CN101278730A - 灵芝红景天口服液的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明主要涉及生物领域中保健口服液的制备方法。一种灵芝红景天口服液的制备方法，其主要特点在于原料包括有灵芝菌滤液体积比为60－90％，红景天浸出液的体积比为10－40％，其中红景天为红景天浸出液的重量比为1－2％；其制备步骤如下：将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值4－5，升温40－60℃，保持时间12－24小时，利用活菌自身产生的溶解酶使其菌丝体和菌细胞壁溶解，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用；按得到的灵芝菌滤液体积加入红景天的浸出液，充分混合，在温度40－60℃，保持12－24小时，过滤。本发明制备方法简单，易于工业化生产应用。本口服液风味独特，药效稳定，具有很高的医疗保健作用。
Description
技术领域：
本发明主要涉及生物领域中保健口服液的制备方法，尤其涉及含有灵芝菌丝体红景天口服液的制备方法。
背景技术：
随着现代生活节奏的加快，社会竞争的加剧，再加之工作学习的压力和环境污染的影响，疲劳和缺氧已成为威胁人们健康的重要问题，为了提高机体抗疲劳、耐缺氧和免疫的能力，保持健康体魄，延缓衰老，延长生命，于是追求一些保健食品和保健药品，已成为时尚，特别是以灵芝为主要原料所制备的保健品更是受到青睐。因为灵芝有仙草之誉有“安惊魂，补肝益气，坚筋骨，好颜色，利关节，祛痰健脾，活血”等功效，临床实验证明，灵芝对人体有“扶正固本，滋补强壮，延年益寿”和有病治病，无病防病的双向调节作用，现在灵芝已作为药物正式被国家药典收载，同时又是被国家批准的新资源食品，可药食两用，被誉为中药圣品。它的主要有效成分是高分子灵芝多糖，三萜，灵芝酸及脲嘌呤核苷等生物活性物质，存在于天然灵芝子实体和菌丝体中。由于子实体生长周期长，所需劳动力强度大，受自然气候条件的影响大，产量和质量不稳定，子实体木质化程度高，多糖和其它生物活性物质含量低等原因，不适应工业化生产。
发明内容：
本发明的目的在于避免现有技术的不足之处而提供一种灵芝红景天口服液的制备方法。采用液态深层微生物发酵技术生产灵芝菌丝体和发酵液，质量稳定，生产周期短，成本低，产量大，并且具有工业化生产前景。
本发明的另一个目的在于将红景天作为配伍，以增强口服液的耐缺氧，抗疲劳和抗辐射的保健作用。
本发明的目的可以通过采用以下技术方案来实现：一种灵芝红景天口服液的制备方法，其主要特点在于原料包括有灵芝菌滤液体积比为60-90％，红景天浸出液的体积比为10-40％，其中红景天为红景天浸出液的重量比为1-2％；其制备步骤如下：将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值4-5，升温到40-60℃，保持时间12-24小时，利用活菌自身产生的溶解酶使其菌丝体和菌细胞壁溶解，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用；按得到的灵芝菌滤液体积加入红景天的浸出液，充分混合，在温度40-60℃，保持12-24小时，过滤。
所述的红景天的浸出液的制备方法是：称取红景天10-20重量份，按500-1000倍加水进行煎煮三次，第一次煎煮1小时，冷却后收集滤液；将滤渣加水第二次煎煮45分钟冷却过滤，收集滤液，将滤渣加水第三次煎煮30分钟，冷却后过滤、弃渣，三次滤液合并定容，使其每100ml含药量为1-2g。
所述的灵芝红景天口服液的制备方法，还包括有加入白砂糖26％或甜蜜素0.02-0.06％，柠檬酸0.30.7％，蜂蜜0.5-1.5％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.01-0.03％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
所述的发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液的制备步骤为：
(1)首先进行灵芝菌斜面菌种的制备：其培养基为，去皮马铃薯18-22重量份，葡萄糖1-3重量份，磷酸二氢钾0.10-0.20重量份，硫酸镁0.065-0.085重量份，VB1 0.010-0.025重量份，琼脂粉1.5-3重量份，水80-100重量份，PH自然；经115-120℃、25-30分钟高压灭菌后，冷却至45-48℃，摆成斜面，待凝固后，冷藏备用；取天然灵芝菌柄与菌盖连接处的小组织块，放入0.2％的汞水或75％的乙醇内浸泡1分钟，取出用无菌水冲洗1-2次，用无菌纱布吸干水渍，放入清洁的培养皿中，用消毒过的小刀切取3-5mm3的组织菌肉，移接在固体斜面培养基中心，在26-30℃恒温下，培养8-10天，待菌丝长满培养基斜面，再移接到新的琼脂斜面培养基上，培养成固体斜面菌种；
