WO2024034683A1 - 新規なコポリマー - Google Patents

新規なコポリマー Download PDF

Info

Publication number
WO2024034683A1
WO2024034683A1 PCT/JP2023/029355 JP2023029355W WO2024034683A1 WO 2024034683 A1 WO2024034683 A1 WO 2024034683A1 JP 2023029355 W JP2023029355 W JP 2023029355W WO 2024034683 A1 WO2024034683 A1 WO 2024034683A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
copolymer
copolymer according
hydrogen atom
substituent
Prior art date
Application number
PCT/JP2023/029355
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
健一 鈴木
暢宏 藤巻
洋平 荒井
Original Assignee
興和株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 興和株式会社 filed Critical 興和株式会社
Publication of WO2024034683A1 publication Critical patent/WO2024034683A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/66—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid the modifying agent being a pre-targeting system involving a peptide or protein for targeting specific cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
    • C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
    • C08F220/10—Esters
    • C08F220/12—Esters of monohydric alcohols or phenols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F290/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups
    • C08F290/02—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups on to polymers modified by introduction of unsaturated end groups
    • C08F290/06—Polymers provided for in subclass C08G

Definitions

  • the present invention relates to novel copolymers that can be used in drug delivery technology. More specifically, the present invention relates to a copolymer for a tumor-targeted drug delivery carrier, a pharmaceutical composition in which the copolymer supports a physiologically active substance such as an anticancer drug, and a pharmaceutical containing the composition.
  • DDS drug delivery systems
  • the drug delivery process in the EPR effect is via the bloodstream, and the nanoparticle extravasation process is passive. Therefore, in order to maximize the accumulation of nanoparticles against solid tumors, it is important to give the constituent components of nanoparticles that serve as drug delivery carriers a molecular design that can withstand long-term retention in blood. . Therefore, drug delivery carriers must avoid barriers such as nonspecific interactions with blood components, foreign body recognition by the reticuloendothelial system (RES) in the liver, spleen, and lungs, and glomerular filtration in the kidneys. ability is required. It is also known that these barriers can be overcome by optimizing particle properties such as particle size and surface modification with biocompatible polymers. For example, the particle size of the drug delivery carrier is desirably larger than about 6 nm, which is the threshold for renal clearance, and smaller than 200 nm, which avoids recognition by the RES.
  • RES reticuloendothelial system
  • the particle size of drug delivery carriers also affects tissue permeability at diseased sites.
  • the anticancer activity of drug-loaded nanoparticles with particle diameters of 30nm, 50nm, 70nm, and 100nm, which have the same retention in blood has been compared, and drug-loaded nanoparticles with a particle size of 30nm reach deep into the disease site. It has been shown that it has the highest therapeutic effect (Non-Patent Document 1). Therefore, it is considered desirable that the particle size of nanoparticles for drug delivery carriers targeting solid tumors be as small as possible within a range that avoids renal clearance.
  • Nanoparticles for drug delivery carriers include methods using colloidal dispersions such as liposomes, emulsions, or nanoparticles, methods using biological raw materials such as albumin, methods using natural polymers such as natural polysaccharides, or methods using synthetic polymers. Methods using molecules have been developed. Among these, synthetic polymers are widely used as components of drug delivery carriers because nanoparticles with precisely controlled particle sizes can be prepared by appropriately selecting the constituent monomers and synthesis method. has been done.
  • an amphiphilic block copolymer consisting of a hydrophilic segment and a hydrophobic segment as a drug delivery carrier.
  • the block copolymer spontaneously associates in an aqueous medium using intermolecular hydrophobic interactions as a driving force to form core-shell type nanoparticles (polymer micelles). It is possible to encapsulate or bind a low-molecular drug to the hydrophobic segment of the polymeric micelle, and the resulting drug-loaded polymeric micelle exhibits high blood stability and is effective against solid cancers through the EPR effect.
  • Patent Document 1 It is known that the selective accumulation of low-molecular-weight drugs in the molecule results in higher anticancer activity compared to solution administration of low-molecular-weight drugs (Patent Document 1).
  • the lower limit of particle size that can be prepared is about 30 nm, and it is difficult to finely control the particle size around 10 nm to avoid the influence of renal clearance. It is.
  • SCNP single chain nanoparticles
  • Non-Patent Document 5 Another drug delivery technology is a drug delivery system that utilizes avidin/biotin binding.
  • the affinity between avidin/streptavidin and biotin is very high, and their interaction is widely applied in the fields of biochemistry, molecular biology, and medicine.
  • a drug delivery method and a pretargeting method that combine the high binding ability with an antibody molecule have been devised (Non-Patent Document 5).
  • An object of the present invention is to provide a copolymer for a tumor-targeted drug delivery carrier. More specifically, it is an object of the present invention to provide a copolymer for a drug delivery carrier that can be used to improve blood retention and/or tumor accumulation of drugs.
  • the present inventors have discovered the property of a terpolymer of acrylic acid derivatives to form SCNPs in water. Furthermore, in addition to being able to precisely control the particle size of SCNPs on a microscale of about 10 nm or less, we succeeded in creating a new polymer for drug delivery carriers that has high tumor accumulation. Furthermore, when the polymer was loaded with an anticancer drug and administered to a mouse model with subcutaneous colon cancer transplantation, excellent antitumor effects were confirmed. Furthermore, we succeeded in creating the above-mentioned terpolymer derivative that forms biotin-conjugated SCNPs that can be applied to pretargeting methods.
