CN102552398A

CN102552398A - 一种丹参提取物的药物组合物及其用途

Info

Publication number: CN102552398A
Application number: CN2012100440943A
Authority: CN
Inventors: 孙隆儒; 翟光喜; 朱海林; 谢婷婷; 季梅
Original assignee: Shandong University
Current assignee: Shandong University
Priority date: 2012-02-24
Filing date: 2012-02-24
Publication date: 2012-07-11

Abstract

本发明涉及一种丹参提取物的药物组合物及其用途。所述的药物组合物是丹酚酸A或丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠组合、或者丹酚酸A和丹酚酸B与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠组合。该药物组合物对心肌梗死的治疗作用优于各组成成分单独使用，能更好地体现中药丹参多成分、多靶点的治疗作用，用于制备治疗心脑血管疾病的药物。可按照药剂学常规生产工艺将该药物组合物加工制成片剂、胶囊剂、冲剂、注射用冻干制剂、或其羧酸盐的注射用冻干制剂或粉针剂。

Description

一种丹参提取物的药物组合物及其用途

技术领域

本发明涉及一种丹参提取物主要成分的药物组合物，尤其涉及从丹参中提取精制而成的丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA或丹参酮IIA的化学修饰物丹参酮IIA磺酸钠组成的一种药物组合物及其用途。

背景技术

丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)，作为一种传统的常用中药，始载于《神农本草经》，历代医家比喻丹参谓“一味丹参，功同四物”(“四物”即“四物汤”，由当归、地黄、川芎、白芍四味药组成)，可见丹参之妙用。2010版中国药典中记载，丹参具有活血祛瘀、通经止痛等功效，用于主治胸痹心痛等症。临床上常用丹参治疗心血管系统的疾病，且疗效很好。

丹参的化学成分主要包括脂溶性的丹参酮类和水溶性的酚酸类化合物。丹参酮类在骨架上大多具有邻菲醌或对菲醌结构，主要有丹参酮IIA、隐丹参酮、丹参酮I等，其中最主要的代表性成分是丹参酮IIA；丹酚酸类是以咖啡酸和丹参素为结构单元形成的不同单体，主要有丹酚酸B、丹酚酸A、紫草酸、迷迭香酸和丹参素等，其中紫草酸、迷迭香酸和丹参素一般认为是丹酚酸B的降解产物，而丹酚酸A的结构与丹酚酸B差别较大，导致其生物活性作用也有较大的差别，因此，其中最主要的代表性成分是丹酚酸B和丹酚酸A。

目前，源自于丹参的制剂有丹参素注射液、丹参多酚酸盐粉针剂、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液、复方丹参注射液等注射用制剂以及复方丹参片、丹参滴丸、冠心丹参片、精制冠心颗粒、心可舒片等口服制剂。其中，丹参多酚酸盐粉针剂和丹参酮ⅡA磺酸钠注射液在临床上常用于治疗冠心病、心肌梗死、心绞痛等疾病。

目前已报道验证的有丹酚酸B与丹参酮ⅡA具有协同作用：

1、丹酚酸B和丹参酮ⅡA不同配比(10∶0，8∶2，5∶5，2∶8，0∶10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)损伤大鼠心肌细胞具有保护协同作用，其中8∶2配比组显著降低LDH释放水平，参见张萌等，丹酚酸B/丹参酮ⅡA不同配比对肿瘤坏死因子-α损伤大鼠心肌细胞的影响，中国药理学通报，2003，19(9)：992-994。

2、丹酚酸B和丹参酮ⅡA不同配比(10∶0，8∶2，5∶5，2∶8，0∶10)对TNF-α损伤大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC)也具有保护协同作用，丹酚酸B和丹参酮ⅡA各配比组均可提高CMEC活力，降低LDH释放，且二者配伍后的作用明显强于丹酚酸B和丹参酮ⅡA单独使用，参见张萌等，丹酚酸B和丹参酮ⅡA不同配比对肿瘤坏死因子α损伤大鼠心脏微血管内皮细胞的影响，中草药，2004，35(1)：63-65。

