CN101167788A - 一种用于久病虚损,气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质控方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，属于药品的技术领域。贞芪扶正中药制剂是以黄芪和女贞子等中药材组成，具有补气养阴，提高人体免疫功能，保护骨髓和肾上腺皮质的功效，用于久病虚损，气阴不足等症状者，目前临床上广泛用于配合手术、放射治疗、化学治疗，促进正常功能的恢复等。本发明提供了一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，这种方法向有关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该中药制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品品质。

Description

一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质控方法

技术领域：

本发明涉及一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，属于药品的技术领域。

背景技术：

贞芪扶正中药制剂是以黄芪和女贞子等两味药组成，具有补气养阴，提高人体免疫，保护骨髓和肾上腺皮质的功效，用于久病虚损，气阴不足的上述症状者，目前临床上广泛用于配合手术、放射治疗、化学治疗，促进正常功能的恢复等。药物制剂必须要在保证产品质量稳定可控安全的基础上，才能不断的更新发展，为了更好的控制该中药制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要研究、控制该中药制剂质量的方法。虽然许多药学工作者产品的制备工艺上做了大量的研究工作，如专利号为“200510032415.8”发明名称为“贞芪扶正制剂及其制备方法”等等制备方法的改进，但是它根本不能全面反应产品的质量，目前对于贞芪扶正胶囊的质量控制方法为《部颁标准》第十七册111页或者为《部颁标准》第二十册117页贞芪扶正颗粒的质量控制方法，只是采用了单一的黄芪甲苷有效成分作为鉴别和含测指标，且该方法的鉴别和含测均采用薄层色谱法进行，薄层色谱法测定含量重现性差，测定结果不准确，仅以此用来控制该中药制剂的质量不是十分合理；如果用其它的指标进行控制，由于没有现成的检测方案、检测条件等，所以比较难于实施。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，这种方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等；以便更好的控制该中药制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地。

本发明涉及黄芪药材或其提取物、女贞子药材或其提取物按照一定的比例组方制成的中药制剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目，它是将黄芪对照药材、乙酰黄芪苷I、黄芪苷I、黄芪苷II、黄芪苷III、黄芪甲苷、异黄芪苷I、异黄芪苷II、黄芪皂苷乙、环黄芪醇、大豆皂苷I、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、鼠李柠檬素苷元、异槲皮苷、棉毛黄芪甲苷、棉毛黄芪苷VI、棉毛黄芪苷II、女贞子对照药材、齐墩果酸、熊果酸、女贞苷、红景天苷、丁香苷、苦杏仁苷酶、转化酶、乌索酸、D-甘露醇、A-乌索酸甲酯、萎陵菜酸、胡萝卜苷、己六醇、木犀草素-7-O-B-D-葡萄糖苷、对羟基苯乙醇-B-D-葡萄糖苷、女贞子酸、阿拉伯糖、葡萄糖、硬脂酸、油酸、白桦脂醇、磷脂、橄榄苦苷、8-表金银花苷、乙酰齐墩果酸、乙酰熊果酸、女贞苷酸、β-谷甾醇、有旋-花旗松素、外消旋圣草素、10-羟基橄榄苷中的全部或部分品种作为该中药制剂的质量控制的检测指标。

本发明所述的一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，是将黄芪甲苷、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、黄芪对照药材、葡萄糖、齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、甘露醇、己六醇、乌索酸、β-谷甾醇、女贞子对照药材中的全部或部分品种作为该中药制剂的鉴别方法、含量测定方法的检测指标。

本发明所述的一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，采用以下方法中全部或部分作为质量控制的方法：

对于黄芪的鉴别方法可以采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30μl之间任一体积，以黄芪对照药材、黄芪甲苷、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法；

对于黄芪的鉴别方法还可以采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水、甲醇中的一种或一种以上的溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以黄芪对照药材、黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内；

对于女贞子的鉴别方法也可以采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30μl之间任一体积，以齐墩果酸、熊果酸、乌索酸、红景天苷、甘露醇、槲皮苷、己六醇、乌索酸、槲皮素、葡萄糖、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样或者是以甲醇或三氯甲烷或二氯甲烷或乙醚或无水乙醇或醋酸乙酯提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法；

对于女贞子的鉴别方法还可以采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样或者是以甲醇或三氯甲烷或二氯甲烷或乙醚或无水乙醇或醋酸乙酯提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、槲皮苷、槲皮素、己六醇、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内。

