CN103550164B

CN103550164B - 一种益气健脾的归脾丸(微丸)

Info

Publication number: CN103550164B
Application number: CN201310491688.3A
Authority: CN
Inventors: 刘忠良; 林海波
Original assignee: ZHEJIANG WECOME MEDICINE LNDUSTRY CO Ltd
Current assignee: ZHEJIANG WEIKANG PHARMACEUTICAL CO., LTD.
Priority date: 2013-10-18
Filing date: 2013-10-18
Publication date: 2015-09-16
Anticipated expiration: 2033-10-18
Also published as: CN103550164A

Abstract

本发明涉及一种微丸制剂，具体讲，涉及一种益气健脾的归脾丸（微丸），该归脾丸（微丸）的组成为：党参66重量份，白术（炒）131重量份，黄芪（蜜炙）66重量份，甘草（蜜炙）33重量份，茯苓131重量份，远志（制）131重量份，酸枣仁（炒）66重量份，龙眼肉131重量份，当归131重量份，木香33重量份，去核大枣33重量份；所述的归脾丸（微丸）中含有药用辅料10～500重量份，优选20～100重量份。本发明还涉及该归脾丸（微丸）的制备方法，将传统的归脾丸制成丸径为3.5～4mm的归脾丸（微丸），从而使归脾丸（微丸）质量稳定、药效显著，并且具有极好的流动性和溶出度，非常适合临床使用。

Description

一种益气健脾的归脾丸(微丸)

技术领域

本发明涉及一种微丸制剂，具体讲，涉及一种益气健脾的归脾丸（微丸）及其制备方法。

背景技术

归脾丸是中药良药。有大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸及其颗粒剂等几种成药形态。主要用于治疗心脾两虚引起的多种疾病。其功效为：益气健脾，养血安神。用于心脾两虚，气短心悸，失眠多梦，头昏头晕，肢倦乏力，食欲不振，崩漏便血。可用于体质亏虚、病后失调、严重贫血、气虚崩漏、脾虚腹泻、心脾两虚等症。其临床疗效确切，引用范围广，为临床常用药。含有以下11味药：

（1）党参：为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.、素花党参Codonopsispilosula Nannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen或川党参Codonopsis tangshen O Vliv.的干燥根；

（2）白术（炒）：本品为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根；

（3）炙黄芪：本品豆科植物本品为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根；

（4）甘草：本品为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎的炮制加工品；

（5）茯苓：本品为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos（Schw.）Wolf的干燥菌核。多于7～9月采挖，挖出后除去泥沙；

（6）远志（制）：本品为远志科植物远志Polygala tenuifolia Willd.或卵叶远志Polygala sibricaL.的干燥根；

（7）酸枣仁（炒）：为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujube Mill.Var.spinosa（Bunge）Hu exH.F.Chou的干燥成熟种子；

（8）龙眼肉：本品为无患子科植物龙眼Dimocarpus longan Lour.的假种皮；

（9）当归：本品为伞形科植物当归Angelica Sinensis（Oliv.）Diels的干燥根；

（10）木香：本品为菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根；

（11）大枣（去核）：本品为鼠李科植物枣Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实；

现有技术中，该药的制备工艺均为生药粉直接加工，存在口服量大，崩解慢等缺陷。微丸具有生产工艺简洁、载药量大、流动性好、脆碎度小、稳定性强等工艺学优点。我国古代就有中药微丸制剂，如“六神丸”“喉炎丸”“牛黄消炎丸”等，但这些微丸剂型多限于处方剂量小、治疗喉部炎症药物的应用，且制备工艺落后，存在工作强度大、效率低等缺点。随着近现代药剂学的发展，人们发现微丸制剂与其他口服制剂相比，自身有许多优点，如一个剂量由多个分散单元组成，口服后可大面积、均匀地分散在胃肠道，提高药物的生物利用度；在胃肠道的转运不受胃排空的影响，吸收重现性好；且肠道刺激性小；在胃内滞留时间长，粒径小，转运受食物输送节律的影响小；不同释药速率小丸的组合，容易实现预期的释药速率，达到理想的血药浓度；具有改良的灵活性，可进一步装囊、压制成片剂或包裹特定的衣膜等。