3、比较研究等剂量的丹参酮ⅡA、丹酚酸B及其等质量混合物对为临床用垂体后叶素和结扎冠脉所致大鼠实验性心肌缺血模型，双侧颈总动脉结扎所致大鼠实验性脑缺血模型，线栓所致大鼠实验性脑缺血-再灌注模型的影响，结果丹参酮ⅡA及混合物对急性心肌缺血的作用优于丹酚酸B，尤其是对垂体后叶素所致的一过性心肌缺血，丹酚酸B仅在缺血时间较长的冠脉结扎模型中表现一定作用；在两种脑缺血模型中，丹酚酸B及混合物均表现较好的拮抗作用，该作用与丹酚酸B强抗氧化能力和对Ca²⁺-Mg²⁺ATPase降低的抑制有关，表明丹参酮ⅡA、丹酚酸B在心脑缺血的治疗中具有不同的作用特点，在相关药物应用时，应根据临床需要进行恰当选择；二者对心、脑缺血均有一定的协同作用，提示其联合用药可提高疗效，提升药物的临床价值，参见黄凯文等，丹参酮ⅡA和丹酚酸B抗心脑缺血的比较研究，中国医院用药评价与分析，2009，9(6)：449-452。

丹酚酸B可以降低缺氧复氧后心脏微血管内皮细胞ICAM-1的表达，这与缺氧预适应的保护作用相似；进一步的实验发现，丹酚酸B预适应(缺氧前给药)可以抑制微血管内皮细胞分泌ET和NO，明显增强PKC mRNA和HSP70 mRNA的表达，且效果优于缺氧预适应，这些结果提示，丹酚酸B对缺血再灌注心脏的保护作用与激活内源性保护机制有关；在再灌注损伤的模型中，丹酚酸B可以降低损伤后血清CPK水平，缩小心梗面积，明显抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统的激活，调节PGI2和TXA2的水平，降低炎性细胞因子的释放，这些结果从抑制炎症反应的角度，证实丹酚酸B对缺血再灌注心肌细胞的保护作用；在离体心脏和培养心肌细胞的缺氧复氧模型中，丹酚酸B也表现出类似的作用，参见汪芸，丹酚酸B对心脑血管疾病药理作用的研究进展，现代中西医结合杂志，2010，19(35)：4634-4637。

丹参酮ⅡA是丹参中最丰富、结构最具有代表性的丹参酮，也是治疗心血管疾病的有效成分。丹参酮ⅡA磺酸钠是丹参酮ⅡA经磺化后得到的水溶性化合物，与丹参酮ⅡA一样，在治疗心血管疾病方面具有类似的作用，如扩血管、降低血液黏滞度、抗血小板聚集、改善微循环、拮抗血管紧张素Ⅱ和保护心肌细胞等作用。丹参酮ⅡA磺酸钠对心肌梗塞后期ST段抬高、左心室功能损伤及24小时后心肌梗塞范围有良好的影响，能增加侧支循环对缺血区的血液供应，通过抑制线粒体呼吸链复合体(Ⅱ+Ⅲ)的活性来拮抗缺血-再灌注过程中的钙超载现象，减少缺血-再灌注过程中自由基的产生，再加上丹参酮ⅡA磺酸钠清除自由基的能力，从而达到保护心肌的作用，参见杨征等，丹参酮ⅡA的心血管作用及机制研究进展，中国动脉硬化杂志，2011，19(4)：372-374；张玉方等，丹参酮ⅡA及其钠盐的药理研究进展，中国药业，2008，17(1)：1-2。

