AT391319B - Verfahren zur herstellung von neuen cephalosporinverbindungen - Google Patents

Description

Nr. 391 319

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von neuen Verbindungen der allgemeinen Formel

,(D worin R eine acylierte Aminogruppe bedeutet; R ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe ist; R^ ein Wasserstoffatom oder eine carboxylblockierende Gruppe darstellt; B oder —> Ο (a- oder ß-) ist; und die gestrichelte Linie, welche die 2-, 3- und 4-Stellung verbindet, anzeigt, daß die Verbindung eine Ceph-2-em-oder Ceph-3-em-Verbindung ist, und von Salzen, Solvaten und Estem davon.

Die Cephalosporin-Verbindungen in dieser Beschreibung sind unter Bezugnahme auf "Cepham” gemäß J. Amer. Chem. Soc., 1962, M, 3400, benannt, wobei der Ausdruck "Cephem" sich auf die Basis-Cepham-Struktur mit einer Doppelbindung bezieht.

Cephalosporin-Antibiotika werden in weitem Maße bei der Behandlung von Krankheiten, die durch pathogene Bakterien in Menschen und Tieren verursacht werden, verwendet und sind besonders nützlich bei der Behandlung von Krankheiten, die durch Bakterien verursacht sind, welche gegenüber anderen Antibiotika, wie Penicillin-Verbindungen, resistent sind, und bei der Behandlung von Penicillin-empfindlichen Patienten. In vielen Fällen ist es erwünscht, ein Cephalosporin-Antibiotikum zu verwenden, das Aktivität sowohl gegen gram-positive als auch gram-negative Mikroorganismen zeigt, und eine beträchtliche Forschungsarbeit wurde auf die Entwicklung von verschiedenen Typen von Breitband-Cephalosporin-Antibiotika gerichtet

In der GB-PS-1 342 241 ist eine Klasse von Cephalosporin-Antibiotika beschrieben, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie in 3-Stellung durch eine Vinylgruppe substituiert sind, die gegebenenfalls durch eine substituierte oder unsubstituierte, aliphatische, cycloaliphatische, aromatische oder araliphatische Gruppe substituiert sein kann.

In der GB-PS-1 399 086 ist eine neue Klasse von Cephalosporin-Antibiotika beschrieben, die eine 7ß-(a-veretherte-Oximino)-acylamido-Gruppe enthalten, wobei die Oximinogruppe die syn-Konfiguration hat. Diese Klasse von antibiotischen Verbindungen ist charakterisiert durch eine hohe antibakterielle Aktivität gegenüber einer Reihe von gram-positiven und gram-negativen Organismen, gekoppelt mit besonders hoher Stabilität für ß-Lactamasen, die durch verschiedene gram-negative Organismen erzeugt werden. Der 3-Substituent der Cephalosporin-Verbindungen kann u. a. eine gegebenenfalls substituierte Vinylgruppe sein.

Die GB-PS-1496 757 bezieht sich auf Cephalosporin-Antibiotika mit einer 7ß-(syn-a-veretherten-Oximino)-acylamido-Gruppe, worin die verethemde Gruppe durch eine Carboxylgruppe substituiert ist. Der 3-Substituent kann u. a. eine gegebenenfalls substituierte Vinylgruppe sein, und es sind Verbindungen als Beispiele angegeben, welche eine 3-(2-Methoxycarbonyl)-vinyl- oder 3-(2-Cyano)-vinyl-Gruppe haben.

Die EP-A-30630 beschreibt Cephalosporin-Antibiotika mit einer unsubstituierten Vinylgruppe in 3-Stellung und einem weiten Bereich möglicher Substituenten in 7ß-Stellung. Von einer der beschriebenen Verbindungen, nämlich (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-ethenyl-ceph-3-em-4-carboxylat, wurde berichtet, daß sie bei klinischen Versuchen bei der Behandlung von Menschen durch orale Verabreichung erfolgreich benutzt wurde, obwohl sie bei oraler Verabreichung an Mäuse im wesentlichen keine Aktivität gegenüber Stämmen des gram-positiven Organismus Staphylococcus aureus hat. Weiterhin ist ihre Absorption vom Gastrointestinal-Trakt nur mittelmäßig, ebenso wie die pharmakokinetische Halbwertzeit.

Es besteht jedoch im allgemeinen ein Bedürfnis für eine Verbindung mit guter Aktivität gegenüber sowohl gram-positiven als auch gram-negativen Organismen, verbunden mit einer guten oralen Absorption. Es wurden nun gewisse 3-(gegebenenfalls subst.-But-l-en-3-inyl)-cephalosporin-Verbindungen gefunden, welche im allgemeinen die gewünschten, vorteilhaften Eigenschaften aufweisen. Geschützte Formen dieser Verbindungen -2-

Nr. 391 319 und Vorläufer davon sind ebenfalls wertvoll als Zwischenverbindungen bei der Erzeugung der aktiven Antibiotika.

Eine derartige Verbindung wird erfindungsgemäß bei einem Verfahren der eingangs genannten Art dadurch besonders einfach hergestellt, daß eine Verbindung der Formel (I) oder ein Salz davon, worin R eine Aminogruppe oder silylierte Aminogruppe ist, acyliert wird.

Vorteilhafterweise kann eine Verbindung der ^gemeinen Formel

[worin R1 eine Acylgruppe ist, ausgewählt aus (i) einer Gruppe der Formel RaCH2CO-, worin Ra eine gegebenenfalls halogensubstituierte, 5-gliedrige, heterocyclische Arylgruppe mit einem oder mehreren Heteroatomen, ausgewählt aus S, N und O, im Ring ist; (ii) einer Gruppe der Formel Rb - C - CO -,

II

worin Rb eine gegebenenfalls substituierte, carbocyclische oder heterocyclische Arylgruppe ist und Rc ein Wasserstoffatom oder eine, gegebenenfalls substituierte, Alkylgruppe darstellt; und (iii) einer Gruppe der Formel R^CH - CO -,

I X, worin R^ wie für Ra definiert ist oder eine gegebenenfalls substituierte, carbocyclische Gruppe ist und X eine Amino-, Hydroxyl-, acylierte Hydroxyl-, Carboxyl- oder veresterte Carboxylgruppe darstellt; und R^ ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Nied-rigalkoxycarbonylgruppe ist], und von nichttoxischen Salzen, Solvaten, 1-Oxiden und nichttoxischen, metabolisch labilen Estern davon, dadurch hergestellt werden, daß eine Verbindung der Formel

CH — CH C = C-R‘ > (Id) -3-

Nr. 391 319 [worin R^A eine Gruppe, wie vorstehend für R* definiert, oder eine geschützte Form davon bedeutet; R^ ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe darstellt; R^ ein Wasserstoffatom oder eine carboxylblockierende Gruppe bedeutet; B oder —> Ο (a- oder ß-) ist; und die gestrichelte Linie, welche die 2-, 3- oder 4-Stellung verbindet, anzeigt, daß die Verbindung eine Ceph-2-em- oder Ceph-3-em-Verbindung ist] oder ein Salz, Solvat oder Ester davon gebildet wird durch Acylieren einer Verbindung der Formel

Η H

CH=CH-C-C- (II), 9 “3 (worin B, R , R und die gestrichelte Linie wie vorstehend definiert sind) oder eines Salzes oder N-Silylderivats davon mit einer Säure der Formel (m),

R1AOH (worin R^A wie vorstehend definiert ist) oder mit einem dieser entsprechenden acylierenden Mittel, wonach, falls notwendig und/oder erwünscht, im jeweiligen Fall irgendeiner der folgenden Schritte in irgendeiner geeigneten Reihenfolge durchgeführt werden kann: (i) Bildung eines nichttoxischen Salzes, (ii) Entfernung irgendwelcher carboxylblockierender und/oder O- oder N-schützender Gruppen, bzw. 9 Ί (iii) Umwandlung eines Δ -Isomeren in das gewünschte Δ -Isomere, (iv) Reduktion einer Verbindung, worin B I^S —> O ist, zur Bildung einer Verbindung, worin B ^=S ist.

Die 1-Oxide der erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen können in a- oder ß-Form sein, jedoch sind die Sulfide der Verbindungen bevorzugt

Dabei kann in der Verbindung der Formel II R^ ein Wasserstoffatom oder eine C^.4-Alkyl-, Phenyl-, Carboxyl- oder eine G^-Alkoxycarbonyl-Gruppe sein, und in der Verbindung der Formel ΠΙR^A eine Gmppe b· R°- C-CO-

N

OR worin R*3 eine Thiazolyl- oder Furylgruppe bedeutet, gegebenfalls amino-substituiert, Rc ein Wasserstoffatom -4-

Nr. 391 319 oder eine Cj ,4-Alkylgruppe ist, gegebenenfalls substituiert durch Carbamoyl, Methylcarbamoyl, Dimethylcarbamoyl, Carboxyl oder C2_5-Alkoxycarbonyl oder eine geschützte Form davon ist

Wenn R* in den erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen eine Gruppe der Formel Rb - C - CO - li

5 N ^ORc bedeutet, sind diese Verbindungen syn-Isomere in bezug auf die Konfiguration da- Oximinogruppe. Die syn- isomere Form wird durch die Konfiguration der Gruppe -ORc in bezug auf die Carboxamidogruppe definiert In 10 der vorliegenden Beschreibung wird die syn-Konfiguration strukturell als

Rb - C-CONH

N 15 ORc bezeichnet. Es sei erwähnt, daß, da die Oximgruppe in der 7-Seitenkette in solchen Verbindungen eine geometrische Isomere ergibt, dann eine gewisse Vermischung mit dem entsprechenden anti-isomeren auftreten kann. 20 Es sei weiter erwähnt, daß erfindungsgemäß hergestellte Verbindungen als geometrische Isomere in bezug auf den 3-Substituenten existieren. So können die Substituenten an der Doppelbindung in der cis-, d. h.

25 oder trans-, d. h. 30 ^C=LC-

Isomerenform sein. Beide, sowohl die geometrische Isomeren als auch Mischungen davon, sind in den Bereich der 35 Erfindung eingeschlossen.

Beispiele für heterocyclische Arylgruppen für Ra umfassen 3- und 4-Isoxazolyl, Tetrazolyl, Thiazolyl, Furyl, Thienyl, Isothiazolyl, Thiadiazolyl, Pyrazolyl und Oxadiazolyl. Solche Gruppen können gegebenenfalls substituiert sein, beispielsweise durch ein oder mehrere Halogenatome (z. B. Chlor, Brom oder Jod) oder Nitro-, Hydroxyl-, Amino-, Niedrig (z. B. Cj.g)alkyl-, Niedrig(z. B. Cj.g)alkoxy- oder Niedrig(z. B. C2_g)acyloxy-, 40 z. B. Alkanoyloxy-, Gruppen.

Bevorzugte carbocyclische oder heterocyclische Arylgruppen für Rb umfassen beispielsweise Phenyl, Thiazolyl, Isothiazolyl, Furyl, Thienyl, Thiadiazolyl, Oxadiazolyl, Pyridyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl und Pyrimidinyl. Solche Gruppen können gegebenenfalls substituiert sein, beispielsweise durch ein oder mehrere Halogenatome, z. B. Chlor, Brom oder Jod, oder Nitro-, Hydroxyl-, Amino-, Niedrig(z. B. C^_g)alkyl-, 45 Niedrig(z. B. Cj.g)alkoxy- oder Niedrig(z. B. C2.g)acyloxy-, z. B. Alkanoyloxy-, Gruppen. Eine besonders bevorzugte Gruppe für Rb ist 2-Aminothiazol-4-yl.