中药复方是指在辨证审因决定治法以后，选择合适的药物酌定用量,按照组成原则妥善配伍而成的一组药物。具有所含化学成分复杂、药理作用具有多靶点多层次的特点。对中药复方剂型的改进则尤为复杂，如若处理不当，则会影响中药复方的药性，临床应用效果不佳。发明人经药效学、制剂学和毒理学等方面的深入研究之后，对中药复方—归脾丸进行了剂型的改进，不仅用药量小，质量稳定、药效显著，并且具有极好的流动性和溶出度，非常适合临床使用。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提出了一种益气健脾的归脾丸（微丸）。

本发明的第二发明目的在于提出了该益气健脾的归脾丸（微丸）的制备方法。

为了实现本发明的目的，采用的技术方案为：

一种归脾微丸，所述归脾微丸的原料药为：党参66～77重量份，白术（炒）131～151重量份，黄芪（蜜炙）66～77重量份，甘草（蜜炙）33～39重量份，茯苓131～151重量份，远志（制）131～151重量份，酸枣仁（炒）66～77重量份，龙眼肉131～151重量份，当归131～151重量份，木香33～38重量份，去核大枣33～38重量份，所述的归脾微丸中含有药用辅料1～100重量份；优选归脾微丸的原料药为：党参66重量份，白术（炒）131重量份，黄芪（蜜炙）66重量份，甘草（蜜炙）33重量份，茯苓131重量份，远志（制）131重量份，酸枣仁（炒）66重量份，龙眼肉131重量份，当归131重量份，木香33重量份，去核大枣33重量份；所述的归脾微丸中含有药用辅料10～500重量份，优选20～100重量份。

其中，所述的药用辅料选自淀粉、羟甲基纤维素、微晶纤维素、乳糖、壳聚糖、微粉硅胶中的至少一种，优选淀粉。

归脾微丸的直径为3.0～4.0mm，优选3.5～4.0mm。

本发明还涉及该归脾微丸的制备方法，包括以下步骤：

（1）将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

（2）将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归按重量比称取，混合，粉粹成50～200μm的粉末I；

（3）将龙眼肉和去核大枣冷冻至-30～-25℃，在-10～-5℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至750～1500μm的粉末II，然后在真空条件下进行干燥；

（4）将白术（炒）和木香按重量比称取，混合，粉碎成500～1000μm的粉末III；

（5）将酸枣仁与茯苓混合，然后粉碎成500～1500μm的粉末IV；

（6）将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀，然后继续粉碎成150～250μm的粉末V；

（7）将粉末I与粉末V混合，加入药物辅料，水泛成微丸，干燥，包薄膜衣，即得。

其中：在步骤（2）中，粉末I的粒径为50～150μm，优选100～150μm；

在步骤（3）中，粉末II的粒径为750～1200μm，优选750～1000μm；

在步骤（4）中，粉末III的粒径为750～1000μm；

在步骤（5）中，粉末IV的粒径为750～1500μm，优选950～1200μm；

在步骤（7）中，水泛成微丸的步骤为：将药物粉末与药物辅料混合；取一半混好辅料的药粉进行制粒，将制好的颗粒用20目筛整粒，置包衣锅内滚转，依次喷入水，撒入剩余的药粉与辅料的混合物，吹干，重复操作，采用过筛法筛选直径为3.0～4.0mm微丸；然后进行干燥；

在步骤（7）中，包薄膜衣中使用的薄膜包衣液含有羟丙基甲纤维素3～5wt%、乙醇60～80wt%、甘油0.1～2wt%，余量为水；优选含有羟丙基甲纤维素3wt%、乙醇70wt%、甘油1wt%，余量为水；

在步骤（7）中，薄膜包衣的工艺参数为：流量0.15～0.2kg/min；压力0.4Mpa；干燥温度60～70℃。

下面对本发明的技术方案做进一步的解释和说明。

归脾丸由黄芪、当归、白术、茯苓、酸枣仁等十多味中药配制而成，具有健脾益气、补血养心的功效，适用于食少体倦、健忘失眠、心悸等症。近年来，经临床实践与研究证实，该药还有不少较好的新用途：抗衰老、升白细胞、提高血象水平等作用，可用于治疗白细胞减少、小儿慢性特发性血小板减少性紫癜、神经衰弱等症。

