CN100417326C - 对环境安全的农用添加剂 - Google Patents

Abstract

通过在合适条件下，在高碳水化合物培养基中培养真菌菌种生产含有植物生长调节剂的基本上无微生物的组合物。所述培养基滤出液进行消毒、配制并用于促进植物生长。

Description

对环境安全的农用添加剂

有关申请的相互参照

根据35U.S.C.∮119(e)，本申请要求提交于2002年7月16日的美国临时申请系列号60/396833的权益，其内容纳入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及增进食用和观赏作物的生长和质量的制剂。更具体的是，本发明涉及来自分解高糖含量介质，较好是农业废物的消毒滤出液。

背景技术

已经使用各种方法来提高食用作物的产量，包括使用化肥作为营养添加剂，施用杀菌剂来减少侵染的负面影响以及补充生长激素如生长素和赤霉酸。尤其是当施用合成原料来实现时，这些途径会出现与不能接受的环境改变有关的问题，并伴随生态系统的失衡。

应理解，可通过一些真菌生产植物生长调节剂。例如，Brizuela，M.A.等综述69-74在担子菌中找到用于调节植物生长的赤霉素、吲哚乙酸、细胞分裂素和其它化合物Revista IBERO Americana de Mycologgia(1998)15；所述植物生长调节剂二氢壶腹素(ampullicin)是由真菌瓶孢囊菌(Ampulliferina)产生的(Kimura，Y.，等人，Bioscience Biotech. & Biochenz.(1993)57：687-688)，且通常已知脉孢菌属和各种植物致病真菌产生植物生长调节剂。也已知杂色多孔菌(Polyporus versicolor)，一种白色腐败多孔菌产生植物生长调节剂。但是，提高植物生长因子产生的培养条件变化很大。

已经显示担子菌产生赤霉素、生长素、吲哚乙酸、脱落酸、细胞分裂素和乙烯，以及其它植物刺激代谢物。但是，在植物自身生长或小规模实验室条件下已经显示了这些因子的产生。

本发明提供在商业规模上由真菌，尤其是担子菌生产植物生长因子的方法。通常这认为是不可能实现的。例如，参见《应用真菌学手册》(Handbook of AppliedMYCOLOGY)，第4卷，Fungal Biotechnology(1992)第588页：

感兴趣注意的是，寄主植物的寄生组织上表层中的酵母类细胞和孢子形成了外囊菌属和外担子菌属种类。当在合成培养基中以浸没发酵法(SMF)生长时，这些真菌产生的细胞分裂素(CK)太小，而不能使寄主植物中天然存在的形态变化大，不管酵母类细胞形式在SMF培养基中的生长情况。因此重点是，通过在寄主组织中生长的外囊菌属的病原菌丝细胞产生CK的量是明显不同的。在固态发酵技术下，真菌的生长和在寄主组织上真菌上述类型的生长非常相似是熟知的。

而且据此来源：

明显的是，专性寄生，菌根，子囊菌类和担子菌类真菌在发酵生产CK(细胞分裂素)中没有潜力，这是因为培养和生长速率慢的问题。

下游工艺涉及处理大量用于分离极低量GA3(赤霉酸3)的液体，因此，当和其它发酵产品如柠檬酸或葡糖酸比较时，其成本大。

在通过过滤或离心分离来分离菌丝体细胞之后，GA3要么吸附到合适的树脂/吸附剂上，要么在合适的溶剂中提取。而且，纯化涉及一系列的操作，如重复进行液-液分配，在真空条件下浓缩以及最后加工获得GA3的无定形粉末或结晶。