Beispiele für Gruppen Rc umfassen C Alkyl (z.B. Methyl, Ethyl oder Prop-2-yl).

Die Gruppe Rc kann gegebenenfalls substituiert sein, beispielsweise durch Hydroxyl, Alkoxy (z. B. Methoxy), Amino, substituiertes Amino (z. B. Methyl- oder Dimethylamino), Nitro, Carbamoyl, substituiertes 50 Carbamoyl (z. B. Methyl- oder Dimethylcarbamoyl), Carboxyl, verestertes Carboxyl (z. B. C2_5-Alkoxycarbonyl, wie Methoxycarbonyl) und Cyanogruppen oder durch Halogenatome (z. B. Chlor, Brom oder Jod). Eine besonders bevorzugte Gruppe für Rc ist Carboxymethyl.

Beispiele für die Gruppe R^ umfassen solche, die oben für die Gruppe Ra aufgezählt sind. Zusätzlich kann beispielsweise ausgewählt sein aus Phenyl, 4-Hydroxyphenyl, Cyclohexa-l,4-dien-l-yl, Naphthyl und 55 Benzothienyl.

Beispiele für die Gruppe X umfassen Amino-, Acetoxy- und Ethoxycarbonylgruppen. -5-

Nr. 391 319 Λ

Beispiele für die Gruppe R umfassen Wasserstoff, C ^4-Alkyl (wie Methyl oder Ethyl), Phenyl, Furyl, Carboxyl oder G^-Alkoxycarbonyl, wie Methoxycarbonyl.

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen können in tautomeren Formen existieren (z. B. wenn eine 2-Aminothiazolylgruppe ist), und es sei erwähnt, daß solche tautomeren Formen, z. B. die 2-Iminothiazolyl-Form, in dem Bereich der Erfindung eingeschlossen sind.

Es werden vorliegend auch die Solvate (besonders die Hydrate) der erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen der Formel (Ia) mitumfaßt, auch die Solvate der nichttoxischen Salze der erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen der Formel (Ia) und nichttoxische Salze und Solvate von nichttoxischen, metabolisch labilen Estern der Verbindungen der Formel (Ia).

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen der Formel (Ia) zeigen antibakterielle Aktivität gegenüber einer weiten Anzahl von gram-positiven und gram-negativen Bakterien.

Von erfmdungsgemäß hergestellten Verbindungen der Formel (Ia) wurde gefunden, daß sie eine hohe Aktivität gegenüber verschiedenen Gliedern der Enterobacteriaceae aufweisen (z. B. Stämmen von Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens, Citrobacter diversus, Providence-Species, Proteus mirabilis und insbesondere Indol-positiven Proteus-Organismen, wie Proteus vulgaris und Proteus morganii) und Stämmen von Haemophilus influenzae. Sie sind auch aktiv gegenüber gram-positiven Bakterien, wie Staphylococcus aureus.

Von Verbindungen der Formel (Ia) in der trans-Konfiguration wurde gefunden, daß sie bei oraler Verabreichung gut absorbiert werden.

Eine bevorzugte Klasse von erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen kann durch die Formel (Ib) dargestellt werden: R -C — Co NH —

Ob)

LJ

Hierbei bedeutet R° eine Thiazolyl- oder Furylgruppe, gegebenenfalls amino-substituiert; Rc bedeutet ein Wasserstoffatom oder eine C^-Alkygruppe, gegebenenfalls substituiert durch Carbamoyl, Methylcarbamoyl,

Dimethylcarbamoyl, Carboxyl, C2_5-Alkoxycarbonyl oder Halogen, und R^ bedeutet ein Wasserstoffatom oder eine C Alkyl-, Phenyl-, Carboxyl- oder C2_5-Alkoxycarbonylgruppe. Die Aktivität dieser Verbindungen gegenüber gram-negativen Bakterien, wie solchen, wie vorstehend spezifiziert, ist im allgemeinen hoch und dehnt sich auf viele ß-Lactamase erzeugende, gram-negative Stämme aus. Die Verbindungen besitzen auch eine hohe Stabilität für ß-Lacatmasen, die durch einen Bereich von gram-positiven und gram-negativen Organismen erzeugt werden.

Eine noch mehr bevorzugte Klasse von erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen kann durch die Formel (Ic) uri.

\=L

C -Conj H | 1 I 11 N J—λ Λ. \ c ·· ο ORc 1 CC-OH c *1 -c SC-Ra de) -6-

Nr. 391 319 wiedergegeben werden, worin Rc ein Wasserstoffatom oder eine Methyl-, Ethyl-, Carboxymethyl-, Λ» 2-Carboxyprop-2-yl-, Carbamoylmethyl- oder Methoxycarbonylmethylgruppe bedeutet und R bedeutet ein Wasserstoffatom oder eine C2.4-Alkylgruppe (z. B. Methyl oder Ethyl), und die nichttoxischen Salze und nichttoxischen, metabolisch labilen Ester davon.

Von Verbindungen der Formel (Ic) wurde gefunden, daß sie eine gute Aktivität gegenüber einem weiten Bereich von gram-positiven und gram-negativen Bakterien besitzen.

Von Verbindungen der Formel (Ic), worin der 3-Substituent in der trans-Konfiguration vorliegt, wurde gefunden, daß sie nach oraler Verabreichung gut absorbiert werden. So sind die trans-isomeren und ihre nichttoxischen Salze und nichttoxischen, metabolisch labilen Ester ganz besonders bevorzugte Verbindungen.

Zwei erfindungsgemäß hergestellte Verbindungen, welche besonders bevorzugt sind aufgrund ihrer guten oralen Absorption und hohen antibakteriellen Aktivität, sind (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-hex-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carbonsäure; und (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-but-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carbonsäure.

Eine außergewöhnliche erfindungsgemäß hergestellte Verbindung ist (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carbonsäure der Strukturformel

sowie die nichttoxischen Salze und nichttoxischen, metabolisch labilen Ester davon. Besonders erwähnt sei das Natriumsalz.

Diese Verbindung besitzt sowohl in vitro als auch in vivo eine gute Aktivität gegenüber gram-positiven Organismen und eine hohe Aktivität gegenüber einem breiten Spektrum von gram-negativen Organismen. Sie wird nach oraler Verabreichung gut absorbiert und wurde erfolgreich zur Behandlung von experimentellen Infektionen (z. B. Escherichia coli und Staphylococcus aureus) bei kleinen Nagetieren durch orale Verabreichung verwendet. Weiterhin wurde gefunden, daß sie eine ungewöhnlich lange pharmakokinetische Halbwertzeit bei Mäusen hat, und dies bedeutet, daß eine weniger häufige Dosierung als normal möglich ist. Diese Kombination von oraler Absorption, guten Spiegeln von Breitband-antibakterieller Aktivität in vivo und langer pharmakokinetischer Halbwertzeit ist besonders überraschend, da die meisten Cephalosporin-Antibiotika, welche bisher zugänglich waren, bei oraler Verabreichung nicht wirksam waren und eine häufigere Dosierung erforderten.

Nicht-toxische Salzderivate, welche durch Reaktion von einer oder mehreren Carboxylgruppen, die in den Verbindungen der Formel (Ia) vorhanden sind, gebildet werden können, umfassen anorganische Basensalze, wie Alkalimetallsalze (z. B. Natrium- und Kaliumsalze) und Erdalkalimetallsalze (z. B. Calciumsalze); Aminosäuresalze (z. B. Lysin- und Argininsalze); organische Basensalze (z. B. Procain-, Phenylethylbenzylamin-, Dibenzylethylendiamin-, Ethanolamin-, Diethanolamin- und N-Methylglucosaminsalze). Andere nicht-toxische Salzderivate umfassen Säureadditionssalze, wenn die Verbindungen eine basische Gruppe enthalten, z. B. gebildet mit Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure, Ameisensäure und Trifluoressigsäure. Die Salze können auch in Form von Resinaten, gebildet mit beispielsweise einem Polystyrolharz oder vernetztem Polystyrol-Divinylbenzol-Copolymerharz, enthaltend Amino- oder quaternäre Aminogruppen oder Sulfonsäuregruppen, oder mit einem Carboxylgruppen enthaltenden Harz, z. B. einem Polyacrylsäureharz, sein. Lösliche Basensalze (z. B. Alkalimetallsalze, wie das Natriumsalz) der Verbindungen der Formel (Ia) können bei therapeutischen Anwendungen aufgrund der raschen Verteilung solcher Salze im Körper nach der Verabreichung verwendet werden. Wo jedoch unlösliche Salze der Verbindungen (Ia) bei einer besonderen Anwendung gewünscht sind, z. B. zur Verwendung bei Depotpräparaten, können solche Salze in üblicher Weise gebildet werden, z. B. mit geeigneten organischen Aminen.

Diese und andere Salzderivate, wie die Salze mit Toluol-p-sulfonsäure und Methansulfonsäure, können als Zwischenverbindungen bei der Herstellung und/oder Reinigung der vorliegenden Verbindungen der Formel (Ia), beispielsweise bei den weiter unten beschriebenen Verfahren, verwendet werden. -7-

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Nicht-toxische, metabolisch labile Esterderivate, welche durch Veresterung einer oder mehrerer Carboxylgruppen in den Stammverbindungen der Formel (Ia) gebildet werden können, umfassen Acyloxyalkylester, z. B. Niedrigalkanoyloxy-methyl- oder -ethylester, wie Acetoxy-methyl- oder -ethyl- oder Pivaloyloxymethylester, und Alkoxycarbonyloxyalkylester, wie Ethoxycarbonyloxyethylester. Zusätzlich zu den obigen Esterderivaten umfaßt die vorliegende Erfindung in ihrem Bereich die Verbindungen der Formel (Ia) in Form anderer physiologisch annehmbarer Äquivalente, beispielsweise physiologisch annehmbarer Verbindungen, welche, wie die metabolisch labilen Ester, in vivo in die stamm-antibiotischen Verbindungen der Formel (Ia) übergefühlt werden.

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen der Formel (Ia) können zur Behandlung einer Reihe von Krankheiten, die durch pathogene Bakterien in Menschen und Tieren verursacht werden, wie Infektionen des Respirationstrakts und des Urinärtrakts, verwendet werden.

Acylierende Mittel, welche bei den Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) oder (Ia) verwendet werden können, umfassen Säurehalogenide, insbesondere Säurechloride oder -bromide. Solche acylierenden Mittel können hergestellt werden durch Reaktion einer geeigneten Säure, z. B. einer Säure (ΠΙ) oder eines Salzes davon, mit einem halogenierenden Mittel, z. B. Phosphorpentachlorid, Thionylchlorid oder Oxalylchlorid.

Acylierungen unter Verwendung von Säurehalogeniden können in wäßrigen oder nicht-wäßrigen Reaktionsmedien durchgeführt werden, zweckmäßig bei Temperaturen von -50 bis +50 °C, vorzugsweise -40 bis +30 °C, gewünschtenfalls in Gegenwart eines säurebindenden Mittels. Geeignete Reaktionsmedien umfassen wäßrige-Ketone, wie wäßriges Aceton, wäßrige Alkohole, wie wäßriges Ethanol, Ester, wie Ethylacetat, halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Methylenchlorid, Amide, wie Dimethylacetamid, Nitrile, wie Acetonitril, oder Mischungen von zwei oder mehreren solcher Lösungsmittel. Geeignete säurebindende Mittel umfassen tertiäre Amine (z. B. Triethylamin oder Dimethylanilin), anorganische Basen (z. B. Calciumcarbonat oder Natriumbicarbonat) und Oxirane, wie Niedrig- 1,2-alkylenoxide (z. B. Ethylenoxid oder Propylenoxid), welche den bei der Acylierungsreaktion freigesetzten Halogenwasserstoff binden. Säuren [z. B. die Säuren der Formel (III)] können ihrerseits als acylierende Mittel bei der Herstellung der Verbindungen der Formel (I) oder (Ia) verwendet werden. Acylierungen unter Verwendung der Säuren (ΙΠ) werden zweckmäßig in Gegenwart eines kondensierenden Mittels durchgeführt, z. B. eines Carbodiimids, wie Ν,Ν’-Dicyclohexylcarbodiimid oder N-Ethyl-N'-Y-dimethylaminopropylcarbodiimid; einer Carbonylverbindung, wie Carbonyldiimidazol; oder eines Isoxazoliumsalzes, wie N-Ethyl-5-phenylisoxazoliumperchlorat.

