CN101580755B - 从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺 - Google Patents

从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺。是将过40～60目筛的蛹虫草菌丝体粉加入到超临界CO2流体萃取仪中；在压力15-25MPa，温度35-40℃，CO2流量为50-150L/min的条件下，萃取1-3h，在分离釜中分离出蛹虫草挥发油；再用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的酯类或酮类有机夹带剂继续萃取1-3h萃取分离出虫草素；再用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的蒸馏水作为夹带剂，萃取1-3h，采用一级分离方式分离出含虫草酸和虫草多糖的水溶液。本发明降低了有机溶剂的使用，提高了生产效率，降低了生产成本。所得到的蛹虫草挥发油的提取得率为6.5％左右，虫草素的提取率为0.049％左右，虫草素的纯度为45％左右，虫草酸的提取率为2％左右。

Description

从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺
技术领域
本发明涉及一种超临界CO2流体连续萃取蛹虫草中虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺。
背景技术
冬虫夏草是一类药用价值极高的珍稀名贵药材，含有众多活性成分，如虫草酸、虫草多糖、多种核苷类(虫草素、脲苷、腺苷)、挥发油、黄酮、甾醇类化合物、超氧化物歧化酶等。其中虫草多糖、虫草素、虫草酸的含量是评价虫草质量主要指标。其中的虫草素是一种核苷类抗生素，具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌和消炎、提高免疫力、抗白血病等多种生物活性。虫草多糖能调节人体免疫功能，增强抗病能力，具有抗癌活性，对各种疾病引起的白细胞降低有很好的辅助治疗作用，还具有降血糖的功能，同时冬虫夏草多糖能增强单核巨噬细胞功能，提高血清IgG水平，促进淋巴母细胞转化。虫草酸能抑制各种病菌的成长，可预防与治疗脑血栓、脑出血、心肌梗塞等疾病。但是从冬虫夏草中提取以上组份价格极贵。蛹虫草是冬虫夏草的重要人工替代品之一，其功能成分、药理药效作用与天然冬虫夏草基本一致，200710122409.0公开了一种从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法，是将蛹虫草粉末以冷渗法提取过滤，滤渣与乙醇混合，超声波辅助提取、离心，上清液浓缩、醇析。醇析上清液减压浓缩、洗脱，洗脱液浓缩结晶，用正丁醇重结晶，得到虫草素；醇析沉淀进行酶解脱蛋白处理、离心，上清液浓缩、洗脱，流出液浓缩、醇析，冷冻干燥后得到精制多糖。这种方法提取虫草素和虫草多糖，提取率低，工艺复杂，只能提取出虫草素和虫草多糖；而不能连续提取出虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖，且其有机溶剂的使用量较高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可减少有机溶剂的用量，减少分离步骤，提高提取率、降低成本、能从蛹虫草中连续提取虫草精油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的综合工艺。
本发明包括以下步骤：
(1)将过40～60目筛的蛹虫草菌丝体粉加入到超临界CO2流体萃取仪中；在压力15-25Mpa，温度35-40℃，CO2流量为50-150L/min的条件下，萃取1-3h，在分离釜中分离出蛹虫草挥发油；
(2)用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的酯类或酮类有机夹带剂，在压力为22-30Mpa，温度为35-40℃、CO2流量为50-150L/min的条件下，继续萃取1-3h，从分离釜中分离出含虫草素的有机夹带剂，在55-65℃将该溶液进行减压蒸馏回收有机夹带剂，烧瓶中剩余物为虫草素产品，冷冻干燥得虫草素；
