BRPI1008777A2 - composições farmacêuticas compreendendo imidazoqui-lin(aminas) e derivados das mesmas adequados para administração local - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS COMPREENDENDO IMIDAZOQUILIN(AMINAS) E DERIVADOS DAS MESMAS E USO DE IMIDAZOQUINOLIN(AMINA) OU DERIVADO DA MESMA. A presente invenção refere-se, em geral, ao campo de moduladores do sistema imune inato, particularmente a composições farmacêuticas compreendendo imidazoquinolin(aminas) e derivados das mesmas, preferivelmente adequados para administração local, tal como administração intravesical. Em adição, a presente invenção refere-se ao uso de imidazoquinolin(aminas) e derivados das mesmas para tratamento intravesical de doenças da bexiga, tais como, por exemplo, câncer de bexiga e cistite. A presente invenção, além disso, compreende métodos de tratamento para estas doenças, bem como métodos de administração das composições farmacêuticas da invenção.

Description

à: 1/1132 Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSI- * ÇÕES FARMACÊUTICAS COMPREENDENDO IMIDAZOQUILIN(AMINAS) : E DERIVADOS DAS MESMAS E USO DE IMIDAZOQUINOLIN(AMINA) OU DERIVADO DA MESMA”.

A presente invenção refere-se, em geral, ao campo de modula- dores do sistema imune inato, particularmente a composições farmacêuticas compreendendo imidazoquinolin(aminas) e derivados destas, preferivel- mente adequadas para administração local, tal como administração intrave- sical. Em adição, a presente invenção se refere ao uso de imidazoquino- linfaminas) e derivados destes para tratamento intravesical de doenças da bexiga, tais como, por exemplo, câncer de bexiga e cistite. A presente inven- ção adicionalmente compreende métodos de tratamento para estas doen- ças, bem como métodos de administração das composições farmacêuticas da invenção.

A indução e/ou intensificação de respostas imunes do sistema imune inato e, dependendo do tipo do disparador, o sistema imune adapta- tivo desempenha um papel importante na medicina moderna no tratamento e prevenção de numerosas doenças. Para tal proposta, composições imuno- modulatórias são amplamente usadas na técnica, que proporcionam um pe- queno número de receptores denominados receptores de reconhecimento modelo. Estes receptores de reconhecimento padrão reconhecem tipica- mente modelos moleculares conservados que distinguem organismo estra- nho, similar a vírus, bactéria, fungos e parasitas de células de seus hospe- deiros. Como conhecidos de hoje, os receptores de reconhecimento modelo incluem, entre outros, os assim denominados membros da família de recep- tor similar à Toll (TLR), a primeira família de receptores de reconhecimento modelo estudada em detalhe.

TLRs são proteínas de transmembrana que reconhecem ligantes de meio extracelular ou do lúmen de endossomos. Em seguida à ligação de ligante, eles transduzem o sinal através de proteinas adaptadoras citoplás- micas que conduzem ao disparo de uma resposta de defesa de hospedeiro e determinando produção de peptídeos antimicrobiais, quimiocinas pró-

. inflamatórias e citocina s, citocina s antivirais, etc. Até aqui, pelo menos 10 membros de receptor similar à Toll (TLRs 1-10) foram identificados no humano e 13 (TLRs 1-13) em camundongos. Aqueles receptores similares à Toll (TLRs) em humano incluem TLR1-TLR2, que reconhecem lipopeptídeos Triacila; receptores similaes à Toll TLRI-TLR6, que reconhecem lipopeptídeo diacila; receptor similar à Toll TLR2, que reconhece peptido- glicans; receptor similar à Toll TLR3, que é conhecido por reconhecer dsRNA, um produto viral; receptor similar à Toll TLR4, que tem LPS (lipopolissacarídeo) de bactéria Gram-negativa como um ligante conhecido; receptor similar à Toll TLR5, que reconhece flagellin(s) bacterial(is); receptores similares à Toll TLR7/8, cujos ligantes conhecidos compreendem ' imidazoquinolinas, análogos de guanosina e ssRNA; receptor similar à Toll TLR9, que reconhece motivos de CpG não metilatados frequentemente ” encontrados no genoma de bactéria, vírus e protozoários, mas não em vertebrados; TLR9 adicionalmente reconhecem hemozoina de pigmento de malária, um produto de digestão de hemoglobina. Finalmente, o receptor similares à Toll TLR10 foi mostrado se associar diretamente com MyD88, o adaptador de domínio de receptor Toll IL-1 comum (ver, por exemplo, Hasan et al, The Joumal of Immunology, 2005, 174: 2942-2950). Após reconhecimento de patogenias microbiais, estes TLRs tipicamente disparam trajetórias de sinalização intracelular que resultam em indução de citocina s inflamatórias (por exemplo, TNF-alfa, IL-6, IL-1-beta e 11-12), interferon tipo | (IFN-beta e IFN-alfa múltiplo) e quimiocinas (Kawai, T. and S. Akira (2006). "TLR signalling." Cell Death Differ 13(5): 816-25).

Entre os TLRs acima, TLR3, TLR7 e TLR9 são de maior importância. TLR7 reconhece modificadores imune sintéticos pequenos, incluindo imiquimod, R-848, loxoribina, e bropirimina, todos dos quais já são aplicados ou prometem uso clínico contra infecções virais e cânceres. Adicionalmente, células dendríticas plasmacitóides expressam TLR7 e —TLRS9,erespondem a ligantes de TLR7 e TLR9 por produção de uma grande quantidade de interferon (IFN-alfa). Estes resultados indicam que TLR3, TLR7 e TLR9 podem desempenhar um papel importante na detecção e

. combate de infecções virais.

Um exemplo particular de modificadores imunes conforme descritos acima incluem imiquimod (dentro da seguinte descrição também referido como R-837, TMX, TMX-101), que pertencem a classe de modificadores imunes de imidazoquinolin(amina). A molécula imunomo- dulatória imiquimod (1-isobutil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amina) demons- trou ter eficiência clínica em doenças oncológicas, virais e inflamatórias. O mecanismo para a atividade imunoestimulatória de imiquimod é pensada ser devido em parte substancial a intensificação da resposta imune por indução de várias citocinas importantes (por exemplo, interferons, interleucinas, fator de necrose de tumor, etc.). Mesmo se o mecanismo exato de ação não é Y ainda conhecido, a ligação de imiquimod ao receptor similar à Toll é relacionada para ser uma etapa essencial na ativação do sistema imune. As z células estimuladas por imiquimod via TLR-7 secretam citocina s (principalmente interferon-a (IFN-a), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose de tumor-a (TNF-a) que contribuem para as propriedades anti-viral, anti- tumor, e anti-inflamatória do agente.

Foi mostrado que imiquimod é um modulador imune potente atualmente usado como uma primeira linha de terapia tópica para verrugas genitais e carcinomas de célula basal superficiais (Purdon CH, Azzi CG, Zhang J, Smith EW, Maibach HI. Penetration enhancement of transdermal delivery-current permutations and limitations. Crit Rev Ther Drug Carrier Syst. 2004; 21: 97-132; Chang YC, Madkan V, Cook-Norris R, Sra K, Tyring S. Current and potential uses of imiquimod. South Med J. 2005; 98: 914-20; Wagstaff AJ, Perry CM. Topical imiquimod: a review of its use in the management of anogenital warts, actinic keratoses, basal cell carcinoma and other skin lesions. Drugs. 2007; 67: 2187-210). Em adição, imiquimod foi usado para o tratamento de lesões de pele malignas incluindo melanoma e carcinoma de célula basal (Wagstaff AJ, Perry CM. Topical imiquimod: a review of its use in the management of anogenital warts, actinic keratoses, basal cell carcinoma and other skin lesions. Drugs. 2007; 67: 2187-210). Imiquimod induz citocina s pró-inflamatórias e quimiocinas in vitro e in vivo

- (Chan M, Hayashi T, Kuy CS et al. Synthesis and Immunological Characterization of Toll-Like Receptor 7 Agonistic Conjugates. Bioconjugate chemistry. 2009) que atraem células imunes ao sítio local de administração (Barnetson RS, Satchell A, Zhuang L, Slade HB, Halliday GM. Imiquimod que induz regressão de carcinoma de célula basal superficial clinicamente diagnosticado é associado com infiltração anterior por células CD4 T e células dendríticas. Clinical and experimental dermatology, 2004; 29: 639- 43).

Adicionalmente, imidazoquinolinas têm mostrado direcionar efeitos citotóxicos em células de câncer de bexiga e as induzem a secretar citocina s pró-inflamatórias (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H et al. : Antitumor effects of imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. The Joumal of urology. 2007; 177: 2347-51). É adicionalmente - descrito que imidazoquinolinas têm efeitos antitumor em modelos de camundongo de câncer de bexiga ortotópico (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H et al. Antitumor effects of imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. The Journal of urology. 2007; 177: 2347-51). Em adição, foi mostrado que TLR-7 é também expresso em linhas de célula de câncer de bexiga de murino e humana e imidazoquinolinas têm efeitos biológicos diretos potentes nas células de carcinoma de célula urotelial por diminuição da viabilidade da célula e indução de apoptose e produção de citocina (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H, et al. Antitumour effects of Imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. J Urol 2007;177:2347). Os efeitos diretos parecem seroresultado de regulação descendente de c-Myc e podem sinergizar com a ação de imunomodulação de imidazoquinolinas (Liu H, Schwartz MJ, Hwang DH, Scherr OS. Tumour growth inhibition by an imidazoquinoline is associated com c-Myc down-regulation in urothelial cell carcinoma. BJU Int 2008; 101:894-901). Adicionalmente, os resultados iniciais em um modelo de camundongo ortotópico competente imune sugerem efeitos antitumor in vivo (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H, et al. Antitumour effects of Imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. J Urol

. 2007;177:2347; Liu H, Schwartz MJ, Hwang DH, Scherr OS. A inibição de crescimento de tumor por uma imidazoquinolina está associada com regulação descendente de c-Myc em carcinoma de célula urotelial. BJU Int 2008; 101: 894-901). Portanto, imidazoquinolinas têm potencial terapêutico como agente intravesical para câncer de bexiga.

Embora alguns dos efeitos benéficos de modificadores imunes, tal como imiquimod, sejam conhecidos, a capacidade de proporcionar benefício terapêutico via administração local destes modificadores imunes para tratamento de uma condição particular em uma localização particular pode ser evitada por uma variedade de fatores. Estes fatores incluem insolubilidade e/ou degradação destes modificadores imunes na formulação R antes, durante ou ainda subsequente a administração, mas também instabilidade física da formulação, incluindo fatores tais como separação de - componentes, espessamento, precipitação/agiomeração de ingredientes ativos, e similares, bem como permeação pobre do(s) modificador(s) imune(s) no tecido ou células circundantes após administração. Especifi- camente, a solubilidade do modificador imune imiquimod é crítica, e seu uso em composições farmacêuticas, em particular, em composições líquidas ou semilíquidas é limitada devido a suas propriedades hidrofóbicas. Ainda embora imiquimod seja solúvel em baixas concentrações em solventes orgânicos polares tais como DMSO, dimetil formida, e N-metil-2-pirrolidona, tais solventes não permitem administração de imiquimod em ou no corpo humano devido a seus vários efeitos tóxicos. Solventes não tóxicos, contudo, tais como água ou etanol solubilizam membro das imidazoqui- —nolin(aminjas, tal como imiquimod, somente levemente e somente permite administração de imiquimod a ou no corpo humano em baixas concentra- ções (subterapêuticas).

Portanto, de acordo com um primeiro aspecto da presente invenção, existe uma necessidade de proporcionar uma composição farmacêutica, particularmente como formulação líquida ou semi-líquida, que permite solubilizar imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, em uma maneira apreciável e, portanto, permite concentrações eficazes mais altas

. de modificadores imunes tal como imiquimod, quando administrada ao indivíduo em necessidade desta.

Particularmente, existe uma necessidade na técnica de se proporcionar tal formulação líquida ou semilíquida para modos de administração local, que não exibem efeitos tóxicos, mas exibem — solubilidade aperfeiçoada e preferivelmente diminuem instabilidade física da formulação.

Contudo, o uso de modificadores imunes, particularmente de membros da classe de imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, para o tratamento de doenças oncológicas e virais é também limitado por seus vários efeitos colaterais.

Por exemplo, imiquimod é reportado causar, por exemplo, agitação, anemia, angioedema, arritmias, síndrome de vazamento P capilar, falha cardíaca, cardiomiopatia, acidente cerebrovascular, depressão, dispnéia, eritema multiforme, dermatite esfoliativa, sindrome de púrpura de - Henoch-Schônlein, púrpura de trombocitopenia idiopática, insônia, isquemia, leucopenia, função anormal do fígado, linfoma, esclerose múltipla agravada, paresia, proteinúria, edema pulmonar, síncope, trombocitopenia, e tireoidite.

De modo a reduzir o risco de tais efeitos colaterais severos — que podem ser ameaças à vida em alguns casos — ele é realmente essencialmente administrado localmente ao invés de sistemicamente.

Neste contexto, as rotas para administração sistêmica em geral incluem, por exemplo, rotas transdermal, oral, ou parenteral, incluindo rotas de administração subcutâneas, intravenosas, intramusculares, intraarteriais, intradermais e injeções intraperitoneais e/ou rotas de administração intranasais.

Tal administração sistêmica tipicamente conduz a uma distribuição total dos modificadores imunes através dos corpos humanos e, portanto, aumenta significantemente o risco de efeitos colaterais.

Em contraste, as rotas para administração local em geral incluem, por exemplo, rotas de administração tópica, mas também intradermais, transdermais, injeções subcutâneas ou intramusculares ou intralesionais, intracraniais, intrapulmonares, intracardíacas, e injeções sublinguais, no qual tal administração tipicamente ocorre no sítio de aflição e permite uma ação direta do fármaco enquanto efeitos colaterais sistêmicos são significante-

, mente reduzidos, que são considerados ocorrerem após administração sistêmica.

No contexto de modificadores imunes conforme definido acima, em particular imidazoquinolin(amin)as, tais como imiquimod ou seus — derivados, o requerimento específico de administração local devido às propriedades físico-químicas acima mencionadas destes compostos e efeitos colaterais após administração sistêmica, limitam sua aplicação terapêutica e o número de doenças a serem tratadas com estas.

No presente, a maioria das doenças que podem ser tratadas imiquimod ou seus derivados são doenças específicas da pele, incluindo cânceres de pele, tais como, carcinoma de célula basal, doença de Bowen, carcinoma de célula ' escamosa superficial, bem como verrugas genitais (Condylomata acumi- nata). Uma doença adicionalmente proeminente que pode ser tratada com - modificadores imunes, em particular imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, inclui doenças da bexiga, em particular câncer da bexiga e cistite.

Neste contexto, o câncer da bexiga se refere a qualquer de tipos severos de doenças neoplásticas (maligna ou não maligna) da bexiga urinária.

Ele é um dos cânceres de crescimento mais rápido ao redor do mundo devido ao rápido envelhecimento da população de muitos países.

Todo ano nos Estados Unidos mais do que 60.000 pessoas são recentemente diagnosticadas com câncer de bexiga, 80 % destas têm câncer de bexiga não invasivo.

Desde que a taxa de mortalidade de câncer de bexiga é relativamente baixa, o número total de pacientes nos Estados Unidos e na Europa é acima de 400.000. Desse modo, o câncer de bexiga urinária é a quinta malignidade mais comum entre homens na sociedade ocidental.

A maioria dos casos de câncer de bexiga é diagnosticada como tumores superficiais não invasivos que são potencialmente curáveis por cirurgia e terapia imune (Schenk-Braat EA, Bangma CH.

Immunotherapy for superficial câncer de bexiga.

Cancer Immunol Immunother. 2005; 54: 414-

23)

Desse modo, a maioria de pacientes com câncer de bexiga não invasivo (superficial) são tratados com o assim denominado “soluções de bacillus Calmette-Guerin (BCG), que são administradas via a rota intravesical.. Contudo, tais soluções de BCG são produtos não caracterizados = compostos por uma forma atenuada da bactéria Mycobacterium tuberculose, e, portanto, exibem um perfil de segurança pobre.

Em adição, tumores que crescem superficialmente podem ser removidos por ressecção transuretral, mas a taxa de recorrência é alta. Para prolongar os intervalos livre de tumor após ressecção cirúrgica, tratamento intravesical com Mycobacterium bovis Baccilus-Calmette-Guerin (BCG), a cepa de vacina contra infecção de tuberculose, é atualmente usada como uma opção de tratamento adjuvante (Alexandroff AB, Jackson AM, O'Donnell : MA, James K. BCG immunotherapy of bladder cancer: 20 years on. Lancet.

1999; 353: 1689-94. De Jager R, Guinan P, Lamm D et al. Long-termo - complete remission in bladder carcinoma in situ with intravesical TICE bacillus Calmette Guerin. Overview analysis of six phase |l clinical trials.

Urology. 1991; 38: 507-13. Totterman TH, Loskog A, Essand M. The immunotherapy of prostate e bladder cancer. BJU international. 2005; 96: 728-35.) Contudo, o tratamento de M. bovis BCG induz a inflamação local não específica na bexiga, acompanhada de várias citocina s pró- inflamatórias (IL-2, IL-6, I11-8 e TNFa) (De Boer EC, Rooijakkers SJ, Schambhart DH, Kurth KH. Cytokine gene expression in a mouse model: the first instillations with viable bacillis Calmette-Guerin determine the succeeding Th1i response. The Journal of urology. 2003; 170: 2004-8) e —quimiocinas que por sua vez iniciam infiltração de células imunes no urotélio da bexiga (Sutimann H, Riemensberger J, Bentien G et al. Neutrophil granulocytes are required for effective Bacilus Calmette-Guerin immunotherapy of bladder cancer and orchestrate local immune responses.

Cancer research. 2006; 66: 8250-7. Simons MP, O'Donnell MA, Griffith TS.

Role of neutrophils in BCG immunotherapy for bladder cancer. Urologic oncology. 2008; 26: 341-5). Instilação de BCG causa estimulação não específica do sistema imune, que induz infiltração local da parede da bexiga por células T ativadas derivadas por imunidade mediada por células (Bohle A, Brandau S. Immune mechanisms in bacilus Calmette-Guerin immunotherapy for superficial bladder cancer. The Journal of urology. 2003; 170: 964-9).

A incidência de carcinoma de célula urotelial invasiva de não músculo da bexiga (NMIBC) é alta (Babjuk M, Oosterlinck W, Sylvester R, Kaasinen E, Bóhle A, Palou-Redorta J; European Association of Urology (EAU). EAU guidelines on non-muscle-invasive urothelial carcinoma of the bladder. Eur Urol 2008;54:303-14) e a prevalência é ainda maior devido à alta taxa de recorrência após a resseccão trans uretal primária. Em pacientes em alto risco de recorrência de tumor e/ou progressão a doença : invasiva de músculo, imunoterapia de BCG intravesical por pelo menos um ano é indicada (Babjuk M, Oosterlinck W, Sylvester R, Kaasinen E, Bôhle A, ” Palou-Redorta J; European Association of Urology (EAU). EAU guidelines on —non-muscle-invasive urothelial carcinoma of the bladder. Eur Urol 2008;54:303-14). Contudo, BCG é somente parcialmente eficaz e efeitos colaterais locais e sistêmicos sérios podem ocorrer (Witjes JA, Palou J, Soloway M, Lamm O, Brausi M, Spermon JR, Persad R, Buckley R, Akaza H, Colombel M, Bôhle A. Clinical Practice recommendations for the prevention and management of intravesical therapy-associated adverse events. Eur.

Urol Suppl2008;7:667-74). Portanto, o desenvolvimento de novas opções de tratamento intravesical para abaixar a recorrência de tumor e progressão de NMIBC permanece essencial.

Como doenças de bexiga adicionais, a cistite tipicamente compreende uma inflamação da bexiga urinária e ocorre quando o trato urinário inferior normalmente estéril (uretra e bexiga) é infectado por bactéria e torna-se irradiado e inflamado. Devido ao risco da difusão da infecção aos rins e devido à alta taxa de complicação na população mais velha e em diabéticos, pronto tratamento é quase sempre recomendado. De modo a controlar a cistite , a infecção bacterial, é usualmente tratada com antibióticos. Antibióticos comumente usados para o tratamento incluem, por exemplo, nitrofuran, trimetoprim-sulfametoxazole, amoxicilina,

cefalosporinas, ciprofloxacina ou levofloxacina, e doxiciclina.

Contudo, tais terapias de antibiótico frequentemente rompem o equilíbrio normal da flora intestinal causando diarréia.

Em adição, um rompimento induzido por antibiótico da população da bactéria normalmente presente como constituintes da flora vaginal normal pode também ocorrer, e pode conduzir a super crescimento de espécies de levedura do gênero Candida na área vulvo-vaginal.

Para tais doenças, particularmente para o tratamento de doenças de bexiga tais como câncer não invasivo e/ou cistite, a provisão de um agente alternativo que age via uma ativação do sistema imune seria desejável.

Contudo, embora modificadores imunes, conforme definidos . acima, particularmente imiquimod ou seus derivados, possam ser usados para o tratamento destas doenças, administração pode ser dificultada por

. efeitos colaterais severos após administração sistêmica conforme explanado :

acima.

Adicionalmente, quando administrados localmente, tais modificadores imunes, particularmente imiquimod ou seus derivados, não estão tipicamente presentes em uma quantidade terapeuticamente eficaz in vivo devido a suas propriedades — físico-químicas — (farmaceuticamente — polêmica). Tais composições farmacêuticas não foram ainda descritas na técnica, indicando oexcelente desafio na técnica.

Conforme conhecido a umversado na técnica , de modo a proporcionar tal composição farmacêutica específica, vários aspectos farmacêuticos, tal como dose, compatibilidade excipiente, solubilidade, estabilidade, fabricação estéril, praticabilidade de escala, distribuível com cateter, custos, e complacência do paciente, bem como aspectos farmacológicos, tais como atividade biológica, permeabilidade de membrana, duração de efeito, baixa circulação sistêmica (de modo a evitar efeitos colaterais sistêmicos) e perfil de toxicidade têm que serem considerados.

Como para muitos outros agentes ativos, a provisão de composições farmacêuticas compreendendo o agente ativo desejado e liberando o agente tal que distribuição de fármaco local é assegurada é um dos maiores desafios para cada farmacêutico.

Adicionalmente, as propriedades físico-químicas (críticas) de, por exemplo, imidazo-

quinolin(aminas), em particular o perfil de hidrofobicidade desta classe de composto, têm que ser levadas em conta, que (em vista das aproximações descritas na técnica) tipicamente conduzem a uma concentração insuficiente in vivo do composto modificador imune administrado que age como ligante deTLR7.

Portanto, de acordo com um segundo aspecto existe uma necessidade urgente de proporcionar uma composição farmacêutica adequada para distribuição local específica de modificadores imunes conforme definidos acima, particularmente de imiquimod ou seus derivados, por exemplo, para tratamento de doenças de bexiga, por exemplo, via uma rota de administração intravesical. ' Em resumo, conforme esboçado acima, imiquimod é um agente ativo eficiente para o tratamento de doenças oncológicas, virais e inflama- - tórias. Contudo, o uso de imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod e seus derivados, na fabricação de um medicamento é estritamente limitado : por suas características de solubilidade. Em adição, vários efeitos colaterais são causados por imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, se administradas sistemicamente. Consequentemente, a administração deste agente em uma formulação que permite que o agente seja especificamente distribuído ao órgão alvo pelo uso de uma composição farmacêutica apropriada é de muita importância. Portanto, seria altamente desejável proporcionar composições farmacêuticas específicas compreendendo imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, em quantidades suficiente- mente solubilizadas para permitir tratamento eficiente das doenças aqui mencionadas. Em adição, seria preferível, se imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod e derivados deste, fossem formulados em uma formulação adequada para ser administrada localmente, em particular, intravesi- calmente, de modo a combater doenças da bexiga, reduzindo, desse modo, significantemente o risco de efeitos colaterais sistêmicos severos. Desse modo, é um objetivo da presente invenção proporcionar uma composição farmacêutica adequada para compreender modificadores imunes, em particular imidazoquinolin(amin)as, tal como imiquimod, em quantidades terapeuticamente eficazes . Em adição, é um objetivo adicional da presente invenção proporcionar composições farmacêuticas adequadas para serem usadas nafabricação de um medicamento para tratamento intravesical de doenças da bexiga, em particular de câncer de bexiga não invasivoe cistite, via administração intravesical.

O(s) objetivo(s) da presente invenção é (são) solucionado(s) pelas reivindicações em anexo. Particularmente, o(s) objetivo(s) da presente invenção é (são) solucionado(s) por uma composição farmacêutica compreendendo (a) uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, por exemplo, imiquimod ou um derivado deste, e (b) pelo menos um ácido orgânico selecionado de ácido acético e/ou ácido láctico, ou uma mistura : destes. Desse modo, de acordo com uma concretização preferida da J. presente invenção, a composição farmacêutica compreende uma imidazoquinolin(amina) e pelo menos um ácido orgânico selecionado de ácido acético e/ou ácido láctico.

Para algumas concretizações uma ou mais das seguintes condições se aplicam: - composições — farmacêuticas para aplicação tópica são excluídas, - composições — farmacêuticas — compreendendo — óleo são tr excluídas, - composições farmacêuticas formuladas como uma formulação w/o (água-em-óleo) ou o/w (óleo-em-água) são excluídas, - composições farmacêuticas formuladas como um creme compreendendo 4% peso por peso de imiquimod (1-isobutil-1H-imidazo[4,5- c]l-quinolin-4-amina) na fase óleo e 1 % peso por peso de ácido láctico (85%) na fase aquosa são excluídas, - composições farmacêuticas para administração parenteral são excluídas, - composições farmacêuticas compreendendo glicerina e/ou sorbitol são excluídas,

- composições farmacêuticas para administração parenteral compreendendo 1% peso por peso de 1-isobutil-1H-imidazo(4,5-c]-quinolin- 4-amina e/ou 1% peso por peso de 1-(2-hidróxi-2-metilpropil)-1H- imidazo([4,5-clquinolin4-amina = ou N-[4-(4-amino-2-etil-IH-imidazo[4,5- clquinolin-1-i)butillmetanosulfoneamida e 1% ou 2 % peso por peso de ácido láctico (85 %) ou 0,6 % peso por peso de ácido acético são excluídas, - composições farmacêuticas compreendendo ácido acético e sorbitan monooleato 20 miristato ou isopropil miristato são excluídas, e/ou - composições farmacêuticas compreendendo nanopartículas de imiquimod quitosano obtidas por mistura de solução de quitosano ácido acético com imiquimod são excluídas. p De acordo com outra concretização preferida da presente invenção, a composição farmacêutica adicionalmente compreende pelo " menos um agente termossensível, no qual o pelo menos um agente termossensível é preferiveimente selecionado de quitosano ou seus derivados, ou de um poli(etileno óxido)-poli(propileno óxido)-poli(etileno óxido) copolímero (também denominado PEO-PPO-PEO ou poloxâmero). De acordo com uma concretização adicionalmente preferida da presente invenção, o pelo menos um agente termossensível é selecionado de quitosano ou seus derivados, ou de um poli(etileno óxido)-poli(propileno óxido)-poli(etileno óxido) copolímero (também denominado PEO-PPO-PEO í ou poloxâmero) incluindo Pluronic F 108 Cast Solid Surfacta; Pluronic F 108 Pastille; Pluronic F 108 Prill; Pluronic F 108NF Prill (Poloxâmero 338); Pluronic F 127; Pluronic F 127 Prill; Pluronic F 127 NF; Pluronic F 127 NF 500 BHT Prill; Pluronic F 127 NF Prill (Poloxâmero 407); Pluronic F 38; Pluronic F 38 Pastille; Pluronic F 68; Pluronic F 68 Pastille; Pluronic F 68 LF Pastille; Pluronic F 68 NF Prill (Poloxâmero 188); Pluronic F 68 Prill; Pluronic F 77; Pluronic F 77 Micropastille; Pluronic F 87; Pluronic F 87 NF Prill (Poloxâmero 237); Pluronic F 87 Prill; Pluronic F 88 Pastille; Pluronic F 88 — Prill; Pluronic F 98; Pluronic F 98 Prill; Pluronic L 10; Pluronic L 101; Pluronic L 121; Pluronic L 31; Pluronic L 35; Pluronic L 43; Pluronic L 44; Pluronic L 44 NF (Poloxâmero 124); Pluronic L 61; Pluronic L 62; Pluronic L 62 LF;

Pluronic L 62D; Pluronic L 64; Pluronic L 81; Pluronic L 92; Pluronic L44 NF INH surfactant (Poloxâmero 124); Pluronic N 3; Pluronic P 103; Pluronic P 104; Pluronic P 105; Pluronic P 123 Surfactante; Pluronic P 65; Pluronic P 84; Pluronic P 85; e Poloxâmero 403, ou é selecionado de uma mistura formada por qualquer dois ou mais dos agentes termosssensíveis antes definidos.

De acordo com uma outra concretização preferida da presente invenção, o pelo menos um agente termossensível é selecionado de um poli(etileno — óxido)-poli(propileno — óxido)-polifetileno óxido) copolímero (também denominado PEO-PPO-PEO ou poloxâmero) incluindo Pluronic F 108 Cast Solid Surfacta; Pluronic F 108 Pastille; Pluronic F 108 Prill; Pluronic BR F 108NF Prill (Poloxâmero 338); Pluronic F 127; Pluronic F 127 Prill; Pluronic F 127 NF; Pluronic F 127 NF 500 BHT Prill; Pluronic F 127 NF Prill . (Poloxâmero 407); Pluronic F 38; Pluronic F 38 Pastille; Pluronic F 68; Pluronic F 68 Pastille; Pluronic F 68 LF Pastille; Pluronic F 68 NF Prill (Poloxâmero 188); Pluronic F 68 Prill; Pluronic F 77; Pluronic F 77 Micropastille; Pluronic F 87; Pluronic F 87 NF Prill (Poloxâmero 237); Pluronic F 87 Prill; Pluronic F 88 Pastille; Pluronic F 88 Prill; Pluronic F 98; Pluronic F 98 Prill; Pluronic L 10; Pluronic L 101; Pluronic L 121; Pluronic L l 20 31; PluronicL 35; Pluronic L 43; Pluronic L 44; Pluronic L 44 NF (Poloxâmero 124); Pluronic L 61; Pluronic L 62; Pluronic L 62 LF; Pluronic L 62D; Pluronic r L 64; Pluronic L 81; Pluronic L 92; Pluronic L44 NF INH surfactant (Poloxâmero 124); Pluronic N 3; Pluronic P 103; Pluronic P 104; Pluronic P 105; Pluronic P 123 Surfactant; Pluronic P 65; Pluronic P 84; Pluronic P 85; e —Poloxâmero 403, ou é selecionado de uma mistura formada por qualquer dois ou mais dos agentes termos-sensíveis antes definidos.

No contexto da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção compreende como um primeiro componente pelo menos um ácido orgânico selecionado de ácido acético e/ou ácido láctico, ou a mistura destes. Embora os ácidos orgânicos “ácido acético” e “ácido láctico” já fossem conhecidos a um versado na técnica para formulação de compo- sições farmacêuticas em geral, os inventores da presente invenção surpreendentemente verificaram que especificamente estes ácidos carboxí- licos de cadeia curta são adequados para solubilizar eficientemente imidazoquinolin(amina) ou derivados destes, uma descoberta que não foi ainda publicada ou discutida na técnica. Em adição, foi verificado que ácido acético e ácido láctico exibem propriedades de solubilização claramente superiores a qualquer outro ácido (carboxílico). Mais especificamente e ainda mais surpreendentemente, ácido acético (CH;COOH) e/ou ácido láctico (ácido 2-hidróxi propiônico), solubiliza imidazoquinolin(amina) 3 a 100 vezes melhor do que outros ácidos de cadeia curta (carboxílico), a saber, ácido fosfórico, ácido succínico e ácido cítrico. Estes efeitos surpreendentes são, sem estar ligados a qualquer ' teoria, particulamente devido à estrutura específica de imidazoquino- lin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, por exemplo, . imiquimod, e a interação específica de especificamente ácido acético e ácido láctico com a imidazoquinolin(amina) composto, que conduz a uma estrutura de aduto inesperada. Os termos “imidazoquinolin(aminas)” se referem a ambas as classes genéricas de imidazoquinolins e, mais especificamente, em uma concretização preferida, também à subclasse de imidazoqui- nolinaminas.

