CN104096013A

CN104096013A - 一种防治酒精性肝炎的中药提取工艺

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Publication number: CN104096013A
Application number: CN201310122290.2A
Authority: CN
Inventors: 刘佩莉; 王倩; 孔令钰; 李楠; 黄美菊
Original assignee: TIANJIN INST OF MEDICAL AND MEDICINAL SCIENCES
Current assignee: TIANJIN INST OF MEDICAL AND MEDICINAL SCIENCES
Priority date: 2013-04-10
Filing date: 2013-04-10
Publication date: 2014-10-15

Abstract

本发明是属于中药领域，涉及一种防治酒精性肝炎中药的提取工艺，包括以下步骤：田基黄15g、五味子6g、败酱草15g、垂盆草15g、泽泻9g、山楂12g、丹参15g、草决明12g、柴胡9g、甘草6g，加8～12倍量40～60％的乙醇提取1～3次，进行L₉(3⁴)正交试验，以干膏得率、总黄酮含量和五味子醇甲含量为指标，探讨其最佳提取工艺条件。最佳工艺条件为12倍量40％乙醇提取3次，每次2小时，回收乙醇并浓缩干燥，粉碎成细粉，加适量乳糖混匀，制粒，干燥，即得。经工艺验证表明该发明所确定的最佳工艺条件合理有效成分提取率较高。

Description

一种防治酒精性肝炎的中药提取工艺

技术领域

本发明涉及一种防治酒精性肝炎中药复方的提取工艺。

背景技术

(一)田基黄：为藤黄科金丝桃属植物地耳草Hypericumjaponicum Thunb.的干燥全草，采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版地耳草项下有关要求。田基黄所含的总黄酮为田基黄定量测定的指标性成分。田基黄中所含总黄酮类成分为保肝作用的主要成分。

(二)五味子：为木兰科植物五味子Schisancha chinensis(Tucz.)Bail的干燥成熟果实，采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版和中国药典2010年版一部五味子项下的有关要求。

(三)败酱草：为败酱科败酱属Patrima黄花败酱Patrinia scabiosaefoha Fisch.ex Link.的带根全草。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版败酱草项下有关要求。

(四)垂盆草：为景天科植物垂盆草Sedum sarmentosum Bunge的干燥全草。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版垂盆草项下的有关要求。垂盆草中所含的总黄酮为垂盆草定量测定的指标性成分。垂盆草中所含的黄酮类化合物为主要的保用成分。

(五)泽泻：为泽泻科植物泽泻Alisma ortentalis(Sam.)Juzep.的干燥块茎。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版泽泻项下的有关要求。

(六)山楂：为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge Far：major.NEBr或山楂Crataegus pinnatifida Bge的干燥成熟果实。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版山楂项下的有关要求。

(七)丹参：为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版丹参项下的有关要求。

(八)决明子：为豆科植物决明Cassia obtutsl.folia L或小决明Cassia tora L.的干燥成熟种子。采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版决明子项下的有关要求。

(九)柴胡：为伞形科植物柴胡Bupleurum chirese DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzoneri folium Willd.的干燥根。采用饮片符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版柴胡项下的有关要求。

(十)甘草：为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch胀果甘草Glycyrrhiza mflata Ba.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，采用饮片，符合《天津市中药材饮片炮制规范》2005年版甘草项下的有关要求。

复方中田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草的质量比为15∶6∶15∶15∶9∶12∶15∶12∶9∶6。本发明所要解决得技术问题在于提供一种副作用小、保留有效成分、保留指标成份、增强疗效、节约成本的提取工艺，并在传统提取工艺的基础上进行优化的田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草的混合提取工艺。

发明内容

本发明所要解决得技术问题在于提供一种副作用小、保留有效成分、保留指标成分、增强疗效、节约成本的提取工艺，并在传统提取工艺的基础上进行优化的田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草的混合提取工艺。

本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是一种田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草的混合提取工艺，包括下述步骤：田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草加12倍量40％乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度125-1.30(50℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，加适量乳糖混匀，制粒，干燥，制得1000g，分装160袋颗粒，即得(见附图说明)。