Die Acylierung kann auch mit anderen amidbildenden Derivaten von Säuren [z. B. Säuren der Formel (ΙΠ)] durchgeführt werden, wie z. B. einem aktivierten Ester, einem symmetrischen Anhydrid oder einem gemischten Anhydrid (z. B. gebildet mit Pivalinsäure oder mit einem Halogenformiat, wie Niedrigalkylhalogenformiat). Gemischte Anhydride können auch mit Phosphorsäuren (z. B. Phosphor- oder Phosphorigsäure), Schwefelsäure oder aliphatischen oder aromatischen Sulfonsäuren (z. B. Toluol-p-sulfonsäure) gebildet werden. Ein aktivierter Ester kann zweckmäßig in situ gebildet werden unter Verwendung von beispielsweise 1-Hydroxybenzotriazol in Gegenwart eines kondensierenden Mittels, wie oben erwähnt. Alternativ kann der aktivierte Ester vorgebildet werden.

Die Acylierungsreaktionen, welche die freien Säuren oder ihre oben erwähnten, amidbildenden Derivate einschließen, werden zweckmäßig in einem wasserfreiem Reaktionsmedium, z. B. Methylenchlorid, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Acetonitril, durchgeführt.

Eine alternative Methode der Aktivierung besteht beispielsweise in der Reaktion einer Säure (z. B. einer Säure der Formel ΠΙ) mit einer Lösung oder Suspension, die durch Zugabe eines Carbonylhalogenids, insbesondere Oxalylchlorid oder Phosgen, oder eines Phosphorylhalogenids, wie Phosphoroxychlorid, zu einem Lösungsmittel, wie einem halogenierten Kohlenwasserstoff, z. B. Methylenchlorid, enthaltend ein Niedrigacyl-tert-amid, wie Ν,Ν-Dimethylformamid, vorgebildet wurde. Die aktivierte Form der Säure kann dann mit einer 7-Amino-Verbindung der Formel (I) oder (II) in einem geeigneten Lösungsmittel oder Gemisch von Lösungsmitteln, z. B. einem Alkohol, wie wäßrigem Ethanol oder wäßrigem, mit Methanol vergälltem Industrieethanol, umgesetzt werden. Die Acylierungsreaktion kann zweckmäßig bei Temperaturen von -50 bis +50 °C, vorzugsweise -40 bis +30 °C, gewünschtenfalls in Gegenwart eines säurebindenden Mittels, z. B. wie oben beschrieben (z. B. Triethylamin), durchgeführt werden.

Gewünschtenfalls können die obigen Acylierungsreaktionen in Gegenwart eines Katalysators, wie 4-Dimethylaminopyridin, durchgeführt werden.

Die Säuren (z. B. der Formel (ΠΙ)) und die ihnen entsprechenden, acylierenden Mittel können gewünschtenfalls in Form ihrer Säureadditionssalze hergestellt und verwendet werden. So können beispielsweise Säurechloride zweckmäßig als ihre Hydrochloridsalze und Säurebromide als ihre Hydrobromidsalze verwendet werden.

Derartige, wie oben beschrieben, Eliminierungsreaktionen können in üblicher Weise bewirkt werden, z. B. in einem inerten, organischen Medium, wie dasjenige, worin die Zwischenverbindung gebildet wurde, und bei einer Temperatur von 0 bis 100 °C. Gewünschtenfalls kann dieEntfemungsreaktion in Gegenwart eines Katalysators, wie einer nicht-nukleophilen Base, z. B. Triethylamin, durchgeführt werden.

Das Reaktionsprodukt von den obigen Verfahren kann aus der Reaktionsmischung, die beispielsweise unverändertes Cephalosporin-Ausgangsmaterial und andere Substanzen enthalten kann, durch eine Vielzahl von -8-

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Verfahren einschließlich Umkristallisieren, Ionophorese, Säulenchromatographie und Verwendung von Ionenaustauschern (beispielsweise durch Chromatographie auf Ionenaustauschharzen) oder makroretikulären Harzen abgetrennt werden.

Ein Δ -Cephalosphorinester-Derivat, das gemäß dem erfindungsgemäßen Verfahren erhalten wurde, kann in das entsprechende, gewünschte Δ^-Derivat überführt weiden, beispielsweise durch Behandlung des Δ^-Esters mit einer Base, wie Pyridin oder Triethylamin.

Ein Ceph-2-em- oder Ceph-3-em-Reaktionsprodukt kann auch oxidiert werden, um das entsprechende Ceph-3-em-l-oxid zu ergeben, beispielsweise durch Reaktion mit einer Persäure, z. B. Peressigsäure oder m-Chlorpeibenzoesäure; das entstandene Sulfoxid kann gewünschtenfalls anschließend reduziert werden, wie weiter unten beschrieben, unter Bildung des entsprechenden, gewünschten Ceph-3-em-sulfids.

Wenn eine Verbindung erhalten wird, worin B —> O ist, kann diese gewünschtenfalls in das entsprechende Sulfid überführt werden, beispielsweise durch Reduktion des entsprechenden Acyloxysulfonium-oder Alkoxysulfoniumsalzes, das in situ durch Reaktion mit z. B. Acetylchlorid im Falle eines Acetoxysulfoniumsalzes hergestellt wurde, wobei die Reduktion bewirkt wird z. B. mit Natriumdithionit oder Jodidion, wie in einer Lösung von Kaliumjodid in einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel, z. B. Essigsäure, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylformamid oder Dimethylacetamid. Die Reaktion kann bei einer Temperatur von -20 bis +50 °C duichgeführt werden.

Wenn bei irgendeinem der obigen Verfahren ein Gemisch von cis- und trans-geometrischen Isomeren erzeugt wird, können diese gewünschtenfalls durch übliche Techniken getrennt werden, z. B. durch Kristallisation, fraktionierte Kristallisation oder Chromatographie. In ähnlicher Weise kann, wo die Verbindungen eine Oximgruppe, in der 7-Seitenkette enthalten und als Gemisch von syn- und anti-isomeren erhalten werden, das syn-Isomere durch solche üblichen Methoden erhalten werden.

Um die Auftrennung der cis- und trans-isomeren zu erleichtern, kann es zweckmäßig sein, das Gemisch der Cephalosporin-cis- und -trans-isomeren zu den entsprechenden Sulfoxiden zu oxidieren, die cis- und transisomeren durch vorstehend beschriebene Methoden zu trennen und gewünschtenfalls die Sulfoxide zu den erforderlichen Sulfiden zu reduzieren, beispielsweise durch die hier beschriebenen Methoden.

Falls notwendig und/oder erwünscht, kann das cis-Isomere zu dem entsprechenden trans-isomeren isomerisiert werden, beispielsweise durch Erhitzen eines Gemisches der cis- und trans-isomeren in einem inerten Lösungsmittel, wie Toluol, bei einer Temperatur von beispielsweise 80 bis 110 °C.

In einigen Fällen, beispielsweise wenn kein Oximsubstituent vorhanden ist, kann das Reaktionsgemisch vorteilhaft einen Isomerisationskatalysator, wie Jod, enthalten.

Metabolisch labile Esterderivate der Verbindungen der Formel (Ia) können hergestellt werden durch Reaktion der Verbindung der Formel (Ia) oder eines Salzes oder geschützten Derivats davon mit dem geeigneten, verestemden Mittel, wie einem Acyloxyalkylhalogenid (z. B. Jodid), zweckmäßig in einem inerten, organischen Lösungsmittel, wie Dimethylformamid oder Aceton, und anschließend, falls erforderlich, Entfernung irgendwelcher Schutzgruppen.

Basensalze der Verbindungen der Formel (I) oder (Ia) können gebildet werden durch Reaktion der Säure der Formel (I) oder (Ia) mit einer entsprechenden Base. So können beispielsweise Natrium- oder Kaliumsalze unter Verwendung des jeweiligen 2-Ethylhexanoat- oder Hydrogencarbonatsalzes hergestellt werden. Säureadditionssalze können hergestellt werden durch Reaktion einer Verbindung der Formel (I) oder (Ia) oder eines metabolisch labilen Esterderivats davon mit einer zweckentsprechenden Säure.

Verbindungen der Formel (II) (d. h. Verbindungen der Formel (I), worin R eine Aminogruppe bedeutet), die als Ausgangsmaterialien verwendet werden, können allgemein durch N-Desacylierung einer Verbindung der Formel (I), worin R eine acylierte Aminogruppe bedeutet, hergestellt werden, wobei die Acylgruppe unter geeigneten Bedingungen entfernt werden kann. Insbesondere können diese Ausgangsmaterialien hergestellt werden durch N-Desacylierung einer Verbindung der Formel (X)

Η H

CH=CH-C^C-R2 ,(X) -9-

Nr. 391 319 ο ο 4 (worin R , R , B und die gestrichelte Linie wie vorstehend definiert sind und R eine carboxylische Acylgruppe bedeutet, ausgewählt aus beispielsweise Formyl, Phenoxyacetyl, Phenylacetyl, substituiertem Phenoxy- oder Phenylacetyl, Thienylacetyl oder 5-Amino-adipoyl, oder das letztere hat eine oder beide der Carboxyl- und Aminogruppen blockiert; oder t-Butoxycarbonyl oder solche Kohlensäureacylgruppen bzw.

Alkoxycarbonylgruppen; oder die Gruppe R4 und das benachbarte Wasserstoffatom bedeuten zusammen eine Diacylgruppierung, abgeleitet von einer Dicarbonsäure, z, B. eine Phthalimido- oder Maleimidogruppe, wobei demnach R4NH eine N-verknüpfte, heterocyclische Gruppe ist). Die N-Desacylierung kann in üblicher Weise erfolgen, z. B. unter Verwendung von PClg, wie in der GB-PS 1 241 655 beschrieben.

Die Verbindungen der Formel (X) können durch Reaktion einer Verbindung der Formel (IV)

.(IV) in welcher R^, R4, B und die punktierte Linie die vorstehend beschriebene Bedeutung haben, und Y ein Substituent ist, der mit einem oder mehreren Reagenzien reagieren kann, um eine Gruppe der Formel -CH=CH- C^CR^ in Position 3 zu bilden oder einzuführen, mit einem oder mehreren Reagenzien.

