立了一种妇炎康分散片的质量控制方法，能有效的表征该妇炎康分散片的质量，有利于全面控制产品质量。

(2)该方法采用薄层色谱法分别对赤芍、当归、延胡索、苦参、黄柏河丹参进行定量鉴别，达到多成分同时控制，采用高效液相色谱法分别对丹参和苦参进行含量检测，采用高效液相色谱法建立指纹图谱以全面控制产品的质量。

(3)本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。

附图说明

附图1是妇炎康分散片的HPLC指纹图谱

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明的保护范围不仅仅限于以下实施例。

具体实施方式

实施例1：标准指纹图谱的建立

(1)供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉6.0236g，置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，超声处理20分钟(功率250W，频率33kHz)，放冷，加水定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备：精密称取苦参碱对照品10.05mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；即得；

(3)色谱条件：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充料；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％体积分数的磷酸水溶液，进行梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：

0～20min，流动相A为10％～20％，流动相B为90％～80％；

20～50min，流动相A为20％～30％，流动相B为80％～70％；

50～60min，流动相A为30％～35％，流动相B为70％～65％；

60～70min，流动相A为35％～50％，流动相B为65％～50％；

70～80min，流动相A为50％～10％，流动相B为50％～90％；

流速：1.0ml/min；检测波长：203nm；柱温：40℃；进样量：10μl；

(4)测定：精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱；

取妇炎康分散片10批，按照(1)-(4)条件进行检测，得到10批样品的HPLC图谱，制定标准指纹图谱。以苦参碱色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中共有18个吸收峰，其中峰8为对照品苦参碱，各峰以峰8为参照峰的相对保留时间和相对峰面积如下：

相对保留时间：

峰1：0.365～0.378；峰2：0.472～0.481；峰3：0.532～0.541；峰4：0.748～0.757；峰5：0.873～0.882；峰6：0.924～0.933；峰7：0.943～0.949；峰9：1.096～1.108；峰10：1.200～1.213；峰11：1.261～1.272；峰12：1.491～1.506；峰13：1.597～1.612；峰14：1.852～1.867；峰15：1.961～1.972；峰16：2.260～2.270；峰17：2.659～2.672；峰18：3.118～3.129；

相对峰面积：峰1：0.120～0.128；峰2：0.412～0.425；峰3：0.161～0.172；峰4：0.089～0.093；峰5：0.236～0.245；峰6：0.103～0.112；峰7：0.090～0.098；峰9：0.103～0.110；峰10：0.391～0.400；峰11：0.152～0.159；峰12：0.106～0.115；峰13：0.391～0.399；峰14：0.118～0.125；峰15：0.391～0.399；峰16：0.136～0.145；峰17：0.137～0.147；峰18：0.198～0.207；

实施例2：生产工艺

取当归216g、三棱135g和莪术128g加10倍量水，蒸馏提取挥发油5小时，将上述挥发油用β-环糊精75g制成包合物(包合温度16℃，时间1.5小时)，备用；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与赤芍120g、土茯苓205g、川楝子125g、延胡索135g、芡实200g、苦参126g、黄柏130g、香附88g、山药250g加12倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，减压浓缩至相对密度为1.10(55℃)的清膏，冷却至40℃，加95％乙醇使含醇量达到58％，搅拌，静置20小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.25(60℃)的清膏，真空干燥，粉碎，备用；丹参215g加10量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.16(60℃)的清膏，药渣再以75％乙醇提取2小时，滤过，滤液冷却至室温后加入至上述清膏中，搅拌，静置18小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.24(60℃)的清膏，减压干燥，粉碎，备用；在上述干膏粉及包合物中加入10g滑石粉及10g交联聚乙烯吡咯烷酮(PPVP)，混匀，粉碎，过筛，制成颗粒，干燥，备用；另取2g低取代羟丙纤维素与2g微粉硅胶混匀，粉碎，过筛，与上述颗粒混匀，压制成1000片

实施例3：检验

1鉴别

(1)赤芍的薄层色谱鉴别

取实施例2样品5片，研细，加正丁醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液置水浴上浓缩至1ml，加适量中性氧化铝在水浴上均匀干燥，装入预先装填好的中性氧化铝小柱，以醋酸乙酯∶甲醇＝1∶1的溶液50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-乙酸(40∶2.5∶10∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)当归的薄层色谱鉴别：

取实施例2样品5片，研细，加石油醚100ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-乙酸(7∶3∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)延胡索的薄层色谱鉴别：

