KR101758639B1 - 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 - Google Patents
인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 인동등, 우방자 및 황금을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다. 특히, 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 인동등 3~15 중량부, 우방자 1~5 중량부의 혼합 추출물 분말과 황금 4~20 중량부의 추출물 분말을 1:1 ~ 1:3 중량비로 혼합한 것을 유효성분으로 포함하는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
본 발명에 따른 조성물은 인동등 3~15 중량부, 우방자 1~5 중량부의 혼합 추출물 분말과 황금 4~20 중량부의 추출물 분말을 1:1 ~ 1:3 중량비로 혼합한 것을 유효성분으로 포함하는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
Description
본 발명은 인동등, 우방자 및 황금을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다. 특히, 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 인동등 3~15 중량부 및 우방자 1~5 중량부의 혼합 추출물 분말과 황금의 추출물 분말을 1:1 ~ 1:3 중량비로 혼합한 것을 유효성분으로 포함하는 것을 기술적 특징으로 하고 있다.
호흡기 질환에서 공통적으로 발견할 수 있는 기본적인 증상으로는 염증(inflammation), 통증(pain), 가래(sputum), 발열 및 기관지 수축이 있다.
염증은 생체 또는 조직에 기질적 변화를 가져오는 침습이 가해질 때 그 손상 부위를 수복 및 재생하려는 복구기전 또는 방어적 반응의 일종으로서, 자극이 가해지면 국소적으로 염증성 사이토카인 등의 염증성 성분이 증가되며 염증이 유발된다.
염증이 발생하면 발적, 발열, 종창, 동통, 기능장애 등의 증상이 나타나며, 형태학적으로 진행을 확인할 수 있는 증상으로는 퇴행성 병변, 순환장애 및 조직의 과도한 증식 등이 있다.
염증의 발생 원인으로는 물리학적 손상, 화학적 물질에 의한 손상 및, 세균 및 바이러스 등 미생물의 감염 등 다양한 원인이 있다.
통증은 통증 수용체를 지닌 특수한 신경에 대한 자극으로 인해 생기는 불쾌한 감각을 일컬으며, 발생기전에 따라 체성통증, 내장통증, 신경인성통증 등으로 분류한다.
통증의 원인은 매우 다양하며, 통증의 원인에 따라 통증의 부위와 양상, 강도, 빈도 및 동반 증상 등이 달라진다.
가래는 객출된 기도 점막으로부터의 분비물을 일컬으며, 형태 및 색은 하얀 가래, 점액성 가래 및 황록색 가래 등으로 분류할 수 있다.
또한 가래의 형태 및 색을 보고 감염 질환을 진단할 수 있다. 예를 들어 농성(膿性 ; 황색 또는 황녹색) 점액성 가래는 폐결핵, 기관지 폐렴 등을 진단할 수 있으며, 딸기 젤리형 가래는 폐암을 진단할 수 있다.
통상적인 경우에는 가래의 분비량과 배출량이 증가할 수록, 가래의 농도가 높을수록 세균 감염의 가능성이 높다.
상기와 같은 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축은 호흡기 질환에서 기본적으로 발견되는 증상이므로 상기 증상들의 치료 약물은 시중에 다량 시판되어 왔으나, 상기 증상 치료 약물이 다량 시판된 만큼 부작용 사례 역시 대다수 발견되고 있다.
그 중에서도 염증 및 통증 저해 작용을 하는 약물인 소염진통제는 부작용 발견 빈도수가 모든 약물의 부작용 발견 빈도 수 중 가장 높았다는 연구결과가 도출될 정도로 빈도수가 높았다.
일 예로, 소염진통제의 종류인 디클로페낙 및 플루비프로펜에는 다음과 같은 부작용이 있는 것으로 알려졌다. 하기의 [표 1]에 상기 약물들의 부작용에 관하여 기재되어 있다.
| 디클로페낙 | 플루비프로펜 | |
| 부작용 | 위장관 장애, 과민반응, 골관절염, 소화성 궤양, 혈액이상, 용혈성 빈혈, 심장발작 및 뇌졸중 등 | 위장출혈, 식욕부진, 구역, 구토, 위통, 복통, 위부불쾌감, 위복부 팽만감, 변비, 설사, 구갈, 구내염, 쇼크, 과민증, 발진,가려움증, 천식발작, 급성신부전, 네프로제증후군, 두통, 이명, 혈소판기능저하, 부종 및 심계항진 등 |
또한 가래 제거 작용을 하는 진해거담제의 부작용에 관하여도 연구가 지속되고 있다. 일 예로, 진해거담제인 암브로콜 및 슈다페드에는 다음과 같은 부작용이 있는 것으로 알려졌다. 하기의 [표 2]에 상기 약물들의 부작용에 관하여 기재되어 있다.
| 암브로콜 | 슈다페드 | |
| 부작용 | 1. 정신신경계 : 두통, 진전, 근경직, 졸음, 불안, 어지러움, 신경과민, 불면, 흥분, 사지마비감 등 2. 순환기계 : 심계항진, 빈맥, 혈압변동, 고혈압, 부정맥 등 3. 과민증 : 발진, 가려움, 혈관부종, 두드러기, 기관지경련, 저혈압, 허탈 등 4. 기타 : ALT, AST의 상승, 전신권태감, 부종, 위장장애 등 |
1. 순환기계 : 심계항진, 빈맥, 부정맥, 안면창백, 저혈압을 수반한 심혈관 허탈 등 2. 정신신경계 : 편두통, 두통, 어지러움, 불안, 긴장, 무력감, 허약, 불면, 환각, 경련, 중추신경계 흥분 또는 억제 등 3. 소화기계 : 변비, 구역, 소화장애 등 4. 과민증 : 발진 등 5. 비뇨기계 : 요저류 등 6. 기타 : 구갈, 발한 등 |
따라서 상기와 같은 부작용 없이 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 치료할 수 있는 약물이 절실한 상황이다.