本发明所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，对于鉴别技术，最好选用薄层色谱法鉴别黄芪药材，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以黄芪对照药材、黄芪甲苷作为对照品，样品前处理是三氯甲烷、二氯甲烷、醋酸乙酯、丙酮、甲酸乙酯、正丁醇、苯、甲苯、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚中的一种或者是它们任意混合溶剂提取杂质，然后用乙醇、甲醇、醋酸乙酯、水中的一种或者是它们任意混合溶剂提取后再浓缩方法，再用正丁醇、水、氨试液提取精制的方法，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法；

也可以采用薄层色谱法鉴别女贞子药材，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以女贞子对照药材、红景天苷、葡萄糖、齐墩果酸作为对照品，样品前处理是三氯甲烷、二氯甲烷、醋酸乙酯、丙酮、甲酸乙酯、正丁醇、苯、甲苯、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚中的一种或者是它们任意混合溶剂提取杂质，然后用乙醇、甲醇、醋酸乙酯、水中的一种或者是它们任意混合溶剂提取后再浓缩方法，再用正丁醇、水、氨试液提取精制的方法，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法；

本发明所述的一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，最佳的鉴别方法是采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以黄芪对照药材和女贞子对照药材为对照品，样品前处理是用水超声使其溶解，上清液再用正丁醇提取，正丁醇提取液蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以5～15％硫酸乙醇在加热条件显色后日光灯下检视的方法。

本发明所述的一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，对于含量测定，有以下方法可供选择使用，包括：

方法1：以可见紫外分光光度法测定本品中的总皂苷含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，测定波长为200～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为黄芪甲苷。

方法2：以可见紫外分光光度法测定本品中的总黄酮含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，测定波长为200～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为槲皮苷或槲皮素中的任何一种；

方法3：以可见紫外分光光度法测定本品中的总糖含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，测定波长为200～650nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为葡萄糖；

方法4：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙睛、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm范围内；

方法5：采用薄层色谱扫描法测定本品中黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间任一体积，以黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色后用薄层扫描仪进行扫描的方法；

方法6：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、槲皮素、葡萄糖、甘露醇、槲皮苷、己六醇、乌索酸、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙睛、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm范围内；

方法7：采用薄层色谱扫描法测定本品中齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、槲皮素、葡萄糖、甘露醇、槲皮苷、己六醇、乌索酸、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间任一体积，以黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色后用薄层扫描仪进行扫描的方法。

本发明所述的一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，最好选用以下方法的一种或全部作为含量测定的方法：

方法1：采用高效液相色谱法测定本品中红景天苷，样品前处理以用氯仿、无水乙醇、甲醇采用索氏提取或超声波处理的提取方法，使用C18类型填料的色谱柱，流动相以乙腈和水用低压梯度洗脱，波长为250～350nm。

方法2：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中黄芪甲苷，样品前处理以水、无水乙醇、甲醇采用索氏提取或超声波处理的提取，然后用醋酸乙酯、正丁醇精制的方法，再用氨试液纯化后大孔吸附树脂柱洗脱精制，然后洗脱液水浴蒸干，残渣用甲醇或乙醇中的一种溶解的方法，使用C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相。

与现有技术相比，本发明提供的质量控制方法能更好的控制一种久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药制剂的产品质量，保证用药的安全性，使用本发明后，从生产开始、选用原材料，到每一个生产过程的工艺步骤均必须严格按照工艺规程执行，能够保证药物制成品的质量；我们在进行试验时发现：采用本发明就会要求选用黄芪、女贞子药材的等级必须达到一级以上，否则制成品会出现不合格的情况；这样更有利于指导生产，使工艺控制更加严格合理，让消费者全面认识产品品质、放心使用这类药品。在现有贞芪扶正胶囊质量标准中，只测定了黄芪甲苷的含量，采用的薄层色谱扫描法灵敏度低，误差大，使用紫外检测器在黄芪甲苷的紫外末端吸收处测定含量，由于制剂成分复杂，需进行梯度洗脱，色谱条件苛刻，加之对黄芪甲苷灵敏度低，重复性差，而且已有标准中没有收载女贞子中有效成分的含量测定。采用本发明的检测方法测定，提高了黄芪甲苷测定的灵敏度，同时也提高了结果的准确度和精密度；而且增加了女贞子的含量测定，使该中药制剂更易于控制。因此，本申请人经过的一系列考察研究，采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法进行黄芪中黄芪甲苷的含量测定，结果分离度好、重现性好、回收率高，得到的图谱能够很好的检测产品质量；同时，由于贞芪扶正中药制剂制备常用水提工艺，以女贞子为主药的中药制剂常以脂溶性的齐墩果酸作为质量控制指标，齐敦果酸为酯溶性物质，因此含量很低，测定含量不具备代表性；考虑到贞芪扶正中药制剂为水提工艺，因此选择水溶性有效成分红景天苷作为其质量控制指标。红景天苷元及其葡萄糖苷具有抗衰老、抗寒冷、抗微波辐射等作用，所以我们以红景天苷为对照品建立了测定贞芪胶囊中红景天苷的高效液相色谱法，更好地控制贞芪扶正制剂的质量。所以本发明选定了一系列的成分和方法作为控制、检测产品质量的技术手段，使贞芪扶正中药制剂的生产技术有了保障，得到的制剂更加可靠，达到了发明的目的。

