BR112014028221B1

BR112014028221B1 - Compostos antivirais, composição farmacêutica que os compreende e uso

Info

Publication number: BR112014028221B1
Application number: BR112014028221-8A
Authority: BR
Inventors: John O. Link; Jeromy J. Cottell; Teresa Alejandra Trejo Martin; Elizabeth M. Bacon
Original assignee: Gilead Pharmasset Llc
Priority date: 2012-05-16
Filing date: 2013-05-15
Publication date: 2022-05-03
Also published as: SI2850085T1; EP3239153B1; US20190337960A1; AU2013262874A1; US10800789B2; HK1205126A1; MX2014013660A; CN106432254A; ES2738012T3; CN109970749A; AU2013262874B2; EP2850085B1; US20130309196A1; JP2017160276A; EA201492002A1; CN104487442B; US20170342085A1; US20140316144A1; JP6209209B2; SI3239153T1

Abstract

COMPOSTOS ANTIVIRAIS. A revelação é relacionada a compostos antivirais de fórmula (I), composições que contêm tais compostos, e métodos terapêuticos que incluem a administração de tais compostos, bem como a processos e intermediários úteis para a preparação de tais compostos.

Description

[001] Esse pedido reivindica prioridade para o Pedido U.S. N° 13/831.116, depositado em 14 de março de 2013, e Pedido U.S. Provisório N° 61/647.966, depositado em 16 de maio de 2012, ambos aqui incorporados por referência em sua totalidade.

FUNDAMENTOS

[002] A Hepatite C é reconhecida como uma doença viral crônica do fígado que é caracterizada por doença hepática. Embora fármacos dirigidos ao fígado estejam em amplo uso e tenham demonstrado efetividade, a toxicidade e outros efeitos colaterais limitaram sua utilidade. Inibidores do vírus da hepatite C (HCV) são úteis para limitar o estabelecimento e progressão da infecção por HCV, bem como em ensaios diagnósticos para HCV.

[003] Há necessidade de novos agentes terapêuticos para HCV. Em particular, há necessidade de agentes terapêuticos para HCV que possuam ampla atividade contra genótipos de HCV (por exemplo, genótipos 1a, 1b, 2a, 3a, 4a). Há também umanecessidade particular por agentes que sejam menos suscetíveis à resistência viral. Mutações de resistência aos inibidores foram descritas para NS5A de HCV para genótipos 1a e 1b em “Antimicrobial Agents and Chemotherapy”, Setembro de 2010, Volume 54, páginas 3.641-3.650.

SUMÁRIO

[004] Em uma modalidade, a revelação fornece um composto de fórmula (I):

em que:

e W1a é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados independentemente de halo, alquil, haloalquil, aril opcionalmente substituído, heterociclo opcionalmente substituído e ciano; Y5 é -O-CH2-, -CH2-O-, -O-C(=O)- ou -C(=O)-O-; X5 é - CH2-CH2- ou -CH=CH-; E1a é -N(H)(alcoxicarbonil), - N(H)(cicloalquilcarbonil) ou -N(H)(cicloalquiloxicarbonil); ou E1a-V1a juntos são R9a; E1b é -N(H)(alcoxicarbonil), - N(H)(cicloalquilcarbonil) ou -N(H)(cicloalquiloxicarbonil); ou E1b-V1b juntos são R9b; V1a e V1b são selecionados independentemente de:

P1a é selecionado de:

P1b é selecionado de:

R9a e R9b são selecionados independentemente de:

ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste; desde que quando Y5 é -O-CH2-, ou -CH2-O-, então pelo menos um dos seguintes ocorre: (1) pelo menos um de V1a e V1b é selecionado de (af), (ag), (ah), (ai), (aj), (ak), (al), (am), (an), (ao), (ap) ou (aq); ou (2) P1a é selecionado de (be), (bf), (bg), (bh), (bi), (bj), (bk), (bl), (bm), (bn), (bo), (bq) ou (br); ou (3) P1b é selecionado de (be), (bf), (bg), (bh), (bi), (bj), (bk), (bl), (bm), (bn), (bo), (bp), (bq) ou (br).

[005] A revelação também fornece compostos isotopicamente enriquecidos que são compostos da revelação que compreendem um isótopo enriquecido em uma ou mais posições no composto.

[006] A presente revelação também fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto da revelação ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.

[007] A presente revelação também fornece uma composição farmacêutica para uso no tratamento de hepatite C (HCV). Em uma modalidade, a composição compreende pelo menos um agente terapêutico adicional para o tratamento de HCV. Em uma modalidade, o agente terapêutico é selecionado de ribavirina, um inibidores de NS3 protease, um inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV, um inibidores de alfa-glicosidase 1, um hepatoprotetor, a inibidor não nucleosídico de HCV polimerase, ou combinações destes. Em uma modalidade, a composição ainda compreende um inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV. Em uma modalidade, o inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV é selecionado de ribavirina, viramidina, levovirina, um L-nucleosídeo ou isatoribina.

[008] Em uma modalidade, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto como aqui descrito e pelo menos um inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável. Em uma modalidade, a composição ainda compreende um interferon, um interferon peguilado, ribavirina ou combinações destes. Em uma modalidade, o inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV é sofosbuvir.

[009] Em uma modalidade, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto como aqui descrito e pelo menos um inibidores de NS3 protease, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável. Em uma modalidade, a composição ainda compreende sofosbuvir.

[010] A presente revelação também fornece uma composição farmacêutica que ainda compreende um interferon ou interferon peguilado.

[011] A presente revelação também fornece uma composição farmacêutica que ainda compreende um análogo de nucleosídeo.

[012] A presente revelação também fornece uma composição farmacêutica, em que o referido análogo de nucleosídeo é selecionado de ribavirina, viramidina, levovirina, um L- nucleosídeo e isatoribina, e o referido interferon é α- interferon ou α-interferon peguilado.

[013] A presente revelação também fornece um método de tratamento de hepatite C, o referido método compreendendo a administração a um paciente humano de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da revelação.

[014] A presente revelação também fornece um método de inibição de HCV, que compreende a administração a um mamífero que sofre de uma condição associada à atividade de HCV de uma quantidade de um composto da revelação, eficaz para inibir HCV.

[015] A presente revelação também fornece um composto da revelação para uso em terapia médica (por exemplo, para uso na inibição da atividade de HCV ou tratamento de uma condição associada à atividade de HCV), bom como o uso de um composto da revelação para a fabricação de um medicamento útil para inibição de HCV ou para o tratamento de uma condição associada à atividade de HCV em um mamífero.

[016] A presente revelação também fornece processos sintéticos e novos intermediários aqui revelados que são úteis para a preparação de compostos da revelação. Alguns dos compostos da revelação são úteis para preparar outros compostos da revelação.

[017] Em outro aspecto, a revelação fornece um composto da revelação, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou pró- fármaco deste, para uso no tratamento profilático ou terapêutico de hepatite C ou um distúrbio associado à hepatite C.

[018] Em outro aspecto, a revelação fornece um método de inibição da atividade de HCV em uma amostra que compreende o tratamento da amostra com um composto da revelação.

[019] Verificou-se que compostos de fórmula (I) possuem atividade útil contra vários genótipos de HCV. Adicionalmente, certos compostos de fórmula (I) exibem potência significante contra variantes resistentes em, por exemplo, GT1.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[020] Será agora feita referência em detalhe a certas modalidades da revelação, cujos exemplos são ilustrados nas estruturas e fórmulas as acompanham. Embora a revelação seja descrita em conjunto com as modalidades enumeradas, será subentendido que elas não visam limitar a revelação a essas modalidades. Pelo contrário, a revelação visa englobar todas as alternativas, modificações e equivalentes, que podem ser incluídos dentro do escopo da presente revelação como definida pelas modalidades.

Compostos

[021] Os grupos “P” (por exemplo, P1a e P1b) definidos para a fórmula (I) aqui apresentada possuem uma ligação a um - C(=O)- de fórmula (I) e uma ligação a um grupo W1a. Deve ser subentendido que um nitrogênio do grupo P está conectado ao grupo -C(=O)- de fórmula (I) e que um carbono do grupo P está conectado ao grupo W1a.

[022] No grupo W1a, um grupo Y5 está presente. Quando aquele grupo Y5 é definido como grupo -O-CH2- ou -CH2-O-, aqueles grupos Y5 possuem uma direcionalidade. O grupo Y5 está conectado ao grupo W1a na mesma direcionalidade da esquerda para a direita em que cada um é desenhado. Portanto, por exemplo, quando Y5 é -O-CH2-, a estrutura diretamente a seguir é a seguinte:

[023] Por exemplo, quando Y5 é -CH2-O-, a estrutura diretamente a seguir é a seguinte:

[024] Na estrutura I, o grupo W1a possui uma direcionalidade da esquerda para a direita, como revelada em I e W1a, como desenhados.

em que: W1a é

[025] Por exemplo, o grupo P1a está conectado ao grupo imidazol de W1a, e o grupo P1b está conectado ao sistema em anel pentacíclico de W.

[026] “Alquil” é C1-C18 hidrocarboneto que contém átomos de carbono secundários, terciários ou cíclicos normais. Exemplos são metil (Me, -CH3), etil (Et, -CH2CH3), 1-propil (n-Pr, n-propil, -CH2CH2CH3), 2-propil (i-Pr, i-propil, - CH(CH3)2), 1-butil (n-Bu, n-butil, -CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1- propil (i-Bu, i-butil, -CH2CH(CH3)2), 2-butil (s-Bu, s- butil, -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propil (t-Bu, t-butil, - C(CH3)3), 1-pentil (n-pentil, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentil (- CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentil (-CH(CH2CH3)2), 2-metil-2-butil (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butil (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3- metil-1-butil (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-1-butil (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-hexil (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-hexil (- CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-hexil (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2- metil-2-pentil (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentil (- CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metil-3-pentil (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2- metil-3-pentil (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butil (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butil(-CH(CH3)C(CH3)3 eciclopropilmetil

[027] “Alquenil” é C2-C18 hidrocarboneto que contém átomos de carbono secundários, terciários ou cíclicos normais com pelo menos um sítio de insaturação, ou seja, uma ligação dupla sp2 carbono-carbono. Exemplos incluem, sem limitação, etileno ou vinil (-CH=CH2), alil (-CH2CH=CH2), ciclopentenil (-C5H7) e 5-hexenil (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).

[028] “Alquinil” é C2-C18 hidrocarboneto que contém átomos de carbono secundários, terciários ou cíclicos normais com pelo menos um sítio de insaturação, ou seja, uma ligação tripla sp carbono-carbono. Exemplos incluem, sem limitação, acetilênico (-CCH) e propargil (-CH2C=CH).

[029] “Alquileno” se refere a um radical hidrocarboneto saturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclico de 1-18 átomos de carbono, e que possui dois centros do radical monovalente derivados pela remoção de dois átomos de hidrogênio dos mesmos átomos de carbono ou de dois átomos de carbono diferentes de um alcano parente. Radicais alquileno típicos incluem, sem limitação, metileno (-CH2-) 1,2-etil (-CH2CH2-), 1,3-propil (-CH2CH2CH2-), 1,4-butil (- CH2CH2CH2CH2-), e semelhantes.

[030] “Alquenileno” se refere a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclico de 218 átomos de carbono, e que possui dois centros do radical monovalente derivados pela remoção de dois átomos de hidrogênio dos mesmos átomos de carbono ou de dois átomos de carbono diferentes de um alceno parente. Radicais alquenileno típicos incluem, sem limitação, 1,2-etileno (- CH=CH-).

[031] “Alquinileno” se refere a um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia ramificada ou linear ou cíclico de 218 átomos de carbono, e que possui dois centros do radical monovalente derivados pela remoção de dois átomos de hidrogênio dos mesmos átomos de carbono ou de dois átomos de carbono diferentes de um alcino parente. Radicais alquinileno típicos incluem, sem limitação, acetileno (- CsC-), propargil (-CH2CSC-) e 4-pentinil (-C^C^CH^CH).

[032] O termo “alcóxi” ou “alquiloxi”, como aqui usado, se refere a um grupo alquil anexado à porção molecular parente por meio de um átomo de oxigênio.

[033] O termo “alcoxicarbonil”, como aqui usado, se refere a um grupo alcóxi anexado à porção molecular parente por meio de um grupo carbonil.

[034] O termo “cicloalquil”, como aqui usado, se refere a um sistema em anel de hidrocarboneto saturado monocíclico, que possui três a sete átomos de carbono e nenhum heteroátomo. Exemplos representativos de grupos cicloalquil incluem, sem limitação, ciclopropil, ciclopentil e ciclohexil. Os grupos cicloalquil da presente revelação são opcionalmente substituídos com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes selecionados independentemente de alcóxi, alquil, aril, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquil, heterociclil, hidróxi, hidroxialquil, nitro e -NRxRy, em que o aril e o heterociclil são ainda opcionalmente substituídos com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente de alcóxi, alquil, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquil, hidróxi e nitro.

[035] O termo “cicloalquilcarbonil”, como aqui usado, se refere a um grupo cicloalquil anexado à porção molecular parente por meio de um grupo carbonil.

[036] O termo “cicloalquiloxi”, como aqui usado, se refere a um grupo cicloalquil anexado à porção molecular parente por meio de um átomo de oxigênio.

[037] O termo “cicloalquiloxicarbonil”, como aqui usado, se refere a um grupo cicloalquiloxi anexado à porção molecular parente por meio de um grupo carbonil.

[038] “Aril” significa um radical hidrocarboneto aromático monovalente de 6-20 átomos de carbono derivado pela remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono de um sistema em anel aromático parente. Grupos aril típicos incluem, sem limitação, radicais derivados de benzeno, benzeno substituído, naftaleno, antraceno, bifenil, e semelhantes.

[039] “Arilalquil” se refere a um radical alquil acíclico no qual um dos átomos de hidrogênio ligados a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical aril. Grupos arilalquil típicos incluem, sem limitação, benzil, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil, 2- naftofeniletan-1-il e semelhantes. O grupo arilalquil compreende 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, a porção alquil, incluindo grupos alcanil, alquenil ou alquinil, do grupo arilalquil possui 1 a 6 átomos de carbono e a porção aril possui 5 a 14 átomos de carbono.

[040] “Alquil substituído”, “aril substituído” e “arilalquil substituído” significam alquil, aril e arilalquil, respectivamente, nos quais um ou mais átomos de hidrogênio são, cada um independentemente, substituídos com um substituinte que não é hidrogênio. Substituintes típicos incluem, sem limitação: halo (por exemplo, F, Cl, Br, I), - R, -OR, -SR, -NR2, -CF3, -CCl3, -OCF3, -CN, -NO2, - N(R)C(=O)R, -C(=O)R, -OC(=O)R, -C(O)OR, -C(=O)NRR, -S(=O)R, -S(=O)2OR, -S(=O)2R, -OS(=O)2OR, -S(=O)2NRR, e cada R é independentemente -H, alquil, aril, arilalquil ou heterociclo. Grupos alquileno, alquenileno e alquinileno também podem ser similarmente substituídos.

[041] O termo “opcionalmente substituído”, em referência a uma porção particular do composto de fórmula (I) (por exemplo, um grupo aril opcionalmente substituído) se refere a uma porção que possui 0, 1, 2 ou mais substituintes.

[042] O símbolo “ ” em uma estrutura em anel significa que uma ligação é uma ligação simples ou dupla. Em um exemplo não limitante,

[043] “Haloalquil”, como aqui usado, inclui um grupo alquil substituído com um ou mais halogênios (por exemplo, F, Cl, Br ou I). Exemplos representativos de haloalquil incluem trifluormetil, 2,2,2-trifluoretil e 2,2,2-triflúor-1- (trifluormetil)etil.

[044] “Heterociclo” ou “heterociclil”, como aqui usado, inclui, apenas como exemplo e não como limitação, esses heterociclos descritos em Paquette, Leo A.; “Principles of Modern Heterocyclic Chemistry” (W.A. Benjamin, Nova York, 1968), particularmente os Capítulos 1, 3, 4, 6, 7 e 9; “The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs” (John Wiley & Sons, Nova York, 1950 até o presente), em particular Volumes 13, 14, 16, 19 e 28; e J. Am. Chem. Soc. (1960) 82: 5.566. Em uma modalidade específica, “heterociclo” inclui a “carbociclo” como aqui definido, em que um ou mais (por exemplo, 1, 2, 3 ou 4) átomos de carbono foram substituídos com um heteroátomo (por exemplo, O, N ouS). O termo heterociclo também inclui “heteroaril”, que é um heterociclo em que pelo menos um dos anéis heterocíclicos é aromático.

[045] Exemplos de heterociclos incluem, apenas como exemplo, e não limitação, piridil, diidropiridil, tetrahidropiridil (piperidil), tiazolil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiofenil oxidado com enxofre, pirimidinil, furanil, tienil, pirrolil, pirazolil, imidazolil, tetrazolil, benzofuranil, tianaftalenil, indolil, indolenil, quinolinil, isoquinolinil, benzimidazolil, piperidinil, 4-piperidonil, pirrolidinil, 2-pirrolidonil, pirrolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidroquinolinil, tetrahidroisoquinolinil, decahidroquinolinil, octahidroisoquinolinil, azocinil, triazinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 2H,6H-1,5,2-ditiazinil, tienil, tiantrenil, piranil, isobenzofuranil, cromenil, xantenil, fenoxatinil, 2H-pirrolil, isotiazolil, isoxazolil, pirazinil, piridazinil, indolizinil, isoindolil, 3H-indolil, 1H-indazolil, purinil, 4H- quinolizinil, ftalazinil, naftiridinil, quinoxalinil, quinazolinil, cinnolinil, pteridinil, 4H-carbazolil, carbazolil, β-carbolinil, fenantridinil, acridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiazinil, furazanil, fenoxazinil, isocromanil, cromanil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperazinil, indolinil, isoindolinil, quinuclidinil, morfolinil, oxazolidinil, benzotriazolil, benzisoxazolil, oxindolil, benzoxazolinil, isatinoil, e bis- tetrahidrofuranil:

[046] Apenas como exemplo, e não limitação, heterociclos ligados ao carbono estão ligados na posição 2, 3, 4, 5 ou 6 de uma piridina, posição 3, 4, 5 ou 6 de uma piridazina, posição 2, 4, 5 ou 6 de uma pirimidina, posição 2, 3, 5 ou 6 de uma pirazina, posição 2, 3, 4 ou 5 de um furano, tetrahidrofurano, tiofurano, tiofeno, pirrol ou tetrahidropirrol, posição 2, 4 ou 5 de um oxazol, imidazol ou tiazol, posição 3, 4 ou 5 de um isoxazol, pirazol ou isotiazol, posição 2 ou 3 de uma aziridina, posição 2, 3 ou 4 de uma azetidina, posição 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 de uma quinolina ou posição 1, 3, 4, 5, 6 7, ou 8 de uma isoquinolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados ao carbono incluem 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 5- piridil, 6-piridil, 3- piridazinil, 4-piridazinil, 5- piridazinil, 6-piridazinil, 2-pirimidinil, 4-pirimidinil, 5- pirimidinil, 6-pirimidinil, 2-pirazinil, 3-pirazinil, 5- pirazinil, 6-pirazinil, 2-tiazolil, 4-tiazolil ou 5- tiazolil.

[047] Apenas como exemplo, e não limitação, heterociclos ligados ao nitrogênio são ligados na posição 1 de uma aziridina, azetidina, pirrol, pirrolidina, 2-pirrolina, 3- pirrolina, imidazol, imidazolidina, 2-imidazolina, 3- imidazolina, pirazol, pirazolina, 2-pirazolina, 3- pirazolina, piperidina, piperazina, indol, indolina, 1H- indazol, posição 2 de um isoindol ou isoindolina, posição 4 de um morfolino, e posição 9 de um carbazol ou β-carbolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados ao nitrogênio incluem 1-aziridil, 1-azetedil, 1-pirrolil, 1-imidazolil, 1-pirazolil e 1-piperidinil.

[048] “Carbociclo” se refere a um anel saturado, insaturado ou aromático que possui até cerca de 25 átomos de carbono. Tipicamente, um carbociclo possui cerca de 3 a 7 átomos de carbono como um monociclo, cerca de 7 a 12 átomos de carbono como um biciclo, e até cerca de 25 átomos de carbono como um policiclo. Carbociclos monocíclicos tipicamente possuem 3 a 6 átomos do anel, ainda mais tipicamente 5 ou 6 átomos do anel. Carbociclos bicíclicos tipicamente possuem 7 a 12 átomos do anel, por exemplo, dispostos como um sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6] ou [6,6], ou 9 ou 10 átomos do anel dispostos como um sistema biciclo [5,6] ou [6,6]. O termo carbociclo inclui “cicloalquil”, que é um carbociclo saturado ou insaturado. Exemplos de carbociclos monocíclicos incluem ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, 1-ciclopent-1-enil, 1-ciclopent-2- enil, 1-ciclopent-3-enil, ciclohexil, 1-ciclohex-1-enil, 1- ciclohex-2-enil, 1-ciclohex-3-enil, fenil, espiril e naftil.

[049] O termo “amino”, como aqui usado, se refere a -NH2.

[050] O termo “quiral” se refere às moléculas que possuem a propriedade de não superposição do parceiro de imagem especular, enquanto o termo “aquiral” se refere às moléculas que são superponíveis ao seu parceiro de imagem especular.

[051] O termo “estereoisômeros” se refere aos compostos que possuem constituição química idêntica, mas diferem com relação ao arranjo dos átomos ou grupos no espaço.

[052] “Diastereômero” se refere a um estereoisômero com dois ou mais centros de quiralidade e cujas moléculas não são imagens especulares entre elas. Diastereômeros possuem propriedades físicas diferentes, por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, propriedades espectrais e reatividades. Misturas de diastereômeros podem se separar sob procedimentos analíticos de alta resolução como, por exemplo, eletroforese e cromatografia.

[053] “Enantiômeros” se referem a dois estereoisômeros de um composto que são imagens especulares não superponíveis entre eles.

[054] O termo “tratamento” ou “que trata”, na medida em que esteja relacionada a uma doença ou condição, inclui prevenção da ocorrência da doença ou da condição, inibição da doença ou condição, eliminação da doença ou condição e/ou alívio de um ou mais sintomas da doença ou condição.

[055] As definições e convenções estereoquímicas aqui usadas geralmente seguem S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill, “Dictionary of Chemical Terms” (1984) McGraw-Hill Book Company, Nova York; e Eliel, E. e Wilen, S., “Stereochemistry of Organic Componds” (1994) John Wiley & Sons, Inc., Nova York. Muitos compostos orgânicos existem em formas opticamente ativas, ou seja, eles possuem a habilidade para girar o plano da luz plana-polarizada. Na descrição de um composto opticamente ativo, os prefixos (D e L) ou (R eS) são usados para representar a configuração absoluta da molécula em torno de seu centro quiral (ou centros quirais). Os prefixos d e l ou (+) e (-) são empregados para designar o sinal de rotação da luz plana- polarizada pelo composto, com (-) ou 1 significando que o composto é levorrotatório. Um composto prefixado com (+) ou d é dextrorrotatório. Para certa estrutura química, esses estereoisômeros são idênticos, exceto que são imagens especulares entre eles. Um estereoisômero específico também pode ser denominado um enantiômero, e uma mistura desses isômeros é freqüentemente denominada uma mistura enantiomérica. Uma mistura 50:50 de enantiômeros é denominada uma mistura racêmica ou um racemato, que pode ocorrer quando não houve nenhuma estereosseleção ou estereoespecificidade em uma reação química ou processo. Os termos “mistura racêmica” e “racemato” se referem a uma mistura eqüimolar de duas espécies enantioméricas, desprovidas de atividade óptica. A revelação inclui todos os estereoisômeros dos compostos aqui descritos.

Pró-fármacos

[056] O termo “pró-fármaco”, como aqui usado, se refere a qualquer composto que, quando administrado a um sistema biológico, gera um composto da revelação que inibe a atividade de HCV (“o composto inibidor ativo”). O composto pode ser formado pelo pró-fármaco como resultado de: (i) reação química espontânea (ou reações), (ii) reação química catalisada por enzima (ou reações), (iii) fotólise e/ou (iv) reação química metabólica (ou reações).

[057] “Porção de pró-fármaco” se refere a um grupo funcional lábil que se separa do composto inibidor ativo durante metabolismo, sistemicamente, dentro de uma célula, por hidrólise, clivagem enzimática, ou por algum outro processo (Bundgaard, Hans, “Design and Application of Prodrugs” em “A Textbook of Drug Design and Development” (1991), P. Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, páginas 113-191). Enzimas que são capazes de um mecanismo de ativação enzimática com os compostos de pró-fármaco da revelação incluem, sem limitação, amidases, esterases, enzimas microbiana, fosfolipases, colinesterases e fosfases. Porções de pró- fármaco podem servir para aumentar a solubilidade, a absorção e lipofilia para otimizar a liberação, biodisponibilidade e eficácia do fármaco. Uma porção de pró-fármaco pode incluir um metabólito ativo ou o próprio fármaco.

[058] Porções de pró-fármaco exemplares incluem os aciloximetil ésteres hidroliticamente sensíveis ou lábeis - CH2OC(=O) R99 e aciloximetil carbonatos -CH2OC(=O)OR99, em que R99 é C1-C6 alquil, C1-C6 alquil substituído, C6-C20 aril ou C6-C20 aril substituído. O aciloxialquil éster foi primeiro usado como uma estratégia de pró-fármaco para ácidos carboxílicos e depois aplicado aos fosfatos e fosfonatos por Farquhar e cols. (1983) J. Pharm. Sci. 72: 324; também Patentes U.S. Nos 4816570, 4968788, 5663159 e 5792756. Subseqüentemente, o aciloxialquil éster foi usado para liberar ácidos fosfônicos através de membranas celulares e para aumentar a biodisponibilidade oral. Uma variante próxima do aciloxialquil éster, o alcoxicarboniloxialquil éster (carbonato), também pode aumentar a biodisponibilidade oral como uma porção de pró-fármaco nos compostos das combinações da revelação. Um aciloximetil éster exemplar é pivaloiloximetoxi (POM) -CH2OC(=O)C(CH3)3. Uma porção de pró-fármaco de aciloximetil carbonato exemplar é pivaloiloximetilcarbonato (POC) - CH2OC(=O)OC(CH3)3.

Grupos de proteção

[059] No contexto da presente revelação, grupos de proteção incluem porções de pró-fármaco e grupos químicos de proteção.

[060] “Grupo de proteção” se refere a uma porção de um composto que mascara ou altera as propriedades de um grupo funcional ou as propriedades do composto como um todo. Grupos químicos de proteção e estratégias para proteção/desproteção são bem conhecidos na técnica. Veja, por exemplo, “Protective Groups in Organic Chemistry”, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, Inc., Nova York, 1991. Grupos de proteção são freqüentemente utilizados para mascarar a reatividade de certos grupos funcionais, para ajudar na eficiência de reações químicas desejadas, por exemplo, por produção e quebra de ligações químicas de forma ordenada e planejada. A proteção de grupos funcionais de um composto altera outras propriedades físicas além da reatividade do grupo funcional protegido, por exemplo, a polaridade, lipofilia (hidrofilia) e outras propriedades que podem ser medidas por ferramentas analíticas comuns. Os próprios intermediários quimicamente protegidos podem ser biologicamente ativos ou inativos.

[061] Compostos protegidos também podem exibir propriedades alteradas e, em alguns casos, otimizadas, in vitro e in vivo, por exemplo, passagem através de membranas celulares e resistência à degradação enzimática ou seqüestração. Nesse papel, compostos protegidos com efeitos terapêuticos desejados podem ser denominados pró-fármacos. Outra função de um grupo de proteção é converter o fármaco parental em um pró-fármaco, em que o fármaco parental é liberado após conversão do pró-fármaco in vivo. Como os pró-fármacos ativos podem ser absorvidos mais eficazmente do que o fármaco parental, os pró-fármacos podem possuir potência in vivo maior do que o fármaco parental. Grupos de proteção são removidos in vitro, no caso de intermediários químicos, ou in vivo, no caso de pró-fármacos. Com intermediários químicos, não é particularmente importante que os produtos resultantes após desproteção, por exemplo, álcoois, sejam fisiologicamente aceitáveis, embora em geral seja mais desejável que os produtos sejam farmacologicamente inócuos.

[062] Grupos de proteção estão disponíveis, são comumente conhecidos e usados e são opcionalmente usados para evitar reações colaterais com o grupo protegido durante procedimentos sintéticos, ou seja, vias ou métodos para preparar os compostos da revelação. Na maioria dos casos, a decisão sobre quais grupos proteger, quando fazê-lo e qual a natureza do grupo químico de proteção “PG” dependerá da química da reação contra a qual será feita a proteção (por exemplo, condições ácidas, básicas, oxidativas, redutivas ou outras) e da direção da síntese desejada. PGs não precisam ser, e geralmente não são, os mesmos se o composto é substituído com múltiplos PG. Em geral, o PG será usado para proteger grupos funcionais como, por exemplo, grupos carboxil, hidroxil, tio ou amino e para, dessa forma, evitar reações colaterais ou para de algum outro modo facilitar a eficiência sintética. A ordem da desproteção para gerar grupos desprotegidos livres depende da direção da síntese desejada e das condições de reação a serem encontradas, e pode ocorrer em qualquer ordem, como determinado por aqueles habilitados na técnica.

[063] Vários grupos funcionais dos compostos da revelação podem ser protegidos. Por exemplo, grupos de proteção para grupos -OH (sejam eles hidroxil, ácido carboxílico, ácido fosfônico ou outras funções) incluem “grupos formadores de éter ou éster”. Grupos formadores de éter ou éster são capazes de funcionar como grupos químicos de proteção nos esquemas sintéticos aqui apresentados. No entanto, alguns grupos de proteção hidroxil e tio não são grupos de formação de éter nem de éster, como será compreendido por aqueles habilitados na técnica, e são incluídos com amidas, discutidos abaixo.

[064] Um número muito grande de grupos de proteção de hidroxil e grupos formadores de amida e reações de clivagem química correspondentes é descrito em “Protective Groups in Organic Synthesis”, Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nova York, 1991, ISBN 0-471-62301-6) (“Greene”). Veja também Kocienski, Philip J., “Protecting Groups” (Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova York, 1994), que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Em particular Capítulo 1, “Protecting Groups: an Overview”, páginas 1-20, Capítulo 2, “Hydroxyl Protecting Groups”, páginas 21-94, Capítulo 3, “Diol Protecting Groups”, páginas 95-117, Capítulo 4, “Carboxyl Protecting Groups”, páginas 118-154, Capítulo 5, “Carbonyl Protecting Groups”, páginas 155-184. Para grupos de proteção para ácido carboxílico, ácido fosfônico, fosfonato, ácido sulfônico e outros grupos de proteção para ácidos, veja Greene, como apresentado abaixo.

Estereoisômeros

[065] Os compostos da revelação podem ter centros quirais, por exemplo, átomos quirais de carbono ou fósforo. Os compostos da revelação, dessa forma, incluem misturas racêmicas de todos os estereoisômeros, incluindo enantiômeros, diastereômeros e atropisômeros. Além disso, os compostos da revelação incluem isômeros ópticos enriquecidos ou resolvidos em qualquer ou todos os átomos quirais assimétricos. Em outras palavras, os centros quirais evidentes pelas descrições são fornecidos como as misturas não racêmicas ou racêmicas. Tanto misturas racêmicas quanto as não racêmicas, além dos isômeros ópticos individuais isolados ou sintetizados, substancialmente livres de seus parceiros enantioméricos ou diastereoméricos, estão todos dentro do escopo da revelação. As misturas racêmicas são separadas em seus isômeros individuais, substancialmente opticamente puros, por meio de técnicas bem conhecidas como, por exemplo, a separação de sais diastereoméricos formados com adjuntos opticamente ativos, por exemplo, ácidos ou bases, seguida por conversão de volta nas substâncias opticamente ativas. Na maioria dos casos, o isômero óptico desejado é sintetizado por meio de reações estereospecíficas, que começam com o estereoisômero apropriado do material de partida desejado ou por meio de reações enantiosseletivas.

[066] Os compostos da revelação também podem existir como isômeros tautoméricos em certos casos. Embora somente um tautômero possa ser revelado, todas essas formas são contempladas dentro do escopo da revelação. Por exemplo, tautômeros de eno-amina podem existir para sistemas de purina, pirimidina, imidazol, guanidina, amidina e tetrazol, e todas as suas formas tautoméricas possíveis estão dentro do escopo da revelação.

Sais e hidratos

[067] Exemplos de sais fisiologicamente ou farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da revelação incluem sais derivados de uma base apropriada, por exemplo, um metal alcalino (por exemplo, sódio), um metal alcalino terroso (por exemplo, magnésio), amônio e NX4+ (em que X é C1-C4 alquil). Sais fisiologicamente aceitáveis de um átomo de hidrogênio ou um grupo amino incluem sais de ácidos orgânicos carboxílicos como, por exemplo, ácido acético, benzóico, lático, fumárico, tartárico, maléico, malônico, málico, isetiônico, lactobiônico e succínico; ácidos sulfônicos orgânicos, por exemplo, ácido metanossulfônico, etanossulfônico, benzenossulfônico e p-toluenossulfônico; e ácidos inorgânicos, por exemplo, ácido clorídrico, sulfúrico, fosfórico e sulfâmico. Sais fisiologicamente aceitáveis de um composto de um grupo hidróxi incluem o ânion do referido composto em combinação com um cátion adequado como, por exemplo, Na+ e NX4+ (em que X é selecionado independentemente de H ou um grupo C1-C4 alquil).

[068] Para uso terapêutico, sais de ingredientes ativos dos compostos da revelação tipicamente serão fisiologicamente aceitáveis, ou seja, serão sais derivados de um ácido ou base fisiologicamente aceitável. No entanto, sais de ácidos ou bases que não são fisiologicamente aceitáveis também podem encontrar utilização, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto fisiologicamente aceitável.Todos os sais, sejam eles derivados ou não de um ácido ou uma base fisiologicamente aceitável, estão dentro do escopo da presente revelação.

[069] Sais de metal tipicamente são preparados por reação do hidróxido de metal com um composto dessa revelação. Exemplos de sais de metal que são preparados dessa forma são sais que contêm Li+, Na+ e K+. Um sal de metal menos solúvel pode ser precipitado da solução de um sal mais solúvel por adição do composto de metal adequado.

[070] Além disso, sais podem ser formados a partir da adição ácida de certos ácidos orgânicos e inorgânicos, por exemplo, HCl, HBr, H2SO4, H3PO4 ou ácidos sulfônicos orgânicos, a centros básicos, tipicamente aminas, ou a grupos ácidos. Finalmente, deve ser subentendido que as composições aqui apresentadas compreendem compostos da revelação em sua forma não ionizada, bem como em forma zwitteriônica, e combinações com quantidades estequiométricas de água, como em hidratos.

[071] Também estão incluídos dentro do escopo dessa revelação os sais dos compostos parentais com um ou mais aminoácidos. Qualquer um dos aminoácidos naturais ou não naturais é adequado, especialmente os aminoácidos de ocorrência natural encontrados como componentes de proteínas, embora o aminoácido tipicamente seja aquele que abriga uma cadeia lateral com um grupo básico ou ácido, por exemplo, lisina, arginina ou ácido glutâmico, ou um grupo neutro como, por exemplo, glicina, serina, treonina, alanina, isoleucina ou leucina.

Métodos de inibição de HCV

[072] Outro aspecto da revelação está relacionado aos métodos de inibição da atividade de HCV que compreendem a etapa de tratamento de uma amostra suspeita de conter HCV com um composto ou composição da revelação.

[073] A etapa de tratamento da revelação compreende a adição do composto da revelação à amostra ou compreende a adição de um precursor da composição à amostra. A etapa de adição compreende qualquer método de administração, como descrito acima.

[074] Se desejado, a atividade de HCV após aplicação do composto pode ser observada por qualquer método, incluindo métodos diretos e indiretos de detecção de atividade de HCV. Métodos quantitativos, qualitativos e semiquantitativos de determinação da atividade de HCV são contemplados. Tipicamente, um dos métodos de avaliação descritos acima é aplicado; no entanto, qualquer outro método como, por exemplo, observação das propriedades fisiológicas de um organismo, vivo também é aplicável.

[075] Muitos organismos contêm HCV. Os compostos dessa revelação são úteis no tratamento ou profilaxia de condições associadas à ativação do HCV em animais ou no homem.

[076] No entanto, na avaliação de compostos capazes de inibição da atividade de HCV deve-se ter em mente que os resultados de ensaios enzimáticos nem sempre estão correlacionados aos ensaios de cultura de células. Dessa forma, um ensaio à base de células deve tipicamente ser a ferramenta de avalição primária.

Formulações farmacêuticas

[077] Os compostos dessa revelação são formulados com veículos e excipientes convencionais, que serão selecionados de acordo com a prática comum. Os comprimidos conterão excipientes, glidantes, enchimentos, aglutinantes e semelhantes. Formulações aquosas são preparadas em forma estéril e, quando destinadas à liberação por outra via que não a administração oral, geralmente serão isotônicas. Todas as formulações opcionalmente conterão excipientes como, por exemplo, aqueles apresentados no “Handbook of Pharmaceutical Excipients” (1986). Excipientes incluem ácido ascórbico e outros antioxidantes, agentes quelantes como, por exemplo, EDTA, carboidratos como, por exemplo, dextrina, hidroxialquilcelulose, hidroxialquilmetilcelulose, ácido esteárico e semelhantes. O pH das formulações varia de cerca de 3 até cerca de 11, mas é normalmente cerca de 7 a 10. Tipicamente, o composto será administrado em uma dose de 0,01 miligrama a 2 gramas. Em uma modalidade, a dose será de cerca de 10 miligramas a 450 miligramas. É contemplado que o composto pode ser administrado uma, duas ou três vezes ao dia.

[078] Em algumas modalidades, o composto é administrado por cerca de 12 semanas ou menos. Em modalidades adicionais, o composto é administrado por cerca de 12 semanas ou menos, cerca de 8 semanas ou menos, cerca de 8 semanas ou menos, cerca de 6 semanas ou menos, ou cerca de 4 semanas ou menos. O composto pode ser administrado uma vez ao dia, duas vezes ao dia, uma vez em dias alternados, duas vezes por semana, três vezes por semana, quatro vezes por semana ou cinco vezes por semana.

[079] Em modalidades adicionais, uma resposta virológica sustentada é obtida em cerca de 12 semanas, em cerca de 8 semanas, em cerca de 6 semanas ou em cerca de 4 semanas ou em cerca de 4 meses ou em cerca de 5 meses ou em cerca de 6 meses ou em cerca de 1 ano ou em cerca de 2 anos.

[080] Embora seja possível que os ingredientes ativos sejam administrados isoladamente, pode ser preferível apresentá- los como formulações farmacêuticas. As formulações, tanto para uso veterinário quanto para uso humano, compreendem pelo menos um ingrediente ativo, como definido acima, junto com um ou mais veículos aceitáveis para ele e, opcionalmente, outros ingredientes terapêuticos. O(s) veículo(s) deve ser “aceitável”, no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e fisiologicamente inócuo ao seu receptor.

[081] As formulações incluem aquelas adequadas às vias de administração citadas anteriormente. As formulações podem convenientemente ser apresentadas em forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer um dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia. As técnicas e formulações geralmente são encontradas em “Remington’s Pharmaceutical Sciences” (Mack Publishing Co., Easton, PA). Esses métodos incluem a etapa de colocação em associação o ingrediente ativo com o veículo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas colocando-se em associação uniforme e intimamente o ingrediente ativo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e depois, se necessário, modelagem do produto.

[082] As formulações da presente revelação adequadas à administração oral podem ser apresentadas como unidades distintas como, por exemplo, cápsulas, pílulas ou comprimidos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida óleo-em-água ou uma emulsão líquida água-em-óleo. O ingrediente ativo também pode ser administrado como um bolo, eletuário ou pasta.

[083] Um comprimido é feito por compressão ou modelagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Comprimidos compactados podem ser preparados por compressão em uma máquina adequada do ingrediente ativo em uma forma de fluxo livre como, por exemplo, um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, agente tensoativo ou dispersante. Comprimidos moldados podem ser feitos por modelagem em uma máquina adequada de uma mistura do ingrediente ativo em pó umedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou riscados e, opcionalmente, são formulados de modo a fornecer liberação lenta ou controlada por ele do ingrediente ativo.

[084] Para administração ao olho ou a outros tecidos externos, por exemplo, boca e pele, as formulações são preferivelmente aplicadas como uma pomada ou creme tópico contendo o(s) ingrediente(s) ativo(s) em uma quantidade de, por exemplo, 0,075 a 20% p/p (incluindo o(s) ingrediente(s) ativo(s) em uma faixa entre 0,1% e 20% em incrementos de 0,1% p/p como, por exemplo, 0,6% p/p, 0,7% p/p etc.), preferivelmente 0,2 a 15% p/p e, principalmente, 0,5 a 10% p/p. Quando formulados em uma pomada, os ingredientes ativos podem ser empregados com uma base de pomada parafínica ou miscível em água. Alternativamente, os ingredientes ativos podem ser formulados em um creme com uma base de creme óleo-em-água.

