BR112013005438B1

BR112013005438B1 - Agente para o tratamento de olho ressecado caracterizado por combinar o agonista do receptor de p2y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo, método para o tratamento de olho ressecado, e uso do agonista do receptor de p2y2, e ácido hialurônico ou um sal do mesmo

Info

Publication number: BR112013005438B1
Application number: BR112013005438-7A
Authority: BR
Inventors: Yuko Shichijo; Atsuyoshi Dota; Takashi Nagano; Masatsugu Nakamura; Asuka Sakamoto
Original assignee: Santen Pharmaceutical Co., Ltd
Priority date: 2010-09-10
Filing date: 2011-09-09
Publication date: 2021-09-21
Also published as: EA026680B1; EP2614838B1; AU2017200821A1; KR20130109130A; HK1184686A1; US9006208B2; AU2011299851A1; EP2614838A1; TW201216971A; JP2012077080A; WO2012033189A1; CN106729718A; KR20170018462A; TWI519301B; CA2810481C; BR112013005438A2; CA2810481A1; AU2017200821B2; SG188482A1; MX336944B

Abstract

agente para o tratamento de olho ressecado caracterizado por combinar o agonista do receptor de p2y y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo, método para o tratamento de olho ressecado, e uso do agonista do receptor de p2y y 2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo. a presente invenção refere-se a um agente para o tratamento de olho ressecado compreendendo uma combinação de um agonista do receptor de p2y y 2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz, agente este que tem uma forma de dosagem de um agente oftálmico, pode promover a secreção acentuada de lágrimas e pode melhorar acentuadamente distúrbios epiteliais da córnea, e portanto espera-se que este seja um novo agente para o tratamento de olho ressecado.

Description

Campo Técnico

A presente invenção refere-se a um agente para o tratamento de olho ressecado caracterizado por compreender uma combinação de um a- ÍO gonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz, onde a forma de dosagem é um agente oftálmico. A presente invenção também se refere a um método para o tratamento de olho ressecado usando o agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um 15 sal do mesmo. A presente invenção também se refere a um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado. A presente invenção também se refere ao uso do agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção de um agente para o tratamento de olho ressecado.

Antecedentes da Técnica

Olho ressecado é uma doença que começa com níveis desa-gradáveis de sintomas de secura dos olhos e uma sensação desconfortável nos olhos e muito impede as pessoas de desempenharem suas atividades diárias quando a doença piora. O número de pacientes com olho ressecado 25 vem aumentando todo ano associado à chegada de uma sociedade mais velha e ao aumento de trabalhos em VDT ("video display terminal") com computadores pessoais. Acredita-se que o número de pacientes com olho ressecado é maior ou igual a 10.000.000 nos Estados Unidos e maior ou igual a 8.000.000 no Japão.

Embora as condições clínicas do olho ressecado ainda não te nham sido completamente elucidadas, considera-se que a diminuição no volume de lágrimas na córnea e na conjuntiva, que é causada pela redução na secreção de lágrimas, pela aceleração da evaporação das lágrimas, entre outros, seja a principal patogênese do olho ressecado. Isto é, a secura da córnea e a da conjuntiva associada à redução no volume de lágrimas induz sintomas e/ou observações patológicos incluindo desconforto ocular, 5 sensação de secura dos olhos, sensação de cansaço dos olhos, hiperemia, e distúrbios ceratoconjuntivais epiteliais. Se esses sintomas e/ou observações progridem, ocorre por fim a anormalidade na visão. Portanto, é bastante importante tratar o olho ressecado de forma adequada no estágio inicial.

Acredita-se que o objetivo mais desejado para os métodos de 10 tratamento do olho ressecado seja promover a secreção de lágrimas em um paciente com olho ressecado. No entanto, ainda não conhece nenhum agente para o tratamento de olho ressecado que tenha tal atividade. Então, no tratamento convencional do olho ressecado, a administração de uma solução oftálmica de lágrima artificial, a supressão da excreção de lágrimas 15 com um tampão pontual, entre outros, é em geral escolhido. Como um agente para o tratamento de olho ressecado, geralmente usa-se uma solução oftálmica contendo ácido hialurônico. Embora o ácido hialurônico não tenha uma ação promotora de secreção de lágrimas, está descrito em Cornea, 12(5), 433-436 (1993) (NPL 1) que, quando ácido 20 hialurônico retém múltiplas moléculas de água, o ácido hialurônico pode exibir uma excelente propriedade retentora de água. Embora haja várias teorias sobre o mecanismo de ação de uma solução oftálmica contendo ácido hialurônico para o tratamento de olho ressecado, acredita-se que a propriedade retentora de água do ácido hialurônico pode aliviar a secagem da córnea e 25 da conjuntiva. Por outro lado, um receptor de P2Y2 é um dos subtipos de um receptor de P2Y que é um receptor de purina e acredita-se que ele esteja profundamente envolvido na regulação da secreção de um íon de cloreto ou similar. Um ligante para um receptor de P2Y é considerado como sendo um 30 nucleotídeo em um corpo vivo, e está descrito em Current Medicinal Chemistry, 13(3), 289-312 (2006) (NPL 2) que nucleotídeos tipificados por uridi- na-5'-trifosfato (UTP), adenosina-5'-trifosfato (ATP) e derivados dos mes- mos, dinucleotídeos tipificados por P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato (também chamado de "diquafosol" ou "INS-365"), entre outros podem agir como ago- nistas para um receptor de P2Y2.

Nos últimos anos, foi constatado que esses agonistas do recep- 5 tor de P2Y2 têm a ação de promover a secreção de lágrimas, e esses agonistas do receptor de P2Y2 vêm chamando a atenção como novos agentes para o tratamento de olho ressecado. Por exemplo, Current Eye Research, 21(4), 782-787 (2000) (NPL 3) descreve que UTP e ATP podem promover a secreção de lágrimas em coelhos, e portanto sugere que a secreção de lá- 10 grimas pode ser promovido estimulando um receptor de P2Y2. Em Cornea, 23(8), 784-792 (2004) (NPL 4), foi reportado que uma solução oftálmica contendo diquafosol promoveu a secreção de lágrimas e melhorou distúrbios ceratoconjuntivais epiteliais em testes clínicos.

Entretanto, ainda há alguns pacientes com olho ressecado seve- 15 ro que não podem ser tratados de forma satisfatória com os agentes mencionados acima para o tratamento de olho ressecado, e portanto há uma demanda para o desenvolvimento de um agente para o tratamento de olho ressecado tendo uma ação promotora de secreção de lágrimas mais potente.

