CN101785816B

CN101785816B - 一种石菖蒲提取物、含其药物组合物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN101785816B
Application number: CN2009100458697A
Authority: CN
Inventors: 董文心; 杨培明; 顾丰华; 许海燕; 陈嘉; 倪翔; 陈佳; 张扬
Original assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Current assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Priority date: 2009-01-23
Filing date: 2009-01-23
Publication date: 2012-07-04
Anticipated expiration: 2029-01-23
Also published as: CN101785816A

Abstract

本发明公开了一种石菖蒲提取物的制备方法，其包括如下步骤：将石菖蒲用水提取，然后向提取液中加入醇类溶剂进行沉降，收集沉淀，干燥，即可得本发明的石菖蒲提取物。本发明还公开了由上述方法制得的石菖蒲提取物，含有本发明石菖蒲提取物的药物组合物，以及其在制备提高学习和记忆能力的药物、保健品或食品，或者在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。本发明的石菖蒲提取物具有显著的改善学习和记忆能力的效果，并且毒副成分α和β-细辛醚的含量低，安全性高，其为制备提高学习和记忆能力的药物、保健品或食品，以及治疗老年痴呆症药物提供了新途径。

Description

一种石菖蒲提取物、含其药物组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种石菖蒲提取物、含其药物组合物及其制备方法和应用。

背景技术

目前，老年痴呆症(AD)的病因尚不清楚，因此缺乏有效的治疗药物。国内外的研究人员从病理基础到对症治疗多环节寻找治疗药物。我国的医药研究工作者也在深入进行抗老年痴呆症新药的研发。我国有着广博的中药资源，在我国的中药宝库中有许多能改善学习和记忆的有效药物，这些药物中有可能开发出治疗老年痴呆症的新药。

石菖蒲是中药中为数不多的几味芳香开窍药之一，其常用于醒脑开窍，改善学习记忆的中药配方中。据文献记载，石菖蒲的主要药效学作用包括：①.对中枢神经系统的影响：镇静催眠、抗惊厥、益智健脑；②.对心血管系统的影响：抑制血小板聚集、增强血小板变形能力、抗心率失常、减慢心率；③.对消化系统的影响：抑制胃肠肌电活动；④.对免疫功能的影响：提高正常小鼠血清IgG含量、胸腺重量、血清补体C3含量以及巨嗜细胞的吞噬功能等。石菖蒲与中枢神经系统有关的药理药效研究报道有：①.水提液主要兴奋中脑和大脑，而挥发油既兴奋脊髓、又有抑制中脑和大脑的作用；②.去油煎剂、总挥发油和α、β-细辛醚都对小鼠的学习记忆有改善作用；③.水煎液有一定的抗抑郁作用；④.可以明显提高胆碱乙酰化转移酶的活性，促进乙酰胆碱的合成，这可能是石菖蒲改善学习记忆作用的环节之一。因此，很有必要对石菖蒲进行深入研究，以期开发为临床有效的中枢神经系统的治疗药物。此外，有文献报道α、β-细辛醚有致癌、致突变的可能。因此，为了提高药物治疗的安全性，应尽可能降低有毒副作用的α、β-细辛醚的含量。文献：石菖蒲对学习记忆的影响及突触机制(中国中医基础医学杂志，景玉宏，冯慎远，汤晓琴，2006，8(6)：438-440)研究了石菖蒲提取物对学习记忆的影响及突触机制，文献使用的石菖蒲提取物为将石菖蒲进行常规水提醇沉法制得的浓缩液。文献：石菖蒲的促进小鼠学习记忆和提高耐缺氧力作用(中国现代应用药学，周大兴，李昌煜，张文龙，林乾良，1993，10(4)：4-6)研究了石菖蒲对于小鼠学习记忆和耐缺氧力的作用，文献中使用的石菖蒲提取物同样也是将石菖蒲进行常规水提醇沉法制得的浓缩液。并且，上述文献中，对于石菖蒲提取物中含有的具毒副作用的α、β-细辛醚的含量均没有说明。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有显著的改善学习和记忆能力的石菖蒲提取物、含其药物组合物及其制备方法和应用。

本发明的石菖蒲提取物的制备方法包括如下步骤：将石菖蒲用水提取，然后向提取液中加入醇类溶剂进行沉降，收集沉淀，干燥，即可得本发明的石菖蒲提取物。本发明中，该石菖蒲提取物简称为SCP-3。

其中，所述的用水提取的步骤可按本领域常规提取植物提取物的方法进行操作，优选条件如下：水的用量较佳的为石菖蒲质量的8～12倍，更佳的为10倍。提取的温度较佳的为90～100℃。提取的时间较佳的为15分钟～1.5小时，更佳的为40～80分钟。提取的次数较佳的为1～3次，更佳的为2次。

其中，所述的向提取液中加入醇类溶剂进行沉降的步骤可按本领域常规醇沉方法进行操作，优选条件如下：所述的醇类溶剂较佳的为甲醇和/或乙醇；所述的醇类溶剂的加入量较佳的为加入至溶液中含体积百分比60～90％的醇类溶剂。所述的收集沉淀的步骤可按本领域常规方法操作，如：离心收集沉淀。