Beispiele von Verbindungen der Formel (IV), die als Ausgangsmaterial bei der Herstellung von Verbindungen der Formel (X) angewendet werden, umfassen Verbindungen, bei welchen Y eine Gruppe bedeutet, die ausgewählt ist von: (i) CH-PRe3 [worin die Gruppen Re, welche gleich oder verschieden sein können, Alkyl-, Aralkyl-, Aryloder Dialkylaminogruppen sind oder eine solche Gruppe sind, substituiert durch ein oder mehrere Halogenatome, Nitrogruppen, Cyanogruppen, Aminogruppen, substituierte Aminogruppen (z. B. Alkyl- oder Acyl-substituierte Aminogruppen) oder Acylgruppen] oder eine zwitterionische Form der Gruppe; und (ii) CH2Q [worin Q die Gruppe [PR^] © bedeutet (worin Re wie vorstehend definiert ist) oder die Gruppe f f P(0)R 2. worin die Gruppen R , welche gleich oder verschieden sein können, eine Alkoxy-, Aryloxy- oder Aralkyloxygruppe bedeuten, wobei diese Gruppen gegebenenfalls durch ein oder mehrere Halogenatome, Nitrogruppen, Cyanogruppen, Aminogruppen, substituierte Aminogruppen (z. B. Alkyl- oder Acyl-substituierte Aminogruppen) oder Acylgruppen substituiert sein können].

Die Reaktion kann in einem inerten Lösungsmittel, vorzugsweise einem inerten, organischen Lösungsmittel, und zweckmäßig bei einer Temperatur von -80 bis +120 °C, vorzugsweise 0 bis 80 °C, durchgeführt werden. Geeignete, inerte, organische Lösungsmittel umfassen beispielsweise einen Kohlenwasserstoff, wie Benzol oder Toluol; einen halogenierten Kohlenwasserstoff, z. B. Dichlormethan; einen Ether, z. B. Diethylether, Tetrahydrofuran oder Dioxan; ein Amid, z. B. Dimethylformamid, Dimethylacetamid oder Hexamethylphosphoramid; ein Sulfoxid, z. B. Dimethylsulfoxid; oder ein Sulfon, z. B. Sulfolan.

Insbesondere kann eine Verbindung der Formel (X) hergestellt werden, indem eine Verbindung der Formel (IV), worin Y die Gruppe -CH=PRe3 oder eine zwitterionische Form davon bedeutet, mit einer Carbonylverbindung der Formel (V) (V)

R2C=C-CHO

9 9 umgesetzt wird, worin R^ wie vorstehend für R definiert ist oder eine Trialkylsilylgruppe bedeutet, worin die -10-

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Alkylgruppen gleich oder verschieden sein können und ausgewählt sein können beispielsweise aus Cj.g-Alkyl, z. B. Methyl.

Die Reaktion wird vorzugsweise in einem Zwei-Phasen-System, das Wasser und ein mit Wasser nicht mischbares, organisches Lösungsmittel enthält, wie einen halogenierten Kohlenwasserstoff, z. B. Dichlormethan, durchgeführt.

Die Verbindungen der Formel (IV), worin Y die Gruppe -CH=PRe3 bedeutet, können in situ aus einer Phosponiumverbindung der Formel -CH2®PRe3 durch Reaktion mit einer Base gebildet werden. Geeignete Basen umfassen beispielsweise Alkalimetall- und Erdalkalimetallhydroxide, -carbonate und -hydrogencarbonate, z. B. Natriumhydroxid oder Natriumhydrogencarbonat; Dinatriumhydrogenphosphat; Hydride, z. B. Natriumhydrid; und organische Basen, wie tertiäre Stickstoffbasen, z. B. Triethylamin; oder Alkyllithiate, z. B. Butyllithium.

Die Zwischenverbindung, gebildet bei der obigen Reaktion von einer Verbindung der Formel (IV) mit einer Verbindung der Formel (V), worin R^ eine Trialkylsilylgruppe ist, kann zu einer Verbindung, worin R^ Wasserstoff ist, umgewandelt werden durch Reaktion mit beispielsweise Silbernitrat und Kaliumcyanid. Zusätzlich kann eine Verbindung der Formel (IV), worin Y die Gruppe -CHjQ bedeutet, oder ein Salz davon, mit einer Carbonylverbindung der Formel (V) in Gegenwart einer Base, zur Bildung einer Verbindung der Formel (X), umgesetzt werden. Zweckmäßige Basen umfassen solche, wie vorstehend beschrieben.

Die Verbindungen der Formel (IV), worin Y die Gruppen -CH=PRe3 oder -CH2Q bedeutet, können in üblicher Weise hergestellt werden, beispielsweise nach den in der britischen Patentschrift 1 342 241 oder der EP-A-30630 beschriebenen Methoden.

Alternativ kann die Verbindung der Formel (II) aus einer 7-Aminocephalosporin-Verbindung nach Methoden, analog dem vorstehenden Verfahren, hergestellt werden. Säuren der Formel (III) können nach üblichen Techniken hergestellt werden.

Zur Verwendung als Ausgangsmaterialien für die Herstellung von Verbindungen gemäß der Erfindung, worin die 7-Seitenkette eine Oximgruppe enthält, werden die Verbindungen der allgemeinen Formel (III) und die dementsprechenden Säurehalogenide und -anhydride vorzugsweise in ihrer syn-isomeren Form oder in Form von Gemischen der syn-isomeren und der entsprechenden anti-isomeren, die mindestens 90 % des syn-isomeren enthalten, verwendet

Es sei erwähnt, daß es bei einigen der obigen Umwandlungen notwendig sein kann, irgendwelche empfindlichen Gruppen in der in Frage stehenden Verbindung zu schützen, um unerwünschte Nebenreaktionen zu vermeiden. Geeignete Schutzgruppen sind beispielsweise beschrieben in "Protective Groups in Organic Chemistry", von J. F. W. McOmie (Plenum Press, London, 1973), und "Protective Groups in Organic Synthesis" von Theodora W. Greene (Wiley Interscience, New York, 1981). Beispielsweise kann während irgendeiner der oben erwähnten Reaktionsfolgen es notwendig sein, irgendwelche NH2-Gruppen zu schützen, z. B. in einem Aminothiazolyl-Teil, beispielsweise durch Tritylierung, Acylierung (z. B. Chloracetylierung oder Formylierung), Protonierung oder andere, geeignete Methoden. Die Schutzgruppe kann danach in irgendeiner geeigneten Weise, welche nicht den Zerfall der gewünschten Verbindung verursacht, entfernt werden, z. B. im Falle einer Tritylgruppe durch Verwendung einer gegebenenfalls halogenierten Carbonsäure, z. B. Essigsäure, Ameisensäure, Chloressigsäure oder Trifluoressigsäure, oder durch Verwendung einer Mineralsäure, z. B. Chlorwasserstoffsäure, oder Gemischen solcher Säuren, vorzugsweise in Gegenwart eines protischen Lösungsmittels, wie Wasser, oder im Falle einer Chloracetylgruppe durch Behandlung mit Thiohamstoff.

Carboxyl-blockierende oder Hydroxyl-schützende Gruppen, die bei der Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen oder bei der Herstellung der notwendigen Ausgangsmaterialien verwendet werden, sind wünschenswerter Weise Gruppen, welche in einem geeigneten Stadium in der Reaktionsfolge, zweckmäßig in der letzten Stufe, leicht abgespalten werden können. Es kann jedoch in einigen Fällen zweckmäßig sein, nichttoxische, metabolisch labile, Carboxyl-blockierende Gruppen, wie Acyloxymethyl- oder -ethylgruppen (z. B. Acetoxymethyl oder -ethyl oder Pivaloyloxymethyl), zu verwenden und diese in dem Endprodukt zu behalten, um ein geeignetes Esterderivat der Verbindung der Formel (Ia) zu ergeben.

Geeignete Carboxyl-blockierende und Hydroxyl-schützende Gruppen sind auf dem Fachgebiet gut bekannt, eine Liste repräsentativer, blockierender Carboxylgruppen ist in der GB-PS 1 399 086 eingeschlossen. Bevorzugte, blockierte Carboxylgruppen umfassen Aryl-niedrigalkoxycarbonyl-Gruppen, wie p-Methoxybenzyloxycarbonyl, p-Nitrobenzyloxycarbonyl und Diphenylmethoxycarbonyl; Niedrigalkoxycarbonylgruppen, wie t-Butoxycarbonyl; und Niedrighalogenalkoxycarbonylgruppen, wie 2,2,2- , Trichlorethoxycarbonyl. Repräsentative Hydroxyl-schützende Gruppen sind Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- und Acylgruppen. Die blockierenden und/oder schützenden Gruppen können anschließend durch irgendeine der geeigneten Methoden, die in der Literatur beschrieben sind, entfernt werden. So ist beispielsweise in vielen Fällen die Säuren- oder Basen-katalysierte Hydrolyse sowie enzymatisch-katalysierte Hydrolysen anwendbar.

Die antibiotischen Verbindungen gemäß der Erfindung können für die Verabreichung in irgendeiner geeigneten Weise formuliert werden, in Analogie mit anderen Antibiotika und die Erfindung führt daher zu pharmazeutischen -11-

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Zusammensetzungen, die eine antibiotische Verbindung gemäß der Erfindung, angepaßt zur Vewendung in der Human- oder Veterinärmedizin, umfassen. Solche Zusammensetzungen können zur Verwendung in üblicher Weise mit Hilfe irgendwelcher notwendiger, pharmazeutischer Träger oder Exzipienten dargeboten werden.

Die Zusammensetzungen können in einer Form, die zur Absorption durch den Gastrointestinal-Trakt geeignet ist, dargeboten werden, besonders wo der aktive Bestandteil orale Absorption, wie das oben erwähnte, besonders bevorzugte trans-isomere, aufweist. Tabletten und Kapseln zur oralen Verabreichung können in Einheitsdosisform vorliegen und können übliche Exzipienten enthalten, wie Bindemittel, z. B. Sirup, Akaziengummi, Gelatine, Sorbit, Tragant oder Polyvinylpyrrolidon; Füllstoffe, wie z. B. Lactose, Zucker, Maisstärke, Calciumphosphat, Sorbit oder Glycin; Tabletten-Gleitmittel, z. B. Magnesiumstearat, Talk, Polyethylenglykol, Siliciumdioxid; Zerfallmittel, z. B. Kartoffelstärke, oder annehmbare Netzmittel, wie Natriumlaurylsulfat. Die Tabletten können nach in der Fachwelt bekannten Methoden überzogen werden. Orale, flüssige Präparate können in Form von wäßrigen oder öligen Suspensionen, Lösungen, Emulsionen, Sirupen oder Elixieren sein oder können als trockenes Produkt zur Zubereitung mit Wasser oder einem anderen geeigneten Träger vor der Verwendung dargeboten werden. Solche flüssigen Präparate können übliche Zusätze enthalten, wie Suspendiermittel, z. B. Sorbitsirup, Methylcellulose, Glucose/Zuckersirup, Gelatine, Hydroxyethylcellulose, Carboxymethylcellulose, Aliminiumstearatgel oder hydrierte, eßbare Fette; Emulgiermittel, z. B. Lecithin, Sorbitanmonooleat oder Akaziengummi; nicht-wäßrige Träger können eßbare Öle, z. B. Mandelöl, frakdoniertes Kokosnußöl, ölige Ester, Propylenglykol oder Ethylalkohol einschließen; Konservierungsmittel, z. B. Methyl- oder Propyl-p-hydroxybenzoate oder Sorbinsäure. Suppositorien werden übliche Suppositorienbasen, z. B. Kakaobutter oder andere Glyceride, enthalten.

Die andbioüschen, erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen können auch zur Injektion formuliert werden und können in Einheitsdosisform, in Ampullen oder in Mehrfachdosisbehältem, falls notwendig mit einem zugesetzten Konservierungsmittel, dargeboten werden. Die Zusammensetzungen können auch solche Formen, wie Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen, in öligen oder wäßrigen Trägern haben und können Formulierungsmittel, wie Suspendier-, Stabilisier- und/oder Dispergiermittel, enthalten. Alternativ kann der aktive Bestandteil in Pulverform zur Zubereitung mit einem geeigneten Träger, z. B. sterilem, pyrogenfreiem Wasser, vor der Verwendung vorliegen.

