CN101679439A

CN101679439A - P70 s6激酶抑制剂

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Publication number: CN101679439A
Application number: CN200880015686A
Authority: CN
Inventors: R·D·达利; 黄建平; S·约瑟夫; T·A·谢泼德; C·L·霍尔斯特
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2007-05-11
Filing date: 2008-05-01
Publication date: 2010-03-24
Anticipated expiration: 2028-05-01
Also published as: US20090163714A1; PE20090887A1; TW200848053A; DK2148880T3; PL2148880T3; IL201564A0; EA016445B1; PT2148880E; AU2008251692A1; DOP2009000257A; EP2148880A1; EA200971051A1; JP5503532B2; WO2008140947A1; TN2009000446A1; CO6241109A2; UA99284C2; RS53451B; HK1140767A1; IL201564A

Abstract

本发明提供以下通式的p70 S6激酶抑制剂：包括它们的药物配制剂，和它们的使用方法。

Description

P70 S6激酶抑制剂

本发明的背景

p70 S6激酶是雷帕霉素(mTOR)发信号途径的磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT/哺乳动物靶的下游效应物并且p70 S6激酶通常在许多人实性肿瘤中活化。p70 S6激酶活性响应于促有丝分裂的刺激来调节核糖体生物合成、细胞生长和细胞周期进展。因此，抑制p70 S6激酶活性将阻断核糖体生物合成，所选择蛋白质的合成，细胞生长，和细胞周期进展。因此p70 S6激酶的作用在于肿瘤细胞增殖和保护细胞避免凋亡。此外，p70 S6激酶的抑制剂被描述为可用于治疗感染、炎症和肿瘤形成，以及新陈代谢性疾病和病症。(WO 2005/117909，WO 2006/071819，WO2006/046024，WO 2007/125321和WO 2008/012635)。本发明提供抑制p70 S6激酶活性的令人吃惊地有效力的化合物。另外本发明的特殊化合物是高度生物可利用的。

本发明的概述

本发明提供通式I的化合物：

其中：

Y是N或CR⁶；

Z₁和Z₂独立地是CR³或N，前提条件是Z₁和Z₂不都是N；

R¹是H或C₁-C₄烷基；

R²是任选被选自C₁-C₄烷氧基、氰基、NO₂、卤素、三氟甲基和三氟甲氧基中的第一取代基所取代和任选进一步被选自卤素中的第二取代基所取代的苯基；

R³是氢，卤素，C₁-C₄烷基，C₃-C₆环烷基，或C₂-C₆炔基，其中C₂-C₆炔基任选被羟基取代；

R⁴和R⁵独立地是氢或C₁-C₄烷基；

R⁶是氢或羟基；或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供通式I的化合物，其中：

Y是N或CR⁶；

Z₁和Z₂独立地是CR³或N，前提条件是Z₁和Z₂不都是N；

R¹是H或C₁-C₄烷基；

R³是氢，卤素，或C₃-C₆环烷基；

R⁴和R⁵独立地是氢或C₁-C₄烷基；

R⁶是氢或羟基；或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供抑制在哺乳动物体内p70 S6激酶的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I或IA的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供抑制在哺乳动物中血管生成的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

另外，本发明还提供治疗在哺乳动物中结肠腺癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

另外，本发明还提供治疗在哺乳动物中非小细胞肺癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供治疗在哺乳动物中多形性胶质母细胞瘤的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明进一步提供治疗在哺乳动物中卵巢癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明进一步提供治疗在哺乳动物中白血病的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明进一步提供治疗在哺乳动物中胰腺癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明另外提供治疗在哺乳动物中前列腺癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明进一步提供治疗在哺乳动物中乳腺癌的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供治疗在哺乳动物中淋巴管肌瘤的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。

本发明还提供药物配制剂，它包含通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐，和相结合使用的药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明还提供通式I或IA的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造抑制p70 S6激酶的药物的用途。另外，本发明提供用于抑制在哺乳动物中p70 S6激酶的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于抑制p70 S6激酶的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明还提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造抑制血管生成的药物的用途。另外，本发明提供用于抑制在哺乳动物中血管生成的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于抑制血管生成的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗结肠腺癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中结肠腺癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗结肠腺癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明还提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗非小细胞肺癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中非小细胞肺癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗多形性胶质母细胞瘤的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中多形性胶质母细胞瘤的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗多形性胶质母细胞瘤的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗卵巢癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中卵巢癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗卵巢癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗白血病的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中白血病的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗白血病的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗胰腺癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中胰腺癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗胰腺癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗前列腺癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中前列腺癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗前列腺癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗乳腺癌的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中乳腺癌的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗乳腺癌的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

本发明进一步提供通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐用于制造治疗淋巴管肌瘤的药物的用途。另外，本发明提供用于治疗在哺乳动物中淋巴管肌瘤的通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐。此外，本发明提供适合于治疗淋巴管肌瘤的药物组合物，它包括通式I的化合物或它的药物学上可接受的盐和与其相结合使用的一种或多种药物学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。

另外，本发明提供通式1的化合物在治疗中的用途。

本发明的详细说明

在以上通式中使用的一般化学术语具有它们通常的意义。例如：术语“C₁-C₄烷基”指具有1-4个碳原子的直链或支链、一价、饱和的脂族链，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基和叔丁基等等。同样地，术语“C₁-C₃烷基”包括甲基，乙基，丙基和异丙基等等。

在这里使用的术语“C₁-C₄烷氧基”指有1-4个碳原子连接于氧原子上的直链或支链烷基链。典型的C₁-C₄烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，叔丁氧基等等。

在这里使用的术语“卤素”指氯，溴，碘或氟原子，除非在这里另作说明。

在这里使用的术语“C₃-C₆环烷基”指包括碳和氢原子的全饱和环并且包括环丙基和环丁基。

在这里使用的术语“C₂-C₆炔基”是具有2-6个碳原子和一个叁键的直链或支链炔基链，它包括但不限于，乙炔基，丙炔基，丁炔基，戊炔基，等等。

本发明的化合物是碱，因此与许多有机和无机酸中的任何一种反应形成药物学上可接受的盐类，并且本发明包括通式I或IA的化合物的药物学上可接受的盐类。在这里使用的术语“药物学上可接受的盐”指对活的生物基本上无毒的通式I的化合物的盐。此类盐包括在Journal ofPharmaceutical Science，66，2-19(1977)中列出的药物学上可接受的盐类，它们是本领域中技术人员已知的。盐酸盐，甲磺酸盐，和甲苯磺酸盐(也已知为对甲苯磺酸盐)是优选的盐。盐酸盐和甲苯磺酸盐是最优选的。

本发明的化合物中的一些具有一个或多个手性中心并且可以各种的立体异构的构型存在。由于这些手性中心的存在，本发明的化合物能够作为外消旋物，对映异构体的混合物和作为单种对映异构体，以及作为非对映异构体和非对映异构体的混合物存在。所有这些外消旋物，对映异构体和非对映异构体是在本发明的范围之内。通式I的化合物的特定立体异构体和对映异构体能够使用众所周知的技术和方法由本领域中的普通技术人员制备，如由J.Jacques，等人，“Enantiomers，Racemates，and Resolutions”，John Wiley and Sons，Inc.，1981，和E.L.Eliel and S.H.Wilen，“Stereochemistry of Organic Compounds”，(Wiley-Interscience1994)，和欧洲专利申请EP-A-838448，1998年4月29日公开的那些。拆分的例子包括重结晶技术或手性色谱分离法。

本领域中技术人员还会认识到，其中R¹是氢或其中Z₁或Z₂是N的通式I的化合物是作为互变异构体存在的。虽然互变异构体在结构上是不同的，但是本领域中技术人员会认识到它们以平衡存在并且在常用条件下容易地和快速地可互相转化。(参见March，Advanced Organic Chemistry，Third Edition，Wiley Interscience，New York，New York(1985)，第66-70页；和Allinger，Organic Chemistry，Second Edition，WorthPublishers，New York，New York，(1976)，第173页)。因此，通式I的化合物以单种互变异构形式的表示考虑到了单独的两种互变异构形式和它们的混合物。同样地，其中例如R¹是氢的通式I的化合物作为1H-咪唑或作为3H-咪唑的命名都考虑到两种互变异构形式。

某些类型的通式I化合物是优选的p70 S6激酶抑制剂。下面的段落描述了此类优选的类别：

a)Y是CR⁶；

b)Y是CH；

c)R¹是H；

d)R¹是CH₃；

e)Z₁是CR³；

f)Z₁是CH；

g)Z₂是N；

h)R²是被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基取代和任选进一步被属于卤素的第二取代基取代的苯基；

i)R²是被选自卤素和三氟甲基的第一取代基取代和进一步被属于卤素的第二取代基取代的苯基；

j)R²是在3或4位上被选自卤素和三氟甲基的第一取代基所取代和任选进一步被属于卤素的第二取代基所取代的苯基。

k)R²是在3或4位上被选自卤素和三氟甲基的第一取代基所取代和进一步被属于卤素的第二取代基所取代的苯基。

l)R²是在3位上被选自卤素和三氟甲基的第一取代基所取代和任选进一步在4位上被属于卤素的第二取代基所取代的苯基。

m)R⁵是H；

n)通式I的化合物是游离碱；

o)通式I的化合物是盐；

p)通式I的化合物是盐酸盐；

q)通式I的化合物是甲苯磺酸盐。

通式I的其它优选化合物是其中Y是CR⁶和R¹是H或CH₃的那些。通式I的附加优选化合物是其中Y是CR⁶和R¹是H或CH₃；和R²是被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基所取代和任选进一步被属于卤素的第二取代基所取代的苯基的那些化合物。

通式I的优选化合物也包括其中Y是CR⁶和R¹是H或CH₃；R²是被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基所取代和任选进一步被属于卤素的第二取代基取代的苯基；R⁵是H；Z₁是CR³和Z₂是N的那些化合物。

也优选的是其中Y是CH；R¹是H或CH₃；R²是被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基所取代和任选进一步被属于卤素的第二取代基取代的苯基；R⁵是H；Z₁是CH；和Z₂是N的具有通式I的那些化合物。

另外，优选的是其中Y是CH；R¹是H或CH₃；R²是被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基所取代和进一步被属于卤素的第二取代基取代的苯基；R⁵是H；Z₁是CH；和Z₂是N的具有通式I的那些化合物。

通式I的更优选化合物是其中Y是CH；R¹是H或CH₃；R²是在3位上被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基取代和任选进一步在4位上被属于卤素的第二取代基取代的苯基；R⁵是H；Z₁是CH；和Z₂是N的那些化合物。

另外，通式I的更优选化合物是其中Y是CH；R¹是H或CH₃；R²是在3位上被选自卤素和三氟甲基中的第一取代基取代和进一步在4位上被属于卤素的第二取代基取代的苯基；R⁵是H；Z₁是CH；和Z₂是N的那些化合物。

特别优选的是其中Y是CH，Z₁是CH和Z₂是N的通式I的那些化合物。

下面化合物，4-{4-[4-(3-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶：

或它的药物学上可接受的盐类，是最特别优选的。

另外，化合物4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶：

或它的药物学上可接受的盐类，也是最特别优选的。

通式I的化合物是p70 S6激酶的抑制剂并且因此可用于治疗哺乳动物中的新陈代谢性疾病和病症如肥胖病，糖尿病，代谢性综合症，胰岛素抵抗症，高血糖症，血氨基酸过多症，和高脂质血症，和增殖病症，特别是多形性胶质母细胞瘤，结肠直肠癌，肝细胞性的癌症，肺癌，乳腺癌，卵巢癌症，和肾细胞癌。另外已经发现，p70 S6激酶途径在良性肿瘤的细胞中活化，如与淋巴管肌瘤(LAM)相结合的那些细胞。参见Journal of Bological Chemistry，277：34，30958-30967(2002)，和ModernPathology 19，839-846(2006)。因此p70 S6激酶抑制剂也可用于治疗LAM。p70 S6激酶的抑制剂也是哺乳动物中血管生成的有用抑制剂。优选的是所要治疗的哺乳动物是人。

通式I的化合物能够由本领域中的普通技术人员根据本领域中公认的技术和程序来制备。更具体地说，通式I的化合物能够按照在下面所述的反应路线、方法和实施例中所述的方法来制备。本领域中技术人员会认识到，在以下反应路线中的各步骤可以加以改变来提供通式I或IA的化合物。试剂和起始原料是本领域中的普通技术人员容易获得的。全部的取代基如前面所定义，除非另作说明。为了清楚起见，一些取代基在下面的反应路线中已省略，并且不希望以任何方式限制反应路线的教导。

通式I的化合物可以按下列例示的反应路线制备，其中R¹，R²，R⁴，R⁵，Z₁，Z₂和Y如前面所定义，L是合适的离去基团如卤素。

反应路线1

通式(a)的取代吡唑并嘧啶(或嘌呤或吡咯并嘧啶)化合物与通式(b)的取代哌嗪或哌啶进行反应，形成通式I或IA的化合物。例如，通式(a)的化合物，哌嗪(b)和合适的碱如三乙胺、二异丙基乙胺或N-甲基吗啉在合适溶剂如丙醇或异丙醇中的溶液被加热至约70℃-100℃，得到通式I或IA的化合物，它然后可被分离，以及如果必要和需要，通过使用现有技术中众所周知的技术如色谱法来提纯。

通式(a)的化合物是可从市场上买得到的，或可通过本领域中普通技术人员已知的方法合成。例如，其中Z₁是CR³和Z₂是N的通式(a)化合物可以通过别嘌呤醇与氯化剂如磷酰氯反应，然后加热到约80℃-90℃来制备。此外，通式(a)的化合物，如果需要的话，可在本领域中公知的条件下被取代。例如，其中Z₁或Z₂是CR³的通式(a)化合物，在合适的溶剂中或合适溶剂的混合物中(如乙腈和乙酸)，通过暴露于合适的氟化剂如[1-(氯甲基)-4-氟-1，4-重氮鎓双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐)]而被氟化。另外，其中R³是烷基或环烷基的通式(a)化合物通过现有技术中已知的方法来合成。例如，二氯嘧啶与环丙甲醛在强碱如LDA存在下在溶剂如THF中在冷却了的温度下进行反应，生产出必需的醇。在氧化铬(VI)存在下在0℃下在合适溶剂如丙酮中的氧化反应得到所需的酮，它然后与水合肼在合适溶剂如THF中在室温下进行反应，得到通式(a)的环烷基取代的吡唑并嘧啶化合物。另外，生产其中R³是炔基的化合物的方法是本领域中技术人员已知的。例如，通式(a)的氯化化合物和三甲基甲硅烷基乙炔在三乙胺和合适的溶剂如DMF和/或THF中通过使用四(三苯基膦)钯(0)(Pd(Ph₃P)₄)作为催化剂进行反应，获得通式(a)的乙炔基取代的化合物。

必需的哌啶/哌嗪化合物(b)可以按照在下面的反应路线所示来制备，其中R¹，R²，R⁴，R⁵和Y如前面所述，PG是合适的保护基团。

反应路线2

胺(c)与受保护的哌啶在合适的偶联剂如氯甲酸异丁酯，1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]-碳二亚胺盐酸盐(EDC)，或1-丙烷磷酸环酸酐(PPA)和合适的碱如N-甲基吗啉或三乙胺的存在下，在合适的溶剂如THF、二氯甲烷或N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中在降低的温度下进行反应，形成通式(d)的酰胺化合物。其中Y是CR⁶的后续咪唑哌啶(b1)是通过将化合物(d)在密封容器中暴露于乙酸铵或氯化铵而形成的，或对于其中R⁵是H的化合物，通过在加压下暴露于微波加热而形成。或者，通式(b1)的化合物可以通过脒(e)与合适的卤代酮在合适的溶剂如DMF或丙酮中，在碱如碳酸钾或碳酸钠的存在下进行反应，随后在本领域中普通技术人员已知的条件下进行去保护而形成。通式(b1)的羟基哌啶也可通过通式(m)的苯甲酰甲基溴与甲酰胺在加热下进行反应来合成。咪唑(n)然后被添加到合适的溶剂如THF中，冷却，和用氮保护基团如2，2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基-甲基氯在氢化钠存在下处理，同时让反应混合物升至室温，得到通式(o)的中间体。后续的受保护咪唑然后可用金属化试剂如正丁基锂在惰性溶剂如THF中，在降低的温度下和在惰性气氛下进行处理。这一混合物用合适取代的哌啶酮处理，然后经过约1小时升至室温，得到(p)类型的化合物。中间体(p)用酸水溶液如1N HCl在升高的温度下的处理得到(b1)。