归脾丸是中药良方，本发明对该中药复方的剂型做了改进，制备出一种归脾微丸，归脾微丸的原料药为：党参66重量份，白术131重量份，黄芪66重量份，甘草33重量份，茯苓131重量份，远志131重量份，酸枣仁66重量份，龙眼肉131重量份，当归131重量份，木香33重量份，大枣33重量份，所述的归脾微丸中含有药用辅料1～20重量份。并对制备方法做了进一步的改进。目前，关于中药的超微粉碎研究很广，但超微粉碎也不适合所有的中药复方。例如有些药物挥发油含量高，在超微粉碎过程中药物有效成分有所损失。有些药物的粘度很大，很难粉碎，要制备成超微颗粒更是困难，在实际生产操作中很难实施。为此，针对本发明药物中药性的特点，本发明对其制备工艺做了深入、精细的研究，最终确定了一条制备工艺，该工艺不仅利于实施，对设备要求低，并且最大限度保护了药物的有效成分，使其在临床试验过程中，其药效高于超微粉碎组。因其成产成本低、对设备要求低，无需配置昂贵的超微粉碎机，从而是一种适于市场化的制备工艺，不仅能为企业提高效益、降低成本，并且临床效果好，适于临床应用。

本发明归脾微丸的制备方法，包括以下步骤：

（2）将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归按重量比称取，混合，粉粹成50～200μm的粉末I；优选为50～150μm，更优选100～150μm；本发明直接将党参、黄芪、甘草、远志、当归混合，并进行粉碎，是由于这五味药为根茎类，易于粉碎，并且经高效液相色谱的检测，这五味药不会因为粉碎而降低其有效成分的含量；

（3）将龙眼肉和去核大枣冷冻至-30～-25℃，在-10～-5℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至750～1500μm的粉末II，然后在真空条件下进行干燥；粉末II的粒径为500～750μm，优选550～750μm；由于龙眼肉和大枣的粘度大、成型性差，很难直接粉碎，所以本发明采用了先冷冻再粉碎的工艺，从而将龙眼肉和大枣这两味不易粉碎的药物粉碎成较小的颗粒，并且经冷冻干燥，进一步降低了粘性，使其利于后续加工和制备；

（4）将白术（炒）和木香按重量比称取，混合，粉碎成500～1000μm的粉末III；优选粒径为750～1000μm；本发明将挥发油含量较高的药物粉碎成粒度较大的药粉，避免了药物有效成分的损失；

（5）将酸枣仁与茯苓混合，然后粉碎成500～1500μm的粉末IV，优选粒径为750～1500μm，更优选为950～1200μm；本发明将油脂含量较高的酸枣仁与茯苓一起粉碎，茯苓的纤维能起到支撑和吸附的效果；酸枣仁油脂含量高，不易粉碎，故将酸枣仁和茯苓混合成粒度较大的药粉；

（6）将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀，然后继续粉碎成150～250μm的粉末V；本发明将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀后，进一步粉碎，利用粉末II和粉末IV具有一定的粘度，从而使其与粉末III混合，从而利用药材本身的包裹作用，将挥发油含量较高的粉末III包裹，从而避免了药材在混合过程中有限成分的挥发，同时利用粉末III药物的纤维的支撑作用，从而可比较容易的将三种粉末混合并进一步粉碎；

本发明整个工艺以生药粉入药，结合微丸的特殊工艺特点，采用泛制法进行成型，需进行制得基本母粒，作为成型时的球形模子。药物辅料通常选用淀粉、PVP、微晶纤维素等，试验中分别以水进行制粒，以其制粒的粘合性考察指标，经筛选实验证实，发现淀粉的效果最佳，并且安全性高、成本低，因此优选淀粉作为药物辅料。

