CN102526186A - 一种用于预防和治疗心血管疾病的药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于预防和治疗心血管疾病的药物组合物，属于中药技术领域。该药物组合物是由一定重量配比的丹参总酚酸、总丹参酮和三七皂苷混合物制成，其中三七皂苷混合物是由人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1混合而成；且该三七皂苷混合物也可以由等量的三七总皂苷代替。该药物组合物对冠心病、心绞痛及心肌梗死具有显著的治疗作用。

Description

一种用于预防和治疗心血管疾病的药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及一种药物组合物及其用途，特别是涉及一种用于预防和治疗冠心病、心绞痛和心肌梗死等心血管疾病的中药成分组合物及其用途，属中药领域。

背景技术

冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病，是临床常见病多发病，发病率呈现逐年上升的趋势。冠心病的主要临床表现是心肌缺血、缺氧而导致的心绞痛、心律失常，严重者可发生心肌梗死，出现多种并发症而危及生命。本病多发于40岁以上者，男性多于女性。有高血压、高血脂症、糖尿病以及长期吸烟者易发本病。常因饱餐、受寒、疲劳和精神刺激其发病。其发病主要为突然阵发性的前胸压榨感或疼痛，有可能波及大部分心前区，并放射至左肩及左上肢，并沿前臂内侧直达小指及无名指等部位。对冠心病的防治研究，成为社会和医学界关注的热点和难点。丹参、三七为中医临床治疗冠心病的常用药，复方丹参片(胶囊、滴丸)、丹七片(胶囊)、冠心丹参片(胶囊、滴丸)等，都是以丹参、三七为主组方，用于治疗冠心病的中成药，但大部分药物多采用传统制药工艺，存在服用量大、生物利用度低、质量标准可控性差等问题，无法占有足够市场，更难以打开国际市场。

现代中药主要以有效成分或有效部位入药，后者又可进一步分为精制中药、有效部位中药及组分配伍中药等。其中的“组分配伍”是指以中医学理论为指导，利用中药有效部位(群)进行的配伍，组分配伍规律是传统中医学理论与现代科学技术相交融发展的结果，是中医整合调节与靶向效应相结合而发展的趋势。中药方剂有效部位(群)的研制与临床应用是中医现代化的典范之一，是通过组分配伍规律指导下而实现其临床疗效。组分配伍源自于临床实践，用之于临床实践，是中医在防治疾病、保护人类健康的过程中，自身理论的创新发展与必然趋势。组分配伍的理论、临床与实验研究在时代科技及疾病谱的机遇下，从组分配伍的提出到组分中药系统的构建，从组分中药学学科的探索到朝向成熟完善的学科体系发展，有利于提升现代中药产业工程技术水平，推进中医现代化的步伐。冠心病心绞痛是最常见的心血管疾病，中药方剂有效部位(群)经组分配伍而创制的新药制剂在方证对应规律的指导下，为防治冠心病心绞痛方面发挥了重要作用。但是，目前的研究主要集中在对复方制剂的研究与临床应用方面，对于中药复方有效部位群的研究及开发，无论在思路还是在技术与方法上都处于探索阶段，尚有很多问题有待于广泛、深入、全面的研究。

本发明人一直致力于中药现代化的研究及中药治疗心血管疾病的临床实践，是中药“组分配伍”理论的提出者和建立者之一，认为有必要深入研究丹参、三七有效部位及其复方制剂，为临床提供疗效更好、使用更方便、更加安全可靠的现代中药。

发明内容

本发明的目的在于按照中药组分配伍理论，提供一种可以预防和治疗心血管疾病的药物组合物。本发明目的是通过以下两种技术方案实现的。

技术方案一：

一种用于防治心血管疾病的药物组合物，其有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸2-6份、总丹参酮1-4份、三七皂苷混合物0.2-1份；其中，三七皂苷混合物是由人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1按照1∶1∶0.5的重量配比混合而成的。

优选的，上述药物组合物的有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸4份、总丹参酮2份、三七皂苷混合物1份。