Gewünschtenfalls können solche Pulverformulierungen eine geeignete, nicht-toxische Base enthalten, damit die Wasserlöslichkeit des aktiven Bestandteils verbessert und/oder sichergestellt wird, daß, wenn das Pulver mit Wasser zubereitet wird, das pH der entstehenden, wäßrigen Formulierung physiologisch annehmbar ist Alternativ kann die Base in dem Wasser, mit dem das Pulver zubereitet wird, vorhanden sein. Die Base kann beispielsweise eine anorganische Base, wie Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat oder Natriumacetat, oder eine organische Base, wie Lysin oder Lysinacetat, sein.

Zusammensetzungen für die Veterinärmedizin können beispielsweise als intramammare Präparate in entweder langwiikenden oder kurzzeitig abgebenden Grundstoffen formuliert sein.

Die Zusammensetzungen können von 0,1 %, aufwärts, z. B. 0,1 bis 99 %, des aktiven Materials, in Abhängigkeit von der Methode der Verabreichung, enthalten. Wenn die Zusammensetzungen Dosiseinheiten umfassen, wird jede Einheit vorzugsweise 50 bis 3000 mg, z. B. 100 bis 2000 mg, des aktiven Bestandteils enthalten. Die Dosierung, wie sie für einen Erwachsenen in der Humanmedizin verwendet wird, wird vorzugsweise im Bereich von 200 bis 12 000 mg, z. B. 500 bis 6000 mg/Tag, liegen, in Abhängigkeit von dem Verabreichungsweg und der Häufigkeit der Verabreichung, der Natur der Infektion und der Aktivität des Antibiotikums gegen den infizierenden Organismus. Beispielsweise werden bei der humanmedizinischen Behandlung des Erwachsenen 500 bis 4000 mg/Tag, intravenös oder intramuskulär verabreicht, normalerweise ausreichen. Zur oralen Verabreichung an Erwachsene wird die tägliche Dosis in dem Bereich von 200 bis 4000 mg/Tag, z. B. 500 bis 2000 mg/Tag, und für Kinder in dem Bereich von beispielsweise 125 bis 1000 mg/Tag liegen.

Durch die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen ist eine Möglichkeit zur Bekämpfung bakterieller Infektionen bei Mensch und Tier gegeben, wobei eine antibakteriell wirksame Menge einer antibiotischen Verbindung der Formel Ia, wie vorstehend definiert, oder ein nicht-toxisches Salz oder nichttoxischer, metabolisch labiler Ester davon prophylaktisch oder therapeutisch an das zu behandelnde Subjekt verabreicht wird.

Die Erfindung schafft zusätzlich die Verwendung einer Verbindung der Formel Ia, wie vorstehend definiert, oder eines nicht-toxischen Salzes oder nicht-toxischen, metabolisch labilen Esters davon zur Erzeugung einer pharmazeutischen oder Veterinärzusammensetzung zur Verwendung bei der Bekämpfung bakterieller Infektionen in Menschen und Tieren.

Die antibiotischen Verbindungen gemäß der Erfindung können in Kombination mit anderen therapeutischen Mitteln, wie Antibiotika, z. B. Penicillinen oder anderen Cephalosporinen, verabreicht werden.

Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung. Alle Temperaturen sind in °C angegeben.

Herstellung 1

Diphenvlmethvl-f6R. 7RV7-formamido-3-r(EV und (ZVpent-l-en-3-invl~)l-ceph-3-em-4-carboxvlat

Eine gerührte Lösung von 7,61 g (6R, 7R)-[4-Diphenylmethoxycarbonyl-7-formamido-ceph-3-em-yl-methyl]-triphenylphosphoniumbromid in 100 ml Dichlormethan wurde mit 60 ml gesättigter Natriumbicarbonatlösung -12-

Nr. 391 319 behandelt. Nach 5 min wurden 1,38 g But-2-inal zugesetzt und das Gemisch wurde 3 h gerührt. Die Phasen wurden getrennt und die organische Phase wurde mit Wasser, 2M Salzsäure, Wasser und Salzlösung (jeweils 200 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (200 g Silikagel) unter Eluieren mit Ethylacetat-Dichlormethan (1 : 9) gereinigt und ergab ein Gemisch der Titelverbindungen als Feststoff (2,18 g); (E): (Z) = 1:3, Xmax (Ethanol) 258,5 nm (ε 4600), 265,5 nm (ε 4600), 325 nm (ε 17 500); vmax(CHBr3) 3415 (NH), 2210 (C=C), 1786 (ß-Lactam), 1722 (C02R), 1700, 1500 cm'1 (HCONH); τ (DMSO-d6) 3,42, 4,30 (CH=CH-C=C-, Z-Isomeres), 3,87 (-CH=CH-C=C, E-Isomeres), 5,70, 6,07 (2-CH2, Z-Isomeres), 6,06, 6,35 (2-CH2, E-Isomeres), 7,97 (-C=C-CH3).

Herstellung 2

DiDhenvlmethvl-(6R.7R)-7-formamido-3-IYEVpent-l-en-3-invll-ceDh-3-em-4-carboxvlat

Eine Lösung von 2,11 g Produkt von Herstellung 5 in 100 ml Toluol, enthaltend einen Kristall Jod, wurde 5 h unter Stickstoff zum Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde der ausgefallene Feststoff abfiltriert, mit Toluol und Ether gewaschen und getrocknet und ergab 794 mg Titelverbindung als feine Nadeln. Die Mutterlaugen wurden wiederverarbeitet und chromatographiert und ergaben 796 mg weiteres Material. Die Titelverbindung zeigte Xmax (Ethanol) 328 nm (ε 26 100); vmax(CHBr3) 3415,3340 (NH), 2215 (C=C-), 1786 (ß-Lactam), 1725 (C02R), 1698,1500 cm'1 (CONH); τ (CDC13) 1,80 (CHO), 3,02 (CHPh2), 3,44 (NH), 4,13 (7H), 4,20 (-CH=CH-CeC), 5,03 (6H), 6,45 und 6,56 (2-CH2), 8,01 (CH3).

Herstellung 3

DiDhenvlmethvl-(6R· 7RV7-amino-3- ΚΈΊ-pent-1 -en-3-in vH -ceDh-3-em-4-carboxvlat-hvdrochlorid

Eine gerührte Lösung von 710 mg Produkt von Herstellung 6 in 5 ml Methanol und 5 ml Ether wurde tropfenweise mit 0,29 ml Phosphoroxychlorid bei 0°-behandelt. Das Reaktionsgemisch wurde während 90 min auf 20° erwärmen gelassen und die entstandene Lösung durch Verdampfen auf 2 ml eingeengt und zu 50 ml Ether gegeben und ergab 534 mg Titel-Hydrochlorid als Feststoff; Xmax(Ethanol) 270 nm (ε 4800), 328 nm (ε 22 600); vmax (Nujol) 2600 (NH3), 2210 (C=C), 1782 (ß-Lactam), 1718 cm'1 (C02R); τ (DMSO-d6) 2,92 (-CH=CH-C=C), 3,74 (CH=CH-C=C), 5,99,6,26 (2-CH2) und 7,97 (C=C-CH3).

Herstellung 4

Diphenvlmethvl-löR. 7RV7-amino-3-r fEVpent-1 -en-3-invll-ceph-3-em4-carhoxvlat

Eine Lösung von 10 g Produkt von Herstellung 7 in 100 ml Dichlormethan wurde 5 min mit 100 ml Natriumbicarbonaüösung geschüttelt. Aufarbeitung der organischen Phase lieferte 942 mg Titelverbindung als Schaum; τ (CDC13) 2,84 (-CH=CH-C=C), 4,24 (-CH=CH-C=C), 5,05 (7H), 5,26 (6H), 8,03 (C=C-CH3).

Herstellung 5

Diphenvlmethvl-(6R. 7Rl-7-formamido-3-r(EV und (ZVpent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-carhnxvlat

Zu einer Lösung von 56,5 g (6R, 7R)-[4-Diphenylmethoxycarbonyl-7-formamido-ceph-3-em-3-yl-methyl]-triphenyl-phosphoniumbromid in 700 ml Dichlormethan wurden 450 ml gesättigtes, wäßriges Natriumbicarbonat unter kräftigem Rühren bei 21° wahrend 5 min zugesetzt. But-2-inal wurde zugesetzt und das Zwei-Phasen-Gemisch 1 h bei 21° gerührt und dann 15 h bei 10° stehengelassen. Die Phasen wurden getrennt und die wäßrige Phase mit 2 x 200 ml Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden nacheinander mit 500 ml Wasser, 500 ml 2M wäßriger HCl, 500 ml Wasser und 500 ml gesättigter Salzlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Entfernung des Lösungsmittels im Vakuum ergab einen Schaum, welcher auf Merck Kieselgel 60 (230-400 Maschen) (1,3 kg) chromatographiert und nacheinander mit Ethylacetat-Dichlormethan (1 : 9) bzw. (1 : 5) eluiert wurde. Geeignete Fraktionen wurden vereinigt und ergaben die Titelverbindungen als Feststoff (13,80 g); (Ε): (Z) = 1:4 mittels ^-NMR; Xmax(Ethanol) 264,5 nm (ε 5000) und 323 nm (ε 18 000); vmax (CHBr3) und τ (DMSO-dg): die Werte sind ähnlich wie bei Herstellung 1.

Herstellung 6

Diphenvlmethvl-(6R.7R)-7-fonnamido-3-r(E')-pent-l-en-3-invll-cenh-3-em4-carhoxvlat

Ein 1:4 Gemisch (bestimmt durch ^H-NMR) von 13,75 g Diphenylmethyl-(6R, 7R)-7-formamido-3-[(E)- und (Z)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carboxylat wurde in 600 ml Toluol suspendiert, einige Jodkristalle zugesetzt und das Gemisch 5 h unter Stickstoff zum Rückfluß erhitzt. Weitere Jodkristalle wurden nach jeder Stunde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde in Eis gekühlt und ein Impfkristall der Titelverbindung zugesetzt. Der -13-

Nr. 391 319 entstehende Niederschlag wurde abfiltriert, nacheinander mit 2 x 30 ml kaltem Toluol und 2 x 30 ml Ether gewaschen und getrocknet und ergab 6,87 g eines Feststoffs, der aus 500 ml Methanol umkristallisiert wurde und die Titelverbindung als feine Nadeln ergab (4,56 g); [a]^D = -125° (c = 0,53 in CHCI3); Xmax(Ethanol) 327 nm (ε 26 600); vmax (CHBr^) und τ (CDCI3): die Werte sind ähnlich wie bei Herstellung 2. Die Methanol-Mutterlauge wurde zu einem Rückstand eingeengt, der mit der Toluol-Mutterlauge vereinigt wurde, und das Gemisch wurde auf 300 ml eingeengt. Das obige Verfahren wurde viermal wiederholt, um insgesamt 4,80 g Titelveibindung als feine Nadeln zu ergeben.

