CN105963415A - 一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 - Google Patents
一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105963415A CN105963415A CN201610462835.8A CN201610462835A CN105963415A CN 105963415 A CN105963415 A CN 105963415A CN 201610462835 A CN201610462835 A CN 201610462835A CN 105963415 A CN105963415 A CN 105963415A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- parts
- crude drug
- weight portion
- weight
- apply
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
- A61K36/074—Ganoderma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
- A61K36/232—Angelica
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/258—Panax (ginseng)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/29—Berberidaceae (Barberry family), e.g. barberry, cohosh or mayapple
- A61K36/296—Epimedium
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/34—Campanulaceae (Bellflower family)
- A61K36/344—Codonopsis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/488—Pueraria (kudzu)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/537—Salvia (sage)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/66—Papaveraceae (Poppy family), e.g. bloodroot
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
- A61K36/718—Coptis (goldthread)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
- A61K36/734—Crataegus (hawthorn)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/80—Scrophulariaceae (Figwort family)
- A61K36/804—Rehmannia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/2013—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
- A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
- A61K9/2806—Coating materials
- A61K9/282—Organic compounds, e.g. fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/4808—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate characterised by the form of the capsule or the structure of the filling; Capsules containing small tablets; Capsules with outer layer for immediate drug release
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞的药物中的应用,所述药物组合物的原料药组成为:黄芪100‑150重量份、党参80‑120重量份、丹参60‑100重量份、葛根60‑100重量份、淫羊藿60‑100重量份、山楂60‑100重量份、地黄40‑80重量份、当归40‑80重量份、黄连40‑80重量份、醋延胡索40‑80重量份、灵芝40‑80重量份、人参20‑30重量份、炙甘草20‑30重量份;取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺,制成临床可接受的片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。用于保护心肌细胞,促进心肌细胞生长、降低心肌细胞TNF‑α和IL‑1Β的表达、降低心肌细胞LDH含量。
Description
发明领域
本发明涉及一种益气活血的药物的新用途,特别涉及一种具有益气活血作用的药物在制备保护心肌细胞作用的药物中的应用。
背景技术
冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)一直是危害人类健康甚至生命的严重疾病,冠心病的发生,致使相当数量的患者不同程度的丧失劳动能力,既给患者造成生活上的困难,肉体上的痛苦,又给国家、社会带来一系列问题和严重损失。
长期的临床研究,医生们发现冠心病心绞痛又分多种,有的分为劳动性心绞痛、中间型、变异性心绞痛,还有的分为:稳定型、不稳定型和变异型心绞痛,各类型心绞痛在治疗上也各有特殊性。
专利号为201010212568,发明名称为“一种益气活血的药物组合物及其制备方法检测方法和用途”的发明专利公开了一种具有益气活血作用的药物组合物,该药物组合物具有扶正固本,益气活血,行脉止痛的作用。
本发明在前述发明专利的基础上继续对该药物的药效作用进行了深入研究。
发明内容
本发明目的在于公开一种药物的新用途,一种具有益气活血作用的药物在制备保护心肌细胞作用的药物中的应用。
本发明的技术方案为:
本发明药物的原料药组成为:
本发明药物的原料药组成优选为:
本发明药物的原料药组成优选为:
本发明药物的原料药组成为:
本发明药物的原料药组成为:
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺,制成临床可接受的片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
本发明药物的制备方法包括如下步骤:
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮1-3次,每次1-3小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90-95℃时相对密度为1.05~1.15,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90-95℃时相对密度为1.15~1.25的清膏,与上述药粉混合,制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
本发明药物的制备方法优选包括如下步骤:
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06~1.12,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90℃时相对密度为1.20~1.22的清膏,与上述药粉混合,制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
本发明药物制剂中滴丸的制备方法包括如下步骤:
取原料药,用8—12重量倍的水浸40—80分钟,煮沸1—3小时,取出药液,药渣再加6—10重量倍的水煎煮70—110分种,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1—3倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量2—4倍的60-90%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1—2体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.05-1.20,喷雾干燥,得提取物喷雾干燥药粉,加入常规辅料制备得滴丸。
本发明药物制剂中滴丸的制备方法优选包括如下步骤:
取原料药,用10重量倍的水浸60分钟,煮沸2小时,取出药液,药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1.5倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量3倍的70%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1.5体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08-1.15,喷雾干燥,得提取物喷雾干燥药粉,加入常规辅料制备得滴丸。
其中,上述制备方法中喷雾干燥的条件控制为:进料速度为35—40ml/min,雾化速度:25000—35000rpm,进风温度:130—160℃,出风温度:70—80℃。
其中,上述制备方法中喷雾干燥的条件控制优选为:进料速度为37ml/min,雾化速度:30000rpm,进风温度:145~147℃,出风温度:71~76℃。
其中,上述制备方法中得提取物后,滴丸的制备方法还可以为:
称取聚乙二醇-4000,于60—90℃下水浴至彻底溶胀,加入上述提取物喷雾干燥药粉,加入比例为药粉:聚乙二醇-4000=1:2—6,于80—90℃下保温搅拌均匀,使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中;移入滴丸机中,保持滴距和滴温,调整滴制参数为:油浴温度:80—90℃,药液温度:75—85℃,滴盘温度:85—90℃,制冷温度:10—15℃,管口温度:35—40℃,滴头口径为:3mm/5mm,滴速:1滴/1秒-----1滴/7秒;调节开关使液滴适速滴入冷凝剂二甲基硅油或液体石蜡中,药滴经过冷凝收缩成滴丸,收集滴丸,以转速1000-4000转/分离心脱油,再进入筛选干燥机进行筛选干燥,即得本发明药物滴丸。
其中,上述制备方法中得提取物后,滴丸的制备方法还可以优选为:
称取聚乙二醇-4000,于80-85℃下水浴至彻底溶胀,加入上述提取物喷雾干燥药粉,加入比例为药粉:聚乙二醇-4000=1:4,于85℃下保温搅拌均匀,使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中;移入滴丸机中,保持滴距和滴温,调整滴制参数为:油浴温度:85℃,药液温度:80℃,滴盘温度:87℃,制冷温度:12℃,管口温度:37℃,滴头口径为:3mm/5mm,滴速:1滴/2秒-----1滴/5秒;调节开关使液滴适速滴入冷凝剂二甲基硅油或液体石蜡中,药滴经过冷凝收缩成滴丸,收集滴丸,以转速1500-3000转/分离心脱油,再进入筛选干燥机进行筛选干燥,即得本发明药物滴丸。
本发明带来的有益效果:
本发明药物能显著促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;
本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
附图说明
图1本发明实施例1片对心肌细胞的影响(与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与缺氧模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。组别如下:A:空白组;M:模型组;B:阳性对照组;C:本发明实施例1低剂量组;D:本发明实施例1中剂量组;E:本发明实施例1高剂量组);
下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1本发明药物片剂-本发明实施例1含药血清对心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用的试验研究。
1实验材料与仪器
给药组按本发明实施例1制备。DMEM培养基,胰蛋白酶,四甲基偶氮唑蓝(MTT)购于美国GIBCO公司。胎牛血清为杭州四季青公司产品。二甲基亚砜(DMSO)购于Amresco公司。细胞因子检测试剂盒及乳酸脱氢酶检测试剂盒购自BD公司。
酶标仪(Multiskan MK3)购于上海雷勃分析仪器有限公司。紫外可见分光光度计(UV-2501PC)为日本岛津公司产品,细胞培养箱为THERMO产品。
2实验方法
2.1含药血清的制备
将20只SD大鼠随机分为5组,以便制作含药血清。A组灌服等量生理盐水;B组灌胃复方丹参片组混悬液563mg/kg体重(112.6mg/只/200g,相当于成人一倍临床等效剂量),每日1次,连续给药3d;C灌胃本发明实施例1片混悬液563mg/kg体重(112.6mg/只/200g,相当于成人一倍临床等效剂量),每日1次,连续给药3d;D组灌胃本发明实施例1片混悬液2815mg/kg体重(相当于成人五倍临床等效剂量)每日1次,连续给药3d;E组灌胃本发明实施例1片混悬液5630mg/kg体重(相当于成人十倍临床等效剂量)每日1次,连续给药3d。末次给药后1h,清醒状态下行颈动脉分离插管采血,无菌分离血清,即得含药血清和空白血清,56℃,30min灭活,-20℃存放备用。
2.2大鼠乳鼠心肌细胞原代培养