所需要的脒可以按照在反应路线3中所述方法来合成，其中PG是合适的保护基团：

反应路线3

脒(e)容易从腈生产。更具体地说，溶于合适溶剂如水中的盐酸羟胺与氰基哌啶(g)在碱如碳酸钠存在下，在合适的溶剂中(如在甲醇中)和在加热下进行反应，得到羟基甲脒基(carbamimidoyl)哌啶(h)。随后，该羟基甲脒基哌啶(h)在合适的溶剂如乙酸中在乙酸酐存在下，在加压下经由钯催化剂被氢化，得到脒(e)。

或者，通过将氰基哌啶(g)溶解在合适的溶剂如甲醇中，冷却，然后与氯化氢气体反应，来形成甲亚胺酸(carboximidic acid)(j)。随后，通过用在甲醇中形成的氨溶液处理甲亚胺酸(j)，然后用氨气饱和该混合物，生产脒。

本领域中技术人员将会认识到，不是在通式I的化合物中的所有取代基将容忍用于合成这些化合物的某些反应条件。这些结构部分可以在合成中的适当时间点被引入，或可以加以保护，然后根据需要或希望进行去保护。本领域中技术人员也将会认识到，保护基团可以在本发明化合物的合成中的任何适当时间点被除去。引入和除去氮保护基团的方法是现有技术中所熟知的；参见，例如Greene and Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3^rd Ed.，John Wiley and Sons，New York，Chapter 7(1999)。此外，本领域中技术人员将会认识到，在许多情形下，结构部分引入的顺序不是关键的。生产通式I的化合物所需要的各步骤的具体顺序取决于所要合成的具体化合物、起始化合物和被取代的结构部分的相对不稳定性。

在下面的实施例和分析中使用的缩写、符号和术语具有以下意义：BuOH＝丁醇，DCM＝二氯甲烷，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，EtOAc＝乙酸乙酯，EtOH＝乙醇，MeOH＝甲醇，Pd(OH)₂/C＝碳载氢氧化钯(Pearlman催化剂)，h＝小时，LDA＝二异丙基胺化锂，EDCI＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，Et₂O＝乙醚，Et₃N(或TEA)＝三乙胺，NaBH(OAc)₃＝三乙酰氧基硼氢化钠，TBAF＝氟化四丁基铵，Tf₂O＝三氟甲烷磺酸酐，THF＝四氢呋喃。

制备例1

2-溴-1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮

将溴(3.34g，0.95当量)在二氯甲烷(80.00mL)中形成的溶液慢慢地添加到由2-氟-5-(三氟甲基)丙酰苯(5g，22.03mmol)在二氯甲烷(80mL)中形成的溶液中，同时搅拌，使得溴的棕色刚好消失。用饱和NaHCO₃洗涤反应混合物，在Na₂SO₄上干燥和进行浓缩，得到6.22g的粗物质。

MS(ES)：m/z＝301.2[M+2H]。

制备例2-5-D的化合物可以基本上按照在制备例1中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z[M+2H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z[M+2H]	2	2-溴-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	301.2
3	2-溴-1-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	285.2	2	2-溴-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	301.2
3	2-溴-1-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	285.2	4	2-溴-1-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	287.2
5	2-溴-1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	287.2	4	2-溴-1-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	287.2
5	2-溴-1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮	287.2	5-A	2-溴-1-(4-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	281
5-B	2-溴-1-(3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	281.2	5-A	2-溴-1-(4-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	281
5-B	2-溴-1-(3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮	281.2	5-C	2-溴-1-(3-氯-4-氟苯基)-丙-1-酮	265.2
5-D	2-溴-1-(3-氟苯基)-丙-1-酮	231.2	5-C	2-溴-1-(3-氯-4-氟苯基)-丙-1-酮	265.2

制备例6

2-氨基-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐

将3-(三氟甲基)苯甲酰甲基溴(10g，37.4mmol)添加到由六亚甲基四胺(HMTA)(5.80g，41.3mmol)在四氯化碳(100mL)中所形成的溶液中。在室温下搅拌一夜。过滤出沉淀物，将滤饼悬浮在乙醇(200mL)中。用浓盐酸(28mL)稀释混合物，然后在室温下搅拌混合物一夜。过滤出沉淀物，然后真空浓缩该滤液，得到灰白色固体。从在2-丙醇中的热1％浓盐酸之中重结晶固体，注意不要冷却至低于室温，得到2-氨基-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐(7.67g，86％)。

MS(APCI)：m/z＝204[M+H]。

制备例7-16的化合物可以基本上按照在制备例6中所述方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	7	2-氨基-1-(4-(三氟甲基)-苯基)乙酮盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝204[M+H]
8	2-氨基-1-苯基乙酮盐酸盐(从热的丙醇中研制)	¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ8.80-8.10(br s，3H)，8.02(dd，J＝1.0，8.5Hz，2H)，7.75-7.72(m，1H)，7.61-7.58(m，2H)，4.59(s，2H)	7	2-氨基-1-(4-(三氟甲基)-苯基)乙酮盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝204[M+H]
8	2-氨基-1-苯基乙酮盐酸盐(从热的丙醇中研制)		9	2-氨基-1-(4-氯苯基)乙酮盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.05-8.02(m，2H)，7.69-7.66(m，2H)，4.59(s，2H)
10	2-氨基-1-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.44-8.35(m，2H)，7.98-7.80(m，1H)，5.11-4.90(m，2H)，4.73-4.68(m，2H)	9	2-氨基-1-(4-氯苯基)乙酮盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.05-8.02(m，2H)，7.69-7.66(m，2H)，4.59(s，2H)
10	2-氨基-1-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐		11	2-氨基-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.55-8.40(br s，2H)，8.15(d，J＝18Hz，2H)，7.98-7.80(m，1H)，5.11-4.90(m，2H)，4.73-4.68(m，2H)
12	2-氨基-1-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ：3.93(2H，s)，7.41(1H，d，J＝8.8Hz)，8.10(1H，s)，8.16(1H，s)，8.18(3H，s).	11	2-氨基-1-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐
12	2-氨基-1-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐		13	2-氨基-1-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐	MS(ES)：m/z＝238.2[M+H]
14	2-氨基-1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐	MS(ES)：m/z＝222.2[M+H]	13	2-氨基-1-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐	MS(ES)：m/z＝238.2[M+H]
14	2-氨基-1-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐	MS(ES)：m/z＝222.2[M+H]	15	3-(2-氨基-乙酰基)-苄腈盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ：4.62(2H，s)，7.81-7.77(1H，m)，8.18(1H，d，J＝7.6Hz)，8.28(1H，d，J＝8.4Hz)，8.50(1H，s)，8.56(3H，s).
16	4-(2-氨基-乙酰基)-苄腈盐酸盐	¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ：4.62(2H，s)，8.06(2H，d，J＝8.4Hz)，8.16(2H，d，J＝8.4Hz)，8.54(3H，s).	15	3-(2-氨基-乙酰基)-苄腈盐酸盐

制备例17

2-氨基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酮

将叠氮化钠(583mg，8.96mmol)添加到由3-(三氟甲氧基)-苯甲酰甲基溴(2.17g，7.66mmol)在甲醇(20mL)中形成的溶液中。在室温下搅拌2小时。混合物真空浓缩。将残留物溶解在EtOAc(20mL)中和用水(10mL)洗涤。干燥有机层(Na₂SO₄)，过滤，和真空浓缩滤液，得到2-叠氮基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酮(1.70g，91％)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ7.83(m，1H)，7.77(s，1H)，7.56(m，1H)，7.49(m，1H)，4.55(s，2H)。

将碳载钯(720mg，10％Pd/C，50wt％水)添加到由2-叠氮基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酮(1.70g，6.93mmol)在乙醇(15mL)中形成的氮气吹扫溶液中。用氢气(气球)吹扫烧瓶。在室温下搅拌一夜。在赛力特硅藻土(

)上过滤混合物，用乙醇(3×30mL)漂洗赛力特硅藻土，然后真空浓缩该滤液，得到粗2-氨基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酮(1.56g，88％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.56(br s，2H)，8.07(m，1H)，7.95(s，1H)，7.76(m，2H)，4.63(s，2H)。

制备例18

2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐

将叠氮化钠(640.94mg；1.05当量；9.76mmol)以一份添加到由2-溴-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮(2.78g；1.00当量；9.30mmol)在四氢呋喃(15mL)中形成的溶液中。在室温下搅拌混合物一夜。过滤固体，用THF洗涤。在20℃下将粗的叠氮化物(1.00当量；9.30mmol；2.43g)添加到由三苯膦(1.06当量；9.86mmol；2.61g)和对甲苯磺酸(2.2当量；20.47mmol；3.56g)在四氢呋喃(15mL)中形成的溶液中。搅拌混合物一夜。过滤固体，然后用THF洗涤，获得920mg(24％)的标题化合物。

MS(ES)：m/z＝236.2[M+H]。

制备例18A到18-D的化合物可以基本上按照在制备例18中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z[M+H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z[M+H]	18-A	2-氨基-1-(4-三氟甲基苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	217.2
18-B	2-氨基-1-(3-三氟甲基苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	217	18-A	2-氨基-1-(4-三氟甲基苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	217.2
18-B	2-氨基-1-(3-三氟甲基苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	217	18-C	2-氨基-1-(3-氯-4-氟苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	210
18-D	2-氨基-1-(3-氟苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	167	18-C	2-氨基-1-(3-氯-4-氟苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐	210

制备例19

4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在-10℃下将N-甲基吗啉(13.0mL，118mmol)添加到由1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(11.2g，48.8mmol)在THF(400mL)中所形成的溶液中，然后搅拌5分钟。添加氯甲酸异丁酯(5.1mL，38.8mmol)，然后在-10℃下继续搅拌2小时。添加2-氨基-1-(3-(三氟甲基)苯基)乙酮盐酸盐(9.35g，39.0mmol)，然后继续搅拌1小时。将二氯甲烷(500mL)添加到混合物中，然后过滤。用饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)洗涤滤液，然后真空浓缩。由硅胶色谱法(330g RediSep柱，用0％-100％乙酸乙酯∶己烷的梯度洗脱，6.0L)提纯残留物，得到4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(9.72g，60％)。

MS(APCI)：m/z＝315[M-C₅H₈O₂+H]⁺。

制备例20-25的化合物可以基本上按照在制备例19中所述方法来制备。

制备例	化合物	物理数据MS(APCI)
制备例	化合物	物理数据MS(APCI)	20	4-(2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)-乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝315[M-C₅H₈O₂+H]⁺
21	4-(2-氧代-2-苯基乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝247[M-C₅H₈O₂+H]⁺	20	4-(2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)-乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝315[M-C₅H₈O₂+H]⁺
21	4-(2-氧代-2-苯基乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝247[M-C₅H₈O₂+H]⁺	22	4-(2-(4-氯苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝280[M-C₅H₈O₂+H]⁺
23	4-(2-(2，4-二氯苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝315[M-C₅H₈O₂+H]⁺	22	4-(2-(4-氯苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝280[M-C₅H₈O₂+H]⁺
23	4-(2-(2，4-二氯苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝315[M-C₅H₈O₂+H]⁺	24	4-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M+H]
25	4-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M+H]	24	4-(2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M+H]

制备例26

4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在0℃下将三乙胺(1.1mL，7.89mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(1.51g，7.87mmol)添加到由2-氨基-1-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酮(1.56g，6.10mmol)和1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(1.66g，7.24mmol)在CH₂Cl₂(15mL)中形成的溶液中。在0℃下搅拌3小时，然后在室温下搅拌一夜。混合物真空浓缩。由硅胶色谱法(80gSiO₂，用50％乙酸乙酯/己烷洗脱，1L)提纯残留物，得到4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.50g，57％)。

MS(APCI)：m/z＝331[M-C₅H₈O₂+H]⁺。

制备例27

4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶 -1-羧酸叔丁酯

在室温下将二甲基甲酰胺(20mL)添加到2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮甲苯-4-磺酸盐(900mg；1.00当量；2.21mmol)和1-Boc-哌啶-4-羧酸(Boc-Inp-OH)(613.96mg，1.20当量；2.65mmol)的混合物中。将N-甲基吗啉(6.00当量；13.26mmol；1.46mL)添加到以上溶液，然后在0℃下添加1-丙烷膦酸环酸酐(1.50当量；3.31mmol；862.14μL)。将混合物升温至室温，同时搅拌1小时。用EtOAc稀释混合物，用水、1M柠檬酸、水、饱和NaHCO₃和饱和氯化钠水溶液洗涤，然后在Na₂SO₄上干燥。通过溶于CH₂Cl₂中，装载到硅胶柱上和用EtOAc洗脱来提纯残留物得到500mg(51％)的标题化合物。

MS(ES)：m/z＝445.2[M-H]。

制备例28-32的化合物可以基本上按照在制备例27中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)
制备例	化合物	MS(ES)	28	4-[2-(4-氰基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝372[M⁺+H]
29	4-[2-(3-氰基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝372[M⁺+H]	28	4-[2-(4-氰基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝372[M⁺+H]
29	4-[2-(3-氰基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝372[M⁺+H]	30	4-[2-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝449[M⁺+H]
31	4-[2-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M⁺+H]	30	4-[2-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝449[M⁺+H]
31	4-[2-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M⁺+H]	32	4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M⁺+H]
32-A	4-(1-氧代-1-(4-(三氟甲基)苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝428.2[M⁺+H]	32	4-[2-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝433[M⁺+H]
32-A	4-(1-氧代-1-(4-(三氟甲基)苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝428.2[M⁺+H]	32-B	4-(1-氧代-1-(3-(三氟甲基)苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝428[M⁺+H]
32-C	4-(1-氧代-1-(3-氯-4-氟苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝412[M⁺+H]	32-B	4-(1-氧代-1-(3-(三氟甲基)苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝428[M⁺+H]
32-C	4-(1-氧代-1-(3-氯-4-氟苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝412[M⁺+H]	32-D	4-(1-氧代-1-(3-氟苯基)丙-2-基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	m/z＝378[M⁺+H]

制备例33

4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶

在CEM Discover微波装置中将4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)-乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，6.09mmol)和NH₄Cl(1.68g，31.4mmol)在乙醇(20mL)中的混合物在300W、120℃和200PSI下微波加热16小时。冷却混合物到室温。使用相同的微波和加热程序，用第二份的由4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.35g，5.67mmol)和NH₄Cl(1.8g，33.6mmol)在乙醇(20mL)中形成的溶液重复该工艺过程。冷却混合物到室温。在微波装置中，用第三份的由4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g，4.82mmol)和NH₄Cl(1.34mg，25.0mmol)在乙醇(15mL)中形成的溶液，在300W、160℃和200PSI下重复以上程序12小时。冷却混合物到室温。合并各批料，吸附到硅胶上，和真空浓缩。由硅胶色谱法(120g RediSep柱，用0％-100％CMA∶二氯甲烷的梯度洗脱，3L)提纯残留物，得到4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(3.40g，75％)。

MS(APCI)：m/z＝296[M+H]。

制备例34-35的化合物可以基本上按照在制备例33中所述方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	34	4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶	MS(APCI)：m/z＝296[M+H]
35	4-(4-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶	MS(ES)：m/z＝296[M+H]	34	4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶	MS(APCI)：m/z＝296[M+H]