[085] Se desejado, a fase aquosa da base de creme pode incluir, por exemplo, pelo menos 30% p/p de um álcool poliídrico, ou seja, um álcool que possui um ou mais grupos hidroxil como, por exemplo, propileno glicol, butano 1,3- diol, manitol, sorbitol, glicerol e polietileno glicol (incluindo PEG 400), e misturas destes. As formulações tópicas podem desejavelmente incluir um composto que aumenta a absorção ou penetração do ingrediente ativo através da pele ou de outras áreas afetadas. Exemplos desses intensificadores de penetração dérmica incluem dimetil sulfóxido e análogos relacionados.

[086] A fase oleosa das emulsões desta invenção pode ser constituída por ingredientes conhecidos de uma forma conhecida. Embora a fase possa compreender simplesmente um emulsificante (também conhecido como emulgente), ela desejavelmente compreende uma mistura de pelo menos um emulsificante com uma gordura ou um óleo, ou com ambos, uma gordura e um óleo. De preferência, um emulsificante hidrofílico é incluído junto com um emulsificante lipofílico que atua como um estabilizante. Prefere-se também incluir tanto um óleo quanto uma gordura. Juntos, o(s) emulsificante(s) com ou sem estabilizante(s) constituem a denominada cera emulsificante, e a cera junto com o óleo e a gordura constituem a denominada base emulsificante de pomada que forma a fase oleosa dispersa das formulações de creme.

[087] Emulgentes e estabilizantes de emulsão adequados para uso na formulação da revelação incluem Tween® 60, Span® 80, álcool cetoestearílico, álcool benzílico, álcool miristílico, monoestearato de glicerila e lauril sulfato de sódio.

[088] A escolha de óleos ou gorduras adequados para a formulação se baseia na obtenção das propriedades cosméticas desejadas. O creme deve preferivelmente ser um produto não gorduroso, que não cora e lavável, com consistência adequada para evitar extravasamento dos tubos ou de outros recipientes. Alquil ésteres de cadeia linear ou ramificada, mono- ou dibásicos como, por exemplo, diisoadipato, estearato de isoacetila, diéster de propileno glicol de ácidos graxos de coco, miristato de isopropila, oleato de decila, palmitato de isopropila, estearato de butila, palmitato de 2-etilhexila ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecida como Crodamol CAP, podem ser usados, os últimos três sendo ésteres preferidos. Esses podem ser usados isoladamente ou em combinação, dependendo das propriedades necessárias. Alternativamente, são usados lipídeos com ponto de fusão elevado como, por exemplo, parafina macia branca e/ou parafina líquida ou outros óleos minerais.

[089] As formulações farmacêuticas de acordo com a presente revelação compreendem um ou mais compostos da revelação junto com um ou mais veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, outros agentes terapêuticos. Formulações farmacêuticas que contêm o ingrediente ativo podem estar em qualquer forma adequada para o método de administração desejado. Quando usados para uso oral, podem ser preparados, por exemplo, comprimidos, pastilhas, losangos, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dispersíveis, emulsões, cápsulas duras ou macias, xaropes ou elixires. Composições destinadas ao uso oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica para a fabricação de composições farmacêuticas, e essas composições podem conter um ou mais agentes, incluindo agentes adoçantes, agentes flavorizantes, agentes corantes e agentes conservantes, a fim de fornecer uma preparação palatável. Comprimidos contendo o ingrediente ativo misturado com excipientes atóxicos farmaceuticamente aceitáveis que são adequados à fabricação de comprimidos são aceitáveis. Esses excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, por exemplo, carbonato de cálcio ou sódio, lactose, monoidrato de lactose, croscarmelose sódica, povidona, fosfato de cálcio ou sódio; agentes de granulação e desintegrantes, por exemplo, amido de milho ou ácido algínico; agentes aglutinantes, por exemplo, celulose, celulose microcristalina, amido, gelatina ou acácia; e agentes lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem não ser revestidos ou revestidos por técnicas conhecidas que incluem microencapsulação para retardar a desintegração e adsorção no trato gastrintestinal e, dessa forma, fornecer uma ação sustentada ao longo de um período mais longo. Por exemplo, um material de retardo como, por exemplo, monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila isoladamente ou com uma cera, pode ser empregado.

[090] Formulações para uso oral também podem ser apresentadas como cápsulas duras de gelatina nas quais o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas macias de gelatina nas quais o ingrediente ativo é misturado com água ou um meio oleoso, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite de oliva.

[091] As suspensões aquosas da revelação contêm os materiais ativos misturados com excipientes adequados à fabricação de suspensões aquosas. Esses excipientes incluem um agente de suspensão como, por exemplo, carboximetilcelulose sódica, metilcelulose, hidroxipropil metilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto e goma acácia, e agentes dispersantes ou umidificantes como, por exemplo, uma fosfatida de ocorrência natural (por exemplo, lecitina), um produto da condensação de um óxido de alquileno com um ácido graxo (por exemplo, estearato de polioxietileno), um produto da condensação de óxido de etileno com um álcool alifático de cadeia longa (por exemplo, heptadecaetilenooxicetanol), um produto da condensação de óxido de etileno com um éster parcial derivado de um ácido graxo e um anidrido de hexitol (por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano). A suspensão aquosa também pode conter um ou mais conservantes como, por exemplo, etil ou n-propil p-hidróxi-benzoato, um ou mais agentes corantes, um ou mais agentes flavorizantes e um ou mais agentes adoçantes, por exemplo, sacarose ou sacarina.

[092] Suspensões oleosas podem ser formuladas por suspensão do ingrediente ativo em um óleo vegetal, por exemplo, óleo de amendoim, azeite de oliva, óleo de gergelim ou óleo de coco, ou em um óleo mineral, por exemplo, parafina líquida. As suspensões orais podem conter um agente espessante, por exemplo, cera de abelha, parafina rígida ou álcool cetílico. Agentes adoçantes, por exemplo, aqueles apresentados acima, e agentes flavorizantes, podem ser adicionados para fornecer uma preparação oral palatável. Essas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante como, por exemplo, ácido ascórbico.

[093] Pós e grânulos dispersíveis da revelação adequados à preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água fornecem o ingrediente ativo misturado com um agente dispersante ou umidificante, um agente de suspensão, e um ou mais conservantes. Agentes dispersantes ou umidificantes e agentes de suspensão adequados são exemplificados por aqueles revelados acima. Excipientes adicionais, por exemplo, agentes adoçantes, flavorizantes e corantes, também podem estar presentes.

[094] As composições farmacêuticas da revelação também podem estar na forma de emulsões óleo-em-água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, por exemplo, azeite de oliva ou óleo de amendoim, um óleo mineral, por exemplo, parafina líquida, ou uma mistura destes. Agentes emulsificantes adequados incluem gomas de ocorrência natural, por exemplo, goma acácia e goma tragacanto, fosfatidas de ocorrência natural, por exemplo, lecitina de soja, ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos de hexitol, por exemplo, monooleato de sorbitano, e produtos de condensação desses ésteres parciais com óxido de etileno, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano. A emulsão também pode conter agentes adoçantes e flavorizantes. Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes adoçantes, por exemplo, glicerol, sorbitol ou sacarose. Essas formulações também podem conter um demulcente, um conservante, um flavorizante ou um agente corante.

[095] As composições farmacêuticas da revelação podem estar na forma de uma preparação injetável estéril, por exemplo, uma suspensão aquosa ou oleaginosa injetável estéril. Essa suspensão pode ser formulada de acordo com a técnica conhecida usando aqueles agentes dispersantes ou umidificantes e agentes de suspensão adequados que foram mencionados acima. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril em um diluente ou solvente atóxico parenteralmente aceitável, por exemplo, como uma solução em 1,3-butano-diol, ou preparada como um pó liofilizado. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão água, solução de Ringer e solução isotônica de cloreto de sódio. Além disso, óleos fixos estéreis podem convencionalmente ser empregados como um solvente ou meio de suspensão. Para essa finalidade, qualquer mistura de óleos fixos pode ser empregada, incluindo mono- ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, ácidos graxos como, por exemplo, ácido oléico, podem, da mesma forma, ser usados na preparação de injetáveis.

[096] A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com o material carreador para produzir uma forma de dosagem única irá variar, dependendo do hospedeiro tratado e do modo de administração particular. Por exemplo, uma formulação de liberação temporizada destinada à administração oral a seres humanos pode conter aproximadamente 1 a 1.000 mg de material ativo composto com uma quantidade apropriada e conveniente de material carreador que pode variar de cerca de 5 a cerca de 95% das composições totais (peso:peso). A composição farmacêutica pode ser preparada para fornecer quantidades facilmente mensuráveis para administração. Por exemplo, uma solução aquosa destinada à infusão intravenosa pode conter de cerca de 3 a 500 μg do ingrediente ativo por mililitro de solução a fim de que possa ocorrer a infusão de um volume adequado em uma taxa de cerca de 30 ml/h.

[097] Formulações adequadas à administração ao olho incluem colírios, nos quais o ingrediente ativo está dissolvido ou suspenso em um veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente ativo. O ingrediente ativo está preferivelmente presente nessas formulações em uma concentração de 0,5 a 20%, vantajosamente 0,5 a 10%, particularmente cerca de 1,5% p/p.

[098] Formulações adequadas à administração tópica na boca incluem losangos que compreendem o ingrediente ativo em uma base flavorizada, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas que compreendem o ingrediente ativo em uma base inerte como, por exemplo, gelatina e glicerina, ou sacarose e acácia; e colutórios que compreendem o ingrediente ativo em um veículo líquido adequado.

[099] Formulações para administração retal podem ser apresentadas como um supositório com uma base adequada que compreende, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.

[0100] Formulações adequadas à administração intrapulmonar ou nasal possuem um tamanho de partícula, por exemplo, na faixa de 0,1 a 500 mícrons (incluindo tamanhos de partícula em uma faixa entre 0,1 e 500 mícrons em incrementos como, por exemplo, 0,5, 1, 30 mícrons, 35 mícrons etc.), que são administradas por inalação rápida através da passagem nasal ou por inalação através da boca de modo a alcançar os sacos alveolares. Formulações adequadas incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente ativo. Formulações adequadas para administração em aerossol ou pó seco podem ser preparadas de acordo com métodos convencionais, e podem ser liberadas com outros agentes terapêuticos como, por exemplo, compostos até agora usados no tratamento ou profilaxia de condições associadas à atividade do HCV.

[0101] Formulações adequadas à administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em spray contendo, além do ingrediente ativo, veículos que são considerados apropriados pela técnica.

[0102] Formulações adequadas à administração parenteral incluem soluções estéreis aquosas e não aquosas para injeção que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor ao qual se destina; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes.

[0103] As formulações são apresentadas em recipientes de dose unitária ou multidoses, por exemplo, ampolas e frascos lacrados, e podem ser armazenadas em uma condição liofilizada que necessita apenas da adição do veículo líquido estéril, por exemplo, água para injeção, imediatamente antes do uso. Soluções e suspensões para injeção extemporânea são preparadas a partir de pós, grânulos e comprimidos estéreis do tipo previamente descrito. Formulações de dosagem unitária preferidas são aquelas que contêm uma dose diária ou uma subdose diária unitária, como aqui citadas acima, ou uma fração apropriada desta, do ingrediente ativo.

[0104] Deve ser subentendido que, além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as formulações dessa revelação podem incluir outros agentes convencionais na técnica que têm relação com o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados à administração oral podem incluir agentes flavorizantes.

[0105] A revelação ainda fornece composições veterinárias que compreendem pelo menos um ingrediente ativo, como definido acima, junto com um veículo veterinário para ele.

[0106] Veículos veterinários são materiais úteis para o objetivo de administrar a composição e podem ser materiais sólidos, líquidos ou gasosos que são, de outro modo, inertes ou aceitáveis na técnica veterinária, e são compatíveis com o ingrediente ativo. Essas composições veterinárias podem ser administradas oralmente, parenteralmente ou por qualquer outra via desejada.

[0107] Os compostos da revelação também podem ser formulados para fornecer liberação controlada do ingrediente ativo para permitir uma dosagem menos freqüente ou para aprimorar o perfil farmacocinético ou de toxicidade do ingrediente ativo. Conseqüentemente, a revelação também fornece composições que compreendem um ou mais compostos da revelação formulados para liberação sustentada ou controlada.

[0108] A dose eficaz de ingrediente ativo depende pelo menos da natureza da condição que está sendo tratada, da toxicidade, se o composto está sendo usado profilaticamente (doses menores), do método de liberação e da formulação farmacêutica, e será determinada pelo médico assistente com o uso de estudos convencionais de escalonamento de doses.

Vias de administração

[0109] Um ou mais compostos da invenção (aqui denominados ingredientes ativos) são administrados por qualquer via adequada à condição a ser tratada. Vias adequadas incluem a via oral, retal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal e parenteral (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal e epidural), e semelhantes. Será observado que a via preferida pode variar, por exemplo, com a condição do receptor. Uma vantagem dos compostos desta revelação é que eles são oralmente biodisponíveis e podem ser dosados oralmente.

Terapia combinada de HCV

[0110] Em outra modalidade, exemplos não limitantes de combinações adequadas incluem combinações de um ou mais compostos de fórmula (I) e (A1-A4) com um ou mais interferons, ribavirina ou seus análogos, inibidores de NS3 protease do HCV, inibidores de alfa-glicosidase 1, hepatoprotetores, inibidores nucleosídicos ou nucleotídicos de NS5B polimerase do HCV, inibidores não nucleosídicos de NS5B polimerase do HCV, inibidores de NS5A de HCV, agonistas de TLR-7, inibidores de ciclofilina, inibidores de IRES do HCV, intensificadores farmacocinéticos, e outros fármacos ou agentes terapêuticos para o tratamento de HCV.

[0111] Mais especificamente, um ou mais compostos da presente revelação como aqui descritos podem ser combinados com um ou mais compostos selecionados do grupo que consiste em: 1) Interferons, por exemplo, rIFN-alfa 2b peguilado (PEG-Intron®), rIFN-alfa 2a peguilado (Pegasys®), rIFN-alfa 2b (Intron® A), rIFN-alfa 2a (Roferon®-A), interferon alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferone®, Alfanative®, Multiferon®, subalin), interferon alfacon-1 (Infergen®), interferon alfa-n1 (Wellferon), interferon alfa-n3 (Alferon®), interferon-beta (Avonex®, DL-8234), interferon-ômega (ômega DUROS®, Biomed® 510), albinterferon alfa-2b (Albuferon®), IFN alfa-2b XL, BLX-883 (Locteron®), DA-3021, interferon alfa-2b glicosilado (AVI-005), PEG-Infergen, interferon lambda-1 PEGuilado (IL-29 PEGuilada) e Belerofon®; 2) Ribavirina e seus análogos, por exemplo, ribavirina (Rebetol®, Copegus®) e taribavirina 20 (Viramidina®); 3) inibidores de NS3 protease do HCV, por exemplo, boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), TMC435350, BI-1335, BI-1230, MK-7009, VBY-376, VX-500, GS- 9256, GS-9451, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531, ABT-450, ACH-1625, ITMN-191, AT26893, MK5172, MK6325 e MK2748; 4) Inibidores de alfa-glicosidase 1, por exemplo, celgosivir (MX-3253), Miglitol e UT-231B; 5) Hepatoprotetores, por exemplo, emericasan (IDN- 6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilina e MitoQ; 6) Inibidores nucleosídicos ou nucleotídicos de NS5B polimerase do HCV, por exemplo, R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, BCX-4678, valopicitabina (NM-283), MK- 0608, sofosbuvir 30 (GS-7977 (anteriormente PSI-7977)), VLX-135 (anteriormente ALS-2200) e INX-189 (agora BMS986094); 7) Inibidores não nucleosídicos de NS5B polimerase do HCV, por exemplo, PF-868554, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK- 3281, GS-9190, VBY-708, VCH-222, A848837, ANA-598, GL60667, GL59728, A-63890, A-48773, A-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125, ABT-072, ABT- 333, GS-9669. PSI-7792 e GS-9190; 8) Inibidores de NS5A do HCV, por exemplo, AZD-2836 (A-831), BMS-790052, ACH-3102, ACH-2928, MK8325, MK4882, MK8742, PSI-461, IDX719, GS-5885 e A-689; 9) Agonistas de TLR-7, por exemplo, imiquimod, 852A, GS-9524, ANA-773, ANA-975 (isatoribina), AZD-8848 (DSP- 3025) e SM-360320; 10) inibidores de ciclofilina, por exemplo, DEBIO-025, SCY-635, e NIM811; 11) IRES do HCV inibidores, por exemplo, MCI-067; 12) Intensificadores farmacocinéticos, por exemplo, BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350 (cobicistat), GS-9585, e roxitromicina; e 13) Outros fármacos para o tratamento de HCV, por exemplo, timosina alfa 1 (Zadaxin), nitazoxanida (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG-10101), GS-9525, KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, ANA 971, NOV- 205, tarvacina, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, BMS- 650032, BMS-791325, Bavituximab, MDX-1106 (ONO-4538),Oglufanida e VX-497 (merimepodib).

[0112] Ainda em outra modalidade, o presente pedido revela composições farmacêuticas que compreendem um composto como aqui descrito, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró- fármaco, solvato e/ou éster deste, em combinação com pelo menos um agente terapêutico adicional, e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0113] Em outra modalidade, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), como aqui descrito, e sofosbuvir e/ou GS-5885 e, opcionalmente, um interferon ou ribavirina.

[0114] Em outra modalidade, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), como aqui descrito, e um inibidor nucleosídico ou nucleotídico de NS5B polimerase do HCV e, opcionalmente, um interferon ou ribavirina.

[0115] É contemplado que agentes terapêuticos adicionais serão administrados de uma forma que é conhecida na técnica, e a dosagem pode ser selecionada por aqueles habilitados na técnica. Por exemplo, agentes terapêuticos adicionais podem ser administrados em uma dose de cerva de 0,01 miligramas até cerca de 2 gramas por dia.

Metabólitos dos compostos

[0116] Também englobados dentro do escopo desta revelação estão os produtos metabólicos in vivo dos compostos aqui descritos. Esses produtos podem resultar, por exemplo, da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação, e semelhantes, do composto administrado, primariamente em conseqüência de processos enzimáticos. Conseqüentemente, a revelação inclui compostos produzidos por um processo que compreende o contato de um composto desta revelação com um mamífero por um período de tempo suficiente para gerar um produto metabólico deste. Esses produtos tipicamente são identificados preparando-se um composto da revelação radiomarcado (por exemplo, C14 ou H3), administrando-o parenteralmente em uma dose detectável (por exemplo, maior do que cerca de 0,5 mg/kg) a um animal, por exemplo, um rato, camundongo, porquinho-da-índia, macaco ou ao homem, permitindo tempo suficiente para que o metabolismo ocorra (tipicamente cerca de 30 segundos a 30 horas) e isolando seus produtos de conversão da urina, sangue ou de outras amostras biológicas. Esses produtos são facilmente isolados, na medida em que são marcados (outros são isolados pelo uso de anticorpos capazes de se ligar a epitopos que sobrevivem no metabólito). As estruturas do metabólito são determinadas de forma convencional, por exemplo, por análise por MS ou RNM. Em geral, a análise de metabólitos é feita da mesma forma que estudos convencionais de metabolismo de fármacos bem conhecidos por aqueles habilitados na técnica. Os produtos de conversão, desde que não sejam encontrados de algum outro modo in vivo, são úteis em ensaios diagnósticos para dosagem terapêutica dos compostos da revelação, até mesmo se não possuírem atividade inibidora do HIV por eles próprios.

[0117] Métodos para determinação da estabilidade de compostos em secreções gastrintestinais substitutas são conhecidos.

Métodos exemplares para produção dos compostos

[0118] A revelação também está relacionada aos métodos de produção das composições da revelação. As composições são preparadas por qualquer uma das metodologias aplicáveis de síntese orgânica. Muitas dessas metodologias são bem conhecidas na técnica. No entanto, muitas das metodologias conhecidas estão elaboradas em “Compendium of Organic Synthetic Methods” (John Wiley & Sons, Nova York), Vol. 1, Ian T. Harrison e Shuyen Harrison, 1971; Vol. 2, Ian T. Harrison e Shuyen Harrison, 1974; Vol. 3, Louis S. Hegedus e Leroy Wade, 1977; Vol. 4, Leroy G. Wade, Jr., 1980; Vol. 5, Leroy G. Wade, Jr., 1984; e Vol. 6, Michael B. Smith; bem como em March, J., “Advanced Organic Chemistry”, Terceira Edição (John Wiley & Sons, Nova York, 1985), “Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry”. Em 9 Volumes, Barry M. Trost, Editor-Chefe (Pergamon Press, Nova York, em impressão em 1993). Outros métodos adequados para a preparação de compostos da revelação estão descritos na Publicação de Pedido de Patente Internacional Número WO 2006/020276.

[0119] Diversos métodos exemplares para a preparação das composições da revelação são fornecidos nos esquemas e exemplos abaixo. Esses métodos visam ilustrar a natureza dessas preparações e não visam limitar o escopo dos métodos aplicáveis.

[0120] Geralmente, as condições de reação como, por exemplo, temperatura, tempo de reação, solventes, procedimentos de desenvolvimento, e semelhantes, serão aqueles comuns na técnica para a reação particular a ser realizada. O material de referência citado, junto com material nele citado, contém descrições detalhadas dessas condições. Tipicamente, as temperaturas serão de -100°C a 200°C, os solventes serão apróticos ou próticos, e os tempos de reação serão de 10 segundos a 10 dias. O desenvolvimento tipicamente consiste em na extinção de quaisquer reagentes não reagidos, seguida por divisão entre um sistema de água/camada orgânica (extração) e separação da camada que contém o produto.

[0121] As reações de oxidação e redução são tipicamente realizadas em temperaturas próximas à temperatura ambiente (cerca de 20°C), embora para reduções de hidreto de metal freqüentemente a temperatura seja reduzida para 0°C a - 100°C, os solventes sejam tipicamente apróticos para reduções e possam ser próticos ou apróticos para oxidações. Os tempos de reação são ajustados para obter conversões desejadas.

[0122] As reações condensação são tipicamente realizadas em temperaturas próximas à temperatura ambiente, embora para condensações não equilibradas, cineticamente controladas, temperaturas reduzidas (0°C a -100°C) também sejam comuns. Os solventes podem ser próticos (comuns em reações equilibradas) ou apróticos (comuns em reações cineticamente controladas).

[0123] Técnicas sintéticas padronizadas como, por exemplo, remoção azeotrópica de subprodutos da reação e uso de condições de reação anidras (por exemplo, ambientes de gás inerte) são comuns na técnica e serão aplicadas quando aplicáveis.

[0124] Os termos “tratado”, “que trata”, “tratamento” e semelhantes, quando usados em conexão com uma operação química sintética, significam o contato, misturação, reação, permissão para reagir, colocação em contato e outros termos comuns na técnica para indicar que uma ou mais entidades químicas são tratadas de modo a convertê-las em uma ou mais outras entidades químicas. Isso significa que “tratamento do composto um com o composto dois” é sinônimo de “permitir que o composto um reaja com o composto dois”, “contato do composto um com o composto dois”, “reação do composto um com o composto dois” e outras expressões comuns na técnica de síntese orgânica que indicam razoavelmente que composto um foi “tratado”, “reagido”, “permitido a reagir” etc., com o composto dois. Por exemplo, “tratamento” indica a forma razoável e comum na qual é permitido que substâncias químicas orgânicas reajam. São visadas concentrações normais (0,01 M a 10 M, tipicamente 0,1 M a 1 M), temperaturas (-100°C a 250°C, tipicamente -78°C a 150°C, mais tipicamente -78°C a 100°C, ainda mais tipicamente 0°C a 100°C), vasos de reação (tipicamente de vidro, plástico, metal), solventes, pressões, atmosferas (tipicamente ar para reações insensíveis ao oxigênio e à água ou nitrogênio ou argônio para sensíveis ao oxigênio ou à água) etc., a menos que indicado de forma diferente. O conhecimento de reações similares conhecidas na técnica de síntese orgânica é usado na seleção das condições e aparelhos para “tratamento” em certo processo. Em particular, aqueles habilitados na técnica de síntese orgânica selecionam condições e aparelhos que razoavelmente se espera que realizem com sucesso as reações químicas dos processos descritos com base no conhecimento da técnica.

[0125] Modificações de cada um dos esquemas exemplares e nos Exemplos (doravante “esquemas exemplares”) levam a vários análogos dos produtos de materiais exemplares específicos. As citações feitas acima que descrevem métodos adequados de síntese orgânica que são aplicáveis a essas modificações.

[0126] Em cada um dos esquemas exemplares, pode ser vantajoso separar produtos de reação uns dos outros e/ou dos materiais de partida. Os produtos desejados de cada etapa ou série de etapas são separados e/ou purificados (doravante separados) até o grau desejado de homogeneidade pelas metodologias comuns na técnica. Tipicamente, essas separações envolvem extração multifases, cristalização de um solvente ou mistura solvente, destilação, sublimação ou cromatografia. A cromatografia pode envolver qualquer entre diversos métodos, incluindo, por exemplo: métodos e aparelhos de cromatografia líquida de fase reversa e de fase normal; de exclusão de tamanho; de troca iônica; de pressão elevada, média e baixa; cromatografia analítica de camada delgada ou espessa em pequena escala; de leito móvel simulado (SMB) e preparativa, além de técnicas de cromatografia camada delgada e instantânea em pequena escala.

[0127] Outra classe de métodos de separação envolve tratamento de uma mistura com um reagente selecionado para se ligar ou de algum outro modo tornar separável um produto desejado, material de partida não reagido, reação por produto, ou semelhantes. Esses reagentes incluem adsorventes ou absorventes como, por exemplo, carbono ativado, peneiras moleculares, meios de troca iônica, ou ácidos, no caso de um material básico, bases, no caso de um material ácido, reagentes de ligação como, por exemplo, anticorpos, proteínas de ligação, quelantes seletivos como, por exemplo, éteres de coroa, reagentes de extração líquida/de íon líquido (LIX), ou semelhantes.

[0128] A seleção de métodos de separação apropriados depende da natureza dos materiais envolvidos. Por exemplo, ponto de ebulição e peso molecular, na destilação e sublimação, presença ou ausência de grupos funcionais polares, na cromatografia, estabilidade de materiais em meios ácidos e básicos, em extração multifases, e semelhantes. Aqueles habilitados na técnica aplicarão técnicas com maior probabilidade de obter a separação desejada.

[0129] Um único estereoisômero, por exemplo, um enantiômero, substancialmente livre de seu estereoisômero, pode ser obtido por resolução da mistura racêmica usando um método como, por exemplo, formação de diastereômeros, usando agentes de resolução opticamente ativos (“Stereochemistry of Carbon Compounds” (1962) por E.L.Eliel, McGraw Hill; Lochmuller, C.H., (1975) J. Chromatogr., 113, 3: 283-302). Misturas racêmicas de compostos quirais da revelação podem ser separadas e isoladas por qualquer método adequado, incluindo: (1) formação de sais iônicos diastereoméricos com compostos quirais e separação por cristalização fracionária ou outros métodos, (2) formação de compostos diastereoméricos com reagentes quirais de derivatização, separação dos diastereômeros e conversão nos estereoisômeros puros, e (3) separação dos estereoisômeros substancialmente puros ou enriquecidos diretamente sob condições quirais.

[0130] Sob o método (1), sais diastereoméricos podem ser formados por reação de bases quirais enantiomericamente puras como, por exemplo, brucina, quinina, efedrina, estricnina, α-metil-β-feniletilamina (anfetamina), e semelhantes com compostos assimétricos que abrigam funcionalidade ácida, por exemplo, ácido carboxílico e ácido sulfônico. Os sais diastereoméricos podem ser induzidos para separar por cristalização fracionária ou cromatografia iônica. Para separação dos isômeros ópticos de compostos amino, a adição de ácidos carboxílicos ou sulfônicos quirais, por exemplo, ácido canforsulfônico, ácido tartárico, ácido mandélico ou ácido lático, pode resultar na formação dos sais diastereoméricos.

[0131] Alternativamente, pelo método (2), o substrato a ser resolvido é reagido com um enantiômero de um composto quiral para formar a par diastereomérico (Eliel, E. e Wilen, S. (1994) “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., página 322). Os compostos diastereoméricos podem ser formados por reação de compostos assimétricos com reagentes de derivatização quiral enantiomericamente puros, por exemplo, derivados de mentil, seguida por separação dos diastereômeros e hidrólise para gerar o substrato livre, enantiomericamente enriquecido. Um método de determinação da pureza óptica envolve a produção de ésteres quirais, por exemplo, um éster de mentil, por exemplo, cloroformato de (-) mentila, na presença de base, ou éster de Mosher, acetato de α-met0xi-α- (trifluormetil)fenila (Jacob III. (1982) J. Org. Chem. 47: 4.165), da mistura racêmica, e análise do espectro de RNM quanto à presença dos dois diastereômeros atropisoméricos.Diastereômeros estáveis de compostos atropisoméricos podem ser separados e isolados por cromatografia de fase normal e reversa seguindo métodos para separação de naftil- isoquinolinas atropisoméricas (Hoye, T., WO 96/15111). Pelo método (3), uma mistura racêmica de dois enantiômeros pode ser separada por cromatografia usando uma fase quiral estacionária (“Chiral Liquid Chromatography” (1989) W.J. Lough, Ed. Chapman e Hall, Nova York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr. 513: 375-378). Enantiômeros enriquecidos ou purificados podem ser distinguidos por métodos usados para distinguir outras moléculas quirais com átomos de carbono assimétricos, por exemplo, rotação óptica e dicroismo circular.

Esquemas e exemplos

[0132] Aspectos gerais desses métodos exemplares são descritos abaixo e nos Exemplos. Cada um dos produtos dos processos seguintes é opcionalmente separado, isolado e/ou purificado antes de seu uso em processos subseqüentes.

[0133] Diversos métodos exemplares para a preparação de compostos da revelação são aqui fornecidos, por exemplo, nos Exemplos abaixo. Esses métodos visam ilustrar a natureza dessas preparações e não visam limitar o escopo dos métodos aplicáveis. Certos compostos da revelação podem ser usados como intermediários para a preparação de outros compostos da revelação. Nos métodos exemplares aqui descritos, o fragmento E-V- também pode ser escrito como R9-. PG representa um grupo de proteção comum para certo grupo funcional que está anexado. A instalação e remoção do grupo de proteção podem ser obtidas usando técnicas-padrão, tais como aquelas descritas em Wuts, P.G.M., Greene, T. “Protective Groups in Organic Synthesis”, 4a Edição; John Wiley & Sons, Inc.: Hoboken, Nova Jersey, 2007. Esquema 1. Síntese representativa de E-V-C(=O)-P-W-P- C(=O)-V-E

[0134] O Esquema 1 mostra uma síntese geral de uma molécula de E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E da invenção em que, para fins ilustrativos, E é metoxicarbonilamino. O tratamento de 1a ou 1c com um ou dois equivalentes, respectivamente, de cloroformato de metila sob condições básicas (por exemplo, hidróxido de sódio) fornece a molécula 1b ou 1d.Esquema 2. Síntese representativa de E-V-C(=O)-P-W-P- C(=O)-V-E

[0135] O Esquema 2 mostra uma síntese geral de uma molécula de E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E da invenção em que, para fins ilustrativos, P é pirrolidina. O acoplamento da amina 2a com ácido 2b é obtido usando um reagente de acoplamento peptídico (por exemplo, HATU) para gerar 2c. Alternativamente, a amina 2d é acoplada com dois equivalentes de 2b sob condições similares para fornecer 2e.Esquema 6. Síntese representativa de R1-V-C(=O)-P-R2

[0136] O Esquema 6 mostra uma síntese geral de um intermediário R1-V-C(=O)-P-R2 em que, para fins ilustrativos, P é pirrolidina, R1 é um grupo genérico que é revelado como -E ou um grupo de proteção de amino, e R2 é um grupo genérico que é revelado como -W-P-C(=O)-V-E, -W-P- C(=O)-V-NH-PG, -W-P-NH-PG ou -W-NH-PG. O acoplamento da amina 6a (ou 6d, 6h, 6k) com ácido 6b ou 6e é obtido usando um reagente de acoplamento peptídico (por exemplo, HATU) para gerar 6c (ou 6f, 6g, 6i, 6j, 6l, 6m), respectivamente.Esquema 7. Síntese representativa de E-V-C(=O)-R1

[0137] O Esquema 7 mostra uma intermediário E-V-C(=O)-R1 em que, E é metoxicarbonilamino e R1 é um grupo genérico que é revelado como -P-W-P-C(=O)-V-NH-PG, -P-W-P-PG, -P-W-PG, -PPG ou -O-PG. O tratamento de 7a (ou 7c, 7e, 7g, 7i) com cloroformato de metila sob condições básicas (por exemplo, hidróxido de sódio) fornece a molécula 7b (ou 7d, 7f, 7h, 7j).Esquema 9. Síntese representativa de R1-P-R2

[0138] O Esquema 9 mostra uma síntese geral de um intermediário R1-P-R2 em que, para fins ilustrativos, R1 é - C(=O)-V-E ou um grupo de proteção, e R2 é um benzimidazol substituído. A formação do benzimidazol é obtida por acoplamento do ácido 9b ou 9e com uma arilamina 9a, usando um reagente de acoplamento peptídico como, por exemplo, HATU, para gerar 9c ou 9d. A ciclização da amida na presença um ácido (por exemplo, ácido acético) gera a molécula que contém benzimidazol 9d ou 9g.

[0139] A formação de múltiplos benzimidazóis é realizada da mesma forma, partindo com a bis-diamina para fornecer o bis-benzimidazol correspondente.Esquema 20. Síntese representativa de R1-P-W-P-R2

[0140] O Esquema 20 mostra uma síntese geral de um intermediário R1-P-W-P-R2 da invenção em que, para fins ilustrativos, R1 e R2 são grupos de proteção independentes e W é uma unidade de dois anéis aromáticos construída por meio de uma ciclização mediada por metal de transição. A alquilação do fenol 20b com um brometo de alquila, por exemplo, 20a, fornece o éter 20c. A ciclização dos anéis aromáticos na presença de um catalisador de paládio fornece o composto 20d. O tratamento de 20d com CuBr2 fornece a α- halocetona 20e, que fornece 20f após adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo, Et3N). A reação de 20f com uma amina ou sal de amina (por exemplo, acetato de amônio) gera a molécula que contém imidazol 20g. A oxidação de 20g, 20i ou 20l pode ser obtida por aquecimento na presença de MnO2 para fornecer 20h, 20j ou 20m, respectivamente. A conversão de 20g ou 20h com um catalisador de paládio, por exemplo, Pd2dba3 e X-Phos, e uma fonte de boro como, por exemplo, bis(pinacolato) diboro, fornece o éster borônico 20i ou 20j . O éster borônico é acoplado com um parceiro de acoplamento apropriado (por exemplo, 20k) usando um catalisador de paládio, por exemplo, Pd(PPh3)4 ou PdCl2(dppf), para gerar 20l ou 20m. For cada reação de acoplamento cruzado mediada por metal de transição, os papéis do nucleófilo e eletrófilo podem ser revertidos para fornecer o mesmo produto de acoplamento. Outros acoplamentos cruzados mediados por metal de transição que permitem a construção de W, mas empregam parceiros de acoplamento e reagentes alternativos, incluem, sem limitação, os acoplamentos de Negishi, Kumada, Stille e Ullman. Para a preparação de grupos W alternativos que contêm dois anéis aromáticos, esse esquema geral pode ser aplicado por meio da escolha apropriada dos reagentes de partida.Esquema 21. Síntese representativa de R1-P-W-P-R2

[0141] O Esquema 21 mostra uma síntese geral de um intermediário R1-P-W-P-R2 da invenção em que, para fins ilustrativos, R1 e R2 são grupos de proteção independentes e W é uma unidade de dois anéis aromáticos construída por meio de uma ciclização mediada por metal de transição. O tratamento de 20d com um reagente de vinil ativado (por exemplo, viniltrifluorborato de potássio) na presença de um catalisador de paládio (por exemplo, acetato de paládio e S-Phos) fornece o composto de vinil 21a. A conversão na α- halocetona correspondente pode ser obtida por bromação com N-bromossuccinimida, seguida por oxidação com MnO2. O deslocamento da α-halocetona prossegue pela adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo, Et3N). A bromação de 21d prossegue após tratamento com tribrometo de piridínio, e é seguida pela adição de um segundo ácido sob condições básicas para fornecer o diéster 21e. A reação de 21e com uma amina ou sal de amina (por exemplo, acetato de amônio) gera a molécula que contém imidazol 21f. A oxidação de 21f pode ser obtida na presença de MnO2 para fornecer 21g.Esquema 22. Síntese representativa de E-V-C(=O)-P-W-P-

[0142] O Esquema 22 mostra uma síntese geral de um intermediário E-V-C(=O)-P-W-P-R da invenção em que, para fins ilustrativos, R é um grupo de proteção e W é uma unidade de dois anéis aromáticos. O deslocamento da α- halocetona 21b prossegue pela adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo, Et3N). A bromação de 22b prossegue após tratamento com tribrometo de piridínio, e é seguida pela adição de um segundo ácido sob condições básicas para fornecer o diéster 22c. A reação de 22c com uma amina ou sal de amina (por exemplo, acetato de amônio) gera a molécula que contém imidazol 22d. A oxidação de 22d pode ser obtida na presença de MnO2 para fornecer 22e. Esquema 23. Síntese representativa de R-P-W-P-C(=O)-V-E

[0143] O Esquema 23 mostra uma síntese geral de um intermediário E-V-C(=O)-P-W-P-R da invenção em que, para fins ilustrativos, R é um grupo de proteção e W é uma unidade de dois anéis aromáticos. O deslocamento da α- halocetona 21d prossegue pela adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo, Et3N). A reação de 23a com uma amina ou sal de amina (por exemplo, acetato de amônio) gera a molécula que contém imidazol 23b. A oxidação de 23b pode ser obtida na presença de MnO2 para fornecer 23c. Esquema 25. Síntese representativa de E-V-C(=O)-P-W-P- C(=O)-V-E

[0144] O Esquema 25 mostra uma síntese geral de uma molécula de E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E da invenção em que, para fins ilustrativos, E é etilcarbonilamino. O tratamento de 25a ou 25c com um ou dois equivalentes, respectivamente, de cloreto de propionila sob condições básicas (por exemplo, hidróxido de sódio) fornece a molécula 25b ou 25d.Esquema 26. Sínteses representativas de E-V-C(=O)-P-R e R1-P-R

[0145] O Esquema 26 mostra uma síntese geral de uma molécula E-V-C(=O)-P-R e uma R1-P-R da invenção em que, para fins ilustrativos R é a haloimidazol. O tratamento do aldeído 26a com glioxal, na presença de hidróxido de amônio fornece o imidazol 26b. O tratamento com N- bromossuccinamida ou iodo fornece o haloimidazol correspondente 26c e 26d, respectivamente. A separação do composto bi-halogenado correspondente pode ser obtida por cromatografia HPLC preparativa. A conversão do bi- haloimidazol no mono-haloimidazol também pode ser obtida mediante aquecimento na presença de sulfito de sódio. Funcionalização adicional do grupo P pode ser obtida mediante remoção do grupo de proteção e acoplamento com um ácido apropriado (E-V-C(=O)-OH).Esquema 27. Síntese representativa de R1-P-W-P-R2

[0146] O Esquema 27 mostra uma síntese geral alternativa de um intermediário R1-P-W-P-R2 da invenção em que, para fins ilustrativos, R1 e R2 são grupos de proteção independentes e W é uma unidade de dois anéis aromáticos construída por meio de uma ciclização mediada por metal de transição. A bromação de 21b com um agente de bromação (ou seja, tribrometo de piridínio) fornece o dibrometo 27a. O deslocamento do brometo primário então prossegue pela adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo,K2CO3) para fornecer 21d. A conversão em 21f ou 21g pode ser obtida seguindo os métodos descritos no Esquema 21.Esquema 28. Síntese representative

[0147] O Esquema 28 mostra uma síntese geral alternativa de um intermediário E-V-C(=O)-P-W-P-R da invenção em que, para fins ilustrativos, R é um grupo de proteção e W é uma unidade de dois anéis aromáticos. A bromação de 21b com um agente de bromação (ou seja, tribrometo de piridínio) fornece o dibrometo 27a. O deslocamento do brometo primário então prossegue pela adição de um ácido sob condições básicas (por exemplo, K2CO3) para fornecer 22d. A conversão em 22d ou 22e pode ser obtida seguindo os métodos descritos no Esquema 22.

Modalidades específicas

[0148] Em uma modalidade, é fornecido um composto de fórmula (I):

em que: W1a é

P1a é selecionado de:

P1b é selecionado de:

R9a e R9b são selecionados independentemente de:

ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste; desde que quando Y5 menos um dos seguintes ocorre: (1) pelo menos um de V1a (ag), (ah), (ai), (aj), (ak), ou (aq); ou (2) P1a é selecionado de (bj), (bk), (bl), (bm), (bn), (3) P1b é selecionado de (bj), (bk), (bl), (bm), (bn),

[0149] Em uma modalidade, o representado pela fórmula: ou -CH2-O-, então pelo e V1b é selecionado de (af), (al), (am), (an), (ao), (ap) (be), (bf), (bg), (bh), (bi), (bo), (bq) ou (br); ou (be), (bf), (bg), (bh), (bi), (bo), (bp), (bq) ou (br). composto de fórmula (I) é

em que o anel imidazol mostrado na fórmula (A1), (A2), (A3) e (A4) é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados independentemente de halo, haloalquil, ciano, e alquil; ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste.