Beispiel 1 falDiphenvlmethvl-('6R.7RV7-r(,ZV2-fcarbamovlmethoxviminoV2-C2-tritvlaminothiazol4-vlVacetamidol-3- Γ (EVnent-1 -en-3-invll-ceDh-3-em-4-carbox vlat

Eine gerührte Lösung von 432 mg Diphenylmethyl-(6R, 7R)-7-amino-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3-em4-carboxylat, Hydrochlorid, in 10 ml Tetrahydrofuran wurde mit 125 μΐ Triethylamin behandelt. 441 mg (Z)-2-(Carbamoylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-essigsäure, 162 mg 1-Hydroxybenzotriazolhydrat und 248 mg NN’-Dicyclohexylcarbodiimid wurden in dieser Reihenfolge zugesetzt. Nach 3 h wurde der ausgefallene NJ^-Dicyclohexylhamstoff abfiltriert, das Filtrat eingedampft und der Rückstand durch Säulenchromatographie (60 g Silikagel) gereinigt. Eluieren mit Ethylacetat-Dichlormethan (1 : 3) ergab 441 mg Titelverbindung als Schaum; vmax (CHBr3) 3500, 3398 (NH2 + NH), 2215 (C=C), 1786 (ß-Lactam), 1722 (C02R), 1682, 1528 cm’1 (CONH); τ (CDC13) 4,24 (CH=CH-C=C), 5,33 (OCH2CONH2), 6,48, 6,60 (2-CH2), 8,02 (C=CCH3). (bK6R.7RV-7-ri2^-2-fCarbamovlmethoxviminoV2-f2-aminothiazol4-vlVacetamidol-3-r(EVt)ent-l-en-3-invn- ceph-3-em4-caibonsäure. Trifluoraeetatsalz 4 ml Trifluoressigsäure wurden zu einer gerührten Lösung von 375 mg Produkt von Stufe (a) in 1 ml Anisol gegeben. Nach 45 min wurde die Reaktionsmischung tropfenweise zu 50 ml rasch gerührtem Wasser gegeben. Nach 5 min wurde die wäßrige Lösung mit 4 x 50 ml Ether gewaschen und jeweils mit 10 ml Wasser rückgewaschen. Die wäßrige Lösung wurde auf 50 ml eingeengt und gefriergetrocknet und ergab 216 mg Titelverbindung als Schaum; Xmax (Ethanol) 237 nm (ε 19 700) und 319 nm (ε 28 200); vmax (Nujol) 3300 (NH), 2205 (-C=C-) und 1772 cm'1 (ß-Lactam); τ (DMSO-dg) 0,14 (-CONH), 2,55, 2,90 (-CONH2), 2,95 (-CE=CH-C=C), 3,94 (-CH=CH-C=C), 4,15 (7H), 4,76 (6H), 5,54 (OCH2CONH2), 7,99 (C=C-CH3).

Beispiel 2 (a) C6R. 7RV7-rrZV2-Methoxvcarbonvlmethoxvimino-2-('2-tritvlaminothiazol4-vl')-acetamido1-3-rrE')-pent-l- en-3-invll-ceph-3-em4-carboxvlat

Eine Lösung von 0,14 ml Oxalychlorid in 2 ml Dichlormethan wurde tropfenweise im Verlauf von 5 min zu einer Lösung von 0,17 ml DMF in 7 ml Dichlormethan bei -15° unter Sticktoff und Rühren gegeben. Diese Lösung wurde bei < -5° gerührt, wobei ein weißer Niederschlag gebildet wurde. Diese Mischung wurde auf -10° gekühlt und 0,83 g (Z)-2-(Methoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylamino4-thiazolyl)-essigsäure wurden in einer Portion zugesetzt. Nach Auflösen erhielt man eine klare braune Lösung, die 0,5 h bei -5° gerührt wurde, bevor sie erneut auf -10° abgekühlt wurde. Zwischenzeitlich wurden 0,42 ml NN-Dimethylanilin und 0,20 ml Triethylamin zu einer Lösung des Produktes von Herstellung 7 in 11 ml Dichlormethan bei -25° gegeben. Die Lösung der aktiven Seitenkette wurde zugesetzt und das Gemisch während 2,5 h auf 10° erwärmen gelassen. 21 ml Wasser wurden zugegeben und die Schichten geschüttelt. Die organische Schicht wurde abgetrennt und mit 2N Salzsäure, Wasser, wäßriger Natriumbicarbonatlösung und gesättigter Salzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wurde durch Chromatographie über Silikagel unter Eluieren mit Ethylacatat-Petrolether gereinigt; man erhielt 0,81 g Titelverbindung als Schaum; vmax (CHBr3) 3393, 3280 (NH), 2215 (C=C), 1787 cm4 (ß-Lactam); τ (CDC13) 1,78 (CONH), 4,10 (7H), 4,20 (-CH=CH-C=Q, 4,92 (6H), 5,12 (-0CH2C02), 6,25 (-C02CH3), 8,00 (CHC-CH3). (b)(6R.7RV7-r(ZW2-Methoxvcarixfflvhnethoxvimino-2-(2-aminothiazol4-vlVacetamidol-3-r(EVpent-l-en-3- invll-ceDh-3-em4-cafhoxvlat

Man gab 6 ml Wasser zu einer Lösung des Produktes der Stufe (a) in 15 ml Ameisensäure und erhitzte das Gemisch 15 min auf 50°. Die Suspension konnte auf Zimmertemperatur abkühlen und wurde dann filtriert. Der Feststoff wurde mit Ameisensäure-Wasser (3:1) gewaschen. Die vereinigten Waschwasser und das Filtrat wurden zu einem hellbraunen Gummi eingedampft. Dieses Gummi wurde mit Ether verrieben und der erhaltene Feststoff -14-

Nr. 391 319 abfiltriert, mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet. Man erhielt 0,33 g Titelverbindung als weißen Feststoff; vmax (Nujol) 3320 (NH), 2220 (C=C), 1770 cm’1 (ß-Lactam; τ (DMSO-d6) 0,45 (CONH), 2,94 (-CH=CH-C=C), 3,96 (-CH=CH-CeC), 4,20 (7H), 4,79 (6H), 5,31 (-0CH2C02), 6,31 (-C02CH3), 8,00 (C=C-CH3).

Beispiel 3 (a) Diphenvlmethvl-(6R. 7RV7-i(,ZV2-fmethoxvcarhonvlmethoxviminoV2-<'2-tritvlaminothia7ol-4-vl')-acetamido1-3-r(EVpent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-carboxvlat

Eine Lösung von 0,14 ml Oxalylchlorid in 2 ml Dichlormethan wurde tropfenweise während 10 min zu einer gerührten Lösung von 0,3 ml Dimethylformamid DMF in 3 ml Dichlormethan bei -15° unter Stickstoff gegeben. Nach 30 min bei < -5° wurde die weiße Suspension auf -10° abgekühlt und 1,126 g (Z)-2-(Trityloxyimino)-2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-essigsäure in einer Portion zugegeben. Die resultierende, klare, gelbe Lösung wurde 30 min bei -5 bis 0° gehalten, bevor sie auf -10° erneut abgekühlt wurde. Diese Lösung wurde während 1 min zu einer gerührten Lösung des Produktes von Herstellung 7 und 0,64 ml N,N-Dimethylanilin in 5 ml Dichlormethan bei -25° gegeben. Die Reaktionsmischung wurde während 1,5 h auf 5° erwärmen gelassen und zwischen 100 ml Dichlormethan und 100 ml 2M Salzsäure verteilt Die organische Phase wurde abgetrennt, mit 2M Salzsäure, Wasser, Natriumbicarbonatlösung, Wasser und Salzlösung (jeweils 100 ml) gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet Das Lösungsmittel wurde eingedampft und der Rückstand durch Chromatographie (60 g Silikagel) gereinigt. Eluieren mit Ethylacetat-Dichlormethan (1:50) ergab 1,25 g Titelverbindung als Schaum; Xmax (EtOH) 321,5 nm (ε 26 300); vmax (CHBr3) 3400 (NH), 2220 (CeC), 1790 cm'1 (ß-Lactam); τ (CDC13) 3,97 (7H), 4,28 (-CH=CH-C=C), 4,92 (6H), 8,02 (C=C.CH3). (b) C6R. 7R')-7-riZV2-ffl[vdroxviminoV2-i2-aminothiazol4-v0-acetamido1-3-r(E’)-pent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-carboxvlat. Trifluoracetatsalz 8 ml Trifluoressigsäure (FFA)wurden zu einer gerührten Lösung von 1,16 g Produkt von Stufe (a) in 2 ml Anisol gegeben. Nach 45 min wurde die Reaktionsmischung tropfenweise zu 100 ml rasch gerührtes Wasser gegeben. Nach 5 min wurde die wäßrige Lösung mit 4 x 100 ml Ether gewaschen und mitjeweils 10 ml Wasser rückgewaschen. Die wäßrige Lösung wurde auf 100 ml eingeengt und gefriergetrocknet und ergab 143 mg Titelverbindung als Schaum. Die Etherextrakte wurden eingedampft und der Rückstand mit 4 ml TFA und 1 ml Anisol, wie oben, behandelt. Man erhielt weitere 181 mg Titelverbindung als Schaum; vmax (Nujol) 3280 (NH), 2210 (CEC), 1770 cm'1 (ß-Lactam); τ (DMSO-dg) 0,46 (CONH), 2,93 (-CH=CH-C=C), 3,91 (-CH=CH-CEQ, 4,19 (7H), 4,79 (6H), 7,98 (CEC-CH3).

Beispiel 4 ('a)DiDhenvlmethvl-f6R.7RV7-r(ZV2-('ethoxviminol-2-('2-tritvlaminothiazol4-vl)-acetamido1-3-rfEVpent-l-en-3-invn-ceph-3-em-4-carboxvlat. Trifluoracetatsalz 582 mg Titelverbindung wurden als Schaum hergestellt, ausgehend von 755 mg (Z)-2-(Ethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-essigsäure und 700 mg Produkt von Herstellung 3, gemäß der Methode von Beispiel 3 (a); vmax (CHBr3) 3400 (NH), 2216 (CeC), 1790 cm'1 (ß-Lactam); τ (CDC13) 3,15 (CONH), 4,06 (7H), 4,23 (-CH=CH-CEC), 4,93 (6H), 5,66 (OCH2-), 8,02 (CEC-CH3), 8,66 (0-CH2CH3). fbl föR. 7R')-7-rt2V2-(EthQxviminoV2-i2-aminothiazol-4-v0-acetamido1-3-i(EVpent-l-en-3-invn-ceph-3-em4-carbonsäure 288 mg Titelverbindung wurden als Feststoff aus dem Produkt von Stufe (a) gemäß der Methode von Beispiel 7(b) hergestellt; vmax(Nujol) 3300 (NH), 2210 (CeC), 1770 cm'1 (ß-Lactam); τ (DMSO-d6) 0,44 (CONH), 2,94 (-CH=CH-CEC), 3,93 (-CH=CH-C=C), 4,19 (7H), 4,78 (6H), 5,87 (-OCH2-), 7,98 (C=C-CH3), 8,73 (-OCH2CH3).