(2)液体菌种的制备：其培养液以重量千分比组成为葡萄糖26-30‰，豆面粉8-12‰，玉米粉2-6‰，磷酸二氢钾1.0-2.5‰，硫酸镁0.55-0.95‰，VB1 0.10-0.25‰，水为无菌水或灭菌自来水，PH自然，取上述培养液分装于500ml的三角烧瓶中，分装量为瓶容量的四分之一，经115-120℃，25-30分钟灭菌后，冷却至32-36℃，将步骤(1)的1-3cm2多块灵芝菌斜面菌种在无菌条件接入盛有培养液的500ml的三角烧瓶中，在120-125r/min摇床上于温度26-30℃培养4-6天，成为菌悬液并显示菌丝片断和大量的菌丝球充满发酵液，发酵液变清液，为液体菌种；
(3)深层液态发酵扩大培养：将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养容器中，接入量为培养液的5-10％，培养液的制备方法与步骤(2)相同，培养液经灭菌后冷却至32-36℃，在无菌条件下接入液体菌种，进行恒温通气液态发酵培养；当培养液变清并有大量菌丝片断和菌丝球出现时终止；而后的二级三级深层发酵培养依此类推。
灵芝发酵液的成熟标准为：
1.菌体形态观察，灵芝菌丝壁上无明显的“芽头与销状联合”，菌丝变细，菌丝原生质凝集，少数菌丝有自溶现象。
2.灵芝菌丝重量(湿重)为15-20％或黏度不增加。
3.灵芝发酵液pH值下降到2.5-3.0。
配伍原料红景天，是珍稀药用植物之一，被誉为“高原人参”，是我国批准的新食品资源。制备本口服液是选用西藏品种中唯一收载于《中国药典》中的大花红景天品种，其生长在海拔4000m以上的高寒地带，由于缺氧、低温、干燥、狂风、强紫外线照射、昼夜温差大等恶劣环境，形成了独特的生命活动机制和生物活性成分。它的主要化学成分是红景天苷、黄酮类、有机酸类、香豆素类和多种微量元素。具有气味芳香、味微苦涩，后甜，性甘苦平，归肺、心经。具有益气活血、通脉平喘等功能；是辅助缓解体力疲劳、耐缺氧等功能的常用原料。
灵芝红景天口服液是基于传统中医药，现代营养学和生命科学等综合科学，将药食两用灵芝大型担子菌通过生物发酵所产生的灵芝多糖等多种活性成分与红景天药用植物的活性成分配伍，制备出具有增强机体免疫力、抗疲劳、耐缺氧的复合性保健口服液，克服了大多数以单一的灵芝液态深层发酵培养制备的灵芝口服液或饮料和利用以干燥的灵芝子实体粉碎浸提而生产的口服液，这些口服液一方面所用原料单一，另一方面营养成分也不全，而干灵芝子实体生产的口服液生物活性物质少，其中的有效成分不易被人们吸收。
我们研制的口服液是以灵芝为主料，重在扶正固本，强壮机体，提高机体免疫力，配以红景天以发挥抗疲劳耐缺氧、抗辐射的作用，为了增强口服液的感官质量，使之口服液，色、香、味更能体现灵芝红景天口服液的天然风味，配方又选择了辅料甜味素，酸味剂和稳定剂，不添加防腐剂。调配出的口服液具有棕黄色、透明，具有红景天天然清香气，口感酸甜柔和。具有调节机体功能，缓解机体疲劳的保健作用。
本发明取得的效果是：利用本发明制得的灵芝红景天口服液具有棕黄色，透明具有红景天天然清香气，口感酸甜柔和。本口服液风味独特，清新爽口，营养丰富，药效稳定，易于吸收，服用安全，具有很高的医疗保健作用，对于开拓保健食品，进一步开发利用灵芝红景天等药材资源具有一定的实际意义。本发明制备方法简单，易于工业化生产应用。
在对50人的应用试验时，以每人每天早晚各服用一次，每次服用量为20-30ml，每人服用总量为2000-3000ml后，结果证明：有40人感觉对睡眠有明显的改善；有42人感觉机体免疫力明显增强，冬天不感冒或感冒症状不明显；有38人感觉对肠胃功能有明显改善，食欲增加，精神状况较好；有32人感觉对心脑血管疾病有明显好转；有38人感觉对调节大小便明显；有26例的气管炎和哮喘病人明显好转；有10例舌裂病人得到治愈；有2例胃癌和2例肺癌病人手术后经放疗和化疗，服用该口服液后能增加食欲恢复虚弱的身体，精神状况有明显的改善。同时对口腔溃疡、咽炎、前列腺炎、过敏症也有较好的治疗作用。
具体实施方式
实施例1：一种灵芝红景天口服液的制备方法。
