CN104931640A - 一种提高动物免疫力的中药组合物的薄层色谱检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：a、制备供试品溶液；b、制备对照品溶液；c、将供试品溶液、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板，以氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干；d、置紫外灯(254nm)下检视。本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。

Description

一种提高动物免疫力的中药组合物的薄层色谱检测方法

技术领域

本发明涉及一种提高动物免疫力的中药组合物的薄层色谱检测方法。

背景技术

薄层色谱(法)是一种常用的中药材鉴别方法，具有设备简单、操作简便、分离速度快、灵敏度和分辨率较高等优点。

黄芪，又名黄耆，为豆科植物蒙古黄芪的干燥根，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效，是一种中药材。黄芪的化学成分复杂，主要有皂苷类、黄酮类及其苷类、多糖类、氨基酸类等。女贞子是木犀科女贞属植物女贞的干燥成熟果实，味甘、微苦涩，具有滋补肝肾、明目乌发之功，可用于肝肾阴虚、眩晕耳鸣、须发早白、目暗不明、内热消渴、骨蒸潮热等症状，是一种中药材。女贞子的化学成分复杂，主要有三菇类、黄酮类、苯乙醇类等。

现有技术中，黄芪、女贞子及其组合物等药材通常采用薄层色谱进行鉴别，然而，现有的鉴别方法只能对黄芪、女贞子中的一种药材进行定性鉴别，如：刘晓庆等(刘晓庆李军胡景莲李晓艳门启鸣康廷国.黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷薄层色谱快速鉴别.辽宁中医药大学学报，2013年7月，第15卷，第7期.)通过特定的前处理制备得到供试品溶液，并选用特定的三氯甲烷-甲醇-水(7.5：2.5：0.2)为展开剂，才能获得薄层斑点清晰、分离度较好的检测结果；周扬等(周扬刘力徐德生.女贞子饮片中特女贞苦的薄层色谱鉴别.中国药业，2013年10月5日，第22卷，第19期.)通过特定的前处理制备得到供试品溶液，并选用特定的乙酸乙醋-丙酮-甲酸-水(6：3：1：1)为展开剂，才能获得薄层斑点清晰、分离度较好的检测结果。

中国文献(翟少钦曹国文李成君.复方黄金颗粒的薄层鉴别.中兽医医药杂志，2010年，第6期.)公开了复方黄金颗粒的薄层鉴别方法，该方法需要对黄芪、女贞子等分别采用不同的前处理制备得到供试品溶液，分别选用不同的展开剂，分别进行薄层色谱检测，该方法不能对复方颗粒中黄芪、女贞子等组分同时进行前处理和薄层色谱检测，存在工序多、操作复杂、检测时间长、成本高等诸多缺陷。

因此，需要发明一种工序少、操作简便且可以对黄芪、女贞子同时进行检测的新方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药组合物的薄层色谱检测方法。

本发明提供的一种中药组合物的薄层色谱检测方法，包括以下步骤：

a、制备供试品溶液：取中药组合物，加入甲醇A，超声处理，过滤，取上清液；上清液用微孔滤膜滤过，蒸干，残渣用10％v/v氨水溶解后，用水饱和正丁醇萃取，得到萃取液；将萃取液蒸干，残渣用甲醇B溶解，即得供试品溶液；

b、制备对照品溶液：取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷分别用甲醇溶解，得到毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液；

c、将供试品溶液、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板，以氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干；于254nm下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。