取实施例2样品10片，研细，加氨试液调节pH9.50，再加甲苯30ml，回流2小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-甲醇-氨水(6∶2.5∶0.5∶0.3)的下层液为展开剂，用氢氧化铵饱和0.5小时后，展开，取出，晾干，碘薰后于紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)苦参的薄层色谱鉴别方法：

供试品溶液：制备方法同鉴别(3)下供试品溶液；另取苦参碱对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水(6∶0.4∶0.2)10℃以下放置24h后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(5)苦参的高效液相色谱鉴别：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间与苦参碱对照品的主峰保留时间一致。

(6)黄柏的薄层色谱鉴别：

取实施例2样品10片，研细，加乙醇50ml，回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加1％盐酸20ml溶解，用氨试液调pH8.50，以氯仿提取2次，合并氯仿液，蒸干，残渣加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-氨水(10∶3∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上；显相同颜色的荧光斑点；

(7)丹参的薄层色谱鉴别：

取实施例2样品10片，研细，置索氏提取器中，加乙醚150ml，回流4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加0.2％的盐酸溶液200ml，回流提取4小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷萃取4次，每次60ml，弃去三氯甲烷层，水层加30g氯化钠振摇使溶解后，加水饱和的乙酸乙酯萃取4次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，加硅藻土3g，回流0.5小时后，过滤，除去硅藻土，续滤液蒸干，残渣加1ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取原儿茶醛、隐丹参酮对照品制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶3∶0.1)的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(8)丹参的高效液相色谱鉴别：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间与儿茶醛对照品的主峰保留时间一致。

2、妇炎康分散片性状

本品为黄褐色的片；气微，味微苦；

分散均匀性：取本品2片，照片剂项下分散均匀性(中国药典2010年版二部附录IA)检查，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，全部崩解并通过二号筛；

3、溶出度试验

取实施例2样品，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录XC第二法)，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作；经15分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品适量，精密称定，以甲醇溶解并定量稀释制成每1ml约含2.5μg的溶液，作为对照品溶液；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(PhenomenexLuna3μmC18(2)，50mm×2.0mmMercuryMS)；甲醇-水-冰乙酸(52.5∶47∶0.5)为流动相；检测波长为280nm；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1000；精密吸取上述两种溶液各100μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算每片的溶出量。各片溶出分别为含量测定结果的96.3％、98.5％、97.5％、95.8％、98.2％、99.6％，溶出平均值为97.7％，RSD为1.5％。

4、妇炎康分散片含量测定

(1)丹参的含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰乙酸(5∶94∶1)为流动相；检测波长为280nm；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1500；

对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品12.56mg，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得；

供试品溶液的制备：取实施例2样品，研细，混匀，取细粉约0.6g，精密称定，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液适量使溶解，超声处理20分钟(功率250W，频率33kHz)，放冷，加1％醋酸溶液定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定；

本品每片含丹参以原儿茶醛(C₇H₆O₃)计，为0.24mg。

(2)苦参的含量测定：

照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-乙醇-0.05％磷酸-N，N二甲基甲酰胺(62∶17.5∶0.5∶20)为流动相；检测波长为208nm；理论板数按苦参碱峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：取苦参碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠2ml使湿润，再加乙醇25ml，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，滤过，取滤液，再用乙醇洗涤残渣、容器及滤器4次，每次5ml，滤过，合并滤液，加在中性氧化铝柱(内径2.0cm，200～400目，装高2cm，流速2～5滴/秒)上，收集过柱乙醇液，再用50ml三氯甲烷-乙醇(7∶3)洗脱，收集洗脱液，与乙醇液合并，置水浴上蒸干，残渣用流动相溶解并转移至50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每片含苦参以苦参碱(C₁₅H₂₄N₂O)计，为0.60mg。

5、妇炎康分散片的HPLC指纹图谱

取实施例2样品，按实施例1条件进行检测，得到妇炎康分散片指纹图谱。

将指纹图谱与实施例1标准指纹图谱对比，得到如下结果：

I待测妇炎康分散片中的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度为0.99；

II待测妇炎康分散片的指纹图谱中，非共有峰面积不超过总峰面积的10％；

III除对照品色谱峰之外的其他共有色谱峰与对照品色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不超过±10％。