Na Publicação de Patente Nacional Japonesa N° 2001-504858 (PTL 1), foi sugerido que ácido hialurônico pode ser adicionado como um aditivo a um promotor de secreção de lágrimas contendo um composto capaz de ativar um receptor de purina (receptor de P2Y2). No entanto, como mencionado em Dictionary of pharmaceutical additives, 220 (2007) (NPL 5), 25 a maior quantidade de ácido hialurônico que pode ser usada como um aditivo em um agente oftálmico é 0,2 mg/g (0,02% (p/p)), e não foi descrito nem sugerido que uma concentração terapeuticamente eficaz (no mínimo 0,1% (p/v) em termos da concentração em uma solução oftálmica) de ácido hialurônico e um agonista do receptor de P2Y2 são administrados combinados. Como mencionado acima, não está claro qual efeito pode ser obtido quando um agonista do receptor de P2Y2 e uma concentração tera-peuticamente eficaz de ácido hialurônico são usados combinados. Lista de Referências LITERATURA PATENTÁRIA PTL 1: Publicação de Patente Nacional Japonesa N° 2001504858 LITERATURA NÃO PATENTÁRIA NPL 1: Cornea, 12(5), 433-436 (1993) NPL 2: Current Medicinal Chemistry, 13(3), 289-312 (2006) NPL 3: Current Eye Research, 21(4), 782-787 (2000) NPL 4: Cornea, 23(8), 784-792 (2004) NPL 5: Dictionary of pharmaceutical additives, 220 (2007)

Sumário da Invenção Problema Técnico

Portanto, a busca por novo agente para o tratamento de olho ressecado tendo uma ação promotora de secreção de lágrimas mais potente 15 é um problema interessante.

Solução para o Problema

Os presentes inventores realizaram estudos intensivos e extensos com a finalidade de encontrar um novo agente para o tratamento de o- Iho ressecado. Como resultado, constataram que, quando um agonista do 20 receptor de P2Y2 e uma concentração terapeuticamente eficaz (0,1% e 0,3%) de ácido hialurônico ou um sal do mesmo foram administrados combinados aos olhos de coelhos normais, uma promoção acentuada da secreção de lágrimas nos coelhos foi observado. Esta descoberta levou à presente invenção. Além disso, quando um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz foram administrados combinados aos olhos, um efeito de melhora significativo em distúrbios epiteliais da córnea foi observado nos modelos de olho ressecado.

Entrementes, quando um agonista do receptor de P2Y2 e ácido 30 hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração empregada para adição como um aditivo (0,002%) foram administrados combinados aos o- Ihos, a ação promotora de secreção de lágrimas mencionada acima não foi observado. Quanto a este resultado, a obtenção do efeito mencionado acima é um resultado maravilhoso.

Isto é, a presente invenção oferece um agente para o tratamento de olho ressecado (doravante também denominado "presente agente de 5 tratamento") caracterizado por compreender uma combinação de um ago- nista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz, onde a forma de dosagem é um agente oftálmico.

O agonista do receptor de P2Y2 no agente para o tratamento de 10 olho ressecado de acordo com a presente invenção é de preferência um composto representado pela seguinte fórmula geral [I] (doravante também coletivamente denominado "presente composto") ou um sal do mesmo: [Fórmula química 1]

[onde X1 representa um grupo hidróxi, um grupo tiol, um grupo 15 representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 2]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 3]

X2 representa um átomo de oxigênio, -NH- ou -CR1R2-; X3 representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 4]

um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 5]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 6]

A representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 7]

ou um grupo representado pela seguinte fó fórmula: [Fórmula química 8]

Y representa CO, CS ou CHSR 6; R1, R2, R3, R4, R5 e R6 são iguais ou diferentes um do outro e representam independentemente um átomo de hidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo alquil; e n representa um inteiro de 0 a 4].

O agonista do receptor de P2Y2 no agente para o tratamento de olho ressecado de acordo com a presente invenção é de preferência P1,P4- bis(5’-uridil)tetrafosfato (doravante também denominado "diquafosol"), uridi- na 5’-trifosfato (UTP), adenosina 5’-trifosfato (ATP) ou um sal do mesmo.

A forma de dosagem do agente para o tratamento de olho ressecado de acordo com a presente invenção é de preferência uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica.

A presente invenção também oferece uma solução oftálmica para tratar o olho ressecado, caracterizado por compreender uma combinação de diquafosol ou um sal do mesmo em uma concentração de 1 a 5% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,05 a 0,5% (p/v).

A presente invenção oferece ainda uma solução oftálmica para tratar o olho ressecado, caracterizado por compreender uma combinação de diquafosol ou um sal do mesmo em uma concentração de 3% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,1 a 0,5% (p/v).

A presente invenção também oferece ainda um método para tratar o olho ressecado, que compreender administrar um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz combinados a um paciente com necessidade do mesmo, onde a forma de dosagem é um agente oftálmico.

Também no método para tratar o olho ressecado de acordo com a presente invenção, o agonista do receptor de P2Y2 é de preferência o presente composto mencionado acima.

Também no método para tratar o olho ressecado de acordo com a presente invenção, o agonista do receptor de P2Y2 é de preferência P1,P4- bis(5’-uridil)tetrafosfato, uridina 5’-trifosfato, adenosina 5’-trifosfato ou um sal do mesmo.

Também no método para tratar o olho ressecado de acordo com a presente invenção, o agente oftálmico é de preferência uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica.

A presente invenção também oferece um método para tratar o olho ressecado, que envolve administrar P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 1 a 5% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,05 a 0,5% (p/v) combinados a um paciente, onde a forma de dosagem é uma solução oftálmica.

A presente invenção também oferece um método para tratar o olho ressecado, que compreende administrar P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 3% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,1 a 0,5% (p/v) combinados a um paciente com necessidade do mesmo, onde a forma de dosagem é uma solução oftálmica.

A presente invenção também oferece um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado por administração do agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do 20 mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz combinados, onde a forma de dosagem é um agente oftálmico.

Também no agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo de acordo com a presente invenção, é preferível que o agonista do receptor de P2Y2 seja o presente composto mencionado acima.

Também no agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo de acordo com a presente invenção, o agonista do receptor de P2Y2 é de preferência P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato, uridina 5’- trifosfato, adenosina 5’-trifosfato ou um sal do mesmo.

Também no agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou 30 um sal do mesmo de acordo com a presente invenção, o agente oftálmico é de preferência uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica.

A presente invenção também oferece P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafos- fato ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado por administração de P1,P4-bis(5’- uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 1 a 5% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,05 5 a 0,5% (p/v) combinados, onde a forma de dosagem é uma solução oftálmica.

A presente invenção também oferece P1,P4-bis(5’-uridil)tetra- fosfato ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado por administração de P\P4-bis(5’- 10 uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 3% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,1 a 0,5% (p/v) combinados, onde a forma de dosagem é uma solução oftálmica.

A presente invenção também oferece o uso de um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção 15 de um agente para o tratamento de olho ressecado compreendendo o agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz, onde o agente para o tratamento de olho ressecado tem a forma de dosagem de um agente oftálmico.

Também no uso de acordo com a presente invenção, o agonista do receptor de P2Y2 é de preferência o presente composto mencionado acima.

Também no uso e na combinação de agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo de acordo com a presente 25 invenção, o agonista do receptor de P2Y2 é de preferência P1,P4-bis(5’- uridil)tetrafosfato, uridina 5’-trifosfato, adenosina 5’-trifosfato ou um sal do mesmo.

Também no uso de acordo com a presente invenção, o agente oftálmico é de preferência uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica.

A presente invenção também oferece o uso de P1,P4-bis(5’- uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção de um agente para o tratamento de olho ressecado compreendendo P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 1 a 5% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,05 a 0,5% (p/v).

A presente invenção também oferece o uso de P1,P4-bis(5’- 5 uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção de um agente para o tratamento de olho ressecado compreendendo P1,P4-bis(5*-uridil)tetrafosfato ou um sal do mesmo em uma concentração de 3% (p/v) e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração de 0,1 a 0,5% (p/v).

