CN101293009A - 药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药物组合物，其特征在于通过量效关系实验、药效学筛选和验证实验、药代动力学实验、毒理学实验确定组合为：丹参丹酚酸A1－10重量份，黄芪总皂苷1－40重量份，优选丹参丹酚酸A1－5重量份，黄芪总皂苷20－40重量份；优选丹参丹酚酸A6－10重量份，黄芪总皂苷1－19重量份；本申请还公开了药物组合物及其制剂的检测分析方法和用途；药理实验表明，本申请药物组合具有很好的药理作用。

Description

药物组合物

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种药物组合物，即包括丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷组合的药物组合物。

本申请黄芪总皂苷为标准提取物；黄芪总皂苷主要包括黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷IV、大豆皂苷、胡萝卜苷等。

背景技术

丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参的根。味苦、性微寒，丹参是最常用的药材之一，用于治疗心绞痛、高血压、冠心病和中风等心脑血管疾病，具有活血化瘀、养血安神、凉血排痈和排毒生肌的功效，是中药活血化瘀的常用药味；黄芪，味苷，性微温，具有补气生阳、固表止汗，利水消肿之功效，为生阳补气之圣药。丹参黄芪在临床上常常配伍使用，如参芪口服液、参芪注射液等，目前在临床上常常将丹参注射液与黄芪注射液联合使用，用于治疗冠心病、心绞痛、病毒性心肌炎等心血管疾病，效果显著，比单用黄芪注射液或丹参注射液效果好。丹参注射液中的有效成分主要是以丹参丹酚酸B为主的丹参总酚酸，研究表明丹参中主要活性成分是丹参丹酚酸A(杜冠华【基础医学与临床，2000，20(5)：10～14】、胡义扬【中药药理学报，1997，18(5)：478-480】)，但因为现有技术的缺陷，无法得到批量级的丹酚酸A，主要是因为丹参丹酚酸A在丹参中含量很低，只有万分之五左右，即使通过一系列的工艺将其提取出，只能得到微量级的丹酚酸A，因此，无法将丹参丹酚酸A与其它中药组分有效部位或有效成分进行量效关系研究，虽然已经有丹参与黄芪进行配伍的研究，但主要研究的重点还是在丹参丹酚酸B与黄芪总皂苷的配伍配比，这种研究具有一定的效果，但没有将中药中最有效成分进行研究，无法达到最佳疗效，因此，将丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷进行配伍配比研究一直是医药科研工作者希望解决的难点之一。

文献《药对“丹参-黄芪”有效组分的最佳配伍配比研究》(刘润辉等，中国药学杂志2006年6月低41卷第11期)和中国专利“02155004.2”“一种治疗心脑血管疾病的中药有效部位组合物及其制备方法”都公开了以丹参丹酚酸B为主的丹参总酚酸与黄芪总皂苷配伍配比的技术，没有将丹参中活性最好的丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷进行配伍配比的研究。

查阅文献和专利，未有丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷配伍的报道。

发明内容

基于上述原因，我们将得到的批量级的丹参丹酚酸A与黄芪组分有效部位黄芪总皂苷进行配伍，通过药效筛选、量效关系研究、剂量优选与配伍研究、系统药效、安全性评价等实验确定了丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷配伍的药物组合物，通过系统的研究对配伍的有效成分重量份进行确定，研究中我们意外的发现一定量的丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷除了具有相加的作用外还具有协同作用，降低了临床联合用药的不良反应，达到了1+1大于2即增加疗效，降低不良反应的效果。

现有技术中已有丹参总酚酸与黄芪总皂苷的配伍研究，应用现代工艺分别提取丹参总酚酸与黄芪总皂苷，参照传统药对丹参黄芪的配伍基础将丹参有效部位丹参总酚酸与黄芪有效部位黄芪总皂苷进行配伍配比筛选。上述配伍配比筛选的缺陷在于：(1)物质基础方面：以活性有效部位作为药效基础，较传统中药的药味基础是有较大进步，但是该有效部位仍为混合物系统，内部成分组成与相互比例仍不清楚，大多数中药有效部位为制备方法来源的有效部位，不是标准有效部位，其组成成分与相互比例因方法而异，不具有普遍性及广泛的适用性。(2)质量控制方面：有效部位总量定量方法一般采用紫外方法或容量方法定量，假阳性难于排除，其本质是模糊定量，质量标准稳定性与均一性差。(3)缺乏量效关系的客观定量研究：有效部位内部各成分的量效关系及相互作用不清楚，有效部位内各成分的药效强度通常差异较大，某些成分为强效活性成分，某些成分为中等药效成分，有些为低效或无效成分，成分之间相加、互补及协同作用关系更不清楚。

