CH630929A5 - Verfahren zur herstellung von neuen disaccaridderivaten von anthracyclinen. - Google Patents

Description

<»30929

2

PATENTANSPRUCH /erfahren zur Herstellung von neuen Disaccharidderi-yaten von Anthracyclinen der allgemeinen Formel

COCH.

wX

(III)

Formel Substitution

(I)

15

lila

R6 =

R8 = Rio = H; R7 =NHCOCF3; R9 =

OCOCFa

Illb

R« =

R8 = R9 = RIO = H; R7 = NHCOCF3

IIIc

R6 =

R9 = Rio = H; R7 =NHCOCF3; R8 =

OCOCFa

Illd

R6 =

NHCOCFs; R7 = R9 = R10 = H; R8 =

: OpNBz

20 Hie

R6 =

R9 = rio = H; R7 = R8 = OpNBz

Ulf

R6 =

R8 = OpNBz; R7 = R9 = R10 = H

Hlg

R6 =

R8 = OpNBz; R7 = R9 = R10 = H

Illh

R6 =

R8 = rio = H; R7 = R9 = OpNBz

25

X =

Brom oder Chlor,

in einem organischen Lösungsmittel in Anwesenheit eines löslichen Silbersalzes als Katalysator behandelt, wobei ein geschütztes Glycosid der allgemeinen Formel

Formel

Substitution

Ia

R1 = R3 = R5 =H;R2 = NH2; R4 =

OH

Ib

R1 = R3=R4 = R5 = H;R2 = NH2

Ic

R1 = R4 = R5 =H; R2 = NH2; R3 =

OH

Id

R1 = NH2; R2=R4=RS = H; R3 =

OH

Ie

R1 = R4 - R5 = H; R2 = R3 = OH

If

RI = R3 = 0H;R2 = R4 = R5 = H

Ih

R1 = R3 = R5 = H; R2 = R4 = OH

dadurch gekennzeichnet, dass man N-Trifluoracetyldauno-mycin der Formel ss

/chTio\

(II)

60

NHCOCF,

worin R6 bis R10 die obige Bedeutung haben, erhalten wird, aus welchem durch milde alkalische Behandlung zur Entfernung der N-Trifluoracetylschutzgruppe die Verbindung der 65 Formel (I) erhalten wird.

mit einem geschützten 1-Halogenzucker der allgemeinen

3

630 929

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von neuen Disaccharidderivaten von Anthracyclinen der allgemeinen Formel (I). Diese Verbindungen zeigen bei verschiedenen Tumorsystemen beträchtliche antimitotische Wirksamkeit und sind als Antikrebs-mittel verwendbar. Insbesondere handelt es sich bei den neuen Verbindungen um folgende:

COCH.

(I)

Formel

Substitution

Ia

RI = R3 = R5 « H; R2 =NH2; R4 =

OH

Ib

R1 = R3 = R4 = R5 =H; R2 = NH2

Ic

R' = R4 = R5 =H; R2 = NH2; R3 =

OH

Id

R1 = NH2; R2 =R4 = R5 = H; R3 =

OH

Ie

R1 = R4 = R5 = H; R2 = R3 = OH

If

R' = R3 = OH; R2 = R4 = R5 = H

Ih

Ri = R3 = R? =H;R2 = R4 = OH

Die neuen, erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen (U-PS 3 686 163) beschrieben; die Verbindungen (Ib) bis (Ih)

wurden bisher durch chemische Synthese niemals erhalten. waren bisher unbekannt.

Die Verbindung (Ia) ist in den Patentliteratur als biologisch 50 Die Synthese der Verbindungen (la) bis (Ih) erfolgt gemäss aktiver Metabolit von Streptomyces peucetius var. carneus folgendem Schema

III

AgSO^CF^

NHCOCF.

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4

v' COCH3 OH

Die 1-Halogenzucker (X = Br, Cl) der allgemeinen Formel (III) sind durch folgende Gruppen gekennzeichnet (pNBz = p-Nitrobenzoyl):