由于本发明为生药粉入药，外观较差，为改善微丸质量，故采用取包衣。薄膜包衣与糖衣相比较具有生产周期短、用量少、片重增加小、衣层机械强度好、对药物崩解影响小等优点，故采用薄膜包衣。通过药物辅料的筛选试验，选用羟丙基甲基纤维素为最佳。由于羟丙基甲基纤维素包衣后，衣层硬而脆，缺乏柔韧性，容易破裂。故需加入增塑剂，使衣层在室温时保持较好的韧性，经筛选试验以1%量加入包衣液中进行包衣最佳。通过药物筛选试验，发现甘油的增韧效果较好。

附图说明：

图1为微丸临界相对湿度图。

本发明的具体实施方式仅限于进一步解释和说明本发明，并不对本发明的内容构成限制。

具体实施方式

实施例1：归脾微丸

配方为：党参66重量份，白术（炒）131重量份，黄芪（蜜炙）66重量份，甘草（蜜炙）33重量份，茯苓131重量份，远志（制）131重量份，酸枣仁（炒）66重量份，龙眼肉131重量份，当归131重量份，木香33重量份，去核大枣33重量份，淀粉50重量份；

实施例2：归脾微丸

配方为：党参77重量份，白术（炒）151重量份，黄芪（蜜炙）77重量份，甘草（蜜炙）39重量份，茯苓151重量份，远志（制）151重量份，酸枣仁（炒）77重量份，龙眼肉151重量份，当归151重量份，木香38重量份，去核大枣38重量份，淀粉100重量份。

实施例3：归脾微丸的制备工艺

1.按实施例1的配方称取原料，将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

2.将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归按重量比称取，混合，粉粹成200μm的粉末I；

3.将龙眼肉和去核大枣冷冻至-30℃，在-10℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至1500μm的粉末II，然后在真空条件下进行干燥；

4.将白术（炒）和木香按重量比称取，混合，粉碎成1000μm的粉末III；

5.将酸枣仁与茯苓混合，然后粉碎成1500μm的粉末IV；

6.将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀，然后继续粉碎成200μm的粉末V；

7.将粉末I与粉末V混合，加入药物辅料，混合均匀；取一半混好辅料的药粉进行制粒，将制好的颗粒用20目筛整粒，置包衣锅内滚转，依次喷入水，撒入剩余的药粉与辅料的混合物，吹干，如上反复操作；包衣锅的转速为：45转/分钟；采用过筛法筛选直径为4.0mm微丸。然后进行干燥，干燥温度为80℃；包薄膜衣，即得；

薄膜包衣工艺操作如下：

（1）薄膜包衣液的配方为：羟丙基甲纤维素3wt%、乙醇70wt%、甘油2wt%，余量为水。将羟丙基甲基纤维素准确称取一定量，置容器内，按比例加入乙醇，搅拌使完全溶解，过滤，滤液中按比例加入甘油，搅匀，胶体磨研磨，过100目筛备用。

（2）先预热包衣锅至40℃左右，将符合要求的素丸置于包衣锅内。启动包衣锅，启动排风及吸尘装置，使素片受热均匀。启动压缩泵，压力控制在0.4Mpa，将配制好的包衣液用喷枪喷雾于转动的素片表面，流量0.15～0.2kg/min，以60～70℃热风干燥，连续喷雾30分钟左右，至片面完整光洁，色泽均匀，停止喷液。用热风继续吹8分钟后，再用冷风吹干，即得。实施例4：归脾微丸的制备工艺

2.将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归按重量比称取，混合，粉粹成150μm的粉末I；

3.将龙眼肉和去核大枣冷冻至-25℃，在-5℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至750μm的粉末II，然后在真空条件下进行干燥；

4.将白术（炒）和木香按重量比称取，混合，粉碎成750μm的粉末III；

5.将酸枣仁与茯苓混合，然后粉碎成1000μm的粉末IV；

6.将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀，然后继续粉碎成150μm的粉末V；

7.将粉末I与粉末V混合，加入药物辅料，混合均匀；取一半混好辅料的药粉进行制粒，将制好的颗粒用20目筛整粒，置包衣锅内滚转，依次喷入水，撒入剩余的药粉与辅料的混合物，吹干，如上反复操作；包衣锅的转速为：45转/分钟。采用过筛法筛选直径为4.0mm微丸。然后进行干燥，干燥温度为80℃；包薄膜衣，即得；