实施例4丹参的含量测定的方法学

1仪器与试药

主要仪器：

高效液相色谱仪：LC-20AT；生产商：日本Shimadzu公司；

电子分析天平：CP225D，生产商：北京sartorius科学仪器有限公司

超声波清洗机：US10300D

试药

原儿茶醛批号：110810-200506中国药品生物制品检定所

甲醇色谱纯生产商：BurdickJackson

乙腈：色谱纯生产商：BurdickJackson

磷酸：分析纯生产商：天津市大茂化学试剂厂

2方法与结果

2.1检测波长的选择取原儿茶醛对照品适量，精密称定，加1％醋酸溶液制成每1ml含0.0025mg的溶液，在190～400nm波长范围内扫描。结果表明，原儿茶醛在280nm处有最大吸收，故选择280nm作为原儿茶醛含量测定的检测波长。

2.2色谱条件

色谱仪：LC-20AT；生产商：日本Shimadzu公司；

色谱柱：DiamonsilODS(C18，4.6mm×250mm，5μm)

流动相：甲醇-水-冰乙酸(5∶94∶1)为流动相流速：

柱温：室温

进样量：10μl

检测波长：280nm

对照品储备液的制备：精密称取原儿茶醛对照品12.53mg，置250ml量瓶中，加1％醋酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约0.6g，精密称定，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液适量使溶解，超声处理20分钟(功率250W，频率33kHz)，放冷，加水定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

2.3提取时间的选择取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约0.6g(共3份)，精密称定，分置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液适量，分别超声处理(功率250W，频率33kHz)5、10、20min，取出，放置室温，加1％醋酸溶液至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

结果表明：超声提取5min即可提取完全。

2.4线性关系考察精密量取原儿茶醛对照品储备溶液(C＝0.0512mg/ml)0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置于10ml量瓶中，用1％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，得到系列浓度的对照品溶液。分别从中精密吸取10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定。以峰面积为纵坐标，原儿茶醛的浓度(μg/ml)为横坐标作图，绘制标准曲线。

编号	原儿茶醛浓度(μg/ml)	峰面积
			1	0	0
2	1.0240	60846
			3	2.0480	120589
4	3.0720	183540
			5	4.0960	244156
6	5.1200	305687

回归方程：y＝59888x-1011

相关系数：r＝0.9999

结果表明：原儿茶醛在1.0240μg/ml～5.1200μg/ml范围内线性良好。

经计算，原儿茶醛的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定原儿茶醛的含量。

2.5精密度试验精密吸取原儿茶醛对照品溶液(C＝3.0720μg/ml)10μl，注入液相色谱仪，测定5次，考察对照品溶液精密度，测定结果见下表。

结果表明，对照品溶液精密度良好。

2.6稳定性试验

2.6.1对照品溶液的稳定性试验精密吸取原儿茶醛对照品溶液(C＝3.0720μg/ml)10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、4、8、24小时进样测定。

结果表明，对照品溶液在24小时内稳定性良好。

2.6.2供试品溶液的稳定性试验精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、4、8、24小时进样测定。

结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。

2.7重复性试验取本品5份，按供试品溶液的制备和测定法项下进行，操作。

2.8加样回收率试验采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约0.6g(共6份)，精密称定，分置100ml量瓶中，分别精密加入原儿茶醛对照品溶液(C＝0.5012mg/ml)5.0ml，加1％醋酸溶液适量超声处理(功率250W，频率33KHz)5min，取出，放置室温，加1％醋酸溶液至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

妇炎康分散片中原儿茶醛的含量为：0.38mg/g。

2.9样品含量测定取本品三批样品，按照2.2项供试品溶液的制备和测定法项下的操作。

实施例5：苦参的含量测定方法学

1仪器与试药

1.1主要仪器：

高效液相色谱仪：LC-20AT；生产商：日本Shimadzu公司；

电子分析天平：CP225D，生产商：北京sartorius科学仪器有限公司

超声波清洗机：US10300D

1.2试药

苦参碱批号：110805-200507中国药品生物制品检定所

甲醇色谱纯生产商：BurdickJackson

乙腈：色谱纯生产商：BurdickJackson

磷酸：分析纯生产商：天津市大茂化学试剂厂

2方法与结果

2.1检测波长的选择取苦参碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.0025mg的溶液，在190～400nm波长范围内扫描。结果表明，原苦参碱在208nm处有最大吸收，固选择208nm作为苦参碱含量测定的检测波长。

2.2色谱条件

色谱仪：LC-20AT；生产商：日本Shimadzu公司；

色谱柱：DiamonsilODS(C18，4.6mm×250mm，5μm)

流动相：乙腈-乙醇-0.05％磷酸-N，N二甲基甲酰胺(62∶17.5∶0.5∶20)

