CN103191175B - 一种腹泻停中药组合、胶囊剂及其应用 - Google Patents

Abstract

一种腹泻停中药组合、胶囊剂及其应用。本发明提供了一种铁苋菜和马齿苋的药物组合；对于本发明的研究中发现铁苋菜和马齿苋药物组合配方水提、醇提得到的提取物，以及醇提提取物经过各种进一步的纯化的产品对于腹泻均具有活性；通过本方案得到提取物及其制备成的胶囊制剂相比较传统水提工艺，以及对该工艺进一步纯化后的产品，具有显著的技术进步和实质性的区别技术特征。

Description

一种腹泻停中药组合、胶囊剂及其应用

技术领域

本发明涉及一种药物，更具体的说涉及一种腹泻停中药组合、胶囊剂及其应用。

技术背景

腹泻不是一种独立的疾病，而是很多疾病的一个共同表现，它同时可伴有呕吐、发热、腹痛、腹胀、黏液便、血便等症状。

马齿苋为马齿苋科植物，是我国的传统中药，具有散血消肿、清热解毒之功效，是我国卫生部规定的78种药食同源性野生植物之一，素有“天然抗生素”的美誉。马齿苋的全草含有丰富的肾上腺素、黄酮、强心苷等物质，具有良好的抗炎、抗肿瘤、降低心血管疾病的作用。

马齿苋中的黄酮对于角叉菜胶诱发的大鼠足爪水肿有明显抑制作用，因此，我们推测其抗炎机制是黄酮等抑制了炎症因子的产生，国内亦有关于马齿苋抗炎方面研究，如范红艳等的研究认为：较低浓度马齿苋水提取物对于二甲苯所致小鼠耳廓炎症但有明显抑制作用，金英子等认为醇提取物抗炎效果更好，马齿苋抗炎效果是肯定的，但是，马齿苋的成分相当复杂，对其抗炎机制研究国内尚未有报道。铁苋菜，又称海蚌含珠，大戟科植物，一年生草本，全草均可入药，具清热解毒、止痢、止血等功效，民间常用于治疗肠炎、痢疾、尿血、便血等症。体外实验发现铁苋菜水提液对多种细菌具有杀伤作用，并对番泻叶引起的腹泻具有拮抗作用。铁苋菜的抗结肠炎作用虽有记载，但国内相关报道极少。目前在兽药领域有添加铁苋菜和马齿苋的药物组合，如用于猪痢疾的黄芩解毒散。

发明内容

本发明提供了一种铁苋菜和马齿苋的药物组合；对对于本发明的研究中发现铁苋菜和马齿苋药物组合配方水提、醇提得到的提取物，以及醇提提取物经过各种进一步的纯化的产品对于腹泻均具有活性；但是只有仅采用了醇提一个处理得到的提取物活性最强。本发明的具体发明内容如下：

一种腹泻停中药组合，所述中药组合的配方为铁苋菜和马齿苋的原药材或/和提取物的混合物。

所述中药组合的配方为铁苋菜和马齿苋原药材采用乙醇溶液提取得到的提取物的混合物。

所述中药组合的配方为铁苋菜和马齿苋原药材采用70±10%乙醇溶液提取得到的提取物的混合物，且该提取物不再进行纯化处理。

所述铁苋菜和马齿苋的重量比为1-9:9-1。

所述铁苋菜和马齿苋的重量比为2-3:1。

上述所述的腹泻停中药组合的胶囊剂，在提取物中添加微晶硅胶制粒，装胶囊得到腹泻停中药组合的胶囊剂。

所述的腹泻停中药组合在制备止泻药物中的应用。

所述的腹泻停中药组合在制备治疗胃肠蠕动加速药物中的应用。

所述的腹泻停中药组合在制备镇痛药物中的应用。

所述的腹泻停中药组合在制备抑菌药物中的应用。

本发明的有益技术效果是：本发明提供的腹泻停中药组合对腹泻的相关症状具有良好的活性，同时本发明提供了一种腹泻停中药组合的提取的优化方案，通过本方案得到提取物及其制备成的胶囊制剂相比较传统水提工艺，以及对该工艺进一步纯化后的产品，具有显著的技术进步和实质性的区别技术特征。