. 20 Desde que imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, confor- me aqui usado, têm um grupo funcional básico, particularmente uma porção . de amina, foi assumido na literatura da técnica anterior que imidazo- quinolin(aminas) podem ser solubilizadas em qualquer solução acídica em valores de pH abaixo do pK, dos compostos daquela classe, por exemplo, no caso de imiquimod, isto é, de cerca de 4. Contudo, foi mostrado pelos inventores da presente invenção que a solubilidade das imidazoqui- nolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, não depende meramente do pH da solução. Sem estar ligado a qualquer teoria, aquelas propriedades superiores parecem serem realizadas por uma interação, que ocorre entre imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, e o ácido (orgânico) especificamente selecionado de ácido acético e/ou ácido láctico, formando, desse modo, adutos específicos entre ambos os componentes.

Evidentemente, nenhuma tal interação parece ocorrer entre imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, e qualquer outro ácido (orgânico). Consequentemente, é assumido que os resultados surpreendentes da presente invenção, particularmente as características de solubilização superiores específicas das imidazoqui- nolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, nos ácidos orgânicos ácido acético e/ou ácido láctico, parecem depender das propriedades estruturais específicas que são exclusivamente realizadas por ácido láctico e | ácido acético, mas não por qualquer outro ácido (orgânico). Desse modo, ácido láctico e/ou ácido acético formam o ânion na estrutura de aduto e as imidazoquinolin(aminas) sendo os cátions positivamente carregados.

Ep De acordo com uma concretização preferida da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, ni compreende um ácido orgânico selecionado de ácido acético e/ou ácido —láctico, ou uma mistura destes, em uma concentração de cerca de 0,025 Ma cerca de 0,200 M, preferivelmente em uma concentração de cerca de 0,025 M a cerca de 0,100 M, ou em uma concentração de cerca de 0,100 M a cerca de 0,200 M, ou em uma concentração de cerca de 0,075 M a cerca de 0,125 M, por exemplo, em uma concentração de cerca de 0,025 M a cerca ; 20 de0,200M, de cerca de 0,030 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,035 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,040 M a cerca de 0,200 M, de cerca de í 0,045 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,050 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,055 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,060 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,065 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,070 M a cerca de 0,200 WM, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,080 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,085 a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,090 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,100 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,125 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,130 M a cerca de 0,200 M,decercade0,135M acerca de 0,200 M, de cerca de 0,140 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,145 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,0150 Ma cerca de 0,200 M, de cerca de 0,155 M a cerca de 0,200 M, de cerca de

0,160 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,165 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,170 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,175 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,180 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,185 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,190 M a cerca de 0,200 M, ou cerca de 0,195 Ma cerca de 0,200 M, ou, preferivelmente, em uma concentração de cerca de 0,050 M a cerca de 0,100 M, por exemplo, em uma concentração de cerca de 0,055 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,060 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,065 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,070 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,080 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,090 M a cerca de 0,100 M, ou de cerca de 0,095 M a cerca de 0,100 M, ou em uma p concentração de cerca de 0,025 M a cerca de 0,100 M, por exemplo, em uma concentração de cerca de 0,025 M a cerca de 0,100 M, de cerca de by 0,030 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,035 M a cerca de 0,100 M, de cercade 0,040 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,045 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,050 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,055 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,060 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,065 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,070 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,080 M a cerca de 0,100 M, de ' 20 cercade 0,085 a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,090 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,100 M, de cerca de 0,095 M a cerca de " 0,100 M, ou em uma concentração de cerca de 0,100 M a cerca de 0,200 M, por exemplo, em uma concentração de cerca de 0,100 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,125 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,130 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,135 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,140 Ma cerca de 0,200 M, de cerca de 0,145 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,0150 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,155 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,160 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,165 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,170 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,175 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,180 M a cerca de 0,200 M, de cerca de 0,185 Ma cerca de 0,200 M, de cerca de 0,190 M a cerca de 0,200 M, ou cerca de 0,195 M a cerca de 0,200 M, ou em uma concentração de cerca de 0,075 M a cerca de 0,125 M, por exemplo, de cerca de 0,08 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,09 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,1 M a cerca de 0,125 M, ou de cerca de 0,075 M a cerca de 0,120 M, de cerca de 0,075 Ma cercade 0,115 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,110 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,105 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,105 M ou de cerca de 0,08 M a cerca de 0,120 M, por exemplo, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,115 M, de cerca de 0,09 M a cerca de 0,110 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,105 M, ou de cerca de 0,1 M, Neste contexto, foi mostrado que a quantidade de imidazoquinolin(aminas) solubilizadas ou seus derivados, conforme aqui usado, em solução, está diretamente relacionada à B concentração do ácido, isto é, à concentração de ácido acético e ácido láctico. Consequentemente, concentrações mais altas de ácido acético e/ou f ácido láctico ou uma mistura de ambos podem ser preferidas para solubilização, preferivelmente dentro das faixas definidas acima.

De acordo com uma concretização específica da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, compreende uma mistura de (dois ácidos orgânicos selecionados de) ácido acético e ácido láctico, ambos juntos preferivelmente exibindo uma ' 20 “concentração comum” de ácidos orgânicos conforme definido acima, para a composição farmacêutica da invenção em geral de cerca de 0,025 M a cerca . de 0,200 M, ou de cerca de 0,075 M a cerca de 0,125 M, qualquer con- centração adicional conforme definido acima. Neste contexto, o termo “concentração comum de ácidos orgânicos” significa que molaridades de ambos ácidos orgânicos ácido acético e ácido láctico usados para tal mistura, conduz a uma concentração conforme definido acima. Ainda mais preferivelmente, ambos componentes de uma mistura de (dois ácidos orgânicos selecionado de) ácido acético e ácido láctico, conforme definido acima, compreende uma proporção de ácido acético : ácido láctico de cerca de1:30acercade 30:1, por exemplo, de cerca de 2:30, de cerca de 3:30, de cerca de 4:30, de cerca de 5:30, de cerca de 6:30, de cerca de 7:30, de cerca de 8:30, de cerca de 9:30, de cerca de 10:30, de cerca de 11:30, de cerca de 12:30, de cerca de 13:30, de cerca de 14:30, de cerca de 15:30, de cerca de 16:30, de cerca de 17:30, de cerca de 18:30, de cerca de 19:30, de cerca de 20:30, de cerca de 21:30, de cerca de 22:30, de cerca de 23:30, de cerca de 24:30, de cerca de 25:30, de cerca de 26:30, de cerca de 27:30, de cercade 28:30, de cerca de 29:30, de cerca de 30:29, de cerca de 30:28, de cerca de 30:27, de cerca de 30:26, de cerca de 30:25, de cerca de 30:24, de cerca de 30:23, de cerca de 30:22, de cerca de 30:21, de cerca de 30:20, de cerca de 30:19, de cerca de 30:18, de cerca de 30:17, de cerca de 30:16, de cerca de 30:15, de cerca de 30:14, de cerca de 30:13, de cerca de 30:12, de cerca de 30:11, de cerca de 30:10, de cerca de 30:9, de cerca de 30:8, de cerca de 30:7, de cerca de 30:6, de cerca de 30:5, de cerca de 30:4, de ' cerca de 30:3, de cerca de 30:2, ou de cerca de 30:1. Faixas de ácido acético : ácido láctico são aqui reveladas, que podem ser formadas n base . de qualquer dos valores acima, por exemplo, 1:30 a 30:24, 1:30 a 23:30, 30:12a30:1,30:8a30:1 etc.

De acordo com uma concretização específica adicional da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme definido acima, compreende exclusivamente ou ácido acético ou ácido láctico como componentes ácidos. Em qualquer caso, as concretizações : 20 específicas se referem a composições da invenção conforme descritas acima que não envolvem qualquer outro ácido, seja um ácido orgânico ou - um ácido inorgânico, exceto para ácido acético e/ou ácido láctico. Em outra concretização específica, a composição farmacêutica compreende exclusi- vamente ácido acético (e nenhum ácido láctico) como componente ácido (orgânico) e, mais preferivelmente, à parte de ácido acético, nenhum outro ácido no todo, seja orgânico ou inorgânico. Ao contrário, a composição farmacêutica pode (em outra concretização específica) compreender exclusivamente ácido láctico (e nenhum ácido acético) como ácido (or- gânico) e, mais preferivelmente, à parte do ácido láctico, nenhum outro ácido no todo, seja orgânico ou inorgânico. Em ainda outra concretização preferida, a composição farmacêutica pode compreender apenas ácido acé- tico e ou ácido láctico como componentes de ácido orgânico, contudo, pode existir pelo menos um ácido inorgânico adicional que seja incluído na composição farmacêutica da invenção, por exemplo, ácido fosfórico, HCI, etc.

De acordo com outra concretização específica da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme aqui definida, compreende exclusivamente ácido láctico como componente ácido, preferivelmente exibindo uma concentração de ácido láctico conforme definida acima para a composição farmacêutica da invenção em geral de cerca de 0,025 M a cerca de 0,200 M, ou de cerca de 0,075 M a cerca de 0,125 M, ou qualquer concentração adicional conforme definido acima. Nesta concretização específica é ainda mais preferido que a composição é farmacêutica da invenção conforme descrito acima, não envolve qualquer outro ácido do que ácido láctico, seja um ácido inorgânico ou um ácido " orgânico. Neste contexto, os inventores da presente invenção — surpreendentemente verificaram que ácido láctico é ainda mais eficiente na solubilização de imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, do que ácido acético. Surpreendentemente, o ácido láctico é duas vezes como eficiente na solubilização das imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, como ácido acético. Foi também verificado que a solubilidade de imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado, no ácido láctico não é intensificada pela adição de surfactantes, x tais como Tween ou Pluronic, que usualmente funcionam como intensificadores de solubilidade em composições farmacêuticas. Esta descoberta sugere que imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, confor- me aquiusado, não são arrastadas em micelas formadas por surfactantes e, portanto, suportam a suposição que estas imidazoquinolin(aminas) interagem com ácido láctico por formação de adutos especificamente estruturados. De acordo com outra concretização específica da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme aqui definida, compreende ácido láctico em uma concentração de cerca de 0,075 M a cerca de 0,125 M, por exemplo de cerca de 0,08 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,09 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,1 M a cerca de 0,125 M, ou de cerca de 0,075 M a cerca de 0,120 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,115 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,110 M, de cerca de 0,075Ma cerca de 0,105 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,105 M ou de cerca de 0,08 M a cerca de 0,120 M, por exemplo, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,115 M, de cerca de 0,09 M a cerca de 0,110 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,105 M, ou de cerca de 0,1 M. De acordo com uma concretização específica adicional da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção, conforme aqui definida, tipicamente compreende um valor de pH de cerca de 3 a cerca de . 8, preferivelmente de cerca de 3 a cerca de 7, mais preferivelmente de cerca de 3 a cerca de 6, ainda mais preferivelmente de cerca de 3 a cerca de 5, e, - mais preferivelmente, um valor de pH de cerca de 3,5 a cerca de 4, incluindo um valor de pH em uma faixa de cerca de 3,5 a cerca de 4,9, de cerca de 3,5 a cerca de 4,8, de cerca de 3,6 a cerca de 4,7, de cerca de 3,6 a cerca de 4,6, de cerca de 3,7 a cerca de 4,5, de cerca de 3,7 a cerca de 4,4, de cerca de 3,8 a cerca de 4,3, de cerca de 3,8 a cerca de 4,2, ou de cerca de 3,9 a cerca de 4,1. A composição farmacêutica da invenção pode ser É 20 preparada e administrada em um valor de pH, conforme definido acima. Se necessário, o valor de pH pode ser adicionalmente ajustado para o Q tratamento específico e requerimentos de administração, por exemplo, a um valor de pH mais neutro de cerca de 5, 6, ou 7 (pH 5 a 7), por exemplo, usando se tampões e aditivos conforme aqui revelados.

No contexto da presente invenção, a composição farmacêutica da invenção compreende como um componente adicional um composto de imidazoquinolin(amina), tal como imiquimod ou um derivado deste, como um agente biologicamente ativo (terapeuticamente). No contexto da presente invenção, o termo “imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme aqui usado”, se refere preferivelmente a imidazoquinolin(aminas) conforme definidas em seguida.

De acordo com uma concretização particular, a composição farmacêutica da invenção compreende imidazoquinolin(aminas) selecio- nadas da seguinte fórmula (1): b

RR R É

FIN (RIA v ns Re O no qual - RI RReR? são cada independentemente selecionados de hidrogênio; ailquila cíclico de três, quatro, ou cinco átomos de carbono; f alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono e alquila substituído de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia reta ou de cadeia - ramiíficada contendo de um a cerca de quatro átomos de carbono; alquilflúor ou alquilcloro contendo de um a cerca de dez átomos de carbono e um ou i mais átomos de flúor ou cloro; alquenila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituída por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de carbono; alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; aciloxialquila no qual a porção acilóxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, com a condição de que qualquer tal grupo alquila, alquila substituída, alquenila , alguenila substituída, hidroxialquila , alcoxialquila , ou acilóxi alguila não tem um átomo de carbono totalmente substituído ligado diretamente ao átomo de nitrogênio; benzila; (fenil)etila; e fenila; a referida benzila, (fenil)etila ou fenila substituinte sendo opcional- mente substituída no anel benzeno por uma ou duas porções independente- mente selecionadas do grupo consistindo em alguila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com à condição de que quandoo referido anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções p juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono;

-CHR.Ry, no qual R, é hidrogênio ou uma ligação carbono- T carbono, com a condição de que quando R, é hidrogênio, R, é alcóxi de um acerca de quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, Ialquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono, tetra-hidropiranila, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piridila, e com a condição adicional = 20 que quando R, é uma ligação carbono-carbono, R, e Rx juntos formam um grupo tetra-hidrofuranila opcionalmente substituída com um ou mais F substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em hidróxi ou hidroxialquita de um a cerca de quatro átomos de carbono; alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cercade oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, morfolinometila, benzila, (fenil)etila e fenila, a benzila, (fenil)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituído no anel benzeno por uma porção selecionada do grupo consistindo em metila, metóxi, ou halogênio;

-C(RS)(R1)(X) no qual Rs e Rr são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, fenila, e fenila substituída no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio; X é alcóxi contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquilamido no qual o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, amino, amino substituído no qual o substituinte é alqguila ou hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, alquiltio de um a cerca de quatro átomos de carbono, ou morfolinoalquila no qual a porção alquila contém um YR a cerca de quatro átomos de carbono; Rº é hidrogênio, C1.6 alquila, C1.8 alcóxi, ou halo; nm n é 1,2,3, ou 4; Rº e Rº são cada independentemente hidrogênio, (C1-Ce)alquila, hidroxi(C1-Cs) alquila, amino(C,-Cs)alquila, aminosulfonila, (C;-Cs)alcanoila, arila, ou benzila, todos eles opcionalmente sendo substituídos por um ou mais grupos amino; ou R?º e Rº juntos com o nitrogênio ao qual eles são fixados formam - 20 um grupo pirrolidino, piperidino, ou morfolino; as linhas tracejadas no anel de cinco membros de fórmula (1) acima denotam uma ligação opcional que liga à: um nitrogênio do anel de cinco membros ao carbono que está entre os dois nitrogênios do anel de cinco membros, e quando a ligação está presente, ou R' ou R? está ausente; provido que Rº e Rº juntos permitem formação de um íon de amônio quaternário ou no nitrogênio do elemento estrutural central N(RINRP), ou por qualquer fon de amônio quaternário sendo provido por Rº e/ou Rº; ou um sal farmmaceuticamente aceitável destes. Um sal farma- — ceuticamente aceitável no significado da presente invenção tipicamente se refere a sal de ácido acético ou ácido láctico.

De acordo com uma concretização particular adicional, a composição farmacêutica da invenção compreende como imidazoquinolina ou seus derivados uma imidazoquinolinamina tal como 1H-imidazo[4,5- clquinolin-4-aminas, tipicamente selecionadas de uma das seguintes fórmulas (1!) a (VI): por exemplo, tais compostos podem ser selecionados de fórmula (1) NH n

NÓ N | da tan, AZ Ru no qual Ru é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a cerca de dez átomos de carbono, hidroxialguila de um a cerca de seis átomos de carbono, aciloxialquila no qual a porção acilóxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila r contém um a cerca de seis átomos de carbono, benzila, (fenil)Jetila e fenila, a referido benzila, (feni)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente ã 15 substituída no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono e halogênio, com a condição de que se o referido anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então referidas porções juntas contêm não —maisdo que seis átomos de carbono; Ra é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila de um a cerca de oito átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, a benzila, (feniletila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono e halogênio, com a condição de que quando o anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções juntas contém não mais do que seis átomos de carbono; e cada Ri é independentemente selecionado do grupo consistindo em alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, e né um inteiro de O a 2, com a condição de que se n é 2, então referidos grupos R, juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável por qualquer dos precedentes; . ou podem ser selecionados da fórmula (Ill) y m NH?

ASA OS

JJ - nÃÁÃ Ra ' 15 no qual Ri12 é selecionado do grupo consistindo em alquenila de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono; e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituída por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; e r 27/192 Ro2 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alqui- 1 la de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, benzila, (fenil)Jetila e fenila, a benzila, (fenil)Jetila ou fenila À substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com a con- dição de que quando o anel benzeno é substituído por duas tais porções, entãoas porções juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono; e cada Ra é independentemente selecionado do grupo consistindo em alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia normal ou de ca- deiaramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, e né um inteiro de zero a 2, com a condição de que se n é 2, então referidos grupos R2 juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável por qualquer dos prece- dentes; ou podem ser selecionados da fórmula (IV) mW NH, x N

OI K

AO no qual Ra3 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alqui- la de cadeia normal ou de cadeia ramificada de um a cerca de oito átomos de carbono, benzila, (feniljetila e fenila, a benzila, (feni)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de cadeia reta ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com a condição de que quando o anel benzeno é substituído por duas tais porções, então as porções juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono; e cada R3 é independentemente selecionado do grupo consistindo em alcóxi de cadeia reta ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, e p né um inteiro de zero a 2, com a condição de que se n é 2, então referidos grupos R3 juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono; í ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer dos precedentes; ou podem ser selecionados da fórmula (V) . Vv NH? - " N Oo ' N O | R: no qual Ria é -CHR.R, no qual R, é hidrogênio ou uma ligação carbono-carbono, com a condição de que quando R, é hidrogênio, R, é alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, 1-alquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono, tetra-hidropiranila, alcoxialquila no qual! a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piríidila, e com a condição adicional que quando R, é uma ligação carbono-carbono, R,y e Rx juntos formam um grupo tetra-hidrofuranila opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em hidróxi e hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono; Ros é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, fenila, e fenila substituída no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de - quatro átomos de carbono, e halogênio; e é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alcóxi de cadeia reta ou de cadeia ramificada ' contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeiareta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável por qualquer dos precedentes; ou podem ser selecionados da fórmula (VI)

VI p NHz

N NX SD

N O 1 Rs no qual Ri5 é selecionado do grupo consistindo em : hidrogênio; alquila de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono e alquila substituída de cadeia reta ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; alquenila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada , contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de carbono; alcoxialquila no qual a porção alcóxi í contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém uma cerca de seis átomos de carbono; aciloxialquila no qual a porção acilóxi acilóxi é alcanoilóxialcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; benzila; (fenil)etila; e fenila; a referida benzila, (fenil)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma ou - 20 duas porções independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de , quatro átomos de carbono, e halogênio, com a condição de que quando referido anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono; Rs é x

E Ra no qual Rs eRrsão independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, fenila, e fenila substituída no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio; x é selecionado do grupo consistindo em alcóxi contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquitamido no qual o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, amino, amino substituído no qual o " substituinte é alquila ou hidroxialquita de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, cloro, hidróxi, 1-morfolino, 1-pirrolidino, alquilttio de um a . cerca de quatro átomos de carbono; e R5 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, alcóxi de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável por qualquer dos - 20 precedentes. De acordo com outra concretização particular, a composição ] farmacêutica da invenção compreende como imidazoquinolina ou seu derivado imidazoquinolin(aminas) da seguinte fórmula (VII): NH; . VI

N N OS

N | RC or Rs no qual m é 1,2, ou3;

Ri6 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio; alquila cíclica de três, quatro, ou cinco átomos de carbono; alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono e alquila substituída de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; alquilflúor ou alquilcloro contendo de um a cerca de dez átomos de carbono e um ou mais átomos de

- flúor ou cloro; alquenila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituído de cadeia f reta ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de carbono;

- 20 —alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono;

Á aciloxialquila no qual a porção acilóxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, com a condição de que qualquer tais grupos alquila, alguila substituído, alquenila , alguenila substituído, hidroxialquila , alcoxialquila , ou acilóxi alquila não têm um átomo de carbono de carbono totalmente substituído ligado diretamente ao átomo de nitrogênio; benzila;

(fenil)etila; e fenila; referida benzila, (fenil)etila ou fenial substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma ou duas porções

—independentemente selecionadas do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com a condição de que quando referido anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono; e

-CHR.Ry, no qual R, é hidrogênio ou uma ligação carbono-

carbono, com a condição de que quando R, é hidrogênio, Rx é alcóxi de um acercade quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, I|-alquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono, tetra-hidropiranila, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piridila, e com a condição adicional que quando R, é uma ligação carbono-carbono, R, e Rx juntos formam um grupo tetra-hidrofuranila opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados do grupo consistindo em hidróxi e hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, T Ras é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, —alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, morfolinometila, benzila, (feniletila e fenila, a benzila, (feni)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma porção selecionada do

. 20 grupo consistindo em metial, metóxi, e halogênio; e “C(Rs(R1)(X) no qual ' Rs e Rr são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, fenila, e fenil asubstituída no qual o substituinte é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio;

X é selecionado do grupo consistindo em alcóxi contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém uma cerca de quatro átomos de carbono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquilamido no qual o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, amino, amino substituído no qual o substituinte é alquila ou hidroxialguila de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, alquiltio de um a cerca de quatro átomos de carbono, e morfolinoalquila no qual a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, e Re é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio, flúor, cloro, alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, e alquilflúor ou alquilcioro de cadeia reta ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono e pelo menos um átomo de flúor ou de cloro; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

De acordo com outra concretização particular, a composição - farmacêutica da invenção compreende como imidazoquinolina ou seu derivado imidazoquinolin(aminas) da seguinte fórmula (VIII): NH vH ne X Ye RS | E Roz fz no qual i R17 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio; - CH2Rw no qual Ryw é selecionado do grupo consistindo em alquila de cadeia reta, de cadeia ramificada ou cíclico contendo um a cerca de dez átomos de carbono, alquenila de cadeia reta ou de cadeia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, e feniletila; e - CH==CR7Rz no qual cada Rz;7 é independentemente aqui! de cadeia reta, de cadeiaramiíificada ou cíclico de um a cerca de seis átomos de carbono; Ro7 é selecionado do grupo consistindo em hidrogênio,

alquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia reta ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alqguilacontém um a cerca de seis átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, a benzila, (fenietila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma porção selecionada do grupo consis- tindo em metila, metóxi, e halogênio; e morfolinoalquila no qual a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono; Rs; E R;; são independentemente selecionados do grupo consistindo em hidrogênio e alquila de um a cerca de cinco átomos de " carbono, com a condição de que RÊ7 E R77 tomados juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono, e com a condição adicional que quando R;7 f é hidrogênio, então Rs; é outro do que hidrogênio e Ro; é outro do que hidrogênio ou morfolinoalquila, e com a condição adicional que quando Re; é hidrogênio, então R;77 e R2>; são outros do que hidrogênio; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes. De acordo com uma concretização particular adicional, a composição farmacêutica da invenção compreende como imidazoquinolina - 20 ou seu derivado imidazoquinolin(aminas) da seguinte fórmula (IX):

K NH SE

DO a L, Z " DA no qual Z é selecionado do grupo consistindo de: -(CH2)p-no qual pé 1 a 4;

-(CH2>)a-C(RoRe)(CH2)y-, no qual a e b são inteiros e arbé 0 a 3, Rp é hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos de carbono, e Re é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a quatro átomos de carbono, hidróxi, -ORF no qual Re é alquila de um a quatro átomos de carbono, e -NRcR'çg no qual Rg e R'g são independentemente hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos de carbono; e -(CH2)a-(Y)-(CH2),- no qual a e b são inteiros e arbé 0a 3,e Y é O, S, ou -NRy- no qual Ry é hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos de carbono; e no qual géloute p Ra é selecionado do grupo consistindo em alquila de um a quatro átomos de carbono, alcóxi de um a quatro átomos de carbono, e fi halogênio, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes. De acordo com uma ainda concretização preferida, a compo- sição farmacêutica da invenção compreende como imidazoquinolin(amina) o composto específico imiquimod, preferivelmente tendo a fórmula específica 1-isobutil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amina, ainda mais preferivelmente . 20 compreendendo as seguintes estruturas específicas: . NH,

NÓS S | > Y x x) De acordo com uma ainda concretização preferiday a composição farmacêutica da invenção compreende como imidazoqui- nolin(amina) o composto específico resiquimod, preferivelmente compre- endendo a seguinte estrutura específica:

NH2 ne — => À (X!) A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode também compreender uma mistura de mais do que uma imidazoqui- nolin(amina) conforme definida acima, tipicamente 2 a 4 imidazoqui- nolin(aminas), que podem, por exemplo, serem selecionadas de qualquer ' dos compostos acima revelados de acordo com as fórmulas (1) a (XI). : Preferivelmente, pelo menos um dos componentes terapeuticamente ativos em tal composição farmaceuticamente ativa compreendendo mais do que uma imidazoquinolin(amina) corresponde a fórmula (XI): imiquimod.

No contexto de imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme definido acima, preferivelmente as seguintes definições adicionais podem se aplicar: eNas fórmulas contendo o inteiro n e onde n pode ser zero, um, oudois,né preferivelmente zero ou um.

y +Os substituintes R141-R17 acima são geralmente designados "1- substituintes" aqui. Em uma concretização, os 1-substituintes são prefe- rivelmente alquila contendo um a seis átomos de carbono e hidroxialquila contendo um a seis átomos de carbono, por exemplo, o 1-substituinte é 2- —metilpropila ou 2-hidróxi-2-metilpropila.

«Os substituintes R21-R27 acima são geralmente designados "2- substituintes" aqui. Em uma concretização, os 2-substituintes são preferi- velmente hidrogênio, alquila de um a seis átomos de carbono, alcoxialquila no qual a porção alcóxi contém um a quatro átomos de carbono e a porção —alquila contém uma quatro átomos de carbono, e hidroxialquila de um a quatro átomos de carbono, por exemplo, o 2-substituinte é hidrogênio, metila, butila, hidroximetila, etoximetila ou metoxietila.

+O termo “alquila“ preferivelmente inclui grupos alquila C1-10 retos ou ramiíificados, por exemplo, metila, etila, propila, butila, pentila, isopropila, isobutila, 1-metilpropila, 3-metilbutila, hexila, e similares. eThe termo “aiquila inferior“ preferivelmente inclui grupos alquila Cig retos ou ramificados, por exemplo, metila, etila, propila, 1-metiletila, butila, 1-metilpropila, 2-metilpropila, 1,1dimetiletila, pentila, 1-metilbutila, 2- metilbutila, 3-metilbutila, 1, 1dimetilpropila, 1,2-dimetilpropila, 2,2-dimetilpro- pila, e similares. + O termo "alquileno" preferivelmente se refere a uma cadeia de —hidrocarboneto divalente reta ou ramíificada (por exemplo, etileno -CH2-CH2- ). À «O termo “C37 cicloalquila “ preferivelmente inclui grupos tais como, ciclopropila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, e similares, e grupo f alquil-substituído C3.; cicloalquila , preferivelmente grupo alquila C1.5 reto ou ramificado tal como metila, etila, propila, butila ou pentila, e grupo cicloalquila Cs.7 tal como, ciclopentila ou ciclo-hexila, e similares. + O termo “alcóxi inferior“ preferivelmente inclui grupos alcóxi C1. 6, tais como, etóxi ou propóxi, e similares. «O termo “alcanoila inferior” preferivelmente inclui grupos - 20 alcanoíla Ci, tais como formila, acetila, propanoila, butanoila, pentanoil ou hexanoila, e similares. ' O termo “aroil C;71“ inclui grupos tais como benzoila ou naftoila; + O termo “alcoxicarbonila inferior “ preferivelmente inclui grupos —alcoxicarbanoil C2,7, tais como metoxicarbonila, etoxicarbonila ou propor- xicarbonila, e similares. +O termo “grupo alquilamino inferior “ preferivelmente significa um grupo amino substituído por grupo alquila C1.6, tais como, metilamino, etilamino, propilamino, butilamino, e similares. “O termo “grupo di(alquila inferiornamino" preferivelmente significa um grupo amino substituído pelo mesmo ou diferente e grupo alquila C1.6 (por exemplo, dimetilamino, dietilamino, etilmetilamino).

«O termo “grupo alquilcarbamoila inferior “ preferivelmente significa um grupo carbamoila substituída por grupo alquila Cie (por exemplo, metilcarbamoila, etilcarbamoila, propilcarbamoila, butilcarbamoila). +O termo “Grupo di(alquil inferior)carbamoila“ preferivelmente significa um grupo carbamoila substituída pelo mesmo ou diferente e grupo alquila C1.6 (por exemplo, dimetilcarbamoila, dietilcarbamoila, etilmetilcar- bamoila). O termo “átomo de halogênio”, conforme aqui definido, preferivelmente significa um átomo de halogênio tais como átomo de flúor, átomo de cloro, átomo de bromo ou átomo de iodo. «O termo “arila”, conforme aqui definido, preferivelmente se p refere a um grupo arila Cg.1o monocíclica ou cíclica fundida, tais como fenila, indenila, ou naftila, e similares. h + O termo “heterocíclico“ conforme aqui definido, preferivelmente se refere a grupos heterocíclicos monocíclicos saturados, ou grupo heterocíclico insaturado ou fundidos contendo pelo menos um heteroátomo, por exemplo, 0-3 átomos de nitrogênio, 0-1 átomo de oxigênio (-O-), e 0-1 átomos de enxofre (-S-). Neste contexto, exemplos não limitativos de grupo heterocíclico monocíclico saturado incluem grupo heterocíclico saturado de 5 . 20 ou 6 membros, tais como tetra-hidrofuranila , pirrolidinila, morfolinila, piperídila, piperazinila ou pirazolidinila.

Exemplos não limitativos de grupo ] heterocíclico monocíclico insaturado incluem grupo heterocíclico insaturado de 5 ou 6 membros, tais como furila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, tienila, piridila ou pirimidinila.

Exemplos não limitativos de grupos — heterocíclicos fundidos insaturados incluem grupo heterocíclico bicíclico insaturado, tais como indolila, isoindolila, quinolila, benzotizolila, cromanila, benzofuranila, e similares. e Adicionalmente, grupos alquila, arila e heterocíclico, conforme aqui definido, podem ser opcionalmente substituídos com um ou mais —substituintes, no qual os substituintes são os mesmos ou diferentes, e incluem alquila inferior; C1.5 alcóxi , tais como metóxi, etóxi ou propóxi; carboxila; C2.7 alcoxicarbonila, tais como metoxicarbonila, etoxicarbonila ou propoxicarbonila) e halogênio; cicloalquila e incluem C36 cicloalquila ; hidroxila; C1.5 alcóxi ; amino; ciano; arila; arila substituída, tais como 4- hidroxifenila, 4-metoxifenila, 4clorofenila ou 3,4-diclorofenila; nitro e halogênio, hidroxila; hidróxi Cis alquileno, tal como hidroximetila, 2- hidroxietila ou 3-hidroxipropila; alcóxi inferior; Cie alcóxi Ci. alquila, tal como 2-metoxietila, 2-etoxietila ou 3-metoxipropila; amino; alquilamino; dialquil amino; ciano; nitro; acila; carboxila; alcóxi carbonila inferior; halogênio; mercapto; C1.6 alquiltio, tal como, metiltio, etiltio, propíltio ou butiltio; substituído C1s alquiltio, tal como metoxietiltio, metiltioetiltio, hidroxietiltio ou cloroetiltio; arila; arila cíclica substituída Ceg-1o monocíclico ou fundida, tal como 4-hidroxifenila, 4-metoxifenila, 4-fluorofenila, 4-clorofenila À ou 3, ,4-diclorofenila; heterocíclico insaturado de 5-6 membros, tal como furila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, tienila, piridil ou pirimidinila; e f heterocíclico insaturado bicíclico, tal como indolila, isoindolila, quinolila, benzotiazolila, cromanila, benzofuranila ou ftalimino.

