CN101856112A - 一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法 - Google Patents

一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法 Download PDF

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潘亚莲
张国清
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Weihai Kangboer Biolog Pharmaceutical Co.,Ltd.
Original Assignee
WUXI CITY TIANCIKANG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
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Abstract

本发明公开了一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法,所述保健食品包括以下重量百分比的组分:蜂胶粉16~36%,紫苏子油60~80%,蜂蜡1~5%。该保健食品的制备方法为:将蜂蜡、紫苏子油加热熔化,搅拌混匀,放至室温;取蜂胶粉过筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,研磨成质地细腻的浆状物,静置抽真空至无气泡,加压出料,过筛,装入胶囊。本发明很好地将蜂胶及紫苏两种原料联用,总黄酮的含量高,增强人体的免疫力,无任何毒副作用,适用于各个年龄段的人群。

Description

一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种营养保健品及其制备方法,特别是涉及一增强人体免疫力的保健食品及其制备方法。
背景技术
健康的身体和充沛的精力是人们适应现代社会竞争的资本,然而每日紧张的工作和学习会使机体处于透支状态,如得不到及时的休息和调整,日积月累,就会导致机体免疫力低下。随着亚健康人群逐渐增多,不少消费者希望通过食用保健品来改善身体状况。据上海致联市场研究有限公司对中国内地654个县级以上城市,20~64岁的成年城市居民的抽样调查显示,消费者购买保健品所要达到的目的排名前四位的分别是:调节免疫力、改善骨骼状况、抗疲劳、改善睡眠。其中东南沿海、黄河中游和西南地区的消费者重视调节免疫能力的比例相对其它地区较高。由此可见,经历了SARS和禽流感的恐慌之后,“提倡保健,预防为主”观点已被群众广泛接受,增强免疫力、提高机体的抗病能力也已成为共识。因此,调节机体免疫力的保健食品具有巨大市场需求量,越来越多的人力物力投入到这块领域中。
蜂胶是蜜蜂将胶源性植物上采集的树胶和树脂,混入其上颚腺分泌物与蜂蜡等加工而成的一种天然物质,含有黄酮类化学成分,现代药理研究表明,蜂胶具有增强免疫力作用。紫苏在我国已有悠久的种植历史,自古就作为中草药发挥作用。本品所用紫苏子油是由紫苏子经压榨制得,现代医学研究证实,紫苏子油具有调节免疫功能,目前已广泛应用于医药和保健食品领域。但是由于技术原因,蜂胶和紫苏的联用比较少,目前仅中国专利200410014842.9记载了一种超临界可溶性蜂胶液配方及其加工工艺,此专利公开加工工艺的同时并未对蜂胶液的功能进行深入研究,作用不明显。
发明内容
发明目的:本发明针对现有技术的不足,提供了一种增强人体免疫力的保健食品以及制备方法。
技术方案:本发明所述的一种增强人体免疫力的保健食品,包括以下重量百分比的组分:蜂胶粉16~36%,紫苏子油60~80%,蜂蜡1~5%。
其中,所述蜂胶粉由蜂胶原料经过人工去杂,80%乙醇提取,粗滤,加压精滤,浓缩,干燥,提纯蜂胶,低温冷冻,粗粉碎,投加20%碳酸钙,细粉碎,过筛混合而成。
其中,所述紫苏子油由紫苏子经润湿,蒸炒,压榨,过滤得到。
制备所述的一种增强人体免疫力的保健食品的方法包括如下步骤:
(1)将蜂蜡、紫苏子油加热熔化,搅拌混匀,放至室温;
(2)取蜂胶粉,过筛,得蜂胶粉细粉,按配方量将蜂胶粉细粉和蜂蜡、紫苏子油的混合物料混合,搅拌混匀,研磨成质地细腻的浆状物,静置抽真空至无气泡,加压出料,过筛,装入胶囊,每粒胶囊含上述混合物0.6g。
其中,步骤(2)优先选用80目筛。
其中,步骤(2)中静止抽真空的真空度在0.06~0.08Mpa。
其中,步骤(2)中研磨的速度为2400~2600r/min。
本发明是以蜂胶粉、紫苏子油为主要原料制成的具有增强免疫力功能的保健食品。其中,蜂胶中含有黄酮类化学成分,现代药理研究表明,具有增强免疫力作用,本品所用蜂胶粉是在蜂胶中加入一定量的碳酸钙制得;紫苏子油经现代医学研究证实,具有调节免疫功能,目前已广泛应用于医药和保健食品领域。本发明通过各原料的共同作用,从而达到增强免疫力功能,是科学合理的。2005版药典规定,蜂胶的日用量为0.2-0.6g,本发明蜂胶粉中蜂胶占80%,每日蜂胶服用量为0.5g,在标准范围内;紫苏子的日用量为3-9g,本发明紫苏子油的每日服用量为1.715g,按出油率36%计算,折合紫苏子为4.76g,亦在标准范围内。
本发明中紫苏子油为油状物,对于含油量高的药物不适宜制成片剂、硬胶囊等固体制剂,但可制成软胶囊剂型。同时软胶囊剂型具有以下特点:良好的隔离功能,能将对光、氧敏感的功能性物料与空气、光线隔离开来,避免有效物质的氧化,使产品在有效期内保持含量稳定,保证功效的发挥;定量准确,吸收快;产品外观新颖,诱人,对消费者很有吸引力和新奇感;表面光滑,口感好,易吞服;携带安全,食用方便。故本发明选择软胶囊剂型。
有益效果:本发明很好地将蜂胶及紫苏两种原料联用,总黄酮的含量高,能增强人体的免疫力,适用于各个年龄段的人群,无任何副作用,值得大力提倡。
具体实施方式
实施例1:
将4%的蜂蜡、80%的紫苏子油(单位重量百分数,下同)置真空均质乳化机中,加热熔化,搅拌混匀,得混合物料,放至室温;取16%的蜂胶粉过80目筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物,控制胶体磨转速2400r/min。0.06Mpa静置抽真空至无气泡,加压出料,过80目筛网,装入胶囊,每粒胶囊含上述药物0.6g。
实施例2:
将5%的蜂蜡、75%的紫苏子油(单位重量百分数,下同)置真空均质乳化机中,加热熔化,搅拌混匀,得混合物料,放至室温;取20%的蜂胶粉过80目筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物,控制胶体磨转速2600r/min。0.08Mpa静置抽真空至无气泡,加压出料,过80目筛网,装入胶囊,每粒胶囊含上述药物0.6g。