  • R 1 , R 2 and R 3 are the same or different and represent a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group
  • R 4 represents a C 1-3 alkyl group
  • R 5 represents a hydrogen atom, C 1-3 18 alkyl group, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group that may have a substituent, or a 5- to 10-membered cycloalkyl group that may have a substituent represents a heteroaryl group
  • X 1 , X 2 and X 3 are the same or different and represent an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7
  • R 6 represents a hydrogen atom, a leaving group or a linker
  • R 7 represents hydrogen represents an atom or a C 1-3 alkyl group
  • m represents an integer of 1 to 100
  • n represents an integer of 0 to 3
  • R 1 , R 2 and R 3 are the same or different and represent a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group
  • R 4 represents a C 1-3 alkyl group
  • R 5 represents a hydrogen atom, C 1-3 18 alkyl group, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group that may have a substituent, or a 5- to 10-membered cycloalkyl group that may have a substituent represents a heteroaryl group
  • X 1 , X 2 and X 3 are the same or different and represent an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7
  • R 6 represents a hydrogen atom, a leaving group or a linker
  • R 7 represents hydrogen represents an atom or a C 1-3 alkyl group
  • m represents an integer of 1 to 100
  • n represents an integer of 0 to 3
  • the linker of R 6 has the following formulas (5) to (7):
  • the copolymer according to any one of [1] to [8] above which is selected from the following.
  • [12] The copolymer according to any one of [1] to [11] above, wherein X 1 is an oxygen atom.
  • X 2 is an oxygen atom.
  • X 3 is an oxygen atom.
  • [15] The copolymer according to any one of [1] to [14] above, wherein m is an integer of 4 to 22.
  • n is 1.
  • the ratio of structural units (A), (B), and (C) is 0.01 to 100 parts by mass of (B) and 0.1 to 100 parts by mass to 1 part by mass of (A).
  • the copolymer according to [1] to [16] above which is composed of (C).
  • the above [2] obtained by polymerizing 0.01 to 100 parts by mass of monomer (2) and 0.1 to 100 parts by mass of monomer (3) per 1 part by mass of monomer (1).
  • the target affinity molecule has the following formula (a):
  • the target affinity molecule has the following formulas (8) to (11):
  • copolymer according to any one of [1] to [19] above which is any molecule represented by: [23] The copolymer according to any one of [1] to [22] above, wherein the bond between the target affinity molecule and the copolymer X is a covalent bond or a non-covalent bond.
  • a single chain nanoparticle comprising the copolymer according to any one of [1] to [23] above.
  • a pharmaceutical composition comprising the copolymer according to any one of [1] to [24] above.
  • SCNPs obtained by self-association of the copolymer of the present invention loaded with an anticancer drug showed an effect of suppressing tumor growth in a mouse tumor-bearing model, and thus were effective against malignant tumors. It can be applied as a therapeutic agent.
  • the SCNPs obtained by self-association of the copolymer of the present invention carrying an anticancer drug have a high tumor growth suppressing effect at a low dose, making it possible to both enhance pharmacological action and suppress side effects.
  • a therapeutic agent for malignant tumors can be provided.
  • the copolymer to which the target affinity molecule of the present invention is bound (hereinafter sometimes referred to as target affinity copolymer) is useful as a drug delivery and pretargeting agent that utilizes biotin/avidin binding.
  • FIG. 1 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of the copolymer obtained in Example 1, measured using nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR).
  • FIG. 2 is a diagram showing a chromatogram obtained by gel permeation chromatography (GPC) for the copolymer obtained in Example 1.
  • Figure 3 is a diagram showing the particle size measurement results (scattering intensity distribution) in dynamic light scattering (DLS) for the copolymer before DACHPt inclusion (Example 69) and the DACHPt inclusion SCNP (Example 70). be.
  • FIG. 4 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of the biotin-bound SCNP obtained in Example 73, measured using nuclear magnetic resonance (NMR).
  • FIG. 5 is a diagram showing a chromatogram obtained by gel permeation chromatography (GPC) for the biotin-conjugated SCNP obtained in Example 73.
  • FIG. 6 is a diagram showing the particle diameter measurement results (scattering intensity distribution) of the biotin-bound SCNP obtained in Example 73 using dynamic light scattering (DLS).
  • FIG. 7 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of the biotin-bound SCNP obtained in Example 75, measured using nuclear magnetic resonance (NMR).
  • FIG. 8 is a diagram showing a chromatogram obtained by gel permeation chromatography (GPC) for the biotin-conjugated SCNP obtained in Example 75.
  • FIG. 9 is a diagram showing the particle size measurement results (scattering intensity distribution) of the biotin-bound SCNP obtained in Example 75 using dynamic light scattering (DLS).
  • FIG. 10 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of the biotin-bound SCNP obtained in Example 77, measured using nuclear magnetic resonance (NMR).
  • FIG. 11 is a diagram showing a chromatogram obtained by gel permeation chromatography (GPC) for the biotin-bound SCNP obtained in Example 77.
  • FIG. 12 is a diagram showing the particle diameter measurement results (scattering intensity distribution) in dynamic light scattering (DLS) for the biotin-bound SCNP obtained in Example 77.
  • FIG. 13 is a diagram showing a 1 H-NMR spectrum of the biotin-bound SCNP obtained in Example 79, measured using nuclear magnetic resonance (NMR).
  • FIG. 14 is a diagram showing a chromatogram obtained by gel permeation chromatography (GPC) for the biotin-bound SCNP obtained in Example 79.
  • FIG. 15 is a diagram showing the particle diameter measurement results (scattering intensity distribution) in dynamic light scattering (DLS) for the biotin-bound SCNP obtained in Example 79.
  • FIG. 16 is a diagram showing changes in relative tumor volume when oxaliplatin solution or DACHPt-containing SCNP (Example 70) was administered three times every other day to a model mouse with subcutaneous implantation of mouse colon cancer cell line (C26) on the back. be.
  • nanoparticle refers to a structure having a particle diameter of 100 nm or less.
  • single chain nanoparticle refers to nanoparticles formed using chemical crosslinks, hydrophobic interactions, ionic bonds, etc. within a single chain as a driving force. They often exhibit a relatively small particle size among nanoparticles, ie, 20 nm or less.
  • initiator refers to an initiator for thermal radical polymerization such as an azo compound or a peroxide.
  • chain transfer agent refers to a compound that causes a chain transfer reaction in radical polymerization, preferably a compound having a thiocarbonyl group.
  • C 1-3 alkyl group means a straight-chain or branched alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, such as a methyl group, an ethyl group, an n-propyl group, and an isopropyl group. It will be done.