薄膜包衣工艺操作如下：

（2）先预热包衣锅至40℃左右，将符合要求的素丸置于包衣锅内。启动包衣锅，启动排风及吸尘装置，使素片受热均匀。启动压缩泵，压力控制在0.4Mpa，将配制好的包衣液用喷枪喷雾于转动的素片表面，流量0.15～0.2kg/min，以60～70℃热风干燥，连续喷雾30分钟左右，至片面完整光洁，色泽均匀，停止喷液。用热风继续吹8分钟后，再用冷风吹干，即得。实验例1：辅料种类筛选

按照实施例1的配方制备归脾微丸，将实施例1中的药物辅料换成表1中的种类，以其制粒的粘合性考察指标，试验结果如表1所示：

表1：辅料筛选

结论：由试验可知，选用淀粉即可。

实验例2：辅料用量筛选

按照实施例1的配方制备归脾微丸，试验中对其淀粉的用量加以筛选，其结果见表2。

表：2辅料用量筛选结果

结论：由试验可知，淀粉以添加50重量份，即5%较好。

实验例3：制粒润湿剂的筛选

按照实施例1的配方制备归脾微丸，试验中采用水、不同浓度的乙醇为润湿剂，对药粉进行润湿，以制粒的难易程度进行筛选。

表3：润湿剂筛选表

结论：由试验可知，以水为润湿能很好的制粒。

实验例4：成膜材料的筛选

按照实施例3的条件制备微丸，并对包衣液中包衣材料进行筛选；实验中分别以3%浓度的薄膜衣物料（羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、Ⅳ号聚丙烯酸树脂）、70%的乙醇、1.0%的甘油，余量为水的包衣液进行包衣（压力0.4mpa、热风干燥温度70℃），考察包衣情况。结果见表4。

表4：成膜材料的筛选表

由结果可知选用羟丙基甲基纤维素与Ⅳ号聚丙烯酸树脂较好，由于羟丙基甲基纤维素的成本低、安全性高，因此选用羟丙基甲基纤维素作为包衣物料。

实施例5：增塑剂的筛选

按照实施例3的条件制备微丸，并对包衣液中增塑剂进行筛选；实验中以1%量加入包衣液中进行包衣，考察衣层的柔韧性。增塑剂的选择见表5；

表5：增塑剂的筛选表

由表可知选择甘油相对较好，其用量筛选见表12-6。

表6：甘油用量筛选表

因此，确立甘油用量为1.0%较好。

实验例6：包衣工艺的确定

对薄膜包衣主要技术参数进行了筛选，具体结果见表7。

表7：薄膜包衣主要技术参数考察

羟丙基甲纤维素浓度（%）	5	4	3	2
					乙醇浓度（%）	70	70	70	70
流量（kg/min）	0.1～0.15	0.13～0.18	0.15～0.2	0.18～0.23
					压力(Mpa)	0.4	0.4	0.4	0.4
干燥温度（℃）	60～70	60～70	60～70	60～70

包衣合格率（%）

83.5

93.6

97.8

82.1

由实验结果可知薄膜包衣的主要技术参数为：羟丙基甲纤维素浓度3%；乙醇浓度70%；流量0.15～0.2kg/min；压力0.4Mpa；干燥温度60～70℃。

实验例7：微丸物理性质研究

取实施例3制备得到的微丸，对其物理性质进行研究：

1、性状：为薄膜衣微丸，除去薄膜衣后显灰黄色；味甘、微苦。

2、堆密度

称取一定重量合格微丸，装入10ml量筒中，以一定高度落下数次（尽可能控制条件一致），使松紧适度，以重量除以容积得堆密度，结果见表8。

表8：微丸堆密度测定结果

3、微丸临界相对湿度测定

取合格微丸7份，每份约2g，精密称定，将其置于表12-9所列的分别盛有7种不同浓度硫酸或不同盐的过饱和溶液的干燥器内（称量瓶盖打开），于25℃恒温培养箱中保持84小时后称量，计算吸湿百分率，其结果见表10。