具体实施方式

实施例1不同药材及组合的提取物的活性考察

称取切碎铁苋菜药材200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（9、7、7倍生药材量），每次回流提取3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣得褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重36.40g，收得率18.20%，得到铁苋菜组。

称取切碎的马齿苋药材200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重53.72g，收得率26.86%，得到马齿苋组。

称取腹泻停药材（铁苋菜140g:马齿苋60g=7:3）200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重41.60g，收得率20.8%，得到铁苋菜:马齿苋（7:3）组。

称取腹泻停药材（铁苋菜100g:马齿苋100g=1:1）200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重45.06g，收得率22.53%，得到铁苋菜:马齿苋（1:1）组。

称取腹泻停药材（铁苋菜180g:马齿苋20g=9:1）200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重38.39g，收得率19.19%，得到铁苋菜:马齿苋（9:1）组。

称取腹泻停药材（铁苋菜20g:马齿苋180g=1:9）200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重28.71g，收得率14.36%，得到铁苋菜:马齿苋（1:9）组。

称取腹泻停药材（铁苋菜120g:马齿苋80g=3:1）200g，放入3L烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（8、6、6倍生药材量），每次3小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得黑褐色滤液420ml，减压回收乙醇，得浓浸膏重28.71g，收得率14.36%，得到铁苋菜:马齿苋（3:1）组。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠80只，均分为8组，每组10只，分别命名为对照组、铁苋菜、马齿苋、铁苋菜:马齿苋（7:3）、铁苋菜:马齿苋（1:1）、铁苋菜:马齿苋（1:9）、铁苋菜:马齿苋（9:1）和铁苋菜:马齿苋（3:1）组，将上述各组分别放入特制小铁丝笼内(笼下垫吸水纸)，每笼1只，分别一次ig各给药组的给药量为原药材10g/kg，泻蒸馏水(对照组)。30分钟后，均ig致泻剂蓖麻油0.2ml/10g。于给致泻剂后1小时开始记录稀便数，每小时一次，共5小时。以每只鼠5小时的稀便数相加，计算平均数和标准差，以及抑制率(％)，并用t检验测其与对照组的显著性差异；具体结果如表1所示。

表1  腹泻停处方中单味药材及其复方的70%乙醇提取物

对蓖麻油致泻的影响（X±SD，n＝10）

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

由表1可见，复方药材（铁苋菜:马齿苋=7:3）对蓖麻油致泻的抑制率较好，因此选用腹泻停（铁苋菜:马齿苋=7:3）的处方进一步研究。

实施例5水、不同浓度乙醇提取物对腹泻停中药组合活性的影响考察

按腹泻停药材（铁苋菜:马齿苋=7:3）称取药材，分别进行如下操作；

水煮提取物：水煮300g生药材，水量为药材重量的8倍，得干物质重61.5g，提取率20.5%。

70%乙醇提取：用70%乙醇提取500g生药，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重98.5g，提取率14.7%。

80%乙醇提取：用80%乙醇提取300g生药，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重35.20g，提取率11.73%。

90%乙醇提取：用90%乙醇提取300g生药，乙醇用量为药材重量的5倍，提取1次，得干物质重26.0g，提取率8.67%。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠50只，均分为5组，每组10只，分别命名为对照组、水提物组、70%乙醇提取物和90%乙醇提取物组，采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表2所示。