[0150] Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) é representado pela fórmula:

em que o anel imidazol mostrado na fórmula (A2) e (A4) é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados independentemente de halo, haloalquil, ciano, e alquil;ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável deste.

[0151] Em uma modalidade, pelo menos um de E1a e E1b é - N(H)(alcoxicarbonil). Em uma modalidade, pelo menos um de E1a e E1b é -N(H)C(=O)OMe. Em outra modalidade, tanto E1a quanto E1b são -N(H)C(=O)OMe.

[0152] Em uma modalidade, pelo menos um de E1a e E1b é - N(H)(cicloalquilcarbonil) ou -N(H)(cicloalquiloxicarbonil). Em uma modalidade, pelo menos um de E1a e E1b é ciclopropilcarbonilamino, ciclobutilcarbonilamino, ciclopropiloxicarbonilamino ou ciclobutiloxicarbonilamino. Em outra modalidade, E1a e E1b são selecionados independentemente de ciclopropilcarbonilamino, ciclobutilcarbonilamino, ciclopropiloxicarbonilamino e metoxicarbonilamino.

[0153] Em uma modalidade, pelo menos um de V1a e V1b é:

[0154] Em uma modalidade, E1a-V1a juntos são R9a ou em que E1b-V1b juntos são R9b. Em uma modalidade, pelo menos um de P1a e P1b é selecionado de:

[0155] Em uma modalidade, P1a e P1b são selecionados independentemente de:

[0156] Em uma modalidade, pelo menos um de -V1a-C(=O)-P1a- e -P1b-C(=O)-V1b- é:

[0157] Em outra modalidade, pelo menos um de -V1a-C(=O)-P1a- e -P1b-C(=O)-V1b- é:

[0158] Ainda em outra modalidade, -V1a-C(=O)-P1a- e -P1b-C(=O)-V1b- são cada independentemente:

[0159] Em uma modalidade, um de -V1a-C(=O)-P1a- e -P1b-C(=O)-V1b- é:

e o outro de -V1a-Q=0)-P1a- e -P1b-C(=O)-V1b- é:

[0160] Em uma modalidade, a revelação fornece um composto de fórmula:

ou um sal ou pró-fármaco farmaceuticamente aceitável destes.

[0161] A revelação será agora ilustrada pelos exemplos não limitantes seguintes. As abreviações seguintes são usadas ao longo do relatório descritivo, incluindo nos Exemplos.

[0162] 3,4-Diidronaftalen-1(2H)-ona: A uma solução agitada de 7-hidróxi-1-tetralona (13,9 g, 85,7 mmol) e 1-bromo-2- (bromometil)-4-clorobenzeno (25,6 g, 90,0 mmol) em dimetilformamida (850 ml) foi adicionado carbonato de potássio (24 g, 172 mmol). A reação foi agitada sob argônio por 18 horas, e então diluída com acetato de etila (1 litro). Os orgânicos foram lavados três vezes com água e uma vez com salmoura. A camada orgânica foi então seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Ao óleo resultante foi adicionado metanol (500 ml) e a suspensão foi agitada por trinta minutos. 7-(2-bromo-5- clorobenziloxi) (27,8 g, 89% de rendimento) foi isolado por filtração.

[0163] 3-Cloro-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona: A um frasco de 1 litro contendo pivalato de paládio (II) (1,18 g, 3,8 mmol), tri(4-fluorfenil)fosfina (1,20 g, 3,8 mmol), ácido piválico (2,33 g, 22,8 mmol) e carbonato de potássio (31,8 g, 228 mmol) foi adicionada uma solução de 7-(2-bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-diidronaftalen-1(2H)- ona (27,8 g, 76,2 mmol) em dimetilacetamida (380 ml). O frasco foi evacuado e preenchido com argônio 5 vezes e então agitado sob argônio a 60°C por 24 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com MTBE e água. A mistura bifásica resultante foi agitada por 3 horas e filtrada através de Celite, enxaguando com MTBE. A camada orgânica do filtrado foi separada e então lavada duas vezes com água e uma vez com salmoura. Os orgânicos foram então secos com sulfato de magnésio, filtrados, concentrados e purificados por cromatografia instantânea em coluna (hexanos/DCM) para gerar 3-cloro-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g] cromen-8(9H)-ona (14,4 g, 67% de rendimento) como um sólido esbranquiçado.

[0164] 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 8(9H)-ona: A uma mistura de 3-cloro-10,11-diidro-5H- dibenzo [ c,g]cromen-8(9H)-ona (14,8 g, 52 mmol) em clorofórmio (50 ml) e acetato de etila (50 ml), foi adicionado brometo de cobre (II) (24,3 g, 104 mmol). A reação foi aquecida até 80°C por 2 horas e então resfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada duas vezes com uma solução 5:1 de cloreto de amônio aquoso saturado e hidróxido de amônio aquoso (aproximadamente 38%), e lavada uma vez com água. A camada orgânica foi seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para gerar 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (18,5 g, >95% de rendimento) com >95% de pureza. Observação: Essa reação nem sempre é limpa. Algumas vezes há é hiperbromação e algumas vezes há material de partida significante. Essas impurezas podem ser removidas por cromatografia instantânea em coluna.

[0165] terc-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de ácido (1R)-2-(terc- butoxicarbonil)ciclopentanocarboxílico (10,17 g, 47,25 mmol) e 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-6H-nafto[2,3-c]cromen- 8(9H)-ona (5,7 mg, 15,7 mmol) em acetonitrila (50 ml) foi adicionada diisopropiletilamina (11,11 ml, 64 mmol). A reação foi agitada a 50°C por 4 horas e foi então diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (MgSO4) e concentrados. O resíduo bruto resultante foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-nafto[c,g]cromen-9-il)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (4,52 g, 58%). A uma solução de (2S)-1-terc- butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3- c]cromen-9-il)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (3,27 mg, 6,56 mmol) em uma mistura de tolueno (11 ml) e 2-metoxietanol (0,7 ml) foi adicionado acetato de amônio (5,06 g, 65,6 mmol). A mistura de reação foi aquecida até 110°C por 3 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (1,95 g, 61%). LCMS-ESI+: calculado para C27H28ClN3O3 42: 477,98; observado [M+1]+: 478,47.

[0166] terc-butil 2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,9 g, 3,96 mmol) em diclorometano (35 ml) foi adicionado óxido de manganês (IV) (17 g, 198 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas, diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc- butil 2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (1,52 g, 81%). LCMS-ESI+: calculado para C27H26ClN3O3 42: 475,9; observado [M+1]+: 476,45.

[0167] terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura desgaseificada de terc-butil 2-(9-cloro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,52 g, 3,17 mmol), bis(pinacolato)diboro (1,21 g, 4,75 mmol), acetato de potássio (934 mg, 9,52 mmol),tris(dibenzilidenoacetona)paládio (116 mg, 0,13 mmol) e 2- diciclohexilfosfino-2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’-bifenil (121 mg, 0,08 mmol) em 1,4-dioxano (16 ml) foi aquecida até 90°C por 1,5 hora, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (1,7 g, 94%).

[0168] terc-butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil] pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2- ilcarbamato (1,48 g, 3,97 mmol), terc-butil 2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1- carboxilato (1,88 g, 1,48 mmol), tetrakis(trifenil fosfina)paládio (0) (191 mg, 0,16 mmol) e dicloro[1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (242 mg, 0,33 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (37,0 ml) e dimetilformamida (6 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 5 ml, 9,93 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc- butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]pirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (1,45 mg, 59%). LCMS-ESI+: calculado para C41H47N7O6 73 733,86; observado [M+1]+: 734,87.

[0169] Ácido [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino](fenil) acetil}pirrolidin-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirrolidin-1- il)-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbâmico: Uma solução de terc- butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]pgrrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (462 mg, 0,63 mmol), etanol (6 ml) e HCl concentrado (2 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (172 mg, 0,82 mmol) e COMU (311 mg, 073 mmol) em DMF (6 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (330 μl, 1,89 mmol). Após agitação por 18 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar ácido [1-(2-{5-[2-(1- {[(metoxicarbonil)amino](fenil)acetil} pirrolidin-2-il)- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]- 1H-imidazol-2-il}pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2- il]carbâmico (231 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculado para C46H48N8O7 8: 824,92; observado [M+1]+: 826,00.

[0170] (2S,4S)-1-terc-butil 2,4-dimetilpirrolidina-1,2,4- tricarboxilato. A uma solução de (2S,4S)-1-terc-butil 2- metil 4-cianopirrolidina-1,2-dicarboxilato (9,0 g, 35,4 mmol) em MeOH (196 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4- dioxano, 100 ml, 403 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 16 h e concentrada in vacuo. O intermediário bruto foi dissolvido em EtOAc (180 ml) e acidificado com bicarbonato aquoso (saturado). Di-terc- butil dicarbonato (8,5 g, 38,9 mmol) foi adicionado e a solução bifásica foi agitada em temperatura ambiente por 12 h. As camadas foram então separadas e a camada aquosa foi extraída de volta com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4, e concentradas. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (EtOAc/hexanos 15% a 40% a 100%) para fornecer (2S,4S)-1-terc-butil 2,4- dimetilpirrolidina-1,2,4-tricarboxilato (9,56 g, 94%).

[0171] Ácido (3S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil)pirrolidina-3-carboxílico. A uma solução de (2S,4S)-1-terc-butil 2,4-dimetilpirrolidina-1,2,4-tricarboxilato (9,56 g, 33,3 mmol) em THF (70 ml) a 0°C (temperatura externa, banho de gelo) foi adicionado NaOH (1 N aquoso, 33 ml, 33,3 mmol) gota a gota ao longo de 15 min. A solução foi agitada a 0°C por 5 h antes da acidificação com HCl (1 N). A solução foi extraída com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (MeOH/CH2Cl2 2% a 5% a 10%) para fornecer ácido (3S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil) pirrolidina-3-carboxílico (6,38 g, 70%).

[0172] (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil pirrolidina-1,2-dicarboxilato. A uma solução de ácido (3S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil) pirrolidina-3-carboxílico (6,38 g, 23,3 mmol) em THF (116 ml) a 0°C (temperatura externa, banho de gelo) foi adicionado Et3N (4,9 ml, 35,0 mmol) e cloroformato de etila (2,7 ml, 28,0 mmol). A solução resultante foi agitada a 0°C por 45 min, e durante esse tempo um precipitado branco se forma. A mistura de reação foi filtrada através de Celite e concentrada. O intermediário bruto foi dissolvido em THF (59 ml) e resfriado até 0°C (temperatura externa, banho de gelo). NaBH4 (4,41 g, 116,7 mmol) em H2O (59 ml) foi lentamente adicionado e a solução resultante foi agitada a 0°C por 2 h. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com H2O. A camada aquosa foi extraída de volta com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (EtOAc/hexanos 42% a 69% a 100%) para fornecer (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4- (hidroximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (3,63 g, 60%).

[0173] (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(metoximetil) pirrolidina-1,2-dicarboxilato. A uma solução de (2S,4S)-1- terc-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirrolidina-1,2- dicarboxilato (2,57 g, 9,9 mmol) em CH2Cl2 (50 ml) foram adicionados AgOTf (4,07 g, 15,8 mmol) e 2,6-di-terc- butilpiridina (4,4 ml, 19,8 mmol). A mistura de reação foi resfriada até 0°C (temperatura externa, banho de gelo) e MeI (0,98 ml, 15,8 mmol) foi lentamente adicionado. A lama resultante foi agitada a 0°C por 1,5 h e em temperatura ambiente por 1,5 h. A lama foi diluída com CH2Cl2 e filtrada através de Celite. O filtrado foi concentrado até a secura, dissolvido em Et2O, e lavado com HCl (1 N) e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com Et2O e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (EtOAc/hexanos 10% a 75% a 100%) para fornecer (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4- (metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,11 g, 78%). 1H-RNM: 400 MHz, (CDCl3) δ : (mistura de rotômeros, principais registrados) 4,20 (t, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,34 (m, 2H), 3,30 (s, 3H), 3,16 (t, 1H), 2,43 (m, 2H), 1,74 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).

[0174] Ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico. A uma solução de (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(metoximetil)pirrolidina- 1,2-dicarboxilato (2,11 g, 7,7 mmol) em uma mistura de THF (38 ml) e MeOH (15 ml) foi adicionado LiOH (2,5 M aquoso, 15 ml, 38,6 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 h, e acidificada com HCl aquoso (1 N). O produto desejado foi extraído com CH2Cl2 (4x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas para fornecer ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico (2,0 g, 99%). 1H-RNM: 400 MHz, (CDCl3) δ : (mistura de rotômeros, principais registrados) 4,33 (t, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,32 (s, 3H), 3,16 (t, 1H), 2,45 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), 1,46 (s, 9H). Exemplo AB-1

[0175] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-4,5-diidro-5H- nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de ácido ((S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico (5,9 g, 23,1 mmol) e 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-5H-nafto[c,g]cromen-8(9H)-ona (5,6 mg, 15,4 mmol) em acetonitrila (60 ml) foi adicionada diisopropiletilamina (5,35 ml, 30,8 mmol). A reação foi agitada a 50°C por 18 horas e foi então diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (MgSO4) e concentrados. O resíduo bruto resultante foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S)-1-terc-butil-2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H- nafto[2,3-c]cromen-9-il)-4(metoximetil)pirrolidina-1,2- dicarboxilato (5,12 g, 61%). A uma solução de (2S)-1-terc- butil-2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3- c]cromen-9-il)-4(metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (5,11 mg, 9,42 mmol) em uma mistura de tolueno (94 ml) e 2- metoxietanol (0,1 ml) foi adicionado acetato de amônio (23,5 g, 304 mmol). A mistura de reação foi aquecida até 110°C por 18 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4R)-terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-SH- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,05 g, 21%) e (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-4,5-diidro-6H-nafto[2,3- c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina- 1-carboxilato (2,0 g, 41%). LCMS-ESI+: calculado para C29H32ClN3O4 2: 522,0; observado [M+1]+: 522,2.

[0176] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-terc-butil-2-(9- cloro-4,5-diidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,99 g, 3,82 mmol) em diclorometano (30 ml) foi adicionado óxido de manganês (IV) (10 g, 115 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas, diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-6H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9- d]imidazol-2-il)-4-metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,05 g, 21%) e (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-4,5-diidro- 6H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,64 g, 82%). LCMS- ESI+: calculado para C29H30ClN3O4 2: 520,02; observado [M+1]+: 520,97.

[0177] (2S,4S)-terc-butil-4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura desgaseificada de (2S,4S)-terc-butil-2-(9-cloro-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (649 mg, 1,25 mmol), bis(pinacolato)diboro (635 mg, 2,5 mmol), acetato de potássio (368 mg, 3,7 mmol), tris(dibenzilidenoacetona) paládio (46 mg, 0,05 mmol) e 2-diciclohexilfosfino- 2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’-bifenil (60 mg, 0,12 mmol) em 1,4-dioxano (7 ml) foi aquecida até 90°C por 3 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4), e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato (467 mg, 61%) LCMS-ESI+: calculado para C35H42BN3O6: 611,54; observado [M+1]+: 612,96.

[0178] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (467 mg, 0,76 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (342 mg, 0,92 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (44 mg, 0,04 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno] paládio (II) (56 mg, 0,07 mmol) em uma mistura de 1,2- dimetoxietano (11,0 ml) e dimetilformamida (1,9 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 1,15 ml, 2,29 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2- il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol- 2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (180 mg, 67%). LCMS-ESI+: calculado para C43H51N7O73: 777,91;observado [M+1]+: 778,84.

[0179] Metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4

[0180] (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2- (9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (196 mg, 0,25 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (69 mg, 0,33 mmol) e COMU (124 mg, 029 mmol) em DMF (4 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (130 μl, 0,7 6 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {2-[2-{9-[2-(1-{2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil} pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-5-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (84 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculado para C48H52N8O8: 868,98; observado [M+1]+: 870,11.

[0181] Metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2- ((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil) pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (116 mg, 0,15 mmol), etanol (5 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (10 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido 2- metoxicarbonilamino-3-metilbutírico (38 mg, 0,22 mmol) e HATU (79 mg, 0,21 mmol) em DMF (1,4 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (270 μl, 1,5 mmol). Após agitação por 18 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il}-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (58 mg, 13%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,96; observado [M+1]+: 835,70.Exemplo AD

[0182] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d] imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato (557 mg, 0,91 mmol), metil (S)-1-((1S,3S,5S)-3- (5-bromo-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-il)- 3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (350 mg, 0,91 mmol) tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (53 mg, 0,04 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (67 mg, 0,07 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (11,0 ml) e dimetilformamida (1,9 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 1,37 ml, 2,7 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil) azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto [c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (271 mg, 38%). LCMS-ESI+: calculado para C44H51N7O7: 789,92; observado [M+1]+: 790,76.

[0183] Metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il)-1H-imidazol-5- il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il}-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil} carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)- 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (196 mg, 0,25 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (69 mg, 0,33 mmol) e COMU (124 mg, 029 mmol) em DMF (4 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (130 μl, 0,76 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il)-1H-imidazol-5- il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il}-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (84 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculado para C49H52N8O8: 880,99; observado [M+1]+: 882,09.Exemplo AE

[0184] 5-(2-Bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-diidronaftalen- 1(2H)-ona: A uma solução agitada de 5-hidróxi-1-tetralona (2,0 g, 12,3 mmol) e 1-bromo-2-(bromometil)-4-clorobenzeno (3,6 g, 12,7 mmol) em dimetilformamida (125 ml) foi adicionado carbonato de potássio (3,5 g, 25,1 mmol). A reação foi agitada sob argônio por 1 hora então diluída com acetato de etila (1 litro). Os orgânicos foram lavados três vezes com água e uma vez com salmoura. A camada orgânica foi então seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. Ao óleo resultante foi adicionado metanol (100 ml) e a suspensão foi agitada por trinta minutos. 5-(2- Bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-diidronaftalen-1(2H)-ona (4,25 g, 94% de rendimento) foi isolada por filtração.

[0185] 8-Cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[ c,h]cromen-1- ona: A um frasco contendo pivalato de paládio (II) (68 mg, 0,22 mmol), tri(4-fluorfenil)fosfina (70 mg, 0,22 mmol), ácido piválico (135 mg, 1,3 mmol) e carbonato de potássio (1,83 g, 13,1 mmol) foi adicionada uma solução de 5-(2- bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-diidronaftalen-1(2H)-ona (1,61 g, 4,4 mmol) em dimetilacetamida (23 ml). O frasco foi evacuado e preenchido com argônio 5 vezes e então agitado sob argônio a 60°C por 24 horas. A reação foi derramada diretamente sobre uma coluna de sílica gel e purificada por cromatografia instantânea em coluna (hexanos/DCM) para gerar 8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-1- ona (1,22 g, 97% de rendimento) como um sólido esbranquiçado.

[0186] 2-Bromo-8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h] cromen-1-ona: A uma mistura de 8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro- 1H-dibenzo[c,h]cromen-1-ona (2,58 g, 9,1 mmol) em clorofórmio (9,1 ml) e acetato de etila (9,1 ml) foi adicionado brometo de cobre (II) (4,65 g, 19,9 mmol). A reação foi aquecida até 80°C por 5 horas e então resfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada duas vezes com uma solução 5:1 de cloreto de amônio aquoso saturado e hidróxido de amônio aquoso (aproximadamente 28%), e lavada uma vez com água. A camada orgânica foi seca com sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (hexanos/DCM) para gerar 2-bromo-8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h] cromen-1-ona (2,45 g, 75% de rendimento).

[0187] (2S)-1-terc-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)pirrolidina-1,2- dicarboxilato: A uma solução de 2-bromo-8-cloro-2,3,4,6- tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-1-ona (1,05 g, 2,9 mmol) e Boc-Pro-OH (1,75 g, 8,1 mmol) em acetonitrila (9,0 ml) foi adicionada diisopropiletilamina (1,5 ml, 8,7 mmol). A solução foi agitada sob argônio a 50°C por duas horas. Boc- Pro-OH (620 mg, 2,9 mmol) e diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,9 mmol) extra foram adicionados e a reação foi agitada a 50°C por 16 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos com sulfato de magnésio e concentrados. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna e o produto (2S)-1- terc-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)pirrolidina-1,2-dicarboxilato foi isolado como uma mistura de diastereômeros (0,99 g, 69% de rendimento).

[0188] terc-butil (2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7-tetrahidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S)-1-terc- butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h] cromen-2-il)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,2 g, 4,4 mmol) em tolueno (40 ml) foi adicionado acetato de amônio (7 g, 91 mmol). A mistura de reação foi vigorosamente refluída por 3 horas, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos com sulfato de magnésio e concentrados. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna para gerar terc-butil (2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7- tetrahidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,13 g, 54% de rendimento), bem como (2, S)-1-terc-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6- tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)pirrolidina-1,2- dicarboxilato recuperado (0,8 g, 36%). LCMS-ESI+: calculado para C27H28N3O3: 477,98; observado [M+1]+: 478,54.

[0189] terc-butil (2S)-2-(9-cloro-3,7-diidroisocromeno [3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato: A uma solução do Intermediário terc-butil (2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7- tetrahidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto [1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,43 g, 3,0 mmol) em diclorometano (30 ml) foi adicionado óxido de manganês (IV) (15 g, 198 mmol). A mistura foi agitada por quatro horas em temperatura ambiente, e então filtrada através de Celite. O MnO2 foi cuidadosamente enxaguado com diclorometano e o filtrado total foi concentrado para gerar terc-butil (2S)- 2-(9-cloro-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (1,37 g, 96% de rendimento). Esse material foi usado sem purificação adicional.

[0190] terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de terc-butil (2S)-2-(9-cloro-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,4 g, 2,9 mmol) em dioxano (20 ml) foi adicionado bis(pinacolato)diboro (1,5 g, 5,9 mmol), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (110 mg, 0,12 mmol), X-Phos (145 mg, 0,30 mmol) e acetato de potássio (870 mg, 8,9 mmol). A mistura foi desgaseificada com um jato de argônio por dez minutos. A reação desgaseificada foi aquecida sob argônio até 90°C por 2,5 horas, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos com sulfato de magnésio e concentrados. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (DCM/EtOAc) para gerar terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-3,7-diidroisocromeno [3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1- carboxilato (1,5 g, 90% de rendimento).

[0191] Metil [(2S)-3-metil-1-oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-diidroisocromeno [3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}butan- 2-il]carbamato: Uma solução de terc-butil (2S)-2-[9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (0,98 g, 1,7 mmol), HCl concentrado (2 ml) e etanol (20 ml) foi aquecida até 60°C por 2 horas. A reação foi concentrada e redissolvida em uma quantidade mínima de metanol. Um volume igual de diclorometano foi adicionado, e a solução foi novamente concentrada. Diclorometano foi adicionado ao resíduo resultante e retirado por concentração mais duas vezes. O material bruto resultante foi dissolvido em dimetilformamida (17 ml). A essa solução foram adicionados ácido ( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (455 mg, 2,6 mmol), HATU (955 mg, 2,5 mmol) e diisopropiletilamina (3 ml, 17 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por uma hora, e então diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água (x2) e salmoura, secos com sulfato de magnésio e concentrados. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia instantânea em coluna para gerar o Intermediário metil [(2S)-3-metil-1- oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}butan-2-il]carbamato (780 mg, 72% de rendimento ao longo de 2 etapas).

[0192] terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]pirrolidin-2-il}-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1- carboxilato: Uma mistura do Intermediário pentacíclico metil [(2S)-3-metil-1-oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}butan-2-il]carbamato (780 mg, 1,3 mmol), (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (450 mg, 1,4 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (30 mg, 0,03 mmol),PdCl2 (dppf) (60 mg, 0,08 mmol), 2 M de carbonato de potássio aquoso (1,9 ml, 3,9 mmol), dimetoxietano (10 ml) e dimetilformamida (2 ml) foi desgaseificada com argônio por 15 minutos. A reação foi então aquecida até 85°C por 3 horas. Após o término, a reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e filtrada através de Celite. O filtrado foi lavado com água e salmoura, seco (MgSO4) e concentrado. O material bruto resultante foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (EtOAc/MeOH) para gerar o Intermediário terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (390 mg, 43% de rendimento).

[0193] metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Uma mistura do Intermediário terc-butil (2R)- 2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2- il}-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (390 mg, 0,53 mmol), HCl concentrado (2 ml) e etanol (10 ml) foi aquecida até 60°C por 2 horas. A reação foi concentrada e redissolvida em uma quantidade mínima de metanol. Um volume igual de diclorometano foi adicionado, e a solução foi novamente concentrada. Diclorometano foi adicionado ao resíduo resultante e retirado por concentração mais duas vezes. Metade do material bruto (aproximadamente 0,27 mmol) foi dissolvida em dimetilformamida (2,5 ml). A essa solução foram adicionados ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (66 mg, 0,38 mmol), HATU (140 mg, 0,37 mmol) e diisopropiletilamina (0,48 ml, 2,7 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas, e então diluída com acetonitrila (2 ml) e metanol (2 ml). A essa solução foram adicionadas dez gotas de solução aquosa de 5 M de NaOH e a agitação foi continuada por 30 minutos. A reação foi diluída com acetato de etila e a camada orgânica foi lavada com água e salmoura. As lavagens aquosas combinadas foram extraídas três vezes com acetato de etila, e as camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e concentradas. O material bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%) para gerar metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 3,7-diidroisocromeno [3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (140 mg, 67% de rendimento ao longo de 2 etapas). LCMS-ESI+: calculado para C43H50N8O7: 790,91; observado [M+1]+: 791,71.Exemplo AF

[0194] Esse composto foi feito de uma forma análoga ao Exemplo de metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato, com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético substituindo ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico e COMU substituindo HATU na etapa de acoplamento de amida final. LCMS-ESI+: calculado para C46H48N8O7: 824,92; observado [M+1]+: 825,72.Exemplo AG

[0195] terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura de terc-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (450 mg, 0,79 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3- metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (325 mg, 0,87 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (30 mg, 0,02 mmol),PdCl2(dppf) (35 mg, 0,05 mmol), 2 M de carbonato de potássio aquoso (1,2 ml, 2,4 mmol), dimetoxietano (6,8 ml) e dimetilformamida (1,2 ml) foi desgaseificada com argônio por 15 minutos. A reação foi então aquecida até 85°C por 2,5 horas. Após o término, a reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e filtrada através de Celite. O filtrado foi lavado com água e salmoura, seco (MgSO4) e concentrado. O material bruto resultante foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (EtOAc/MeOH) para gerar terc-butil (2S)-2-[9-(2- {(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (270 mg, 46% de rendimento).

[0196] Metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirrolidin-2-il]-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Uma mistura de terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)- 1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol- 5-il)-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il]pirrolidina-1-carboxilato (270 mg, 0,37 mmol), HCl concentrado (1,5 ml) e etanol (8 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e redissolvida em uma quantidade mínima de metanol. Um volume igual de diclorometano foi adicionado e a solução foi novamente concentrada. Diclorometano foi adicionado ao resíduo resultante e retirado por concentração mais duas vezes. O material bruto foi dissolvido em diclorometano/dimetilformamida 5:1 (3,8 ml). A essa solução foram adicionados ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (96 mg, 0,46 mmol), COMU (190 mg, 0,44 mmol) e diisopropiletilamina (0,20 ml, 1,1 mmol). A reação foi agitada a 0°C por 30 minutos, e então aquecida até a temperatura ambiente. Após o término, a reação foi diluída com acetonitrila (2 ml) e metanol (2 ml). A essa solução foram adicionadas dez gotas de solução aquosa de 5 M de NaOH e a agitação foi continuada por 30 minutos. A reação foi diluída com acetato de etila e a camada orgânica foi lavada com água e salmoura. As lavagens aquosas combinadas foram extraídas três vezes com acetato de etila, e as camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4) e concentradas. O material bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 45% + TFA 0,1%) para gerar metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirrolidin-2-il]-3,7- diidroisocromeno [3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (155 mg, 51% de rendimento ao longo de 2 etapas). LCMS-ESI+: calculado para C46H48N8O7: 824,92;observado [M+1] 825,67.Exemplo AH

[0197] Dimetil (2S,2’S)-1,1’-((2S,2’S)-2,2’-pirrolidin-2- il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-diil) dicarbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato, com 7-hidróxi-1-tetralona substituindo 5- hidróxi-1-tetralona na primeira etapa da seqüência. Todas as reações na síntese do Exemplo AH geraram rendimentos de produto similares à síntese de metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2- [(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil} pirrolidin-2-il]-3,7-diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato. LCMS-ESI+: calculado para C43H50N8O7: 790,91; observado [M+1]+: 791,6.Exemplo AI

[0198] Metil [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino]-3-metil-1-oxobutan-2-il}pirrolidin-2-il)-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirrolidin-1-il)-fenil-1-oxoacet-2- il]carbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a dimetil (2S,2’S)-1,1’-((2S,2’S)-2,2’1-pirrolidin-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-diil)dicarbamato, com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético substituindo ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico e COMU substituindo HATU na etapa de acoplamento de amida final. LCMS-ESI+: calculado para C46H48N8O7: 824,92; observado [M+1]+: 825,67.Exemplo AJ

[0199] Dimetil (2S,2’S)-1,1’-((2S,2’S)-2,2’1-pirrolidin-2- il)-7H-diidro-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1- diil)dicarbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a dimetil (2S,2’S)-1,1’-((2S,2’S)-2,2’1-pirrolidin-2-il)- 5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-diil)dicarbamato, omitindo a oxidação de MnO2 de terc-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato. LCMS-ESI+: calculado para C43H52N8O7: 792,40; observado [M+1]: 793,69.Exemplo AK

[0200] Metil [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino]-3-metil-1-oxobutan-2-il}pirrolidin-2-il)-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]- 1H-imidazol-2-il}pirrolidin-1-il)-fenil-1-oxoacet-2-il] carbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a dimetil (2S,2’S)-1,1’-((2S,2’S)-2,2’1-pirrolidin-2-il)-7H- diidro-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol- 2-il)pirrolidin-1-il))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-diil)dicarbamato, com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético substituindo ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico e COMU substituindo HATU na etapa de acoplamento de amida final. LCMS-ESI+: calculado para C46H50N8O7: 826,94; observado [M+1]+: 827,71.Exemplo AL

[0201] Ácido [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino](fenil) acetil}pirrolidin-2-il)-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2- il}pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbâmico: Esse composto foi feito de forma análoga a metil {(2S)-1-[(2R)- 2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2- fenilacetil}pirrolidin-2-il]-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato, com terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5- il)-3,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato substituindo terc-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7- diidroisocromeno[3’,4’:5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato. LCMS-ESI+: calculado para C46H50N8O7: 826,94; observado [M+1]+: 827,64. Exemplo AM

[0202] (2S,4S)-metil {4-(metoximetil)-2-[(9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidin-lil]-3- metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de (2S,4S)- terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (424 mg, 0,69 mmol), etanol (6 ml) e HCl concentrado (2 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (10 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido 2-metoxicarbonilamino-3-metilbutírico (152 mg, 0,86 mmol) e HATU (303 mg, 0,79 mmol) em DMF (6 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (360 μl, 2,08 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com solução de NaHCO3 5%, água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e seca sob vácuo para gerar (2S,4S)-metil {4- (metoximetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato.

[0203] terc-butil(2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-metil {4-(metoximetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,69 mmol), (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (220 mg, 0,69 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (24 mg, 0,02 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (31 mg, 0,04 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (6,0 ml) e dimetilformamida (1,0 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 1.04 ml, 2,0 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (terc- butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]- 4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (145 mg, 27%).

[0204] Metil{(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato: Uma solução de terc-butil (2S)-2-[5- (2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (145 mg, 0,18 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (51 mg, 0,24 mmol) e COMU (92 mg, 021 mmol) em DMF (3 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (100 μl, 0,5 6 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 43% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2- [(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (68 mg, 39%). MS (ESI) m/z 870 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,71 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,09 (m, 1H), 7,88-7,63 (m, 6H), 7,36-7,29 (m, 6H), 5,41 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,30-5,24 (m, 2H), 5,14-5,10 (m, 1H), 4,13-3,09 (m, 15H), 2,47-1,80 (m, 8H), 0,80 (dd, 6H, J = 6,4 Hz, J = 23 Hz). Exemplo AN

[0205] terc-butil(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-3,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (438 mg, 0,72 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (276 mg, 0,72 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (41 mg, 0,04 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (52 mg, 0,07 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (8,6 ml) e dimetilformamida (1,5 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 1,07 ml, 2,15 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc- butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (182 mg, 32%).

[0206] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de terc- butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (182 mg, 0,18 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (47 mg, 0,23 mmol) e COMU (85 mg, 0,2 mmol) em DMF (3 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (90 μl, 0,52 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 49% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil) amino]-2-fenilacetil}- 4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (32 mg, 39%). MS (ESI) m/z 884 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,70 (s, 1H), 8,21 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,08 (s, 1H), 7,90-7,64 (m, 6H), 7,34-7,31 (m, 3H), 7,64 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,28-5,25 (m, 3H), 5,05-5,01 (m, 1H), 4,19-4,04 (m, 3H), 3,67-3,15 (m, 15H), 2,51-2,46 (m, 4H), 1,95-1,92 (m, 2H), 1,82-1,76 (m, 1H), 1,10 (d, 3H, J = 6 Hz), 0,75 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 14 Hz).Exemplo AO

[0207] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- metoximetilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: A uma solução de metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (57 mg, 0,08 mmol), ácido 2-metoxicarbonilamino-3- metilbutírico (19 mg, 0,1 mmol), HATU (303 mg, 0,79 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionada diisopropiletilamina (43 μl, 0,24 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com solução de NaHCO3 5%, água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 43% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(2S)-1- [(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil} -4-metoximetilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (13 mg, 19%). MS (ESI) m/z 850 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,28-8,13 (m, 1H), 8,12-7,99 (m, 1H), 7,907,75 (m, 3H), 7,73-7,65 (m, 1H), 7,63-7,57 (m, 1H), 7,347,19 (m, 2H), 5,30-5,24 (m, 2H), 5,21-4,95 (m, 2H), 4,333,93 (m, 6H), 3,23-3,58 (m, 12H), 2,76-2,59 (m, 2H), 2,021,73 (m, 6H), 1,12-1,07 (m, 3H), 0,86-0,68 (m, 12H). Exemplo AP

[0208] terc-butil(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-3,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (217 mg, 0,35 mmol), metil (S)-1-((2S,5S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (170 mg, 0,39 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (21 mg, 0,02 mmol) e dicloro[1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (26 mg, 0,04 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (4,3 ml) e dimetilformamida (0,75 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,53 ml, 1,06 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar terc- butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (110 mg, 39%).

[0209] Metil{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- metoximetilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-3,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (108 mg, 0,14 mmol), etanol (2 ml) e HCl concentrado (0,7 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (10 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido 2-metoxicarbonilamino-3- metilbutírico (31 mg, 0,18 mmol) e HATU (60 mg, 0,16 mmol) em DMF (2 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (70 μl, 0,41 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com solução de NaHCO3 5%, água e salmoura, seca (Na2SO4), Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com solução de NaHCO3 5%, água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 43% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- metoximetilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato (52 mg, 45%). MS (ESI) m/z 850 [M+H]+. 1H- RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,69 (s, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,99-7,86 (m, 4H), 7,72 (s, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,51 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,23 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,29 (s, 2H), 5,22-5,18 (m, 1H), 5,01-4,70 (m, 1H), 4,64-4,61 (m, 1H), 4,21-4,17 (m, 1H), 4,09-4,05 (m, 1H), 3,92-3,88 (m, 1H), 3,59-3,08 (m, 14H), 2,67-1,83 (m, 7H), 1,43 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,91-0,71 (m, 12H). Exemplo AQ

[0210] (2S,4R)-terc-butil-4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura desgaseificada de -(2S,4R)-terc- butil-2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (335 mg, 0,64 mmol), bis(pinacolato)diboro (246 mg, 0,96 mmol), acetato de potássio (190 mg, 1,9 mmol), tris(dibenzilidenoacetona) paládio (24 mg, 0,02 mmol) e 2- diciclohexilfosfino-2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’-bifenil (31 mg, 0,06 mmol) em 1,4-dioxano (3,3 ml) foi aquecida até 90°C por 3 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4R)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (379 mg, 96%).

[0211] (2S,4R)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metil butanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de (2S,4R)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (299 mg, 0,49 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3- metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (217 mg, 0,58 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (28 mg, 0,02 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (35 mg, 0,04 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (4,3 ml) e dimetilformamida (0,75 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,73 ml, 1,46 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4R)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil) pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (170 mg, 45%).

[0212] Metil{(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-5-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2- oxo-feniletil}carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (170 mg, 0,22 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (59 mg, 0,28 mmol) e COMU (108 mg, 025 mmol) em DMF (3 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (110 μl, 0,6 6 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 44% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2- [(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-feniletil}carbamato (67 mg, 35%). MS (ESI) m/z 870 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,71 (s, 1H), 8,20 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,01 (m, 1H), 7,917,64 (m, 6H), 7,38-7,28 (m, 6H), 6,85 (s, 1H), 5,51 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 5,39-5,29 (m, 3H), 5,13-5,09 (m, 1H), 4,113,04 (m, 15H), 2,77-1,98 (m, 8H), 0,79 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 12,8 Hz).Exemplo AR

[0213] (2S,4S)-terc-butil4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5-diidro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura desgaseificada de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (322 mg, 0,61 mmol), bis(pinacolato)diboro (235 mg, 0,92 mmol), acetato de potássio (182 mg, 1,9 mmol), tris(dibenzilidenoacetona) paládio (23 mg, 0,02 mmol) e 2-diciclohexilfosfino- 2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’-bifenil (29 mg, 0,06 mmol) em 1,4-dioxano (3,3 ml) foi aquecida até 90°C por 3 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5-diidro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (267 mg, 70%).

[0214] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il-4,5-diidro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 4- (metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-4,5-diidro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (267 mg, 0,52 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (195 mg, 0,52 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (25 mg, 0,02 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno] paládio (II) (32 mg, 0,04 mmol) em uma mistura de 1,2- dimetoxietano (4,3 ml) e dimetilformamida (0,75 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,65 ml, 1,3 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2- il)-1H-imidazol-5-il-4,5-diidro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (75 mg, 22%).

[0215] Metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-5-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]-4,5- diidro-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-(metoximetil)pirrolidin- 1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Uma solução de (2S,4S)- terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-diidro- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (75 mg, 0,09 mmol), etanol (2 ml) e HCl concentrado (0,6 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (26 mg, 0,13 mmol) e COMU (47 mg, 0,11 mmol) em DMF (2 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (50 μl, 0,2 9 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 44% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2- [(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]-4,5-diidro-nafto[1,2- d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (15 mg, 18%). MS (ESI) m/z 872 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 7,95-7,63 (m, 6H), 7,35-7,25 (m, 7H), 6,97 (s, 1H), 5,42 (d, 1H, J = 6,8 Hz), 5,18 (s, 2H), 5,09 (s, 2H), 4,28-2,63 (m, 19H), 2,47-1,80 (m, 8H), 0,77 (dd, 6H, J = 4,8 Hz, J = 12,4 Hz).Exemplo AS

[0216] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 4- (metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il)pirrolidina-1-carboxilato (400 mg, 0,85 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)pirrolidin- 1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (360 mg, 0,85 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (38 mg, 0,03 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (48 mg, 0,07 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (8,0 ml) e dimetilformamida (1,4 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,98 ml, 1,96 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea até (2S,4S)-terc- butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil) pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (156 mg, 29%).

[0217] Metil{(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (156 mg, 0,18 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada (90 mg, 0,12 mmol) e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (34 mg, 0,16 mmol) e COMU (61 mg, 014 mmol) em DMF (2 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (60 μl, 0,37 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 49% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil) amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d] imidazol-6-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (62 mg, 56%). MS (ESI) m/z 920 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,73 (s, 1H), 8,17 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,94 (d, 3H, J = 8,8 Hz), 7,84-7,67 (m, 6H), 7,37-7,29 (m, 6H), 5,48 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,35-5,20 (m, 5H), 4,14-3,12 (m, 15H), 2,52-1,92 (m, 8H), 0,80 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 6,4 Hz).Exemplo AT

[0218] Metil{(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de (2S,4S)- terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (156 mg, 0,18 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (6 ml). Essa solução foi concentrada e a (68 mg, 0,09 mmol) desse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (21 mg, 0,12 mmol) e COMU (41 mg, 01 mmol) em DMF (1 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (50 μl, 0,28 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 44% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (32 mg, 40%). MS (ESI) m/z 886 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,71 (s, 1H), 8,15 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,95-7,64 (m, 8H), 7,28 (dd, 2H, J = 8,8 Hz, J = 14,4 Hz), 5,31 (s, 2H), 5,23-5,19 (m, 2H), 4,093,85 (m, 5H), 3,58-3,28 (m, 14H), 2,47-1,89 (m, 9H), 0,830,72 (m, 12H).