1.制剂工艺设计的理论依据

根据临床上治疗酒精性肝炎的用药特点和处方中各药物的化学成分与药理作用研究资料，结合颗粒剂的剂型特点进行制剂工艺设计。

11田基黄：是方中的君药。主要黄酮类化合物及其衍生物，酮类化合物及其衍生物，间苯三酚类化合物及其衍生物。药理研究表明田基黄醇提取物具有抑菌、保肝及抑制肿瘤作用，故工艺提取采取乙醇回流提取。

1.2五味子：是方中君药主要含有木脂素、多糖、挥发油、三萜、有机酸、氨基酸和无机元素等，具有增加中枢神经系兴奋性，降低病毒肝炎患者血清中谷丙转氨酶(ALT)等活性。现代药理研究表明五味子乙醇提取物大量用于肝炎的治疗，故工艺提取采取乙醇回流提取。

1.3败酱草：是方中臣药。主要含有皂苷类、环烯醚萜类、黄酮类、香豆素类、挥发油和有机酸类。大量研究表明，败酱草醇提物具有抗自由基、抗氧化、抗癌、抗菌、抗过敏、抗炎症等多种生理活性及药理作用，故工艺提取中采取乙醇回流提取。

1.4垂盆草：是方中臣药。主要含有蛋白质、氨基酸、糖类、黄酮类、三萜类及垂盆草苷类，具有治疗急慢性肝炎的作用。药理研究表明，垂盆草乙醇提取物具有抑制炎症渗出，减少肝细胞损伤的作用，故工艺提取中采取乙醇回流提取。

1.5泽泻：是方中佐药。主要含有萜类化合物、挥发油、生物碱、黄酮、磷脂、蛋白质及淀粉等其它化学成分。药理研究表明泽泻醇提取物具有保肝作用，故工艺提取中采取乙醇回流提取。

1.6山楂：是方中佐药。主要含有黄酮类、黄烷及其聚合物类、三萜类和有机酸类等多种化学成分，具有降血脂、保肝、降压、助消化、强心、抗氧化、抗肿瘤、抗菌等作用。药理研究表明，山楂乙醇提取物含有保肝作用的主要成分故工艺提取采取乙醇回流提取。

1.7丹参：是方中佐药。丹参的主要活性成分为以丹酚酸B为代表的水溶性成分和以丹参酮II_A为代表的脂溶性成分。通常采用高体积分数乙醇和水分别单独提取的全成分提取法。现代研究表明，通过单因素考察不同浓度乙醇对两类有效成分的提取效果，筛选出中间浓度的乙醇能同时兼顾两类有效成分的提取效果，故工艺提取采取乙醇回流提取。

1.8决明子：是方中佐药。主要成分为蒽醌类，以大黄酚、大黄素、大黄素甲醚及芦荟大黄素为主，具有降压、保用、调脂和改善肾功能的功效。现代药理研究表明决明子乙醇提取物具有治疗肝损伤的作用，故工艺提取采取乙醇回流提取。

1.9柴胡：是方中使药。柴胡的主要药效物质基础有柴胡皂苷及苷元、挥发油及黄酮类等。其中柴胡皂苷具有抗炎、抗菌、抗病毒、保肝利胆、降低血压、免疫调节等多方面的药理活性。现代研究表明柴胡皂苷以乙醇为溶剂提取效率较高，故工艺提取采取乙醇回流提取。

110甘草：是方中使药。主要含有三萜皂苷类和黄酮类。其中甘草总黄酮可以治疗肝损伤。现代研究表明，以乙醇为溶剂回流提取甘草总黄酮的效率较高。

2.工艺技术条件的优选

2.1正交试验设计

21.1提取方法

以乙醇浓度(％)、提取时间(h)、乙醇倍量(倍)和提取次数(次)为因素，选择不同水平，以干膏得率、总黄酮含量、五味子醇甲含量为评定指标，按正交设计L₉(3⁴)表进行试验。