因此，即使已知某种植物寄生真菌可以产生植物生长调节剂，所述真菌不会产生发酵系统实际所用量的植物生长调节剂(PGR)，除非进行培养、提取和浓缩步骤。

现在，已经发现了在真菌菌种体存在下分解农业废物，将培养基滤出液消毒，并直接(甚至在用水稀释至1∶500或最高达1∶10000之后)将所得“液体堆肥因子(LCF)”施加到田间作物上，由此提供一种有利于环境的生长刺激物。不需要进行提取或化学分离步骤来获得可用的溶液。仅需要加热和过滤。提取或浓缩不需要任何溶剂或树脂床。来自加热的液体培养基流体的过滤步骤的固体和过滤材料本身可以进行干燥，并用作植物生长刺激物的来源。可以将所述干燥的材料加入堆肥中作为添加剂。

发明概述

本发明涉及用于刺激根部和植物块迅速生长，以及提高田间作物、树木和其它植物的产量的组合物，所述组合物包含真菌菌种体在碳水化合物浓度高的培养基上(在任何情况，但较好在农业废物上)生长的杀菌培养基滤出物。所得“液体堆肥因子(LCF)”可以各种方式施加到许多作物上，提高生长速度和产量。

因此，本发明一方面涉及制备植物添加剂的方法，所述方法包括在光照、通气以及在不干扰菌丝体的条件下，在具有至少10％可利用的碳水化合物浓度的培养基上培养真菌菌种体，收集培养液，使蛋白质变性，除去固体并杀菌或用其它方法将滤出物消毒，得到所述组合物。在另一方面，本发明涉及用这种方法制备组合物。因此，本发明组合物包含在高碳水化合物的培养基(较好是农业废物)中生长的真菌菌种体培养液的消毒培养基滤出物。另一方面，本发明涉及单独或和其它生长促进剂联合使用这种组合物来提高植物生长和产量的方法。因此，本发明也涉及使用本发明组合物来培养植物的方法，不论本发明组合物是单独或和例如除草剂、杀虫剂、杀线虫剂或其它生长刺激剂或营养物联合使用。

本发明实施方式

本发明涉及一种称为“液体堆肥因子(LCF)”的有利于环境的植物生长刺激组合物。LCF是一种真菌菌种体培养液的消毒培养基滤出物，所述菌种体在特定条件和高碳水化合物的培养基中生长。本发明的组合物包括来自真菌菌种体的消毒滤出物及其干燥形式，和过滤回收的固体。通常，这些组合物中的任何一种是在水性溶液中稀释的。当施加到田间作物如玉米、芋头、莴苣、大豆、黄瓜、番茄、菠萝和其它食用作物上时，所得稀释的LCF能刺激根部生长，增加结果率，并提高作物产量。LCF在确定的作物中已经显示了能减轻线虫侵扰的症状，并有助于减少疾病，如减少真菌叶斑、叶腐烂和细菌性球茎腐烂。LCF也可用于观赏性植物上，能促进开花。它对草皮有效，使其增加绿色。LCF也可用于延长剪下的花和叶子的寿命。LCF也可用于增进树木生长，例如有助于重新植林。

本发明的LCF包含植物生长调节剂(作为真菌培养基的次生代谢物)以及植物防御机理的引发剂(elicitor)。这些植物生长调节剂的生产通过合适的培养条件、合适的培养基成分和合适的后培养处理来进行。所述培养基必须包含足量的碳水化合物和足够的钾离子，用代谢产生PGR的合适前体进行这种生产。糖蜜包含约2-6％钾，它是优选的环境可接受的来源，虽然也可以使用其它来源如香蕉、马铃薯、洋李、橙子、番茄、朝鲜蓟、南瓜属植物、葡萄、向日葵、菠菜、种籽或杏仁。K+的最终浓度应0.005-0.1％重量/体积，较好是0.01-0.1％重量/体积。

通常，可利用的碳水化合物含量越高，植物生长调节剂的产量越高，但是，糖形式的碳水化合物浓度太高会不能接受地提高渗透压，由此阻碍或消除真菌生长。提高最终产品中植物生长调节剂产量的其它因素包括在通气条件下、在菌丝体丛不受干扰以及在可见光谱中长波长段为主的光照条件下生长。适于培养的光照条件较好如美国专利5123203所述，其内容纳入本文作为参考。通过加入类胡萝卜素色素并降低果实基质中的Ca⁺²，发现优选红色光源。植物生长调节剂(PGR)的生产也可以通过向培养基中加入足以产生黄色的胡萝卜素来提高。若使用菠萝汁作为碳水化合物源，则固有地存在足够的胡萝卜素。