하기에서 호흡기질환의 예로서 상기도 감염, 인후염 및 기관지 협착증에 관하여 간략히 살펴보겠다.
상기도 감염은 특정한 원인들로 인하여 세균 또는 바이러스가 비강, 부비동, 인두 및 후두 등을 포함한 상기도 점막에 감염되어 발생되는 염증성 질환을 통칭하는 용어이다.
상기도감염은 급성 상기도감염과 만성 상기도감염으로 분류할 수 있다. 급성 상기도감염은 급격한 기온 변화, 감기, 열성질환, 과로 및 허약 체질 등의 원인으로 발생한다. 초기에는 인후의 건조감, 이물감, 가벼운 기침 및 따가움 등의 증세가 나타나며, 병세가 진행되면 음식물을 삼킬 때 통증이 심해지고 목이 쉬며 가래, 고열, 두통, 전신권태, 식욕부진 및 변비 등이 나타난다.
만성 상기도감염은 급성 상기도감염이 재발을 거듭하거나 지나친 흡연, 음주, 과로, 자극성 음식 섭취, 성대 혹사 및 인후두 역류질환 등이 원인으로 발생한다. 인후의 건조감 및 통증이 항시 느껴지며, 피로하면 증세가 심해져 목이 쉬고 가래가 생기며 목소리가 작아진다.
또한 노령층이나 면역력이 감소한 환자 등의 경우에는 상기도감염의 합병증으로 중이염, 기관지염 및 폐렴 등이 발생할 수 있다.
인후염은 상기도 감염의 일종인 질환으로, 상기도 감염에서 비강 부위를 제외한 인두 및 후두에 발생한 염증을 일컫는다.
인후염은 매연, 에어컨 등으로 유발된 대기 오염 등의 환경적 요인과, 세균(베타 용혈성 사슬알균, 포도알균, 폐렴알균 및 헤모필루스균 등) 또는 바이러스(인플루엔자 바이러스, 단순포진 바이러스, 파라인플루엔자 바이러스, 콕사키 바이러스 및 에코 바이러스 등)의 바이러스 등의 생물학적 요인으로 인하여 인두 및 후두의 점액질 층이 손상 또는 파괴되었을시 발생하며, 인후염의 증상은 앞서 언급한 상기도감염과 유사한 양상을 보인다.
기관지 협착증은 기관지의 내강이 좁아져서 공기의 출입이 좋지 않은 증상인데, 기관지 안에 이물이 차있거나 상기의 상기도 감염이나 인후염과도 관련되어 발생된다.
현재 호흡기질환의 근본적 원인을 제거하는 치료법은 없으며, 진해거담제로 증상을 완화시키는 대증요법에 그치는 정도이다.
따라서 본 발명에서는 부작용이 없으며 호흡기질환 등 염증, 통증, 가래, 발열 및/또는 기관지 수축 증상이 나타나는 질병의 근본적인 원인을 치료할 수 있는 조성물을 제공할 수 있다고 판단하여 본 발명을 안출하였다.
이하에서, 본 발명에 사용된 천연물들에 대하여 간략하게 설명하고자 한다.
인동등(Lonicerae caulis)은 인동과(Caprifoliaceae)에 속하는 인동덩굴의 줄기와 잎이다.
인동등 잎의 구성 성분으로는 로니세린(lonicerin) 및 루테올린(luteolin) 등이 알려져 있으며, 줄기의 구성 성분으로는 탄닌(tannin), 알칼로이드(alkaloid) 및 루테루닌(lutelunin) 등이 알려져 있다.
인동등은 해열, 해독, 혈액순환 촉진, 진경, 이뇨 및 지혈 등의 효능을 보유하고 있다.
우방자(Arctii fructus semen)는 국화과(Compositae)에 속하는 우엉의 종자이다.
우방자의 구성 성분으로는 아르크틴(arctiin), 아르크티게닌(arctigenin), 글루코스(glucose), 마타이렌(matairen), 트라체로게닌(thrachelogenin), 아라킨산(arachic acid), 스테아릭 산(stearic acid), 팔미틱 산(palmitic acid) 및 리놀레익(linoleic acid) 등이 알려져 있다.
우방자는 항균, 이뇨, 해열 및 혈당 강하 등의 효능을 보유하고 있다.
황금(Scutellariae radix)은 꿀풀과(Labiatae)에 속하는 황금의 뿌리이다.
황금의 구성 성분으로는 바이카레인(baicalein), 바이카린(baicalin), 우고닌(wogonin), 우고노사이드(wogonoside), 네오바이카레인(neobaicalein) 및 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 등이 알려져 있다.
황금은 해독, 이뇨, 해열 및 지혈 등의 효능을 보유하고 있다.
상기 서술한 인동등, 우방자 및 황금을 이용하고 있는바 이하 간략하게 이들 소재와 관련된 선행기술을 살펴본다.
대한민국 등록특허공보 제10-0672036호에는 인동 추출물을 유효 성분으로 함유하는 천식 치료용 조성물이 기재되어 있으며, 대한민국 공개특허공보 제10-2004-0085980호에는 우방자 추출물을 유효성분으로 하는 염증 치료용 조성물이 기재되어 있고, 대한민국 등록특허공보 제10-0671432호에는 황금 외 16종 소재의 추출물을 유효성분으로 함유하는 천식 치료용 조성물이 기재되어 있다.