制备例36

4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐

在Personal Chemistry微波炉中将4-(2-氧代-2-苯基乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.88mmol)和NH₄Cl(0.462g，8.65mmol)在乙醇(12mL)中的混合物在300W、160℃和14巴下微波加热11小时。冷却混合物到室温，添加硅胶(5mL)，真空浓缩该混合物。由硅胶色谱法(80g RediSep柱，用0％-100％CMA/二氯甲烷的梯度经过60分钟洗脱，60mL/min)提纯残留物，得到4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶(0.418g，64％)，为灰白色固体。将4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶(0.060g，0.26mmol)添加到二氯甲烷(15mL)和浓盐酸(28μL)中。搅拌混合物45分钟，然后真空浓缩混合物，得到4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐(0.070g，99％)。

MS(APCI)：m/z＝228[M+H]。

制备例37的化合物可以基本上按照在制备例36中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	37	4-(4-(4-氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝262[M+H]

制备例38

4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐

在Personal Chemistry微波炉中，将4-(2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)-乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.7g，3.92mmol)和NH₄Cl(0.579g，10.8mmol)在乙醇(17mL)中的混合物在300W、120℃和14巴下微波加热12小时。冷却混合物到室温，和添加硅胶(20g)。由硅胶色谱法(330gRediSep柱，用0％-100％CMA/二氯甲烷的梯度经过30分钟洗脱并在100％CMA下保持另外30分钟，100mL/min)提纯残留物，得到4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(600mg，51％)。MS(APCI)：m/z＝314[M+H]。

将4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(250mg，0.80mmol)悬浮在甲醇(20mL)中，然后添加氯化氢(在乙醚中2M，0.798mL，0.80mmol)。在室温下搅拌30分钟。真空浓缩混合物，然后添加水(15mL)和乙腈(5mL)。冻干混合物获得灰白色固体。在100℃下真空干燥固体2小时，获得4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐，为灰白色固体(220mg，79％)。

MS(APCI)：m/z＝314[M+H]。

制备例39

4-(4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐

在CEM Discover微波炉中将4-(2-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(517mg，1.19mmol)和NH₄Cl(350mg，6.54mmol)在乙醇(2mL)中的混合物在300W、120℃和200PSI下以最大功率微波加热12小时。冷却混合物到室温，和添加硅胶(～5g)。由硅胶色谱法(40g RediSep柱，用0％-100％CMA/二氯甲烷的梯度经过60分钟洗脱，40mL/min)提纯残留物，得到4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(228mg，61％)，为灰白色固体。MS(APCI)：m/z＝314[M+H]。

将产物(29mg)溶解在甲醇(2mL)中，然后添加氯化氢(在乙醚中2M，95μL)，然后在室温下搅拌30分钟。真空浓缩混合物，添加水(10mL)和冻干，获得4-(4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐(29mg)，为灰白色固体。

MS(APCI)：m/z＝314[M+H]。

制备例40

4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶

将4-(2-氧代-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.50g，3.48mmol)添加到乙酸铵(1.40g，18.1mmol)和冰醋酸(10mL)的混合物中，然后在回流状态下加热15小时。冷却混合物到室温，和真空浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯(50mL)中，然后用饱和NaHCO₃调节到pH 8。用乙酸乙酯萃取水层(2×50mL)。合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤，和真空浓缩。由硅胶色谱法(80g，用10％-20％甲醇/乙酸乙酯的梯度洗脱，1.5L)提纯残留物，得到4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(491mg，45％)。

MS(APCI)：m/z＝312[M+H]。

制备例41

4-(N-羟基甲脒基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯。

将盐酸羟胺(1.65g；4.99当量；23.74mmol)溶解在水(5mL)中，然后添加碳酸钠(2.53g；23.87mmol)。将4-氰基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g；1.00当量；4.76mmol)(Astatech)加入到小的管形瓶中并溶于甲醇(6mL；148.25mmol)中，然后添加到含有羟胺的烧瓶中。在搅拌下将混合物加热至回流状态并保持3小时。蒸发除去甲醇，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取水层。用水(1×100mL)洗涤合并的有机相，在硫酸镁上干燥，过滤和浓缩，得到白色固体。在减压下干燥获得1.05g(91％)的标题化合物，为白色固体。

LCMS：m/z＝188.2[M-tBu，M+H]。

制备例42

4-甲脒基-哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(N-羟基甲脒基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(9.7g 1.00当量；39.9mmol)溶解在甲醇(300mL)中，然后添加乙酸(2当量，79.73mmol；4.6mL)，和甲醇洗涤的拉内镍(2.7g)。加热反应到50℃，然后用1大气压的氢气氢化4.5小时。经由赛力特硅藻土过滤反应混合物，然后在减压下浓缩。将固体悬浮在乙醚中，过滤和在减压下干燥，得到10.39g的4-甲脒基-哌啶-1-羧酸叔丁酯。

MS(ES)：m/z＝228[M+H]。

制备例43

4-甲脒基-哌啶-1-羧酸叔丁酯乙酸盐

将10％Pd/C(0.079g；37.12μmol)添加到4-(N-羟基甲脒基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(805mg；1.00当量；3.31mmol)在乙酸(15mL；261.77mmol)和乙酸酐(0.5mL；5.29mmol)中的混合物中。在20PSI下在室温下氢化7小时。用氮气吹扫烧瓶，得到1.2g的泡沫物。用乙腈研制，过滤，得到270mg(28％)的产物，为白色固体。

MS(ES)：m/z＝228.0[M+H]。

制备例44

4-[4-(3-氯苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯。

将4-二氨基甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯乙酸盐(685mg；1.00当量；2.38mmol)悬浮在二甲基甲酰胺(10mL；129.33mmol)中，然后添加粉末碳酸钾(1400mg；10.13mmol)。在室温下搅拌10分钟，然后将已溶于4mL DMF中的2-溴-1-(3-氯-苯基)-乙酮(1400mg；6.00mmol)在室温下滴加到脒中。在3小时后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，然后用50％碳酸氢钠水溶液洗涤。在硫酸钠上干燥有机层，过滤和浓缩，得到粗油。通过使用ISCO色谱法在biotage 40M柱上提纯，用DCM至6％MeOH/DCM的梯度洗脱。浓缩合适的级分，得到20％产率的4-[4-(3-氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯。MS(ES)：m/z＝262.0[M+H]。

将4-[4-(3-氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(171mg；472.54μmol)溶解在二氯甲烷(3mL；46.80mmol)中，然后在室温下慢慢地添加氯化氢(4mL；16.00mmol)(在二噁烷中4M HCl)。搅拌溶液1小时。真空浓缩(2×DCM)，得到4-[4-(3-氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐。

MS(ES)：m/z＝262.0[M+H]。

制备例45-47的化合物可以基本上按照在制备例44中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS (ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS (ES)：m/z＝[M+H]	45	4-[4-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	264.0
46	4-[4-(3-氯-5-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	280.0	45	4-[4-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	264.0
46	4-[4-(3-氯-5-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	280.0	47	4-[4-(3-硝基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	273.2
47-A	4-(4-(3-溴苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	408.0	47	4-[4-(3-硝基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	273.2

制备例48

将4-氰基哌啶(7.19g；1.00当量；65.269mmol)；苯甲醛(1.05当量；68.533mmol；7.0mL)，然后三乙酰氧基硼氢化钠(1.3当量，84.85mmol；18.73g)添加到在四氢呋喃(435mL)中的2％(v/v)乙酸之中，然后快速搅拌，直到反应完全。用乙酸乙酯稀释和用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠水溶液洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，在减压下蒸发得到13.0g油。溶于乙醚(～300mL)中，过滤，慢慢地添加60mL 1M HCl乙醚溶液。在冰浴中冷却。过滤，用乙醚漂洗，在真空下干燥，收集13.616g(57.51mmol，88％)1-苄基-哌啶-4-腈。

MS(ES)：m/z＝201[M+H]。

制备例49

1-苄基-哌啶-4-甲亚胺酸甲酯盐酸盐

将1-苄基-哌啶-4-腈盐酸盐(1.00当量；57.3mmol；13.57g)溶解在75mL MeOH中，然后在冰浴中冷却。用HCl气体饱和25分钟，然后移走冰浴和搅拌3小时。在减压下蒸发得到17.47g(65.0mmol，113％)1-苄基-哌啶-4-甲亚胺酸甲酯盐酸盐。

MS(ES)：m/z＝233[M+H]。

制备例50

1-苄基-哌啶-4-甲脒(carboxamidine)二盐酸化物

将1-苄基-哌啶-4-甲亚胺酸甲酯盐酸盐(17.47g 1.00当量；65mmol)溶解在2M氨甲醇溶液(～350mL)中。用氨气饱和15分钟。搅拌18小时和蒸发。与干燥甲醇一起共蒸发。在高真空下干燥得到18.29g(63.03mmol，97％)的1-苄基-哌啶-4-甲脒二盐酸化物，为浅黄色固体。

MS(ES)：m/z＝218[M+H]。

制备例51

1-苄基-4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶

将1-苄基-哌啶-4-甲脒二盐酸化物(2g；1.00当量；6.89mmol)溶解在二甲基甲酰胺(90mL)中。添加粉末碳酸钾(4当量；27.56mmol；3.8095g)和升温至～45℃。经过40分钟将已溶于8mL DMF中的3-氯-4-氟-苯甲酰甲基溴(2.00当量；13.782mmol；3.5366g)滴加进去。用50mL乙酸乙酯稀释，搅拌5分钟和过滤。蒸发，然后分配在乙酸乙酯/饱和碳酸氢钠溶液之间，用水洗涤有机层，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤。用MgSO₄干燥，过滤和蒸发，得到红色泡沫物。在快速硅胶柱上用0-10％MeOH/ACN提纯。合并各级分，得到1.9772g(5.346mmol，78％)1-苄基-4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶。

MS(ES)：m/z＝370[M+H]。

制备例52-53的化合物可以基本上按照在制备例51中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]	52	1-苄基-4-[5-(3，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶	368
53	1-苄基-4-[4-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶	336.0	52	1-苄基-4-[5-(3，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶	368

制备例54

4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物

将1-苄基-4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶(1.00当量；1.595mmol；590mg)，N，N，N′，N’-四甲基-1，8-萘二胺(1当量；1.595mmol；341.8mg)溶解在1，2-二氯乙烷(12mL)中，然后在冰浴中冷却。添加氯甲酸1-氯乙酯(3当量；4.785mmol；517μL)和加热至回流状态保持1小时。冷却到室温和经由1cm栓塞硅胶过滤，用DCM漂洗。蒸发得到760mg泡沫物。溶于MeOH中和加热到回流状态保持6小时。蒸发得到556.3mg(99％)4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物，为黄色泡沫。

MS(ES)：m/z＝280[M+H]。

制备例55-56的化合物可以基本上按照在制备例54中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]	55	4-[5-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物	330
56	4-[5-(3，4-二氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物	297	55	4-[5-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物	330

制备例57

4-[4-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶

将1-苄基-4-[4-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶在125mL 2B EtOH中在20％Pd(OH)₂/C(Pearlman催化剂)(0.15gm)存在下于30℃在60PSI下氢化23小时。过滤和浓缩，得到油形式的标题化合物。

MS(ES)：m/z＝246.0[M+H]。

制备例58-59的化合物可以基本上按照在制备例57中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]	58	4-[4-(4-甲氧基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶	258.0
59	4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶(NH₄CO₂)	264.0	58	4-[4-(4-甲氧基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶	258.0

制备例60

4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在氮气氛围中将4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(795mg，2.69mmol)添加到CH₂Cl₂(25mL)和THF(25mL)的溶液中，随后添加三乙胺(0.985mL，5.64mmol)和重碳酸二叔丁酯(650mg，2.96mmol)。在室温下搅拌混合物一夜。真空浓缩混合物，由硅胶色谱法(120gRediSep柱，用0％-100％乙酸乙酯/己烷的梯度经过35分钟洗脱，85mL/min)提纯残留物，得到4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(550mg，51％)，为灰白色固体。

MS(APCI)：m/z＝396[M+H]。

制备例61的化合物可以基本上按照在制备例60中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	61	4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(APCI)：m/z＝396[M+H].

制备例62

4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(540mg，1.36mmol)添加到乙醚(100mL)中，然后冷却到0℃。将氢化钠(55mg，1.5mmol，在矿物油中60％)添加到混合物中，随后添加甲基碘(0.142mL，2.72mmol)。在0℃下搅拌混合物1小时，然后升至室温。添加THF(40mL)和搅拌混合物12小时。浓缩混合物，由硅胶色谱法(120g RediSep柱，用0％-100％乙酸乙基酯∶己烷的梯度洗脱，经过40分钟，85mL/min)提纯残留物，得到4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(425mg，76％)。

MS(APCI)：m/z＝410[M+H]。

制备例63的化合物可以基本上按照在制备例62中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	63	4-(1-甲基-4-(4-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(APCI)：m/z＝410[M+H]
63-A	4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝422(M+H)	63	4-(1-甲基-4-(4-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(APCI)：m/z＝410[M+H]

制备例64

4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶二盐酸化物

在0℃和氮气氛围中将氯化氢(在1，4-二噁烷中4M，5mL，20mmol)添加到由4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg，1.10mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中形成的溶液中，然后搅拌2小时。真空浓缩混合物，得到4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶二盐酸化物(435mg，＞99％)。MS(APCI)：m/z＝310[M+H]。

制备例65的化合物可以基本上按照在制备例64中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	65	4-(1-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶二盐酸化物	MS(APCI)：m/z＝310[M+H]

制备例66

4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯

将乙酸铵(3.24g，41.63mmol)添加到由4-(2-氧代-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.00当量；1.39mmol)在1-丁醇(7mL)中所形成的溶液中，随后添加三乙胺(1当量；193.40μL)。将混合物在密封管中于160℃搅拌2小时。在真空中与甲苯和CH₂Cl₂共蒸发除去溶剂。将粗物质再溶解在EtOAc中，用水洗涤，在Na₂SO₄上干燥和浓缩。由硅胶色谱法提纯残留物，用EtOAc∶己烷(6∶4)洗脱，得到280mg(49％产率)的标题化合物。

LCMS：MS(IS)：m/z＝314.2[M+H]。

制备例67-73的化合物可以基本上按照在制备例66中所述方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	67	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝428.2[M+H]
68	4-[4-(4-氰基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝353.2[M+H]	67	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝428.2[M+H]
68	4-[4-(4-氰基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝353.2[M+H]	69	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝428.2[M+H]
70	4-[4-(3-氰基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝353.2[M+H]	69	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝428.2[M+H]
70	4-[4-(3-氰基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝353.2[M+H]	71	4-[4-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝430.2[M+H]
72	4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝414.2[M+H]	71	4-[4-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝430.2[M+H]
72	4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝414.2[M+H]	73	4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝414.2[M+H]
73-A	4-(5-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝409.2[M+H]	73	4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：m/z＝414.2[M+H]
73-A	4-(5-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝409.2[M+H]	73-B	4-(5-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝409.2[M+H]
73-C	4-(5-甲基-4-(3-氯-4-氟苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝393.2[M+H]	73-B	4-(5-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝409.2[M+H]

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	73-D	4-(5-甲基-4-(3-氟苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(IS)：m/z＝359.2[M+H]

制备例74

4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯

在氮气氛围中将4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(860mg，2.08mmol)溶解在乙醚(100mL)中。在冰浴中将溶液冷却到0℃，然后添加氢化钠(1.1当量；2.29mmol；91.52mg)，随后注入甲基碘(2.00当量；4.16mmol；259.12μL)。在0℃下搅拌混合物1小时，然后升至室温。将四氢呋喃(40mL)注入以上混合物中，然后在室温下搅拌一夜。在减压下浓缩混合物，然后将残留物溶解在EtOAc中。用饱和氯化钠水溶液洗涤。经由硅胶色谱法提纯该残留物，用EtOAc∶己烷(7∶3)洗脱，得到270mg(30％产率)的标题化合物。

MS(IS)：m/z＝428.2[M+H]。

制备例74-A

4-(1，5-二甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯

将新鲜粉末状氢氧化钾(193.45mg，2.93mmol，4当量)添加到由4-(5-二甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg，0.73mmol)在二甲亚砜(2mL)中形成的溶液中。在室温下搅拌混合物1小时，然后将甲基碘(156mg，1.5当量)作为一份添加进去。在搅拌三小时后，用AcOEt稀释，用饱和氯化钠水溶液洗涤，然后在Na₂SO₄上干燥。经由硅胶色谱法提纯该残留物，用EtOAc∶己烷(6∶4)洗脱，得到210mg(68％产率)的标题化合物。MS(IS)：m/z＝423.2[M+H]。