表2  腹泻停水煮和不同浓度乙醇提取物的抗腹泻作用

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

实施例3水煮、醇沉样品对腹泻停中药组合活性的影响考察

取200g腹泻停药材（铁苋菜:马齿苋=7:3）放入搪瓷锅，加常水煮沸3次（第1次14倍量水，煮2小时，第2次8倍量水，煮1.5小时，第3次8倍量水，煮1小时），滤过，收集滤液于70～80℃水浴锅，适当浓缩，加乙醇沉淀（乙醇浓度达到70%），室温（12～16℃）放置24小时，滤过，得沉淀和滤液，滤液减压回收乙醇，得一个浸膏1号作为样品1，重19g，收得率9.5%，沉淀重43.62g，收得率21.81%。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠40只，均分为4组，每组10只，分别命名为对照组、样品1、沉淀和乙醇提取组（采用采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组），采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表3所示。

表3  腹泻停水煮、醇沉样品的抗腹泻作用

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

实施例4醇提、水沉样品对腹泻停中药组合活性的影响考察

取200g腹泻停药材（铁苋菜:马齿苋=7:3）放入搪瓷锅，加入70%乙醇回流提取3次（乙醇用量为9、7、7倍生药材量），滤过，减压回收乙醇滤液至无醇味，加水放置24小时，析出沉淀，滤过，得上清液和沉淀，回收上清液得到浸膏2号作为样品2，重29.6g，收得率14.8%，沉淀重12.8g，收得率6.4%；

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠40只，均分为4组，每组10只，分别命名为对照组、样品2、沉淀和乙醇提取组（采用采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组），采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表4所示。

表4  腹泻停醇提、水沉样品对蓖麻油致泻的影响

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

实施例5D101大孔树脂吸附纯化样品对腹泻停中药组合活性的影响考察

70%乙醇提取液，减压浓缩成浸膏，加水，于12～16℃放置24小时，析出沉淀，作为沉淀组，倾出上清液，作为母液组。用D101大孔树脂吸附上清液（树脂量:药材量=2:1），得到吸附物作为D101树脂吸附组。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠5只，均分为5组，每组10只，分别命名为对照组、母液、沉淀、D101树脂吸附组和乙醇提取组（采用采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组），采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表5所示。

表5  腹泻停D101树脂分离、纯化物的抗腹泻作用

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

实施例6DA201大孔树脂吸附纯化样品对腹泻停中药组合活性的影响考察

70%乙醇提取物，按实施例5方法，制成上清液与沉淀，用DA201大孔树脂吸附，得到吸附物作为D201树脂吸附组。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠50只，均分为5组，每组10只，分别命名为对照组、母液、沉淀、DA201树脂吸附组和乙醇提取组（采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组），采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表6所示。

表6  腹泻停DA201树脂分离、纯化物的腹泻作用

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

实施例7聚酰胺吸附纯化样品对腹泻停中药组合活性的影响考察

70%乙醇提取物，按实施例5方法，用聚酰胺（聚酰胺:药材=2:1）吸附上清液，得到母液和聚酰胺吸附物。得到吸附物作为D201树脂吸附组。

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠5只，均分为5组，每组10只，分别命名为对照组、母液、沉淀、DA201树脂吸附组和乙醇提取组（采用采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组），采用实施例1所述的实验方法；具体结果如表6所示。

表7  腹泻停的聚酰胺分离、纯化物的抗腹泻作用

注：F=稀便数动物数，T=动物总数；稀便数为5小时稀便数和的平均数；剂量为生药表示。

综上可见，用多种不同的提取和分离方法（包括常规的水煮醇沉，醇提水沉，大孔树脂和聚酰胺吸附）所得提取物均有明显的抗蓖麻油致小鼠腹泻的作用，其中以70%乙醇提取物药效较好，故在制备过程中采用70%乙醇为溶剂进行提取。

实施例8腹泻停中药组合（以下简称：腹泻停）抗蓖麻油致泻的活性考察

腹泻停对蓖麻油致泻的预防作用

取禁食12小时的20g左右的昆明种小鼠70只,均分为7组,每组10只,分别放入特制小铁丝笼内(笼下垫吸水纸),每笼1只,分别一次ig腹泻停（采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组）2.5、5.0、10g和20g/kg,泻痢停0.5g和1.0g/kg以及蒸馏水(对照组)。30分钟后，均ig致泻剂蓖麻油0.2ml/10g。于给致泻剂后1小时开始记录稀便数,每小时一次,共5小时。以每只鼠5小时的稀便数相加,计算平均数和标准差，以及抑制％，并用t检验测其与对照组的显著性差异。

