CN100525797C - 一种阴道外用药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种阴道外用药物组合物，它是含有下述原料制备而成的制剂：苦豆草、岗松、黄柏、苦地丁、蛇床子、冰片、甘草。本发明还提供了该药物组合物的制备方法及在制备阴道局部用药的抗菌、消炎、抗滴虫、止痒的药物中的用途；通过实验说明，本发明药物疗效确切、治疗范围明确，携带方便，药味清香，且提供了质量控制标准，使本发明药物安全、有效，稳定，可控。

Description

一种阴道外用药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种以中药为原料制成的药物组合物，具体地说，是涉及一种治疗妇科阴道炎症的外用药物组合物，属中药领域。

背景技术

据《中国妇幼保健》等多种文献报道，经调查结果显示：女性阴部瘙痒、白带增多、下体异味等各类妇科炎症及疾病等在成年女性中的发病率高达69％以上；WHO世界卫生组织公布，据统计妇科病发病率为40％，已婚妇女几乎是70％。若上述妇科炎症处理不及时，会严重影响生活质量和家庭幸福，以及学习、工作，造成家庭经济负担；甚则引发便秘、肥胖、不孕症等影响和危害人们身心健康的疾病。

从中医理论角度来讲，妇女外阴及阴道瘙痒，其痒痛难忍，坐卧不安者，称为“阴痒”，亦称“阴门瘙痒”。症见：外阴有阴道内瘙痒，甚则奇痒难忍，坐卧不安，带下量多，色白或有秽气，阴道分泌物增多，黄稠而臭，伴口苦、咽干，舌苔黄腻，脉弦数。病因多由脾虚肝郁、湿热下注，或阴血亏耗，生风化燥，或感染虫，虫扰阴部，发为服痒，并引起各种阴道炎症。若湿热较重者，可波及后阴以及大腿内侧。治疗方面，如因湿热引起的，当清利湿热为主。湿热下注阴痒治宜清泄肝胆湿热。临床上常有内服和外洗两种制法，一般外洗药常用黄柏、槟榔、土茯苓、蛇床子、生明矾、花椒、生甘草等，煎水熏洗阴部。或用1％龙胆紫水溶液涂擦阴道及外阴，每周3～4次，连用2周。但上述常用外用药物，使用周期长、疗效不明显、使用携带不方便、气味难闻等缺陷。

发明内容

本发明所要解决的技术方案是提供一种新的阴道外用的药物组合物，本发明的另一技术方案是提供了该阴道外用的药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供一种阴道外用药物组合物，它是含有下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松20～160份、苦豆草20～160份、黄柏14～26份、苦地丁4～16份、蛇床子4～16份、甘草4～10份。

其原料还含有：冰片0.04～0.16份。

进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松20～160份、苦豆草20～160份、黄柏14～26份、苦地丁4～16份、蛇床子4～6份、甘草4～10份、冰片0.04～0.16份。

更进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松40～120份、苦豆草40～120份、黄柏16～24份、苦地丁6～14份、蛇床子6～14份、甘草4～10份、冰片0.04～0.16份。

其中，以岗松的挥发油提取物为活性成分I；苦豆草、黄柏的酸提取物为活性成分II；苦地丁、蛇床子、甘草与岗松、苦豆草、黄柏提取后的药渣混合、水提，所得水提物与岗松水溶液混合为活性成分III；将活性成分I、II、III与冰片，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的阴道外用制剂。

其中，所述的制剂为外用洗剂、栓剂、阴道软胶囊、阴道用凝胶剂、阴道用膜剂、阴道用泡腾片、阴道用泡沫剂、阴道用气雾剂、阴道用软膏剂、阴道用锭剂、阴道用丸剂。

所述的外用洗剂的pH值为：4～7；所述的外用洗剂含盐酸小檗碱C₂₀H₁₇NO₄.HCl不得少于0.4mg/ml。

本发明还提供了该药物组合物的制备方法，包括如下步骤：

a、以岗松的挥发油提取物为活性成分I；

b、苦豆草、黄柏的酸提取物为活性成分II；

c、苦地丁、蛇床子、甘草与岗松、苦豆草、黄柏提取后的药渣混合、水提，所得水提物与岗松水溶液混合为活性成分III；

d、将活性成分I、II、III与冰片，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的阴道外用制剂。

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2～3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10～18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏，加入岗松挥发油及芳香水、冰片，使溶解，再加入10g苯甲酸钠，混匀，加入上述溶液，加水至约1000ml，混匀，即得本发明洗剂。

所述的重量配比的各原料在制备阴道局部用药的抗菌、消炎、抗滴虫、止痒的药物中的用途。

本发明药物组合物的功能主治：清热解毒，除湿、杀虫止痒。适用于外阴阴道瘙痒，阴道分泌物增多，黄稠而臭，以及滴虫性、霉菌性引起的阴道炎等。

本发明药物组合物的各原料配比，按中医药理论的指导，具有清热解毒，除湿，杀虫止痒之功效。方中岗松(本品为中国药典一九七七年版一部收载的桃金娘科植物岗松Beackea frutescens L.带有花果的干燥叶。苦、涩、寒。清热利湿，杀虫止痒。用于急性肠胃炎；外治滴虫性阴道炎，皮肤湿疹。)性味苦、涩、寒，清利湿热，杀虫止痒，治疗皮肤湿疹，滴虫性阴道炎等病症，为本方之君药。苦豆草(始于《新疆中草药手册》，为豆科植物苦豆子Sophora alopecuroides L.的地上干燥部分。全株味极苦，性寒。具有清热燥湿、止痛杀虫。民间常用其根治疗喉痛、咳嗽、痢疾及湿疹等。我国药典一九七七年版及部分地方药品标准已将苦豆草及“苦豆草片”加以收载，主治菌痢及肠炎。)性味苦寒，清热燥湿，杀虫止痒，治疗赤白带下，阴肿、阴痒及滴虫性阴道炎。黄柏性味苦寒，清热燥湿，泻火解毒，专清下焦湿热，治疗湿热带下，疮疡肿毒，湿疹湿疮；二者合为方中之臣药。苦地丁味苦，性寒，清热解毒。为治温病高热引起的各种炎症效佳；冰片味辛、苦，性平，用于开窍清神，行气活血，消肿止痛。蛇床子味辛、苦，性温，用于温肾壮阳，燥湿，祛风，杀虫。外治外阴湿疹妇人阴痒，滴虫性阴道炎；合为方中之佐药。甘草味甘、平，有调和诸药、抗炎、抗癌的辅助作用，为方中之使药。本方组方标本兼治，能清热解毒，除湿止痒，为治湿热下注引起的外阴阴道瘙痒，阴道分泌物增多，黄稠而臭等症，以及滴虫性、霉菌性阴道炎见上述病证的良方。

本发明药物疗效确切、治疗范围明确，用药时间短，携带方便，药味清香，且提供了质量控制标准，使本发明药物安全、有效，稳定，可控。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1 本发明药物洗剂的制备方法

岗松400g、苦豆草350g、黄柏100g、苦地丁50g、蛇床子40g、甘草30g、冰片0.5g；

本发明药物的生产方法是：

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏；取岗松挥发油及芳香水加入冰片，使溶解，再加入10g苯甲酸钠，混匀，加入上述溶液，加水至约1000ml，混匀，即得本发明洗剂。

用法与用量：阴道用药。将本品洗液原液配成10～15％液体冲洗外阴、阴道。一日1次。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明洗剂。

实施例2 本发明栓剂的制备

岗松800g、苦豆草700g、黄柏150g、苦地丁100g、蛇床子100g、甘草80g、冰片1g；

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏浓缩成干膏；取甘油明胶基质适量，置水浴上加热至溶化后，加入浓缩药液及冰片、岗松挥发油，搅匀后，迅速倒入已涂有液状石蜡的栓膜中，冷却刮平，即得。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明栓剂。

实施例3 本发明胶囊的制备

岗松800g、苦豆草500g、黄柏200g、苦地丁70g、蛇床子70g、甘草50g、冰片1.5g；

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏浓缩成干膏，干燥，粉碎，制粒，岗松挥发油加入冰片，喷入颗粒中，装入胶囊，即得。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明胶囊剂。

实施例4 本发明气雾剂的制备

苦豆草400g、岗松400g、黄柏160g、苦地丁60g、蛇床子60g、甘草50g、冰片0.5g；

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏，取岗松挥发油加入冰片，使溶解，再加入司盘-8020g，混合均匀，加水至1000ml，滤过，分装，每瓶压入抛射剂F₁₂约6g，即得。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明气雾剂。

实施例5 本发明膜剂的制备

苦豆草1600g、岗松800g、黄柏200g、苦地丁100g、蛇床子50g、甘草50g、冰片1.6g；

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏浓缩成干膏，干燥，粉碎、混匀，备用。取白及胶(或其它成膜材料)加温蒸馏水浸泡，并加热使溶解，再加入干浸膏粉和岗松挥发油和冰片，搅拌均匀，除去气泡，制膜，干燥，分装，即得。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明膜剂。

实施例6 本发明片剂的制备

苦豆草400g、岗松400g、黄柏160g、苦地丁60g、蛇床子60g、甘草50g、冰片1.5g；

以上七味，取岗松药材，用水蒸汽蒸馏2~3小时，收集挥发油及芳香水另器保存。苦豆草、黄柏用10~18倍0.6％v/v盐酸溶液作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉液浓缩成清膏备用；(苦豆草中主要含有生物碱类成分，如苦豆素等，根据生物碱的性质，与酸溶液呈盐的形式存在，易溶于酸水，故选用盐酸作为提取溶剂。黄柏中含有小檗碱、黄柏碱为生物碱类成分，故选用盐酸溶液提取)；苦地丁、蛇床子、甘草与以上三味提取后的药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩后加乙醇使含醇量为60～75％v/v，静置24小时，滤液回收乙醇后加入黄柏、苦豆草清膏浓缩成干膏，干燥，粉碎、混匀，制粒。再将冰片加入岗松挥发油使溶解，喷入颗粒中，压片，即得。

按说明书中不同重量配比的原料药物，可制备不同规格的本发明片剂。

实施例7 本发明药物组合物定性定量控制方法

质量控制定性鉴别方法：

【鉴别】(1)取本品10ml，置分液漏斗中，用氨试液调节pH值至11，加氯仿20ml振摇提取，分取氯仿液，蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液。另取槐定碱对照品和苦参碱对照品，分别加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录IV B)试验，吸取上述供试品溶液3μl、对照品溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯(7:3:3)为展开剂，置氨蒸气饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)取本品10ml，置分液漏斗中，加石油醚(60～90℃)振摇提取两次，每次15ml，合并石油醚液，挥干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取岗松对照药材5g，加水50ml蒸馏提取，收集蒸馏液20ml，取其中10ml，置分液漏斗中，加石油醚(60～90℃)振摇提取两次，每次15ml，合并石油醚液，挥干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛盐酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

(3)取本品10ml，置分液漏斗中，加乙醚20ml振摇提取，分取乙醚液，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛盐酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)取本品10ml，置分液漏斗中，加正丁醇振摇提取两次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，加甲醇5ml，加热回流15分钟，滤过，滤液补充甲醇至5ml，作为对照药材溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7:1:2)为展开剂，置氨蒸汽饱和的层析缸内，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材与对照品色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点。

【检查】pH值应为4.5～6.5(《中国药典》2000版一部附录VII G)。

其他应符合洗剂项下有关的各项规定(《中国药典》2000年版二部附录IS)。

【挥发性物质】精密量取本品200ml，加水100ml与玻璃珠数粒，照挥发油测定法(《中国药典》2000版一部附录X D甲法，自“振摇混合后”起)测定。挥发性物质不得少于0.5％(ml/ml)。

【含量测定】照高效液相色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适用试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶磷酸盐缓冲液(0.7％三乙胺溶液，用磷酸调pH值至3.0)(27:73)为流动相；检测波长为349nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。

供试品溶液的制备 精密量取本品1ml，置于10ml容量瓶中，甲醇稀释至刻度，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液6ul，供试品溶液5ul，注入色谱仪，测定，即得。

本品含盐酸小檗碱(C₂₀H₁₇NO_4·Hcl)不得少于0.4mg/ml。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

实验例1 本发明药物组合物的抑菌作用

1、实验材料

1.1 药物和试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。阳性对照：注射用青霉素G钾(北京制药厂)。盐酸链霉素(上海第四制药厂)。

1.2 菌种：金黄色葡萄球菌₂₆₁₁₃、表皮葡萄球菌₁₂₂₂₈、化脓性链球菌₁₉₆₁₅、淋球菌₂₉₁₀₆、绿脓杆菌₁₀₁₀₂、大肠杆菌₄₄₁₄₁，由华西医科大学微生物室提供。

1.3 培养基：普通灭菌肉汤培养基，由四川省药品检验所提供。

2、方法与结果

2.1 液体稀释法：取灭菌小管若干支，用培养基稀释使其浓度为0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.006及0.003125g/ml，每管加入0.1毫升10^-3稀释的新鲜菌液，于37℃培养18小时后观察有无细菌生长，如果药物药颜色深，不透明，无法判定有无细菌生长，可把上述含药菌移种在平皿培养基上，于37℃培养18小时后观察结果。细菌不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度。

表1 本发明药物组合物洗液抑菌试验结果(液体试管法)

注：-为无细菌生长，+为有细菌生长。

表1可见，本发明药物组合物洗液是无菌的，置37℃培养18小时没有细菌生长。本发明药物组合物洗液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、淋球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌有不同程度的抑制作用。

实验例2 本发明药物组合物抑制真菌作用

1、实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

阳性对照：制霉菌素：每片含50万单位(上海施贵宝制药有限公司生产)。洁尔阴洗液(成都恩威世亨制药有限公司)。

1.2 菌种 白色念球菌，实验用第二代新鲜培养物，由华西医科大学微生物室提供。

1.3 培养基 沙雷氏真菌培养基

1.4 动物：大耳白兔，雌性，由成都中医药大学实验动物中心提供。

2、方法与结果

2.1 体外抗菌实验 取灭菌小管若干支，用培养基稀释使其浓度为0.5、0.25、0.125及0.06g/ml，每管加入1ml，再加入200倍稀释的18小时真菌培养物0.1ml，于37℃培养18小时后观察有无真菌生长，因被试药颜色深，不透明，将上述含药菌移种在沙雷氏琼脂平皿上，于37℃培养18小时后观察结果。阳性对照组为制霉菌素。真菌不生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度，结果见表2。

表2 本发明药物组合物洗液抑真菌试验结果(液体试管法)

注：-为无细菌生长，+为有细菌生长。

2.2 体内抗菌实验 对家兔白色念珠菌所导致实验性霉菌性阴道炎的影响，取雌性家兔50只，随机分为5组，每组10只。以预试验选定的白色念珠菌(浓度为6×10⁹/ml)0.8ml/kg滴入家兔阴道，经24小时感染，然后阴道外用，模型对照组给无菌蒸馏水，阳性对照组给予洁尔阴洗液，连续7天，剖解动物，观察其感染程度，结果见表3。

表3 本发明药物组合物洗液对家兔实验性阴道炎的影响X±SD

注：*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01

结果表明阳性药制霉菌素抑菌作用明显，本发明药物组合物洗液对白色念珠菌有抑制作用。且与阳性对照相比，剂量小，却发挥了等同的功效。

实验例3 本发明药物组合物抗滴虫作用

1、实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。甲硝唑0.2mg/片(上海信谊制药厂生产)。

1.2 菌种 阴道滴虫，由华西医科大学微生物室提供

1.3 培养基 采用1640培养基+10％小牛血清。

2 方法和结果

同一标本分置于5个试管内。分别加入本发明药物组合物洗液低剂量(0.25ml)、中剂量(0.5ml)、高剂量(1ml)、甲硝唑1/4片；以不加药物作空白对照管。置37℃孵育30min至1h。结果显示本发明药物组合物洗液中、高剂量及甲硝唑30min后即可杀死滴虫，1h后本发明药物组合物洗液低剂量亦可杀死滴虫；对照试管内滴虫3～4h后仍非常活跃。说明本发明药物组合物洗液具有抗滴虫作用。

实验例4 本发明药物组合物止痒作用

1、实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

阳性药物：洁尔阴洗液(成都恩威世亨制药有限公司)。

1.2 动物 豚鼠50只，体重250g～300g，♀♂各半(由成都中医药大学动物实验中心提供)。

2 方法与结果

取豚鼠50只，随机分为5组：(1)模型对照组；(2)阳性对照组洁：尔阴洗液(10％v/v，0.1ml/100g)；(3)本发明药物组合物洗液高剂量组(2％v/v，0.1ml/100g)；(4)本发明药物组合物洗液中剂量组(1％v/v，0.1ml/100g)(5)本发明药物组合物洗液低剂量组(0.5％v/v，0.1ml/100g)。实验前1日各组动物右后足剃毛后涂药1次，实验当日用粗砂纸擦伤右后足背剃毛处，面积1cm²。局部再涂药1次，对照组涂等量蒸馏水，末次涂药后10min，开始在创面上滴0.01％磷酸组胺0.05ml/只，此后每隔3min依0.01％、0.02％、0.03％…递增浓度，每次均为0.05ml/只，直到出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组胺总量为致痒阈，记录并比较各组的致痒阈，结果见表4。

表4 本发明药物组合物洗液对磷酸组胺致痒反应的影响X±SD

注：*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01

结果表明，本发明药物组合物洗液在高、中剂量均明显提高豚鼠致痒阈的作用，与空白对照相比有显著性差异。提示本发明药物组合物洗液可抗磷酸组胺致痒反应，具有止痒作用。

实验例5 本发明药物组合物抗炎作用

1、实验材料

1.1 药物与试剂：实施例1制备的本发明药物组合物洗液。洁尔阴洗液(成都恩威世亨制药有限公司)。二甲苯(北京化工厂生产)；

1.2 动物 昆明小鼠，体重18g～20g；Wistar大鼠120g～150g，♀♂各半(以上动物由成都中医药大学动物实验中心提供)。

2 方法与结果

2.1 本发明药物组合物洗液对小鼠耳廓二甲苯致炎试验的影响

取昆明种小鼠50只，随机分为模型对照组，阳性对照组：洁尔阴组(10％V/V，0.05ml/20g)，本发明药物组合物洗液高、中、低剂量组(2％、1％、0.5％V/V，0.05ml/20g)。各组动物于实验当日右耳涂药1次，对照组涂以等量蒸馏水，1h后各给药组以蒸馏水洗去药液，干棉球擦干后，每鼠右耳涂以二甲苯0.05ml/只，左耳作对照，15min后处死动物，用直径9mm打孔器将双耳同部位等面积切下，在万分之一天平上分别称重，左右耳片重之差为肿胀度，计算各组差值，求出肿胀抑制率，见表5。

表5 本发明药物组合物洗液对二甲苯所致小鼠耳廓肿的的影响

注：*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01

2.2 本发明药物组合物洗液对大鼠蛋清足跖肿试验的影响

取Wistar大鼠，分组同上。各组动物实验前按毛细管放大测量法测定各组大鼠右后足的正常体积(ml)，实验当日给药组涂药1h后(0.1ml/100g)，各组大鼠右后足皮下注射10％新鲜蛋清0.05ml/只后，再涂药1次，对照组涂以等量蒸馏水，测定致炎前后0.5，1，2，4，6h的右后足体积，各鼠致炎前后的足体积差值为肿胀度，比较各组差异及不同时间的动态变化，详见表6。

表6 本发明药物组合物洗液对大鼠蛋清足跖肿的影响X±SD

注：*与对照组比较P<0.05，**与对照组比较P<0.01

实验结果显示，本发明药物组合物洗液在高、中剂量下，对小鼠二甲苯耳廓肿及大鼠蛋清足跖肿均有明显的抑制作用，提示本品具有抗炎作用。

本发明药物组合物洗剂体内、体外药效学试验表明有一定的抑制白色念珠菌生和长的作用；体外本发明药物组合物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌、淋球菌、绿脓杆菌、滴虫等均有抑制作用；本发明药物组合物皮肤外用有抑制小鼠耳肿胀和大鼠角叉菜致足肿作用；本发明药物组合物对组胺引起豚鼠皮肤瘙痒有一定抑制作用。

实验例6 本发明药物急性毒性实验

1 实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

1.2 动物 KM种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，由成都中医药大学动物实验中心提供。

2 方法于结果

按改良Karber氏法进行实验，确定各组剂量，组见剂量比值：1.1361，皮下注射给药后，观察7天。结果皮下注射LD₅₀为64.81±5.29，相当于临床外用量2121倍。临床为皮肤外用制剂，吸收至皮下这极少，故可认为本品外用安全低毒。

实验例7 长期毒性实验

Wistarl大鼠80只，随机分4组，用本发明药物组合物洗液给大鼠皮肤涂抹一次，连续30天，剂量分别为三个剂量组，分别相当于临床常用剂量的20(20％)、40(40％)、80(80％)倍，对照组涂抹给予同体积蒸馏水。

连续涂抹30天，三个剂量组动物的外观、体征、行为活动无明显异常。饲料日耗量稳定，各组动物对饲料的消耗量无明显差别。体重平均增长无统计学差异。血常规、肝、肾功能等指标未见明显异常。给药30天解剖观察各动物各组织的排列位置、颜色、质地等未见异常；各主要脏器系数组间比较无明显差异；组织病理学检查心、肝、肺、脾、肾、垂体、甲状腺、胸腺、肾上腺、前列腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、气管、食道、胃、十二指肠、回肠、结肠、胰腺、大脑、脊髓、胸骨、膀胱等25种组织均无病理改变，其它各脏器组织也均未见异常。

实验例8 皮肤刺激试验

1 实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

1.2 动物 大耳白兔4只，雌性，体重2.0±0.2kg，由成都中医药大学动物实验中心提供。

2 方法与结果

家兔4只，实验前将兔背部脊柱两侧脱毛(不损伤皮肤)，范围均为5cm×10cm。一侧脱毛区分为给药区与对照区。对照区涂以1ml蒸馏水，给药区涂抹50％本发明药物组合物洗液1ml。另一侧脱毛区同样分为给药区与对照区，给药前用针头在皮肤上划出“#”形擦伤，伤口长2cm，伤口间隔1cm，以刺伤表皮、不伤真皮、有轻度渗血为度。涂药方法同前。以上4组给药后均用1层油纸、2层纱布覆盖，再用胶布固定。给药24h后，用湿纱布洗去药物，分别记录1、24、48及72h给药部位出现红斑和水肿的情况，按参考文献评分并进行刺激强度评价，详见表7。

表7 本发明药物组合物洗液的皮肤刺激试验

结果本发明药物组合物洗液与对照组对正常皮肤和损伤皮肤的平均反应值无明显差别，说明本发明药物组合物洗液对正常皮肤和损伤皮肤均无刺激性。

实验例9 粘膜刺激性试验

1 实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

1.2 动物 大耳白兔6只，雌性，体重2.0±0.2kg，由成都中医药大学动物实验中心提供。

2 方法与结果

动物分为对照组和给药组，每组3只。将本发明药物组合物洗液0.2ml注入动物阴道内，观察24小时局部及全身反应，随后处死动物，取出阴道粘膜进行病理组织学检查。结果肉眼及组织切片均未见给药组于对照组有病理改变。实验证实，本发明药物组合物洗液对阴道粘膜无不良刺激。