制备例74-B到74-F的化合物可以基本上按照在制备例74-A中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]	74-B	4-(1，5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	423.2
74-C	4-(4-(3-氯-4-(氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	407.2	74-B	4-(1，5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	423.2
74-C	4-(4-(3-氯-4-(氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	407.2	74-D	4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	373.2
74-E	4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯		74-D	4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	373.2
74-E	4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯		74-F	4-(1-异丙基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

制备例75

4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐

将氯化氢(2mL，12M水溶液)添加到由4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(275mg；665.19μmol)在甲醇(10mL)中形成的溶液中。在室温下搅拌混合物一夜，浓缩和干燥，获得210mg(90％产率)的标题化合物。

MS(IS)：m/z＝314.2[M+H]。

制备例76-83F的化合物可以基本上按照在制备例75中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]	76	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶二盐酸化物	328.2
77	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	328.2	76	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶二盐酸化物	328.2
77	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	328.2	78	4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	328.2

制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(IS)：m/z＝[M+H]	79	4-(2-哌啶-4-基-1H-咪唑-4-基)-苄腈二盐酸盐	253.2
80	3-(2-哌啶-4-基-1H-咪唑-4-基)-苄腈二盐酸盐	253.2	79	4-(2-哌啶-4-基-1H-咪唑-4-基)-苄腈二盐酸盐	253.2
80	3-(2-哌啶-4-基-1H-咪唑-4-基)-苄腈二盐酸盐	253.2	81	4-[4-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	330.2
82	4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	314.2	81	4-[4-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	330.2
82	4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	314.2	83	4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	314.2
83-A	4-(1，5-二甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	323.2	83	4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸盐	314.2
83-A	4-(1，5-二甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	323.2	83-B	4-(1，5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	323.2
83-C	4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	307.2	83-B	4-(1，5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	323.2
83-C	4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	307.2	83-D	4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	273.2
83-E	4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐		83-D	4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	273.2
83-E	4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐		83-F	4-(1-异丙基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐
83-G	4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐	322	83-F	4-(1-异丙基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶盐酸盐

制备例84

1-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪

将4-苄基哌嗪-1-甲脒半硫酸盐(500mg，1.00当量；1.580mmol)；碳酸钠(4当量，6.321mmol)；二甲基甲酰胺(10.5mL)和丙酮(110.mL)加热到回流状态。经过15分钟将在4mL丙酮中的2-溴-1-[4-氟-3(三氟甲基)苯基]-1-乙酮(1.00当量；1.580mmol；450mg)滴加进去，然后搅拌反应30分钟，然后冷却到室温。过滤反应混合物和在减压下浓缩，用乙酸乙酯稀释，用20％饱和碳酸氢钠、水和饱和氯化钠水溶液洗涤。用MgSO₄干燥，过滤和在减压下蒸发。在硅胶上用2-5％1MNH₃-MeOH/DCM提纯，得到262.0mg(0.678mmol，43％)1-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪。

MS(ES)：m/z＝405[M+H]。

制备例85

1-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪

掺混1-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪(260mg，1.00当量；0.643mmol)，20wt％Pd(OH)₂/C Degussa E101NE/W(250mg)；甲醇(10mL)，甲酸，铵盐(20当量，12.8mmol；810mg)并加热到50℃保持2小时，然后冷却到室温。经由

过滤反应混合物，在减压下蒸发和与甲醇共蒸发一次，得到195.2mg(0.621mmol，97％)1-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪，为黄色泡沫物。

MS(ES)：m/z＝315[M+H]。

制备例86

1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶

将二甲亚砜(0.3M，2.7mL)添加到粉末氢氧化钾(1.5当量，1.217mmol；68mg)中。添加1-苄基-4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶(300mg，1.00当量；0.811mmol)，经过8分钟滴加碘乙烷(1.1当量，0.892mmol；71μL)。搅拌反应60分钟，然后用水(120mL)加上饱和氯化钠(25mL)稀释，接着用DCM萃取四次。用水洗涤有机提取物，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤，和用MgSO₄干燥。过滤和在硅胶上用10％甲醇/乙腈提纯，得到262mg(0.659mmol，81％)的1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶。

MS(ES)：m/z＝398[M+H]。

制备例87-89的化合物可以基本上按照在制备例86中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS(ES)：m/z＝[M+H]	87	1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	384
88	1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	412	87	1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	384
88	1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	412	89	1-苄基-4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	412

制备例90

4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐

将1-苄基-4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶(263.3mg，1.00当量；0.662mmol)和1，8-萘二胺，N，N，N′，N’-四甲基-(0.05当量，0.033mmol，7.0mg)溶解在1，2-二氯乙烷(5mL)中，然后在冰浴中冷却。添加氯甲酸1-氯乙酯(1.2当量，0.794mmol；0.086mL)。在冰浴中搅拌反应10分钟，然后加热至回流20分钟，然后蒸干。将残留物溶解在甲醇(5mL)中，回流45分钟和蒸干，得到268mg(0.779mmol，118％)4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐。

MS(ES)：m/z＝308[M+H]。

制备例91-93的化合物可以基本上按照在制备例90中所述方法来制备。

制备例	化合物	MS (ES)：m/z＝[M+H]
制备例	化合物	MS (ES)：m/z＝[M+H]	91	4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	294
92	4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	440.2	91	4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	294
92	4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐	440.2	93	4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶	278.0

制备例94

4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

掺混4-氯吡咯并[2，3-d]嘧啶(2.985g，19.40mmol)，[1-(氯甲基)-4-氟-1，4-重氮鎓双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐)](Selectfluoro)(10.523g，29.704mmol)]，乙腈(200mL)，和乙酸(40mL)，然后加热到70℃保持24小时。由HPLC监测起始原料的损失，然后浓缩。添加两份的甲苯(50mL)和蒸发。经由赛力特硅藻土的垫片过滤粗物质，然后用1∶1EtOAc/CH₂Cl₂洗涤。最终，浓缩滤液，和在硅胶柱上进行色谱分离，用CH₂Cl₂/MeOH[0-10％ MeOH梯度]洗脱。由MS检测各级分，合并产品级分得到1.931g(58％)的4-氯-5-氟-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶。

MS(ES)：m/z＝172[M+H]。

制备例95

4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

向别嘌呤醇(20g，146.94mmol)在甲苯(205.71mL)中的溶液添加磷酰氯(68.27mL，734.68mmol)和二异丙基乙胺(56.38mL，323.26mmol)，然后在80℃下加热混合物2小时。真空除去溶剂至一半体积，然后将混合物倾倒在4℃的2M磷酸氢二钾水溶液(734.68mL，1.47摩尔)中。在室温下搅拌混合物一夜。经由赛力特硅藻土的垫片滤出沉淀物，随后用EtOAc洗涤它。分离出滤液，用更多EtOAc洗涤水层，合并有机层，在MgSO₄上干燥，过滤和真空浓缩，获得4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(16g，70.45％产率)，为黄色固体。

MS(APCI)：m/z＝155.1[M+H]。

制备例95-A

4，6-二氯嘧啶-5-甲醛

将DMF(8.9mL，1.3当量)加入到圆底烧瓶中，冷却到0℃。在0℃下将POCl₃(32.6mL，4.0当量)滴加到反应中。在0℃下搅拌反应物料1小时。将4，6-二羟基嘧啶(10.0g，1.0当量)加入到反应物料中，慢慢地让其冷却至室温。反应物料回流4小时，然后由TLC(在DCM中10％丙酮)监测反应。在真空下浓缩反应物料，然后将浓缩的反应物料倾倒在碎冰上。用乙醚萃取产物，然后饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，然后在真空下浓缩，得到浅黄色固体形式的产物(6.2g，40％)。

制备例95-B

1-(4，6-二氯嘧啶-5-基)丙-1-醇

将4，6-二氯-嘧啶-5-甲醛(2.5g，1.0当量)和甲苯(50mL)加入到圆底烧瓶中。冷却反应物料到-10℃。在-10℃下将溴化乙基镁THF溶液(3M)(5.1mL，1.1当量)滴加进去。在1小时中慢慢地让反应物料升至室温。将冷冻的氯化铵溶液添加到反应物料中，然后用乙醚萃取。用饱和氯化钠水溶液洗涤乙醚层。在无水硫酸钠上干燥醚层，然后在减压下浓缩它，得到所需产物(2.3g，79.3％)。

制备例95-C的化合物可以基本上按照在制备例95-B中所述方法来制备。

制备例	化合物
制备例	化合物	95-C	1-(4，6-二氯嘧啶-5-基)乙醇

制备例95-D

4-氯-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(6.1g，1.0当量)，N-碘琥珀酰亚胺(NIS)(21.55g，2.0当量)和DMF(213.5mL)加入到圆底烧瓶中。在50℃下搅拌反应物料16小时。由TLC(在DCM中10％丙酮)监测反应。在减压下浓缩反应物料。加入乙酸乙酯，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，在减压下浓缩有机层，得到4-氯-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(6.8g，61.43％)。

制备例95-E

4-氯-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

在氩气氛中将4-氯-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(5.4g，1.0当量)，三甲基甲硅烷基乙炔(11.347g，6.0当量)，CuI(1.833g，0.5当量)，TEA(2.68mL，1.0当量)，DMF(67.5mL)和THF(202.5mL)加入到圆底烧瓶中。在氩气氛围中搅拌反应物料30min。加入(PPh3)₄Pd(2.225g，0.1当量)，然后在35℃下搅拌反应物料3小时。由TLC(在DCM中10％丙酮)监测反应。在减压下浓缩反应物料。加入乙酸乙酯和用饱和碳酸氢钠溶液、水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层，然后在减压下浓缩有机层。由柱色谱分析(硅石100-200目，DCM-丙酮)提纯化合物，得到所需产物(1.81g，36.14％)。

制备例96

环丙基-(4，6-二氯-嘧啶-5-基)-甲醇

在氮气氛中在-78℃下，慢慢地将正丁基锂(2.37g，36.0mmol)添加到二异丙基胺(3.72g，36.0mmol)在50.0mL THF中的冷却溶液中。在同一温度下搅拌反应混合物30分钟，然后将已溶于15mL THF中的4，6-二氯嘧啶(5.0g，33.0mmol)添加进去。在-78℃下搅拌所形成的反应混合物另外30分钟，然后添加环丙烷甲醛(2.58g，36.8mmol)。让反应混合物升至室温。添加50.0mL的水，然后用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤，然后在无水硫酸钠上干燥。在真空下减压浓缩，得到环丙基-(4，6-二氯嘧啶-5-基)-甲醇(4.0g，54％产率)。MS(APCI)：m/z＝220[M+H]。

制备例97

环丙基-(4，6-二氯嘧啶-5-基)-甲酮

在0℃下将氧化铬(VI)(5.84g，58.4mmol)分几份添加到已溶于80.0mL丙酮中的环丙基-(4，6-二氯-嘧啶-5-基)-甲醇(4.0g，18.2mmol)中，然后在0℃下搅拌30分钟。接着添加异丙醇来淬灭过量的试剂，然后在室温下搅拌另外15分钟。冷却到0℃和倾倒在饱和NaHCO₃溶液中。经由赛力特硅藻土(

)床过滤，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤合并的有机层。干燥和减压浓缩，得到无色油形式的标题化合物(2.0g，产率50％，9.2mmol)。MS(ES)：m/z＝218[M+H]。

下列制备例可以基本上按照在制备例97中所述来制备。

制备例	化合物
制备例	化合物	97-A	1-(4，6-二氯嘧啶-5-基)丙-1-酮
97-B	1-(4，6-二氯嘧啶-5-基)乙酮	97-A	1-(4，6-二氯嘧啶-5-基)丙-1-酮

制备例98

4-氯-3-环丙基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

在室温下将水合肼(2.67g，53.4mmol)慢慢地添加已溶于300mLTHF中的环丙基-(4，6-二氯嘧啶-5-基)-甲酮(9.66g，44.5mmol)中，然后搅拌4小时。在完成之后，将反应混合物分配在水和乙酸乙酯之间，收集有机层，用饱和氯化钠水溶液洗涤，在无水硫酸钠上干燥，然后在真空下浓缩。使用氯仿/甲醇(97∶3)作为洗脱剂，流过短的硅胶(60-120目)垫来提纯所得标题化合物。

MS(ES)：m/z＝195[M+H]。

制备例99

4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑

将甲酰胺(15mL；32.72当量；376.99mmol；15.00mL；16.98g)和2-溴-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙酮(3.077g；1.00当量；11.52mmol；3.08g)添加到密封管中，然后加热到185℃保持3小时。将反应倾倒在NaHCO₃中，然后用EtOAc稀释，用水、饱和氯化钠水溶液洗涤，然后在Na₂SO₄上干燥，过滤，和浓缩到干燥。取出粗的混合物，然后通过在硅石上的快速色层分离法，用二氯甲烷(DCM)/甲醇0-10％洗脱来提纯。收集产物级分，除去溶剂，得到4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑(1.373g；0.56当量；6.47mmol；1.37g；56.16％产率)。

MS(ES)：m/z＝213.0[M+H]。

制备例100的化合物可以基本上按照在制备例99中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	100	4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑	MS(ES)：m/z＝213.0[M+H]

制备例101

4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑

在250mL圆底烧瓶(装有橡胶隔片和氮气覆盖层和搅拌棒)中添加四氢呋喃(30mL；368.66mmol；30.00mL；26.58g)，4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑(1.047g；1.00当量；4.93mmol；1.05g)，然后在搅拌下将混合物冷却至0℃并保持5分钟。将氢化钠(0.138g；1.11当量；5.46mmol；138.00mg)添加到烧瓶中，然后搅拌反应20分钟。添加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(1.15mL；1.31当量；6.49mmol；1.15mL；1.08g)，然后让反应升至室温。用水稀释反应，然后用乙酸乙酯萃取混合物两次，然后废弃水相。在Na₂SO₄上干燥该物质，过滤，和浓缩到干燥。通过在硅胶上的快速色层分离法，用从10-60％EtOAc的乙酸乙酯/己烷洗脱，来提纯粗混合物。合并合适的级分和进行浓缩，得到4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑(1.178g；0.70当量；3.44mmol；1.18g；69.71％产率)。

MS(ES)：(m/z)＝343.2[M+H]。

制备例102的化合物可以基本上按照在制备例101中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	102	4-(4-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑	MS(ES)：(m/z)＝343.2[M+H]

制备例103

4-羟基-4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H- 咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯

在100mL圆底烧瓶(装有冷却浴，搅拌棒和氮气覆盖层)中添加4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑(0.995g；1.00当量；2.91mmol；995.00mg)，正丁基锂(2.8mL；1.54当量；4.48mmol；2.80mL；1.90g)，和四氢呋喃(30mL；368.66mmol；30.00mL；26.58g)，然后在搅拌下冷却混合物至-78℃并保持30分钟。添加N-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(0.706g；1.22当量；3.54mmol；706.00mg)，然后让反应升至室温。用CH₂Cl₂稀释反应，用水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，过滤，和浓缩到干燥。通过在硅石上的快速色层分离法，用从10-50％EtOAc的乙酸乙酯/己烷洗脱，来提纯粗混合物。合并合适的级分和进行浓缩，得到4-羟基-4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.248g；0.79当量；2.30mmol；1.25g；79.29％产率)。

MS(ES)：(m/z)＝542.2[M+H]。

制备例104的化合物可以基本上按照在制备例103中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	104	4-羟基-4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯	MS(ES)：(m/z)＝542.2[M+H]

制备例105

4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-4-醇

在微波管形瓶中添加4-羟基-4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-lH-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.453g；1.00当量；836.28μmol；453.00mg)，乙醇(5mL；85.88mmol；5.00mL；3.96g)，和氯化氢(5mL；5.00mmol；1N水溶液)，然后在微波中在搅拌下加热至70℃并保持4小时。浓缩反应混合物，得到4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-4-醇盐(0.32g；1.00当量；832.84μmol；320.00mg；99.59％产率)。