(3)在原超临界CO2流体萃取仪中，用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的蒸馏水作为夹带剂，在压力为25-30Mpa，温度为40-50℃的条件下，萃取1-3h，采用一级分离方式分离出含虫草酸和虫草多糖的水溶液，往该溶液中加入北虫草多糖溶液4倍体积的95％的乙醇，产生絮状沉淀，低温放置3-5h，沉淀完全后，在转速为3000-4000转/min条件下离心10-20min，得虫草多糖沉淀，经冷冻干燥，得虫草多糖产品；将离心上清液60℃旋转减压浓缩回收乙醇，浓缩液为虫草酸浸膏，经冷冻干燥，得含虫草酸的产品。
所述酯类夹带剂是乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯。
所述酮类夹带剂是丙酮、甲乙酮。
本发明能在保护活性成分生物活性的前提下，快速、高效地将蛹虫草中的虫草素、虫草酸、虫草多糖提取出来，简化了分离纯化的步骤，降低了有机溶剂的使用，提高了生产效率，降低了生产成本。所得到的蛹虫草挥发油的提取得率为6.5％左右，虫草素的提取率为0.049％左右，虫草素的纯度为45％左右，虫草酸的提取率为2％左右，虫草酸的纯度为25％左右，虫草多糖的提取率为6.8％左右，虫草多糖纯度为45％左右。
具体实施方式
实施例1：
(1)取液体发酵的蛹虫草菌丝体，在真空箱中60℃干燥12h，于植物粉碎机中粉碎，过40目筛，得蛹虫草菌丝体粉，准确称取1kg蛹虫草菌丝体粉，加入到萃取釜容积为3升的超临界CO2流体萃取仪的萃取釜中，设置萃取压力20Mpa左右，萃取温度37℃，CO2流量为80L/h，萃取时间2h。从分离釜中得亮黄色透明的蛹虫草挥发油。
(2)保持萃取釜中的蛹虫草菌粉不变，改变萃取条件为：萃取压力25Mpa左右，萃取温度40℃，夹带剂为2升乙酸乙酯，CO2流量为50L/h，萃取时间2h。从分离釜中得含虫草素的乙酸乙酯溶液。在60℃下将该溶液进行减压蒸馏回收乙酸乙酯，烧瓶中剩余物为虫草素产品，冷冻干燥，产品质量约为1g，虫草素含量为42％左右。
(3)保持萃取釜中的蛹虫草菌粉不变，改变萃取压力为25Mpa，萃取温度为45℃，改用2升蒸馏水作为夹带剂，萃取2h，采用一级分离方式分离，得到含虫草酸和虫草多糖水溶液，往该溶液中加入4倍虫草多糖水溶液体积的95％的乙醇，产生絮状沉淀，低温放置5h，沉淀完全后，4000转/min转速离心10min，得沉淀，沉淀冷冻干燥，得虫草多糖产品，产品质量约为150g，虫草多糖纯度约为45％。将离心上清液60℃旋转减压浓缩回收乙醇，浓缩液为浸膏，冷冻干燥，得产品约为80g，该产品含虫草酸，虫草酸含量约为25％。
实施例2：
(1)取人工固体栽培的蛹虫草子实体，在真空箱中60℃干燥12h，于植物粉碎机中粉碎，过40目筛，得蛹虫草子实体菌粉，准确称取1kg蛹虫草子实体菌粉，加入到3L的超临界CO2流体萃取仪的萃取釜中，设置萃取压力20Mpa左右，萃取温度40℃，CO2流量为120L/h，萃取时间2h。从分离釜中得亮黄色透明的蛹虫草挥发油。
(2)保持萃取釜中的蛹虫草菌粉不变，改变萃取条件为：萃取压力25Mpa左右，萃取温度40℃，夹带剂为2升乙酸乙酯，CO2流量为50L/h，萃取时间2h。从分离釜中得含虫草酸的乙酸乙酯溶液。在60℃下将该溶液进行减压蒸馏回收乙酸乙酯，烧瓶中剩余物为虫草酸产品，冷冻干燥，产品质量约为1.1g，虫草素纯度约为45％。
(3)保持萃取釜中的蛹虫草子实体菌粉不变，改变萃取压力为30Mpa，萃取温度为45℃，改用2升蒸馏水作为夹带剂，萃取2h，采用一级分离方式分离，得到含虫草酸和虫草多糖水溶液，往该溶液中加入虫草多糖水溶液4倍体积的95％的乙醇，产生絮状沉淀，低温放置4h，沉淀完全后，4000转/min转速离心10min，得沉淀，沉淀冷冻干燥，得虫草多糖产品，产品质量约为140g，虫草多糖纯度约为50％。将离心上清液60℃旋转减压浓缩回收乙醇，浓缩液为浸膏，冷冻干燥，得产品约为70g，该产品含虫草酸，虫草酸含量约为30％。

Claims (3)