[0219] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S)-metil {-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-lil]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (460 mg, 0,74 mmol), (2S,4S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol- 2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (250 mg, 0,61 mmol), tetrakis (trifenilfosfina)paládio (0) (35 mg, 0,03 mmol) e dicloro[1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (45 mg, 0,06 mmol) em uma mistura de 1,2-dimetoxietano (9,0 ml) e dimetilformamida (1,5 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,92 ml, 1,84 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C sob argônio por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4) e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]- pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (123 mg, 26%).

[0220] Metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato: Uma solução terc-butil (2S,4S)-2-[5- (2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-pirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina- carboxilato (122 mg, 0,16 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (3 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (43 mg, 0,2 mmol) e COMU (77 mg, 018 mmol) em DMF (3 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (80 μl, 0,37 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 44% + TFA (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,30-5,24 (m, 2H), 5,14-5,10 (m, 6,4 Hz, J = 23 Hz).Exemplo AV

[0221] (1R,3S,5R)-terc-butil3-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4- metoximetilpirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2- azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxilato: A uma solução de (1R,3S,5R)-terc-butil-3-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxilato (213 mg, 0,37 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5- bromo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il)-3- metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (142 mg, 0,31 mmol), tetrakis (trifenilfosfina)paládio (0) (35 mg, 0,03 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (22 mg, 0,03 mmol) em uma mistura de 1,4-dioxano (3,0 ml) e dimetilsulfóxido (3,0 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,46 ml, 0,9 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 95°C sob argônio por 7 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com água e salmoura, secos (Na2SO4), e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em (1R,3S,5R)- terc-butil 3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-4-metoximetilpirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5- il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxilato (101 mg, 42%).

[0222] Metil{(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- metoximetilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato : Uma solução (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metoximetilpirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2- azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxilato (101 mg, 0,16 mmol), etanol (3 ml) e HCl concentrado (1 ml) foi aquecida até 60°C por 1 hora. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DCM (3 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido ( R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (35 mg, 15 0.17 mmol) e COMU (63 mg, 015 mmol) em DMF (3 ml). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (70 μl, 0,3 8 mmol) . Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC preparativa de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 44% + TFA 0,1%). As frações de produto foram liofilizadas para gerar metil {(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-4-metoximetilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (71 mg, 63). MS (ESI) m/z 882 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,17 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 8,04 (s, 1H), 7,87-7,59 (m, 6H), 7,39-7,22 (m, 6H), 5,72 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,68 (s, 1H), 5,25 (s, 1H), 5,135,01 (m, 2H), 4,12-4,00 (m, 2H), 3,81-3,00 (m, 13H), 2,60 (m, 1H), 2,43-2,37 (m, 3H), 1,92-1,82 (m, 3H), 0,83-0,58 (m, 7H), 0,59 (s, 1H), 0,00 (s, 1H).Exemplo AW

[0223] Esse composto foi sintetizado usando as mesmas condições que o Exemplo BX, substituindo com o respectivo ácido (1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexano-3-carboxílico e ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-2-carboxílico como apropriado. MS (ESI) m/z 918 [M+H]+.Exemplo AX

[0224] Esse composto foi sintetizado usando as mesmas condições que o Exemplo BX substituindo com o respectivo ácido (1R,3S,5R)-2-((2S,3S)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexano-3-ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico como apropriado. MS (ESI) m/z 898 [M+H]+. Exemplo AY

[0225] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 9-bromo-3-cloro-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (1,32 g, 3,63 mmol) em MeCN (40 ml) foi adicionado ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico (1,0 g, 4,36 mmol) e DIPEA (0,7 ml, 3,99 mmol). Após agitação por 18 h, a solução foi diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 10% a 40%) para gerar (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-metilpirrolidina- 1,2-dicarboxilato (1,31 g, 70%).

[0226] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-5H-nafto[c,g] cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina- 1-carboxilato: (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,31 g, 2,56 mmol) foram adicionados xilenos (25 ml) e acetato de amônio (3,95 g, 51,2 mmol) e a solução foi aquecida até 136°C e agitada de um dia para o outro. Na manhã seguinte, a solução foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 60% a 100%) para gerar (2S,4S)-terc-butil 2- (9-cloro-4,5-diidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2- il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (711 mg, 56%).

[0227] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil) pirrolidina-1-carboxilato (935 mg, 1,9 mmol) em CH2Cl2 (20 ml) foi adicionado MnO2 (8,25 g, 95 mmol). A mistura de reação foi agitada por 3 h, e então filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 10%) para gerar (2S,4S)- terc-butil 2-(9- cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (692 mg, 74%).

[0228] (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,4S)- terc-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol- 2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (692 mg, 1,41 mmol) em dioxano (15 ml) foram adicionados bis(pinacolato)diboro (1,07 g, 4,23 mmol), KOAc (415 mg, 4,23 mmol), X-Phos (52 mg, 0,11 mmol) e Pd2dba3 (26 mg, 0,03 mmol). A solução foi desgaseificada com N2 por 10 min, e então aquecida até 100°C por 16 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado, salmoura, seca com MgSO4 e concentrada,purificada por cromatografia em sílica gel (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d] imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (821 mg, quantitativo).

[0229] (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)- 4(metil)pirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4S)-terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino) metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9- d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (821 mg, 1,41 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (1,05 g, 2,82 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) 162 mg, 0,14 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (102 mg, 0,14 mmol) em DME (15 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 2,32 ml, 4,65 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 85°C por 18 horas. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com bicarbonato de sódio saturado e salmoura, secos sobre MgSO4 e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (386 mg, 37%).

[0230] Metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4- (metil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)-1H- imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (386 mg, 0,52 mmol), CH2Cl2 (8 ml), MeOH (2 ml) e HCl (4 M em dioxano, 2 ml) e foi agitada de um dia para o outro. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DMF (8 ml). Essa solução foi concentrada e a esse material foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (108 mg, 0,52 mmol) e COMU (248 mg, 0,52 mmol). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (0,45 ml, 2,6 mmol). Após agitação por 2 horas em temperatura ambiente, a reação foi diluída com MeOH/EtOAc 10%, lavada com NaHCO3 saturado, água e salmoura, seca (Na2SO4), concentrada e purificada por HPLC para gerar metil {2-[2-{9-[2-(1-{2- [(metoxicarbonil) amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4- metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (27 mg, 6%). LCMS-ESI: calculado para C47H50N8O7: 838,38; observado [M+1]+: 840,12. Exemplo AZ

[0231] Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato: (2S,4S)- terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo [3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil)pirrolidina-1-carboxilato (950 mg, 1,63 mmol) foi dissolvido em DCM (12 ml), MeOH (3 ml) e HCl (4 M em dioxano, 3 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 4 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (285 mg, 1,63 mmol), HATU (620 mg, 1,63 mmol) e DMF (15 ml), então DIPEA (1,42 ml, 8,15 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 1 h, a mistura foi diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar metil [(2S)-3- metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2- il]carbamato (596 mg, 57%).

[0232] Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil) -L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato: Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2- il]carbamato (298 mg, 0,47 mmol), (S)-terc-butil 2-(5- bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (443 mg, 1,4 mmol), Pd(PPh3)4 (54 mg, 0,05 mmol), PdCl2(dppf)2 (36 mg, 0,05 mmol), e K2CO3 (2 M em H2O, 0,78 ml, 1,55 mmol) foram combinados em DME (5 ml). A mistura foi desgaseificada com N2 borbulhante por 10 min e aquecida até 85°C por 16 h. Após resfriamento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar terc-butil (2S)-2- [5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (84 mg, 24%).

[0233] Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (84 mg, 0,11 mmol) foi dissolvido em DCM (2,5 ml), MeOH (0,5 ml) e HCl (4 M em dioxano, 0,5 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 18 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (23 mg, 0,11 mmol), COMU (53 mg, 0,11 mmol) e DMF (3 ml), então DIPEA (0,10 ml, 0,56 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 30 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil) amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (41 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculado para C47H50N8O7: 838,38; observado [M+1]+: 839,39.Exemplo BA

[0234] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (164 mg, 0,23 mmol) foi dissolvido em DCM (2,57 ml), MeOH (0,7 ml) e HCl (4 M em dioxano, 0,7 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 16 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (30 mg, 0,17 mmol), HATU (65 mg, 0,17 mmol) e DMF (3 ml), então DIPEA (0,15 ml, 0,85 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 45 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (23 mg, 16%). LCMS- ESI+: calculado para C45H54N8O7: 818,41; observado [M+1] 820,70. Exemplo BB

[0235] Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,4S)- terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino) metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5- il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (293 mg, 0,78 mmol), (2S,4S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-Pd(PPh3)4 (60 mg, 0,052 mmol), PdCl2(dppf)2 (38 mg, 0,052 mmol), e K2CO3 (2 M em H2O, 0,86 ml, 1,72 mmol) foram combinados em DME (6 ml). A mistura foi desgaseificada com N2 borbulhante por 10 min e aquecida até 85°C por 16 h. Após resfriamento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (100% EtOAc) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (183 mg, 50%).

[0236] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2-il] - 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (183 mg, 0,26 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (91 mg, 0,52 mmol), HATU (198 mg, 0,52 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,45 ml, 2,6 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 1 h, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10 sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromen[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato (6 mg, 3%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O7: 818,41; observado [M+1]+: 819,41. Exemplo BC

[0237] Terc-butil (2S,4S)-249-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[l,2- d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,4S)- terc-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan- 3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9- d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (558 mg, 0,96 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2- il)-4-metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2- ilcarbamato (501 mg, 1,15 mmol), Pd(PPh3)4 (111 mg, 0,096 mmol), PdCl2(dppf)2 (70 mg, 0,096 mmol), e K2CO3 (2 M em H2O, 1,6 ml, 3,17 mmol) foram combinados em DMSO (6 ml) e dioxano (6 ml). A mistura foi desgaseificada com N2 borbulhante por 10 min e aquecida até 95°C por 14 h. Após resfriamento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0%-30%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (257 mg, 35%).

[0238] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirrolidin-2- il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1- carboxilato (257 mg, 0,34 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 3 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético (71 mg, 0,34 mmol), COMU (161 mg, 0,34 mmol) e DMF (6 ml), então DIPEA (0,3 ml, 1,67 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 15 h, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S)-1- [(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirrolidin-2- il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato (152 mg, 53%). LCMS-ESI+: calculado para C48H52N8O7: 852,40; observado [M+1]+: 854,26. 1H-RNM (CD3OD): 8,677 (s, 1H), 8,232-7,837 (m, 5H), 7,695-7,673 (m, 2H), 7,496-7,426 (m, 5H), 5,499 (s, 1H), 5,445-5,401 (m, 1H), 5,337 (s, 1H), 5,253-5,208 (q, 1H, J = 7,2 Hz), 4,870 (m, 1H), 4,230 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 3,781 (m, 1H), 3,671 (s, 3H), 3,607 (s, 3H), 3,425 (m, 3H), 2,750-2,689 (m, 2H), 2,683 (m, 2H), 2,384 (m, 1H), 1,894 (quint., 2H, J = 12 Hz), 1,249-1,151 (m, 6H), 0,974-0,890 (m, 6H). Exemplo BD

[0239] (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona em MeCN (30 ml) foram adicionados ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico (1,2 g, 3,23 mmol) e trietilamina (0,48 ml, 3,55 mmol) e a solução foi aquecida até 50°C. Após agitação por 15 h, a solução foi resfriada até a temperatura ambiente, e diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 20% a 50%) para gerar (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (1,09 g, 65%).

[0240] (2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: (2S,5S)-1-terc-butil 2- (2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 3-il)etil) 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,29 g, 2,48 mmol) foi dissolvido em uma solução de DCM (17,5 ml) e MeOH (7 ml), então tratado com tribrometo de piridínio (873 mg, 2,73 mmol). Após agitação em temperatura ambiente por 1 h, a mistura de reação foi diluída com DCM e HCl 10%, e extraída com DCM. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi levado adiante sem purificação adicional.

[0241] (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil) -5- metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro- 5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: (2S,5S)-2-(2-(9-bromo- 8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2- oxoetil) 1- terc-butil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (700 mg, 1,17 mmol) foi tratado com uma solução de ácido (2 S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico (375 mg, 1,64 mmol) em acetona (6 ml) e CS2CO3 (267 mg, 0,82 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 40°C por 16 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 40% a 100%) para gerar (2S,5S)-2-(2- (9-((2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (464 mg, 53%).

[0242] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,5S)- 2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro- 5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (464 mg, 0,62 mmol) e NH4OAc (8,48 g, 110,0 mmol) foram suspensos em uma solução de PhMe/2-metoxietanol 10:1 (22 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 110°C por 20 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (393 mg, 90%).

[0243] Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato: Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (393 mg, 0,55 mmol) foi suspenso em DCM (7 ml) e MnO2 ativado (1,45 g, 16,7 mmol) foi adicionado em uma porção única. A mistura de reação foi aquecida até 40°C. Após agitação por 2,5 h, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e a lama foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi levado à etapa seguinte sem purificação adicional para gerar terc-butil (2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2- il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (328 g, 85%).

[0244] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (164 mg, 0,23 mmol) foi dissolvido em DCM (7 ml), MeOH (1,5 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1,5 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 16 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (81 mg, 0,46 mmol), HATU (175 mg, 0,46 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,4 ml, 2,34 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 35 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato (132 mg, 69%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O7: 818,41; observado [M+1]+: 820,19. 1H-RNM (CD3OD): 8,492 (m, 1H), 8,179-7,538 (m, 7H), 5,267-5,201 (m, 3H), 5,125-5,082 (m, 1H), 4,070 (m, 1H), 3,383-3,592 (m, 4H), 3,225 (s, 3H), 2,466-2,249 (m, 5H), 1,992-1,892 (m, 3H), 1,568 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,490 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,266 (m, 2H), 1,020-0,806 (m, 14H).

[0245] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2-il] - 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (164 mg, 0,23 mmol) foi dissolvido em DCM (7 ml), MeOH (1,5 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1,5 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 16 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (90 mg, 0,46 mmol), HATU (175 mg, 0,46 mmol) e DMF (6 ml), então DIPEA (0,4 ml, 2,34 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 30 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato (97 mg, 50%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O9: 850,40; observado [M+1]+: 851,58. 1H-RNM (CD3OD): 8,631 (s, 1H), 8,191-7,938 (m, 7 H), 6,100 (m, 1 H), 5,925 (m, 1H), 5,303 (m, 3H), 5,179 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,406-4,358 (m, 2H), 3,754-3,598 (m, 8H), 3,376 (s, 3H), 3,263 (s, 3H), 2,625-2,256 (m, 6H), 2,038-1,955 (m, 2H), 1,598 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,530 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,302-1,099 (m, 6H).Exemplo BF

[0246] (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: (2S,5S)-2-(2- (9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (800 mg, 1,34 mmol) foi tratado com uma solução de ácido (2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4- (metoximetil) pirrolidina-2-carboxílico (485 mg, 1,87 mmol) em acetona (6 ml) e Cs2CO3 (306 mg, 0,94 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 40°C por 16 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 40% a 100%) para gerar (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro- 5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (680 mg, 65%).

[0247] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1- carboxilato: (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-SH-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1- terc-butil 5-metilpirrolidina-1, 2-dicarboxilato (680 mg, 0,87 mmol) e NH4OAc (10,0 g, 130,0 mmol) foram suspensos em uma solução de PhMe/2-metoxietanol 10:1 (22 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 110°C por 24 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (461 mg, 72%).

[0248] Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato: Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (461 mg, 0,62 mmol) foi suspenso em DCM (7 ml) e MnO2 ativado (1,6 g, 18,8 mmol) foi adicionado em uma porção única. A mistura de reação foi aquecida até 40°C. Após agitação por 5,5 h, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e a lama foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi levado à etapa seguinte sem purificação adicional para gerar terc-butil (2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-30 metilpirrolidina-1-carboxilato (414 g, 90%).

[0249] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- (metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan- 2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (207 mg, 0,28 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 1,5 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico (106 mg, 0,56 mmol), HATU (214 mg, 0,56 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,49 ml, 2,8 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 30 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)- 1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato (132 mg, 69%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O7: 876,45; observado [M+1]+: 879,02. Exemplo BG

[0250] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil)-4- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: A uma solução de 3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (647 mg, 1,74 mmol) em MeCN (20 ml) foi adicionado ácido (2 S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2- carboxílico (559 mg, 2,44 mmol) e DIPEA (0,36 ml, 2,09 mmol) e a solução foi aquecida até 60°C. Após agitação por 3 h, a solução foi resfriada até a temperatura ambiente, e diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 20% a 50%) para gerar (2S,4S)-1-terc-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil)-4-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (621 mg, 69%).

[0251] (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 4- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: (2S,4S)-1-terc-butil 2- (2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 3-il)etil)-4-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (621 mg, 1,19 mmol) foi dissolvido em uma solução de DCM (10 ml) e MeOH (4 ml), então tratado com tribrometo de piridínio (421 mg, 1,3 mmol). Após agitação em temperatura ambiente por 1,5 h, a mistura de reação foi diluída com DCM e HCl 10%, e extraída com DCM. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi levado adiante sem purificação adicional.

[0252] (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 4-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: (2S,4S)-2-(2- (9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 4-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (709 mg, 1,18 mmol) foi tratado com uma solução de ácido (2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4- (metoximetil) pirrolidina-2-carboxílico (614 mg, 2,36 mmol) em Me-THF (12 ml) e Cs2CO3 (384 mg, 1,18 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 50°C por 16 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 40% a 100%) para gerar (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 4-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (651 mg, 71%).

[0253] Terc-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1- carboxilato: (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboniloxi)- 8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2- oxoetil) 1- terc-butil 4-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (651 mg, 0,84 mmol) e NH4OAc (10,0 g, 129,7 mmol) foram suspensos em uma solução de PhMe/2-metoxietanol 10:1 (22 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 110°C por 20 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar t erc-butil (2S,5S)- 2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-metilpirrolidina-1-carboxilato (382 mg, 62%).

[0254] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: Terc- butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-metilpirrolidina-1-carboxilato (382 mg, 0,52 mmol) foi suspenso em DCM (8 ml) e MnO2 ativado (1,35 g, 15,5 mmol) foi adicionado em uma porção única. A mistura de reação foi aquecida até 35°C. Após agitação por 15 h, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e a lama foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi levado à etapa seguinte sem purificação adicional para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5- (2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il}-1,11- diidroiaocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (347 g, 91%).

[0255] Metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 1-oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1- carboxilato (174 mg, 0,24 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 5 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi (metoxicarbonilamino)butanóico (92 mg, 0,48 mmol), HATU (182 mg, 0,48 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,31 ml, 2,4 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 35 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirrolidin-2- il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato (72 mg, 34%). LCMS-ESI+: calculado para C46H56N8O10: 880,41; observado [M+1]+: 882,39. 1H-RNM (CD3OD): 8,558 (s, 1H), 8,123-7,572 (m, 7H), 5,436-5,391 (dd, 1H, J = 7,2, 3,6 Hz), 5,252 (s, 2H), 5,220 (m, 1H), 4,493-4,444 (m, 2H), 4,2874,206 (m, 2H), 3,756-3,256 (m, 21H), 2,834 (m, 1H), 2,7172,621 (m, 2H), 2,500 (m, 1H), 2,150 (m, 1H), 1,882 (m, 1H), 1,208 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,159-1,099 (m, 6H).Exemplo BH

[0256] (2S,5S)-2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxilato: A uma solução de 3-(2-bromoacetil)-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (750 mg, 2,02 mmol) em MeCN (20 ml) foi adicionado ácido (2S,5 S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico (600 mg, 2,09 mmol) e DIPEA (0,35 ml, 2,02 mmol) e a solução foi aquecida até 60°C. Após agitação por 4 h, a solução foi resfriada até a temperatura ambiente, e diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 40% a 80%) para gerar (2S,5S)-2-oxo-2-(8- oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxilato (1,16 g, quantitativo).

[0257] (2S,5S)-2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil 1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxilato: (2S,5S)-2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro- 5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxilato (400 mg, 0,61 mmol) foi dissolvido em uma solução de DCM (15 ml) e MeOH (6 ml), e então tratado com tribrometo de piridínio (409 mg, 1,28 mmol). Em 2 h, uma porção adicional de tribrometo de piridínio (40 mg) foi adicionada. Após agitação em temperatura ambiente por mais 20 min, a mistura de reação foi diluída com DCM e HCl 10%, e extraída com DCM. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi levado adiante sem purificação adicional.

[0258] (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboniloxi)acetil)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato: (2S,5S)-2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil 1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxilato) foi tratado com uma solução de ácido (2 S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2- carboxílico (280 mg, 1,22 mmol) em Me-THF (6 ml) e Cs2CO3 (199 mg, 0,61 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 50°C por 2,5 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 50% a 100%) para gerar (2S,4S)-1- terc-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboniloxi)acetil)- 8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (441 mg, 90%).

[0259] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1- carboxilato: (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboniloxi)acetil)-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-metilpirrolidina- 1,2-dicarboxilato (441 mg, 0,55 mmol) e NH4OAc (5 g, 65,0 mmol) foram suspensos em uma solução de PhMe/2-metoxietanol 10:1 (11 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 110°C por 7 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar t erc-butil (2S,4S)- 2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]- 4-metilpirrolidina-1-carboxilato (266 mg, 63%).

[0260] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: Terc- butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]- 4-metilpirrolidina-1-carboxilato (266 mg, 0,35 mmol) foi suspenso em DCM (7 ml) e MnO2 ativado (908 mg, 10.45 mmol) foi adicionado em uma porção única. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro. Após agitação por 15 h, mais MnO2 ativado (500 mg, 5.75 mmol) foi adicionado em uma porção única. Após agitação por 2 h a 35°C, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e a lama foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi levado à etapa seguinte sem purificação adicional para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[9- (2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (266 mg, quantitativo).

[0261] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (266 mg, 0,23 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 1,5 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (44 mg, 0,23 mmol), HATU (87 mg, 0,23 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,3 ml, 1,75 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 30 min, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil) amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato (59 mg, 31%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834.41; observado [M+1]+: 836,89. 1H-RNM (CD3OD): 8,186 (s, 1H), 7,800-7,291 (m, 7H), 5,258-5,213 (dd, 1H, J = 7,2, 3,6 Hz), 5,027-4,918 (m, 4H), 4,620 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,246 (m, 1H), 4,116 (m, 1H), 3,972 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 3,701-3,675 (m, 1H), 3,503 (s, 3H), 3,479 (s, 3H), 3,177 (s, 3H), 2,554-2,191 (m, 3H), 1,906-1,821 (m, 6H), 1,392 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 1,113-0,728 (m, 12H).Exemplo BI

[0262] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1Himidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaboro1an-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato (312 mg, 0,49 mmol), metil (S)-1- ((2S,4S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1- il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (219 mg, 0,54 mmol), Pd(PPh3)4 (58 mg, 0,05 mmol), PdCl2(dppf)2 (36 mg, 0,05 mmol), e K2CO3 (2 M em H2O, 0,8 ml, 1,6 mmol) foram combinados em DMSO (5 ml) e dioxano (5 ml). A mistura foi desgaseificada com N2 borbulhante por 10 min e aquecida até 95°C por 5 h. Após resfriamento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0%-30%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2- [5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1Himidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (166 mg, 43%).

[0263] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2- oxo-1-feniletil}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (166 mg, 0,21 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml), MeOH (1 ml) e HCl (4 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético (44 mg, 0,21 mmol), COMU (100 mg, 0,21 mmol) e DMF (5 ml), então DIPEA (0,18 ml, 1,05 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 1 h, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (71 mg, 38%). LCMS-ESI+: calculado para C49H54N8O8: 882,41; observado [M+1]+: 884,34. 1H-RNM (CD3OD): 8,462 (s, 1H), 8,029-7,471 (m, 7H), 7,394-7,343 (m, 5H), 5,410 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 5,300 (m, 1H), 5,233 (m, 2H), 4,341 (m, 1H), 4,236 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 3,603 (s, 3H), 3,551 (s, 3H), 3,522-3,241 (m, 8H), 2,650 (m, 1H), 2,550 (m, 2H), 1,977-1,926 (m, 4H), 1,221 (d, 3H, J = 3,2 Hz), 0,897-0,779 (dd, 6H, J = 19,2, 6,8 Hz).

[0264] (S)-etil 2-(terc-butoxicarbonilamino)-5- oxohexanoato: Uma solução de etil N-Boc (S)-piroglutamato (20,0 g, 77,7 mmol) em THF anidro (150 ml) em um frasco de fundo redondo de dois gargalos sob argônio foi resfriada até -40°C. Solução de brometo de metil-magnésio (3,0 M em éter, 28,5 ml, 85,5 mmol) foi adicionada à mistura de reação gota a gota ao longo de 30 minutos. A reação foi agitada por 4 horas a -40°C, e então por 1 hora a 0°C. A reação foi dividida entre acetato de etila e solução saturada de cloreto de amônio e acidificada com HCl 1 N. A camada aquosa foi extraída mais duas vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e secas com sulfato de sódio. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc/hexanos 20%-40%) para gerar (S)-etil 2-(terc-butoxicarbonilamino)-5-oxohexanoato como um óleo viscoso e foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0265] (S)-etil 5-metil-3,4-diidro-2H-pirrol-2-carboxilato: (S)-etil 2-(terc-butoxicarbonilamino)-5-oxohexanoato em um frasco de 1 litro foi tratado com uma solução de ácido trifluoracético/diclorometano (mistura 1:1, 100 ml). Foi observada efervescência e a mistura foi agitada por 4 horas em temperatura ambiente. Depois desse tempo, os voláteis foram removidos in vacuo para gerar (S)-etil 5-metil-3,4- diidro-2H-pirrol-2-carboxilato como um óleo, que foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0266] (2S,5S)-etil 5-metilpirrolidina-2-carboxilato: A imina bruta 3 em um frasco de 1 litro foi dissolvida com etanol (400 ml) e o frasco foi evacuado e carregado com argônio três vezes (3x). Paládio sobre carbono (aproximadamente 750 mg, 10% p/p, seco) foi adicionado e a reação foi evacuada de gás e carregada com gás hidrogênio (3x). A reação deixada em agitação sob hidrogênio atmosférico por 16 horas. A mistura foi filtrada através de um plugue de Celite e o filtrado foi concentrado in vacuo. Éter dietílico foi adicionado ao óleo e um precipitado se formou. A mistura foi filtrada para gerar (2S,5S)-etil 5- metilpirrolidina-2-carboxilato, como um sólido branco (10,6 g, 67,4 mmol, 86,7% ao longo de três etapas). 1H-RNM (400 MHz, CDCl3) δ 4,48 (dd, 1H), 4,27 (q, 2H), 3,92-3,80 (m, 1H), 2,52-2,36 (m, 1H), 2,32-2,13 (m, 2H), 1,75-1,60 (m, 1H), 1,51 (d, 3H), 1,30 (t, 3H).

[0267] (2S,5S)-1-terc-butil 2-etil 5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato: A uma solução de (2S,5S)-etil 5- metilpirrolidina-2-carboxilato (7,0 g, 44,5 mmol) em diclorometano (250 ml), di-terc-butil-anidrido (10,7 g, 49,0 mmol), diisopropiletilamina (17.1 ml, 98,0 mmol) gota a gota ao longo de 10 minutos e dimetil amino piridina (0,27 g, 2,23 mmol) foram adicionados sucessivamente. Foi observada efervescência e a mistura foi agitada por 16 horas em temperatura ambiente. A reação foi lavada com HCl (250 ml, 1 N). A camada orgânica foi então seca com sulfato de sódio. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc/hexanos 5%-25%) para gerar (2S,5S)-1-terc- butil 2-etil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato como um óleo (6,46 g, 25,1 mmol, 56%). LCMS-ESI+: calculado para C13H23NO4: 257,16 (M+); encontrado: 258,70 (M+H+).

[0268] Ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico: A uma solução de (2S,5S)-1- terc-butil 2-etil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (6,46 g, 25,1 mmol) em etanol (20 ml) foram adicionados monoidrato de hidróxido de lítio (2,11 g, 50,2 mmol) e água deionizada (12 ml). A mistura foi agitada por 16 horas, e então dividida entre acetato de etila e uma mistura 1:1 de salmoura saturada e HCl 1 N. A camada aquosa foi extraída mais uma vez com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secas com sulfato de sódio e o solvente foi removido in vacuo para gerar ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico como um sólido branco (quantitativo), que foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0269] (2S,5S)-terc-butil 2-(hidroximetil)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico (5,91 g, 25,8 mmol) em tetrahidrofurano a 0°C, foi adicionado borano em dimetilsulfeto (1,0 M, 3,4 ml, 34 mmol) gota a gota. A reação foi agitada por 4 horas a 0°C, e então por 18 horas em temperatura ambiente. A mistura foi então resfriada até 0°C e metanol (70 ml) foi adicionado gota a gota. A reação foi aquecida até a temperatura ambiente e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi recolhido em diclorometano (200 ml) e extraído com bicarbonato de sódio saturado. A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio e o solvente foi removido in vacuo para gerar (2S,5S)-terc-butil 2-(hidroximetil)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato como um óleo transparente (5,15 g, 23,9 mmol, 93%), que foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0270] (2S,5S)-terc-butil 2-formil-5-metilpirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de (2S,5S)-terc-butil 2- (hidroximetil)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (5,15 g, 23,9 mmol) em diclorometano, foram adicionados TEMPO (0,075 g, 0,48 mmol), brometo de sódio (0,246 g, 2,39 mmol) e bicarbonato de sódio (0,442 g, 5,26 mmol). Hipoclorito de sódio (2,67 g, 35,9 mmol) de uma solução 6% foi adicionado, e a mistura bifásica foi vigorosamente agitada por 2 horas em temperatura ambiente. A mistura de reação foi extraída duas vezes com diclorometano (2 x 100 ml). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com solução saturada de tiossulfato de sódio, secas com sulfato de sódio e o solvente foi removido in vacuo para gerar (2S,5S)-terc- butil 2-formil-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (3,9 g, 18,29 mmol, 77%) como um óleo ligeiramente colorido, que foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0271] (2S,5S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,5S)- terc-butil 2-formil-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (3,9 g, 18,30 mmol) em MeOH (15 ml) e hidróxido de amônio (15 ml, 99,9%), glioxal (11,7 ml, 40% p/v em água, 102.40 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura bifásica ficou laranja e turva. A reação foi agitada vigorosamente de um dia para o outro em temperatura ambiente. O solvente foi removido in vacuo. A mistura bruta foi redissolvida em acetato de etila e lavada com água. A camada aquosa foi lavada mais uma vez com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio e o solvente foi removido in vacuo. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna com acetato de etila em hexanos 85% a 100% para gerar (2S,5S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina- 1-carboxilato como um sólido esbranquiçado (3,47 g, 13,8 mmol, 75%). LCMS-ESI+: calculado para C13H21N3O2: 251,16 (M+); encontrado: 252,20 (M+H+).

[0272] (2S,5S)-terc-butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato: Um frasco de fundo redondo de 500 ml foi carregado com (2S,5S)-terc-butil 2- (1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (3,47 g, 13,8 mmol), iodo (7,7 g, 30,4 mmol) e carbonato de sódio (4,54 g, 42,8 mmol). Dioxano (70 ml) e água (45 ml) foram adicionados à mistura, e a reação foi agitada vigorosamente de um dia para o outro no escuro. A reação foi então dividida entre acetato de etila e uma solução aquosa 10% de tiossulfato de sódio e extraída. A camada aquosa foi extraída mais uma vez com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas, secas com sulfato de sódio e o solvente foi removido in vacuo. O material bruto foi filtrado através de um plugue de sílica com acetato de etila em hexanos 25% para gerar (2S,5S)- terc-butil 2-(4,5- diiodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato como um sólido branco (4,28 g, 8,50 mmol, 62%). LCMS-ESI+: calculado para C13H19I2N3O2: 502,96 (M+); encontrado: 503,94 (M+H+).

[0273] (2S,5S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,5S)- terc-butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato (4,28 g, 8,50 mmol) em etanol (75 ml) e água (75 ml), tiossulfato de sódio (10,72 g, 85,1 mmol) foi adicionado, e a mistura de reação foi agitada vigorosamente por 1 hora a 100°C, 16 horas a 90°C e 5 horas a 100°C. A mistura de reação foi dividida entre acetato de etila e água. A camada aquosa foi lavada adicionalmente com acetato de etila e as camadas orgânicas foram combinadas. A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio, concentrada, e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para gerar (2S,5S)-terc-butil 2-(5- iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato como um sólido branco (2,34 g, 6,20 mmol, 73%). 1H-RNM (400 MHz, CDCl3) δ 7,04 (s, 1H), 4,89 (dd, 1H), 3,92 (m, 1H), 2,91 (s, 1H), 2,18-2,06 (m, 2H), 1,78 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,13 (d, 3H).

[0274] (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3- metilbutan-1-ona: Um frasco de fundo redondo foi carregado com (2S,5S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidina-1-carboxilato (1,5 g, 3,98 mmol) e tratado com um excesso de ácido clorídrico (100 ml de 4,0 M em dioxano). A mistura foi agitada vigorosamente por 3 horas, quando então um precipitado se formou e o solvente foi removido in vacuo. A uma mistura do intermediário bruto, ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,836 g, 4,77 mmol), HATU (1,81 g, 4,77 mmol) em diclorometano (25 ml), diisopropiletilamina (3,46 ml, 19,9 mmol) foi então adicionada gota a gota e foi agitada de um dia para o outro sob nitrogênio. A mistura de reação foi dividida acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio, o solvente removido in vacuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna para gerar (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol- 2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3- metilbutan-1-ona como um sólido branco (1,63 g, 3,75 mmol, 94%). LCMS-ESI: calculado para C15H23IN4O3: 434,08 (M+); encontrado: 435,51 (M+H+).

[0275] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-gl}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: A síntese desse composto foi feita de acordo com o procedimento do Exemplo AB-1 com a seguinte modificação: durante o acoplamento de Suzuki, (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3- metilbutan-1-ona foi usada no lugar de (2S)-1-[(2S)-2-(5- bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-[(1- metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona. O material bruto foi purificado por HPLC preparativa para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato como um sólido branco (17 mg, 0,019 mmol, 17%). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,63 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,04 (m, 1H), 7,87 (m, 2H), 7,66 (m, 2H), 7,52-7,39 (m, 6H), 5,50 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,16 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 3,80 (m, 4H), 3,66 (s, 6H), 3,43 (m, 4H), 3,23 (s, 3H), 2,72-1,99 (m, 9H), 1,56 (d, 3H), 1,29 (m, 1H), 0,99 (d, 3H), 0,88 (d, 3H).Exemplo BL

[0276] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato: A síntese desse composto foi feita de acordo com o procedimento do Exemplo AA com a seguinte modificação: durante o acoplamento de Suzuki, (2S)-1- [(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona foi usada no lugar de (2S)-1-[(2S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan- 1-ona. O material bruto foi purificado por HPLC preparativa para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato como um sólido branco (110 mg, 0,131 mmol, 57%). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,65 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 8,04 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,46 (m, 6H), 5,59 (s, 1H), 5,50 (dd, 1H), 5,33 (s, 2H), 5,22-5,09 (m, 1H), 4,14 (m, 2H), 3,74 (s, 1H), 3,65 (m, 6H), 3,52-3,37 (m, 2H), 2,60-1,89 (m, 11H), 1,56 (d, 3H), 1,29 (d, 1H), 0,99 (d, 3H), 0,88 (d, 3H). Exemplo BM

[0277] Metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato: A síntese desse composto foi feita de acordo com Exemplo BL com as seguintes modificações: durante o acoplamento de amida, ácido (R)-2-(terc-butoxicarbonilamino)-2- fenilacético foi usado no lugar de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético. Esse foi então tratado com um excesso de ácido clorídrico (15 ml, 4,0 M em dioxano) por 2 horas. O produto bruto foi purificado por HPLC para fornecer metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1- [(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan- 2-il]carbamato como um sólido branco (153 mg, 0,196 mmol, 74%). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,63 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,99 (m, 1H), 7,93 (m, 2H), 7,80 (m, 2H), 7,72-7,64 (m, 2H), 7,63-7,52 (m, 5H), 5,52 (dd, 1H), 5,44 (m, 1H), 5,33 1H), 0,98 (d, 3H), 0,88 (d, 3H). Exemplo BN

[0278] (2S,5S)-Etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxilato: (2S,5S)- Etil 5-metilpirrolidina-2-carboxilato-TFA (10,0 g, 39,3 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (6,88 g, 39,3 mmol) e HATU (14,9 g, 39,3 mmol) foram combinados em DMF (100 ml) e DIPEA (15,0 ml, 86,5 mmol) foi adicionado. Após agitação por 1 h em temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada sucessivamente com HCl 10%, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar (2S,5S)-etil 1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxilato. O material bruto foi levado adiante sem purificação adicional.

[0279] Ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico: (2S,5S)- Etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxilato (39,3 mmol, presumindo conversão completa da transformação prévia) foi suspenso em MeOH (200 ml) e LiOH aquoso (1,0 M, 100 ml, 100 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro, e então concentrada sob pressão reduzida para remover a maior parte do MeOH. A solução aquosa foi lavada 2x com DCM antes de ser acidificada até pH-1-2 com HCl 10%. A fase aquosa ácida foi então extraída 5x com EtOAc. Os extratos de EtOAc combinados foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para gerar ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico (6,89 g, 56% ao longo de 2 etapas).Exemplo BO

[0280] 3-Vinil-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)- ona: Um frasco de fundo redondo de 3 gargalos de 500 ml seco ao forno foi resfriado sob Ar, e então carregado com 3-cloro-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (12,0 g, 42,1 mmol), viniltrifluorborato de potássio (8,47 g, 6,32 mmol), Pd(OAc)2 (473 mg, 2,11 mmol), SPhos (1,74 g, 4,25 mmol), K2CO3 (17,5 g, 126 mmol) e propanol anidro (120 ml). A mistura de reação foi espargida com Ar por 16 min, e então aquecida até o refluxo por 5,5 h. Após o término, a mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi suspenso em DCM, e então lavado com H2O e salmoura. A solução orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi ainda purificado por meio de um plugue de sílica, eluindo com DCM para gerar 3-vinil-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (10.2 g, 87%).

[0281] 3-(2-Bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona: 3-Vinil-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (9,98 g, 36,1 mmol) foi dissolvida em uma solução agitada de THF (70 ml), DMSO (70 ml) e H2O (35 ml). NBS (6,75 g, 37,9 mmol) foi adicionado em uma porção única e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 33 min. Após o término, o meio de reação foi diluído com EtOAc e lavado duas vezes com H2O e uma vez com salmoura. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A bromoidrina bruta resultante foi suspensa em DCM (200 ml) e tratada com MnO2 ativado (62,7 g, 722 mmol). Após agitação por 15 h em temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada sobre Celite e a torta do filtro foi enxaguada várias vezes com DCM. O filtrado combinado (aproximadamente 400 ml) foi tratado com MeOH (aproximadamente 100 ml) e a mistura foi gradualmente concentrada sob pressão reduzida, fazendo com que o material sólido se precipitasse da solução. Quando o volume de líquido alcançava aproximadamente 200 ml, o sólido foi retirado por filtração e enxaguado com MeOH. A seqüência concentração/precipitação/filtração/enxágüe foi realizada mais duas vezes, resultando na coleta de 3 safras de 3-(2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 8(9H)-ona em pó (7,49 g, 56% ao longo de 2 etapas).

[0282] (4S)-1-terc-Butil2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 4- (metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato: 3-(2-Bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (7,47 g, 20,1 mmol) e ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico (5,22 g, 20,1 mmol) foram suspensos em 2-Me-THF (75 ml) e tratados com Cs2CO3 (3,27 g, 10,1 mmol). Após agitação por 4 h em temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com DCM. A camada orgânica foi lavada com H2O. A camada aquosa foi então extraída de volta 2x com DCM. Os orgânicos combinados foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/DCM 10% a 50%) para gerar (4S)-1-terc-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 4- (metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (7,73 g, 70%).

[0283] (2S,4S)-2-(2-(9-Bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 4- (metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato: (4S)-1-terc- Butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 4-(metoximetil)pirrolidina- 1,2-dicarboxilato (7,66 g, 13,9 mmol) foi dissolvido em uma solução de DCM (100 ml) e MeOH (40 ml), então tratado com tribrometo de piridínio (4,90 g, 15,3 mmol). Após agitação em temperatura ambiente por 1,75 h, a mistura de reação foi diluída com DCM e lavada sucessivamente com HCl 10%, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi levado adiante sem purificação adicional.

[0284] (2R,4R)-1-terc-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)-2-oxoetil) 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2- dicarboxilato: (2S,4S)-2-(2-(9-Bromo-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (8,76 g, 13,94 mmol) foi tratado com uma solução de ácido (2S,5S)-1- (( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico (6,85 g, 23,92 mmol) em 2- Me-THF (70 ml) e Cs2CO3 (3,63 g, 11,15 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 50°C por 20 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com H2O e salmoura, então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar (2R,4R)-1-terc- butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (10,47 g, 90%).