流速：1.0ml/min

柱温：室温

进样量：10μl

检测波长：208nm

对照品储备溶液的制备：精密称取苦参碱对照品12.62mg，置250ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠2ml使湿润，再加乙醇25ml，超声处理(功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，滤过，取滤液，再用乙醇洗涤残渣、容器及滤器4次，每次5ml，滤过，合并滤液，加在中性氧化铝柱(内径2.0cm，200～400目，装高2cm，流速2～5滴/秒)上，收集过柱乙醇液，再用50ml三氯甲烷-乙醇(7∶3)洗脱，收集洗脱液，与乙醇液合并，置水浴上蒸干，残渣用流动相溶解并转移至50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

2.3线性关系考察精密量取苦参碱对照品储备溶液(C＝0.5048mg/ml)0.0、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5ml，分别置于10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别从中精密吸取10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定。以峰面积为纵坐标，苦参碱的量(μg)为横坐标作图，绘制标准曲线。

编号	苦参碱浓度(μg/ml)	峰面积
			1	0	0
2	15.1440	380124
			3	30.2880	762589
4	45.4320	1142698
			5	60.5760	1536871
6	75.7200	1912584

回归方程：y＝25351x-4787

相关系数：r＝0.9999

结果表明：苦参碱在15.1440μg/ml～75.7200μg/ml范围内线性良好。

经计算，苦参碱的标准曲线过原点，因此选用外标一点法测定苦参碱的含量。

2.5精密度试验精密吸取苦参碱对照品溶液10μl(C＝60.5760μg/ml)，注入液相色谱仪，测定5次，考察对照品溶液精密度，测定结果见下表。

结果表明，对照品溶液精密度良好。

2.6稳定性试验

2.6.1对照品溶液的稳定性试验精密吸取苦参碱对照品溶液10μl(C＝60.5760μg/ml)，注入液相色谱仪，分别在0、2、4、8、24小时进样测定。

结果表明，对照品溶液在24小时内稳定性良好。

2.6.2供试品溶液的稳定性试验取本品，按正文供试品溶液的制备制备样品，精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，分别在0、2、4、8、24小时进样测定。

结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。

2.7重复性试验取本品，按正文供试品溶液的制备和测定法项下进行操作。

2.8加样回收率试验采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约0.13g(共6份)，精密称定，分置25ml量瓶中，分别精密加入苦参碱对照品溶液(C＝0.5048mg/ml)5.0ml，按正文供试品溶液的制备和测定法项下进行操作

妇炎康分散片中苦参碱的含量为：0.96mg/g。

2.9样品含量测定取本品三批样品，按照正文供试品溶液的制备和测定法项下的操作。

Claims (4)

1.一种妇炎康分散片质量检测方法，它是由土茯苓205g、苦参126g、黄柏130g、莪术128g、三棱135g、丹参215g、赤芍120g、川楝子125g、延胡索135g、香附88g、当归216g、芡实200g、山药250g、β-环糊精75g、交联聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉、低取代羟丙纤维素和微粉硅胶适量按照下述方法制备：取当归、三棱和莪术加10倍量水，蒸馏提取挥发油5小时，将上述挥发油用β-环糊精75g制成包合物，包合温度16℃，时间1.5小时，备用；蒸馏后的水溶液另器收集；药渣与赤芍、土茯苓、川楝子、延胡索、芡实、苦参、黄柏、香附、山药加12倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，减压浓缩至相对密度为1.01～1.18，温度为55℃的清膏Ⅰ，冷却至40℃，加95％乙醇使含醇量达到58％，搅拌，静置20小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.22～1.26，温度为60℃的清膏Ⅱ，真空干燥，粉碎，备用；丹参加10量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.01～1.18，温度为60℃的清膏Ⅲ，药渣再以75％乙醇提取2小时，滤过，滤液冷却至室温后加入至上述清膏Ⅲ中，搅拌，静置18小时，滤过，滤液减压回收乙醇至相对密度为1.22～1.26，温度为60℃的清膏Ⅳ，减压干燥，粉碎，备用；在上述清膏Ⅱ粉碎后和清膏Ⅳ粉碎后的干膏粉及包合物中加入0.5份滑石粉及0.5份交联聚乙烯吡咯烷酮，混匀，粉碎，过筛，制成颗粒，干燥，备用；另取0.1份低取代羟丙纤维素与0.1份微粉硅胶混匀，粉碎，过筛，与上述颗粒混匀，压制成1000片，其特征在于：所述质量检测方法包括性状、检查、鉴别、含量测定和指纹图谱测定项目；其中的鉴别是以芍药苷对照品、当归对照药材、延胡索对照药材、苦参碱对照品、黄柏对照药材和盐酸小檗碱对照品、丹参对照药材、原儿茶醛对照品和隐丹参酮对照品为对照的薄层鉴别；含量测定是以原儿茶醛对照品和苦参碱对照品为对照的含量测定方法；指纹图谱是以苦参碱对照品建立标准指纹图谱的测定方法；