1.一种从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将过40～60目筛的蛹虫草菌丝体粉加入到超临界CO2流体萃取仪中；在压力15-25Mpa，温度35-40℃，CO2流量为50-150L/min的条件下，萃取1-3h，在分离釜中分离出虫草挥发油；
(2)用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的酯类或酮类有机夹带剂，在压力为22-30Mpa，温度为35-40℃、CO2流量为50-150L/min的条件下，继续萃取1-3h，从分离釜中分离出含虫草素的有机夹带剂，在55-65℃将该溶液进行减压蒸馏回收有机夹带剂，烧瓶中剩余物为虫草素产品，冷冻干燥得虫草素；
(3)在原超临界CO2流体萃取仪中，用蛹虫草菌丝体粉质量1-3倍的蒸馏水作为夹带剂，在压力为25-30Mpa，温度为40-50℃的条件下，萃取1-3h，采用一级分离方式分离出含虫草酸和虫草多糖的水溶液，往该溶液中加入虫草多糖溶液4倍体积的95％的乙醇，产生絮状沉淀，低温放置3-5h，沉淀完全后，在转速为3000-4000转/min条件下离心10-20min，得虫草多糖沉淀，经冷冻干燥，得虫草多糖产品；将离心上清液60℃旋转减压浓缩回收乙醇，浓缩液为虫草酸浸膏，经冷冻干燥，得含虫草酸的产品。
2.根据权利要求1所述的从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺，其特征在于，所述酯类夹带剂是乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸丁酯。
3.根据权利要求1所述的从蛹虫草中连续提取虫草挥发油、虫草素、虫草酸与虫草多糖的工艺，其特征在于，所述酮类夹带剂是丙酮、甲乙酮。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN102719315B (zh) * 2012-07-11 2013-12-25 青岛农业大学 利用超临界萃取方法由姜苗中提取姜苗精油及其提取方法
CN103446189A (zh) * 2013-07-03 2013-12-18 广州市浩立生物科技有限公司 一种冬虫夏草菌粉药酒及其制备方法
CN103766545A (zh) * 2014-01-02 2014-05-07 隋新 一种富含蛹虫草提取物蛹虫草茶的制备方法
CN103936806B (zh) * 2014-05-13 2015-10-21 邓华 从蛹虫草中提取虫草素的工艺方法
CN104403012A (zh) * 2014-11-10 2015-03-11 苏州蔻美新材料有限公司 蛹虫草多糖和多肽的提取工艺
CN105076925B (zh) * 2015-09-06 2019-09-10 青海之也科技咨询服务有限公司 一种冬虫夏草保健果冻及其制备方法
CN105294395A (zh) * 2015-09-23 2016-02-03 安徽阳光药业有限公司 一种同步提取-组合柱层析-结晶纯化制备虫草酸、虫草素的方法
CN107099378A (zh) * 2016-02-20 2017-08-29 王弘 一种蛹虫草芳香油及其制备方法
CN107114490A (zh) * 2016-02-24 2017-09-01 王弘 一种蛹虫草植物油及其制备方法
CN108276501B (zh) * 2017-12-22 2020-11-17 中山大学 一种富硒蝉虫草多糖的制备方法和应用
CN108611182A (zh) * 2018-06-29 2018-10-02 成都纺织高等专科学校 一种超临界co2萃取枸杞籽油的方法及系统
CN109157545B (zh) * 2018-10-09 2021-10-01 海门茂发美术图案设计有限公司 一种从紫草茸中提取紫草茸酸和紫草茸醇酸的方法
CN109463729A (zh) * 2018-12-26 2019-03-15 中国科学院西北高原生物研究所 蛹虫草提取物的制备方法、功能性食品
CN109553647A (zh) * 2018-12-26 2019-04-02 中国科学院西北高原生物研究所 代谢产物的提取方法、添加剂
CN111040044B (zh) * 2019-12-31 2022-03-25 华南师范大学 一种蛹虫草胞内多糖及制备方法及其在调节肠道菌群中的应用
CN113736669B (zh) * 2021-09-24 2023-04-28 滁州学院 一种虫草真菌新种及其分离鉴定方法
CN114042092A (zh) * 2021-10-20 2022-02-15 中恩（天津）医药科技有限公司 虫草素混合物及其有效分离方法和应用

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