CN101254270A

CN101254270A - 一种治疗妇科炎症的外用中药制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN101254270A
Application number: CNA2008103005092A
Authority: CN
Inventors: 蔡少青; 董立莎; 张亚洲; 陈晓昱; 陈嵘
Original assignee: Individual
Current assignee: GUIZHOU BAILING GROUP PHARMACY CO Ltd
Priority date: 2008-03-11
Filing date: 2008-03-11
Publication date: 2008-09-03
Anticipated expiration: 2028-03-11
Also published as: CN101254270B

Abstract

本发明提供了一种治疗妇科疾病的中药外用制剂及其制备方法，它是由苦参、蛇床子、黄柏、博落回、红土茯苓和石榴皮提取的有效部位浸膏和枯矾极细粉制备而成，其中泡腾栓制剂是由上述成分加入聚乙二醇、有机酸、碳酸氢盐或碳酸盐和吐温80制备而成。本发明以苦参和蛇床子为君药，辅以黄柏、博落回及红土茯苓，并佐以石榴皮和枯矾，对治疗妇科炎症的有效率可达90％以上，无任何刺激作用及毒副作用，是一种安全可靠的纯中药外用制剂。并且还提供了泡腾栓剂产品稳定，使用方便，增加了患者的顺应性，制备工艺相对简单。

Description

一种治疗妇科炎症的外用中药制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药制药技术领域，特别是涉及一种治疗妇科炎症的外用中药制剂及其制备方法。

背景技术

阴道炎症(vaginitis)是女性常见、多发的病症之一，发生于女性不同年龄段，其发病原因多种，总的是由于机体防御功能减弱，病原体侵入机体内或条件致病等原因引起的。目前，中国年龄在18--50岁妇女数为3.4亿人，约占中国总人口数量的28％，其中城市约为1亿人，乡郊地区约为2.4亿人。根据调查，其中约41％的女性患有不同程度的妇科炎性疾病，已婚女性发病率更高达80％以上。

妇科炎症给女性的生活工作造成很大影响，目前对该病治疗以抗生素为主，但产生的毒副作用及耐药性给患者带来负面影响。妇科炎症用药目前为内服和外用，内服以中成药为主，剂型有胶囊、片剂、滴丸等；外用以化学药(西药)为主，剂型以内置栓剂、片剂居多，而中成药则以洗剂为主，但稳定性较差。

因此临床上迫切需要使用方便、安全可靠、疗效稳定的妇科局部新剂型的天然药，市场上同时也需要适合大工业生产的现代新制剂。

泡腾剂型在世界医药制剂行业中是一种先进、技术含量较高的剂型，为泡腾系统中含有有机酸和碳酸氢盐或碳酸盐等，遇水可放出大量的二氧化碳而呈泡腾状，但中药泡腾剂型的研制和上市刚刚起步，而阴道泡腾片则为2005版药典新增的剂型，目前不管是药品申报和专利申请，数量和技术创新点都很少，上市品种更少，尤其是妇科用药，市场上仅见于洁尔阴等为数极少的外用药。但泡腾片对加工工艺及条件有特殊要求，容易吸湿，压片时出现粘冲，贮存过程中易发生变质，条件要求较高，并且由于酸碱系统的存在，制剂中应控制含水量，才能保证成品的质量和稳定性。

阴道泡腾栓是在基质中加入了发泡剂(酸碱系统)，使栓剂在体温下随着基质的熔化(药效学试验证实：本产品在体内10分钟熔化)，在阴道中有少量的体液就会产生泡腾作用及大量细腻的泡沫，均匀持久地分布于阴道内壁和宫颈黏膜，可使药物渗入到阴道黏膜皱褶深部，增加药物与组织的接触面积，从而产生良好的局部治疗作用，有利于药物的释放与分布，克服了普通栓剂在阴道使用时易出现前后穹窿、阴道壁皱褶等充盈不好，致使存在抗菌死角，融变时限长，溶解不彻底，生物利用度低的缺点。又克服了泡腾片质量不稳定，制备条件要求苛刻等缺点。

公开号为CN1270715的中国专利公开了一种博落回总生物碱药物制剂及其制备方法，其中提到了泡腾栓剂，但单独用博落回总生物碱治疗妇科疾病，仅能杀阴道滴虫，而其他治疗作用未见报道，故适应症范围小，治疗效果也有待提高。到目前为止，市场上还未见有治疗妇科疾病的纯中药泡腾栓产品。

发明内容

本发明提供了一种治疗妇科炎症的外用中药制剂及其制备方法，该外用中药制剂疗效好、适应症范围宽，并且疗效稳定、安全可靠，本发明提供的制备方法也适合大工业生产。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

按照重量份计算，治疗妇科炎症的外用中药制剂是由中药原料苦参5～50份、蛇床子5～40份、黄柏5～40份、博落回5～30份、红土茯苓10～60份、石榴皮3～30份和枯矾1～15份制备而成。

优选为：苦参20份、蛇床子15份、黄柏15份、博落回12份、红土茯苓30份、石榴皮10份和枯矾3份。

其中，所述的外用中药制剂可以为泡腾栓剂、泡腾剂、栓剂、泡腾片剂、凝胶剂、膜剂或洗剂。

上述的泡腾栓剂是由前述的中药原料和辅料聚乙二醇80～300份、有机酸10～40份、碳酸氢盐或碳酸盐10～40份以及制剂量0.5％～2％的吐温-80制备而成。

上述泡腾栓剂优选为：中药原料苦参20份、蛇床子15份、黄柏15份、博落回12份、红土茯苓30份、石榴皮10份、枯矾3份和辅料聚乙二醇114.3份、有机酸20份、碳酸氢盐20份以及制剂量1％的吐温-80。

其中，所述聚乙二醇为聚乙二醇-2000或聚乙二醇-4000；所述有机酸为柠檬酸、酒石酸、富马酸或苹果酸；所述碳酸氢盐为碳酸氢钠、碳酸钠或碳酸氢钾。

前述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法：

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，蛇床子用水提取挥发油，挥发油和水提取液备用；苦参、黄柏、博落回、红土茯苓和蛇床子药渣用醇提取，醇提取液趁热过滤，得滤液1备用，所得药渣用水提取，水提取液和蛇床子水提取液合并后趁热过滤，得滤液2备用，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩得清膏1备用，石榴皮用水提取，提取液趁热过滤，滤液减压浓缩成清膏2备用，合并清膏1和清膏2，干燥，打成细粉，加入枯矾细粉，混合均匀，得浸膏干粉；

b、制剂成型：浸膏干粉中加入蛇床子挥发油和辅料，制成药剂学上的各种外用中药制剂。

前述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法，其中泡腾栓剂是这样制备的：

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，蛇床子水提取挥发油，所得蛇床子药渣和其余原料药经提取浓缩得清膏，干燥，打成细粉后加入枯矾细粉，混合均匀，得浸膏干粉备用；

b、制剂成型：将聚乙二醇加热溶化后加入吐温-80搅拌均匀，然后加入有机酸和浸膏干粉，搅拌均匀，加入碳酸氢盐充分搅拌均匀后，再加入蛇床子挥发油，搅拌均匀，灌装栓模即得泡腾栓剂。

上述泡腾栓剂的制备方法中，所述制剂成型工艺为：取聚乙二醇加热溶化后加入吐温-80搅拌均匀，再加入有机酸和浸膏干粉，搅拌均匀后加热至30～80℃熔化，温度控制在30～80℃加入碳酸氢盐搅拌均匀，30～100目过滤后再加入蛇床子挥发油搅拌均匀，趁热灌装栓模即得泡腾栓剂。

前述泡腾栓剂的制备方法中，所述浸膏干粉的制备为：

取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用12倍量水浸泡6小时，加热回流提取6小时，得蛇床子挥发油、水提取液和药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣合并，用5～10倍量50％～90％的乙醇浸泡过夜，在50℃～80℃提取1～4次，每次0.5～2小时，提取液200～450目滤布趁热滤过，合并得滤液1备用，所得药渣在70℃～100℃用5～10倍量水提取1～3次，提取液200～450目滤布趁热过滤，所得滤液和蛇床子水提取液合并得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.00～1.20的清膏1备用；石榴皮打粗粉，用5～10倍量水提取1～4次，每次0.5～1.5小时，合并提取液趁热过滤，减压浓缩成60℃相对密度为1.00～1.20的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过80～200目筛，加入过80～200目筛的枯矾细粉，混匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存。

方解：该中药复方制剂具有清热解毒，燥湿收敛，杀虫止痒的功效。方中苦参为豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的干燥根，味苦性寒，归大肠、膀胱经，具有清热燥湿，杀虫止痒，利水消肿之功效，含苦参碱、氧化苦参碱等，有抗菌、抗炎作用。蛇床子为伞形科植物蛇床子(Cnidium monnieri(L.)Cuss.)的干燥成熟果实，味苦性寒，归肝、大肠经，具有清热解毒，杀虫止痒，活血散瘀之功效，所含的香豆素类成分具有明显的抑制细菌、真菌作用，在体外对滴虫有较强的杀灭作用，其挥发油为止痒成分。两药合用，清热燥湿，杀虫止痒，活血散瘀，敛疮祛腐，此二药为君药。黄柏为芸香科植物黄皮树(Phellodendron chinense Schneid.)的干燥树皮，味苦性寒，归肾、膀胱经，具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮之功效，黄柏含小檗碱等生物碱类，具有广谱抗菌作用，如抗病原微生物，对多种球菌和杆菌及致病性皮肤真菌亦有不同程度的抑制作用，对阴道滴虫亦能杀灭。博落回为罂粟科植物博落回(Macleaya cordata(Willd.)R.Br.)的干燥全草，味辛苦性温，具有消肿，解毒，杀虫之功效，博落回中异喹啉类生物碱如血根碱、屈白菜红碱等是抗菌作用的有效成分，其抗菌效力强，抗菌谱广，对球菌和杆菌、革兰氏阳性和阴性都有较强的抗菌活性，并有强大杀阴道滴虫作用。红土茯苓为百合科植物菝葜(Smilax chinaL.)的干燥根茎，味苦性寒，入心经，具有清热利湿之功效，红土茯苓含的皂苷类及黄酮类具有广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗病原虫的作用。方中黄柏、博落回和红土茯苓清热解毒，燥湿止痒，杀虫，止血生肌，为辅药。石榴皮为石榴科植物石榴(Punica granatunL.)的干燥果皮，味酸涩性温，入大肠、肾经，具有涩肠，止血，驱虫之功效，石榴皮含鞣质、生物碱，具有抗生殖器疱疹病毒作用，对淋球菌和白色念珠菌有明显抑制和杀灭作用，而且无副作用。枯矾为硫酸盐类矿物明矾石照明煅法煅至松脆而成，味酸涩性寒，入肺、脾、胃、大肠经，具有燥湿，止泻，止血，解毒杀虫之功效，枯矾主要成分为无机盐类，具有抗细菌、真菌、滴虫及收敛、止血作用。方中石榴皮、枯矾敛疮祛腐，止血，清热燥湿，解毒疗疮，为使药。诸药合用，共奏清热解毒，燥湿收敛，杀虫止痒之效。

功能主治：清热燥湿，杀虫止痒，祛腐生肌。用于妇女湿热带下，症见阴部瘙痒红肿，带下量多，色黄或如豆渣状等；如霉菌性阴道炎，滴虫性阴道炎，细菌性阴道炎、宫颈糜烂及淋病等见上述证候者。

发明人对原料药的提取及除杂工艺进行了大量的实验研究：

I.不同提取工艺的研究

一、处方提取工艺初步探索具体操作如下：

1、蛇床子单独提取挥发油，得挥发油、水提药液(浓缩得干膏)和蛇床子药渣。

2、苦参、黄柏、博落回、红土茯苓、石榴皮和蛇床子药渣。

I：以上6味药用水6倍，回流提取3次，每次1小时，滤液浓缩得干膏后，按处方量加挥发油和枯矾制成样品I(含生药1g/ml)

II：以上6味药用40％乙醇6倍，回流提取3次，每次1小时，滤液浓缩得干膏后，按处方量加挥发油和枯矾制成样品II(含生药1g/ml)

III：以上6味药用80％乙醇6倍，回流提取3次，每次1小时，滤液浓缩得干膏后，按处方量加挥发油和枯矾制成样品III(含生药1g/ml)

IV：以上6味药用80％乙醇6倍，回流提取3次，每次1小时，药渣再用水6、6倍提取两次，每次1小时，合并滤液浓缩得干膏后，按处方量加挥发油和枯矾制成样品IV(含生药1g/ml)

V：以上6味药除石榴皮外，用80％乙醇6倍，回流提取3次，每次1小时，滤液浓缩得干膏后，按处方量加挥发油、枯矾和石榴皮分提物(石榴皮加8倍，回流提取3次，每次1小时，滤液浓缩得干膏)制成样品V(含生药1g/ml)

二、处方提取工艺初步探索结果如下：

I、II、III、IV、V工艺的干膏得量分别为：

结果：工艺I的干膏得率最低，其次为工艺III、II，但三者得膏率未见显著差别，工艺V分煎石榴皮中干膏得率为23.90％，较工艺I、II、III得膏率要高，干膏得率最高的则为工艺IV。

三、I、II、III、IV、V工艺的抑菌实验：

实验方法：琼脂二倍稀释法，将对倍稀释的药液与培养基混合倒入已消毒的平皿中，待凝固后，用多点接种仪将细菌接种于平皿表面，35℃培养16-18hr，以无菌生长的最低浓度为MIC值。细菌接种量为10⁴CFU/点。供试样品浓度1000-2mg/ml。

5个样品对4种株菌的MIC值(单位：生药mg/ml)

从结果可见，所有样品均表现出对革兰阳性菌的抗菌活性略优于革兰阴性菌。5个样品中4号样品抗菌活性最好，3号和5号样品略逊于4号样品，1、2号样品抗菌活性相对较弱。

四、样品含量测定：

I、II、III、IV、V工艺的蛇床子素含量测定结果如下：

结果：工艺V提取工艺中，蛇床子素提取转移率为最高89.01％(注：含量中是指相当15g蛇床子药材在复方中提取后含有的总蛇床子素)。

五、I、II、III、IV、V工艺的总生物碱(以苦参碱计)测定结果如下：

注：含量g(以苦参碱计)：指按一个处方量投料提取，均为相当于一个处方量药材共提取生物碱的量；除枯矾外，石榴皮分提后也除外。

六、处方提取工艺初步探索结果总结

1、通过对5个初步探索的提取工艺I、II、III、IV、V的考查，得出了抑菌效果总的来说是醇提大于水提，高浓度醇(80％)提又优于低浓度醇(40％)提；蛇床子素提取转移率也是醇提显著大于水提，且高浓度醇(80％)提又优于低浓度醇(40％)提的转移率。

石榴皮鞣质分提结果使蛇床子素提取率有提高(从85.51％提高至89.01％)。

2、提取工艺的总生物碱考查结果也是乙醇提显著大于水提，且高浓度乙醇(80％)提又显著优于低浓度乙醇(40％)提(从67.04％提高至89.66％)，石榴皮鞣质分提结果也使总生物碱提取量有明显提高(从89.66％提高至100％)。工艺IV醇水双提的结果证明，用80％乙醇提后，再加水提取两次，对蛇床子素、总生物碱的提取都有增加，抑菌的药效也有增进作用。

七、下一步提取工艺路线确定

综上各种原因考虑，石榴皮为含鞣质的药物，且其主要功效作用为抗淋球菌(抑菌筛选时淋球菌株较难分得)；现已证实鞣质与生物碱合提会使两者结合成沉淀而被除去，本处方初步提取工艺筛选也说明了这一问题的正确性，而生物碱又作为本方中的主要功效成分。所以下一步提取工作中，将对石榴皮单独考查提取工艺；而其它处方药味(蛇床子提油后药渣、苦参、黄柏、博落回、红土茯苓)确定考虑合提工艺考查。

八、对以后工艺考查使用评价指标的确定

因为蛇床子为方中君药，而且蛇床子素又为本方中有效成分之一，而且含量测定方法是参考05版药典成熟、稳定的HPLC法，以此为评价工艺优劣的指标之一，权重系数定为0.3；总生物碱也是本方中主要的活性大类成分，也作为控制的一个指标，权重系数也定为0.3；最低抑菌试验结果为体外主要药效学评价，对本方提取工艺研究也是一个具有较好参考的评价指标之一，对其权重系数也定为0.3，考虑工艺成型研究，干膏得率也会对下一步产生影响，也作为综合评价的指标之一，权重系数定为0.1。

综合评分＝(40/最高总生物碱含量)×总生物碱含量+(40/最高蛇床子素含量)×蛇床子素含量+(20抑菌结果)，注：最低抑菌试验最好者为30，较好者为20，较不好者则为10。

九、处方中5味药不同浓度乙醇的提取优选，确定提取溶剂浓度

处方药味(蛇床子提油后药渣、苦参、黄柏、博落回、红土茯苓)考虑合提工艺考查，对不同浓度乙醇的考查，选取乙醇浓度为70％、80％、90％进行提取考查。

方法：按处方量称取蛇床子提油后药渣，与苦参、黄柏、博落回、红土茯苓，分别加70％、80％、90％的乙醇8倍量，每次提取1hr，连续提取3次后，滤液合并浓缩，滤渣继续加6倍量水，每次提取1hr，连续提取2次，滤液合并浓缩，滤渣弃。合并两次浓缩滤液，烘箱中60℃烘干，得干膏，打粉备用。

(一)70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺得干膏水分测定

方法：按《中国药典》一部附录IX H水分测定法第一法(烘干法)取干膏粉末适量，精密称定，铺放至干燥恒重的培养皿中，厚度不超过5mm，放100-105℃烘箱中干燥5hr后，盖好瓶盖，移至干燥器中，冷却30min，精密称重后，继续干燥1hr，在依上法冷却30min，两次称重差异不超过5mg为止。计算水分含量，结果如下表：

70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺干膏水分测定结果

结果：70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺下得干膏样品水分测定结果表明，不同醇提取工艺样品下样品水分相差不大，浓缩液至烘箱中60℃至干，干膏量得率之间有可比性。

(二)70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺考查的蛇床子素含量测定结果

结果：70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺对蛇床子素的提取差别不显著，70％提取干膏蛇床子素的含量较低为1.24％，90％提取干膏的蛇床子素含量最高为1.31％，但70％提取干膏量为24.19g，90％提取干膏量为22.69g，三工艺以80％提取蛇床子素为100％，则70％提取蛇床子素为99.54％，90％提取蛇床子素为98.57％。

(三)70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺考查的总生物碱(以苦参碱计)测定结果

结果：70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺对生物碱的提取差别不显著，70％提取干膏生物碱含量较低为4.04％，90％提取干膏的生物碱含量最高为4.27％，但70％提取干膏量为24.19g，90％提取干膏量为22.69g，三工艺以70％提取总生物碱为100％，则80％提取生物碱为99.6％，90％提取生物碱为99.0％。

(四)70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺考查的抑菌实验

3个样品对4种株菌的MIC值(单位mg/ml)

从结果看，所有样品均表现为对化脓性链球菌抗菌作用最强，其次为金黄色葡萄球菌和白色念珠菌，对大肠埃希菌的抗菌作用略逊于金葡菌和念珠菌。3个样品中1、2号样品对革兰阴性菌的作用略优于3号样品。

(五)结果分析：通过本次对70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺考查实验，三个不同浓度乙醇提取以蛇床子素、总生物碱、抑菌实验结果为考查指标。①80％、90％浓度乙醇提取工艺对蛇床子素的提取差别不显著，70％提取干膏蛇床子素的含量较低为1.24％，90％提取干膏的蛇床子素含量最高为1.31％，但70％提取干膏量为24.19g，90％提取干膏量为22.69g，三工艺以80％提取蛇床子素为100％，则70％提取蛇床子素为99.54％，90％提取蛇床子素为98.57％。②70％、80％、90％浓度乙醇提取工艺对生物碱的提取差别不显著，70％提取干膏生物碱含量较低为4.04％，90％提取干膏的生物碱含量最高为4.27％，但70％提取干膏量为24.19g，90％提取干膏量为22.69g，三工艺以70％提取总生物碱为100％，则80％提取生物碱为99.6％，90％提取生物碱为99.0％。

十、处方中五味药合提的吸水率考查

故按处方量称取五味药(注蛇床子为提油后药渣)各46g(3份)，加一定浓度醇276ml浸泡，隔一定时间观察浸透心程度，浸泡约7hr后，过滤，测得过滤水量，计算吸水率，结果见下表，

五味药合提时的吸水实验结果(n＝3)

结果表明，五味药合提时药材吸水率约为自身重量的196％。

十一、提取工艺评价指标的正交试验

选用蛇床子素、总生物碱含量及抑菌实验为提取工艺评价指标，五味药合提的正交实验结果分析如下：

L₉(3⁴)正交实验结果(n＝3)

数据分析：

①以蛇床子素提取总量％(相当一个处方原药材15g的量)考虑

方差分析：

结果：对蛇床子素提取影响大小是提取次数＞提取加入溶剂量＞提取时间，方差分析结果显示提取次数和提取加入溶剂量对蛇床子素提取转移率有显著性的影响，结合直观分析应提取加入溶剂量是第二水平加入效果最好，提取次数是第三水平提取效果最好。而提取时间对蛇床子素提取转移率没有显著性的影响，直观分析表明第二水平提取较好。故综合以上分析提取以蛇床子素的转移率为指标。则提取最佳工艺应定为A₂B₂C₃。

②以总生物碱提取量(相当一个处方原药材)考虑

方差分析：

结果：对总生物碱提取影响大小是提取次数＞提取加入溶剂量＞提取时间，方差分析结果显示提取次数对总生物碱提取转移率有显著性的影响，结合直观分析应是，提取次数是选择第三水平提取效果最好。而提取时间和提取加入溶剂量对总生物碱提取转移率没有显著性的影响，直观分析表明且都以第二水平提取较好，故综合以上分析提取以总生物碱的转移率为指标，则提取最佳工艺应定为A₂B₂C₃。

③综合结果考虑及最后提取工艺确定

方差分析：

结果：对提取影响大小是提取次数＞提取加入溶剂量＞提取时间，方差分析显示，提取次数对提取结果有显著性影响，结合直观分析应是，提取次数是选择第三水平提取效果最好。而提取时间、加入溶剂量则对提取结果有无显著性影响。直观分析说明加入溶剂量经综合评分后，是第二水平提取效果是最好。直观分析说明提取时间综合评分后，也是第二水平提取效果最好。

综合通过统计方差分析及直观分析，得出最后提取工艺条件，A₂B₂C₃，既用8倍量70％的乙醇提取3次，每次1小时后，再用6倍量的水提取1次，每次提取1小时。

十二、正交实验工艺9个样品的抑菌实验

9个样品对4种株菌的MIC值(单位mg/ml)

从结果可见，所有样品均表现出对化脓性链球菌和白色念珠菌的抗菌活性优于金葡菌和大肠埃希菌。9个样品中3号样品抗菌活性最好，2号和4号样品略逊于3号样品，其它样品抗菌活性相对更弱。

十三、五味药提取工艺验证实验

根据上面工艺筛选得到的最佳提取工艺A₂B₂C₃，既用8倍量70％的乙醇提取3次，每次1小时后，再用6倍量的水提取1次，每次提取1小时。提取三次，过滤，得滤液，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

验证结果如下：

处方中五味药合提工艺验证实验干膏收率结果表(n＝3)

处方中五味药合提工艺验证实验蛇床子素提取结果表(以一个处方量计)：

处方中五味药合提工艺验证实验总生物碱提取结果表(以一个处方量计)：

结果：通过以上五味药合提验证实验总生物碱、蛇床子素的提取结果说明，所筛选的提取工艺条件基本稳定可行。

十四、醇提后水提因素的考察：

提取工艺用一定浓度一定量的醇提取后，再考察用水提取量、次数、提取时间，测定蛇床素、总生物碱含量(以苦参碱计)及体外抑菌试验，结果见表。

表醇提取后水提因素的考察结果的比较(以一个处方量计，n＝2)

由表可见醇提后，水提取次数及提取时间对选取的有效成份的转移率及抑菌作用均无明显的差异。

十五、蛇床子水提工艺考察

考虑挥发油对药效的独特作用(止痒作用)，合提工艺中容易丢失，以后除杂、制剂成型等工艺也易损失等原因，挥发油选择水回流单独提取。对不同加水量、提取时间进行工艺考查如下：

蛇床子挥发油提取工艺研究：

吸水率考查考虑因制剂需要，以后除杂困难而使干膏得率过高，仅将蛇床子打成粗粉提取挥发油，故称取粗粉各10g(3份)，加水100ml浸泡，隔一定时间观察浸透心程度，浸泡约6hr后，过滤，测得过滤水量，计算吸水率，结果见下表：

蛇床子药粉吸水实验结果(n＝3)

结果表明，蛇床子粗粉吸水率约为自身重量的345％，并且粗粉体积较大，所以回流提取挥发油工艺中，确定加水量从10倍量开始考查，选定加水量12倍，加水量14倍平行考查。

加水量考查称取蛇床子粗粉90g，加不同量水浸泡6hr，以收油量为指标，回流蒸溜提取。结果见下表：

蛇床子药粉挥发油提取加水量10倍结果

蛇床子药粉挥发油提取加水量12倍结果

蛇床子药粉挥发油提取加水量14倍结果

结果表明，称取蛇床子粗粉，加12倍水量，浸泡6hr，回流提取挥发油量较高，当提取时间为6hr时，收油量达0.99ml(已达总收油量的92％以上)，考虑节省能源，确定提取时间为6hr。

挥发油提取验证实验，称取蛇床子粗粉3份，每份90g，加12倍水量，浸泡6hr，回流6hr提取挥发油。

挥发油提取验证实验(n＝3)

由上验证实验可知，蛇床子挥发油提取工艺基本稳定可行，确定蛇床子提取工艺为加12倍水量，浸泡6hr，回流提取6hr。

十六、石榴皮水提工艺考察

一)石榴皮提取工艺条件进一步筛选

因考虑工艺提取中石榴皮主要成分鞣质类为抗淋球菌的作用，考虑石榴皮与其它含生物碱的药材合提会使鞣质与生物碱结合而沉淀，可导致处方对抗淋球菌的功效减弱，及对总生物碱提取完全考虑，本工艺对石榴皮单独用水回流提取进行提取工艺研究。

影响水回流提取的主要因素有加水量、提取时间、提取次数。上述3个因素，各取3个水平进行L9(3⁴)正交试验。选用鞣质提取含量作为提取工艺的评价指标。

石榴皮提取正交试验因素水平表

二)石榴皮吸水率考查：

称取石榴皮粗粉各10g(3份)，加水80ml浸泡，隔一定时间观察浸透心程度，浸泡约4hr后，过滤，测得过滤水量，计算吸水率，结果见下表：

结果表明，石榴皮药材吸水率约为自身重量的260％。

称取石榴皮药材各40g(因前预实验石榴皮提取，干膏得率均为50％左右)，照正交表中各实验号下的要求进行回流提取，浓缩、干燥，得不同工艺下的干膏，打粉备用。

三)提取工艺评价指标的正交试验：

石榴皮L₉(3⁴)正交实验结果(n＝3)

方差分析如下：

数据分析：以鞣质提取总量％(相当原药材的百分比)

I：比较各因素极差R值的大小得出对总鞣质提取得率的影响因素由大到小顺序是C＞A＞B，既提取次数＞加水量＞提取时间的影响。

II：方差分析结果表明，回流提取时间对总鞣质提取得率无显著性影响，所以考虑节约工时、能源，提取时间选择B1，即0.5hr；加水量对总鞣质提取得率也无显著性影响，但考虑实验3中加水量(6、4、4)倍，提取1.5小时，提取3次时，得总鞣质3.7858g，但是当加水量(8、6、6)时，提取1小时，提取3次时，得总鞣质4.3975g，前者为后者的86.0％，差别较大，为充分利用药用资源提高总鞣质提取得率考虑，加水量考虑选择A2，即(8、6、6)倍；提取次数对总鞣质提取得率有显著性影响，应选择提取次数为C3，即提取3次，因此可将提取工艺定为A2B1C3，即用(8、6、6)倍水，提取0.5小时，提取3次。

四)石榴皮提取工艺验证实验：

称取石榴皮药材40g，3份样品，照正交实验后确定的工艺的要求进行回流提取，按前鞣质测定方法，测定鞣质含量，实验数据及结果如下：

石榴皮提取工艺验证实验结果表(n＝3)

结果：三次实验提取样品中鞣质含量平均值为25.58％，RSD值为3.71，干膏收率平均为45.8％，RSD值为0.66，石榴皮提取工艺验证试验说明，所筛选的提取工艺条件基本稳定可行。

五)提取得干膏水分测定：

方法(按《中国药典》一部附录IX H水分测定法第一法(烘干法)取干膏粉末适量，精密称定，铺放至干燥恒重的培养皿中，厚度不超过5mm，放100？05℃烘箱中干燥5hr后，盖好瓶盖，移至干燥器中，冷却30min，精密称重后，继续干燥1hr，在依上法冷却30min，

两次称重差异不超过5mg为止。计算水分含量，结果如下表(单位：g)：

结果：各提取工艺下得干膏样品水分测定结果表明，不同提取工艺样品下样品水分相差不大，浓缩液至烘箱中60℃至干，干膏量得率之间有可比性。

六)石榴皮提取工艺的直接溶液测定指标评价与本工艺方法指标评价比较：

称取石榴皮药材40g，照正交实验后确定的工艺要求进行回流提取，得滤液定溶至1000ml。

固形物收率测定：精密量取25ml滤液，至105℃条件下烘箱中至完全干燥，计算。

精密量取滤液1ml，至100ml棕色量瓶中，按前鞣质测定方法，测定鞣质含量，实验数据及结果如下：

实验结果说明，通过本实验方法与直接溶液评价比较，指标固形物收率及提取总鞣质含量均相差不大，说明本研究方法对溶液处理过程中，浓缩及干燥等工艺能够基本保持稳定，对各指标影响不明显，也说明实验确实可行。

(注：含量是指40克石榴皮药材提取总鞣质为药材重量百分比计算)

II.不同除杂工艺的研究

一、自然静置除杂工艺研究：

1.石榴皮提取工艺的自然除杂考查研究及考虑提取物是否需要粉碎进行的实验如下，以干膏收率、鞣质含量为指标进行考察。

考查具体实验安排：

除杂研究工艺I：称取打粉后石榴皮药材40g，以石榴皮提取工艺进行水提取，过滤后，静置18小时，含沉淀部分用滤纸抽滤处理，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂研究工艺II：方法同工艺I，过滤后，静置12小时，含沉淀部分用滤纸抽滤处理，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂研究工艺III：称取仅切成小块的石榴皮药材40g，以石榴皮提取工艺进行水提取，过滤后，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

按前鞣质测定方法，测定鞣质含量，实验数据及结果如下：

石榴皮提取工艺自然静置除杂实验结果表：

结果：不同除杂工艺的处理后，I、II、III所得干膏收率差别不显著。石榴皮提取工艺自然静置除杂实验鞣质含量结果表

(注：提取总鞣质％指为石榴皮40克药材中提取的得到总鞣质为药材重量百分比)

结果：石榴皮提取工艺的自然除杂考查研究及考虑提取物是否需要粉碎进行实验结果说明，自然静置在石榴皮除杂工艺中未有较大量的干膏量降低。采用石榴皮切小块处理进行提取，干膏量有所降低，但是提取得到的总鞣质含量却有较大量下降。因此提取时药材还是应打粉后提取较合理。实验也同时证明，石榴皮采用自然静置的方法进行除杂处理，效果并不显著，也可以说明石榴皮提取后不溶性杂质含量存在不高。

2.五味药合提提取工艺的自然除杂考查研究实验如下，以干膏收率、总生物碱含量及蛇床子素含量为指标进行考察。

考察具体实验安排：

除杂研究工艺I：按最佳提取工艺进行醇水双提，初步得到滤液进行静置12小时后，含沉淀部分用滤纸抽滤处理，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂研究工艺II：提取方法同工艺I，初步得到滤液进行静置24小时后，含沉淀部分用滤纸抽滤处理，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂研究工艺III：提取方法同工艺I，初步得到滤液进行静置6小时后，含沉淀部分用滤纸抽滤处理，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

五味药提取工艺自然静置除杂的实验结果表：

结果：不同自然静置除杂工艺的处理后，I、II、III所得干膏收率差别不显著。处方中五味药合提自然静置除杂工艺实验蛇床子素提取结果表

结果：不同除杂工艺的处理后，I、II、III工艺提取蛇床素转移以自然静置6小时(III)为100％计，自然静置12小时(I)则为94.5％，自然静置24小时(II)则为97.8％。

处方中五味药合提工艺自然静置除杂实验总生物碱提取结果表

结果：不同除杂工艺的处理后，I、II、III工艺提取总生物碱以自然静置6小时为100％计，自然静置12小时则为98.4％，自然静置24小时则为97.7％。

处方中五味药合提采用自然静置除杂的实验总结：

通过自然静置对处方中的五味药提取工艺考查，说明采用自然静置除杂，有效成份指标未见明显影响，而除杂也未有较好的效果。

二、离心除杂工艺研究：

1.石榴皮离心除杂工艺研究

石榴皮提取工艺的离心除杂工艺考查研究以干膏收率、鞣质含量为指标进行考查，考查具体实验安排：

除杂研究工艺I：称取打粉后石榴皮药材40g，以石榴皮提取工艺进行水提取，过滤处理后，用TDL-5-A CENTRIFUGE型低速离心机对滤液进行离心处理(转速：4200r/min；Time：10min)后，浸出上清液进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂离心工艺II：称取打粉后石榴皮药材40g，以石榴皮提取工艺进行水提取，过滤处理后，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。按前鞣质测定方法，测定鞣质含量，实验数据及结果如下：

石榴皮提取工艺离心除杂实验结果表：

结果：经离心除杂工艺的处理后，I、II工艺所得干膏收率差别不显著。既离心除杂对石榴皮提取工艺处理后，未见明显的除杂效果，离心除杂工艺对石榴皮提取工艺干膏收率影响不大。

石榴皮提取工艺离心除杂实验鞣质含量结果表

(注：提取总鞣质％指为40克石榴皮药材中提取的得到总鞣质为药材重量百分比)

结果：石榴皮提取工艺的离心除杂工艺考查研究实验结果说明，离心除杂在对石榴皮提取工艺中未有较大量的干膏量收率降低。提取得到的总鞣质含量也未有较大量下降。实验同时证明，石榴皮采用离心工艺的方法进行除杂处理，效果并不显著，也同时可以说明石榴皮提取后不溶性杂质含量存在不高的情况。

2.处方中五味药合提工艺的离心除杂研究：

五味药合提的提取工艺的离心除杂考查研究实验如下，以干膏收率、总生物碱含量及蛇床子素含量为指标进行考察。

除杂研究工艺I：按一个处方量称取各味药材量，按最佳提取工艺进行醇水双提，得滤液，用TDL-5-A CENTRIFUGE型低速离心机进行离心处理(转速：4200r/min；Time：10min)后，浸出上清液再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

除杂研究工艺II：按一个处方量称取各味药材量，，按最佳提取工艺进行醇水双提，得到滤液，再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

五味药提取工艺离心除杂的实验结果表：

结果：离心除杂工艺的处理后，I、II所得干膏收率差别有较明显的差异。既处方中五味药合提离心除杂工艺实验与未离心处理工艺固型物收率有较明显的差异(离心后为未离心收率的85.8％)。

处方中五味药合提离心除杂工艺实验蛇床子素提取结果表(以一个处方量计)：方法同前蛇床子素含量测定。

结果：离心除杂工艺的处理后，离心工艺提取蛇床子素为未离心工艺提取的蛇床子素的98.4％，说明离心工艺对提取蛇床子素未有明显的影响。

处方中五味药合提工艺离心除杂实验总生物碱提取结果表

结果：离心除杂工艺的处理后，I离心工艺后提取总生物碱为未离心工艺提取的总生物碱89.4％。说明处方中五味药合提经离心处理后，对总生物碱的提取保留有较明显的影响，使总生物碱有显著性的降低，可能原因为离心快速沉淀，而使杂质吸附一定的生物碱而一同沉淀而除去。

三、板框压滤除杂工艺研究：

1、石榴皮提取工艺的板框压滤除杂实验考查：以干膏收率、鞣质含量为指标进行考察。

以石榴皮提取工艺进行提取，称取打粉后石榴皮药材160g，用水提取，初步得到滤液后，用板框压滤机(天津市鹏翔科技有限公司板框过滤实验装置)进行压滤后(滤布选用400目)，取相当于40g的石榴皮进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

石榴皮提取工艺板框压滤除杂实验结果表：

结果：经板框压滤除杂工艺的处理后，工艺所得干膏收率与未经处理的工艺样品差别不明显。既板框压滤除杂对石榴皮提取工艺处理后，未有明显的除杂效果，板框压滤除杂工艺对石榴皮提取工艺干膏收率影响不大。

石榴皮提取工艺的板框压滤除杂实验鞣质含量结果表

结果：石榴皮提取工艺的板框压滤除杂工艺考查研究实验结果说明，板框压滤在对石榴皮提取工艺中未有较大量的干膏量收率降低。提取得到的总鞣质含量也未有较大量下降。实验同时证明，石榴皮采用板框压滤的方法进行除杂处理，效果并不显著，也同时可以说明石榴皮提取后不溶性杂质含量存在不高的情况。

2、五味药合提的板框压滤除杂实验考察：以干膏收率、总生物碱含量及蛇床子素含量为指标进行考查。

以五味药合提的提取确定工艺进行提取，按二个处方量称取各味药材量，按最佳提取工艺进行醇水双提，得到滤液，进行板框压滤机(天津市鹏翔科技有限公司板框过滤实验装置)压滤后(滤布选用400目)，取一个处方量溶液再进行浓缩，置60℃烘箱中干燥，得干膏，打粉备用。

五味药提取工艺板框压滤除杂的实验结果表：

结果：板框压滤除杂工艺的处理后，所得干膏收率有较小的差异。既处方中五味药合提板框压滤除杂工艺实验与未处理工艺固型物收率有较小的影响(板框压滤处理后为未板框压滤处理收率的91.8％)。

处方中五味药合提板框压滤除杂工艺实验蛇床子素提取结果表

结果：板框压滤除杂工艺的处理后，(提取以一个处方量计算)共提取得到蛇床子素为0.3039g，与未经板框压滤工艺处理(以一个处方量计算，共提取得到蛇床子素为0.3117g)比较，为后者含量的101.08％。既经板框压滤工艺处理对蛇床子素提取保留率未有较大影响。

处方中五味药合提工艺板框压滤除杂实验总生物碱(以苦参碱计g)提取结果表

结果：板框压滤除杂工艺的处理后，提取总生物碱为未板框压滤工艺提取的总生物碱96.2％。说明处方中五味药合提经板框压滤处理后，对总生物碱的提取工艺未有较明显的影响。

III.不同干燥方法对提取工艺的影响

1、石榴皮提取工艺的真空减压干燥(40℃)处理与常压干燥(60℃)考查研究：

工艺I：以石榴皮提取工艺进行提取，称取打粉后石榴皮药材40g，用水提取，初步得到滤液后，取溶液进行浓缩，用ZK-82B型真空干燥箱中40℃干燥，得干膏，打粉备用。

工艺II：提取工艺同上，初步得到滤液后，取溶液进行浓缩，用干燥箱中鼓风60℃干燥，得干膏，打粉备用。

石榴皮不同干燥工艺实验结果表：

结果：经真空减压干燥工艺的处理后，工艺所得干膏收率与未经处理的工艺样品差别不显著。既真空减压干燥对石榴皮提取工艺处理后，未有明显的差别。

石榴皮不同干燥工艺鞣质含量结果表

结果：石榴皮提取工艺经真空减压干燥(40℃)考查研究实验结果说明，经真空减压干燥(40℃)在对石榴皮提取工艺中未有较大量总鞣质含量变化。

2、处方中五味药提取工艺的真空减压干燥(40℃)处理与常压干燥(60℃)考查研究：

工艺I：按一个处方量称取各味药材量，按最佳提取工艺进行醇水双提，初步得到滤液，滤液再进行浓缩后，用ZK-82B型真空干燥箱中40℃干燥，得干膏，打粉备用。

工艺II：按一个处方量称取各味药材量，提取方法同工艺I，初步得到滤液，滤液再进行浓缩，置60℃烘箱中鼓风干燥，得干膏，打粉备用

五味药不同干燥工艺实验结果表：

结果：经真空减压干燥(40℃)与常压干燥(60℃)的处理后，所得干膏收率有极小的差异。既处方中五味药合提经真空减压干燥(40℃)与常压干燥(60℃)处理，固型物收率没有较明显的影响。

处方中五味药不同干燥工艺蛇床子素提取结果表

结果：经真空减压干燥(40℃)与常压干燥(60℃)处理后，(提取以一个处方量计算)共提取得到蛇床子素为0.3039g，与常压干燥(60℃)处理共提取得到蛇床子素为0.3117g)比较，为后者含量的97.50％。既经真空减压干燥(40℃)工艺处理对蛇床子素提取保留率未有较大影响。

处方中五味药不同干燥工艺总生物碱提取结果表

结果：经真空减压干燥(40℃)提取总生物碱与常压干燥(60℃)的处理后比较，真空减压干燥(40℃)提取总生物碱为常压干燥(60℃)提取总生物碱的96.1％，说明处方中五味药合经真空减压干燥(40℃)对总生物碱的提取工艺未有较明显的影响。

IV.实验小结枛

1.通过对石榴皮提取工艺自然静置除杂研究、离心除杂、板框压滤除杂研究，对提取固形物收率未有明显减少，说明石榴皮提取工艺中，物理学杂质不是主要杂质原因。但从工业生产考虑，综合上面研究结果应考虑以板框压滤为宜。

2.通过对处方中五味药合提工艺采用自然静置除杂研究及离心除杂、板框压滤除杂研究，对提取固形物收率离心除杂效果较好，但对总生物碱有明显减少，同时也说明处方中五味药提取工艺中，物理学杂质同样不为主要杂质原因。但从工业生产考虑，综合上面研究结果应考虑以板框压滤为宜。

4.经真空减压干燥(40℃)与常压干燥(60℃)对石榴皮及处方中五味药提取工艺各考查指标(固形物收率、总鞣质含量、总生物碱、蛇床子素含量)未有明显影响和变化。生产考虑简便适用可行为宜，可以根据生产条件适宜选择。

V.泡腾栓中投入提取物剂量的确定

1、泡腾栓中投入提取物剂量的确定：

方法：先确定样品对多种不同细菌的抑菌杀菌范围，然后确定更小的浓度差，进一步确定确切的MIC及MBC值。综合抑菌实验结果，找出较合适的抑菌浓度下，参考成型工艺要求，确定干膏投量成型。

中间体清膏对细菌及真菌的最低抑菌浓度(MIC)试验结果

注：+：有菌生长，-：无菌生长，以上为3次结果均值。

中间体清膏对支原体的最低抑菌浓度(MIC)试验结果

注：+：有菌生长，-：无菌生长，以上为3次结果均值。

中间体清膏对细菌及真菌的最低杀菌浓度(MBC)试验结果

注：+：有菌生长，-：无菌生长，3次结果均值。

中间体清膏对支原体的最低抑菌浓度(MBC)试验结果

注：+：有菌生长，-：无菌生长，3次结果均值。

结果：通过抑菌实验结果按提取物投料现以240mg/粒使用。

2、考查最佳投药量处方：

3、对制剂处方的pH值考查：

将碳酸氢盐与有机酸按比例称取，溶于10ml水中，测定pH值。对蒸馏水的pH值测定为6.99。

结果：可以得出提取物药粉的投料范围中使用时，其pH值在4～5，而酸碱系统在使用范围内时，其pH值也在4～5。制剂处方量使用是其pH值也在4～5内。因阴道泡腾栓为阴道制剂，其pH值要求使用范围为弱酸性，尽量接近其生理值pH4.0；认为其制剂pH范围定在pH值在4.0～5.0之间合适。本制剂使用处方能满足以上对pH值的要求。

药效学实验：

一、主要药效学试验

本发明中药制剂具有清热燥湿，杀虫止痒，祛腐生肌，收敛的功能。用于妇女湿热带下，症见阴部瘙痒红肿，带下量多，色黄或如豆渣状；霉菌性阴道炎，滴虫性阴道炎，细菌性阴道炎，及宫颈糜烂、淋病见上述证侯者。主要药效学试验结果表明，具有下列重要药理作用：

(1)抑菌作用：体外抗菌作用显示有较强的抑菌与杀菌作用。对金黄色葡萄球菌的MIC为20mg生药/ml，MBC为100mg生药/ml，对大肠埃希菌的MIC为30mg生药/ml，MBC为150mg生药/ml；对乙型溶血性链球菌的MIC为20mg生药/ml，MBC为50mg生药/ml；对粪肠球菌的MIC为80mg生药/ml，MBC为150mg生药/ml；对淋病奈瑟菌的MIC为2mg生药/ml，MBC为2mg生药/ml；对阴道加德纳菌的MIC为20mg生药/ml，MBC为50mg生药/ml；对白色念珠菌的MIC为50mg生药/ml，MBC为50mg生药/ml；对支原体的MIC为1mg生药/ml，MBC为1mg生药/ml。

(2)杀灭阴道滴虫作用：对阴道毛滴虫虫株的最低致死浓度为3.9～7.8mg生药/ml。

(3)对大鼠阴道炎及宫颈炎模型的治疗作用：①本泡腾栓270、135、68mg生药/kg对混合细菌(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌)感染性阴道炎及宫颈炎模型大鼠阴道内给药具有显著的治疗作用，主要表现在治疗后使阴道分泌物细菌培养菌落数目显著减少，对阴道粘膜、子宫颈组织病理损伤程度显著减轻；②本泡腾栓270、135、68mg生药/kg对苯酚胶浆致阴道炎及宫颈炎模型大鼠阴道内给药具有显著的治疗作用，主要表现在治疗后使阴道粘膜及宫颈组织病理损伤程度显著减轻及浸润炎细胞数量显著减少。

(4)抗炎作用：①本泡腾栓200、133、67mg生药/kg于小鼠耳廓搽药，对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀具有显著抑制作用，对炎症肿胀抑制率分别为36.05％、33.72％和32.56％(P均＜0.05)。显示其对渗出性炎症具有显著的抗炎作用；②本泡腾栓270、180、90mg生药/kg，于小鼠注射琼脂部位的皮肤处连续搽药7天，对小鼠琼脂肉芽肿形成具有显著抑制作用，对小鼠肉芽组织湿重的抑制率分别为34.19％、32.63％和24.89％(P均＜0.01)，显示其对增生性炎症具有显著的抗炎作用。抗炎作用有益于减轻或改善阴道炎和宫颈糜烂时炎症的病理改变，加速阴道炎和宫颈糜烂的痊愈。

(5)止痒作用：本泡腾栓400和270mg生药/kg两种剂量均具有显著的止痒作用，可使引起豚鼠瘙痒的磷酸组织胺总用量(致痒阈)显著增加，分别增加86.57％(P＜0.01)和32.84％(P＜0.05)。进一步实验证实，蛇床子的挥发油具有极强的止痒作用，可使引起豚鼠瘙痒的磷酸组织胺总用量(致痒阈)增加117.91％(P＜0.01)。

(6)促进烫伤溃疡愈合作用：本泡腾栓270、180、90mg生药/kg连续10天于小鼠皮肤溃疡面搽药，具有显著的促进烫伤溃疡面愈合作用，可显著缩短烫伤溃疡面痊愈的时间，显示其具有收敛的功能。

(7)止血作用：①缩短出血时间：本泡腾栓270、180、90mg生药/kg连续4天于小鼠背部皮肤及尾部皮肤搽药，可显著缩短小鼠的出血时间，分别缩短37.78％(P＜0.01)、33.26％(P＜0.01)和29.53％(P＜0.05)；②缩短凝血时间：本泡腾栓270、180mg生药/kg连续4天于小鼠背部皮肤搽药，可不同程度缩短小鼠凝血时间(毛细玻管法)，使小鼠的凝血时间分别缩短21.96％(P＜0.05)和11.18％(P＞0.05)。本泡腾栓的止血作用对阴道炎时阴道壁黏膜炎症损伤出血，以及宫颈糜烂时所引起的出血症状均可发挥治疗作用。

(8)镇痛作用：①小鼠扭体法镇痛实验结果：本泡腾栓400、270、135mg生药/kg对小鼠腹部皮肤搽药具有显著镇痛作用，可使小鼠发生扭体反应的潜伏期显著延长及使在20分钟内发生扭体次数显著减少。三种剂量使小鼠发生扭体反应的潜伏期分别延长35.71％(P＜0.05)、52.38％(P＜0.01)和7.14％(P＞0.05)；使小鼠在20分钟内发生扭体次数的降低率分别为74.85％(P＜0.01)、60.65％(P＜0.01)和30.18％(P＜0.05)。②小鼠热板法镇痛实验结果：本泡腾栓400、270、135mg生药/kg对小鼠双后肢膝关节以下至足底部搽药后具有一定的镇痛作用，可使小鼠的痛阈值升高达40％左右。本泡腾栓的镇痛作用可缓解阴道炎及宫颈糜烂时引起的下腹部疼痛与不适感觉症状。

综上所述，本泡腾栓具有抑制杀灭多种细菌和杀灭阴道滴虫作用，对混合细菌及苯酚胶浆诱发的大鼠阴道炎及宫颈炎模型具有显著治疗作用，表明其对阴道炎及宫颈炎的病因和病理具有显著的治疗作用。另对多种症状具有缓解作用，其促进烫伤溃疡愈合作用及抗炎作用，有益于减轻或改善阴道炎和宫颈糜烂时炎症的病理改变，加速阴道炎和宫颈糜烂的痊愈；其止血作用对阴道炎的阴道壁黏膜炎症损伤出血，以及宫颈糜烂时所引起的出血症状可发挥治疗作用；其止痒作用及镇痛作用可缓解阴道炎及宫颈糜烂时引起的外阴瘙痒及下腹部疼痛与不适感觉症状。因此，本泡腾栓治疗阴道炎、宫颈糜烂及淋病具有较好的疗效。

二、急性毒性试验

目的：测定受试药物本泡腾栓对雌性动物阴道内给药的急性毒性，观察中毒反应症状及死亡情况，为临床用药的安全性剂量提供参考资料。

对雌性小鼠在1日内分3次阴道内给予本泡腾栓的最大给药量达3360mg/kg(此剂量为临床成年人拟用剂量的746倍)而不引起动物死亡。表明本泡腾栓对雌性动物阴道内给药的急性毒性小，阴道用药安全。

三、长期毒性试验

经动物(大鼠)长期毒性试验结果表明，以本泡腾栓高、中、低三种剂量(360、180、90mg生药/kg，分别为成年人临床拟用剂量的50倍、25倍和12.5倍)对雌性大鼠连续阴道内给药2个月以及停药观察2周，对大鼠的外观行为、摄食量(饲料消耗量)和体重增长均未见明显毒性影响；对血液学(造血功能，WBC、Lymph、Mid、Gran、Lymph％、Mid％、Gran％、RBC、HGB、MCHC、MCV、MCH、RDW、HCT、PLT、MPV、PDW、PCT、RC)不但未见损伤性毒性影响，而且发现对造血功能具有兴奋性促进作用，主要表现在升高WBC(白细胞数目)及Gran(中性粒细胞数目)，升高RC(网织细胞百分率)，升高MCV(平均红细胞体积)及HCT(红细胞压积)，升高PLT(血小板数目)；对血液生化学(主要为肝脏功能、肾脏功能和代谢功能，ALT、GOT/AST、TP、Alb、ALP、BU、Crea、TCH、TG、GLU、Tbil、CK、Na⁺、K⁺、Cl^-)未见明显毒性影响；对大鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺、胸腺、子宫、卵巢等10种重要器官的重量系数均无明显毒性影响。经与空白对照组比较观察，抗妇炎糜泡腾栓高剂量(360mg/kg)对大鼠的大脑、小脑、垂体、脊髓(胸段)、胸骨(骨髓)、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、膀胱、淋巴结、肾上腺、胸腺、胃、小肠、大肠、乳腺、卵巢、子宫、子宫颈、阴道壁等22种器官组织的形态亦未发现有明显的病理学损害性变化。因此，可以认为本泡腾栓较大剂量及较长疗程阴道给药对大鼠的长期毒性试验无毒，长期阴道用药安全。

四、特殊毒性试验

1.对豚鼠皮肤过敏性试验结果：本泡腾栓剂在激发接触后6、24、48、72小时均未见豚鼠皮肤出现溃烂、红斑或水肿；未见炎细胞浸润、水疱、溃疡、充血等病变。结果表明本泡腾栓对豚鼠皮肤外用接触皮肤后无致敏作用。

2.对兔阴道用药的刺激性试验结果：本泡腾栓高剂量组：990、330、55mg生药/kg(每天分1～3次阴道内塞入)。每天给药，连续2周(14天)。(1)症状观察：在以本泡腾栓高、中、低三种剂量及基质(高剂量)连续14天对实验兔阴道给药的时程中，均未见对实验兔出现明显中毒或明显不适的全身症状，动物无死亡；也未见明显局部刺激反应。各组实验兔无阴道刺激疼痛症状(后肢活动异常)，未见流泪及眼分泌物，阴道口未见充血、水肿，阴道口无分泌物。(2)阴道壁黏膜及子宫颈黏膜病理检查结果：以本泡腾栓高、中、低三种剂量及基质(高剂量)连续14天对实验兔阴道给药后，其阴道黏膜及子宫颈黏膜经组织切片和观察检查结果表明，对实验兔阴道黏膜及子宫颈黏膜无明显病理形态学损伤变化。

3.对兔皮肤的刺激性试验：在兔破损皮肤试验中，以本泡腾栓高、中、低三种剂量(1.5g/kg、1.0g/kg、0.5g/kg)对兔破损皮肤涂搽3次、2次、1次后，与涂搽泡腾栓基质的对侧皮肤比较，在1～5天内，各组兔皮肤均出现不同程度的红斑和水肿现象，尤其以皮肤损伤后24～48小时内较为明显，根据皮肤刺激性强度评价标准属于中度刺激性。各剂量组破损皮肤的红斑和水肿在2天(48小时)后逐步减轻，3天后明显消退，5天后基本痊愈。但本泡腾栓各剂量组在不同时间(1～5)天对皮肤的刺激性强度，分别与涂搽泡腾栓基质的对侧皮肤比较，经统计学(t检验)处理，其差异均无统计学意义，P均＞0.05。说明本泡腾栓高、中、低三种剂量组兔破损皮肤在1～5内天出现的红斑和水肿现象是由于皮肤损伤引起炎症反应所致，而不是用药所致。结果显示本泡腾栓对兔破损皮肤涂搽后未见明显的刺激性作用。

临床资料：

1、一般资料

30例病例均来源于贵阳中医学院第一附属医院妇科门诊，年龄22～49岁，平均38岁，病程10天～2个月。细菌性阴道炎10例，滴虫性阴道炎8例，霉菌性阴道炎7例，宫颈糜烂5例。

2、治疗方法

2.1药物：

本阴道泡腾栓是由贵州汉方制药有限公司研制的外用剂型，由蛇床子、苦参、黄柏等7味中药及贵州省民族药组成，具有清热燥湿、燥湿止带、杀虫止痒及收敛的功效，主要用于妇女细菌性、滴虫性、霉菌性阴道炎及宫颈糜烂等之赤白带下、量多有臭味、外阴瘙痒等。

2.2方法：

取膀胱截石位，常规消毒外阴，铺洞巾，5％碘伏棉球备用，手持卵圆钳夹5％碘伏棉球轻轻进入阴道底达宫颈口做旋转擦洗宫颈及阴道壁数次，将阴道分泌物擦洗干净后，用阴道扩张器，充分暴露子宫颈，用干棉球吸干宫颈及阴道壁四周余液，取药1粒(1.8g)直接送入阴道深部后穹隆处。每晚一粒。在治疗过程中嘱患者，勤换内裤，注意个人卫生。7日为一疗程，阴道炎患病时间短者，1疗程即可治愈，患病时间长者需2个疗程。宫颈糜烂需2～3个疗程。

3、治疗效果

3.1疗效标准：

参照《实用中西医结合妇科学》和《中医内、外妇儿科病证诊断疗效标准》中带下病的诊断标准，根据临床表现，常规采集病史，妇科常规检查和实验室白带常规检查，白带培养，确诊为带下病病人，依据治疗前后白带检验结果及有关体征，两个疗程后进行疗效判断。痊愈：临床症状全部消失，分泌物正常，病原体阴性。有效：临床症状基本或明显减轻，分泌物正常，病原体阴性或阳性。无效，临床症状改善不明显，分泌物基本不正常，病原体阳性。

3.2结果：

30例治愈18例(60％)，有效9例(30％)，2例无效(7％)，1例中途失去联络(3％)，总有效率达90％。多数患者治疗1～2个疗程获效。治疗过程中未见有任何刺激作用及毒副反应。

与现有技术相比，本发明以苦参和蛇床子为君药，辅以黄柏、博落回及红土茯苓的功效，并佐以石榴皮和枯矾，对妇科炎症治疗的有效率可达90％以上，无任何刺激作用及毒副作用，是一种安全可靠的纯中药制剂。其中，本发明所提供的泡腾栓外用中药制剂在综合了泡腾片和栓剂的优点的同时，还具有如下优点：

1、本制剂处方为中药阴道外用，对剂型选择时首选普通栓剂，但考虑阴道制剂的pH值条件要求，其pH值要求使用范围为弱酸性，尽量接近人体阴道生理值(pH4.0)，以便适应人体的顺应性，因此考虑使用有酸碱系统的泡腾栓制备成型工艺。

2、聚乙二醇是在体温下缓慢溶解于体液中的水溶性基质，故基质不需要制成熔融型，实际上以聚乙二醇混合物制备的栓剂其熔点往往高于体温。此性质不仅可使栓剂塞入腔道后，释药速度加快，而以聚乙二醇作基质的阴道栓能与水混溶，具有足够的硬度，有利于病人的塞入。由于聚乙二醇栓在溶解后能同粘膜分泌液混合，故不象可可豆栓及泡腾片那样会被排掉，并对阴道粘膜有刺激性。

3、阴道泡腾栓是在基质中加入了酸碱系统，在使用过程中具有定位给药，直接接触病灶部位，遇体液快速崩解呈泡沫状、分散均匀、无聚集的颗粒残留，并且吸收完全，不伤黏膜，并与感染病灶部位充分接触，在较长时间保持药物浓度，维持足够有效的治疗时间，迅速起到显著疗效，从而达到更加有效的治疗效果，使治愈率和有效率显著提高，患者顺应性好，具有可自行给药、使用方便、安全可靠、易于掌握使用、便于包装和储存等优点。

4、处方中加入表面活性剂既增强了泡腾作用，又促进了各种原辅料在基质中的分散，使药栓的外观良好，药物释放均匀，提高了药物的治疗效果，故溶解速度和吸收率均明显优于普通栓剂。

5、用聚乙二醇做基质包裹了泡腾剂中的酸碱系统，使药物避免了直接和酸碱的反应，从而增加了中药提取物及成品的稳定性，保证了药效。同时又有水溶性好，无刺激性，易于洗脱等优点。

6、本产品稳定，通过影响因素试验、加速试验及长期稳定性试验的研究而证实，本品质量控制中的有效成分蛇床子素、苦参碱及氧化苦参碱、小檗碱等都很稳定，本品的pH值、发泡量、融变时限、微生物限度检查、重金属及砷盐限度检查等指标均符合05版中国药典的有关规定与要求，通过数理统计计算有效期为2年以上。故可在常温条件下及50℃下放置，不需要冰箱保存，也不必担心天暖时栓剂的软化，贮存方便，有利于贮存及运输。而泡腾片的保存需要防潮避高温，以保证成品的质量和稳定性；贮存过程中易发生变质，条件要求较高，保存期相对较短等。

7、泡腾栓在企业的一般栓剂生产线均可生产，制备工艺相对简单，制剂成型条件比泡腾片要求低，易于工业化大生产及质量控制。而泡腾片在生产过程中条件有特殊要求，必须严格防止水分的吸收，否则容易吸湿，压片时出现粘冲现象，制粒与压片车间要控制空气的温度与湿度(相对湿度为20％～25％，温度为18～21℃)，这就需要运用一系列设备才能达到这一条件，故条件要求较苛刻。

具体实施方式

实施例1：苦参200g、蛇床子150g、黄柏150g、博落回120g、红土茯苓300g、石榴皮100g、枯矾30g、聚乙二醇-2000 1028g、聚乙二醇-4000 115g、酒石酸200g、碳酸氢钠200g、制剂量1％的吐温-80。

a、浸膏干粉的制备：

取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用12倍量水浸泡6小时，加热回流提取6小时，得蛇床子挥发油、水提取液合药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣混合，用8倍量的70％的乙醇浸泡过夜，在70℃下提取3次，每次1小时，提取液趁热用400目滤布的板框压滤机过滤，合并得滤液1备用。所得药渣在100℃用6倍量水提取1次，提取1小时。提取液趁热用400目滤布的板框压滤机过滤，所得滤液与蛇床子提取液合并得滤液2，合并滤液1合滤液2，减压回收乙醇，减压浓缩成相对密度为1.10(60℃测)的清膏1备用。石榴皮打粗粉，用8、6、6倍水，提取3次，每次0.5小时，提取液趁热过滤，合并，减压浓缩成相对密度为1.10(60℃测)的清膏2备用。合并清膏1和清膏2，在60℃烘箱中干燥后，打成细粉，过100目筛，加入过150目筛的枯矾极细粉，混匀，得浸膏干粉，置干燥器中密封备用。

b、制剂成型：取聚乙二醇在60℃加热溶化后，加入吐温-80搅拌均匀，再加入酒石酸和浸膏干粉，搅拌均匀后加热至60℃熔化，温度控制在55～60℃，加入碳酸氢钠搅拌均匀熔化后，温度控制在55～60℃，滤网50目过滤后，最后再加入蛇床子挥发油混匀，趁热灌装栓模即得泡腾栓剂，封口、印批号、聚乙烯复合膜包装(加入干燥剂、指套等)、外包装印批号、盒装即得泡腾栓剂。

药品名：抗妇炎糜泡腾栓

用法用量：先冲洗患部后，洗净手及外阴部，取平卧位或适当体位，戴上消毒指套用手将药粒送入阴道深部后穹隆处。每晚一粒，严重者可早晚各放一粒，或遵医嘱。七日为一疗程。

禁忌：经期、孕期妇女禁用。

注意事项：1、本品为外用药，禁止内服。

2、治疗期间忌房事。

实施例2：苦参50g、蛇床子300g、黄柏150g、博落回250g、红土茯苓450g、石榴皮100g和枯矾150g、聚乙二醇-4000 800g、柠檬酸100g、碳酸氢钾300g、制剂量0.5％的吐温-80。

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，蛇床子用水提取挥发油，挥发油和水提取液备用；苦参、黄柏、博落回、红土茯苓和蛇床子药渣用5倍量50％的乙醇浸泡过夜，然后在80℃提取4次，每次2小时，所得提取液用200目滤布趁热过滤，合并滤液得滤液1备用，所得药渣在70℃用10倍量水提取1次，所得提取液和蛇床子水提取液合并后用200目滤布趁热过滤，得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.00的清膏1备用；取石榴皮打粗粉，用10倍量水提取1.5小时，提取液趁热过滤，滤液减压浓缩成60℃相对密度为1.00的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，在50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过80目筛，加入枯矾细粉，混合均匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存；

b、制剂成型：取聚乙二醇加热溶化后加入吐温-80搅拌均匀，再加入柠檬酸和浸膏干粉，搅拌均匀后加热至80℃熔化，温度控制在70～80℃加入碳酸氢钾搅拌均匀，熔化后，100目滤网过滤后再加入蛇床子挥发油搅拌均匀，趁热灌装栓模即得泡腾栓剂。

实施例3：苦参100g、蛇床子350g、黄柏200g、博落回250g、红土茯苓500g、石榴皮150g和枯矾100g、聚乙二醇-6000 3000g、苹果酸400g、碳酸钠150g、制剂量2％的吐温-80。

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用10倍量水浸泡6小时，加热回流提取6小时，得蛇床子挥发油、水提取液和药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣合并，用8倍量90％的乙醇浸泡过夜，在70℃提取2次，每次1小时，提取液300目滤布趁热滤过，合并得滤液1备用，所得药渣在80℃用6倍量水提取2次，提取液300目滤布趁热过滤，所得滤液和蛇床子水提取液合并得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.20的清膏1备用；石榴皮打粗粉，用5倍量水提取3次，每次0.5小时，合并提取液趁热过滤，减压浓缩成60℃相对密度为1.20的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过100目筛，加入过100目筛的枯矾细粉，混匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存；

b、制剂成型：取聚乙二醇加热溶化后加入吐温-80搅拌均匀，再加入苹果酸和浸膏干粉，搅拌均匀后加热至70℃熔化，温度控制在70℃，加入碳酸钠搅拌均匀，80目过滤后再加入蛇床子挥发油搅拌均匀，趁热灌装栓模即得泡腾栓剂。

实施例4：苦参150g、蛇床子400g、黄柏150g、博落回400g、红土茯苓100g、石榴皮300g和枯矾50g

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用10倍量水浸泡6小时，加热回流提取5小时，得蛇床子挥发油、水提取液和药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣合并，用7倍量80％的乙醇浸泡过夜，在70℃提取2次，每次1.5小时，提取液400目滤布趁热滤过，合并得滤液1备用，所得药渣在90℃用7倍量水提取3次，提取液400目滤布趁热过滤，所得滤液和蛇床子水提取液合并得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.10的清膏1备用；石榴皮打粗粉，用7倍量水提取2次，每次1小时，合并提取液趁热过滤，减压浓缩成60℃相对密度为1.10的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过150目筛，加入过100目筛的枯矾细粉，混匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存。

b、制剂成型：浸膏干粉中加入辅料，按常规制剂工艺制成栓剂。

实施例5：苦参300g、蛇床子50g、黄柏400g、博落回150g、红土茯苓600g、石榴皮30g和枯矾150g

a、浸膏干粉的制备：取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用12倍量水浸泡6小时，加热回流提取6小时，得蛇床子挥发油、水提取液和药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣合并，用9倍量75％的乙醇浸泡过夜，在60℃提取4次，每次0.5小时，提取液450目滤布趁热滤过，合并得滤液1备用，所得药渣在80℃用8倍量水提取3次，提取液450目滤布趁热过滤，所得滤液和蛇床子水提取液合并得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.10的清膏1备用；石榴皮打粗粉，用8倍量水提取3次，每次1.5小时，合并提取液趁热过滤，减压浓缩成60℃相对密度为1.10的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过80目筛，加入过80目筛的枯矾细粉，混匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存。

b、制剂成型：浸膏干粉中加入辅料，按常规制剂工艺制成泡腾片剂。

Claims

1. 一种治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：按照重量份计算，它是由中药原料苦参5～50份、蛇床子5～40份、黄柏5～40份、博落回5～30份、红土茯苓10～60份、石榴皮3～30份和枯矾1～15份制备而成。

2. 按照权利要求1所述治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：按照重量份计算，它是由中药原料苦参20份、蛇床子15份、黄柏15份、博落回12份、红土茯苓30份、石榴皮10份和枯矾3份制备而成。

3. 按照权利要求1或2所述治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：所述外用中药制剂为泡腾栓剂、泡腾剂、栓剂、泡腾片剂、凝胶剂、膜剂或洗剂。

4. 按照权利要求3所述治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：所述泡腾栓剂是由中药原料和辅料聚乙二醇80～300份、有机酸10～40份、碳酸氢盐或碳酸盐10～40份以及制剂量0.5％～2％的吐温80制备而成。

5. 按照权利要求4所述治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：

所述泡腾栓剂是由中药原料苦参20份、蛇床子15份、黄柏15份、博落回12份、红土茯苓30份、石榴皮10份、枯矾3份和辅料聚乙二醇114.3份、有机酸20份、碳酸氢盐20份以及制剂量1％的吐温80制备而成。

6. 按照权利要求4或5所述治疗妇科炎症的外用中药制剂，其特征在于：所述聚乙二醇为聚乙二醇-2000或聚乙二醇-4000；所述有机酸为柠檬酸、酒石酸、富马酸或苹果酸；所述碳酸氢盐为碳酸氢钠、碳酸钠或碳酸氢钾。

7. 权利要求1或2所述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法，其特征在于：

8. 权利要求4或5所述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法，其特征在于：

9. 按照权利8所述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法，其特征在于：所述制剂成型工艺为：取聚乙二醇加热溶化后加入吐温-80搅拌均匀，再加入有机酸和浸膏干粉，搅拌均匀后加热至30～80℃熔化，温度控制在30～80℃加入碳酸氢盐搅拌均匀，30～100目过滤后再加入蛇床子挥发油搅拌均匀，趁热灌装栓模即得泡腾栓剂。

10. 按照权利要求7-9任一所述治疗妇科炎症的外用中药制剂的制备方法，其特征在于：所述浸膏干粉的制备为：取枯矾打成细粉备用，取蛇床子用12倍量水浸泡6小时，加热回流提取6小时，得蛇床子挥发油、水提取液和药渣；苦参、黄柏和红土茯苓打最粗粉，与博落回和蛇床子药渣合并，用5～10倍量50％～90％的乙醇浸泡过夜，在50℃～80℃提取1～4次，每次0.5～2小时，提取液200～450目滤布趁热滤过，合并得滤液1备用，所得药渣在70℃～100℃用5～10倍量水提取1～3次，提取液200～450目滤布趁热过滤，所得滤液和蛇床子水提取液合并得滤液2，合并滤液1和滤液2，减压回收乙醇，浓缩成60℃相对密度为1.00～1.20的清膏1备用；石榴皮打粗粉，用5～10倍量水提取1～4次，每次0.5～1.5小时，合并提取液趁热过滤，减压浓缩成60℃相对密度为1.00～1.20的清膏2备用，合并清膏1和清膏2，50～70℃烘箱中干燥后，打成细粉，过80～200目筛，加入过80～200目筛的枯矾细粉，混匀，即得浸膏干粉，置干燥器中密封保存。