CN101579402A - 一种夏天无眼用即型凝胶 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种夏天无眼用即型凝胶制剂，属中药领域。该制剂的有效成分来自于中药夏天无，其凝胶基料中主要含有结冷胶，占成品重量的0.4％至0.7％。该技术方案克服了目前夏天无眼用制剂的生物利用度低、使用不方便和滞留时间短等缺陷，取得了减小用药量、延长眼内滞留时间、使用方便、用量准确等效果。

Description

一种夏天无眼用即型凝胶

技术领域

本发明涉及一种夏天无眼用即型凝胶制剂，尤其是一种以结冷胶为主要凝胶基料的眼用即型凝胶制剂，属于中药领域。

背景技术

夏天无为罂粟科紫堇属植物伏生紫堇的块茎，广泛分布于华东、河南、湖北及湖南等省，具有活血、通络、止痛等功效，其在眼部制剂中的应用较多。夏天无中主要含有生物碱类成分，如原阿片碱、延胡索乙素、比枯枯灵、巴马汀、球紫堇碱、药根碱、罂粟碱等，这些成分可以经多次水煎煮、乙醇提取等方法提取分离出来，临床运用证明运用常规提取工艺提取出来的夏天无总生物碱成分对青少年功能性、调节性近视有较好的疗效。

现在市场上主要的眼用制剂为夏天无眼药水，其标准已被国家部颁标准所收载。夏天无眼药水具有舒筋通络、活血祛瘀之功效，主要用于防治青少年近视眼。夏天无眼药水作为一种传统的剂型具有使用方便、顺应性好、价格低廉等优点，但其药物在眼内滞留时间短、生物利用度低的缺点使其疗效受到很大影响。研究表明：一滴滴眼液的体积基本在25～50ul之间，如果不眨眼，眼内药液体积仅仅在30ul，如果眨眼则降低到10ul，所以眼部外用的药物大部分不是进入眼组织，而是经过鼻泪管系统和眼睑缝隙流失掉。根据眼泪动力学，眼用溶液剂在眼表面的滞留时间很短，被吸收的药物量通常仅是给药量的一小部分，即使是在眼球表面的药物，因为眨眼和眼泪的稀释，药物的有效浓度降低，药物的作用时间减少，故溶液剂必须重复给药，才能保证有效的药物浓度，增加药物的作用时间，达到较高的药物吸收度，这就需要经常滴眼药水，但频繁给药极易造成眼组织的持久损伤，使用不方便，患者也难以坚持。

随着新型药物辅料的不断发展，一种新的眼用即型凝胶制剂开始受到关注。即型凝胶是一种高分子溶液剂，它的形成机制是利用高分子材料对外界刺激(体内外不同的生理环境如pH、温度、离子等)的响应，使高分子聚合物在生理条件下发生分散状态或构象的可逆变化，完成由溶液向凝胶的转化过程。此类剂型有一定新颖性：在贮存期呈液态，滴入眼内后呈半固体状态，不仅可解决普通滴眼剂眼内滞留时间短、生物利用度不高的问题，也克服了普通眼用凝胶高黏度缺乏良好的铺展性，剂量不易控制的问题，其独特的溶液-凝胶转变性质使其兼有制备简单、使用方便、与用药部位尤其是粘膜组织亲和力强、滞留时间长等优点。

本发明所要解决的技术问题就是提供一种以夏天无为有效成分的眼用即型凝胶。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药夏天无眼用即型凝胶制剂，主要是以结冷胶为凝胶基料的眼用即型凝胶，以便提高产品的使用效果，方便临床使用，更好的满足医疗需要。本发明中所述凝胶基料，是指凝胶的前体物质，在与水等溶剂混合并达到一定的胶凝条件时，才会变成凝胶。

结合已有的研究结果，本发明目的是通过如下技术方案实现的：

将夏天无提取物与以结冷胶为主要成分的即型凝胶基料相结合，再辅以眼用制剂的常规辅料，按照眼用凝胶的制备方法制成夏天无眼用即型凝胶。

具体地说：

凝胶剂是由药物和适宜的辅料制备成的，其中药物为夏天无的提取物，以制成100份重量的成品计，所用夏天无药材的量为5～50份，并按现有任一种制备方法制备成提取物。在眼用凝胶剂的制备过程中，为了保证制剂的成型，除了眼用制剂的常规辅料外，关键性的工作在于选择适宜的凝胶基料，本发明中采用了一种新型的相转变基料-结冷胶。以制成100份重量的成品计，凝胶基料中使用结冷胶的量为0.4～0.7份；进一步优选，结冷胶的用量为0.6份。