Adicionalmente, o anel heterocíclico, conforme aqui definido, pode ser opcionalmente substituído com um ou mais substituintes, no qual os substituintes são os mesmos ou diferentes, e incluem Ci. alquila; hidróxi Cie alquileno; C1.6 alcóxi Ci.6 alquileno; hidroxila; C1-.6 alcóxi ; e ciano. - 20 Finalmente, será apreciado por versados na técnica no assunto que imidazoquinolin(aminas), conforme definido acima, no contexto da ' presente invenção, também podem ter um centro quiral e podem ser isolados em formas oticamente ativas e racêmicas.

Alguns compostos podem exibir polimorfismo.

É para ser compreendido que a presente invenção envolve qualquer forma racêmica, oticamente ativa, polimórfica, ou estereoisomérica, ou misturas destas, de imidazoquinolin(aminas) ou seus derivados, conforme definido acima, que possuem as propriedades úteis aqui descritas, sendo bem conhecido na técnica como preparar formas oticamente ativas (por exemplo, por resolução da forma racêmica por técnicas de recristalização, pela síntese de materiais de partida oticamente ativos, por síntese quiral, ou por separação por cromatografia usando uma fase estacionária quiral) e como determinar atividade agonística de nicotina usando os testes padrões descritos aqui, ou usando outros testes similares que são bem conhecidos na técnica.

De acordo com uma concretização, a composição farmacêutica de acordo com a presente invenção tipicamente compreende uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, conforme aqui definida, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, em uma quantidade de cerca de 0,005 % (p/y) a cerca de 5 % (p/v), preferivelmente em uma quantidade de cerca de 0,01 % (p/vy) a cerca de 5 % (py), mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 4 % (pm), ainda mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 3 % (pm), ainda adicionalmente preferido em uma - quantidade de cerca de 0,2 % (p/y) a cerca de 2 % (py), e, mais preferivelmente, em uma quantidade de cerca de 0,2 % (p/v) a cerca de 1 % f (p/v), ou ainda em uma quantidade de cerca de 0,5 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v), no qual as quantidades, conforme definidas em % (p/v), podem ou serem determinadas na base do peso de imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definido, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, com relação ao volume total da composição farmacêutica da invenção, quando, por exemplo, provida como uma formulação líquida ou . 20 semilíquida. Alternativamente, as quantidades acima podem ser definidas em % (p/p), no qual as quantidades conforme definidas em % (p/p), podem ' ou serem determinadas na base do peso de imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, conforme definido acima, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, com relação ao peso total da composição farmacêutica da invenção.

De acordo com uma concretização preferida particular, a composição farmacêutica de acordo com a presente invenção tipicamente compreende uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, conforme aqui definida, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, em uma — quantidade de cerca de 0,005 % (p/v) a cerca de 1, 2, 3, 4, ou 5 % (p/yv), em uma quantidade de cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 1, 2, 3, 4, ou 5 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 1,2, 3,4, ou 5%

(p/v), em uma quantidade de cerca de 0,2 % (p/v) a cerca de 1,2,3,4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,3 % (p/v) a cerca de 1,2,3,4, ou % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,4 % (p/v) a cerca de 1,2,3,4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,5 % (p/v) a cerca de 1,2,3, 5 4, ,o0u5S'%(p/y) em uma quantidade de cerca de 0,6 % (p/v) a cerca de 1,2, 3, 4, ou 5 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 0,7 % (p/v) a cerca de 1, 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,8 % (p/v) a cerca de 1, 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,9 % (p/v) a cerca de 1, 2, 3, 4, ou 5 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 1,0 % (p/v) a cercade2,3,4,0ou5'% (p/vy), em uma quantidade de cerca de 1,1 % (p/v) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,2 % (p/v) a | cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,3 % (p/v) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,4 % (p/v) a A cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,5% (p/v) a cercade2,3,4,ouS%(p/y), em uma quantidade de cerca de 1,6 % (p/v) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,7 % (pv) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,8 % (p/v) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 1,9 % (pfv) a cerca de 2, 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,0 % (pv) a - 20 cercade 3,4,0ou5% (py), em uma quantidade de cerca de 2,1 % (pfv) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,2 % (pv) a : cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,3 % (pv) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,4 % (pv) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,5 % (pv) a cercade 3,4,ou5 7% (py), em uma quantidade de cerca de 2,6 % (pv) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,7 % (p/v) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,8 % (p/v) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 2,9 % (p/(y) a cerca de 3, 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,0 % (p/v) a cercade4,ou5% (py), em uma quantidade de cerca de 3,1 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,2% (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,3 % (p/v) a cerca de 4, ou 5

% (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,4 % (p/v) a cerca de 4, ou 5% (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,5 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,6 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,7 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,8 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,9 % (p/v) a cerca de 4, ou 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,0 % (p/v) a cerca de 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,1 % (p/y) a cerca de 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,2 % (p/v) a cerca de 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,3 % (pv) a cercade 5% (p/y)) em uma quantidade de cerca de 4,4 % (pv) a cerca de 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 5 - % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,6 % (p/v) a cerca de 5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,7 % (p/v) a cerca de 5 % (p/v), em uma f quantidade de cerca de 4,8 % (p/v) a cerca de 5 % (pv), ou em uma quantidade de cerca de 4,9% (p/v) a cerca de 5% (p/v). Os valores acima podem também serem determinados em % (p/p). Ambos os termos “% (p/v)” e “% (p/p)” são preferivelmente conforme definidos acima. De acordo com outra concretização preferida particular, a composição farmacêutica de acordo com a presente invenção tipicamente - 20 compreende uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, conforme aqui definida, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, em uma Ô quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v).

De acordo com concretização preferida adicionalmente particular, a composição farmacêutica de acordo com a presente invenção tipicamente compreende uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta, conforme aqui definida, preferivelmente imiquimod, ou um derivado deste, em uma quantidade de cerca de 0,005 % (p/v) a cerca de 0,5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 0,6 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,2 % (p/v) a cerca de 0,7 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,3 % (p/v) a cerca de 0,8 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,4 % (p/v) a cerca de 0,9 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 0,5 % (p/v) a cerca de 1,0 % (py), em uma quantidade de cerca de 0,6 % (p/v) a cerca de 1,1 % (py), em uma quantidade de cerca de 0,7 % (p/v) a cerca de 1,2 % (py), em uma quantidade de cerca de 0,8 % (p/v) a cerca de 1,3 % (py), em uma quantidade de cerca de 0,9 % (p/v) a cerca de 1,4 % (py), em uma quantidade de cerca de 1,1 % (p/v) a cerca de 1,5 % (py), em uma quantidade de cerca de 1,2 % (p/v) a cerca de 1,6 % (pN), em uma quantidade de cerca de 1,3 % (p/v) a cerca de 1,7 % (pn), em uma quantidade de cerca de 1,4 % (p/v) a cerca de 1,8 % (ph), em uma quantidade de cerca de 1,5 % (p/v) a cerca de 1,9 % (pn), em uma quantidade de cerca de 1,6 % (p/v) a cerca de 2,0 % (pn), em uma " quantidade de cerca de 1,7 % (p/v) a cerca de 2,1 % (py), em uma quantidade de cerca de 1,8 % (p/v) a cerca de 2,2 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 1,9 % (p/v) a cerca de 2,3 % (py), em uma quantidade de cerca de 2,0 % (p/v) a cerca de 2,5 % (py), em uma quantidade de cerca de 2,1 % (p/v) a cerca de 2,6 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 2,2 % (p/v) a cerca de 2,7 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 2,3 % (p/v) a cerca de 2,8 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 2,4 % (p/v) a cerca de 2,9 % (py), em uma - 20 quantidade de cerca de 2,5 % (p/v) a cerca de 3,0 % (py), em uma quantidade de cerca de 2,6 % (p/v) a cerca de 3,1 % (p/v), em uma ' quantidade de cerca de 2,7 % (p/v) a cerca de 3,2 % (py), em uma quantidade de cerca de 2,8 % (p/v) a cerca de 3,3 % (py), em uma quantidade de cerca de 2,9 % (p/v) a cerca de 3,4 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,0 % (p/v) a cerca de 3,5 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 3,1 % (pv) a cerca de 3,6 % (py), em uma quantidade de cerca de 3,2 % (p/v) a cerca de 3,7 % (pv), em uma quantidade de cerca de 3,3 % (p/v) a cerca de 3,8 % (pv), em uma quantidade de cerca de 3,4 % (p/v) a cerca de 3,9 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,5 % (p/v) a cerca de 4,0 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 3,6 % (p/v) a cerca de 4,1 % (py), em uma quantidade de cerca de 3,7 % (p/v) a cerca de 4,2 % (py), em uma quantidade de cerca de 3,8 % (p/vy) a cerca de 4,3 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 3,9 % (p/y) a cerca de 4,4 % (py), em uma quantidade de cerca de 4,0 % (p/v) a cerca de 4,5 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,1 % (p/v) a cerca de 4,6 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,2 % (p/v) a cerca de 4,7 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 4,3 % (p/v) a cerca de 4,8 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4,4 % (p/v) a cerca de 4,9 % (p/v), ou em uma quantidade de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 5,0 % (p/v). Os valores acima podem também serem determinados em % (p/p). Ambos os termos “%(p/v)” e"%(p/p) são preferivelmente conforme definidos acima. Para a preparação da composição farmacêutica da invenção, 3 por exemplo, quando preparando uma solução (estoque) durante a preparação da composição farmacêutica da invenção, contudo, imidazo- E quinolin(amina) ou um derivado desta, conforme aqui definida, pode ser dissolvida em tal solução aquosa (estoque) compreendendo ou ácido láctico ou ácido acético, ou uma mistura de ambos, conforme definido acima, tipicamente em uma concentração mais alta conforme indicado acima para a composição farmacêutica da invenção final. Para tal proposta, a solução (estoque) pode compreender uma quantidade de cerca de 0,005 % (p/v) ou - 20 0,01% (p/v)a cerca de 30 % (p/v), preferivelmente uma quantidade de cerca de 1 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), mais preferivelmente uma quantidade de ' cerca de 5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), ainda mais preferivelmente uma quantidade de cerca de 10 % (p/y) a cerca de 25 % (p/v), e, mais preferivelmente, uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 20 ou 25 % (py) de imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida. Os valores acima podem ser alternativamente compreendidos como % (p/p). Estas percentagens “% (p/y)” e “%í(p/p)” são preferivelmente conforme definidas acima.

De acordo com outra concretização, a composição farmacêutica da invenção pode também compreender aditivos ou componentes adicionais. Vantajosamente, tais aditivos ou componentes adicionais intensi- ficam a solubilidade e/ou penetração de membrana da imidazo-

quinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, na compo- sição farmacêutica da invenção. Alternativamente ou adicionalmente, tais aditivos ou componentes adicionais permitem proporcionar uma formulação mais adequada para uma doença específica a ser tratada, conferir uma melhortolerância à composição farmacêutica da invenção, etc.

De acordo com uma concretização particular, a composição farmacêutica da invenção pode compreender ciclodextrinas, que são também designadas cicloamiloses. Conforme surpreendentemente verificado pelos inventores da presente invenção, ciclodextrinas podem ser usadas para intensificar a solubilidade e, vantajosamente, a penetração de membrana da imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui À definida, na composição farmacêutica da invenção, mesmo embora a imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, não possa ser suficien- f temente dissolvida por apenas ciclodextrinas. Neste contexto, a solubilidade da imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, não é intensificada na composição farmacêutica da invenção final usando ciclodextrinas, mas também em uma solução intermediária (estoque) formada pela imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, e um ácido orgânico conforme definido acima, por exemplo, ácido . 20 láctico, ácido acético, ou a mistura destes. Particularmente, foi uma descoberta inesperada em vista da técnica anterior conhecida que : ciclodextrina em combinação com ácido láctico e/ou ácido acético conduz a um incremento pequeno, mas significante da solubilidade da imida- zoquinolin(amina), ou um derivado desta, particularmente de imiquimod, de pelomenos 10%, mais preferivelmente de pelo menos 15% ou pelo menos cerca de 18 % comparada a solubilidade daquele agente terapeuticamente ativo em combinação com ácido láctico sozinho. Consequentemente, ciclodextrinas podem ser usadas em qualquer estágio de preparação da composição farmacêutica para intensificar a solubilidade da imidazo- — quinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida. No contexto da presente invenção, ciclodextrinas são preferivelmente compreendidas como membros de uma família de oligossacarídeos cíclicos, compostos de 5 ou mais unidades de a-D-glucopiranoside encadeadas entre as posições 1 e 4, conforme conhecido para amilose, um fragmento de amido. No contexto da presente invenção, ciclodextrinas particularmente compreendem a- ciclodextrins, que formam seis moléculas de anel de açúcar membrado, B- ciclodextrins, que formam sete moléculas de anel de açúcar, y—ciclodextrins, que formam oito moléculas de anel de açúcar, O-ciclodextrins e e- ciclodextrins. Particularmente preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção compreende a-ciclodextrins, B-ciclodextrins, e/ou y- ciclodextrins, ainda mais preferivelmente, B-ciclodextrins, tais como hidroxipropil-B-ciclodextrin (HP-B-CD). Surpreendentemente, a incorporação de HPBCD na formulação - farmacêutica da invenção aperfeiçoa a estabilidade física, alcançando uma solução homogênea clara.

í De acordo com uma concretização particularmente preferida, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, pode compreender ciclodextrinas, conforme definida acima, em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 30 % (p/v), tipicamente em uma quantidade de cerca de 1 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), preferivelmente em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 20 % (pn), mais : 20 preferivelmente em uma quantidade de cerca de 5 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), ainda mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 5 % (p/v) ' a cerca de 15 % (p/v), e, mais preferivelmente, em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 15 % (p/v), ou em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 4 % (pv), 0,1 a 2%, mais preferivelmente em uma quantidade de 0,5 a 2% ou, alternativamente, em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 4 % (p/v) a cerca de 8 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 6 % (p/v) a cerca de 10 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 8 % (p/v) a cerca de 12 % (p/N), em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 14 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 16 % (p/(y), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 18 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 16 % (p/v) a cerca de 20 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 18 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 20 % (p/v) a cerca de 24 % (py), em uma quantidade de cerca de 22 % (p/v) a cerca de 26 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 24 % (p/v) a cerca de 28 % (p/v), ou em uma quantidade de cerca de 26 % (p/v) a cerca de 30 % (p/v), no qual as quantidades conforme definidas em % (p/v) podem ou serem compreendidas para serem baseadas no peso da ciclodextrina com relação ao volume total da composição farmacêutica da invenção, ou uma solução de estoque intermediária, quando, por exemplo, provida como uma formulação líquida ou semilíquida. Alternativamente, as quantidades acima podem ser definidas em % (p/p), no qual a quantidade conforme definida em % (p/p) - pode ser ou determinada na base do peso da ciclodextrina com relação ao peso total da composição farmacêutica da invenção, ou na base de uma f solução de estoque intermediária.

De acordo com uma outra concretização particularmente preferida, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, pode compreender ciclodextrinas, conforme definidas acima, em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), por exemplo de cerca de 2,5 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 3 % (p/v) a cerca de 6 % - 20 (pv), de cerca de 3,5% (p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 4 % (pv) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), ou de cerca : de 2,5 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), cerca de 3 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cerca de 3,5 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cerca de 4 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), ou de cercade5% (py).

De acordo com outra concretização particularmente preferida, particularmente para certas formas de administração e aplicações, a composição farmacêutica de acordo com a presente invenção adicionalmente compreende pelo menos um agente termossensível. No contexto da presente invenção, o termo “agente termossensível" tipicamente se refere a um composto, preferivelmente um polímero, que é capaz de mudar seu estado de agregação ou sua viscosidade a um ponto definido de transição (transição cooperativa) de um estado líquido ou semilíquido em um estado sólido ou semi sólido, preferivelmente a um estado sólido.

Mais preferivelmente o termo “agente termossensível” tipicamente se refere a um composto, preferivelmente um(n) polímero (orgânico), que é capaz de mudar seuestado de agregação de um estado líquido ou semilíquido em um estado sólido ou semissólido (por exemplo, de um estado líquido a um estado similar a gel, ou a um estado sólido) em um ponto específico de transição (também denominado “temperatura de solução crítica inferior” (LCST) ou “temperatura de transição de gel”), no qual o ponto específico de transição é preferivelmente definido por uma temperatura de transição específica em uma faixa de cerca de 15ºC a cerca de 35ºC, mais preferivelmente em uma - faixa de cerca de 15ºC a cerca de 30ºC, ainda mais preferivelmente em uma faixa de cerca de 15 ou 20ºC a cerca de 30ºC, mais preferivelmente em uma 7 faixa de cerca de 15 ou 20ºC a cerca de 25ºC.

A “temperatura de solução crítica inferior”, de acordo com a presente invenção, é medida a pressão ambiente e depende da distribuição de massa molar do agente termos- sensível.

Preferivelmente, tal agente termossensível, conforme definido acima, permite uma formação de gel in situ do agente termossensível e qualquer composto ou composição formulada com esta, por exemplo, a : 20 composição farmacêutica da invenção na temperatura do corpo, pelo que a composição farmacêutica revelará tipicamente propriedades (semi)líquidas. i Neste contexto, uma formação de gel in situ do agente termossensível e qualquer composto ou composição formulada com este tipicamente ocorre diretamente após ou diretamente subsequente a administração da composição farmacêutica da invenção ao sítio de aflição do paciente a ser tratado, isto é, não antes da administração da composição farmacêutica da invenção.

Tal formação de gel in situ é, in particular, vantajosa para aplicações específicas, que são pretendidas para liberar imidazoquino- lin(amina), ou um derivado desta, da composição farmacêutica da invenção, conforme aqui definida, por um período prolongado de tempo.

Tais aplicações são usualmente direcionadas para colocar a formulação em uma cavidade do corpo, por exemplo, de um tecido ou órgão, tal como a bexiga, e pode, portanto, ser particularmente adequada para, por exemplo, adminis- tração vesical na terapia de doenças da bexiga. Uma vantagem particular de uma composição farmacêutica da presente invenção compreendendo agentes termossensíveis é a facilidade de sua administração devido a seleção de um ponto de transição a uma faixa de temperatura conforme definida acima. Mais especificamente, a seleção de um ponto de transição a uma faixa de temperatura conforme definido acima permite não somente preparação ou armazenagem da composição farmacêutica da invenção em um estado agregado líquido ou semislíquido. Ela também permite administração da (preferivelmente líquida) composição farmacêutica da invenção por, por exemplo, injeção, visto que a . composição farmacêutica da invenção solidifica diretamente ou suporta gelação subsequente a administração devido à temperatura aumentada do Ê tecido ou órgão circundante, que é preferivelmente mais alta do que a temperatura do ponto de transição. Consequentemente, a formação de gel é induzida dentro do tecido ou órgão. A administração, desse modo, pode ser efetuada usando métodos não invasivos (sem cirurgia), tal como uma agulha de injeção tendo uma cânula de um diâmetro adequado, um tubo de injeção, métodos endoscópicos, etc. Adicionalmente, tal formação de gel resulta em . 20 propriedades bioadesivas aumentadas da composição farmacêutica da invenção da presente invenção conduzindo a uma exposição prolongada da imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, da composição farmacêutica da invenção em células que expressam TLR7 e menos penetração de fármaco sistêmica. Conforme acima mencionado, a exposição de imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, a células que expressam TLR7 induz uma resposta imunológica exercendo o efeito terapêutico desejado.

Adicionalmente, as composições farmacêuticas da presente invenção compreendendo agentes termossensíveis evitam vantajosamente —oupelomenos reduzem significantemente os efeitos colaterais sistêmicos de imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, devido a administração local no sítio de afliãoa viscosidade aumentada in vivo da composição farmacêutica da invenção, difusão reduzida do agente biologicamente ativo aos tecidos circundantes, e, em adição, em alguns casos, também devido a propriedades bioadesivas aumentadas. Finalmente, as composições farmacêuticas da presente inven- ção compreendendo agentes termossensíveis vantajosamente permite a assim denominada “liberação prolongada” (ou às vezes denominado “liberação de longo prazo”) da imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, contido na mesma. Particularmente, a formação de gel da composição farmacêutica da invenção resulta em uma liberação de fármaco sustentada de imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, em uma cinética de ordem zero que intensifica a duração do efeito terapêutico. Tal - efeito terapêutico prolongado da imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, contido na composição farmacêutica da invenção também evita f administração repetida da composição farmacêutica da invenção, parti- cularmente em intervalos de tempo curto, que tipicamente não pode ser evitada quando se usa composições farmacêuticas sem exibição de liberação de fármaco sustentada. O efeito de depósito de uma composição farmacêutica da invenção tipicamente dura pelo menos 24 horas, mais preferivelmente 48 horas, mais preferivelmente pelo menos 7 dias, í 20 tipicamente liberando o agente ativo em quantidades aproximadamente constantes com o tempo (por exemplo, quantidades de liberação compa- ] ráveis dentro de 24 horas em, por exemplo, dia 2 e dia 8 após administração).

De acordo com uma concretização preferida, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, contém um agente termossensível, conforme aqui definido, em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/y) a cerca de 40 % (p/v), preferivelmente entre 0,1 e 5% (mais preferivelmente 0,1. e 2%) ou, alternativamente, tipicamente em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 30 % (p/v), preferivelmente em uma quantidade de cerca de 5 % (p/v) a cerca de 30 % (p/v), mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 30 % (Pp/v), e, mais preferivelmente, em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), por exemplo, em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 10 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 5 % (pfv) a cerca de 15 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 20 % (pn), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/y) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 20 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 20 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 16 % (p/v) a cerca de 20 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 19 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 18 % (p/vy), em uma - quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 17 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 16 % (py), em uma í quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 19 % (p/(vy), em uma quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 18 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 16 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 19 % (py), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 18 % (p/(y), em uma r 20 quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 17 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 16 % (pv), em uma ' quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 19 % (p/(y), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 18 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 16 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 19 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 18 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 16 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 19 % (pv), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 18 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 16 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 20 % (p/v) a cerca de 30 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 25 % (p/v) a cerca de 35 % (p/v), ou em uma — quantidade de cerca de 30 % (p/v) a cerca de 40 % (p/v), no qual as quantidades conforme definidas em % (p/v) pode ou serem compreendidas para serem dadas na base do peso do agente termossensível, conforme aqui definido, com relação ao volume total da composição farmacêutica da invenção, ou um solução de estoque intermediária, quando, por exemplo, provida como uma formulação líquida ou semiliquída. Alternativamente, as quantidades acima podem ser definidas em % (p/p), no qual a quantidade, - conforme definida em % (p/p) pode ou ser compreendida para ser baseada no peso do agente termossensível, conforme aqui definido, com relação ao í peso total da composição farmacêutica da invenção.

De acordo com outra concretização preferida da presente invenção, a composição farmacêutica compreende uma imidazoqui- nolin(amina), pelo menos um ácido orgânico selecionado de ácido acético e/ou ácido láctico, e pelo menos um agente termossensível, no qual o pelo menos um agente termossensível é preferivelmente selecionado de E 20 quitosano ou seus derivados, ou de um poli(etileno óxido)-poli(propileno óxido)-poli(etileno óxido) copolímero (também denominado PEO-PPO-PEO, ' ou poloxâmero). De acordo com uma concretização preferida, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, contém como um agente termossensível um quitosano ou um derivado deste. No contexto da presente invenção, tal quitosano é preferivelmente compreendido como um polissacarídeo linear composto de B-(141)-ligado D-glucosamina (unidade desacetilada) aleatoriamente distribuída de N-acetil-D-glucosamina (unidade acetilada). Quitosano é tipicamente produzido comercialmente por deace- tilação de quitina, que é o elemento estrutural no exoesqueleto de crustá- ceos tais como caranguejos, camarões, etc. O grau de desacetilação (%DA) é tipicamente determinado por espectroscopia de RMN, no qual a % de DA em quitosanos comerciais está tipicamente na faixa 60-100 %. Quitosanos no contexto da presente invenção adicionalmente incluem derivados dos mesmos tais como trimetilquitosano, no qual o grupo amino de quitosano foi trimetilado ou derivados oligoméricos (3-6 kDa) de quitosanos.

De acordo com uma concretização preferida mais adicional, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, contém como um agente termossensível um poloxâmero. Poloxâmeros, solubili- zados em concentrações relativamente altas (> 17,5%) em água, são capazes de produzirem sistemas que são líquidos a baixa temperatura (temperatura ambiente baixa) e que formam estruturas similares a geleia, semissólidas ou sólidas, ou géis, a temperaturas elevadas. Poloxâmeros são « comercialmente disponíveis sob o nome comercial Pluronic e Lutrol (BASF AG, Ludwigshafen, Germany). Poloxâmeros estão presentes em muitos " produtos farmacêuticos comercializados como solubilizadores, tensoativo, agentes de viscosidade e de formação de geleia. Neste contexto, a composição farmacêutica da invenção preferivelmente não compreende quaisquer componentes adicionais exibindo propriedades tensoativo à parte de tais componentes termossensíveis, por exemplo, poloxâmeros, que exibem adicionalmente propriedades tensoativo.

r 20 As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção compreendendo um agente termossensível são particularmente : vantajosas. Por exemplo, aplicação intravesical das composições farma- cêuticas de acordo com a presente invenção compreendendo um agente termossensível, tais como, por exemplo, poloxâmero, evita absorção sistêmica, e, em adição, proporciona um aumento do contato local de imidazoquinolina(amina) ao urotélio. Desse modo, a adição de um agente termossensível reduz absorção sistêmica da imidazoquinolina(amina) do urotélio da bexiga com infiltração local sustentada de células imunes. Os poloxâmeros no contexto da presente invenção são tipica- mente para serem compreendidos como um poli(etileno óxido)-poli(propileno óxido)-poli(etileno óxido) copolímero, também abreviado “PEO-PPO-PEO”. Tais poloxâmeros são, portanto, copolímeros de tribloco não-iônicos compostos de uma cadeia hidrofóbica central de polioxipropileno (poli(propileno óxido)) flanqueado por duas cadeias hidrofílicas de polioxietileno (poli(etileno óxido)). O peso molecular de tais poloxâmeros é geralmente não especificamente definido e pode ser variado adequa- damente para cada proposta específica. Porque os comprimentos dos blocos de polímero podem ser customizados, uma multiplicidade de poloxâmeros pode ser provida tendo propriedades levemente diferentes. Para o termo genérico "poloxâmero", estes copolímeros são comumente denominados com a letra "P" (para poloxâmero), seguido por três dígitos, os primeiros dois dígitos x 100 dá a massa molecular aproximada do núcleo do polioxipropileno, e o último dígito x 10 dá a percentagem do teor de . polioxietileno (por exemplo, P407 = Poloxâmero com uma massa molecular de polioxipropileno de 4.000 g/mol e 70% de teor de polioxietileno). Para o f nome comercial Pluronic/Lutrol, a codificação dos mesmos copolímeros começa com uma letra para definir sua forma física à temperatura ambiente (L = líquido, P = pasta, F = floco (sólido)), seguido por dois ou três dígitos. O primeiro dígito (dois dígitos em um número de três dígitos) na designação numérica, multiplicado por 300, indica o peso molecular aproximado do hidrófobo; e o último dígito x 10 dá a percentagem de teor de polioxietileno . 20 (por exemplo, L61 = Pluronic com uma massa molecular de polioxipropileno de 1.800 g/mol e 10% de teor de polioxietileno). No exemplo dado, ' poloxâmero 181 (P181) = Pluronic L61.

Poloxâmeros adequados para a composição farmacêutica da invenção como um agente termossensível preferivelmente compreendem qualquer polifetleno óxido)-poli(propileno óxido)-polifetileno óxido) copolímero, ou mistura de tais copolímeros adequados para a proposta da invenção, isto é, qualquer polimero PEO-PPO-PEO ou mistura de tais copolímeros exibindo propriedades termossensíveis conforme definido acima. Tais polímeros PEO-PPO-PEO incluem também polímeros PEO- PPO-PEO comercialmente disponíveis e misturas dos mesmos, por exemplo, Pluronic F 108 Cast Solid Surfacta; Pluronic F 108 Pastille; Pluronic F 108 Prill; Pluronic F 108NF Prill (Poloxamer 338); Pluronic F 127;

Pluronic F 127 Prill; Pluronic F 127 NF; Pluronic F 127 NF 500 BHT Prill; Pluronic F 127 NF Prill (Poloxamer 407); Pluronic F 38; Pluronic F 38 Pastille; Pluronic F 68; Pluronic F 68 Pastille; Pluronic F 68 LF Pastille; Pluronic F 68 NF Prill (Poloxamer 188); Pluronic F 68 Prill; Pluronic F 77; — PluronicF 77 Micropastille; Pluronic F 87; Pluronic F 87 NF Prill (Poloxamer 237); Pluronic F 87 Prill; Pluronic F 88 Pastille; Pluronic F 88 Prill; Pluronic F 98; Pluronic F 98 Prill; Pluronic L 10; Pluronic L 101; Pluronic L 121; Pluronic L 31; Pluronic L 35; Pluronic L 43; Pluronic L 44; Pluronic L 44 NF (Poloxamer 124); Pluronic L 61; Pluronic L 62; Pluronic L 62 LF; Pluronic L 62D; Pluronic L 64; Pluronic L 81; Pluronic L 92; Pluronic L44 NF INH surfactant (Poloxamer 124); Pluronic N 3; Pluronic P 103; Pluronic P 104; : Pluronic P 105; Pluronic P 123 Surfactant; Pluronic P 65; Pluronic P 84; Pluronic P 85; e Poloxamer 403. Tais polímeros PEO-PPO-PEO incluem í adicionalmente misturas formadas por qualquer dois ou mais (3, 4, 5, 6, etc.) dosmesmos polímeros PEO-PPO-PEO.

Mais — preferivelmente, —poloxâmeros adequados para a composição farmacêutica da invenção como um agente termossensível incluem poloxâmeros ou misturas dos mesmos, os poloxâmeros selecionados de Poloxâmero 124, Poloxâmero 188, Poloxâmero 237, ' 20 —Poloxâmero 338, Poloxâmero 403, e Poloxâmero 407. Desse modo, usando- se o poloxâmero que codifica etiquetas de BASF, poloxâmeros adequados são selecionado de Pluronic/Lutrol F 44 (poloxâmero 124), Pluronic/Lutrol F 68 (poloxâmero 188), Pluronic/Lutrol F 87 (poloxâmero 237), Pluronic/Lutrol F 108 (poloxâmero 338), Pluronic/Lutrol F 123 (poloxâmero 403), —Pluronic/LutrolF 127 (poloxâmero 407).

Ainda mais preferivelmente, poloxâmeros adequados para a composição farmacêutica da invenção como um agente termossensível incluem poloxâmeros ou misturas dos mesmos, os poloxâmeros selecionados de Poloxâmero 188, Poloxâmero 403, e Poloxâmero 407.

Entre os polímeros PEO-PPO-PEO diferentes adequados para a composição farmacêutica da invenção como um agente termossensível, Poloxâmero 407 é mais preferivelmente selecionado e representa o primeiro polímero de escolha para a produção dos géis termor-responsivos dentro do contexto da presente invenção.

Poloxâmero 407 como um agente termos- sensível pode ser usado ou sozinho ou em mistura com outros poloxâmeros conforme descritos acima, preferiveimente com Poloxímero 188, para produzir uma mistura de agente termossensíveis, agentes que “formam geleia" a uma temperatura selecionada, preferivelmente temperatura ambi- ente levemente acima (> 20ºC), mas abaixo da temperatura corpórea (<

37ºC). De acordo com uma concretização particularmente preferida, a composição farmacêutica da invenção compreende como um agente termossensível Poloxâmero 407 em uma quantidade conforme definido - acima em geral para agentes termossensíveis, mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 0,1, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 % (p/v) a cerca de à 30 % (p/v), ainda mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 5 % (p/v) acerca de 25 % (pN), e, mais preferivelmente, em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), por exemplo, em uma quantidade de cerca de 0,1, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9 ou 10 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 10,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 11 % (p/v) a cerca de 25 % (pn), em uma ' 20 quantidade de cerca de 11,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 12,5 % (p/y) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 25 % (pv), em uma quantidade de cerca de 13,5 % (p/v) a cerca de 25 % (phy), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 14,5 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 25 % (pN), em uma quantidade de cerca de 15,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 16 % (p/v) a cerca de 25 % (phy), em uma — quantidade de cerca de 16,5 % (p/vy) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 17 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 17,5 % (p/y) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 18 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 18,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/fy), em uma quantidade de cerca de 19 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 19,5% (p/v) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 20 % (p/fv) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 20,5 % (p/y) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 21 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 21.5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 22 % (p/v) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 22,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 23 % (p/v) a cerca de 25 % (p/vy), em uma - quantidade de cerca de 23,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 24 % (p/v) a cerca de 25 % (p/y), ou em uma " quantidade de cerca de 24,5 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 25 % (p/vy),) em uma quantidade de cerca de 16 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma s 20 quantidade de cerca de 17 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 18 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma : quantidade de cerca de 19 % (p/v) a cerca de 25 % (py), em uma quantidade de cerca de 20 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v)) em uma quantidade de cerca de 21 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v),) em uma quantidade de cerca de 22 % (py) a cerca de 25 % (p/v),) em uma quantidade de cerca de 23 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 24 % (pv) a cerca de 25 % (pv), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 22 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 19 % (py), em uma quantidade de cerca de 12 % (py) a cerca de 18 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 12 % (py) a cerca de 17 % (p/vy), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 16 % (p/v), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 24 % (pv), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 20 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (py) a cerca de 19 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 18 % (p/y), em uma - quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 16 % (p/y), ou, mais ' particularmente, em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 24 % (pm), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 19 % (pv), em uma 5 20 quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 18 % (pv), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 17 % (p/v), em uma i quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 16 % (py), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/y) a cerca de 22 % (pv), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 20 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 19 % (pv), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 18 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 16 % (py), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 24 % (p/v) a cerca de 25 %

(Pp/v), no qual as quantidades conforme definidas em % (p/v) podem ou serem compreendidas para serem baseadas no peso do agente termossensível conforme aqui definido com relação ao volume total da composição farmacêutica da invenção, ou uma solução de estoque intermediária, quando, por exemplo, providas como uma formulação líquida ou semilíquida. Alternativamente, as quantidades acima podem ser definidas em % (p/p), no qual a quantidade conforme definida em % (p/p) pode ou ser compreendida para ser baseada no peso do agente termossensível conforme aqui definido com relação ao peso total da composição farmacêutica da invenção.