  • C 1-18 alkyl group means a straight-chain or branched alkyl group having 1 to 18 carbon atoms, such as methyl group, ethyl group, n-propyl group, isopropyl group, n -butyl group, isobutyl group, sec-butyl group, tert-butyl group, pentyl group, hexyl group, heptyl group, octyl group, nonyl group, decyl group, undecyl group, dodecyl group, tridecyl group, tetradecyl group, pentadecyl group, Examples include hexadecyl group, heptadecyl group, octadecyl group, and the like.
  • a 3- to 8-membered cycloalkyl group which may have a substituent means a cyclic alkyl group having 3 to 8 carbon atoms, such as cyclopropyl group, cyclobutyl group, cyclopentyl group, cyclohexyl group, etc. group, cycloheptyl group, cyclooctyl group, etc.
  • substituents include halogen atoms, alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkenyl groups having 2 to 6 carbon atoms, alkynyl groups having 2 to 6 carbon atoms, hydroxyl groups, and hydroxyl groups having 1 to 6 carbon atoms.
  • Alkoxy group amino group, alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms, di-alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms in which the alkyl groups are the same or different, thiol group, alkylthio group having 1 to 6 carbon atoms, carboxyl group, 1 to 6 carbon atoms -6 alkoxycarbonyl groups, carbamoyl groups, etc.
  • a C 6-18 aryl group which may have a substituent means a monocyclic or condensed polycyclic aromatic hydrocarbon group, such as a phenyl group, a naphthyl group, , anthracenyl group, phenanthrenyl group, triphenylenyl group, pyrenyl group, chrysenyl group, naphthacenyl group, and the like.
  • a C 6-14 aryl group that may have a substituent means a monocyclic or condensed polycyclic aromatic hydrocarbon group, such as a phenyl group, a naphthyl group, an anthracenyl group.
  • substituents There are no particular restrictions on the substituents, but examples include halogen atoms, alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkenyl groups having 2 to 6 carbon atoms, alkynyl groups having 2 to 6 carbon atoms, hydroxyl groups, and hydroxyl groups having 1 to 6 carbon atoms.
  • Alkoxy group amino group, alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms, di-alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms in which the alkyl groups are the same or different, thiol group, alkylthio group having 1 to 6 carbon atoms, carboxyl group, carbon number Examples include 1 to 6 alkoxycarbonyl groups and carbamoyl groups.
  • a 5- to 10-membered heteroaryl group that may have a substituent refers to 1 to 4 ring-constituting atoms selected from nitrogen atoms, oxygen atoms, and sulfur atoms in addition to carbon atoms. means a 5- to 10-membered monocyclic aromatic heterocyclic group or fused aromatic heterocyclic group containing a hetero atom.
  • Examples of monocyclic aromatic heterocyclic groups include furyl group, thienyl group, pyrrolyl group, pyridinyl group, pyrazinyl group, pyrimidinyl group, pyridazinyl group, imidazolyl group, pyrazyl group, thiaryl group, oxazolyl group, isoxazolyl group, 1, Examples include 3,4-thiadiazolyl group, 1,2,3-triazolyl group, 1,2,4-triazolyl group, and tetrazolyl group.
  • fused aromatic heterocyclic group examples include benzofuranyl group, benzothiophenyl group, quinoxalinyl group, indolyl group, isoindolyl group, isobenzofuranyl group, chromanyl group, benzimidazolyl group, benzothiazolyl group, benzoxazolyl group, and quinolyl group. group, isoquinolinyl group, and the like.
  • a 6- to 10-membered heteroaryl group that may have a substituent refers to 1 to 4 heteroaryl atoms selected from nitrogen atoms, oxygen atoms, and sulfur atoms in addition to carbon atoms as atoms constituting the ring.
  • a 6- to 10-membered monocyclic aromatic heterocyclic group or fused aromatic heterocyclic group containing examples include a pyridinyl group, a pyrazinyl group, a pyrimidinyl group, and a pyridazinyl group.
  • Examples of the fused aromatic heterocyclic group include benzofuranyl group, benzothiophenyl group, quinoxalinyl group, indolyl group, isoindolyl group, isobenzofuranyl group, chromanyl group, benzimidazolyl group, benzothiazolyl group, benzoxazolyl group, and quinolyl group.
  • substituents There are no particular restrictions on the substituents, but examples include halogen atoms, alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, alkenyl groups having 2 to 6 carbon atoms, alkynyl groups having 2 to 6 carbon atoms, hydroxyl groups, and hydroxyl groups having 1 to 6 carbon atoms.
  • Alkoxy group amino group, alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms, di-alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms in which the alkyl groups are the same or different, thiol group, alkylthio group having 1 to 6 carbon atoms, carboxyl group, carbon number Examples include 1 to 6 alkoxycarbonyl groups and carbamoyl groups.
  • halogen atom examples include a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, an iodine atom, and the like.
  • target affinity molecule refers to biotin or a derivative thereof that has a specific binding function to avidin/streptavidin or its mutants or functional fragments.
  • the target affinity molecule may be supported by the copolymer X of the present invention through an action such as electrostatic interaction, hydrogen bonding, hydrophobic interaction, or covalent bonding.
  • pretargeting method is a drug delivery method that accurately accumulates a drug in target cells such as cancer cells.
  • a fusion of a molecular probe such as a cancer antigen-specific antibody molecule and avidin/streptavidin or its mutants or functional fragments is prepared and administered to a patient, thereby injecting the fusion into cancer cells. Accumulate.
  • a conjugate of the pharmaceutical composition and a target affinity molecule such as biotin that has an affinity for the avidin/streptavidin or its mutants (modified) or functional fragments, cancer cells are It consists of the process of accumulating drugs accurately.
  • a conjugate of a molecular probe such as a cancer antigen-specific antibody molecule and avidin/streptavidin or a mutant or functional fragment thereof, and a conjugate of the target affinity molecule and a pharmaceutical composition are prepared in advance.
  • a complex can also be prepared and administered to a patient.