结冷胶(gellan gum)是一种微生物胞外多糖，是通过发酵生成的水溶性聚合物，正常状态下是液态。结冷胶一旦接触生理浓度的阳离子(Na⁺，K⁺，Ca²⁺)，结构中的葡糖醛酸被中和，即发生阳离子介导的凝聚，产生溶液-凝胶相变。并且，在阳离子存在时，在pH4.0～8.0时结冷胶形成的凝胶的强度几乎不随pH变化。发明人考虑到人的泪液中就含有生理浓度的阳离子(Na⁺，K⁺，Ca²⁺)，便利用了结冷胶的这一特性，将其应用于眼用制剂中，扩展了结冷胶的应用领域，进一步提升了其药用价值。

在眼用即型凝胶的制备过程中，发明人又试验了以结冷胶和其他基料如卡波姆、羟丙基甲基纤维素、泊洛沙姆、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、甲基纤维素、海藻酸钠中的一种或多种进行组合应用。故任何以结冷胶和上述基料进行组合应用来制备眼用即型凝胶的行为也都属于本发明的保护范围。

为了保证凝胶剂的成型和质量稳定，还需要加入一定量眼用制剂常规辅料，即pH调节剂、等渗调节剂、抑菌剂及水。发明人所用的等渗调节剂包含葡萄糖、硼酸、硼砂、甘油、丙二醇、甘露醇中的至少一种，pH调节剂包含盐酸、枸橼酸、枸橼酸钠、冰醋酸、三乙醇胺、硼酸、硼砂中的至少一种，抑菌剂包含苯甲醇、三氯叔丁醇、苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯氧乙醇、尼泊金甲、乙、丙酯中的至少一种。

经过进一步试验，发明人优选硼酸、硼酸的混合物，既可以做为等渗调节剂，又能发挥pH调节剂的作用；抑菌剂而优选为尼泊金乙酯或苯扎溴铵。

经过优选后本发明的等渗调节剂和pH调节剂为硼酸和硼砂的组合，其加入量和比例以调节制剂的pH值达到5～8、渗透压达到等渗或接近等渗为准；抑菌剂为尼泊金乙酯或苯扎溴铵，加入量足以达到抑菌目的为准。

发明人在试验研究中发现，在制备夏天无眼用即型凝胶时，以制成100份成品计，其原料中还可以加入0～1份的聚山梨酯80或0～1份的羟丙基倍他环糊精或0～1份的透明质酸钠来改善制剂的状态。加入聚山梨酯80或透明质酸钠后，制剂的辅料用量降低，黏度也降低，完善了制剂的制备工艺，加入羟丙基倍他环糊精后，药物的许多难溶性成分的溶解度提高，从而提高了制剂的生物利用度。

本发明中的夏天无药材经过常规的提取方法就能提取得到其有效成分，如水提取、乙醇提取、超临界提取等，再经过浓缩、精制后得到夏天无提取物。发明人经过多次试验，确定了夏天无眼用即型凝胶的制备方法为：将夏天无药材提取有效成分，浓缩、精制得夏天无提取物，备用；将注射用水中加入凝胶基料，混匀，再加入等渗调节剂、pH调节剂、抑菌剂等辅料，混匀，加入夏天无提取物，滤过，加注射用水至总量，滤过，无菌分装，即得。

本发明中的药物具有舒筋通络、活血祛瘀之功效，主要用于治疗青少年近视眼、各种结膜炎、角膜炎及缓解视疲劳等。

有益效果

由于泪液中含有Na⁺、K⁺和Ca²⁺等阳离子，结冷胶可以和这些离子作用形成凝胶，从而抑制药物从角膜前区域消除。结冷胶具有凝胶形成能力强、透明度高、耐酸耐热性能好等特点，以其为主要成分的凝胶基料，在制备时为液态，流动性好，给制备带来方便，而滴入眼内又变为凝胶态，也具备了凝胶剂的所有优点。从而解决了现在眼用制剂的缺陷。