Beispiel 5 fa)J)iphenvlmethvl-f6R.7RV7-KZV2-ft-butoxvcarbonvlmethoxvimino)-2-(2-furvl)-acetamido1-3-IYEVpent-l- en-3-invn-ceph-3-em-4-carboxvlat 582 mg (Z)-2-(t-Butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-furyl)-essigsäure, 338 mg 1-Hydroxybenzotriazolhydrat -15-

Nr. 391 319 und 516 mg Ν,Ν'-Dicyclohexylcarbodiimid wurden in dieser Reihenfolge zu einer geröhrten Lösung des Produktes von Herstellung 8 in 15 ml Tetrahydrofuran (THF) gegeben. Nach 2 h wurde die Reaktionsmischung filtriert, das Filtrat eingedampft und der Rückstand in Ethylacetat aufgelöst und erneut filtriert. Das Ethylacetat wurde eingedampft und der Rückstand durch Chromatographie (60 g Silikagel) gereinigt. Ebneren mit Ethylacetat-Benzol (1:10) ergab 1,062 g Titelverbindung als Schaum; λιη3χ (EtOH) 288,5 nm (ε 19 600) und 326 nm (ε 20 500); vmax (CHBr3) 3380, 3260 (NH), 2220 (C=C), 1790 cm*1 (ß-Lactam); τ (CDC13) 1,32 (CONH), 4,08 (7H), 4,21 (-CH=CH-C=C), 4,89 (6H), 5,28 (-0CH2C02), 8,02 (C=C-CH3). fbH6R.7R)-7-rf2r>-2-fCafboxvmethoxviminoV2-f2-furvll-acetamidol-3-rfEVpent-l-en-3-invll-ceph-3-em4- carbonsäure 8 ml TFA wurden zu einer gerührten Lösung von 992 mg Produkt von Stufe (a) in 2 ml Anisol gegeben. Nach 45 min wurde die Lösung eingedampft, der Rückstand mit 20 ml Toluol azeotrop destilliert und in Ethylacetat gelöst Die organische Lösung wurde mit 3 x 50 ml Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Die vereinigten wäßrigen Extrakte wurden mit 100 ml Ethylacetat gewaschen und mit 100 ml 2M Salzsäure unter Ethylacetat auf pH 1,5 angesäuert. Die Schichten wurden getrennt und die wäßrige Phase mit 2 x 75 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden mit 2 x 200 ml Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhielt 669 mg Titelverbindung als Schaum; vmax (Nujol) 3250 (NH), 2205 (C=C), 1770 cm*1 (ß-Lactam); τ (DMSO-d6) 0,24 (NH), 2,90 (-CH=CH-C=C), 3,91 (-CH=CH-C=C), 4,14 (7H), 4,72 (6H), 5,30 (0CH2C02-), 7,96 (C=C-CH3).

Beispiel 6 falDiphenvlmethvl-f6R.7RV7-rfZV2-fmethoxviminoV2-f2-furvlVacetamidol-3-rfEVpent-l-en-3-invll-ceph-3- em-4-cafboxvlat 555 mg Titelverbindung wurden als Feststoff aus 355 mg (Z)-2-(2-Furyl)-2-(methoxyimino)-essigsäure und 886 mg Produkt von Herstellung 4 gemäß der Methode des Beispiels l(a) hergeslellt; vmax (CHBr3) 3400 (NH), 2220 (C=C), 1788 cm*1 (ß-Lactam); τ (CDC13) 4,06 (7H), 4,19 (-CH=CH-C=C), 4,91 (6H), 5,91 (-OCH3), 8.02 (C=C-CH3). (TA C6R. 7RV7-r(ZV2-fMethoxvimino')-2-('2-furvlVacetamidol-3-f(E'l-Pent-l-en-3-invll-ceDh-3-em-4- carbonsäure 318 mg Titelverbindung wurden als Schaum aus 487 mg Produkt von Stufe (a) gemäß der Methode des Beispiels 5 (b) hergestellt; vmax (Nujol) 3260 (NH), 2204 (C=C), 1778 cm*1 (ß-Lactam); τ (DMSO-dg) 0,17 (NH), 2,89 (-CH=CH-C=C), 3,89 (-CH=CH-C=C), 4,14 (7H), 4,72 (6H), 6,03 (-OCH3), 7,94 (-C=C-CH3).

Beispiel 7 faT Diphenvlmethvl-(’6R. 7R)-7-rfZl-2-(2-t-butoxvcarbonvlprop-2-oxvimino)-2-(2-tritvlaminothiazol-4-vfl-acetamido1-3-r(ET-pent-l-en-3-invl1-ceph-3-em4-carboxylat 959 mg Titelverbindung wurden als Schaum aus 1,143 ml (Z)-2-(2-t-Butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-essigsäure und 827 mg Produkt von Herstellung 7 gemäß der Methode von Beispiel 3 (a) hergestellt; vmax (CHBr3) 3400, 3260 (NH), 2220 (C=C), 1790 cm*1 (ß-Lactam); τ (CDC13) 1,93 (CONH), 4.03 (7H), 4,24 (-CH=CH-C=C), 4,94 (6H), 8,03 (C=C-CH3), 8,47,8,52 [C(CH3)2]. fbT (6R. 7RT-7-r(ZT-2-('2-CarboxvDrop-2-oxviminoV2-(2-aminothiazol4-vl')-acetamidol-3-r(EVpent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-cafboxvlat 8 ml TFA wurden zu einer gerührten Lösung von 914 mg Produkt von Stufe (a) in 2 ml Anisol bei 5° gegeben. Nach 15 min bei 5° und 30 min bei 20° wurde die Reaktionsmischung tropfenweise zu 200 ml schnell gerührtem Wasser gegeben. Nach 5 min wurde die wäßrige Phase mit 4 x 100 ml Ether gewaschen, auf 150 ml eingeengt und gefriergetrocknet, wobei man 20 mg eines blaßgelben Schaums erhielt. Die Etherextrakte wurden eingedampft und der Rückstand mit 2 ml TFA, wie oben, behandelt. Man erhielt 80 mg eines blaßgelben Schaums. Die Etherextrakte wurden auf 2 ml eingeengt und tropfenweise zu 150 ml schnell gerührtem Diisopropylether gegeben. Der entstandene Niederschlag wurde durch Filtrieren gesammelt, fünfmal mit Ether gewaschen und im Vakuum getrocknet, und ergab 90 mg eines weißlichen Pulvers. Die obigen drei Fraktionen waren aufgrund Umkehrphasen-TLC identisch (Acetonitril-Wasser; 1:4) und wurden vereinigt und ergaben -16-

Nr. 391 319 196 mg Titelverbindung als Feststoff; vmax (Nujol) 3300 (NH), 1778 cm'1 (ß-Lactam); x (DMSO-dg) 0,56 (CONH), 2,94 (-CH=CH-CHC), 3,93 (-CH=CH-C=jC-), 4,13 (7H), 4,75 (6H), 7,99 (C=C-CH3), 8,50 [-C(CH3)2).

Beispiel 8 fal Diphenvlmethvl-f6R. 7RW-rfZl-2-(t-butoxycarhonvlmethoxvimino’)-2-f2-tritvlaminothiazol-4-v1V acetamidol-3-r(E)-pent-l-en-3-invll-ceph-3-3m-4-carboxvlat

Zu einer gerührten Lösung aus 2,5 ml Dimethylformamid in 50 ml Dichlormethan, die unter Stickstoff auf -15° gekühlt war, wurde eine Lösung von 1,20 ml Oxalylchlorid in 15 ml Dichlormethan tropfenweise während 5 min gegeben und die entstandene Suspension wurde während 10 min auf -5° erwärmen gelassen. Das Gemisch wurde erneut auf -10° gekühlt und 6,40 g (Z)-2-(2-t-Butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-essigsäure wurden als Aufschlämmung in 3 ml Dichlormethan zugegeben. Die entstandene Lösung wurde 30 min bei -5° gerührt und erneut auf -10° abgekühlt. Zu einer gerührten Lösung von 5,50 g Diphenylmethyl-(6R, 7R)-7-amino-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]ceph-3-em-4-carboxylat-hydrochlorid und 6,0 ml Ν,Ν-Dimethylanüin in 45 ml Dichlormethan, die auf -25° gekühlt war, wurde unter Stickstoff rasch die Lösung der aktivierten Seitenkettensäure gegeben und die entstandene Lösung während 30 min auf 0° erwärmen gelassen und dann während 1 h auf 21°. Das Reaktionsgemisch wurde zwischen 500 ml 2M wäßriger Salzsäure und 900 ml Dichlormethan verteilt. Die organische Phase wurde abgetrennt, nacheinander mit 500 ml 2M wäßriger Salzsäure, 500 ml Wasser, 500 ml gesättigter, wäßriger Natriumbicarbonatlösung und 500 ml Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Man erhielt 11,90 g eines Schaums, der auf 500 g Merck Kieselgel 60 (70-230 mesh) unter Verwendung eines Eluiergemisches von Dichlormethan-Ethylacetat (19:1) chromatographiert wurde. Geeignete Fraktionen wurden vereinigt, auf 200 ml eingeengt, nacheinander mit 100 ml 2M wäßriger Salzsäure, 100 ml Wasser und 100 ml Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat 91 getrocknet und im Vakuum eingeengt und ergaben die Titelverbindung als Schaum (9,05 g); [cc] d - -107° (c = 0,94 in DMSO); λιη3χ (Ethanol) 324 nm (ε 28 500); vmax (CHBr3) 3390, 3260 (NH), 2210 (-C=C-), 1788 (ß-Lactam), 1728 (C02R), 1680,1524 cm'1 (-CONH-); x (CDC13) 4,23 (-CH=CH-C=C-CH3), 6,46,6,56 (2-CH2). (¾1) C6R. 7RV7-r(,ZV2-('2-Aminothiazol-4-vl~)-2-fcarboxvmethoxvimino')-acetamidol-3-r(E'>-pent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-cafbonsäure

Zu einer Lösung aus 3,37 g Produkt von Stufe (a) in 6 ml Anisol gab man 25 ml Trifluoressigsäure und rührte das Gemisch 1 h bei 21°. 5 ml Wasser wurden zugesetzt und das Rühren 45 min bei 21° fortgesetzt. Die Lösung wurde tropfenweise zu 600 ml rasch gerührtem Isopropylether gegeben und der entstandene Niederschlag abfiltriert, mit 2 x 20 ml Isopropylether gewaschen und getrocknet, wobei man 1,63 g eines Pulvers erhielt. Dieses wurde mit 50 ml gesättigtem, wäßrigem Bicarbonat und 100 ml Wasser behandelt. Wenn das Aufbrausen aufgehört hat, wurde die Suspension auf < 40° erwärmt und ergab eine Lösung, die an 100 g Diaion HP-20 Hatz der Firma Mitsubishi chromatographiert wurde, unter Eluieren nacheinander mit 500 ml Wasser, 300 ml 2%igem (Vol/Vol) wäßrigem Methanol und 700 ml 5%igem (Vol/Vol) wäßrigem Methanol. Geeignete Fraktionen wurden vereinigt, auf 500 ml eingeengt und die Lösung mit 36 % (Gew./Gew.) wäßriger Salzsäure auf pH 3,2 angesäuert. Die entstandene Suspension wurde mit 300 ml Ethylacetat-Tetrahydrofuran (2:1) extrahiert und die Phasen getrennt. Die wäßrige Phase wurde mit Natriumchlorid gesättigt und mit 2 x 300 ml Ethylacetat-Tetrahydrofuran (2:1) erneut extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden mit 200 ml Salzlösung gewaschen und das Salzlösungswaschwasser mit 2 x 150 ml Ethylacetat-Tetrahydrofuran (2:1) rückextrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingeengt, der mit 40 ml Diethylether verrieben, abfiltriert und getrocknet wurde und 1,16 g Titelverbindung als Pulver ergab; [oc]21d = -120° (c = 0,51 in DMSO); Xmax (Ethanol) 232,5 nm (ε 18 700) und 315 nm (ε 31 100); vmax (Nujol) 3700-2100 (NH2, NH + OH), 2215 (-G=C), 1762 (ß-Lactam), 1730 (-C02H), 1675 cm’1 (-CONH-); x (DMSO-dg) 0,44 (-CONH-), 2,74 (NH2), 2,88 (-CH=CH-C=CCH3), 3,15 (Thiazolyl), 3,91 (-CH=CH-ChC-CH3), 4,14 (7H), 4,75 (6H), 5,36 (-0CH2C02-), 6,13,6,38 (2-CH2), 7,97 (-C=C-CH3), HPLC 93,2 %, rein.