表8  腹泻停对蓖麻油致泻的预防作用

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

结果发现(见表8),ig不同剂量的腹泻停后，稀便数也有不同程度的减少,随剂量的增加，其减少程度越明显,表现出明显的量效关系。可见,腹泻停具有明显的予防篦麻油引起的腹泻作用并有一定的量效关系。给药后，可完全抑制部份小鼠的腹泻。泻痢停也有非常明显的抑制作用。重复实验得到相似的结果（见表8）。

腹泻停对蓖麻油致小鼠腹泻的治疗作用:

取19～21g的昆明种小鼠60只,均分为6组,每组10只,雌雄各半。均ig蓖麻油0.1ml/10g,30分钟后，分别ig腹泻停2.5,5.0,10.0和20.0g/kg和泻痢停0.3g/kg,记录给致泻剂前及给致泻剂后1,2,3,4和5小时的稀便总数,计算每组动物稀便的平均值±标准差,以及抑制百分率，并与对照组相比,经”t”检验测其显著性差异。

表9  腹泻停对蓖麻油致泻的治疗作用

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

表9为ig腹泻停对蓖麻油致小鼠腹泻的治疗作用。由表9可见,不同剂量的腹泻停均能抑制蓖麻油引起的腹泻,其抑制率在于20.3～69.5％,但2.5g/kg的腹泻停的作用无统计意义,5g/kg腹泻停就显示出明显的统计学差异,可见ig腹泻停能明显治疗蓖麻油的致泻作用。

腹泻停对蕃泻叶致泻的影响

取禁食4小时的昆明种雄小鼠50只，均分5组，每组10只，分别ig腹泻停5.0，10.0和20.0g/kg,泻痢停0.5g/kg,对照组给与蒸馏水，其体积均为0.2ml/10g体重，半小时后，均ig番泻叶0.2ml/只小鼠。观察并记录给致泻剂后1，2，3，4，和5小时的稀便数，计算每组动物稀便的平均值±标准差,以及抑制百分率，并与对照组相比,经”t”检验测其显著性差异。

结果如表10所示。由表10可见，给不同剂量的腹泻停的小鼠，腹泻次数均明显的减少，表明腹泻停对蕃泻叶引起的腹泻有明显的抑制作用，其抑制率在46.7～91.6％。泻痢停也有明显的作用。

表10  腹泻停对番泻叶致小鼠腹泻的预防作用

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

另取禁食4小时的昆明种雄小鼠50只，均分5组，每组10只，均ig番泻叶0.2ml/只小鼠，半小时后，分别ig腹泻停5.0，10.0和20.0g/kg,泻痢停0.5g/kg,对照组给与蒸馏水，其体积均为0.2ml/10g体重。观察并记录给致泻剂后1，2，3，4，和5小时的稀便数，计算每组动物稀便的平均值±标准差,以及抑制百分率，并与对照组相比,经”t”检验测其显著性差异。

结果如表11所示。由表11可见，给不同剂量的腹泻停后，腹泻次数均明显的减少，表明腹泻停对蕃泻叶引起的腹泻有明显的抑制作用，其抑制率在42.9～76.2％。可能，这种作用是由于腹泻停减少了蕃泻叶对小肠的刺激，从而减肠的收缩作用。

表11  腹泻停对番泻叶致小鼠腹泻的治疗作用

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

腹泻停抗大黄致泻的治疗作用

取19-22g的小鼠50只,均分为5组,每组10只(雌雄各半),ig腹泻停2.5,5.0,10g/kg,泻痢停0.6g/kg及蒸馏水,均以20ml体积/kg给予。于给药后45分钟，ig大黄1.0g/kg,1小时后按前计数小鼠稀便数,每小时一次,共计数5个小时,以6小时的湿便平均数标准差表示,并与对照组比较,测其差异显著性；具体结果如表12所示。

