CN101475459A - 一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法 - Google Patents
一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种从山核桃外果皮中提取球松素及β－谷甾醇的方法，属于球松素及β－谷甾醇提取方法技术领域。包括以下步骤：将山核桃外果皮洗净，粉碎；然后用乙醇溶胀后渗漉提取，收集的渗漉液浓缩得浓缩液；将浓缩液用有机溶剂萃取，得萃取物干粉；萃取物干粉采用硅胶柱色谱分离：a)分别采用石油醚和体积比为45∶1～15∶1的石油醚－乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；b)采用体积比为10∶1～1∶20的石油醚－乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液减压浓缩析晶，得球松素粗晶和β－谷甾醇粗晶；重结晶处理得球松素结晶和β－谷甾醇结晶。该方法工艺简单，生产成本低，制得的球松素结晶及β－谷甾醇结晶含量均大于98％。
Description
技术领域
本发明属于球松素及β-谷甾醇提取方法技术领域，具体为一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法。
背景技术
山核桃Juglans mandshurica Maxim，为胡桃科Juglandaceae，山核桃属Carya植物，主产于浙江临安、淳安和安吉等地。山核桃未成熟时核外部有一层厚厚的绿色外果皮，随着山核桃逐渐成熟并被采摘剥离后，该外果皮颜色会渐渐变棕红。剥离后的山核桃外果皮量非常大，果实与外果皮重量比几乎为1:1，因此废弃后造成极大的浪费。经文献报道，山核桃叶、树皮和外果皮均可入药。山核桃树皮味苦、辛、性寒，可清热、燥湿、清肠、杀虫。近年来它应用于治疗消化系统、肿瘤，尤其对食管癌、胃癌均有显著疗效。山核桃外果皮其性淡、味苦涩、有毒，具有抗肿瘤、镇痛消炎、拟菌杀菌、消肿止痒、清热利尿、明目解毒等功效。
球松素为5-羟基-7-甲氧基二氢黄酮，其结构式为：
属于二氢黄酮类化合物，具有抑菌、消炎的活性，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌等具有较强的抑菌作用。
β-谷甾醇的结构式为：
β-谷甾醇能抑制人体对胆固醇的吸收，具有降低血脂的作用，可预防和治疗冠心病、动脉粥样硬化，同时具有防治前列腺肥大、抗炎、抑制肿瘤、抑制乳腺增生和调节免疫等方面的作用，还有报道β-谷甾醇具有保肝护肝的作用。因此研究开发高纯度球松素及β-谷甾醇纯品，可广泛应用于食品、医药等行业用做生产食品、药品的原料和对照品等，因此具有广阔的市场潜力。
国内现有的分离纯化球松素及β-谷甾醇的报道仅限于对植物原料进行系统化学成分研究，从中分离并鉴定出它们的化学结构的基础研究报道，而未从工艺方法上给出提取分离中的具体工艺参数，也不考虑产品纯度、工艺方法及步骤、生产成本、环境污染等问题。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法的技术方案，其工艺简单，生产成本较低，制得的产品纯度高。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将山核桃外果皮洗净，晾干，粉碎，过筛；
2)经步骤1)处理后的原料用95％乙醇溶胀后进行渗漉提取，收集渗漉液；
3)将渗漉液在50℃以下真空薄膜浓缩至无醇味，回收乙醇，得到浓缩液；
4)有机溶剂萃取：将浓缩液超声分散到水中，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液减压浓缩，回收溶剂，萃取浓缩液真空干燥，得到萃取物干粉；
5)萃取物干粉采用硅胶柱色谱分离：
5a)分别采用石油醚和体积比为45∶1～15∶1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
5b)采用体积比为10∶1～1∶20的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
6)减压浓缩析晶：将步骤5a)、5b)得到的洗脱液分别进行减压浓缩，回收溶剂，放凉，析出沉淀，抽滤，除去母液，洗涤沉淀后分别得到球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶；
7)重结晶处理：将球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶分别用石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶，即得球松素结晶和β-谷甾醇结晶。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤1)中山核桃外果皮洗净自然晾干后，先置35-45℃的烘箱中干燥20-28小时，再取出粉碎成粗粉，过20～40目筛。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤2)中经步骤1)处理后的原料用95％乙醇溶胀3.5～4.5小时后装入渗漉筒中，以95％乙醇为溶剂进行渗漉提取，流速为5～10mL/min，收集10～20倍量的渗漉液。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤4)中将浓缩液超声分散到水中得到水溶液，用乙酸乙酯萃取4次，前2次每次用量为水溶液的1～1.5倍量，后2次每次用量为水溶液的0.4～0.6倍量；合并萃取液减压浓缩，回收溶剂，真空干燥，得到乙酸乙酯萃取物干粉。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤5)中萃取物干粉采用160～200目的硅胶G进行柱色谱分离，湿法装柱，后干法上样。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤5a)中石油醚-乙酸乙酯的体积比为40∶1～20∶1，优选为40∶1～30∶1；