丹酚酸A具有升高细胞活力和线粒体膜电位，这可能是丹酚酸A降低由于心肌缺血再灌注而引起损伤的作用机制之一，主要表现为能显著升高心肌缺血大鼠血清和心脏中SOD、过氧化氢酶和谷光甘肽转移酶(GSH)含量，降低缺血心肌组织中MDA含量，降低血清CK、LDH水平，显著改善氧化应激状态，还可减轻心肌缺血大鼠线粒体功能损伤、升高其呼吸控制率，说明丹酚酸A通过清除自由基、减轻膜脂质过氧化引起的流动性和通透性变化，阻止了离子的异常通透和酶的漏出，降低了由于心肌缺血再灌注而引起的损伤；促进钾通道开放的作用，并能逆转被氧自由基抑制的钾通道活动，降低心肌细胞的兴奋性，可能是丹酚酸A抗缺血再灌注性心律失常的机制之一，参见张莉等，丹酚酸A的研究与进展，中国中药杂志，2011，36(19)：2603-2609。丹酚酸B与丹酚酸A之间也具有协同作用。丹酚酸A和丹酚酸B不同配比(4∶1，2∶1，1∶1，1∶2，1∶4)均能显著减少大鼠心肌缺血再灌注损伤所致的大鼠心肌梗死范围，升高大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、降低缺血心肌组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量，与模型组比较有显著性差异，且单独使用丹酚酸A或者丹酚酸B效果不如二者配伍组明显，各配比组中以2∶1效果最显著，参见王国振等，丹酚酸A/丹酚酸B不同配比对大鼠心肌缺血再灌注性损伤的保护作用，河北中医药学报，2006，21(2)：4-5，12。

如上所述，目前临床应用的丹酚酸B、丹参酮ⅡA磺酸钠制剂都是将丹参中的主要成分单独使用，上述文献中涉及到的配伍也比较局限，既不能发挥丹参药材的整体治疗作用，也不能体现多成分、多靶点的配伍协同作用。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种丹参提取物的药物组合物及其用途。本发明将丹参中的几种主要成分配伍使用，能更好地发挥中药丹参的多成分、多靶点的协同治疗作用。

本发明还提供该药用组合物的各种制剂。

本发明技术方案如下：

一种丹参提取物的药物组合物，由丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA磺酸钠、丹参酮IIA按以下质量比组合：

a、丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为1～3∶1；

b、丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为2～6∶1；

c、丹酚酸A、丹酚酸B与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为(3～9)∶(1～3)∶(1～2)；

根据本发明优选的，所述的组合物是丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠的组合物。

根据本发明优选的，以50kg人的体重为标准，丹酚酸A的用量为20mg～140mg，更优选的用量是60mg～90mg；丹酚酸B的用量为50mg～400mg，更优选的用量是120mg～280mg；丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠的用量为20mg～120mg，更优选的用量是40mg～80mg。

在以上优选的以50kg人的体重为标准各组分有效剂量范围内各组分可按以下质量比例组合：

一、丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，优选的丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠质量比例及用量组分别如下：

质量比2∶1，用量组选自120mg∶60mg，160mg∶80mg或200mg∶100mg；

质量比3∶1，用量组选自120mg∶40mg，180mg∶60mg或240mg∶80mg；

质量比4∶1，用量组选自160mg∶40mg，200mg∶50mg或240mg∶60mg；

质量比5∶1，用量组选自150mg∶50mg，200mg∶40mg或250mg∶50mg；

质量比6∶1，用量组选自240mg∶40mg或300mg∶50mg。

其中，优选的组合是丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠＝200mg∶50mg，或丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠＝200mg∶40mg。

二、丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠组合物，优选的丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比例及用量组分别如下：

质量比1∶1，用量组选自40mg∶40mg，50mg∶50mg，60mg∶60mg，70mg∶70mg或80mg∶80mg；

质量比2∶1，用量组选自60mg∶30mg，80mg∶40mg或100mg∶50mg；

质量比3∶1，用量组选自60mg∶20mg或90mg∶30mg；

质量比3∶2，用量组选自60mg∶40mg或75mg∶50mg；

质量比4∶1，用量组选自80mg∶20mg。

其中，优选的组合是丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠＝80mg∶40mg或丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠＝75mg∶50mg。

三、丹酚酸B、丹酚酸A与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠组合物，优选的丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠质量比及用量组分别如下：