  • the term "pharmaceutical composition” refers to an active ingredient (drug, physiologically active substance) that can be used for diagnosis, prevention, or treatment of a disease that interacts with the copolymer X of the present invention or a target-affinity copolymer, It means something that is supported by an action such as a bond, hydrophobic interaction, or covalent bond.
  • an action such as a bond, hydrophobic interaction, or covalent bond.
  • the supported form when the copolymer One example is the form.
  • One embodiment of the present invention is a copolymer (target affinity copolymer) in which a target affinity molecule is bound to a copolymer X having structural units represented by the following formulas (A), (B), and (C).
  • R 1 , R 2 and R 3 are the same or different and represent a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group
  • R 4 represents a C 1-3 alkyl group
  • R 5 represents a hydrogen atom, C 1-3 18 alkyl group, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group that may have a substituent, or a 5- to 10-membered cycloalkyl group that may have a substituent represents a heteroaryl group
  • X 1 , X 2 and X 3 are the same or different and represent an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7
  • R 6 represents a hydrogen atom, a leaving group or a linker
  • R 7 represents hydrogen represents an atom or a C 1-3 alkyl group
  • m represents an integer of 1 to 100
  • n represents an integer of 0 to 3
  • the structural unit (A) functions as a unit that imparts hydrophilicity
  • the structural unit (B) functions as a unit that imparts hydrophobicity
  • the structural unit (C) functions as a scaffold to which the active ingredient (drug, physiologically active substance) and copolymer X or target affinity copolymer are bound.
  • R 1 in the structural unit (A) represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • X 1 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • m represents an integer of 1 to 100, preferably an integer of 3 to 100, preferably 3 to 80 from the viewpoint of imparting good hydrophilicity, more preferably 4 to 60, even more preferably 4 to 40, and 22 is even more preferred.
  • R 4 represents a C 1-3 alkyl group, specifically a methyl group, ethyl group, n-propyl group or isopropyl group, preferably a methyl group or an ethyl group, and more preferably a methyl group.
  • R2 in the structural unit (B) represents a hydrogen atom or a C1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • X 2 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • n represents an integer of 0 to 3, preferably an integer of 1 to 3, and more preferably 1.
  • R 5 is a hydrogen atom, a C 1-18 alkyl group, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group that may have a substituent, or a substituent
  • This represents a 5- to 10-membered heteroaryl group that may have a A cycloalkyl group, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group which may have a substituent, or a 5- to 10- membered heteroaryl group which may have a substituent are preferred;
  • a 3- to 8-membered cycloalkyl group, an adamantyl group, a C 6-18 aryl group, which may have a substituent, or a 5- to 10-membered heteroaryl group, which may have a substituent More preferred are C 1-18 alkyl groups, 3- to 8-membered cycloalkyl groups, adamantyl groups, and
  • a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent an adamantyl group, a C 6-14 aryl group that may have a substituent, or a 6- to 10-membered cycloalkyl group that may have a substituent.
  • the substituent is preferably one or more selected from a halogen atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, and an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms.
  • R 3 in the structural unit (C) represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • X 3 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • R 6 represents a hydrogen atom, a leaving group, or a linker.
  • This leaving group is a group that can be removed when the structural unit (C) binds to a drug (physiologically active substance), and the linker is a group that can be released when the structural unit (C) binds to a drug (physiologically active substance). It is a group that can be used for crosslinking.
  • These leaving groups or linkers include a C 1-18 alkyl group that may have a substituent, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, and a C 1-18 alkyl group that may have a substituent.
  • a C 7-19 aralkyl group is preferred.
  • examples of the substituent include a halogen atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, and an alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms. , amino group, alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms, di-alkyl group having the same or different alkyl groups, alkylamino group having 1 to 6 carbon atoms, thiol group, alkylthio group having 1 to 6 carbon atoms, carboxyl group, carbon number 1 to 6 6, an alkoxycarbonyl group, a carbamoyl group, and the like.
  • the linker is preferably a group having a functional group such as a hydroxyl group, an amino group, a thiol group, or a carboxyl group as a substituent.
  • a functional group such as a hydroxyl group, an amino group, a thiol group, or a carboxyl group as a substituent.
  • Preferred specific examples of the leaving group for R 6 include the following formula (4):
  • Examples include groups represented by: Preferred specific examples of the linker for R 6 include the following formulas (5) to (7):
  • Examples include groups selected from.
  • Copolymer X of the present invention is a copolymer having structural units represented by formulas (A), (B), and (C).
  • the copolymer X may be a random copolymer or a block copolymer, but is preferably a random copolymer.
  • the composition ratio of each structural unit in one molecule is such that when (A) is 1 part by mass, (B) is 0.01 to 100 parts by mass, and (C) is 0.1 to 100 parts by mass.
  • the ratio is preferable, and when (A) is 1 part by weight, (B) is 0.05 to 18 parts by weight, and (C) is more preferably 0.1 to 20 parts by weight, and (A) It is particularly preferable that (B) be 0.05 to 4 parts by weight and (C) be 0.1 to 16 parts by weight, when 1 part by weight is 1 part by weight.
  • the degree of polymerization of the copolymer X of the present invention is not particularly limited, but the number average molecular weight is preferably 5,000 to 150,000, more preferably 8,000 to 150,000.
  • the monomer represented by general formula (1) functions as a unit that imparts hydrophilicity
  • the monomer represented by general formula (2) functions as a unit that imparts hydrophobicity
  • the monomer represented by general formula (3) functions as a scaffold to which the drug and copolymer are bound.
  • Examples of the monomer that functions as a hydrophobic unit represented by the general formula (2) include the following formula:
  • the monomers shown can be exemplified.
  • R 1 represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • R 2 represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • R 3 represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, preferably a hydrogen atom or a methyl group, more preferably a hydrogen atom, an ethyl group or a propyl group, and more preferably a hydrogen atom .
  • R 4 represents a C 1-3 alkyl group, specifically a methyl group, ethyl group, n-propyl group or isopropyl group, preferably a methyl group or an ethyl group, and a methyl group is preferable. More preferred.