步骤5b)中石油醚-乙酸乙酯的体积比为5∶1～1∶10，优选为5∶1～1∶1。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤6)中将步骤5a)、5b)得到的洗脱液分别减压浓缩至原液体积的1/5-1/10，用石油醚洗涤沉淀分别得到球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤7)中：球松素粗晶采用体积比20:1～10:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶；β-谷甾醇粗晶采用体积比5:1～1:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于所述石油醚的沸程为60～90℃。
所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于渗漉提取时，流速为6～8mL/min，收集15～18倍量的渗漉液。
吸附色谱的原理是利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异而实现分离的一类色谱。常用的吸附剂包括硅胶和氧化铝。硅胶吸附色谱的应用较广泛，中草药中的各类化学成分大多均可用其进行分离。吸附剂的填装分为干法和湿法两种。干法：将吸附剂一次加入色谱柱，振动管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入洗脱剂；湿法：将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整；填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，液面和柱表面相平时，即可加样品溶液。
梯度洗脱：流动相由几种不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子，并使样品的所有组分可在最短时间内实现最佳分离，提高分离效果。
上述一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，以山核桃剥离后的废弃物—山核桃外果皮为原料，原料来源丰富、成本低，提取分离工艺简单，操作方便，设备投资少，过程中不使用有毒溶剂，无环境污染，所用溶剂可回收使用，生产成本低；制得的球松素结晶及β-谷甾醇结晶，经高效液相色谱峰面积归一化法标定纯度，两者含量均大于98％，产品纯度高，可用于实验室及工业化生产中，适合做标准品及医药原料。通过综合开发利用山核桃外果皮，可增加农产品的附加值，因此具有一定的经济价值及现实意义。
本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，液体的百分含量为体积比，固体的百分含量为重量比。
具体实施方式
现结合具体实施例，对本发明作进一步说明。
一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，包括以下步骤：
1)原料处理：将山核桃外果皮洗净自然晾干后，先置40℃烘箱中干燥24小时，再取出粉碎成粗粉，过20～40目筛；
2)提取：经步骤1)处理后的原料用95％乙醇溶胀4小时后装入渗漉筒中，以95％乙醇为溶剂进行渗漉提取，控制流速为8mL/min，收集15倍量的渗漉液；
3)减压浓缩：将渗漉液在50℃以下真空薄膜浓缩至无醇味，回收乙醇，得到浓缩液；
4)有机溶剂萃取：将浓缩液超声分散到水中得到水溶液，加水量使其达到含1g原料/mL水溶液；用乙酸乙酯萃取4次，前2次每次用量为水溶液的1倍量，后2次每次用量为水溶液的0.5倍量；合并萃取液减压浓缩，回收溶剂，真空干燥，得到乙酸乙酯萃取物干粉；
5)硅胶柱色谱分离：萃取物干粉采用160～200目的硅胶G进行柱色谱分离，硅胶G和石油醚混合后湿法装柱，萃取物干粉和少量硅胶G及溶剂混合炒干后干法上样；
5a)分别采用石油醚和体积比为40∶1、30∶1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
5b)采用体积比为5∶1、1∶1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
6)减压浓缩析晶：将步骤5a)、5b)得到的洗脱液分别进行减压浓缩至原液体积的1/5～1/10，，回收溶剂，放凉，析出沉淀，抽滤，除去母液，用石油醚洗涤沉淀分别得到球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶；
7)重结晶处理：球松素粗晶采用体积比为10:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶，即得球松素结晶；β-谷甾醇粗晶采用体积比为1:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶，即得β-谷甾醇结晶。