MS(ES)：(m/z)＝312.2[M+H]。

制备例106的化合物可以基本上按照在制备例105中所述的方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	106	4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-4-醇	MS(ES)：(m/z)＝312.2[M+H]

制备例107

1-甲基-4-苯基-1H-咪唑

将20mL二甲亚砜(35mL；492.74mmol)添加到粉末氢氧化钾(20.81mmol；1.17g)中。在室温下添加5-苯基-1H-咪唑(13.87mmol；2.00g)，固体迅速地溶解得到桔黄色溶液。在搅拌5min之后，甲基碘(15.26mmol；950.36μL)作为一份被添加进去。在室温下搅拌4小时。用水稀释和用乙酸乙酯萃取(2×)，然后用饱和氯化钠水溶液/水(2×)溶液洗涤有机相，在MgSO₄上干燥，过滤，蒸发，得到1.71g黄色固体。通过使用在biotage 40M柱上的ISCO色谱法，用0.5％MeOH/DCM到5％MeOH/DCM的梯度在40mL/min的流动速率下洗脱，提纯粗产物。干燥产品级分，得到1.43g(65％产率)灰白色固体。(7％的不想要的区域异构体)MS(ES)：(m/z)＝159.0[M+H]。

制备例108

4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-哌啶-4-醇二盐酸化物

将1-甲基-4-苯基-1H-咪唑(9.05mmol；1.43g)溶解在无水四氢呋喃(30.00mL)中，所得混合物冷却到-78℃。慢慢地添加正丁基锂(1.30当量；11.77mmol；7.35mL)(在己烷中1.6M)和反应在-78℃下搅拌30分钟，然后经过20分钟添加N-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(11.77mmol；2.34g)的THF(20mL)溶液。搅拌一夜，同时升至室温。用DCM和饱和氯化钠水溶液/水(50/50)稀释，(2×DCM)，然后在MgSO₄上干燥。过滤和浓缩，得到3.8g粗黄色油。通过使用ISCO色谱法在Biotage 40M柱上提纯反应混合物，用50∶50 EtOAc∶Hex以40mL/min的流动速率洗脱。浓缩产物级分，得到2.00g的4-羟基-4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体。ES-MS(M+H)＝358.3。将它溶解在5ml二氯甲烷中，然后在室温下慢慢地添加氯化氢(20.00mmol；5.00mL)(在二噁烷中4M)。在约5min之后溶液变浑浊，然后添加3ml的甲醇使反应混合物变回到溶液。在1小时之后，反应完成95％。将1mL的在二噁烷中的4M HCl添加进去，搅拌15分钟。浓缩到2.1g的4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-哌啶-4-醇二盐酸化物，为浅黄色固体。MS(ES)：(m/z)＝258.3[M+H]。

制备例109

4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

将6-氯-7-脱氮嘌呤(10.75g，70mmol)和N-碘琥珀酰亚胺(16.8g，75mmol)溶解在400mL的干燥DMF中，然后在环境温度下在黑暗中保持一夜。蒸发溶剂。将深色的残留物分布在500mL的乙酸乙酯和150mL的10％Na₂SO₃之间。用10％Na₂SO₃(2×100mL)、饱和氯化钠水溶液(150mL)洗涤有机级分，在Na₂SO₄干燥和蒸发。从乙醇中结晶黄色残留物，得到16.2g(83％)的4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为灰白色晶体。蒸发母液，溶于甲苯中，然后通过在硅胶(7×4cm)上的快速色谱法提纯。用甲苯洗涤该柱，直到洗脱剂是无色的为止，然后用在甲苯中的5％乙酸乙酯洗脱标题化合物，得到另外3.5g的产物。

制备例110

4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇

在氩气氛中在室温下添加4-氯-5-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(5.0g，1.0当量)，2-甲基-3-丁炔-2-醇(9.02g，6.0当量)，TEA(1.68g，0.93当量)，CuI(1.36g，0.4当量)，DMF(62.5mL)和THF(187.5mL)。在氩气氛中在室温下搅拌反应物料5分钟。加入Pd(PPh3)₄(1.03g，0.05当量)，然后在45℃下搅拌反应物料16小时。由TLC(65％CHCl₃∶23％己烷∶12％丙酮)监测反应。在真空下浓缩反应物料。加入乙酸乙酯，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在真空下浓缩它。在65％CHCl₃∶23％己烷∶12％丙酮中结晶该化合物，得到所需化合物(3.35g，79.7％)。

制备例111-112的化合物可以基本上按照在制备例110中所述方法来制备。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	111	3-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇
112	4-氯-5-三甲基硅烷基乙炔基-7H-吡咯并[2，3-d]-嘧啶	LCMS＝250(M+H)	111	3-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇

制备例113

4-氯-5-(3-甲基-3-(三甲基甲硅烷基氧基)丁-1-炔基)-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶

在室温下添加4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇(3.35g，1.0当量)，咪唑(2.9g，3.0当量)，TEA(2.16g，1.5当量)和乙醚(84mL)。将反应物料冷却至0℃，然后添加三甲基甲硅烷基氯(1.53g，1.0当量)。在室温下搅拌反应物料4小时。由TLC(在DCM中5％MeOH)监测反应。添加冷却的DM水，然后用乙醚萃取。用饱和氯化钠水溶液洗涤乙醚层。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在真空中浓缩它，得到所需化合物(3.06g，70％)。

制备例	化合物	物理数据
制备例	化合物	物理数据	114	4-氯-5-(3-(三甲基甲硅烷基氧基)丙-1-炔基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶

实施例1

4-(4-(5-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]- 嘧啶盐酸盐

将4-(4-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(270mg，0.91mmol)，4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(280mg，1.82mmol)，Et₃N(0.63mL，4.5mmol)，和2-丙醇(10mL)的混合物在氮气中于90℃加热一夜。冷却混合物到室温，然后倾倒在水(100mL)中。用CH₂Cl₂(2×200mL)萃取混合物，合并有机层，和用水(50mL)洗涤。干燥(Na₂SO₄)有机层，过滤混合物，然后真空浓缩该滤液。由硅胶色谱法(25g的SiO₂，用CH₂Cl₂/CMA 4∶1洗脱，1000mL)提纯残留物，得到4-(4-(5-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(304mg，80％)。将盐酸(2.0M水溶液，0.36mL，0.72mmol)添加到由4-(4-(5-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(300mg，0.72mmol)在甲醇(7mL)中所形成的悬浮液中。真空浓缩混合物至干燥。将残留物溶解在甲醇(2mL)中，添加乙醚(50mL)形成沉淀。过滤出沉淀，然后用Et₂O洗涤滤饼。将固体溶解在甲醇(10mL)中，然后真空除去溶剂至干燥，得到4-(4-(5-(2，4-二氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐(210mg，65％)，为灰白色固体。MS(APCI)：m/z＝414[M+H]。

实施例2-33的化合物可以基本上按照实施例1中所述方法制备。

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	2	4-(4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝414[M+H]
3	4-(4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝346[M+H]	2	4-(4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝414[M+H]
3	4-(4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝346[M+H]	4	4-(4-(4-(4-氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝380[M+H]
5	4-{4-[4-(3-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝414[M+H]	4	4-(4-(4-(4-氯苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝380[M+H]
5	4-{4-[4-(3-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝414[M+H]	6	4-(4-(4-(4-氟-3-三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝432[M+H]
7	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝431.41[M+H]	6		MS(APCI)：m/z＝432[M+H]
7		MS(IS)：(m/z)＝431.41[M+H]	8	6-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝431.41[M+H]
9	5-氟-4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝449.40[M+H]	8	6-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝431.41[M+H]
9		MS(IS)：(m/z)＝449.40[M+H]	10	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]
11	4-(4-(1-甲基-4-((3-三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝428[M+H]	10		MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]
11		MS(APCI)：m/z＝428[M+H]	12	4-(4-(1-甲基-4-((4-三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝428[M+H]

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	13	4-(4-(4-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝432[M+H]
14	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]	13		MS(APCI)：m/z＝432[M+H]
14		MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]	15	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	MS(IS)：(m/z)＝445.2[M+H]
16	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝445.2[M+H]	15		MS(IS)：(m/z)＝445.2[M+H]
16		MS(IS)：(m/z)＝445.2[M+H]	17	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]
18	6-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]	17		MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]
18	6-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝446.2[M+H]	19	4-{2-[1-(3-环丙基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝411.2[M+H]
20	4-{2-[1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝371.2[M+H]	19		MS(IS)：(m/z)＝411.2[M+H]
20	4-{2-[1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝371.2[M+H]	21	3-{2-[1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝371.2[M+H]
22	3-{2-[1-(3-环丙基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝411.22[M+H]	21	3-{2-[1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝371.2[M+H]
22		MS(IS)：(m/z)＝411.22[M+H]	23	4-{4-[5-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝448.2[M+H]

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	24	4-{4-[5-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]
25	4-{4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]	24		MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]
25		MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]	26	4-{4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]
27	6-{4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]	26		MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]
27	6-{4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝432.2[M+H]	28	3-环丙基-4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物	MS(IS)：(m/z)＝472.2[M+H]
29	1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-4-醇二盐酸化物	MS(ES)：(m/z)＝430.0[M+H]	28		MS(IS)：(m/z)＝472.2[M+H]
29		MS(ES)：(m/z)＝430.0[M+H]	30	1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-4-醇二盐酸化物	MS(ES)：(m/z)＝430.0[M+H]
30-A	1-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇二盐酸化物	ES-MS (M+H)＝429.0	30		MS(ES)：(m/z)＝430.0[M+H]
30-A		ES-MS (M+H)＝429.0	30-B	1-(9H-嘌呤-6-基)-4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇二盐酸化物	ES-MS (M+H)＝430.0
30-C	1-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇二盐酸化物	ES-MS (M+H)＝429.2	30-B	1-(9H-嘌呤-6-基)-4-(4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇二盐酸化物	ES-MS (M+H)＝430.0
30-C		ES-MS (M+H)＝429.2	30-D	1-(9H-嘌呤-6-基)-4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇二盐酸化物	ES-MS (M+H)＝430.0

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	31	6-{4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(ES)：(m/z)＝414.0[M+H]
32	6-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(ES)：(m/z)＝414.0[M+H]	31	6-{4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(ES)：(m/z)＝414.0[M+H]
32	6-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(ES)：(m/z)＝414.0[M+H]	33	4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	MS(ES)：(m/z)＝445.0[M+H]
33-A	4-(4-(1，5-二甲基-4-(4-三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物(在二甲基甲酰胺中与二异丙基乙胺的偶联反应)	MS(APCI)：m/z＝441[M+H]	33		MS(ES)：(m/z)＝445.0[M+H]
33-A		MS(APCI)：m/z＝441[M+H]	33-B	4-(4-(1，5-二甲基-4-(3-三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物(在二甲基甲酰胺中与二异丙基乙胺的偶联反应)	MS(APCI)：m/z＝441[M+H]
33-C	4-(4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物(在二甲基甲酰胺中与二异丙基乙胺的偶联反应)	MS(APCI)：m/z＝425[M+H]	33-B		MS(APCI)：m/z＝441[M+H]
33-C		MS(APCI)：m/z＝425[M+H]	33-D	4-(4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶二盐酸化物(在二甲基甲酰胺中与二异丙基乙胺的偶联反应)	MS(APCI)：m/z＝391[M+H]
33-E	6-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝424[M+H]	33-D		MS(APCI)：m/z＝391[M+H]
33-E	6-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝424[M+H]	33-F	4-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝424[M+H]
33-G	4-{4-[1-异丙基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝455[M+H]	33-F		MS(APCI)：m/z＝424[M+H]

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	33-H	4-{4-[1-异丙基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝456[M+H]

实施例34

4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐

掺混1-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪(195mg，1.00当量；0.620mmol)；4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(1.00当量；0.620mmol；96mg)；异丙醇(3mL)；二异丙基乙胺(1mL)，然后在微波反应器中于80℃加热60分钟。蒸发反应混合物，在硅胶上用5％MeOH/DCM提纯。掺混各级分，得到213.2mg(0.494mmol，80％)的4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。将该游离碱溶解在DCM/MeOH中，添加1.0当量1M HCl(在乙醚中)。浓缩混合物得到237.2mg 4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌嗪-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐。

MS(ES)：m/z＝443[M+H]。

下面的化合物可以基本上按照在实施例34中所述方法制备。

实施例	化合物	物理数据MS(ES)
实施例	化合物	物理数据MS(ES)	35	4-{4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝398[M⁺+H]
36	4-{4-[5-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝348[M⁺+H]	35	4-{4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝398[M⁺+H]
36		m/z＝348[M⁺+H]	37	4-{4-[5-(3，4-二氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝414[M⁺+H]
38	4-{4-[4-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝364.2[M⁺+H]	37	4-{4-[5-(3，4-二氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝414[M⁺+H]
38	4-{4-[4-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝364.2[M⁺+H]	39	4-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝426[M⁺+H]

实施例	化合物	物理数据MS(ES)
实施例	化合物	物理数据MS(ES)	40	4-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝412[M⁺+H]
41	6-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	m/z＝412[M⁺+H]	40		m/z＝412[M⁺+H]
41	6-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	m/z＝412[M⁺+H]	41-A	3-环丙基-4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶	MS(M+H)：m/z＝486.5
41-B	3-环丙基-4-(4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶	MS(M+H)：m/z＝436.4	41-A		MS(M+H)：m/z＝486.5
41-B		MS(M+H)：m/z＝436.4	42	4-{4-[4-(3-氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝380.2[M⁺+H]
43	4-{4-[4-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝382.0[M⁺+H]	42	4-{4-[4-(3-氯-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝380.2[M⁺+H]
43	4-{4-[4-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝382.0[M⁺+H]	44	4-{4-[4-(3-氯-5-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝398.0[M⁺+H]
44-A	4-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶双盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝395[M+H]	44	4-{4-[4-(3-氯-5-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝398.0[M⁺+H]
44-A		MS(APCI)：m/z＝395[M+H]	44-B	6-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤双盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝396[M+H]
44-C	4-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶双盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝411[M+H]	44-B	6-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤双盐酸盐	MS(APCI)：m/z＝396[M+H]
44-C		MS(APCI)：m/z＝411[M+H]	45	4-{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)-1-异丙基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝440.2[M⁺+H]
46	4-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝396.0[M⁺+H]	45		m/z＝440.2[M⁺+H]
46		m/z＝396.0[M⁺+H]	47	4-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	m/z ＝382.0[M⁺+H]

实施例	化合物	物理数据MS(ES)
实施例	化合物	物理数据MS(ES)	48	4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝413[M⁺+H]
49	4-{4-[1-甲基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝427[M⁺+H]	48	4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶盐酸盐	m/z＝413[M⁺+H]
49		m/z＝427[M⁺+H]	50	6-{4-[1-甲基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	m/z＝428[M⁺+H]
50-A	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝376.3	50	6-{4-[1-甲基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-9H-嘌呤盐酸盐	m/z＝428[M⁺+H]
50-A	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝376.3	50-B	4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-(1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝444.2
50-C	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(9H-嘌呤-6-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝376.2	50-B		ES-MS(M+H)＝444.2
50-C	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(9H-嘌呤-6-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝376.2	50-D	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝375.3
50-E	1-(3-环丙基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇盐酸盐	ES-MS(M+H)＝416.3	50-D	4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-醇(游离碱)	ES-MS(M+H)＝375.3
50-E		ES-MS(M+H)＝416.3	50-F	6-(4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤盐酸盐	ES-MS(M+H)＝438.0
50-G	4-(4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	ES-MS(M+H)＝438.0	50-F	6-(4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤盐酸盐	ES-MS(M+H)＝438.0
50-G	4-(4-(4-(3-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	ES-MS(M+H)＝438.0	50-H	4-(4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	ES-MS(M+H)＝360.3
50-I	6-(4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-9H-嘌呤盐酸盐	ES-MS(M+H)＝360.3	50-H	4-(4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐	ES-MS(M+H)＝360.3