  • X 1 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • m represents an integer of 1 to 100, preferably an integer of 3 to 100, preferably 3 to 80 from the viewpoint of imparting good hydrophilicity, more preferably 4 to 60, and more preferably 4 to 100. 40 is more preferable, and 4 to 22 is even more preferable.
  • R 5 is a hydrogen atom, a C 1-18 alkyl group, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, an adamantyl group, or a C 6 that may have a substituent.
  • -18 aryl group or a 5- to 10-membered heteroaryl group which may have a substituent from the point of imparting hydrophobicity to the structural unit (B),
  • a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent an adamantyl group, a C 6-14 aryl group that may have a substituent, or a 6- to 10-membered cycloalkyl group that may have a substituent.
  • the substituent is preferably one or more selected from a halogen atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, and an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms.
  • X 2 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • n represents an integer of 0 to 3, preferably an integer of 1 to 3, and more preferably 1.
  • R 6 represents a hydrogen atom, a leaving group, or a linker.
  • These leaving groups or linkers include a C 1-18 alkyl group that may have a substituent, a 3- to 8-membered cycloalkyl group that may have a substituent, and a C 1-18 alkyl group that may have a substituent.
  • a C 7-19 aralkyl group is preferred.
  • examples of the substituent include a halogen atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms, a hydroxyl group, and an alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms.
  • the linker is preferably a group having a functional group such as a hydroxyl group, an amino group, a thiol group, or a carboxyl group as a substituent.
  • Preferred specific examples of the leaving group for R 6 include the following formula (4):
  • Examples include groups represented by: Preferred specific examples of the linker for R 6 include the following formulas (5) to (7):
  • Examples include groups selected from.
  • X 3 represents an oxygen atom, a sulfur atom or NR 7 , preferably an oxygen atom, a sulfur atom or NH, and more preferably an oxygen atom.
  • Copolymer X of the present invention is formed by copolymerizing three types of monomers represented by general formulas (1) to (3). Although the copolymerization may be random copolymerization or block copolymerization, it is preferable to use random copolymerization.
  • the blending ratio of the three types of monomers is, when the mass part of monomer (1) is 1, 0.01 to 100 parts by mass of monomer (2) and 0.1 to 100 parts by mass of monomer (3). It is preferable to polymerize 0.05 to 18 parts by weight of monomer (2) and more preferably 0.1 to 20 parts by weight of monomer (3), and 0.05 to 4 parts by weight of monomer (3) to be polymerized. It is particularly preferred to polymerize 2) with 0.1 to 16 parts by weight of monomer (3).
  • solvents in which various solvents are coordinated are also included in the copolymer X of the present invention.
  • examples of the "solvate” include hydrates and ethanolates. Any number of solvents may be coordinated with the copolymer X of the present invention.
  • Copolymer X of the present invention can be produced by various known methods. Although the manufacturing method is not particularly limited, it can be manufactured, for example, according to the basic polymer synthesis method described below.
  • R' represents a hydrogen atom or a C 1-3 alkyl group, and R'' represents a group represented by R 4 , R 5 or R 6 above]
  • This reaction shows a process of producing polymer (III) by reacting monomer (I) with a chain transfer agent (II) and an initiator.
  • This reaction is carried out without a solvent, or with alcohols such as methanol, ethanol, 1-propanol, and 2-propanol, ethers such as diethyl ether, tetrahydrofuran, and 1,4-dioxane, and aromatic compounds such as benzene, toluene, and xylene.
  • Hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, and 1,2-dichloroethane
  • solvents such as N,N-dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, acetonitrile, and ethyl acetate.
  • aromatic hydrocarbons such as toluene and xylene as the solvent.
  • DDMAT 2-(dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid
  • CDTTC cyanomethyl dodecyltrithiocarbonate
  • CPDTTC 2-Cyano-2-p ropyldodecyl trithiocarbonate
  • CDSPA 4-Cyano-4-[(dodecylsulfanyl-thiocarbonyl) sulfanyl]pentanoic acid
  • CDSPA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-azido-1-propanol ester
  • N 3 -CTA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-azido-1-propanol ester
  • the copolymer X of the present invention takes a structure in which part or all of the structure of the chain transfer agent is partially bonded. If copolymer X contains a chain transfer agent structure, the structure may be removed by a suitable method.
  • initiators examples include 2,2'-Azobis-isobutyronitrile (AIBN), 1,1'-Azobis(cyclohexanecarbonitrile) (ACHN), and 2,2'-Azobis-2-methylbutyronitrile ( AMBN), 2,2'-Azobis
  • An azo polymerization initiator such as -2,4-dimethylvaleronitrile (ADVN) can be used, and AIBN is preferably used.
  • the reaction temperature is 0 to 300°C, preferably 0 to 150°C, more preferably 1 to 100°C, and the reaction time is 1 minute to 48 hours, preferably 5 minutes to 24 hours.
  • a randomly copolymerized copolymer X can be produced by performing the reaction in the presence of monomers (I) having different structures.
  • monomers (I) having different structures For example, if N 3 -CTA having an azide group is used as a chain transfer agent, a copolymer X having an azide group at the terminal can be obtained, which is advantageous for producing a target-affinity copolymer by the click reaction described below.
  • the target affinity molecule that binds to the above-mentioned copolymer X is biotin or a derivative thereof that has a specific binding function to avidin/streptavidin or a mutant or functional fragment thereof.
  • biotin or its derivatives include biotin, norbiotin, homobiotin, iminobiotin, oxybiotin, thiobiotin, ethylbiotin, desthiobiotin, diaminobiotin, biotin carbamate, biotin carbonate, trisnorbiotin sulfoxide, bisnorbiotin sulfoxide, Norbiotin sulfoxide, biotin sulfoxide, homobiotin sulfoxide, bis-homobiotin sulfoxide, tris-homobiotin sulfoxide, biotin sulfone, reduced biotin (biotinol) and those described in JP-A-58-154508 and
  • biotin or its derivative examples include compounds. Furthermore, biocytin and a compound having a spacer such as those described in ThermoFisher's Avidin-Biotin Technical Handbook can also be used. Furthermore, as bisbiotin derivatives that have high affinity for streptavidin variants with reduced affinity for natural biotin, WO 2015/125820, WO 2018/151301, WO 2019/189867 Examples include compounds described in No., International Publication No. 2019/230905, and International Publication No. 2021/210573 pamphlet, but are not limited thereto. Among these, as biotin or its derivative, the following formula (a)
  • Y represents O or NH
  • a molecule having a biotin residue represented by the following is preferable.