开发高效中药的阳光大道，我们认为首先应将方法来源的有效部位研究清楚，通过对各成分的药效筛选、量效关系与药物代谢研究，优选出强效活性成分，保留中等活性成分，筛除低效或无效成分，将强效活性与中等活性组成优选的有效部位即组分有效部位；对组分有效部位进行比例优选研究，从而确定组分有效部位的组成和比例，也即标准有效部位，该有效部位不但物质基础清楚，而且具有显著的生物活性。在标准有效部位研究的基础上，经类似的优选过程，进行有效部位群新药的开发。

本申请通过下述方案实现的。

药物组合物，包括：丹参丹酚酸A1-10重量份，黄芪总皂苷1-40重量份；

药物组合物，其中优选为：丹参丹酚酸A1-5重量份，黄芪总皂苷20-40重量份；

药物组合物，其中优选为：丹参丹酚酸A6-10重量份，黄芪总皂苷1-19重量份；

上述药物组合物还可以加入人参皂苷、山楂总黄酮、川芎嗪、银杏黄酮、银杏内酯、丹皮酚、红花黄色素中的一种或几种。

其中黄芪总皂苷含量以黄芪甲苷A计大于等于10％且小于100％；

其中丹参丹酚酸A的含量大于等于50％且小于100％；

上述药物组合物制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液、水针剂、输液剂、粉针剂；

上述药物组合物含有丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷外，还含有药剂学常规要求的药用辅料；

其中片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液单位剂量为20mg-4000mg；其中优选单位剂量为50-2000mg；单位剂量低于20mg在临床使用中没有效果，单位剂量大于4000mg在临床使用会产生一定的毒副反应；

其中水针剂、输液剂、粉针剂单位剂量为10-2000mg，其中优选单位剂量20-1000mg；单位剂量低于10mg在临床使用中没有效果，单位剂量大于2000mg在临床使用会产生一定的毒副反应。

上述药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝纤维化、衰老、肿瘤中的应用。上述药物组合物还可以用于肾病(例如缺血性肾病等)、高血脂等疾病，还具有利尿、提高免疫力、治疗糖尿病及并发症等作用。

本申请黄芪甲苷为C₄₁H₆₈O₁₄，Astragaloside IV。

一.制备工艺

丹参丹酚酸A提取纯化：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A；

或：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20或聚酰胺柱层析分离，先用水、20-50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A；

或：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20或聚酰胺柱层析分离，先用水、20-50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至2-5，经有机溶剂萃取，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、异丙醇中的一种，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其中黄芪总皂苷含量以黄芪甲苷计大于等于10％且小于100％(市售或根据文献方法提取纯化得到)。

文献“大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的提取工艺研究”(潘细贵等，《中国医院药学杂志》2005年25卷11期，1029-1031)；

文献“大孔吸附树脂对黄芪总皂苷分离纯化的研究”(腾兴隆等，《黑龙江医药》2002年15卷5期，340-341)；

文献“黄芪皂苷纯化工艺研究”(贾晓宾等，《中成药》2003年15卷11期，866-868)；

文献“大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的研究”(石忠峰等，《中草药》2003年36卷9期，1322-1325)；

现有技术是指现有文献和专利中公开的提取纯化黄芪总皂苷的方法。

制剂制备：

制剂制备：取丹参丹酚酸A、黄芪总皂苷，按照药剂学常规要求制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液、水针剂、输液剂、粉针剂。

二.检测分析方法

1.丹参丹酚酸A检测分析方法：

色谱柱：C₁₈反相色谱柱，NUCLEODUR，250*4.6mm，ODS；

色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温35℃；检测波长286nm；以乙腈-0.2％醋酸水溶液为流动相，按下述梯度洗脱条件进行梯度洗脱，运行90分钟；

0-15分钟时，乙腈的比例由10％升至20％，0.2％醋酸水溶液的比例由90％降至80％；15-55分钟时，乙腈的比例由20％升至30％，0.2％醋酸水溶液的比例由80％降至70％；55-65分钟时，乙腈的比例由30％升至50％，0.2％醋酸水溶液的比例由70％降至50％；65-72分钟时，乙腈的比例由50％升至80％，0.2％醋酸水溶液的比例由50％降至20％；72-77分钟时，乙腈的比例80％，0.2％醋酸水溶液的比例20％；77-80分钟时，乙腈的比例由80％降至10％，0.2％醋酸水溶液的比例由20％升至90％；80-90分钟时，保持乙腈-0.2％醋酸水溶液以10∶90的比例进行洗脱；

对照品溶液的配制：精密称取丹酚酸A对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

样品溶液的配制：精密称取丹酚酸A样品，加入甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；或精密量取或称取制剂，进行预处理，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

测定法：分别精密吸取对照品溶液和样品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采用外标法以峰面积计算，即得；

2.黄芪总皂苷检测分析：

根据《中华人民共和国药典》(2005年，一部)213页【含量测定】总皂苷的检测分析方法，进行含量测定(制剂进行检测时需要进行预处理)。

实验结果见表1、表2：

表1原料药的检测分析

实验结论：通过上述实验表明，本申请药物组合具有实际意义。

三.量效关系研究

丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷同是治疗心脑血管疾病的有效成分，二者是否存在一定的量效关系，通过下述实验，我们有了进一步的认识：