为证明利用本发明提供的质量控制方法能更好的控制一种贞芪扶正中药制剂的产品质量，得到的药物具有有效的效果，申请人进行了一系列实验；

实验例1  黄芪甲苷含量测定的方法学考察

1.1仪器条件：岛津高效液相色谱仪，LC-2010AHT；蒸发光散射检测，ELSD2000。

1.2试药：乙腈为色谱纯，甲醇、醋酸乙酯、正丁醇、氨水均为分析纯，氢氧化钾为化学纯，水为重蒸水；黄芪甲苷(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用)，样品贞芪扶正胶囊(贵州信邦制药股份有限公司，批号：20060101)。

1.3色谱条件：色谱柱：迪玛ODS C18柱；流动相：乙腈-水(37：63)柱温：25℃；流速：0.5ml/min；ELSD漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min；进样量：10ul。

1.4系统适应性试验

分别取黄芪甲苷对照品，贞芪扶正胶囊供试品溶液缺黄芪药材的阴性空白溶液注入色谱仪，在记录的色谱图中看，黄芪甲苷的保留时间为12.1分钟，色谱峰的对称因子为1.00，阴性空白色谱图在黄芪甲苷位置处无峰，黄芪甲苷与其相近的其他峰分离度完全(分离度＞1.5)，即本实验条件下黄芪甲苷与其他组分分离完全。理论板数以黄芪甲苷峰计算，应不低于4000。

1.5供试品溶液的制备

取贞芪扶正胶囊10粒，倾出内容物，混匀，精密称量约0.8g，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml浸泡过夜，超声1h，过滤并用少量甲醇洗涤残渣，蒸干回收甲醇，残渣加甲醇适量洗涤，定容到5ml量瓶中，用0.45um微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

1.6标准曲线及线性范围

1.6.1.标准溶液的制备精密取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含黄芪甲苷0.4888mg的对照品溶液。

1.6.2.标准曲线的绘制精密吸取上述对照品溶液4ul、8ul、12ul、16ul、20ul、24ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱，结果见表1，以峰面积A的对数对质量数X(μl)的对数进行线性回归计算，得线性回归方程为：LgX＝0.648334LgAx-3.24309，r＝0.99954(黄芪甲苷在1.9552ug～11.7312ug范围内线性关系良好)。

表一  黄芪甲苷线性关系考察

实验次数	1	2	3	4	5	6
							进样量(ug)峰面积A	1.9552280069	3.9104812960	5.86561618628	7.82082438434	9.7763244520	11.73124470872

1.7精密度实验

取贞芪扶正胶囊内容物，按1.5项下供试液的制备方法制备供试液，重复进样6次，每次10ul，测定峰面积，结果见表二，黄芪甲苷的平均峰面积为1039616；RSD为1.98％。

表二 黄芪甲苷测定的精密度试验

进样次数	1	2	3	4	5	平均值	RSD(％)
								黄芪甲苷峰面积	1015718	1029926	1033953	1048622	1069860	1039616	1.98

1.8稳定性试验

取贞芪扶正胶囊内容物，按1.5项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0h、2h、4h、8h、12h进样测定黄芪甲苷峰面积，计算结果见表三，黄芪甲苷的平均峰面积为1049610；RSD为1.79％，说明供试液在12小时内稳定性良好。

表三 贞芪扶正胶囊中黄芪甲苷的稳定性试验

测定时间(h)	0	2	4	8	12	平均值	RSD(％)
								黄芪甲苷峰面积	1020252	1045375	1051908	1061310	1069203	1049610	1.79