De acordo com uma concretização preferida adicional, a - composição farmacêutica da invenção pode compreender como um agente termossensível qualquer dos poloxâmeros conforme definidos acima, ' preferivelmente qualquer dos poloxâmeros selecionados de Poloxâmero 124, Poloxâmero 188, Poloxâmero 237, Poloxâmero 338, e Poloxâmero 403. Tais poloxâmeros estão preferivelmente presentes na composição farmacêutica da invenção como um agente termossensível em quantidades conforme descritas acima para agentes termossensíveis em geral, ou mais especificamente, conforme descrita acima para Poloxâmero 407. : 20 De acordo com uma concretização particularmente preferida, a composição farmacêutica da invenção pode também compreender como um ' agente termossensível uma mistura de qualquer dos agentes termos- sensíveis conforme definidos acima. Tal mistura de agentes termossensíveis preferivelmente compreende uma quantidade total do agente termossensível de tal mistura similar conforme descrito acima em geral para agentes termossensíveis, ou mais especificamente conforme descrito acima para Poloxâmero 407. Adicionalmente, tal mistura de agentes termossensíveis preferivelmente compreende uma proporção dos poloxâmeros diferentes, que conduz a uma mistura de agentes termossensíveis que “gelifica” a uma temperatura desejada, preferivelmente a uma faixa de temperatura conforme definida acima. Neste contexto, a proporção e/ou a quantidade de poloxâmeros diferentes na mistura pode influenciar a “Temperatura de solução crítica inferior” (LCST) e, desse modo, a temperatura de transição de gel.

Por exemplo, foi verificado que a diminuição da percentagem de Poloxâmero 407 em uma mistura com Poloxâmero 188 resulta em um aumento da LCST.

Adicionalmente, a quantidade e/ou proporção dos poloxâmeros diferentes na mistura é preferivelmente selecionada com relação à solubilidade do fármaco.

Preferivelmente, qualquer de dois dos agentes termossensíveis conforme definido acima, particularmente quando provido em uma quantidade conforme definida acima, podem estar contidos na composição farmacêutica da invenção como uma mistura em uma proporção de cerca de 1: 20 a cerca de 20:1, preferivelmente em uma proporção de cerca de 1:20, 2:20, 3:30, 4:20, 5:20, 6:20, 7:20, 8:20, 9:20, : 10:20, 11:20, 12:20, 13:20, 14:20, 15:20, 16:20, 17:20, 18:20, 19:20, 20: 20 (= 1:1), ou em uma proporção de cerca de 20: 20, 19: 20, 18: 20, 17: 20, 16: ' 20, 15: 20, 14: 20, 13: 20, 12: 20, 11: 20, 10: 20, 9: 20, 8: 20,7: 20,6: 20, 5: 20,4;:20,3:20,2:20, ou cerca de 1: 20, ou em uma proporção de cerca de 1:20, 1:19, 2:18:, 3:17, 4:16, 5:15, 6:14, 7:13, 8:12, 9:11, 10:10 (1:1), 11:9, 12:8, 13:7, 14:6, 15:5, 16:4, 17:3, 18:2, 19:1 ou 20:1, ou em uma faixa formada por qualquer de dois dos valores de proporção conforme definidos acima.

Ainda mais preferivelmente, qualquer de dois dos agentes termos- ' 20 sensíveis conforme definidos acima, particularmente quando providos em uma quantidade conforme definida acima, podem estar contidos na ] composição farmacêutica da invenção como uma mistura em uma faixa de cerca de 1:10 a cerca de 10:1, por exemplo, em uma proporção de cerca de 1:10, 2:10, 3:10, 4:10, 5:10, 6:10, 7:10, 8:10, 9:10, ou 10:10 (isto é, 1:1), ou em uma proporção de cerca de 10: 9, 10: 8, 10:7, 10:6, 10:5, 10:4, 10:3, 10:2, ou 10:1, ou em uma faixa formada por qualquer de dois dos valores de proporção conforme definidos acima.

Ainda mais preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção pode compreender como um agente termossensível uma mistura de Poloxâmero 407 e qualquer dos poloxâmeros acima descritos, ainda mais preferivelmente “selecionados de Poloxâmero 124, Poloxâmero 188, Poloxâmero 237, Poloxâmero 338, e Poloxâmero 403. Do mesmo modo, tal mistura de agentes termossensíveis preferiveemente compreende uma quantidade total dos agentes termossensíveis da mistura similar conforme descrito acima em geral para agentes termossensíveis, ou mais especificamente conforme descrito acima, para Poloxâmero 407.

De acordo com uma concretização particularmente preferida, a composição farmacêutica da invenção pode compreender como um agente termossensível uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188. Preferivelmente, tal mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 está contida na composição farmacêutica da invenção em uma quantidade total conforme descrita acima em geral para agentes termossensíveis, ou mais especificamente — conforme descrito acima, para Poloxâmero 407. - Preferivelmente, tal mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 também ocorre na composição farmacêutica da invenção em uma proporção ! conforme descrita acima em geral para misturas de polioxâmeros usados como um agente termossensível na composição farmacêutica da invenção. Ainda mais preferivelmente, tal proporção é selecionada de uma proporção de Poloxâmero 407: Poloxâmero 188 de cerca de 1:20, 1:19, 2:18:, 3:17, 4:16, 5:15, 6:14, 7:13, 8:12, 9:11, 10:10 (1:1), 11:9, 12:8, 13:7, 14:65, 15:5, 16:4, 17:3, 18:2, 19:1 ou 20:1, ou uma proporção formada por qualquer de ' 20 dois dos valores conforme definidos acima. Mais preferivelmente, tal proporção é selecionada de uma proporção de Poloxâmero 407 : ' Poloxâmero 188 de cerca de 7:3, 7.5:2.5, 8:2, 8.5:1.5, 9:1, ou 9.5:0.5, ou uma proporção formada por qualquer de dois dos mesmos valores. Consequentemente, o teor absoluto de Poloxâmero 188 e de Poloxâmero 407 nacomposição farmacêutica da invenção pode ser determinado na base da quantidade total e na proporção específica de ambos poloxâmeros na composição farmacêutica da invenção. De acordo com uma concretização específica, a composição farmacêutica da invenção pode compreender como um agente termossensível Poloxâmero 407 em uma quantidade (total) de cerca de 17,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), mais preferivelmente em uma quantidade total de cerca de 17,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 18,0 %

(p/v)/(p/p), de cerca de 18,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 19,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 20,0 % (p/vY/(p/p), de cerca de 20,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 21,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 21,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 22,0 % (p/v)/(p/p), ou de cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), ou em uma quantidade (total) de cerca de 10 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), mais preferivelmente em uma quantidade total de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (P/v)/(p/p), de cerca de 13 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 14,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 16,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5% - (p/v)/(p/p), ou de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 13 % ' (P/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 14,0 % (p/v)/(p/p) a cercade20,0% (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 16,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 20,0 % (p/v)/(p/p), ou de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 13 % (p/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % " 20 (p/v)l((p/p), de cerca de 14,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,5 % (Pp/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 16,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 19,0 % (p/v)/(p/p), ou de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), de cercade 13% (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 14,0 % (P/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/vY/(p/p), de cerca de 15,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 16,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 18,0 % (p/v)/(p/p), ou de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v)/(p/p)acercade 17,0% (p/v)/(p/p), de cerca de 13 % (p/vW/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 14,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), de cerca de 16,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 17,0 % (p/v)/(p/p), ou de cerca de 11 % (p/v)/(p/p) a cerca de 16,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 12,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 16,5 % (P/v)/(p/p), de cerca de 13 % (p/v)/(p/p) a cerca de 16,5 % (p/v)/(p/p), de cercade 14,0% (p/v)/(p/p) a cerca de 16,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 16,5 % (p/v)/(p/p), de cerca de 15,5 % (p/vY/(p/p) a cerca de 16,5 % (p/v)/(p/p). (O termo (p/v)/(p/p) significa ou (p/v) ou (p/p)), ou qualquer faixa formada por qualquer de dois dos mesmos valores conforme definido acima.

De acordo com uma concretização adicional específica, a composição farmacêutica da invenção pode compreender como um agente - termossensível uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 em uma quantidade total de cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 27,5 % (p/v)/(p/p), " mais preferivelmente em uma quantidade total de cerca de 25 % (p/v)/(p/p), e preferivelmente em uma proporção de Poloxâmero 407 : Poloxâmero 188 de cerca de 15:5, 16:4, 17:3, 18:2, 19:1 ou 20:1, ou uma proporção formada por qualquer de dois dos mesmos valores, mais preferivelmente em uma proporção de cerca de 9,5:0,5, de cerca de 9:1, de cerca de 8,5:1,5, ou de cerca de 8:2, ou uma proporção formada por qualquer de dois dos mesmos " 20 valores. Consequentemente, quando a composição farmacêutica da invenção compreende uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188, Poloxâmero 407 pode estar presente na composição farmacêutica da invenção em uma quantidade de cerca de 15,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 26,5 % (p/v)/(p/p), preferiveimente em uma quantidade de cerca de 17,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 22,5 % (p/v)/(p/p), pelo que o Poloxâmero 188 pode estar presente na composição farmacêutica em uma quantidade de cerca de 1,0 % (p/v)/(p/p) a cerca de 6,0 % (p/v)/(p/p), preferivelmente em uma quantidade de cerca de 2,5 % (p/v)/(p/p) a cerca de 4,5 % (p/v)/(p/p). (O termo (p/v)/(p/p) significa ou (p/v) ou (p/p)). A composição farmacêutica da invenção pode adicionalmente compreender aditivos ou componentes adicionais, tais como, por exemplo, ciclodextrina, conforme definido acima. Neste contexto, o teor de aditivos,

particularmente ciclodextrina, pode ter uma influência na acima definida assim denominada “temperatura de solução crítica inferior” (LCST) ou “temperatura de transição do gel”. Como um exemplo particular, o aumento das percentagens de ciclodextrina resulta em um aumento da LCST de Poloxâmero 407 ou uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 conforme definido acima. Isto pode ser adequado para ser aplicado a outros poloxâmeros conforme definido acima e a outros agentes termossensíveis conforme aqui definido.

Do mesmo modo, a LCST das composições farmacêuticas da presente invenção é diferentemente influenciada por ácido acético e ácido láctico. Ambos os ácidos geralmente aumentam a LCST das composições. - Contudo, enquanto, por exemplo, imiquimod não influencia no todo a temperatura de transição de gel das composições farmacêuticas da Í invenção compreendendo somente ácido acético, a LCST das composições compreendendo ácido láctico é aumentada. Desse modo, a percentagem final de agentes termossensíveis, conforme aqui definida, pode depender do ácido usado e se ciclodextrina está presente ou não. De acordo com uma concretização adicional, a composição farmacêutica de acordo com a invenção pode adicionalmente compreender ' 20 um transportador e/ou veículo farmaceuticamente aceitável. No contexto da presente invenção, um transportador farmaceuticamente aceitável ' tipicamente inclui uma base líquida da composição farmacêutica da invenção, por exemplo, água livre de pirogênio; a solução de água livre pode ser combinada em qualquer proporção apropriada com um solvente orgânico farmaceuticamente aceitável miscível em água, por exemplo, um álcool (por exemplo, etanol ou isipropanol); o seguinte pode também ser usado: soluções salinas isotônicas ou soluções tamponadas (aquosas), por exemplo, fosfato, citrato, etc., soluções tamponadas, uma solução tampo- nada aquosa, contendo, por exemplo, um sal de sódio, preferivelmente pelo menos 50 mM de um sal de sódio, um sal de cálcio, preferivelmente pelo menos 0,01 mM de um sal de cálcio, e/ou um sal de potássio, preferivelmente pelo menos 3 mM de um sal de potássio. De acordo com uma concretização preferida, os sais de sódio, cálcio e/ou potássio podem ocorrer na forma de seus halogenetos, por exemplo, cloretos, iodetos, ou brometos, na forma de seus hidróxidos, carbonatos, carbonatos de hidrogênio, ou sulfatos, etc. Sem estar limitado a estes, exemplos de sais de sódio incluem, por exemplo, NaCl, Nal, NaBr, Na2CO3, NaHCO;3, Na>sSO,, exemplos dos sais de potássio opcionais incluem, por exemplo, KCl, KI, KBr, K2CO3, KHCO:3, K2SO,, e exemplos de sais de cálcio incluem, por exemplo, CaChk, Cal, CaBrs, CaCO3z, CaSO,, Ca(OH)>z. Adicionalmente, ânions orgânicos dos cátions antes mencionados podem estar contidos na composição da invenção. De acordo com uma concretização mais preferida, a composição da invenção adequada para proposta de injeção conforme - definida acima, pode conter sais selecionados de cloreto de sódio (NaCl), cloreto de cálcio (CaCl») e, opcionalmente, cloreto de potássio (KCI), no qual Í adicionalmente ânions podem estar presentes adicionais aos cloretos. CaCl, pode também ser substituído por outro sal similar a KCl. A composição da invenção pode ser hipertônica, isotônica ou hipotônica com referência ao meio de referência específico, isto é, a composição da invenção pode ter um conteúdo de sal mais alto, idêntico ou mais baixo com referência ao meio de referência específico, no qual preferivelmente tais concentrações dos sais í 20 antes mencionados podem ser usadas, que não conduzem a dano das células devido a osmose ou outros efeitos de concentração. Os meios de : referência são, por exemplo, líquidos que ocorrem em métodos “in vivo”, tais como sangue, linfa, líquidos citosólicos, ou outros líquidos corpóreos, ou, por exemplo, líquidos que podem ser usados como meio de referência em métodos “in vitro”, tais como tampões comuns ou líquidos. Tais tampões comuns ou líquidos são conhecidos a um técnico no assunto.

Contudo, uma ou mais cargas sólidas ou líquidas compatíveis ou diluentes ou compostos de encapsulamento podem ser usados, bem como para a composição farmacêutica da invenção, que são adequados para administração a um paciente a ser tratado. O termo "compatível" conforme aqui usado significa que estes constituintes da composição farmacêutica da invenção são capazes de serem misturados com as imidazoquinolin(aminas)

ou derivados dos mesmos, conforme definidas de acordo com a presente invenção de tal maneira que nenhuma interação ocorra que reduziria substancialmente a eficiência farmacêutica da composição farmacêutica da invenção sob condições típicas de uso. Veículos farmaceuticamente aceitáveis, cargas e diluentes devem, naturalmente, terem pureza suficientemente alta e toxicidade suficientemente baixa para torná-las adequadas para administração a uma pessoa a ser tratada. Alguns exemplos de compostos que podem ser usados como veículos farmaceuticamente aceitáveis, cargas ou constituintes dos mesmos são açúcares, tais como, por exemplo, lactose, glicose e sucrose; amidos, tais como, por exemplo, amido de milho ou amido de batata; celulose e seus - derivados, tais como, por exemplo, sódio carboximetilcelulose, etilcelulose, acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; sebo; deslizantes f sólidos, tais como, por exemplo, ácido esteárico, estearato de magnésio; sulfato de cálcio; óleos vegetais, tais como, por exemplo, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de teobroma; polióis, tais como, por exemplo, polipropileno glicol, glicerol, sorbitol, manitol e polietileno glicol; ácido algínico.

Adicionalmente, aditivos que podem ser incluídos na ' 20 composição farmacêutica da invenção são emulsificantes, tal como, por exemplo, Tweenº; agentes de umedecimento, tais como, por exemplo, lauril sulfato de sódio; agentes de coloração; agentes de concedimento de sabor, veículos — farmacêuticos; agentes de formação de comprimido; estabilizadores; antioxidantes; conservantes. ' De acordo com outra concretização, a composição farmacêutica da invenção pode compreender um adjuvante. Neste contexto, um adjuvante pode ser compreendido como qualquer composto que seja adequado para iniciar ou aumentar uma resposta imune do sistema imune inato, isto é, uma resposta imune não-específica. Em outras palavras, quando administrada, a composição farmacêutica da invenção tipicamente induz uma resposta imune inata devido ao adjuvante, opcionalmente contido na mesma. Tal adjuvante pode ser selecionado de qualquer adjuvante conhecido a um técnico no assunto e adequado para o presente caso, isto é, suportando a indução de uma resposta imune inata em um mamífero.

Preferivelmente, o adjuvante pode ser selecionado do grupo consistindo em, sem ser limitado a estes, qualquer dos seguintes incluindo quitosano, TOM, MDP, muramil dipeptídeo, pluronics, solução de alume, hidróxido de alumínio, ADJUMERºTY (polifosfazeno); gel de fosfato de alumínio; glucanos de algas; algammulin; gel de hidróxido de alumínio (alum); gel de hidróxido de alumínio de alta adsorção de proteína; gel de hidróxido de alumínio de baixa viscosidade; AF ou SPT (emulsão de esqualeno (5%), Tween 80 (0,2%), —Pluronic L121 (1,25%), salina tamponada por fosfato, pH 7,4); AVRIDINE"Y (propanodiamina); BAY R1005"" ((N-(2-deóxi-2-L-leucilamino-b-D-glucopi- - ranosil)-N-octadecil-dodecanoil-amida — hidroacetato)) CALCITRIOLº (1- alfa ,25-di-hidróxi-vitamina D3); gel de fosfato de cálcio; CAPTM í (nanopartículas de fosfato de cálcio); halotoxina de cólera, toxina de cólera- Al-proteína-A-D-fragmento proteína de fusão, subunidade B da toxina de cólera; CRL 1005 (copolímero de bloco P1205); lipossomas contendo citocina; DDA (brometo dimetildioctadecilamônia); DHEA (dehidroepiandros- terona); DMPC (dimiristoilfosfatidilcolina); DMPG (dimiristoilfosfatidilglicero!); DOC/complexo de alume (ácido deoxicólico sal de sódio); adjuvante ' 20 completo de Freund; adjuvante incompleto de Freund; gama inulina; adjuvante de Gerbu (mistura de: i) N-acetilglucosaminil-(P1-4)-N- | acetilmuramil-L-alanil-D-glutamina (GMDP), ii) cloreto dimetildioctadecilamô- nio (DDA), iii) complexo de sal de zinco-L-prolina (ZnPro-8); GM-CSF); GMDP (N-acetilglucosaminil-(b1-4)-N-acetilmuramil-L-alanil-D-isoglutamina); ImmTherº (N-acetilglucosaminil-N-acetilmuramil-L-Ala-D-isoGlu-L-Ala-glice- rol dipalmitato)) DRVs (imunolipossomos preparados de vesículas de desidratação-re-hidratação); interferon-gama; interleucina-1beta; interleuci- na-2; interleucina-7; interleucina-12; ISCOMS º%; ISCOPREP 7.0.3. *; lipossomos; LOXORIBINES (7-alil-B-oxoguanosina); adjuvante oral LT (E.coli instável enterotoxin-protoxin); microesferas e micropartículas de qualquer composição; MF59º; (emulsão de esqualeno-água); MONTANIDE ISA 51º (adjuvante de Freund incompleto purificado); MONTANIDE ISA 720º

(adjuvante de óleo metabolizável); MPLº (3-Q-desacil-4'-monofosforil lipídeo A); MTP-PE e MTP-PE lipossomos ((N-acetil-L-alanil-D-isoglutaminil-L- alanina-2-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-(hidroxifosforitóxi))-etilamida, sal de monosódio); MURAMETIDE? (Nac-Mur-L-Ala-D-Gln-OCH;3); —MURAPALMITINE? e D-MURAPALMITINE? (Nac-Mur-L-Thr-D-isoGln-sn- gliceroldipalmitoil); NAGO (neuraminidase-galactose oxidase); nano esferas ou nanopartículas de qualquer composição; NISVs (vesículas de surfactante não-iônico); PLEURANº (g-glucan;: PLGA, PGA e PLA (homo- e copolímeros de ácido láctico e ácido glicólico; microesferas/nano esferas); PLURONIC L121º; PMMA (metacrilato de polimetila); PODDSº (microes- feras proteinoides); derivados de carbamato de polietileno; poli-rA: poli-rU - (complexo de ácido poliadenílico, ácido poliuridílico); polissorbato 80 (Tween 80); proteina coquelatos (Avanti Polar Lipids, Inc, Alabaster, AL); Í STIMULONTY (QS-21); Quil-A (Quil-A saponina); S-28463 (4-amino-otec- dimetil-?-etoximetil-1H-imidazo[4,5-c]quinolina-1-etanol); SAF-1º ("Syntex adjuvant formulation"); Sendai proteolipossomos e matrizes de lipídeo contendo Sendai; Span-85 (trioleato de sorbitano); Specol (emulsão de Marco! 52, Span 85 e Tween 85); esqualeno ou Robaneº (2,6,10,15,19,23- hexametiltetracosano e 2,6,10,15,19,23-hexametil-2,6,10,14,18,22-tetracosa- " 20 hexano); esteariltirosina (cloridrato de octadeciltirosina ); Theramidº (N-

acetilglucosaminil-N-acetilmuramil-L-Ala-D-isoGlu-L-Ala-dipalmitoxipropila- mida); Theronil-MDP (Termurtideº ou [thr 1)-MDP; N-acetilmuramil-L-treonil- D-isoglutamina); Ty partículas (partículas similares à Ty-VLPs ou vírus); Walter-Reed lipossomos (lipossomos contendo lipídeo A adsorvidos em hidróxido de alumínio), e lipopeptídeos, incluindo Pam3Cys, em sais de alumínio particulares, tais como Adju-phos, Alhydrogel, Rehydragel; emulsões, incluindo CFA, SAF, IFA, MF59, Provax, TiterMax, Montanide, Vaxfectin; copolímeros, incluindo Optivax (CRL1005), L121, etc.; lipossomos, incluindo Stealth, cochleatos, incluindo BIORAL; adjuvantes derivados de planta, incluindo QS21, Quil A, Iscomatrix, ISCOM; adjuvantes adequados para coestimulação incluindo Tomatina, biopolímeros, incluindo PLG, PMM, Inulin; adjuvantes derivados de micróbio, incluindo Romurtide, DETOX, MPL,

CWS, Mannose, CpG sequências de ácido nucleico, CpG7909, ligantes de TLR 1-10 humano, ligantes de murino TLR 1-13, 1ISS-1018, IC31, Ampligen, Ribi529, IMOxine, IRIVs, VLPs, toxina de cólera, toxina instável ao calor, Pam3Cys, Flagellin, GPI anchor, LNFPIll/Lewis X, peptídeos antimicrobiais, UC-1IVISO, proteína de fusão de RSV, cdiGMP; e adjuvantes adequados como antagonistas incluindo CGRP neuropeptídeo.

A composição farmacêutica da invenção pode adicionalmente conter uma ou mais substâncias auxiliares de modo a aumentar adicio- nalmente seu efeito imunomodulatório. Uma ação sinergística das imidazo- quinolin(aminas) ou um derivado desta, conforme definidos de acordo com a presente invenção, e de uma substância auxiliar, que pode estar - opcionalmente contido na composição farmacêutica da invenção conforme descrita acima, é preferivelmente, desse modo, alcançada. Dependendo dos í vários tipos de substâncias auxiliares, vários mecanismos podem ser levados em consideração neste particular. Por exemplo, os compostos que permitem a maturação de células dendríticas (DCs), por exemplo, lipopolissacarídeos, TNF-alfa ou CD40 ligante, de uma primeira classe de substâncias auxiliares adequadas. Em geral, é possível usar como substância auxiliar qualquer agente que influencie o sistema imune na ' 20 maneira de um "sinal de perigo" (LPS, GP96, etc.) ou citocinas, tais como GM-CSF, que permitem que uma resposta imune produzida pelo agente | imune-estimulante de acordo com a invenção a ser intensificada e/ou influenciada em maneira objetivada. Substâncias auxiliares particularmente preferidas são citocinas, tais como monoquinas, linfoquinas, interleucinas ou —quimiocinas, que adicionalmente promovem a resposta imune inata, tais como IL-1, IL-2, I1L-3, IL-A4, I1L-5, I1L-6, IL-7, 1L-8, IL-9, 11-10, 11-12, 11-13, IL- 14, 11-15, IL-16, IL-17, 11-18, I1L-19, 11-20, 11-21, 11-22, 11-23, 11-24, 11-25, 11L- 26, 11-27, 11-28, 11-29, 11-30, 11-31, 11-32, 11-33, INF-alfa, IFN-beta, INF- gama, GM-CSF, G-CSF, M-CSF, LT-beta ou TNF-alfa, fatores de crescimento, tal como hGH.

A composição farmacêutica da invenção pode também adicionalmente ou alternativamente conter qualquer composto adicional, que é conhecido para ser imune-estimulante devido a sua afinidade de ligação (como ligantes) a receptores similares à Toll humanos TLR1, TLR2, TLR3, TLRA, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLRIO, ou devido a sua afinidade de ligação (como ligantes) a receptores similares à Toll de murino TLR1, TLR2,TLR3,TLRA,TLRS5,TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLRIO, TLRI1, TLRI2 ou TLR13.

Outra classe de compostos, que pode ser adicionada a uma composição farmacêutica da invenção neste contexto, pode ser ácidos nucleicos CpG, em particular CpG-RNA ou CpG-DNA. Um CpG-RNA ou CpG-DNA pode ser um CpG-DNA de trançado simples (ss CpG-DNA), um CpG-DNA de trançado duplo (dsDNA), um CpG-RNA de trançado simples - (ss CpG-RNA) ou um CpG-RNA de trançado duplo (ds CpG-RNA). O CpG ácido nucleico está preferiveimente na forma de CpG-RNA, mais f preferivelmente na forma de CpG-RNA de trançado simples (ss CpG-RNA).

O CpG ácido nucleico preferivelmente contém pelo menos uma ou mais sequência(s) de nucleotídeo (mitogênicas) citosina/guanina (CpG motivo(s)).

De acordo com uma primeira alternativa preferida, pelo menos um motivo de CpG contido nestas sequências, isto é, a C (citosina) e a G (guanina) do motivo CpG, é não-metilatada. Todas as citosinas ou guaninas adicionais ' 20 opcionalmente contidas nestas sequências podem ser ou metiladas ou não- metiladas. De acordo com uma alternativa preferida adicional, contudo, a C i (citosina) e a G (guanina) do motivo de CpG pode também estar presente na forma metilada.

A composição farmacêutica da invenção tipicamente compre- ende uma “quantidade segura e eficaz” dos componentes acima da composição farmacêutica da invenção, particularmente das imidazoqui- nolin(aminas) e derivados destas, conforme definidas de acordo com a presente invenção. Conforme aqui usado, uma "quantidade segura e eficaz" significa uma quantidade deste componente, particularmente das imidazoquinolin(aminas) e derivados destas, que é suficiente para induzir significantemente uma modificação positiva de uma doença ou distúrbio, conforme aqui definido. Ao mesmo tempo, contudo, uma "quantidade segura e eficaz" é pequena o bastante para evitar sérios efeitos colaterais, isto é, para permitir um relacionamento sensível entre vantagem e risco. A determinação dos mesmos limites tipicamente assenta dentro do escopo do julgamento médico sensível. Uma "quantidade segura e efetiva" dos componentes da composição farmacêutica da invenção, particularmente das imidazoquinolin(aminas) e derivados destas, variará adicionalmente em conjunto com a condição particular a ser tratada e também com a idade condição física do paciente a ser tratado, do peso corpóreo, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de excreção, combinação de fármaco, sua atividade, a severidade da condição, a duração do tratamento, a natureza da terapia acompanhante, do transportador farmaceuticamente - aceitável particular usado, e fatores similares, dentro do conhecimento e experiência do médico acompanhante. A composição farmacêutica da í invenção pode ser usada para humano e também para propostas médicas veterinárias, preferivelmente para propostas médicas humanas.

Sem estar ligada a estas, em algumas concretizações, a composição farmacêutica da invenção conterá ou liberará imidazoqui- nolin(amina) suficiente ativa ou um derivado desta para proporcionar uma dose de cerca de 10, 20, 50, ou 100 nano gramas por quilograma (ng/kg) a ' 20 cercade 50 miligramas por quilograma (mg/Kg), preferivelmente cerca de 10 microgramas por quilograma (ug/Kkg) à cerca de 5 mg/kg, do composto ou um | sal deste ao indivíduo. Em outras concretizações, a composição farmacêutica da invenção conterá ou liberará imidazoquinolin(amina) ativa suficiente ou um derivado desta para proporcionar uma dose de, por exemplo, de cerca de 0,0001, 0,001, 0,01 ou 0,01 mg/m? a cerca de 5,0 mg/m?, computada de acordo com o método de Dubois, em que a área superficial corpórea de um indivíduo (m?) é computada usando-se o peso corpóreo do indivíduo: m? = (peso kg? x altura cm?) x 0,007184, embora em algumas concretizações os métodos podem ser realizados por administração de um composto ou sal ou composição em uma dose fora desta faixa. Em algumas destas concretizações, o método inclui administrar imidazoquinolin(amina) suficiente ou um derivado desta para proporcionar uma dose de cerca de 0,0001, 0,001, 0,01, ou 0,1 mg/m? a cerca de 2,0 mg/ m? ao indivíduo, por exemplo, uma dose de cerca de 0,004, 0,04, ou 0,4 mg/m? a cerca de 1,2 mg/m?. A composição farmacêutica da invenção pode ser administrada localmente.

Rotas para administração local em geral incluem, por exemplo, rotas de administração tópica, mas também injeções intravesicais, intradermais, — transdermais, — subcutâneas ou intramusculares — ou intralesionais, intracraniais, intrapulmonares, intracardíacas, e injeções sublinguais.

Mais preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção pode ser administrada por uma rota intravesical.

A quantidade adequada da composição farmacêutica da invenção a ser administrada pode ser - determinada por experimentos de rotina com modelos animais.

Tais modelos incluem, sem implicar em qualquer limitação, coelho, carneiro, camundongo, í rato, cão e modelos de primata não-humano.

Formas de dose unitária preferidas para injeção incluem soluções estéreis de água, salina fisiológica ou misturas destas.

As seguintes concretizações são especificamente composições preferidas da invenção sendo restritas a componentes específicos.

Preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção, con- ' 20 forme definida acima, compreende pelo menos uma imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, e pelo menos um ácido orgânico conforme definido acima selecionado de ácido láctico e/ou ácido acético - preferivelmente em tal concentração que seu pH final é de pH 3 a 5, preferivelmente 3,5 a 4.5. Desse modo, os componentes da composição da invenção formam as estruturas de aduto da invenção.

A composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, compreende preferi- velmente pelo menos uma imidazoquinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, e pelo menos um ácido orgânico conforme definido acima selecionado de ácido láctico e/ou ácido acético, contudo contendo não —maisdoque4,3,2,1,oumais preferivelmente, nenhum ácido orgânico e/ou inorgânico adicional, conforme aqui definido, ou, alternativamente, menos do que 2 ácidos orgânicos e nenhum ácido inorgânico adicional ou, ainda alternativamente, apenas um ácido orgânico adicional e nenhum ácido inorgânico.