实验方案一：

方案1：丹参丹酚酸A0.2重量份；

方案2：丹参丹酚酸A0.4重量份；

方案3：丹参丹酚酸A0.6重量份；

方案4：丹参丹酚酸A0.8重量份；

方案5：丹参丹酚酸A1重量份；

方案6：丹参丹酚酸A2重量份；

实验方法：实验方法：取健康SD大鼠，体重240-260g，随机分组：空白对照组、实验方案组。置于相同环境预饲养2天，自由饮食。预饲养结束后，进行实验，动物称重，20％乌拉坦按0.6ml/100g腹腔注射，待麻醉满意后，仰卧固定于鼠板上，气管插管，接呼吸机，按10～12ml潮气量，70次/分的频率给予呼气，持续正压呼吸，吸∶呼比为1∶1。根据呼吸频率及深度调整呼吸参数。随后接心电图机，测正常心电图。剪去胸前手术区毛，碘酒消毒，剪开皮肤、皮下组织、胸前肌肉及筋膜3～4cm，用18#血管钳沿第三肋间钝性分离肋间肌3cm长，打开胸腔及心包膜，记录心电图，撑开3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右侧胸腔，助手用眼科镊将胸腺向上推，在左心耳与肺动脉圆锥之间找到结扎标志血管左冠状静脉，在左心耳下方2mm处用无创小圆针带6-0丝线穿线，进针深度为1～1.5mm，宽2～3mm，穿线后记录心电图，尾静脉给药(给药量为12.5mg/kg)，空白对照组给予相应量的生理盐水，给药10min后记录心电图，并用一带凹槽的小塑料管垫在结扎部位，两端线头在其上结扎。结扎后即刻记录心电图，以左室前壁呈紫绀或II导联S-T段弓背向上抬高大于0.1mv并持续0.5h以上为结扎成功标志(S-T段无改变者淘汰)。结扎后10min再次记录心电图，结扎30min后剪开结扎线，实现再灌注，再灌3小时，解剖取心脏，冰生理盐水洗去残血，剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷冻。将心脏在冰箱中冷冻10min后，自心尖向心底平行房室沟方向将左室切成相等厚度的5片，放入1％TTC染液中，37℃染色10min，未坏死区为暗红色，坏死区呈灰白色。数码相机拍照。将坏死区和非坏死区分别称重，计算坏死区占左心室重量的百分比，即梗死范围。

实验方法：按照上述实验方法进行，实验结果见表4：

表3丹参丹酚酸A不同方案实验结果

表4黄芪总皂苷不同方案实验结果

注：将上述实验方案进行灌胃给药，实验结果与上述实验结果相近。

实验小结：实验方案一实验结果表明，丹参丹酚酸A由0.2重量份至0.8重量份时，与模型组比较，心脏局灶缺血面积有降低的趋势，但无统计学差异；当丹参丹酚酸A大于1重量份时，与模型组比较，心脏局灶缺血面积明显降低，具有统计学差异。同样，实验方案二实验结果表明，黄芪总皂苷在1-小于20重量份与模型组比较，心脏局灶缺血面积有降低的趋势，但无统计学差异；当黄芪总皂苷大于20重量份，与模型组比较，心脏局灶缺血面积明显降低，具有统计学差异。通过上述实验结果表明1重量份的丹参丹酚酸A与20重量份以上的黄芪总皂苷的药效基本相同，说明等量的丹参丹酚酸A比黄芪总皂苷药效更好，提示我们在进行配伍筛选时，当丹参丹酚酸重量份少时，需要更多重量份的黄芪总皂苷进行补充，以达到很好的药理作用。

将上述实验方案进行心脑血管实验、器官纤维化、肿瘤、衰老等体外实验，同样得到上述实验结果。

四.配伍筛选实验

1.对麻醉大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷41重量份；

方案2：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案3：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案4：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷10重量份；

方案5：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案6：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案7：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷25重量份；