实施例51

6-(4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-嘌呤

将4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(200mg，0.642mmol)，6-氯嘌呤(105mg，0.679mmol)，和三乙胺(95μL，0.681mmol)添加到2-丙醇(5mL)中。将混合物在80℃下加热3小时。冷却混合物到室温，和真空浓缩。将固体在CH₂Cl₂(10mL)中研制。由硅胶色谱法(60g，用40％甲醇/二氯甲烷，0.500L洗脱)提纯剩余固体，得到6-(4-(4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-嘌呤(179mg，65％)。

MS(APCI)：m/z＝430[M+H]。

实施例52

4-{4-[4-(4-甲氧基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并 [3，4-d]-嘧啶

将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(135mg；1.10当量；873.45μmol)和4-[4-(4-甲氧基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶(205mg，1.00当量；796.63μmol；205.00mg)加入到微波管形瓶中，然后溶于异丙醇(3mL；39.24mmol；3.00mL)中。添加二异丙基乙胺(0.5mL；2.87mmol；500.00μL)。在搅拌下在微波中将混合物加热到70℃并保持1小时。溶于5％MeOH/DCM，然后用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。在硫酸钠上干燥，过滤和浓缩。通过使用在biotage 40S柱上的ISCO色谱法，用2.5％MeOH/DCM到10％MeOH/DCM的梯度在40mL/min的流动速率下洗脱，经过35min收集，来提纯粗产物。合并各级分，得到4-{4-[4-(4-甲氧基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。

MS(APCI)：m/z＝376.2[M+H]。

实施例53

4-{4-[4-(3-硝基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]- 嘧啶

将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(150mg；1.16当量；970.50μmol；150.00mg)，和4-[4-(3-硝基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶盐酸盐(258mg1.00当量；835.58μmol；258.00mg)加入到微波管形瓶中，然后溶于异丙醇(3mL；39.24mmol；3.00mL)中和添加二异丙基乙胺(0.5mL；2.87mmol；500.00μL)。在搅拌的同时，在Emrys Optimizer微波中将混合物加热到70℃保持1小时。过滤，和浓缩滤液，得到油。合并固体和油，然后溶于3％MeOH/DCM中。通过使用在biotage 40S柱上的ISCO色谱法，用2.5％MeOH/DCM到10％MeOH/DCM的梯度在40mL/min的流动速率下洗脱，提纯粗产物。收集合适的级分，浓缩得到油。将油溶解在10％MeOH/DCM中，然后用碳酸氢钠水溶液/饱和氯化钠水溶液的混合物洗涤三次。用饱和氯化钠水溶液洗涤合并的有机层，然后在硫酸钠上干燥。浓缩和在减压下干燥，获得标题化合物。

MS(APCI)：m/z＝391.0[M+H]。

实施例53-A

4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-3- 甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

在微波管形瓶中加入4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物盐(0.5g，1.0当量)，1-(4，6-二氯-嘧啶-5-基)-乙酮(0.22g，1.0当量)，TEA(1.2mL，8.0当量)和异丙醇(5mL)。在微波中将反应物料在80℃下搅拌45分钟。由TLC(在DCM中10％MeOH)监测反应。冷却反应物料到0℃，然后添加水合肼(0.07mL，1.2当量)。慢慢地将反应物料升至室温。在微波中将反应物料在80℃下搅拌45分钟。由TLC(在DCM中10％MeOH)监测反应。在真空下浓缩反应物料。添加乙酸乙酯，然后用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在减压下浓缩它。由柱色谱分析(硅胶60-120目，DCM-甲醇)提纯化合物。在乙醚中结晶该产物，和过滤它，得到4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.254g，50.29％)。MS(M+H)：m/z＝460.5。

下列实施例可以基本上按照在实施例53-A中所述方法来制备。

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	53-B	3-乙基-4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶	MS(M+H)：m/z＝474.6

实施例53-C

3-乙炔基-4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶

在微波管形瓶中添加4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶.2HCl(0.2g，1.0当量)，4-氯-3-三甲基硅烷基乙炔基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.151g，1.1当量)，二异丙基乙胺(0.72mL，7.6当量)和异丙醇(6mL)。在微波中将反应物料在80℃下搅拌45分钟。由TLC(在DCM中30％丙酮)监测反应。浓缩反应物料。添加乙酸乙酯，然后用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在减压下浓缩它。由柱色谱分析(硅胶100-200目，DCM-丙酮)提纯化合物，得到4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-3-三甲基硅烷基乙炔基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.18g，60.56％)

将4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-3-三甲基硅烷基乙炔基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.18g，1.0当量)，KOH(0.057g，3.0当量)，MeOH(3.7mL)和DCM(1.85mL)加入到圆底烧瓶中。在室温下搅拌反应物料40分钟。由TLC(在DCM中30％丙酮)监测反应。在真空下浓缩反应物料。加入DCM，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，然后在真空下浓缩它，得到3-乙炔基-4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.074g，46.07％)。LCMS＝470.4(M+1)。

下列化合物可以基本上按照在实施例53-C中所述方法来制备。

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	53-D	4-(4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-3-乙炔基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶	MS (M+H)：m/z＝420.5

实施例53-E

4-(4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1- 基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇

在微波管形瓶中加入4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶二盐酸化物(0.5g，1.0当量)，4-氯-3-(3-甲基-3-三甲基硅烷基氧基-丁-1-炔基)-1H-吡咯并[3，4-d]嘧啶(0.47g，1.0当量)，二异丙基乙胺(2mL，7.6当量)和异丙醇(10mL)。在微波中将反应物料在80℃下搅拌1小时。由TLC(在DCM中10％MeOH)监测反应。在真空下浓缩反应物料。加入乙酸乙酯，用水和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在真空下浓缩它。由柱色谱分析(硅胶60-120目，DCM-MeOH)提纯化合物。在乙醚中结晶出产物，过滤它，得到所需产物4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-5-(3-甲基-3-(三甲基甲硅烷基氧基)丁-1-炔基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.21g，23％)。

将4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-5-(3-甲基-3-(三甲基甲硅烷基氧基)丁-1-炔基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(0.21g，1.0当量)和THF(2mL)加入到圆底烧瓶中。冷却反应物料到0℃。滴加四丁基铵氟化物(0.19mL，2.0当量)。在室温下搅拌反应物料40分钟。由TLC(在DCM中10％MeOH)监测反应。加入乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥有机层，在真空下浓缩它。在乙醚中结晶该产物和过滤它，得到4-(4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇(0.11g，64％)。MS(M+H)：m/z＝474.6。

下列化合物可以基本上按照在实施例53-E中所述方法来制备。

实施例	化合物	物理数据
实施例	化合物	物理数据	53-F	4-(4-(4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇	MS(M+H)：m/z＝475.6
53-G	3-(4-(4-(4-(3，4-二氟苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇	MS(M+H)：m/z＝449.4	53-F		MS(M+H)：m/z＝475.6
53-G		MS(M+H)：m/z＝449.4	53-H	3-(4-(4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇	MS(M+H)：m/z＝481.4
53-I	5-乙炔基-4-{4-[1-甲基-4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(在密封管中100℃加热一夜，Et₃N，用TBAF去保护)	MS(M+H)：m/z＝451	53-H		MS(M+H)：m/z＝481.4
53-I		MS(M+H)：m/z＝451	53-J	4-{4-[4-(3，4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-5-乙炔基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(在密封管中于100℃加热一夜，Et₃N，用TBAF去保护)	MS(M+H)：m/z＝419
53-K	5-乙炔基-4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(在密封管中于100℃加热一夜，Et₃N，用TBAF去保护)	MS(M+H)：m/z＝469	53-J		MS(M+H)：m/z＝419

实施例54

4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并 -[3，4-d]嘧啶盐酸盐

在22L四颈圆底烧瓶(装有加料漏斗，氮气覆盖层，冷凝器，洗涤器和机械搅拌器)中添加：3-三氟甲基-乙酰苯(1500g，1.00当量；7.97摩尔)和二氯甲烷(7.5L)。在室温下搅拌所得澄明的、无色的溶液，同时在室温下利用加料漏斗经过4小时添加由溴(1274g；1.00当量；7.97摩尔)在二氯甲烷中形成的溶液。通过缓慢添加饱和NaHCO₃水溶液(2000mL)，由冰浴控制温度到低于25℃来淬灭反应。分离两相，用饱和氯化钠水溶液(2000mL)洗涤有机层，然后用硫酸钠干燥，过滤和浓缩得到澄明的无色油。由硅胶色谱法(步骤梯度，在庚烷中20％-50％CH₂Cl₂)提纯这一粗油，获得2-溴-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙酮(1667g，6.24mol，78％)，为澄明无色油。

将2-溴-1-[3(三氟甲基)苯基]-1-乙酮(1664.7g；1.00当量；6.23摩尔)和四氢呋喃(7500mL)加入到12L三颈圆底烧瓶(装有水冷冷凝器，氮气覆盖层，机械搅拌器和冷却浴)中。将叠氮化钠(425.6g；1.05当量；6.55摩尔)作为一份添加进去。用水(135mL)漂洗该烧瓶。在氮气氛围中在室温下搅拌该浅黄色淤浆。在6小时后，添加水(260mL)和继续搅拌一夜。经由赛力特硅藻土()的薄垫片过滤出所得桔黄色淤浆，然后用THF(1L)漂洗。将所得溶液分成两个等份(各5146.5g)。在两个相同的22L三颈圆底烧瓶(装有加料漏斗，水冷冷凝器，氮气覆盖层，机械搅拌器和冷却浴)中加入三苯膦(889g，3.43mol，1.1当量)，对甲苯磺酸一水合物(1304g，6.86mol，2.2当量)和THF(5.6L)。借助于加料漏斗经过4小时将两份的中间体混合物添加到各自烧瓶中，由加入速率控制因氮气放出所引起的起沫和使用冰浴控制温度。在添加完成之后在环境温度下搅拌淤浆两个小时，然后从两个反应器中过滤固体到同一过滤器上。洗涤两烧瓶，合并的滤饼用总THF(4L)洗涤。在真空烘箱中于40℃干燥一夜，获得(2-氨基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙酮)-、对甲苯磺酸盐(1∶1)，为白色结晶固体(2340g，6.23mol，72％)。

将(2-氨基-1-(3-三氟甲基-苯基)-乙酮)-、对甲苯磺酸盐(1∶1)(913g，2.43mol)和1-叔丁氧基羰基异哌啶酸(623g，2.73mol，1.12当量)与THF(2.75L)和EtOAc(5.5L)一起添加进去，然后冷却到0-5℃。添加1.2当量的丙基膦酸酐(T3P)(1.2当量，2.91mol，1.512L的50％溶液(在EtOAc中))和在添加过程中将反应温度维持在0-5℃。搅拌10分钟，然后添加N-甲基吗啉(566g，5.6mol，2.3当量)，在添加过程中保持温度低于5℃。让反应升温至室温，在10小时后，在冰浴中冷却和添加水(7.3L)。分离两层，用EtOAc(2.75L)洗涤水层。合并有机层和用0.5M碳酸氢钠水溶液(2.75L)洗涤。用饱和氯化钠水溶液(2.75L)洗涤有机层，然后用硫酸钠处理所得有机层，然后过滤。蒸馏除去溶剂，减至～4.6L。再添加庚烷(11L)，同时蒸馏除去溶剂，直到最终容积达到～11L为止。冷却到50℃和接种。将所得淤浆在50℃下保持3小时，然后冷却该淤浆到室温和搅拌2小时。过滤出固体，首先用在庚烷(2L)中的10％EtOAc、然后用庚烷(2L)洗涤该滤饼。在真空烘箱中于60℃干燥3小时之后，获得800g(79％)的4-[2-氧代-2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体。

制备4-[2-氧代-2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(773.3g；1.00当量；1.87摩尔)在甲醇(2300mL)中的溶液。制备乙酸铵(755.08g；9.80摩尔)在甲醇(3500mL)中的溶液。将两种溶液按照乙酸铵与4-[2-氧代-2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯的5∶1摩尔比泵抽出来，停留时间为45分钟。在室温下将两个流股在T形管中掺混，然后经过5小时流入到热管式反应器中，其中烘箱温度在170℃。掺混全部所收集的产品溶液和在减压下浓缩，然后溶剂替换为3500mL的n-BuOH。用3000mL的饱和NaHCO₃水溶液和1000mL水的混合物洗涤这一溶液。再次用饱和氯化钠水溶液(3000mL)洗涤，随后通过蒸馏出1L的n-BuOH(45℃浴温)进行共沸干燥。过滤出在蒸馏过程中沉淀的固体物。将滤液加入到在冷却浴中的5L四颈烧瓶中。慢慢地将无水HCl气体鼓泡通入到溶液中，用冰水浴控制温度＜55℃。在反应完成之后利用加料漏斗慢慢地添加庚烷(4000mL)，然后在冰浴将所得淤浆冷却到＜5℃，保持15分钟。过滤出固体，用庚烷(2×600mL)洗涤滤饼。在40℃真空烘箱中干燥固体，获得(4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶)-、盐酸盐(1∶1)，为白色固体(619.1g，1.87mol，92％)。

将4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(93.3g；1.00当量；603.66mmol；93.30g)，(4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶)-、盐酸盐(1∶1)(200.1g；1.00当量；603.13mmol)和甲醇(1800mL)加入到5000mL四颈圆底烧瓶(装有氮气覆盖层，橡胶隔片，机械搅拌器，加热罩，冷凝器和热电偶探针)中。利用加料漏斗经过大约15分钟添加三乙胺(280mL；2.01摩尔)。将所得澄明桔黄色溶液加热到50℃，然后在50℃下保持15分钟。当由HPLC检测认为反应已完成时，利用加料漏斗在50℃下添加水(2000mL)。在添加水的过程中添加种子晶体，产物结晶。一旦添加结束，加热该淤浆到回流状态保持1小时。冷却到室温，然后过滤和用在水中的20％MeOH(2×250mL)洗涤固体。在真空烘箱中于45℃干燥固体一夜，获得4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，为黄褐色固体(211.5g，0.603mol，85％)。

m.p.＝281℃；MS m/z＝414[M+H]。

将4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(442.9g，1.07mol)与IPA(4.43L)一起添加进去，然后在室温下搅拌所得淤浆。慢慢地添加HCl(214mL的5M水溶液，1.07mol，1.0当量)和加热到50℃。搅拌30分钟和添加丙酮(4.43L)和继续加热4小时。冷却到15℃保持2小时，然后过滤出固体。用丙酮(800mL)洗涤滤饼，所得固体在真空烘箱中于60℃干燥3小时，获得标题化合物(458g，94％)，为黄褐色到灰白色的固体。M.p.＝306℃；MS(ES)：m/z＝414[M+H]。

实施例55

4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1- 基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐

将六亚甲基四胺(1.10当量；231.55mmol；32.46g)添加到由4-氟-3-(三氟甲基)苯甲酰甲基溴(60.00g 1.00当量；210.50mmol)在乙酸乙酯(450mL；4.60摩尔)中形成的溶液中。在室温下搅拌混合物一夜。真空除去溶剂，将固体在甲基叔丁基醚中研磨。过滤和在减压下干燥。添加乙醇(450mL；7.73摩尔)，随后添加氯化氢(150mL；8.30当量；1.75摩尔)和在室温下搅拌混合物一夜。真空除去溶剂，在真空中于50℃干燥固体一周，获得2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐(54.23g；100％产率)，为白色固体。

将N-甲基吗啉(3当量；631.52mmol；69.66mL)添加到由哌啶-1，4-二羧酸单叔丁酯(1.20当量；252.61mmol；57.92g)在THF(400mL)中形成的溶液中。用干冰-丙酮浴冷却混合物到-10℃。滴加氯甲酸异丁酯(1.1当量；231.56mmol；30.26mL)，同时维持温度低于-5℃。在-5℃至10℃下30分钟之后，添加已悬浮在THF(300mL)中的2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮盐酸盐(54.23g；1.00当量；210.51mmol)，然后将混合物在浴中于-5℃搅拌20分钟。在室温下搅拌1小时。添加水和EtOAc，然后用水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层。在MgSO₄上干燥，过滤和真空除去溶剂。将该粗物质悬浮在甲基叔丁基醚中和搅拌2小时。过滤出固体和真空干燥，得到1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-4-羧酸叔丁酯(64.44g；70.79％产率)。