Preferiveimente, a composição farmacêutica da invenção, conforme definida acima, compreende pelo menos uma imidazo- quinolin(amina), ou um derivado desta, conforme aqui definida, e pelo menos um ácido orgânico conforme definido acima selecionado de ácido láctico e/ou ácido acético, e menos do que 4, ou 3 agentes termossensíveis ou, mais preferivelmente, apenas um agente termossensível. Alternativamente, a composição da invenção pode também compreender nenhum agente termossensível. A combinação de um número restrito de agentes termossensíveis na composição farmacêutica da invenção e um número - restrito de ácidos conforme definido acima são também providos.

Consequentemente, a composição farmacêutica da invenção conforme Í definida acima pode compreender, por exemplo, pelo menos uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado desta conforme aqui definida e pelo menos um ácido orgânico conforme definido acima selecionado de ácido láctico e/ou ácido acético, e menos do que 4, 3, 2, ou 1 ácidos orgânicos e/ou inorgânicos adicionais conforme aqui definida, e menos do que 4, 3, ou 2 agentes termossensíveis, preferivelmente todos eles pertencentes à classe , 20 de pluronics, mais preferivelmente aqueles compostos pluronic que são definidos como sendo preferidos aqui.

Preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção pode compreender nenhum surfactante à parte dos agentes termossensíveis (se houver), que podem ter propriedades tensoativo adicionais. Conse- quentemente, a composição da invenção pode compreender também ne- nhum surfactante e nenhum agente termossensível.

Preferivelmente, a composição farmacêutica da invenção pode conter menos do que 4, 3, ou 2 ciclodextrinaas ou, alternativamente, nenhuma ciclodextrinaa no todo. Estas concretizações podem ser combi- nadas com as concretizações acima preferidas. Consequentemente, a composição da invenção pode, por exemplo, não conter agente termos- sensível, nem ciclodextrina e nem tensoativo. Em adição, a composição da invenção pode não conter intensificador de solubilidade adicional, ser ela um surfactante, uma ciclodextrina ou ser ela outro composto de intensificação de solubilidade, à parte do ácido láctico e/ou ácido acético.

Preferivelmente, a composição da invenção compreende pelo menos um composto de imidaziquinolin(amina), ácido acético e/ou ácido láctico e 1, 2 ou nenhum agente(s) termossensível e nenhum composto de intensificação de solubilidade adicional e nenhum ingrediente terapeutica- mente ativo adicional e nenhuma celulose ou derivado de celulose.

Nesta concretização, a composição da invenção pode exclusivamente conter adicionalmente um ou mais dos seguintes componentes padrões pertencentes à classe de estabilizadores e conservantes. - De acordo com uma concretização específica, a composição farmacêutica da invenção compreende ácido acético e/ou ácido láctico em f uma concentração de cerca de 0,025 a cerca de 02 M, imidazoquinolin(amina) em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v), ciclodextrina(s) em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v) e Poloxâmero 407 em uma quantidade de cerca de 10 % (p/v) a cerca de 25 % (p/v), preferivelmente a composição farmacêutica da invenção compreende ácido acético e/ou ácido láctico em uma concentração , 20 de cerca de 0,075 a cerca de 0,125 M, por exemplo, de cerca de 0,08 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,085 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,09 i M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,125 M, de cerca de 0,1 M a cerca de 0,125 M, ou de cerca de 0,075 M a cerca de 0,120 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,115 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,110 M,decercade 0,075M a cerca de 0,105 M, de cerca de 0,075 M a cerca de 0,105 M ou de cerca de 0,08 M a cerca de 0,120 M, por exemplo de cerca de 0,085 M a cerca de 0,115 M, de cerca de 0,09 M a cerca de 0,110 M, de cerca de 0,095 M a cerca de 0,105 M, ou de cerca de 0,1 M, imidazoquinolin(amina) em uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de1%(p/v), por exemplo, em uma quantidade de cerca de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 ou 1,0 (p/v), ciclodextrina(s) em uma quantidade de cerca de 2 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), por exemplo, de cerca de 2,5 %

(p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 3 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 3,5 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 4 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 6 % (p/v), ou de cerca de 2,5 % (Pp/v) a cerca de 5,5 % (p/v), cerca de 3 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cercade3,5% (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cerca de 4 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), de cerca de 4,5 % (p/v) a cerca de 5,5 % (p/v), ou de cerca de 5 % (p/v), e Poloxâmero 407 em uma quantidade de cerca de 12 % (py) a cerca de 25 % (p/v), por exemplo, em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (pv) a cercade 23% (p/vy), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 21 % - (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 19 % (p/y), em uma : quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 18 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 12 % (p/vy) a cerca de 16 % (p/v), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma ' 20 quantidade de cerca de 13 % (pv) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (pv) a cerca de 20 % (py), em uma | quantidade de cerca de 13 % (py) a cerca de 19 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (py) a cerca de 18 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 13 % (pv) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 13 % (p/v) a cerca de 16 % (p/v), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 22 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 21 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (pv) a cerca de 20 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (pv) a cerca de 19 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 18 % (p/y),) em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 17 % (py), em uma quantidade de cerca de 14 % (p/v) a cerca de 16 % (p/v), ou, mais particularmente, em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 24 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 23 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 22 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 21 % (p/y), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 20 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 19 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 18 % (p/v), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 17 % (pfy), em uma quantidade de cerca de 15 % (p/v) a cerca de 16 % (p/v), ou em uma - quantidade de cerca de 16 % (p/v).

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção, o í objetivo da presente invenção é solucionado pelo uso de imidazoqui- nolin(aminas) e derivados destas conforme aqui definidas (para a manufatura de uma composição farmacêutica, por exemplo, conforme aqui definida) para a profilaxia, tratamento e/ou melhora de qualquer das doenças e distúrbios conforme aqui definidos, por exemplo, distúrbios da pele incluindo condições pré-cancerosas, tais como queratose acítínica, , 20 verrugas genitais (condylomata), VIN (neoplasia intraepitelial vulvar), VAIN (neoplasia intraepitelial vaginal), etc., Molluscum contagiosum, cânceres de | pele, tais como carcinoma de célula basal, doença de Bowen, carcinoma de célula escamosa, melanomas malignos superficiais, etc., doenças da bexiga, tais como, por exemplo, câncer de bexiga e cistite, etc., câncer, incluindo câncer peritoneal, câncer de ovário, etc.

Ressecção de tumor de bexiga transuretral e imunoterapia intravesical adjuvante com BCG é o tratamento padrão para NMIBC de alto grau. Contudo, muitos pacientes mostram recorrência de doença e o impacto na progressão da doença é somente limitado (Sylvester FJ, Van der Meijden AP, Lamm DL. intravesical bacillus Calmetie-Guerin reduces the risk of progression in patients com superficial bladder cancer: a metaanalysis of the published results of randomized clinical trials. J Urol 2002; 168:196470) or still absent (Malmstrôm PU, Sylvester RJ, Crawford ED, Friedrich M, Krege S, Rintala E, Solsona E, Di Stasi SM, Witjes JA. An individual patient data meta-analysis of the long-termo outcome of randomized studies comparing intravesical Mitomycin C versus Bacillus Caimettte-Guerin for non-muscle- invasive bladder cancer. Eur Urol 2009; 56 (2):247256). Além disso, o tratamento com BCG pode conduzir a efeitos colaterais sérios locais e sistêmicos (Witjes JA, Palou J, Soloway M, Lamm 0, Brausi M, Spermon JR, Persad R, Buckley R, Akaza H, Colombel M, Bôhle A. Clinical Practice recommendations for the prevention and management of intravesical therapy-associated adverse events. Eur. Urol Supp! 2008; 7: 667-74). Portanto, novas opções de tratamento terapêutico para aperfeiçoar as taxas - de sucesso de tratamento totais, possivelmente com um perfil de baixa toxicidade, para cânceres de bexiga invasivos de não-músculo são í urgentemente necessários.

Surpreendentemente, pode ser mostrado que imidazoquino- lin(aminas) administradas intravesicalmente em porcos é bem tolerada, não causa toxicidade na parede da bexiga e formulações com poloxâmero e HPBCD não ficam mais na bexiga com menos absorção sistêmica. O perfil de segurança de imidazoquinolin(aminas) intravesicais se compara àquele deterapias atuais, tal como BCG.

Consequentemente, para uma concretização particularmente preferida, o objetivo da presente invenção é solucionado pelo uso de imidazoquinolin(aminas) e derivados destas conforme aqui definidas, (para a manufatura de uma composição farmacêutica, por exemplo, conforme aqui definida) para o tratamento (intravesical) de doenças da bexiga, tais como, por exemplo, câncer de bexiga, tais como, por exemplo, cânceres de bexiga invasivos de não-músculo e cistite, etc. Para esta proposta específica, imidazoquinolin(aminas) e derivados destas, conforme aqui definidas, são preferivelmente providas em uma formulação conforme descrito acima para acomposição farmacêutica da invenção.

Finalmente, a presente invenção adicionalmente compreende métodos de tratamento de doenças e distúrbios, conforme aqui definidos,

incluindo distúrbios da pele incluindo condições pré-cancerosas, tais como queratose actínica, verrugas genitais (condylomata), VIN (neoplasia intra- epitelial vulvar), VAIN (neoplasia intraepitelial vaginal), etc., Molluscum contagiosum, cânceres de pele, tais como carcinoma de célula basal, doença de Bowen, carcinoma de célula escamosa, melanomas malignos superficiais, etc., doenças da bexiga, tal como, por exemplo, câncer de bexiga, tal como, por exemplo, cânceres de bexiga invasivos de não- músculo, e cistite, etc., câncer, incluindo câncer peritoneal, câncer ovariano, etc., usando-se a composição farmacêutica da invenção, preferivelmente conforme definida acima. Neste contexto, tais métodos de tratamento conforme definidos acima preferivelmente compreende administração da - composição farmacêutica da invenção usando-se qualquer modo de administração conforme definido acima, preferivelmente incluindo, rotas de Í administração tópica, mas também intravesical, injeções intradermais, transdermais, subcutâneas, ou intramusculares ou injeções intralesionais, intracraniais, intrapulmonares, intracardíacas, e sublinguais.

Particularmente preferido, a presente invenção compreende métodos de tratamento (intravesical) de doenças da bexiga, tal como, por exemplo, câncer de bexiga, tal como, por exemplo, cânceres de bexiga ' 20 invasivos de não-músculo, e cistite, etc, usando-se a composição farmacêutica da invenção, preferivelmente conforme definida acima. Neste contexto, tais métodos de tratamento (intravesical) de doenças da bexiga tipicamente compreendem a administração intravesical da composição farmacêutica da invenção. Adicionalmente, a composição farmacêutica da invenção pode ser administrada usando-se métodos não-invasivos, tais como uma agulha de injeção tendo uma cânula de um diâmetro adequado, um tubo de injeção, métodos endoscópicos, etc.

É para ser compreendido que esta invenção não é limitada a metodologia particular, protocolos e reagentes aqui descritos, visto que estes podem variar. É também para ser compreendido que a terminologia aqui usada é para a proposta de descrição das concretizações particulares somente, e não é pretendida para limitar o escopo da presente invenção que será limitada somente pelas reivindicações em anexo. A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm os mesmos significados conforme comumente compreendido por um técnico no assunto.

FIGURAS As seguintes figuras são pretendidas para ilustrarem a invenção adicionalmente. Eles não são pretendidos para limitarem o material objeto da invenção.

Figura 1 mostra a viscosidade de sistemas contendo percentagens diferentes de Poloxâmero 407 (20% e 25%) como uma função da temperatura.

- Figura 2 mostra a viscosidade de sistemas contendo percentagens diferentes de HP-B-CD (0% a 20 %) como uma função da í temperatura.

Figura 3 mostra a viscosidade de sistemas contendo proporções diferentes de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 (0% a 30%) como uma função da temperatura.

Figura 4 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 20% de Poloxâmero 407 ou 25% de mistura de poloxâmero em uma ' 20 solução de ácido acético (AA), na presença ou na ausência de imiquimod (TMX, 0,4%) como uma função da temperatura.

| Figura 5 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 20% de Poloxâmero 407 em água ou solução de ácido acético (AA), ou na presença de imiquimod (TMX) em solução de ácido acético como uma funçãoda temperatura.

Figura 6 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 25% de mistura de poloxâmero (Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188) em água ou solução de ácido acético, na presença de imiquimod (TMX) em solução de ácido acético como uma função da temperatura.

Figura 7 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 20% de Poloxâmero 407 (PG) ou 25% de mistura de poloxâmero (Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188, PPG) em solução de ácido láctico (LA),

na presença e na ausência de imiquimod (TMX, 0,9 %) como uma função da temperatura.

Figura 8 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 20% de Poloxâmero 407 em água ou em solução de ácido láctico, ou napresença de imiquimod (TMX, 0,9) em solução de ácido láctico como uma função da temperatura.

Figura 9 mostra a viscosidade de sistemas preparados com 25% de mistura de poloxâmero (Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188) em água ou em solução aquosa de ácido láctico ou na presença de imiquimod (TMX, 0,9) em solução de ácido láctico como uma função da temperatura. - Figura 10 mostra o perfil de erosão (dissolução) de PG-LA1 (Poloxâmero 407 em solução de ácido láctico) sem imiquimod (topo) e com ' imiquimod (TMX PG-LA1) (fundo) com o tempo.

Figura 11 mostra os perfis de difusão de imiquimod (TMX) (g) passando a membrana de celulose como um resultado de formulações de gel preparadas com ácido láctico 0,1 M e Poloxâmero 407 (PG) ou mistura de Poloxâmero 407/Poloxâmero 188 (PPG): na mesma figura, a difusão de imiquimod (TMX) em solução de ácido láctico 0,1 M sem 1 20 formulação de gel é dada para proposta comparativa.

Figura 12 mostra a quantidade de imiquimod (TMX-101) ] recuperada em BE (epitélio de bexiga) após 4 horas de contato com a formulação (ver Exemplo 5), a saber, para 0,9% de Imiquimod — 15% de HP- B-CD dissolvido em solução de ácido láctico 0,1 M, ou em 19% de dispersão de gelde Poloxâmero 407 contendo 15% de HP-B-CD (ácido láctico 0,1 M) ou em dispersão de lipossomo (1% de feijão-soja lecithin em solução de ácido láctico 0,1 M). É mostrado que as formulações da invenção mostram um efeito consideravelmente melhor em liberação de longo prazo do que a formulação lipossomal que é dada aqui para proposta comparativa.

Figura 13 mostra solubilidade de imiquimod (TMX-101) na presença de concentrações diferentes de ácido láctico.

A solubilidade aumenta como uma função da concentração de ácido láctico.

Figura 14 Na parte de topo bexigas de porcos são mostradas que foram cortadas, lavadas e transferidas em solução de NaCl a 37ºC.

Formulações de acordo com a invenção foram aplicadas à bexiga e a bexiga seccionada após 10 minutos.

O estado de gel da formulação aplicada foiobservado.

Na parte de fundo, a bexiga após adição de uma formulação da invenção compreendendo imiquimod em 20% de Polaxâmero 4077 em solução de ácido láctico (0,1 M)), que foi previamente manchada por Coomassie Blue, é mostrada e o gel é ainda observado.

Nenhuma adesão do gel é observada.

Figura 15 mostra a quantidade de imiquimod (TMX) recuperado no epitélio da bexiga (BE) após 4 horas de contato com as - formulações diferentes de imiquimod (dados são normalizados para a absorção areal e são a média de 3 experimentos). ' Figura 16 mostra um manchamento imuno-histoquímico para TLR-7 de (sub)mucosa humana de câncer de bexiga de acordo com o exemplo 10.3.1 (ampliação original 40x). Figura 17 mostra um manchamento imuno-histológico para TLR-7 de (sub)mucosa de bexiga de porco de acordo com o exemplo 10.3.1 (ampliação original 40x). F 20 Figura 18 mostra os parâmetros de plasma farmacocinéticos de imiquimod (R-837) administrado a grupos de porcos tratados com ] formulações diferentes de imiquimod.

Os animais receberam uma solução de imiquimod 0,5% dissolvida em ácido láctico 0,1 M (grupo 1); uma solução de imiquimod 0,5% dissolvida em ácido láctico 0,1 M, poloxâmero 407 16% como agente de emulsificação e HPRCD (hidroxipropil-B-ciclodextrina) 15% com o agente de estabilização (grupo 2); uma solução de imiquimod 0,5% dissolvida em ácido láctico 0,1 M, poloxâmero 407 16% e HPBCD 5% (grupo 3). Figura 19 mostra aparecimento normal (sub)mucosal de uma bexiga de porco (ampliação original 20x) Figura 20 mostra reação inflamatória submucosal linfocítica predominantemente moderada um dia após instilação de fármaco de estudo

(grupo 3) do exemplo 10.3.2 (ampliação original 20x). Figura 21 mostra vasculite leucocitoclástica com necrose de parede de vaso fibrinoide em bexiga de porco (grupo 1) dp exemplo 10.3.2 (ampliação original 20x).

Figura 22 mostra indução de citocina e quimiocina por administração intravesical de imiquimod em 0,1% de ácido láctico de acordo com o exemplo 11.3.1. Camundongos (n=8) receberam intravesicalmente várias doses de imiquimod em formulação de ácido láctico. Duas horas após administração, soro e lavagem de bexiga foram coletados. Os níveis de TNFa(A)ekKC (B) em soro, e TNFa (C) e KC (D) na lavagem de bexiga, foram medidos. Os dados mostrados são representativos de dois . experimentos independentes (média + SEM.). * denota p<0,05 comparado aos camundongos tratados com veículo (Veh) por testes ANOVA de uma via 7 com teste Dunnett's post hoc. Figura 23 mostra farmacocinéticos de imiquimod (R-837) em camundongos após administração intravesical de acordo com exemplo

11.3.2. (A-D) Aos camundongos (n=8) foram administrados 5000 nmoles de imiquimod em formulação de ácido láctico ou poloxâmero. Os níveis de soro TNFa (A), TNFa em lavagem de bexiga (B), soro KC (C), e KC em lavagem = 20 de bexiga (D) foram medidos. * denota p<0,01 avaliado por teste t Student não-emparelhado. (E) Aos camundongos (n=6 a 8) foram administrados ' 1500 nmoles de imiquimod em formulação de ácido láctico ou poloxâmero. Soros foram coletados 2, 4, 6, 24 horas após a administração. (F) Aos camundongos (n=6) foram administradas várias doses de imiquimod em 100 ulemformulações de ácido láctico ou poloxâmero. Soros foram coletados 2 a 4 horas após a administração. Os níveis de imiquimod foram determinados por Chiman SRL. Os dados mostrados são valores reunidos de dois experimentos independentes (média + SEM.). * denota p<0,05 por testes ANOVA de uma via com teste Dunnett's post hoc comparado a — camundongos tratados a ponto de tempo de O hora ou camundongos tratados com veículo sozinho (Veh). ** denota significância estatística (p<0,01) avaliada por testes ANOVA de uma via com teste Bonferroni's post hoc. . Figura 24 mostra incorporação de HPBCD que restaura parcialmente TNFa sistêmico e níveis de KC de acordo com o exemplo

11.3.3. Aos camundongos (n=8) foram administrados 1500 nmoles de imiquimod em formulação de ácido láctico, poloxâmero ou poloxâmero- HPBCD. Os níveis de aNFa (A) e KC (B) são mostrados. Os dados apresentados são valores reunidos de dois experimentos independentes (média + SEM). * denota p<0,05 por testes ANOVA de uma via com teste Dunnett's post hoc. (C) Aos camundongos C57BL/6 foram injetados 5000 nmoles de imiquimod em formulações de ácido láctico, poloxâmero, ou poloxâmero-HPBCD. Os níveis de KC na lavagem foram avaliados por . ensaio de contas Luminex. Os dados apresentados são valores reunidos de três experimentos independentes (média + SEM.). É Figura 25 mostra histologia representativa de bexiga de murino tratada com 0,1% de imiquimod (R-837) em formulação de poloxâmero-HPBCD de acordo com exemplo 11.3.4. A: Tratamento simples Veh (C57BL/6 tipo selvagem) B: Tratamento três vezes Veh (C57BL/6 tipo selvagem) C: Tratamento simples de imiquimod (C57BL/6 tipo selvagem) D: Tratamento três vezes de imiquimod (C57BL/6 tipo selvagem) E: Tratamento três vezes com salina (C57BL/6 tipo selvagem) F: Tratamento três vezes com imiquimod (TLR7 ko) C57BL/6 (A-E) ou camundongos deficientes de TLR7 (ko) (F) foram intravesicalmente tratados com 0,1% de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD no dia 0 (tratamento simples), 50uL nos dias O, 4, e 8 (tratamento três vezes). As bexigas foram coletadas no dia 1 para tratamento simples (A e C) ou no dia 9 para tratamento três vezes (B, D, E e F) e manchadas com H&E.- Os camundongos tratados com veículo sozinho (Veh, n=4) e camundongos naive servidos como controles (B e E). Barra de escala: 100 um. A ampliação original foi 200x. Figura 26 mostra peso reduzido da bexiga de camundongos suportando MB49 tratados com 0,1% de imiquimod em formulação poloxâmero-HPBCD de acordo com o exemplo 11.3.5. Os camundongos (n=11) suportando tumor de bexiga de MB49 receberam intravesicalmente

50 uL de 0,1% de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD nos dias 3,6 e 9. Os camundongos foram sacrificados no dia 11 e o peso da bexiga foi medido. Camundongos puros sem implantação de tumor (naive), camundongos implantados com MB49 com nenhum tratamento (Nenhum) ou camundongos tratados com veículo (Veh) servidos como controles. Os dados mostrados são valores reunidos de três experimentos independentes (média + SEM.). A significância estatística foi avaliada por testes ANOVA de uma via com teste de Kruskal-Wallis.

EXEMPLOS Os seguintes Exemplos são pretendidos para ilustrar a invenção adicionalmente. Eles não são pretendidos para limitar o material objeto da ] invenção.

1. Exemplo: Solubilidade de imiquimod Ú 1.1. Testes preliminares

1.1.1. Solubilidade de imiquimod em ácido clorídrico 48 mg de imiquimod foram pesados e adicionados de soluções de ácido clorídrico em concentrações diferentes: em particular, 48,2 mg de imiquimod foram tratados com 8 ml de ácido clorídrico 0,1N, 48,6 mg de imiquimod com 9 ml de ácido clorídrico 0,2 N e 48,4 mg de imiquimod com 8 mlde ácido clorídrico 2 N. Após centrifugação por 5 minutos, as amostras foram visualmente inspecionadas. O fármaco é levemente solúvel em ácido clorídrico 0,1 N, 0,2 Ne 2 N. O sistema preparado com HCI 2 N é uma solução transparente a 74ºC. A concentração teórica do fármaco dissolvido na mesma foi 0,042 M correspondente a 1,0 %.

1.1.2. Solubilidade de imiquimod em ácido acético glacial Uma quantidade pesada de fármaco (48,2 mg) foi dissolvida sob agitação em 2 ml de ácido acético glacial. Após solubilização completa uma alíquota pesada de imiquimod (150 mg) foi adicionada a esta solução de modo a avaliar visualmente a concentração máxima de fármaco dissolvida. Este experimento preliminar demonstra que é possível solubilizar 10 g de imiquimod em 100 ml de 100% de ácido acético à temperatura ambiente (10

% (p/v).

1.1.3. Solubilidade de imiquimod em tampões A solubilidade de imiquimod em valores diferentes de pH foi determinada. Dois procedimentos diferentes foram usados. O fármaco foi disperso no tampão (sem ácido acético como co-solvente). 72 mg de imiquimod foram dispersos com 10 ml de tampão de citrato, 155 mg de imiquimod em 10 ml de tampão de fosfato e 192 mg em 10 ml de tampão de citrato. Após centrifugação por 5 minutos, cada amostra foi visualmente inspecionada.

Imiquimod foi completamente dissolvida em ácido acético glacial e 1 ml desta solução (2,41 % de imiquimod) foi diluído com 9 ml! de água, 0,9 f %p/p de solução de NaCl, tampão de fosfato pH 7,0 (0.1 M), tampão de citrato pH 6,0 (0,1 M) ou tampão de acetato pH 5,0 (0,1 M). Uma inspeção Í visual dos sistemas foi efetuada.

Os resultados dos mesmos testes preliminares indicam que imiquimod é levemente solúvel em tampões. Quando a fármaco foi dissolvida em ácido acético glacial e, em seguida, diluída com tampões, soluções claras, transparentes foram obtidas: o pH dos mesmos sistemas foi sempre mais baixo do que 3,6.

1.2. Análise de imiquimod

1.2.1. Curva de calibração de imiquimod em ácido acético por espectrofotômetro Uma quantidade pesada de fármaco (0,0124 9) foi dissolvida em 100 ml de solvente (ácido acético/água 1:9). A concentração da solução foi 0,0005 M. Quantidades diferentes desta solução foram oportunamente diluídas com o mesmo solvente para preparar cinco soluções padrões com concentrações variando de 2x10 — 5x10* M (em particular 2x10º M, 5x108 M, 10x10º M, 20x10º M, 50x10º M). Estas soluções foram espectro- fotometricamente analisadas. A absorvência foi determinada em três — comprimentos de onda (250, 305, 319 nm).

As concentrações das soluções padrão usadas para a calibração do método e os valores de absorvência correspondentes a 319, 305 e 250 nm são mostradas na Tabela 1 abaixo. Concentração (1 o*moll) A=319 nm | A= 305 nm | A= 250 nm - Tabela 1: Concentrações e valores de absorvência de soluções padrões de imiquimod. h 5 1.2.2. Curva de calibração de imiquimod em ácido acético por

HPLC Uma quantidade pesada de imiquimod (0,0316 g) foi dissolvida em 250 ml de solvente (acetonitrila (ACN)/água pH 3,5). A concentração da solução foi 0,0005 M. Quantidades diferentes desta solução foram apropriadamente diluídas com o mesmo solvente para preparar soluções : padrões com concentrações na faixa 2x10º — 3x10* M (em particular 2x10% M, 3x10º M, 10x10º M, 20x10º M, 30x10º M). Estas soluções foram analisadas por HPLC para imiquimod. As amostras foram analisadas nas seguintes condições: eColuna: Blindagem de Simetria RP18 (150 x 4,6 mm, 3,5 um) e Pré-coluna: Simetria C18 (3,9 x 20 mm, 5 um) +Fase móvel: Solução A: Acetonitrila Solução B: solução contendo 50 mM de acetato de amônio (3,85 g em 11 de água) e Fluxo (ml/min): 1.0 e Gradiente: ver Tabela 2 eTemperatura do forno (ºC): 40 e Comprimento de onda (nm): 250

+ Volume de injeção (ul): 20 meses Tsusenta Lscicena | lo o [emo = e E) 0-16 20-30 80-70 linear = = e E 18-26 30-50 70-50 linear e fo do E 26-31 50-80 50-20 linear : [80 — fo fa Jisoxárco | = RE . 40-42 80-20 20-80 linear [220 dao Sao Jresamero | Tabela 2: Gradiente para calibração por HPLC Sob estas condições de análise, o tempo de retenção de imiquimod foi 18 minutos. As concentrações de soluções padrões usadas para o método de calibração e as áreas de pico correspondentes são mostradas na Tabela 3 abaixo. Tabela 3: Concentrações e áreas de pico de soluções padrões de imiquimod.

1.3. Estudo de solubilidade

1.3.1. Solubilidade de imiquimod em ácido acético glacial e tampões

Conforme reportado a solubilidade de imiquimod em ácido acé- tico glacial, à temperatura ambiente, foi 100 mg/ml (10% p/v). A solubilidade foi experimentalmente determinada pesando-se 1200 mg de fármaco, adicionando-se 10 ml de ácido acético glacial e agitando brandamente a dispersão por 24 horas. Esta amostra, após filtração (membrana de filtro 0,22 um Millipore) foi analisada por HPLC para o teor de imiquimod e seu pH foi medido. Imiquimod (738 mg) foi inicialmente dissolvido em ácido acético glacial (10 ml). Um volume desta solução foi apropriadamente diluído com tampão de fosfato pH 7,0 (0,1 M), tampão de citrato pH 6,0 (0,1 M) ou tampão de acetato pH 5,0 (0,1 M) para preparar sistemas contendo 2,0 % de . fármaco. As amostras, após filtração por filtto de membrana 0,22 pum Millipore, foram espectrofotometricamente e cromatograficamente analisadas ' para o teor de imiquimod. O pH foi determinado. Os valores de solubilidade da fármaco em ácido acético glacial ou em ácido acético diluído com tampões de fosfato, citrato ou acetato (0,1 M) determinados por HPLC e/ou espectrofotometria e os valores de pH correspondentes são mostrados na Tabela 4. o ia : pl ácido acético de fosfato pH | de citrato pH | Tampão de acetato | UV | HPLC glacial 7,0 6,0 pH 5,0 oo br | rs o ssh em

FR PO A A OA Bo ds ladies Doee| Tabela 4: Composições, pH da solução e solubilidade de imiquimod de sistemas

1.3.2. Solubilidade de imiquimod em ácidos de cadeia curta Alguns ácidos inorgânicos e orgânicos foram considerados como solubilizadores potenciais do fármaco. 100 mg de imiquimod foram dissolvidos em 10 ml de ácido fosfórico 0,1 M, ácido succínico 0,1 M, ácido cítrico 0,1 M, ácido acético 0,01 M, 0,05 M, 0,1 M e ácido láctico 0,01 M, 0,05 M, 0,088 M, e 01 M. Estes sistemas, após filtração, foram espectrofotometricamente analisados para imiquimod e seu pH foi medido.

1.3.3. Solubilidade de imiquimod na presença de ciclodextrina Quantidades exatamente pesadas de imiquimod (200 mg) e hidroxipropil-B-ciclodextrina (HP-B-CD) (4000 mg) foram dissolvidas em 10 ml de: vágua ságua a pH 5.0 (corrigido com HCI) - svágua a pH 3.0 (corrigido com HC!) esolução de ácido láctico (0,1 M) ] Após oscilação por 24 horas e filtração (filtro de membrana 0,22 um Millipore),) o imiquimod solubilizado foi espectrofotometricamente determinado. O pH da solução foi também medido.

1.3.4. Solubilidade de imiquimod na presença de tensoativo Imiquimod (200 mg) foi pesado e misturado com quantidades diferentes de tensoativo (Tween 20, Tween 80, Cremophor EL ou Pluronic F- ' 20 68)de modo a preparar formulações contendo 0,5, 2,5 e 5% de agente ativo de superfície. Cada mistura foi adicionada a 10 ml de ácido láctico (0,1 M), sacudida brandamente por 24 horas, filtrada e analisada por espectrofoto- metria e submetida a medição de pH. O imiquimod presente na solução em composições preparadas com ácidos diferentes e tensoativo é espectrofotometricamente determinado e é mostrado na Tabela 5 junto com o valor do pH.

ácido ácido Cremopho HP-B-CD | Imiqui- ácido acético | láctico rel mod ácido succi- ácido Tween | Tween Pluronic (Low) fosfórico | nico cítrico 20 80 F68

FENINNNNNDNNBIPITE Lee DD om les | o del DD om leo | od he DDD om las | : mNNNFININNNNNPIPE LO e PD form [am | | PD e PD Domo [am |

EENNNPENNNDNNPIPE PO e PD om [am | PO a fas PP Joss [am | LD de Bs DD Tio [am | LD fe de PD am dam | LD fe e E Jos [am | mNNNPENPINININIPIRPE LD fe e Dom la | mMNNNPENNIANNBIPITE LD fe Ds DD om [am | Pr fe o DP om [am | LD fe DD das DO ro [as | LD fe E das O [rom [om | mMNNNPENNNIANIPIPE LI ID DD bo Tom [7 | o O Jo [sm | O o Joss [am | Lo he o Do Lunda |

Tabela 5: Composição, valor do pH e quantidade de imiquimod nas formulações

1.3.5. Solubilidade de imiquimod em glicerol ou propileno glico! Imiquimod foi pesado (100 mg) e adicionado de glicerol ou propileno glicol a um volume de 10 ml. Após oscilação (a 120ºC por 24 horas) e resfriamento, 10 ml de água foram adicionados: as dispersões foram filtradas e a quantidade de imiquimod nas fases líquidas foi deter- minada. O sistema preparado com glicerol como solvente mostrou um valorde pH de 5,42 e uma concentração de imiquimod de 0,02 %. Quando propileno glicol foi usado o pH foi 3,03 e a concentração de imiquimod em ' solução foi 0,02%.