以吸湿百分率为纵坐标，相对湿度为横坐标作图，结果见图1。

表9：不同浓度硫酸或不同盐的过饱和溶液在25℃时的相对湿度

表10：临界相对湿度测定数据

由吸湿曲线求得，临界相对湿度为65%，因此在整丸分装时，应将相对湿度控制在65%以下。

实验例8：

取实施例3制备得到的归脾微丸的三个批次，进行质量检验，实验结果如表11所示：

表11：三批样品检验

取本发明实施例4制备得到的归脾微丸进行质量检测，获得相似的检测结果。

实施例9：动物实验

1.动物清洁级Wistar大鼠，体质量140～260g，雌雄各半，由中南大学实验动物中心提供。

2.试药与仪器

实施例3制备得到的归脾微丸以及对比药物a、b、c和d；环磷酰胺粉针剂0.2g/支；水合氯醛；GM-CSF试剂盒（Adlitteram Diagnotic Laboratories，Inc.）；库尔特细胞全自动分析仪；Bio-rad550酶标仪。

3.方法

3.1对比药物的制备

3.1.1对比药物a的制备:

a1:按实施例1的配方称取原料，将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

a2:将原料药物按重量比称取，混合，直接粉粹成800μm的粉末（由于有些药物的粘度大，直接混合很难粉碎成800μm以下，故本对比例采用800μm）；

a3:加入药物辅料，水泛成微丸，干燥，包薄膜衣，即得（具体条件同实施例3）。

3.1.2对比药物b的制备:

b1:按实施例1的配方称取原料，将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

b2:将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归、白术（炒）、木香、酸枣仁与茯苓按重量比称取，混合，粉粹成200μm的粉末I_b；

b3:将龙眼肉和去核大枣粉粹得II_b，由于很难粉碎成粉末状态，故在制备过程中只尽可能的进行粉碎；

b4:将粉末I_b和II_b混合均匀，然后继续粉碎成300μm的粉末（由于很难继续粉碎成目标200μm，所以只能尽可能进行粉碎成300μm左右）；加入药物辅料，水泛成微丸，干燥，包薄膜衣，

即得（具体条件同实施例3）。

3.1.3对比药物c的制备：

c1:按实施例1的配方称取原料，将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

c2:将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归按重量比称取，混合，粉粹成200μm的粉末I_c；

c3:将龙眼肉和去核大枣粉粹得II_c，由于很难粉碎成粉末状态，故在制备过程中只尽可能的进行粉碎；

c4:将白术（炒）、木香、酸枣仁与茯苓按重量比称取，混合，粉碎成1500μm的粉末III_c；

c5:将II_c和III_c混合均匀，然后继续粉碎成400μm的粉末IV_c；（由于很难继续粉碎成目标200μm，所以只能尽可能进行粉碎成400μm左右）

c6:将粉末I_c与粉末IV_c混合，然后继续粉碎成200μm的粉末；加入药物辅料，水泛成微丸，干燥，包薄膜衣，即得（具体条件同实施例3）。

3.1.4对比药物d的制备：

d1:按实施例1的配方称取原料，将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5%；

d2:将党参、黄芪（蜜炙）、甘草（蜜炙）、远志（制）、当归、白术（炒）、木香、酸枣仁与茯苓按重量比称取，混合，粉粹成200μm的粉末I_d；

d3:将龙眼肉和去核大枣冷冻至-30～-25℃，在-10～-5℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至750～1500μm的粉末II_d，然后在真空条件下进行干燥；

d5:将I_d和II_d混合均匀，然后继续粉碎成200μm的粉末III_d，加入药物辅料，水泛成微丸，干燥，包薄膜衣，即得（具体条件同实施例3）。

3.2动物分组取大鼠85只，体质量140～250g，雌雄各半，用随机排列表法分为7组：空白对照组、模型组、对比例a组、对比例b组、对比例c组及实施例3组，除空白对照组外，

其余5组均参照文献法制备气血双虚大鼠模型。模型组大鼠于放血的第7天开始出现蜷缩少动、毛蓬竖少光泽、鼠尾苍白、闭目、体质量减轻等体征。

3.3模型制备

模型组及给药组大鼠于给药的第1日，每鼠尾部放血约1ml/200g，隔日放血1次，连续放血5次；模型组及给药组大鼠于给药第2日，每鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg，隔日注射1次（以后的剂量为20mg/kg），连续注射6次；空白对照组仅腹腔注射同体积生理盐水。