所述培养基包含对应于5-10％糖蜜的有效糖浓度。虽然可以使用农业废物组成所述培养基，但是可以使用任何来源的合适碳水化合物和其它所需营养物(如胡萝卜素)，一部分的营养物可以由真菌菌种体本身提供，所述菌种体在谷物和其它营养物存在下培养真菌来制备。因此，培养基所需的糖含量可以通过糖浆来提供，所述糖浆由各种来源制备，包括各种水果、玉米糖浆、甘蔗糖浆、甜菜糖浆、糖蜜等。也可以使用由其它水果如菠萝、橙子、李子、葡萄、番木瓜等制备的糖浆。优选使用植物提取物作为培养基中的营养物来源。

所述培养基必须具有可利用的碳水化合物含量，它高于通常用于培养真菌的含量。“可利用的碳水化合物”是指通过真菌培养可代谢碳水化合物能源。这些可利用的碳水化合物的典型组分包括蔗糖、葡萄糖、其它简单糖和二糖。通常，所述培养基包含至少10％重量/体积的可利用的碳水化合物，较好是12％重量/体积，更好是13％重量/体积，甚至更好是15重量％体积。或者，所述培养基中的最终浓度在白利糖度(BRIC)中的读数至少为10，更好是至少为12，最好是至少15。最优选高浓度的可利用的碳水化合物，如上所述，仅通过避免产生不能接受的渗透压情况的必要性来限定。由于真菌能消化纤维素，提高纤维素形式中的碳水化合物浓度，或者较好使用不会提高渗透压的其它碳水化合物。

似乎用于培养基的最佳白利糖度值为12-15。在一个典型培养基中，白利糖度值高于19，如24或30导致生长很缓慢或根本不生长。当白利糖度为19时，所述菌丝体覆盖了培养基的表面，但是仅仅在薄层中，当白利糖度为11和8时，可以获得很好的生长。但是，当白利糖度低于11时，PGR含量似乎更少。

除了作为碳源的可利用的碳水化合物以外，所述培养基还必须包含其它营养物，明显的是氮源和各种辅因子。通常，在用于接种体的真菌菌种体中有足够来源的多数这些营养物。但似乎重要的是，所述培养基包含足以提供可见黄色的胡萝卜素浓度。

若使用糖蜜作为至少部分可利用的碳水化合物来源，则糖蜜本身提供许多维生素和真菌所需的其它营养物。相比由甜菜制备的那些，优选由甘蔗制备的糖浆，因为这些糖浆提供更好的营养物来源。合乎需要的营养物的其它来源包括使用香蕉来提供钾离子，番木瓜也可以加入培养基中。番木瓜包含类胡萝卜素、糖和硫化合物。其中的果糖尤其高。

所述培养基首先消毒，较好通过加热至足够温度充分时间，以除去任何污染生物体。然后，所述去污染的培养基用真菌培养液即真菌菌种体接种。

在本发明中可以使用任何真菌，只要它适于本文所述的培养技术。虽然已经描述许多真菌可以产生植物生长调节剂，但是这种情况通常不适于商业或实际生产这些化合物。

能得到本发明LCF组合物的真菌培养可以使用容易得到的设备以有效的方式进行。虽然可以使用不锈钢筒，但是它们昂贵，且除非所述不锈钢特别制成耐腐蚀的，否则在发酵过程中会出现腐蚀。因此，优选玻璃或塑料容器。已经发现在套管中仅具有一个棉花塞的55加仑半透明塑料筒中培养真菌尤其方便。在使用前，所述筒或其它容器的内部首先例如用稀释的碘溶液进行去污。