1.4. Discussão dos resultados i Imiquimod é apreciavelmente solúvel em ácido acético e ácido láctico puros (>7,5 % p/v). Estes dois ácidos podem ser usados como cossolvente para preparar formulações contendo quantidade relativamente alta da substância ativa. Entre os ácidos considerados como solubilizador para imiqui- mod, ácidos acético e láctico confirmam sua capacidade de interagirem com ' 20 a fármaco e solubilizá-la. A quantidade de fármaco em solução é diretamente relacionada a concentração de ácido (isto é também confirmado pelo Exemplo 6.1.). Como solubilizador, ácido láctico é mais eficiente do que ácido acético. Os tensoativos associados ao ácido láctico não melhoram a solubilidade de imiquimod. Os resultados obtidos demonstram que para estes sistemas, a solubilidade do fármaco depende principalmente do ácido láctico e indica que o fármaco não é arrastado nas micelas da forma dos tensoativo. Sobre a inclusão do agente, enquanto um concentração simples altade HP-B-CD foi usada, pode ser afirmado que este agente de complexação não modifica substancialmente a solubilidade do fármaco: o aumento das concentrações observado nos experimentos diferentes são devido a diminuição do valor do pH.

Quando HP-B-CD foi usado em associação com ácido láctico, um pequeno incremento, mas significante (cerca de 18%) de solubilidade de fármaco pode ser observado.

2. Exemplo: Formulação de géis termorreversíveis de imiquimod

2.1. Formulações de sistemas semissólidos

2.1.1. Formulações com Poloxâmero 407 Poloxâmero 407 foi usado para preparar sistemas semissólidos que continham como fases líquidas: cágua - +10 % de solução de ácido acético esolução de ácido acético 0,1 M í esolução de ácido láctico 0,1 M Todos os sistemas foram constituídos de 25% de polímero (quantidade total/concentração de agente termossensível)

2.1.2. Formulações com Poloxâmero 407 e hidroxipro- pbilmetilcelulose O efeito de um derivado de celulose, hidroxipropilmetilcelulose ' 20 (HPMC - Methocel KL5SM, Colorcon, MW 15000), nas propriedades de termogelação de poloxâmero foi avaliado: HPMC pura mostra transição de fase gel entre 40 e 50ºC e sua temperatura de solução crítica inferior (LCST) pode ser abaixada por modificação química (por redução do grau de substituição, a temperatura de transição de gel pode ser abaixada a cerca de 40ºC). Quantidades diferentes deste polímero foram usadas: a composição das formulações contendo HPMC é a seguinte: | Poloxamero sor — Ínemc —Jagua =| es jo —|7so |

Tabela 6: Composições contendo HPMC Como um resultado, a adição de derivados de celulose não modifica significantemente o comportamento reológico das formulações.

2.1.3. Formulações com Poloxâmero 407 e ciclodextrina A literatura reporta o uso de ciclodextrina como componente de sistemas semissólidos termossensíveis (CDG. Palmieri et al., 15" Int. Symp. on Microencapsulation, Parma, Italy 18-21 September 2005). Hidroxipropil-B- ciclodextrina (HP-B-CD) em altas percentagens, variando de O a 20% foi usado em sistemas constituídos de Poloxâmero 407 e água e a LCST destas formulações foi determinada.

2.1.4. Formulações com poloxâmero e Poloxâmero 188 . Misturas de poloxâmeros como sistemas de gelificação foram também avaliadas. Poloxâmero 188, PEO-PPO-PEO copolímero com peso ' molecular mais baixo do que Poloxâmero 407 podem ser usados para —modularaLCST do gel. Poloxâmero 407 foi em parte substituído por Poloxãâ- mero 188 para obter hidrogéis que contêm uma quantidade de polímeros . correspondente a 25%. | Potoxâmero 407 | Potoxâmero 188 [água |" ! Tabela 7: Misturas diferentes de poloxâmeros

2.1.5. Formulações com poloxâmeros e ácido láctico ou ácido acético A fase líquida (água) foi substituída por ácido láctico ou ácido acético: seus efeitos e aqueles do fármaco no comportamento reológico de sistemas termossensíveis foram avaliados. Entre as formulações de gel diferentes preparadas com ácidos orgânicos (ácido láctico ou ácido acético), aquelas que mostram temperaturas de transição de gel a cerca de 20ºC foram consideradas. Desse modo, os sistemas gelificados que nós selecio-

nados contêm: 20% p/p de Poloxâmero 407 «25% p/p de Poloxâmero 407/Poloxâmero 188 (proporção de peso 9:1)

2.1.6. Formulações com imiquimod A composição dos géis investigados foi a seguinte: Imiquimod PPG-LA 01 Imiquimod 0,90 g Poloxâmero 407 22,50 g Poloxâmero 188 2,50g Solução de ácido láctico (0,135 M) 74,02 g ' Imiguimod PG-LA 01 Imiquimod 0,90 g Poloxâmero 407 20,00 g Solução de ácido láctico (0,125 M) 79,02 g Imiquimod PPG-AA 01 JE Imiquimod 0,40 g Poloxâmero 407 22,50g Poloxâmero 188 2,50 g Solução de ácido acético (0,135 M) 74,02 g Imiquimod PG- AA 01 Imiquimod 0,40 g Poloxâmero 407 20,00 g Solução de ácido acético (0,125 M) 79,02 g

2.2. Influência dos componentes na temperatura de solução crítica inferior (LCST) Os valores de LOST não podem ser determinados por DSC: enquanto sistemas constituídos de Poloxâmero 407 puro mostraram um pico endotérmico que pode ser encadeado a transição de gel, usando-se mistu- ras de poloxâmeros, HP-B-CD/Poloxâmero 407 ou HPMC/Poloxâmero 407 como agentes de gelificação, o sinal de transição de DSC foi perdido. Desse modo, a temperatura de transição de gel foi determinada pela medição da viscosidade. A viscosidade dos sistemas foi avaliada na faixa de temperatura 140ºC, usando-se um Rheometer BROOKFIELD DV-ll+, equipado com o Adaptador de Amostra Pequena e o fuso S-25.

2.2.1. Viscosidade de sistemas contendo quantidades diferentes dePoloxâmero407 A diminuição da percentagem de polímero, a LCST aumentada (ver Figura 1): em concentração mais baixa de poloxâmero, micelas reque- rem um suprimento de energia para estabelecer interações que dão consistência semissólida para a formulação. A LCST de géis contendo 20 ou 25% de Poloxâmero 407 e água como solvente são 19,93 e 13,9ºC, respectivamente. Estes resultados são consistentes com aqueles reportados - na literatura [A. Cabana.et al, Study of the Gelation Process of Polietileno Oxide-Polipropilene Oxide—-Polyethylene Oxide Copolimer (Poloxâmero 407) í Aqueous Solutions, J. COLLOID INTERFACE SCI. 190, 307-312 (1997)].

2.2.2. Viscosidade de sistemas contendo poloxâmero e HPMC HPMC, na faixa de concentrações consideradas (< 2%), não é - verificada modificar a temperatura de transição de gel da formulação conten- do Poloxâmero 407 puro.

2.2.3. Viscosidade de sistemas contendo poloxâmero e ] 20 ciclodextrina ' Aumentando-se as percentagens de ciclodextrina (HP-B-CD) conduz-se a um aumento leve, mas significante de LCST: os resultados obtidos indicam uma relação não linear entre concentração e viscosidade de CD. Desde que CD aumenta, a solubilidade do fármaco (cerca de 17% de incremento), o uso deste componente na formulação de gel final pode ser considerado (medições nos sistemas contendo o fármaco não foram efetuadas) (ver figura 2).

2.2.4. Viscosidade de sistemas contendo uma mistura de Poloxâmero 407 e 188 Um efeito relevante de Poloxâmero 188 em LCST foi observado: aumentando-se a proporção deste componente eleva a temperatura de transição de gel (notar o relacionamento linear entre concentração de P188 e viscosidade do sistema) (ver figura 3).

2.2.5. Viscosidade de sistemas contendo ácido acético, ácido láctico e imiquimod Pode ser apreciado que, indiferente do sistema de gelificação, ácido acético eleva a LCST do sistema: este componente ácido aumenta LCST de ambos imiquimod PG-AA 01 e imiquimod PPG-AA 01 para 22,85ºC. Imiquimod não modifica significantemente a temperatura de transição de gel (22,95 e 23,00ºC para respectivamente imiquimod PG-AA 01 e imiquimod PPG-AA 01) (figuras 4, 5, 6). Também ácido láctico aumenta a LCST das formulações de gel: conforme anteriormente observado com ácido acético, a temperatura de ' transição de gel de sistemas constituídos de Poloxâmero 407 é 23,8ºC. Com a mistura de Poloxâmero 407/Poloxâmero 188, na presença de ácido láctico, i Í este valor é ainda mais alto (=25,9ºC) (figuras 7,8, 9).

Diferente de com ácido acético, imiquimod afeta signi- ficantemente a LCST de sistemas preparados com ácido láctico: para . formulação de imiquimod PG-LA 01 (Poloxâmero 407 puro), o fármaco conduz a um aumento adicional leve de temperatura de transição de gel (figura 8); quando a mistura de componentes de gelificação foi usada, a ' 20 temperatura diminui para 24,1ºC (LCST de gel na ausência de fármaco = 25,9ºC) (Figura 9).

3. Exemplo: Teste de Dissolução/Erosão e experimentos de liberação de formulações contendo imiquimod

3.1. Composições e condições experimentais

3.1.1. Composições Um teste exploratório de dissolução/erosão foi realizado nas seguintes formulações: Imiquimod PG-LA 01 Imiquimod 0,90 g Poloxâmero 407 20,00 g Solução de ácido láctico (0,125 M) — 79,02g PG-LAO1

Poloxâmero 407 20,00 g Solução de ácido láctico (0,125 M) — 79,029g

3.1.2. Condições experimentais O teste é ilustrado em "Development and in-vitro evaluation of sustained release Poloxamer 407 (P407) formulation of gels of ceftiofur" by L. Zhang -J. Control. Release, 85 (2002) 73-81. O teste foi efetuado em frascos de 10, fechados com um elastomérico. Uma quantidade pesada de cerca de 3 g de formulação como sol (temperatura = 4ºC) foi transferida ao frasco e o frasco foi armazenado a 37ºC até gelificação. Em seguida, o frasco foi pesado, 2 ml de tampão de acetato (pH 6,0; 0,1 M) foram estratificados no gel. Em intervalos de tempo predeterminados (após 1, 2,3, E 4 horas), a fase líquida foi completamente retirada e o frasco pesado. Tampão de acetato fresco foi estratificado no gel remanescente. A diferença f de peso de frasco após cada intervalo de tempo corresponde à quantidade : 15 de gel solubilizado pelo tampão. A percentagem de gel dissolvido foi reportada como uma função do tempo.

' Para comparação, um gel estudado por Zhang (J. Control. Release, 85 (2002) 73-81) foi considerado: este foi o sistema de gel de 25% de Poloxâmero 407 contendo ceftiofur.

3.2. Resultados e discussão Os resultados obtidos são representados na figura 10 (os valores são a média de três réplicas). Pode ser notado que o perfil de erosão dos sistemas considerados é muito similar (p > 0,973), indicando que o fármaco não afeta a erosão do polímero. A dissolução/erosão de ambos os sistemas foi um processo cinético de ordem zero, quase até 4 horas (cerca de 40% de erosão): uma cinética idêntica foi observada por Zhang, mas a taxa do processo foi mais alta (cerca de 0,26 % min”) do que aquela que nós obtivemos (cerca de 0,19 % min”). Zhang observou que o pH do meio de dissolução tinha uma influência insignificante na dissolução de gel e usou soluções de tampão de fosfato de pH diferente como solvente distante do polímero. As presentes descobertas podem estar associadas ao baixo pH das formulações ou às interações de ácido láctico com o poloxâmero.

Adicionalmente, durante o experimento de dissolução/erosão com formulação de imiquimod PG-LA 01, nenhuma separação/precipitação da fármaco podem ser observadas.

4. Exemplo: Experimentos de difusão/liberação de imiquimod

4.1. Composições e condições experimentais

4.1.1. Composições Imiquimod PPG-LA 01 Imiquimod 0,90 g Poloxâmero 407 22,50g Poloxâmero 188 2,509 f Solução de ácido láctico (0,135 M] — 74,029 Imiquimod PG-LA 01 Á Imiquimod 0,90 g Poloxâmero 407 20,00 g | Solução de ácido láctico (0,125 M) 79,029 e PG-LAO1 Poloxâmero 407 20,00 g Solução de ácido láctico (0,125 M) — 79,02g ' 20 4.1.2. Condições experimentais Os experimentos de difusão/liberação de imiquimod foram realizados com células Franz com uma área de difusão afetiva de 1,76 cm? e um volume de compartimento de recebimento de 14 ml: o compartimento doador continha cerca de 2 g de formulação de gel, enquanto o comparti- —mento de recebimento foi enchido com solução de ácido láctico 0,1 M (pH = 3,5). Entre os dois compartimentos, uma membrana de acetato de celulose (MWCO = 23000) foi interposta. Os experimentos foram efetuados a 37ºC usando-se um banho de recirculação e o fluido na câmara receptora foi agitado continuamente a 300 rpm. Em intervalos de tempo pré-fixados, a fase de recebimento foi completamente retirada e substituída por solução ácida fresca. A solução de recebimento foi submetida a análise de UV para imiquimod.

4.2. Resultados e discussão O fluxo de imiquimod através da barreira artificial é alto (1,95x10 gem?s) e constante (quase para a primeira hora), sugerindo que a transferência do fármaco através da membrana não afeta as cinéticas de 5 imiquimod através dos géis de poloxâmero.

Os perfis de imiquimod de formulações de gel são muito f diferentes daqueles da solução, mas muito similar entre eles. Imiquimod se difunde através da matriz de gel com taxa relativamente alta: após 6 horas, cerca de 44,4% para formulação de imiquimod PG-LA 01 e cerca de 48,3% para Imiquimod PPG-LAO1 estava na fase de recebimento da célula de Franz. Os perfis de difusão do fármaco para ambos as formulações de gel ' são lineares, sugerindo cinéticas de ordem pseudozero: os fluxos de imiquimod através da matriz de gel são 2,00x107 gem?-s* para imiquimod i PG-LA 01 e 2,19x107 gcom?s” para sistema de imiquimod PPG-LAO1 (Figura 11). Estas descobertas conduziram a conclusão que a taxa de . difusão de fármaco através de ambos os sistemas examinados não difere significantemente e demonstra que a composição do material de gelificação não tem efeito relevante na difusão de imiquimod no gel: as dimensões ' 20 moleculares pequenas (baixo peso molecular) do ativo favorecem seu : movimento através da estrutura micelar de gel.

Conforme o experimento procede, o polímero gradualmente se dissolve no líquido que passa na membrana. O fluxo do líquido, em contracorrente a fármaco, pode alterar a difusão da molécula ativa de doar ao compartimento de recebimento. Contudo, este efeito é insignificante: o fluxo de imiquimod através da membrana é dez vezes mais alto do que seu fluxo através dos sistemas de poloxâmero.

5. Exemplo: Teste de penetração de imiquimod

5.1. Composições e condições experimentais

5.1.1. Composições As composições submetidas ao teste foram: «0,9% de Imiquimod — 15% de HP-B-CD em solução de ácido láctico 0,1 M 0,9% de Imiquimod em 19% de gel de Poloxâmero 407 contendo 15% de HP-B-CD (ácido láctico 0,1 M) 0,9% de Imiquimod em dispersão de lipossomo (1% de lecitina desojaem solução de ácido láctico 0,1 M)

5.1.2. Condições experimentais A bexiga de porcos fêmeas de 6-9 meses de idade foi usada: imediatamente após a excisão, a uretra foi cortada e o epitélio da bexiga (BE) foi seccionado para obter peças de cerca de 3 cm? de área. Cada porção de epitélio foi montada entre os compartimentos de uma célula de Franz com a superfície interna faceada para cima. Como fase de ' recebimento (compartimento de fundo), solução de tampão de fosfato 0,1 M (pH 7,4) foi usada: ela foi mantida sob agitação (cerca de 300 rpm) a 37ºC F durante o experimento. Uma das formulações reportadas representa a fase doadora (compartimento de topo): a formulação (2 g) foi introduzida no compartimento doador após a temperatura do aparelho alcançar temperatura . de 37ºC. No final do experimento (4 horas após o começo), BE removido a partir da célula de difusão foi totalmente lavado com água destilada para remover excesso de formulação e cuidadosamente limpo com papel de ' 20 tecido Em seguida, BE foi congelado e seccionado usando-se micrótomo criostático. Cinco seções sucessivas de BE (cada uma de 100 um de espessura) foram introduzidas em um tubo, adicionado 5 ml de ácido láctico (92%) e mantido sob oscilação durante a noite. A fase líquida foi filtrada (0,22 um) e ensaiada por HPLC para imiquimod.

5.2. Resultados A figura 12 representa os resultados obtidos reportando a quantidade de imiquimod recuperada no BE após 4 horas de contato com a formulação (dados são normalizados para a área de absorção). Os dados são a média de 3 experimentos (solução e lipossomos) ou 6 experimentos (formulação de gel). A formulação de gel afeta a absorção de imiquimod no epitélio da bexiga: a quantidade de ativo liberada do gel e recuperada em BE é mais baixa do que aquela liberada da solução. É interessante notar que a quantidade de imiquimod formulado em lipossomos e presente no BE é maior do que aquela da solução: este resultado sugere um efeito de promoção de vesículas de lipídeo na absorção do fármaco.

6. Exemplo: Solubilidade, densidade e viscosidade de composições diferentes compreendendo imiquimod

6.1. Solubilidade

6.1.1. Composições A solubilidade de imiquimod foi determinada em sistemas de solvente diferentes: esoluções de ácido láctico — 0,025, 0,05, 0,1 e 0,2 M ' esolução de ácido láctico 0,1 M contendo 5 ou 15% de HP-B-CD esolução de ácido láctico 0,1 M contendo 5, 16 e 20 % de i Poloxâmero 407 «solução de ácido láctico 0,1 M contendo 5 ou 15% de HP-B-CD e 16% de Poloxâmero 407 , esoluções de ácido glicólico 0,1 M, ácido tartárico e ácido glutâmico e«DMSO ' 20 e N-metil-pirrolidona +PEG 400

6.1.2. Condições experimentais Uma quantidade excedendo a solubilidade de fármaco (2 g) foi adicionada aos sistemas de solvente diferentes (50 ml!) e agitada por 24 horas (400 rpm) a 25ºC. As dispersões foram centrifugadas a 10.000 rpm por 1o minutos e as fases líquidas coletadas e armazenadas à tempertura ambiente até quwe analisadas. A concentração de imiquimod nestas soluções foi espectrofotometricamente determinada (A= 319 nm) após diluição apropriada.

6.1.3. Resultados e discussão Na Tabela 8, os resultados obtidos são reportados. Os valores são a média de 3 determinações. A solubilidade de imiquimod em solução de ácido maleico será determinada em poucos dias. : : ; : omso a ba | : Tabela 8: Estudo de solubilidade de imiquimod em sistemas de solvente diferentes Os resultados obtidos indicam que: eum relacionamento linear entre ácido láctico e imiquimod existe (figura 13, topo): a solubilidade do fármaco aumenta como o aumento da concentração do ácido carboxílico eciclodextrina aumenta a solubilidade de imiquimod: também neste caso, o incremento de fármaco dissolvida é linearmente relacionado a quantidade de ciclodextrina empregada (figura 13, fundo). ePoloxâmero 407 tem o efeito negativo na solubilidade do fármaco: conforme a percentagem de polímero aumenta, a concentração de imiquimod na solução diminui.

* Quando ambos Poloxâmero 407 e ciclodextrina estão presen- tes na formulação, os efeitos opostos dos mesmos componentes são equilibrados e a solubilidade de imiquimod não foi substancialmente modifi- cada com relação àquela de solução de ácido láctico 0,1 M.

Na presença de glicólicos similares a ácidos carboxílicos, ácidos tartárico e glutâmico, a solubilidade do fármaco é mais baixa do que com ácido láctico (ácido glutâmico foi usado a uma concentração corres- pondente a sua solubilidade, isto é, 10,6 g/I). A solubilidade de imiquimod observada na presença de ácido tartárico pode ser explanada considerando as diferenças estruturais deste ácido (dicarboxílico) com relação aos outros compostos acídicos (ácidos hidroxil-carboxílico): o valor da solubilidade mais Ê baixa sugere o envolvimento da função alcoólica na formação de aduto fármaco/hidróxi-ácido carboxílico. Para ácido glutâmico, o papel do grupo Í hidroxila é desempenhado pelo grupo amino primária do amino ácido. B 15 eA solubilidade de imiquimod em solvente hidrofílico, não- aquoso, é muito baixa. f 6.2. Densidade

6.2.1. Composições A avaliação da densidade foi efetuada em 5 ml das seguintes composições: «solução de ácido láctico 0,1 M contendo 16 % de Poloxâmero 407 esolução de ácido láctico 0,1 M contendo 5 ou 15% de HP-B-CD e 16% de Poloxâmero 407 «solução de ácido láctico 0,1 M contendo 5 ou 15% de HP-B-CD, 16% de Poloxâmero 407, e 0,5 % de imiquimod «solução de ácido láctico 0,1 M contendo 5% de HP-B-CD e 0,5 % de imiquimod

8.2.2. Condições experimentais 5 medições foram feitas e os valores médios e desvios padrões foram calculados

8.2.3. Resultados

Tabela 9: Determinação da densidade

6.3. Viscosidade

6.3.1. Composições A viscosidade foi determinada nas seguintes composições: É 5 egel contendo 16% de Poloxâmero 407 | egel contendo 16% de Poloxâmero 407 e 15% de HP-B-CD egel contendo 16% de Poloxâmero 407 e 5% de HP-B-CD , +0.5% de imiquimod solução de ácido láctico (0,1 M) contendo 15% de HP-B-CD í 10 + 0,5% imiquimod solução de ácido láctico (0,1 M) contendo 5% de HP-BCD *0,5% de imiquimod formulação de gel contendo 16% de : Poloxâmero 407 e 15% de HP-B-CD 0,5% de imiquimod formulação de gel contendo 16% de Poloxâmero 407 e 5% de HP-B-CD

6.3.2. Resultados Na Tabela 10, as viscosidades dos outros sistemas são repor- tadas. Os valores são a média de 3 medições + S.D. [ermuação = | vesosadeamantnaso Loo .eeo eo le ==

Famsguimaa imiquimod 1 Spindle SC18 ? Fuso SC29 Tabela 10: viscosidade de gel (20 RPM) a 10, 25 e 37ºC Para as formulações estudadas, um comportamento significante- mente diferente foi observado em temperaturas diferentes: a 10 e 25ºC, a adição de ciclodextrina e/ou imiquimod à solução polimérica conduz ao aumento da viscosidade, enquanto, a 37ºC, a viscosidade é abaixada por ciclodextrina e aumentada pelo fármaco. " 7. Exemplo: Solubilidade de imiquimod em soluções de sal e em Solução de Urina Artificial Í 7.1. Composições : A solubilidade de imiquimod contido nas formulações de gel foi avaliada em várias soluções de sal.

O estudo foi realizado nas formulações " de imiquimod constituídas de: 0,9% de gel de imiquimod Poloxâmero 407 mg 160,162 HPBCD mg 50,025 Imiquimod mg 9,005 Ácido láctico (90,3%) mg 10,017 Água para Injeção q.b. mG 1000,000 0,5% de gel de imiquimod Poloxâmero 407 mg 160,157 HPRBCD mg 50,031 Imiquimod mg 5,002 Ácido láctico (90,3%) mg 10,024 Água para Injeção q.b. mg 1000,000 0,1% de gel de imiquimod Poloxâmero 407 mg 160,098 HPRBCD mg 50,013

Imiquimod mg 1,007 Ácido láctico (90,3%) mg 10,028 Água para Injeção q.b. mg 1000,000 Como solventes para o fármaco, as seguintes soluções foram empregadas: . Água .º Sulfato de Na = 10 mM . Fosfato de K 14 MM .º Bicarbonato de Na25 mM 10 .º AUS O pH foi corrigido para 6,50 + 0,05 com 1 HCI ] A Solução de Urina Artifical (AUS) tinha a seguinte composição: É Bicarbonato de Na 25 mM Ureia 170 mM Ácido úrico 0,4 MM - Creatinina 7 mM Cloreto de Na 90 mM Sulfato de Na 10 mM K,? fosfato de hidrogênio 7 mM K fosfato de di-hidrogênio 7 MM Cloreto de NH, 25 mM O pH foi corrigido para 6,50 + 0,05 com 1M HCI]

7.2. Condições experimentais Volumes pré-ligados de formulação e solvente foram transferidos em um frasco de 10 ml! de modo a obter misturas onde as proporções de volume de solvente/formulação foram 0,5, 1, 5 e 10. Estes sistemas foram mantidos sob agitação por períodos de tempo diferentes (25, 50, 240 e 240 minutos por 0,5, 1, 5 e 10 sistemas de proporção de volume de solven- te/formulação, respectivamente). Os tempos selecionados correspondem aos tempos presumíveis de formação de urina (taxa de produção de urina = 1 mi/min) (10 sistemas de proporção de volume para solvente/formulação no período de tempo aplicado de 240 minutos é mais baixo do que esperado porque o tempo calculado (500 minutos) excede o tempo eficaz de contato da formulação com a bexiga). Após isto, o pH de cada sistema foi medido. Os sistemas foram centrifugados a 5000 rpm por 15 minutos e as frações de líquido recuperadas submetidas à análise espectrofotométrica (A = 319 nm) para teor de imiquimod.

7.3. Resultados e discussão Os resultados (médias de 3 réplicas) são reportados como unidades de pH e como porcentagens de imiquimod precipitado nas seguintes tabelas 11 e 12. Tabela 11: Medições de pH HO | SO | H2KO.P/ | HCO? | A.ULS. | 0,9% de gel . imiquimod le | Jess om em les [3% | : le les lamjaso las [346 [ase | e 4 Íawslas (as aso aco | | o e asas [as Jaxo [5% | o lh Íssolaso [sm levo less | HO | SO | H2KO.P/ | HCO” | A.UL.S. | 0,5% de gel imiquimod le | | Jess eso [om tem lazm — | o Jos am/sso [a3s axo |am | oo [asslsss ae [ass [aos | do ls jas/aso ses ss Jem | o lh lass/ass ame less loco |

H2O | SO? | HAKO.P/ | HCO? | AUS. | 0,1% de gel imiquimod e | | Jess em Jem [om |amx — | oleo [amolas [am Caso Jon | o le - lseelace lar le%o Joss | Tabela 12: Precipitação de imiquimod : : | Proporção de sovtomentm Los 11 15 do | e a a qa ea : % Inicial [os [2246 | 4756 | 8354 | 7524 | . % de miquimo lo1 loco loco foco loco | : VV) nas 2% de los Jaco loco 7482 |o977 | | imguimos — — lot loco 1861000 lona

| o a a ea eee pure equestre] [ma — — Jon lomlocolosala2o | e, e deneelaess Imiguimos — — Jor locolo2s 0001120 | gua | | Proponso de scrtmutim [os T+ Ps Tso | E a rm aerea %.de FEFSPINIDE imauimos — — Jor loco looolocoloso | : : e i % Inítial [os — 2328] 2402 | 0660 | casa | . de imaumos — lot loco lomo s420 | ess] Os pHs das soluções diferentes (exceto AUS) foram corrigidos a ' cerca de 6,5. Tem-se notado que * um volume pequeno de solução (indiferente do tipo de sal) não é capaz de controlar o pH da mistura.

* Solução de A.U.S. e bicarbonato em alta proporção de volume com a formulação mostraram um pH não significantemente diferente de seu valorinicial.

* a quantidade de fármaco presente na formulação não alterou substancialmente a capacidade de tamponamento da solução de A.U.S e de Bicarbonato: uma leve diminuição no pH foi observada como a porcentagem de imiquimod na formulação diminuída (aumento de ácido láctico livre).

Diluição com água não determina uma precipitação significante do fármaco, independentemente da proporção de gel/solução: uma exceção é representada pelo sistema água/0,9%de gel de imiquimod (0.5:1 proporção de volume) para que uma diminuição consistente de concentração de fármaco solubilizada tenha sido observada (mais do que 30%). Com solução de tampão de fosfato, a precipitação do fármaco nãofoimacroscopicamente evidente: máx 4,29% de diminuição de fármaco em solução para a formulação contendo a quantidade mais alta de imiquimod (0,9%) e na proporção de diluição máxima. Entre os ânions, o bicarbonato determina a maior precipitação do fármaco: a 10:1 de proporção de volume, uma precipitação quase completa de imiquimod foi observada para todas as formulações. A solução de sulfato separou o fármaco de 0,9% e 0,5% de géis, ' mas não de 0,1% do sistema de fármaco: para o gel contendo fármaco mais alto, um relacionamento parabólico entre porcentagem de imiquimod Í precipitado e proporção de diluição estava presente. ' 15 Os resultados obtidos com Solução de Urina Artificial podem ser atribuídos à presença de íons bicarbonato e sulfato, enquanto um efeito " aditivo/sinergístico do outro componente de AUS não pode ser excluído.

8. Exemplo: Comparação de formulações de imiquimod contendo porcentagens diferentes de poloxâmero i 20 8.1. Composições O trabalho experimental foi objetivado para comparar algumas características químico-físicas de formulações de imiquimod que contêm quantidades diferentes de poloxâmero 407 e de fármaco. Os sistemas investigados tinham as seguintes composições: Formulação 0,5% - 16 Poloxâmero 407 160,06 mg Imiquimod 5,02 mg HPBCD 50,06 mg Ácido láctico (90,3%) 10,00 mg Água para Injeção q.b. 1000,00 mg Formulação 0,1% - 16 Poloxâmero 407 160,05 mg

Imiquimod 1,01 mg í HPRBCD 50,02 mg Ácido láctico (90,3%) 10,00 mg Água para Injeção q.b. 1000,00 mg Formulação 0,5% - 10 Poloxâmero 407 160,03 mg Imiquimod 5,01 mg HPBCD 50,06 mg Ácido láctico (90,3%) 10,00 mg Água para Injeção q.b. 1000,00 mg

Formulação 0,1% - 10

' Poloxâmero 407 100,06 mg Imiquimod 1,04 mg

HPRBCD 50,01 mg

: 15 Ácido láctico (90,3%) 10,00 mg Água para Injeção q.b. 1000,00 mg

' 8.2. Resultados A viscosidade e o pH destas formulações foram determinados a eo 25 e 37ºC e os resultados são reportados na seguinte tabela 13: | Velocidade | Força Viscosidade | Velocidade | Força Viscosidade de rotação | de (cP) de rotação | de (cP) (rpm) torsão (rpm) torsão %) %) Irosmcas jon — fara Jor de lr loroz 326 |

(*) Fuso nr. 25 (*9) Fuso nr. 18

9. Exemplo: Avaliação in Vitro da toxicidade da formulação de imiquimod em epitélio de bexiga urinária de porco

9.1. Material e Métodos

9.1.1. Projeto de estudo O estudo foi efetuado no epitélio da bexiga de dois porcos usando-se os seguintes tratamentos: +0,1% de formulação de imiquimod (uma mistura de 16% de Poloxâmero, 5% de Hidroxipropil Beta ciclodextrina, em ácido láctico 0,1M) eVeículo (uma mistura de 16% de Poloxâmero, 5% de Hidroxipropil Beta ciclodextrina, em ácido láctico 0,1 M) «0,9% de solução de NaCl ' Porções de bexiga de porco foram colocadas entre as câmaras doadoras (tratamento) e aceitadoras de células de Franz. O meio de recebimento PBS (pH 7,4) foi usado em todos os experimentos. Uma hora ' 15 apóso experimento iniciado, o meio de recebimento foi retirado e analisado para teor de imiquimod. A bexiga foi recuperada; a porção tratada foi 7 separada e dividida em duas partes: uma foi ligada em formalina, embebida, seccionada e manchada (H&E) para exame histológico; e a outra parte foi submetida à extração e à análise do fármaco. | 20 9.1.2. Revisão de Peer . O exame histopatológico foi efetuado em cinco seções de bexiga urinária, isto é, 2 lâminas de porco 1 (etiquetadas imiquimod 1 e veículo 1), 2 lâminas de porco 2 (etiquetadas imiquimod 2 e veículo 2) e uma lâmina com a solução de NaCl (etiquetada controle). As laminas foram examinadas principalmente para integridade urotelial e quaisquer mudanças submucosais incluindo inflamação.

9.2. Resultados e conclusão O tecido urotélio e submucosal pareceu ser normal em todas as lâminas examinadas. Não existiram diferenças significantes entre tratamentos (Dados não mostrados).

9.3. Experimentos de penetração de imiquimod para avalia- ção de toxicidade

9.3.1. Objetivo De modo a avaliar a penetração da molécula ativa no epitélio vesical do porco, uma série de experimentos de penetração in-vitro foram efetuados.