[0285] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: (2R,4R)-1-terc-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)-2-oxoetil) 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2- dicarboxilato (10,47 g, 12,56 mmol) e NH4OAc (50,9 g, 660 mmol) foram suspensos em uma solução de PhMe/2-metoxietanol 10:1 (132 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 110°C for 4,5 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada 3x com NaHCO3 aquoso saturado, então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (8,33 g, 84%).

[0286] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (8,33 g, 1,049 mmol) foi suspenso em DCM e MnO2 ativado (55,0 g, 630 mmol) foi adicionado em uma porção única. Após 13 h, MeOH (200 ml) foi adicionado e a lama foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com MeOH (600 ml) e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 45%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (4,85 g, 58%).

[0287] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxopentan-2-il}carbamato: terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2- d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (179 mg, 0,226 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml) e HCl (4,0 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 1 h em temperatura ambiente então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi tratado com ácido (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico (51 mg, 0,27 mmol), HATU (95 mg, 0,25 mmol), DMF (2 ml) e DIPEA (0,39 ml, 2,3 mmol). Após agitação por 6 min, a reação foi extinta com H2O, filtrada e purificada por HPLC de fase reversa para gerar metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxopentan-2-il}carbamato (116 mg, 59%). MS (ESI) m/z 864 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,57 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,20 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 8,15-7,98 (m, 2H), 7,91 (dd, J = 21,8, 14,1 Hz, 2H), 7,85-7,69 (m, 2H), 7,697,48 (m, 2H), 5,42-5,12 (m, 5H), 4,34 (dd, J = 22,3, 13,7 Hz, 1H), 4,30-4,10 (m, 2H), 3,87-3,73 (m, 1H), 3,73-3,63 (m, 7H), 3,62-3,48 (m, 2H), 3,48-3,38 (m, 4H), 3,35 (s, 3H), 2,95-2,70 (m, 1H), 2,70-2,55 (m, 2H), 2,55-2,20 (m, 2H), 2,20-1,91 (m, 3H), 1,77 (d, J = 42,0 Hz, 1H), 1,65 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,43 (t, J = 24,6 Hz, 1H), 1,28 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 1,23-1,01 (m, 3H), 0,98 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,90 (dd, J = 13,1, 5,9 Hz, 10H).Exemplo BP

[0288] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4-(metoximetil)pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato foi preparado a partir de terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato pelo mesmo método empregado na síntese de {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxopentan-2-il}carbamato, substituindo ácido (2S,3S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico com ácido (2S,3R)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico. MS (ESI) m/z 864 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,62-8,41 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,07 (dt, J = 20,1, 10,0 Hz, 1H), 7,89 (dt, J = 35,6, 15,6 Hz, 2H), 7,77 (dd, J = 20,3, 7,0 Hz, 2H), 7,687,48 (m, 2H), 5,95 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 5,42-5,13 (m, 4H), 4,47 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 4,40-4,09 (m, 2H), 3,80-3,73 (m, 1H), 3,73-3,62 (m, 6H), 3,57 (dt, J = 16,1, 9,7 Hz, 2H), 3,40 (s, 3H), 3,34 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 18,4, 12,5 Hz, 1H), 2,63 (td, J = 13,3, 6,8 Hz, 2H), 2,55-2,18 (m, 2H), 2,16-1,77 (m, 4H), 1,65 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,501,31 (m, 1H), 1,26 (dd, J = 15,6, 6,7 Hz, 2H), 1,17-1,03 (m, 2H), 0,98 (dd, J = 6,7, 4,5 Hz, 5H), 0,89 (dd, J = 15,5, 7,8 Hz, 3H), 0,86-0,74 (m, 3H). Exemplo BQ

[0289] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (102 mg, 0,128 mmol) foi dissolvido em DCM (4 ml) e HCl (4,0 M em dioxano, 2,0 ml, 8,0 mmol) foi adicionado. Após agitação em temperatura ambiente por 30 min, a solução foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi tratado com ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (29 mg, 0,141 mmol), COMU (60 mg, 0,141 mmol), DMF (3,0 ml) e DIPEA (0,223 ml, 1,28 mmol). Após agitação em temperatura ambiente por 20 min, a mistura de reação foi diluída com EtOAc. A solução orgânica foi lavada com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por HPLC de fase reversa para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato como o sal de bis-TFA (82,4 mg, 60%). MS (ESI) m/z 866 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 7,94-7,67 (m, 4H), 7,59 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,48-7,33 (m, 4H), 7,11 (d, J = 18,7 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,48-5,33 (m, 1H), 5,23 (dd, J = 24,1, 15,7 Hz, 1H), 5,17-5,03 (m, 3H), 4,22 (dd, J = 17,0, 9,6 Hz, 1H), 4,164,01 (m, 1H), 3,91 (d, J = 24,1 Hz, 1H), 3,83-3,68 (m, 1H), 3,68-3,59 (m, 3H), 3,59-3,49 (m, 3H), 3,38 (ddd, J = 15,9, 9,6, 5,7 Hz, 2H), 3,28-3,14 (m, 5H), 3,10 (dd, J = 14,0, 8,2 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 17,8, 9,6 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 14,5, 6,7 Hz, 1H), 2,73-2,41 (m, 2H), 2,40-2,11 (m, 2H), 2,11-1,83 (m, 2H), 1,54 (t, J = 9,7 Hz, 2H), 1,24 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 1,06 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 0,85 (d, J = 6,7 Hz, 2H).Exemplo BR

[0290] terc-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato foi

[0291] preparado a partir de (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1- terc-butil 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato pelo mesmo método empregado na síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato, substituindo ácido (2S,5S)-1- (( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico.

[0292] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: terc- Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (137 mg, 0,179 mmol) foi dissolvido em DCM (5 ml) e HCl (4,0 M em dioxano, 1 ml) foi adicionado. Após agitação em temperatura ambiente por 1,5 h, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (69 mg, 0,39 mmol), HATU (149 mg, 0,393 mmol), DMF (2,0 ml) e DIPEA (0,31 ml, 1,8 mmol). Após agitação por 15 min em temperatura ambiente, a mistura de reação foi extinta com água e purificada por HPLC para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2- (5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato (123 mg). MS (ESI) m/z 880 [M+H]. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,48 (s, 1H), 8,05 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 7,92 (dd, J = 19,7, 10,1 Hz, 2H), 7,74 (s, 2H), 7,59-7,44 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 5,40 (dt, J = 16,3, 8,1 Hz, 1H), 5,31-5,15 (m, 3H), 4,47-4,10 (m, 4H), 3,86-3,44 (m, 12H), 3,39 (dd, J = 13,2, 7,1 Hz, 6H), 2,94-2,57 (m, 4H), 2,25-1,94 (m, 4H), 1,02-0,82 (m, 12H).Exemplo BS

[0293] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2- il}carbamato foi preparado a partir de terc-Butil (2S,4S)- 2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato usando o mesmo método empregado na síntese de metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato, substituindo ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico com ácido (2S,3S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico. MS (ESI) m/z 908 [M+H]+. Exemplo BT

[0294] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato foi sintetizado a partir de (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1- terc-butil 4-(metoximetil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato usando os mesmos métodos descritos para a síntese de terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato, com ácido (S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidina-2-carboxílico substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico.

[0295] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato foi sintetizado a partir de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1- [N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato usando o mesmo método empregado para a síntese de metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato com terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 871 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 7,87 (ddd, J = 20,5, 15,3, 6,8 Hz, 4H), 7,65 (s, 1H), 7,50-7,38 (m, 5H), 7,17 (s, 1H), 5,41 (d, J = 24,5 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 4,24 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,03-3,94 (m, 1H), 3,89 (dd, J = 15,4, 8,6 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 3,723,64 (m, 4H), 3,63-3,52 (m, 4H), 3,43 (qd, J = 9,5, 5,6 Hz, 3H), 3,30 (s, 3H), 3,24-3,08 (m, 2H), 2,97 (dd, J = 11,6, 5,4 Hz, 2H), 2,59 (dt, J = 21,1, 7,8 Hz, 3H), 2,29 (s, 1H), 2,24-2,14 (m, 2H), 2,11-1,85 (m, 2H), 0,92 (dd, J = 15,8, 6,7 Hz, 6H).Exemplo BU

[0296] terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato foi preparado de acordo com o método descrito para a síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato, com terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo terc- Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato.

[0297] Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato foi preparado de acordo com o método descrito para a síntese de metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2’-((2S,4S)-1- ((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2- il)-1H,1’H-7,7’-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato, substituindo metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2’-((2S,4S)-1-((R)-2- terc-butoxicarbonilamino-2-fenilacetil)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il)-1H,1’H-7,7’-binafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1- oxobutan-2-ilcarbamato com terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 811 [M+H]+.Exemplo BV

[0298] terc-Butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato foi sintetizado a partir de 3-(2-bromoacetil)- 10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona, pelos mesmos métodos empregados na síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1- carboxilato, com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico substituindo ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico substituindo ácido (2 S,5S)-1-(( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico.

[0299] terc-Butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato foi preparado de acordo com o método descrito para a síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato, com terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(25,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato substituindo terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato.

[0300] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato foi preparado a partir de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato de acordo com o mesmo método descrito para a síntese de metil (S)-1- ((2S,4S)-2-(2’-((2S,4S)-1-((2S,3R)-2-metoxicarbonilamino-3- metoxibutanoil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il)-1H,1’H- 7,7’-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il)- 3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato, substituindo (2S,4S)- terc-Butil 2-(2’-((2S,4S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-4-metilpirrolidin-2-il)-1H,1’H-7,7’- binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato com terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N

[0301] (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 866 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,44 (d, J = 19,8 Hz, 1H), 8,02 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 7,98-7,81 (m, 3H), 7,74 (dd, J = 22,2, 13,6 Hz, 2H), 7,63-7,41 (m, 2H), 5,79 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,42 (dt, J = 43,3, 21,5 Hz, 2H), 5,31-5,10 (m, 5H), 4,85-4,70 (m, 1H), 4,52 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 20,8, 8,8 Hz, 1H), 3,80 (dt, J = 19,0, 7,3 Hz, 2H), 3,73-3,63 (m, 7H), 3,63-3,49 (m, 3H), 3,39 (d, J = 9,7 Hz, 4H), 3,35 (s, 5H), 3,28 (d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,84 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 12,5, 6,6 Hz, 1H), 2,59-2,45 (m, 1H), 2,45-2,11 (m, 4H), 2,11-1,82 (m, 2H), 1,56 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,35-1,21 (m, 1H), 1,221,12 (m, 4H), 1,10-1,01 (m, 2H), 0,99 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H).Exemplo BW

[0302] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- (metoximetil)-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato foi preparado de acordo com o método descrito para a síntese de metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5- {2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilp entanoil}-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxopentan-2-il}carbamato com terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo terc-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 863 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,43 (d, J = 24,6 Hz, 1H), 8,01 (dt, J = 16,1, 8,0 Hz, 1H), 7,95-7,78 (m, 2H), 7,77-7,64 (m, 2H), 7,59-7,41 (m, 2H), 5,79 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,39 (dt, J = 46,2, 23,1 Hz, 1H), 5,27-5,07 (m, 3H), 4,85-4,72 (m, 1H), 4,42 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 19,7, 8,7 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 23,6, 13,3 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 10,0 Hz, 5H), 3,60 (dd, J = 14,7, 7,8 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 3,17 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,99-2,91 (m, 1H), 2,85 (s, 1H), 2,73 (dd, J = 12,5, 6,4 Hz, 1H), 2,62-2,48 (m, 1H), 2,452,14 (m, 3H), 2,10-1,91 (m, 2H), 1,83 (s, 1H), 1,57 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,44 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 1,34-1,23 (m, 1H), 1,20-0,96 (m, 5H), 0,90 (dt, J = 14,8, 6,7 Hz, 9H).Exemplo BX

[0303] Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato foi preparado de acordo com o método descrito para a síntese de metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2’-((2S,4S)-1- ((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoximetil)pirrolidin-2- il)-1H,1’H-7,7’-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato, com terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo (2S,4S)-terc-butil 2-(2’-((2S,4S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metilpirrolidin-2- il)-1H,1’H-7,7’-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 811 [M+H]+.Exemplo BY

[0304] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato foi sintetizado de acordo com o protocolo descrito para a preparação de metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato, com terc- butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 886 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,02-7,85 (m, 2H), 7,85-7,68 (m, 2H), 7,58 (d, J = 21,5 Hz, 1H), 7,55-7,35 (m, 4H), 7,31 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 5,43 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 5,25-5,10 (m, 3H), 4,13 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 3,93-3,54 (m, 7H), 3,42 (qd, J = 9,5, 5,5 Hz, 2H), 3,34 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 3,28 (s, 3H), 3,19 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,00 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,74-2,46 (m, 3H), 2,442,15 (m, 2H), 2,12-1,86 (m, 2H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,29 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 1,15-1,01 (m, 1H), 0,98 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 0,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H).Exemplo BZ

[0305] (2S,4S)-1-Terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-etoxipirrolidina-1,2-dicarboxilato. A uma lama de 9-bromo-3-cloro-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (2,50 g, 6,8 mmol) em MeCN (20 ml) foram adicionados ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-etoxipirrolidina-2-carboxílico (2,68 g, 10,3 mmol) e DIPEA (1,3 ml, 7,5 mmol). A reação foi aquecida com agitação até 50°C por 18 h. A reação foi então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A solução foi lavada com HCl (1 N) e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc e as camadas orgânicas resultantes foram combinadas, secas (Na2SO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 15% a 50%) para gerar (2S,4S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-etoxipirrolidina-1,2- dicarboxilato (2,08 g, 56%).

[0306] Terc-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-etoxipirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de (2S,4S)- 1-terc-butil-2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-etoxipirrolidina-1,2- dicarboxilato (2,08 g, 3,8 mmol) em uma mistura de tolueno (30 ml) e metoxietanol (4 ml) foi adicionado acetato de amônio (2,90 g, 37,7 mmol). A solução foi aquecida com agitação até 80°C por 18 h. A reação foi então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A solução foi lavada com salmoura, e a camada aquosa resultante foi extraída de volta com EtOAc. As camadas orgânicas resultantes foram combinadas, secas (Na2SO4), e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 10% a 75%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4- etoxipirrolidina-1-carboxilato (0,99 g, 50%).

[0307] Terc-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de (2S,4S)-2-(9-cloro- 1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-etoxipirrolidina-1-carboxilato (0,99 g, 1,9 mmol) em CH2Cl2 (18 ml) foi adicionado MnO2 (4,52 g, 52,0 mmol). A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 18 h. A reação foi filtrada através de Celite, lavada com CH2Cl2, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 10% a 75%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- etoxipirrolidina-1-carboxilato (0,71 g, 72%).

[0308] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-cloro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- etoxipirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato. A uma solução de (2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirrolidina-1- carboxilato (0,46 g, 0,9 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (9,0 ml) e MeOH (1,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 6,5 ml, 26,0 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 h. A solução foi concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto em CH2Cl2 (10,0 ml) foram adicionados ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,17 g, 0,9 mmol), HATU (0,41 g, 1,1 mmol) e DIPEA (0,5 ml, 2,9 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 48 h e diluída com CH2Cl2. A solução foi lavada com HCl aquoso (1 N) e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com CH2Cl2 (2x). As camadas orgânicas resultantes foram combinadas, secas (Na2SO4) e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 20% a 100% até MeOH/EtOAc 80%) para gerar metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9- cloro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il)-4-etoxipirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,46 g, 90%).

[0309] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etóxi-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3- metil-1-oxobutan-2-il]carbamato. A uma solução de metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,46 g, 0,84 mmol) em dioxano (8,5 ml) foram adicionados 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’- octametil-2,2’-bi(1,3,2-dioxaborolano) (0,32 g, 1,3 mmol), acetato de potássio (0,25 g, 2,5 mmol), bis(dibenzilidenoacetona)paládio (0,032 g, 0,035 mmol) e 2- diciclohexilfosfino-2’,4’,6’-triisopropilbifenil (Xphos, 0,032 g, 0,067 mmol). A solução resultante foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida, com agitação, até 90°C por 6 h. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc e filtrada através de Celite. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 20% a 100% até MeOH/EtOAc 90%) para gerar metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4- etóxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- 1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato (0,41 g, 73%).

[0310] Terc-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etóxi-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisozhromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etóxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato (0,41 g, 0,61 mmol) em uma mistura de DME (6,1 ml) e DMF (1,0 ml) foram adicionados (S)-terc- butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,39 g, 1,2 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0,021 g, 0,018 mmol), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (0,030 g, 0,041 mmol) e carbonato de potássio aquoso (2 M, 1,0 ml, 2,0 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida, com agitação, até 85°C por 6 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 20% a 100% até MeOH/EtOAc 80%) para gerar terc- butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etóxi-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (0,16 g, 33%).

[0311] Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etóxi-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[5-(2- {(2S,4S)-4-etóxi-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (0,048 g, 0,062 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,0 ml) e MeOH (0,25 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 0,47 ml, 1,9 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 3 h, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (1,5 ml) foram adicionados ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanóico (0,012 g, 0,069 mmol), HATU (0,029 g, 0,076 mmol) e DIPEA (0,050 ml, 0,28 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 h. A reação foi diluída com DMF e LiOH aquoso (2,5 M, 4 gotas) foi adicionado. A solução foi concentrada para remover o CH2Cl2 e o resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 52% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(2S)-1- [(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etóxi-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,008 g, 17%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ : (mistura de rotômeros) 8,37 (s, 1H), 7,97 (s, 2H), 7,37-7,76 (m, 5H), 5,38-5,54 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 5,14-5,16 (m, 1H), 4,21-4,31 (m, 4H), 3,87-4,09 (m, 1H), 3,79-3,85 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,46-3,55 (m, 2H), 2,30-2,35 (m, 3H), 2,04-2,06 (m, 3H), 1,11 (m, 2H), 0,95 (d, 3H), 0,88 (d, 3H). MS (ESI) m/z 836,02 [M+H]+. Exemplo CA

[0312] Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etóxi-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil} carbamato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-[5-(2- {(2S,4S)-4-etóxi-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (0,11 g, 0,14 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (2,0 ml) e MeOH (0,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 1,0 ml, 4,0 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 3 h, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (1,5 ml) foram adicionados ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético (0,044 g, 0,21 mmol) e DIPEA (0,075 ml, 0,43 mmol). A solução resultante foi resfriada até -40°C e COMU (0,096 g, 0,22 mmol) foi adicionado. Foi permitido que a reação se aquecesse lentamente até 0°C ao longo de 1 h. A reação foi diluída com DMF. A solução foi concentrada para remover o CH2Cl2 e o resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 55% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2- [(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etóxi-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,022 g, 18%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ: (mistura de rotômeros) 8,28 (d, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,527,70 (m, 3H), 7,28-7,38 (m, 5H), 6,90-6,96 (m, 2H), 5,445,47 (m, 1H), 5,31 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,16-4,48 (m, 3H), 3,81-3,19 (m, 1H), 3,62-3,76 (m, 2H), 3,58 (s, 3H), 2,56 (s, 3H), 2,42-2,57 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 1,81-2,41 (m, 5H), 1,04 (t, 3H), 0,87 (d, 3H), 0,81 (d, 3H). MS (ESI) m/z 869,55 [M+H]+.

[0313] Metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il)-3-metóxi-1-oxobutan-2-ilcarbamato. A uma solução de (S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (1,00 g, 3,2 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (30 ml) e MeOH (5 ml) foi adicionado HCl (em dioxano, 4 M, 11,5 ml, 46,0 mmol). A solução foi agitada a 40°C por 1 hora, resfriada até a temperatura ambiente, e concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (30 ml) foram adicionados ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (0,67 g, 3,5 mmol), HATU (1,47 g, 3,8 mmol) e DIPEA (1,00 ml, 6,0 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 24 h. DMF (2 ml) e LiOH aquoso (2,5 M, 1 ml) foram adicionados e a reação foi concentrada até a secura sob pressão reduzida. O material bruto foi diluído com EtOAc e lavado com H2O e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/CH2Cl2 20% a 100%) para gerar metil (2S,3R)-1- ((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metóxi- 1-oxobutan-2-ilcarbamato (1,2 g, 100%). Exemplo CC

[0314] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-f-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]pirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil 4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1- ml) e dioxanos (2,0 ml) foram adicionados metil (2S,3R)-1- ((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metóxi- 1-oxobutan-2-ilcarbamato (0,24 g, 0,62 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0,050 g, 0,043 mmol), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (0,030 g, 0,041 mmol) e carbonato de potássio aquoso (2 M, 0,65 ml, 1,3 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida, com agitação, até 85°C por 6 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 20% a 100% até MeOH/EtOAc 60%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]pirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,20 g, 63%).

[0315] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3- metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}pirrolidin-2-il]- 1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2- oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L- treonil]pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,20 g, 0,26 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (3,0 ml) e MeOH (0,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 2,0 ml, 8,0 mmol). A solução foi agitada a 40°C por 1 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (3,0 ml) foram adicionados ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético (0,081 g, 0,39 mmol) e DIPEA (0,150 ml, 0,86 mmol). A solução resultante foi resfriada até -40°C e COMU (0,180 g, 0,42 mmol) foi adicionado. Foi permitido que a reação se aquecesse lentamente até a temperatura ambiente ao longo de 30 min e mantida por 1,5 h. A solução foi diluída com CH2Cl2 e lavada com bicarbonato aquoso. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 50% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3-metóxi-2- [(metoxicarbonil)amino] butanoil}pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,10 g, 46%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ: (mistura de rotômeros) 8,34 (s, 1H), 7,92-7,97 (m, 2H), 7,33-7,69 (m, 10H), 5,53 (s, 1H), 5,36-5,39 (m, 1H), 5,155,21 (m, 3H), 4,44 (d, 1H), 3,86-3,93 (m, 2H), 3,68-3,75 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,46-3,57 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 2,47-2,60 (m, 3H), 2,22-2,36 (m, 4H), 1,99-2,08 (m, 3H), 1,15 (d, 3H). MS (ESI) m/z 886,19 [M+H]+. Exemplo CD

[0316] Metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3-metóxi-1- oxobutan-2-il)carbamato. A uma solução de terc-butil 4- (metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 2-il]pirrolidina-1-carboxilato (0,25 g, 0,41 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (4,0 ml) e MeOH (1,0 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 3,0 ml, 12,0 mmol). A solução resultante foi agitada a 40°C por 45 min. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto em CH2Cl2 (4,0 ml) foram adicionados ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino) butanóico (0,08 g, 0,42 mmol), HATU (0,17 g, 0,45 mmol) e DIPEA (0,4 ml, 2,3 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 48 h e diluída com CH2Cl2. A solução foi lavada com salmoura. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2 (2x). As camadas orgânicas resultantes foram combinadas, secas (Na2SO4) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (p/MeOH 5%)/hexanos 30% a 100% até MeOH/EtOAc 80%) para gerar metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il)carbamato (0,24 g, 92%).

[0317] Terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxi lato. A uma solução de metil (1-{4-(metoximetil)-2- [9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il)carbamato (0,15 g, 0,22 mmol) em uma mistura de DMSO (2,0 ml) e dioxano (2,0 ml) foram adicionados (S)-terc-butil 2-(5- iodo-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,15 g, 0,40 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0,028 g, 0,024 mmol), [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (0,018 g, 0,025 mmol) e carbonato de potássio aquoso (2 M, 0,35 ml, 0,70 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 25 min e aquecida, com agitação, até 90°C por 6 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 55% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A solução restante foi alcalinizada com bicarbonato aquoso e extraída com CH2Cl2 (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para fornecer terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L- treonil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,013 g, 7%).

[0318] Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metoxibutanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,013 g, 0,016 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (0,5 ml) e MeOH (0,02 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 0,20 ml, 0,80 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1 h, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (0,5 ml) foram adicionados ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2- fenilacético (0,006 g, 0,029 mmol) e DIPEA (0,05 ml, 0,28 mmol). A solução resultante foi resfriada até 0°C e COMU (0,012 g, 0,028 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a 0°C por 30 min. A solução foi diluída com DMF e LiOH aquoso (2,5 M, 2 gotas) e concentrada sob pressão reduzida para remover o CH2Cl2. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 55% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metoxibutanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (0,008 g, 61%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ : (mistura de rotômeros) 8,37 (m, 1H), 7,96-7,98 (m, 2H), 7,60-7,79 (m, 3H), 7,35-7,52 (m, 6H), 6,98-7,03 (m, 1H), 5,52 (s, 1H), 5,26-5,39 (m, 2H), 5,20 (s, 2H), 4,44 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,64 (s, 6H), 3,50-3,57 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 3,29- 3,44 (m, 3H), 3,20 (s, 3H), 2,68-2,72 (m, 2H), 2,57-2,62 (m, 2H), 1,89-2,15 (m, 6H), 1,18 (d, 3H). MS (ESI) m/z 885,73 [M+H]+. Exemplo CE

[0319] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-2-il}-3- metil-1-oxobutan-2-il]carbamato. Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3- [9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2- azabiciclo[3.1.0]hex-2-il}-3-metil-1-oxobutan-2- il]carbamato foi preparado seguindo o procedimento para metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etóxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato por substituição de ácido (1S,3S,5S)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3.1.0] hexano-3-carboxílico para ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-etoxipirrolidina-2-carboxílico.

[0320] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato (0,19 g, 0,30 mmol) em uma mistura de DMSO (2,0 ml) e dioxano (2,0 ml) foram adicionados (2S,4S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol- 2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,20 g, 0,55 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0,035 g, 0,030 mmol), [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (0,025 g, 0,034 mmol) e carbonato de potássio aquoso (2 M, 0,5 ml, 1,0 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida, com agitação, até 90°C por 6 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, e filtrada através de Celite. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia em coluna de sílica (CH2Cl2/MeOH 2% a 25%) e HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 55% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A camada aquosa foi alcalinizada com bicarbonato de sódio aquoso e extraída com CH2Cl2 (3x). As camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,025 g, 11%).

[0321] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,025 g, 0,032 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,0 ml) e MeOH (0,25 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 0,50 ml, 2,0 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 12 h, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (0,5 ml) foram adicionados ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,012 g, 0,057 mmol) e DIPEA (0,05 ml, 0,28 mmol). A solução resultante foi resfriada até 0°C e COMU (0,023 g, 0,054 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a 0°C por 30 min. A solução foi diluída com DMF e LiOH aquoso (2,5 M, 2 gotas) e concentrada sob pressão reduzida para remover o CH2Cl2. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 55% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2- [(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2- azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,015 g, 55%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ: (mistura de rotômeros) 8,35 (m, 1H), 7,94-7,96 (m, 2H), 7,54-7,78 (m, 6H), 6,93-7,00 (m, 1H), 5,72 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 5,14-5,16 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,42-3,49 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 2,67-2,78 (m, 2H), 2,41-2,62 (m, 3H), 2,01-2,13 (m, 2H), 1,86-1,99 (m, 3H), 0,99-1,03 (m, 2H), 0,90 (d, 3H). MS (ESI) m/z 882,23 [M+H]+. Exemplo CF

[0322] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-isoleucil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il)carbamato (0,47 g, 0,78 mmol) em uma mistura de DMSO (4,0 ml) e dioxano (4,0 ml) foram adicionados metil (2S,3S)-1-((2S,5S)-2-(5- iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1- oxopentan-2-ilcarbamato (0,26 g, 0,72 mmol), tetrakis(trifenilfosfina) paládio (0,090 g, 0,078 mmol), [1,1’-bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaládio (0,061 g, 0,083 mmol) e carbonato de potássio aquoso (2 M, 1,2 ml, 2,4 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida, com agitação, até 90°C por 6 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc e filtrada através de Celite. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e diluído com EtOAc. A solução orgânica foi lavada água e salmoura e as camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc (MeOH 5%)/CH2Cl2 10% a 100%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-L-isoleucil]-5-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,25 g, 40%).

[0323] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-isoleucil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H- imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,175 g, 0,21 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (2,0 ml) e MeOH (0,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 1,6 ml, 6,4 mmol). A solução foi agitada a 40°C por 1 h, resfriada até a temperatura ambiente, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (3,0 ml) foram adicionados ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,070 g, 0,34 mmol) e DIPEA (0,15 ml, 0,86 mmol). A solução resultante foi resfriada até -40°C e COMU (0,15 g, 0,35 mmol) foi adicionado. A reação foi aquecida até a temperatura ambiente ao longo de 30 min e diluída com CH2Cl2. A solução foi lavada com aquoso saturado bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2, e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 58% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (0,079 g, 41%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ : (mistura de rotômeros) 8,36 (m, 1H), 7,93-7,98 (m, 2H), 7,66-7,84 (m, 3H), 7,35-7,48 (m, 7H), 5,53 (s, 1H), 5,36-5,39 (m, 1H), 5,17 (d, 2H), 5,08 (m, 1H), 4,14-4,35 (m, 1H), 3,74 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,46 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,76 (m, 1H), 2,46 -2,60 (m, 3H), 2,24-2,35 (m, 1H), 2,08 -2,18 (m, 2H), 1,91 (m, 1H), 1,61-1,87 (m, 2H), 1,48 (d, 3H), 1,13-1,21 (m, 3H), 0, 80-0,97 (m, 3H). MS (ESI) m/z 898, 24 [M+H]+. Exemplo CG

[0324] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-isoleucil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,075 g, 0,09 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,0 ml) e MeOH (0,25 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 0,7 ml, 2,8 mmol). A solução foi agitada a 40°C por 1 h, resfriada até a temperatura ambiente, e então concentrada até a secura sob pressão reduzida. Ao intermediário bruto suspenso em CH2Cl2 (3,0 ml) foram adicionados ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,020 g, 0,14 mmol), HATU (0,043 g, 0,11 mmol) e DIPEA (0,10 ml, 0,57 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 h. A reação foi diluída com DMF e LiOH aquoso (2,5 M, 3 gotas) e o CH2Cl2 foi removido sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa (MeCN/água 10% a 58% com TFA 0,1%). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,031 g, 38%). 1H-RNM: 400 MHz, (MeOD) δ: (mistura de rotômeros) 8,34 (m, 1H), 7,91-9,97 (m, 2H), 4,33 (m, 4H), 2,59 (m, 1H), 7,50-7,81 (m, 3H), 7,35-7,38 (m, 2H), 5,17-5,26 (m, 3H), 5,08 (m, 1H), 4,14-3,64 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,51-3,59 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 2,71 (m, 1H), 2,55-2,23-2,33 (m, 1H), 1,92-2,10 (m, 2H), 1,77- 1,89 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 1,48 (d, 1H), 1,11-1,22 (m, 2H), 0,81-0,98 (m, 12H). MS (ESI) m/z 864,27 [M+H]+. Exemplo CH

[0325] Terc-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato: O composto do título foi obtido como no Exemplo AA, mas usando ácido (2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2- carboxílico no lugar de ácido (S)-1-(terc- butoxicarbonil)pirrolidina-2-carboxílico.

[0326] 2-[4-(Metoximetil)pirrolidin-2-il]-9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol: Terc-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato (310 mg, 0,507 mmol) foi tratado com 2 ml de HCl 1,25 N em etanol e agitado em temperatura ambiente por 2 h então a 50°C por 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para gerar um sólido amarelo escuro, que foi usado diretamente na etapa seguinte.

[0327] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etóxi-2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3- metil-1-oxobutan-2-il]carbamato: Uma mistura de ácido (S)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (107 mg, 0,608 mmol), HATU (231 mg, 0,608 mmol) e 6 ml de DIPEA 10% em DMF foi pré-ativada por 5 minutos, então ela foi adicionada ao sal de amina da etapa acima e foi agitada de um dia para o outro. A mistura de reação foi dividida entre acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. A fase orgânica foi concentrada e purificada por cromatografia em sílica gel (103 mg).

[0328] Terc-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato: o composto do título foi obtido como no Exemplo AA, mas usando metil [(2S)-1- {(2S,4S)-4-etóxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato (103 mg, 0,154 mmol) no lugar de terc-butil 2-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato e metil (S)-1-((S)-2-(5-iodo- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2- ilcarbamato (58 mg, 0,154 mmol) no lugar de metil (S)-1- ((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metil- 1-oxobutan-2-ilcarbamato (50,0 mg).

[0329] Metil {1-[4-(metoximetil)-2-{9-[2-(4- metilpirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2- il}pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: terc-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (50 mg, 0,063 mmol) foi tratado com 2 ml de HCl 1,25 N em etanol e aquecido a 60°C por 2 h, e então foi concentrado sob pressão reduzida e bombeado sob alto vácuo e usado diretamente na etapa seguinte.

[0330] Metil {1-[2-{9-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino] (fenil) acetil}-4-metilpirrolidin-2-il)-1H-imidazol-5-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}- 4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Uma mistura de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (13 mg, 0,063 mmol), COMU (30 mg, 0,069 mmol) em 0,500 ml de DMF e DIPEA (0,033 ml, 0,189 mmol) foi pré-ativada por 15 minutos antes de ser adicionada ao sal de amina sólido bruto da etapa prévia e agitada de um dia para o outro. O produto foi purificado por HPLC de fase reversa. O produto foi convertido na base livre por dissolução em 2 ml de acetonitrila:metanol 1:1 e passagem através de um cartucho pré-embalado de carbonato suportado por polímero. A concentração e secagem geraram um pó esbranquiçado (23,3 mg). MS (ESI) m/z 883,8 [M+H] 1H-RNM (CD3CN) 8,176 (s, 1H), 7,778 (m, 1H), 7,596-7,521 (m, 4H), 7,455-7,347 (m, 6H), 7,218 (s, 1H), 5,482 (s, 1H), 5,310 (m, 1H), 5,192 (m, 1H), 4,999 (q, 2H, J = 14 Hz), 4,372 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 4,279 (m, 1H), 3,800-3,697 (m, 2H), 3,632 (s, 3H), 3,597-3,445 (m, 7H), 3,355 (s, 3H), 2,876 (m, 2H), 2,761 (m, 1H), 2,583 (m, 2H), 2,220 (m, 2H), 1,764 (m, 1H), 1,070 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,020 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,898 (d, 3H, J = 6,4 Hz). Exemplo CI

[0331] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: O composto do título foi obtido como no Exemplo AA, mas usando metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2- il]carbamato (307 mg, 0,481 mmol) no lugar de terc-butil 2- [9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato e metil (S)-1-((S)-2-(5-iodo- 1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2- ilcarbamato (181 mg, 0,481 mmol) no lugar de metil (S)-1- ((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il)-3-metil- 1-oxobutan-2-ilcarbamato (200,8 mg).

[0332] Metil {(2S)-3-metil-1-[(2S,4S)-4-metil-2-(9-{2- [(2S,4S)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (200 mg, 0,262 mmol) foi tratado com 2 ml de HCl 1,25 N em etanol e aquecido a 60°C por 2 h, e então foi concentrado sob pressão reduzida e bombeado sob alto vácuo e usado diretamente na etapa seguinte.

[0333] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato: Uma mistura de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (13 mg, 0,063 mmol), COMU (30 mg, 0,069 mmol) em 1,5 ml de DMF foi pré-ativada por 5 minutos antes de ser adicionada ao uma solução da amina do sal prévio em 1,5 ml de DMF e DIPEA (0,137 ml, 0,786 mmol) e agitada de um dia para o outro. O produto foi purificado por HPLC de fase reversa. O produto foi convertido na base livre por dissolução em 2 ml de acetonitrila:metanol 1:1 e passagem através de um cartucho pré-embalado de carbonato suportado por polímero. A concentração e secagem geraram um pó esbranquiçado. (25,8 mg). MS (ESI) m/z 853.8 [M+H]+. 1H-RNM (CD3CN) 8,164 (s, 1H), 7,781 (m, 1H), 7,609 (m, 2H), 7,535 (m, 2H), 7,4337,305 (m, 6H), 7,229 (s, 1H), 5,482 (s, 1H), 5,290 (m, 1H), 5,191 (m, 1H), 4,997 (m, 2H), 4,372 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 4,267 (m, 1H), 3,735-3,445 (m, 10H), 2,573 (m, 4H), 2,197 (m, 2H), 2,017 (m, 1H), 1,760 (m, 1H), 1,204 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,068 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,010 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 0,887 (d, 3H, J = 6,8 Hz). Exemplo CJ

[0334] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1- [(benziloxi)carbonil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: O composto do título foi obtido como no Exemplo BO (composto terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato), mas usando ácido (S)-1- (benziloxicarbonil)pirrolidina-2-carboxílico no lugar de ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico na etapa 6.

[0335] Terc-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S)- pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato: Uma mistura de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S)-1-[(benziloxi)carbonil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (724 mg, 0,96 mmol) e 70 mg de Pd/C 10% em 20 ml de etanol foi hidrogenada a 1 atmosfera de um dia para o outro. Mais Pd/C 10% (300 mg) e uma porção de NaHCO3 sólido foram adicionados e a hidrogenação continuou por 4 horas. A filtração através de Celite e a concentração do filtrado sob pressão reduzida geraram o produto como um sólido marrom escuro, 454 mg. A purificação por HPLC de fase reversa gerou 65 mg de produto purificado.

[0336] Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Uma mistura de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (22 mg, 0,105 mmol), COMU (45 mg, 0,069 mmol) e terc-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S)-pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (65 mg, 0,105 mmol) em 1,5 ml de DIPEA 10% em DMF foi agitada por 1,5 h. A mistura de reação foi dividida entre acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O intermediário bruto foi tratado com 8 ml de HCl 1,25 N em etanol a 50°C por 4 h. Bicarbonato de sódio saturado foi adicionado e a base livre extraída em diclorometano (106 mg).

[0337] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma mistura de metil {(1R)-2- [(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil} carbamato (55 mg, 0,077 mmol), ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (14 mg, 0,077 mmol), HATU (32 mg, 0,085 mmol) e 0,4 ml de DIPEA 10% em DMF foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. O produto foi purificado por HPLC de fase reversa. O produto foi convertido na base livre por dissolução em 2 ml de acetonitrila:metanol 1:1 e passagem através de um cartucho pré-embalado de carbonato suportado por polímero. O eluente foi concentrado, recolhido em TFA 1% em acetonitrila:água 1:1, congelado e liofilizado para gerar o produto como um sal de trifluoracetato (30,7 mg) MS (ESI) m/z 869,9 [M+H]+.

[0338] Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2- oxo-1-feniletil}carbamato: Uma mistura de metil {(1R)-2- [(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil} carbamato (51 mg, 0,072 mmol), ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (14 mg, 0,072 mmol), HATU (30 mg, 0,079 mmol) e 0,4 ml de DIPEA 10% em DMF foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. O produto foi purificado por HPLC de fase reversa. O produto foi convertido na base livre por dissolução em 2 ml de acetonitrila:metanol 1:1 e passagem através de um cartucho pré-embalado de carbonato suportado por polímero. O eluente foi concentrado, recolhido em TFA 1% em acetonitrila:água 1:1, congelado e liofilizado para gerar o produto como um sal de trifluoracetato (24 mg). MS (ESI) m/z 885,8 [M+H]+; 1H-RNM (CD3CN) 7,635 (s, 1H), 7,434 (m, 3H), 7,330 (m, 4H), 7,233 (m, 1H), 7,164 (m, 1H), 6,983 (m, 1H), 6,747 (m, 2H), 6,127 (m, 1H), 5,584 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 5,431 (m, 1H), 5,145 (m, 1H), 4,729 (s, 2H), 4,442 (m, 1H), 4,029 (m, 2H), 3,838 (m, 1H), 3,662-3,534 (m, 2H), 3,572 (s, 3H), 3,552 (s, 3H), 3,444-3,310 (m, 3H), 3,240 (s, 3H), 3,225 (s, 3H), 2,618 (m, 1H), 2,464 (m, 1H), 2,304 (m, 1H), 2,129 (m, 1H), 2,041 (m, 1H), 1,899 (m, 2H), 1,107 (d, 3H, J = 6,4 Hz). Exemplo CK

[0339] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(benziloxi) carbonil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: O composto do título foi obtido como no Exemplo BO (composto terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato), mas usando ácido (2S,5S)-1-(benziloxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico no lugar de ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico.

[0340] Terc-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)- 5-metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1- carboxilato: Uma mistura de 683A (830 mg, 1,08 mmol) e 100 mg de Pd/C 10% em 20 ml de etanol foi hidrogenada em 1 atmosfera de um dia para o outro. Mais Pd/C 10% (300 mg) e uma porção de NaHCO3 sólido foram adicionados, e a hidrogenação continuou por 4 horas. A filtração através de Celite e a concentração do filtrado sob pressão reduzida geraram o produto como um sólido marrom escuro, 722 mg. A purificação por HPLC de fase reversa gerou 100 mg de produto purificado.