本发明可用的优选真菌是担子菌类，即一类和天然植物共存且依赖其生长的真菌。担子菌类可以是多孔或肋形的，本发明方法中培养的菌种体的优选来源是多孔真菌，尤其是多孔菌科属的那些。所述多孔菌科通常归类为褐腐真菌或白色腐败真菌的指定属。所述褐腐真菌将其生长的木材中的白色纤维素降解，留下褐色的木质素；所述白色的腐败真菌却相反，它们降解所述木质素，留下白色的纤维素。因此，优选用于本发明方法的真菌是褐色的腐败多孔真菌，尤其是桥孔菌(Bridgeoporus)、Ceriporia、迷孔菌(Daedalea)、旬孔菌属(Laetiporus)、寡孔菌(Oligoporus)和密孔菌(Pycnoporellus)。

因此，在所需具体培养条件下，本发明可以使用各种担子菌类，但是优选是多孔菌属，尤其是褐腐类的。

本发明所用尤其优选的真菌是：旬孔菌属，尤其是硫磺多孔菌属(LaetiporusSulphureus)。硫磺多孔菌属“Sulphur shelf”或“Chicken of the Woods”是硬木树的伤口寄生物。它通常在夏威夷的叶桉(Eucalyptus robusta)上发现。由于这种真菌生活于树木的心木中，它在树木的外部并不可见。所述果实体或蘑菇每隔几年就呈现出硫磺色或橙色的托架蘑菇。所述真菌接种在心木上，并在内部产生立体的褐腐物，因为在纤维素和半纤维素被酶作用而溶解之后留下了木质素。树木在感染开始之后的多年才会死亡。在发表文献中没有提及这种真菌控制宿主树木生长的能力，也没有提及和这种真菌关联的任何植物刺激物。在本发明受控的真菌液体培养物生长中，这些植物生长因子已经大量产生，并已经证实对植物生长的影响超出了常见的宿主的范围。如本文所述，为了利用植物刺激物，通过加热液体来破坏所述组织降解酶，所述刺激物在100℃下热稳定。

已经显示硫色旬孔菌的真菌液体培养基能刺激玉米、大豆、莴苣、豆类、谷类和草的种籽发芽。已经显示，叶面喷涂影响菠萝、咖啡、马铃薯、芋头、甘蔗和其它作物。这种真菌通常影响100英尺高的桉树(重数吨生物量)的生长。用适当的稀释，植物刺激作用对较小植物也有效。所述液体培养基可以稀释1∶3000(例如，用水)仍有效。实际上，旬孔菌属真菌已经平衡了各种植物生长调节剂的产生，以便刺激具有粗大树围和根部系统的大宿主树。这种平衡应用于具有所需效果的较小植物和树木。

因此，真菌菌种体较好包含担子菌类，更好是褐腐担子菌类，更好是在具体选择真菌生物体的合适条件下生长的旬孔菌属菌。所述真菌的营养培养基包含尤其适合所用真菌的合适组分，但是必须包含碳源、氮源和相关的维生素和辅因子。所述菌种体通过如下方式产生：在合适时间内培养足以提供足够的真菌接种体，使菌丝体在本发明的培养基中形成。从开始接种到形成菌种体的时间通常为5-100天。

本发明所用的市售液体真菌菌种体可以从Kukui Spawn Co.(以前的MauiShiitake Trading Company，均为Maui)获得。

然后，使用液体菌种体接种用于制备LCF的培养基。所述接种的培养基在15-37℃，较好在约20℃，在可见光谱的长波长段为主的光照条件下培养(无需搅拌)足够时间，产生所需水平的PGR。通常，PGR在培养30天之后，较好在45天之后，更好在60天之后产生有用量的PGR。

虽然为了避免干扰所述菌丝体丛而不搅拌所述接种的培养基，但是需要培养基的通气。这可以通过例如将氧气鼓泡入培养基中或者不会干扰菌丝体丛的其它方式来提供。已经发现，即使在不将空气鼓泡入培养基中，并通过与菌丝体表面相互作用仅允许通气也可以获得足够的氧气。