Efeitos Vantajosos da Invenção

Como mencionado abaixo, o presente agente de tratamento pode promover acentuadamente a secreção de lágrimas e pode melhorar a- centuadamente distúrbios epiteliais na córnea, e esperamos portanto que ele seja um novo agente para o tratamento de olho ressecado. Além disso, 15 são oferecidos um método para tratar o olho ressecado usando um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo, um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado, e o uso de um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção de um agente pa- 20 ra o tratamento de olho ressecado.

Breve Descrição dos Desenhos

A Fig. 1 é um gráfico ilustrando o curso de tempo de uma alteração no valor da área de menisco lacrimal depois da administração de drogas de teste aos olhos.

A Fig. 2 é um gráfico ilustrando uma alteração nos escores da coloração da córnea com fluoresceína antes e depois da administração de drogas de teste aos olhos.

Descrição de Modalidades

O agente para o tratamento de olho ressecado de acordo com a 30 presente invenção é bem caracterizado por compreender uma combinação de uma concentração terapeuticamente eficaz de um agonista do receptor de P2Y2 e uma concentração terapeuticamente eficaz de ácido hialurônico ou um sal do mesmo. De acordo com a presente invenção, um método para tratar o olho ressecado usando um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo combinados, um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para uso no tratamento de olho ressecado, e 0 uso de um agonista do receptor de P2Y2 e ácido hialurônico ou um sal do mesmo para a produção de um agente para o tratamento de olho ressecado também são fornecidos.

O "agonista do receptor de P2Y2" na presente invenção não é particularmente limitado, e pode ser qualquer composto contanto que o composto possa se ligar a um receptor de P2Y2 e possa ativar uma via de sinalização a jusante do receptor de P2Y2. O agonista do receptor de P2Y2 pode ser facilmente rastreado de acordo com o método divulgado em Bio- org. Med. Chem. Lett. 11(2), 157-160 (2001) ou similar.

Quanto ao agonista do receptor de P2Y2 de acordo com a presente invenção, o presente composto representado pela fórmula geral [I] ou um sal do mesmo é preferido. No presente composto, o átomo de halogênio refere-se a um átomo de flúor, um átomo de cloro, um átomo de bromo ou um átomo de iodo. No presente composto, o número de átomos de carbono no grupo alquil não é particularmente limitado, e o grupo alquil é de preferência um grupo alquil linear ou ramificado tendo 1 a 6 átomos de carbono, tal como um grupo metil, um grupo etil, um grupo propil, um grupo butil, um grupo pentil, um grupo hexil, um grupo isopropil, um grupo isobutil, um grupo isopentil, um grupo iso-hexil, um grupo t-butil e um grupo 3,3-dimetilbutil. (a) Um exemplo preferido do presente composto é um composto representado pela fórmula geral [I] onde cada grupo é o seguinte: (a1) X1 representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 9]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 10]

(a2) X representa um átomo de oxigênio; (a3) X representa um grupo representado pela seguinte fórmu- 5 la: [Fórmula química 11]

um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 12]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 13]

(a4) A representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 14]

(a5) Y representa CO, CS ou CHSR6; (a6) R3 e R6 podem ser iguais ou diferentes um do outro e re-presentam independentemente um átomo de hidrogênio, um átomo de halo- gênio ou um grupo alquil; e (a7) n representa um inteiro de 0 a 4. (b) Um outro exemplo preferido do presente composto é um composto representado pela fórmula geral [I] onde cada grupo é o seguinte: (b1) X1 representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 15]

(b2) X representa um átomo de oxigênio; O (b3) X representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 16]

(b4) A representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 17]

(b5) R4 e R5 podem ser iguais ou diferentes um do outro e re presentam independentemente um átomo de hidrogênio, um átomo de halo- gênio ou um grupo alquil; e (b6) n representa 1. (c) Ainda um outro exemplo preferido do presente composto é um composto representado pela fórmula geral [I] onde cada grupo é o se guinte: (d) X1 representa um grupo hidróxi ou um grupo tiol; (c2) X representa um átomo de oxigênio, -NH- ou -CR R -; (c3) X3 representa um grupo representado pela seguinte fórmu- la: [Fórmula química 18]

um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 19]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 20]

(a4) A representa um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 21]

ou um grupo representado pela seguinte fórmula: [Fórmula química 22]

(c5) Y representa CO, CS ou CHSR6; e (c6) R1, R2, R3, R4, R5 e R6 sâo iguais ou diferentes um do outro e representam independentemente urn átomo de“hidrogênio, um átomo de halogênio ou um grupo alquil.

Exemplos preferidos específicos do presente composto incluem os compostos mencionados abaixo e sais dos mesmos. • P1,P3-bis(5'-uridil)trifosfato [Up3U] [Fórmula química 23]

• P1,P4-bis(5’-uridil)tetrafosfato [diquafosol] [Fórmula química 24]

• P1-(uridina 5')-P'-(2'-desoxicitidina 5')tetrafosfato [Denufosol] [Fórmula química 25]

• P',P'-bis(5'-uridil)pentafosfato [Up5U] [Fórmula química 26]

• P',P'-bis(5'-uridil)hexafosfato [Up6U] [Fórmula química 27]

• P1 ,P7-bis(5'-uridil)heptafosfato [Up7U] [Fórmula química 28]

• P1,P4-bis(5'-adenosil)tetrafosfato [Ap4A] [Fórmula química 29]

• Uridina 5’-trifosfato [UTP] [Fórmula química 30]

• Uridina 5’-O-(3-thiotrifosfato) [UTPyS] [Fórmula química 31]

• Uridina 5’-(β,y-imida)trifosfato [β,y-imida-UTP] [Fórmula química 32]

• Uridina 5’-(β,y-metileno)trifosfato [β,y-metileno-UTP] [Fórmula química 33]

•Uridina 5’-(β,y-difluoimetileno)trifosfato [β,y-difluormetileno-UTP] fFórmula química 34]

• (N)-Metanocarba-UTP [Fórmula química 35]

• L-α-treofuranosil-UTP [MRS-2488] [Fórmula química 36]

• 5-Bromouridina 5’-trifosfato [5-Br-UTP] [Fórmula química 37]

• 5-Etiluridina 5’-trifosfato [5-etil-UTP] [Fórmula química 38]

• 4-Tiouridina 5’-trifosfato [4-tio-UTP] [Fórmula química 39]

• 4-Hexiltiouridina 5’-trifosfato [4-hexiltio-UTP] [Fórmula química 40]

• Adenosina 5’-trifosfato [ATP] [Fórmula química 41]

• Adenosina 5'-0-(3-tiotrifosfato) [ATPyS] [Fórmula química 42]

• Adenosina 5'-(β,y-imida)trifosfato [β,y-imido-ATP] [Fórmula química 43]

• (N)-Metanocarba-ATP [Fórmula química 44]

• 2-Cloroadenosina 5’-trifosfato [2-cloro-ATP] [Fórmula química 45]

• 8-Bromoadenosina 5’-trifosfato [8-bromo-ATP] [Fórmula química 46]

Um composto que é particularmente preferido como o agonista do receptor de P2Y2 de acordo com a presente invenção é diquafosol, UTP, ATP ou um sal do mesmo.