其中，所述的干燥可按本领域常规干燥方法操作，较佳的为冷冻干燥或减压干燥。

本发明的提取方法中，各步骤的优选条件可任意组合，即得到本发明的较佳实例。

本发明还涉及上述方法制得的石菖蒲提取物。经HPLC测定，本发明的石菖蒲提取物SCP-3中，α-细辛醚的含量为0.001％～0.002％、β-细辛醚的含量为0.03～0.04％，α和β-细辛醚的总含量为0.03～0.04％。上述百分比为α和/或β-细辛醚的色谱峰积分面积占石菖蒲提取物总色谱峰积分面积的百分比。经药效试验证明，上述石菖蒲提取物均具有显著的改善学习和记忆能力的效果，参见效果实施例。

本发明还进一步涉及一种药物组合物，其含有治疗有效量的本发明的石菖蒲提取物和药学上可接受的载体。所述的药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，其中，稀释剂如淀粉、糖粉、糊精、微晶纤维素、甘露醇、乳糖和大豆油等；粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基纤维素等；崩解剂如羧甲基纤维素钠或低取代羟丙纤维素等；润滑剂如硬脂酸镁或滑石粉等；稳定剂如羧甲基纤维素钠或环糊精等；防腐剂如对羟基苯甲酸乙酯或苯甲酸钠等。另外，还可以在该药物组合物中加入其他辅助剂如香味剂和/或甜味剂如蔗糖、果糖和天冬甜素等。该药物组合物的活性成分是治疗有效量的上述的本发明的石菖蒲提取物。该药物组合物可采用医学领域常规的方法，将所述的活性成分与药学上可接受的载体制成各种剂型。当用于口服时，可将其制备成常规的固体制剂如片剂、胶囊、软胶囊、液体制剂、颗粒剂、煎膏剂、丸剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂或栓剂等；用于注射时，可将其制备成注射液。在各种制剂中，活性成分的重量含量为1～100％，优选的重量含量为50～100％。

本发明进一步涉及上述石菖蒲提取物在制备提高学习和记忆能力的药物、保健品或食品中的应用。

本发明再进一步涉及上述石菖蒲提取物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本发明的石菖蒲提取物及其药物组合物具有显著的改善学习和记忆能力的效果，并且毒副成分α和β-细辛醚的含量低，安全性高，其为制备提高学习和记忆能力的药物、保健品或食品，以及治疗老年痴呆症药物提供了新途径。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

下述实施例中，洗脱液百分比均为体积百分比。

实施例1石菖蒲提取物SCP-3的制备

取200g石菖蒲药材，加2L(2000g)水微沸(100℃)提取2次，1h/次，提取液过滤，加入乙醇至溶液中含体积百分比70％的乙醇，收集沉淀，冷冻干燥即得79.5g。

实施例2石菖蒲提取物SCP-3的制备

取200g石菖蒲药材，加2L(2000g)水微沸(100℃)提取2次，40min/次，提取液过滤，加入乙醇至溶液中含体积百分比60％的甲醇，收集沉淀，冷冻干燥即得76.7g。

实施例3石菖蒲提取物SCP-3的制备

取200g石菖蒲药材，加2L(2000g)水微沸(100℃)提取2次，80min/次，提取液过滤，加入乙醇至溶液中含体积百分比90％的乙醇，收集沉淀，冷冻干燥即得84.6g。

实施例4石菖蒲提取物SCP-3的制备

取200g石菖蒲药材，加2.4L(2400g)水微沸(90℃)提取3次，15min/次，提取液过滤，加入乙醇至溶液中含体积百分比80％的乙醇，收集沉淀，减压干燥即得63.5g。

实施例5石菖蒲提取物SCP-3的制备

取200g石菖蒲药材，加1.6L(1600g)水微沸(100℃)提取1次，1.5h/次，提取液过滤，加入乙醇至溶液中含体积百分比70％的乙醇，收集沉淀，冷冻干燥即得71.2g。

效果实施例1 石菖蒲提取物中α和β-细辛醚的含量

以标准品α和β-细辛醚为参照，以实施例1制得的石菖蒲提取物为样品，采用HPLC测定α和β-细辛醚在上述石菖蒲提取物中的含量。HPLC测试条件：C18柱，流动相为乙腈∶水＝6∶4(体积比)，流速为1ml/min，柱温：30℃，检测波长257nm，标准品由sigma公司提供。结果如表1所示：