更严格的要求，在上述的有效成分中，丹参总酚酸中可以含有丹参素、原儿茶醛和咖啡酸等丹参酚酸类成分，但要求含丹酚酸B不低于60％；总丹参酮中可以含有多种丹参酮类成分，但应主要含有7.5％-83.5％的丹参酮I、4.5％-80.5％的隐丹参酮、12.0-88.0％的丹参酮IIA。实际检测中，总丹参酮中含有多种丹参酮类成分，但主要含有7.5％-23.5％的丹参酮I、4.5％-12.5％的隐丹参酮、12.0％-28.5％的丹参酮IIA。

技术方案二：

一种用于防治心血管疾病的药物组合物，其有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸2-6份、总丹参酮1-4份、三七总皂苷0.2-1份。

优选的，上述药物组合物的有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸4份、总丹参酮2份、三七总皂苷1份。

更严格的要求，在上述的有效成分中，丹参总酚酸中可以含有丹参素、原儿茶醛和咖啡酸等丹参酚酸类成分，但要求含丹酚酸B不低于60％；总丹参酮中可以含有多种丹参酮类成分，但应主要含有7.5％-83.5％的丹参酮I、4.5％-80.5％的隐丹参酮、12.0％-88％的丹参酮IIA；三七总皂苷中可以含有多种皂苷类成分，但应主要含有21.0％-73.6％的人参皂苷Rb1、21.0％-73.6％的人参皂苷Rg1、5.4％-58％的三七皂苷R1。实际检测中，总丹参酮中含有多种丹参酮类成分，但主要含有7.5％-23.5％的丹参酮I、4.5％-12.5％的隐丹参酮、12.0％-28.5％的丹参酮IIA；三七总皂苷中含有多种皂苷类成分，但主要含有21.0％-35.0％的人参皂苷Rb1、21.0％-35.0％的人参皂苷Rg1、5.4％-10.0％的三七皂苷R1和2.8％-6.0％的人参皂苷Re。

在本发明的两种技术方案中所用丹参总酚酸、总丹参酮、三七皂苷成分和三七总皂苷均可市购获得，或通过多种提取精制方式获得，但以下方式效率更高、纯度更高、成本更低。

1、丹参总酚酸提取物

取丹参药材，粉碎成最粗粉，加水煎煮提取3次，合并三次的提取液，减压浓缩得到丹参水提浓缩液；浓缩液采用HPD450大孔树脂纯化，水洗脱除杂，再用2倍柱体积(2BV)40％乙醇洗脱，洗脱液喷雾干燥即得。

2、总丹参酮提取物

取丹参药材，95％乙醇浸泡半小时后，回流提取1.5小时，共提取2次，合并提取液，减压浓缩后，喷雾干燥得丹参醇提粉末；用乙酸乙酯溶解醇提粉，过滤，滤液用5％碳酸钠溶液萃取4次，取乙酸乙酯层，挥干，得总丹参酮提取物。

3、三七总皂苷提取物

取三七药材，粉碎，加入6-10倍量60％乙醇水溶液，浸泡1h，回流提取2-3次，每次2h，提取温度80-90℃，合并提取液，减压回收乙醇，得三七浓缩提取液；浓缩液用HPD100大孔吸附树脂纯化，水洗脱杂质，用3-4倍柱体积(3BV)70％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，喷雾干燥，得三七总皂苷提取物。

本发明的药物组合物可以加入一种或多种药学上可接受的载体，将其制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊、分散片、颗粒、咀嚼片、口崩片、滴丸等。

本发明的药物组合物的制剂可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要时可添加各种药学上可接受的载体。载体包括药学领域常规的赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、吸收促进剂、吸附载体等。

本发明的药物组合物在制成口服制剂时，可选择的填充剂有：淀粉、糊精、糖分、硫酸钙、磷酸氢钙、微晶纤维素、甘露醇等；可选择的黏合剂有：淀粉浆、糖浆、阿拉伯胶浆、明胶浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、聚维酮(PVP)等；可选择的崩解剂有：干燥淀粉、羧甲基淀粉纳、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素纳等；可选择的润滑剂有：硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。