Um composto que é mais preferido como o agonista do receptor de P2Y2 de acordo com a presente invenção é diquafosol ou um sal do mesmo.

O presente composto pode ser produzido de acordo com méto dos convencionais que costumam ser empregados no campo da química orgânica sintética, tais como os métodos divulgados em Nucleic acids research, 15(8), 3573-3580 (1987) e Bioorg. Med. Chem. Lett. 11(2), 157-160 (2001). Alternativamente, compostos comercialmente disponíveis, tais como produtos fabricados e comercializados pela Sigma, podem ser usados como o presente composto.

Entre os exemplos dos presentes compostos, particularmente o diquafosol e um sal do mesmo podem ser produzidos pelo método divulgado na Publicação de Patente Nacional Japonesa N° 2001-510484. Um sal só- dico de UTP (catálogo N°: U6625), um sal sódico de ATP (catálogo N°: A7699), um sal de litio de ATPyS (catálogo N°: A1388), entre outros, encontram-se comercialmente disponíveis na Sigma.

O ácido hialurônico a ser usado no agente para o tratamento de olho ressecado de acordo com a presente invenção é um composto repre- sentado pela seguinte fórmula geral [II]: [Fórmula química 47]

[onde m representa um número natural].

O "ácido hialurânico" a ser usado na presente invenção é de preferência ácido hialurônico tendo um peso molecular médio de 500.000 a 10 3.900.000, mais preferivelmente ácido hialurônico tendo um peso molecular médio de 500.000 a 1.200.000.

O sal do presente composto ou do ácido hialurônico não é parti-cularmente limitado, contanto que o sal seja um sal farmaceuticamente aceitável. Exemplos do sal incluem: sais com ácidos inorgânicos tais como ácido 15 clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico; sais com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido fumárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido adípico, ácido glucônico, ácido gluco-heptônico, ácido glucurônico, ácido tereftálico, ácido metanossulfônico, ácido láctico, ácido hipúrico, ácido 1,220 etanodissulfônico, ácido isetiônico, ácido lactobiônico, ácido oleico, ácido pamoico, ácido poligalacturônico, ácido esteárico, ácido tânico, ácido triflu- ormetanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido p-toluenossulfônico, ácido sulfúrico, éster laurílico, metil sulfato, ácido naftalenossulfônico e ácido sulfossalicílico; sais de amónio quaternário com brometo de metila e iodeto 25 de metila; sais com íons de halogênio tais como um íon de bromo, um íon de cloro e um ion de iodo; sais com metais alcalinos tais como lítio, sódio e potássio; sais com metais alcalinos terrosos tais como cálcio e magnésio; sais metálicos com ferro, zinco, entre outros; sais com amónia; e sais com aminas orgânicas tais como trietilenodiamina, 2-aminoetanol, 2,2-iminobis (etanol), 1-desoxi-1-(metilamino)-2-D-sorbitol, 2-amino-2-(hidroximetil)-1,3- propanodiol, procaína e N,N-bis(fenilmetil)-1,2-etanodiamina.

Como os sais do presente composto ou do ácido hialurônico, sais sódicos são preferidos. Particularmente, quando o presente composto é diquafosol, um sal tetrassódico de diquafosol que é representado pela se- guinte fórmula (doravante simplesmente chamado de "diquafosol sódico") é preferido. [Fórmula química 48]

Como o sal sódico de ácido hialurônico, um sal sódico represen-tado pela seguinte fórmula geral [III] (doravante também chamado de "hialu- 15 ronato de sódio") é particularmente preferido: [Fórmula química 49]

[onde n representa um número natural],

O presente composto, ácido hialurônico ou um sal do mesmo pode ter a forma.de um hidrato ou de um solvato.

Quando o presente composto ou ácido hialurônico tem um isô- 5 mero geométrico ou um isômero ótico, o isômero ou um sal do mesmo está incluído no escopo da presente invenção. Quando o presente composto ou ácido hialurônico tem um tautômero protônico, o tautômero ou um sal do mesmo está incluído no escopo da presente invenção.

Quando o presente composto, ácido hialurônico ou um sal do - 10 mesmo, um hidrato ou um solvato tem um polimorfismo cristalino ou um grupo de polimorfismo cristalino (um sistema de polimorfismo cristalino), o polimorfismo cristalino e o grupo de polimorfismo cristalino (o sistema de polimorfismo cristalino) estão incluídos no escopo da presente invenção. O termo "grupo de polimorfismo cristalino (um sistema de polimorfismo cristali- 15 no) conforme usado neste relatório refere-se a formas cristalinas individuais nas etapas individuais de alteração das formas cristalinas e a totalidade do processo dependendo das condições e do estado de produção, cristalização, e preservação do cristal (este estado inclui o estado formulado).

O ácido hialurônico e um sal do mesmo podem ser produzidos 20 de acordo com métodos convencionais empregados no campo da química orgânica sintética, ou podem ser produzidos de acordo com o método divulgado na Patente Japonesa Aberta à Inspeção Pública N° 1-115902. O ácido hialurônico e um sal do mesmo a serem usados na presente invenção pode ser um produto comercialmente disponível produzido e comercializado pela 25 Sigma, entre outros. Por exemplo, um sal sódico de ácido hialurônico (catálogo N°: H5388) encontra-se comercialmente disponível na Sigma.

Na presente invenção, o termo "caracterizado por compreender uma combinação de um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz" refere-se a um caso em que um agente oftálmico misto compreendendo um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz é administrado de uma só vez, e também se refere a um caso em que um agente oftálmico compreendendo um agonista do receptor de P2Y? em uma concentração terapeuticamente eficaz e um agente oftálmico compreendendo ácido hialu-rônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz são administrados separada e sequencialmente.

Na presente invenção, o termo "concentração terapeuticamente eficaz" refere-se a uma concentração na qual um agente medicinal exibe sua ação farmacológica no olho quando o agente medicinal é administrado por via tópica ao olho.

Na presente invenção, a "concentração terapeuticamente eficaz" específica do agonista do receptor de P2Y2 pode variar dependendo dos tipos dos compostos a serem selecionados como o agonista do receptor de P2Y2, das formas de dosagem do presente agente de tratamento, entre outros. Por exemplo, quando o agonista do receptor de P2Y2 é diquafosol ou um sal do mesmo, a concentração terapeuticamente eficaz varia de 0,01 a 20% (p/v), de preferência 0,3 a 10% (p/v), mais preferivelmente 1 a 5% (p/v) quando uma solução oftálmica é escolhida como a forma de dosagem, e varia de 0,01 a 20% (p/p), de preferência 0,3 a 10% (p/p), mais preferivelmente 1 a 5% (p/p), ainda mais preferivelmente 3% (p/p) quando uma pomada oftálmica é escolhida como a forma de dosagem. Quando o agonista do receptor de P2Y2 é UTP, ATP ou um sal do mesmo, a concentração terapeuticamente eficaz varia de 0,01 a 30% (p/v), de preferência 0,3 a 20% (p/v), mais preferivelmente 1 a 10% (p/v) quando uma solução oftálmica é escolhida como a forma de dosagem, e varia de 0,1 a 30% (p/p), de preferência 0,3 a 20% (p/p), mais preferivelmente 1 a 10% (p/p), quando uma pomada oftálmica é escolhida como a forma de dosagem.