质量比3∶1∶1，用量组选自180mg∶60mg∶60mg，或210mg∶70mg∶70mg；

质量比4∶1∶1，用量组选自160mg∶40mg∶40mg，200mg∶50mg∶50mg或240mg∶60mg∶60mg；

质量比5∶1∶1，用量组选自200mg∶40mg∶40mg或250mg∶50mg∶50mg；

质量比4∶2∶1，用量组选自160mg∶80mg∶40mg；

质量比5∶2∶1，用量组选自200mg∶80mg∶40mg；

质量比6∶2∶1，用量组选自240mg∶80mg∶40mg或210mg∶70mg∶35mg；

质量比9∶3∶2，用量组选自180mg∶60mg∶40mg。

其中，其中，更优选的组合是

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝200mg∶80mg∶40mg；

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝240mg∶80mg∶40mg，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝210mg∶70mg∶35mg；或，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝180mg∶60mg∶40mg。

本发明所述的丹参提取物丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠均可通过市购获得。或者丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮IIA按照经典的提取分离方法从丹参中提取分离精制而成；丹参酮IIA磺酸钠可按照文献报道的合成方法钱名堃等，化学快报，1978，36(3)：199-206，将丹参酮IIA进行化学结构修饰而合成丹参酮IIA磺酸钠。

根据本发明，所述组合物最优选是下列之一：

丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠质量比为5∶1，以50kg人的体重为标准：丹酚酸B是200mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg；或者，

丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比2∶1，以50kg人的体重为标准：丹酚酸A是80mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg；或者，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比5∶2∶1，以50kg人的体重为标准：丹酚酸B是200mg，丹酚酸A是80mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg。

本发明的丹参提取物的药物组合物的制药用途，用于制备治疗心脑血管疾病药物，特别是用于制备治疗心肌梗死、冠心病、心绞痛等心脏疾病的药物。

本发明的丹参提取物的药物组合物或其药学上可接受的盐与药用辅料组合可制成不同的制剂。

一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，包括所述的丹参提取物的药物组合物或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

优选的，所述药物组合物制成的药物制剂为片剂、胶囊剂、冲剂、注射用冻干制剂或其盐的注射用冻干制剂，最优选的是药物组合物羧酸盐的注射用冻干制剂，可按照药剂学常规生产工艺制备。

所述药物组合物不同剂型的药物制剂详细说明如下：

1.片剂、胶囊剂或冲剂的制作，均按药物组合物的重量百分比。

取所述的丹参提取物的药物组合物，加入2～5重量倍的稀释剂I，5～10wt％的湿润剂，4～15wt％的崩解剂，按常规湿法制粒，干燥，整粒，装袋，或者再加入0.5～3wt％的润滑剂，压片或装入胶囊壳。

上述的丹参提取物的药物组合物优选含有丹参酮IIA的组合物：丹酚酸A与丹参酮IIA组合物；丹酚酸B与丹参酮IIA组合物；丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮IIA组合物；

上述稀释剂I选自淀粉、糖粉、糊精或微晶纤维素；

上述湿润剂选自水或乙醇；

上述崩解剂为羧甲基淀粉钠；

上述润滑剂为硬脂酸镁或滑石粉。

2.药物组合物注射用冻干制剂的制备

取所述的丹参提取物的药物组合物，加入1～5重量倍的药用辅料如甘露醇、氨基酸、葡萄糖或山梨醇，加入0.5～2重量倍的抗坏血酸钠，溶解于蒸馏水中，定容，过滤除菌，无菌条件下分装，冷冻干燥，然后在氮气下密封，即得。

上述的丹参提取物的药物组合物优选含有丹参酮IIA磺酸钠的组合物：丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠组合物；丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠组合物；丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠组合物。

3.药物组合物羧酸盐注射用冻干制剂的制备

取所述的丹参提取物的药物组合物，加入与其等摩尔数的磷酸氢镁，0.5～2重量倍的抗坏血酸钠，1～5重量倍的药用辅料如甘露醇、氨基酸、葡萄糖或山梨醇，溶于蒸馏水中，室温下搅拌10～30分钟，溶解，过滤除去不溶物，再过滤除菌，无菌条件下分装，冷冻干燥，然后在氮气下密封，即得。