As formulações de imiquimod investigadas foram: - 0,5% de imiquimod em solução de ácido láctico 0,1 M -0,5% de imiquimod -5% de HP-$B-CD em solução de ácido láctico 0,1 M - 0,5% de imiquimod em 16% de gel de poloxâmero 407 -0,5% de imiquimod -5% de HP-B-CD em 16% de gel de poloxâmero 407 ' A composição dos sistemas foi a seguinte: 0,5% de imiquimod em solução de ácido láctico 0,1 M : Imiquimod 5,020 mg . 15 Ácido láctico (90,3%) 10,020 mg Água para Injeção qb. 1000,00mg - 0,5% de imiquimod -5% de HP-B-CD em solução de ácido láctico0,1 M HP-B-CD 50,080 mg : 20 Imiquimod 5,020 mg Ácido láctico (90,3%) 10,080 mg Água para Injeção qb. —1000,000 mg 0,5% de imiquimod em 16% de gel de poloxâmero 407 ' Poloxâmero 407 160,020 mg Imiquimod 5,000 mg Ácido láctico (90,3%) 10,100 mg Água para Injeção q.b. 1000,000 mg 0,5% de imiquimod -5% de HP-B-CD em 16% de gel de poloxâmero 407 Poloxâmero 407 160,162 mg HP-B-CD 50,025 mg Imiquimod 5,005 mg

Ácido láctico (90,3%) 10,017 ma Água para Injeção q.b.1000,000 mg

9.3.2. Método A bexiga de um porco fêmea de 6-9 meses de idade foi seccio- nadae montada entre os compartimentos de uma célula de Franz com a superfície interna faceada para cima. Em todos os experimentos, solução de tampão de fosfato 0,1 M (pH 7,4) foi usada como fase de recebimento: ela foi mantida sob agitação (cerca de 300 rpm) a 37ºC durante o experimento. Uma formulação contendo imiquimod (2 g) representou a fase doadora. No final do experimento (4 horas após o começo), o epitélio da bexiga (BE) removido da célula de difusão foi totalmente lavado com água ' destilada para remover excesso de formulação e limpar cuidadosamente com papel de tecido. Em seguida BE foi congelado e seccionado usando-se i um micrótomo criostático. Cinco seções sucessivas de BE (cada uma de 100 : 15 um de espessura) foram introduzidas em um tubo, adicionadas de 5 ml de ácido láctico (92%) e mantidas sob oscilação durante a noite. A fase líquida ' foi filtrada (0,22 pm) e ensaiada por HPLC para imiquimod.

9.3.3. Resultados A figura 15 representa os resultados obtidos reportando a quantidade de imiquimod recuperada no BE após 4 horas de contato com a formulação (dados são normalizados para a absorção areal. Os dados são a média de 3 experimentos.

10. Exemplo: Farmacocinéticas e toxicidade de imiquimod intravesical: um estudo pré-clínico em porcos

10.1. Introdução Para testar se câncer de bexiga pode ser um alvo adequado para terapia de imidazoquinolina(aminas), expressão de TLR-7 em câncer de bexiga de humano e tecido de bexiga normal foram estudados. As amostras de tecido de porco foram estudadas para validação de modelo. Em seguida, para testar o potencial e riscos de imidazoquinolina(aminas) quan- do usadas intravesicalmente, um estudo de animal foi realizado em que três formulações intravesicais diferentes de imiquimod e um controle de veículo foram testados. O bem-estar do animal, propriedades farmacocinéticas, produção de citocina e histologia da parede da bexiga foram estudados.

10.2. Animais, Material e Métodos

10.2.1. Detecção de expressão de TLR-7 Quinze espécimes de câncer de bexiga humana embebidas em parafina e ligadas em formalina e seis espécimes de bexiga normal foram manchadas para TLR-7 por Mosaic Laboratories, LLC (Lake Forest, CA, USA). Adicionalmente, 28 espécimes de tecido humano normal diferente (outras do que bexiga) foram manchadas para expressão de TLR-7. Em adição, amostras de tecido de bexiga de porco, amígdala, coração, fígado, baço e rim foram testadas. ' A intensidade de manchamento de cada espécime foi julgada relativa à intensidade de uma lâmina de controle contendo uma seção i adjacente manchada com uma espécie irrelevante e anticorpo de isótipo : 15 equiparado. O manchamento da seção etiquetada com o controle de reagente negativo foi considerado "antecedente". As seções foram classifi- ' cadas conforme segue: 0 nenhum manchamento relativo ao antecedente, 1+ manchamento fraco, 2+ manchamento moderado, e 3+ manchamento forte. O manchamento positivo total (a soma de todo o manchamento a 1+, 2+, e 3+ foiregistrada para cada espécime. O H-score foi calculado baseado na : soma do produto de porcentagem de células manchadas em cada intensidade usando-se a seguinte equação: (3 x % manchamento de células a 3+) + (2 x % manchamento de células a 2+) + (1 x % manchamento de células a 1+). Os valores H-score variam de 0-300.

10.2.2. Modelo de porco Os procedimentos de animal foram realizados de acordo com o protocolo aprovado pelo Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC, Radboud University Nimegen Medicai Centre, The Netherlands) e em acordo com as regulações nacionais e Européias. Os porcos fêmeas —(DutchLandrace) foram usados para este estudo. O trato urogenital do porco se assemelha proximamente ao trato urogenital humano, e a forma do pênis e o divertículo prepucial previnem cateterização transuretral de um porco macho.

As porcas foram alojadas em gaiolas de bactéria de aço inoxidável suínas e alimentadas com alimento de suíno universal.

Os porcos foram divididos em quatro grupos de seis animais.

Os procedimentos experimen- tais foram realizados sob anestesia geral.

A pré-medicação contém uma misturade 10 mg/kg de cetamina e 0,5 a 1,0 mg/kg de midazolam i.m. em uma dose.

A manutenção da sedação foi feita pela mesma mistura em metade da dosagem todo 45 minutos.

A bexiga foi esvaziada sem trauma de sucção antes do início de tratamento (via 12 cateteres French Foley) e 50 mL do fármaco de estudo foi instilado intravesicalmente.

Os animais receberam uma solução de imiquimod 0,5% dissolvido em ácido láctico 0,1 M (grupo 1); uma solução de imiquimod 0,5% dissolvido em ácido láctico 0,1 É M, poloxâmero 407 16% como agente de emulsificação e HPRCD (hidroxipropil-B-ciclodextrina) 15% como agente de estabilização (grupo 2); Í uma solução de imiquimod 0,5% dissolvida em ácido láctico 0,1 M, ' 15 —poloxâmero 407 16% e HPRBCD 5% (grupo 3) ou um controle de veículo (ácido láctico 0,1 M) (grupo 4). O cateter foi preso e o fluido de instilação foi E retido na bexiga por 60 minutos, após o qual a bexiga foi esvaziada.

À bexiga não foi enxaguada após esvaziamento.

Amostras de sangue foram obtidas por análises farmacociné- i 20 ticas (PK), medições de citocina (11-6), medições de creatinina e contagem de célula de sangue.

A veia cefálica ou interna, externa, ou veia jugular comunal foi puncionada, dependendo do ângulo de punção e profundidade da penetração da agulha.

Amostras para contagem de sangue e medição de creatinina foram coletadas em tubos de 3 mL de potássio EDTA e tubos de 3 mL de lítio heparina com divisor de gel, respectivamente, antes da instilação e 60 minutos, 24 horas e 1 semana (imediatamente antes de cistectomia) após o começo de instilação.

As amostras foram armazenadas em gelo e transferidas para o laboratório para análise.

Amostras pra sangue para análise farmacocinética e medição de citocina foram coletadas em 4 mL de tubos de lítio heparina com divisor de gel antes da instilação do fármaco de estudo e 15, 30, 60, 120, 240 e 480 minutos após o começo de instilação de fármaco e também imediatamente antes de cistectomia. As amostras foram transferidas no gelo ao laboratório para processamento de plasma dentro de 30 minutos. O sangue foi centrifugado por minutos a 3.200 rpm a 4ºC, plasma foi coletado para análi- sedePKecitocina, armazenado a -80ºC, e carregado em gelo seco para análise.

O pós-tratamento evacua o conteúdo da bexiga e a urina evacuada imediatamente antes da necropsia foi coletada para análise de concentração de imiquimod. A urina foi congelada imediatamente e armazenada em tubos plásticos a -80ºC, e carregada em gelo seco para determinação de imiquimod. Análise de urina de haste foi realizada na urina ' de pré- e pós-tratamento evacuada e na urina coletada imediatamente antes da necropsia. As concentrações de imiquimod em plasma e urina foram determinadas por CHIMAN s.r.1. (Rottofreno, Italy) por espectroscopia de : 15 —massa-cromatografia líquida-espectroscopia de massa/espectroscopia de massa (LC-MSMS). As amostras de plasma para medição de IL-6 foram ] analisadas por Areta International s.r.1. (Gerenzano, Italy) usando-se o kit "Quantikine Porcine IL-6" (P6000; R&D System).

A temperatura corpórea foi medida retalmente antes e 1, 8 e 24 horase uma semana após início do tratamento. O bem-estar dos animais foi monitorado por uma equipe experimentada por uma lista protocolar selecionada de sinais possíveis e sintomas de toxicidade antes do experimento, imediatamente após a instilação e imediatamente antes de cistectomia.

24 horas após tratamento, três animais por grupo foram sacrifi- cados e cistectomizado e 7 dias após tratamento os animais restantes . suportaram o mesmo procedimento. O material a partir das bexigas foi coletado e processado para histologia conforme segue: Biópsias de bexiga de 1 cm? foram tomadas de domo, trigone, parede lateral direita e parede lateral esquerda e transferidas em 10% de formalina em PBS. O material foi embebido em parafina, seccionado, e manchado com H&E.

As laminas foram avaliadas para sinais de inflamação e reação alérgica em submucosa e mucosa. As anormalidades microscópicas foram classificadas como não reação, reação média, moderada ou severa.

10.3. Resultados

10.3.1. Expressão de TLR-7 A expressão de TLR-7 das 15 espécimes de câncer de bexiga humano demonstrou manchamento positivo em todas as amostras variando de 70% a 100% com uma média de 90% (SD=9%). O manchamento mais intenso foi membrana nuclear/perinuclear e manchamento citoplásmico mais fraco (figura 16). O H-score varia de 90 a 155 com uma média de 127 (SD=23). Manchamento positive foi também observado em 6 espécimes de epitélio de bexiga normal variando de 80% a 100% com uma média de 95% ' (SD=8%). O H-score varia de 100 a 230 com uma média de 179 (80=55). À expressão de TLR-7 foi observada em quase todos os tecidos diferentes da bexiga examinados (dados não mostrados), mais proeminentemente em . 15 tecido linfóide. A falta de manchamento foi observada no coração e músculos lisos. A expressão de TLR-7 em tecidos de porco (figura 17) foi ' similar aos tecidos humanos correspondentes.

10.3.2. Experimento de porco Vinte e quatro porcos com um peso médio de 57,1 kg (faixa, 40,0-85,0 kg) foram divididos em quatro grupos de seis porcos tratados com várias formulações de imiquimod como uma instilação intravesical de 50 minutos simples. Através de um período seguido de uma semana após instilação (3 porcos por grupo) nenhuma deterioração de bem-estar do animal foi observada. Sinais menores de toxicidade possivelmente devido ao fármaco de estudo foram observados em quatro porcos (isto é, baixa admissão de alimento em três porcos, grupo 1, 2 e 4 e perda de fezes em um porco, grupo 1). Não existiram outros sinais de animal com bem-estar prejudicado. A temperatura corpórea do pós-tratamento não foi influenciada pela instilação do fármaco de estudo e comparável com a temperatura corpórda do pós-tratamento para todos os grupos de tratamento. Embora um leve aumento nos níveis de creatinina fosse observado uma semana pós-

instilação no grupo | e 2, possivelmente indicando leve prejuízo do rim, nenhuma correlação óbvia com modalidades de tratamento.

Valores de hematologia estavam dentro da faixa normal com exceção de um porco no grupo 1 que mostrou valores normais de — hematologia (concentração de hemoglobina 2,5 mmol/l, hematócrito 12%, contagem de trombócito 18 x10%L, contagem de leucócito 8,8 x10º/L no final do período de instilação de 50 minutos). Contudo, a T=24h quase todos os valores hematológicos deste animal estavam dentro da faixa normal, exceto para a contagem de trombócito (53 x 10ºL), que estava dentro da faixa normal uma semana pós-instilação.

A análise de urina pós-tratamento (50 minutos após começo de ' instilação) mostrou altas quantidades of imiquimod (Tabela 14) para todos os grupos de tratamento, exceto para o grupo de controle de veículo.

A quantidade de imiquimod coletada na urina de animais no grupo 1 foi quase ' 15 2 vezes mais alta do que aquela de animais no grupo 2 e 3, com nenhuma diferença maior entre grupo 2 e 3. Após 24 horas, os níveis de imiquimod 7 estavam muito baixos (<5 ug/mL). Tabela 14 Grupo de pré-tratamento, a quantidade de tratamento final administrada e medida de Imiquimod Ú 20 gq de Imiquimod (ug, faixa, %); le Jeso O orem csuos»AAa | As análises farmacocinéticas revelaram somente pouca absor- ção sistêmica (tabela 15 e figura 18). Os níveis de plasma máximos de animais no grupo 1 foram três vezes mais altos do que os níveis de plasma máximos do grupo 2 e 3 de animais resultando em um AUC de duas vezes.

Após oito horas quase nenhum imiquimod (<2,10 ng/mL) pode ser detectado em qualquer plasma de porco.

Tabela 15 Parâmetros de plasma farmacocinéticos de

Imiquimod, por grupo de tratamento (médiatsd Cmáx = Concentração máxima; AUC = Área sob a Curva; Tip = meia-vida Os níveis de citocina IL-6 foram similares em todos os grupos, incluindo o grupo de controle de veículo, com níveis máximos de IL-6 alcançados oito horas após instalação dos fármacos de estudo (dados não mostrados). ' Exame macroscópico das bexigas resectadas não mostrou ' . anormalidades, exceto algumas áreas com uma aparência hemorrágica nos porcos sacrificados 24 horas pós-instilação de imiquimod (grupo 1-3), que foi , menos aparente ou ausente nos porcos sacrificados após sete dias. Exame microscópico das bexigas resectadas não revelou " diferença entre as quatro regiões mostradas (parede lateral esquerda, parede lateral direita, domo, trigone). Em muitos animais dos três grupos de . 15 tratamento, uma reação inflamatória moderada, predominantemente linfocítica foi vista 24 horas após instilação intravesical (figura 20), que diminuiu para inflamação média nos porcos sacrificados após sete dias. Vinte e quatro horas pós-instilação, vasculite foi observada em três porcos, igualmente divididos sobre os três braços de tratamento (figura 21). Miosite moderada foi observada em um porco no grupo 1. Epitélio de bexiga atípico reativo brando foi observado em quase todos os animais sacrificados após 24 horas que desapareceu com o tempo e não foi visível nos animais sacrificados após uma semana. Erosão, edema submucosal e sangramento foram brandas, nenhuma reação alérgica sendo observada.

10.4. Discussão Conforme já citado na descrição, imiquimod, um membro condutor da família imidazoquinolin(aminas), mostrou eficácia contra muitos tipos de tumor (Schón MP, Schôn M. Imiquimod: mode of action. Br J

Dermato!2007;157:8-13). O composto se liga a TLR-7, induzindo a produção e secreção de citocinas pró-inflamatórias, que induzem consecutivamente uma resposta imune mediada por célula específica de tumor profunda, que é muito similar ao. mecanismo de operação proposto de BCG.

Em adição, o imiquimod pode exercer efeitos apoptóticos diretos nas células de tumor, podem estimular expressão de gene independente de TLR, e podem interferir com trajetórias de sinalização de receptor de adenosina (Schôn MP, Schôn M.

Imiquimod: mode of action.

Br J Dermatol2007;157:8-13). Imiquimod é eficaz e bem tolerado como um agente tópico para o tratamento de várias lesões dermatológicas benignas e malignas.

As reações de pele locais são os efeitos colaterais mais comuns (Geisse J, ' Caro |, Lindholm J, Golitz L, Stampone P, Owens M.

Imiquimod 5% creme . para o tratamento de carcinoma de célula basal superficial: Resultados de dois estudos de duas fases Ill, controlados por veículo, randomizados.

J Am : 15 Acad Dermatol! 2004;50:722-33). Imiquimod foi estudado como modalidade de tratamento sistêmico: administração semanalmente de alta dose oral de 7 imiquimod foi estudada em um ensaio de fase | em pacientes com câncer (Witt PL, Ritch PS, Reding D, McAuliffe TL, Westrick L, Grossberg SE, : Borden EC.

Ensaio de Fase | de um imunomodulador oral e indutor de interferon em pacientes com câncer.

Cancer Res 1993;53:5176-5180). Eleitos colaterais de limitação de dose foram sintomas similares a influenza e linfocitopenia branda.

Câncer de bexiga pode ser um alvo interessante para tratamento com imiquimod: A administração intravesical de imiquimod se assemelha ao tratamento tópico de lesões de pele com contato direto com células malignas e citotoxicidade direta ou apoptose induzida por imiquimod independente de uma resposta imune.

Além disso, instilação intravesical evita perdas de primeiro metabolismo de passagem e permite que o efeito terapêutico de um fármaco seja localizado no sítio desejável com efeitos colaterais sistêmicos mínimos. * A evidência experimental que imidazoquinolina(aminas) pode, de fato, ser apropriada a modalidades de tratamento para câncer de bexiga foi proporcionada por Smith et al.

Estes investigadores mostraram que TLR-7 é expresso em linhas de célula de murino e humana de câncer de bexiga e que imidazoquinolina tem efeitos biológicos diretos nestas linhas de célula: a viabilidde da célula foi diminuída e apoptose e produção de citocina foi induzida.

Em adição, os resultados iniciais em um modelo de camundongo ortotópico, imune competente sugeriram efeitos de antitumor in vivo (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H, et al.

Antitumour effects of Imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder.

J Urol 2007;177:2347; Liu H, Schwartz MJ, Hwang DH, Scherr OS.

Tumour growth inhibition by an imidazoquinoline é associated com c-Myc down-regulation in urothelial cell carcinoma.

BJU Int 2008; 101 :894-901) : Para investigar se o alvo de imiquimod, TLR-7, é expresso, . expressão de TLR-7 de câncer de bexiga humano em 15 espécimes foi avaliada.

O manchamento positivo foi demonstrado em todas as amostras BR 15 com uma média de 90%, contudo, existe alguma heterogeneidade na intensidade que conduz a H-scores variando de 90 a 165. Estes resultados , demonstram que o câncer de bexiga pode ser um alvo atrativo para terapia de imiquimod. . p Para avaliar as farmocinéticas e possível toxicidade de instilações de imiquimod, experimentos em porcos foram realizados.

A : expressão de TLR-7 em amostras de tecido de porco e de bexiga humana foi similar, corroborando a validade do modelo de porco.

Três soluções intravesicais diferentes de imiquimod e um controle de veículo (solução de ácido láctico) foram estudadas.

Nenhuma das formulações testadas afetou o bem-estar gerado do porco conforme julgado por, por exemplo, aparência mucosal, comportamento, admissão de alimento/água, etc.

A análise de plasma mostrou somente pouca absorção sistêmica de imiquimod após instilação da bexiga, indiferente da formulação usada.

Consequentemente, altas quantidades de imiquimod foram recuperadas em urina de pós- instilação.

Contudo, os níveis de imiquimod de urina de pós-tratamento em animais tratados com imiquimod em uma solução de ácido láctico simples (grupo 1) foram quase duas vezes mais altos do que em animais tratados com formulações de imiquimod com poloxâmero e HPBCD (grupo 2 e 3). Além disso, o nível de plasma máximo médio de imiquimod no grupo 1 foi 3 vezes mais altos do que no grupo 2 e 3 de animais.

Esta diferença é provavelmente o resultado da bio-adesividde aumentada e prolongada das formulações de fármaco com poloxâmero e HPBCD para a parede da bexiga.

Contudo, este efeito foi de vida curta, visto que após oito horas quase nenhum imiquimod pode ser detectado no plasma do porco e após 24 horas quase nenhum imiquimod pode ser detectado na urina em qualquer dos animais, indiferente da formulação de imiquimod.

É possível que as formulações de fármaco 2 e 3 conduzam a níveis de membrana sustentada mais longos de imiquimod. : Os níveis de plasma IL-6 foram similares em todos os grupos, incluindo o grupo de controle de veículo, com valores máximos sendo alcançados oito horas após instilações da bexiga, mais provavelmente , 15 devido a reação de estresse após anestesia geral e cateterização da bexiga, preferivelmente do que imunoestimulação por imiquimod.

Além disso, os " níveis de imiquimod foram muito baixos para alcançar uma resposta de citocina sistêmica. : O exame histopatológico da parede da bexiga revelou a reação inflamatória pretendida nos grupos de imiquimod tratados.

À parte desta relação inflamatória pretendida, nenhuma anormalidade significante foi observada.

Somente a vasculite pode representar alguma reação tóxica, embora transiente: nenhuma vasculite foi observada nos animais sacrificados no dia 7. Não é possível produzir comparações intergrupo significativas com estes números pequenos por grupo, contudo, nenhuma diferença maior entre as soluções de imiquimod testadas foi observada.

Em conclusão, imiquimod intravesicalmente administrada em porcos é bem tolerado, não causa toxicidade na parede da bexiga e formulações com poloxâmero e HPBCD ficam mais tempo na bexiga com menos absorção sistêmica.

O perfil de segurança de imiquimod intravesical se compara favorável àquele de terapias atuais tal como BCG.

Considerando as características farmacocinéticas muito similares, um estudo de lesão com marcador de escala de dose de fase | será iniciado com imiquimod 0,5% em ácido láctico 0,1 M, poloxâmero 407 16% e HPBCD 5% em pacientes com NMIBC.

11. Exemplo: Otimização de formulação intravesical de um agonístico de receptor 7 similar à toll para terapia de câncer de bexiga

11.1. Introdução O objetivo deste estudo foi otimizar a formulação de imiquimod para aperfeiçoar a aplicação terapêutica. A inflamação local e sistêmica induzida por várias formulações de imiquimod foi comparada. A eficácia anticâncer de imiquimod em polímero termo sensível poloxâmero foi avaliada em modelos de câncer de bexiga ortotópicos de murino. ] 11.2. Material e Métodos

11.2.1. Camundongos Camundongos fêmeas de 6 a 8 semanas de idade C57BL/6 , 15 foram comprados de Charles River Laboratory (Wilmington, MA). Os camundongos deficientes de TLR7 foram uma doação de S. Akira (Osaka ' University, Osaka, Japan) e cruzados por 10 gerações com os camundongos antecedentes C57BL/6. Todos os camundongos foram alojados sob condi- ; ções padrões na Universidade da Califórnia, San Diego Animal Facility. Todos os procedimentos e protocolos receberam antes a aprovação pelo institutional review board of UCSD.

11.2.2. Reagentes Imiquimod (TMX, TMX-101, R-837) e LutrolOFi127 foram proporcionados por Telormedix SA (Bioggio, Switzerland). Ácido láctico foi comprador de Fisher Scientific (Pittsburgh, PA). 2-(hidroxipropil)-B- ciclodextrina (HPBCD) foi comprado de Sigma Aldrich (St. Louis, MO). Imiquimod foi dissolvido na concentração final de 1% (p/v, 41,7 mM) em 0,1% de ácido láctico (formulação de ácido láctico). Lutrol&OF127 (poloxâmero 407) foi adicionado a ácido láctico 0,1 M para produzir 20% (formulação de poloxâmero). 5% de HPBCD foi incorporado em 16% de Lutrol&F 127, em ácido láctico 0,1 M (formulação de poloxâmero-HPBCD). Todas as soluções foram filtradas por filtto de 0,22 mícron antes da administração.

11.2.3. Estudo farmacológico in vivo Camundongos foram anestesiados e cateterizados usando-se um cateter intravenoso 20G Teflon (Terumo Co. Somerset, NJ). 150, 500, ou 1500 nmoles de imiquimod em 50 ou 100 ul de veículos foram intravesicalmente administrados, respectivamente. Volume de 120 uL foi usado para instalação de 5000 nmoles. A solução de imiquimod foi mantida na bexiga por 20 min. Os níveis de citocinas foram medidos por ensaio de micro-conta Luminex (Invitrogen, Carlsbad, CA) de acordo com a instrução do fabricante. Os níveis de detecção mínimos de TNFa, e KC foram 5pg/mL, e 25pg/mL, respectivamente. O nível de imiquimod no soro foi analisado por : Chiman SRL (Rottofreno, Italy).

11.2.4. Exame histológico Aos camundongos foram administrados 100 ul de 0,1% de . 15 imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD uma vez, ou 50 uL três times em intervalos de quatro dias. 24 horas após a última administração, as " bexigas foram coletadas. As bexigas ligadas foram embebidas em parafina e foram manchadas com hematoxilin e eosin (H&E) por UCSD Cancer Center | Histology Core.

11.2.5. Implantação, tratamento e avaliação de tumor Após tratamento de 20 min com poli-L-lisina (0,1mg/mL), 1x10º células MB49 foram implantados conforme descrito anteriormente (Hegele A, Dalpke A, Barth P et al. Antineoplastic effect of immunostimulatory DNA (CpG-ODN) in a murine C57-BL6/MB-49 transitional cell carcinoma model. —Anticancer research. 2004; 24: 2225-30). O tratamento foi realizado no dia 3, 6 e 9. Os camundongos implantados com MB49 com nenhum tratamento ou tratamento com veículo serviram como controles. Os camundongos foram sacrificados no dia 11 e o peso da bexiga foi medido.

11.2.6. Análise estatística Um pacote de software (Prism 4.0, GraphPad, San Diego CA) foi usado para análises estatísticas conforme indicado nas legendas da figura. Um valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significante.

11.3. Resultados

11.31. Administração intravesical de inflamação sistêmica induzida por imiquimod Imiquimod é conhecido por ser insolúvel em água e modera- damente solúvel em solventes farmacêuticos comuns. Conforme mostrado acima solução de ácido acético e/ou solução de ácido láctico aumenta a solubilidade de imiquimod. Portanto, ácido láctico 0,1 M foi usado para preparar 1% de solução de imiquimod (-41.7mMM). Os camundongos receberam intravesicalmente 150, 500, 1500 e 5000 nmoles. Soros TNFa e KC foram induzidos em uma maneira dependente de dose (ácido táctico 0,1 M na figura 22A e B). Os níveis destes fatores na bexiga foram 10 a 100 " vezes mais baixos do que os níveis em seu soro (p<0,001 a 1500 e 5000 : nmoles, figura 22C e D).

11.3.2. Adição de polímero de poloxâmero previne absorção de , 15 imiquimod e indução sistêmica de citocinas Indução sistêmica de citocinas pró-inflamatórias causa anorexia " e fatiga, assim denominada “síndrome de doença” em hospedeiros (Hayashi T, Cottam HB, Chan M et al. Mast cell-dependent anorexia e hypothermia . induced by mucosal activation of Toll-like receptor 7. Am J Physiol Regullntegr Comp Physiol. 2008; 295: R123-32). Para evitar absorção sistêmica, bem como aumentar o contato local de imiquimod ao urotélio, polímero de poloxâmero termo sensível, Lutrol&F127, foi adicionado à formulação. Os níveis de TNFa (figura 23A e B) e KC (figura 23C e D) em ambos soro e bexiga foram significantemente reduzidos em camundongos que receberam 5000 nmoles de imiquimod nesta formulação comparada a formulação com ácido láctico. Para avaliar o efeito do polímero de poloxâmero na absorção sistêmica de imiquimod via urotélio da bexiga, os soros dos camundongos que receberam 1500 nmoles de imiquimod foram coletados em 2, 4,6,24 e 48 horas. Em camundongos que receberam imiquimod ou em ácido láctico sozinho ou em formulação de poloxâmero, concentração máxima de soro foi observada 2 horas após administração (figura 23E) (p<0.01). Os níveis de imiquimod de soro aumentaram em uma maneira dependente da dose (figura 23F). A adição de polímero de poloxâmero na formulação reduziu os níveis de soro de imiquimod em pontos de tempo de 2 horas (p<0,01, figura 23E) e em 5000 nmoles (p<0,01, figura 23F). Estes dados indicam que inclusão de poloxâmero na formulação reduz significantemente absorção sistêmica de imiquimod.

11.3.3. Incorporação de HPBCD restaura inflamação sistêmica e local Para aperfeiçoar a estabilidade física e alcançar uma solução homogênea clara e alcançar a liberação completa a partir do polímero de poloxâmero, imiquimod foi incorporado com HPBCD a poloxâmero em ácido à láctico (formulação de poloxâmero-HPBCD). Os níveis sistêmicos de TNFa e ] KC foram avaliados e comparados a outras formulações (figura 24). A adição do polímero de poloxâmero reduziu os níveis de soros KC a níveis de quase p 15 linhabase, comparados a formulação de ácido láctico (p<0,001, figura 24A e 24B). A adição de HPBCD à formulação de poloxâmero restaura significan- fo temente o nível de soro KC (figura 24B), mas não TNFa (figura 24A). Uma tendência similar foi vista nos níveis locais de KC (figura 24C). , 11.34. Avaliação de inflamação local na bexiga por adminis- tração intravesical de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD Para avaliar a inflamação local na bexiga, os camundongos receberam intravesicalmente 0,1% de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD como veículo. Influxo de células inflamatórias na bexiga foi avaliado por exame histológico (figura 25). Devido aos pacientes receberem tratamentos intravesical repetidos na aplicação clínica, nós testamos o efeito de administração repetida de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD nos dias O, 4, e 8. Após a primeira instilação de imiquimod, a infiltração da célula foi iniciada (figura 25C) comparada ao veículo sozinho (figura 25A). Após o terceiro tratamento, infiltração substancial de células mononucleares na lâmina propria na bexiga tratada com imiquimod foi observada (figura 25D), enquanto poucas células se infiltraram nas bexigas tratadas com veículo ou salina (figura 25B e E). À inflitração de célula reduzida foi observada na bexiga de camundongos deficientes de TLR7 tratados com imiquimod em formulação de poloxâmero- HPBCD similares aos camundongos tratados com salina, indicando que inflamação induzida por imiquimod na bexiga foi dependente de TLR7 (figura 25F).

11.3.5. Avaliação da eficácia terapêutica em modelos de câncer de bexiga ortotópica de camundongo Modelos de tumor de bexiga ortotópicos foram gerados usando- se MB49, uma linha de célula derivada de carcinoma de célula transicional dostratos urinários de murino. Os camundongos que suportam a o tumor de bexiga de MB49 foram tratados três vezes (dias 3, 6 e 9) com 50 ul de 0,1% ' de imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD como veículo. O grupo de tratamento mostrou cargas médias de tumor significantemente mais baixas comparadas aos grupos não-tratados ou tratados com veículo - 15 (p<0,01, figura 26). Desse modo, tratamento com imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD mantém o peso da bexiga próximo àquele de " camundongos não suportando tumor (naive).

11.4. Discussão . Neste estudo, polímero de poloxâmero termo sensível foi usado para assegurar contato local prolongado e minimizar absorção sistêmica de imiquimod. A formulação de polímero reduziu absorção sistêmica de imiquimod de urotélio de bexiga com infiltração local sustentada de células imunes. A incorporação de HPBCD na formulação aperfeiçoa a estabilidade física, alcançando uma solução homogênea clara. Esta formulação aperfeiçoa a indução de quimiocina local e demonstra efeitos antitumor em um modelo de camundongo ortotópico de câncer de bexiga. A administração intravesical de BCG é uma terapia imune bem estabelecida de câncer de bexiga superficial (Alexandroff AB, Jackson AM, O'Donnell MA, James K. BCG immunotherapy of bladder cancer: 20 years on. Lancet. 1999; 353: 1689-94). Embora bacillus BCG vivos proporcionem uma vantagem significante para evocar a resposta imune, o uso de BCG vivo requer precaução bionoçiva cuidadosa para a equipe de cuidado do coração e pacientes (Games J. Nursing implications in the management of superficial bladder cancer. Seminars in urologic oncology. 1996; 14: 36-40). BCG permanece somente parcialmente eficaz e efeitos colaterais sérios podem ocorrer, incluindo febre alta, pneumonia, hepatite e septicemia. Os esforços continuam a desenvolver terapia mais segura e mais eficaz para câncer de bexiga. Entre estas, tentativas de usar o agonístico de TLR individual para tratar o câncer de bexiga foram reportadas (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto H et al. Antitumor effects of imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. The Journal of urology. 2007; 177: 347-51; Mangsbo SM, Ninalga C, Essand M, Loskog A, Totterman TH. À terapia CpG é superior a BCG em um modelo de câncer de bexiga ortotópico ' e gera imunidade de CD4+ célula-T. J Immunother. 2008; 31: 34-42.) Repeated application of TLR9 agonist improved survival and reduced tumor loads (Mangsbo SM, Ninalga C, Essand M, Loskog A, Totterman TH. A BR 15 terapia CpG é superior a BCG em um modelo de câncer de bexiga ortotópico e gera imunidade CD4+ célula-T. J Immunother. 2008; 31: 34-42). O agonístico de TLR7 imiquimod afeta diretamente células de câncer de bexiga humano e de camundongo para induzir secreção de quimiocina e induzir ' apoptose e reduzir crescimento de tumor (Smith EB, Schwartz M, Kawamoto Hetal. Antitumor effects of imidazoquinolines in urothelial cell carcinoma of the bladder. The Journal of urology. 2007; 177: 2347-51).