Na presente invenção, a "concentração terapeuticamente eficaz" específica de ácido hialurônico ou um sal do mesmo varia de 0,05 a 5% (p/v), de preferência 0,05 a 1% (p/v), mais preferivelmente 0,05 a 0,5% (p/v), 5 ainda mais preferivelmente 0,1 a 0,5% (p/v) quando uma solução oftálmica é escolhida como a forma de dosagem, e varia de 0,05 a 10% (p/p), de preferência 0,05 a 5% (p/p), mais preferivelmente 0,05 a 1% (p/p), ainda mais preferivelmente 0,1 a 0,5% (p/p) quando uma pomada oftálmica é escolhida como a forma de dosagem.

As concentrações de "diquafosol ou um sal do mesmo", "UTP ou

um sal do mesmo", "ATP ou um sal do mesmo" ou "ácido hialurônico ou um sal do mesmo" na presente invenção podem ser a concentração de uma forma livre ou de um sal de diquafosol, UTP, ATP ou ácido hialurônico.

Na presente invenção, "olho ressecado" é definido como "uma 15 doença crônica que ocorre na lágrima distúrbio epitelial da córnea e da conjuntiva causado por vários fatores, que vem acompanhada por um desconforto ocular e transtorno visual". O olho ressecado na presente invenção inclui ceratoconjuntivite seca (KCS), e também inclui tanto olho ressecado por deficiência de lágrima quanto olho ressecado evaporativo.

Olho ressecado deficiente em lágrimas é classificado como olho ressecado associado à síndrome de Sjogren e olho ressecado tipo não- síndrome de Sjogren. Olho ressecado tipo não-síndrome de Sjogren inclui: olho ressecado associado a uma doença da glândula lacrimal tal como ala- crimia congênita, sarcoidose, e doença do enxerto versus hospedeiro (G- 25 VHD) associada a transplante da medula óssea; olho ressecado associado à obstrução do órgão lacrimal causada por pênfigo ocular, síndrome de Stevens-Johnson, tracoma, entre outros; olho ressecado associado à redução na secreção de lágrima reflexa causada por diabetes, cirurgia ceratorrefratá- ria (LASIK: ceratomileuse (assistida por) laser in situ), entre outros; e assim por diante.

Olho ressecado evaporativo inclui olho ressecado associado à redução em uma camada oleosa causada por disfunção das glândulas mei- • bomiana, blefarite, entre outros; olho ressecado associado a piscar incom-pleto ou fechamento incompleto das pálpebras causado por exoftalmia, la- goftalmia, entre outros; olho ressecado associado à deterioração da estabili-dade de lágrima induzida pelo uso de lentes de contato; olho ressecado as- 5 sociado à redução na secreção de mucina de uma célula caliciforme; olho ressecado associado a operações de VDT; e assim por diante.

Na presente invenção, o termo "tratamento do olho ressecado" é definido como a melhora de todos os sintomas e/ou observações patológicos associados ao olho ressecado através da promoção da secreção de lá- 10 grimas ou similar, e inclui a melhora de sintomas subjetivos associados ao olho ressecado, tais como uma sensação de secura, dos olhos, um desconforto ocular, uma sensação de cansaço nos olhos, uma sensação de peso, uma sensação de fotofobia, dor nos olhos e visão borrada (visão enevoada), assim como a melhora de hiperemia associada ao olho ressecado, distúr- 15 bios ceratoconjuntivais epiteliais, e assim por diante.

O presente agente de tratamento pode ser formulado como um agente oftálmico misto misturando-se o agonista do receptor de P2Y2, ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e um aditivo farmaceuticamente aceitável e empregando-se uma técnica geralmente conhecida. Alternativamente, um 20 aditivo farmaceuticamente aceitável pode ser adicionado ao agonista do receptor de P2Y2 OU ácido hialurônico ou um sal do mesmo, respectivamente, e as misturas resultantes podem ser formuladas como agentes oftálmicos em uma única entidade usando-se uma técnica geralmente conhecida.

Uma solução oftálmica compreendendo apenas diquafosol ou 25 um sal do mesmo como princípio ativo pode ser preparada de acordo com o método divulgado na Publicação de Patente Nacional Japonesa N° 2003160491. No Japão, "DIQUAS® solução oftálmica a 3%", que contém apenas diquafosol sódico como princípio ativo em uma concentração de 0,3% (p/v), encontra-se comercialmente disponível. Além disso, no Japão, soluções of- 30 tálmicas contendo apenas ácido hialurônico ou um sal do mesmo como princípio ativo, tal como "Hyalein® solução oftálmica a 0,1 %", que contém apenas hialuronato de sódio como princípio ativo em uma concentração de 0,1% (p/v), e "Hyalein® Mini solução oftálmica a 0,3%", que contém apenas hialuronato de sódio como princípio ativo em uma concentração de 0,3% (p/v), também se encontram comercialmente disponíveis.

Na presente invenção, o presente agente de tratamento é admi- 5 nistrado por via tópica aos olhos. Exemplos do modo de administração do presente agente de tratamento incluem instilação ocular (incluindo administração tópica aos olhos na forma de uma pomada oftálmica), administração subconjuntival, administração ao saco conjuntival e administração subtenon, a instilação ocular sendo particularmente preferida.

Na presente invenção, a forma de dosagem do "agente oftálmi co" não é particularmente limitada, contanto que o agente possa ser usado para administração tópica aos olhos. Exemplos da forma de dosagem incluem uma solução oftálmica, uma pomada oftálmica, uma injeção, uma compressa adesiva, um gel, e um agente intercalante. Entre estas formas de 15 dosagem, uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica são preferidas.

As formas de dosagem podem ser preparadas usando-se técnicas conven-cionais que são geralmente empregadas na prática. Além dessas preparações, o presente agente de tratamento pode ser formulado como um preparado para implante intraocular ou como um preparado que é modificado para 20 ficar adequada para um sistema de distribuição de drogas (DDS) tal como uma microesfera.

A solução oftálmica pode ser preparada usando-se aditivos que são apropriadamente selecionados dentre agentes de tonicidade tais como cloreto de sódio, cloreto de potássio e glicerina concentrada; agentes tam- 25 ponantes tais como fosfato de sódio, acetato de sódio e ácido epsilon- aminocaproico; tensoativos tais como polioxietileno sorbitan mono-oleato, polioxil 40 estearato e óleo de rícino hidrogenado com polioxietileno; agentes estabilizantes tais como citrato de sódio e edetato de sódio; e agentes preservativos tais como cloreto de benzalcônio e parabeno, conforme ne- 30 cessário. O valor do pH da solução oftálmica pode ser qualquer um, contanto que o valor de pH esteja dentro da faixa oftalmicamente aceitável, e geralmente é varia de preferência 4 a 8.

A pomada oftálmica pode ser preparada usando-se um veículo que é geralmente usado, tal como petrolato branco e parafina líquida.

A injeção pode ser preparada usando-se um aditivo que é apro-priadamente selecionado dentre agentes de tonicidade tais como cloreto de 5 sódio; agentes tamponantes tais como fosfato de sódio; tensoativos tais como polioxietileno sorbitan mono-oleato; e agentes espessantes tais como metil celulose conforme necessário.