Beispiel 9 (,6R.7RV7-r(,Zl-2-(2-Aminothiazol-4-vlV2-fcarboxvmethoxvimino'>-acetamidol-3-ffEl-pent-l-en-3-invll-ceph-3-em-4-carbonsäure. Natriumsalz 4,59 g (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3em-4-carbonsäure, Trifluoracetatsalz, wurden mit 50 ml gesättigtem, wäßrigem Natriumbicarbonat -17-

Nr. 391 319 und 50 ml Wasser behandelt. Wenn das Aufschäumen aufgehört hat, wurde der entstandene Niederschlag abfiltriert, nacheinander mit 2 ml Wasser und 3 x 5 ml Diethylether gewaschen und getrocknet; man erhielt 0,22 g Titelverbindung als feine Nadeln Fp. > 230°; [a]^^ = -75,1° (c = 0,42 in H20); Xmax (pH 6-Puffer) 232,5 nm (ε 16 500), 312,5 nm (ε 30 200); vmax (Nujol) 3700-2500 (NH2, NH + OH), 2200 (-C=C-), 1752 (ß-Lactam), 1688,1535 (-CONH-), 1600 cm’1 (-C02); τ (D20) 2,96 (Thiazolyl), 3,07 (-CH=CH-C=C-CH3), 4,19 (7H), 4,20 (-CH=CH-CeC-CH3), 4,76 (6H), 5,44 (0CH2C02-), 6,32,6,43 (2-CH2), 8,05 (-C=C-CH3).

Beispiel 10 (al Diphenvlmethvl-f2'R· 6R. 7RV7-(2'-t-butoxvcarbonvlamino-2'-phenvlacetamidoV3-rrEVpent-l-en-3-invll- ceph-3-em-4-carboxvlat

Zu einer Lösung von 207 mg Produkt von Herstellung 4 in 8 ml Dichlormethan wurden 121 mg 2-t-Butoxycarbonylamino-2-phenylessigsäure, 115 mg 1-Hydroxybenzotriazolhydrat und 155 mg Dicyclohexylcarbodiimid gegeben. Die Mischung wurde 17 h bei 23° gerührt. Der ausgefallene Feststoff wurde abfiltriert und mit 2 x 5 ml Dichlormethan gewaschen. Das vereinigte Filtrat und die Waschwässer wurden nacheinander mit 10 ml Wasser, 2 x 10 ml gesättigter, wäßriger Natriumbicarbonatlösung und 2 x 10 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockene eingedampft. Der erhaltene Feststoff wurde auf 25 g Silikagel unter Eluieren mit einem 15:1 Gemisch aus Dichlormethan und Ethylacetat chromatographiert. Geeignete Fraktionen wurden vereinigt und eingedampft, wobei man 195 mg Titelester als Feststoff erhielt, Fp. 178 bis 180°; Xmax (EtOH) 326,5 nm (ε 26 800). Πϊ> f2R'. 6R- 7RV7-(2'-Amino-2'-nhenvlacetarnidoV3-lYEVpent-l-en-3-invl1-cenh-3-em-4-carbonsäure.

Trifluoracetatsalz

Zu einem eisgekühlten Gemisch aus 167 mg Produkt von Stufe (a) und 0,3 ml Anisol wurden 2 ml Trifluoressigsäure gegeben. Die Lösung wurde 1 h in Eis gerührt und dann zu 70 ml gerührtem Diisopropylether gegeben. Der ausgefallene Feststoff (41 mg) wurde abfiltriert und getrocknet. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit 50 ml Ether verrieben. Der resultierende Feststoff (52 mg) wurde abfiltriert. Beide Produktchargen wurden vereinigt, mit 5 ml Ether verrieben, abfiltriert und getrocknet. Man erhielt 88 mg

Titelverbindung; Xmax (EtOH) 332,5 nm (ε 21 580); vmax (Nujol) 3700 bis 2100 (NH, OH, NH3+), 2220 (C=C), 1772 (Azitidin-2-on C=0), 1700 (Carbonsäure C=0), 1675 (Amid C=0), 1570 (Carboxylat C=0) und 725 cm*1 (Phenyl); τ (DMSO-dg) 0,42 (NH), 2,3 bis 2,8 (Phenylprotonen und NH3+), 2,94 (d, J=17 Hz, CH=CH-C=C), 4,03 (d, J=17 Hz, CH=CH-ChC), 4,21 (Cy-H), 4,89 (d, J=5 Hz, CgH), 4,93 (PhCH), 6,25 und 6,51 (ABq, J=18 Hz, (¾¾) und 7,99 (CH3).

Die folgenden Beispiele erläutern pharmazeutische Formulierungen mit den erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen.

Beispiel A

Trockenes Pulver zur Injektion

Steriles (6R, 7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carbonsäure-natriumsalz wird aseptisch in Glasfläschchen derart eingefüllt, daß jedes Fläschchen eine Menge enthält, die 1 g der wasserfreien Cephalosporinsäure äquivalent ist. Der Oberraum der Fläschchen wird mit sterilem Stickstoff gespült. Die Fläschchen werden unter Verwendung von Gummischeiben oder Stopfen verschlossen und mit Metallversiegelungen (aufgebracht durch Bördeln) versehen. Das Produkt kann durch Auflösen in Wasser für Injektionen oder einem anderen geeigneten, sterilen Träger kurz vor der Verabreichung zubereitet werden.

Beispiel B

Tablette für die orale Verabreichung mg/Tablette

Cephalosporin 250

Natriumstäikeglykolat 5 mikrokristalline Cellulose 45

Natriumlaurylsulfat 3 (6R,7R)-7-[(Z)-2-(2-Aminothiazol4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)-acetamido]-3-[(E)-pent-l-en-3-inyl]-ceph-3-em-4-carbonsäure und die mikrokristalline Cellulose werden durch ein 40 mesh-Sieb gesiebt. Das -18-

Claims (5)

1. Nr. 391 319 Natriumstärkeglykolat und Natriumlaurylsulfat werden durch ein 60 mesh-Sieb gesiebt. Die Pulver werden in einem geeigneten Mischer zusammengemischt, bis sie homogen sind. Es wird auf geeigneten Stempeln auf einer automatischen Tablettiermaschine verpreßt. Die Tabletten können mit einem dünnen Polymerüberzug umhüllt werden, der durch übliche Filmüberzugstechniken aufgebracht wird. Ein Pigment kann in dem Filmüberzug enthalten sein. Andere erfindungsgemäß hergestellte Verbindungen können in ähnlicher Weise formuliert werden. PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung von neuen Verbindungen der allgemeinen Formel Η H

   CH=CH-C=C-R 2 .0) worin R eine acylierte Aminogruppe bedeutet; R ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe ist; R^ ein Wasserstoffatom oder eine carboxylblodrierende Gruppe darstellt; B oder —> Ο (a- oder ß-) ist; und die gestrichelte Linie, welche die 2-, 3- und 4-Stellung verbindet, anzeigt, daß die Verbindung eine Ceph-2-em-oder Ceph-3-em-Verbindung ist, und von Salzen, Solvaten und Estern davon, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel (I) oder ein Salz davon, worin R eine Aminogruppe oder silylierte Aminogruppe ist, acyliert wird.
2. 2. Verfahren nach Anspruch 1, zur Herstellung von Verbindungen der Formel Η H R^hlH - -rr ' —CH=CH-C^C-R2 ,0a) COOH -19- Nr. 391 319 [worin R* eine Acylgruppe ist, ausgewählt aus (i) einer Gruppe der Formel RaCH2C0-, worin Ra eine gegebenenfalls halogensubstituierte, 5-gliedrige, heterocyclische Arylgruppe mit einem oder mehreren Heteroatomen, ausgewählt aus S, N und O, im Ring ist; (ii) einer Gruppe der Formel R^ - C - CO -, II

   worin R^ eine gegebenenfalls substituierte, carbocyclische oder heterocyclische Arylgruppe ist und Rc ein Wasserstoffatom odereine, gegebenenfalls substituierte, Alkylgruppe darstellt; und (iii) einer Gruppe der Formel R^CH-CO-, I X, worin R^ wie für Ra definiert ist oder eine gegebenenfalls substituierte, carbocyclische Gruppe ist und X eine Amino-, Hydroxyl-, acylierte Hydroxyl-, Carboxyl- oder veresterte Carboxylgruppe darstellt; und R^ ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe ist] und von nichttoxischen Salzen, Soivaten, 1-Oxiden und nichttoxischen, metabolisch labilen Estern davon, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel

   C-R α .αΦ [worin R*A eine Gruppe, wie vorstehend für R^ definiert, oder eine geschützte Form davon bedeutet; R ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl-, Aryl-, Carboxyl- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe darstellt; R^ ein Wasserstoffatom oder eine carboxylblockierende Gruppe bedeutet; B ^-S oder —> Ο (a- oder ß-) ist; und die gestrichelte Linie, welche die 2-, 3- oder 4-Stellung verbindet, anzeigt, daß die Verbindung eine Ceph-2-em-oder Ceph-3-em-Verbindung ist] oder ein Salz, Solvat oder Ester davon gebildet wird durch Acylieren einer Verbindung der Formel Η H

   CH=CH-C^C- OD, -20- Nr. 391 319 η ο (worin Β, R , R und die gestrichelte Linie wie vorstehend definiert sind) oder eines Salzes oder N-Silylderivats davon mit einer Säure der Formel r1aoh an), (worin R*A wie vorstehend definiert ist) oder mit einem dieser entsprechenden acylierenden Mittel, wonach, falls notwendig und/oder erwünscht, im jeweiligen Fall irgendeiner der folgenden Schritte in irgendeiner geeigneten Reihenfolge durchgeführt werden kann: (i) Bildung eines nichttoxischen Salzes, (ii) Entfernung irgendwelcher carboxylblockierender und/oder O- oder N-schützender Gruppen, bzw. (iii) Umwandlung eines Δ -Isomeren in das gewünschte Δ-Isomere, (iv) Reduktion einer Verbindung, worin B Ir=S —> O ist, zur Bildung einer Verbindung, worin B Z>S ist.
3. 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß in der eingesetzten Verbindung der Formel II R^ ein Wasserstoffatom oder eine C Alkyl-, Phenyl-, Carboxyl- oder eine C2_5-Alkoxycarbonyl-Gruppe ist, und in der Verbindung der Formel ΙΠ, R* A eine Gruppe R b» C-CO — N f OR IV -t worin R° eine Thiazolyl- oder Furylgruppe bedeutet, gegebenenfalls amino-substituiert, Rc ein Wasserstoffatom oder eine Cj.4-Alkylgruppe ist, gegebenenfalls substituiert durch Carbamoyl, Methyicarbamoyl, Dimethylcarbamoyl, Carboxyl oder C2_5-Alkoxycarbonyl oder eine geschützte Form davon ist.
4. 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß in der eingesetzten Verbindung der Formel II R^ ein Wasserstoffatom oder eine C ^-Alkylgruppe ist und in der Verbindung der Formel ΠΙR1A eine Gruppe

   c-CO- II N

   II OR (worin Rc ein Wasserstoffatom oder eine Methyl-, Ethyl-, Carboxymethyl-, 2-carboxyprop-2-yl-, -21- Nr. 391 319 Carbamoylmethyl- oder Methoxycarbonylmethyl-Gruppe bedeutet) oder eine geschützte Form davon bedeutet
5. 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß der 3-Substituent in der eingesetzten Verbindung der Formel II in der trans-Konfiguration ist. -22-