정리하여 보면, 인동등, 우방자 및 황금은 염증 또는 천식 치료 소재로서 언급되고 있다.
그러나 인동등, 우방자 및 황금의 혼합물을 유효성분으로 한 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 치료하는 기술은 검색되지 않았다.
류근호 외 10명. 인동 추출물의 항천식 효과. 생약학회지. 1999, v.30, no.4, pp.377-383
유혜정. 인동꽃 추출물의 항염증 활성. 석사학위논문. 숙명여자대학교 약학대학원. 2008.
남지영 외 2명. 우방자가 항알러지 염증 반응에 미치는 영향. 대한한방소아과학회지. 2006, v.20, no.1, pp.241-255
본 발명은 천연물을 이용함으로써 부작용없이 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축의 증상을 호전시킴으로써 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 염증 동물모델, 과민통 동물모델과, 이질통 통증모델, 포르말린 유도성 통증 동물모델, 거담 동물모델, 발열 동물모델 및 기관지 수축 동물모델을 이용하여 실험한 결과에 기반한 효능을 기초로 하는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 인동등, 우방자 및 황금을 유효성분으로 함유함으로써 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 호전시킴으로써 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 조성물을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은 인동등 3~15 중량부 및 우방자 1~5 중량부의 혼합 추출물 분말과 황금의 추출물 분말을 1:1 ~ 1:3 중량비로 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명에 따른 조성물은, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 함유하여 염증, 통증, 가래, 발열 및 기관지 수축을 호전함으로써 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 효능을 보유하고 있다.
특히 염증 동물모델, 과민통 동물모델과, 이질통 통증모델, 포르말린 유도성 통증 동물모델, 거담 동물모델, 발열 동물모델 및 기관지 수축 동물모델을 이용하여 실험한 결과에 기반한 효능을 기초로 하고 있다는 점에서 현저한 효과를 보유하고 있다.
도 1은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 염증 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 2는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(Thermal hyperalgesia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 3은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(Mechanical hyperalgesia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 4는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 이질통(Mechanical allodynia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 5는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 포르말린 유도성 통증 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 6은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 거담 효능을 나타낸 결과이다.
도 7 내지 도 9는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 해열 효능을 나타낸 결과이다.
도 10 내지 도 12는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 기관지 이완 효능을 나타낸 결과이다.
도 2는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(Thermal hyperalgesia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 3은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(Mechanical hyperalgesia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 4는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 이질통(Mechanical allodynia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 5는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 포르말린 유도성 통증 저해 효능을 나타낸 결과이다.
도 6은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 거담 효능을 나타낸 결과이다.
도 7 내지 도 9는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 해열 효능을 나타낸 결과이다.
도 10 내지 도 12는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 기관지 이완 효능을 나타낸 결과이다.
본 명세서 및 청구 범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서 본 명세서에 기재된 실시예, 참조예 및 도면에 기술된 사항은 본 발명의 가장 바람직한 일 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
제조예
1. 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 조성물(1)
본 발명의 제조예로서 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 조성물의 제조법은 다음과 같다.
1)
인동등
,
우방자
및 황금 중 2종의 소재를 선택하여 혼합한 후 추출한다.
여기에서, 소재는 인동등, 우방자 및 황금에 한정되지 않으며, 상기 소재들의 동속근연 식물로 대체될 수 있다.
인동덩굴은 인동속에 속하며, 인동덩굴의 동속근연 식물에는 구슬댕댕이, 괴불나무, 섬괴불나무, 지리괴불나무, 각시괴불나무 등이 있다. 상기 식물들의 줄기 및/또는 잎으로 인동등을 대체할 수 있다.
또한 우엉은 우엉속에 속하며, 우엉의 동속근연 식물에는 수리취 등이 있다. 상기 식물의 종자로 우방자를 대체할 수 있다.
또한 황금은 골무꽃속에 속하며, 황금의 동속근연 식물에는 소황금, 애기골무꽃, 연지골무꽃, 떡잎골무꽃, 산골무꽃, 구슬골무꽃 등이 있다. 상기 식물들의 뿌리로 황금을 대체할 수 있다.
설계 조건에 따라 인동등, 우방자 및 황금 중 선택되는 소재 2종의 중량비는 변경될 수 있으며, 선택된 소재의 중량비 역시 설계 조건에 따라 변경될 수 있다. 추출 시간, 추출 방법 및 추출 횟수도 설계 조건에 따라 변경될 수 있다.
추출방법에는 용매추출, 초임계유체추출, 발효추출, 퍼콜레이션 추출, 열수추출 법 등 다양한 종류가 있으며, 바람직하게는 용매 추출을 실행할 수 있다.
바람직하게는 인동등 및 우방자를 선택하여 20~40중량% 주정을 5~25배수 가하여 75~100℃에서 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인동등 및 우방자를 각각 3 : 1 중량비로 혼합하여 30중량% 주정을 10~20배수 가하여 85~95℃에서 2회 추출할 수 있다.
2) 앞서 나열한 과정에서 추출된 2종 소재를 제외한 나머지 1종 소재를 추출한다.
설계 조건에 따라 인동등, 우방자 및 황금 중 선택되는 소재 1종의 중량비는 변경될 수 있으며, 선택된 소재의 중량비 역시 설계 조건에 따라 변경될 수 있다. 추출 시간, 추출 방법 및 추출 횟수도 설계 조건에 따라 변경될 수 있다.