所述的妇炎康分散片质量检测方法中的性状为：

本品为黄褐色的片；气微，味微苦；

检查为：

(1)分散均匀性：取本品2片，照中国药典2010年版二部附录IA片剂项下分散均匀性检查，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；

(2)溶出度：取本品，照中国药典2010年版二部附录XC第二法溶出度测定法，以水900ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作；经15分钟时，取溶液5ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取原儿茶醛对照品适量，精密称定，以水溶解并定量稀释制成每1ml约含2.5μg的溶液，作为对照品溶液；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂PhenomenexLuna，3μm，C18,50mm×2.0mmMercuryMS；比例为52.5∶47∶0.5的甲醇-水-冰乙酸为流动相；检测波长为280nm；流速：1.0ml/min，柱温：室温；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1500；精密吸取上述两种溶液各100μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算每片的溶出量；限度为含量测定结果的80％，应符合规定；

(3)其他：应符合中国药典2010年版一部附录ⅠD片剂项下有关的各项规定。

2.按照权利要求1所述的一种妇炎康分散片质量检测方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量检测方法中的鉴别方法包括以下中的一种或几种：

(1)、妇炎康分散片质量检测方法中赤芍的薄层色谱鉴别方法：

取本品5片，研细，加正丁醇10ml，振摇5分钟，滤过，滤液置水浴上浓缩至1ml，加适量中性氧化铝在水浴上均匀干燥，装入预先装填好的中性氧化铝小柱，以醋酸乙酯：甲醇＝1∶1的溶液50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为40∶2.5∶10∶0.4的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)、妇炎康分散片质量检测方法中当归的薄层色谱鉴别方法：

取本品5片，研细，加石油醚100ml，回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB规定的层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以比例为7∶3∶0.1的正己烷-乙酸乙酯-乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，置波长365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(3)、妇炎康分散片质量检测方法中延胡索的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，加氨试液调节pH9.5，再加甲苯30ml，回流2小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶2.5∶0.5∶0.3的甲苯-三氯甲烷-甲醇-氨水的下层液为展开剂，用氢氧化铵饱和0.5小时后，展开，取出，晾干，碘薰后于波长365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)、妇炎康分散片质量检测方法中苦参的薄层色谱鉴别方法：

供试品溶液：制备方法同鉴别(3)下供试品溶液；另取苦参碱对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以比例为6∶0.4∶0.2的三氯甲烷-甲醇-氨水10℃以下放置24h后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(5)、妇炎康分散片质量检测方法中苦参的高效液相色谱鉴别方法：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与苦参碱对照品的主峰保留时间一致；

(6)、妇炎康分散片质量检测方法中黄柏的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，加乙醇50ml，回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加1％盐酸20ml溶解，用氨试液调pH8.5，以氯仿提取2次，合并氯仿液，蒸干，残渣加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液；另取黄柏对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-氨水(10∶3∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，置波长365nm的紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上；显相同颜色的荧光斑点；

(7)、妇炎康分散片质量检测方法中丹参的薄层色谱鉴别方法：

取本品10片，研细，置索氏提取器中，加乙醚150ml，回流4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加0.2％的盐酸溶液200ml，回流提取4小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷萃取4次，每次60ml，弃去三氯甲烷层，水层加30g氯化钠振摇使溶解后，加水饱和的乙酸乙酯萃取4次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，加硅藻土3g，回流0.5小时后，过滤，除去硅藻土，续滤液蒸干，残渣加1ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取原儿茶醛、隐丹参酮对照品制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以比例为5∶3∶0.1三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(8)、妇炎康分散片质量检测方法中丹参的高效液相色谱鉴别方法：

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液的主峰保留时间应与原儿茶醛对照品的主峰保留时间一致。

3.按照权利要求1所述的一种妇炎康分散片质量检测方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量检测方法中的含量测定方法包括以下：