有益效果

传统中药应用模式为饮片配伍，适应症定位不明确，并且由于中药成分复杂，质量难以控制，常导致药效不稳定，使中药的科学性受到质疑，信任度下降。安全、有效、质量可控是现代药物评价的基本要求。多年来，通过对中药单味药及复方的深入研究，中药成分配伍理论有了很大进展，已成为中药研究的新模式和重要的发展方向。中药成分配伍理论以传统方剂配伍理论为基础，保持新模式配伍方剂的中医特色，通过严谨的实验设计，针对有限适应症，采用药理作用相对明确、成分相对清楚的有效成分/组分组方，使整个复方通过多组分、多靶点、整合调节的作用方式发挥疗效。研发体现中医药特色、组方合理、疗效确切、工艺先进、质量可控、机理清楚、安全方便的现代中药是中药成分配伍研究的目标，对促进中医药与国际接轨有着重要意义。

本发明药物组合物具有防治冠心病、心绞痛、心肌梗死的作用；经过药理学研究和药效动物实验证明，该药物组合物可以显著改善大剂量异丙肾上腺素导致的大鼠心肌损伤，减轻结扎大鼠冠状动脉导致的心肌梗死，对心肌缺血性损伤有明显的治疗作用。丹参总酚酸、总丹参酮与三七皂苷类成分合并用药呈协同作用，药效明显增强。实验结果如下：

实验例1、药物组合物对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤的影响

1.1材料与方法

1.1.1实验动物

wistar大鼠110只，雄性，体重200～220g.购自中国医学科学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(京)2006-0009

1.1.2实验用药

异丙肾上腺素(ISO)(购自sigma公司，批号：018k5003)；丹参总酚酸(自制，批号20100203，含丹酚酸B 62％)；总丹参酮(自制，批号：20100927，含有7.5％的丹参酮I、4.5％的隐丹参酮和12.0％的丹参酮IIA)。三七总皂苷提取物(昆明圣火，批号20070502，含有21.0％的人参皂苷Rb1、21.0％的人参皂苷Rg1和5.4％的三七皂苷R1)；人参皂苷Rb1(批号110704-200420)；人参皂苷Rg1(批号110703-200726)；三七皂苷R1(批号：110745-200617)。三者购自中国药品生物制品检定所。配药时均用0.5％CMC-Na将其配成所需浓度混悬液；试剂盒购自南京建成生物有限公司及北方生物技术研究所。

1.1.3动物分组和给药方法

将大鼠分为以下7组，每组大鼠15-16只：

组1：正常组

组2：模型组

组3：丹参组(丹参总酚酸∶总丹参酮＝2∶1)，总量150mg/kg体重给药

组4：三七皂苷组(人参皂苷Rb1∶人参皂苷Rg1∶三七皂苷R1＝1∶1∶0.5)，总量150mg/kg体重给药

组5：丹三①组：(丹参总酚酸∶总丹参酮∶三七总皂苷＝4∶2∶1)，总量150mg/kg体重给药

组6：丹三②组：(丹参总酚酸∶总丹参酮∶三种三七皂苷成分＝4∶2∶1)，总量150mg/kg体重给药

组7：复方丹参滴丸组，150mg/kg体重给药

除正常组和模型组灌胃等量0.5％CMC-Na外，其余各组灌以不同受试物2周，第14天灌胃给药后30min，皮下注射ISO(剂量10mg/kg，每日1次，连续2d)，末次注射后24h取材。1.1.4指标检测、取材及标本处理方法

于取材当天，称重麻醉并备皮，立即行无创B超进行心功能检测，随后经腹主动脉抽血，分2管分别收集血浆和血清。开胸，摘取心脏，在4℃生理盐水中洗去血渍，吸干多余水分，称量心脏质量。做病理的心脏放入4％多聚甲醛固定；切下部分左心室前壁心肌，按重量比1∶9加入生理盐水制备10％匀浆，3000r/min，4℃离心去上清待测。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、游离脂肪酸(NEFA)、血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素1α(6-Keto-PGF1α)：生化法使用分光光度计测，酶免法使用酶标仪检测，匀浆上清的蛋白定量采用考马斯亮蓝法。