[0341] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato: Uma mistura de terc-butil (2S,4S)-4- (metoximetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)-5-metilpirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (101 mg, 0,159 mmol), ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanóico (30 mg, 0,159 mmol), HATU (61 mg, 0,159 mmol) e 2 ml de DIPEA 10% em DMF foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 hora. Bicarbonato de sódio saturado foi adicionado, e o produto foi extraído em diclorometano, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado sob pressão reduzida. Esse produto bruto foi tratado com 5 ml de HCl 1,25 N em etanol a 50°C por 4 h e foi então concentrado sob pressão reduzida. Bicarbonato de sódio saturado foi adicionado, e o produto foi extraído em diclorometano, seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado sob pressão reduzida (74,6 mg).

[0342] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Uma mistura de metil {(2S,3R)-3-metóxi-1- [(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]- 1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2- il}carbamato (74,6 mg, 0,105 mmol), ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (18.5 mg, 0,105 mmol), HATU (44 mg, 0,116 mmol) e 0,6 ml de DIPEA 10% em DMF foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. O produto foi purificado por HPLC de fase reversa (48,1 mg) MS (ESI) m/z 866,1 [M+H]+. Exemplo CL

[0343] Terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-4-(trifluormetil)pirrolidin-2- il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato: o composto do título foi preparado como no Exemplo BO para o composto terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-yt}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato, por utilização de ácido (2S,4S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamin)-3-metilbutanoil)-4-(trifluormetil) pirrolidina-2-carboxílico no lugar de ácido (2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2- carboxílico e ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil) pirrolidina-2-carboxílico no lugar de ácido (2 S,5S)-1-(( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina -2-carboxílico.

[0344] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(trifluormetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- (trifluormetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (<0,412 mmol, bruto da etapa prévia) foi tratado com 6 ml de HCl 4 N em dioxano em temperatura ambiente de um dia para o outro e então a 50°C por 1 hora. Éter dietílico (20 ml) foi adicionado e o precipitado de sal de cloridrato foi coletado por filtração a vácuo (126 mg, 0,16 mmol). Esse material foi combinado com ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (34 mg, 0,16 mmol), COMU (70 mg, 0,16 mmol) e 1,6 ml de DIPEA 10% em DMF. Após 1 hora em temperatura ambiente, a mistura foi adicionada gota a gota em 25 ml de bicarbonato de sódio saturado, com agitação e o precipitado resultante foi coletado por filtração a vácuo e lavado com 2 ml de água. O produto foi purificado, então repurificado por HPLC de fase reversa (3,5 mg). MS (ESI) m/z 938,1 [M+H]+. Exemplo CM

[0345] (2S,4S)-terc-butil 2-formil-4-metilpirrolidina-1- carboxilato: Uma mistura de ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico (5,2 g, 22,7 mmol), cloridrato de O,N-dimetilhidroxilamina (2,4 g, 24,9 mmol), HATU (10,4 g, 27,2 mmol) e DIPEA (9,5 ml, 54,5 mmol) em 114 ml de DMF foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi extraída em acetato de etila e lavada com bicarbonato saturado e água, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Ela foi então dissolvida em éter dietílico (100 ml) e lavada com água para remover DMF residual, seca, filtrada e concentrada em um óleo amarelo pálido (5,30 g, 19,5 mmol) de (2S,4S)-terc-butil 2-(metóxi(metil)carbamoil)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato.

[0346] (2S,4S)-terc-butil 2-(metóxi(metil)carbamoil)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (5,30 g, 19,5 mmol) foi dissolvido em 120 ml de THF, resfriado até -78°C e tratado com hidreto de lítio alumínio (1 M em THF, 19,5 ml, 19,5 mmol) gota a gota por meio de um funil de adição. Após 1 hora, a mistura foi levada até 0°C e mantida naquela temperatura por 2 horas. Ela foi extinta por adição gota a gota 50 ml de uma solução de 3,0 g de KHSO4 em água, removida do banho de gelo, e agitada por 15 minutos em temperatura ambiente. O produto foi extraído com três porções de 75 ml de acetato de etila e lavado com salmoura. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para gerar (2S,4S)-terc-butil 2-formil-4- metilpirrolidina-1-carboxilato bruto (4,89 g).

[0347] (2S,4S)-terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de (2S,4S)- terc-butil 2-formil-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (4,89 g, 22,9 mmol), hidróxido de amônio (17 ml) e água (17 ml) foi adicionado, gota a gota, glioxal (40% em água, 14,6 ml, 128 mmol) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. Bicarbonato de sódio saturado (100 ml) foi adicionado e a mistura foi extraída com quatro porções de 75 ml de diclorometano. A fase orgânica foi lavada com água, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada, e então purificada por cromatografia em sílica gel para gerar um total de 3,76 g de produto.

[0348] (2S,4S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidina-1-carboxilato: Uma mistura de (2S,4S)- terc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1- carboxilato (1,0 g, 3,97 mmol), iodo (2,22 g, 8,75 mmol) e carbonato de sódio (1,3 g, 12,31 mmol) em 20 ml de dioxano e 13,25 ml de água foi coberta por uma folha metálica e agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi diluída com acetato de etila e tratada com tiossulfato de sódio 10% (5 ml) e agitada por 10 minutos. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então a fase aquosa foi extraída de volta com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas para fornecer (2S,4S)-terc-butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1- carboxilato bruto (2,25 g) como um sólido amarelo pálido.

[0349] Uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(4,5-diiodo-1H- imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (2,25 g, 4,4 mmol) em 18 ml de etanol e 18 ml de água foi tratada com sulfito de sódio (5,59 g, 44,4 mmol) e aquecida a 90°C de um dia para o outro. A mistura foi dividida entre acetato de etila e água. A fase aquosa foi extraída com mais acetato de etila e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio, filtrada, concentrada e purificada por cromatografia em sílica gel para gerar 766 mg de (2S,4S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H- imidazol-2-il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato. Exemplo CN

[0350] (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil hexahidrociclopenta [b]pirrol-1,2(2H)-dicarboxilato: A uma solução disponível comercialmente de (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil hexahidrociclopenta[b]pirrol-1,2(2H)- dicarboxilato (4,70 g, 16,68 mmol) em cloreto de metileno (42 ml) foram adicionados Di-terc-butil dicarbonato (7,28 g, 33,36 mmol), N,N-diisopropiletilamina (5,82 ml, 33.36 mmol) e 4-(dimetilamino)piridina (0,20 g, 1,67 mmol). A solução foi agitada sob ar por 16 horas. Após o término, a reação foi concentrada in vacuo, diluída em acetato de etila e lavada com HCl 1 N. As camadas aquosas foram extraídas de volta duas vezes com acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por em sílica gel (acetato de etila em hexanos 5-40%) para gerar (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil hexahidrociclopenta [b]pirrol-1,2(2H)-dicarboxilato, que foi usado sem purificação adicional. MS (ESI) m/z 368,47 [M+Na]+.

[0351] Ácido (2S,3aS,6aS)-1-(terc-butoxicarbonil) octahidrociclopenta[b]pirrol-2-carboxílico: A um frasco de fundo redondo de 250 ml carregado com uma barra de agitação e (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terc-butil hexahidrociclopenta [b]pirrol-1,2(2H)-dicarboxilato (5,76 g, 16,68 mmol) foi adicionado paládio sobre carbono 10% (1,77 g). Etanol foi derramado sobre a mistura e a mistura de reação foi evacuada e recebeu um jato de gás hidrogênio três vezes. A suspensão foi agitada em temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio por 24 horas. Após o término, a mistura de reação foi filtrada através de Celite e concentrada para gerar ácido (2S,3aS,6aS)-1-(terc- butoxicarbonil)octahidrociclopenta[b] pirrol-2-carboxílico (4,45 g, >99%). MS (ESI) m/z 256,21 [M+H]+. Exemplo CO

[0352] terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirrol-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil (2R)-2-[5- (2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}- 3,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato com ácido (2S,3aS,6aS)-1-(terc-butoxicarbonil)octahidrociclopenta[b] pirrol-2-carboxílico substituindo a alquilação inicial de 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-6H-nafto[2,3-c]cromen-8(9H)- ona. As reações na síntese de terc-butil 2-[5-(2- {(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc-butil (2R)-2-[5-(2- {(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil] pirrolidin-2-il}-3,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 774,1 [M+H]+. Exemplo CP

[0353] Metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta [b]pirrol-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato: A uma solução de terc-butil 2-[5-(2-20 {(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil] octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (0,128 g, 0,165 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,6 ml) e MeOH (0,33 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4-dioxano, 1,24 ml, 4,9 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 h e concentrada até a secura. O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (1,6 ml). Ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,052 g, 0,25 mmol) e DIPEA (0,087 ml, 0,496 mmol) foram então adicionados à solução. A mistura de reação foi resfriada até -40°C (temperatura externa, banho de MeCN/CO2(s)). COMU (0,113 g, 0,265 mmol) foi então adicionado, e foi permitido que a solução se aquecesse até 0°C ao longo de 1,5 h. Após o término por LCMS, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, MeCN/H2O 10-47% com TFA 0,1%) e as frações desejadas foram combinadas. A solução foi concentrada até que a camada aquosa permanecesse e bicarbonato aquoso (saturado) foi lentamente adicionado até que a solução se tornasse básica. A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e filtrada. O sólido resultante foi seco in vacuo para fornecer metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (0,068 g, 48%). MS (ESI) m/z 865,7 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,44-8,30 (m, 1H), 8,02-7,82 (m, 2H), 7,81-7,58 (m, 4H), 7,50-7,11 (m, 6H), 7,09-6,83 (m, 2H), 5,72-5,45 (m, 2H), 5,41 (s, 1H), 5,34-5,28 (m, 1H), 5,22 (s, 3H), 4,69-4,64 (m, 1H), 4,26-4,19 (m, 1H), 4,03-3,98 (m, 1H), 3,96-3,91 (m, 1H), 3,66 (d, 4H), 2,98-2,91 (m, 1H), 2,88 2,83 (m, 1H), 2,58-2,48 (m, 1H), 2,27-2,12 (m, 4H), 2,11 2,00 (m, 3H), 2,00-1,89 (m, 2H), 1,77-1,72 (m, 1H), 1,31 1,04 (m, 3H), 0,93 (d, 6H). Exemplo CQ

[0354] Metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta [b]pirrol-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato: A uma solução de terc-butil 2- [5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil] octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2- il]pirrolidina-1-carboxilato (0,030 g, 0,039 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (0,39 ml) e MeOH (0,078 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4-dioxano, 0,29 ml, 1,16 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 h e concentrada até a secura.

[0355] O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (0,39 ml). Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,007 g, 0,043 mmol) e DIPEA (0,020 ml, 0,116 mmol) foram então adicionados à solução. HATU (0,018 g, 0,047 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada em temperatura ambiente. Após o término, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, 10-47% MeCN/H2O com TFA 0,1%) e as frações desejadas foram combinadas e liofilizadas para fornecer metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,010 g, 31%). MS (ESI) m/z 832,2 [M+H]+. Exemplo CR

[0356] Metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta [b]pirrol-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a metil {(2S)-1-[2-(5-{2- [(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirrol-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato, com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- (tetrahidro-2H-piran-4-il)acético substituindo ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico para gerar metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta [b]pirrol-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato (0,039, 56%). MS (ESI) m/z 874,34 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,58 (s, 2H), 8,26-8,08 (m, 2H), 7,96-7,75 (m, 4H), 7,65-7,54 (m, 5H), 5,36-5,11 (m, 4H), 4,34-4,04 (m, 4H), 3,97-3,79 (m, 4H), 3,65 (s, 4H), 3,53-3,44 (m, 2H), 2,68-2,47 (m, 4H), 2,32-2,02 (m, 7H), 1,95-1,82 (m, 3H), 1,77-1,54 (m, 4H), 1,49-1,24 (m, 5H), 1,10-0,99 (m, 3H), 0,92-0,85 (m, 4H). Exemplo CS

[0357] terc-butil 2-[5-(2-{(2S,4S)-4- [(difluormetoxi)metil]-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)- 1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirrol- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-((difluormetoxi)metil) pirrolidina-2-carboxílico substituindo a alquilação inicial de 9-bromo-3-cloro-10,11-diidro-6H-nafto[2,3-c]cromen- 8(9H)-ona. As reações na síntese de terc-butil 2-[5-(2- {(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]pirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1- carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirrol-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 815,04 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,58 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 7,96-7,85 (m, 3H), 7,70 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,50-7,38 (m, 4H), 7,10 (s, 1H), 6,46 (t, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,39-5,36 (m, 1H), 5,31-5,28 (m, 2H), 4,43-4,36 (m, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,13-4,02 (m, 3H), 3,75-3,62 (m, 7H), 3,51-3,47 (m, 1H), 3,18-3,11 (m, 2H), 2,93-2,83 (m, 2H), 2,75-2,69 (m, 1H), 2,47-2,36 (m, 2H), 2,23-2,09 (m, 3H), 2,01-1,94 (m, 2H), 0,87 (dd, 6H). Exemplo CT

[0358] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil (2R)- 2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2- il}-3,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato com ácido (1R,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexano- 3-carboxílico substituindo a alquilação inicial de 9-bromo- 3-cloro-10,11-diidro-6H-nafto[2,3-c]cromen-8(9H)-ona, e com (2S,4S)-terc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato substituindo o acoplamento de Suzuki-Miyara. As reações na síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]pirrolidin-2-il}-3,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 791,0 [M+H]+.

[0359] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1R,3S,5R)-2-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2- azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-diimidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2- [N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,060 g, 0,076 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (0,76 ml) e MeOH (0,15 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4-dioxano, 0,570 ml, 2,28 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e concentrada até a secura.

[0360] O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (0,76 ml). Ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,024 g, 0,114 mmol) e DIPEA (0,040 ml, 0,228 mmol) foram então adicionados à solução. A mistura de reação foi resfriada até -40°C (temperatura externa, banho de MeCN/CO2(s)). COMU (0,052 g, 0,122 mmol) foi então adicionado e foi permitido que a solução se aquecesse até 0°C ao longo de 1,5 h. Após o término por LCMS, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, MeCN/H2O 10-45% com TFA 0,1%) e liofilizada para fornecer metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2- [(1R,3S,5R)-2-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,028 g, 42%). MS (ESI) m/z 881,8 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,45-8,33 (m, 1H), 8,02-7,94 (m, 1H), 7,91-7,75 (m, 2H), 7,72-7,67 (m, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,59-7,34 (m, 6H), 7,09-6,91 (m, 2H), 5,62-5,38 (m, 2H), 5,29 (t, 1H), 5,24-5,09 (m, 3H), 4,61 (d, 1H), 4,37-4,26 (m, 1H), 3,83-3,73 (m, 1H), 3,69-3,56 (m, 6H), 3,50-3,40 (m, 1H), 3,20-3,11 (m, 1H), 2,99 (s, 1H), 2,83 (d, 1H), 2,63-2,50 (m, 2H), 2,47-2,34 (m, 2H), 2,29-2,13 (m, 2H), 2,10-1,95 (m, 2H), 1,37-1,23 (m, 3H), 1,19-1,10 (m, 1H), 1,03-0,78 (m, 7H). Exemplo CU

[0361] terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidina-1-carboxilato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil (2S,4S)-2- [5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico substituindo a alquilação inicial de 3-(2-bromoacetil)- 10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona, e com ácido (2 S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil)-4-((difluormetoxi)metil) pirrolidina-2-carboxílico substituindo a outra alquilação na sequência. As reações na síntese de terc-butil (2S,4S)- 2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-4- [(difluormetoxi)metil]pirrolidina-1-carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 772,03 [M+H]+.

[0362] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4- [(difluormetoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidina-1-carboxilato (0,081 g, 0,105 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,05 ml) e MeOH (0,210 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4-dioxano, 0,788 ml, 3,15 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e concentrada até a secura.

[0363] O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (1,05 ml). Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,040 g, 0,231 mmol) e DIPEA (0,055 ml, 0,315 mmol) foram então adicionados à solução. HATU (0,176 g, 0,462 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada em temperatura ambiente. Após o término, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, MeCN/H2O 10-45% com TFA 0,1%) e as frações desejadas foram combinadas. A solução foi concentrada até que a camada aquosa permanecesse e bicarbonato aquoso (saturado) foi lentamente adicionado até que a solução se tornasse básica. A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e filtrada. O sólido resultante foi seco in vacuo para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]- 1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,025 g, 27%). MS (ESI) m/z 886,1 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,49-8,25 (m, 2H), 8,08-7,82 (m, 2H), 7,79-7,27 (m, 5H), 6,45 (t, 1H), 5,36-5,26 (m, 1H), 5,22-5,07 (m, 3H), 4,78-4,49 (m, 2H), 4,45-4,19 (m, 3H), 4,16-4,05 (m, 2H), 3,99-3,92 (m, 1H), 3,85-3,71 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 2,88-2,70 (m, 2H), 2,69-2,49 (m, 2H), 2,42-2,26 (m, 2H), 2,23-2,10 (m, 2H), 2,07-1,87 (m, 3H), 1,51 (d, 2H), 1,34 1,20 (m, 2H), 1,17-0,76 (m, 12H). Exemplo CV

[0364] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difsuorometoxi)metil]-2- (5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato com (2S,4S)-1-(terc- -butoxicarbonil)-4-((difluormetoxi)metil)pirrolidina-2- carboxílico ácido substituindo a alquilação inicial de 3- (2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)- ona, e com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico substituindo a outra alquilação na sequência. As reações na síntese de terc- butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-[(difluormetoxi) metil]pirrolidina-1-carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. MS (ESI) m/z 772,31 [M+H]+.

[0365] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]-2- (5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: A terc-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- (terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidina-1- carboxilato (0,057 g, 0,074 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (0,739 ml) e MeOH (0,148 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4-dioxano, 0,555 ml, 2,218 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e concentrada até a secura.

[0366] O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (0,739 ml). Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,028 g, 0,163 mmol) e DIPEA (0,039 ml, 0,222 mmol) foram então adicionados à solução. HATU (0,124 g, 0,325 mmol) foi adicionado e solução foi agitada em temperatura ambiente. Após o término, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, MeCN/H2O 10-46% com TFA 0,1%) e as frações desejadas foram combinadas e liofilizadas para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]-2- (5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,011 g, 17%). MS (ESI) m/z 886,1 [M+H]+. 1H- RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,67-8,51 (m, 1H), 8,26-8,11 (m, 1H), 8,04-7,75 (m, 3H), 7,69-7,58 (m, 2H), 6,43 (t, 1H), 5,41-5,15 (m, 4H), 4,48-3,90 (m, 6H), 3,82 (s, 1H), 3,713,57 (m, 5H), 3,53-3,43 (m, 1H), 3,20-3,01 (m, 2H), 2,92 2,63 (m, 3H), 2,60-2,25 (m, 4H), 2,15-1,86 (m, 4H), 1,57 (d, 3H), 1,24 (d, 2H), 1,07 (dd, 2H), 0,98-0,77 (m, 9H). Exemplo CW

[0367] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato: Esse composto foi feito de forma análoga a terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato com ácido (2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2- carboxílico substituindo a alquilação inicial de 3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona, e com ácido (2S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil) -4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-2-carboxílico substituindo a outra alquilação na sequência. As reações na síntese de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato geraram rendimentos de produto similares à síntese de terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato. MS (ESI) m/z 801,1 [M+H]+.

[0368] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4- [(difluormetoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: A terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1- (terc-butoxicarbonil)-4-[(difluormetoxi)metil]pirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,092 g, 0,115 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,15 ml) e MeOH (0,230 ml) foi adicionado HCl (4 M em 1,4- dioxano, 0,862 ml, 3,446 mmol). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e concentrada até a secura.

[0369] O intermediário foi dissolvido em CH2Cl2 (1,149 ml). Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,044 g, 0,253 mmol) e DIPEA (0,060 ml, 0,345 mmol) foram então adicionados à solução. HATU (0,192 g, 0,505 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada em temperatura ambiente. Após o término, a solução foi diluída com DMF e concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna Gemini, MeCN/H2O 10-45% com TFA 0,1%) e as frações desejadas foram combinadas. A solução foi concentrada até que a camada aquosa permanecesse e bicarbonato aquoso (saturado) foi lentamente adicionado até que a solução se tornasse básica. A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 h e filtrada. O sólido resultante foi seco in vacuo para fornecer metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]- 1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (0,042 g, 40%). MS (ESI) m/z 916,30 [M+H]+. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,55-8,25 (m, 1H), 8,15-7,85 (m, 2H), 7,83-7,26 (m, 5H), 6,44 (t, 1H), 5,37-5,02 (m, 4H), 4,47-4,35 (m, 1H), 4,33-4,18 (m, 3H), 4,15-3,90 (m, 3H), 3,81-3,45 (m, 11H), 3,39 (s, 3H), 2,90-2,27 (m, 5H), 2,221,92 (m, 4H), 1,12-0,73 (m, 13H). Exemplo CX

[0370] (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato: Um frasco de fundo redondo de 100 ml foi carregado com (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirrolidina- 1,2-dicarboxilato (3,33 g, 12,84 mmol), CuI (0,489 g, 2,56 mmol) e acetonitrila anidra (57,1 ml). A reação foi aquecida até 45°C (banho de óleo ext.). Ácido 2,2-diflúor- 2-(fluorsulfonil)acético (2,655 ml, 25,68 mmol) foi adicionado a 45°C ao longo de 30 minutos por meio de bomba de seringa. A reação foi aquecida por 30 minutos. Após o término como monitorado por TLC, a mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O resíduo bruto foi diluído em EtOAc e lavado com bicarbonato de sódio (aquoso). A camada de bicarbonato foi extraída de volta com acetato de etila duas vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O resíduo resultante foi ainda purificado por meio de cromatografia em sílica gel (EtOAc/hexanos 10 a 40%) para gerar (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,41 g, 61%). MS (ESI) m/z 210,21 [M+H-Boc]+.

[0371] Ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-2-carboxílico: A uma solução de (2S,4S)-1-terc-butil 2-metil 4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-1,2-dicarboxilato (2,41 g, 7,79 mmol) em uma mistura de THF (39 ml) e MeOH (15,6 ml) foi adicionado LiOH (2,5 M aquoso, 15,6 ml, 38,9 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. Após o término por TLC, a mistura de reação foi acidificada com HCl aquoso (1 N). O produto desejado foi extraído com CH2Cl2 (3x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas para fornecer ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-((difluormetoxi) metil)pirrolidina-2-carboxílico (2,4 g, 99%). MS (ESI) m/z 294,96 [M-H]-. 1H-RNM: 400 MHz, (acetona-d6) δ (mistura de rotômeros): 6,50 (t, 1H), 4,36-4,17 (m, 1H), 3,93 (d, 2H), 3,77-3,67 (m, 1H), 3,63-3,59 (m, 1H), 3,26-3,12 (m, 1H), 2,72-2,41 (m, 2H), 1,89-1,73 (m, 2H), 1,41 (s, 9H). Exemplo CY

[0372] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (150 mg, 0,19 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi agitada de um dia para o outro então aquecida até 50°C por 3 h. A reação foi concentrada e material bruto dissolvido em DMF (2 ml). A essa solução foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (52 mg, 0,25 mmol) e COMU (90 mg, 0,21 mmol). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (0,099 ml, 0,57 mmol). Após agitação por 2 h em temperatura ambiente, a reação foi extinta com HCl 1 N (0,200 ml) e purificada por HPLC. Após liofilização, o sal de TFA foi dissolvido em EtOAc e lavado com NaHCO3 saturado. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada. A base livre foi então dissolvida em MeCN/H2O e liofilizada para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2- [(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}- 4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (65 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculado para C49H54N8O8: 882,4; observado [M+1]+: 884,1. Picos diagnósticos em RNM 1H-RNM (CD3OD): 8,28 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,91-7,01 (m, 10H), 3,62 (s, 3H), 3,34 (s, 3H), 3,23 (s, 3H), 1,56 (d, 3H), 1,03 (d, 3H), 0,94 (d, 3H). Exemplo CZ

[0373] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)- 2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato (100 mg, 0,13 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanóico (34 mg, 0,20 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol) e DMF (1,3 ml), então N-metilmorfolino (0,043 ml, 0,39 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 h, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (91 mg, 82%). LCMS-ESI calculado para C46H56N8O8: 848,4; observado [M+1]+: 850,2. Exemplo DA

[0374] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxohutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (119 mg, 0,15 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (43 mg, 0,23 mmol), HATU (63 mg, 0,17 mmol) e DMF (2 ml), então N-metilmorfolino (0,050 ml, 0,45 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 horas, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9- {2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-3-metóxi-2- [(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-(metoximetil)pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (76 mg, 59%). LCMS-ESI: calculado para C46H56N8O9: 864,4; observado [M+1]+: 866,1. Exemplo DB

[0375] Metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)-4-metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2- ilcarbamato: (2S,4S)-terc-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2- il)-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (100 mg, 0,13 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (15 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilpentanóico (625 mg, 3,30 mmol), HATU (1,05 g, 2,77 mmol) e DMF (10 ml), então DIPEA (1,33 ml, 7.62 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 2 h, a mistura foi derramada em NaHCO3 aquoso saturado e então extraída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada sucessivamente com LiCl aquoso 5% e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (30 a 90% de MeOH/EtOAc 10% em hexanos) e gerou metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamato (932 mg, 81%).

[0376] Terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato: (2S,4S)-Terc-butil 4-(metoximetil)-2-(9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidina-1-carboxilato (856 mg, 1,4 mmol), metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamato (932 mg, 2,1 mmol), Pd(PPh3)4 (162 mg, 0,14 mmol), PdCl2(dppf)2 (102 mg, 0,14 mmol) e K2CO3 (2 M em H2O, 2,31 ml, 4,62 mmol) foram combinados em DMSO (8 ml) e dioxanos (8 ml). A mistura foi desgaseificada com argônio borbulhante por 10 min e aquecida até 95°C por 1 hora. Após resfriamento, a mistura de reação foi diluída com EtOAc, e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 1% a 20%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[9- (2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4- (metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (701 mg, 62%).

[0377] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato: Uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (218 mg, 0,27 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecida até 50°C por 3 h. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DMF (3 ml). A essa solução foi adicionada uma solução de ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (73 mg, 0,35 mmol) e COMU (127 mg, 0,30 mmol). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (0,141 ml, 0,81 mmol). Após agitação por 2 h em temperatura ambiente, a reação foi extinta com HCl 1 N (0,200 ml) e purificada por HPLC. Após liofilização, o sal de TFA foi dissolvido em EtOAc e lavado com NaHCO3 saturado. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada. A base livre foi então dissolvida em MeCN/H2O e liofilizada para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2- [(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilpentanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (121 mg, 50%). LCMS-ESI+: calculado para C50H56N8O8: 896,4; observado [M+1]+: 897,5. Exemplo DC

[0378] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (105 mg, 0,13 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (32 mg, 0,18 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol) e DMF (1,3 ml), então N- metilmorfolino (0,043 ml, 0,39 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 h, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S)-1- [(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil) amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato (80 mg, 71%). LCMS-ESI+: calculado para C47H58N8O8: 862,4; observado [M+1]+: 864,2. Exemplo DD

[0379] Metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1- [N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-aloisoleucil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]- 4-(metoximetil)pirrolidina-1-carboxilato (105 mg, 0,13 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (35 mg, 0,18 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol) e DMF (1,3 ml), então N-metilmorfolino (0,043 ml, 0,39 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 horas, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2- (5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]- 4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato (92 mg, 81%). LCMS-ESI calculado para C47H58N8O9: 878,4; observado [M+1]+: 879,3. Exemplo DE

[0380] Metil {(3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2- il}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-aloisoleucil]-4-metilpirrolidin-2-il}- 1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (105 mg, 0,13 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (3 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico (34 mg, 0,18 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol) e DMF (1,3 ml), então N-metilmorfolino (0,043 ml, 0,39 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 h, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(3R)-1- [(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil) amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1H- imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxopentan-2-il}carbamato (98 mg, 86%). LCMS-ESI+: calculado para C48H60N8O8: 876,5; observado [M+1]+: 878,2. Exemplo DF

[0381] (2S,5S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-5-metilpirrolidina- 1,2-dicarboxilato: A uma solução de 9-bromo-3-cloro-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (1,41 g, 3,88 mmol) em MeCN (17 ml) foram adicionados ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico (980 mg, 4,27 mmol) e DIPEA (1,49 ml, 8,54 mmol). Após agitação por 18 h a 50°C, a solução foi diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com HCl 1 N, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 10% a 30%) para gerar (2S,5S)-1-terc-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-9-il)-5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (1,63 g, 81%).

[0382] (2S,5S)-terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-5H- nafto[c,g] cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5- (metil)pirrolidina-1-carboxilato: A (2S,5S)-1-terc-butil 2- (3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 9-il)-5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,63 g, 3,18 mmol) foram adicionados tolueno (30 ml), 2-metoxietanol (3 ml) e acetato de amônio (3,68 g, 77,1 mmol), e a solução foi aquecida até o refluxo de um dia para o outro. Na manhã seguinte, a solução foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com água, NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 40% a 80%) para gerar (2S,5S)- terc-butil 2-(9-cloro-4,5-diidro-5H- nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina- 1-carboxilato (1,13 g, 72%).

[0383] ((2S,5S)- terc-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g] cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1- carboxilato: A uma solução de (2S,5S)-terc-butil 2-(9- cloro--diidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5- (metil)pirrolidina-1-carboxilato (1,13 g, 2,3 mmol) em CH2Cl2 (25 ml) foi adicionado MnO2 (9,98 g, 115 mmol). A mistura de reação foi agitada de um dia para o outro então filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e MeOH copiosos, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para gerar o produto bruto (2S,5S)-terc- butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (931 mg, 83%).

[0384] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: (2S,5S)- terc-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (931 mg, 1,9 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (8 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (499 mg, 2,9 mmol), HATU (795 mg, 2,1 mmol) e DMF (10 ml), então N- metilmorfolino (0,627 ml, 5,7 mmol) foi adicionado gota a gota. Após agitação por 1 h, a reação foi diluída com EtOAc e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado, LiCl 5% e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 50% a 100%) para gerar metil {(2S)-1- [(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato (950 mg, 91%).

[0385] Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11- diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato: A metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (950 mg, 1,74 mmol) em dioxano (17 ml) foi adicionado bis(pinacolato)diboro (662 mg, 2,61 mmol), KOAc (512 mg, 5,22 mmol), X-Phos (25 mg, 0,05 mmol) e Pd2dba3 (80 mg, 0,08 mmol). A solução foi desgaseificada com N2 por 10 min, então aquecida até 90°C por 16 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, lavada com NaHCO3 aquoso saturado, salmoura, seca com Na2SO4, e concentrada. A purificação por cromatografia em sílica gel (gradiente de 30% a 75% usando MeOH/EtOAc 5% em hexanos) para gerar metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro1an-2-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato (800 mg, 72%).

[0386] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato: A uma solução de [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-1- oxobutan-2-il]carbamato (269 mg, 0,42 mmol), metil (S)-1- ((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1- il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (206 mg, 0,54 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0) (49 mg, 0,042 mmol) e dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (31 mg, 0,042 mmol) em DMSO (3 ml) e dioxanos (3 ml) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (2 M em água, 0,69 ml, 1,39 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada e então aquecida até 95°C por 2 h. Após resfriamento até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com acetato de etila. Os orgânicos foram lavados com bicarbonato de sódio saturado e salmoura, secos sobre Na2SO4 e concentrados. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea (MeOH/EtOAc 1 a 20%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (202 mg, 63%).

[0387] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirrolidin-2- il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato: Uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- metilpirrolidina-1-carboxilato (80 mg, 0,11 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (2 ml) foi aquecida até 50°C por 3 h. A reação foi concentrada e o material bruto dissolvido em DMF (1,5 ml). A essa solução foi adicionada uma solução de ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (29 mg, 0,14 mmol) e COMU (52 mg, 0,12 mmol). À solução resultante foi adicionada diisopropiletilamina (0,057 ml, 0,33 mmol). Após agitação por 2 h em temperatura ambiente, a reação foi extinta com HCl 1 N (0,200 ml) e purificada por HPLC. Após liofilização, o sal de TFA foi dissolvido em EtOAc e lavado com NaHCO3 saturado. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada. A base livre foi então dissolvida em MeCN/H2O e liofilizada para gerar metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2- [(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}- 4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (42 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculado para C48H52N8O7: 852,4; observado [M+1]+: 854,2. Exemplo DG

[0388] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (60 mg, 0,079 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (2 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (21 mg, 0,12 mmol), HATU (36 mg, 0,095 mmol) e DMF (1,5 ml), então N- metilmorfolino (0,027 ml, 0,24 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 h, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S)-1- [(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino] -3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2- il}carbamato (33 mg, 51%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O7: 818,4; observado [M+1]+: 820,2. Exemplo DH

[0389] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil- 1-oxobutan-2-il}carbamato: terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirrolidina-1-carboxilato (20 mg, 0,079 mmol) em HCl 1,25 N em EtOH (2 ml) foi aquecido até 50°C por 3 h e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (8 mg, 0,04 mmol), HATU (12 mg, 0,03 mmol) e DMF (0,5 ml), então N- metilmorfolino (0,009 ml, 0,078 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 3 h, a mistura foi extinta com HCl 1 N (0,100 ml) e então purificada por HPLC para gerar metil {(2S)-1- [(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (7,5 mg, 35%). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,4; observado [M+1]+: 835,7.

Exemplos DI-DT

[0390] Usando procedimentos similares àqueles aqui descritos, os seguintes compostos da invenção foram preparados.

Exemplo DU

[0391] 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo [c,g]cromen-8(9H)-ona: A 3-(2-bromo-1-hidroxietil)-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (20,3 g, 54 4 mmol) em DCM (365 ml) foram adicionados MeOH (22 ml) e tribrometo de piridínio (18.24 g, 57,0 mmol). Após 2 h, água foi adicionada (100 ml) e após agitar brevemente as camadas divididas e a camada orgânica inferior foi coletada. A camada orgânica foi então lavada com 1 M de HCl (100 ml) e a camada orgânica inferior que contém 9-bromo-3-(2-bromo-1- hidroxietil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona foi coletada. 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) 7,75 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,42 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,99-4,96 (m, 1H), 4,73 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 3,69-3,66 (m, 1H), 3,58-3,53 (m, 1H), 3,35-3,27 (m, 1H), 2,96-2,90 (m, 1H), 2,58-2,44 (m, 2H), COH não observada.

[0392] À 9-bromo-3-(2-bromo-1-hidroxietil)-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (aproximadamente 54,4 mmol) em DCM (365 ml) foram adicionados bicarbonato de sódio (5,45 g), brometo de sódio (6,14 g), TEMPO (16,55 mg) e água (60 ml). A solução foi resfriada entre 0-5°C e alvejante 6% (91,5 ml) foi adicionado. Após 1 h álcool isopropílico (20 ml) foi adicionado, e a mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente. A agitação foi interrompida, as camadas separadas e a camada orgânica inferior foi coletada e concentrada removendo aproximadamente 345 g de solvente. A lama foi filtrada e a torta lavada com 50 ml de água e então 50 ml de DCM (pré-resfriado até 5°C). Os sólidos foram coletados e secos sob vácuo para obter 9-bromo-3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (18,6 g, 76% de rendimento). 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) δ 8,038,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37-3,29 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 1H), 2,59-2,46 (m, 2H); 100 MHz 13C-RNM (CDCl3) δ 190,4, 189,6, 154,2, 136,6, 134,1, 133,9, 132,9, 131,8, 129,3, 127,2, 125,6, 124,2, 123,3, 117,0, 68,1, 49,9, 31,8, 30,4, 25,5. Exemplo DV

[0393] 9-Bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g] cromen-8(9H)-ona: Uma mistura de 3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (2,58 g, 6,95 mmol), tribrometo de piridínio (2,56 g, 8,0 mmol), diclorometano (22 ml) e metanol (2,5 ml) foi agitada a cerca de 20°C por 3 horas para obter uma lama. O produto precipitado foi filtrado, lavado com diclorometano (10 ml) e sevo em um forno a vácuo a 40°C para gerar 9-bromo-3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (2,62 g, 84% de rendimento). 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) δ 8,038,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37-3,29 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 1H), 2,59-2,46 (m, 2H). Exemplo DW

[0394] 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g] cromen-8(9H)-ona: Um frasco de 300 ml equipado com um agitador aéreo e um condensador de refluxo sob uma atmosfera de nitrogênio foi carregado com 3-cloro-10,11- diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (10,0 g, 35,12 mmol), fosfato tripotássico anidro em pó (22,4 g, 105,4 mmol), XPhos (1,34 g, 2,81 mmol) e PdCl2(MeCN)2 (364 mg, 1,40 mmol). Acetonitrila (140 ml) foi adicionada, seguida por TMS-acetileno (18 ml, 141 mmol). A mistura foi aquecida até 65°C. Após 6 h, a reação foi considerada completa, e a mistura foi resfriada até 20°C. A mistura foi filtrada através de um funil de frita, e a torta do filtro foi lavada com acetonitrila.

[0395] O filtrado foi concentrado até cerca de 150 ml sob pressão reduzida e extraído com heptano (50 ml, 3x 100 ml). N-Acetil cisteína (15 g) foi adicionada à fase de acetonitrila, e a mistura foi agitada por 5 h a 45°C. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, filtrada através de um funil de frita, e a torta do filtro foi lavada com acetonitrila. O filtrado foi concentrado até cerca de 120 ml sob pressão reduzida. Água (120 ml) foi adicionada, e a mistura foi agitada por 40 minutos a 45°C e então resfriada até a temperatura ambiente. Após 30 minutos, a mistura foi filtrada através de um funil de frita para fornecer 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-diidro- 5H-dibenzo [c,g]cromen-8(9H)-ona (4,07 g, 33,4% de rendimento) como um sólido amarelo: 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) δ 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,1, 1,4 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 2,95 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,67-2,59 (m, 2H), 2,18-2,08 (m, 2H), 0,26 (s, 9H).

[0396] 3-acetil-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)- ona: Um frasco de 20 ml com barra de agitação foi carregado com 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-8(9H)-ona (850 mg, 2,44 mmol) e ácido fórmico (9,8 ml). A solução foi aquecida até 65°C. Após 3 h, a reação foi considerada completa. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida; o resíduo resultante foi recolhido em CH2Cl2 e carregado sobre um cartucho pré-embalado de sílica gel de 25 g. O produto foi purificado por cromatografia em uma coluna pré-embalada de sílica gel de 80 g eluindo com um gradiente de solvente de EtOAc/hexanos 5% a 85%. As frações que contêm produto foram combinadas e concentradas para fornecer 3-acetil-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen- 8(9H)-ona (616 mg, 86%): 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) δ 8,00-7,94 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,64 (s, 2H), 5,16 (s, 2H), 2,98 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,69-2,64 (m, 2H), 2,63 (s, 3H), 2,21-2,09 (m, 2H).

[0397] 9-bromo-3-(2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H- dibenzo[c,g] cromen-8(9H)-ona: Um frasco de 20 ml com uma barra de agitação foi carregado com 3-acetil-10,11-diidro- 5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (100 mg, 0,366 mmol), CH2Cl2/MeOH 9:1 (3,4 ml) e tribrometo de piridínio (246 mg, 0,769 mmol). A solução foi aquecida até 35°C. Após 30 minutos, a reação foi considerada completa. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc (50 ml) e sequencialmente lavada com Na2S2O3 aquoso saturado (20 ml), NaHCO3 aquoso 2% (20 ml), água (20 ml) e salmoura (10 ml). A fase orgânica foi seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, resultando em 9-bromo-3- (2-bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)- ona (68 mg, 41%): 400 MHz 1H-RNM (CDCl3) δ 8,03-8,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37-3,29 (m, 1H), 2,99-2,92 (m, 1H), 2,592,46 (m, 2H). Exemplo DX

[0398] (2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc-butil 5- metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato: 9-bromo-3-(2- bromoacetil)-10,11-diidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (1,43 g, 3,17 mmol) foi tratada com uma solução de ácido (2 S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico (800 mg, 3,49 mmol) em diclorometano (14 ml) e K2CO3 (658 mg, 1,18 mmol). A mistura de reação agitada foi agitada em temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar ((2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,61 g, 84%).

[0399] (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)-2-oxoetil)-5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato: ((2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11- tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terc- butil 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,59 g, 2,66 mmol) foi tratado com uma solução de ácido (2S,5S)-1-((S)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico (1,14 g, 3,99 mmol) em THF (16 ml) e Cs2CO3 (692 mg, 2,12 mmol). A mistura de reação agitada foi aquecida até 50°C por 16 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2 e extraída 3X. A fase orgânica foi lavada com salmoura, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (EtOAc/hexanos 20%) para gerar (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboniloxi)-8-oxo- 8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 5-metilpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,26 g, 59%).

[0400] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,5S)-1-terc-butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)-2-oxoetil)-5-metilpirrolidina-1,2- dicarboxilato (1,2 g, 1,49 mmol), hexametildisilazano (2,5 ml, 11,9 mmol) e ácido propiônico (3,3 ml, 44,8 mmol) foram suspensos em PhMe (12 ml). A mistura de reação agitada foi aquecida até 90°C por 20 h, e então resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água/NH4OH 98:2, e então seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (MeOH/EtOAc 0% a 30%) para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (474 mg, 41%).