按处方称取药材9份，每份114g，按以下因素水平表和L₉(3⁴)正交表进行回流提取，见表1。

表1 工艺因素水平表

2.1.2考察指标的测定

2.1.2.1干膏得率的测定精密量取10mL五田保肝醇提液，置于洁净干燥并已称重的蒸发皿中，

水浴蒸上，置于烘箱内105℃干燥3h，于干燥器内冷却30min，迅速精密称定质量，计算干膏得率。干膏得率＝干膏质量药材质量100％。结果见表2。

2.1.2.2总黄酮含量的测定

(1)对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品10.7mg，加甲醇适量使溶解，定容于50mL容量瓶中，摇匀，得对照品储备液。

(2)标准曲线的绘制：精密量取对照品储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于25mL容量瓶中，再分别加水6.0、5.0、4.0、3.0、2.0、1.0、0mL，加入5％亚硝酸钠溶液1.0mL，摇匀后放置6min，加入10％硝酸铝溶液1.0mL，摇匀后放置6min，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀放置15min。以相应的试剂作空白，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度值(＞)为纵坐标，浓度(X)为横坐标绘制标准曲线计算回归方程，得Y＝37004X-14793(r＝0.9999)。

(3)供试品溶液的测定：精密量取1mL五田保肝醇提液于10mL容量瓶中，加对应浓度的乙醇定容至刻度，摇匀，从10mL容量瓶中精密量取2mL溶液，置于25mL容量瓶中，照标准曲线制备项下的方法自“加水至6mL”起，依法测定吸光度，于500nm处测定供试品中总黄酮的含量。结果见表2。

2.2.2.3五味于醇甲的测定

色谱条件：色谱柱KromasilC₁₈(250mm×4.6mm，5μm)；流动相∶甲醇-水(62∶38)；流速：1mL/min；检测波长：250nm；柱温：25℃。

含量测定：取按各提取工艺制备的干粉(过三号筛)约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加甲醇约18mL，超声处理20min，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得五味子醇甲供试品溶液。进样量10μL，每个样品平行进样2次，以外标法计算，测定各样品中的五味子醇甲的含量。结果见表2。

表2 提取工艺正交试验结果

注：综合评分＝(0.2\26.74+0.4)/1.829+0.4/0.114100％

表3 综合评分方差分析

注：F_{（2，2)0.05}=19.00，F_{（2，2)0.01}=99.00，因素C离均差平方和最小，将其作为误差项来处理。

2.1.3结果：正交试验结果和方差分析，结果见表2和表3。直观分析表明，以综合评分为指标，在所选因素水平范围内，各因素作用顺序为D＞C＞B＞A，最优方案为A₁B₃C₃D₃。由于各因素的统计学检验不具有显著性，为降低成本，故实际生产的最优组合是A₁B₂C₃D₃，即用12倍量40％乙醇提取3次，每次2小时。

2.2优选工艺验证试验

为验证上述优选工艺最佳条件的稳定性，取处方药材3份各114g，按优选工艺进行验证试验，得出干膏得率平均值25.28％，RSD＝1.2％；总黄酮平均含量2.245mg/g，RSD＝1.0％；五味子醇用平均含量0.180mg/g，RSD＝1.8％，(n＝3)。表明该工艺合理，稳定可行。

3.成品颗粒剂的制备

3.1药物剂型的选择

选择剂型为颗粒剂，既保持了汤剂吸收快、显效迅速的特点，又克服了汤剂煎煮费时、久置易霉败变质等缺点，还掩盖了中药的苦味，从而达到疗效高、剂量小、储运、携带、使用方便的目的。

3.2药物颗粒剂的制备

称取提取物干粉8667重量份，乳糖13.33重量份，过60目筛，充分混匀，喷散适量的无水乙醇润湿物料，加85％乙醇，制软材，过筛制粒，55℃于燥约3小时，取出，整粒，筛除细粉，制备成为颗粒剂。

本发明采用新型辅料制备颗粒剂，既避免了含糖颗粒剂的易潮解、软化变质、不易久存的不足，从而提高了药物稳定性，又保证了药物的临床疗效由于减少了大量使用蔗糖等赋形剂的用量，故药物的单剂量包装量大为减少，使药物服用、贮存、携带均较为方便。