O agente intercalante pode ser preparado por pulverização e misturação de um polímero biodegradável tal como hidroxipropil celulose, 10 hidroxipropil metil celulose, um polímero carboxivinílico ou ácido poliacrílico com o presente composto e compressão e moldagem do pó resultante, onde um excipiente, um aglutinante, um agente estabilizante, um agente de ajuste do pH, entre outros, podem ser usados, se necessário.

O preparado para implante intraocular pode ser preparado u- 15 sando-se um polímero biodegradável tal como ácido poliláctico, ácido poli- glicólico, um copolímero de ácido láctico-ácido glicólico ou hidroxipropil celulose.

Na presente invenção, o regime de dose do presente agente de tratamento pode variar apropriadamente dependendo da forma de dosagem 20 empregada, da severidade da condição, da idade e do peso corporal do paciente ao qual o presente agente de tratamento será administrado, das orientações do médico, entre outros fatores. Por exemplo, quando uma solução oftálmica ou uma pomada oftálmica é escolhida como a forma de dosagem do presente agente de tratamento, a solução oftálmica ou a pomada 25 oftálmica podem ser administradas por via tópica aos olhos em 1 a 10 doses fracionadas por dia, de preferência 2 a 8 doses fracionadas por dia, mais preferivelmente 4 a 6 doses fracionadas por dia. O regime de dosagem significa o regime de dosagem para uma preparação oftálmica mista compreendendo o agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuti- 30 camente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz, assim como o regime de dosagem para um caso no qual um agente oftálmico compreendendo o agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e um agente oftálmico compreendendo ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz são administrados separadamente e sequencialmente.

Abaixo estão mostrados os resultados de testes farmacológicos e exemplos de preparação. No entanto, estes exemplos foram incluídos me-ramente com a finalidade de ajudar a compreender a presente invenção e não devem ser interpretados como limitativos do escopo da presente invenção.

EXEMPLOS [Teste farmacológico 1]

A alteração no volume de fluido lacrimal pode ser avaliada medindo-se o valor da área de menisco lacrimal colorida com uma solução de fluoresceína (Exp. Eye. Res., 78(3), 399-407 (2004)). Em seguida, o curso 15 de tempo de uma alteração no valor da área de menisco lacrimal depois da administração sequencial de diquafosol sódico, que é um agonista do receptor de P2Y2, e hialuronato de sódio aos olhos foi avaliada de acordo com o método de Murakami et al. (Ophthalmic Res., 34, 371-374 (2002)), usando coelhos brancos machos normais.

(Método de preparação da droga)

Diquafosol sódico (30 mg) foi dissolvido em uma solução de tampão fosfato, e cloreto de potássio, cloreto de sódio, cloreto de benzalcô- nio e um agente de ajuste de pH foram adicionados à solução resultante para preparar uma solução aquosa isotônica e neutra (1 mL), que foi usada 25 como uma solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% neste teste. Como uma solução de lágrima artificial, "Soft Santear, 0,1 %" produzida e comercializada pela Santen Pharmaceutical Co., Ltd. foi usada. Como uma solução oftálmica de hialuronato de sódio, "Hyalein® solução oftálmica a 0,1 %" produzida e comercializada pela Santen Pharmaceutical Co., Ltd. foi usada.

(Método de teste e método de administração da droga)

Uma solução de fluoresceína a 0,1% (3 μL) foi administrada a um menisco lacrimal da pálpebra inferior de cada um dos coelhos brancos machos normais (40 olhos de 20 coelhos no total), e foi tirada uma fotografia do menisco lacrimal que foi colorido com fluoresceína acumulada na pálpebra. A área da parte de menisco lacrimal colorida na fotografia foi calculada usando-se um aplicativo de análise de imagem, e o valor resultante foi empregado como a linha basal. Subsequentemente, uma solução de lágrima artificial, uma solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% e uma solução de ácido hialurônico a 0,1% foram administradas da seguinte maneira. • Grupo de administração isolada de solução de lágrima artificial: a solução de lágrima artificiaL(50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração isolada de diquafosol: uma solução of-tálmica de diquafosol sódico a 3% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração isolada de ácido hialurônico: a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração combinada de diquafosol/solução de lágrima artificial: Cinco minutos depois da administração da solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% (50 μL) aos olhos, a solução de lágrima artificial (50 μL) foi instilada nos olhos (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico: Cinco minutos depois da instilação da solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% (50 μL) nos olhos, a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% (50 μL) foi instilada nos olhos (oito olhos de quatro coelhos por grupo).

Em relação ao grupo de administração isolada da solução de lágrima artificial, o grupo de administração isolada de diquafosol, e o grupo de administração isolada de ácido hialurônico, 10 minutos e 35 minutos depois da administração, uma solução de fluoresceína a 0,1% (3 μL) foi instilada em um menisco lacrimal da pálpebra inferior, e foi tirada uma fotografia do menisco lacrimal colorido com fluoresceína acumulada na pálpebra. Por outro lado, em relação ao grupo de administração combinada de diquafo- sol/solução de lágrima artificial e ao grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico, 10 minutos e 35 minutos depois da administração do primeiro agente, o mesmo procedimento usado para os grupos que receberam um único agente foi realizado.

(Método de avaliação)

A alteração na área de menisco lacrimal antes e depois da ad-ministração de cada uma das drogas foi calculada como "Δ valor da área de menisco lacrimal". O Δ valor da área de menisco lacrimal de cada valor medido está mostrado na Fig. 1. Na Fig. Veada valor é o valor médio ± erro 10 padrão de 8 exemplos.

(Resultados)

No grupo de administração isolada de diquafosol, um aumento no valor da área de menisco lacrimal foi observado tanto 10 minutos quanto 35 minutos depois da administração. Ao contrário, no grupo de administra- 15 ção isolada de ácido hialurônico, um ligeiro aumento foi observado 10 minutos depois da administração e um aumento no valor da área de menisco lacrimal não foi observado 35 minutos depois da administração. Por outro lado, em relação ao grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico, um aumento no valor da área de menisco lacrimal em uma ex- 20 tensão maior que aquele que ocorreu no grupo de administração isolada de diquafosol ou no grupo de administração isolada de ácido hialurônico foi observado tanto 10 minutos quanto 35 minutos depois da administração (i.e., 5 minutos e 30 minutos depois da administração do segundo agente). Em relação ao grupo de administração combinada de diquafosol/solução de lá- 25 grima artificial, apenas um nível de aumento no valor da área de menisco lacrimal quase equivalente àquele que ocorreu no grupo de administração isolada de diquafosol foi observado.

(Discussão)

Como mencionado na seção "Antecedentes da Técnica", o áci- 30 do hialurônico não tem ação promotora da secreção de lágrimas. De fato, a solução de ácido hialurônico a 0,1% não aumentou em nada o valor da área de menisco lacrimal 35 minutos depois da administração. Não obstante, quando a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% e a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% foram administradas combinadas, surpreendentemente, um grande aumento no valor da área de menisco lacrimal foi observado em um período entre 10 minutos depois da administração do primeiro agente e 35 minutos depois da administração do primeiro agente comparado com aquele obtido pelas administrações isoladas de cada uma das soluções oftálmicas. Em outras palavras, consideramos que, quando a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% e a solução oftálmica de hialu-ronato de sódio a 1% são administradas combinadas, um nível de promoção de secreção de lágrimas acentuadamente mais alto que a soma total daqueles obtidos pelas administrações isoladas de cada uma das soluções oftálmica foi observado. Como mencionado acima, foi sugerido que é possível obter uma acentuada ação promotora de secreção de lágrimas quando um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz são administrados combinados.