“可见光谱的长波长段”是指波长约为500-800nm，较好是600-750nm的光。也可以包括其它波长，但是主要的波长应在上述范围内。因此，以总光子的百分数计，所述长波长段应占所述光子的50％以上。

使用标准生物测定方法可以评价PGR浓度。和已知浓度的在盆栽土壤中用作土壤湿透剂的LCF比较的大豆苗生长用作生长标准物。LCF溶液的颜色在一定时间内和大豆苗的效力相关。肥料速度根据处理的和对照物进行设定，在施用之后14天评价苗。为了与标准LCF溶液的效果比较，测量总重量、根部重量、根部长度、叶子重量以及高度的效果。或者，由于已经发现颜色从黄色向深酒红色变化和PGR的产生有关，所以培养液的颜色可以用作指数。

LCF溶液的浓度通过在大豆苗上将已知LCF溶液的颜色和稀释浓度为1∶500的“标准物”匹配来控制。通常，已经培养60天的培养物用水稀释至1∶2，形成和标准物匹配的颜色亮度。培养时间越长，则培养液达到标准LCF水平所需的稀释度越大。

当所述培养物成熟时，菌丝体丛生长，当产生足够的PGR时，所述培养基的液体部分容易用无菌方法除去。较好通过过滤或者离心或其它已知方式分离固体，从收集的培养基中除去固体。然后，所述液体部分加热至100℃，并保持10分钟。这种步骤使酶如纤维素酶、脂肪酶和半纤维素酶变性。也可以使用化学/温度蛋白质提取或者膜过滤。然后所述变性的蛋白质可以用滤纸过滤或者通过离心除去。然后，所述液体部分进行合适的无菌步骤，如巴氏杀菌法和超滤，较好是巴氏杀菌法。所得杀菌的“LCF”包装在消毒容器中。若需要的话，所述具有菌丝体丛的培养瓶可以用消毒的冷营养液再装满，由此制备额外的LCF。所述第一次LCF生产花费60天，第二次仅需要约30天，因为在第一次过程中已经形成了菌丝体丛。所述第三次和随后的生产过程为30天，且可以是连续的，直到所述培养容器被污染。

“培养基滤出物”是指所述培养基的液体部分。“培养基滤出物”是常用的术语，尽管这种滤出液的回收率不一定受实际过滤的影响。实际上，在本发明的许多培养基中，形成菌丝体丛，由此通过滗析或虹吸可以除去培养基滤出液。“培养基滤出物”仅指培养基的液体部分。

本发明LCF的“消毒”可通过各种方法进行。因为巴氏杀菌法最实用，所述组合物是指LCF。但是，也可以进行其它消毒方法，如超滤或加入抗生素或消毒剂如Idophor。

除了所述消毒的培养基滤出物以外，本发明的LCF组合物也包含过滤培养基时保留的物质，它可以进行干燥。这种物质也包含PGR，并且可以与消毒的滤出物类似的方式使用。

为收集LCF，在除去所述培养质之后可以再次使用所述菌丝丛。通常，所述培养基可以在丛下通过导管除去，并用新的无菌培养基代替。由于在除去前一培养基过程中所述丛通常会破裂，所述新的无菌培养基仅重新倒入容器中即可，所述丛的部分会重新汇集，并继续生长。

除了按照本发明所述方法产生植物生长调节剂以外，已经发现所述培养基还包含材料的引发剂，它构成植物抗病原体的防线。这些防御机理(通常已知为植物抗毒素)在被寄生虫或病原体感染的植物中形成。在名为“植物本身如何防御病原体”第8讲，来自爱达荷大学植物科学405/504教程(来自www.uidaho.edu/ag/plantdisease)中找到这些机理的一般论述。如概述的，结构防御通常涉及例如形成蜡层、软木层、离层等，构成了破坏植物代谢的屏障。代谢防御包括先前存在的防御，以及因病原体感染而引发的那些。这些防御包括产生毒性物质，称为植物抗毒素。本发明的LCF能引发这种类型的反应。