方案8：丹参丹酚酸A11重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案9：丹参丹酚酸A；

方案10：黄芪总皂苷；

实验方法：取健康SD大鼠，体重240-260g，随机分组：空白对照组、实验方案组。置于相同环境预饲养2天，自由饮食。预饲养结束后，进行实验，动物称重，20％乌拉坦按0.6ml/100g腹腔注射，待麻醉满意后，仰卧固定于鼠板上，气管插管，接呼吸机，按10～12ml潮气量，70次/分的频率给予呼气，持续正压呼吸，吸∶呼比为1∶1。根据呼吸频率及深度调整呼吸参数。随后接心电图机，测正常心电图。剪去胸前手术区毛，碘酒消毒，剪开皮肤、皮下组织、胸前肌肉及筋膜3～4cm，用18#血管钳沿第三肋间钝性分离肋间肌3cm长，打开胸腔及心包膜，记录心电图，撑开3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右侧胸腔，助手用眼科镊将胸腺向上推，在左心耳与肺动脉圆锥之间找到结扎标志血管左冠状静脉，在左心耳下方2mm处用无创小圆针带6-0丝线穿线，进针深度为1～1.5mm，宽2～3mm，穿线后记录心电图，尾静脉给药(给药量为12.5mg/kg)，空白对照组给予相应量的生理盐水，给药10min后记录心电图，并用一带凹槽的小塑料管垫在结扎部位，两端线头在其上结扎。结扎后即刻记录心电图，以左室前壁呈紫绀或II导联S-T段弓背向上抬高大于0.1mv并持续0.5h以上为结扎成功标志(S-T段无改变者淘汰)。结扎后10min再次记录心电图，结扎30min后剪开结扎线，实现再灌注，再灌3小时，解剖取心脏，冰生理盐水洗去残血，剪去心房及右心室，立即放入冰箱中冷冻。将心脏在冰箱中冷冻10min后，自心尖向心底平行房室沟方向将左室切成相等厚度的5片，放入1％TTC染液中，37℃染色10min，未坏死区为暗红色，坏死区呈灰白色。数码相机拍照。将坏死区和非坏死区分别称重，计算坏死区占左心室重量的百分比，即梗死范围。

检测指标分别为，心肌梗死范围。实验结果详见表5：

表5对结扎/再通大鼠左冠状动脉前降支所致心肌缺血/再灌注损伤心肌梗死范围(％)的影响(x±s)

注：与对照组比较^**P＜0.01，^*P＜0.05；与方案9比较#P＜0.05。

2.对大鼠脑梗塞的影响

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷15重量份；

方案2：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案3：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷30重量份；

方案4：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案5：丹参丹酚酸A3重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案6：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案7：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案8：丹参丹酚酸A11重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案9：丹参丹酚酸A；

方案10：黄芪总皂苷；

实验方法：取健康SD大鼠，体重240-260g，随机分组：模型对照组、实验方案组，各实验组给药量12.5mg/kg，尾静脉给药。给药3天后，于末次给药1小时，取大鼠，水合氯醛300mg/kg ip麻醉，颈部切口，分离并结扎右侧颈总动脉，缝合肌肉皮肤后，右侧位固定，在右耳和右眼外眦连线中点切开皮肤，分离颞肌，暴露颧突及颞骨，在颧突的头端1～2mm处开一约3×3mm的骨窗，暴露大脑中动脉(MCA)，将MCA灼断，缝合切口。参考Bederson法，处死动物，取右大脑半球，切成5片，置于2g/LNPT中37℃温育15min染色，仔细挖取并称重未被染成兰色的白色梗塞脑组织，实验结果见表6：

表6对大鼠脑梗塞保护情况

注：与对照组比较^**P＜0.01，^*P＜0.05；  与方案9、10比较#P＜0.05。

3.对大鼠静脉血栓形成的影响

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案2：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷5重量份；

方案3：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷10重量份；

方案4：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案5：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案6：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案7：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷15重量份；

方案8：丹参丹酚酸A11重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案9：丹参丹酚酸A；

方案10：黄芪总皂苷；

实验方法：

取健康SD大鼠，体重240-260g，随机分组：模型对照组、实验方案组，各实验组给药量50mg/kg，灌胃给药。给药7天后，于末次给药1小时，水合氯醛(350mg/kg，ip)麻醉，开腹分离下腔静脉，于左肾静脉下方用粗丝线结扎下腔静脉，缝合腹部。6h后重新开腹，在结扎处下方2cm处夹闭血管，剖开管腔，取出血栓，称重。数据用x±s表示，组间t检验，结果见表7。

表7对大鼠静脉血栓形成的影响

注：与对照组比较^**P＜0.01，^*P＜0.05；与方案9、10比较#P＜0.05。

4.抗器官纤维化实验

方案1：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案2：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案3：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷2重量份；

方案4：丹参丹酚酸A8重量份，黄芪总皂苷5重量份；

方案5：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案6：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷22重量份；

方案7：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷31重量份；

方案8：丹参丹酚酸A；

方案9：黄芪总皂苷；

实验方法：用40％四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化模型。同时给与方案组治疗，方案组灌胃给药，给药量为50mg/kg，应用生理盐水作为阴性对照组。试验结束时检测肝功能、III型前胶原(pcIII)、透明质酸(HA)，分离肝组织检测肝羟脯氨酸含量及电镜观察肝组织病理变化。

实验结果：方案1-7组能明显改善肝纤维化大鼠的肝功能，降低血清pCIII、HA含量及使肝组织羟脯氨酸明显下降；明显减轻贮脂细胞增生及胶原的沉积。其它组效果不是太明显，与阴性对照组没有显著性差异。