[Teste farmacológico 2]

Um modelo de rato do qual uma glândula lacrimal exorbitai é ex- cisada geralmente é usado como um modelo para avaliação dos efeitos te-rapêuticos nos distúrbios epiteliais da córnea induzidos pelo olho ressecado, e também costuma ser usado como um modelo para avaliação dos efeitos terapêuticos de agonistas do receptor de P2Y2 (Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 42(1), 96-100 (2001)). Usando um modelo de olho ressecado que tem um fluxo de ar adicionalmente aplicado ao modelo de rato, examinamos se era possível obter ou não um efeito de melhora em distúrbios epiteliais da córnea pela administração de um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz combinados.

(Método para a produção de modelos de olho ressecado)

Usando um rato SD macho, um modelo de rato do qual uma glândula lacrimal exorbitai foi excisada foi produzido de acordo com o método de Fujihara et al. (Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 42(1), 96-100 (2001)).

Isto é, somnopentil foi administrado ao rato para dar anestesia geral, uma glândula lacrimal exorbitai foi excisada do rato, e então um fluxo de ar (por 8 semanas) foi adicionalmente aplicado ao rato para induzir um distúrbio epi- telial da córnea.

(Método de preparação da droga)

Da mesma maneira que no Teste farmacológico 1, uma solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% foi preparada. "Soft Santear" produzida e comercializada pela Santen Pharmaceutical Co., Ltd. foi usada como solução de lágrima artificial, e "Hyalein® solução oftálmica a 0,1 %" produzida e 10 comercializada pela Santen Pharmaceutical Co., Ltd. foi usada como a "solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,1 %".

(Método de teste e método de administração da droga)

Aos ratos nos quais um distúrbio epitelial da córnea foi induzido, a solução de lágrima artificial, a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% 15 e a solução de ácido hialurônico a 0,1% foram administradas da seguinte maneira. • Grupo de administração isolada de solução de lágrima artificial: a solução de lágrima artificial (5 μL) foi instilada em ambos os olhos 6 vezes ao dia por 6 semanas (oito olhos de quatro ratos por grupo). • Grupo de administração isolada de ácido hialurônico: a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% (5 μL) foi instilada em ambos os o- Ihos 6 vezes ao dia por 6 semanas (oito olhos de quatro ratos por grupo). • Grupo de administração isolada de diquafosol: a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% (5 μL) foi instilada em ambos os olhos 6 25 vezes ao dia por 6 semanas (oito olhos de quatro ratos por grupo). • Grupo de administração combinada de solução de lágrima arti- ficial/ácido hialurônico: a solução de lágrima artificial e a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% (5 μL de cada uma) foram instiladas em ambos os olhos 6 vezes ao dia por 6 semanas (seis olhos de três ratos por gru- 30 po). • Grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialu-rônico: a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% e a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% foram instiladas em ambos os olhos 6 vezes ao dia por 6 semanas (oito olhos de quatro ratos por grupo).

Entre os ratos nos quais um distúrbio epitelial da córnea foi induzido, aqueles aos quais não foi administrada nenhuma droga por 6 sema- 5 nas foram definidas como o grupo sem medicação (oito olhos de quatro ratos por grupo).

Seis semanas depois do início da instilação nos olhos, uma parte afetada da córnea foi colorida com fluoresceína, e a ocorrência do distúrbio epitelial da córnea foi determinada de acordo com o método de Muraka- 10 mi et al. (Journal of the Eye (Atarashii Ganka), 21(1), 87-90 (2004)). Isto é, no caso de cada uma dentre a parte superior, a parte intermediária e a parte inferior da córnea, os escores do grau de coloração com fluoresceína foram determinados de acordo com os critérios mencionados abaixo, e o valor médio da soma total dos escores foi calculado. Em cada dos escores 0,1,2 15 e 3, um valor intermediário 0,5 foi fixado. (Critérios de determinação) 0: não colorido 1: escassamente colorido, onde as partes coloridas na forma de pontos ficaram afastadas uma das outras 2: o grau de coloração foi moderado, onde algumas das partes coloridas na forma de pontos ficaram adjacentes entre si 3: densamente colorido, onde as partes coloridas na forma de pontos ficaram adjacentes entre si

(Resultados)

Um gráfico dos escores calculados de coloração com fluoresce ína para cada grupo está mostrado na Fig. 2. Neste gráfico, cada um dos escores é o valor médio ± erro padrão de 6 ou 8 exemplos.

Como evidente da Fig. 2, no grupo de administração isolada de ácido hialurônico e no grupo de administração isolada de diquafosol, embora 30 uma tendência de melhora nos escores de coloração com fluoresceína tenha sido observada, uma melhora que possa ser considerada estatisticamente significativa não foi observada. Por outro lado, no grupo de adminis- tração combinada de diquafosol/ácido hialurônico, foi observada uma considerável melhora nos escores de coloração com fluoresceína, onde o efeito de melhora foi estatisticamente significativo (p < 0,05, múltiplos testes de Turkey (quando comparado com o grupo sem medicação)).

(Discussão)

Como evidente a partir dos resultados mencionados acima, foi demonstrado que um distúrbio epitelial da córnea severo que não pode ser tratado pela administração isolada de cada uma das soluções oftálmicas pode ser melhorado pela administração da solução oftálmica de diquafosol 10 sódico a 3% e da solução oftálmica de hialuronato de sódio a 1% combinadas. Em outras palavras, espera-se que a administração de um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz combinados tenha um efeito terapêutico excelente no olho ressecado 15 associado a distúrbios epiteliais da córnea severos.

[Teste farmacológico 3]

Com a finalidade de verificar se um aumento no valor das áreas de menisco lacrimal é observado ou não quando um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz é combinado com áci- 20 do hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração em que ele é empregado como aditivo, o curso de tempo de uma alteração no valor da área de menisco lacrimal depois da instilação ocular sequencial do diquafosol sódico a 3% e do hialuronato de sódio a 0,002% foi avaliada da mesma maneira que aquela mencionada no Teste farmacológico 1.

(Método de preparação da droga)

Uma solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% foi preparada da mesma maneira que aquela mencionada no Teste farmacológico 1. Uma solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,002% foi preparada por diluição de "Hyalein® solução oftálmica a 0,3%" produzida e comercializada pela 30 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. com solução salina fisiológica.

(Método de teste e método de administração da droga)

Em relação aos coelhos brancos machos normais (24 olhos de 12 coelhos no total), uma fotografia do menisco lacrimal antes da administração de uma droga foi tirada da mesma maneira que no teste farmacológico 1. Subsequentemente, a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% e a solução oftálmica de ácido hialurônico a 0,002% foram administradas da 5 maneira a seguir e uma fotografia do menisco lacrimal foi novamente tirada 35 minutos depois da administração. • Grupo de administração isolada de diquafosol: a solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração isolada de ácido hialurônico: a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,002% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (oito olhos de quatro coelhos por grupo). • Grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico: Cinco minutos depois da instilação da solução oftálmica de diquafo- 15 sol sódico a 3% (50 μL) nos olhos, a solução oftálmica de hialuronato de - sódio a 0,002% (50 μL) foi instilada nos olhos (oito olhos de quatro coelhos por grupo).