[0401] Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H- imidazol-2-il]-5-metilpirrolidina-1-carboxilato: (2S,4S)-2- [5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidina-1-carboxilato (474 mg, 0,70 mmol) foi suspenso em DCM (5 ml) e MnO2 ativado (2,1 g, 21,7 mmol) foi adicionado em uma porção única. Após agitação por 15 h, a mistura foi filtrada sobre Celite. A torta do filtro foi lavada com CH2Cl2 e EtOAc copiosos e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para gerar terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidina-1-carboxilato (432 mg, 81%) que foi levado à etapa seguinte sem purificação adicional.

[0402] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafta [1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidina- 1-carboxilato (216 mg, 0,28 mmol) foi dissolvido em EtOH (3 ml) e HCl (1 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 1 h a 60°C e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi tratado com ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (71 mg, 0,38 mmol), HATU (126 mg, 0,33 mmol) e DMF (3 ml), então DIPEA (0,15 ml, 0,86 mmol) foi adicionado gota a gota. Após 2 h, a mistura foi diluída com MeOH/EtOAc 10% e lavada sucessivamente com NaHCO3 aquoso saturado e salmoura. Os orgânicos foram secos sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, ACN/H2O 15 a 43% + TFA 0,1%), para gerar metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3R)-3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,L]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan- 2-il}carbamato (96,7 mg, 41%). 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,64 (s, 1H), 7,74 (m, Hz, 8H), 5,27 (s, 2H), 5,15 (s, 1H), 4,98 (s, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,20-3,22 (m, 10H), 3,17 (s, 3H), 2,22 (m, 5H), 1,84 (m, 2H), 1,47 (m, 6H), 1,31-0,97 (m, 3H), 0,92 (d, 3H), 0,83 (d, 3H), 0,72 (d, 3H). MS (ESI) m/z 835,76 [M+H]+. Exemplo DY

[0403] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidin-1-il}-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metilpirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,70 (s, 1H), 8,31-7,45 (m, 8H), 7,05 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,22-5,14 (m, 1H), 5,03-4,92 (m, 1H), 4,68-4,60 (m, 1H), 4,21 (d, 4H), 3,75-3,06 (m, 14H), 2,36-2,02 (m, 2H), 1,94-1,75 (m, 2H), 1,45 (s, 3H), 1,26-1,18 (m, 2H), 1,14 (s, 3H), 1,05 (s, 2H), 0,95 (d, 6H). MS (ESI) m/z 851,79 [M+H]+. Exemplo DZ

[0404] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,62 (s, 1H), 8,34-7,47 (m, 8H), 7,10 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,18-5,00 (m, 2H), 4,79-4,66 (m, 2H), 4,54-4,40 (m, 1H), 4,31-4,01 (m, 2H), 3,43 (m, 10H), 3,15 (s, 3H), 2,432,23 (m, 4H), 2,18-2,01 (m, 2H), 1,82 (s, 2H), 1,50 (s, 3H), 1,28-1,17 (m, 1H), 1,02 (d, 4H), 0,95 (d, 6H). MS (ESI) m/z 851,82 [M+H]+. Exemplo EA

[0405] Metil(1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil] -5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il)carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,04-7,50 (m, 8H), 5,27 (s, 2H), 5,15 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,66 (m, 2H), 4,24-3,43 (m, 9H), 3,15 (s, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,98-1,97 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 1,57 (s, 1H), 1,47 (m, 6H), 1,20 (s, 4H), 0,90 (s, 2H), 0,83 (d, 3H), 0,72 (d, 3H). MS (ESI) m/z 861,82 [M+H]+. Exemplo EB

[0406] Metil [(1S)-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- {[(metoxicarbonil)amino](tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil}- 5-metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4- il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico e, substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,67 (s, 1H), 8,19 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 8,07-7,50 (m, 8H), 5,27 (s, 2H), 5,19-5,08 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 4,66 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,75 (m, 4H), 3,56-3,39 (m, 6H), 3,26-2,95 (m, 4H), 2,22 (m, 6H), 1,83 (s, 3H), 1,58 (d, 2H), 1,47 (m, 6H), 1,21 (m, 8H). MS (ESI) m/z 903,60 [M+H]+. Exemplo EC

[0407] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2 - [(2S,5S)-1- {(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX substituindo ácido ((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,68 (s, 1H), 8,18 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,02 (m, 1H), 7,94-7,80 (m, 3H), 7,73 (s, 1H), 7,63 (m, 1H), 7,51 (m, 2H), 5,67 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 5,18-5,09 (m, 1H), 5,03-4,91 (m, 1H), 4,72-4,56 (m, 2H), 4,23-4,03 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,48 (t, 5H), 3,38 (s, 1H), 2,33 (s, 2H), 2,26-2,02 (m, 3H), 2,08 (m, 2H), 1,81 (m, 1H), 1,64 (s, 2H), 1,45 (m, 7H), 1,17 (d, 1H), 1,04 (m, 2H), 0,75 (m, 7H), 0,63 (d, 5H). MS (ESI) m/z 847,78 [M+H]+. Exemplo ED

[0408] Metil{(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3R)-3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diiroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2- il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1- ((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,70 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,87 (s, 4H), 7,74 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,28 (d, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,24-5,16 (m, 1H), 4,97 (d, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,27-4,02 (m, 2H), 3,60-3,37 (m, 14H), 2,68 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,32 (m, 3H), 2,18-1,91 (m, 3H), 1,82 (s, 1H), 1,63 (s, 1H), 1,45 (d, 3H), 1,24 (m, 2H), 0,99 (d, 5H), 0,79-0,64 (m, 7H). MS (ESI) m/z 879,85 [M+H]+. Exemplo EE

[0409] Metil{(3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-D-alotreonil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1- ((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,73 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,90 (m, 3H), 7,77 (s, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,07 (d, 1H), 5,35-5,15 (m, 3H), 5,06-4,94 (m, 1H), 4,64 (s, 1H), 4,33-4,25 (m, 1H), 4,19 (s, 1H), 4,08 (s, 1H), 3,98 (t, 1H), 3,62 (t, 1H), 3,54-3,41 (m, 8H), 3,27 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 2,69 (s, 1H), 2,59-2,49 (m, 1H), 2,48-2,41 (m, 2H), 2,28 (m, 2H), 2,18-1,94 (m, 2H), 1,82 (m, 1H), 1,67 (m, 1H), 1,44 (d, 3H), 1,15-1,01 (m, 1H), 0,98 (d, 3H), 0,79 (m, 4H), 0,65 (d, 3H). MS (ESI) m/z 879,90 [M+H]+. Exemplo EF

[0410] Metil [(1S) -2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico; ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,78 (m, 4H), 7,59 (d, 1H), 7,49 (d, 2H), 7,27 (d, 1H), 5,30-5,10 (m, 3H), 5,01-4,89 (m, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,13 (m, 3H), 3,92-2,95 (m, 9H), 2,65 (s, 2H), 2,52-2,37 (m, 2H), 2,18 (m, 4H), 1,98-1,69 (m, 4H), 1,40 (d, 5H), 1,22 (m, 5H), 0,84 (m, 5H), 0,68 (d, 3H). MS (ESI) m/z 891,65 [M+H]+. Exemplo EG

[0411] Metil{2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3- metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4- il)etil}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S,5S)- 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,60 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,76 (m, 4H), 7,54 (m, 3H), 5,23 (s, 2H), 5,11 (t, 1H), 4,95 (s, 1H), 4,63 (m, 2H), 4,42-4,16-3,95 (m, 2H), 3,86-3,30 (m, 8H), 3,26-2,89 (m, 5H), 2,21 (m, 5H), 1,80 (s, 3H), 1,54 (m, 2H), 1,44 (m, 6H), 1,16 (m, 5H), 1,02 (d, 1H), 0,88 (d, 3H). MS (ESI) m/z 877.77 [M+H]+. Exemplo EH

[0412] Metil{(3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3- metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1- ((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,63 (s, 1H), 8,21-7,49 (m, 8H), 5,26 (s, 2H), 5,13 (m, 1H), 4,98 (s, 1H), 4,68 (m, 2H), 4,14 (s, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,34 (m, 9H), 2,36 (m, 2H), 2,11 (m, 4H), 1,84 (m, 2H), 1,70-1,60 (m, 1H), 1,47 (m, 6H), 1,13 (m, 4H), 0,92 (d, 3H), 0,84 (m, 2H), 0,74 (m, 3H), 0,66 (d, 3H). MS (ESI) m/z 849,74 [M+H]+. Exemplo EI

[0413] Metil[(1S)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1- (terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanoil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico; ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2- carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,73 (s, 1H), 8,21 (m, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,98-7,84 (m, 3H), 7,73 (m, 2H), 7,52 (d, 1H), 7,27 (d, 1H), 5,31 (s, 2H), 5,24-5,14 (m, 1H), 5,05-4,96 (m, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,29-3,48 (m, 10H), 3,26-3,03 (m, 4H), 2,65-2,52 (m, 2H), 2,41-2,03 (m, 4H), 1,97-1,75 (m, 4H), 1,44 (d, 3H), 1,32 (s, 2H), 1,20 (m, 2H), 1,09 (d, 3H), 0,87 (m, 4H), 0,72 (d, 3H). MS (ESI) m/z 861,75 [M+H]+. Exemplo EJ

[0414] Metil[(2S)-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-4-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,68 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,097,96 (m, 1H), 7,83 (m, 2H), 7,73-7,43 (m, 2H), 7,27 (d, 1H), 5,24 (d, 2H), 5,13 (m, 1H), 5,01 (m, 1H), 4,72-4,59 (m, 1H), 4,21-4,03 (m, 4H), 3,91 (m, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,55-3,31 (m, 8H), 3,25-3,03 (m, 3H), 2,51-2,25 (m, 4H), 2,12 (m, 1H), 1,79 (m, 3H), 1,47 (d, 3H), 1,34-1,12 (m, 3H), 1,12-0,93 (m, 4H), 0,86 (s, 1H), 0,79 (d, 3H), 0,69 (d, 3H). MS (ESI) m/z 861,79 [M+H]+. Exemplo EK

[0415] Metil[(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-5-etil-1- [N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]pirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metóxi-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- etilpirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,81 (m, 3H), 7,59 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,20-5,08 (m, 1H), 5,05-4,94 (m, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,53 (s, 1H), 4,42 (s, 1H), 4,24-3,98 (m, 4H), 3,61-3,36 (m, 5H), 3,28-3,12 (m, 6H), 2,43-2,08 (m, 6H), 1,92 (m, 4H), 1,45 (d, 3H), 1,05 (m, 12H), 0,71 (s, 1H). MS (ESI) m/z 865,74 [M+H]+. Exemplo EL

[0416] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan- 2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,93-7,57 (m, 6H), 5,27 (s, 2H), 5,14 (m, 1H), 5,02-4,93 (m, 1H), 4,56-4,26 (m, 2H), 4,22-4,08 (m, 2H), 3,77-3,08 (m, 16H), 2,39-2,08 (m, 4H), 1,91 (m, 6H), 1,16-1,03 (m, 2H), 1,01-0,83 (m, 10H), 0,79-0,64 (m, 3H). MS (ESI) m/z 879,87 [M+H]+. Exemplo EM

[0417] Metil [(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-etil-5-[5-(2-{(2S,5S)-1- [N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]pirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan- 2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2-carboxílico, e ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,06-7,68 (m, 5H), 7,59 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,19-5,08 (m, 1H), 5,034,94 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,47 (s, 1H), 4,31 (s, 1H), 4,23-4,05 (m, 3H), 3,87-3,09 (m, 16H), 2,34 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,98 (s, 2H), 1,85 (s, 3H), 1,50 (d, 2H), 1,25 (s, 1H), 1,08 (d, 2H), 0,94 (m, 6H), 0,75 (s, 1H). MS (ESI) m/z 865,85 [M+H]+. Exemplo EN

[0418] Metil[(1S)-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-5-etil-1- {(2S)-2[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1(tetrahidro-2H-piran-4- il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2- carboxílico e ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H- piran-4-il)acetil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metil butanóico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,63 (s, 1H), 8,22-8,11 (m, 1H), 7,68 (m, 8H), 5,26 (s, 2H), 5,13 (s, 1H), 4,99 (s, 1H), 4,77-4,64 (m, 1H), 4,38-4,25 (m, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,85 (d, 2H), 3,60-2,92 (m, 9H), 2,63 (s, 1H), 2,29 (s, 4H), 1,90 (m, 6H), 1,58 (s, 1H), 1,49 (d, 4H), 1,15 (s, 4H), 0,95 (d, 4H), 0,84 (d, 4H), 0,71 (d, 4H). MS (ESI) m/z 875,67 [M+H]+. Exemplo EO

[0419] Metil [(1S)-2-[(2S,5S)-2-etil-5-(9-{2-[(2S,5S)-1- {(2S)-2[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4- il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanoil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico; ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2- carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,66 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,81 (m, 3H), 7,58 (m, 3H), 5,27 (d, 2H), 5,15 (s, 1H), 5,04-4,93 (m, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,39 (s, 1H), 4,03 (s, 2H), 3,94-3,34 (m, 9H), 3,26-2,96 (m, 4H), 2,43-2,06 (m, 4H), 2,00 (s, 2H), 1,84 (s, 4H), 1,59 (d, 1H), 1,44 (d, 3H), 1,28 (d, 4H), 0,97 (m, 2H), 0,84 (d, 4H), 0,69 (m, 4H). MS (ESI) m/z 875,74 [M+H]+. Exemplo EP

[0420] Metil {(2S,3R)-1-[(2S,5S)-2-etil-5-(9-{2-[(2S,5S)-1- {(2S)-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il)pirrolidin-1-il]-3-metóxi-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanoil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico e ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-etilpirrolidina-2- carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,69 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,01-7,48 (m, 6H), 5,28 (s, 2H), 5,14 (m, 1H), 5,06-4,94 (m, 1H), 4,70-4,35 (m, 2H), 4,23-3,82 (m, 3H), 3,52 (m, 6H), 3,41 (s, 3H), 3,25 (s, 1H), 3,15 (s, 2H), 2,42-2,06 (m, 4H), 1,90 (m, 4H), 1,44 (d, 3H), 1,08 (d, 1H), 1,02-0,76 (m, 10H), 0,71 (d, 4H). MS (ESI) m/z 849,79 [M+H]+. Exemplo EQ

[0421] Metil{(2S,3R)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-5-etil-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-3- metóxi-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-5-etil-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico. (400 MHz, DMSO) δ 8,68 (s, 1H), 8,19 (m, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,00-7,70 (m, 4H), 7,60 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 5,19-5,08 (m, 1H), 5,05-4,94 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,22-4,06 (m, 2H), 3,94-3,82 (m, 3H), 3,75-3,19 (m, 9H), 3,14 (s, 2H), 2,36 (m, 2H), 2,14 (m, 2H), 1,87 (m, 3H), 1,50 (d, 3H), 1,25 (d, 1H), 1,15-1,01 (m, 1H), 1,01-0,76 (m, 10H), 0,71 (d, 3H). MS (ESI) m/z 849,83 [M+H]+. Exemplo ER

[0422] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-5-etil-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-5-etil-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S,5S)-1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,72 (s, 1H), 8,25-8,11 (m, 1H), 8,07-7,84 (m, 3H), 7,67 (m, 3H), 7,26 (d, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,25-5,15 (m, 1H), 5,06-4,91 (m, 1H), 4,36-4,00 (m, 3H), 3,94-381 (m, 2H), 3,65-335 (m, 10H), 3,27 (s, 3H), 2,69 (s, 2H), 2,51 (m, 1H), 2,33 (s, 1H), 2,19 (s, 2H), 2,05-1,63 (m, 7H), 0,99-0,63 (m, 12H). MS (ESI) m/z 863,88 [M+H]+. Exemplo ES

[0423] Metil{(2R,3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-5-etil-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]- 3-metóxi-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-5-etil-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)pirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S,5S)-1- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico. 1H-RNM (400 MHz, DMSO) δ 8,71 (s, 1H), 8,19 (m, 1H), 7,94 (m, 3H), 7,76 (m, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,25-5,16 (m, 1H), 5,06-4,93 (m, 1H), 4,37-4,10 (m, 3H), 3,95-3,82 (m, 2H), 3,51 (m, 8H), 3,25 (m, 3H), 3,11 (s, 3H), 2,60 (m, 3H), 2,25 (m, 3H), 2,06-1,65 (m, 6H), 1,11-0,77 (m, 8H), 0,71 (d, 3H). MS (ESI) m/z 879,81 [M+H]+. Exemplo ET

[0424] Ácido (2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilpentanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico foi sintetizado de forma similar ao Exemplo BN, substituindo ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico com ácido (2S,3S)-2-(metoxicarbonil-amino)-3-metilpentanóico MS (ESI) m/z 301,19 [M+H]+. Exemplo EU

[0425] Ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- carboxílico foi sintetizado de forma similar ao Exemplo BN, substituindo ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- (tetrahidro-2H-piran-4-il)acético. MS (ESI) m/z 329,36 [M+H]+. Exemplo EV

[0426] Ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanoil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico foi sintetizado de forma similar ao Exemplo BN, substituindo ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanóico com ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico. MS (ESI) m/z 303,19 [M+H]+. Exemplo EW

[0427] Ácido (2S,5S)-5-etil-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)pirrolidina-2-carboxílico foi sintetizado de forma similar ao Exemplo BN, substituindo (2S,5S)-etil 5-metilpirrolidina-2-carboxilato-TFA com (2S,5S)-metil 5- etilpirrolidina-2-carboxilato-HCl. MS (ESI) m/z 301,15 [M+H]+. Exemplo EX

[0428] Metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)- 1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)- 5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico (0,083 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H58N8O11: 910,42; observado [M+1]+: 911,78. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,63 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,91 (d, 2H), 7,83 (d, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,63 (d, 1H), 5,45-5,37 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 5,30-5,24 (m, 1H), 4,55-4,44 (m, 2H), 4,37-4,23 (m, 3H), 3,78-3,65 (m, 10H), 3,65-3,54 (m, 5H), 3,41 (s, 7H), 3,28 (s, 3H), 2,90-2,59 (m, 6H), 2,12 (dq, 3H), 1,12 (q, 6H). Exemplo EY

[0429] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato foi sintetizado de forma similar a metil {(2S,3R)-3-metóxi-1- [(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L- treonil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- (metoximetil)pirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato, substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético e substituindo HATU com COMU (0,068 g). LCMS-ESI+: calculado para C53H54N8O9: 946,40; observado [M+1]: 947,83. 1H-RNM (400 MHz, acetona) δ 8,21 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,88-7,71 (m, 3H), 7,59 (d, 3H), 7,51 (d, 2H), 7,48-7,32 (m, 7H), 7,27-7,18 (m, 1H), 5,74 (t, 1H), 5,63 (dd, 2H), 5,52 (t, 1H), 5,11 (s, 3H), 3,98-3,87 (m, 2H), 3,83 (d, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,60 (s, 3H), 3,51-3,37 (m, 4H), 3,25 (d, 3H), 3,19 (s, 3H), 2,86-2,75 (m, 1H), 2,73-2,54 (m, 4H), 2,25 (dd, 1H), 2,18-2,10 (m, 1H). Exemplo EZ

[0430] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidin-1-il}-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,5S)-1-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico (0,068 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O9: 850,40; observado [M+1]+: 851,78. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,65 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,87- 7,81 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,64 (d, 1H), 5,39 (q, 1H), 5,33 (s, 2H), 5,25 (q, 1H), 4,51 (dd, 2H), 4,43 -4,23 (m, 3H), 3,73 -3,62 (m, 8H), 3,57 -3,46 (m, 2H), 3,45 -3,35 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 2,83 -2,63 (m, 3H), 2,61 -2,47 (m, 2H), 1,93 (dq, 3H), 1,26 (dd, 6H), 1,22-1,14 (m, 2H), 1,11 (t, 6H). Exemplo FA

[0431] Metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico ácido com (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,5S)-1-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico (0,102 g). LCMS-ESI+: calculado para C4hH54N8O8: 834,41; observado [M+1]+: 835,77. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,68-8,61 (m, 1H), 8,25-8,17 (m, 1H), 8,09-7,97 (m, 2H), 7,96-7,91 (m, 1H), 7,88-7,82 (m, 1H), 7,73-7,63 (m, 2H), 6,10-6,01 (m, 1H), 5,75-5,66 (m, 1H), 5,33 (d, 3H), 5,22-5,11 (m, 1H), 4,844,75 (m, 2H), 4,68-4,58 (m, 1H), 4,42 (d, 1H), 4,35-4,25 (m, 1H), 4,18-4,07 (m, 1H), 3,76 (d, 2H), 3,67 (d, 4H), 3,62-3,55 (m, 1H), 3,40 (s, 1H), 3,28 (s, 2H), 2,67-2,46 (m, 3H), 2,44-2,26 (m, 4H), 2,10-1,90 (m, 3H), 1,61 (d, 2H), 1,56 (d, 3H), 1,34-1,22 (m, 4H), 1,14-1,06 (m, 2H), 1,03 (d, 1H), 0,98 (d, 2H), 0,87 (d, 3H). Exemplo FB

[0432] Metil {(1R)-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato por substituição de ácido (2S,3R)- 3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético, e substituindo HATU com COMU (0,033 g). LCMS-ESI+: calculado para C48H52N8O7: 852,40; observado [M+1]+: 853,77. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,67 (s, 1H), 8,27-8,17 (m, 1H), 8,14-8,03 (m, 2H), 8,027,96 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,89-7,78 (m, 1H), 7,72-7,65 (m, 2H), 7,57-7,51 (m, 2H), 7,51-7,42 (m, 2H), 5,62 (s, 1H), 5,50 (t, 1H), 5,33 (s, 2H), 5,22-5,13 (m, 1H), 4,84-4,78 (m, 1H), 4,35-4,24 (m, 1H), 4,21-4,07 (m, 1H), 3,82- 3,72 (m, 3H), 3,67 (s, 3H), 2,75-2,49 (m, 3H), 2,47 -2,25 (m, 4H), 2,10- 1,95 (m, 3H), 1,92-1,83 (m, 1H), 1,59 (dd, 6H), 1,33 -1,27 (m, 1H), 1,06 (dd, 2H), 0,99 (d, 2H), 0,88 (d, 3H). Exemplo FC

[0433] Metil [(1S)-2-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1-il]-2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1- [N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato por substituição de ácido (2S,3R)- 3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético (0,116 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H56N8O8: 860,42; observado [M+1]+: 861,42. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,65 (s, 1H), 8,27-8,17 (m, 1H), 8,08-7,97 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,88-7,83 (m, 1H), 7,73-7,62 (m, 2H), 5,41-5,26 (m, 3H), 5,21-5,12 (m, 1H), 4,85-4,76 (m, 1H), 4,39-4,21 (m, 2H), 4,12 (d, 1H), 4,04-3,90 (m, 2H), 3,87-3,81 (m, 1H), 3,76 (d, 2H), 3,67 (d, 4H), 3,50-3,38 (m, 1H), 3,25-3,10 (m, 2H), 2,68-2,21 (m, 7H), 2,12-1,87 (m, 4H), 1,85-1,70 (m, 1H), 1,64 (d, 2H), 1,56 (d, 3H), 1,51-1,33 (m, 2H), 1,32-1,25 (m, 2H), 1,25 -1,18 (m, 1H), 1,06 (dd, 2H), 0,99 (d, 2H), 0,88 (d, 2H). Exemplo FD

[0434] Ácido (S)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)propanóico. A uma solução de cloridrato de ácido (S)-2-amino-3-metoxipropanóico (2,5 g, 16,17 mmol) em THF (40 ml) foram adicionados NaOH aquoso (6 M, 6,47 ml, 38,82 mmol) e Metil cloroformato (1,50 ml, 19,41 mmol). A solução foi agitada por 18 h. HCl aquoso (1 M, 40 ml) foi lentamente adicionado. A solução foi extraída com acetato de etila (3 vezes) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas para fornecer ácido (S)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)propanóico (1,60 g, 56%). 1H-RNM (400 MHz, CDCl3) δ 5,61 (d, 1H), 4,52 (d, 1H), 3,88 (d, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,65 (dd, 1H), 3,43-3,35 (s, 3H). Exemplo FE

[0435] Metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-seril]-5-metilpirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato substituindo áci do (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)propanóico (0, 059 g). LCMS- ESI+: calculado para C44H52N8O8: 820,39; observado [M+1]+: 821,76. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,66-8,57 (m, 1H), 8,24- 8,14 (m, 2H), 8,06-7,94 (m, 2H), 7,93-7,88 (m, 1H), 7,85- 7,80 (m, 1H), 7,79-7,74 (m, 1H), 7,69-7,60 (m, 2H), 6,01- 5,59 (m, 2H), 5,38-5,24 (m, 3H), 5,21-5,07 (m, 1H), 4,82- 4,63 (m, 3H), 4,34-4,21 (m, 1H), 4,09 (d, 1H), 3,81 (s, 2H), 3,72 (s, 1H), 3,62-3,44 (m, 2H), 3,37 (s, 1H), 3,31 (s, 1H), 2,86-2,74 (m, 1H), 2,69-2,45 (m, 3H), 2,42-2,24 (m, 4H), 2,07-1,88 (m, 3H), 1,55 (dd, 5H), 1,05 (dd, 2H), 0,96 (d, 2H), 0,85 (d, 3H). 1,27 (d, 2H), 1,05 (dd, 2H), 0,96 (d, 2H), 0,85 (d, 3H). Exemplo FF

[0436] Ácido (2S,3R)-3-terc-butóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanóico foi sintetizado de forma similar ao ácido (S)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)propanóico substituindo cloridrato de ácido (S)-2-amino-3-metoxipropanóico com ácido (2S,3R)-2-amino-3-terc-butoxibutanóico (1,33 g, 99%). 1H-RNM (400 MHz, CDCl3) δ 5,65 (s, 1H), 4,41-4,25 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 1,29 (d, 9H), 1,16 (d, 3H). Exemplo FG

[0437] Metil {(2S,3R)-3-terc-butóxi-1-[(2S,5S)-2-(9-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato, substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3R)-3-terc- butóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (0,133 g). LCMS- ESI+: calculado para C48H60N8O8: 876,45; observado [M+1]+: 877,73. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,62 (d, 1H), 8,24-8,13 (m, 1H), 8,07-7,76 (m, 4H), 7,73-7,59 (m, 2H), 5,32 (d, 2H), 5,20-5,11 (m, 1H), 4,82-4,75 (m, 2H), 4,70-4,62 (m, 1H), 4,47-4,22 (m, 3H), 4,19-3,98 (m, 2H), 3,94-3,85 (m, 1H), 3,80-3,61 (m, 6H), 2,85-2,46 (m, 4H), 2,43-2,25 (m, 4H), 2,11-1,91 (m, 3H), 1,64 (d, 2H), 1,56 (d, 3H), 1,31 (dd, 2H), 1,25 -1,17 (m, 6H), 1,14 -1,07 (m, 2H), 1,04 (s, 4H), 0,98 (d, 2H), 0,88 (d, 2H). Exemplo FH

[0438] Ácido (2S,3R)-3-hidróxi-2-(metoxicarbonilamino) butanóico foi sintetizado de forma similar ao ácido (S)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)propanóico substituindo cloridrato de ácido (S)-2-amino-3-metoxipropanóico com ácido (2S,3R)-2-amino-3-terc-butoxibutanóico (0,59 g, 39%). 1H-RNM (400 MHz, CDCl3) δ 5,95 (d, 1H), 4,52-4,29 (m, 2H), 4,08 (d, 1H), 3,75 (d, 4H), 1,57 (t, 3H). Exemplo FI

[0439] Metil {(2S,3R)-3-hidróxi-1-[(2S,5S)-2-(9-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3R)-3-hidróxi- 2-(metoxicarbonilamino)butanóico (0,013 g). LCMS-ESI+: calculado para C44H52N8O8: 820,39; observado [M+1]+: 821,73. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,63 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,097,76 (m, 4H), 7,71-7,62 (m, 2H), 5,47-5,26 (m, 3H), 5,205,12 (m, 1H), 4,83 -4,71 (m, 3H), 4,58-4,40 (m, 2H), 4,32 (s, 1H), 4,19-3,97 (m, 3H), 3,80-3,64 (m, 6H), 2,71-2,44 (m, 4H), 2,41-2,27 (m, 3H), 2,08-1,92 (m, 3H), 1,67-1,47 (m, 5H), 1,33-1,24 (m, 3H), 1,17 (d, 2H), 1,05 (dd, 2H), 0,98 (d, 2H), 0,87 (d, 2H). Exemplo FJ

[0440] A uma solução de composto 1 (7 g, 0,053 mol) em água (260 ml) foi adicionado Na2CO3 (11,2 g, 0,106 mol) em porções, e a mistura resultante foi resfriada até 0°C. A seguir, cloroformato de metila (5,5 g, 0,058 mol) foi adicionado gota a gota ao longo de 5 minutos. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. TLC mostrava que a reação estava completa. A mistura foi então dividida entre HCl 1 N e EtOAc, e separada. A camada orgânica foi coletada e a camada aquosa foi adicionalmente extraída com mais EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de magnésio, concentradas, purificadas por cromatografia (PE/EA = 5/1 a 1/1) para gerar G-01431-1 (5,6 g, 55%) como um óleo amarelo puro. 1H-RNM: (400 M CDCl3) δ 8,88 (br, 1H), 5,51-5,49 (m, 1H), 4,56-4,53 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,73 (br, 1H), 3,41 (s, 3H), 1,29 (d, 3H). Exemplo FK

[0441] Metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-Lalotreonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9- il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato substituindo ácido (2S,3R)-3- metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)- 3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (0,150 g). LCMS- ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,41; observado [M+1]+: 835,76. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,61 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,07-7,87 (m, 3H), 7,83 (d, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,66 (t, 2H), 6,00 (d, 1H), 5,74 -5,65 (m, 1H), 5,30 (d, 2H), 5,21-5,11 (m, 1H), 4,82-4,75 (m, 1H), 4,36 (t, 1H), 4,32-4,25 (m, 1H), 4,11 (d, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,73 (s, 1H), 3,66 (d, 3H), 3,63-3,56 (m, 1H), 3,51-3,41 (m, 1H), 3,36 (s, 2H), 3,09 (s, 1H), 2,86-2,77 (m, 1H), 2,71-2,58 (m, 1H), 2,57-2,47 (m, 1H), 2,44-2,21 (m, 4H), 2,09-1,91 (m, 3H), 1,63 (d, 2H), 1,55 (d, 3H), 1,27 (t, 4H), 1,20 (d, 1H), 1,04 (dd, 2H), 0,97 (d, 2H), 0,87 (d, 2H). Exemplo FL

[0442] Éster metílico de ácido 2-terc-butoxicarbonilamino- 3-difluormetoxi-butírico: A uma mistura de éster metílico de ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3-hidróxi-butírico (630 mg, 2,70 mmol) e iodeto de cobre (I) (105 mg, 0,55 mmol) em acetonitrila a 45°C foi adicionada uma solução de ácido 2- (fluorsulfonil)difluoracético (0,560 ml, 5,42 mmol) em acetonitrila (2 ml) por bomba de seringa ao longo de 45 minutos. A reação foi então agitada a 45°C por 30 minutos. Outra solução de ácido 2-(fluorsulfonil)difluoracético (0,560 ml, 5,42 mmol) em acetonitrila (2 ml) foi adicionado por bomba de seringa ao longo de 45 minutos a 45°C. A reação foi agitada por 30 minutos a 45°C após a segunda adição por bomba de seringa estar completa. Foi cuidadosamente adicionada água para extinguir a reação, e a mistura foi diluída com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com água e salmoura, seca (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea (acetato de etila/hexanos 10%) para gerar éster metílico de ácido 2-terc- butoxicarbonilamino-3-difluormetoxi-butírico (276 mg, 36%). 1H-RNM: 400 MHz, (CDCl3): 6,16 (t, JHF = 74,0 Hz, 1H), 5,235,16 (br, 1H), 4,86-4,80 (m, 1H), 4,40 (br d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 1,46 (br s, 9H), 1,36 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.

[0443] (2S,3R)-metil-3-(difluormetoxi)-2- (metoxicarbonilamino)butanoato: A uma solução de éster metílico de ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3- difluormetoxi-butírico (3 g, 10,6 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionada solução de HCl concentrado (10 ml) e a reação foi agitada a 50°C por 1 hora. A reação foi concentrada em um evaporador rotatório e o resíduo resultante foi alcalinizado com solução de NaHCO3 saturado. A camada aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca (MgSO4) e concentrada. A uma solução do material bruto em diclorometano (50 ml) foi adicionada diisopropiletilamina (4,2 ml, 24,2 mmol), seguida por cloroformato de metila (0,95 ml, 12,3 mmol). A reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas, extinta pela adição cuidadosa de solução saturada de NH4Cl e diluída com acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com água e salmoura, seca (MgSO4) e concentrada. O material bruto foi purificado por cromatografia instantânea para gerar (2S,3R)-metil-3-(difluormetoxi)-2- (metoxicarbonilamino)butanoato (1,2 g, 47%).

[0444] Ácido (2S,3R)-3-(difluormetoxi)-2- (metoxicarbonilamino)butanóico: A uma solução de (2S,3R)- metil-3-(difluormetoxi)-2-(metoxicarbonilamino)butanoato (265 mg, 1,1 mmol) em dicloroetano (10 ml) foi adicionado hidróxido de trimetiltina (1 g, 5,5 mmol) e a mistura resultante foi aquecida até 80°C por 1 hora. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila, lavada duas vezes com solução aquosa de HCl 5% e salmoura, seca (MgSO4) e concentrada. O material bruto resultante (209 mg, 84%) foi usado sem purificação adicional. Exemplo FM

[0445] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-(difluormetoxi)-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar a metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato, substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3R)-3- (difluormetoxi)-2-(metoxicarbonilamino)butanóico (0,092 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H52F2N8O8: 870,39; observado (d, 1H), 8,12 7,96 (m, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,87 -7,77 (m, 1H), 7,71 -7,61 (m, 2H), 6,31 (t, 2H), 5,92-5,70 (m, 1H), 5,38 -5,26 (m, 3H), 5,22-5,11 (m, 1H), 4,83-4,75 (m, 1H), 4,73 -4,64 (m, 1H), 4,62-4,52 (m, 1H), 4,50-4,40 (m, 1H), 4,29 (s, 1H), 4,13 (d, 1H), 3,78 -3,62 (m, 5H), 3,40 (s, 1H), 2,72 -2,58 (m, 2H), 2,56 -2,44 (m, 2H), 2,42 -2,24 (m, 3H), 2,12 -1,90 (m, 3H), 1,76 (d, 1H), 1,62 (d, 2H), 1,55 (d, 2H), 1,40 (d, 1H), 1,35 (d, 1H) , 1,29 (d, 1H), 1,25 (d, 2H), 1,07 (d, 1H), 1,02 (d, 1H), 0,98 (d, 2H), 0,87 (d, 2H), 1,07 (d, 1H), 1,02 (d, 1H), 0,98 (d, 2H), 0,87 (d, 2H). Exemplo FN

[0446] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2 S,5S)-1-(( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)- 5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,022 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H56N8O8: 860,42; observado [M+1]: 861,91. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,62 (s, 1H), 8,27-8,13 (m, 1H), 7,92 (s, 2H), 7,85-7,77 (m, 1H), 7,737,60 (m, 2H), 5,37-5,13 (m, 4H), 4,43-4,12 (m, 4H), 4,043,78 (m, 3H), 3,76-3,60 (m, 5H), 3,50-3,37 (m, 2H), 3,20 3,09 (m, 1H), 2,92-2,20 (m, 9H), 2,14-1,75 (m, 6H), 1,63 (d, 3H), 1,24 (d, 5H), 0,89 (dd, 6H). Exemplo FO

[0447] Metil [(2S,3R)-1-{(2S,4S)-4-[(difluormetoxi)metil]- 2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]pirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- ((difluormetoxi)metil)pirrolidina-2-carboxílico (0,079 g). LCMS-ESI+: calculado para C46H54F2N8O9: 900,40; observado [M+1]+: 901,78. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,61 (s, 1H), 8,17 (d, 1H), 8,06-7,95 (m, 2H), 7,89 (d, 1H), 7,84 -7,75 (m, 1H), 7,71 -7,57 (m, 2H), 6,47 (t, 2H), 5,50-5,39 (m, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,22 -5,12 (m, 1H), 4,83 -4,75 (m, 1H), 4,52 (d, 1H), 4,42-4,24 (m, 2H), 4,19- 4,03 (m, 3H), 3,86- 3,72 (m, 2H), 3,68 (s, 4H), 3,28 (s, 2H), 2,98-2,85 (m, 2H), 2,82 -2,72 (m, 1H), 2,71 -2,65 (m, 1H), 2,59-2,48 (m, 1H), 2,44 -2,14 (m, 4H), 2,08 -1,94 (m, 2H), 1,56 (d, 2H), 1,30 (d, 1H), 1,12 (d, 2H), 1,06 (dd, 2H), 0,99 (d, 2H), 0,89 (d, 2H). Exemplo FP

[0448] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil)- 5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2 S,5S)-1-(( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,005 g). LCMS-ESI: calculado para C47H56N8O8: 860,42; observado [M+1]+: 861,90. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,62 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,067,93 (m, 1H), 7,90-7,73 (m, 3H), 7,68-7,58 (m, 2H), 5,405,26 (m, 2H), 5,18-5,09 (m, 1H), 4,44-4,33 (m, 1H), 4,314,15 (m, 3H), 4,04-3,83 (m, 3H), 3,79-3,60 (m, 6H), 3,563,42 (m, 2H), 2,80-2,45 (m, 5H), 2,42-2,19 (m, 3H), 2,08 1,86 (m, 4H), 1,74 (d, 2H), 1,55 (d, 3H), 1,48-1,33 (m, 3H), 1,30-1,17 (m, 4H), 1,05-0,75 (m, 7H). Exemplo FQ

[0449] Metil [(1S)-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilpentanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético (0,094 g). LCMS-ESI+: calculado para C48H58N8O8: 874,44; observado [M+1]+: 875,81. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,39 (t, 1H), 8,21-7,24 (m, 8H), 5,71-5,33 (m, 2H), 5,30-5,01 (m, 3H), 4,85-4,70 (m, 2H), 4,45-4,13 (m, 3H), 4,06-3,71 (m, 4H), 3,67 (s, 4H), 3,51-3,38 (m, 1H), 3,26-3,18 (m, 1H), 3,08-2,94 (m, 1H), 2,91-2,55 (m, 2H), 2,53-2,07 (m, 5H), 2,05-1,88 (m, 2H), 1,87-1,66 (m, 3H), 1,56 (dd, 5H), 1,43-1,22 (m, 3H), 1,19-1,08 (m, 2H), 1,06-0,92 (m, 3H), 0,90-0,72 (m, 3H). Exemplo FR

[0450] Metil [(1S)-2-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acético (0,089 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H56N8O9: 876,42; observado [M+1]: 877,81. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,52-8,28 (m, 1H), 8,21-7,82 (m, 3H), 7,81-7,28 (m, 6H), 5,88-5,67 (m, 1H), 5,51-5,02 (m, 4H), 4,82-4,71 (m, 1H), 4,69-4,58 (m, 1H), 4,55-4,33 (m, 2H), 4,31-4,13 (m, 2H), 4,04-3,77 (m, 4H), 3,75-3,54 (m, 5H), 3,40 (s, 2H), 3,28-3,21 (m, 1H), 2,98-2,67 (m, 2H), 2,64-2,44 (m, 2H), 2,40-2,09 (m, 4H), 2,06-1,87 (m, 2H), 1,84 -1,70 (m, 1H), 1,56 (dd, 5H), 1,43-1,00 (m, 8H). Exemplo FS

[0451] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1- (terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-(metoximetil) pirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,5S)-1- (( S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1- ((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico (0,119 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H58N8O8: 862,44; observado [M+1]: 863,87. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,60 (s, 1H), 8,31-8,13 (m, 2H), 8,00 (d, 1H), 7,90 (d, 2H), 7,83-7,78 (m, 1H), 7,70-7,60 (m, 2H), 5,38-5,15 (m, 4H), 4,41-4,15 (m, 4H), 3,78 (s, 1H), 3,72-3,48 (m, 7H), 3,41 (s, 3H), 2,92-2,72 (m, 2H), 2,69-2,55 (m, 2H), 2,52-2,29 (m, 3H), 2,13-1,96 (m, 3H), 1,91-1,69 (m, 2H), 1,64 (d, 3H), 1,32-1,13 (m, 3H), 1,07-0,75 (m, 12H). Exemplo FT

[0452] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3R)-3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanóico (0,118 g). LCMS-ESI+: calculado para C47H58N8O9: 878,43; observado [M+1]+: 879,86. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,52 (s, 1H), 8,23-8,07 (m, 1H), 7,99-7,72 (m, 2H), 7,68-7,55 (m, 1H), 5,30-5,24 (m, 1H), 4,81 (s, 8H), 4,61-4,18 (m, 3H), 4,14-4,00 (m, 6H), 3,95-3,76 (m, 1H), 3,72-3,47 (m, 3H), 3,37 (d, 1H), 3,33 (s, 3H), 3,29 (s, 2H), 3,26 (s, 1H), 2,86-2,68 (m, 1H), 2,66-2,54 (m, 1H), 2,50-2,27 (m, 2H), 2,11-2,03 (m, 1H), 1,99 (s, 9H), 1,80-1,69 (m, 1H), 1,57 (d, 1H), 1,49-1,33 (m, 1H), 1,21 (t, 10H), 1,16-1,02 (m, 2H), 0,92-0,78 (m, 2H). Exemplo FU

[0453] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato foi sintetizado de forma similar ao Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1- (terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2 S,4S)-1-( terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2- carboxílico, e substituindo ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (2S,3S)-3-metóxi- 2-(metoxicarbonilamino)butanóico (0,065 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,41; observado [M+1]+: 835,89. 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ 8,62 (s, 1H), 8,16 (d, 1H), 8,09-7,92 (m, 2H), 7,91-7,86 (m, 1H), 7,84-7,76 (m, 1H), 7,697,58 (m, 2H), 5,41-5,27 (m, 3H), 5,21-5,13 (m, 1H), 4,80 (t, 1H), 4,49-4,35 (m, 2H), 4,33-4,21 (m, 1H), 4,19-4,06 (m, 1H), 3,72 (s, 1H), 3,66 (s, 4H), 3,55 (t, 1H), 3,493,41 (m, 1H), 3,38-3,33 (m, 1H), 3,24-3,14 (m, 1H), 3,10 (s, 2H), 2,81-2,70 (m, 1H), 2,66-2,46 (m, 2H), 2,44-2,23 (m, 3H), 2,08-1,88 (m, 3H), 1,55 (d, 2H), 1,27 (d, 3H), 1,22-1,17 (m, 1H), 1,14 (d, 2H), 1,07 (d, 1H), 1,02 (d, 1H), 0,98 (d, 2H), 0,87 (d, 2H). Exemplo FV

[0454] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-bromo-5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,06 g, 0,07 mmol) em AcOH (1,0 ml) foi adicionado bromo (0,004 ml, 0,08 mmol) em AcOH (0,4 ml). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1 h e concentrada in vacuo. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-65% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram combinadas, alcalinizadas com bicarbonato de sódio aquoso, e extraídas com CH2Cl2. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para gerar metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-bromo-5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2- oxo-1-feniletil}carbamato (0,04 g, 54%). LCMS-ESI+: calculado para C46H55BrN8O8: 926,33 (M+); encontrado: 927,17 (M+H+).