1.9重现性试验

取同一样品按1.5项下供试品溶液的制备方法制备6份供试液，分别进样，测定黄芪甲苷的峰面积，计算含量，RSD为2.3％。

1.10回收率试验

采用加样回收法，分别精密称取6份已测定含量的贞芪扶正胶囊样品(批号：20060301，黄芪甲苷含量为1.46mg/g)约0.9g，精密加入黄芪甲苷(0.2630mg/ml)对照品溶液5ml，置具塞锥形瓶中，置水浴挥干溶剂，再照含量测定项下供试液的制备方法制备，分别吸取20ul注入色谱仪，记录峰面积，以外标对照法计算样品的平均回收率为99.22％，相对偏差为1.76％，本法加样回收率良好，结果见表四。

表四 贞芪扶正胶囊中黄芪甲苷的回收率试验

样品量(g)	含黄芪甲苷量(mg)	加入黄芪甲苷量(mg)	测得黄芪甲苷量(mg)	回收率(％)	平均回收率(％)	RSD(％)
							0.90620.90790.91130.90210.89710.9013	1.32311.32551.33051.31711.30981.3159	1.31501.31501.31501.31501.31501.3150	2.61412.62812.68082.61582.59942.6118	98.1799.06102.6898.7698.0798.55	99.22	1.76

1.11样品的含量测定

取贞芪扶正胶囊10批样品，按1.5项下供试品溶液的制备方法制备供试液，进行含量测定结果见表五。

表五 10批样品中黄芪甲苷含量测定结果

批号	黄芪甲苷含量mg/g		平均值mg/g	RSD％
					1	2
	20060301200601022005120120060201200605022006060120060701200604012006080120070101	1.41.461.331.351.421.381.301.391.411.40					1.371.441.321.371.411.411.331.371.431.32	1.381.451.331.361.421.401.321.381.421.33	1.5％0.98％0.53％1.04％0.5％1.5％1.6％1.0％1.0％1.0％

实验例2  红景天苷含量测定的方法学考察

2.1仪器条件：岛津高效液相色谱仪，LC-2010AHT。

2.2试药：甲醇(色谱纯、分析纯)，乙腈(色谱纯)，氯仿(分析纯)，水为高纯水；红景天苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用)，样品贞芪扶正胶囊(贵州信邦制药有限公司，批号：20060101)。

2.3色谱条件：色谱柱：迪玛ODS C18柱；流动相：乙腈-水溶液(20∶80)；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量：10ul；检测波长278nm。

2.4系统适应性试验

分别取红景天苷对照品，贞芪扶正胶囊供试品溶液缺女贞子药材的阴性空白溶液注入色谱仪，在记录的色谱图中看，红景天苷的保留时间为11.5分钟，阴性空白色谱图在红景天苷位置处无峰，红景天苷与其相近的其他峰分离度完全(分离度＞2.0)，即本实验条件下红景天苷与其他组分分离完全。理论塔板数以红景天苷峰计在4000以上。

2.5线性关系考察

2.5.1供试溶液的制备

取贞芪扶正胶囊10粒，倾出内容物，混匀，精密称量约0.8g，置50ml锥形瓶中，加甲醇25ml浸泡过夜，超声1h，过滤并洗涤，蒸干回收甲醇，残渣加甲醇适量洗涤，定容到5ml量瓶中，用0.45mg微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.5.2标准溶液的制备

精密取红景天苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含红景天苷0.2mg的对照品溶液。

2.5.3标准曲线的绘制

分别精密吸取上述红景天苷对照品溶液2ul，4ul，8ul，10ul 12ul，16ul，20ul注入液相色谱，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，进样量(ul)为横坐标绘制标准曲线，回归方程为A＝269158.5625C+13014.65，相关系数R＝0.9999，红景天苷在0.4～4ug范围内呈良好的线性关系。

2.6精密度试验

取贞芪扶正胶囊样品按2.5.1方法制备供试品溶液，吸取10ul，重复进样6次，测定样品中红景天苷的含量见表六，RSD为1.2％，测定方法精密度良好。

表六 红景天苷含量测定的精密度试验

进样次数	1	2	3	4	5	6	平均值	RSD(％)
									红景天苷的含量	0.73	0.72	0.72	0.71	0.71	0.73	0.72	1.2％

2.7稳定性试验

取贞芪扶正胶囊内容物，按2.5.1项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0h、1h、2h、4h、8h小时进样10μl，测定峰面积的RSD为2.2说明供试品溶液在8h内稳定性良好。

2.8重复性试验

取贞芪扶正胶囊内容物，制备方法同2.5.1，平行制备5份供试液，分别进样10μl，进样，测定含量。计算结果红景天苷的平均含量为0.71mg/g，RSD为2.4％，测定方法重复性良好，结果见表七。