(1)、妇炎康分散片质量检测方法中丹参的含量测定：

照中国药典2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为5∶94∶1的甲醇-水-冰乙酸为流动相；检测波长为280nm；流速：1.0ml/min；室温：柱温；理论板数按原儿茶醛峰计算应不低于1500；

对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品约12.5mg，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液至刻度，摇匀，即得，其中，每1ml中含原儿茶醛约2.5μg；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约0.6g，精密称定，置100ml量瓶中，加1％醋酸溶液适量使溶解，超声处理20分钟，功率250W，频率33kHz，放冷，加1％醋酸溶液定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定；

本品每片含丹参以原儿茶醛C₇H₆O₃计，不得少于0.20mg；

(2)、妇炎康分散片质量检测方法中苦参的含量测定：

照中国药典2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；比例为62：17.5：0.5：20的乙腈-乙醇-0.05％磷酸-N,N二甲基甲酰胺为流动相；流速：1.0ml/min；室温：柱温；检测波长为208nm；理论板数按苦参碱峰计算应不低于5000；

对照品溶液的制备：取苦参碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加0.01mol/L氢氧化钠2ml使湿润，再加乙醇25ml，超声处理，功率250W，频率33kHz，30分钟，放冷，滤过，取滤液，再用乙醇洗涤残渣、容器及滤器4次，每次5ml，滤过，合并滤液，加在中性氧化铝柱上，内径2.0cm，200～400目，装高2cm，流速2～5滴/秒，收集过柱乙醇液，再用50ml比例为7∶3的三氯甲烷-乙醇洗脱，收集洗脱液，与乙醇液合并，置水浴上蒸干，残渣用流动相溶解并转移至50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每片含苦参以苦参碱C₁₅H₂₄N₂O计，不得少于0.40mg。

4.按照权利要求1所述的一种妇炎康分散片质量检测方法，其特征在于：所述的妇炎康分散片质量检测方法中的指纹图谱采用高效液相色谱法以苦参碱对照品建立标准指纹图谱；

测定方法包括以下：

(1)供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品，研细，混匀，取细粉约6.0g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，超声处理20分钟，功率250W，频率33kHz，放冷，加水定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备：精密称取苦参碱对照品约10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；即得，其中，每1ml中含苦参碱0.1mg；

(3)色谱条件：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充料；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.05％磷酸溶液，梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：

0～20min，流动相A为10％～20％，流动相B为90％～80％；

20～50min，流动相A为20％～30％，流动相B为80％～70％；

50～60min，流动相A为30％～35％，流动相B为70％～65％；

60～70min，流动相A为35％～50％，流动相B为65％～50％；

70～80min，流动相A为50％～10％，流动相B为50％～90％；

流速：1.0ml/min；检测波长：203nm；柱温：40℃；进样量：10μl；

(4)测定：精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱；

(5)标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以苦参碱对照品的指纹图谱的测定手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准图谱，以苦参碱色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中共有18个吸收峰，其中峰8为对照品苦参碱峰，保留时间约为16.3min，各峰以峰8为参照峰的相对保留时间和相对峰面积如下：

相对保留时间：

峰1：0.365～0.378；峰2：0.472～0.481；峰3：0.532～0.541；峰4：0.748～0.757；峰5：0.873～0.882；峰6：0.924～0.933；峰7：0.943～0.949；峰9：1.096～1.108；峰10：1.200～1.213；峰11：1.261～1.272；峰12：1.491～1.506；峰13：1.597～1.612；峰14：1.852～1.867；峰15：1.961～1.972；峰16：2.260～2.270；峰17：2.659～2.672；峰18：3.118～3.129；

相对峰面积：峰1：0.120～0.128；峰2：0.412～0.425；峰3：0.161～0.172；峰4：0.089～0.093；峰5：0.236～0.245；峰6：0.103～0.112；峰7：0.090～0.098；峰9：0.103～0.110；峰10：0.391～0.400；峰11：0.152～0.159；峰12：0.106～0.115；峰13：0.391～0.399；峰14：0.118～0.125；峰15：0.391～0.399；峰16：0.136～0.145；峰17：0.137～0.147；峰18：0.198～0.207；

(6)以(1)～(4)所述方法作为待测妇炎康分散片的指纹图谱的测定手段，制备待测样品的指纹图谱；

(7)将待测妇炎康分散片的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部：

Ⅰ计算待测妇炎康分散片中的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；

Ⅱ待测妇炎康分散片的指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；

Ⅲ除对照品色谱峰之外的其他共有色谱峰与对照品色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％。