表12、腹泻停对大黄致泻的治疗作用

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

表12为腹泻停对抗大黄引起的腹泻的作用。由表12可见,ig2.5、5.0、和10.0g/kg的腹泻停,均明显减少小鼠湿便数,抑制率在38.2～62.8之间，且具有一定的量～效关系,与对照组比较,均有明显的差异。重复实验得相似的结果，表明腹泻停对大黄引起的腹泻有明显得治疗作用。泻痢停的这种作用也很明显得。

腹泻停抗大黄致泻的预防作用

取19-22g的小鼠50只,均分为5组,每组10只(雌雄各半),ig腹泻停2.5,5.0,10.0和20.0g/kg,及蒸馏水,均以20ml体积/kg给予。于给药后45分钟，ig大黄1.0g/kg,1小时后按前计数小鼠稀便数,每小时一次,共计数5个小时,以6小时的湿便平均数标准差表示,并与对照组比较,测其差异显著性。

表5为腹泻停对抗大黄引起的腹泻的作用。由表2可见,ig2.5、5.0、和10.0g/kg腹泻停后,小鼠湿便数军明显减少,也且具有明显的量～效关系,其效果与其治疗作用相似（抑制率在34.4～80.6％），与对照组比较,均有明显的差异。重复实验得相似的结果。具体结果如表13所示。

表13  腹泻停对大黄致泻的预防作用

注：F/T表式动物总数，F表示稀便动物数。

可见,腹泻停具有明显的抗大黄引起的致泻作用,泻痢停也有这种作用。

腹泻停对巴豆油致腹泻作用的影响

取18-22g的雄性昆明种小鼠50只,均分为5组,每组10只(雌雄各半),分别ig腹泻停2.5，5.0，10.0g/kg,泻痢停0.6g/kg,及0.6%吐温,均以20ml体积给予。于给药后45分钟ig巴豆油0.2ml/20g体重,1小时后按前法计数湿便数,每2小时一次,共计6个小时,以6小时的湿便平均数标准差表示,并与对照组比较,经t检验测其差异显著性。具体结果如表14所示。

表14  腹泻停对巴豆油致泻作用的影响

注：F/T～表式动物总数，F表示稀便动物数。

表14为腹泻停对巴豆油致腹泻作用影响的结果.由表6可见,ig2.5,5.0,10.0和20.0g/kg的腹泻停,均明显减少小鼠湿便数,具有一定的量效关系,与对照组比较,均有明显差异。重复实验得相似的结果。泻痢停也有明显的抗巴豆油致腹泻作用。

ig不同剂量的腹泻停有明显的预防和治疗蓖麻油,大黄,蕃泻叶和巴豆油引起的腹泻，而且这种作用具有明显的量/效关系。其作用特点为作用强，并对多致泻剂引起的腹泻有效。实际上,组成腹泻停复方制剂的药物均有不少实验研究和用于治疗腹泻的报道。铁苋菜早在60年代已进行了不少研究,该药已在数千例临床治疗腹泻病人有很好疗效的报导。药理实验也证明它有很强的抗痢疾杆菌的作用。在这些研究中,均用水煎剂,我们也发现水煎剂具有明显的抗腹泻作用,但这种作用不如70%乙醇提取物明显,可能其抗腹泻有效成分为乙醇所溶的。组方中的马齿苋也是肠炎腹泻的常用药物之一。泻痢停也有明显的作用。

我们所用的致泻剂均为药物性的，其共有的特点是均可刺激肠粘膜，使之收缩加快，肠分泌增加，水分吸收减少，而产生腹泻。如巴豆油，它含有大量的脂肪酸，可使肠道润滑，并刺激肠粘膜致使肠粘膜分泌增减或水分不吸收而产生水泻，腹泻停抑制巴豆油引起的腹泻可能是减少巴豆油对小肠粘膜的刺激而减少分泌和增加水分的吸收所致。