表1石菖蒲提取物中α和β-细辛醚的含量

由表1可见，SCP-3中α和β-细辛醚的含量非常低，这避免了α和β-细辛醚可能带来的致癌作用，其具有较高的安全性。

效果实施例2石菖蒲提取物SCP-3对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响

采用记忆获得障碍模型研究实施例1制得的石菖蒲提取物SCP-3对动物记忆障碍的改善作用。

实验动物采用小鼠。记忆获得障碍药理实验方法：动物经口灌胃(i.g)给药，第1组(空白组)和第2组(模型组)小鼠给予生理盐水，第3组(阳性药物组)i.g给予石杉碱甲66.7μg/kg，第4～9组(石菖蒲提取物实验组)分别给予10、5、2.5g生药/kg的SCP-3，0.2ml/10g体重，连续给药两周。第2～9组小鼠最后一次给药后1小时，腹腔注射东莨菪碱2mg/kg。30min后，将1～9组小鼠放入跳台仪内适应5min。然后通电，动物受到电击后的正常反应是跳回平台以躲避伤害性刺激，多数动物可能再次或多次跳至铜栅上，受到电击后又迅速跳回平台，如此训练5min，记录每鼠受电击的次数。24小时后重测，记录受电击的动物数，第一次跳下平台的潜伏期和3min内的错误总数。

结果如表2所示，由表2数据可见，石菖蒲提取物SCP-3都有明显的改善小鼠学习的作用。

表2SCP-3对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响

组别	药物	第1次跳下平台的潜伏期(秒)	3min内的错误次数
				空白对照	N.S	270.4±53.2	1
模型组	N.S	80.4±89.3^##	12^##
				石杉碱甲	66.7μg/kg	258.8±94.5^**	2^*
SCP-3	10g生药/kg	216.5±113.3^**	5^*
				SCP-3	5g生药/kg	193.4±116.7^*	5^*
SCP-3	2.5g生药/kg	189.3±125.4^*	6^*

^##P＜0.01，与空白对照组相比

^*P＜0.05，^**P＜0.01，与模型组相比

效果实施例3石菖蒲提取物SCP-3对乙醇所致小鼠记忆再现障碍的影响

采用记忆再现障碍模型研究实施例1制得的石菖蒲提取物SCP-3对动物记忆障碍的改善作用。

记忆再现障碍药理实验方法：动物经口灌胃(i.g)给药，第1组(空白组)和第2组(模型组)小鼠给予生理盐水，第3组(阳性药物组)i.g给予石杉碱甲66.7μg/kg，第4～9组(石菖蒲提取物实验组)分别给予10、5、2.5g生药/kg的SCP-3，0.2ml/10g体重，连续给药两周。末次给药后1小时，所有组别的小鼠分别以避暗法训练一次。将小鼠放入避暗箱内，背朝洞口放入明室，同时启动计时器，动物穿过洞口进入暗室受到电击，计时自动停止。取出小鼠，记录每鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需的时间，此即潜伏期。24小时后进行测试，测试前30min，第2～9组小鼠口服给予45％的乙醇溶液(0.1ml/10g)。记录动物由明室进入暗室的潜伏期和5min内的电击次数(错误次数)。

结果如表3所示，由表3数据可见，石菖蒲提取物SCP-3都有明显的改善小鼠记忆的作用。

表3SCP-3对乙醇所致小鼠记忆再现障碍的影响

组别	药物	由明室进入暗室的潜伏期(秒)	错误次数
				空白对照	N.S	144.0±86.2	2.7±1.9
模型组	N.S	20.3±11.5^##	7.7±2.4^##
				石杉碱甲	66.7μg/kg	114.4±83.5^**	4.4±3.5^*
SCP-3	10g生药/kg	140.8±103.0^**	4.7±3.2^*
				SCP-3	5g生药/kg	136.5±108.4^**	3.4±2.5^**
SCP-3	2.5g生药/kg	68.6±70.0^*	9.2±2.1

^##P＜0.01，与空白对照组相比

^*P＜0.05，^**P＜0.01，与模型组相比

Claims

1.一种石菖蒲提取物的制备方法，其包括如下步骤：将石菖蒲用水提取，然后向提取液中加入醇类溶剂进行沉降，收集沉淀，干燥，即可得石菖蒲提取物；所述的将石菖蒲用水提取的步骤中，水的用量为石菖蒲质量的8～12倍；提取的温度为90～100℃；提取的时间为15分钟～1.5小时；提取的次数为1～3次；所述的醇类溶剂为甲醇和/或乙醇；所述的醇类溶剂的加入量为加入至溶液中含体积百分比60～90％的醇类溶剂；所述的干燥为冷冻干燥或减压干燥；所述的石菖蒲提取物中α-细辛醚的含量为0.001％～0.002％，β-细辛醚的含量为0.03～0.04％，α和β-细辛醚的总含量为0.03～0.04％，百分比为α和/或β-细辛醚的色谱峰积分面积占石菖蒲提取物总色谱峰积分面积的百分比。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的将石菖蒲用水提取的步骤中，水的用量为石菖蒲质量的10倍；提取的时间为40～80分钟；提取的次数为2次。

3.如权利要求1～2任一项所述的制备方法制得的石菖蒲提取物。

4.一种药物组合物，其含有治疗有效量的如权利要求3所述的石菖蒲提取物和药学上可接受的载体。

5.如权利要求3所述的石菖蒲提取物在制备提高学习和记忆能力的药物、保健品或食品，或者在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。