上述的丹参提取物的药物组合物优选含有丹参酮IIA的组合物：丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠组合物；丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠组合物；丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠组合物。

4.药物组合物羧酸盐注射用粉针剂的制备

取所述的丹参提取物的药物组合物，加入与其等摩尔数的磷酸氢镁、0.5～2重量倍的抗坏血酸钠，1～5重量倍的药用辅料如甘露醇、氨基酸、葡萄糖或山梨醇，溶于蒸馏水中，室温下搅拌10～30分钟，溶解，过滤除去不溶物，再过滤除菌，在无菌条件下冷冻干燥，将所新制得的药物组合物研细、混匀，分装，在氮气下密封，即得。

本发明的一种丹参提取物的药物组合物及其制剂用于治疗心脑血管疾病，尤其治疗心肌梗死、冠心病、心绞痛等心脏疾病。

丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮IIA(丹参酮IIA磺酸钠)在治疗心血管疾病方面的作用机制是有所不同的。正是由于上述作用机制的不同，丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮IIA(丹参酮IIA磺酸钠)配伍应用才具有协同作用，组合在一起应用的治疗效果才能优于单独应用。因此，丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮IIA作为丹参中的主要有效成分，将其联合应用，能更完整地体现丹参的药效及其对心血管疾病的治疗作用。丹参酮IIA为脂溶性成分，不溶于水，适合于制备口服制剂，很难制成注射用制剂；可采用与丹参酮IIA具有类似药理作用的丹参酮IIA的化学修饰物丹参酮IIA磺酸钠代替丹参酮IIA，由于丹参酮IIA磺酸钠水溶性很好，可以与丹酚酸B和丹酚酸A联用，制成注射用制剂，更好地达到治疗效果。

本发明的药物组合物的药效学研究

本实验采用结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型，观察丹参主要成分及其组合物对实验性心肌梗死的保护作用。

动物分组：Wistar雄性大鼠80只，体重280～300g，由山东大学实验动物中心提供。将大鼠随机分组，每组10只，分为假手术组、模型组以及给药组，其中给药组每kg大鼠的给药量为人每千克体重正常用量的5倍，各给药组及其给药量如下：

丹酚酸B组 20mg/kg

丹酚酸A组 8mg/kg

丹参酮IIA磺酸钠组 4mg/kg

丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠为5∶1组(B∶IIAS组)20mg/kg+4mg/kg

丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠为2∶1组(A∶IIAS组)8mg/kg+4mg/kg

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠为5∶2∶1组(B∶A∶IIAS组)20mg/kg+8mg/kg+4mg/kg

给药方法：术前禁食过夜，自由饮水。术后当天腹腔注射给药，连续给药7天。假手术组、模型组均同样方法给予同体积的生理盐水。

大鼠模型制备：雄性大鼠，参照文献方法雷娟等，中国实用医药，2009，4(2)：1-3，水合氯醛腹腔注射麻醉，经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间)，连接小动物呼吸机予以正压通气，潮气量3～5ml/100g，呼吸频率60次/分钟，吸呼比1∶1。左侧胸部经胸骨左缘第4肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，结扎冠脉左前降支后，观察左室前壁部分心肌变苍白，并出现室壁运动减弱，同时心电图见S-T段弓背上抬，确定冠脉结扎成功(S-T段无改变者弃去)。逐层缝合胸壁，自主呼吸恢复后拔出通气导管。术后连续3d予以青霉素40万U腹腔注射以预防感。

假手术对照组除不结扎冠状动脉外，其余步骤相同。

仪器与试剂：ALC-V8型动物心电图机(上海奥尔特生物科技有限公司)，ECG-6511型动物心电图机(上海光电医用电子仪器有限公司)，离心机(德国)，电子分析天平(上海，梅特勒-托利多仪器有限公司)；肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

统计学处理：实验数据用

表示，计数等级资料采用秩和检验，计量资料采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析处理。组间比较应用t检验，P＜0.05为显著性差异，P＜0.01为非常显著性差异。