腹泻停对多种致泻剂引起的腹泻有明显的预防和治疗作用。其最佳有效量为5～10g生药/kg。

实施例9腹泻停对小肠推进运动的影响

对正常小鼠小肠推进运动的影响:取禁食12小时,体重19-20g的昆明种小鼠,按体重随机分为5组,每组11只,分别ig腹泻停（采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组，以下各组相同）原药材2.5,5.0和10.0g/kg,阿托品6mg/kg和水(阳性药组),对照组给予生理盐水，30分钟后,均ig5%的碳末悬液(10%阿拉伯胶制)10ml/kg。20分钟后断颈椎处死,剖腹,取出小肠,置于预先放有NS的玻板上(使之处于生理状态),测量小肠的全长(胃幽门至回盲部),及碳末推进的距离(幽门至炭末前沿的距离),计算炭末在小肠内推进的百分率。用”t“检验测其与模型组的差异。结果如表15所示。

计算公式为:小肠推进百分率=（炭末的距离/小肠全长）×100%

表15  腹泻停对正常小鼠小肠推进运动的影响

由表1可见,给正常小鼠ig腹泻停后,小肠推进运动有不同程度的减慢,这种减慢作用不如阿托品的作用明显。可见,腹泻停在10g/kg时仅轻度抑制正常小鼠小肠推进运动并有较好的重复性。

腹泻停对新斯的明致小肠亢进小鼠小肠推进运动的影响：取18～21g昆明种小鼠按体重随机分成6组,分别ig水,腹泻停2.5,5.0和10.0g/kg,以及阿托品6mg/kg。20分钟后,皮下住射(Sc)新斯的明0.1ml/kg(除给水的对照组外)再过20分钟均ig5%的炭末0.1ml/10g体重,于给炭末后20分钟处死动物,按上述方法测量和计算推进的距离和推进率,均与模型组比较,用“t”检验测其显著性差异。

由表16可见,Sc新斯的明后,其小肠推进率明显高于对照组,给予不同剂量的腹泻停后,推进率均有不同程度的降低,5.0和10g/kg的腹泻停均有明显减慢亢进小肠的推进运动,6mg/kg的阿托品的减慢作用更强，重复结果一致。

表16  腹泻停对新斯的明致胃肠机能亢进小鼠小肠推进运动的影响

注：*为新斯的明比正常小鼠推进的增加％，其余均为与新斯的明比较的抑制

上述可见，腹泻停对收缩亢进小肠比对正常小肠的松弛作用更明显。

对离体豚鼠胃条的影响；取饥饿48小时的豚鼠击头致死后,剖腹取胃,立即放入克氏液中，剪除胃底部，沿胃小弯剪开胃腔，平行剪开5-6道，取约2cm胃条,一端连于浴槽底部，另端连接力-位移换能器，浴槽内充以95%O₂和5%CO₂的混合气体。

表17  腹泻停对胃条肌收缩的影响

稳定30分钟待小肠并记录基线，加入激动剂BaCL20.1ml（原液5mg/ml）或ACH0.2ml（原液4mg/ml），使终浓度分别达20μg/ml,和3.2μg/ml。观察并记录回肠的收缩幅度，3-5分钟后用营养液冲洗，重复收缩幅度一致后，加入不同浓度的腹泻停，3-5分钟后再加入上述浓度的BaCL2或Ach，观察其收缩幅度。计算腹泻停抑制回肠收缩的百分率。计算功式如下：

对离体大鼠小肠收缩的影响

取饥饿12小时的大鼠断颈椎致死后，迅速剖腹取小肠，立即放入克氏液中，剪除周围组织，取若干段大约1.5～2.0cm长为一段，洗净后立即放入新鲜克氏液中备用。每次用一段，一端结扎后连于浴槽底部，另端连接力-位移换能器。浴槽内充以95%O₂和5%CO₂的混合气体,水浴温度保持在37℃。浴槽体积约25ml。