1.2结果

1.2.1对ISO导致急性心肌缺血大鼠心脏指数的影响(表1)

表1对心脏指数的影响

注：与正常组比*p＜0.05，**p＜0.01

与正常组比较，模型及各给药组心脏指数均显著增高(P＜0.05或P＜0.01)；和模型组比较，丹参滴丸组、丹三组心脏指数有所降低。

1.2.2对ISO导致急性心肌缺血大鼠心功能的影响(表2)

表2对急性心肌缺血大鼠心功能的影响

注：与正常组比*p＜0.05，**p＜0.01，与模型组比^△p＜0.05

与正常组比较，模型及各给药组射血分数(EF)和左室缩短分数(FS)均显著降低(P＜0.01)；左室舒张期内径(LVIDd)和左室收缩期内径(LVIDs)均显著升高(P＜0.05或P＜0.01)。与模型组及单成分组比较，丹三各组和丹参滴丸组EF和FS值明显升高(P＜0.05)，LVIDd显著降低(P＜0.05)，说明对于异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤，本发明药物组合物通过合理配伍，增强药理作用，促进受损心功能的恢复，对心功能的改善，优于各单成分组，其中部分指标优于丹参滴丸组。综合评价，效果强弱排序为丹三②组＞丹三①组＞丹参滴丸组。

1.2.3对ISO导致急性心肌缺血大鼠心肌膜脂质过氧化的影响(表3)

表3对心肌组织SOD、MDA和T-AOC值的影响

注：与正常组相比^★表示P＜0.05，^★★表示P＜0.01，与模型组比^△p＜0.05，^△△p＜0.01

与正常组比较，模型组MDA值显著升高、SOD、T-AOC值显著降低(P＜0.05或P＜0.01)；和模型组比较，丹三各组MDA值显著降低(P＜0.05)，丹三各组和丹参滴丸组SOD值显著升高(P＜0.05)，各给药组T-AOC值有升高趋势但均无统计学差异(P＞0.05)。实验结果说明本发明药物组合物通过合理配伍用药后，使心肌抗氧化能力显著增强，提高心肌SOD酶活性，对抗缺血造成的氧自由基损伤具有修复作用。综合评价，效果强弱排序为丹三②组＞丹三①组＞丹参滴丸组。

1.2.4对ISO导致急性心肌缺血大鼠能量代谢的影响(表4、5)

表4对血清及组织NEFA和肌糖元的影响

注：与正常组相比^★表示P＜0.05，^★★表示P＜0.01，与模型组比^△p＜0.05，^△△p＜0.01

表5对组织中不同ATPase含量的影响

注：与正常高脂组比*p＜0.05，**p＜0.01，与模型组比^△p＜0.05，^△△p＜0.01

与正常组相比，模型组的血清和心肌组织游离脂肪酸(NEFA)含量显著升高(P＜0.01)，心肌组织糖元含量显著降低(P＜0.05)，心肌组织中Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase、Na⁺-K⁺ATPase、T-ATPase活力明显降低(p＜0.05)。与模型组比较，除丹参组外，各组均能显著降低血清及心肌组织中NEFA(p＜0.05)，丹三各组可显著升高心肌组织中糖元的含量(P＜0.05)。各给药组均能明显抑制Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase活力及Na⁺-K⁺-ATPase活力的降低，其中丹三各组和丹参滴丸组可明显提高心肌总T-ATPase活力。实验结果说明丹参、三七有效组分配伍后，可以通过提高ATP酶来改善因为能量代谢障碍导致的心肌损伤，有效降低大鼠血清及心肌组织中FFA含量，纠正能量代谢紊乱，减轻心肌损伤，对缺血心肌起到保护作用。各指标综合分析，效果强弱排序为丹三②组＞丹三①组＞丹参滴丸组。

1.2.5对ISO导致急性心肌缺血大鼠血管活性物质释放的影响(表6)