表七 红景天苷含量测定的重复性试验

进样次数	1	2	3	4	5	平均值	RSD(％)
								红景天苷的含量	0.73	0.72	0.72	0.71	0.71	0.71	1.7％

2.9回收率试验

取已知含量的贞芪扶正胶囊内容物，精密称取约0.4g，5份，分别加入对照品溶液1.5ml，按2.5.1项下制备供试品溶液，分别吸取供试品溶液及红景天苷对照品溶液10μl注入液相色谱仪，记录峰面积，以外标对照法计算样品的平均回收率为98.8％，RSD为0.7％，本法加样回收率良好，结果见表八。

表八 贞芪扶正胶囊中红景天苷回收率测定结果

样品含量(mg)	加入量(mg)	测得量(mg)	回收率	平均回收率	RSD(％)
						0.3110.3090.3120.3180.311	0.33060.33060.33060.33060.3306	0.64060.63500.63530.64460.6390	99.798.697.898.899.2	98.8	0.7

2.10样品测定

按前述方法制备供试液和对照溶液，分别进样10μl，记录色谱图，测定峰面积，按外标法计算含量，10个批样品中红景天苷含量测定结果见表九。

表九 10批样品中红景天苷含量测定结果

批号	含量(％)		平均值mg/g	RSD％
					1	2
	20060301200602012005120120050102200605022005060120060701200608012006040120051001	0.710.700.670.720.760.730.690.740.740.68					0.690.690.660.750.740.710.710.750.770.69	0.710.6950.6650.7350.750.720.700.7450.7550.685	2.0％1.0％1.1％2.9％1.9％2.0％2.0％0.9％2.8％1.0％

具体实施例

实施例1  一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药胶囊剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目。

1、成分：

黄芪1870g  女贞子935g

2、制法：以上两味，将黄芪、掏洗好的女贞子药材投入多功能提取罐内，加水煎煮三次，第一次加水量为药材的10倍量，煎煮2小时；第二、三次加水量均为药材的8倍量，分别煎煮1小时，超滤，合并提取液，浓缩至相对密度为1.07～1.09(50℃)清膏，清膏进行干燥，粉碎。将上述浸膏粉加入适量辅料，混合均匀，制粒，干燥装胶囊，制成900粒，即得。

3、鉴别：

(1)取本品内容物10g，置具塞锥形瓶中，加水50ml，密塞，超声使其溶解，离心(3000转每分钟)5分钟，取上清液30ml置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取3次(25ml，20ml，20ml)，合并正丁醇提取液，氨试液提取2次(25ml，20ml)，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材2g，加水100ml煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约20ml，用水饱和的正丁醇提取3次(25ml，20ml，20ml)，合并正丁醇提取液，氨试液提取2次(25ml，20ml)，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇1ml使溶解，离心，作为黄芪对照药材溶液。取女贞子对照药材1g，同法制得女贞子对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液10μl及两种对照药材溶液各20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

4、含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适应性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32∶68)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，混匀，即得。

供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，混合均匀，研细，取约1.75g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水25ml，超声使其溶解，取出，放冷，离心，精密量取上清液10ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取4次(25、20、20、20ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次(20、20、20ml)，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml，使溶解，放冷，通过D₁₀₁型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。

本品含黄芪按黄芪甲苷(C₁₁H₆₈O₁₄)计，每粒不得少于0.3mg。

实施例2一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药胶囊剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目。

1、处方：

黄芪1666g  女贞子833g

2、制法：以上两味，将黄芪、掏洗好的女贞子两味药材投入多功能提取罐内，加水煎煮三次，第一次加水量为药材的10倍量，煎煮2小时；第二、三次加水量均为药材的8倍量，分别煎煮1小时，超滤，合并提取液，浓缩至相对密度为1.07～1.09(50℃)清膏，清膏进行干燥，粉碎。将上述浸膏粉加入适量辅料，混合均匀，制粒，干燥装胶囊，制成800粒，即得。

3、鉴别：

(1)取本品内容物5g，加氯仿-乙醚(1∶1)20ml，超声30分钟，弃去氯仿-乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，加热回硫30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，转移到分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗两次，每次25ml，再用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次25ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加0.5ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材同法制成对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)，10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(2)取本品内容物5g，加水30ml，超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇-氯仿(3∶2)混合液1ml溶解，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材同法制成对照药材溶液。再取红景天苷对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)为，展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

4.含量测定

(1)黄芪甲苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适应性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水(37∶63)；流速：0.5ml/min；蒸发光散射检测：ELSD漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min；进样量：10ul。

对照品溶液制备  精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入2％KOH-甲醇50ml，回流1h，甲醇提取液蒸至尽干，加水20ml使溶解后，转移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml；合并醋酸乙酯液，加水15ml洗涤，合并水液；用水饱和正丁醇提取4次，每次20ml；合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml；弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，即得。