(1)首先进行灵芝菌斜面菌种的制备：其培养基为，去皮马铃薯20g，葡萄糖2g，磷酸二氢钾0.15g，硫酸镁0.075g，VB1 0.015g，琼脂粉2g，无菌水或灭菌自来水100ml，PH自然；经120℃、25分钟高压灭菌后，冷却至45℃，摆成斜面，待凝固后，冷藏备用；取天然灵芝菌柄与菌盖连接处的小组织块，放入0.2％的汞水或75％的乙醇内浸泡1分钟，取出用无菌水冲洗1-2次，用无菌纱布吸干水渍，放入清洁的培养皿中，用消毒过的小刀切取3-5mm3的组织菌肉，移接在固体斜面培养基中心，在26-30℃恒温下，培养8-10天，待菌丝长满培养基斜面，再移接到新的琼脂斜面培养基上，培养成固体斜面菌种。
(2)液体菌种的制备：按培养液总质量为1公斤，培养液组成为葡萄糖30g，豆面粉10g，玉米粉4g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.75g，VB1 0.15g，水为无菌水或灭菌自来水，PH自然，取上述培养液分装于500ml的三角烧瓶中，分装量为瓶容量的四分之一，经120℃，30分钟灭菌后，冷却至32℃，将步骤(1)的1cm2多块灵芝菌斜面菌种在无菌条件接入盛有培养液的500ml的三角烧瓶中，在120r/min摇床上于温度28℃培养5天，成为菌悬液并显示菌丝片断和大量的菌丝球充满发酵液，发酵液变清液，为液体菌种。
(3)深层液态发酵扩大培养：将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养容器中，接入量为培养液的6％，培养液的制备方法与步骤(2)相同，培养液经灭菌后冷却至32-36℃，在无菌条件下接入液体菌种，进行恒温通气液态发酵培养；当培养液变清并有大量菌丝片断和菌丝球出现时终止；而后的二级三级深层发酵培养依此类推。
(4)将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值4.0，升温40℃，保持时间24小时，利用活菌自身产生的溶解酶使其菌丝体和菌细胞壁溶解，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用。
(5)红景天的浸出液的制备方法是：选取符合质量的大花红景天10g，加水1000ml进行煎煮三次，第一次煎煮1小时，冷却后收集滤液；将滤渣加水第二次煎煮45分钟冷却过滤，收集滤液，将滤渣加水第三次煎煮30分钟，冷却后过滤、弃渣，三次滤液合并定容1000ml，使其每100ml含药量为1g。
(6)取步骤4得到的灵芝菌滤液600ml，加入400ml红景天的浸出液，充分混合，在温度40℃，保持24小时，过滤后，再加入白砂糖3％，柠檬酸0.3％，蜂蜜1.5％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.02％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
实施例2：一种灵芝红景天口服液的制备方法。
步骤(1)至步骤(3)与实施例1相同。
(4)将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值4.5，升温50℃，保持时间18小时，利用活菌自身产生的溶解酶使其菌丝体和菌细胞壁溶解，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用。
(5)红景天的浸出液的制备方法是：选取符合质量的大花红景天15g，加水1000ml进行煎煮三次，第一次煎煮1小时，冷却后收集滤液；将滤渣加水第二次煎煮45分钟冷却过滤，收集滤液，将滤渣加水第三次煎煮30分钟，冷却后过滤、弃渣，三次滤液合并定容1000ml，使其每100ml含药量为1.5g。
(6)取步骤4得到的灵芝菌滤液700ml，加入300ml红景天的浸出液，充分混合，在温度50℃，保持18小时，过滤后，再加入甜蜜素0.03％，柠檬酸0.3％，蜂蜜3％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.02％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
实施例3：一种灵芝红景天口服液的制备方法。
步骤(1)至步骤(3)与实施例1相同。
(4)将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值5.0，升温60℃，保持时间12小时，利用活菌自身产生的溶解酶使其菌丝体和菌细胞壁溶解，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用。
(5)红景天的浸出液的制备方法是：选取符合质量的大花红景天20g，加水1000ml进行煎煮三次，第一次煎煮1小时，冷却后收集滤液；将滤渣加水第二次煎煮45分钟冷却过滤，收集滤液，将滤渣加水第三次煎煮30分钟，冷却后过滤、弃渣，三次滤液合并定容1000ml，使其每100ml含药量为2g。