因此，本发明一方面将LCF的植物生长调节作用与植物抗毒素的引发产生相结合。这方面可以通过加入已知的植物抗毒素引发剂如称为包含蛋白质Harpin的Messenger的产品(由Eden Bioscience制造)来加强。

所述LCF稀释到适于施用到作物或树木的浓度。可以使用1∶100-1∶2000或者1∶5000的稀释度，这取决于PGR的浓度以及所需的效果。所述稀释度水平当然取决于PGR的起始浓度、材料施加的方式以及普通技术人员熟知的许多其它因素。在许多情况下，已经发现高达1∶6000的LCF稀释度，或者甚至大于1∶10000的稀释度也有效。LCF也可以在惰性支持体如滑石或硅藻土上干燥，或者可以干燥到颗粒肥料上，以促进肥料的性能。通常，所述稀释的LCF可以以任何常规的方式施用，包括植物浸渍或叶面喷雾，通过滴灌系统加入，与盆栽土壤混合，围绕树苗周围的土壤施加等。

在一个实施方式中，当作为喷雾剂或土壤添加剂使用时，施用速度是每英亩每30加仑水6-8盎司LCF。但是，优选施用更多量的液体。每英亩施用的总液体优选为100-150加仑，稀释度约为1品脱-1.5夸脱(稀释到100-200加仑水中)。因此，典型的施用方式是每英亩施用125-200加仑水中的1夸脱LCF(消毒的培养基)，作为喷涂剂；或者每英亩施用在325加仑水中稀释的2夸脱消毒培养基滤出物LCF。

但如上所述，所述培养基滤出物LCF也可以干燥成颗粒物质，并作为干燥材料施用。

所述LCF及其稀释剂或其它制剂也可以和其它酸性物质如杀虫剂、其它营养物/肥料混合施用。应避免和碱性肥料或溶液混合。尤其优选的混合物是PCT出版物WO96/38590中所述的具有表面活性剂掺合作物助剂的那些，其内容纳入本文作为参考。或者，也可以施用完全由独立成分组成的杀线虫剂混合物，如月桂基硫酸钠、糖蜜、红花油和奶酪的混合物。这些在提交于2002年6月21日的待审批申请60/390289中所述，其内容纳入本文作为参考。如上所述，在所述制剂中也包含植物抗毒素防御蛋白质或代谢物的引发剂。

通过说明，设计所述LCF可在肥料颗粒上提供1％(重量/重量)的涂层，用于草皮或蔬菜和树木。在硅藻土上2％(重量/重量)的涂层是合适的种籽处理粉(用于小种籽，如莴苣、番茄、甘蓝和茄子)。涂在硅藻土上较高百分比的LCF可用于较大的种籽。例如，6.5％的涂层适于玉米、豆类、大豆、豌豆和黄瓜。裸露的根苗、球茎、菠萝冠和其它蔬菜植物洒上这种粉以促进生长。

施用的常规方法是将约1/2茶匙的所述粉加入塑料袋中的1盎司种籽中。在密封所述袋子之后，振荡所述袋子，用所述粉涂布种籽，回收过量的粉，所得种籽具有细腻的粉涂层。

通常，所述LCF应在室温、避光和干燥条件下储存。虽然LCF对环境安全，但是不应吸入，且不应与皮肤接触过长时间。

以下实施例是说明本发明，但不是用于限制本发明。

实施例1

制备杀菌的LCF

所述培养基由以下物质组成：

20加仑高纤维菠萝汁保留物，从超滤中得到；

1加仑菠萝浆；

20加仑糖蜜水(5加仑糖蜜混合40加仑水)；和

5加仑软的成熟期的番木瓜酱，任选包括表皮、种籽和果肉。

然后，用额外的保留物和/或糖蜜水将总体积调节至50加仑。在敞开的塑料筒中混合所述组分，并转移到不锈钢罐中，使其达到沸腾，并保持在100℃至少30分钟。将所述热浆汁转移到55加仑消毒的白色透亮塑料生物工艺筒，并冷却至室温。所述冷却需要数天。