实验结果：

丹参主要成分及其组合物对心肌梗死模型大鼠血清LDH及CK活性的影响：末次给药1小时后，麻醉大鼠，腹主动脉取血约4ml，3000rpm离心10min，取血清，按试剂盒说明书测定大鼠血清中肌酸磷酸酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的值。结果见表1，模型组与假手术组比较，具有显著性差异，说明造模成功；各给药组与模型组比较，均具有显著性差异，说明各给药组对大鼠心肌梗死模型均具有治疗作用，其中丹酚酸A、丹酚酸B与丹参酮ⅡA磺酸钠联合用药组的疗效也优于各组成成分单独给药组的，尤其当丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮ⅡA磺酸钠联合使用时疗效最好，表明它们之间具有配伍协同作用。

表1丹参主要成分及其组合物对心肌梗死模型大鼠血清CK、LDH活性的影响

注：a.与模型组比较^*P＜0.05；b.表中B代表丹酚酸B，A代表丹酚酸A，IIAS代表丹参酮IIA磺酸钠；

药物组合物对心肌缺血大鼠心肌梗死范围的影响：大鼠取血完毕，摘取心脏，放置-20℃冰箱30分钟后取出，在冠脉结扎线以下，将心室横切成6片，生理盐水冲洗后，置于0.5％氯化硝基四氮唑蓝的磷酸缓冲溶液中，37℃水浴条件下染色20分钟，正常心肌为暗蓝色，梗死心肌组织不变色。分离梗死心肌与正常心肌，分别称重，计算梗死心肌占全心室的百分数。结果见表2，模型组心肌梗死重比为13.09％，与假手术组有显著性差异，说明该模型符合要求；各给药组与模型组比较，心肌梗死范围相对较小，均具有显著性差异，说明各给药组对大鼠心肌梗死模型均具有治疗作用，其中丹酚酸A、丹酚酸B与丹参酮ⅡA磺酸钠的联合用药组比单独使用组效果更好，说明配伍用药比单独用药疗效好，尤其当丹酚酸A、丹酚酸B和丹参酮ⅡA磺酸钠同时配伍使用时疗效最好，表明它们之间具有配伍协同作用。

表2丹参主要成分及其组合物对心肌缺血大鼠心肌梗死范围的影响

注：1.与模型组比较^*P＜0.05；

2.表中B代表丹酚酸B，A代表丹酚酸A，IIAS代表丹参酮IIA磺酸钠

根据上述药效学实验，本发明的丹参提取物的药物组合物具有配伍协同作用，配伍使用对心肌梗死模型大鼠具有比较好的治疗作用，适合于制备相应的药物制剂，用于治疗心脑血管疾病，尤其是用于治疗心肌梗塞、冠心病、心绞痛等心脏疾病。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。

实施例中所用原料丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA、丹参酮IIA磺酸钠纯品从市场购得，例如西安鸿生生物技术有限公司或南京泽朗医药科技有限公司有售。

实施例中所用原料丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA、丹参酮IIA磺酸钠也可以按以下现有的技术制备。

按照经典的方法制备丹参酮IIA：将原料丹参的根粉碎，以10倍量95％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，浓缩至无乙醇，加水稀释至原料的5重量倍，以等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液，蒸干乙酸乙酯，所得固体物进行硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂洗脱，反复进行2～3次硅胶柱层析分离，即可得纯度大于98％的丹参酮ⅡA。

按照经典的方法制备丹酚酸A、丹酚酸B：将原料丹参粉或95％乙醇提取后药渣，加入8倍量的水，加热80℃提取，重复提取2次，合并水提取液，浓缩至比重为1.15～1.20(60℃下测)，加入乙醇至其含量为75％，沉淀，滤过，将滤液在减压条件下浓缩至无乙醇，先进行大孔吸附树脂柱层析纯化，然后反复进行C18反相硅胶柱层析或结合制备性高效液相色谱法进行分离，即可得到纯度大于95％的丹酚酸A单体和丹酚酸B单体。