5.微循环药理实验

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷2重量份；

方案2：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷2重量份；

方案3：丹参丹酚酸A8重量份，黄芪总皂苷13重量份；

方案4：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案5：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷22重量份；

方案6：丹参丹酚酸A3重量份，黄芪总皂苷31重量份；

方案7：丹参丹酚酸A2重量份，黄芪总皂苷39重量份；

方案8：丹参丹酚酸A；

方案9：黄芪总皂苷；

实验方法：显微电视放大系统定量观测方案组对正常及去甲肾上腺素(NA)所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓微循环的影响；血浆复钙试验测定抗凝作用，方案组尾静脉给药，给药量为12.5mg/kg。

实验结果：方案1-7组能显著促进或改善正常及NA所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓的微循环；亦可延长血浆复钙时间。

6.抗肿瘤实验

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷23重量份；

方案2：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷30重量份；

方案3：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷39重量份；

方案4：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案5：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案6：丹参丹酚酸A8重量份，黄芪总皂苷11重量份；

方案7：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷3重量份；

方案8：丹参丹酚酸A；

方案9：黄芪总皂苷；

实验方法：以小鼠骨髓细胞微核实验和睾丸染色体畸变实验观察方案组的抗突变作用，以S-180和H-22移植性肿瘤观察方案组的抗肿瘤效果，方案组灌胃给药，给药量为40mg/kg。

实验结果：方案1-7组对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核发生和丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有明显的抑制效果；对S-180和H-22小鼠移植性肿瘤生长也有明显的抑制作用。表明方案1-7组对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用，对小鼠移植性肿瘤也有一定的抑瘤作用。

7.抗老年性痴呆药理实验

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷21重量份；

方案2：丹参丹酚酸A3重量份，黄芪总皂苷25重量份；

方案3：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷30重量份；

方案4：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案5：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷12重量份；

方案6：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷8重量份；

方案7：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案8：丹参丹酚酸A；

方案9：黄芪总皂苷；

实验方法：取经跳台法和八臂迷宫法筛选的正常大鼠采用侧脑室注射β-AP_25-35，制成阿尔茨海默病(AD)大鼠模型，应用跳台法和八臂电迷宫法判断给药前后大鼠的空间学习和记忆能力；采用化学比色法测定脑组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)活性，应用生理盐水作为阴性对照组，方案组尾静脉给药量为12.5mg/kg。

实验结果：与阴性对照组大鼠相比，模型大鼠八臂电迷宫错误次数明显增加(P＜0.05)，跳台学习和记忆错误次数明显增加(P＜0.01)。大鼠造模前后连续静注给药21天后，方案1-7组大鼠上述行为学指标得到明显改善(P＜0.01)，脑组织AchE活性降低(P＜0.01)。结果表明本申请制剂对β-AP_25-35侧脑室注射所致大鼠空间学习和记忆障碍有显著的预防和治疗作用，该作用与降低脑组织中AchE活性呈相关性。其它组效果不是太明显，与模型组没有显著性差异。

8.抗衰老实验

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷21重量份；

方案2：丹参丹酚酸A3重量份，黄芪总皂苷25重量份；

方案3：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷30重量份；

方案4：丹参丹酚酸A6重量份，黄芪总皂苷19重量份；

方案5：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷12重量份；

方案6：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷8重量份；

方案7：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案8：丹参丹酚酸A；

方案9：黄芪总皂苷；

实验方法：将老龄上海系小鼠随机分组，雌雄各半，给药组每天灌胃给药，50mg/kg，共给药3周。将小鼠断尾取血50μl，按照邻苯三酚自氧化的方法测定SOD的活性。将小鼠断头处死，取出肝脏，用滤纸吸去残血，剪碎称重，加生理盐水，制备成1％匀浆，采用硫代巴比妥酸法测定肝组织中LPO的含量。

实验结果：通过抗衰老实验表明，本申请药物组合物具有很好的抗衰老作用。

药理实验小结：通过上述药理实验表明，在本申请范围内药物组合与对照组具有很好的药理作用(P＜0.01)；与丹参丹酚酸A、黄芪总皂苷比较具有显著性差异(P＜0.05)，充分说明丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷组合除具有很好的相加作用外，还具有互相影响提高药理活性的作用。

七.药代动力学实验

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案2：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷5重量份；

方案3：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷10重量份；

方案4：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案5：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案6：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案7：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷5重量份；

方案8：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷10重量份；

方案9：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案10：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷30重量份；

方案11：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案12：丹参丹酚酸A5重量份，黄芪总皂苷20重量份；