바람직하게는 황금을 선택하여 20~40중량% 주정을 5~25배수 가하여 75~100℃에서 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 30중량% 주정을 10~20배수 가하여 85~95℃에서 2회 추출할 수 있다.
또한 주정 추출 후에 다른 종류의 유기용매 분획 추출을 추가로 이용할 수도 있다.
3) 2종 소재 혼합 추출물과 1종 소재 추출물을 각각 농축한 후 건조한다.
농축 방법에는 건조농축, 감압농축, 증발농축, 막농축 및 냉동농축 등이 있으며, 바람직하게는 감압농축을 실행할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
농축시의 온도 범위 및 시간은 다양하게 선택될 수 있으며, 바람직하게는 60℃ 이하에서 실행될 수 있다.
건조 방법에는 자연건조, 열풍건조, 전기건조, 동결건조, 원적외선 전기건조 및 냉풍건조 등이 있으며, 다양하게 선택될 수 있다.
4) 건조된 2종 소재 혼합
농축물과
1종 소재
농축물을
건조분쇄 후 혼합한다.
각 농축물 분말을 1:1~1:3 중량비로 혼합하되, 바람직하게는, 2종 소재 혼합 농축물과 1종 소재 농축물의 중량비를 2:3으로 할 수 있다.
제조예
2. 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 조성물
본 발명의 제조예로서 염증, 통증 및 가래의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물의 제조법은 다음과 같다.
1)
인동등
,
우방자
및 황금을 혼합한 후 추출한다.
설계 조건에 따라, 각 소재의 중량비는 변경될 수 있다.
제조예 1에서와 동일하게, 소재는 인동등, 우방자 및 황금에 한정되지 않으며, 상기 소재들의 동속근연 식물로 대체될 수 있다. 대체될 수 있는 소재들은 제조예 1에 나열된 것과 동일하다.
추출 시간, 추출 방법 및 추출 횟수도 설계 조건에 따라 변경될 수 있다.
추출방법에는 용매추출, 초임계유체추출, 발효추출, 퍼콜레이션 추출, 열수추출 법 등 다양한 종류가 있으며, 바람직하게는 용매 추출을 실행할 수 있다.
바람직하게는 인동등, 우방자 및 황금에 20~40중량% 주정을 5~25배수 가하여 75~100℃에서 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 인동등, 우방자 및 황금을 각각 3 : 1 : 4 중량비로 혼합하여 30중량% 주정을 10~20배수 가하여 80~85℃에서 2회 추출할 수 있다.
또한 주정 추출 후에 다른 종류의 유기용매 분획 추출을 추가로 이용할 수도 있다.
2)
인동등
,
우방자
및 황금 혼합 추출물을 농축한 후 건조한다.
농축 방법에는 건조농축, 감압농축, 증발농축, 막농축 및 냉동농축 등이 있으며, 바람직하게는 감압농축을 실행할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
농축시의 온도 범위 및 시간은 다양하게 선택될 수 있으며, 바람직하게는 60℃ 이하에서 실행될 수 있다.
건조 방법에는 자연건조, 열풍건조, 전기건조, 동결건조, 원적외선 전기건조 및 냉풍건조 등이 있으며, 다양하게 선택될 수 있다.
3)
인동등
,
우방자
및 황금 혼합
농축물을
분쇄한다.
상기에 나열한 과정 전후에 건조, 농축 및 여과 등의 공정이 추가될 수도 있다.
제조예
3. 호흡기 질환을 예방, 개선 또는 치료할 수 있는 약학 제제
제조예 1 또는 2에 기재된 과정으로 제조된 조성물에 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제 등을 추가하여 약제학적 단위 투여형 제형으로 제공한다.
여기에서, 담체, 부형제, 희석제로는 토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과의 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
또한 염증, 통증 및 가래의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 포함하는 약학적 조성물을 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면 활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 고형 제제에는 상기 혼합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분은 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다.
상기 비 수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 제조예에 따른 염증, 통증 및 가래의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 연령, 성별, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 제조예에 따른 염증, 통증 및 가래의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하주사에 의해 투여될 수 있다.
제조예
4. 호흡기 질환을 예방 또는 개선할 수 있는 건강기능식품
제조예 1 또는 2에 기재된 과정으로 제조된 조성물에 식품학적으로 허용되는 첨가제를 첨가하여 건강기능식품을 제조할 수 있다. 건강 기능식품의 제조시 추가 공정이 진행될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물을 이용한 건강기능식품은, 기능성 음료, 각종 식품류, 건강보조식품, 차, 과자류, 껌, 차, 비타민 복합제 등과 같이 다양한 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 캡슐 등의 다양한 형태로 제조될 수 있다.
본 발명의 조성물은 염증, 통증 및 가래의 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이때, 식품 또는 음료 중의 상기 조성물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며 건강 음료 조성물은 100㎖를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율의 필수 성분으로서 자초를 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리통 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 일긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 채소 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하지는 않으나 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
실험예
1.
인동등
,
우방자
및 황금 혼합물의
소염
효능
실험예 설명에 앞서, 모든 실험예에는 제조예 1에 기재된 과정으로 제조된 혼합물을 사용하였다.
즉 인동등 및 우방자를 3:1 중량비로 혼합한 후 20~40중량% 주정을 5~25배수 가하여 85~95℃에서 3시간씩 2회 추출하여 여과한 후에 60℃이하에서 감압농축 및 건조한다. 그 후에, 황금에 20~40중량% 주정을 5~25배수 가하여 85~95℃에서 3시간씩 2회 추출하여 농축 및 건조한다. 그 후에, 인동등 및 우방자 건조물과 황금 건조물을 2:3 중량비로 혼합하여 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 제조한다.