测定法分别精密吸取上述对照液与供试品溶液10ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本品含黄芪甲苷(C₁₁H₆₈O₁₄)计，每粒不得少于0.3mg。

(2)红景天苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定

色谱条件系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.1％磷酸-乙腈(80∶20)为流动相；流速：1ml/min；检测波长278nm；柱温30℃。理论板数以人红景天苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备  精密称量红景天苷对照品约5mg，置25mL量瓶中，先加适量甲醇溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，备用。

供试品溶液的制备  取10粒胶囊，倾出内容物，混匀，精密称量约0.8g，置50mL锥形瓶中，加甲醇25mL浸泡过夜，超声1h，过滤并洗涤，蒸干回收甲醇，残渣加甲醇适量洗涤，定容到5mL量瓶中，用0.45um微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含红景天苷计，每粒不得少于0.2mg。

实施例3一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药颗粒剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目。

1、处方：

黄芪2500g 女贞子1225g

2、制法：以上两味，将黄芪、掏洗好的女贞子两味药材投入多功能提取罐内，加水煎煮三次，第一次加水量为药材的10倍量，煎煮2小时；第二、三次加水量均为药材的8倍量，分别煎煮1小时，超滤，合并提取液，浓缩至相对密度为1.07～1.09(50℃)清膏，清膏进行干燥，粉碎。将上述浸膏粉加入适量辅料，混合均匀，制粒，干燥，分装，制成600袋，即得。

3、鉴别：

(1)取本品内容物10g，加甲醇-25％盐酸溶液(4∶1)的混合溶液50ml置水浴中加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材同法制成对照药材溶液。再取槲皮素对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)，10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(2)取本品内容物10g，加水50ml，超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇-氯仿(3∶2)混合液1ml溶解，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材同法制成对照药材溶液。再取红景天苷对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)为，展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

4.含量测定

(1)黄芪甲苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适应性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水(37∶63)；流速：0.5ml/min；蒸发光散射检测：ELSD漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min；进样量：10ul。

对照品溶液制备精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取颗粒剂5袋，倾出内容物，混匀，精密称量约10g，置具塞锥形瓶中，精密加入2％KOH-甲醇50ml，回流1h，甲醇提取液蒸至尽干，加水20ml使溶解后，转移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml；合并醋酸乙酯液，加水15ml洗涤，合并水液；用水饱和正丁醇提取4次，每次20ml；合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml；弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，即得。

测定法分别精密吸取上述对照液与供试品溶液10ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本品含黄芪甲苷(C₁₁H₆₈O₁₄)计，每袋不得少于0.6mg。

(2)红景天苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VI D)测定。

色谱条件系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.1％磷酸-乙腈(80∶20)为流动相；流速：1ml/min；检测波长278nm；柱温30℃。理论板数以红景天苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备  精密称量红景天苷对照品约5mg，置25mL量瓶中，先加适量甲醇溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，备用。

供试品溶液的制备取颗粒剂5袋，倾出内容物，混匀，精密称量约10g，置50mL锥形瓶中，加甲醇25mL浸泡过夜，超声1h，过滤并洗涤，蒸干回收甲醇，残渣加甲醇适量洗涤，定容到5mL量瓶中，用0.45um微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含红景天苷计，每袋不得少于0.4mg。

实施例4  一种用于久病虚损，气阴不足的贞芪扶正中药片剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目。

1、处方：

黄芪1040g 女贞子520g

2、制法：以上两味，将黄芪、掏洗好的女贞子两味药材投入多功能提取罐内，加水煎煮三次，第一次加水量为药材的10倍量，煎煮2小时；第二、三次加水量均为药材的8倍量，分别煎煮1小时，超滤，合并提取液，浓缩至相对密度为1.07～1.09(50℃)清膏，清膏进行干燥，粉碎。将上述浸膏粉加入适量辅料，混合均匀，制粒，干燥，压制成500片，即得。

3、鉴别：

(1)取本品3片，研细，加氯仿-乙醚(1∶1)20ml，超声30分钟，弃去氯仿-乙醚液，药渣挥干溶剂，加甲醇20ml，加热回硫30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，转移到分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗两次，每次25ml，再用正丁醇饱和的水洗涤两次，每次25ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加0.5ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材同法制成对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)，10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(2)取本品3片，研细，加甲醇20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇-氯仿(3∶2)混合液1ml溶解，作为供试品溶液。另取女贞子对照药材同法制成对照药材溶液。再取齐墩果酸对照品加甲醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述对照品溶液10ul，供试品溶液15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)为，展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