取出生1—3d的乳鼠,进行心肌细胞的原代培养:无菌条件下取出乳鼠心尖部组织,以0.125%胰酶:0.08%胶原酶=1:1混和消化液分次消化,用含10%FBS的MEM终止消化,200目筛网过滤,800rpm、5min离心2次;沉淀的细胞以DMEM重悬后常规孵育1.5h,以差速贴壁培养法纯化细胞;调整细胞浓度为2*106ce lls/mL接种于6孔或96孔板,常规培养,24h换液1次,4d后细胞成片融合,长满视野90%以上用于实验。
2.3缺氧/复氧模型的建立
预先用高纯氮气(999ml/L)饱和无糖Hanks液,通气持续时间40min左右,即为低氧液;用高纯氧(999ml/L)饱和Hanks液(通气持续时间40min左右),即为复氧液。用低氧液置换正常培养液,并将培养板置于密封保鲜袋中,充入高纯氮气造成心肌细胞低氧,封口培养2h;2h后以复氧液置换低氧液,排出氮气并充以高纯氧,继续培养4h即为心肌细胞复氧。
2.4实验分组
取搏动良好的细胞,随机分为正常细胞培养组(正常对照组,即A组,培养于普通细胞培养箱),缺氧/复氧模型组,置于培养箱中培养,依照“2.1含药血清的制备”中的血清获取情况进行分组:A组:空白组,采用A组大鼠血清(占10%,下同)培养,细胞培养于普通培养箱;M组:模型组,采用A组大鼠血清培养,细胞培养于缺氧/复氧装置中;B组:阳性对照组,采用B组大鼠血清培养,细胞培养于缺氧/复氧装置中;C组:本发明实施例1低剂量组,采用C组大鼠血清培养,细胞培养于缺氧/复氧装置中;D组:本发明实施例1中剂量组,采用D组大鼠血清培养,细胞培养于缺氧/复氧装置中;E组:本发明实施例1高剂量组,采用E组大鼠血清培养,细胞培养于缺氧/复氧装置中。
2.5观察指标及检测方法
ELISA法检测TNF-α及IL-1β的含量;比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量。
2.6统计学分析
所有数据以均数±标准差表示(X±S),两组间均数比较用t检验,多组间均数比较用单因素方差分析(one-way ANOVA),各组间两两比较采用SNK-q检验。采用SPSS 17.0统计分析软件进行处理,P<0.05有统计学意义。
3实验结果
3.1MTT法检测本发明实施例1片对心肌细胞的影响
MTT实验结果发现,与正常对照组比较,缺氧损伤的心肌细胞增殖受到明显影响(P<0.01)。阳性药物和本发明实施例1均能显著促进细胞的生长(P<0.01),见附图1。
3.2ELISA法检测TNF-α及IL-1β的含量
取培养上清液,以ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β含量,与正常组相比,模型组心肌细胞TNF-α和IL-1β表达显著上升(P<0.01)。与模型组相比,复方丹参组及本发明实施例1各剂量组均能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达(P<0.01,P<0.05)。见表1
表1本发明实施例1片含药血清对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞细胞因子表达的影响
注:与正常组比较,*P<0.05,**P<0.01;与缺氧模型组比较,ΔP<0.05,ΔΔP<0.01。n为重复孔数。
3.3比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化
取培养上清液,按照试剂盒的要求,采用比色法检测检测LDH含量。预先绘制标准曲线,用以对OD值进行定量与正常组相比,模型组心肌细胞LDH含量显著上升(P<0.01);与模型组相比复方丹参组及本发明实施例1各剂量组均能显著降低心肌细胞LDH含量(P<0.01)。见表2
表2本发明实施例1片含药血清对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞LDH的影响
注:与正常组比较,*P<0.05,**P<0.01;与缺氧模型组比较,ΔP<0.05,ΔΔP<0.01。n为重复孔数。
4结论
本发明实施例1片含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
下述实施例均能实现上述实验例所述的效果。
具体实施方式
实施例1:本发明药物片剂
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06~1.12,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90℃时相对密度为1.20~1.22的清膏,与上述药粉混合,制成颗粒,干燥,压制成1000片(小片),包糖衣或薄膜衣片,或压制成500片(大片),包薄膜衣,即得。小片每片重0.3g,每日服用3次,一次4~6片;大片每片重0.6g,每日服用3次,一次2~3片。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例2:本发明药物胶囊剂
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06~1.12,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90℃时相对密度为1.20~1.22的清膏,与上述药粉混合,制成胶囊剂。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例3:本发明药物颗粒剂
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06~1.12,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90℃时相对密度为1.20~1.22的清膏,与上述药粉混合,制成颗粒剂。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例4:本发明药物丸剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成丸剂。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例5:本发明药物口服液
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成口服液。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例6:本发明药物注射剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成注射剂。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例7:本发明药物滴丸
取原料药,用10重量倍的水浸60分钟,煮沸2小时,取出药液,药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1.5倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量3倍的70%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1.5体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08-1.15,喷雾干燥,得提取物喷雾干燥药粉,加入常规辅料制备得滴丸,丸重49-52mg/粒,口服,一次10粒,一日3次。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