表6对血浆TXB₂和6-Keto-PGF1α的影响

注：与正常饲料组相比^★表示P＜0.05，^★★表示P＜0.01，与模型组比^△p＜0.05，^△△p＜0.01

与正常组比较，模型组TXB₂值显著升高(P＜0.01)；6-Keto-PGF1α值显著降低(P＜0.01)；与模型组比较，丹三各组和丹参滴丸组血浆中TXB₂含量显著降低，6-Keto-PGF1α含量显著升高(P＜0.05)；说明丹参、三七有效组分配伍可纠正血管活性物质释放的失衡，改善内皮功能，且配伍后的药效显著优于各单成分组。综合两项指标，丹三①组、丹三②组与丹参滴丸组效果相当。

1.2.6形态学观察

通过对大鼠心肌石蜡切片HE染色观察可见，正常组细胞形态结构完整排列整齐，模型组心肌细胞排列疏松紊乱，并有炎性细胞浸润，有胶原沉积和成纤维细胞增生，小灶性坏死，肌纤维肿胀断裂，间质水肿；各给药组较模型组有明显减轻趋势，以丹三①组、丹三②组改善最为显著。

结论：各给药组对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血后心脏代偿性重量增加有一定的抑制作用，其中丹三①组、丹三②组和丹参滴丸组均能显著提高心脏射血分数和左室射短分数，降低血清及组织中MDA、NEFA、TXB2，升高SOD、T-AOC、6-Keto-PGF1α含量，抑制心肌组织中T-ATPase活力的降低，升高组织中肌糖元的含量。可见，丹参总酚酸、总丹参酮、三七皂苷成分按比例配伍后，药效呈协同增强作用，可从促进缺血心肌心功能恢复、抗氧自由基损伤、调节能量代谢、纠正血管活性物质释放的失衡、改善内皮功能等多方面，明显改善异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤，效果显著优于各单成分组；综合评价各项指标，丹三②组效果优于丹三①组，丹三各组部分指标优于丹参滴丸组。

实验例2、药物组合物对结扎冠状动脉致大鼠心肌梗死的干预作用

2.1材料和方法

2.1.1实验动物

Wistar大鼠120只，雄性，体重220-240g，购自中国医学科学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(京)2006-0009

2.1.2大鼠急性心肌梗死模型的制作

①10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉。②气管插管并固定，接小动物呼吸机，潮气量为9ml，频率88次/分，呼吸比为1∶2。③第3～4肋间开胸，以眼科开睑器打开胸腔，暴露心脏，在左心耳下缘距肺动脉弓根部2mm处结扎。结扎深度2mm，宽度1.5mm，见结扎下方变暗变白为结扎成功。(假手术组，只穿线不结扎。)④大血管钳夹闭胸腔，脱呼吸机，逐层缝合。⑤皮下注射青霉素40万单位/只预防感染。

2.1.3实验用药同实验例1。

2.1.4动物分组和给药方法

将大鼠分为以下8组，每组大鼠15只，于手术当天术前1小时给药，术后次日起连续每天给药1次，共21d。所有药物均灌胃给药，正常组、模型组和假手术组同时灌胃等量动物饮用水。

组1：正常组

组2：假手术组

组3：模型组

组4：复方丹参滴丸组，150mg/kg体重给药

组5：丹参组(丹参总酚酸∶总丹参酮＝2∶1)，总量150mg/kg体重给药

组6：三七皂苷组(人参皂苷Rb1∶人参皂苷Rg1∶三七皂苷R1＝1∶1∶0.5)，总量150mg/kg体重给药

组7：丹三①组：(丹参总酚酸∶总丹参酮∶三七总皂苷＝4∶2∶1)，总量150mg/kg体重给药

组8：丹三②组：(丹参总酚酸∶总丹参酮∶三种三七皂苷成分＝4∶2∶1)，总量150mg/kg体重给药

2.1.5取材及标本处理方法

结扎冠状动脉21d后，称重麻醉，进行无创心功能检测。随后开胸，摘取心脏，在4℃生理盐水中洗去血渍，吸干多余水分，称量心脏质量。心脏-20℃冷冻30min后行TTC染色。切下梗死心肌称重，用缺血心肌与心脏湿重百分比计算心肌梗死面积(MIS)。