在上述提取方法中：步骤1)中烘箱温度为35℃或45℃，干燥时间为20小时、26小时或28小时；步骤2)中溶胀时间为3.5小时或4.5小时，流速为5mL/min、6mL/min或10mL/min，收集12、16、20倍量的渗漉液；步骤4)中用乙酸乙酯萃取前2次每次用量为水溶液的1.2或1.5倍量，后2次每次用量为水溶液的0.4或0.6倍量；步骤5a)中采用石油醚～乙酸乙酯体积比为45∶1、25∶1，或35∶1、20∶1，或40∶1、15∶1进行梯度洗脱；步骤5b)中采用石油醚-乙酸乙酯体积比为10∶1、1∶5，或5∶1、1∶10，或15∶1、1∶5进行梯度洗脱；其它方法和上述具体工艺步骤相同，也基本能达到本发明所述的技术效果。
上述步骤2)中收集10～20倍量渗漉液的意思是：渗漉液的多少根据原料重量来决定，若外果皮粗粉为1kg，则渗漉液的体积为10～20升。步骤4)中加水量使其达到含1g原料/mL水溶液的意思是：加水量的多少根据原料重量来决定，若外果皮粗粉为1kg，提取浓缩后，在浓缩液中加水，使水溶液体积达到1000ml。本发明所采用的石油醚沸程为60～90℃。
采用上述方法制得的球松素结晶及β-谷甾醇结晶，经高效液相色谱峰面积归一化法标定纯度，两者含量均大于98％，产品纯度高，可用于实验室及工业化生产中，适合做标准品及医药原料。
Claims (10)
1、一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将山核桃外果皮洗净，晾干，粉碎，过筛；
2)经步骤1)处理后的原料用95％乙醇溶胀后进行渗漉提取，收集渗漉液；
3)将渗漉液在50℃以下真空薄膜浓缩至无醇味，回收乙醇，得到浓缩液；
4)有机溶剂萃取：将浓缩液超声分散到水中，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液减压浓缩，回收溶剂，萃取浓缩液真空干燥，得到萃取物干粉；
5)萃取物干粉采用硅胶柱色谱分离：
5a)分别采用石油醚和体积比为45∶1～15∶1的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
5b)采用体积比为10∶1～1∶20的石油醚-乙酸乙酯混合液进行梯度洗脱，合并洗脱液；
6)减压浓缩析晶：将步骤5a)、5b)得到的洗脱液分别进行减压浓缩，回收溶剂，放凉，析出沉淀，抽滤，除去母液，洗涤沉淀后分别得到球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶；
7)重结晶处理：将球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶分别用石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶，即得球松素结晶和β-谷甾醇结晶。
2、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤1)中山核桃外果皮洗净自然晾干后，先置35-45℃的烘箱中干燥20-28小时，再取出粉碎成粗粉，过20～40目筛。
3、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤2)中经步骤1)处理后的原料用95％乙醇溶胀3.5～4.5小时后装入渗漉筒中，以95％乙醇为溶剂进行渗漉提取，流速为5～10mL/min，收集10～20倍量的渗漉液。
4、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤4)中将浓缩液超声分散到水中得到水溶液，用乙酸乙酯萃取4次，前2次每次用量为水溶液的1～1.5倍量，后2次每次用量为水溶液的0.4～0.6倍量；合并萃取液减压浓缩，回收溶剂，真空干燥，得到乙酸乙酯萃取物干粉。
5、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤5)中萃取物干粉采用160～200目的硅胶G进行柱色谱分离，湿法装柱，后干法上样。
6、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤5a)中石油醚-乙酸乙酯的体积比为40∶1～20∶1，优选为40∶1～30∶1；
步骤5b)中石油醚-乙酸乙酯的体积比为5∶1～1∶10，优选为5∶1～1∶1。
7、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤6)中将步骤5a)、5b)得到的洗脱液分别减压浓缩至原液体积的1/5-1/10，用石油醚洗涤沉淀分别得到球松素粗晶和β-谷甾醇粗晶。
8、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于步骤7)中：球松素粗晶采用体积比20:1～10:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶；β-谷甾醇粗晶采用体积比5:1～1:1的石油醚-丙酮混合溶剂进行重结晶。
9、如权利要求1所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于所述石油醚的沸程为60～90℃。
10、如权利要求3所述的一种从山核桃外果皮中提取球松素及β-谷甾醇的方法，其特征在于渗漉提取时，流速为6～8mL/min，收集15～18倍量的渗漉液。