  • the compound of the present invention has geometric or optical isomers, mixtures or separated isomers of these isomers are also included within the scope of the present invention. Separation of isomers can be carried out by conventional methods.
  • the target affinity copolymer of the present invention can be produced by various known methods. Although the production method is not particularly limited, it can be produced, for example, according to the click reaction synthesis method described below.
  • “Click chemistry” is classified as a reaction similar to a natural biochemical reaction with the following attributes and has the following characteristics. It is a very efficient reaction that proceeds rapidly to high yields, and is highly selective, producing no (or few) by-products and tolerant of multiple functional groups. . Furthermore, it is a reaction that proceeds under mild reaction conditions such as low temperature (or ambient temperature) or in an aqueous solution. This reaction can be carried out in water or with alcohols such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, ethers such as diethyl ether, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, etc.
  • alcohols such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, ethers such as diethyl ether, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, aromatic hydrocarbons such as benzen
  • a solvent such as halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, and 1,2-dichloroethane, N,N-dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, acetonitrile, and ethyl acetate.
  • halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, and 1,2-dichloroethane
  • N,N-dimethylformamide N,N-dimethylacetamide
  • N-methylpyrrolidone acetonitrile
  • ethyl acetate ethyl acetate
  • water or N,N-dimethylformamide is used as the solvent.
  • the cyclooctyne is dibenzocyclooctyne (DBCO), difluorobenzocyclooctyne (DIFBO), biarylazacycloocthinone (BARAC), dibenzocyclooctyne (DIBO), difluorinated cyclooctyne (DIFO), Monofluorinated cyclooctyne (MOFO), dimethoxyazacyclooctyne (DIMAC) or aryl-less octyne (ALO), preferably dibenzocyclooctyne (DBCO).
  • DBCO dibenzocyclooctyne
  • DIFBO difluorobenzocyclooctyne
  • BARAC biarylazacycloocthinone
  • DIBO dibenzocyclooctyne
  • DIFO difluorinated cyclooctyne
  • MOFO Monofluorin
  • the alkyne is an aliphatic alkyne and the reacting step is carried out in the presence of a copper(I) catalyst.
  • the alkyne is cyclooctyne and the reacting step is performed under copper-free conditions.
  • the reaction temperature is 0 to 300°C, preferably 0 to 150°C, more preferably 1 to 100°C, and the reaction time is 1 minute to 48 hours, preferably 5 minutes to 24 hours.
  • the reaction in the above reaction formula is a Huisgen cycloaddition, which is a type of click reaction, and is a 1,3-dipolar cycloaddition reaction that forms a 1,2,3-triazole from an azide and an alkyne. .
  • the produced polymer X of the present invention and the target affinity copolymer can be purified by polymer isolation and purification methods generally known in the field of polymer chemistry. Specifically, examples include extraction, recrystallization, salting out with ammonium sulfate or sodium sulfate, centrifugation, dialysis, ultrafiltration, adsorption chromatography, ion exchange chromatography, hydrophobic chromatography, normal phase chromatography, and reverse chromatography. Treatment operations include phase chromatography, gel filtration, gel permeation chromatography, affinity chromatography, electrophoresis, countercurrent distribution, and combinations thereof.
  • Copolymer X and target affinity copolymer of the present invention can be used as carriers for transporting various physiologically active substances (drugs).
  • a pharmaceutical composition in which a tumor therapeutic drug is supported (encapsulated) in the copolymer It can be used as a preventive and/or therapeutic agent for various cancer diseases such as duodenal cancer, stomach cancer, pancreatic cancer, liver cancer, lung cancer, uterine cancer, and ovarian cancer.
  • cancer diseases such as duodenal cancer, stomach cancer, pancreatic cancer, liver cancer, lung cancer, uterine cancer, and ovarian cancer.
  • it since it has a high tumor accumulation ability, it can be used as a tumor diagnostic agent and a contrast agent.
  • the dosage and frequency of administration should be determined taking into account the dosage form, age and weight of the patient, the nature or severity of the symptoms to be treated, etc. It may be selected as appropriate, and the dose and frequency of administration should not be limited, but when administering a drug-encapsulating polymer intravenously as an injection, for example, once per adult (60 kg). In administration, it is preferable to administer an amount of 0.12 mg to 1,200,000 mg, more preferably to administer an amount of 1.2 mg to 1,200,000 mg, and particularly preferably to administer an amount of 12 to 120,000 mg.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be produced by mixing the copolymer X of the present invention or the target affinity copolymer with a drug.
  • a single chain nanoparticle is produced by mixing the copolymer of the present invention or a target affinity copolymer with a drug, or a single chain nanoparticle of the copolymer X of the present invention or a target affinity copolymer is produced and then the drug is mixed.
  • a single chain nanoparticle can be manufactured by a known method.
  • the drug may be supported on the copolymer X or the target-affinity copolymer through an action such as electrostatic interaction, hydrogen bonding, hydrophobic interaction, or covalent bonding.
  • the drug may be one used for various cancer diseases, and anticancer drugs that act on cancer cells to suppress their proliferation are preferred, such as antimetabolites, alkylating agents, anthracyclines, antibiotics, and anticancer drugs.
  • antimetabolites include mitotic inhibitors, topoisomerase inhibitors, proteasome inhibitors, and antihormonal agents.
  • antimetabolites include azathioprine, 6-mercaptopurine, 6-thioguanine, fludarabine, pentostatin, cladribine, 5-fluorouracil (5FU), floxuridine (FUDR), cytosine arabinoside (cytarabine), methotrexate, trimethoprim. , pyrimethamine, or pemetrexed.