在层流罩超净台(flow-hood)下，用真菌起子培养基(见下)接种所述冷却的培养基，并在55加仑筒中安装一个或两个消毒的棉花塞。然后，所述筒在有光照的空调室内孵化60天。所述光照由Agrolights或deluxe白色暖光提供。白色冷光并不令人满意。

在60天后，除去液体部分的培养基，并过滤除去固体。将滤出的液体加热至100℃，保持10分钟，使可溶性蛋白质变性。然后，过滤所述加热的培养基，并再次加热至100℃，保持30分钟进行巴氏杀菌处理。所述杀菌的产品填充到消毒瓶中，并在室温下储存。由此实施例制备的LCF的pH为2.5。

此实施例中所用的真菌起子培养物从Kukui Spawn Co.，之前的MauiShiitake Trading Company，Hawaii获得。在无菌条件下，将1升所述液体菌种体加入冷却的营养物溶液的生物工艺筒中。通常，每50加仑生物工艺筒中加入2瓶菌种体液体培养基。

实施例2

施用到植物上

将实施例1制备的1盎司LCF稀释到5加仑水中。此混合物施用到咖啡树周围的土壤中。

将1盎司的LCF稀释到5加仑水中，并用于处理谷类植物，其体积比对照植物大60％。将1盎司LCF稀释到10加仑水中显示出改进的效果。

类似地将1盎司LCF稀释到5加仑水中，用于喷洒Manoa莴苣，其叶子重量比对照物多50％。

在种植之前，用6.5％LCF处理黄瓜种籽，所述植物的重量比对照物重39％。

将1盎司LCF稀释到5加仑水中，将其施用到菠萝冠上，使得菠萝长得更快，当用此稀释液喷洒成年植物叶子或者将3岁大的菠萝植物浸渍在这种稀释液中时，也可以观察到生长情况的改善。

将1盎司LCF稀释到1加仑水中，它用作干土芋头、甜马铃薯和山药用的球茎/植物浸渍液。

结果在6周内芋头种籽比对照植物重160％。

在施用到甘蔗时，所需稀释度随各种植物而变化。在有些情况下，1盎司LCF和2.5加仑水就能使芽直径增大50％。

通过喷洒稀释在5加仑水中的1盎司LCF可以使草皮以更快的速度生长。

LCF也已经用作土壤透湿剂，为每苗盆29ml稀释液(1∶500)，用于处理Douglas冷杉，使其在4周内生长10-20％。

LCF可以和聚合物混合，用于干涂布处理谷物、蔬菜和其它作物的种籽。LCF的百分数随作物而变化。

LCF可以用于减轻线虫感染的病症。每棵感染的咖啡树5加仑的稀释液(1∶500)。在5个月内施用三次，可以增加根部、叶面、树枝，增加果料一致性并增加产量。

LCF可以用于降低植物疾病的发生，如真菌叶斑和植物的细菌性腐败。每三周叶面施用LCF稀释液(1∶1600)可以降低洋葱球茎腐败。

可以施用LCF的稀溶液(0.1％溶液)延长剪下的花、叶子和圣诞树的寿命。

可以通过1∶500叶石或土壤湿透施用，使用LCF来降低霜冻、昆虫和化学物质对植物的损害。

在使用颗粒化肥植在盆栽土壤中之前，通过将菠萝芽浸渍在含800、1000或2000ppm LCF的消毒培养基滤出物中10分钟来试验菠萝芽。同时也将芽浸渍在微乳液表面活性剂掺合杀线虫剂中。虽然所述对照物的平均根部重量为6.9克，平均根部长度为29.4英寸，用800ppm LCF处理的植物的根部重量为8.2g，根部长度为33.35英寸；用1000ppm的LCF处理的植物根部重量为7.4g，根部长度为41.4英寸，比对照物增加41％。但是，在2000ppm时，出现毒性效果，根部重量和长度小于对照物。