(6)取步骤4得到的灵芝菌滤液800ml，加入200ml红景天的浸出液，充分混合，在温度40℃，保持12小时，过滤后，再加入加入白砂糖6％，柠檬酸0.7％，蜂蜜5％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.03％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
实施例4：一种灵芝红景天口服液的制备方法。
步骤(1)至步骤(3)与实施例1相同。步骤(4)至步骤(5)与实施例3相同。
(6)取步骤4得到的灵芝菌滤液900ml，加入100ml红景天的浸出液，充分混合，在温度60℃，保持12小时，过滤后，再加入白砂糖6％，柠檬酸0.7％，蜂蜜1.5％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.03％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
Claims (4)
1.一种灵芝红景天口服液的制备方法，其特征在于原料包括有灵芝菌滤液体积比为60-90％，红景天浸出液的体积比为10-40％，其中红景天为红景天浸出液的重量比为1-2％；其制备步骤如下：将液态发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液一起放在捣碎机中制浆，调节pH值4-5，升温到40-60℃，保持时间12-24小时，过滤并收集滤液，滤渣重复处理一次，合并两次滤液，盛于容器内备用；按得到的灵芝菌滤液体积加入红景天的浸出液，充分混合，在温度40-60℃，保持12-24小时，过滤。
2.如权利要求1所述的灵芝红景天口服液的制备方法，其特征在于：所述的红景天的浸出液的制备方法是：称取红景天10-20重量份，按500-1000倍加水进行煎煮三次，第一次煎煮1小时，冷却后收集滤液；将滤渣加水第二次煎煮45分钟冷却过滤，收集滤液，将滤渣加水第三次煎煮30分钟，冷却后过滤、弃渣，三次滤液合并定容，使其每100ml含药量为1-2g。
3.如权利要求1或2所述的灵芝红景天口服液的制备方法，其特征在于：还包括有加入白砂糖2-6％或甜蜜素0.02-0.06％，柠檬酸0.3-0.7％，蜂蜜0.5-1.5％，稳定剂D-抗坏血酸钠0.01-0.03％，充分混合溶解后，过滤，灭菌，装瓶，冷藏。
4.如权利要求1所述的灵芝红景天口服液的制备方法，其特征在于：所述的发酵的灵芝菌丝体和灵芝发酵液的制备步骤为：
(1)首先进行灵芝菌斜面菌种的制备：其培养基为，去皮马铃薯18-22重量份，葡萄糖1-3重量份，磷酸二氢钾0.10-0.20重量份，硫酸镁0.065-0.085重量份，VB1 0.010-0.025重量份，琼脂粉1.5-3重量份，水80-100重量份，PH自然；经115-120℃ 25-30分钟高压灭菌后，冷却至45-48℃，摆成斜面，待凝固后，冷藏备用；取天然灵芝菌柄与菌盖连接处的小组织块，放入0.2％的汞水或75％的乙醇内浸泡1分钟，取出用无菌水冲洗1-2次，用无菌纱布吸干水渍，放入清洁的培养皿中，用消毒过的小刀切取3-5mm3的组织菌肉，移接在固体斜面培养基中心，在26-30℃恒温下，培养8-10天，待菌丝长满培养基斜面，再移接到新的琼脂斜面培养基上，培养成固体斜面菌种；
(2)液体菌种的制备：其培养液以重量千分比组成为葡萄糖26-30‰，豆面粉8-12‰，玉米粉2-6‰，磷酸二氢钾1.0-2.5‰，硫酸镁0.55-0.95‰，VB1 0.10-0.25‰，水为无菌水或灭菌自来水，PH自然，取上述培养液分装于500ml的三角烧瓶中，分装量为瓶容量的四分之一，经115-120℃，25-30分钟灭菌后，冷却至32-36℃，将步骤(1)的1-3cm2多块灵芝菌斜面菌种在无菌条件接入盛有培养液的500ml的三角烧瓶中，在120-125r/min摇床上于温度26-30℃培养4-6天，成为菌悬液并显示菌丝片断和大量的菌丝球充满发酵液，发酵液变清液，为液体菌种；
(3)深层液态发酵扩大培养：将液体菌种在无菌条件下接入一级深层发酵培养容器中，接入量为培养液的5-10％，培养液的制备方法与步骤(2)相同，培养液经灭菌后冷却至32-36℃，在无菌条件下接入液体菌种，进行恒温通气液态发酵培养；当培养液变清并有大量菌丝片断和菌丝球出现时终止；而后的二级三级深层发酵培养依此类推。
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