  • alkylating agents include cyclophosphamide, mechlorethamine, uramustine, melphalan, chlorambucil, thiotepa/chlorambucil, ifosfamide, carmustine, lomustine, streptozocin, busulfan, dibromomannitol, cisplatin, carboplatin, nedaplatin, oxaliplatin, and miriplatin. , satraplatin, triplatin tetranitrate, procarbazine, altretamine, dacarbazine, mitozolomide, trabectedin, or temozolomide.
  • anthracyclines examples include daunorubicin, doxorubicin, epirubicin, idarubicin, valrubicin, aclarubicin, amrubicin, pirarubicin, and the like.
  • antibiotics include dactinomycin, bleomycin, mithramycin, anthramycin, streptozotocin, gramicidin D, staurosporine, mitomycins (e.g., mitomycin C), duocarmycins (e.g., CC-1065), or Examples include calicheamicins.
  • mitotic inhibitors examples include maytansinoids (e.g., DM0, mertansine (also known as DM1), DM2, DM3, DM4, or emtansine), auristatin (e.g., auristatin E, auristatin phenylalanine phenylenediamine), AFP), monomethyl auristatin E, monomethyl auristatin D, and monomethyl auristatin F), dolastatins, cryptophycins, vinca alkaloids (e.g., vincristine, vinblastine, vindesine, vinorelbine), taxanes (e.g., paclitaxel, docetaxel) , or colchicines.
  • DM0 mertansine
  • DM1 mertansine
  • DM2 DM3, DM4, or emtansine
  • auristatin e.g., auristatin E, auristatin phen
  • topoisomerase inhibitors examples include irinotecan, topotecan, topotecan, amsacrine, etoposide, teniposide, misantrone, mitoxantrone, SN-38, exatecan, deruxtecan, and the like.
  • proteasome inhibitors include peptidylboronic acid, carfilzomib, bortezomib, and the like.
  • antihormonal agents include fulvestrant, tamoxifen, toremifene, and the like.
  • parenteral preparations such as oral preparations, injections, or transdermal preparations
  • Parenteral administration such as intraarterial injection, intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, and intraperitoneal injection is preferred, and intraarterial injection and intravenous injection are more preferred.
  • the number of administrations should not be limited, for example, it may be administered once to several times per week on average.
  • formulations suitable for the administration route include excipients, fillers, binders, wetting agents, disintegrants, lubricants, surfactants, dispersants, buffers, preservatives, solubilizing agents, Preparation additives such as preservatives, flavoring agents, soothing agents, stabilizers, and isotonic agents can be appropriately selected, and the preparation can be carried out by conventional methods.
  • formulation additives that can be included in the various formulations mentioned above are not particularly limited as long as they are pharmaceutically acceptable.
  • examples of such formulation additives include purified water, water for injection, distilled water for injection, pharmaceutically acceptable organic solvents, collagen, polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, carboxyvinyl polymers, sodium alginate, water-soluble dextran, carboxylic Examples include sodium methyl starch, pectin, xanthan gum, gum arabic, casein, gelatin, agar, glycerin, propylene glycol, polyethylene glycol, vaseline, paraffin, stearyl alcohol, stearic acid, human serum albumin, mannitol, sorbitol, and lactose.
  • the additives used can be appropriately selected depending on the various formulations, and can be used alone or in combination.
  • Injections can also be prepared as non-aqueous diluents (for example, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, alcohols such as ethanol, etc.), suspensions, or emulsions.
  • the injection can be sterilized by filter sterilization or by adding a bactericide or the like.
  • injections can be manufactured in a ready-to-use form. That is, it can be made into a sterile solid composition by freeze-drying or the like, and dissolved in water for injection, distilled water for injection, or other solvent before use.
  • the treatment method using the target affinity copolymer of the present invention first, a fusion of a molecular probe such as a cancer antigen-specific antibody molecule and avidin/streptavidin or a mutant or functional fragment thereof is prepared, and By administering the fusion product to cancer cells, the fusion product is accumulated in cancer cells.
  • the method consists of a step of accurately accumulating the drug into cancer cells by administering the conjugate of the target affinity copolymer of the present invention and an anticancer drug to the patient.
  • a conjugate of a molecular probe such as a cancer antigen-specific antibody molecule and avidin/streptavidin or a mutant (modified) product or functional fragment thereof, and a conjugate of the target affinity copolymer of the present invention and an anticancer drug may be prepared in advance.
  • a complex can also be prepared and administered to a patient.
  • Example 1 Production of poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(1-ethoxyethyl acrylate)] (1) 1-Ethoxyeth Synthesis of yl acrylate (EEA) Argon atmosphere At the bottom, ethyl vinyl ether (28.725 mL) was weighed out, and phosphoric acid (50 mg) was added under ice cooling. Then, acrylic acid (17.15 mL) was added and stirred at room temperature for 48 hours. Hydrotalcite (3 g) was added and stirred for further 2 hours to stop the reaction. After filtration through Celite, unreacted ethyl vinyl ether was removed by evaporation.
  • ESA yl acrylate
  • Phenothiazine was added as a polymerization inhibitor at a concentration of 500 ppm, and the mixture was purified by vacuum distillation together with calcium hydride (distillation temperature: 28-32°C).
  • the obtained 1-Ethoxyethyl acrylate was collected into a glass vial and stored at -30°C. 13C NMR (400MHz, CDCl 3 ), ⁇ , ppm: 15.29 (-OCH 2 CH 3 ), 21.16 (-COOCH(CH 3 )), 64.98 (-OCH 2 -), 96.73 (-COOCH(CH 3 )), 128.84 (CH 2 CH-), 131.43 (CH 2 CH-), 166.00 (-COO).
  • AIBN 2,2'-Azobis (2-methylpropionitrile)
  • poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate (mPEGA, the average number of repeats (n) of ethylene glycol is 9) 1.296 g, Benzyl acrylate (BnA) 0.394 g, 1-Ethoxyethyl acr ylate0.039g, 1.73 mL of DDMAT/Toluene stock solution and 1.73 mL of AIBN/Toluene stock solution were added, and polymerization was performed in an oil bath at 70°C. After 90 minutes, the polymerization was stopped, and the copolymer was recovered by reprecipitation or dialysis against methanol.