실험예 1 내지 3의 실험 준비는 실험예 1에 기재된 실험 준비 과정과 동일하게 수행되었음을 밝혀둔다. 도면에는 YG1으로 표기하였다.
(1) 실험 준비
SD 랫드에 대조 약물인 플루비프로펜(flubiprofen)과 평가 약물인 인동등, 우방자 및 황금 추출물(10 mg/kg, 30 mg/kg 및 100 mg/kg)을 경구투여하였다. 앞서 언급한 바와 같이, 플루비프로펜은 소염진통제의 한 종류이다.
상기 약물들의 경구투여는 지모산(zymosam) 피하투여 1시간 전에 실행되었다.
(2) 실험 과정
SD 랫드의 발바닥에 지모산(20 mg/ml, 200 ul)을 피하투여한 후, 투여 3시간째에 각 군의 부종(Edema) 크기를 측정하였다.
(2) 실험 결과
도 1은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 염증 저해 효능을 나타낸 결과이다.
실험 결과, vehicle군(대조군)에서는 부종의 부피가 약 1.3ml 가량으로 측정되었다. 반면 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 투여 농도를 증가시킴에 따라 부종의 부피가 약 1.15ml까지 감소하여, vehicle 투여군과 비교했을 때 부종의 부피가 현저히 감소하는 양상을 보였다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 염증 저해 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예
2.
인동등
,
우방자
및
황금 혼합물의
과민통
저해 효능
(1) 실험 과정
전 실험군에 기계적 자극을 가하여 회피시의 자극의 문턱값을 측정하고, 또한 열적 자극을 가하여 회피 시간을 측정하였다.
이는 실험군의 발 통증이 심해질수록 실험군이 발을 움츠리는 자극의 문턱값이 낮아지고 자극을 견디는 시간이 점점 빨라지는 원리를 이용하였다. 이를 발 회피 반응(paw withdrawal latency)실험이라 일컫는다.
(2) 실험 결과
도 2는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(thermal hyperalgesia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
열적 자극을 가한 결과, 시간 경과에 따라 모든 실험군에서 통증회피 시간이 빨라지고 있으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군은 vehicle 투여군보다 회피 시간이 느린 것을 알 수 있다.
vehicle 투여군에서는 회피 시간이 약 9.5초였으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 투여 농도를 증가시킴에 따라 회피 시간이 최대 약 16초까지 증가하여, vehicle 투여군과 비교했을 때 회피 시간이 현저히 증가하는 양상을 보였다.
특히, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 100 mg/kg 투여군의 회피 시간은 기존 약물인 플루비프로펜 투여군의 회피 시간인 약 20초와 유사한 수준으로, 인동등, 우방자 및 황금이 천연물인 것을 감안하면 상기 혼합물은 과민통 저해 효능이 현저하다고 할 수 있다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 열적 과민통 저해 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
도 3은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 과민통(mechanical hyperalgesia)을 저해 효능을 나타낸 결과이다.
기계성 자극을 가한 결과, 시간 경과에 따라 모든 실험군에서 자극의 문턱값이 낮아지고 있으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군은 vehicle 투여군보다 자극의 문턱값이 높은 것을 알 수 있다.
vehicle 투여군에서는 문턱값이 약 120g였으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 투여 농도를 증가시킴에 따라 문턱값이 약 190g까지 증가하여, vehicle 투여군과 비교했을 때 문턱값이 현저히 증가하는 양상을 보였다.
특히, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 100 mg/kg 투여군의 문턱값은 기존 약물인 플루비프로펜 투여군의 문턱값인 약 199g과 유사한 수준으로, 상기 혼합물은 과민통 저해 효능이 현저하다고 할 수 있다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 기계적 과민통 저해 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예
3.
인동등
,
우방자
및 황금
혼합물의
이질통
저해 효능
(1) 실험 과정
실험예 2와 동일한 과정으로 전 실험군에 기계적 자극을 가하여 회피시의 자극의 문턱값을 측정하였다. 단, 본 실험예에서는 이질통을 측정하였다.
2) 실험 결과
도 4는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 이질통(Mechanical allodynia) 저해 효능을 나타낸 결과이다.
기계성 자극을 가한 결과, 시간 경과에 따라 모든 실험군에서 자극의 문턱값이 낮아지고 있으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군은 vehicle 투여군보다 자극의 문턱값이 높은 것을 알 수 있다.
vehicle 투여군에서는 문턱값이 약 3g였으나, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 투여 농도를 증가시킴에 따라 문턱값이 약 9g까지 증가하여, vehicle 투여군과 비교했을 때 문턱값이 현저히 증가하는 양상을 보였다.
특히, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 100 mg/kg 투여군의 문턱값은 기존 약물인 플루비프로펜 투여군의 문턱값인 약 14g과 유사한 수준으로, 상기 혼합물은 이질통 저해 효능이 현저하다고 할 수 있다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 이질통 저해 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예
4.
인동등
,
우방자
및
황금 혼합물의
포르말린 유도성 통증 저해 효능
(1) 실험 준비
ICR 마우스에 플루비프로펜 100 mg/kg과 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 10 mg/kg, 30 mg/kg 및 100 mg/kg를 경구투여하였다.
(2) 실험 과정
플루비프로펜과 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 경구투여 1시간 경과 후 ICR 마우스의 발바닥에 포르말린(1% 20ul)을 피하투여하고 통증반응(paw licking)을 40분간 측정하였다.