2.2结果

2.2.1对急性心肌梗死大鼠心功能的影响(表7)

表7各组间射血分数和左室缩短分数的比较

注：和假手术组比较，^☆表示P＜0.05，^☆☆表示P＜0.01；和模型组比较，^★表示P＜0.05，^★★表示P＜0.01；

和假手术组比较，模型组、各给药组EF、FS均显著降低(P＜0.01)；和模型组比较，丹三①组和丹三②组的EF值、FS值明显升高(P＜0.05)。实验结果表明，丹三①组、丹三②组的组分配伍对心梗后大鼠心功能的下降有明显的抑制作用，药效优于丹参滴丸，显著优于各单成分组。

2.2.2对高脂血症AMI大鼠心脏内径的影响(表8)

表8各组间左室舒张期内径和左室收缩期内径的比较

注：和假手术组比较，^☆表示P＜0.05，^☆☆表示P＜0.01；和模型组比较，^★表示P＜0.05，^★★表示P＜0.01；

和假手术组比较，模型组、各给药组LVIDd、LVIDs均显著增高(P＜0.01)；和模型组比较，丹三①组、丹三②组可显著抑制心肌梗死后大鼠心脏LVIDd的扩张(P＜0.05)，同时显著抑制大鼠心脏LVIDs的扩张(P＜0.05)；其它组分配伍组对AMI大鼠心脏内径无明显影响。缺血诱导的心功能损伤是冠心病发展到一定阶段的产物，缺血会诱导心肌重构，心肌重构最初是为了缺血状态下保持正常心功能的一种代偿反应，但如果缺血严重或持续时间长久最终逐渐导致心功能进行性失代偿，远期可造成严重后果，包括恶性室性心律失常、心衰、心源性猝死等。实验结果可看出，本发明提供的药物组合物(丹三①组、丹三②组)能有效抑制心梗后心肌重构，减轻缺血诱导的心功能损伤，可用于治疗冠心病及其并发症，效果显著优于各单成分组。

2.2.3形态学观察

2.2.3.1心脏整体形态观察：正常组和假手术组心脏形态结构完整，模型组心脏左心室前壁组织梗死明显，心肌组织被胶原和结缔组织完全取代，失去了心肌组织的全部功能。各给药组心脏左心室前壁梗死范围和严重程度较模型组有明显减轻趋势，以丹三①组、丹三②组丹和丹参滴丸组改善最为显著。

2.2.3.2心脏TTC染色观察：正常组和假手术组心脏TTC染色显示左心室前后壁形态结构完整，呈红色，前后壁心肌厚度均匀一致，心室腔较小。模型组的心脏左心室前壁组织梗死发白变薄，前壁心肌组织被胶原和结缔组织完全取代，心室腔变大。各给药组心脏左心室前壁梗死范围和严重程度较模型组有明显减轻趋势，以丹三①组、丹三②组和丹参滴丸组效果最为显著。

通过形态学观察，本发明提供的药物组合物(丹三①组、丹三②组)能有效减轻结扎致大鼠心肌梗死程度，减小心肌梗死范围，对肌缺血梗死后的心脏结构有明显的保护作用；药效优于丹参滴丸组，显著优于各单成分组。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者增减。

以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

以下实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

一、丹参总酚酸的获得

实施例1：

A、提取：取丹参药材1kg，粉碎为18目，加入6倍量去离子水90℃煎煮提取，提取3次，每次的提取时间为0.8h，合并三次的提取液，减压浓缩至2ml/1g丹参药材量，得到丹参水提浓缩液。

B、纯化：取A中丹参水提浓缩液采用HPD450大孔树脂纯化(约7kg，柱体积约10L)，上样后，用2倍柱床体积(2BV)的纯水洗脱除杂(流速为1BV/6h)，再用2BV的40％乙醇洗脱(洗脱流速为1BV/6h)，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥得丹参总酚酸。