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Cited By (10)
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|---|---|---|---|---|
| CN101875648A (zh) * | 2010-07-12 | 2010-11-03 | 马灵媛 | 一种从药用植物中提取纯化球松素的方法及其药物制剂与应用 |
| CN101735885B (zh) * | 2009-12-14 | 2012-07-04 | 山东省中医药研究院 | 一种从柏子仁中提取柏子仁油及胡萝卜苷的方法 |
| CN102697820A (zh) * | 2012-05-28 | 2012-10-03 | 西北大学 | 茯苓皮提取物及其在制备利尿作用药物中的应用 |
| CN102911236A (zh) * | 2012-09-06 | 2013-02-06 | 青岛农业大学 | 大花金鸡菊叶中β-谷甾醇的提取方法及其新用途 |
| CN103073530A (zh) * | 2013-02-04 | 2013-05-01 | 河南中医学院 | 一种从山橿中制备球松素的方法 |
| CN103845343A (zh) * | 2014-03-05 | 2014-06-11 | 浙江大学 | 山核桃甾醇提取物在制备消炎物品中的应用 |
| CN104286034A (zh) * | 2014-09-26 | 2015-01-21 | 浙江大学宁波理工学院 | 山核桃外果皮提取物的制备方法 |
| CN107298695A (zh) * | 2017-08-09 | 2017-10-27 | 浙江大学 | 一种提取山核桃蒲壳甾醇的方法 |
| CN107325071A (zh) * | 2017-06-05 | 2017-11-07 | 浙江中医药大学 | 一种具有降血糖作用的山核桃叶球松素的制备方法和用途 |
| CN110092809A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-08-06 | 贵州大学 | 一种利用巨大芽孢杆菌分离提取β－谷甾醇的方法 |
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Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101735885B (zh) * | 2009-12-14 | 2012-07-04 | 山东省中医药研究院 | 一种从柏子仁中提取柏子仁油及胡萝卜苷的方法 |
| CN101875648B (zh) * | 2010-07-12 | 2012-12-12 | 马灵媛 | 一种从药用植物中提取纯化球松素的方法及其药物制剂与应用 |
| CN101875648A (zh) * | 2010-07-12 | 2010-11-03 | 马灵媛 | 一种从药用植物中提取纯化球松素的方法及其药物制剂与应用 |
| CN102697820A (zh) * | 2012-05-28 | 2012-10-03 | 西北大学 | 茯苓皮提取物及其在制备利尿作用药物中的应用 |
| CN102697820B (zh) * | 2012-05-28 | 2014-07-09 | 西北大学 | 茯苓皮提取物及其在制备利尿作用药物中的应用 |
| CN102911236A (zh) * | 2012-09-06 | 2013-02-06 | 青岛农业大学 | 大花金鸡菊叶中β-谷甾醇的提取方法及其新用途 |
| CN103073530B (zh) * | 2013-02-04 | 2014-07-23 | 河南中医学院 | 一种从山橿中制备球松素的方法 |
| CN103073530A (zh) * | 2013-02-04 | 2013-05-01 | 河南中医学院 | 一种从山橿中制备球松素的方法 |
| CN103845343A (zh) * | 2014-03-05 | 2014-06-11 | 浙江大学 | 山核桃甾醇提取物在制备消炎物品中的应用 |
| CN103845343B (zh) * | 2014-03-05 | 2015-11-18 | 浙江大学 | 山核桃甾醇提取物在制备消炎物品中的应用 |
| CN104286034A (zh) * | 2014-09-26 | 2015-01-21 | 浙江大学宁波理工学院 | 山核桃外果皮提取物的制备方法 |
| CN107325071A (zh) * | 2017-06-05 | 2017-11-07 | 浙江中医药大学 | 一种具有降血糖作用的山核桃叶球松素的制备方法和用途 |
| CN107298695A (zh) * | 2017-08-09 | 2017-10-27 | 浙江大学 | 一种提取山核桃蒲壳甾醇的方法 |
| CN110092809A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-08-06 | 贵州大学 | 一种利用巨大芽孢杆菌分离提取β－谷甾醇的方法 |
| CN110092809B (zh) * | 2019-06-14 | 2021-06-11 | 贵州大学 | 一种利用巨大芽孢杆菌分离提取β－谷甾醇的方法 |
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