包装：6g/袋，10袋/盒。用量：每日三次，每次12～18克温水冲服。

3.3药物流动性考察

采用固定漏斗法，将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上2厘米处，小心地将药粉沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到下面的药粉圆锥体尖端接触到最下面漏斗下口为止。测出圆锥底部的直径，计算出休止角。

表4 药物流动性考察

结果0＝12.96°。休止角小于40°，表明药物颗粒的流动性良好。

3.4药物吸湿率的测定

将干燥器底部盛有饱和氯化钠的溶液放置1d使其内部湿度(RH)恒定75％，在已干燥恒重的称量瓶底部放入0.5g左右不同处方的颗粒，平铺于瓶底，称重并干燥至恒重，精密称重后置于RH为75％的干燥器中(打开称量瓶盖)，定时称重并计算吸湿百分率。

稳定性研究显示，对三批防治酒精性肝炎的颗粒进行加速试验，其形状、鉴别、重量差异、微生物限度均无明显变化，相当于在室温放置二年内药品质量稳定。

各项相关研究结果证实，该生产工艺提高了用药的安全性，保证了治疗效果、工艺合理质量稳定可控。

具体实施方式

实施例1

本发明药物各组分的用量可以是：田基黄15g、五味子6g、败酱草15g、垂盆草15g、泽泻9g、山楂12g、丹参15g、草决明12g、柴胡9g、甘草6g。其制备方法为：对原料进行筛选、洗净、晾干备用；按处方称取田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草饮片，12倍量40％乙醇提取3次，每次2h，过滤，合并三次滤液减压浓缩，旋转蒸发温度设在55～65℃，浓缩至密度为15(20℃)左右。加乳糖(总颗粒量的1/6)混匀。平铺至不锈钢盘中，60℃真空干燥。干燥后粉碎过60目筛。

称取上述提取物干粉86.67重量份，乳糖13.33重量份，过60目筛，充分混匀，喷散适量的无水乙醇润湿物料，加85％乙醇，制软材，过18目筛制粒，50℃干燥约3小时，取出。18目整粒，65目筛除细粉，得颗粒剂。

实施例2

本发明药物各组分的用量可以是：田基黄9g、五味子1.5g、败酱草9g、垂盆草15g、泽泻6g、山楂9g、丹参18g、草决明9g、柴胡3g、甘草1.5g。其制备方法与实施例1方法相同。

实施例3

本发明药物各组分的用量可以是：田基黄12g、五味子4g、败酱草12g、垂盆草12g、泽泻8g、山楂10g、丹参16g、草决明10g、柴胡6g、甘草4g。其制备方法与实施例1方法相同。

附图说明

图1是一种防治酒精性肝炎的中药的提取工艺流程图。

Claims

1.一种防治酒精性肝炎的药物组台物，其特征在于：它是由以下重量份配比德药物组成的制剂：田基黄9-15、五味子1.5-6、败酱草9-15、垂盆草15-30、泽泻6-9、山楂9-12、丹参9-15、草决明9-15、柴胡3-9、甘草1.5-9。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由以下重量份配比德药物组成的制剂：田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草的质量比为15∶6∶15∶15∶9∶12∶15∶12∶9∶6。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述的药剂为药剂学上所说的任何一种药剂，优选为颗粒剂。

4.一种如权利要求1-3之一所述的用于预防和治疗酒精性肝炎的中药提取工艺，其特征在于：包括如下步骤：

(1)原料处理：对原料进行筛选、洗净、晾干备用；

(2)提取和制备：按处方称取田基黄、五味子、败酱草、垂盆草、泽泻、山楂、丹参、草决明、柴胡、甘草药材饮片，加12倍量40％乙醇提取3次，每次2h，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.25～1.30(50℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉。称取细粉866.7重量份，加乳糖133.3重量份，过60目筛，充分混匀，喷洒适量无水乙醇润湿物料，制粒，干燥，制得1000g，分装160袋颗粒，即得。