为说明本发明的应用效果，体现眼用即型凝胶的眼滞留能力，发明人进行了如下试验：

实验一：夏天无眼用即型凝胶体外释放度考察

试验目的：考察夏天无眼用即型凝胶的体外释药特性，并与夏天无眼药水进行比较。

试验材料：夏天无眼用即型凝胶：取夏天无药材100g，粉碎成粗颗粒，以乙醇回流提取三次，每次1.5小时，合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，滤过，备用；取注射用水600ml，加入结冷胶6g，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入硼酸12g、硼砂0.6g、尼泊金乙酯0.8g，搅拌至澄清，加热至70℃，滤过，搅拌下加入上述夏天无提取液，过微孔滤膜，加注射用水至1000ml，120℃高压灭菌20分钟，放冷，无菌分装，即得。

夏天无眼药水(江西天狮中药集团余江制药厂生产，与夏天无眼用即型凝胶所含的药量相同)

岛津LC-2010A高效液相色谱仪

岛津CLASS-VP工作站

等渗磷酸盐缓冲液(1000ml溶液中含NaH₂PO₄ 1.60g，Na₂HPO₄ 7.58g，NaCl 4.32g，调pH至7.40)

试验方法：称取夏天无眼用即型凝胶和夏天无眼药水各5g，分别置于透析袋中，袋两头用尼龙线扎紧(袋内除去气泡)，固定于250ml烧杯中，释放介质为等渗磷酸盐缓冲液100ml，袋上沿距离液面1cm，烧杯置于电磁搅拌器上，搅拌子长约2.5cm，温度控制(34±1)℃，每隔一定时间取样5ml，同时补加同体积新鲜的磷酸盐缓冲液。

分别测定所取各样品的含量，以峰面积表示。按以下公式计算累加扩散释药量：

C_i＝f(A_i)，Qn＝100Cn+5∑C_i(Q1＝100C₁ i，n＝1，2，3...)

(C_i为药物浓度，A为测得峰面积，Q为药物累积释放量，i，n分别为取样次数。)

试验结果：夏天无眼用即型凝胶及夏天无眼药水体外释放曲线见附图。

将上述累积释放曲线进行释放方程拟合，结果其具有一级释放规律，回归方程具有良好的相关性。一级释药拟合方程为：Log(Y_∝-Y)＝-Kr×t/2.303+M。本发明夏天无眼用凝胶的释放方程为：Log(Y_∝-Y)＝-0.1778t+1.8269，相关系数为0.9958。

结果表明，夏天无眼药水的体外释药速度较快，1h释药达到80％左右，之后进入平台期；而夏天无眼用即型凝胶在3h释药达到80％左右，释药速度平缓，具有较好的缓释特性。

试验结论：夏天无眼用即型凝胶具有较好的缓释特性。通过本发明提高药物在眼部的生物利用度具有可行性。

试验二：夏天无眼用即型凝胶动物药效学试验考察。

试验目的：对家兔细菌性角膜炎的药效学试验研究

试验材料：夏天无眼用即型凝胶(同试验一)

夏天无眼药水(同试验一)

试验动物与材料：新西兰兔，雌雄兼用，2.2～2.8kg，共50只(均由山东大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(鲁)20030004)；

绿脓杆菌(ACTT27853)，浓度1×10⁶CFU·ml^-1；

金黄色葡萄球菌(ACTT25923)，浓度2.5×10⁹CFU·ml^-1；

大肠杆菌(ACTT25922)，浓度1.8×10⁹CFU·ml^-1；均由山东中医药大学附属医院检验科细菌室临床分离而得。

试验方法：

1、细菌性角膜炎模型建立：用兔座夹固定家兔，以0.5％丁卡因2～3滴滴眼，待其失去知觉后用1ml注射器抽取0.1ml含菌培养液(含绿脓杆菌1×10⁶CFU，金黄色葡萄球菌2.5×10⁹CFU或大肠杆菌1.8×10⁹CFU)自眼角膜近中央部位注人角膜实质层内，使造成直径约2～3min的白色菌斑，分别放入单笼饲养治疗。

2、动物分组治疗与给药方法：模型家兔50只，分为夏天无眼用即型凝胶高、中、低剂量组(高剂量给药6次/d，1～2滴/次；中剂量给药4次/d，1～2滴/次；低剂量给药2次/d，1～2滴/次)，夏天无眼药水组(8次/d，1～2滴/次)和空白对照组(给注射用水8次/d，1～2滴/次)。以造模后12h开始用药，为期5d，每天进行相关观测工作。