将乙酸铵(15当量；1.02摩尔；78.61g)添加到由1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-4-羧酸叔丁酯(29.4g；1.00当量；67.99mmol)在1-丁醇(150mL；1.64摩尔)中形成的溶液中，然后添加三乙胺(1当量；67.99mmol；9.48mL)。将混合物在密封管中于160℃搅拌3小时。添加EtOAc和水，然后用更多的水和饱和氯化钠水溶液洗涤有机层，真空浓缩。将该粗物质在甲基叔丁基醚中研磨，过滤和在减压下干燥，得到4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(18.23g；44.10mmol，64.86％产率)，为白色固体。

将已溶于40mL二甲亚砜中的4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(16.03g；1.00当量；38.77mmol)添加到由氢氧化钾(1.5当量；58.16mmol；3.26g)在200mL的二甲亚砜中形成的溶液中。在室温下5分钟后，将甲基碘(1.1当量；42.65mmol；2.66mL)作为一份添加进去。在室温下搅拌两个小时，然后将混合物倾倒在冰水中。过滤出固体，用水洗涤，然后在减压下干燥。将固体在热的庚烷中研磨，过滤和在减压下干燥，得到4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(8.7g；52.49％产率)，为白色固体。

在室温下将氯化氢(4.00当量；81.41mmol；20.35mL)添加到由4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(8.7g；1.00当量；20.35mmol)在二氯甲烷(101.77mL)中形成的溶液中。在室温下搅拌溶液1小时。在减压下除去溶剂，然后将粗物质溶解在异丙醇(101.77mL)中。添加4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(1.65当量；33.58mmol；5.19g)和三乙胺(10当量；203.54mmol；28.37mL)。在回流下搅拌混合物1小时。在减压下除去溶剂，然后在水中研磨该粗物质一夜。过滤出固体和在热的乙腈中研磨，过滤和真空干燥。获得4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(8.42g；18.86mmol；92.66％产率)，为浅黄色固体。

将氯化氢(1.1当量；18.52mmol；4.63mL)添加到由4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(7.5g；1.00当量；16.84mmol)在二氯甲烷(50mL)中形成的悬浮液中，然后在室温下搅拌混合物1小时。真空除去溶剂，将该粗物质在甲基叔丁基醚中研磨1小时。过滤出固体和真空干燥一夜，得到4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-3-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐(7.99g；16.58mmol；98.47％产率)，为白色固体。¹H-NMR(300MHz，DMSO)：δ14.01-13.99(m，1H)，8.57-8.54(m，2H)，8.26-8.19(m，3H)，7.72-7.63(m，1H)，5.23-5.20(m，2H)，3.89(s，3H)，3.41(m，2H)，2.15-2.07(m，3H)，1.10(s，2H)。

实施例56

结晶性4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐

将4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(134mg)悬浮在丙酮(2mL)中。将悬浮液加热到77℃，然后添加甲醇(1mL)。将0.25M HCl(1.28mL)添加到溶液中，然后慢慢地冷却。添加庚烷(2mL)，随后添加丙酮(6mL)。在室温下蒸发一夜。将丙酮(3mL)添加到所得到的油中，将所得的白色固体在丙酮中经过4小时制成淤浆。过滤该悬浮液和空气干燥，得到98mg，在真空烘箱中在真空中和在45℃下干燥。该晶形具有在294℃开始的吸热。

用装有CuKα源(

)的在40kV和50mA下操作的D4Endeaver衍射计进行X射线粉末衍射分析。样品从4°扫描到40°(2θ)，使用0.009°2θ的步长和≥1.5秒/每步的扫描速率。使用NIST标准SRM675(标准峰，2θ角在8.8°)校正样品偏移误差。

2θ角(±0.1°)	强度％	2θ角(±0.1°)	强度％
2θ角(±0.1°)	强度％	2θ角(±0.1°)	强度％	7.1	39.5	19.8	30.7
10.7	9.1	20.4	16.0	7.1	39.5	19.8	30.7
10.7	9.1	20.4	16.0	12.8	13.3	21.7	100.0
13.0	14.8	22.6	44.1	12.8	13.3	21.7	100.0
13.0	14.8	22.6	44.1	13.5	15.1	22.7	30.4
15.0	9.3	23.1	17.5	13.5	15.1	22.7	30.4
15.0	9.3	23.1	17.5	16.1	28.1	24.6	34.9
16.3	20.3	26.0	7.5	16.1	28.1	24.6	34.9
16.3	20.3	26.0	7.5	17.2	24.0	27.0	6.3
18.7	20.6	29.7	11.0	17.2	24.0	27.0	6.3
18.7	20.6	29.7	11.0	18.9	9.8	30.3	7.2
19.4	17.3			18.9	9.8	30.3	7.2

本发明提供结晶性4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐，它通过在X射线图中在7.1°±0.1或21.7°±0.1的2θ衍射角上的至少一个峰来表征。本发明还提供药物配制剂，它包含结晶性4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐，后者通过在X射线图中在7.1°±0.1或21.7°±0.1的2θ衍射角上的至少一个峰来表征。本发明进一步提供结晶性4-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶盐酸盐用于制造抑制血管生成或治疗结肠腺癌的药物的用途，该化合物通过在X射线图中在7.1°±0.1或21.7°±0.1的2θ衍射角上的至少一个峰来表征。

盐和晶体的制备的一般程序

母板是用被添加到全部孔(设定为96孔格式)的250μL的由主题化合物的游离碱在甲醇中形成的溶液(0.1M)来制备的。按照化学计量摩尔当量，将一个阵列的酸分配到各孔中。通过使用Genevac Series II蒸发器从全部96孔蒸发溶剂，在母板中留下固体残留物或油。将一个阵列的溶剂通过密封圈分配到这些孔当中的每一个中，然后在搅拌下加热至55℃，在约55℃下平衡60-90分钟。各样品然后趁热过滤，并转移到在蒸发板、沉淀板和冷却板中的相应孔中。通过使用55℃加热注射器将200μL的滤液从母板中转移到开孔滴定板上，然后在室温和环境湿度下经过一夜蒸发至干燥，来制备蒸发板。通过使用55℃加热注射器将100μL的滤液从母板中添加到密封圈密封的96孔滴定板上，其中各孔含有200μL的庚烷或水的抗溶剂，来制备沉淀板。在室温下平衡九小时的一段时间之后，通过使用预先裁切的Whatman滤纸芯吸除去过量溶液。通过使用55℃加热注射器将200μL的滤液从母板上转移到在密封圈所密封的滴定板上的各个孔中，然后经过8小时的时间按指数规律从55℃冷却至10℃，来制备冷却板。通过使用带有2.5X物镜的Zeiss Axiovert 200M逆转式入射光显微镜，对于在96孔板中的各孔中的材料收集显微照片。如果该材料是结晶性的，它具有双折射率，显示为白色对深色背景。无定形固体或油看起来是深色的或是不透明的液滴或环。

实施例57

4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐

将4-氟-3-(三氟甲基)苯甲酰甲基溴(由HPLC测得93％纯度，1000g；3.51摩尔)和四氢呋喃(5L)的溶液在冰浴中冷却到＜5℃。在＜5℃下经过1小时将叠氮化钠(239g；3.68摩尔，1.05当量)在水(800mL)中的溶液滴加进去。在＜5℃下搅拌一小时后，分离两相和废弃水层。在仍然冷的时候，经过3小时将有机层慢慢地添加到三苯膦(920.2g，3.51摩尔，1.0当量)，对甲苯磺酸一水合物(1335g，7.02摩尔，2.0当量)，和THF(5L)的溶液中。在整个添加过程中温度维持在＜15℃，在添加过程中固体沉淀。

在＜20℃下搅拌反应混合物2小时，然后过滤固体，用THF(3×2L)洗涤，然后在真空下于50℃下干燥，得到1167.4g(85％，对于起始原料纯度校正后92％)的2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮对甲苯磺酸盐，为白色结晶固体。

掺混2-氨基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮对甲苯磺酸盐(1133g；2.88摩尔)，1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(795g；3.47摩尔，1.20当量)，四氢呋喃(3450mL)和乙酸乙酯(7500mL)，形成稀薄的白色淤浆。在冰浴中冷却该淤浆到＜5℃，然后添加2-丙烷膦酸酐(T₃P)(在EtOAc中50％溶液)(2385g；3.75摩尔，1.3当量)。然后经过1小时添加N-甲基吗啉(795mL；7.21摩尔，2.5当量)，维持温度＜10℃。将所得淤浆升温至环境温度，然后搅拌2小时。

通过添加水来淬灭反应。分离有机相，然后用NaHCO₃水溶液，NaCl水溶液洗涤。在旋转蒸发器上将有机相加热到50℃，然后添加正庚烷。在真空下蒸馏溶剂直至最终的淤浆体积是大约5L。冷却该淤浆到室温和过滤固体，用正庚烷(2×1L)洗涤，然后在真空烘箱中于50℃干燥一夜，得到1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-4-羧酸叔丁酯(1124.8g，90％)，为白色固体。

掺混1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基氨基甲酰基]-哌啶-4-羧酸叔丁酯(100g，231mmol)，乙酸铵(178.3g；2.31摩尔，10当量)，和甲醇(1000mL)。用于这一转化中的反应器是盘管状1/16”内径不锈钢管(在烘箱中管道的总内体积是541mol)。在烘箱中将反应器加热到140℃。通过调节器将该管中的回压控制在250psig，以使溶液过热到高于它的正常沸点。在6.01mL/min的流速和压力下将以上所制备的溶液泵抽连续通过热管(获得在热管中90分钟的总停留时间)。当溶液离开该烘箱时，在套管式热交换器中冷却至20℃。一旦整个溶液流过该反应器进行处理(8小时总处理时间)，在真空下于30℃下浓缩所得桔黄色溶液到600mL的总体积。添加乙腈(200mL)和加热溶液到50℃。经过2小时滴加水(700mL)且接种以结晶该产物。冷却所得淤浆到20℃和过滤出固体，然后用在水中的20％MeOH(2×200mL)洗涤。在真空和50℃下干燥所得固体。在50℃下将固体在乙腈(200mL)中再制成淤浆。冷却该淤浆到环境温度，过滤出固体和用乙腈(100mL)洗涤，获得4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(54.43g，132mmol，57％)，为灰白色固体。

将4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(80.02g，183.69mmol)溶解在二甲亚砜(1060mL)中。将KOH(18.47g；279.82mmol；1.5当量)作为一份添加进去。在25℃下经过30分钟添加甲基碘(27.74g；193.48mmol，1.05当量)。在25℃下搅拌溶液1小时。将4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯种子晶体(0.17g)和水(80mL)的混合物经过5分钟添加到溶液中。将所得稀薄淤浆在25℃下搅拌30分钟。在25℃下经过30分钟添加另外的水(240.73mL)。过滤出固体和用在水中的20％DMSO(2×120mL)洗涤，然后用水(120mL)洗涤。在真空下于60℃干燥固体。在50℃下将所得干燥固体溶解在乙醇(480mL)中。经过5分钟添加水(240mL)。然后经过30分钟添加4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯晶种(0.038g)和更多的水(240mL)。经过2小时将所得淤浆冷却至25℃。过滤出固体和用水中的20％EtOH洗涤滤饼。在真空和60℃下干燥固体，获得4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(72.36g，92％)，为白色固体。

通过在＜5℃下经过45分钟将乙酰氯(193.14mL；2.71摩尔，4.00当量)缓慢添加到甲醇(1160mL)中来制备无水HCl溶液。在20℃下经过90分钟，将所得溶液添加到含有由4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(290g；678.46mmol)在甲醇(2320mL)中形成的溶液的单独烧瓶中。在20℃下搅拌反应混合物一夜。在真空和30℃下浓缩反应混合物。添加二甲亚砜(1080mL；15.20摩尔；1.08L；1.19kg)和继续蒸馏，直到内部温度在20mm Hg的压力下达到50℃为止。添加DMSO，直到总体积是2030mL为止。然后利用加料漏斗经过30分钟添加三乙胺(473mL；3.39摩尔，5当量)。经过30分钟将固体4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(110.29g；713.58mmol，1.05当量)作为相等的份以等间隔加入。在20℃下搅拌所得淤浆一夜。加热该淤浆到80℃。添加水(229mL)获得透明溶液。为反应接种，经过4小时缓慢地添加更多的水(1273mL)以完全地使产物结晶。冷却该淤浆到50℃，然后过滤出固体。用在DMSO中30％水(2×290mL)洗涤滤饼，然后用水(290mL)洗涤。在真空和60℃下干燥固体，获得4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(301g，99％)，为灰白色固体。

将4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(20g，44.9mmol)溶解在20∶1 H₂O∶丙酮混合物(360mL)中。在20℃下经过20分钟将对甲苯磺酸一水合物(10.25g，53.9mmol，1.2当量)在20∶1 H₂O∶丙酮混合物(40mL)中的溶液添加到反应中。将反应混合物加热到55℃，保持1小时，然后经过1小时冷却到25℃。过滤出固体，然后用水(40mL)洗涤滤饼。在真空和50℃下干燥，获得4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐(23.9g，86％)，为白色固体。

实施例58

结晶性4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶 -1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐

在具有顶部搅拌器的1升圆底烧瓶中加入60.12g的4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，随后加入250mL的5％MeOH水溶液。搅拌所得淤浆和添加对甲苯磺酸一水合物(26.88g)，然后用剩余50mL的5％MeOH水溶液向前漂洗。搅拌所得淤浆和冷却晶体到5℃。在5℃下1小时后，停止搅拌和在布氏漏斗上过滤淤浆。用75mL冷5％MeOH水溶液漂洗烧瓶，使用这一漂洗液来洗涤滤饼。将固体转移到称量盘中，然后在50℃下在真空中干燥一整天和整夜，有缓慢的放气。最终重量是71.44g。

用装有CuKα源(

)的在40kV和50mA下操作的D4Endeaver衍射计进行X射线粉末衍射分析。样品从4°扫描到40°(2θ)，使用0.009°2θ的步长和≥1.5秒/每步的扫描速率。

2θ角(±0.1°)	强度％	2θ角(±0.1°)	强度％
2θ角(±0.1°)	强度％	2θ角(±0.1°)	强度％	6.826	12	23.485	14
10.256	24	23.615	17	6.826	12	23.485	14
10.256	24	23.615	17	12.984	24	23.866	22
13.131	61	24.024	20	12.984	24	23.866	22
13.131	61	24.024	20	13.431	25	24.667	11
13.688	100	24.795	11	13.431	25	24.667	11
13.688	100	24.795	11	14.062	24	25.029	8
15.745	6	25.552	9	14.062	24	25.029	8
15.745	6	25.552	9	17.121	15	26.234	5
18.599	5	26.556	10	17.121	15	26.234	5
18.599	5	26.556	10	18.919	21	27.031	6
19.38	29	27.693	11	18.919	21	27.031	6
19.38	29	27.693	11	20.603	14	27.97	5
21.661	6	28.352	6	20.603	14	27.97	5
21.661	6	28.352	6	21.962	14	28.428	5
22.108	9	38.232	5	21.962	14	28.428	5

本发明提供结晶性4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐，它通过在X射线图中的13.7°±0.1或10.3°±0.1的2θ衍射角的至少一个峰来表征。本发明还提供包含结晶性4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐的药物配制剂，该化合物通过在X射线图中的13.7°±0.1或10.3°±0.1的2θ衍射角的至少一个峰来表征。本发明进一步提供结晶性4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶对甲苯磺酸盐用于制造抑制血管生成或治疗结肠腺癌的药物的用途，该化合物通过在X射线图中的13.7°±0.1或10.3°±0.1的2θ衍射角的至少一个峰来表征。

p70S6激酶的抑制

从Upstate USA，Inc.(Charlottesville，VA)获得的P70 S6激酶(T412E)在96孔板中在室温下用15μL体积的10种浓度的化合物进行预培养30分钟。添加从AnaSpec(San Jose，CA)商购的PKA、PKC、MAPKAP-K1底物和从PerkinElmer(Waltham，MA)商购的γ³³P-ATP来引发反应，该反应然后在以下条件下以最终25μL体积在室温下进行60分钟：10mMHEPES pH 7.5，10mM MgCl₂，1.0mM DTT，0.082mM EGTA，0.005％TRITON X-100^TM，25μM，25μM ATP，40μCi/mL，4μM底物，和5nM酶。反应用75μL 10％H₃PO₄终止，然后85μL的淬灭反应混合物被转移到磷酸纤维素过滤板(Millipore #MAPHN0B50)和使用真空歧管用0.5％ H₃PO₄洗涤。将100μL的Microscint 20(Packard #60113621)添加到各孔中，有衬层的板使用Wallac β计数管计数。由非线性四参数拟合法计算相对IC₅₀值。所有举例的化合物基本上按照以上所述方法来测试，并发现具有小于或等于0.75μM的IC₅₀值。下列化合物基本上按照以上所述方法测试，并侧得具有下面的活性：