方案13：丹参丹酚酸A；

方案14：黄芪总皂苷；

实验动物：SD大鼠，雄性，8周龄，SPF级；测定方法：选用LC-MS/MS方法检测；血浆处理方法：精密量取血浆标本100μl，加入100μl 0.1％磷酸、400μl甲醇，涡旋混匀后，10000r/min离心5min。经0.2μm过滤器过滤后，上清液通过自动进样器进样；雄性SD大鼠，经灌胃给药，药前取空白血，于服药后15min、30min、45min、1h、1.5h、 2h、3h、4h、6h、8h和12h取静脉血0.3ml于抗凝管中，分离血浆，以丹参丹酚酸A与黄芪总皂苷为原料制备成的注射制剂为基准，计算不同方案绝对生物利用度，实验结果见表7：

表7不同方案生物利用度的考察

八.毒理学研究

实验方案：

方案1：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案2：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷6重量份；

方案3：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷11重量份；

方案4：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷25重量份；

方案5：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案6：丹参丹酚酸A7重量份，黄芪总皂苷3重量份；

方案7：丹参丹酚酸A9重量份，黄芪总皂苷2重量份；

方案8：丹参丹酚酸A10重量份，黄芪总皂苷1重量份；

方案9：丹参丹酚酸A1重量份，黄芪总皂苷40重量份；

方案10：丹参丹酚酸A；

方案11：黄芪总皂苷；

实验方法：上述不同方案的药物组合物，进行毒理学实验，测定小鼠尾静脉给药急性毒性的LD₅₀，实验结果见表7：

表7不同方案的LD₅₀值

实验结论：通过量效实验、药效学筛选实验、药效学论证实验、药代动力学实验、毒理学实验，我们确定丹参丹酚酸A1-10重量份，黄芪总皂苷1-40重量份；优选丹参丹酚酸A1-5重量份，黄芪总皂苷20-40重量份；优选丹参丹酚酸A6-10重量份，黄芪总皂苷1-19重量份。

七.制备实施例

实施例1

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用70％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热4小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-450大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用50％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为53.8％。

或

丹参用60％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热2小时；溶液进行过滤，滤液经D101大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用35％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用55％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为79.7％。

或

丹参用65％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至5.5、130℃温度、表压0.17MPa压强，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-I大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、45％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用90％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至4.5，经有机溶剂乙酸丁酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为91.2％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为10.1％；(市售)

制剂制备：

口服制剂原料药为：丹参丹酚酸A20克，黄芪总皂苷20克；药用辅料；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为20mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A5克，黄芪总皂苷5克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量10mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例2

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用70％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热4小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-450大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用50％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为55.1％。

或

丹参用60％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热2小时；溶液进行过滤，滤液经D101大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用35％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用55％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为80.1％。

或

丹参用65％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至5.5、130℃温度、表压0.17MPa压强，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-I大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、45％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用90％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至4.5，经有机溶剂乙酸丁酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为90.3％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为14.5％；

根据文献“大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的研究”(石忠峰等，《中草药》2003年36卷9期，1322-1325)方法制备得到；

制剂制备：

口服制剂原料药为：丹参丹酚酸A200克，黄芪总皂苷800克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为4000mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A50克，黄芪总皂苷200克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量2000mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例3

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用85％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至9.0、80℃温度、加热6小时，溶液进行过滤，滤液经HPD-400大孔树脂柱层析分离，先用水、30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，丹参丹酚酸A含量59.3％。

或

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至3.5、110℃温度、表压0.05MPa压强，加热6小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-400A大孔树脂柱层析分离，先用水、30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用95％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，丹参丹酚酸A含量89.7％

或

丹参用80％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至6.0、130℃温度、表压0.17MPa压强，加热6小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-450大孔树脂柱层析分离，先用水、30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用95％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至5，经有机溶剂乙酸丙酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，丹参丹酚酸A含量99.4％。

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为99.1％；

制剂制备：

口服制剂原料药为：丹参丹酚酸A100克，黄芪总皂苷400克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为2000mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A25克，黄芪总皂苷100克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量1000mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例4

丹参丹酚酸A的制备：

丹参35％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、115℃温度、表压0.07MPa压强，加热5小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-100大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用40％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为58.1％。

或

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至4.5、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热3.5小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-100A大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用45％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、30％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为69.7％。

或

丹参50％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热6小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-300大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、35％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用60％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至2.5，经有机溶剂异丙醇萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量91.2％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，根据文献“大孔吸附树脂对黄芪总皂苷分离纯化的研究”(腾兴隆等，《黑龙江医药》2002年15卷5期，340-341)方法制备得到；

制剂制备：

口服制剂原料药为：丹参丹酚酸A100克，黄芪总皂苷800克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为900mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A25克，黄芪总皂苷200克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量：450mg

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例5

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用70％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热4小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-450大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用50％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为55.1％。

或

丹参用60％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、130℃温度、表压0.17MPa压强，加热2小时；溶液进行过滤，滤液经D101大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用35％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用55％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为80.1％。

或

丹参用65％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至5.5、115℃温度、表压0.08MPa压强，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-1大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、45％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用90％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至4.5，经有机溶剂乙酸丁酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为90.3％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为24.3％；