상기 통증반응은 초기 5분간 진행되는 1차기와, 시간차를 두고 나타나는 2차기로 분류할 수 있으며 1차기는 신경성 통증기, 2차기는 염증성 통증기로 알려져 있다. 따라서 1, 2차기 모두를 측정하였다.
(2) 실험 결과
도 5는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 통증 저해 효능을 나타낸 결과이다.
통증 반응 측정 결과, 1차기에서는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 자극 지속시간이 vehicle 투여군에서보다 미미하게 감소하였으며, 플루비프로펜 투여군에서는 오히려 자극 지속시간이 약 150초로 증가하였다. 1차기의 통증은 마약성 진통제에서만 진통 효과가 있다는 것을 감안하면 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 진통 효능이 현저하다고 할 수 있다.
2차기에서는 모든 약물 투여군에서 vehicle 투여군보다 자극 지속시간이 감소하였으며, 특히 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군에서는 자극 지속시간이 약 70초로, 플루비프로펜의 자극 지속시간인 약 80초보다 더 감소하였다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 통증 저해 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예
5.
인동등
,
우방자
및
황금 혼합물의
거담 효능
(1) 실험 과정
가래의 pH를 증가시키면 가래의 당질 결합이 느슨해지므로, 가래의 배출이 용이하게 된다.
페놀 레드(phenol red)는 본래 무색투명한 액체이나, pH 8.2 이상의 물질에반응하면 붉은색으로 변하는 지시약이다. 가래의 pH는 본래 7이므로, 페놀 레드의 농도 및 색 변화를 통해 가래 배출, 즉 거담의 활성을 측정할 수 있다.
정상군(normal)은 어떤 처리도 하지 않았으며, 대조군(control), 암브록솔(ambroxol) 200 mg/kg 투여군과, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 200 mg/kg 투여군에 페놀 레드를 복강 주사한 후, 분리한 기관에서 페놀 레드의 농도를 측정하고 색 변화를 관찰하였다.
(2) 실험 결과
도 6은 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 거담 효능을 나타낸 결과이다.
페놀 레드의 농도 측정 결과, 대조군의 페놀 레드 농도에 비하여 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군의 페놀 레드 농도가 현저히 낮은 것을 알 수 있었다. 대조군의 페놀 레드 농도는 약 1.9 μg/ml였으며, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군의 페놀 레드 농도는 약 0.8 μg/ml였다.
특히, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군의 페놀 레드 농도는 기존 약물인 암브록솔 투여군의 페놀 레드 농도인 약 0.7 μg/ml과 유사한 수준으로, 상기 혼합물은 거담 효능이 현저하다고 할 수 있다.
설명에 앞서, 왼쪽 튜브는 대조군, 가운데 튜브는 암브록솔 투여군, 오른쪽 튜브는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군임을 명시한다.
또한 페놀 레드의 색 관찰 결과, 대조군 기관지의 페놀 레드 색은 무색투명하였던 반면, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군 기관지의 페놀 레드 색은 붉은색으로 변한 것을 볼 수 있다. 이는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 투여로 인하여 기관지 내 가래의 pH가 높아졌으며, 가래의 배출이 용이하게 되었다는 것을 방증한다.
특히, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물 투여군 기관지의 페놀 레드 색은 기존 약물인 암브록솔 투여군 기관지의 페놀 레드 색과 유사한 수준으로 붉은 것을 볼 수 있으며, 상기 혼합물은 거담 효능이 현저하다고 할 수 있다.
이로써, 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 조합할시 현저한 거담 효능이 있다는 결론을 도출할 수 있다.
실험예
5.
인동등
,
우방자
및 황금 혼합물의 해열 효능
(1) 실험 과정
[발열 동물 모델 제작과 약물 투여]
실험에 사용된 rat은 SD-rat 7주령 (220~250g) (다물 사이언스, 대전)이고 모두 수컷을 사용하였다. 모든 대상의 실험쥐는 사료와 음수를 사육기간에 마음대로 섭취하도록 하였으며 사육장 내에서 제한 없이 운동하도록 하였다. 발열 모델은 LPS (2.5 mg/kg) 를 복강 투여하여 유발시켰다. 실험동물은 군당 5마리씩 5그룹으로 구분하였고 YG-1 은 saline에 용해시켜 존대가 부착된 1 ml 주사기를 이용하여 경구투여 하였다. 발열 유발 30분전 flurbiprofen (20 mg/kg), YG-1 (100, 400 mg/kg)을 존대로 경구투여 하였다.
[체온측정]
Rat 직장체온계 (MT200, microlife, 서울)을 사용하여 직접 직장에 넣어 체온을 측정하였다. 실험 시작 전과 LPS투여로 인후염 유도 후 1시간이 지났을 때 측정을 한다. 이후에는 한 시간 단위로 하여 총 12번의 체온 측정을 하였다.
[IL-
1β
,
TNF
-α,
프로스타글라딘
E
2
(
PGE
2
)의 혈청 내 분비량 측정]
실험종료 각각 6시간 (peak time)과 12시간 (last time)에 조레틸(zoletil)로 마취한 후 심장채혈로 혈액을 채취한 후 centrifuge (3000 rpm, 5 min, 4 ℃)를 하여 혈청을 분리 하고 -20 ℃에 보관하였다. 분리한 혈청은 6시간 (peak Time)과 12시간 (Last Time)으로 나누어 inflammatory cytokine을 분석하였다.