稳定30分钟并记录基线后，加入激动剂BaCL2半部0.1ml（原液5mg/ml）或Ach0.2ml（原液4mg/ml），使终浓度分别达20μg/ml,和3.2μg/ml。观察并记录回肠的收缩幅度，3-5分钟后用营养液冲洗，重复收缩幅度一致后，加入不同浓度的腹泻停，3-5分钟后再加入上述浓度的BaCL2或Ach，观察其收缩幅度。计算腹泻停抑制回肠收缩的百分率。计算功式如下：

给腹泻停后收缩幅度抑制百分率＝（给激动剂的收缩幅度－给腹泻停后的收缩幅度）÷给激动剂的收缩幅度。计算抑制50%的药物浓度，以t检验测其差异显著性。每个剂量组4～5个标本，用3个不同的浓度。

实验结果如表18所示，所用浓度的腹泻停均能对抗Ach和BaCL₂引起的小肠收缩。1.25mg/ml的腹泻停已有明显的作用，浓度加大到5.0mg/ml,作用已非常明显，抑制率分别均在72.8%和54.3%。

表18  腹泻停对Ach和BaCl₂致大鼠离体小肠收缩的影响

注：括弧内为生药量；Ach致小肠收缩样本为6个；BaCL₂致小肠收缩样本为5个

若按生药计腹泻停的终浓度分别为6.25，12.5和25.0mg/ml。

可见，腹泻停对能明显对抗BaCL2和Ach小肠收缩，与在体实验结果一致。可能这是腹停抑制腹泻的原理之一。

可以通过不同的方式减轻腹泻,如减少肠的蠕动和肠液的分泌和吸收均可达到止泻的目的。我们的实验观察到腹泻停对正常小鼠的小肠的推进运动和新斯的明引起的小肠运动亢进的小鼠均有明显的抑制作用。已知蓖麻油在小肠上部被脂肪水解酶分解成有刺激性的蓖麻油酸,刺激小肠引起肠蠕动增加而腹泻。腹泻停能明显抑制正常和亢进小肠的蠕动,因而其抑制腹泻的作用可能主要是抑制小肠的蠕动而发挥作用。

实施例10腹泻停对腹痛的影响

对醋酸引起的扭体反应的影响:取20g左右的小鼠44只,均分4组。分别ig腹泻停2.5和10g/kg（采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组，以下各组相同）,消炎痛0.06g/kg,对照组给予同体积0.6%吐温80或蒸馏水，于给药后45分钟均ip0.9%醋酸0.1ml/10g体重。5分钟后记录其扭体反应的次数，共观察15分钟。以”t”检验测其与对照组的差异显著性，其结果如表19所示。

表19  腹泻停对醋酸致小鼠扭体反应的影响

对热刺激致疼痛的影响

取禁食14小时的雌性昆明种小鼠50只（实验前一天预选，对热刺激的潜伏期在15秒内的小鼠），按体重均分为5组，分别ig腹泻停2.5，5.0，10.0g/kg,对照组给予蒸馏水，其体积均为0.2ml/10g体重，于给药后30和60分钟，放入置于水浴上的金属板上，其温度通过恒温水浴调节在55±0.5℃。以小鼠放入热板至出现添后足的反应时间（潜伏期）作为痛阈的指标。计算给药前后的增减值，以“t”检验测其差显著性，或与对照组的相应时间电的潜伏增减值比较，测其显著性差异。

结果如表20所示。

表20  腹泻停对热刺激致痛的影响

注：给药前后相比，*P<0.05,***P<0.001；^▲P<0.001。

从表20可见，给腹泻停5.0和10.0g/kg后不同时间，痛潜伏期的延长不明显，但阳性药消炎痛的潜伏期则明显延长。表明腹泻停对热刺激引起的疼痛无明显对抗作用。

上述实验可见，腹泻停能明显抑制醋酸引起的扭体反应，其作用可能是通过松弛醋酸引起的肠平滑肌痉挛所致；而对热刺激引起的中枢性疼痛也有一定的作用，但不如解痉作用明显。

在无菌操作下，用移液吸管取营养肉膏汤培养基于试管内，每管5ml,再吸上述样品溶液5ml放入培养基内，充分摇匀后为1:2，依次倍比稀释成1:4、1:8、1:6、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512,其药物浓度依次为500、250、125、62.5、31.2、15.6和7.8mg/ml,另取不含药物的培养基作为对照管。