[0455] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-ciclopropil-5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato. A uma solução de metil {(1R)-2- [(2S,4S)-2-(4-bromo-5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (0,04 g, 0,036 mmol) em tolueno (0,75 ml) foi adicionado ácido c- propilborônico (0,006 g, 0,08 mmol), acetato de paládio (0,005 g, 0,007 mmol), tetrafluorborato de triciclohexilfosfina (0,005 g, 0,014 mmol) e fosfato de potássio (aquoso, 2 M, 0,075 ml, 0,15 mmol). A solução foi desgaseificada com argônio por 5 minutos e aquecida até 100°C (externa, banho de óleo) por 20 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com CH2Cl2, e lavada com água. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2/MeOH (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-50% (TFA 0,1%)) . As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-ciclopropil-5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil) amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,01 g, 42%). LCMS-ESI+: calculado para C49H60N8O8: 888,45 (M+); encontrado: 889,86 (M+H+). 1H- RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,38 (d, 1H), 8,01 (d, 1H), 7,85 (d, 2H), 7,73-7,60 (m, 2H), 7,53-7,42 (m, 1H), 5,33-5,16 (m, 3H), 4,38-4,27 (m, 1H), 4,26-4,14 (m, 2H), 4,14-4,00 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,60-3,51 (m, 2H), 3,38 (s, 3H), 2,85-2,65 (m, 2H), 2H), 2,65 1,09-2,47 (m, 2H),-0,94 (m, 5H), 2,37-2,16 (m, 2H), 2,16-1,91 (m, 5H), 1,48 (d, 3H), 1,18 (d, 0,91 (d, 3H), 0,89-0,84 (m, 2H), 0,82 (d, 3H), 0,65 (s, 1H). Exemplo FW

[0456] Metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1- il]-1-oxobutan-2-il}carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil) -5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)- 3-metilciclopentanocarboxílico em ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico, e usando 2 equivalentes de ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico, foi fornecido metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4- metilpirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,08 g). LCMS-ESI+: calculado para C46H56N8O10: 880,41 (M+); encontrado: 882,11 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,21 (d, 1H), 7,91-7,72 (m, 2H), 7,70-7,33 (m, 4H), 7,33-7,11 (m, 2H), 5,24-5,13 (m, 1H), 5,13 -4,91 (m, 3H), 4,45-4,29 (m, 2H), 4,26-3,97 (m, 3H), 3,57 (s, 6H), 3,50-3,37 (m, 3H), 3,28 (s, 3H), 3,19-3,10 (m, 7H), 2,62-2,45 (m, 2H), 2,45-2,30 (m, 2H), 2,09-1,74 (m, 4H), 1,14 (d, 3H), 1,11-0,97 (m, 6H). Exemplo FX

[0457] Metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-1-oxobutan-2-il}carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil) -5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)- 3-metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e usando 2 equivalentes de ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico, foi fornecido metil {(2S,3R)-3-metóxi-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,ll- diidroinocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,14 g). LCMS-ESI+: calculado para C46H56N8O10: 880,41 (M+); encontrado: 881,85 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,40-8,22 (m, 2H), 8,07-7,84 (m, 2H), 7,83-7,25 (m, 6H), 5,75 (s, 1H), 5,29-5,07 (m, 4H), 4,42 (d, 2H), 4,32-4,12 (m, 2H), 3,86 (s, 1H), 3,75-3,44 (m, 9H), 3,41-3,32 (m, 4H), 3,26-3,19 (m, 4H), 2,72-2,35 (m, 4H), 2,35-1,87 (m, 5H), 1,55 (d, 3H), 1,23 (s, 2H), 1,13 (d, 5H). Exemplo FY

[0458] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- cloroimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,1 g, 0,12 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionado N-clorossuccinimida (0,02 g, 0,16 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1 h, e então aquecida até 45°C por 4 h. A solução foi purificada por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-68% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram diluídas com EtOAc e lavadas com uma mistura 1:1 de bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para fornecer terc- butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L- valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- cloroimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,09 g, 87%). LCMS-ESI+: calculado para C44H52ClN7O7: 825,36 (M+); encontrado: 827,13 (M+H+).

[0459] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-cloro-5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- cloroimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,09 g, 0,11 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (1,5 ml) e metanol (0,25 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 0,8 ml, 3,20 mmol). A solução resultante foi agitada a 40°C por 1 h, e concentrada in vacuo. O sólido resultante foi misturado com CH2Cl2 (1,5 ml), e ácido (R)- 2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,04 g, 0,17 mmol) e diisopropiletilamina (0,07 ml, 0,40 mmol) foram adicionados. A reação foi resfriada até -40°C (banho de MeCN/CO2) e COMU (0,07 g, 0,18 mmol) foi adicionado. Foi permitido que a solução se aquecesse até a temperatura ambiente ao longo de 30 min, e agitada em temperatura ambiente por 1,5 h. A reação foi diluída com CH2Cl2 e lavada com bicarbonato de sódio aquoso. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2, e as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e concentradas. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-58% (TFA 0,1%)) . As frações desejadas foram diluídas com EtOAc e lavadas com salmoura. A camada aquosa foi extraída de volta com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo. O material resultante foi liofilizado por MeCN e água para fornecer metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-cloro-5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,09 g, 90%). LCMS-ESI+: calculado para C49H53ClN8O8: 916,37 (M+); encontrado: 918,28 (M+H). 1HRNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,43 (s, 1H), 8,18-7,94 (m, 2H), 7,90-7,78 (m, 1H), 7,77-7,55 (m, 3H), 7,53-7,29 (m, 4H), 7,13-6,95 (m, 1H), 5,49-5,30 (m, 2H), 5,31-5,13 (m, 2H), 5,12-5,00 (m, 1H), 4,40-4,08 (m, 3H), 3,89 (s, 1H), 3,72-3,61 (m, 3H), 3,58 (s, 2H), 3,26 (s, 3H), 2,57 (s, 2H), 2,50-2,00 (m, 7H), 2,00-1,84 (m, 3H), 1,56 (d, 3H), 1,10 (d, 2H), 1,07-0,73 (m, 7H). Exemplo FZ

[0460] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- bromoimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,3 g, 0,38 mmol) em DMF (3,8 ml) a 0°C foi adicionada N-bromossuccinimida (0,067 g, 0,38 mmol). A solução resultante foi agitada a 0°C por 1 h. A solução foi purificada por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-65% (TFA 0,1%)) . As frações desejadas foram diluídas com EtOAc e lavadas com uma mistura 1:1 de bicarbonato de sódio aquoso e salmoura. As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo para fornecer terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)- L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H- 4-bromoimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,33 g, 99%). LCMS-ESI+: calculado para C44H52BrN7O7: 869,31 (M+); encontrado: 871,61 (M+H+).

[0461] terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- ciclopropil-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato. A uma solução de terc-butil(2S,4S)-2-[5-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol- 9-il)-1H-4-bromoimidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina- 1-carboxilato (0,20 g, 0,23 mmol) em tolueno (2,5 ml) foi adicionado ácido ciclopropilborônico (0,04 g, 0,47 mmol), Pd(OAc)2 (0,03 g, 0,05 mmol), tetrafluorborato de triciclohexilfosfina (0,04 g, 0,12 mmol) e fosfato de potássio (aquoso, 2 M, 0,40 ml, 0,80 mmol). A lama foi desgaseificada com argônio por 5 min e aquecida até 100°C (externa, banho de óleo) por 20 h. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, e filtrada através de Celite. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna (SiO2, MeOH/EtOAc 0 a 30%) para fornecer terc-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- ciclopropil-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,13 g, 67%). LCMS-ESI+: calculado para C47H57N7O7: 831,43 (M+); encontrado: 832,62 (M+H+).

[0462] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-ciclopropil-5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2- [5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-4- ciclopropil-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirrolidina-1- carboxilato (0,13 g, 0,15 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (3,0 ml) e metanol (0,25 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 1,1 ml, 4,40 mmol). A solução resultante foi agitada a 40°C por 1 h, e concentrada in vacuo. O sólido resultante foi misturado com CH2Cl2 (3,0 ml) e ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (0,05 g, 0,23 mmol) e diisopropiletilamina (0,1 ml, 0,57 mmol) foram adicionados. A reação foi resfriada até -40°C (banho de MeCN/CO2) e COMU (0,11 g, 0,25 mmol) foi adicionado. Foi permitido que a solução se aquecesse até a temperatura ambiente ao longo de 30 min, e agitada em temperatura ambiente por 1,5 h. A reação foi diluída com CH2Cl2 e lavada com bicarbonato de sódio aquoso. A camada aquosa foi extraída de volta com CH2Cl2, e as camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e concentradas. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-58% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram combinadas com MeOH e concentradas para remover voláteis. A solução resultante foi alcalinizada com bicarbonato de sódio aquoso (saturado). A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 30 min, filtrada (filtro de membrana de náilon (0,45 μm)), e lavada com água. O sólido foi seco in vacuo para fornecer metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(4-ciclopropil-5-{2- [(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3- metilbutanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H- imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirrolidin-1-il]-2-oxo-1- feniletil}carbamato (0,05 g, 38%). LCMS-ESI+: calculado para C52H58N8O8: 922,44 (M+); encontrado: 923,69 (M+H+). 1H- RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,28 (s, 2H), 7,93 (s, 2H), 7,74-7,52 (m, 3H), 7,52-7,32 (m, 3H), 7,27-7,07 (m, 4H), 5,48-5,38 (m, 2H), 4,10-3,98 (m, 2H), 3,67-3,48 (m, 4H), 3,42-3,34 (m, 6H), 3,06 (s, 3H), 2,43-2,16 (m, 4H), 2,16-1,61 (m, 8H), 1,55-1,32 (m, 3H), 1,02-0,50 (m, 11H). Exemplo GA

[0463] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidin-1-il}-3-metil- 1-oxobutan-2-il]carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1- ((2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,4S)-1-(tercbutoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico, foi fornecido metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxobutan-2-il]carbamato (0,12 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,41 (M+); encontrado: 835,47 (M+H). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) (mistura de rotômeros) 8,29 (s, 2H), 8,02- 7,71 (m, 3H), 7,71-7,20 (m, 5H), 5,52 (s, 1H), 5,31-4,98 (m, 4H), 4,74-4,62 (m, 1H), 4,56-4,04 (m, 5H), 3,74 (s, 1H), 3,65 (s, 2H), 3,63 (s, 2H), 3,59-3,44 (m, 2H), 3,35 (s, 2H), 2,65-2,28 (m, 4H), 2,27-1,82 (m, 5H), 1,53 -1,44 (m, 2H), 1,26 (s, 1H), 1,21 (d, 3H), 1,18-1,06 (m, 3H), 1,03-0,77 (m, 6H). Exemplo GB

[0464] terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(tercbutoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(tercbutoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-(tercbutoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e omitindo a etapa final, foi fornecido terc-butil (2S,4S)-2- (9-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2- il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,83 g). LCMS-ESI+: calculado para C41H48N6O5: 704,37 (M+); encontrado: 705,52 (M+H+).

[0465] terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-4-cloroimidazol- 5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}- 1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,15 g, 0,21 mmol) em DMF (2,2 ml) foi adicionada N- clorossuccinimida (0,04 g, 0,28 mmol). A solução resultante foi aquecida até 45°C por 3 h. A solução foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com EtOAc, e lavada com LiCl aquoso (5%, 2x). As camadas aquosas foram extraídas de volta com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre (Na2SO4) e concentradas in vacuo. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, EtOAc (MeOH 5%)/hexanos 50 a 100%) para fornecer terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metilpirrolidin-2-il]-1H-4-cloroimidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,13 g, 86%). LCMS-ESI+: calculado para C41H47ClN6O5: 738,33 (M+); encontrado: 739,84 (M+H+).

[0466] Metil [(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-[9-(4-cloro-2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il]carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-4-cloroimidazol- 5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,14 g, 0,19 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (2,0 ml) e metanol (0,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 1.3 ml, 5,20 mmol). A solução resultante foi agitada a 40°C por 1 h, e concentrada in vacuo. O sólido resultante foi misturado com CH2Cl2 (2,0 ml), e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (0,04 g, 0,23 mmol), HATU (0,08 g, 0,22 mmol) e diisopropiletilamina (0,1 ml, 0,57 mmol) foram adicionados. A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente ao longo de 2 h. A reação foi diluída com DMF e concentrada. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-60% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram combinadas com MeOH e concentradas para remover voláteis. A solução resultante foi alcalinizada com bicarbonato de sódio aquoso (saturado). A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 30 min, filtrada (filtro de membrana de náilon (0,45 μm)), e lavada com água. O sólido foi seco in vacuo para fornecer metil [(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-[9-(4-cloro-2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il]carbamato (0,05 g, 62%). LCMS-ESI+: calculado para C45H53ClN8O9: 884,36 (M+); encontrado: 886,33 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,35 (s, 1H), 8,10-7,87 (m, 2H), 7,88-7,82 (m, 1H), 7,77-7,57 (m, 2H), 7,57-7,45 (m, 1H), 5,77-5,63 (m, 1H), 5,51-5,42 (m, 1H), 5,24-5,06 (m, 2H), 4,98-4,86 (m, 1H), 4,70-4,51 (m, 2H), 4,43 (d, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,21-4,06 (m, 2H), 3,81 (s, 1H), 3,63 (s, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,48 (s, 2H), 3,32 -3,27 (m, 3H), 2,90-2,77 (m, 1H), 2,60 (s, 2H), 2,27 (d, 6H), 1,84 (s, 1H), 1,48 (d, 2H), 1,42 (d, 2H), 1,29-0,89 (m, J = 31,3, 29,3, 19,7 Hz, 9H). Exemplo GC

[0467] terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-4-ciclopropil- imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1- carboxilato. Seguindo o Exemplo FZ, substituindo terc-butil (2S,4S)-2-[5 -(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil) pirrolidina-1-carboxilato com terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2- [(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]- 1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7] nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1- carboxilato, foi fornecido terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2- [(2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]- 1H-4-ciclopropil-imidazol-5-il}-1,4,5,11- tetrahidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)- 5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,27 g). LCMS-ESI: calculado para C44H52N6O5: 744,40 (M+); encontrado: 745,46 (M+H+).

[0468] Metil [(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-[9-(4-ciclopropil-2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metóxi-1-oxobutan-2-il]carbamato. A uma solução de terc-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il]-1H-4-cloroimidazol- 5-il}-1,4,5,11-tetrahidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidina-1-carboxilato (0,27 g, 0,36 mmol) em uma mistura de CH2Cl2 (3,5 ml) e metanol (0,5 ml) foi adicionado HCl (em dioxanos, 4 M, 2,7 ml, 10,80 mmol). A solução resultante foi agitada a 40°C por 1 h, e concentrada in vacuo. O sólido resultante foi misturado com CH2Cl2 (2,0 ml), e ácido (2S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico (0,17 g, 0,91 mmol), HATU (0,35 g, 0,91 mmol) e diisopropiletilamina (0,5 ml, 2,86 mmol) foram adicionados. A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente ao longo de 2 h. A reação foi diluída com DMF e concentrada. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-45% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram diluídas com EtOAc e lavadas com salmoura. A camada aquosa foi extraída de volta com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo. O material resultante foi liofilizado por MeCN e água para fornecer metil [(2S,3R)-1-{(2S,5S)-2-[9-(4-ciclopropil-2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metóxi-1- oxobutan-2-il]carbamato (0,16 g, 48%). LCMS-ESI+: calculado para C48H58N8O9: 890,43 (M+); encontrado: 891,88 (M+H+). 1H- RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,41 (s, 1H), 8,13-7,93 (m, 2H), 7,91-7,79 (m, 1H), 7,78-7,40 (m, 3H), 5,85-5,68 (m, 1H), 5,46 (d, 1H), 5,33-5,14 (m, 3H), 5,094,92 (m, 1H), 4,78-4,59 (m, 1H), 4,44-4,32 (m, 2H), 4,31- 4,11 (m, 2H), 3,88 (s, 1H), 3,74-3,48 (m, 6H), 3,41-3,32 (m, 3H), 2,75-2,39 (m, 3H), 2,38-1,79 (m, 7H), 1,55 (d, 2H), 1,47 (d, 2H), 1,33 -1,03 (m, 9H), 0,98 (s, 3H), 0,81 (s, 2H), 0,66 (s, 1H). Exemplo GD

[0469] Metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirrolidin- 2-il}-4-metil-1H-imidazol-5-il)-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1- il}-1-oxobutan-2-il]carbamato. Seguindo o Exemplo GC, com ácido metilborônico substituindo ácido ciclopropilborônico, foi fornecido metil [(2S,3R)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2- {(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-4-metil-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato (0,08 g). LCMS-ESI+: calculado para C46H56N8O9: 864,42 (M+); encontrado: 865,91 (M+H). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,40 (s, 1H), 8,14-7,85 (m, 2H), 7,78-7,34 (m, 4H), 5,78 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,30-5,13 (m, 3H), 5,11-4,96 (m, 1H), 4,79-4,58 (m, 2H), 4,48-4,30 (m, 2H), 4,30-4,13 (m, 2H), 3,88 (s, 1H), 3,73-3,50 (m, 6H), 3,42-3,32 (m, 4H), 2,57-2,03 (m, 9H), 2,03-1,76 (m, (d, 2H), 1,39-0,99 (m, 10H). Exemplo GE

[0470] Metil [(2S,3S)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)- 1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-5- metilpirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e substituindo ácido (2S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanóico com 2 equivalentes de ácido (2S,3S)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico, foi fornecido metil [(2S,3S)-3-metóxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-5-metilpirrolidin-2- il}-1H-imidazol-5-il)-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamato (0,27 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O9: 850,40 (M+); encontrado: 851,80 (M+H). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,43-8,29 (m, 1H), 8,12-7,90 (m, 2H), 7,87-7,61 (m, 3H), 7,61-7,32 (m, 3H), 5,74 (d, 1H), 5,54 (d, 1H), 5,24-5,09 (m, 2H), 4,76-4,60 (m, 1H), 4,46-4,30 (m, 2H), 4,31-4,12 (m, 2H), 3,89 (s, 2H), 3,80-3,60 (m, 4H), 3,60-3,44 (m, 2H), 3,34 (s, 2H), 3,32 (s, 2H), 2,97-2,63 (m, 2H), 2,62-2,35 (m, 2H), 2,35-1,78 (m, 6H), 1,65-1,52 (m, 2H), 1,50 (d, 1H), 1,42 (d, 1H), 1,35-1,04 (m, 10H). Exemplo GF

[0471] Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3R)-3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-gl}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilpentanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico e ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, foi fornecido metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1- {(2S,3R)-3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamato ESI+: calculado para C46H56N8O8: 848,42 (M+); encontrado: 849,80 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,43-8,14 (m, J = 14,6 Hz, 2H), 8,09-7,75 (m, 3H), 7,75-7,24 (m, 5H), 5,80-5,64 (m, 1H), 5,38-4,95 (m, 4H), 4,80-4,67 (m, 1H), 4,31-4,09 (m, J = 20,2, 7,7 Hz, 2H), 3,85 (s, 1H), 3,72-3,54 (m, J = 20,5 Hz, 4H), 3,37 (s, 2H), 2,94-2,64 (m, J = 51,0 Hz, 2H), 2,63-2,37 (m, J = 35,2 Hz, 2H), 2,37-2,01 (m, 4H), 2,00-1,83 (m, 1H), 1,83-1,69 (m, 1H), 1,67-1,51 (m, J = 6,6 Hz, 3H), 1,47 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1,35-1,00 (m, 7H), 1,00-0,69 (m, 7H). Exemplo GG

[0472] Metil [(2S,3S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)- 2-[(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-5-metilpirrolidin-2-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5- metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxopentan-2-il]carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilpentanoil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-(terc- butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2-carboxílico, e ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acético, foi fornecido metil [(2S,3S)-1-{(2S,5S)-2-[5- (2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2- (tetrahidro-2H-piran-4-il)acetil]-5-metilpirrolidin-2-il}- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)- 1H-imidazol-2-il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1- oxopentan-2-il]carbamato (0,07 g). LCMS-ESI+: calculado para C48H58N8O8: 874,44 (M+); encontrado: 876,07 (M+H+). 1H- RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,33-8,10 (m, 2H), 8,04-7,68 (m, 3H), 7,68-7,16 (m, 5H), 5,49 (s, 1H), 5,35-5,20 (m, 1H), 5,20-4,91 (m, 3H), 4,73-4,61 (m, 1H), 4,25-4,01 (m, 3H), 3,98-3,65 (m, 4H), 3,57 (d, 3H), 3,363,24 (m, 1H), 3,17-2,97 (m, 1H), 2,91-2,58 (m, 2H), 2,571,76 (m, 9H), 1,52 (d, 3H), 1,41 (d, 3H), 1,28-0,93 (m, 5H), 0,93-0,56 (m, 7H). Exemplo GH

[0473] Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)- 3-metóxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5- metilpirrolidin-2-il]-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto [1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin- 1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc- butoxicarbonil)-4-metilpirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-((2S,3R)- 3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoil)-5- metilpirrolidina-2-carboxílico, e ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanóico, foi fornecido metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3-metóxi-2- [(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5-metilpirrolidin-2-il]- 1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}- 1H-imidazol-2-il)-4-metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1- oxobutan-2-il}carbamato (0,16 g). LCMS-ESI+: calculado para C45H54N8O8: 834,41 (M+); encontrado: 835,86 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,23-8,09 (m, 1H), 7,94-7,68 (m, 3H), 7,67-7,13 (m, 6H), 5,70-5,56 (m, 1H), 5,23-5,13 (m, 1H), 5,12-4,91 (m, 4H), 4,25-4,08 (m, 3H), 3,76 (s, 2H), 3,66-3,52 (m, 5H), 3,39-3,25 (m, 3H), 3,18 (s, 1H), 2,45-2,07 (m, 4H), 2,03-1,73 (m, 3H), 1,47 (d, 2H), 1,25-0,98 (m, 8H), 0,94-0,81 (m, 4H), 0,79 (d, 3H). Exemplo GI

[0474] Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5- il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2- il]carbamato. Seguindo o Exemplo DX, substituindo ácido (2 S,5S)-1-( terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidina-2- carboxílico com ácido (2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirrolidina-2-carboxílico, ácido (1R,3S)-2-(2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-3- metilciclopentanocarboxílico com ácido (2S,5S)-1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirrolidina- 2-carboxílico, e ácido (2 S,3R)-3-metóxi-2- (metoxicarbonilamino)butanóico com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acético, foi fornecido metil [(2S)-1-{(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1- [(2S)-2-[(metoxicarbonvl)amino]-2-(tetrahidro-2H-piran-4- il)acetil]-4-(metoximetil)pirrolidin-2-il}-1H-imidazol-5- il)-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2- il]-5-metilpirrolidin-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2- il]carbamato (0,06 g). LCMS-ESI+: calculado para C48H58N8O9: 890,43 (M+); encontrado: 891,81 (M+H+). 1H-RNM (400 MHz, CD3OD) δ (mistura de rotômeros) 8,50 (s, 1H), 8,17-8,01 (m, 2H), 7,88 (t, 1H), 7,83-7,74 (m, 2H), 7,74-7,63 (m, 1H), 7,62-7,48 (m, 2H), 5,72 (d, 1H), 5,26-5,08 (m, 4H), 4,33-4,12 (m, 3H), 4,05 (d, 1H), 3,90-3,76 (m, 2H), 3,67 (d, 1H), 3,58 (s, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,54-3,39 (m, 3H), 3,29 (s, 3H), 2,75-2,60 (m, 2H), 2,60-2,17 (m, 5H), 2,06-1,76 (m, 5H), 1,53 (d, 2H), 1,48-1,17 (m, 5H), 1,15 (d, 1H), 0,98 (dd, 2H), 0,86 (d, 2H), 0,77 (d, 2H). Exemplo GJ

[0475] Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4- (metoximetil)pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11- diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5- metilpirrolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato: Seguindo o Exemplo CY, substituindo ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético com (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacético ácido, COMU com DMTMM, e diisopropiletilamina com N-metilmorfolino, foi fornecido metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,16 g). LCMS-ESI+: calculado para C49H54N8O8: 882,41; observado [M+1]+: 883,77. Exemplo GK

[0476] Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-11-oxo-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato. A uma solução de metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2- [(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil) pirrolidin-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-diidroisocromeno [4’,3’:6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirrolidin-1- il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamato (0,19 g, 0,22 mmol) em CH2Cl2 (3 ml) foi adicionado clorocromato de piridínio (0,48 g, 2,21 mmol). A lama resultante foi agitada em temperatura ambiente por 5 dias. A reação foi diluída com MeOH e filtrada. O filtrado foi diluído com CH2Cl2 e lavado com água e bicarbonato de sódio aquoso (saturado). As camadas aquosas foram extraídas de volta com CH2Cl2. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas in vacuo. O óleo bruto foi purificado por HPLC de fase reversa (Gemini, MeCN/H2O 10-55% (TFA 0,1%)). As frações desejadas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para remover orgânicos voláteis. A adição de bicarbonato de sódio aquoso com agitação resultou na precipitação de um sólido branco. O precipitado foi filtrado através de um filtro de membrana e lavado com água. A secagem sob pressão reduzida gerou metil {(1R)-2- [(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2- [(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirrolidin- 2-il]-11-oxo-1,11-diidroisocromeno[4’,3’:6,7]nafto[1,2- d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil) pirrolidin-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamato (0,08 g, 39%). LCMS-ESI+: calculado para C49H52N8O9: 896,39 (M+); encontrado: 897,72 (M+H+).

Exemplos GL - IY

[0477] Usando procedimentos similares àqueles aqui descritos, os seguintes compostos da invenção foram preparados.

ENSAIOS BIOLÓGICOS

[0478] Efeito de proteínas séricas sobre a potência do replicon: Ensaios de replicon são realizados em meio de cultura de células normal (DMEM + FBS 10%) suplementado com concentrações fisiológicas de albumina sérica humana (40 mg/ml) ou a-ácido glicoproteína (1 mg/ml). EC50s na presença de proteínas séricas humanas são comparadas com a EC50 em meio normal para determinar a quantidade de mudança na potência.

[0479] Citotoxicidade de células MT-4: Células MT4 são tratadas com diluições seriais de compostos por um período de 5 dias. A viabilidade celular é medida ao final do período de tratamento usando o ensaio CellTiter-Glo de Promega e a regressão não linear é realizada para calcular a CC50.

[0480] Concentração de composto associada às células na EC50: Culturas Huh-luc são incubadas com composto em concentrações iguais à EC50. Em diversos pontos do tempo (0-72 horas), as células são lavadas 2X com meio gelado e extraídas com acetonitrila 85%; uma amostra dos meios em cada ponto do tempo também será extraída. Extratos de células e dos meios são analisados por LC/MS/MS para determinar a concentração molar de compostos em cada fração. Compostos da revelação representativos demonstraram atividade. Compostos representativos da revelação demonstraram atividade.

[0481] Solubilidade e estabilidade: A solubilidade é determinada retirando-se uma alíquota de 10 mM de solução de estoque de DMSO e preparando-se o composto em uma concentração final de 100 μM nas soluções de teste de meios (PBS, pH 7,4 e HCl 0,1 N, pH 1,5) com uma concentração total de DMSO de 1%. As soluções de meios de teste são incubadas em temperatura ambiente com agitação por 1 h. As soluções serão então centrifugadas e os sobrenadantes recuperados são testados na HPLC/UV. A solubilidade será calculada por comparação da quantidade de composto detectada na solução de teste definida comparada com a quantidade detectada em DMSO na mesma concentração. A estabilidade de compostos após uma incubação de 1 hora com PBS a 37°C também será determinada.

[0482] Estabilidade em hepatócitos humanos, de cães e gatos criopreservados: Cada composto é incubado por até 1 hora em suspensões de hepatócitos (100 μl, 80.000 células por poço) a 37°C. Hepatócitos criopreservados são reconstituídos no meio de incubação sem soro. A suspensão é transferida para placas de 96 poços (50 μl/poço). Os compostos são diluídos até 2 μM em meio de incubação e depois são adicionados às suspensões de hepatócitos para iniciar a incubação. São coletadas amostras em 0, 10, 30 e 60 minutos após o início da incubação e a reação será extinta com uma mistura que consiste em ácido fórmico 0,3% em acetonitrila 90%/água 10%. A concentração do composto em cada amostra é analisada usando LC/MS/MS. A meia-vida de desaparecimento do composto na suspensão de hepatócitos é determinada por ajuste dos dados de concentração-tempo com uma equação exponencial monofásica. Os dados também serão escalonados para representar a depuração hepática intrínseca e/ou a depuração hepática total.

[0483] Estabilidade na fração hepática S9 de humanos, cães e gatos: Cada composto é incubado por até 1 hora em suspensão de S9 (500 μl, 3 mg de proteína/ml) a 37°C (n = 3). Os compostos são adicionados à suspensão de S9 para iniciar a incubação. São coletadas amostras em 0, 10, 30 e 60 minutos após o início da incubação. A concentração do composto em cada amostra é analisada usando LC/MS/MS. A meia-vida de desaparecimento do composto na suspensão de S9 é determinada por ajuste dos dados de concentração-tempo com uma equação exponencial monofásica.

[0484] Permeabilidade de Caco-2: Os compostos são testados por meio de um serviço contratado (Absorption Systems, Exton, PA). Os compostos são fornecidos ao contratado de forma cega. Tanto a permeabilidade direta (A-para-B) quanto a reversa (B-para-A) serão medidas. Monocamadas de Caco-2 são desenvolvidas até a confluência em membranas de microporosas de policarbonato revestidas com colágeno, em placas de 12 poços TRANSWELL® da Costar. Os compostos são dosados no lado apical para a permeabilidade direta (A- para-B), e são dosados no lado basolateral para a permeabilidade reversa (B-para-A). As células são incubadas a 37°C com CO2 5% em uma incubadora umidificada. No começo da incubação e em 1 hora e 2 horas após a incubação, uma alíquota de 200 μl é retirada da câmara receptora e substituída com tampão de ensaio fresco. A concentração do composto em cada amostra é determinada com LC/MS/MS. A permeabilidade aparente, Papp, é calculada.

[0485] Ligação de proteína plasmática: A ligação de proteína plasmática é medida por diálise de equilíbrio. Cada composto é salpicado em plasma em uma concentração final de 2 μM. O plasma salpicado e o tampão de fosfato são colocados em lados opostos das células de diálise montadas, que serão então giradas lentamente em um banho-maria a 37°C. Ao final da incubação, a concentração do composto no plasma e tampão de fosfato é determinada. O percentual não ligado é calculado usando a seguinte equação:

[0486] Em que Cf e Cb são concentrações livres e ligadas determinadas como as concentrações pós-diálise de tampão e plasma, respectivamente.

[0487] Perfil de CYP450: Cada composto é incubado com cada uma das enzimas CYP450 humanas recombinantes, incluindo CYP1A2, CYP2C9, CYP3A4, CYP2D6 e CYP2C19, na presença e ausência de NADPH. Serão coletadas amostras seriais da mistura de incubação no começo da incubação e em 5, 15, 30, 45 e 60 minutos após o início da incubação. A concentração do composto na mistura de incubação é determinada por LC/MS/MS. A percentagem do composto que permanece após a incubação em cada ponto do tempo é calculada por comparação com a coleta no início da incubação.

[0488] Estabilidade em plasma de ratos, cães, macacos e humano: Os compostos serão incubados por até 2 horas em plasma (rato, cão, macaco ou humano) a 37°C. Os compostos são adicionados ao plasma nas concentrações finais de 1 e 10 μg/ml. São coletadas alíquotas em 0, 5, 15, 30, 60 e 120 minutos após adição do composto. As concentrações de compostos e metabólitos principais em cada ponto do tempo são medidas por LC/MS/MS.

[0489] Avaliação de atividade anti-HCV baseada em células: A potência antiviral (EC50) foi determinada usando um ensaio repórter de replicon de HCV à base de luciferase de Renilla (RLuc). Para realizar o ensaio para o genótipo 1 e 2a JFH-1, células de replicon de HCV 1a RLuc estáveis (que abrigam um replicon de genótipo bicistrônico 1a H77 que codifica um repórter de RLuc), células de replicon de HCV 1b RLuc estáveis (que abrigam um replicon de genótipo bicistrônico 1b Con1 que codifica um repórter de RLuc) ou células de replicon de HCV 2a JFH-1 RLuc estáveis (que abrigam um replicon de genótipo bicistrônico 2a JFH-1 que codifica um repórter de RLuc; com L31 presente em NS5A) foram dispensadas em placas de 384 poços para ensaios de EC50. Para realizar o ensaio para o genótipo 2a (com M31 presente em NS5A) ou 2b, replicons de NS5A de genótipo quimérico 2a JFH-1 que codificam um repórter de RLuc-Neo e gene do genótipo da cepa de NS5A 2a J6 ou gene de NS5A da cepa do genótipo 2b MD2b-1 (ambos com M31 presente), respectivamente, foram transfectadas transitoriamente (t) em células Huh-Lunet ou foram estabelecidas como células de replicon que se replicam estavelmente, são fornecidos. As células foram dispensadas em placas de 384 poços para ensaios de EC50. Para realizar o ensaio para o genótipo 3 e 4, replicons do genótipo quimérico 1b Con1 de NS5A que codificam um repórter de Pi-RLuc e gene de NS5A da cepa de genótipo 3a S52 ou gene de NS5A da cepa do genótipo 4a ED43, respectivamente, foram transfectadas transitoriamente (t) em células Huh-Lunet, que foram subsequentemente dispensadas em placas de 384 poços. Os compostos foram dissolvidos em DMSO em uma concentração de 10 mM e diluídos em DMSO manualmente ou usando um instrumento de pipetagem automatizado. Os compostos serialmente diluídos 3 vezes foram misturados manualmente com meios de cultura de células e adicionados às células semeadas ou diretamente adicionados às células usando um instrumento automatizado. DMSO foi usado como um controle negativo (solvente; sem inibição), e o inibidor de protease ITMN-191 foi incluído em uma concentração > 100 x EC50 como um controle positivo. Setenta e duas horas mais tarde, as células foram lisadas e a atividade de luciferase de Renilla quantificada da forma recomendada pelo fabricante (Promega-Madison, WI). A regressão não linear foi realizada para calcular os valores da EC50.

[0490] Para determinar a potência antiviral (EC50) contra mutantes de resistência, mutações de resistência, incluindo M28T, Q30R, Q30H, Q30E, L31M, Y93C, Y93H e Y93N em NS5A do genótipo 1a, NS5A, Y93H e L31V/Y93H em NS5A do genótipo 1b e Y93H para NS5A do genótipo 3a, foram introduzidas individualmente em replicons 1a Pi-RLuc ou 1b Pi-RLuc por mutagênese sítio-dirigida. O RNA de replicon de cada mutante resistente foi transfectado transitoriamente em células derivadas de Huh curadas com 51 e a potência antiviral foi determinada nessas células transfectadas como descrito acima.

[0491] Estudos farmacocinéticos de dose única IV e VO em ratos SD: A farmacocinética de compostos selecionados foi caracterizada em machos de ratos Sprague-Dawley (SD) (250-300 g). Nesse estudo, dois grupos de ratos SD de raça pura virgens (N = 3 por grupo, em jejum de um dia para o outro) receberam o composto selecionado como uma infusão intravenosa (IV) (1 mg/kg ao longo de 30 minutos) por meio da veia jugular ou por engorda oral (2 mg/kg). O veículo da dosagem intravenosa (IV) foi etanol 5%, polietileno glicol 400 35% (PEG 400) e água 60% pH 2,0. O veículo para a dosagem oral foi etanol 5%, PEG 400 55% e tampão de citrato 40% pH 2,2.

[0492] Amostras seriais de sangue (aproximadamente 0,3 ml cada) foram coletadas da veia jugular ou de outra veia adequada em pontos do tempo especificados. Para o grupo de infusão IV, as amostras de sangue foram coletadas pré-dose e em 0,25, 0,48, 0,58, 0,75, 1,5, 3, 6, 8, 12 e 24 horas após o início da infusão. Para o grupo oral, as amostras de sangue foram coletadas pré-dose e em 0,25, 0,50, 1, 2, 4, 6, 8, 12 e 24 horas após dosagem. As amostras de sangue foram coletadas em tubos VacutainerTM contendo EDTA-K3 como o anticoagulante e foram centrifugadas a aproximadamente 4°C para obter plasma. As amostras de plasma foram armazenadas a -20°C até análise por LC/MS/MS.

[0493] Um método bioanalítico que utiliza cromatografia líquida de alto desempenho acoplada à espectrometria de massa em tandem (LC/MS/MS) foi desenvolvido para análise do composto selecionado no plasma de rato. A detecção foi feita usando monitoramento selecionado da reação (SRM); íons que representam a espécie precursora (M+H)+ foram selecionados em quadrupolo 1 (Q1) e colidiram com gás argônio na célula de colisão (Q2) para gerar produto iônicos específicos, que foram subsequentemente monitorados por quadrupolo 3 (Q3). Uma curva-padrão e amostras de controle de qualidade foram preparadas em plasma de ratos machos e processadas da mesma forma que as amostras de teste para gerar dados quantitativos.

[0494] Os parâmetros farmacocinéticos foram gerados usando análise farmacocinética não compartimental (Phoenix WinNonlin, versão 6.3). Valores abaixo do limite inferior de quantificação (LLOQ) receberam um valor de zero se pré- dose e tratados como ausentes posteriormente. A área sob a curva (AUC) foi calculada usando a regra trapezoidal linear. A biodisponibilidade oral (%F) foi determinada por comparação da área sob a curva (AUC) do composto e/ou um metabólito gerado no plasma após administração oral com aquela gerada após administração intravenosa. Tabela 1A

Faixas de atividade: A > 44 nMmm B = 1 nM-43,999 nM, C = 0,1 nM-0,999 nM, D < 0,1 nM. Tabela 1B

Faixas de atividade: A ≥ 44 nM, B = 1 nM-43,999 nM, C = 0,1 nM-0,999 nM, D < 0,1 nM.

Claims

1. Composto, caracterizado por ser de fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

2. Composição farmacêutica, caracterizada por compreender o composto definido na reivindicação 1 e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável, ou uma combinação destes.

3. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por ser formulada para administração oral.

4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 2, caracterizada por ser formulada na forma de um comprimido.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser de fórmula:

6. Composição farmacêutica, caracterizada por compreender o composto definido na reivindicação 5 e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável, ou uma combinação destes.

7. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 6, caracterizada por ser formulada para administração oral.

8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 6, caracterizada por ser formulada na forma de um comprimido.

9. Uso do composto definido na reivindicação 1 ou 5, caracterizado por ser na fabricação de uma composição ou medicamento para o tratamento de hepatite C.