3、观察指标：角膜炎病变治愈程度(肉眼观察)于角膜接种细菌6h后开始，每天观察记录一般情况和积脓、红肿、角膜浑浊、溃疡等角膜炎症表现，并予以分级评分：

0分(正常)：无积脓、无红肿、无角膜浑浊、无溃疡；

1分(轻度)：眼球角膜、无积脓、有红肿、无角膜浑浊、无溃疡；

2分(中度)：眼角膜有积脓、有红肿、无角膜浑浊、轻度溃疡；

3分(重度)：眼角膜积脓红肿、角膜浑浊、溃疡。

于接种治疗后第6天处死动物，取一侧10只眼角膜作切片HE染色于显微镜观察角膜厚度、溃疡、炎细胞浸润、成纤维细胞增生等炎症表现评分。另一侧10只眼角膜作24h细菌培养分离检测、金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌和大肠杆菌计数对比统计。并与下述病原体转阴率检测数据一起统计处理。

试验结果：家兔用绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌接种后分组照上述治疗后第5天借助眼科反光镜肉眼观察角膜炎症评分及治疗后第6天处死家兔，取一侧10眼角膜切片HE染色显微镜观察角膜炎症评分，两组20眼综合统计见表1。计算公式如下。

治愈率(％)＝(空白炎症分值-各组炎症分值)/空白炎症分值×100％

表1  夏天无眼用即型凝胶治疗兔眼角膜炎试验结果表

结果表明，对家兔三种致病菌混合感染的疗效，夏天无眼用即型凝胶的三个剂量组的治愈率较高，均好于夏天无眼药水。提示夏天无眼用即型凝胶与夏天无眼药水相比具有更好的治疗效果。

附图说明

附图：夏天无眼用即型凝胶及夏天无眼药水体外释放曲线。

具体实施方式

以下通过具体的实施例进一步说明本发明，但以下实施例仅用于说明本发明而对本发明没有限制。

实施例一：

处方：夏天无200g    结冷胶12g

制法：取夏天无药材，粉碎成粗颗粒，以乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，滤过，备用；取注射用水1200ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入硼酸24g、硼砂1.2g、尼泊金乙酯1.2g，搅拌至澄清，加热至70℃，滤过，搅拌下加入上述夏天无提取液，过微孔滤膜，加注射用水至2000ml，120℃高压灭菌20分钟，放冷，无菌分装，即得。

实施例二：

处方：夏天无1500g    结冷胶25g    透明质酸钠5g

制法：取夏天无药材，粉碎成粗颗粒，以90％乙醇回流提取两次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，滤过，备用；取注射用水3000ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入三乙醇胺及甘露醇，再加入苯扎氯铵2g，搅拌至澄清，加热至70℃，过微孔滤膜，搅拌下加入上述夏天无提取液，滤过，加注射用水至5kg，加入透明质酸钠，充分润胀，过微孔滤膜，无菌分装，即得。

实施例三：

处方：夏天无1000g    结冷胶14g

制法：取夏天无药材，粉碎成粗颗粒，以90％乙醇浸渍12h，再进行渗漉提取，收集4倍量渗漉液，减压回收乙醇至无醇味，滤过，备用；取注射用水1000ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入枸橼酸及甘油，再加入尼泊金甲酯0.6g和尼泊金丙酯0.6g，搅拌至澄清，加热至70℃，滤过，搅拌下加入上述夏天无提取液，加热至70℃，滤过，加注射用水至2000g，120℃高压灭菌20分钟，放冷，无菌分装，即得。

实施例四：

处方：夏天无100g    结冷胶8g    羟丙基倍他环糊精20g

制法：取夏天无药材，粉碎成粗颗粒，加10倍量水煎煮两次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至适量，加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，备用；取注射用水1200ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入硼酸、硼砂，加入尼泊金乙酯1.2g及羟丙基倍他环糊精10g，搅拌至澄清，加热至70℃，滤过，搅拌下加入上述夏天无提取液，加热至70℃，滤过，加注射用水至2000g，过微孔滤膜，无菌分装，即得。

实施例五：

处方：夏天无500g    结冷胶11g  羟丙基甲基纤维素3g

制法：取夏天无药材，粉成粗粉，加氨水拌至弱碱性，置3L超临界CO₂萃取器中，萃取1h，按药材重量30％加入乙醇做夹带剂，收集萃取液，滤过，备用；取注射用水1200ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入羟丙基甲基纤维素，充分溶解，加入三乙醇胺及丙二醇，再加入苯扎溴铵0.6g，搅匀，搅拌下加入上述夏天无萃取液，过微孔滤膜，加注射用水至2000g，120℃高压灭菌20分钟，放冷，无菌分装，即得。