혈액 내 IL-1β, TNF-α, PGE2의 양은 ELISA kit를 사용하여 통상적인 방법에 따라 처리한 다음 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
[뇌조직 내 COX-2,
iNOS
의 Western blotting 에 의한 평가]
LPS 투여 후 6시간과 12시간째에 실험 종료 후 모든 rat을 부검하여 뇌조직을 군별로 채취하였다. 추출한 뇌조직은 송과체 부분을 RIPA buffer처리 후 4℃에서 15,000 RPM에서 15분 동안 원심분리 하였다.
단백질 정량은 BCA protein assay reagent (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA)를 사용하였다. 단백질 sample은 acrylamide gel 12%에서 electrophoresis를 하였고, polyvinylidene difluoride membrane electrotransfer 하였다. Membrane은 실온에서 blocking buffer (PBS-T에 5 % skim milk)에 blocking을 한 뒤, COX-2, iNOS (Santa cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA ,USA), β-actin antibody (Cell signaling)를 1:1000으로 하여 4 ℃에서 24시간 incubation하였다. Membrane은 PBS-T로 washing 후 실온에서 peroxidase-conjugated goat anti-rabbit IgG secondary antibody (Millipore, Temecula, CA, USA)와 1시간동안 반응시켰다. Supersignal West Dura extended duration substrate (Thermo, CA, USA)를 사용하여 Chemi Imager analyzer system (Alpha Innotech, San Leandro, CA, USA)에서 발색, 감광 시켰다.
[통계학적 검정]
모든 실험 결과는 평균±표준오차로 표시하였다. 대조군과 LPS 단독 처리군(vehicle) 그리고 각 실험군 간의 차이를 검정하기 위해 Student's t-test와 ANOVA 통해 실시하였다. 실험의 분석시 유의 수준은 p < 0.05 로 설정하여 검정하였다.
(2) 실험 결과
도 7 내지 도 9는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 해열 효능을 나타낸 결과이다.
[
LPS에
의한 염증성 발열 모델에서
YG
-1의 효과]
LPS (2.5 mg/kg)을 투여 후 1시간 간격으로 12시간 동안 체온 측정한 결과는 가장 체온이 많이 올라간 6시간 (peak time) 과 12시간 (last time)으로 나누어 기록하였다.
대조군(Control)과 비교해서 초기에 LPS 처리 군 (vehicle) 과 YG-1 (100 mg/kg)군은 점차적으로 온도가 증가하는 것이 보였으나, YG-1 (100 mg/kg)군은 6시간 후에 체온 상승이 억제되는 것이 보였다.
flurbiprofen (20 mg/kg), YG-1 (400 mg/kg)은 체온상승에 크게 변동이 없는 것으로 보아 YG-1 (400 mg/kg)군에서 LPS투여에 따른 발열을 유의성 있게 억제하는 것을 확인할 수 있었다.
또한 대조군인 flurbiprofen군과 비교해보았을 때 YG-1 (100, 400 mg/kg)은 LPS투여 6시간 (peak time) 부터 해열작용이 더 유의하게 일어나는 것을 알 수 있었다.
[
LPS에
의해 유도된 IL-
1β
,
TNF
-α,
PGE
2
의
혈청 내
YG
-1의 발현 억제 효과]
실험 시작 후 체온이 가장 많이 올라간 6시간과, 실험 종료시간인 12시간의 혈청 내 염증성 사이토카인 (IL-1β, TNF-α, PGE2)의 측정결과 6시간과 12시간 모두 LPS군에서 증가하는 것을 확인하였다.
Flurbiprofen (20 mg/kg)과 YG-1 (100, 400 mg/kg) 투여군에서 IL-1β와 PGE2은 유의성 있게 발현이 억제되는 것을 보인 반면, TNF-α은 LPS처리군 에서는 유의성 있게 증가하였으나 YG-1과 flurbiprofen 투여군에서 발현을 억제하지 못했다. 본 실험의 결과 YG-1이 LPS에 의해 증가되는 염증성 사이토카인의 발현을 억제함으로써 발열이 억제되는 것으로 사료된다.
[
YG
-1의 뇌조직 내
iNOS
, COX-
2발현
억제 효과]
YG-1 (100, 400 mg/kg)과 LPS (2.5 mg/kg)을 투여 후 6시간 (peak time) 과 12시간 (last time) 으로 나누어 안락사를 시킨 후 송과체에서의 iNOS와 COX-2의 발현을 분석하였다. LPS를 단독투여한 군에서는 iNOS와 COX-2의 발현이 peak time과 last time에서 유의하게 증가한 반면, YG-1 투여 군에서는 iNOS와 COX-2의 발현이 peak time과 last time 모두에서 유의성 있게 발현이 억제되는 것을 확인하였다.
실험예
7.
인동등
,
우방자
및 황금 혼합물의 기관지 이완 효능
(1) 실험 과정
[백서 기관지의 분리]
건강한 수컷 백서 (Sprague-Dawley, 몸무게 약 250-300 g)의 두부를 탈골시킨 후 흉곽을 절제하고 기관지를 분리한다. 신속하게 분리된 기관지를 95% O2와 5% CO2의 혼합기체로 포화된 ice-cold Krebs 용액 (118 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 1.1 mM MgSO4, 1.2mM KH2PO4, 1.5 mM CaCl2, 25 mM NaHCO3, 10 mM glucose, pH 7.4)에 넣고 주위 지방 및 결합조직을 제거한 후 약 3-4 mm의 길이의 절편으로 만든다. 이때 기관지 평활근을 손상시키지 않도록 신중을 기한다.