Formel Substitution

Illa R6 = R» = R'» = H; R7 = NHCOCFs; R9 = OCOCFs

Illb R6 = R8 = R9 = RIO = H; R7 = NHCOCF3

nie R6 = R9 = R10 = H; R7 = NHCOCF3; R8 = OCOCF3

Illd R6 = NHCOCF3; R7 = R9 = R10 = H; R8 = OpNBz

Ille R6 = r9 = rio = H; R7 = R8 = OpNBz

Ulf R6 = R8 = OpNBz; R7 = R9 = R10 = H

Illg R6 = R8 = OpNBz; R7 = R9 = R10 = H

Illh R® = R8 = Rio =H;R7=R9 = OpNBz

Insbesondere sind die Ausgangsmaterialien für die neuen Antitumorglycoside N-Trifluoracetyldaunomycin (II) und der 1-Halogenzucker (Formeln lila bis IHh). Das erfin-dungsgemässe Verfahren zur Herstellung der Glycosidbin-dung besteht in der Behandlung der Formel (II) mit dem geschützten 1-Halogenzucker in einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Chloroform oder Methylenchlorid, in Anwesenheit eines löslichen Silbersalzes als Katalysator. Diese Reaktion wird hierdurch Verwendung von 1-Chlor-N,0-trifluoracetyldaunosamin (lila) als Vertreter des Halogenzuckerreagens veranschaulicht. Die Kopplungsreaktion ergibt das geschützte Glycosid (IV) (R6 = R8 = H; R7 = NHCOCFs; R9 = OH), aus welchem durch milde alkalische Behandlung zur Entfernung der N-Trifluoracetylschutz-gruppe die Verbindung der Formel (Ia) erhalten wird, die als Hydrochlorid isoliert wird. Die neuen Verbindungen (Ia bis Ih) zeigen antimitotische Wirksamkeit und sind als therapeutische Mittel zur Behandlung von Tumorerkrankungen bei Menschen verwendbar.

Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung näher erläutern, ohne dass diese jedoch hierauf beschränkt sein soll.

35 Beispiel I

C-4' -Daunosaminyldaunomycin (Ia) (MAR 33)

Eine Lösung von 6,48 g N-Trifluoracetyldaunomycin in 420 ml wasserfreiem Methylenchlorid, enthaltend 4,5 g l-Chlor-N,0-trifluoracetyldaunosamin, wurde in Anwesen-40 heit von 50 g Molekularsieb (4 Ä, Merck) mit 3,25 g

AgS03CF3, die in vier Teilen unter starkem Rühren während 20 Minuten zugesetzt wurden, und 1,38 ml 2,6-Lutidin behandelt. Nach 2 Stunden bei Raumtemperatur zeigte Dünnschichtchromatographie auf Kieselgel F254 (Merck), 45 Lösungsmittelsystem CHCb-(CH3)2CO (4:1 V/V) ein neues, weniger polares Produkt in etwa 30%iger Ausbeute. Dann wurde der Reaktionsmischung unter starkem Rühren eine gesättigte wässerige NaHC03-Lösung zugesetzt. Nach 10 Stunden wurde die organische Phase abgetrennt und im 50 Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde in 100 ml Aceton gelöst und bei 0°C mit 0,1N NaOH behandelt. Nach 30 Minuten bei 0°C wurde die Lösung mit 0,1N HCl auf einen pH-Wert von 8,5 eingestellt und mit Chloroform extrahiert, bis die Extrakte farblos waren. Die vereinigten organi-55 sehen Extrakte wurden über Na2S04 getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde durch Chromatographie auf einer Kieselsäuresäule unter Verwendung von CHCb-Me0H-H20 (14:6:1 V/V) als Eluie-rungslösungsmittel gereinigt. Die Daunomycin und andere 60 Nebenprodukte enthaltenden Fraktionen wurden entfernt, während die das Produkt (Ia) enthaltenden Fraktionen gesammelt wurden und Wasser bei pH 4,5 zugesetzt wurde. Die rote wässerige Phase wurde abgetrennt, der pH-Wert auf 8,5 eingestellt und mit Chloroform extrahiert. Das gesamte 65 rote Produkt wurde in die organische Phase übergeführt, die abgetrennt und mit Wasser bei pH 4,8 extrahiert wurde. Das Produkt wurde wiederum in wässerige Lösung übergeführt, die unter Vakuum in Anwesenheit eines Überschusses an

Butylalkohol eingedampft wurde. Als das Wasser vollständig entfernt war, wurde die alkoholische Lösung auf ein kleines Volumen (10 ml) eingedampft und der Niederschlag abgetrennt, gesammelt und mit Äther gewaschen, wobei 0,5 g reine Verbindung (Ia) erhalten wurden, Fp. 161°C (Zers.); Dünnschichtchromatographie auf einer Silikagelplatte, gepuffert auf pH 7 (0,067M Phosphat), Lösungsmittelsystem CHCh-MeOH-HzO (14:6:1 V/V), Rf0,25.

Analyse für C33H42CI2N2O12:

Ber.: H 5,81, C 54,31, N 3,84, Cl 9,72%

Gef.: H 5,59, C 53,77, N 3,91, Cl 9,24%.