Neste estudo foi demonstrado que imiquimod em formulação de poloxâmero-HPBCD pode iniciar uma reação imune inata local substancial. Devido a formulação ácida aumentar a solubilidade de imiquimod, imiquimod foiiniciamente testado dissolvido em ácido láctico 0,1 M que é comumente usado na indústria farmacêutica. Imiquimod na formulação de ácido láctico foi absorvido sistemicamente e causa a indução significante de inflamação sistêmica. Os bacilos de BCG vivos aderem à superfície da parede da bexiga (Atkins H, Davies BR, Kirby JA, Kelly JD. Polarisation of a T-helper cell immune response by activation of dendritic cells com CpG-containing oligonucleotides: a potential therapeutic regime for bladder cancer immunotherapy. British journal of cancer. 2003; 89: 2312-9; Akazawa T,

Masuda H, Saeki Y et al. Adjuvant-mediated tumor regression and tumor- specific cytotoxic response are impaired in MyD88-deficient mice. Cancer research. 2004; 64: 757-64) e proporcionam estimulação imune sustentada a urotélio e células imunes locis por períodos prolongados. O polímero de poloxâmero termosensível reduz a liberação de fármaco e mantém a concentração de fármaco na superfície das células e previne a absorção sistêmica do fármaco (Anderson BC, Pandit NK, Mallapragada SK. Understanding drug release from poly(ethylene oxide)-b-poli(propylene oxide)-b-poly(ethylene oxide) gels. J Control Release. 2001; 70: 157-67). Para recapitular as propriedades pró-inflamatóris vantajosas de infecção de bacilo de BCG vivo e reduzir absorção sistêmica, bem como aumentar o : contato superficial de fármaco, polímero de poloxâmero termosensível foi adicionado à formulação de ácido láctico. A formulação de poloxâmero reduz significantemente a absorção sistêmica de imiquimod através da superfície - 15 dabexigae reduza indução de citocina sistêmica a níveis de linha base. O componente deste estudo que foi de interesse particular foi " que a formulação incluindo HPBCD restaura a indução de KC por imiquimod comparada àquela do poloxâmero sozinho. Complexação usando HPBCD é . uma aproximação comum para aumentar a solubilidade e estabilidade do fármaco em meio aquoso (Brewster ME, Loftsson T. Ciclodextrinas as pharmaceutical solubilizers. Advanced drug delivery reviews. 2007; 59: 645-

66. [25] Bilensoy E, Rouf MA, Vural |, Sen M, Hincal AA. Mucoadhesive, thermosensitive, prolonged-release vaginal gel for clotrimazole:beta- ciclodextrina complex. AAPS PharmSciTech. 2006; 7: E38). Além disso, a inclusão de HPLCD nos polímeros é usada nos sistemas de distribuição vaginais (Chang JY, Oh YK, Kong HS et al. Prolonged antifungal effects of clotrimazole containing mucoadhesive thermosensitive gels on vaginitis. J Control Release. 2002; 82: 39-50.) Desde que 20% de poloxâmero termosensível foi observado solidificar na bexiga dentro de um curto tempo, causando a obstrução da uretra, a concentração de poloxâmero foi reduzida para 16%. Especificamente, a incorporação de HPBCD n formulação de polímero aperfeiçoa a solubilidade aquosa e imiquimod foi eficaz em efeito de antitumor em um modelo de camundongo ortotópico de câncer de bexiga. Esta descoberta suporta fortemente o uso da formulação de poloxâmero para estudos clínicos subsequentes. A terapia imune antitumor eficaz requer um recrutamento apropriado de células imunes Simons MP, O'Donnell MA, Griffith TS. O papel dos neutrófilos em imunoterapia de BCG para câncer de bexiga. Urologic oncology. 2008; 26: 341-5; Saban MR, Simpson C, Davis C et al. Discriminadores de resposta de bexiga de camundongo para Bacillus Calmette-Guerin (BCG) intravesical. BMC immunology. 2007; 8: 6). O exame histológico mostra infiltração substancial de célula imune na lâmina propria por imiquimod. A infiltração da célula na bexiga induzida por imiquimod Ú diminuída em camundongos deficientes de TLR7, indicando que a inflamação era dependente de TLR7, não causada por veículo ou dano mecânico. A integridade do urotélio foi bem mantida após administração BR 15 repetida de veículo sozinho (formulação de poloxâmero-HPBCD). Foi reportado que 1V270, um conjugado de fosfolipídeo de um agonístico de 7 TLR7, exerce excelentes e rápidas respostas imunes adaptativas de Th1. Devido a terapia imune por instilação de BCG vivo induzir a uma ativação . imune adaptativa tipo Th1 que é específica de tumor (Luo Y, Chen X, ObDonell MA. O papel das citocinas Th1 e Th2 na produção de IFN-gama induzida por BCG: promoção de citocina e estimulação de efeito de BCG. Cytokine. 2003; 21: 17-26), p conjugado de fosfolipídeo tem potencial para intensificar a potência terapêutica do agonístico de TLR7 não-conjugado em câncer de bexiga.

Em resumo, estes resultados sugerem que a formulação de poloxâmero e HPBCD de fármacos com baixa solubilidade pode exercer propriedades favoráveis, tais como perfil de liberação lento e maior contato superficial, enquanto evita possíveis efeitos adversos sistêmicos. As formulações otimizadas de poloxâmero- HPBCD podem aumentar a dose máxima tolerada de imiquimod e aperfeiçoar a complacência do paciente.

Claims (23)

1. r 1/20

   REIVINDICAÇÕES 7 1. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma imidazoquinolin(amina) e pelo menos um ácido orgânico ! selecionado a partir de ácido acético e/ou ácido láctico.
2. 2. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende ainda pelo menos um agente termossensível, em que pelo menos um agente termossensível é seleciona- do preferivelmente a partir de quitosano ou seus derivados, ou a partir de um copolímero poli(óxido de etileno)-poli(óxido de propileno)-poli(óxido de etile- no) (também denominado PEO-PPO-PEO ou poloxâmero).
3. 3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é se- lecionado a partir de um copolímero poli(óxido de etileno)-poli(óxido de pro- pileno)-poli(óxido de etileno) (também denominado PEO-PPO-PEO ou polo- —xâmero), ou a partir de quitosano, ou seus derivados.
4. 4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é se- lecionado a partir de um copolímero poli(óxido de etileno)-poli(óxido de pro- pileno)-poli(óxido de etileno) (também denominado PEO-PPO-PEO ou polo- xâmero).
5. 5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é se- lecionado a partir de um copolímero poli(óxido de etileno)-poli(óxido de pro- pileno)-poli(óxido de etileno) (também denominado PEO-PPO-PEO ou polo- —xâmero) incluindo Pluronic F 108 Cast Solid Surfacta; Pluronic F 108 Pastíille; Pluronic F 108 Prill; Pluronic F 108NF Prill (Poloxâmero 338); Pluronic F 127; Pluronic F 127 Prill; Pluronic F 127 NF; Pluronic F 127 NF 500 BHT Prill; Plu- ronic F 127 NF Prill (Poloxâmero 407); Pluronic F 38; Pluronic F 38 Pastille; Pluronic F 68; Pluronic F 68 Pastille; Pluronic F 68 LF Pastille; Pluronic F 68 NF Prill (Poloxâmero 188); Pluronic F 68 Prill; Pluronic F 77; Pluronic F 77 Micropastille; Pluronic F 87; Pluronic F 87 NF Prill (Poloxâmero 237); Pluro- nic F 87 Prill; Pluronic F 88 Pastille; Pluronic F 88 Prill; Pluronic F 98; Pluro-

   . 2/20 nic F 98 Prill; Pluronic L 10; Pluronic L 101; Pluronic L 121; Pluronic L 31; r Pluronic L 35; Pluronic L 43; Pluronic L 44; Pluronic L 44 NF (Poloxâmero 124); Pluronic L 61; Pluronic L 62; Pluronic L 62 LF; Pluronic L 62D; Pluronic É L 64; Pluronic L 81; Pluronic L 92; Pluronic L44 NF INH tensoativo (Poloxã- mero124);Pluronic N3; Pluronic P 103; Pluronic P 104; Pluronic P 105; Plu- ronic P 123 Surfactant; Pluronic P 65; Pluronic P 84; Pluronic P 85; e Polo- xâmero 403, ou é selecionado a partir de uma mistura formada por qualquer dois ou mais dos agentes termossensíveis anteriormente definidos.
6. 6. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que compreende ácido acéti- co e/ou ácido láctico em uma concentração de cerca de 0,025 M a cerca de 0,200 M, preferivelmente em uma concentração de cerca de 0,025 M a cerca de 0,100 M, ou em uma concentração de cerca de 0,100 M a cerca de 0,200 M, ou em uma concentração de cerca de 0,075 a cerca de 1,125 M.
7. 7. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que compreende imidazo- quinolin(amina) em uma quantidade de cerca de 0,005% (p/v) a cerca de 5% (p/v), incluindo uma quantidade de cerca de 0,01% (p/v) a cerca de 5% (p/v), uma quantidade de cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 4% (p/v), uma quantida- dede cercade 0,1% (p/v) a cerca de 3% (p/v), uma quantidade de cerca de 0,2% (p/v) a cerca de 2% (p/v), uma quantidade de cerca de 0,2% (p/v) a cerca de 1% (p/v), uma quantidade de cerca de 0,5% (p/v) a cerca de 1% (p/v) ou uma quantidade de cerca de 0,1% (p/v) a cerca de 1% (p/v).
8. 8. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a imidazoquinolin(amina) é selecionada a partir de um composto definido por um dos seguintes grupos (a)a(): (a) 1H-imidazo[4,5-c]quinolin4-amina ou um derivado do mesmo; (b) Um composto de imidazoquinolin(amina) selecionado a partir da seguinte fórmula (1):

   . 3/20 : Ro 2 À e 1 DR (RAS nº Rº o no qual: R', R? e Rº são cada independentemente selecionados de hidro- gênio; alquila cíclica de três, quatro, ou cinco átomos de carbono; alquila de —cadeianormal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono e alquila substituída de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquil contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; fluoralquila ou cloroalquila contendo a partir de um a cerca de dez átomos de carbono e um ou mais átomos de flúor ou cloro; alquenila de cadeia normal ou de ca- deia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquil de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um acerca de quatro átomos de carbono; hidroxialguila de um a cerca de seis átomos de carbono; alcoxialquila em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; aciloxialquila em que a porção aciloxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila

   ” 4/20 contém um a cerca de seis átomos de carbono, com a condição que qual- n quer tal grupo alquila, alquila substituído, alquenila, alquenila substituído, hidroxialquila, alcoxialquila, ou aciloxialquila não tem um átomo de carbono À totalmente substituído ligado diretamente ao átomo de nitrogênio; benzila; (feni)etila; e fenila; referidos substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo opcionalmente substituídos no anel benzeno por uma ou duas porções inde- pendentemente selecionadas a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro áto- mos de carbono, e halogênio, com a condição de que, quando o referido a- nel benzeno é substituído por duas de referidas porções, em seguida, as porções juntas não contêm mais do que seis átomos de carbono; -CHR,R,, em que R, é hidrogênio ou uma ligação carbono- carbono, com a condição de que, quando R, é hidrogênio, Rx é alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, 1-alquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono, tetra-hidropiranila, alcoxialquila em que a porção alcóxi contém um a cer- ca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piridila, e com a condição adicional de que, quando R, é uma ligação carbono-carbono, R, e Rx juntos formam um grupo tetra-hidrofuranila opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consis- tindo em: hidróxi ou hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono; alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um acercade oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, mor- folinometila, benzila, (fenil)jetila e fenila, a benzila, (fenil)etila ou fenila substituinte sendo opcionalmente substituída no anel benzeno por uma porção selecionada a partir do grupo consistindo em: metil, metóxi, ou halogênio; -C(Rs)(Rn)(X), em que Rg e Rr são selecionados independente- mente a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila de um a cerca de

   - 5/20 quatro átomos de carbono, fenila, e fenila substituída, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbo- : no, e halogênio;

   X é alcóxi contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de car- bono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquilamido, em que o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono,

   amino, amino substituído, em que o substituinte é alquila ou hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, alquiltio de um a cerca de quatro átomos de carbono, ou morfolinoalquila, em que a porção alquila con- tém um a cerca de quatro átomos de carbono;

   Rº é hidrogênio, C1.6 alquila, C1.8 alcóxi, ou halo;

   né 1,2,3,ouU4;

   Rº e Rº são cada independentemente hidrogênio, (C1-Ce)alquila, hidróxi (C;-Cs) alquila, amino(C,-Cs)alquita, aminossulfonila, (C;-Cs)alca- noila, arila, ou benzila, todos estes sendo opcionalmente substituídos por um ou mais grupos amino; ou

   Rº e Rº juntos com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam um grupo pirrolidino, piperidino, ou morfolino; as linhas tracejadas no anel de cinco membros da fórmula (1) acima denotam uma ligação opcional que liga um nitrogênio do anel de cinco membros ao carbono que está entre os dois nitrogênios do anel de cinco membros, e quando a ligação está presente, ou

   R'ouR'é ausente;

   desde que Rº e Rº juntos permitam formação de um íon de amônio quaternário no nitrogênio do elemento estrutural central N(RºXRº) ou por qualquer íon de amônio quaternária sendo provido por Rº e/ou Rº;

   ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos;

   (c) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula

   (1):

   , 6/20 - NHz . : = N | f | PA Pr Rui na qual:

   R11 é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de dez átomos de carbono, hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de carbono, aciloxialquila, em que a porção acilóxi é alcanoilóxi de doisa cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, referidos substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo opcionalmente substituídos no anel benzeno por uma ou duas porções selecionadas inde- pendentemente a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbo- no e halogênio, com a condição de que, se o referido anel benzeno é substi- tuído por duas das referidas porções, então as referidas porções juntas con- têm não mais do que seis átomos de carbono;

   R21 é selecionado a partir do grupo consistindo: em hidrogênio,

   —alquilade um a cerca de oito átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, os substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo opcionalmente substituí- dos no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecio- nadas do grupo consistindo em alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono e halogênio,

   coma condição de que, quando o anel benzeno é substituído por duas das referidas porções, então as porções juntas não contêm mais do que seis á- tomos de carbono; e cada R; é selecionado independentemente a partir do gru- po consistindo em alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, halo-

   r 7/20 gênio, e alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, e T n é um inteiro de O a 2, com a condição de que, se n é 2, então os referidos grupos R; contêm juntos não mais do que seis átomos de car- ! bono; ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos pre- cedentes; (d) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (11): mm NHa

   ÉS

   SD

   N - & na qual: R12 é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquenila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono e ci- cloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono; e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituída por alquil de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro áto- mos de carbono; e R22 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, os substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo substituídos opcionalmente no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas a partir do grupo consistindo em: alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo

   " 8/20 um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de cadeia normal ou de ca- " deia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, e halo- gênio, com a condição de que, quando o anel benzeno é substituído por du- as tais porções, então as porções juntas contêm não mais do que seis áto- —mosdecarbono;e cada R, é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em: alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono,e n é um inteiro de zero a 2, com a condição de que, se n é 2, en- tão os referidos grupos R2 contêm juntos não mais do que seis átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos pre- cedentes; (e) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (IV): x NHz

   FS 08

   RN Rad na qual: R23 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, —alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíficada de um a cerca de oito áto- mos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, os substituintes benzila, (fe- niDetila ou fenila sendo substituídos opcionalmente no anel benzeno por uma ou duas porções independentemente selecionadas a partir do grupo consis- tindo em: alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramíificada

   MM 9/20 de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com a condição 7 de que, quando o anel benzeno é substituído por duas tais porções, então as porções juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono; e ! cada R; é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em: alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada de um a cerca de quatro átomos de carbono, e n é um inteiro de zero a 2, com a condição de que, se n é 2, en- tão os referidos grupos R3 contêm juntos não mais do que seis átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos pre- cedentes; (0 imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (V): : v

   NH " X

   OO

   N 2 Re na qual: R14 é -CHR/R,, em que R, é hidrogênio ou uma ligação carbono- carbono, com a condição de que, quando R, é hidrogênio, R é alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, 1-alquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono, tetra-hidropiranila, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de qua- tro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piridila, e com a condição adicional de que, quando R, é uma ligação carbono-carbono, R, e Rx formam juntos um grupo tetra-hidrofuranila opcionalmente substituído com um ou mais substitu-

   r 10/20 intes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo em: hi- f dróxi e hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono; Ro É selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, | alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, fenila, e fenila substituí- da em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio; e é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de quatro áto- mos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos pre- cedentes; (g) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (V): ví

   NH

   CANA

   DO bh, Rs na qual: R15 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio; alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono e alquila substituída de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de carbono, em que o subs- tituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; al-

   ” 11/20 quenila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de r dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia normal ou de ca- deia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, em que o : substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: cicloalquila con- tendotrêsa cerca de seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de carbono; alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; aciloxialquila, em que a porção acilóxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; benzila; (fenil)etila; e fenila; referidos substituintes benzila, (fe- nil)etila ou fenila sendo substituídos opcionalmente no anel benzeno por uma ouduas porções independentemente selecionadas a partir do grupo consis- tindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio, com a condição de que, quando referido anel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono; Ras É: x A.

   Rá no qual:

   Rs e Rr são selecionados independentemente a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de car- bono, fenila, e fenila substituída, em que os substituintes são selecionados a

   —partirdo grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio;

   X é selecionado a partir do grupo consistindo em: alcóxi conten-

   . 12/20 do um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquilamido, em que o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, amino, amino substituído no qual o substituin- te é alquila ou hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, cloro, hidróxi , 1-morfolino, 1-pirrolidino, alquiltio de um a cerca de quatro átomos de carbono; e Rs é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alcóxi de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono, halogênio, e alquila de cadeia normal ou de ca- deia ramíficada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos pre- cedentes; (h) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (VI): NH; vO

   N N DD"

   N | RÁ Ro na qual: mé1,2,0u3; Ra16 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio; alquila cíclica de três, quatro, ou cinco átomos de carbono; alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de dez átomos de car- bono e alquita substituída de cadeia normal ou de cadeia ramificada conten- do um a cerca de dez átomos de carbono, em que o substituinte é selecio-

   . 13/20 nado a partir do grupo consistindo em: cicloalquila contendo três a cerca de 1 seis átomos de carbono e cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituído por alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada : contendo um a cerca de quatro átomos de carbono; fluoroalquila ou cloroal- —quila contendo de um a cerca de dez átomos de carbono e um ou mais áto- mos de flúor ou cloro; alquenila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono e alquenila substituída de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistin- doem: cicloalquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono e ciclo- alquila contendo três a cerca de seis átomos de carbono substituída por al- quila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de qua- tro átomos de carbono; hidroxialquila de um a cerca de seis átomos de car- bono; alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono; aciloxialquila, em que a porção acilóxi é alcanoilóxi de dois a cerca de quatro átomos de carbono ou benzoilóxi, e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, com a condição de que qualquer tais gru- pos alquila, alquila substituída, alguenila, alquenila substituída, hidroxialquila, —alcoxialquila, ou acilóxi alquila não têm um átomo de carbono de carbono totalmente substituído ligado diretamente ao átomo de nitrogênio; benzila; (fenil)etila; e fenila; referidos substituintes benzila, (fenil)Jetila ou fenila sendo substituídos opcionalmente no anel benzeno por uma ou duas porções sele- cionadas independentemente a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cercade quatro átomos de carbono, alcóxi de um a cerca de quatro áto- mos de carbono, e halogênio, com a condição de que, quando o referido a- nel benzeno é substituído por duas de referidas porções, então as porções juntas contêm não mais do que seis átomos de carbono; e -CHR,R,, em que R, é hidrogênio ou uma ligação carbono- — carbono, com a condição de que, quando R, é hidrogênio, R é alcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, hidroxialcóxi de um a cerca de quatro átomos de carbono, 1-alquinila de dois a cerca de dez átomos de carbono,

   f 14/20 tetra-hidropiranila, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca : de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de qua- tro átomos de carbono, 2-, 3-, ou 4-piridila, e com a condição adicional de õ que, quando R, é uma ligação carbono-carbono, R, e Rx juntos formam um grupo tetra-hidrofuranila substituído opcionalmente com um ou mais substitu- intes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo em: hi- dróxi e hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono,

   Rag é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia normal ou de cadeia ramifi- cada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, morfolinometila, ben- zila, (feni)etila e fenila, os substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo substituídos opcionalmente no anel benzeno por uma porção selecionada a partir do grupo consistindo em: metila, metóxi, e halogênio; e

   -C(Rs)(R1)(X), em que:

   Rs e Rr são selecionados independentemente a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, alquila de um a cerca de quatro átomos de car- bono, fenila, e fenila substituída, em que o substituinte é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de um a cerca de quatro átomos de carbo-

   no, alcóxide um a cerca de quatro átomos de carbono, e halogênio;

   X é selecionado a partir do grupo consistindo em: alcóxi conten- do um a cerca de quatro átomos de carbono, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, haloalquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, alquilamido no qual o grupo alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono, amino, amino substituído no qual o substituinte é alquila ou hidroxialquila de um a cerca de quatro átomos de carbono, azido, alquiltio de um a cerca de quatro átomos de carbono, e mor- folinoalquila, em que a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos decarbono,e

   Re é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, flúor, cloro, alquila de cadeia normal ou de cadeia ramíficada contendo um a

   - 15/20 cerca de quatro átomos de carbono, e fluoroalquila ou cloroalquila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de quatro átomos de carbono e pelo menos um átomo de flúor ou de cloro; ! e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos; () imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (VII): NH? VIH

   O Sta

   AS N = | Ro Re na qual: R17 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio; - CH2Rw, em que Ry é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de cadeia normal, de cadeia ramificada, ou alquila cíclica contendo um a cerca de dez átomos de carbono, alquenila de cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo dois a cerca de dez átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia normal ou de cadeia ramíificada contendo um a cerca de seis áto- mos de carbono, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis á- tomos de carbono, e feniletila; e -CH==CR7R7, em que cada Rz é indepen- dentemente aquila de cadeia normal, de cadeia ramíificada, ou alquila cíclica de um a cerca de seis átomos de carbono; Ro27 é selecionado a partir do grupo consistindo em: hidrogênio, —alquilade cadeia normal ou de cadeia ramificada contendo um a cerca de oito átomos de carbono, hidroxialquila de cadeia normal ou de cadeia ramifi- cada contendo um a cerca de seis átomos de carbono, alcoxialquila, em que a porção alcóxi contém um a cerca de quatro átomos de carbono e a porção alquila contém um a cerca de seis átomos de carbono, benzila, (fenil)etila e fenila, os substituintes benzila, (fenil)etila ou fenila sendo substituídos op-

   r 16/20 cionalmente no anel benzeno por uma porção selecionada do grupo consis- . tindo em: metila, metóxi, e halogênio; e morfolinoalquila, em que a porção alquila contém um a cerca de quatro átomos de carbono; õ Re7 e R77 são selecionados independentemente a partir do grupo consistindo em: hidrogênio e alquila de um a cerca de cinco átomos de car- bono, com a condição de que Re; e R77 tomados juntos contêm não mais do que seis átomos de carbono, e com a condição adicional de que, quando R;7 é hidrogênio, então Res; não é hidrogênio e R27 não é hidrogênio ou morfoli- noalquila, e com a condição adicional de que, quando Res, é hidrogênio, en- tãoR;;eRxz; não são hidrogênio; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos; 0) imidazoquinolin(amina) selecionada da seguinte fórmula (DO: mm

   NH

   N NX

   DI

   TJ XL

   RR (Rek na qual: Z é selecionado a partir do grupo consistindo em: -(CH2),y-, em que pé 1a 4; -(CH2)a-C(RpRe)(CH2))-, em que a e b são inteiros e a+hb é 0 a 3, Rp é hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos de carbono, e Re é sele- cionado do grupo consistindo em: alquila de um a quatro átomos de carbono, hidróxi,-ORr, em que Rr é alquila de um a quatro átomos de carbono, e - NReR'c, em que Rc e R'g são independentemente hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos de carbono; e -(CH2)a-(Y)-(CH2)-, em que a e b são inteiros e arbé 0a 3,e Y

   ” 17/20 é O, S, ou -NRy-, em quel Ry é hidrogênio ou alquila de um a quatro átomos r de carbono; e em que: : géOoute Rs é selecionado a partir do grupo consistindo em: alquila de um a quatro átomos de carbono, alcóxi de um a quatro átomos de carbono, e halogênio, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos; (k) imiquimod, tendo a fórmula específica 1-isobutil-1H-imi- dazo[4,5-clquinolin-4-amina, selecionado da seguinte fórmula (X): NH,

   N SE y

   FÊ AN N 0; e (1) resiquimod, compreendendo a seguinte fórmula (XI) ne ] NI E J — O QU)
9. 9. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que compreende ainda uma ou mais ciclodextrina(s), selecionada(s) a partir de a-ciclodextrinas, B- ciclodextrinas, yciclodextrinas, ó—ciclodextrinas e e-ciclodextrinas, preferi- velmente a partir de B-ciclodextrinas, incluindo hidroxipropil-B-ciclodextrina (HP-B-CD).
10. 10. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que compreende a(s) ciclodextrina(s) em uma quantidade de cerca de 0,1% (p/v) a cerca de 30% (p/v), tipicamente em

    . 18/20 uma quantidade de cerca de 1% (p/v) a cerca de 20% (p/v), preferivelmente r em uma quantidade de cerca de2 % (p/v) a cerca de 20% (p/v), mais preferi- velmente em uma quantidade de cerca de 5% (p/v) a cerca de 20% (p/v), Y ainda mais preferivelmente em uma quantidade de cerca de 5% (p/v) a cerca de15%(pW), e, mais preferivelmente, em uma quantidade de cerca de 10% (p/v) a cerca de 15% (p/v), ou em uma quantidade de cerca de 2% (pv) a cerca de 6% (p/v).
11. 11. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 10, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível exibe uma “temperatura de solução crítica inferior” (LCST) específica em uma faixa de cerca de 15 ºC a cerca de 35 ºC, mais preferi- velmente em uma faixa de cerca de 15 ºC a cerca de 30 ºC, ainda mais pre- ferivelmente em uma faixa de cerca de 15 ou 20 ºC ou 25 ºC a cerca de 30 ºC, mais preferivelmente em uma faixa de cerca de 15 ou 20 ºC a cerca de 25ºC.
12. 12. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 11, caracterizada pelo fato de que compreende pelo me- nos um agente termossensível em uma quantidade de cerca de 0,1% (p/v) a cerca de 40% (p/v), tipicamente em uma quantidade de cerca de 2% (p/v) a cerca de 30% (pW), preferiveimente em uma quantidade de cerca de 5% (p/v) a cerca de 30% (p/v), mais preferivelmente em uma quantidade de cer- ca de 10% (p/v) a cerca de 30% (p/v), e mais preferivelmente em uma quan- tidade de cerca de 10% (p/v) a cerca de 25% (p/v), ou em uma quantidade de cerca de 10% (p/v) a cerca de 20% (p/v).
13. 13. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que qualquer dos dois agentes termossensíveis estão contidos na composição farmacêutica como uma mistura em uma pro- porção de cerca de 1:20 a cerca de 20:1, incluindo uma proporção de cerca de 1:20, 2:20, 3:30, 4:20, 5:20, 86:20, 7:20, 8:20, 9:20, 10:20, 11:20, 12.20, 13:20, 14:20, 15:20, 16:20, 17:20, 18:20, 19:20, 20:20 (= 1:1), ou em uma proporção de cerca de 20:20, 19:20, 18:20, 17:20, 16:20, 15:20, 14:20, 13:20, 12:20, 11:20, 10:20, 9:20, 8:20, 7:20, 6:20, 5:20, 4:20, 3:20, 2:20, ou s 19/20 cerca de 1:20, ou uma faixa formada por qualquer dos dois valores de pro- porção conforme definida antes.
14. 14. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 13, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é Poloxâmero 407 e/ou Poloxâmero 188, ou uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188.
15. 15. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é Po- loxâmero 407 em uma quantidade de cerca de 10% (p/v) a cerca de 25% (pv), ou em uma quantidade de cerca de 12% (p/v) a cerca de 25% (p/v).
16. 16. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é Po- loxâmero 407 em uma quantidade (total) de cerca de 17,5% (p/v)/(p/p) a cer- ca de 22,5% (p/v)/(p/p), preferivelmente em uma quantidade (total) total de cercade 17,5% (p/v)/(p/p), de cerca de 18,0% (p/v)/(p/p), de cerca de 18,5% (P/v)/(p/p), de cerca de 19,0% (p/v)/(p/p), de cerca de 19,5% (p/v)/(p/p), de cerca de 20,0% (p/v)/(p/p), de cerca de 20,5% (p/v)/(p/p), de cerca de 21,0% (P/v)/(p/p), de cerca de 21,5% (p/v)/(p/p), de cerca de 22,0% (p/v)/(p/p), ou de cerca de 22,5% (p/v)/(p/p), ou qualquer faixa formada por qualquer de doisdestes valores.
17. 17. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que pelo menos um agente termossensível é uma mistura de Poloxâmero 407 e Poloxâmero 188 em uma quantidade (total) de cerca de 22,5% (p/v)/(p/p) a cerca de 27,5% (p/v)/(p/p), mais preferivelmente em uma quantidade total de cerca de 25% (p/v)/(p/p), e em uma proporção de Poloxâmero 407:Poloxâmero 188 de cerca de 15:5, 16:4, 17:3, 18:2, 19:1 ou 20:1, ou uma faixa formada por qualquer de dois destes valores de pro- porção, mais preferivelmente em uma proporção de cerca de 9,5:0,5, de cer- ca de 9:1, de cerca de 8,5:1,5, ou de cerca de 8:2, ou uma faixa formada por — qualquer de dois destes valores de proporção.
18. 18. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que compreende ácido acé-

    « 20/20 tico e/ou ácido lático em uma concentração de cerca de 0,025 a cerca de 0,2 * M, preferivelmente em uma concentração de cerca de 0,075 a cerca de 1,125 M, imidazoquinolin(amina) em uma quantidade de cerca de 0,1% (p/v) À a cerca de 1% (p/v), ciclodextrina(s) em uma quantidade de cerca de 2% (pN)acercade 6% (py) e Poloxâmero 407 em uma quantidade de cerca de 10% (p/v) a cerca de 25% (p/v), preferivelmente em uma quantidade de cer- ca de 12% (p/v) a cerca de 25% (p/v).
19. 19. Uso de uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado da mesma como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracte- rizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de distúrbios de pele incluindo condições pré-cancerosas, incluindo queratose actínica, verrugas genitais (condylomata), VIN (neopla- sia vulvar intraepitelial), VAIN (neoplasia vaginal intraepitelial), Molluscum contagiosum, cânceres de pele, incluindo carcinoma de célula basal, doença de Bowen, carcinoma de célula escamosa, melanomas malignos superfici- ais, doenças da bexiga, incluindo câncer de bexiga e cistite, câncer, incluin- do câncer peritoneal e câncer ovariano.
20. 20. Uso de uma imidazoquinolin(amina) ou um derivado da mesma como definido em qualquer das reivindicações 1 a 18, caracterizado pelofatode ser para o tratamento de doenças da bexiga.
21. 21. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de ser para o tratamento intravesical de doenças da bexiga.
22. 22. Uso de acordo com a reivindicação 20 ou 21, caracterizado pelo fato de que as doenças da bexiga são cistite e câncer de bexiga.
23. 23. Invenção como descrita e exemplificada no relatório descriti- vo do presente pedido de patente.