实施例8:本发明药物滴丸
取原料药,用10重量倍的水浸60分钟,煮沸2小时,取出药液,药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1(WLD)大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1.5倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量3倍的70%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1.5体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08-1.15,喷雾干燥,喷雾干燥的条件为:进料速度为37ml/min,雾化速度:30000rpm,进风温度:145~147℃,出风温度:71~76℃,得提取物喷雾干燥药粉;称取聚乙二醇-4000,于80-85℃下水浴至彻底溶胀,加入上述提取物喷雾干燥药粉,加入比例为药粉:聚乙二醇-4000=1:4,于85℃下保温搅拌均匀,使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中;移入滴丸机中,保持滴距和滴温,调整滴制参数为:油浴温度:85℃,药液温度:80℃,滴盘温度:87℃,制冷温度:12℃,管口温度:37℃,滴头口径为:3mm/5mm,滴速:1滴/2秒-----1滴/5秒;调节开关使液滴适速滴入100﹟二甲基硅油或液体石蜡中,药滴经过冷凝收缩成滴丸,收集滴丸,以转速1500-3000转/分离心脱油,再进入筛选干燥机进行筛选干燥,即得本发明药物滴丸,丸重50mg/粒,口服,一次10粒,一日3次。用于保护心肌细、促进心肌细胞的生长;能显著降低TNF-α和IL-1Β的表达;能显著降低心肌细胞LDH含量;本发明药物含药血清可抑制缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β;减少乳酸脱氢酶的合成,保护心肌细胞缺氧/复氧损伤。
Claims (13)
1.一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞的药物中的应用,所述药物的原料药组成为:黄芪100-150重量份、党参80-120重量份、丹参60-100重量份、葛根60-100重量份、淫羊藿60-100重量份、山楂60-100重量份、地黄40-80重量份、当归40-80重量份、黄连40-80重量份、醋延胡索40-80重量份、灵芝40-80重量份、人参20-30重量份、炙甘草20-30重量份;取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺,制成临床可接受的片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的保护心肌细胞是指促进心肌细胞生长、降低心肌细胞TNF-α和IL-1Β的表达、降低心肌细胞LDH含量。
3.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物的原料药组成为:
4.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物的原料药组成为:
5.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物的原料药组成为:
6.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物的原料药组成为:
7.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物的制备方法包括如下步骤:
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮1-3次,每次1-3小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90-95℃时相对密度为1.05~1.15,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90-95℃时相对密度为1.15~1.25的清膏,与上述药粉混合,制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述药物的制备方法包括如下步骤:
取原料药中的人参、黄连、醋延胡索、山楂与一半量的黄芪,粉碎成细粉,其余八味原料药与剩余黄芪加水煎煮2次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至90℃时相对密度为1.06~1.12,放冷,加一倍量乙醇使沉淀,取上清液,回收乙醇,并浓缩至90℃时相对密度为1.20~1.22的清膏,与上述药粉混合,制成片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、滴丸、软胶囊剂、缓释剂、口服液体制剂或冻干粉针剂。
9.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于所述药物滴丸制剂的制备方法包括如下步骤:
取原料药,用8—12重量倍的水浸40—80分钟,煮沸1—3小时,取出药液,药渣再加6—10重量倍的水煎煮70—110分种,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1—3倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量2—4倍的60-90%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1—2体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.05-1.20,喷雾干燥,得提取物喷雾干燥药粉,加入常规辅料制备得滴丸。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于所述药物滴丸制剂的制备方法包括如下步骤:
取原料药,用10重量倍的水浸60分钟,煮沸2小时,取出药液,药渣再加8重量倍的水煎煮90分钟,合并二次药液,滤过;药液通过已处理好的JD-1大孔吸附树脂柱,树脂用量为原料药重量的1.5倍,控制吸附流速2-4ml/min,吸附完毕,用水冲洗树脂柱至流出液澄清后,用树脂重量3倍的70%乙醇洗脱,收集洗脱液,后用1.5体积倍水冲洗,合并洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度为1.08-1.15,喷雾干燥,得提取物喷雾干燥药粉,加入常规辅料制备得滴丸。
11.如权利要求9或10所述的应用,其特征在于所述喷雾干燥的条件为:进料速度为35—40ml/min,雾化速度:25000—35000rpm,进风温度:130—160℃,出风温度:70—80℃。
