AT217636B - Verfahren zur Herstellung eines leicht wasserlöslichen Proteinpräparates für die Carcinomdiagnose - Google Patents

Description

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  Verfahren zur Herstellung eines leicht wasserlöslichen
ProteinpräparatesfürdieCarcinomdiagnose 
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines leicht   wasserlöslichenproteinpräparates   für die Carcinomdiagnose,
Die zur Carcinomdiagnose anwendbare Nitsche-Reaktion (im folgenden kurz als NR bezeichnet) ist eine unter ganz bestimmten Bedingungen durchgeführte enzymatische Proteolyse. Wesentlich ist hiebei die Wahl des Proteins, von dem gefordert wird, dass es sich lediglich durch tryptische Enzyme spalten lässt, der Proteolyse durch die gleichzeitig anwesenden   katheptischen   Enzyme hingegen widersteht. 



   Durchgeführte Versuche haben ergeben, dass Klumpen aus nativem Fibrin (z. B. aus defibriniertem Blut) die genannten Forderungen der NR zwar erfüllen, jedoch die Reaktion infolge der zu geringen Oberfläche, die die Klumpen dem Angriff der Enzymmoleküle darbieten, für ihre praktische Anwendung In der Carcinomdiagnostik viel zu langsam abläuft. Bei weiteren Versuchen, in denen die Klumpen nativen Fibrins durch in verdünnten   Neutralsalzlösungen geloste Pfoteine, sogenannte   Lösungen nach   Hammersten   (vgl. O. Hammersten, Lehrbuch der physiologischen Chemie, 11. Auflage, S.   202)   ersetzt wurden, ergab sich, dass eine Spaltung des Proteins nicht nur durch tryptische, sondern auch durch katheptische Enzyme eintritt.

   Die Lösungen nach Hammersten sind also nicht fUr die NR verwendbar, wahrscheinlich, weil das Protein in diesen Lösungen in denaturierter Form vorliegt, die Brauchbarkeit eines Proteins zur Durchführung der NR aber augenscheinlich an den nativen Charakter des Proteins gebunden ist. 



   Es wurde nun gefunden, dass man ein leicht   wasserlösliches Protein   für die Carcinomdiagnose herstellen kann, wenn man natives Fibrin in einer mindestens   halbgesättigten   Erdalkalisalzlösung, insbesondere einer ungefähr 6%igen Calciumlactatlösung, zweckmässig in Gegenwart von Erdalkali- oder Alkalimetallbasen, bei einer Temperatur von nicht über   450   und einem pH-Wert von ungefähr 8 in Lösung bringt. 



   Beschleunigt wird der   Lösungsvorgang   durch Zusatz von   Ca", Mg", N# und K@ -Ionen im   Lösungsmittel, beispielsweise in Form von Alkali- oder Erdalkalimetallbasen. Das kann, ohne dass der nati-   v ?   Charakter der Proteine geschädigt wird, unbedenklich geschehen, wenn dabei die Temperatur von 450 nicht überschritten wird. Besonders bewährt als   Erdalkalisalzlösung   hat sich eine 6%ige Calciumlactatlösung,
Werden solche Lösungen bei niederen Temperaturen, gegebenenfalls im Vakuum, eingeengt, dann resultieren trockene Massen, die sich sehr leicht pulverisieren und ebenso leicht wieder in homogene Lösungen überführen lassen. Die so gewonnenen Trockenpräparate sind unbegrenzt haltbar und können leicht wieder in Lösung gebracht werden.

   Das trockene Protein hat seinen nativen Charakter unverändert beibehalten. 



   In grösserer Verdünnung von beispielsweise etwa 1 : 20 sind diese Lösungen wasserklar oder opalisieren nur sehr schwach. 
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Beispiel: 10gFibrinwerdenin1000cm 3 einerfeigenCaiciumlactatlösung, diemittelsCa (OH)peratur eingetrocknet. 

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Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH Verfahren zur Herstellung eines leicht wasserlöslichen Proteinpräparates für die Carcinomdiagnose, dadurch gekennzeichnet, dass man natives Fibrin in einer mindestens halbgesättigten Erdalkalisalzlösung, <Desc/Clms Page number 2> insbesondere einer ungefähr Saigon Calciumlactatlösung, zweckmässig in Gegenwart von Erdalkali- oder Alkalimetallbasen, bei einer Temperatur von nicht über 45 und einem pH-Wert von ungefähr 8 in Lösung bringt.