3.4给药方法

将各组归脾丸均用蒸馏水溶解，配成相当于生药材1.0g/ml的药液。根据日服用剂量，给药剂量为：4.0g·kg^-1·d^-1，模型组给予中剂量同体积生理盐水。给药1次/d，连续14d。

3.5指标测定

于最后一次给药后2h，将大鼠麻醉固定颈动脉取血液，采用库尔特细胞全自动分析仪测血液中红细胞（RBC）、白细胞（WBC）和血小板数（P LT）及血红蛋白（HGB）含量；用GM-CSF试剂盒测血清GM-CSF水平。

测量得到的实验结果如表12所示：

表12：各组大鼠红细胞、白细胞、血小板计数、血红蛋白和GM-CSF含量测定结果：（x±s）

注：与空白对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01；

与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01；

与对比例a比较，^#P<0.05，^##P<0.01；

与对比例b比较，^▼P<0.05，^▼▼P<0.01；

与对比例c比较，^▽P<0.05，^▽▽P<0.01；

与对比例d比较，^⊕P<0.05，^⊕⊕P<0.01。

根据上述对比试验可知，本发明归脾丸的制备好于对比例a，说明本发明的制备方法制备得到的归脾微丸，其效果好于直接粉碎；

本发明归脾丸的好于对比例b和c，本发明采用将难于粉碎成微粒的药物进行冷冻干燥的方式，可以进一步将药物粉碎，便于药物的混合，从而改进了药物的疗效；

同时，对比例c略好于对比例b，可说明将挥发油含量高的药物分组粉碎，可提高药物中有效物质的含量，从而使药效略好；

本发明归脾丸的好于对比例d，进一步说明本发明采用的分组粉碎、进一步合并粉碎方式可提高药物中有效物质的含量，从而改进了药物的疗效。

实验例9：动物实验

1.动物清洁级Wistar大鼠，体质量140～260g，雌雄各半，由中南大学实验动物中心提供。2.试药与仪器

提取归脾丸、提取超微归脾丸；环磷酰胺粉针剂0.2g/支；水合氯醛；GM-CSF试剂盒（Adlitteram Diagnotic Laboratories，Inc.）；库尔特细胞全自动分析仪；Bio-rad550酶标仪。

3.方法

3.1提取归脾丸、提取超微归脾丸的制备：

3.1.1提取归脾丸的制备：称取实施例1的10倍处方量各药材饮片，加10倍量水浸泡30min，加热回流煎煮1.5h，离心过滤，滤渣加10倍量的水加热回流煎煮1.0h，离心过滤，合并滤液，浓缩成浓缩液，浓缩液置蒸发皿中蒸干，置真空烘箱内60℃真空干燥，得干浸膏。干浸膏粉碎成100目浸膏粉，泛制成丸，干燥得普通归脾丸。

3.1.2提取超微归脾丸的制备：称取实施例1的10倍处方量（除木香、白术、茯苓）各药材超微饮片，加10倍量水浸泡30min，75℃下进行动态提取1.5h，离心过滤，滤渣加8倍量的水，再提取1.0h，离心过滤，合并滤液，浓缩成浓缩液，浓缩液置蒸发皿中蒸干，置真空烘箱内60℃真空干燥，得干浸膏；木香、白术经CO₂超临界流体萃取得挥发油，挥发油用β-环糊精包合，得挥发油β-环糊精包合物；干浸膏粉碎成100目浸膏粉，再与茯苓超微粉、挥发油包合物混匀泛制成丸，干燥得超微归脾丸。

3.2动物分组取大鼠50只，体质量140～250g，雌雄各半，用随机排列表法分为5组：空白对照组、模型组、提取归脾丸剂组、提取超微归脾丸组、实施例3组。

3.3模型制备：同试验例8；

3.4给药方法：

将提取归脾丸、提取超微归脾丸、实施例3归脾丸均用蒸馏水溶解，配成相当于生药材1.0g/ml的药液，给药剂量为：4g·kg^-1·d^-1。给药1次/d，连续14d。