4.含量测定

(1)黄芪甲苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件与系统适应性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水(37∶63)；流速：0.5ml/min；蒸发光散射检测：ELSD漂移管温度：100℃；载气流速：2.7L/min；进样量：10ul。

对照品溶液制备  精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品20片，研细，精密称定3g，置具塞锥形瓶中，精密加入2％KOH-甲醇50ml，回流1h，甲醇提取液蒸至尽干，加水20ml使溶解后，转移至分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，每次20ml；合并醋酸乙酯液，加水15ml洗涤，合并水液；用水饱和正丁醇提取4次，每次20ml；合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml；弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解转移至5ml量瓶中，精密加甲醇至刻度，摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过，即得。

测定法分别精密吸取上述对照液与供试品溶液10ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

本品含黄芪甲苷(C₁₁H₆₈O₁₄)计，每片不得少于0.3mg。

(2)红景天苷照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。

色谱条件系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.1％磷酸-乙腈(80∶20)为流动相；流速：1ml/min；检测波长278nm；柱温30℃。理论板数以人参皂苷Re峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备  精密称量红景天苷对照品约5mg，置25mL量瓶中，先加适量甲醇溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，备用。

供试品溶液的制备  取本品20片，研细，精密称定3g，置50mL锥形瓶中，加甲醇25mL浸泡过夜，超声1h，过滤并洗涤，蒸干回收甲醇，残渣加甲醇适量洗涤，定容到5mL量瓶中，用0.45um微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

测定法  分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含红景天苷计，每片不得少于0.2mg。

Claims (7)

1.一种用于久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，主要包括鉴别、含量测定等项目，其特征在于：它是将黄芪对照药材、乙酰黄芪苷I、黄芪苷I、黄芪苷II、黄芪苷III、黄芪甲苷、异黄芪苷I、异黄芪苷II、黄芪皂苷乙、环黄芪醇、大豆皂苷I、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、鼠李柠檬素苷元、异槲皮苷、棉毛黄芪甲苷、棉毛黄芪苷VI、棉毛黄芪苷II、女贞子对照药材、齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、萎陵菜酸、乙酰齐墩果酸、乙酰熊果酸、乙酰乌索酸、女贞苷酸、女贞苷、丁香苷、8-表金银花苷、橄榄苦苷、木犀草素-7-O-B-D-葡萄糖苷、对羟基苯乙醇-B-D-葡萄糖苷、胡萝卜苷、阿拉伯糖、葡萄糖、A-乌索酸甲酯、苦杏仁苷酶、转化酶、甘露醇、10-羟基橄榄苷己六醇、硬脂酸、油酸、白桦脂醇、磷脂、外消旋圣草素、β-谷甾醇、有旋-花旗松素中的全部或部分品种作为该中药制剂的质量控制的检测指标。

2.按照权利要求1所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，其特征在于：将黄芪甲苷、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、黄芪对照药材、齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、己六醇、葡萄糖、β-谷甾醇、女贞子对照药材中的全部或部分品种作为该中药制剂的鉴别方法、含量测定方法的检测指标。

3.按照权利要求1或2所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，其特征在于：采用以下方法中全部或部分作为鉴别的方法：

对于黄芪的鉴别方法1：采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30μl之间任一体积，以黄芪对照药材、黄芪甲苷、山柰素、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素、葡萄糖中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法；

对于黄芪的鉴别方法2：采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水、甲醇中的一种或一种以上的溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以黄芪对照药材、黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、槲皮苷、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内；

对于女贞子的鉴别方法1：采用薄层色谱法，一般使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30μl之间任一体积，以齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、槲皮苷、槲皮素、己六醇、葡萄糖、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样或者是以甲醇或三氯甲烷或二氯甲烷或乙醚或无水乙醇或醋酸乙酯提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色的方法；

对于女贞子的鉴别方法2：采用高效液相色谱法或蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法，样品前处理包括直接取样或者是以甲醇或三氯甲烷或二氯甲烷或乙醚或无水乙醇或醋酸乙酯提取后再浓缩的方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水、甲醇中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，以齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、槲皮苷、槲皮素、己六醇、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种作为对照品，检测波长在200～600nm范围内。

4.按照权利要求3所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，其特征在于：采用以下方法中全部或部分作为鉴别的方法：