按照文献方法制备丹参酮ⅡA磺酸钠：参照文献的合成方法钱名堃等，化学快报，1978，36(3)：199-206，上述所得的丹参酮ⅡA，在醋酸存在下，滴加浓硫酸-冰醋酸混合液(1∶1，v/v)，室温下搅拌1小时，反应液倾入等体积的蒸馏水中，过滤，加入氯化钠饱和溶液盐析，过滤结晶，甲醇重结晶，即得橙红色细柱状的丹参酮ⅡA磺酸钠结晶。

实施例1：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(5∶2∶1)冻干制剂

取实施例1中丹酚酸B 20g、丹酚酸A 8g和丹参酮IIA磺酸钠4g，加入32g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于350ml蒸馏水中，定容至400ml，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例2：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(3∶1∶1)冻干制剂

取实施例1中丹酚酸B 21g、丹酚酸A 7g和丹参酮IIA磺酸钠7g，加入7.4g磷酸氢镁、35g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于250ml蒸馏水中，搅拌20分钟，定容至300ml，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例3：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(9∶3∶2)冻干粉针剂

取丹酚酸B 18g、丹酚酸A 6g和丹参酮IIA磺酸钠4g，加入6g磷酸氢镁、27g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于250ml蒸馏水中，搅拌20分钟，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下冷冻干燥，将所新制得的粉末性药物组合物分装于100个西林瓶中，在氮气下密封，即得。

实施例4：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA(4∶2∶1)片剂

取丹酚酸B 80g、丹酚酸A 40g和丹参酮IIA 20g，加入淀粉130g，糊精45g，蔗糖粉3.5g，以上固体物质均分别研磨过80目筛，混匀，加入适量10％淀粉浆作粘合剂，制成湿颗粒，60℃下干燥，整粒，加入滑石粉1.5g，混匀，压制成1000片，即得。

实施例5：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA(5∶1∶1)胶囊剂

取丹酚酸B 100g、丹酚酸A 20g和丹参酮IIA 20g，加入淀粉140g，糊精45g，蔗糖粉3.5g，以上固体物质均分别研磨过80目筛，混匀，加入适量10％淀粉浆作粘合剂，制成湿颗粒，60℃下干燥，整粒，加入硬脂酸镁1.5g，混匀，装入胶囊壳1000粒，即得。

实施例6：丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA(4∶1∶1)颗粒剂

丹酚酸B 24g、丹酚酸A 6g和丹参酮IIA 6g，加入淀粉164g，糊精75g，微晶纤维素25g，以上固体物质均分别研磨过80目筛，混匀，加入适量10％淀粉浆作粘合剂，制成湿颗粒，60℃下干燥，整粒，分装成100袋，即得。

实施例7：丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠(5∶1)冻干制剂

取丹酚酸B 20g、丹参酮IIA磺酸钠4g，加入24g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于250ml蒸馏水中，定容至300ml，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例8：丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠(4∶1)冻干制剂

取丹酚酸B 20g、丹参酮IIA磺酸钠5g，加入7.0g磷酸氢镁、25g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于200ml蒸馏水中，搅拌20分钟，定容至250ml，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例9：丹酚酸B和丹参酮IIA磺酸钠(2∶1)冻干粉针剂

取实施例1中丹酚酸B 12g、丹参酮IIA磺酸钠6g，加入4.5g磷酸氢镁、18g抗坏血酸钠、7.5g甘露醇，溶于200ml蒸馏水中，搅拌20分钟，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下冷冻干燥，将所新制得的粉末性药物组合物分装于100个西林瓶中，在氮气下密封，即得。

实施例10：丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(2∶1)冻干制剂

取实施例1中丹酚酸A 10g、丹参酮IIA磺酸钠5g，加入15g抗坏血酸钠、7.5g甘露醇，溶于150ml蒸馏水中，定容至200ml，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例11：丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(1∶1)冻干制剂

取实施例1中丹酚酸A 8g、丹参酮IIA磺酸钠8g，加入5.2g磷酸氢镁、16g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于130ml蒸馏水中，搅拌10分钟，定容至150ml，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下分装于100个西林瓶中，冷冻干燥，在氮气下密封，即得。