12.如权利要求10所述的应用,其特征在于所述喷雾干燥的条件为:进料速度为37ml/min,雾化速度:30000rpm,进风温度:145~147℃,出风温度:71~76℃。
13.如权利要求9所述的应用,其特征在于在得提取物物喷雾干燥药粉后,按如下方法制备成滴丸:
称取聚乙二醇-4000,于80-85℃下水浴至彻底溶胀,加入上述提取物喷雾干燥药粉,加入比例为药粉:聚乙二醇-4000=1:4,于85℃下保温搅拌均匀,使药粉完全溶解分散在聚乙二醇-4000中;移入滴丸机中,保持滴距和滴温,调整滴制参数为:油浴温度:85℃,药液温度:80℃,滴盘温度:87℃,制冷温度:12℃,管口温度:37℃,滴头口径为:3mm/5mm,滴速:1滴/2秒-----1滴/5秒;调节开关使液滴适速滴入冷凝剂二甲基硅油或液体石蜡中,药滴经过冷凝收缩成滴丸,收集滴丸,以转速1500-3000转/分离心脱油,再进入筛选干燥机进行筛选干燥,即得本发明药物滴丸。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610462835.8A CN105963415A (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610462835.8A CN105963415A (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105963415A true CN105963415A (zh) | 2016-09-28 |
Family
ID=57022643
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610462835.8A Pending CN105963415A (zh) | 2016-06-23 | 2016-06-23 | 一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105963415A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107837339A (zh) * | 2017-11-17 | 2018-03-27 | 莫显刚 | 一种保护心肌细胞的药物及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101953935A (zh) * | 2009-07-13 | 2011-01-26 | 青岛国风药业股份有限公司 | 一种益气活血的药物组合物及其制备方法检测方法和用途 |
CN103768231A (zh) * | 2012-10-19 | 2014-05-07 | 青岛国风药业股份有限公司 | 一种益气活血的药物组合物的新用途 |
-
2016
- 2016-06-23 CN CN201610462835.8A patent/CN105963415A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101953935A (zh) * | 2009-07-13 | 2011-01-26 | 青岛国风药业股份有限公司 | 一种益气活血的药物组合物及其制备方法检测方法和用途 |
CN103768231A (zh) * | 2012-10-19 | 2014-05-07 | 青岛国风药业股份有限公司 | 一种益气活血的药物组合物的新用途 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
黄山等: "《心脏标志物实验室检测应用指南》", 31 July 2015, 中国科学技术出版社 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107837339A (zh) * | 2017-11-17 | 2018-03-27 | 莫显刚 | 一种保护心肌细胞的药物及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2002348988B2 (en) | Composition comprising wenguanguo extracts, methods for preparing same and uses thereof | |
CN112972547B (zh) | 一种治疗气血两虚症候的中药组合物及其制备方法和应用 | |
MXPA06009232A (es) | Medicamento basado en plantas para el tratamiento de hepatitis c. | |
CN103191358B (zh) | 一种用于补气健脾的药物组合物 | |
CN113616747A (zh) | 一种感染性疾病康复用的中药组合物及其用途 | |
CN102120015A (zh) | 一种用于舒肝解郁、安神定志的中药及制法和质量标准 | |
CN104288245B (zh) | 抗衰老和增强体质的药物组合物及其制备方法和检测方法 | |
CN102266503B (zh) | 一种无糖型风热感冒颗粒剂及其制备方法 | |
CN116785345A (zh) | 具有调节免疫功能的黄芪扶正茶及其制备方法 | |
CN105998340A (zh) | 一种益气活血药物在制备保护血管内皮细胞药物中的应用 | |
CN109512857A (zh) | 一种抑制肿瘤生长的甘露糖-中药复合物 | |
CN103550164B (zh) | 一种益气健脾的归脾丸(微丸) | |
CN103432421B (zh) | 一种增强免疫力的药物组合物 | |
CN105963415A (zh) | 一种益气活血的药物在制备保护心肌细胞药物中的应用 | |
CN103099788A (zh) | 中药煮散颗粒组合物及其制备、煎煮方法和剂量关系 | |
CN103599354B (zh) | 一种松花粉组合物及其应用 | |
CN112516276A (zh) | 预防新型冠状病毒肺炎的中药及其制备工艺和中药饮品 | |
CN100361650C (zh) | 一种障眼明胶囊及其制备工艺 | |
CN117045744B (zh) | 一种补气健脾和/或化痰散结的中药组合物及其制备方法和用途 | |
CN105012522A (zh) | 一种滋肾健脑的中药、制备方法及用途 | |
CN104771595A (zh) | 一种增强免疫力的中药组合物及其制备方法 | |
CN100348251C (zh) | 一种治疗糖尿病的药物山药参芪丸 | |
CN107970297A (zh) | 一种镇静安神的药物 | |
CN114404487B (zh) | 黄根或其提取物在制备用于治疗胶质瘤的药物中的应用 | |
CN105943701A (zh) | 益气活血药物在制备失眠药物中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160928 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |