CN101528726A

CN101528726A - 用作s1p1/edg1受体激动剂的噻吩衍生物

Info

Publication number: CN101528726A
Application number: CNA2007800333953A
Authority: CN
Inventors: 马丁·博利; 大卫·莱曼; 博里斯·马蒂斯; 克劳斯·米勒; 奥利弗·内勒; 比特·斯蒂内; 约尔格·韦尔克
Original assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Current assignee: Actelion Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2006-09-07
Filing date: 2007-07-10
Publication date: 2009-09-09
Anticipated expiration: 2027-07-10
Also published as: ES2393002T3; HK1134294A1; PT2069322E; IL197395A; ZA200902391B; IL197395A0; BRPI0716482A2; WO2008029306A2; RU2009112536A; EP2069322A2; MA30765B1; MY149869A; KR101409560B1; CA2661102C; MX2009002227A; EP2069322B1; JP2010502693A; KR20090059144A; US20100048648A1; JP5250555B2

Abstract

本发明涉及式(I)的新噻吩衍生物、其制备及其作为医药活性化合物的用途。该等化合物尤其可作为免疫调节剂。

Description

用作S1P1/EDG1受体激动剂的噻吩衍生物

技术领域

本发明关于式(I)的S1P1/EDG1受体激动剂及其在医药组合物的制备中作为活性成份的用途。本发明亦关于相关方面，其包括制备该等化合物的方法、包含式(I)化合物的医药组合物及其单独或与其它活性化合物或治疗组合作为改善血管功能的化合物及作为免疫调节剂的用途。

背景技术

人类免疫系统用来保护人体以对抗可引起感染或疾病的外来微生物及物质。复杂的调节机制可确保免疫响应靶向对抗入侵物质或有机体而并非对抗宿主。于一些情形下，该等控制机制未经调节且可能产生自身免疫响应。若不控制炎性响应则可能造成严重的器官、细胞、组织或关节损伤。使用目前的治疗，通常会抑制整个免疫系统且亦会严重危害身体对感染的响应能力。属于此类的典型药物包括硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、环孢素或胺甲蝶呤。当在长期治疗中使用可减轻炎症并抑制该免疫响应的肾上腺皮质类固醇时，其可能引起副作用。尽管非类固醇类的抗炎药(NSAID)可减轻疼痛及炎症，然而其呈现出相当大的副作用。替代治疗包括使用可激活或阻断细胞因子信号传导的药剂。

具有免疫调节性能、不会损坏免疫响应且具有减轻副作用的经口活性化合物会显著改良目前对未受控炎性疾病的治疗。

在器官移植领域，必须抑制宿主的免疫响应以防止器官排斥反应。即使在器官移植接受者服用免疫抑制药时，其亦会经历某一排斥反应。排斥反应最常发生在器官移植后的前几周，但移植后数月甚至数年内亦可出现排斥反应发作。通常用多达三或四种药物的组合来提供最大程度的保护抑制排斥反应，同时使副作用降至最小。目前用于治疗移植器官排斥反应的标准药物在T-型或B-型白血球活化中会干扰各个细胞内通路。此等药物的实例为：干扰细胞因子释放或信号传导的环孢素、达克珠单抗(daclizumab)、巴利昔单抗(basiliximab)、依维莫司(everolimus)、或FK506；抑制核苷酸合成的硫唑嘌呤或来氟米特(leflunomide)；或15-脱氧精胍菌素，即一种白细胞分化的抑制剂。

广泛免疫抑制治疗的有益效果可体现出其效能；然而，该等药物产生的全身免疫抑制可能降低免疫系统对感染及恶性肿瘤的防御。此外，标准免疫抑制药通常以高剂量使用从而会造成或加速器官损伤。

发明内容

本发明提供式(I)的新颖化合物，其G蛋白耦合受体S1P1/EDG1的激动剂并具有强力且长期稳定的免疫调节效果，此效果藉由减少循环及浸润T-及B-淋巴细胞的数目而达成，此并不影响其成熟、记忆或扩增。由S1P1/EDG1激动引起的循环T-/B-淋巴细胞的减少(以及可能观察到的涉及S1P1/EDG1活化的内皮细胞层功能的改良)使此等化合物可用于处理非受控炎性疾病且可用于改良血管功能。

本发明化合物可单独使用或与抑制T-细胞活化的标准药物组合使用以提供一种与标准免疫抑制疗法相比具有降低的感染倾向的新免疫调节疗法。此外，本发明化合物可与减少剂量的传系统免疫抑制疗法结合使用，以一方面提供有效免疫调节活性同时另一方面减少与较高剂量标准免疫抑制药物相关的最终器官损伤。与S1P1/EDG1活化有关的经改良内皮细胞层功能的观察结果提供化合物改良血管功能的附加优点。

人类S1P1/EDG1受体的核苷酸序列及胺基酸序列已为该项技术所习知且公布于(例如)：Hla、T.及Maciag的T.J.Biol Chem.265(1990)，9308-9313；WO 91/15583(1991年10月17日公开)；WO 99/46277(1999年9月16日公开)中。式(I)化合物的效力及效能分别使用GTPγS分析测定EC₅₀值且藉由量测经口投与后大鼠中的循环淋巴细胞来评价(参见实例)。

实施方式

除非另外说明，否则在上文及下文中所用通用术语在本揭示内容内较佳具有以下含义：

当化合物、盐、医药组合物、疾病及诸如此类以复数形式使用时，此亦指一单一化合物、盐或诸如此类。

应了解，在上文或下文中任何对式(I)化合物的提及皆应理解为亦指式(I)化合物的盐、尤其医药上可接受的盐(若适合且方便)。

术语C_1-5-烷基可单独或与其它基团结合使用，其意指具有1-5个碳原子的饱和、具支链或较佳直链基团。C_1-5-烷基的较佳实例为甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基及正戊基。

术语C_1-4-烷基可单独或与其它基团结合使用，其意指具有1-4个碳原子(较佳1-3个碳原子，即C_1-3-烷基)的饱和、具支链或较佳直链基团。C_1-4-烷基的较佳实例为甲基、乙基及正丙基。

同样，术语C_2-5-烷基可单独或与其它基团结合使用，其意指具有2-5个碳原子的饱和、具支链或较佳直链基团。C_2-5-烷基的较佳实例为乙基、正丙基、正丁基、异丁基、正戊基及异戊基。

术语C_1-5-烷氧基可单独或与其它基团结合使用，其意指R-O基团，其中R为C_1-5-烷基。

术语C_1-4-烷氧基可单独或与其它基团结合使用，意指R-O基团，其中R为C_1-4-烷基。C_1-4-烷氧基的较佳实例甲氧基、乙氧基、丙氧基及异丙氧基。

术语C_2-5-烷氧基可单独或与其它基团结合使用，其意指R-O基团，其中R为C_2-5-烷基。

术语卤素意指氟、氯、溴或碘，较佳为氟或氯。

盐较佳式(I)化合物的医药上可接受的盐。

术语″医药上可接受的盐″指无毒、无机或有机酸及/或碱加成盐，文献：例如″Salt selection for basic drugs″，Int.J.Pharm.(1986)，33，201-217。

式(I)化合物可包含一或多个立体或不对称中心，例如一或多个不对称碳原子。除非另有说明，否则在双键或环上的取代基可以顺-(＝Z-)或反(＝E-)形式存在。因此，式(I)化合物可作为立体异构体的混合物或较佳作为纯立体异构体存在。立体异构体的混合物可以熟悉该项技术者习知的方式分离。

i)本发明关于式(I)的新颖噻吩化合物，

式(I)

其中

A代表*-CO-CH₂CH₂-、*-CO-CH＝CH-、

其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键；

R¹代表C_2-5-烷基；

R²代表氢、甲基或乙基；

R³代表氢、C_1-4-烷基、C_1-4-烷氧基或卤素；

R⁴代表氢、C_1-4-烷基、C_1-4-烷氧基、卤素、三氟甲基或三氟甲氧基；

R⁵代表氢、羟基-C_1-5-烷基、2，3-二羟丙基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷基、-CH₂-(CH₂)_n-NHSO₂R⁵¹、-(CH₂)_nCH(OH)-CH₂-NHSO₂R⁵¹、-CH₂-(CH₂)_n-NHCOR⁵²、-(CH₂)_nCH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²、-CH₂-(CH₂)_n-CONR⁵³R⁵⁴、-CO-NHR⁵³、1-(3-羧基-氮杂环丁基)-2-乙酰基、1-(2-羧基-吡咯啶基)-2-乙酰基、1-(3-羧基-吡咯啶基)-2-乙酰基、1-(3-羧基-氮杂环丁基)-3-丙酰基、1-(2-羧基-吡咯啶基)-3-丙酰基、1-(3-羧基-吡咯啶基)-3-丙酰基、羟基、C_1-5-烷氧基、羟基-C_2-5-烷氧基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷氧基、2，3-二羟基丙氧基、2-羟基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH₂-(CH₂)_m-NHSO₂R⁵¹、-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHSO₂R⁵¹、-OCH₂-(CH₂)_m-NHCOR⁵²、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²；

R⁵¹代表C_1-3-烷基、甲基胺基、乙基胺基、或二甲基胺基；

R⁵²代表羟甲基、2-羟基乙基、2-羟基-1-羟甲基-乙基、或2，3-二羟丙基；

R⁵³代表氢、C_1-3-烷基、2-羟基乙基、2-羟基-1-羟甲基-乙基、2，3-二羟丙基、羧甲基、1-(C_1-5-烷基羧基)甲基、2-羧乙基、或2-(C_1-5-烷基羧基)乙基；

R⁵⁴代表氢或甲基；

m代表整数1或2；

n代表0、1、或2；且

R⁶代表氢、C_1-4-烷基或卤素；

及其盐。

ii)本发明一特定实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

(其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键)，及其盐。

iii)本发明另一特定实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

(其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键)，及其盐。

iv)本发明再一特定实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

(其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键)，及其盐。

v)本发明另一特定实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

(其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键)，及其盐。

vi)本发明另一特定实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

及其盐。

vii)本发明再一特定实施例关于实施例i)至vi)中任一个的噻吩衍生物(其中R¹代表正丙基或异丁基)及其盐。

viii)本发明再一特定实施例关于实施例i)至vii)中任一个的噻吩衍生物(其中R²代表氢或甲基)及其盐。

ix)本发明的一较佳实施例关于实施例i)至vii)中任一个的噻吩衍生物(其中R²代表氢)及其盐。

x)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表甲氧基，且R⁴与R⁶代表氢)及其盐。

xi)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表氢，R⁴代表甲基、乙基或甲氧基，且R⁶代表甲基、乙基或卤素)及其盐。

xii)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表氢，且R⁴与R⁶代表甲基)及其盐。

xiii)本发明的一特定较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表氢，R⁴代表甲基，且R⁶代表乙基)及其盐。

xiv)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表氢，R⁴代表甲氧基，且R⁶代表氯原子)及其盐。

xv)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至ix)中任一个的噻吩衍生物(其中R³代表氢，R⁴代表甲基，且R⁶代表氯原子)及其盐。

xvi)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至xv)中任一个的噻吩衍生物(其中R⁵代表2，3-二羟丙基、-CH₂-(CH₂)_n-NHCOR⁵²、-(CH₂)_nCH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²、羟基、羟基-C_2-5-烷氧基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷氧基、2，3-二羟基丙氧基、2-羟基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH₂-(CH₂)_m-NHCOR⁵²或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²)及其盐。

xvii)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至xv)中任一个的噻吩衍生物(其中R⁵代表羟基、羟基-C_2-5-烷氧基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷氧基、2，3-二羟基丙氧基、2-羟基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH₂-(CH₂)_m-NHCOR⁵²、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²)及其盐。

xviii)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至xv)中任一个的噻吩衍生物(其中R⁵代表3-羟基-2-羟甲基-丙氧基、2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²)及其盐。

xix)本发明另一较佳实施例关于实施例i)至xv)中任一个的噻吩衍生物(其中R⁵代表2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²，其中R⁵²代表羟甲基)及其盐。

xx)本发明一尤其较佳实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中A代表

其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键；R¹代表正丙基或异丁基；R²代表氢；R³代表氢或甲氧基；R⁴代表氢、甲基、乙基或甲氧基；R⁵代表3-羟基-2-羟甲基-丙氧基、2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²；且R⁶代表氢、甲基、乙基或氯；及其盐。

xxi)本发明另一尤其较佳实施例关于实施例i)的噻吩衍生物，其中

A代表*-CO-CH₂CH₂-、*-CO-CH＝CH-、

其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键；

R¹代表C_2-5-烷基；

R²与R³二者皆代表氢；

R⁴代表C_1-4-烷基；

R⁵代表羟基、2，3-二羟基丙氧基、或

-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²；

R⁵²代表羟甲基；且

R⁶代表C_1-4-烷基；

及其盐。

xxii)式(I)的尤其较佳噻吩化合物以下化合物：

(2R)-N-(3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-N-(3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2S)-N-(3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇，

(2S)-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇，

(2R)-2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺，

(2S)-2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺，

(2R)-2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2-乙基-6-甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺，及

(2S)-2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2-乙基-6-甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺，

及该等化合物的盐。

xxiii)式(I)的其它尤其较佳噻吩化合物以下化合物：

2-羟基-N-((2S)-2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺，

N-((2S)-3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

(2R)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇，

(2S)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇，

N-((2R)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，及

N-((2S)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺，

及该等化合物的盐。

式(I)化合物及其医药上可接受的盐可用作(例如)呈用于经肠或非经肠投与的医药组合物形式的医药。

该等医药组合物的制备可以任何业内熟练技术者熟悉的方式(参见例如Mark Gibson编辑的Pharmaceutical Preformulationand Formulation，IHS Health Group，Englewood，CO，USA，2001；Remington的The Science and Practice of Pharmacy，第20版，Philadelphia College of Pharmacy and Science)藉由将所述式(I)化合物或其医药上可接受的盐(视情况可与其它具治疗价值的物质组合)连同具有适宜、无毒、惰性、医药上可兼容的固体或液体载剂材料及(若需要)常用医药佐剂制成盖仑制剂投与形式而达成。

该等包含式(I)化合物的医药组合物可用于预防及/或治疗与经活化免疫系统相关的疾病或病症。

该等疾病或病征选自由以下组成的群：移植器官、组织或细胞的排斥反应；由移植引起的移植物抗宿主疾病；包括类风湿性关节炎在内的自身免疫症候群；全身性红斑狼疮；抗磷脂症候群；桥本氏甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis)；淋巴细胞性甲状腺炎；多发性硬化；重症肌无力；I型糖尿病；葡萄膜炎；巩膜外层炎；巩膜炎；川畸氏病(Kawasaki′s disease)、葡萄膜视网膜炎；后葡萄膜炎；与贝切特氏病(Behcet′s disease)有关的葡萄膜炎；眼色素层脑膜炎症候群；变应性脑脊髓炎；慢性同种异体移植血管病变；感染后自身免疫疾病，其包括风湿热及感染后肾小球肾炎；炎症性及过度增生皮肤疾病；干癣；干癣性关节炎；特应性皮肤炎；肌病；肌炎；骨髓炎；接触性皮炎；湿疹性皮炎；皮脂溢性皮炎；扁平苔癣；天疱疮；大疱性类天疱疮；大疱性表皮松解；风疹；血管性水肿；血管炎；红斑；皮肤嗜酸性粒细胞增多症；痤疮；硬皮症；斑秃；角膜结膜炎；春季结膜炎；角膜炎；疱疹性角膜炎；角膜上皮营养不良；角膜白斑；眼天疱疮；莫伦氏(Mooren)溃疡；溃疡性角膜炎；巩膜炎；格雷夫斯氏(Graves)眼病；伏格特-小柳-原田三氏(Vogt-Koyanagi-Harada)症候群；类肉瘤病；花粉过敏性疾病；可逆阻塞性气道疾病；支气管哮喘；变应性哮喘；内源性哮喘；外源性哮喘；粉尘性哮喘；慢性或顽固性哮喘；迟发性哮喘及气道过度反应；细支气管炎；支气管炎；子宫内膜异位；睾丸炎；胃溃疡；局部缺血性肠疾病；炎性肠疾病；坏死性小肠结肠炎；热烧伤伴随的肠损伤；腹部疾病；直肠炎；嗜酸细胞性胃肠炎；肥大细胞增多症；克隆氏病(Crohn′s disease)；溃疡性结肠炎；由局部缺血病及血栓症引起的血管损伤；动脉粥样硬化；脂肪心；心肌炎；心脏梗塞；主动脉炎症候群；病毒疾病恶病质；血管血栓症；偏头痛；鼻炎；湿疹；间质性肾炎；IgA-诱导的肾病；古德帕斯彻氏(Goodpasture)症候群；溶血性尿毒症症候群；糖尿病性肾病变；肾小动脉血管球硬化；肾小球肾炎；肾小管间质性肾炎；间质性膀胱炎；多发性肌炎；格-巴二氏(Guillain-Barré)症候群；美尼尔氏(Meniere)病；多发性神经炎；多神经炎；脊髓炎；单神经炎；神经根病；甲状腺机能亢进；巴塞多氏(Basedow)病；甲状腺毒症；单纯红细胞再生障碍；再生障碍性贫血；再生不良性贫血；特发性血小板减少性紫斑症；自身免疫溶血性贫血；自身免疫性血小板减少症；粒细胞缺乏症；恶性贫血；巨幼红细胞性贫血；红细胞发生不能；骨质疏松症；纤维化肺；特发性间质性肺炎；皮肌炎；普通白斑病；普通鳞癣；光过敏敏感性；皮肤T细胞淋巴瘤；结节性多动脉炎；亨廷顿氏(Huntington′s)舞蹈病；西登哈姆氏(Sydenham)舞蹈病；心肌病；心肌炎；硬皮病；韦格纳氏(Wegener)肉芽肿；薛格连氏(Sjogren′s)症候群；肥胖症；嗜酸性筋膜炎；牙龈、牙周膜、牙槽骨、骨质牙的损伤；男性型脱发或老年性脱发；肌肉萎缩症；脓皮病；赛杂瑞氏(Sezary)症候群；垂体炎；慢性肾上腺机能不全；阿狄森氏(Addison)症候群；保存时出现器官的局部缺血-再灌注损伤；内毒素休克；假膜性结肠炎；由药物或辐射引起的结肠炎；局部缺血性急性肾功能不全；慢性肾功能不全；肺癌；淋巴源性恶性肿瘤；急性或慢性淋巴细胞性白血病；淋巴瘤；肺气肿；白内障；铁质沉着；色素性视网膜炎；老年性黄斑变性；玻璃体瘢痕；角膜碱烧伤；皮炎红斑；大疱性皮炎；水泥皮炎；龈炎；牙周炎；败血病；胰腺炎；周边动脉疾病；癌发生；实体癌瘤；癌瘤转移；低气压病；自身免疫性肝炎；原发性胆汁性肝硬化；硬化性胆管炎；部分肝切除；急性肝坏死；肝硬化；酒精性肝硬化；肝衰竭；暴发性肝功能衰竭；迟发性肝衰竭；及″急慢性″肝衰竭。

可利用式(I)化合物治疗及/或预防的较佳疾病或病症选自由下列组成的群：移植器官(例如肾、肝、心脏、肺、胰、角膜及皮肤)的排斥反应；由干细胞移植引发的移植物抗宿主疾病；自身免疫症候群，包括类风湿性关节炎、多发性硬化、炎性肠疾病(例如克隆氏病及溃疡性结肠炎)、牛皮癣、干癣性关节炎、甲状腺炎(例如桥本氏甲状腺炎)、葡萄膜视网膜炎；特应性疾病(例如鼻炎、结膜炎、皮炎)；哮喘；I型糖尿病；感染后自身免疫疾病，包括风湿热及感染后肾小球肾炎；实体癌及肿瘤转移。

可用式(I)化合物预防及/或治疗的尤其较佳疾病或病症选自由移植器官(选自肾、肝、心脏及肺)的排斥；由干细胞移植引起的移植物抗宿主疾病；自身免疫综合征，选自类风湿性关节炎、多发性硬化、牛皮癣、干癣性关节炎、克隆氏病及桥本氏甲状腺炎；及特应性皮肤炎组成的群。

本发明亦关于一种预防或治疗本文所提及疾病或病症的方法，该方法包括投与一受试者医药活性量的式(I)化合物。

此外，式(I)化合物亦可与一或若干种免疫调节剂组合用于预防及/或治疗本文所提及的疾病及病症。根据本发明的一较佳实施例，该等药剂选自由免疫抑制剂、肾上腺皮质类固醇、NSAID、细胞毒性药、黏附分子抑制剂、细胞因子、细胞因子抑制剂、细胞因子受体拮抗剂及重组细胞因子受体组成的群。

本发明亦关于式(I)化合物用于制备一医药组合物的用途，该医药组合物视情况与一或若干种免疫调节剂组合使用来预防或治疗本文所提及的该等疾病及病症。

式(I)化合物可藉由以下所给出的方法、藉由实例中所给出的方法或藉由类似方法来制造。最佳反应条件可随所用特定反应物或溶剂而变，但该等条件可由熟悉该项技术者藉由常规最优化程序来确定。

本发明式(I)化合物可根据以下概述的通用反应顺序制备。仅阐述数种可产生式(I)化合物的合成方法。

结构1 结构2

在A代表-CO-CH＝CH-的情况下，式(I)化合物可藉由结构1的化合物与结构2的化合物在碱或酸的存在下反应来制备。残基R³至R⁶中所存在的官能团可能需要暂时保护或甚至可在缩合反应后的附加步骤中引入。式(I)其中A代表-CO-CH₂-CH₂-的化合物可藉由式(I)其中A代表-CO-CH＝CH-的化合物与氢在触媒(例如Pd/C、Pt/C、PtO₂等)的存在下在溶剂(例如乙醇、甲醇、THF等或其混合物)中反应来制备。

结构3 结构4

结构1的化合物可藉由结构3的化合物与甲基格氏试剂(Grignardreagent)反应或藉由将结构4的化合物用2当量甲基锂在溶剂(例如乙醚、THF等)中在介于-20与50℃间的温度下处理来制备。结构3的Weinreb酰胺化合物藉由在耦合试剂(例如EDC、DCC等)的存在下用N，O-二甲基羟基胺盐酸盐处理结构4的化合物来制备(M.Mentzel、H.M.R.Hoffmann的N-Methoxy N-methylamides(Weinreb amides)in modern organic synthesis，Journalfuer Praktische Chemie/Chemiker-Zeitung 339(1997)，517-524；J.Singh、N.Satyamurthi、I.S.Aidhen的The growing syntheticutility of Weinreb′s amide，Journal fuer Praktische Chemie(Weinheim，Germany)342(2000)340-347；V.K.Khlestkin、D.G.Mazhukin的Recent advances in the application ofN，O-dialkylhydroxylamines in organic chemistry，CurrentOrganic Chemistry 7(2003)，967-993)。

式(I)化合物表示一5-噻吩基-[1，2，4]恶二唑衍生物，其藉由在溶剂(例如二甲苯、甲苯、苯、吡啶、DMF、二氯甲烷、乙酸、三氟乙酸等)中与室温或高温下在存在或不存在诸如酸(例如，TFA、乙酸、HCl等)、碱(例如，NaH、NaOAc、Na₂CO₃、K₂CO₃、三乙胺等)、四烷基铵盐、或水去除剂(例如，草酰氯、羧酸酐、POCl₃、PCl₅、P₄O₁₀、分子筛、甲氧羰基胺磺酰基三乙基氢氧化铵(Burgess试剂)等)等辅助剂的情况下使结构5的化合物反应来制备(文献：例如A.R.Gangloff、J.Litvak、E.J.Shelton、D.Sperandio、V.R.Wang、K.D.Rice的Tetrahedron Lett.42(2001)，1441-1443；T.Suzuki、K.Iwaoka、N.Imanishi、Y.Nagakura、K.Miyta、H.Nakahara、M.Ohta、T.Mase的Chem.Pharm.Bull.47(1999)，120-122；R.F.Poulain、A.L.Tartar、B.P.Déprez的Tetrahedron Lett.42(2001)，1495-1498；R.M.Srivastava、F.J.S.Oliveira、D.S.Machado、R.M.Souto-Maior的Synthetic Commun.29(1999)，1437-1450；E.O.John、J.M.Shreeve的Inorganic Chemistry 27(1988)，3100-3104；B.Kaboudin、K.Navaee的Heterocycles 60(2003)，2287-2292)。

结构5的化合物可藉由在溶剂(例如DMF、THF、DCM等)中在存在一或多种耦合剂(例如TBTU、DCC、EDC、HBTU、HOBt、CDI等)或不存在耦合剂的情况下且在存在或不存在碱(例如三乙胺、Hünig碱、NaH、K₂CO₃等)的情况下使结构4的化合物与结构6的化合物反应来制备(文献：例如A.Hamze，J.-F.Hernandez，P.Fulcrand，J.Martinez，J.Org.Chem.68(2003)7316-7321；及上文所列举的文献)。

当式(I)化合物代表一3-噻吩基-[1，2，4]恶二唑衍生物时，其以类似方式(文献：例如C.T.Brain，J.M.Paul，Y.Loong，P.J.Oakley，Tetrahedron Lett.40(1999)3275-3278)藉由使结构7的化合物与结构8的化合物反应且随后环化该相应羟基脒酯中间体来制备。

结构7 结构8

结构6及7的化合物可藉由在溶剂(例如甲醇、乙醇、吡啶等)中在存在或不存在碱(例如Na₂CO₃、K₂CO₃、第三丁醇钾、三乙胺等)的情况下分别使结构9及10的化合物与羟基胺或其一种盐反应来制备(文献：例如T.Suzuki、K.Iwaoka、N.Imanishi、Y.Nagakura、K.Miyta、H.Nakahara、M.Ohta、T.Mase的Chem.Pharm.Bull.47(1999)，120-122；J.Cui、D.Crich、D.Wink、M.Lam、A.L.Rheingold、D.A.Case、W.T.Fu、Y.Zhou、M.Rao、A.J.Olson、M.E.Johnson的Bioorg.Med.Chem.11(2003)，3379-3392；R.Miller、F.Lang、Z.J.Song、D.Zewge的WO 2004/035538(Merck & Co.，Inc.，USA)；B.Kaboudin、K.Navaee的Heterocycles 60(2003)，2287-2292)。

结构9 结构10

端视结构2、5、6、8及9中的残基R³至R⁶中所存在的官能团的性质而定，该等官能团可能需要暂时保护。适宜保护基团已为熟悉该项技术者所习知且包括(例如)苄基或三烷基甲硅烷基以保护醇、缩酮以保护二醇等。该等保护基团可根据标准方法来使用(例如，T.W.Greene，P.G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis，第3版，Wiley New York，1991；P.J.Kocienski，Protective Groups，Thieme Stuttgart，1994)。或者，合意残基R³至R⁶、尤其R⁵亦可在藉由使用结构2、6、8及9的化合物的适宜前体使结构1、4、7或10的噻吩化合物与结构2、6、8或9的苯基衍生物耦合后在随后步骤中引入。结构2、6、8及9的苯基衍生物或其前体自市场上购得或根据熟悉该项技术者习知的程序制备。

当式(I)化合物代表一2-噻吩基-[1，3，4]恶二唑或2-噻吩基-[1，3，4]噻二唑衍生物时，其同样藉由使结构4的化合物与肼反应(藉由使用诸如TBTU、DCC、EDC、HBTU、PyBOP、HOBt、CDI等耦合剂)以形成结构11的化合物、其然后与结构8的化合物偶合给出结构12的化合物来制备。结构12的化合物亦可藉由以下相反反应顺序制备，即，藉由首先使结构8的化合物与肼耦合、随后使相应的酰肼中间体与结构4的化合物反应。使结构12的化合物脱水以形成合意2-噻吩基-[1，3，4]恶二唑衍生物藉由在溶剂(例如甲苯、乙腈、二氧杂环己烷、THF或CHCl₃)中在介于20与120℃的间的温度下在存在或不存在微波辐照的情况下用诸如POCl₃、CCl₄或CBr₄等试剂结合三苯基膦、P₂O₅、Burgess试剂等处理结构12的化合物来达成。(文献：例如M.A.Garcia，S.Martin-Santamaria，M.Cacho，F.Moreno de la Llave，M.Julian，A.Martinez，B.De Pascual-Teresa，A.Ramos，J.Med.Chem.48(2005)4068-4075；C.T.Brain，J.M.Paul，Y.Loong，P.J.Oakley，Tetrahedron Lett.40(1999)3275-3278)。同样，2-噻吩基-[1，3，4]噻二唑衍生物藉由在不存在或存在溶剂(例如吡啶、甲苯、THF或乙腈)下在高温下利用或不利用微波辐照用Lawesson试剂视情况结合P₂S₅使结构12的化合物环化来获得(文献：例如A.A.Kiryanov，P.Sampson，A.J.Seed，J.Org.Chem.66(2001)7925-7929)。

当式(I)化合物代表5-噻吩基-恶唑或5-噻吩基-噻唑衍生物时，其藉由用POCl₃、PCl₅、I₂结合三苯基膦及三乙胺、Burgess试剂、三氟乙酸酐等在溶剂(例如甲苯、苯、二氧杂环己烷或THF)中在介于20与120℃的间的温度下处理、或用Lawesson试剂、视情况结合P₂S₅在存在或不存在溶剂(例如吡啶、甲苯、THF或乙腈)下在高温下如上文所提及利用或不利用微波辐照来处理结构13的化合物来制备(文献：例如N.Sato，T.Shibata，M.Jitsuoka，T.Ohno，T.Takahashi，T.Hirohashi，T.Kanno，H.Iwaasa，A.Kanatani，T.Fukami，Takehiro Bioorg.& Med.Chem.Lett.14(2004)1761-1764)。结构13的化合物藉由使结构14的化合物与结构9的化合物反应来制备。结构14的胺基酮可自结构1的化合物藉由文献中所给出的程序制备(例如，J.L.LaMattina，J.Heterocyclic Chem.20(1983)533-538；M.Pesson，M.Antoine，P.Girard，J.L.Benichon，S.Chabassier，P.De Lajudie，S.Patte，F.Roquet，G.Montay，Eur.J.Med.Chem.15(1980)263-268)。当式(I)化合物代表2-噻吩基-恶唑或2-噻吩基-噻唑衍生物时，其以类似方式自结构15的化合物及结构4的化合物制备。

结构14 结构15

或者，噻吩或苯环与中心5员杂芳族环的间的键亦可藉由实施钯催化的交叉耦合反应来形成。

结构16

结构4的化合物可藉由结构16的噻吩-2-甲酸根据文献程序烷基化来制备(例如，D.W.Knight，A.P.Nott，J.Ch em.Soc.PerkinTrans.1 1983 791-794)。结构16的噻吩-2-甲酸或其甲基或乙基酯自市场上购得或可根据以下文献程序制备(例如，S.Gronowitz，T.Klingstedt，L.Svensson，U.Hansson，Lipids 28(1993)889-897)。

结构17 结构18

结构4的化合物亦可藉由以下来制备：使结构17的化合物(其中R代表甲基、乙基、第三丁基等)与2，4，6-三烯基环三硼氧烷在Suzuki条件下反应(文献：例如F.Kerins，D.F.O′Shea，J.Org.Chem.67(2002)4968-4971)以获得结构18的化合物(其中R代表甲基、乙基、第三丁基等且R^a及R^b二者独立代表氢、甲基、乙基等)，将结构18的化合物氢化且随后酯键断裂后提供结构4的合意化合物。结构17的化合物自市场上购得或根据文献程序制备。

结构19 结构20 结构21

结构4其中R²代表甲基或乙基的化合物亦可藉由结构19的化合物(其中R^c代表乙基或正丙基)与POCl³在DMF中在Vilsmeyer条件下反应获得结构20的化合物来制备(文献：例如G.Alvernhe，D.Greif，B.Langlois，A.Laurent，I.Le Dréan，M.Pulst，A.Selmi，M.Weissenfels，Bull.Soc.Chim.Fr.131(1994)167-172)。结构20的化合物用巯基乙酸酯在碱(例如NaH、NaOEt、NaOMe、第三丁醇K等)的存在下在THF、二氧杂环己烷、DMF、乙醇、甲醇等、或其混合物中处理以形成结构21的中间体。在碱性条件下使用非水性碱(例如NaOMe、NaOEt、KOtBu、DBU等)在溶剂(例如甲醇、乙醇、THF、DMF等、或其混合物)中较佳在高温下环化、随后用水性碱(例如NaOH水溶液、LiOH水溶液、KOH等水溶液)、或酸(例如HCl水溶液、TFA等)在溶剂(例如水、乙醇、甲醇、THF等、或其混合物)中皂化，获得结构4的化合物。用自硫代乙酸S-氰基甲基酯原位产生的巯基乙腈处理结构20的化合物可获得结构10的化合物。

实现将结构4的化合物转化成结构10的化合物或相反的方法已为熟悉该项技术者习知。

实例

以下实例用于阐明本发明而非限制其范围。

所有温度皆以℃表述。化合物藉由下列表征：¹H-NMR(300MHz)或¹³C-NMR(75MHz)(Varian Oxford；化学位移相对于所用溶剂以ppm给出；多重性：s＝单峰、d＝双峰、t＝三峰；p＝五重峰、hex＝六重峰、hept＝七重峰、m＝多重峰、br＝宽峰，耦合常数以Hz给出)；LC-MS(具有HP 1100 Binary帮浦及DAD的菲尼根浏览器(Finnigan Navigator)，管柱：4.6x50毫米，Zorbax SB-AQ，5微米，120埃，梯度：存于水中的5-95％乙腈，1分钟，具有0.04％三氟乙酸，流速：4.5毫升/分钟)，t_R以分钟给出；TLC(得自Merck的TLC-板，硅胶60F₂₅₄)；或熔点。藉由制备型HPLC(管柱：X-terra RP18，50×19毫米，5微米，梯度：存于水中含0.5％甲酸的10-95％乙腈)或藉由MPLC(LabomaticMD-80-100帮浦，Linear UVIS-201检测器，管柱：350×18毫米，Labogel-RP-18-5s-100，梯度：存于水中的10％甲醇至100％甲醇)来纯化化合物。

缩写(如本文所用)：

aq. 含水

BSA 牛血清白蛋白

Bu 丁基

CC 管柱层析法

CDI 羰基二咪唑

DBU 1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯

DCC 二环己基碳二亚胺

DCM 二氯甲烷

DIPEA 二异丙基-乙基胺、Hünig碱、乙基-二异丙基胺

DME 1，2-二甲氧基乙烷

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

EA 乙酸乙酯

EDC N-(3-二甲胺基丙基)-N′-乙基-碳化二酰亚胺

Et 乙基

EtOH 乙醇

h 小时

HBTU 六氟磷酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基

脲鎓

HOBt 1-羟基苯并三唑

HPLC 高效液相层析法

KOtBu 第三丁醇钾

LC-MS 液相层析-质谱法

LDA 异丙基酰胺锂

Lit. 文献

Me 甲基

min 分钟

MPLC 中压液相层析法

NaOAc 酸钠

NMO N-甲基-吗啉-N-氧化物

org. 有机

Ph 苯基

prep. 制备型

PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-叁-吡咯啶基-鏻

rt 室温

sat. 饱和

S1P 鞘胺醇1-磷酸酯

TBME 第三-丁基甲基醚

TBTU 四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，2，3，3-四甲基

脲鎓

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层层析法

t_R 保留时间

5-乙基-噻吩-2-甲酸

将噻吩甲酸(4.00克，30.9毫摩尔)存于THF(24毫升)中的溶液经由唧筒滴加于LDA(32.5毫升，2M存于甲苯中)存于冷却至-78℃的THF(40毫升)中的搅拌溶液中。将反应温度于-78℃下维持10分钟，然后添加碘乙烷(4.87克，30.9毫摩尔)。将混合物于-78℃下搅拌1小时，并然后将其加热至室温过夜。藉由添加水使反应骤冷。将混合物酸化并用乙醚萃取三次。将有机萃取物经MgSO₄干燥、过滤并蒸发。藉由MPL C在反相硅胶上纯化粗产物，获得呈褐色固体状的标题化合物(1.10克)；LC-MS：t_R＝0.80分钟，¹H NMR(CDCl₃)：δ1.34(t，J＝7.3Hz，3H)，2.90(q，J＝7.6Hz，2H)，6.84(d，J＝3.5Hz，1H)，7.73(d，J＝3.8Hz，1H)。

5-正丙基-噻吩-2-甲酸

此标题化合物类似于5-乙基-噻吩-2-甲酸自2-噻吩甲酸及1-碘丙烷起始来制备；LC-MS：t_R＝0.87分钟，¹H NMR(CDCl₃)：δ0.99(t，J＝7.0Hz，3H)，1.74(hex，J＝7.3Hz，2H)，2.83(t，J＝7.6Hz，2H)，6.82(d，J＝3.5Hz，1H)，7.73(d，J＝3.8Hz，1H)

5-正丁基-噻吩-2-甲酸

此标题化合物类似于5-乙基-噻吩-2-甲酸以2-噻吩甲酸及1-碘丁烷起始来制备；LC-MS：t_R＝0.92分钟。

5-异丁基-噻吩-2-甲酸

于-78℃下向2-噻吩-甲酸(4.16克，32.1毫摩尔)存于THF(200毫升)中的溶液中缓慢添加第三丁基锂(49毫升，1.7M存于戊烷中的溶液，83.6毫摩尔)。将混合物于-78℃下搅拌30分钟，然后仔细添加异丁基溴(22.7克，160.7毫摩尔)。将混合物于-78℃下搅拌5小时，然后于室温下搅拌16小时。藉由添加水(400毫升)使反应骤冷。将该混合物酸化并用EA萃取。将有机萃取物经MgSO₄干燥、过滤并蒸发。藉由MPLC在反相硅胶上来纯化粗产物，获得呈褐色油状物的标题化合物(1.67克)；LC-MS：t_R＝0.91分钟，¹H NMR(CDCl₃)：δ0.96(d，J＝6.7Hz，6H)，1.94(hept，J＝6.7Hz，1H)，2.72(d，J＝7.0Hz，2H)，6.80(d，J＝3.8Hz，1H)，7.73(d，J＝3.8Hz，1H)。

5-(2-甲基-丙烯基)-4-甲基-噻吩-2-甲酸

a)向5-溴-4-甲基-噻吩-2-甲酸甲酯(3.65克，15.53毫摩尔)存于DME(30毫升)中的溶液中添加2，4，6-叁-(2-甲基-丙烯基)-环三硼氧烷((5.04克，15.53毫摩尔)，F.Kerins，D.F.O′Shea，J.Org.Chem.67(2002)，4968-4971)，随后添加2M K₂CO₃水溶液(12毫升)。将溶液脱气并放置于氩气氛下，然后添加Pd(PPh₃)₄(366毫克，0.317毫摩尔)。将混合物于80℃下搅拌10小时，然后将其冷却至室温，用乙醚(50毫升)稀释并用饱和NaHCO₃水溶液(2×30毫升)洗涤。有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，获得呈黄色油状物的4-甲基-5-(2-甲基-丙烯基)-噻吩-2-甲酸甲酯(4.08克)；LC-MS：t_R＝1.04分钟，[M+1]⁺＝211.04。

b)将4-甲基-5-(2-甲基-丙烯基)-噻吩-2-甲酸甲酯(4.08克，19.4毫摩尔)存于甲醇(33毫升)中的溶液用2N LiOH水溶液(10毫升)处理。将混合物于室温下搅拌2小时，然后于45℃下搅拌3小时。将反应混合物用乙醚稀释。将有机层分离并用水萃取。合并的水相用1M HCl水溶液酸化，并用乙醚萃取两次。将合并的第二有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，获得呈灰白色固体状的4-甲基-5-(2-甲基-丙烯基)-噻吩-2-甲酸(3.05克)；LC-MS：t_R＝0.92分钟，[M+1]⁺＝196.98。

1-(5-异丁基-噻吩-2-基)-乙酮

于室温下向5-异丁基-噻吩-2-甲酸(550毫克，2.99毫摩尔)存于乙醚(20毫升)中的溶液中缓慢添加甲基锂(3.75毫升，1.6M存于乙醚中)。将反应混合物于室温下搅拌1小时，然后将其用水仔细的洗涤两次，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，获得呈浅黄色油状物的标题化合物(336毫克)，LC-MS：t_R＝0.91分钟，[M+1]⁺＝183.07。

4，N-二羟基-3，5-二甲基-苄脒

此标题化合物自市售4-羟基-3，5-二甲基-苄腈根据文献程序制得(例如，E.Meyer，A.C.Joussef，H.Gallardo，Synthesis2003，899-905)；¹H NMR(CD₃OD)：δ7.20(s，2H)，2.20(s，6H)。

4-烯丙氧基-N-羟基-3，5-二甲基-苄脒

此标题化合物藉由用烯丙基溴在NaOH的存在下在异丙醇中于室温下烯丙基化市售4-羟基-3，5-二甲基-苄腈来制备。然后将腈根据文献程序转化成羟基脒(例如，E.Meyer，A.C.Joussef，H.Gallardo，Synthesis 2003，899-905)；¹H NMR(CD₃OD)：δ7.27(s，2H)，6.10(m，1H)，5.42(m，1H)，5.26(m，1H)，4.31(dt，J＝5.6，1.5Hz，2H)，2.29(s，6H)。

3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒

此标题化合物自市售2-乙基-6-甲基-苯酚根据文献程序制得(G.Trapani，A.Latrofa，M.Franco，C.Altomare，E.Sanna，M.Usala，G.Biggio，G.Liso，J.Med.Chem.41(1998)1846-1854；A.K.Chakraborti，G.Kaur，Tetrahedron 55(1999)13265-13268；E.Meyer，A.C.Joussef，H.Gallardo，Synthesis2003，899-905)；LC-MS：t_R＝0.55分钟；¹H NMR(D₆-DMSO)：δ9.25(s br，1H)，7.21(s，2H)，5.56(s，2H)，2.55(q，J＝7.6Hz，2H)，2.15(s，3H)，1.10(t，J＝7.6Hz，3H)。

4-烯丙氧基-3-乙基-N-羟基-5-甲基-苄脒

该标题化合物藉由将根据文献程序自2-乙基-6-甲基-苯酚制得的3-乙基-4-羟基-5-甲基-苯甲醛烯丙基化来制备(参见3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒)。然后将此醛根据文献程序转化成相应的羟基脒(参见3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒)；LC-MS：t_R＝0.72分钟，[M+1]⁺＝235.09；¹H NMR(CD₃OD)：δ7.31(s，1H)，7.29(s，1H)，6.10(m，1H)，5.43(dd，J＝17.0，1.5Hz，1H)，5.27(dd，J＝10.3，1.2Hz，1H)，4.81(s br，3H)，4.31(d，J＝5.6Hz，2H)，2.67(q，J＝7.6Hz，2H)，2.30(s，3H)，1.23(t，J＝7.6Hz，4H)。

3，5-二乙基-4，N-二羟基-苄脒

此标题化合物自市售2，6-二乙基苯胺根据文献程序制得(G.G.Ecke，J.P.Napolitano，A.H.Filbey，A.J.Kolka，J.Org.Chem.22(1957)639-642；及3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒所引用的文献)。

4-烯丙氧基-N-羟基-2-甲氧基-苄脒

此标题化合物自市售4-羟基-2-甲氧基-苯甲醛根据文献程序制得(3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒所引用的参考文献)；LC-MS：t_R＝0.64分钟；[M+1]⁺＝223.24；¹H NMR(D₆-DMSO)：δ9.33(s br，1H)，7.30(d，J＝8.2Hz，1H)，6.60(d，J＝2.3Hz，1H)，6.50(dd，J＝2.3，8.2Hz，1H)，6.10-5.94(m，1H)，5.50(s，2H)，5.40(d，J＝17.0Hz，1H)，5.24(d，J＝10.6Hz，1H)，4.57(d，J＝4.7Hz，2H)，3.76(s，3H)。

4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼

a)将4-溴-2，6-二甲基-苯酚(20.1克，100毫摩尔)及烯丙基氯(32.7克，428毫摩尔)存于3N NaOH水溶液(100毫升)及异丙醇(250毫升)中的混合物于60℃下搅拌15小时，然后用1N水溶液NaOH(100毫升)稀释。将混合物用乙醚(300毫升，150毫升)萃取并将合并的有机萃取物用1N NaOH水溶液(2×100毫升)、1M NaH₂PO₄水溶液(50毫升)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，获得呈黄色油状物的2-烯丙氧基-5-溴-1，3-二甲基-苯(23.6克)，LC-MS：t_R＝1.08分钟，[M+1]⁺＝241.20。

b)于-75℃下向2-烯丙氧基-5-溴-1，3-二甲基-苯(23.6克，98.0毫摩尔)存于THF(150毫升)中的溶液中添加n-BuLi溶液(90毫升，1.5M存于乙醚中)。将温度保持于-75℃下。将混合物搅拌30分钟并然后经由双嘴插管转移至碳酸二甲酯(21.4克，238毫摩尔)存于THF(90毫升)中的冷(0℃)溶液中。将混合物于0℃下搅拌2小时，然后在15小时内加热至室温。将混合物的溶剂蒸发掉并自乙醇(200毫升)中再次蒸发以去除大多数乙酸丁酯副产物。将混合物吸收于2N LiOH水溶液(150毫升)及EtOH(200毫升)中并于室温下搅拌2小时，然后于60℃下搅拌1小时。将乙醇蒸发掉并将剩余混合物用0.5N NaOH水溶液稀释并用乙醚(200毫升)萃取。将有机萃取物用1M NaOH水溶液(5×50毫升)洗涤并将合并的含水洗涤液用乙醚(100毫升)再次萃取。将水相用25％HCl水溶液酸化并用DCM(5×50毫升)萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥、过滤、蒸发并在真空中于60℃下干燥15小时，获得呈黄-褐色固体状的4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸(8.0)。LC-MS：t_R＝0.90分钟。

c)于室温下向4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸(5.26克，25.5毫摩尔)存于CHCl₃(75毫升)中的溶液中添加亚硫酰氯(7.5毫升，103毫摩尔)。使混合物回流2小时，然后蒸发掉溶剂以获得呈褐色油状物的粗4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酰氯。于0℃下向该酰氯存于DCM(50毫升)中的溶液中添加存于DCM(250毫升)中的肼(75毫升1M存于THF中的溶液)。将混合物于室温下搅拌15小时，然后将其用乙醚稀释并用1N HCl水溶液(75毫升，然后5×50毫升)萃取。藉由添加33％KOH水溶液将合并的含水萃取物碱化并用DCM(5×50毫升)萃取。合并的DCM萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，获得呈白色固体状4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼(5.39克)；LC-MS：t_R＝0.71分钟；[M+1]⁺＝221.20；¹H NMR(D₆-DMSO)：δ2.22(s，6H)，4.28-4.37(m，2H)，4.39(s，2H)，5.19-5.28(m，1H)，5.36-5.47(m，1H)，6.00-6.15(m，1H)，7.49(s，2H)，9.55(s，1H)。

4-苄氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼

4-苄氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼类似于4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼自4-苄氧基-3，5-二甲基苯甲酸起始来制备；LC-MS：t_R＝0.81分钟；[M+1]⁺＝271.41。

4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸酰肼

a)向3-乙基-4-羟基-5-甲基-苯甲醛(34.9克，0.213摩尔，自2-乙基-6-甲基-苯酚根据3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒所引用的文献制得)存于乙腈(350毫升)中的溶液中添加K₂CO₃(58.7克，0.425摩尔)及苄基溴(36.4克，0.213摩尔)。将混合物于60℃下搅拌2小时，然后将其冷却至室温，用水稀释并用EA萃取两次。将合并的有机萃取物用水洗涤并浓缩，获得呈橙色油状物的粗4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲醛(45克)。¹H NMR(CDCl₃)：δ1.29(t，J＝7.5Hz，3H)，2.40(s，3H)，2.77(q，J＝7.8Hz，2H)，4.90(s，2H)，7.31-7.52(m，5H)，7.62(d，J＝1.5Hz，1H)，7.66(d，J＝1.8Hz，1H)，9.94(s，1H)。

b)向4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲醛(132克，0.519摩尔)及2-甲基-2-丁烯(364克，5.19摩尔)存于第三丁醇(1500毫升)中的溶液中添加NaH₂PO₄二水合物(249克，2.08摩尔)存于水(1500毫升)中的溶液。向此混合物中分批添加NaClO₂(187.8克，2.08摩尔)。将反应混合物的温度保持低于30℃，且观察到释放出气体。添加完成后，将该橙色两相混合物充分搅拌3小时，然后将其用TBME(1500毫升)稀释。将有机层分离并用20％NaHS水溶液(1500毫升)及水(500毫升)洗涤。然后将有机相用0.5N NaOH水溶液(1000毫升)萃取三次，水相用25％HC l水溶液(500毫升)酸化并用TBME(1000毫升)萃取两次。将该等有机萃取物合并并蒸发至干燥，获得4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸；¹H NMR(D₆-DMSO)：δ1.17(t，J＝7.5Hz，3H)，2.31(s，3H)，2.67(q，J＝7.5Hz，2H)，4.86(s，2H)，7.34-7.53(m，5H)，7.68(s，2H)，12.70(s，1H)。

c)根据制备4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼的步骤c)将4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸转化成4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸酰肼；LC-MS：t_R＝0.82分钟，[M+1]⁺＝285.44。

甲烷磺酸2，2-二甲基-[1，3]二氧杂环己烷-5-基甲基酯

标题化合物按照B.Xu、A.Stephens，G.Kirschenheuter，A.F.Greslin，X.Cheng，J.Sennelo，M.Cattaneo，M.L.Zighetti，A.Chen，S.-A.Kim，H.S.Kim，N.Bischofberger，G.Cook，K.A.Jacobson，J.Med.Chem.45(2002)5694-5709中所给出的程序来制备。

实例1

a)于0℃下向5-乙基-噻吩-2-甲酸(502毫克，3.21毫摩尔)及DIPEA(1.04克，8.03毫摩尔)存于DCM(16毫升)中的溶液中添加TBTU(1.13克，3.53毫摩尔)。将混合物于0℃下搅拌1小时，然后将反应用水(2毫升)骤冷。将DCM蒸发掉并将剩余残余物用EA稀释，用饱和NaHCO₃水溶液及水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发。藉由自乙腈中结晶来纯化粗产物，获得呈白色固体状的5-乙基-噻吩-2-甲酸(4，N-二羟基-3，5-二甲基-苄脒)酯(600毫克)；LC-MS：t_R＝0.94分钟，[M+1]⁺＝319.02。

b)于100℃下将5-乙基-噻吩-2-甲酸(4，N-二羟基-3，5-二甲基-苄脒)酯(600毫克，1.88毫摩尔)存于二氧杂环己烷(40毫升)中的溶液搅拌18小时。将溶剂蒸发掉并藉由C C在硅胶上用庚烷∶EA4∶1洗脱来纯化残余物，获得呈浅黄色油状物的4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯酚(525毫克)；LC-MS：t_R＝1.09分钟，[M+1]⁺＝301.11。

实例2

2，6-二甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯酚类似于实例1来制备；LC-MS：t_R＝1.10分钟，[M+1]⁺＝315.35。

实例3

4-[5-(5-丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯酚类似于实例1来制备；LC-MS：t_R＝1.15分钟，[M+1]⁺＝329.15。

实例4

4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯酚类似于实例1来制备；LC-MS：t_R＝1.15分钟，[M+1]⁺＝329.09。

实例5

向4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯酚(79毫克，0.263毫摩尔)存于异丙醇(3毫升)及3N NaOH水溶液(0.6毫升)中的溶液中添加(R)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(148毫克，1.31毫摩尔)。将混合物于室温下搅拌2小时，然后于65℃下搅拌16小时，的后添加另一部分(R)-3-氯-丙烷-1，2-二醇(119毫克，1.05毫摩尔)。于65℃下持续搅拌24小时。将反应混合物用水稀释并用乙醚萃取。将有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤并蒸发。藉由层析在制备型TLC板上用含4％7N存于甲醇中的NH₃的DCM纯化粗产物，获得呈灰白色固体状的(2R)-3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇；LC-MS：t_R＝0.99分钟；[M+1]⁺＝375.13；¹H NMR(CDCl₃)：δ7.83(s，2H)，7.80(d，J＝3.8Hz，1H)，6.93(d，J＝3.8Hz，1H)，4.20-4.11(m，1H)，3.97-3.93(m，1H)，3.91(dd，J＝11.5，4.3Hz，1H)，3.85(dd，J＝11.5，5.5Hz，1H)，2.97(q，J＝7.5Hz，2H)，2.39(s，6H)，1.41(t，J＝7.5Hz，3H)。

实例6至12

以下实例类似于实例5自所指示的实例起始使用(R)-或(S)-3-氯-丙烷-1，2-二醇来制备：

实例12

¹H NMR(CDCl₃)：δ0.98(d，J＝6.4Hz，6H)，1.96(hept，J＝6.5Hz，1H)，2.35(s，6H)，2.76(d，J＝7.0Hz，2H)，3.76-3.94(m，4H)，4.09-4.18(m，1H)，6.86(d，J＝3.5Hz，1H)，7.77(d，J＝3.5Hz，1H)，7.80(s，2H)。

实例13

a)将4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯酚(367毫克，1.22毫摩尔)及环氧氯丙烷(565毫克，6.10毫摩尔)存于异丙醇(20毫升)及3N NaOH水溶液(6毫升)中的混合物于40℃下搅拌15小时。将混合物用乙醚稀释，用饱和NaHCO₃水溶液及水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发。藉由CC在硅胶上用庚烷∶EA 9∶1洗脱来纯化粗产物，获得呈浅黄色油状物的3-(3，5-二甲基-4-环氧乙烷基甲氧基(oxiaranymethoxy)-苯基)-5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑(123毫克)；LC-MS：t_R＝1.15分钟，[M+1]⁺＝357.11。

b)将3-(3，5-二甲基-4-环氧乙烷甲氧基-苯基)-5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑(123毫克，0.345毫摩尔)存于7N存于甲醇中的NH₃(10毫升)中的溶液于45℃下搅拌16小时。将溶剂蒸发掉并藉由层析在制备型TLC板上利用含6％7N存于甲醇中的NH₃的DCM来纯化残余物，获得白色固体状的1-胺基-3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙-2-醇(35毫克)；LC-MS：t_R＝0.84分钟，[M+1]⁺＝374.14。

c)向1-胺基-3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙-2-醇(32毫克，86微摩尔)存于DCM(1毫升)中的冷溶液(0℃)中添加DIPEA(45毫克，345微摩尔)、羟基乙酸(13毫克，172微摩尔)且最后TBTU(33毫克，101微摩尔)。将混合物于室温下搅拌1小时，然后将其用EA稀释并用水洗涤。将水相用E A反萃取。合并的有机萃取物经MgSO₄干燥、过滤并蒸发。藉由自乙腈中结晶来纯化粗产物，获得呈白色固体状的N-(3-{4-[5-(5-乙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺(7毫克)；LC-MS：t_R＝0.95分钟，[M+1]⁺＝432.16。

实例14至16

以下实例类似于实例13自所指示的实例起始来制备：

实例15

¹H NMR(D₆-DMSO)：δ0.93(t，J＝7.3Hz，3H)，1.33-1.44(m，2H)，1.63-1.72(m，2H)，2.33(s，6H)，2.93(t，J＝7.5Hz，2H)，3.20-3.30(m，1H)，3.37-3.48(m，1H)，3.69-3.80(m，2H)，3.84(d，J＝5.8Hz，2H)，3.91-3.99(m，1H)，5.30(d，J＝5.3Hz，1H)，5.56(t，J＝5.8Hz，1H)，7.12(d，J＝3.8Hz，1H)，7.69(t，J＝6.0Hz，1H)，7.72(s，2H)，7.90(d，J＝3.5Hz，1H)。

实例16

¹H NMR(D₆-DMSO)：δ0.92(d，J＝6.4Hz，5H)，1.83-2.00(m，1H)，2.30(s，6H)，2.78(d，J＝7.0Hz，2H)，3.14-3.27(m，2H)，3.36-3.48(m，2H)，3.65-3.78(m，2H)，3.81(d，J＝5.6Hz，2H)，3.87-3.99(m，1H)，5.26(d，J＝5.0Hz，1H)，5.52(t，J＝5.6Hz，1H)，7.07(d，J＝3.5Hz，1H)，7.66(m，3H)，7.89(d，J＝3.5Hz，1H)。

实例17

(2R)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例2起始且使用(R)-2-氯甲基-环氧乙烷作为烷基化剂来制备；LC-MS：t_R＝0.98分钟，[M+1]⁺＝446.20。

实例18

(2S)-N-(3-{2，6-二甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例2起始且使用(S)-2-氯甲基-环氧乙烷作为烷基化剂来制备；LC-MS：t_R＝0.98分钟，[M+1]⁺＝446.19，¹H NMR(CDCl₃)：δ1.04(t，J＝7.3Hz，3H)，1.72-1.84(m，2H)，2.36(s，6H)，2.89(t，J＝7.5Hz，2H)，3.19(s br，1H)，3.47-3.56(m，1H)，3.60(sbr，1H)，3.73-3.92(m，3H)，4.18(s，2H)，6.90(d，J＝3.8Hz，1H)，7.12(t，J＝5.8Hz，1H)，7.78(d，J＝3.8Hz，1H)，7.80(s，2H)

实例19

2-乙基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-6-甲基-苯酚类似于实例1使用3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒来制备；LC-MS：t_R＝1.16分钟，[M+1]⁺＝343.02。

实例20

N-(3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例19起始来制备；LC-MS：t_R＝1.01分钟；¹H NMR(CDCl₃)：δ0.99(d，J＝6.7Hz，3H)，1.29(t，J＝7.6Hz，3H)，1.90-2.05(m，1H)，2.35(s，3H)，2.57(s br，1H)，2.67-2.80(m，4H)，3.23(s br，1H)，3.44-3.56(m，1H)，3.72-3.92(m，3H)，4.14-4.22(m，3H)，6.87(d，J＝3.5Hz，1H)，6.97(t br，1H)，7.78(d，J＝3.8Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.84(s，1H)。

实例21

a)于室温下向5-异丁基-噻吩-2-甲酸(830毫克，4.51毫摩尔)及DIPEA(680毫克，5.27毫摩尔)存于DCM(20毫升)中的溶液中添加TBTU(1.59克，4.96毫摩尔)。将混合物于室温下搅拌45分钟，然后添加4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼(993毫克，4.50毫摩尔)。持续搅拌2小时。将混合物用乙醚(200毫升)稀释并用1MHCl水溶液(3×50毫升)、1M NaOH水溶液(3×50毫升)及盐水(50毫升)洗涤。有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，获得呈黄色油状物的粗4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸N′-(5-异丁基-噻吩-2-羰基)-酰肼(1.40克)，其慢慢凝固；LC-MS：t_R＝1.02分钟，[M+1]⁺＝387.10。

b)将4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯甲酸N′-(5-异丁基-噻吩-2-羰基)-酰肼(1.40克，3.62毫摩尔)及Burgess试剂(1.12克，4.71毫摩尔)存于THF(15毫升)中的溶液于110℃下在微波辐照下搅拌3分钟。将混合物用乙醚稀释，用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发。藉由CC在硅胶上用庚烷∶EA 9∶1洗脱来纯化粗产物，获得呈无色油状物的2-(4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯基)-5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑(1.02克)；LC-MS：t_R＝1.21分钟，[M+1]⁺＝369.15。

c)于室温下向2-(4-烯丙氧基-3，5-二甲基-苯基)-5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑(1.02克，2.77毫摩尔)存于丙酮(24毫升)及水(2.4毫升)中的溶液中添加NMO(1.85克，13.7毫摩尔)及OsO₄(128毫克，13微摩尔，作为2.5％存于丁醇中的溶液)。将混合物于室温下搅拌16小时，然后将其用水稀释(50毫升)并用EA(2×100毫升)萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发。藉由CC在硅胶上用EA洗脱来纯化粗产物，获得呈无色油状物的3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇(680毫克)；LC-MS：t_R＝0.99分钟，[M+1]⁺＝403.14。

实例22

a)向3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇(627毫克，1.56毫摩尔)及DIPEA(311毫克，2.41毫摩尔)存于DCM(10毫升)中的溶液中添加甲烷磺酰氯(207毫克，1.81毫摩尔)。将混合物于室温下搅拌，然后添加另一部分的DIPEA(40毫克，0.31毫摩尔)及甲烷磺酰氯(36毫克，0.31毫摩尔)。持续搅拌1小时，然后藉由添加水使反应骤冷。用DCM萃取该混合物。用水洗涤有机萃取物，经MgSO₄干燥、过滤并蒸发。藉由CC在硅胶上用庚烷∶EA 7∶3洗脱来纯化粗产物，获得呈无色油状物的甲烷磺酸2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基酯(220毫克)；LC-MS：t_R＝1.08分钟，[M+1]⁺＝481.09。

b)将甲烷磺酸2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基酯(220毫克，0.458毫摩尔)存于THF(10毫升)及7N存于甲醇中的NH₃(10毫升)中的溶液于65℃下搅拌15小时。将溶剂蒸发掉并藉由层析在制备型TLC板上利用含6％7N存于甲醇中的NH₃的DCM分离残余物，获得呈黄色油状物的1-胺基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙-2-醇(110毫克)；LC-MS：t_R＝0.83分钟，[M+1]⁺＝402.48。

c)于0℃下向1-胺基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙-2-醇(109毫克，271微摩尔)存于DCM(10毫升)中的溶液中添加DIPEA(140毫克，1.086毫摩尔)及羟基乙酸(41毫克，543微摩尔)，随后添加TBTU(102毫克，319微摩尔)。将混合物于室温下搅拌1小时，然后将其用EA稀释并用水洗涤。将水相分离并再次用EA萃取。合并的有机萃取物经MgSO₄干燥、过滤并蒸发。藉由层析在制备型TL C板上利用含4％7N存于甲醇中的NH₃的DCM纯化粗产物，获得呈白色固体状的2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺(31毫克)；LC-MS：t_R＝0.94分钟，[M+1]⁺＝460.51。

实例23

向1-(5-异丁基-噻吩-2-基)-乙酮(336毫克，1.84毫摩尔)及3，5-二甲基-4-羟基-苯甲醛(277毫克，1.84毫摩尔)存于乙醇(6毫升)中的溶液中添加存于异丙醇中的5N HCl(2.5毫升)。将黑色溶液于室温下搅拌6小时，然后在真空中去除溶剂。将残余物溶于EA(80毫升)中并用饱和NaHCO₃水溶液(25毫升)及盐水洗涤。洗涤液用EA反萃取。合并的有机萃取物经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，获得呈黄色粉末的3-(4-羟基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-异丁基-噻吩-2-基)-丙烯酮(682毫克)；LC-MS：t_R＝1.10分钟，[M+1]⁺＝315.15。

实例24

向3-(4-羟基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-异丁基-噻吩-2-基)-丙烯酮(660毫克)存于THF(10毫升)及乙醇(5毫升)中的溶液中添加Pd/C(150毫克，10％Pd)，并然后将此悬浮液于室温下在5巴H₂下搅拌23小时。添加另一部分Pd/C(150毫克)，并继续于于室温下在5巴H₂下搅拌8小时。将触媒滤除并将滤液蒸发，获得呈橙色油状物的3-(4-羟基-3，5-二甲基-苯基)-1-(5-异丁基-噻吩-2-基)-丙-1-酮(554毫克)；LC-MS：t_R＝1.10分钟，[M+1]⁺＝317.04。

实例25

2-羟基-N-(2-羟基-3-{4-[3-(5-异丁基-噻吩-2-基)-3-氧代-丙基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺自实例24类似于实例13来制备；LC-MS：t_R＝0.97分钟，[M+1]⁺＝448.21。

实例26

2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯酚类似于实例1自5-丙基-噻吩-2-甲酸及3-乙基-4，N-二羟基-5-甲基-苄脒起始来制备；LC-MS：t_R＝1.12分钟，[M+1]⁺＝329.14。

实例27

(2R)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例26起始来制备；LC-MS：t_R＝0.95分钟，[M+1]⁺＝460.15。

实例28

(2S)-N-(3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，2，4]恶二唑-3-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例26起始来制备；LC-MS：t_R＝0.95分钟，[M+1]⁺＝460.13。

实例29

2-(4-苄氧基-3，5-二甲基-苯基)-5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑类似于实例21步骤a)及b)藉由将5-异丁基-噻吩-2-甲酸与4-苄氧基-3，5-二甲基-苯甲酸酰肼耦合并环化来制备，LC-MS：t_R＝1.06分钟，[M+1]⁺＝437.17。向此化合物(2.83克，6.75毫摩尔)存于乙醇(50毫升)及THF(50毫升)中的溶液中添加Pd/C(10％Pd，400毫克)并然后将浆液于室温下在5巴H₂下搅拌48小时。将混合物过滤，将滤液浓缩并藉由CC在硅胶上用庚烷∶EA 8∶25洗脱来纯化粗产物，获得呈白色粉末状的4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯酚(943毫克)；LC-MS：t_R＝1.09分钟，[M+1]⁺＝329.36。

实例30

自4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯酚起始，2-羟基-N-((2R)-2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺类似于实例13来制备；LC-MS：t_R＝0.95分钟，[M+1]⁺＝460.18。

实例31

自4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯酚起始，2-羟基-N-((2S)-2-羟基-3-{4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-丙基)-乙酰胺类似于实例13来制备；LC-MS：t_R＝0.95分钟，[M+1]⁺＝460.18，¹H NMRδ0.99(d，J＝6.5Hz，6H)，1.90-2.01(m，1H)，2.31(s，6H)，2.75(d，J＝7.0Hz，2H)，3.46-3.54(m，1H)，3.73-3.91(m，3H)，4.15-4.23(m，3H)，4.26(s br，1H)，4.45(s br，1H)，6.84(d，J＝3.3Hz，1H)，7.42(t br，J＝5.5Hz，1H)，7.64(d，J＝3.5Hz，1H)，7.68(s，2H)。

实例32

2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯酚类似于实例29自4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸酰肼及5-丙基-噻吩-2-甲酸起始来制备；LC-MS：t_R＝0.99分钟，[M+1]⁺＝329.13。

实例33

N-((2R)-3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例32来制备；LC-MS：t_R＝0.85分钟，[M+1]⁺＝460.08。

实例34

N-((2S)-3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-丙基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例32来制备；LC-MS：t_R＝0.85分钟，[M+1]⁺＝460.08。

实例35

2-乙基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯酚类似于实例29自5-异丁基-噻吩-2-甲酸及4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸酰肼来制备；LC-MS：t_R＝1.03分钟，[M+1]⁺＝343.22。

实例36

N-((2R)-3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例35来制备；LC-MS：t_R＝0.91分钟，[M+1]⁺＝474.18。

实例37

N-((2S)-3-{2-乙基-6-甲基-4-[5-(5-异丁基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺类似于实例13自实例35来制备；LC-MS：t_R＝0.91分钟，[M+1]⁺＝474.17。

实例38

2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯酚自4-甲基-5-(2-甲基-丙烯基)-噻吩-2-甲酸及4-苄氧基-3-乙基-5-甲基-苯甲酸酰肼类似于实例29来制备；LC-MS：t_R＝1.13分钟，[M+1]⁺＝357.49。

实例39

(2R)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇自实例38类似于实例5作为白色固体获得；LC-MS：t_R＝1.05分钟，[M+1]⁺＝431.13；¹H NMR(CDCl₃)：δ1.01(d，J＝6.8Hz，6H)，1.31(t，J＝7.5Hz，3H)，1.91-2.02(m，1H)，2.22(s，3H)，2.39(s，3H)，2.68(d，J＝7.0Hz，2H)，2.75(q，J＝7.3Hz，2H)，3.82-3.97(m，4H)，4.14-4.22(m，1H)，7.55(s，1H)，7.78(s，1H)，7.80(s，1H)。

实例40

(2S)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-丙烷-1，2-二醇自实例38类似于实例5作为白色固体获得；LC-MS：t_R＝1.05分钟，[M+1]⁺＝431.14。

实例41

N-((2R)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺自实例38类似于实例13来制备；LC-MS：t_R＝1.00分钟，[M+1]⁺＝488.19。

实例42

N-((2S)-3-{2-乙基-4-[5-(5-异丁基-4-甲基-噻吩-2-基)-[1，3，4]恶二唑-2-基]-6-甲基-苯氧基}-2-羟基-丙基)-2-羟基-乙酰胺自实例38类似于实例13来制备；LC-MS：t_R＝1.00分钟，[M+1]⁺＝488.17；¹H NMRδ1.00(d，J＝6.5Hz，6H)，1.27(t，J＝7.5Hz，3H)，1.90-2.01(m，1H)，2.21(s，3H)，2.34(s，3H)，2.67(d，J＝7.3Hz，2H)，2.71(q，J＝7.5Hz，2H)，3.46-3.56(m，1H)，3.75-3.91(m，3H)，4.08(s br，2H)，4.20(s，3H)，7.33(t br，J＝5.5Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.72(s，1H)，7.74(s，1H)。

实例43：GTPγS分析以确定EC₅₀值

GTPγS结合分析于96孔微量滴定板(Nunc，442587)中以200微升的终体积使用表现重组人类S1P1受体的CHO细胞的膜制备物来实施。分析条件20mM Hepes(Fluka，54461)、100mMNaCl(Fluka，71378)、5mM MgCl₂(Fluka，63064)、0.1％BSA(Calbiochem，126609)、1μM GDP(Sigma，G-7127)、2.5％DMSO(Fluka，41644)、50pM ³⁵S-GTPγS(AmershamBiosciences，SJ1320)。pH值为7.4。将测试化合物溶解并稀释于100％DMSO中并在150微升以上分析缓冲剂中在不存在³⁵S-GTPγS的情况下在室温下预培养30分钟。添加50微升³⁵S-GTPγS后，将分析物于室温下培育1小时。该分析藉由以下操作终止：使用得自Packard Biosciences的细胞收集器将反应混合物转移至一Multiscreen板(Millipore，MAHFC1H60)，并将该等板用冰冷的10mM Na₂HPO₄/NaH₂PO₄(70％/30％)进行洗涤、干燥、于底部密封并添加25微升MicroScint20(PackardBiosciences，序号6013621)，然后于顶部密封。用得自PackardBiosciences的TopCount量测膜结合³⁵S-GTPγS。

EC₅₀诱导50％的最大特异性³⁵S-GTPγS结合的激动剂浓度。特异性结合藉由最大结合减去非特异性结合来确定。最大结合在10μM S1P的存在下结合至该Multiscreen板的数量(cpm)。非特异性结合在该分析中在缺少一激动剂的情况下的结合数量。

表1展示本发明一些化合物的EC₅₀值。该等EC₅₀值根据上述方法确定：

表1

实例化合物	EC₅₀[nM]
实例化合物	EC₅₀[nM]	16	2.6
17	0.6	16	2.6
17	0.6	22	2.8
28	2.4	22	2.8
28	2.4	31	3.3
42	0.6	31	3.3

实例44：活体内功效的评价

式(I)化合物的功效藉由将3-30毫克/公斤式(I)化合物经口投与血压正常的雄性Wistar大鼠后量测循环的淋巴细胞来评价。将动物在具有12小时-明/暗循环的气候控制条件下圈养并留出通往正常大鼠饲料及饮用水的自由信道。于药物投与前及投与3、6及24小时后采集血液。使用Advia血液分析系统(BayerDiagnostics，Zürich，Switzerland)对全血进行血液分析。

所有数据皆以平均±SEM表示。使用Statistica(StatSoft)及Student-Newman-Keuls程序藉由变量分析(ANOVA)实施系统计分析以进行多重比较。当p＜0.05时，拒绝零假设。

作为一实例，表2显示与一组仅用媒剂处理的动物相比向血压正常的雄性Wistar大鼠经口投与10毫克/公斤本发明一些化合物3小时后对淋巴细胞计数的影响。

表2：

实例化合物	淋巴细胞计数
实例化合物	淋巴细胞计数	17	-59±4％
37	-67±3％	17	-59±4％
37	-67±3％	40	-58±3％

Claims

1.一种式(I)化合物，

式(I)

其中

A代表*-CO-CH₂CH₂-、*-CO-CH＝CH-，

其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键；

R¹代表C_2-5-烷基；

R²代表氢、甲基或乙基；

R³代表氢、C_1-4-烷基、C_1-4-烷氧基或卤素；

R⁵¹代表C_1-3-烷基、甲基胺基、乙基胺基、或二甲基胺基；

R⁵⁴代表氢或甲基；

m代表整数1或2；

n代表0、1、或2；且

R⁶代表氢、C_1-4-烷基或卤素；

及其盐。

2.如权利要求1的化合物，其中A代表

其中星号表示连接至该式(I)的噻吩基团的键，及其盐。

3.如权利要求1的化合物，其中A代表

其中星号表示连接至该式(I)的噻吩基团的键，及其盐。

4.如权利要求1的化合物，其中A代表

其中星号表示连接至式(I)的噻吩基团的键，及其盐。

5.如权利要求1的化合物，其中A代表

其中星号表示连接至该式(I)的噻吩基团的键，及其盐。

6.如权利要求1的化合物，其中A代表

及其盐。

7.如权利要求1至6中任一项的化合物，其中R¹代表正丙基或异丁基，及其盐。

8.如权利要求1至7中任一项的化合物，其中R²代表氢或甲基，及其盐。

9.如权利要求1至7中任一项的化合物，其中R²代表氢，及

其盐。

10.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表甲氧基，且R⁴及R⁶代表氢，及其盐。

11.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表氢，R⁴代表甲基、乙基或甲氧基，且R⁶代表甲基、乙基或卤素，及其盐。

12.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表氢，且R⁴及R⁶代表甲基，及其盐。

13.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表氢，R⁴代表甲基，且R⁶代表乙基，及其盐。

14.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表氢，R⁴代表甲氧基，且R⁶代表氯原子，及其盐。

15.如权利要求1至9中任一项的化合物，其中R³代表氢，R⁴代表甲基，且R⁶代表氯原子，及其盐。

16.如权利要求1至15中任一项的化合物，其中R⁵代表2，3-二羟丙基、-CH₂-(CH₂)_n-NHCOR⁵²、-(CH₂)_nCH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²、羟基、羟基-C_2-5-烷氧基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷氧基、2，3-二羟基丙氧基、2-羟基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH₂-(CH₂)_m-NHCOR⁵²、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²，及其盐。

17.如权利要求1至15中任一项的化合物，其中R⁵代表羟基、羟基-C_2-5-烷氧基、二-(羟基-C_1-4-烷基)-C_1-4-烷氧基、2，3-二羟基丙氧基、2-羟基-3-甲氧基-丙氧基、-OCH₂-(CH₂)_m-NHCOR⁵²、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²，及其盐。

18.如权利要求1至15中任一项的化合物，其中R⁵代表3-羟基-2-羟甲基-丙氧基、2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²，及其盐。

19.如权利要求1至15中任一项的化合物，其中R⁵代表2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²，其中R⁵²代表羟甲基，及其盐。

20.如权利要求1的化合物，其中A代表

其中星号表示连接至该式(I)的噻吩基团的键；R¹代表正丙基或异丁基；R²代表氢；R³代表氢或甲氧基；R⁴代表氢、甲基、乙基或甲氧基；R⁵代表3-羟基-2-羟甲基-丙氧基、2，3-二羟基丙氧基、或-OCH₂-CH(OH)-CH₂-NHCOR⁵²；且R⁶代表氢、甲基、乙基或氯；及其盐。

21.如权利要求1的化合物，其选自由下列组成的群：

及该等化合物的盐。

22.如权利要求1的化合物，其选自由下列组成的群：

及该等化合物的盐。

23.一种医药组合物，其包含如权利要求1至22中任一项的化合物、或其医药上可接受的盐、及医药上可接受的载剂。

24.如权利要求1至22中任一项的化合物、或其医药上可接受的盐、或如权利要求23的医药组合物，其用作医药。

25.一种如权利要求1至22中任一项的化合物、或其医药上可接受的盐用于制备医药组合物的用途，该医药组合物用于预防或治疗与经活化免疫系统相关的疾病或病症。

26.如权利要求25的用途，其可用于预防或治疗选自由下列组成的群的疾病或病症：诸如肾、肝、心脏、肺、胰、角膜及皮肤等移植器官的排斥反应；由干细胞移植引发的移植物抗宿主疾病；自身免疫症候群，包括类风湿性关节炎、多发性硬化、诸如克隆氏病及溃疡性结肠炎等炎性肠疾病、牛皮癣、干癣性关节炎、诸如桥本氏甲状腺炎等甲状腺炎、葡萄膜视网膜炎；诸如鼻炎、结膜炎、皮炎等特应性疾病；哮喘；I型糖尿病；感染后自身免疫疾病，包括风湿热及感染后肾小球肾炎；实体癌及肿瘤转移。

27.一种如权利要求1至22中任一项的化合物、或其医药上可接受的盐用于制备一医药组合物的用途，该医药组合物与一或若干种选自由免疫抑制剂、肾上腺皮质类固醇、NSAID、细胞毒性药、黏附分子抑制剂、细胞因子、细胞因子抑制剂、细胞因子受体拮抗剂及重组细胞因子受体组成的群的药剂结合使用来预防或治疗与活化免疫系统相关的疾病或病症。