实施例12：丹酚酸A和丹参酮IIA磺酸钠(3∶2)冻干粉针剂

取实施例1中丹酚酸A 9g和丹参酮IIA磺酸钠6g，加入4.6g磷酸氢镁、15g抗坏血酸钠、12.5g甘露醇，溶于150ml蒸馏水中，搅拌10分钟，滤除不溶物，过滤除菌，无菌条件下冷冻干燥，将所新制得的粉末性药物组合物分装于100个西林瓶中，在氮气下密封，即得。

Claims

1.一种丹参提取物的药物组合物，由丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮IIA磺酸钠、丹参酮IIA按以下质量比组合：

a、丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为1～3∶1；

b、丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为2～6∶1；

c、丹酚酸A、丹酚酸B与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠的组合物，质量比为(3～9)∶(1～3)∶(1～2)。

2.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于以50kg人的体重为标准，丹酚酸A的用量为20mg～140mg，丹酚酸B的用量为50mg～400mg，丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠的用量为20mg～120mg。

3.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于以50kg人的体重为标准，丹酚酸A的用量为60mg～90mg；丹酚酸B的用量为120mg～280mg；丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠的用量为40mg～80mg。

4.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述丹酚酸B与丹参酮IIA磺酸钠的组合物，丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠质量比及以50kg人的体重为标准的用量组分别如下：

质量比2∶1，用量组选自120mg∶60mg，160mg∶80mg或200mg∶100mg；

质量比3∶1，用量组选自120mg∶40mg，180mg∶60mg或240mg∶80mg；

质量比4∶1，用量组选自160mg∶40mg，200mg∶50mg或240mg∶60mg；

质量比5∶1，用量组选自150mg∶50mg，200mg∶40mg或250mg∶50mg；

质量比6∶1，用量组选自240mg∶40mg或300mg∶50mg。

5.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述丹酚酸A与丹参酮IIA磺酸钠组合物，丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比例及以50kg人的体重为标准的用量组分别如下：

质量比2∶1，用量组选自60mg∶30mg，80mg∶40mg或100mg∶50mg；

质量比3∶1，用量组选自60mg∶20mg或90mg∶30mg；

质量比3∶2，用量组选自60mg∶40mg或75mg∶50mg；

质量比4∶1，用量组选自80mg∶20mg；

6.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述丹酚酸B、丹酚酸A与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠组合物，丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠质量比及以50kg人的体重为标准的用量组分别如下：

质量比4∶2∶1，用量组选自160mg∶80mg∶40mg；

质量比5∶2∶1，用量组选自200mg∶80mg∶40mg；

质量比9∶3∶2，用量组选自180mg∶60mg∶40mg。

7.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述丹酚酸B、丹酚酸A与丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠组合物以50kg人的体重为标准的用量组是：

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝200mg∶80mg∶40mg，或者，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝240mg∶80mg∶40mg，或者，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA或丹参酮IIA磺酸钠＝210mg∶70mg∶35mg，或者，

8.如权利要求1所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述组合物是下列之一：

丹酚酸B∶丹参酮IIA磺酸钠质量比为5∶1，以50kg人的体重为标准的：丹酚酸B是200mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg；

丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比2∶1，以50kg人的体重为标准的：丹酚酸A是80mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg；或者，

丹酚酸B∶丹酚酸A∶丹参酮IIA磺酸钠质量比5∶2∶1，每公斤体重用量：丹酚酸B是200mg，丹酚酸A是80mg，丹参酮IIA磺酸钠40mg。

9.如权利要求1～8任一项所述的丹参提取物的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物为片剂、胶囊剂、冲剂或注射用冻干制剂；优选的是药物组合物羧酸盐的注射用冻干制剂。

10.权利要求1～8任一项所述的丹参提取物的药物组合物的制药用途，用于制备治疗心脑血管疾病的药物，特别是用于制备治疗心肌梗死、冠心病或心绞痛的药物。