[백서 기관지의 장력 측정]
준비 되어진 백서의 기관지 절편은 orgam chamber 안 95 % O2, 5 % CO2혼합가스로 포화시킨 37.4℃의 Krebs 용액에서 고정시킨 후 isometric tension을 force-displacement transducer (Grass FT 03, GRASS Instrument, MA, USA)가 장착된 생리 기록계 (Grass Model 7E, Grass Instrument, MA, USA)를 이용하여 측정한다. 이때 heat/circulator (Model CW-10GL, JEIO TECH, Korea)에 의해 일정한 온도를 유지한다. 본 실험을 시작하기 전에 90분 동안 방치하여 평형상태에 도달하게 하였는데, 초기 60분간 점진적으로 tension을 증가시켜 2g의 optimum tension에 도달하도록 하여 안정화시킨 후 본 실험을 진행한다.
안정화된 기관지에 acetylcholine (100 μM)으로 수축을 유도하여 5분동안 평형에 도달하도록 하고 이후 YG-1을 0.01 mg/ml, 0.03 mg/ml, 0.1 mg/ml, 0.3 mg/ml 그리고 1 mg/ml을 점차 누적적으로 투여하였으며 각 농도별로 10min씩 관찰하여 기관지의 긴장도 변화를 측정하였다.
또한, 기전을 살펴보기 위해서 여러 가지 차단제를 본 실험에 들어가기 20분전 전처리해준 후 같은 방법으로 100 μM의 acetylcholine으로 수축을 유도한 후 YG-1을 농도별로 살펴보았다. 유발한 수축력을 100%로 가정한 후 시험물질 투여군의 이완율(%)을 산출했다.
(2) 실험 결과
도 10 내지 도 12는 인동등, 우방자 및 황금 혼합물의 기관지 이완 효능을 나타낸 결과이다.
[
YG
-1의 농도 의존성 기관지 이완 효과]
YG-1의 이완효과를 알아보기 위하여 기관지 평활근을 acetylcholine으로 수축을 유도한 후 농도 의존성 효과를 진행하였다. Acetylcholine으로 수축을 유도한 후 YG-1을 처리하지 않았을 때 같은 시간동안 수축이 유지되었으며, YG-1을 0.01 mg/ml, 0.03 mg/ml, 0.1 mg/ml, 0.3 mg/ml 그리고 1 mg/ml을 점차 누적적으로 투여하였으며 각 농도별로 10min씩 관찰하였을 때 이완효과를 보이는 것을 확인하였다.
YG-1은 1 mg/ml 농도에서 97.580 ± 2.02%의 이완효과가 나타났다.
따라서 기관지 평활근 이완에 있어서 YG-1의 효과를 확인하였기에 기전을 알아보고자 실험을 더 진행하게 되었다. (*p<0.05, ** p<0.01, and ***p<0.001 vs. time-control.)
[기관지 평활근 수축 억제 효과]
기관지 평활근 긴장도 증가에 있어서 대표적인 수축제인 acetylcholine은 무스카린성 M3 수용체에 작용하여 세포내 IP3의 증가로 인해 Ca2 +농도가 유입되고 그로인하여 수축을 유도한다. 따라서 YG-1이 acetylcholine에 의한 기관지 평활근 수축에 영향을 미치는지 알아보기 위하여 0.3 및 1 mg/ml의 농도의 YG-1을 전처리 한 후 acetylcholine을 농도 의존적으로 투여하였을 때 수축력을 비교해 보았다.
그 결과 YG-1에 의하여 acetylcholine 수축력은 감소하였으며, 0.3 mg/ml 보다 1 mg/ml을 전처리 하였을 때 그 효과가 크게 나타났다. (*p<0.05, ** p<0.01, and ***p<0.001 vs. vehicle)
Claims (6)
- 인동등, 우방자 및 황금의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 조성물로서,
상기 혼합물의 농도가, SD 랫드 기준으로 1회 경구투여시 100~400 mg/kg인 경우에 해열시키고, 기관지 수축 모델의 3~4mm 절편 기준으로 0.3~1mg/ml인 경우에 기관지를 이완시킴으로써,
기관지 협착증을 예방, 개선 또는 치료하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 혼합물은,
인동등 3~15 중량부 및 우방자 1~5 중량부의 혼합 추출물 분말과 황금 추출물 분말을 1:1 ~ 1:3의 중량비로 혼합한 것을 특징으로하는 약학적 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 혼합물은 소염 효능, 과민통, 이질통 및 포르말린 유도성 통증을 진통하는 효능과, 거담 효능을 추가로 보유하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 청구항 1 내지 청구항 3 중 어느 한 항에 기재된 혼합물에 식품학적으로 허용가능한 첨가제를 첨가하여 제조한 기관지 협착증을 예방 또는 개선하기 위한 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160038720A KR101758639B1 (ko) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160038720A KR101758639B1 (ko) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR101758639B1 true KR101758639B1 (ko) | 2017-07-17 |
Family
ID=59442922
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020160038720A KR101758639B1 (ko) | 2016-03-30 | 2016-03-30 | 인동등, 우방자 및 황금 혼합물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101758639B1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109010642A (zh) * | 2018-10-11 | 2018-12-18 | 方向坤 | 一种治疗发烧的中药组合物及其制备方法 |
| KR20220144219A (ko) | 2021-04-19 | 2022-10-26 | 경북대학교 산학협력단 | 섬괴불나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 |
-
2016
- 2016-03-30 KR KR1020160038720A patent/KR101758639B1/ko active IP Right Grant
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