对于黄芪的鉴别：采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以黄芪对照药材、黄芪甲苷作为对照品，样品前处理是三氯甲烷、二氯甲烷、醋酸乙酯、丙酮、甲酸乙酯、正丁醇、苯、甲苯、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚中的一种或者是它们任意混合溶剂提取杂质，然后用乙醇、甲醇、醋酸乙酯、水中的一种或者是它们任意混合溶剂提取后再浓缩方法，再用正丁醇、水、氨试液提取精制的方法，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法；

对于女贞子的鉴别：采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以女贞子对照药材、熊果酸、齐墩果酸、红景天苷作为对照品，样品前处理是三氯甲烷、二氯甲烷、醋酸乙酯、丙酮、甲酸乙酯、正丁醇、苯、甲苯、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚中的一种或者是它们任意混合溶剂提取杂质，然后用乙醇、甲醇、醋酸乙酯、水中的一种或者是它们任意混合溶剂提取后再浓缩方法，再用正丁醇、水、氨试液提取精制的方法，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以2～30％硫酸乙醇显色后紫外下检视的方法；

5.按照权利要求4所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，其特征在于：采用薄层色谱法，使用硅胶G薄层板，点样量为0.5μl～30μl之间某一体积，以黄芪对照药材和女贞子对照药材为对照品，样品前处理是用水超声使其溶解，上清液再用正丁醇提取，正丁醇提取液蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，展开剂为环己烷、丙酮、乙酸乙酯按照常规比例配制而成，检视条件为喷以5～15％硫酸乙醇在加热条件显色后日光灯下检视的方法。

6.按照权利要求1或2所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正中药制剂的质量控制方法，其特征在于：采用以下方法中全部或部分作为含量测定的方法：

方法1：以可见紫外分光光度法测定本品中的总皂苷含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，测定波长为200～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为黄芪甲苷。

方法2：以可见紫外分光光度法测定本品中的总黄酮含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，测定波长为200～600nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为槲皮苷或槲皮素中的任何一种；

方法3：以可见紫外分光光度法测定本品中的总糖含量，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，测定波长为200～650nm中某一波长，采用标准曲线法或对照品法测定，常用对照品为葡萄糖；

方法4：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙睛、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm范围内；

方法5：采用薄层色谱扫描法测定本品中黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间任一体积，以黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色后用薄层扫描仪进行扫描的方法；

方法6：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、槲皮苷、槲皮素、己六醇、葡萄糖、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、水、乙睛、冰醋酸、四氢呋喃、磷酸溶液中的一种或一种以上品种溶剂在常规的合适比例条件下为流动相，检测波长在200～600nm范围内；

方法7：采用薄层色谱扫描法测定本品中齐墩果酸、熊果酸、红景天苷、乌索酸、甘露醇、槲皮苷、槲皮素、己六醇、葡萄糖、β-谷甾醇、女贞子对照药材中全部或部分品种，样品前处理包括直接取样或者是以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩方法，使用硅胶G或硅胶GF254或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间任一体积，以黄芪甲苷、山柰素、槲皮素、异鼠李素中全部或部分品种作为对照品，样品前处理包括直接取样、以醋酸乙酯或三氯甲烷或二氯甲烷或正丁醇提取后再浓缩的方法，展开剂可以为乙酸乙酯、甲醇、水、正己烷、三氯甲烷、丙酮、正丁醇、二乙胺、吡啶、甲苯、甲酸、环己烷、苯、冰醋酸、石油醚中的一种或一种以上试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯下检视、氨气熏后再置紫外光灯下检视、或喷以硫酸乙醇溶液、浓硫酸水溶液、茴香醛硫酸溶液、10％硫酸溶液、5％三氯化铁乙醇溶液等溶液显色后用薄层扫描仪进行扫描的方法。

7.按照权利要求6所述的一种久病虚损、气阴不足的贞芪扶正的中药制剂的质量控制方法，其特征在于：采用以下方法中全部或部分作为含量测定的方法：

方法1：采用高效液相色谱法测定本品中红景天苷，样品前处理以用氯仿、无水乙醇、甲醇采用索氏提取或超声波处理的提取的方法，使用C18类型填料的色谱柱，流动相以乙腈和水用低压梯度洗脱，波长为250～350nm。

方法2：采用蒸发光散射检测器与高效液相色谱联用法测定本品中黄芪甲苷，样品前处理以水、无水乙醇、甲醇采用索氏提取或超声波处理的提取，然后用醋酸乙酯、正丁醇精制的方法，再用氨试液纯化后大孔吸附树脂柱洗脱精制，然后洗脱液水浴蒸干，残渣用甲醇或乙醇中的一种溶解的方法，使用C18类型填料的色谱柱，以乙睛、水在常规的合适比例条件下为流动相。