经检测，该丹参总酚酸中含丹酚酸B的比例为72％，其余为其他丹酚酸及非丹酚酸物质。

实施例2：

A、提取：取丹参药材1kg，粉碎为10目，加入8倍量去离子水80℃煎煮提取，提取3次，每次的提取时间为0.5h，合并三次的提取液，减压浓缩至2ml/1g丹参药材量，得到丹参水提浓缩液。

B、纯化：取A中丹参水提浓缩液采用HPD450大孔树脂纯化(约7kg，柱体积约10L)，上样后，用2BV的纯水洗脱除杂(流速为1BV/6h)，再用2BV的40％乙醇洗脱(洗脱流速为1BV/8h)，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥得丹参总酚酸。

经检测，该丹参总酚酸中含丹酚酸B的比例为68％，其余为其他丹酚酸及非丹酚酸物质。。

实施例3：

A、提取：取丹参药材1kg，粉碎为24目，加入10倍量去离子水100℃煎煮提取，提取3次，每次的提取时间为1h，合并三次的提取液，减压浓缩至2ml/1g丹参药材量，得到丹参水提浓缩液。

B、纯化：取A中丹参水提浓缩液采用HPD450大孔树脂纯化(约7kg，柱体积约10L)，上样后，用2BV的纯水洗脱除杂(流速为1BV/6h)，再用2BV的40％乙醇洗脱(洗脱流速为1BV/4h)，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥得丹参总酚酸。

经检测，该丹参总酚酸中含丹酚酸B的比例为62％，其余为其他丹酚酸及非丹酚酸物质。。

二、总丹参酮的获得

实施例4：

A、提取：取丹参药材1kg，10倍量95％乙醇浸泡半小时后，回流提取1.5小时，共提取2次，合并提取液，减压浓缩至0.5ml/1g丹参药材量，雾干燥得丹参醇提粉末。

B、纯化：取丹参醇提粉末，乙酸乙酯溶解，过滤，滤液用5％碳酸钠溶液萃取4次，取乙酸乙酯层，挥干，得总丹参酮。

经检测，该总丹参酮中含有18.5％的丹参酮I、9.5％的隐丹参酮和22.5％的丹参酮IIA；其余为其他丹酸酮类及非丹参酮类物质。

三、三七总皂苷的获得

实施例5：

A、提取：取三七药材800g，粉碎为18目大小，加入8倍量60％乙醇，浸泡1h后回流提取3次，每次提取时间为2h，提取温度90℃，合并3次提取液，减压回收乙醇，减压浓缩至约6ml/1g三七药材，得到三七浓缩提取液。

B、纯化：三七提取浓缩液用HPD100大孔吸附树脂柱(填料8kg，柱体积约12L)层析纯化，最大上样量为50mg/g，上样后，用3-4倍柱体积水洗脱杂质(流速1BV/8h)，然后用3BV70％的乙醇洗脱(洗脱的流速为1BV/6h)，收集洗脱液，减压回收乙醇，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥，得三七总皂苷。

经检测，该三七总皂苷中含有33.0％人参皂苷Rb1、34.0％人参皂苷Rg1、8.5％三七皂苷R1和6.8％人参皂苷Re；其余为其他皂苷类及非皂苷类物质。

实施例6：

A、提取：取三七药材800g，粉碎为10目大小，加入6倍量60％乙醇，浸泡1h后回流提取2次，每次提取时间为2h，提取温度80℃，合并3次提取液，减压回收乙醇，减压浓缩至约6ml/lg三七药材，得到三七浓缩提取液。

B、纯化：三七提取浓缩液用HPD100大孔吸附树脂柱(填料8kg，柱体积约12L)层析纯化，最大上样量为50mg/g，上样后，用3-4倍柱体积水洗脱杂质(流速1BV/8h)，然后用4BV70％的乙醇洗脱(洗脱的流速为1BV/8h)，收集洗脱液，减压回收乙醇，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥，得三七总皂苷提取物。