实施例3:
将3%的蜂蜡、71%的紫苏子油(单位重量百分数,下同)置真空均质乳化机中,加热熔化,搅拌混匀,得混合物料,放至室温;取26%的蜂胶粉过80目筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物,控制胶体磨转速2500r/min。0.07Mpa静置抽真空至无气泡,加压出料,过80目筛网,装入胶囊,每粒胶囊含上述药物0.6g。
实施例4:
将2%的蜂蜡、68%的紫苏子油(单位重量百分数,下同)置真空均质乳化机中,加热熔化,搅拌混匀,得混合物料,放至室温;取30%的蜂胶粉过80目筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物,控制胶体磨转速2400r/min。0.06Mpa静置抽真空至无气泡,加压出料,过80目筛网,装入胶囊,每粒胶囊含上述药物0.6g。
实施例5:
将4%的蜂蜡、60%的紫苏子油(单位重量百分数,下同)置真空均质乳化机中,加热熔化,搅拌混匀,得混合物料,放至室温;取36%的蜂胶粉过80目筛,得蜂胶粉细粉,加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中,搅拌混匀,用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物,控制胶体磨转速2600r/min。0.08Mpa静置抽真空至无气泡,加压出料,过80目筛网,装入胶囊,每粒胶囊含上述药物0.6g。
实施例6:
本发明增强免疫力功能实验研究
1.材料
1.1样品:由无锡市天赐康生物科技有限公司提供。
1.2试剂、实验器材及动物
1.2.1试剂
SRBC(绵羊红细胞),Hank’s液,DNFB(2,4二硝基氟苯),SA缓冲液,琼脂糖,印度墨汁,Na2CO3(碳酸钠),RPMI1640培养液,鸡红细胞悬液,生理盐水,YAC-1细胞。以上试剂由四川省疾病预防控制中心提供。
1.2.2实验器材
100μ微量注射器,二氧化碳培养箱,电子分析天平,723分光光度仪,离心机,手术器械。
1.2.3实验动物
四川省医学科学院实验动物研究所提供的昆明种小鼠160只,全雌,体重18-22g,生产许可证号为SCXK(川)2004-16SPF级;试验动物房为屏障系统,使用许可证号为川实动管SYXK(川)2008-043。温度20-25℃,相对湿度40~70%。
2.实验方法
2.1剂量选择
受试物设400mg/kg.BW、800mg/kg.BW、1200mg/kg.BW三个剂量组(分别相当于人体推荐摄入量的10倍、20倍、30倍),分别称取10g、20g、30g受试物加蒸馏水至250ml混匀,冷藏保存,用完再配,另设植物油阴性对照组,每组40只动物。分为免疫一组、二组、三组、四组,其中一组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;二组用于NK细胞活性测定及淋巴细胞转化实验;三组用于抗体生成细胞实验、血清溶血素测定和迟发型变态反应;四组用于小鼠碳廓清实验。小鼠按20mg/kg.BW体重一次经口灌胃,连续给予30天,每周称一次体重,调整灌胃体积。
2.2实验步骤
2.2.1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法):连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射20%的鸡红细胞悬液1ml,30分钟后,颈椎脱臼处死,将其固定在鼠板上,正中剪开腹壁皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1分钟,吸出腹腔洗液1ml,平均滴于2张载玻片上,置湿盒37℃30分钟,取出在生理盐水漂洗、晾干、固定,4%GiemsaPBS染色3分钟,蒸馏水漂洗晾干,镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。
2.2.2NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法):连续灌胃30天后,颈椎脱臼处死动物,取出脾脏,撕碎,过200目筛网后,用Hank’s液洗3次,用完全RPMI1640培养液配成2×107个/ml细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300μl分3孔置于96孔培养板中,每孔100μl,每孔加靶细胞(YAC-1细胞,4×105个/ml)100μl,同时做靶细胞自然释放孔(靶细胞100μl+培养液100μl)及最大释放孔(靶细胞100μl+2.5%Triton100μl)各8孔,37℃5%CO2培养4小时,取出1500r/min离心5min。将各孔上清液100μl置于另一培养板中,每孔再加入100μl基质液,10分钟后加1mol/L的HCL30μl终止反应,在490nm处测定OD值,计算NK细胞活性率。
2.2.3ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验(MTT法):首先进行脾细胞悬液的制备。将细胞浓度调整为3×106个/ml,然后将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔1ml,一孔加75μlConA液,另一孔作对照,置5%CO2孵箱37℃培养72h。培养结束前4h,每孔轻轻吸去上清液0.7ml加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液,同时加入MTT(5mg/ml)50μ/孔继续培养4h,培养结束后,每孔加入1ml酸性异丙醇,使紫色结晶完全溶解,然后将每孔液体移入比色杯中,用723分光光度仪于570nm波长处比色测定光密度值。
2.2.4抗体生成细胞检测(Jernr改良玻片法):连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射2%压积SRBC0.2ml,将免疫5天半后的小鼠颈椎脱臼处死,取出脾脏放在盛有Hank’s液的平皿内,制成脾细胞悬液。将琼脂糖配成1%水溶液,水浴煮30min,与等量双倍Hank’s液混合,分装小试管,每管0.5ml,再向管内加10%(用SA缓冲液配制)压积SRBC50μl,脾细胞悬液各20μl做两个平行样,迅速混匀后,倾倒于琼脂糖薄层玻片上,待琼脂凝固后,将玻片水平扣放在片架上,放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h,然后将补体加入到玻片架凹槽内,继续温育1.5h,计数溶血空斑数。