根据文献“大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的研究”(石忠峰等，《中草药》2003年36卷9期，1322-1325)方法制备得到；

制剂制备：

口服制剂原料药为：丹参丹酚酸A20克，黄芪总皂苷400克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为420mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A5克，黄芪总皂苷100克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量105mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例6

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至7.5、30℃温度、加热1小时，溶液进行过滤，滤液经HPD-100大孔树脂柱层析分离，先用水、10％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A。丹参丹酚酸A含量50.1％。

或

丹参用20％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至9.0、80℃温度、加热6小时，溶液进行过滤，滤液经HPD-100A大孔树脂柱层析分离，先用水、30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、20％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用50％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A。丹参丹酚酸A含量61.3％；

或

丹参用50％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至8.0、50℃温度、加热4小时，溶液进行过滤，滤液经HPD-300大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用50％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、35％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用75％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至2，经有机溶剂乙酸乙酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A；丹参丹酚酸A含量90.03％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，根据文献“大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的提取工艺研究”(潘细贵等，《中国医院药学杂志》2005年25卷11期，1029-1031)方法制备得到；

制剂制备：

口服原料药为：丹参丹酚酸A200克，黄芪总皂苷20克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为880mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A50克，黄芪总皂苷5克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量20mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例7

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至8.5、50℃温度、加热4小时，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-I大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用55％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为52.9％。

或

丹参用50％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至8.0、75℃温度、加热2小时；溶液进行过滤，滤液经1400大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用60％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为84.1％。

或

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至4.0、110℃温度、表压0.05MPa压强，加热5.5小时；溶液进行过滤，滤液经AB-8大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、30％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用80％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至3.5，经有机溶剂正丁醇萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为94.7％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为42.9％；

根据文献“大孔吸附树脂对黄芪总皂苷分离纯化的研究”(腾兴隆等，《黑龙江医药》2002年15卷5期，340-341)方法制备得到；

制剂制备：

口服原料药为：丹参丹酚酸A200克，黄芪总皂苷380克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为3480mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A50克，黄芪总皂苷95克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量1450mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例8

丹参丹酚酸A的制备：

丹参35％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热5小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-100大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用40％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为58.1％。

或

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至4.5、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热3.5小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-100A大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用45％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、30％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为69.7％。

或

丹参50％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、110℃温度、表压0.05MPa压强，加热6小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-300大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、35％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用60％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至2.5，经有机溶剂异丙醇萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量91.2％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为27.3％；

根据文献“黄芪皂苷纯化工艺研究”(贾晓宾等，《中成药》2003年15卷11期，866-868)方法制备得到；

制剂制备：

口服原料药为：丹参丹酚酸A60克，黄芪总皂苷560克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为620mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A15克，黄芪总皂苷75克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量90mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例9

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至8.5、50℃温度、加热4小时，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-I大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用55％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为52.9％。

或

丹参用50％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至8.0、75℃温度、加热2小时；溶液进行过滤，滤液经1400大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用60％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为84.1％。

或

丹参用水提取得到水提取液，调PH值至4.0、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热5.5小时；溶液进行过滤，滤液经AB-8大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、30％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用80％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至3.5，经有机溶剂正丁醇萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为94.7％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为33.8％；(文献方法)

制剂制备：

口服原料药为：丹参丹酚酸A160克，黄芪总皂苷220克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为380mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A40克，黄芪总皂苷55克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量190mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

实施例10

丹参丹酚酸A的制备：

丹参用70％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.5、120℃温度、表压0.10MPa压强，加热4小时；溶液进行过滤，滤液经HPD-450大孔树脂柱层析分离，先用水、20％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用50％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为57.2％。

或

丹参用60％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至4.0、125℃温度、表压0.14MPa压强，加热2小时；溶液进行过滤，滤液经D101大孔树脂柱层析分离，先用水、15％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用35％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用聚酰胺层析柱分离，先用水、25乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用55％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A，含量为82.3％。

或

丹参用65％乙醇溶液提取得到醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至5.5、130℃温度、表压0.17MPa压强，加热3小时；溶液进行过滤，滤液经1300-I大孔树脂柱层析分离，先用水、25％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用65％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20层析柱分离，先用水、45％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用90％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至4.5，经有机溶剂乙酸丁酯萃取，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A，含量为91.0％；

黄芪总皂苷为现有技术制备，其含量以黄芪甲苷计为59.2％；(市售)

制剂制备：

口服原料药为：丹参丹酚酸A40克，黄芪总皂苷60克；

片剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照片剂药剂学常规要求制备成片剂1000片；

胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照胶囊剂的药剂学常规要求制备成胶囊剂1000粒；

颗粒剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照颗粒剂的药剂学常规要求制备成颗粒剂1000袋；

软胶囊剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照软胶囊剂的药剂学常规要求制备成软胶囊剂1000粒；

微丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照微丸剂的药剂学常规要求制备成微丸剂10000丸；

滴丸剂制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照滴丸剂的药剂学常规要求制备成滴丸剂10000丸；