Beispiel 2

C-4'-(4"-Epidaunosaminyldaunomycin) (Ic) (MAR 60) (NSC 281635)

Eine Lösung von 2,18 g N-Trifluoracetyldaunomycin in 140 ml wasserfreiem Methylenchlorid, enthaltend 1,5 g 1-Chlor-N,0-trifluoracetyl-4-epidaunosamin (IIIc), wurde in Anwesenheit von 18 g Molekularsieb (4 Â, Merck) mit 1,09 g AgS03CF3, die in vier Portionen unter starkem Rühren während 20 Minuten zugesetzt wurden, und 0,46 ml 2,6-Lutidin behandelt. Entsprechend dem in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren wurden 0,09 g reine Verbindung (Ic) erhalten, Fp. 176°C (Zers.); Dünnschichtchromatographie auf Silikagelplatte F 254 (Merck), Lösungsmittelsystem CHCb-Me0H-H20 (14:6:1 V/V), Rf 0,2.

Analyse für C33H42CI2N2O12:

Ber.: H 5,81, C 54,31, N 3,84%

Gef.: H 5,90, C 54,21, N 3,67%.

Beispiel 3

C-4'-(2,6-Dideoxy-a-L-arabinohexopyranosyl)-dauno-mycin (le) (MAR 70) (NSC 286634)

Eine Lösung von 14,50 g N-Trifluoracetyldaunomycin in 700 ml wasserfreiem Methylenchlorid, enthaltend 13 g I-Chlor-2,6-dideoxy-3,4-0-p-nitrobenzoylarabinohexopyra-nose (Ille), wurde in Anwesenheit von 140 g Molekularsieb (4 Â, Merck) mit 7,28 g AgS03CF3, die in vier Teilen während 30 Minuten unter starkem Rühren zugesetzt wurden, und 3,08 g 2,6-Lutidin behandelt. Entsprechend dem in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren wurden 1,25 g reine Verbindung (Ie) erhalten, Fp. 152 bis 157°C(Zers.); Dünnschichtchromatographie auf Silikagelplatte F254 (Merck), Lösungsmittelsystem CH2Ck-Me0H-H20 (10:2:0,2 V/V), Rf 0,4.

Analyse für C33H40CINO13:

Ber.: H 5,82, C 57,09, N 2,02, Cl 5,11%

Gef.: H 5,43, C 57,13, N 1,87, Cl 5,00%.

Biologische Wirksamkeit

Die Produkte wurden gemäss den Vorschriften des NCI -National Institute of Health, Bethesda, Md (USA) gegen

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lymphocytische Leukämie P388 entsprechend dem in Cancer Chemotherapy Reports, Teil 3, Bd. 3, S. 9 (1972), beschriebenen Verfahren getestet.

Die folgende Tabelle illustriert die Antitumorwirksamkeit einiger der neuen Anthracyclindisaccharide.

Die neuen Verbindungen MAR 60 und MAR 70 (Tabelle I) wurden mit Daunomycin verglichen. Dabei wurden mit Tumorzellen infizierte weibliche CDFi-Mäuse wie folgt behandelt: die Injektionen wurden i.p. am 5., 9. und 13. Tag (d.h. mit einem Intervall von vier Tagen zwischen jeder Injektion), beginnend am 5. Tag nach der Tumortransplantation, verabreicht.

Die Wirksamkeit der Verbindung MAR 33 wurde durch i.p. Behandlung am 1. bis zum 9. Tag von infizierten männlichen CDF-Mäusen getestet. Die mittlere Überlebenszeit, ausgedrückt als % Kontrollen (T/C %) ist in Tabelle II angegeben.

Tabelle I

Verbindung

Schemader

Dosis

T/C%

Behandlung in mg/kg

Tagen (i.p.)

C-4'-(4"-Epidaunosaminyl-5,9,13

50,0

112

daunomycin).HCl

25,0

121

MAR 60-(NSC 281635)

12,5

103

Vers.

6,25

103

3,13

112

C-4' -(2,6-Dideoxy-a-L-

5,9,13

50,0

135

arabinohexopyranosyl)-dau-

25,0

117

nomycin.HCl MAR

12,5

119

70-(NSC 286634) Vers. 5622

6,25

119

3,13

108

Daunomycin.HCl (NSC

5,9,13

32,0

91

82151)

16,0

134

8,0

119

4,0

128

Tabellen

Verbindung

Schema der

Dosis

T/C %

Behandlung in mg/kg

Tagen (i.p.)

C-4' -Daunosaminyldauno-

1 bis 9

25,0

59

mycin.HCl

12,5

86

MAR 33-(NSC 268712)

6,25

146

Vers. 4109

3,13

196

1,56

149

Daunomycin.HCl

1 bis 9

4,0

87

(NSC 82151)

2,0

112

1,0

166

0,5

158

0,25

149

5

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

B