实施例10腹泻停抗菌作用的考察

将各实验菌株接种于营养肉汤培养基中，在37℃培养16～18小时，用营养肉汤培养基或灭菌生理盐水稀释至10^-3浓度。取该浓度稀释菌液0.1ml加入已准备好的药物（采用实施例1中铁苋菜:马齿苋（7:3）组，以下各组相同）肉汤培养基中，混匀后于37℃培养24小时，观察细菌生长情况。如药液管澄清，表示无细菌生长，如为混浊，表示细菌已生长。以完全无细菌生长的最小药物浓度作为该药物对该菌株的MIC。

由表21可见，腹泻停对对志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌，鲍氏痢疾杆菌，宋氏痢疾杆菌和大肠杆菌均有一定程度的抑制作用，它们的最小抑菌浓度(MIC)分别为31.2、31.2、31.2、125.0和125.0mg/ml，对前三者的作用较强。

表21  腹泻停对不同菌株最低抑菌浓度的测定

腹泻停对所测志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌，鲍氏痢疾杆菌，宋氏痢疾杆菌和大肠杆菌均有不同程度的抑制作用。

实施例11  腹泻停胶囊制剂的制备

按铁苋菜140g:马齿苋60g=7:3的处方，称取处方量药材1600g放入10L圆底烧瓶中，加入70%乙醇回流提取3次（7、6、6倍生药量），每次回流2小时，稍冷却（30-40℃），滤过，除去药渣，得褐色滤液18.6L。

浓缩：将上述18.6L70%乙醇提取液，通过薄膜回收器，减压回收乙醇（t=60℃，真空度600-650mm Hg），得到清膏，放入蒸发皿，在水浴锅浓缩成浸膏321.6g（相对密度1.30，温度40℃），收得率20.10%，（1g生药0.201g浸膏）。

胶囊剂的制备：

药粉的制备

处方：浸膏10g，微晶硅胶（二氧化硅Silicon dioxide）  3.5g

辅料来源及质量标准，符合HG2791-1996及usp25/NF=20

厂址：湖州展望化学药业有限公司

胶囊剂的制备：在盛有321.6g浸膏的瓷皿中加入药用微粉SiO₂120g拌匀，于70-80℃干燥箱中烘12-13小时，冷却，取出，碾碎，过25-100目筛，制得药粉386g，在本研究院制药厂，用人工将药粉装入1号胶囊1000粒（一板100粒，共装10板），每粒胶囊重0.38g，即得。

表22  腹泻停胶囊剂的制备

腹泻停胶囊的检查

表23  腹泻停胶囊剂的检验结果

腹泻停胶囊剂中有效成分没食子酸的转移率检查

1粒胶囊含铁苋菜药材为1.12g，含没食子酸3.47mg

1粒胶囊(0.38g)含没食子酸为2.93mg

Claims (5)

1.一种腹泻停中药组合物，其特征在于：所述中药组合物的配方为铁苋菜和马齿苋原药材采用70%乙醇溶液提取得到的提取物的混合物，且该提取物不再进行纯化处理；所述铁苋菜和马齿苋的重量比为7:3。

2.权利要求1所述的腹泻停中药组合物在制备止泻药物中的应用。

3.权利要求1所述的腹泻停中药组合物在制备治疗胃肠蠕动加速药物中的应用。

4.权利要求1所述的腹泻停中药组合物在制备镇痛药物中的应用。

5.权利要求1所述的腹泻停中药组合物在制备抑菌药物中的应用。