3.5指标测定

表13：各组大鼠红细胞、白细胞、血小板计数、血红蛋白和GM-CSF含量测定结果：（x±s）

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；

与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01；

与提取组比较，^#P<0.05，^##P<0.01；

与提取超微组比较，^▼P<0.05，^▼▼P<0.01。

根据以上对比文件可知，本发明制备得到的归脾丸的药效好于采用提取法制备，并好于采用提取法制备的微丸。

Claims

1.一种归脾微丸，其特征在于，所述归脾微丸的原料药为：党参66～77重量份，炒的白术131～151重量份，蜜炙黄芪66～77重量份，蜜炙甘草33～39重量份，茯苓131～151重量份，制的远志131～151重量份，炒的酸枣仁66～77重量份，龙眼肉131～151重量份，当归131～151重量份，木香33～38重量份，去核大枣33～38重量份，所述的归脾微丸中含有药用辅料1～100重量份；

所述归脾微丸的制备方法包括以下步骤：

(1)将原料药洗净、切制、干燥，干燥的条件为60～70℃烘干，水分控制为不超过5％；

(2)将党参、蜜炙黄芪、蜜炙甘草、制的远志、当归按重量比称取，混合，粉粹成50～200μm的粉末I；

(3)将龙眼肉和去核大枣冷冻至-30～-25℃，在-10～-5℃条件下，将龙眼肉和去核大枣粉粹至750～1500μm的粉末II，然后在真空条件下进行干燥；

(4)将炒的白术和木香按重量比称取，混合，粉碎成500～1000μm的粉末III；

(5)将酸枣仁与茯苓混合，然后粉碎成500～1500μm的粉末IV；

(6)将粉末II、粉末III和粉末IV混合均匀，然后继续粉碎成150～250μm的粉末V；

(7)将粉末I与粉末V混合，加入药物辅料，水泛成3.0～4.0mm的微丸，干燥，包薄膜衣，即得。

2.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，归脾微丸的原料药为：党参66重量份，炒的白术131重量份，蜜炙黄芪66重量份，蜜炙甘草33重量份，茯苓131重量份，制的远志131重量份，炒的酸枣仁66重量份，龙眼肉131重量份，当归131重量份，木香33重量份，去核大枣33重量份；所述的归脾微丸中含有药用辅料20～100重量份。

3.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，所述的归脾微丸中含有药用辅料20～100重量份。

4.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，所述的药用辅料选自淀粉、羟甲基纤维素、微晶纤维素、乳糖、壳聚糖、微粉硅胶中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的归脾微丸，其特征在于，所述的药用辅料选自淀粉。

6.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，所述归脾微丸的直径为3.5～4.0mm。

7.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(2)中，粉末I的粒径为50～150μm；在步骤(3)中，粉末II的粒径为750～1200μm。

8.根据权利要求7所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(2)中，粉末I的粒径为100～150μm。

9.根据权利要求7所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(3)中，粉末II的粒径为750～1000μm。

10.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(4)中，粉末III的粒径为750～1000μm。

11.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(5)中，粉末IV的粒径为750～1500μm。

12.根据权利要求11所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(5)中，粉末IV的粒径为950～1200μm。

13.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(7)中，水泛成微丸的步骤为：将药物粉末与药物辅料混合；取一半混好辅料的药粉进行制粒，将制好的颗粒用20目筛整粒，置包衣锅内滚转，依次喷入水，撒入剩余的药粉与辅料的混合物，吹干，重复操作，采用过筛法筛选直径为3.0～4.0mm微丸；然后进行干燥。

14.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(7)中，包薄膜衣中使用的薄膜包衣液含有羟丙基甲纤维素3～5wt％、乙醇60～80wt％、甘油0.1～2wt％，余量为水。

15.根据权利要求14所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(7)中，包薄膜衣中使用的薄膜包衣液含有羟丙基甲纤维素3wt％、乙醇70wt％、甘油1wt％，余量为水。

16.根据权利要求1所述的归脾微丸，其特征在于，在步骤(7)中，薄膜包衣的工艺参数为：流量0.15～0.2kg/min；压力0.4Mpa；干燥温度60～70℃。