(Resultados)

A alteração na área de menisco lacrimal antes e depois da ad- 20 ministração de cada uma das drogas foi calculada como um "Δ valor da área de menisco lacrimal". Os resultados estão mostrados na Tabela 1. [Tabela 1]

(Discussão)

Como evidente a partir da Tabela 1, no grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico, embora tenha sido observado um aumento no valor das áreas de menisco lacrimal em um nível maior que aquele que ocorreu no grupo de administração isolada de ácido hialurônico, a ação foi igual ou menor que aquela observada no grupo de administração isolada de diquafosol. Em outras palavras, foi demonstrado que a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,002% não promoveu de forma alguma a ação de secreção de lágrimas da solução oftálmica de diquafosol sódico a 3%.

Como mencionado acima, foi demonstrado que uma acentuada promoção de secreção de lágrimas é obtida quando um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz são administrados combinados (vide Teste farmacológico 1), e que a ação 10 não é observada quando o agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo na concentração que é empregada como aditivo são administrados combinados.

[Teste farmacológico 4]

O curso de tempo de uma alteração no valor das áreas de me nisco lacrimal depois da instilação sequencial de diquafosol sódico a 3% e hialuronato de sódio a 0,3% nos olhos foi avaliada da mesma maneira que aquela descrita no Teste farmacológico 1.

(Método de preparação da droga)

Uma solução oftálmica de diquafosol sódico a 3% foi preparada da mesma maneira que aquela descrito no Teste farmacológico 1 mencionado acima. "Hyalein® solução oftálmica a 0,3%" produzida e comercializada pela Santen Pharmaceutical Co., Ltd. foi usada como a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,3%.

(Método de teste e método de administração da droga)

Com relação a cada um dos coelhos brancos machos normais (18 olhos de 9 coelhos no total), uma fotografia do menisco lacrimal foi tirada antes da administração de cada uma das drogas da mesma maneira que aquela descrita no Teste farmacológico 1. Subsequentemente, a solução 30 oftálmica de diquafosol sódico a 3% e a solução oftálmica de ácido hialurônico a 0,3% foram administradas da seguinte maneira, e uma fotografia do menisco lacrimal foi novamente tirada depois 35 minutos. • Grupo de administração isolada de diquafosol: a solução of-tálmica de diquafosol sódico a 3% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (6 olhos de três coelhos por grupo). • Grupo de administração isolada de ácido hialurônico: a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,3% (50 μL) foi instilada nos olhos uma vez (6 olhos de 3 coelhos por grupo). • Grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialu-rônico: Cinco minutos depois da instilação da solução oftálmica de diquafo- sol sódico a 3% (50 μL) nos olhos, a solução oftálmica de hialuronato de 10 sódio a 0,3% (50 μL) foi instilada nos olhos (6 olhos de 3 coelhos por grupo).

(Resultados)

A alteração na área de menisco lacrimal antes e depois da ad-ministração de cada uma das drogas foi calculada como um "Δ valor da área de menisco lacrimal". Os resultados estão mostrados na Tabela 2. [Tabela 2]

(Discussão)

Como evidente a partir da Tabela 2, no grupo de administração combinada de diquafosol/ácido hialurônico, um efeito muito maior que a soma total do "Δ valor da área de menisco lacrimal" observado no grupo de 20 administração isolada de ácido hialurônico ou no grupo de administração isolada de diquafosol foi confirmado. Em outras palavras, foi verificado que a solução oftálmica de hialuronato de sódio a 0,3% pode promover acentua- damente a ação de secreção de lágrimas da solução oftálmica de diquafosol sódico a 3%, como no caso da solução oftálmica de hialuronato de sódio a 25 1%.

Como mencionado acima, foi confirmado mais uma vez que uma acentuada ação promotora de secreção de lágrimas pode ser obtida quando um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração tera-peuticamente eficaz são administrados combinados.

[Exemplos de preparação]

As drogas da presente invenção serão descritas de forma mais específica com referência a exemplos de preparação. No entanto, a presente invenção não se limita aos exemplos de preparação. (Exemplo de formulação 1: uma solução oftálmica (a concentra-ção de diquafosol sódico: 3% (p/v), a concentração de hialuronato de sódio: 0,1% (p/v)) Em 100 ml: diquafosol sódico 3,0 g hialuronato de sódio 0,1 g cloreto de sódio 0,9 g fosfato ácido de sódio hidratado q.s. água purificada esterilizada q.s.

Diquafosol sódico, hialuronato de sódio e os outros componentes são adicionados à água purificada esterilizada, e a mistura resultante é completamente misturada, preparando assim uma solução oftálmica. Uma 20 solução oftálmica tendo uma concentração de diquafosol sódico de 0,5% (p/v), 1% (p/v) ou 5% (p/v) e uma concentração de hialuronato de sódio de 0,3% (p/v) ou 0,5% (p/v) pode ser preparada variando-se as quantidades de diquafosol sódico e hialuronato de sódio a serem adicionadas. (Exemplo de formulação 2: uma pomada oftálmica (a concentra- 25 ção de diquafosol sódico: 3% (p/p), a concentração de hialuronato de sódio: 0,1% (p/p)) Em 100 g: diquafosol sódico 3,0 g hialuronato de sódio 0,1 mg parafina líquida 10 mg petrolato branco q.s.

Diquafosol sódico e hialuronato de sódio são adicionados ao pe- trolato branco e parafina líquida que foram derretidos de forma homogênea e a mistura resultante é completamente misturada e em seguida resfriada gradualmente, preparando assim uma pomada oftálmica. Uma pomada oftálmica tendo uma concentração de diquafosol sódico de 0,5% (p/v), 1% 5 (p/v) ou 5% (p/v) e uma concentração de hialuronato de sódio de 0,3% (p/v) ou 0,5% (p/v) pode ser preparada variando-se as quantidades de diquafosol sódico e hialuronato de sódio a serem adicionadas.

Aplicabilidade Industrial

Um agente para o tratamento de olho ressecado caracterizado 10 por compreender uma combinação de um agonista do receptor de P2Y2 em uma concentração terapeuticamente eficaz e ácido hialurônico ou um sal do mesmo em uma concentração terapeuticamente eficaz e tendo a forma de dosagem de um agente oftálmico pode promover acentuadamente a secreção de lágrimas e pode melhor acentuadamente distúrbios epiteliais da cór- 15 nea, e esperamos portanto que ele seja um novo agente para o tratamento de olho ressecado.

Claims

1. Uso de uma combinação de P1, P4-bis(5’-uridil) tetrafosfato ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo em uma concentração de 1 a 5% (p/v) e ácido hialurônico ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo 5 em uma concentração de 0,05 to 0,5% (p/v), caracterizado pelo fato de que é na preparação de uma solução oftalmológica para o tratamento de olho ressecado.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a combinação é de P1, P4-bis(5’-uridil) tetrafosfato ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo em uma concentração de 3% (p/v) e ácido hialurônico ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo em uma concentração de 0,1 a 0,5% (p/v).