2.2.5血清溶血素测定(血凝法):在连续灌胃30天后,每只小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml免疫,继续灌胃5天后,摘除眼球取血于离心管内,放置1h,剥离,2000r/min离心10min,收集血清,用生理盐水将血清作倍比稀释,每份稀释12孔,将不同稀释度的血清置于血凝板中,每孔100μl,再加入0.5%SRBC悬液100μl,混匀,置湿盒37℃3h后观察结果,记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。
2.2.6迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法):灌胃30天后,给小鼠腹腔注射2%压积SRBC(0.2ml/每鼠)致敏4天后,测量左后足跖厚度,然后再测量部位皮下注射20%(v/v)SRBC(20μl/每鼠),于注射后24h测量左后足跖厚度,同一位测量三次,取平均值,以攻击前后足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示DTH的程度。
2.2.7小鼠碳廓清试验:连续灌胃30天后,于小鼠尾静脉注射用4倍生理盐水稀释的印度墨汁,按0.1ml/10g墨汁注入后立即计时,于注入墨汁后第2、10min分别从内眦静脉丛取血20μl,加到2mlNa2CO3溶液中,以Na2CO3溶液作空白对照,用723分光光度计在600nm处测定光密度值。取血后处死小鼠,取肝、脾称重,计算吞噬指数。
3.试验数据统计
试验数据采用SPSS10.0 for Windows软件包处理。对照组与剂量组的数据经方差齐性检验,方差齐,进行方差分析,如P值小于0.05,则用Dunnett法进行两两比较;若方差不齐,则进行数据转换,仍不齐,改用秩和检验,如P值小于0.05,则用Dunnett’sT3法进行两两比较。
4.结果
4.1本发明对小鼠体重的影响见表1-4。
表1 各组小鼠的初始体重(X±S)
Figure GSA00000058263200062
表2 各组小鼠的中期体重(X±S)
Figure GSA00000058263200064
表3 各组小鼠的结束体重(X±S)
Figure GSA00000058263200066
表4 本发明对小鼠体重增重的影响(X±S)
由表1-4可见,本发明免疫一组、免疫二组、免疫三组及免疫四组小鼠的初始体重与阴性对照组相比,经方差齐性检验,方差齐(P>0.05),且方差分析结果(P>0.05),说明各组小鼠与阴性对照组之间的初始体重是均衡的。三个剂量组小鼠试验中期、末期的体重以及试验期间小鼠体重的增长与阴性对照组相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05),即本发明对小鼠的体重增长无影响。
4.2本发明对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
表5 本发明对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响(X±S)
Figure GSA00000058263200072
由表5可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的碳廓清能力与阴性对照组相比,经统计学处理,中剂量组有显著性差异(P<0.05)
表6 本发明对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响(X±S)
Figure GSA00000058263200074
由表6可见,连续灌胃30天后,三个剂量组动物的吞噬率和吞噬指数与阴性对照组相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。
由表5、表6可见,本发明对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性。
4.3本发明对小鼠细胞免疫的影响
表7 本发明对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响(X±S)
由表7可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的足跖肿胀度与阴性对照组相比,经统计学处理,高剂量组动物的足跖肿胀度有显著性差异(P<0.05)
表8本发明对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响(X±S)
Figure GSA00000058263200078
由表8可见,连续灌胃小鼠30天后,三个剂量组小鼠的淋巴细胞增殖能力与阴性对照相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。
由表7、表8可见本发明对小鼠细胞免疫试验结果为阴性。
4.4本发明对小鼠体液免疫的影响
表9 本发明对小鼠抗体生成细胞的影响(X±S)
Figure GSA00000058263200082
由表9可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的溶血空斑数与阴性对照相比,经统计学处理,无显著性差异(P>0.05)。
表10 本发明对小鼠血清溶血素的影响(X±S)
Figure GSA00000058263200084
由表10可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠的抗体积数与阴性对照组相比,经统计学处理,低、高剂量组有显著性差异(P<0.05、P<0.05)
由表9、表10可见,本发明对小鼠体液免疫试验结果呈阳性。
4.5本发明对小鼠NK细胞活性的影响
表11 本发明对小鼠NK细胞活性的影响(X±S)
由表11可见,连续灌胃30天后,三个剂量组小鼠NK细胞活性与阴性对照相比,经统计学处理,中、高剂量组有显著性差异(P<0.05、P<0.05)。本发明对小鼠的NK细胞活性试验结果显阳性。
5.总结
本发明连续灌胃小鼠30天后,对小鼠体重无明显影响(P>0.05);对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性;对小鼠的细胞免疫试验结果阴性;对小鼠的体液免疫试验,三个剂量组的抗体积数与阴性对照组比较,低、高剂量组差异均有显著性(P<0.05),试验结果阳性;对小鼠的NK细胞试验,三和剂量组NK细胞活性与阴性对照组比较,中、高剂量组差异均有显著性(P<0.05),试验结果阳性。
依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版可以判定,本发明对动物具有增强免疫力的功能。