口服液制备：

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照口服液的药剂学常规要求制备成口服液1000瓶；

单位剂量为50mg。

注射剂原料药：丹参丹酚酸A45克，黄芪总皂苷175克；药用辅料；

水针剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照水针剂的药剂学常规要求制备成水针剂1000瓶；

输液剂的制备：取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照输液剂的药剂学常规要求制备成输液剂1000瓶；

取丹参丹酚酸A和黄芪总皂苷，按照粉针剂的药剂学常规要求制备成粉针剂1000瓶；

单位剂量220mg；

药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。

注：本发明所要求保护的具体技术方案，不限于上述实施例所表达的技术方案的具体组合。

Claims (13)

1.一种药物组合物，其特征在于药物组合物包括：丹参丹酚酸A1-10重量份，黄芪总皂苷1-40重量份。

2.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A1-5重量份，黄芪总皂苷20-40重量份。

3.根据权利要求1所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A6-10重量份，黄芪总皂苷1-19重量份。

4.根据权利要求1、2或3所述的一种药物组合物，其中黄芪总皂苷含量以黄芪甲苷计大于等于10％且小于100％。

5.根据权利要求1、2或3所述的一种药物组合物，其中丹参丹酚酸A的含量大于等于50％且小于100％。

6.根据权利要求1、2或3所述的一种药物组合物，其中药物组合物制备成单位剂量的片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液、水针剂、输液剂、粉针剂。

7.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其中片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液单位剂量为20mg-4000mg。

8.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其中片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液单位剂量为50mg-2000mg。

9.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其中水针剂、输液剂、粉针剂的单位剂量为10mg-2000mg。

10.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其中水针剂、输液剂、粉针剂的单位剂量为20mg-1000mg。

11.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其中片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、微丸剂、滴丸剂、口服液、水针剂、输液剂、粉针剂的原料药包括黄芪总皂苷，其中丹参丹酚酸A的制备方法为：

丹参丹酚酸A提取纯化：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A；

或：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20或聚酰胺柱层析分离，先用水、20-50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％乙醇溶液洗脱，浓缩，干燥，得到丹参丹酚酸A；

或：

丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液，醇提液浓缩乙醇至尽，调PH值至7.5-9.0、30-80℃温度、加热1-6小时或调PH值至3.5-6.0、110-130℃温度、表压0.05MPa-0.17MPa压强，加热1-6小时；溶液进行过滤，滤液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，大孔树脂柱为HPD-100、HPD-100A、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、D101、1300-I、1400或AB-8，先用水、10-30％稀乙醇洗脱，除去杂质，再用30-70％浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至尽；浓缩液用葡聚糖凝胶LH-20或聚酰胺柱层析分离，先用水、20-50％乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％乙醇溶液洗脱，回收乙醇至尽；浓缩液调PH值至2-5，经有机溶剂萃取，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、正丁醇、异丙醇中的一种，分离有机溶剂相，得含药溶液，浓缩，干燥或冷冻干燥，得丹参丹酚酸A。

12.根据权利要求1、2、、3、11任一项所述的一种药物组合物，包括黄芪总皂苷的检测分析方法，其特征在于丹参丹酚酸A的检测分析方法：

丹参丹酚酸A检测分析方法：

色谱柱：C₁₈反相色谱柱，NUCLEODUR，250*4.6mm，ODS；

色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温35℃；检测波长286nm；理论板数按丹酚酸A计应不低于60000；以乙腈-0.2％醋酸水溶液为流动相，按下述梯度洗脱条件进行梯度洗脱，运行90分钟；

0-15分钟时，乙腈的比例由10％升至20％，0.2％醋酸水溶液的比例由90％降至80％；15-55分钟时，乙腈的比例由20％升至30％，0.2％醋酸水溶液的比例由80％降至70％；55-65分钟时，乙腈的比例由30％升至50％，0.2％醋酸水溶液的比例由70％降至50％；65-72分钟时，乙腈的比例由50％升至80％，0.2％醋酸水溶液的比例由50％降至20％；72-77分钟时，乙腈的比例80％，0.2％醋酸水溶液的比例20％；77-80分钟时，乙腈的比例由80％降至10％，0.2％醋酸水溶液的比例由20％升至90％；80-90分钟时，保持乙腈-0.2％醋酸水溶液以10∶90的比例进行洗脱；

对照品溶液的配制：精密称取丹酚酸A对照品到容量瓶中，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

样品溶液的配制：精密称取丹酚酸A样品，加入甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；或精密量取或称取制剂，进行预处理，加甲醇溶解摇匀，并稀释至刻度；

测定法：分别精密吸取对照品溶液和样品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采用外标法以峰面积计算，即得。

13.根据权利要求1、2、3任一项所述的一种药物组合物在制备治疗和/或预防心脑血管疾病、肝损伤、肿瘤、衰老中的应用。