实验例10 皮肤过敏试验

1 实验材料

1.1 药物与试剂 实施例1制备的本发明药物组合物洗液。

1.2 动物 豚鼠，雌雄各半，体重250~300g，由成都中医药大学动物实验中心提供。

2 方法与结果

取豚鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，每组10只，于实验前用推剪和刮刀给豚鼠背部脊柱左右两侧皮肤脱毛，各为4cm×4cm。第一组为给药组，第二组为空白对照组，第三组为阳性对照组，给1％2，4-二硝基氯代苯0.2ml。于左侧脱毛区进行致敏接触，第7天和第14天重复1次；于末次涂药后第14天在右侧激发致敏，6h后去掉药物，洗净皮肤，即刻观察皮肤过敏情况，实验结果按皮肤过敏反应评分标准评分，计算平均分值，结果见下表。

表8 本发明药物组合物洗液的皮肤刺激试验

实验结果表明，给药组和对照组各有1只豚鼠皮肤出现勉强可见的红斑，24小时消退，反应平均分24小时为0.1分，24～72小时为0分，给药组与对照组比较不差异，可认为其致敏率为0。阳性对照组致敏率为100％。

通过上述的药效学试验和毒理实验说明，本发明药物组合物洗液具有抗炎、抑菌、杀虫、止痒等作用，低毒、对皮肤无刺激性。本发明药物组合物的其它剂型(栓剂、阴道软胶囊、阴道用凝胶剂、阴道用膜剂、阴道用泡腾片、阴道用泡沫剂、阴道用气雾剂、阴道用软膏剂、阴道用锭剂、阴道用丸剂)除了使用方法，生物利用度不同外，同样具备与洗剂相同的疗效和安全性，因此，本发明药物组合物是一种安全、有效、稳定、可控的药物，为临床提供了一种新的选择。

Claims (9)

1、一种治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：它是含有下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松20～160份、苦豆草20～160份、黄柏14～26份、苦地丁4～16份、蛇床子4～16份、甘草4～16份。

2、根据权利要求1所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松20～160份、苦豆草20～160份、黄柏14～26份、苦地丁4～16份、蛇床子4～16份、甘草4～10份、冰片0.04～0.16份。

3、根据权利要求2所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂：

岗松40～120份、苦豆草40～120份、黄柏16～24份、苦地丁6～14份、蛇床子6～14份、甘草4～10份、冰片0.04～0.16份。

4、根据权利要求3所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：以岗松的挥发油提取物为活性成分I；苦豆草、黄柏的酸提取物为活性成分II；苦地丁、蛇床子、甘草与岗松、苦豆草、黄柏提取后的药渣混合、水提，所得水提物与岗松水溶液混合为活性成分III；将活性成分I、II、III与冰片，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的阴道外用制剂。

5、根据权利要求4所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：所述的制剂为外用洗剂、栓剂、阴道软胶囊、阴道用凝胶剂、阴道用膜剂、阴道用泡腾片、阴道用泡沫剂、阴道用气雾剂、阴道用软膏剂、阴道用锭剂或阴道用丸剂。

6、根据权利要求5所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：所述的外用洗剂的pH值为：4～7。

7、根据权利要求5所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物，其特征在于：所述的外用洗剂含盐酸小檗碱C₂₀H₁₇NO₄·HC1不得少于0.4mg/ml。

8、一种制备权利要求3所述的治疗妇科阴道炎症的阴道外用药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、以岗松的挥发油提取物为活性成分I；

b、苦豆草、黄柏的酸提取物为活性成分II；

c、苦地丁、蛇床子、甘草与岗松、苦豆草、黄柏提取后的药渣混合、水提，所得水提物与岗松水溶液混合为活性成分III；

d、将活性成分I、II、III与冰片，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的阴道外用制剂。

9、权利要求1所述的药物组合物在制备阴道局部用药的抗菌、消炎、抗滴虫、止痒的药物中的用途。