经检测，该三七总皂苷中含有28.0％人参皂苷Rb1、27.5％人参皂苷Rg1、10.7％三七皂苷R1和2.5％人参皂苷Re；其余为其他皂苷类及非皂苷类物质。

实施例7：

A、提取：取三七药材800g，粉碎为24目大小，加入10倍量60％乙醇，浸泡1h后回流提取3次，每次提取时间为2h，提取温度85℃，合并3次提取液，减压回收乙醇，减压浓缩至约6ml/1g三七药材，得到三七浓缩提取液。

B、纯化：三七提取浓缩液用HPD100大孔吸附树脂柱(填料8kg，柱体积约12L)层析纯化，最大上样量为50mg/g，上样后，用3-4倍柱体积水洗脱杂质(流速1BV/8h)，然后用3BV70％的乙醇洗脱(洗脱的流速为1BV/4h)，收集洗脱液，减压回收乙醇，洗脱液浓缩至药液相对密度为1.05g/ml，喷雾干燥，得三七总皂苷提取物。

经检测，该三七总皂苷中含有26.2％人参皂苷Rb1、25.0％人参皂苷Rg1、5.6％三七皂苷R1和3.2％人参皂苷Re；其余为其他皂苷类及非皂苷类物质。

四、本发明药物组合物不同制剂的获得

以下实施例所获得的药物均能够不同程度地实现本发明实验例所具有的治疗效果。

实施例8：

取丹参总酚酸15kg、总丹参酮10kg、三七皂苷混合物0.5kg(人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1以1∶1∶0.5的比例混合而成)与淀粉，羧甲基纤维素钠、滑石粉混合均匀，制粒，压片即得片剂。

实施例9：

取丹参总酚酸10kg、总丹参酮5kg、三七皂苷混合物1kg(人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1以1∶1∶0.5的比例混合而成)加入100kg的聚乙二醇，混合均匀，熔融，上滴丸机，制成滴丸。

实施例10：

取丹参总酚酸15kg、总丹参酮10kg、三七皂苷混合物2.5kg(人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1以1∶1∶0.5的比例混合而成)，加入等量淀粉，乳糖和硬脂酸镁，制粒，装入胶囊，即得胶囊剂。

实施例11：

取丹参总酚酸10kg、总丹参酮5kg、三七总皂苷2.5kg与淀粉，羧甲基纤维素钠、滑石粉混合均匀，制粒，压片即得片剂。

实施例12：

取丹参总酚酸15kg、总丹参酮10kg、三七总皂苷2.5kg加入120kg的聚乙二醇，混合均匀，熔融，上滴丸机，制成滴丸。

实施例13：

取丹参总酚酸10kg、总丹参酮5kg、三七总皂苷1kg，加入等量淀粉和乳糖，制粒，得颗粒剂。

Claims (8)

1.一种用于防治心血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸2-6份、总丹参酮1-4份、三七皂苷混合物0.2-1份；其中，三七皂苷混合物是由人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1按照1∶1∶0.5的重量配比混合而成的。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的有效成分组成及重量配比为：丹参总酚酸4份、总丹参酮2份、三七皂苷混合物1份。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：其中丹参总酚酸中含丹酚酸B不低于60％；总丹参酮中主要含有7.5％-83.5％的丹参酮I、4.5％-80.5％的隐丹参酮、12.0-88.0％的丹参酮IIA。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：其中总丹参酮中主要含有7.5％-23.5％的丹参酮I、4.5％-12.5％的隐丹参酮和12.0％-28.5％的丹参酮IIA。

5.权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其特征在于其中的三七皂苷混合物用等量的三七总皂苷代替。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于三七总皂苷中主要含有21.0％-73.6％的人参皂苷Rb1、21.0％-73.6％的人参皂苷Rg1和5.4％-58％的三七皂苷R1。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于三七总皂苷中主要含有21.0％-35.0％的人参皂苷Rb1、21.0％-35.0％的人参皂苷Rg1、5.4％-10.0％的三七皂苷R1和2.8％-6.0％的人参皂苷Re。

8.权利要求1至7中任一项所述药物组合物在制备用于预防和治疗冠心病、心绞痛和/或心肌梗死的药物中的应用。