将鹰嘴豆浸泡在1盎司消毒培养基滤出液LCF稀释在0.5加仑或1加仑水的稀释液中。以每100g豆1ml稀释材料的比率处理所述豆。然后，将所述豆干燥并种植，相比未处理的对照物，收获的豆的产量增加22％。

在其它应用中，本发明LCF组合物处理和花刺激物、除草剂和草皮生长抑制剂处理组合。

当LCF施用于番茄时，其果实重量增加56％。

Claims (18)

1. 一种包含植物生长调节物质的组合物，所述组合物是在长波长光存在下和基本上不搅拌下，从含有至少10％可利用的碳水化合物的培养基孵育的多孔真菌菌种体培养液回收的消毒的培养基滤出物，其中，所述培养基还含有0.005-0.1％重量/体积的钾离子和足够提供黄颜色的胡萝卜素；所述滤出物是其中的蛋白质已变性并被除去的培养基的液体部分，并且所述滤出物是任选地干燥的。

2. 权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述培养基的白利糖度值是12-15。

3. 权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述培养基包含糖蜜、菠萝浆、菠萝汁、番木瓜浆、番木瓜汁、或者它们的任意组合。

4. 权利要求1-3中任一项所述的组合物，其特征在于，所述多孔菌是旬孔菌属。

5. 一种用于提高植物生长和/或发育的制剂，所述制剂包含有效量的含有植物生长调节物质的组合物，所述组合物是在长波长光存在下和基本上不搅拌下，从有至少10％可利用的碳水化合物的培养基孵育的多孔真菌菌种体培养液中回收的干燥的消毒的培养基滤出物，其中，所述培养基还含有0.005-0.1％重量/体积的钾离子和足够提供黄颜色的胡萝卜素；所述滤出物是其中的蛋白质已变性并被除去的培养基的液体部分，并且所述滤出物是任选地干燥的。

6. 权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述培养基的白利糖度值是12-15。

7. 权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述培养基包含糖蜜、菠萝浆、菠萝汁、番木瓜浆、番木瓜汁、或者它们的任意组合。

8. 权利要求5-7中任一项所述的制剂，其特征在于，所述多孔菌是旬孔菌属。

9. 权利要求8所述的制剂，其特征在于，所述制剂包含涂布所述组合物的硅藻土或肥料颗粒。

10. 一种制备包含植物生长调节剂的组合物的方法，所述方法包括将多孔真菌菌种体培养基的滤出物消毒，所述担子菌类真菌菌种体在长波长光存在下和基本上不搅拌下，在含有至少10％可利用的碳水化合物的培养基中生长，其中，所述培养基还含有0.005-0.1％重量/体积的钾离子和足够提供黄颜色的胡萝卜素；所述蛋白质已变性并从所述滤出物中除去，并且所述滤出物是任选地干燥的。

11. 权利要求10所述的方法，其特征在于，所述培养基滤出物通过过滤所述培养基来回收。

12. 权利要求11所述的方法，其特征在于，所述变性的蛋白质通过过滤除去。

13. 权利要求10所述的方法，其特征在于，所述消毒通过巴氏杀菌法进行。

14. 权利要求10-13中任一项所述的方法，其特征在于，所述多孔菌是旬孔菌属。

15. 一种促进植物生长、发育或长大的方法，所述方法包括使所述植物的种籽或至少一部分和权利要求5-9中任一项所述的制剂接触。

16. 权利要求15所述的方法，其特征在于，所述制剂还含有至少一种杀虫剂、至少一种营养物、至少一种除草剂、或者它们的组合。

17. 权利要求15所述的方法，其特征在于，所述制剂还含有至少一种产生植物抗毒素的引发剂。

18. 权利要求15所述的方法，其特征在于，所述方法还包括使所述植物的种籽或至少一部分和至少一种杀虫剂、至少一种营养物、至少一种除草剂、或者它们的组合接触。