进一步的，步骤a中，所述中药组合物是由以下原料组成：黄芪、女贞子。

进一步的，步骤a中，所述中药组合物是由以下重量份数的原料组成：黄芪4份、女贞子1份。

进一步的，步骤a中，所述中药组合物按照以下步骤制备而成：

①、取黄芪、女贞子，混匀，粉碎至80目，得到粗粉；

②、在-10℃～-20℃条件下，将步骤①得到的粗粉进一步粉碎至100目～800目的粒度，即得。

进一步的，步骤a中，中药组合物与甲醇A的重量体积比为1：20g/ml；甲醇A、10％v/v氨水、水饱和正丁醇、甲醇B的体积比为8：2：3：1。

进一步的，步骤a中，超声处理的时间为60min；微孔滤膜的孔径为0.45μm。

进一步的，步骤b中，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液的浓度分别为1mg/ml。

进一步的，步骤c中，所述硅胶板为硅胶GF₂₅₄薄层板。

进一步的，步骤c中，氯仿-甲醇-水中，氯仿、甲醇、水的体积比为7.5：2.5：0.2。

本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为本发明中药组合物的薄层色谱检测结果，其中，“1”代表“特女贞苷”，“2”代表“供试品”，“3”代表“毛蕊异黄酮葡萄糖苷”。

具体实施方式

本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。

实施例1、本发明中药组合物的薄层色谱检测方法

1、制备中药组合物

按重量份数计：取黄芪4份、女贞子1份，混合，用万能粉碎机粉碎至80目，得到药材粗粉，再将药材粗粉用超微粉碎机在温度为-10℃～20℃条件下粉碎至药物粒径为100～800目，得到。中药组合物。

2、检测方法

精密称取上述中药组合物的粉末2.0g，置于三角瓶中，加甲醇40ml，超声处理60min，过滤，取上清液；上清液用0.45μm微孔滤膜(PTFE)滤过，置于蒸发皿中蒸干；残渣用10ml 10％(V/V)氨水溶解，放置10min，不时振摇；将溶液移至分液漏斗中，用15ml水饱和正丁醇萃取3次；合并萃取液，用蒸发皿蒸干，残渣加5ml甲醇溶解，即得供试品溶液；

取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷，加入甲醇，分别制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

按照薄层色谱法(中华人民共和国药典2010版附录ⅥB)试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液各3μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以氯仿-甲醇-水(7.5：2.5：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(254nm)下检视；其检测结果见图1，在与对照品色谱相应的位置上，供试品色谱显示相同颜色的荧光斑点。

本发明中药组合物的薄层色谱检测方法，可以对中药组合物中的黄芪、女贞子同时进行检测，检测结果准确、可靠，同时，本发明方法具有工序少、操作简便、检测时间短、成本低等优点，非常适合产业上的应用。

Claims (9)

1.一种中药组合物的薄层色谱检测方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：

a、制备供试品溶液：取中药组合物，加入甲醇A，超声处理，过滤，取上清液；上清液用微孔滤膜滤过，蒸干，残渣用10％v/v氨水溶解后，用水饱和正丁醇萃取，得到萃取液；将萃取液蒸干，残渣用甲醇B溶解，即得供试品溶液；

b、制备对照品溶液：取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、特女贞苷分别用甲醇溶解，得到毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液；

c、将供试品溶液、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液，分别点样于同一硅胶GF₂₅₄薄层板，以氯仿-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干；于254nm下检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。

2.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，所述中药组合物是由以下原料组成：黄芪、女贞子。

3.根据权利要求2所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，所述中药组合物是由以下重量份数的原料组成：黄芪4份、女贞子1份。

4.根据权利要求2或3所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，所述中药组合物按照以下步骤制备而成：

①、取黄芪、女贞子，混匀，粉碎至80目，得到粗粉；

②、在-10℃～-20℃条件下，将步骤①得到的粗粉进一步粉碎至100目～800目的粒度，即得。

5.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，中药组合物与甲醇A的重量体积比为1：20g/ml；甲醇A、10％v/v氨水、水饱和正丁醇、甲醇B的体积比为8：2：3：1。

6.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤a中，超声处理的时间为60min；微孔滤膜的孔径为0.45μm。

7.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤b中，毛蕊异黄酮葡萄糖苷的对照品溶液、特女贞苷的对照品溶液的浓度分别为1mg/ml。

8.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤c中，所述硅胶板为硅胶GF₂₅₄薄层板。

9.根据权利要求1所述的薄层色谱检测方法，其特征在于：步骤c中，氯仿-甲醇-水中，氯仿、甲醇、水的体积比为7.5：2.5：0.2。