Claims (7)

1.一种增强人体免疫力的保健食品,其特征在于它包括以下重量百分比的组分:蜂胶粉16~36%,紫苏子油60~80%,蜂蜡1~5%。
2.根据权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品,其特征在于所述蜂胶粉由蜂胶原料经过人工去杂,80%乙醇提取,粗滤,加压精滤,浓缩,干燥,提纯蜂胶,低温冷冻,粗粉碎,投加20%碳酸钙,细粉碎,过筛混合而成。
3.根据权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品,其特征在于所述紫苏子油由紫苏子经润湿,蒸炒,压榨,过滤得到。
4.制备权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品的方法,其特征在于它包括如下步骤:
(1)将蜂蜡、紫苏子油加热熔化,搅拌混匀,放至室温;
(2)取蜂胶粉,过筛,得蜂胶粉细粉,按配方量将蜂胶粉细粉和蜂蜡、紫苏子油的混合物料混合,搅拌混匀,研磨浆状物,静置抽真空至无气泡,加压出料,过筛,装入胶囊。
5.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法,其特征在于步骤(2)选用80目筛。
6.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法,其特征在于步骤(2)中静止抽真空的真空度在0.06~0.08Mpa。
7.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法,其特征在于步骤(2)中研磨的速度为2400~2600r/min。
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