实施例	IC₅₀(μM)
实施例	IC₅₀(μM)	5	0.0294
7	0.0103	5	0.0294
7	0.0103	8	0.00758
10	0.00379	8	0.00758
10	0.00379	57	0.0127

这表明本发明的化合物是有效的p70 S6激酶抑制剂。

血管生成索形成分析

在第一天将人新生真皮成纤维细胞(neo NHDF)接种到Parkard 96孔板中，然后在37℃在5％ CO₂培养器中培养。然后将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)覆在neo NHDF细胞之上。从第三天开始，共培养物在20ng/mL血管内皮细胞生长因子(VEGF)存在下用八个剂量系列的试验化合物(从20μM开始，1∶3连续稀释)进行处理。化合物和VEGF每两到三天进行补充。该分析进行12天时间。在第12天，细胞由冷70％乙醇固定30分钟，然后进行处理，用于抗人CD31免疫荧光分析。培养物用小鼠抗人CD31抗体进行培养，然后被山羊抗小鼠阿列克萨(alexa)488二级抗体染色。细胞也被赫希斯特(Hoechst)染色，以显现细胞核。在染色之后，索形成通过使用采用管形成BioApplication的Cellomics

VTI高含量图像分析平台来捕获和定量分析。两种参数，即索面积和血管生成指数，用来计算在这一血管生成分析中试验化合物的相对功效。实施例5和10的化合物基本上按照以上所述方法来试验和分析。

实施例	IC₅₀(μM)
实施例	IC₅₀(μM)	5	2.92
10	4.78	5	2.92

这表明本发明的化合物可用于抑制血管生成。

细胞分析

细胞被维持，然后被胰蛋白酶化(typsinized)和悬浮于杜尔贝科改性伊格尔培养基(含有10％胎牛血清(FBS)，25mM 4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸(HEPES)，1.0mM丙酮酸钠和0.1mM非必需氨基酸(NEAA)的DMEM_)中。1×10³ HCT116和2×10³细胞可以50μL接种在96孔板中并在5％CO₂中于37℃培养一夜。化合物以所需起始浓度制备并系列稀释在DMSO中。将4μL的稀化合物转移到1mL 10％FBS DMEM中，以便在细胞存在下为50μL增加50μL来构成2X浓度，用于按剂量给药。该板在5％CO₂中于37℃培养72小时。在培养期结束时，添加10μL Alamar Blue，在2小时反应之后在CytoFluor中在530nm激发、580nm发射和增益45下测得测量值。下面化合物基本上按照以上所述方法在下列细胞系中试验。

实施例	U87MGIC₅₀(μM)	A549IC₅₀(μM)	A2780IC₅₀(μM)	NCI-H460IC₅₀(μM)	PANC-1IC₅₀(μM)	大鼠13762IC₅₀(μM)	PC₃IC₅₀(μM)	K562IC₅₀(μM)
实施例	U87MGIC₅₀(μM)	A549IC₅₀(μM)	A2780IC₅₀(μM)	NCI-H460IC₅₀(μM)	PANC-1IC₅₀(μM)	大鼠13762IC₅₀(μM)	PC₃IC₅₀(μM)	K562IC₅₀(μM)	5	14.6	22	NA	NA	NA	NA	NA	NA
57	27.52	10.28	25.05	23.99	30.24	51.62	31.92	16.46	5	14.6	22	NA	NA	NA	NA	NA	NA

这表明本发明的化合物可用于通过涉及p70 S6激酶的机理而抑制这些细胞系的增殖。

p70 S6K活体内靶抑制(HCT 116)的测定

HCT 116人结肠癌细胞^*(5×10⁶)在0.2mL的基质胶(matrigel)中皮下植入到无胸腺裸鼠的侧腹。植入后两个星期，小鼠根据时间进程、单剂量/单个时点或剂量响应规程按剂量给药PO，以测定TMED₅₀(最小有效剂量阈值)。肿瘤在采集时快速冷冻，收集血液用于母体化合物血浆暴露的测定和在剂量响应研究中TMEC₅₀(最低有效浓度阈值)的计算。通过使用Lysing Matrix A管(MP Biomedicals，Solon，OH，cat# 6910-500)和BIO101 Thermo Savant Fast Prep FP12，肿瘤或组织在XY Lysis缓冲剂(10μg/mL亮肽素，10μg/mL胰蛋白酶-糜蛋白酶抑制剂，10μg/mL甲苯磺酰基苯丙氨酰基氯甲基酮(TPCK)，10μg/mL抑肽酶，60mmβ-磷酸甘油，1％Triton X100，25mM Tris pH 7.5，2.5mM焦磷酸盐，150mM NaCl，2mM对甲苯磺酰基-L-精氨酸甲酯(TAME)，15mM对硝基苯基磷酸酯(pNPP)，5mM苯甲脒，1mM钒酸Na，10mM NaF，50μg/mL苯基甲烷磺酰氟(PMSF)，1mM DTT，15mM EDTA pH 8.0，5mM EGTA pH8.0，1μM微囊藻毒素，1μM冈田酸，和1个Roche完整蛋白酶抑制剂微片/每10mL)中进行均化。溶胞产物被等分，然后立即分析或在-80℃下贮存以用于后续试验。通过使用Meso Scale Discovery(Gaithersburg，MD)ELISA技术评价该化合物对于下游效应因子S6RP的丝氨酸240/244位点的磷酸化的影响，来测量p70 S6K的活体内靶抑制作用。p70 S6K(T389)和Akt(S473)的磷酸化也通过使用这一技术以多路格式进行分析。总之，20μg的溶胞产物被添加到已用合适的捕获抗体进行预涂斑点的碳电极96孔板上。所考虑的蛋白质通过使用钌标记的检测抗体进行探测。在含有共反应物TPA的读缓冲器存在下电流流过电极时，电化学荧光导致了光的产生，该光通过使用MSD Sector 6000仪器来定量和记录。对于各研究，百分抑制率是相对于载体(vehicle)对照组计算的，ANOVA分析是通过使用用于测定统计显著性的JMP软件包来进行的。下列化合物基本上按照以上所述方法来试验，和具有下列效力(基于血浆暴露(plasma exposure)计)。

实施例	IC₅₀(μM)
实施例	IC₅₀(μM)	5	7.3
7	1.92	5	7.3
7	1.92	8	47.7
10	1.97	8	47.7

^*或者，U87MG细胞用于如上所述的程序中。

这表明了本发明的化合物在活体内抑制p70 S6激酶的能力。

p70 S6K活体内效力的测定

HCT 116人结肠癌细胞(5×10⁶)在0.2mL的基质胶(matrigel)中皮下植入到无胸腺裸鼠的侧腹。植入后的一个星期，根据分子在24小时的时间中维持30-50％或60-90％pS6抑制率的药物动力学和药效学，小鼠按剂量给药PO。按剂量给药继续进行至少21天。肿瘤体积每两周测量，使用标准方法评价药物相关的肿瘤生长减少率。在研究的结束时，肿瘤在采集之后快速冷冻，收集血液用于测定母体化合物血浆暴露。实施例5的化合物基本上按照以上所述方法来试验。

	载体	30mg/kg PO(BIDx21)	60mg/kg PO(BIDx21)	60mg/kg PO(QDx21)
	载体	30mg/kg PO(BIDx21)	60mg/kg PO(BIDx21)	60mg/kg PO(QDx21)	天	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a
8	38.5±4.1	36.5±3.1^b	28.8±2.6^b	30.6±3.4^b	天	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a	肿瘤体积^a
8	38.5±4.1	36.5±3.1^b	28.8±2.6^b	30.6±3.4^b	13	100.9±13.7	58.7±4.8^**	42.1±6.2^***	57.8±10.7^**
16	163.1±25.7	90.9±9.4^***	72.1±11.8^***	85.0±13.3^***	13	100.9±13.7	58.7±4.8^**	42.1±6.2^***	57.8±10.7^**
16	163.1±25.7	90.9±9.4^***	72.1±11.8^***	85.0±13.3^***	20	287.1±31.9	134.6±13.2^***	139.0±26.4^***	142.5±18.4^***
23	402.2±43.1	192.7±13.5^***	188.4±25.9^***	194.5±25.7^***	20	287.1±31.9	134.6±13.2^***	139.0±26.4^***	142.5±18.4^***
23	402.2±43.1	192.7±13.5^***	188.4±25.9^***	194.5±25.7^***	27	545.0±41.1	296.3±30.1^***	280.0±36.1^***	252.7±34.4^***

^a10个动物的平均体积(mm³)±标准偏差。

^b相对于载体处理组而言差异不显著。

^**相对于载体处理组，0.001＜p≤0.01。

^***相对于载体处理组，p≤0.001。

这表明本发明的化合物可用于降低肿瘤生长的速率。

本发明的化合物的口服是优选的。然而，口服不是唯一途径或甚至不是唯一优选途径。例如，透皮给药对于易忘记口服药物或在口服药物时暴躁的患者来说可能是非常合乎需要的，而静脉内给药途径为方便起见或为了避免与口服有关的潜在性并发症而可能是优选的。通式I的化合物也可以在具体情形下通过经皮、肌内、鼻内或直肠给药途径来给药。给药途径能够以任何方式改变，由药物的物理性能、患者和护理人员的方便和其它相关情形所限制(Remington′s Pharmaceutical Sciences，18thEdition，Mack Publishing Co.(1990))。

药物组合物按照在药物领域中众所周知的方式来制备。载体或赋形剂可以是可用作活性成分的载体或介质的固体、半固体或液体材料。合适的载体或赋形剂是现有技术中所熟知的。该药物组合物可适合于口服、吸入、胃肠外或局部给药，并且能够以片剂、胶囊剂、气溶胶、吸入剂、栓剂、溶液、悬浮液等等的形式给药于患者。

本发明的化合物，单独或任选与肿瘤消解剂、细胞毒素试剂或治疗剂相结合，通常以药物配制剂的形式给药，该配制剂例如可与惰性稀释剂或胶囊剂一起口服给药或压制成片剂。为了口服治疗目的，化合物可以与赋形剂混合并以片剂，锭剂，胶囊剂，酏剂，悬浮液，糖浆剂，圆片，口香糖等等的形式使用。这些制剂应该含有至少4％的本发明化合物-活性成分，但是可根据具体形式来变化并且可适宜在该单元重量的4％-约70％之间。在组合物中存在的化合物的量使得将获得合适的剂量。本发明的优选组合物和制剂将可通过本领域技术人员众所周知的方法来测定。

片剂，药丸，胶囊剂，锭剂等也可含有一种或多种下列助剂：粘结剂如聚乙烯基吡咯烷酮，羟基丙基纤维素，微晶纤维素，或明胶；赋形剂或稀释剂如：淀粉，乳糖，微晶纤维素或磷酸二钙，崩解剂如：交联羧甲基纤维素，聚乙烯基吡咯烷酮，淀粉羟基乙酸钠，玉米淀粉等等；润滑剂如：硬脂酸镁，硬脂酸，滑石或氢化植物油；助流剂如胶体二氧化硅；润湿剂如：十二烷基硫酸钠和聚山梨酸酯80；和甜味剂如：蔗糖，阿斯巴特或糖精可以添加或调味剂如：薄荷，水杨酸甲酯或桔子香料。当剂量单元形式是胶囊剂时，除了上述类型的物质之外它还可含有液体载体如聚乙二醇或脂肪油。其它剂量单元形式可含有改变剂量单元的外形的其它各种材料，例如作为涂料。因此，片剂或药丸可以涂有糖，羟丙基甲基纤维素，聚甲基丙烯酸酯，或其它涂层剂。糖浆剂可含有，除本发明化合物之外，蔗糖作为甜味剂和某些防腐剂，染料和着色剂和香味剂。用于制备这些各种组合物的物质应该具有药物学纯度并且在所使用的用量下是无毒的。

通式I的化合物一般在宽的剂量范围内是有效的。例如，每天的剂量通常是在约0.01到约10mg/kg体重的范围内。在一些情况下低于上述范围的下限的剂量水平可能也是足够的，而在其它情况下可以使用仍然更大的剂量而不引起任何有害副作用，因此以上剂量范围无论如何不希望限制本发明的范围。将会理解，实际上给药的化合物的量将由医生根据有关的情形来确定，其中包括所要治疗的症状，所选择的给药途径，给药的实际化合物，各患者的年龄、体重和响应程度，以及患者症状的严重程度。

例如，一种形式可包括通式1化合物和2.223μL的1N NaOH/每mg化合物，其中含有1％羟乙基纤维素(HEC)/0.25％吐温80/0.05％防沫剂1510-US载体，根据下列计算式：所添加载体的mL＝(化合物的mg/理论mg/mL)-(化合物的mg/1200mg/mL估算的化合物密度)-所添加1NNaOH的mL。另一个配制剂可包括在净化水中的5％维生素E-TPGS，1％羟乙基纤维素，和0.05％Dow Corning防沫剂。

本发明的化合物的生物利用率可通过现有技术中技术人员已知的方法来测量。例如，通式I的化合物是以在常规配制剂中1mg/kg(IV)或10mg/kg(经口填喂法)的剂量施用于Sprague Dawley大鼠。口服配制剂可包括使用研磨的通式I化合物的悬浮液(0.25％ PS80，1％ HEC，在水中0.05％防沫剂)。获得血浆样品，测量通式I化合物的浓度。按照与以上所述的方法基本上类似的方法来评价实施例57的化合物并测得具有＞100％的口服生物利用率。

Claims

1.以下通式的化合物或它的药物学上可接受的盐：

其中：

Y是N或CR⁶；

Z₁和Z₂独立地是CR³或N，前提条件是Z₁和Z₂不都是N；

R¹是H或C₁-C₄烷基；

R⁴和R⁵独立地是氢或C₁-C₄烷基；

R⁶是氢或羟基。

2.具有以下通式的权利要求1的化合物或它的药物学上可接受的盐：

其中：

Y是N或CR⁶；

Z₁和Z₂独立地是CR³或N，前提条件是Z₁和Z₂不都是N；

R¹是H或C₁-C₄烷基；

R³是氢，卤素，或C₃-C₆环烷基；

R⁴和R⁵独立地是氢或C₁-C₄烷基；

R⁶是氢或羟基。

3.权利要求1或2的化合物，其中Y是CR⁶，或该化合物的药物学上可接受的盐。

4.权利要求1-3中任何一项的化合物，其中Z₂是N，或该化合物的药物学上可接受的盐。

5.权利要求1的化合物，它是4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-哌啶-1-基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，或它的药物学上可接受的盐。

6.药物配制剂，它包含权利要求1-5中任何一项的化合物和与其相结合的药物学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

7.权利要求1-5中任何一项的化合物，或它的药物学上可接受的盐，用于治疗。

8.权利要求1-5中任何一项的化合物用于制造抑制血管生成的药物的用途。

9.权利要求1-5中任何一项的化合物用于制造治疗结肠腺癌的药物的用途。

10.抑制哺乳动物中血管生成的方法，该方法包括对需要治疗的哺乳动物施用有效量的权利要求1-5中任何一项的化合物。

11.治疗哺乳动物中结肠腺癌的方法，该方法包括对需要治疗的哺乳动物施用有效量的权利要求1-5中任何一项的化合物。