实施例六：

处方：夏天无800g    结冷胶30g

制法：取夏天无药材，粉成粗粉，加氨水拌至弱碱性，置3L超临界CO₂萃取器中，萃取1h，加入250ml乙醇做夹带剂，收集萃取液，滤过，备用；取注射用水4000ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入羟丙基倍他环糊精50g，搅拌均匀，加入三乙醇胺及甘油，加入尼泊金乙酯4g，搅匀，搅拌下加入上述夏天无提取液，过微孔滤膜，加注射用水至5kg，过微孔滤膜，无菌分装，即得。

实施例七：

处方：夏天无200g  结冷胶12g

制法：取夏天无药材，粉成粗粉，以8倍量5％的盐酸提取两次，每次1小时，滤过，合并滤液，加氢氧化钠调pH7，减压浓缩、干燥，以无水乙醇抽提2次，每次1.5小时，合并无水乙醇液，减压回收乙醇至无醇味，加适量水，滤过，备用；取注射用水1200ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入硼酸、硼砂，加入尼泊金乙酯1g及聚山梨酯803g，搅匀，搅拌下加入上述夏天无提取液，过微孔滤膜，加注射用水至2000g，120℃高压灭菌20分钟，放冷，无菌分装，即得。

实施例八：

处方：夏天无400g  结冷胶24g  透明质酸钠4g

制法：取夏天无药材，粉碎成粗颗粒，以90％乙醇浸渍12h，再进行渗漉提取，收集4倍量渗漉液，减压回收乙醇至无醇味，继续浓缩至适量，滤过，备用；取注射用水2000ml，加入结冷胶，搅拌均匀，置沸水浴中，搅拌至澄清，加入三乙醇胺及甘油，加入尼泊金甲酯1.2g和尼泊金丙酯1.2g及聚山梨酯806g，搅匀，搅拌下加入上述夏天无提取液，滤过，加注射用水至4000g，无菌加入透明质酸钠，充分润胀，微孔滤膜滤过，无菌分装，即得。

Claims (10)

1、一种夏天无眼用即型凝胶，是由夏天无提取物、凝胶基料和眼用制剂常规辅料制成，其特征在于凝胶基料的主要成分为结冷胶。

2、根据权利要求1所述的眼用即型凝胶，其特征在于以制成100份重量的成品计，使用结冷胶0.4～0.7份。

3、根据权利要求2所述的眼用即型凝胶，其特征在于以制成100份重量的成品计，使用结冷胶0.6份。

4、根据权利要求1至3中任一所述的眼用即型凝胶，其特征在于凝胶基料中还可以含有卡波姆、羟丙基甲基纤维素、泊洛沙姆、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、甲基纤维索、海藻酸钠中的一种或多种。

5、根据权利要求4所述的眼用即型凝胶，其特征在于以制成100份重量的成品计，原料中还含有0～1份的聚山梨酯80或0～1份的羟丙基倍他环糊精或0～1份的透明质酸钠。

6、根据权利要求5所述的眼用即型凝胶，其特征在于所用的眼用制剂常规辅料含有等渗调节剂、pH调节剂、抑菌剂及水。

7、根据权利要求6所述的眼用即型凝胶，其特征在于等渗调节剂为葡萄糖、硼酸、硼砂、甘油、丙二醇、甘露醇中的至少一种，pH调节剂为盐酸、枸橼酸、冰醋酸、三乙醇胺、硼酸、硼砂中的至少一种，抑菌剂为苯甲醇、三氯叔丁醇、苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯氧乙醇、尼泊金甲、乙、丙酯中的至少一种。

8、根据权利要求7所述的眼用即型凝胶，其特征在于pH调节剂的加入量至制剂的pH值为5～8时即可，等渗调节剂的加入量至制剂的渗透压为等渗或接近等渗即可，抑菌剂的加入量则需达到抑菌标准。

9、制备权利要求1至8中任一所述眼用即型凝胶的方法，其特征在于：将夏天无药材提取有效成分，浓缩、精制后备用；将注射用水中加入凝胶基料，混匀，再加入其他辅料，混匀，加入夏天无提取物，滤过，加注射用水至总量，滤过，无菌分装，即得。

10、结冷胶在制备夏天无眼用即型凝胶中的应用。

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