  • mPEGA poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate
  • the operation of collecting by centrifugation (2,000 ⁇ g, 5 min) was repeated three times, and finally vacuum drying was performed to obtain poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co- (1-ethoxyethyl acrylate)] was obtained.
  • the degree of polymerization of each monomer and the number average molecular weight (M n,NMR ) were analyzed from the 1 H-NMR spectrum measured using NMR.
  • the degree of polymerization of BnA was 94
  • the degree of polymerization of EEA was 9
  • the M n,NMR was 65,900.
  • the molecular weight dispersity (M w /M n ) of the obtained copolymer was measured using GPC, and the result was 1.53.
  • Examples 2 to 68 By appropriately changing the type of monomer (mPEGA, BnA, EEA) used in Example 1, the amount charged, the reaction temperature, and the polymerization time and using the same method as in Example 1, the composition ratio and Polymers with different average molecular weights were produced.
  • Example 69 Production of poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(acrylic acid)]
  • Poly[(benzyl acrylate) obtained in Example 1 e) -co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(1-ethoxyethyl acrylate)] was treated with 0.5N HCl at room temperature to remove the ethoxyethyl group to obtain 1.176 g of a ternary copolymer having carboxyl groups.
  • the Z average particle diameter and polydispersity index in water of the obtained terpolymer were measured by dynamic light scattering (DLS), and the result was 8.5 nm (polydispersity index 0.14). there were.
  • Example 70 Method for producing (1,2-diaminocyclohexane)platinum (II)-containing SCNPs Cl (H 2 O) form (DACHPt ⁇ Cl ⁇ H 2 65.28 mg of O) was dissolved in 20 mL of purified water and stirred at 70°C for 2 hours. 287.4 mg of the terpolymer obtained in Example 69 was added to 5 mL of this solution, and the mixture was stirred at 50° C. overnight. After the stirring was completed, the reaction solution was purified by dialysis using purified water as an external liquid to obtain 5 mL of DACHPt-containing SCNP.
  • the Pt content of the DACHPt-containing SCNPs obtained after purification was measured by inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry (ICP-AES), and was 720 ⁇ g/mL (1.14 mg/mL as DACHPt). It was. Separately, 200 ⁇ L of DACHPt-containing SCNP was freeze-dried, the solid concentration was calculated, and the ratio with the Pt content was calculated to calculate the amount of Pt bonded per polymer, which was 3.4 mol/mol.
  • the Z-average particle diameter and polydispersity index of the obtained DACHPt-containing SCNPs were measured by dynamic light scattering (DLS), and were found to be 8.7 nm (polydispersity index 0.14). .
  • FIG. 3 shows the particle diameter of SCNP before and after encapsulating DACHPt. The particle size of SCNPs hardly changed before and after inclusion of DACHPt. The results are summarized in the table below.
  • ICP-AES measurement device Sequential high-frequency plasma light emitting device ICPE-9000/Shimadzu Pretreatment device: Microwave sample pretreatment device ETHOS EASY / Milestone General measurement wavelength: 214nm Standard solution: Platinum standard solution (Pt1000) for ICP analysis/Fuji Film Wako Pure Chemical Industries (2) DLS measuring device: Zetasizer NanoZS/Malvern Instruments Ltd. Measurement temperature: 25°C Sample concentration: 10mg/mL Result: Figure 3
  • Example 71 Production of N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(1-ethoxyethyl acrylate)] Chain transfer agent DDMA used in Example 1 N 3 ⁇ instead of T Synthesized using CTA.
  • N 3 -CTA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-azido-1-propanol ester
  • N 3 -CTA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-azido-1-propanol ester
  • N 3 -CTA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-azido-1-propanol ester
  • N 3 -CTA 2-(Dodecylthiocarbonothioylthio)-2-methylpropionic acid 3-a
  • AIBN 2,2'-Azobis (2-methylpropionitrile)
  • poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate (mPEGA, the average number of repeats (n) of ethylene glycol is 9) 2.592 g, Benzyl acrylate (BnA) 0.684 g, 1-Ethoxyethyl acr ylate0.172g, 4.15 mL of N 3 -CTA/Toluene stock solution and 3.46 mL of AIBN/Toluene stock solution were added, and polymerization was carried out in an oil bath at 70°C. After 90 minutes, the polymerization was stopped, and the copolymer was recovered by reprecipitation or dialysis against methanol.
  • mPEGA poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate
  • the operation of collecting by centrifugation (2,000 ⁇ g, 5 min) was repeated three times, and finally vacuum drying was performed to obtain N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate). 2.643 g of -co-(1-ethoxyethyl acrylate)] was obtained.
  • the degree of polymerization of each monomer and the number average molecular weight (M n,NMR ) were analyzed from the 1 H-NMR spectrum measured using NMR.
  • the degree of polymerization of BnA was 56
  • the degree of polymerization of EEA was 15,
  • the M n,NMR was 44,000.
  • the molecular weight dispersity (M w /M n ) of the obtained copolymer was measured using GPC, and the result was 1.32.
  • Example 72 Production of N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(acrylic acid)] zyl acrylate ) -co-
  • the Z-average particle diameter and polydispersity index in water of the obtained terpolymer were measured by dynamic light scattering (DLS), and the result was 7.5 nm (polydispersity index 0.18). there were.
  • the reaction solution was dialyzed against methanol, and after the solvent was distilled off, 265.7 mg of biotin-bound SCNP was recovered by vacuum drying.
  • the Z-average particle diameter and polydispersity index of the biotin-bound SCNPs were measured by dynamic light scattering (DLS) and were found to be 8.6 nm (polydispersity index 0.17).
  • Example 75 Compound (9) Production of bonded SCNP 200 mg of N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(acrylic acid)] obtained in Example 74 Compound (9) 30 mg was weighed into a glass vial, 5 mL of DMF was added and dissolved, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution was dialyzed against methanol, and after the solvent was distilled off, 197.4 mg of compound (9)-bound SCNP was recovered by vacuum drying. The Z-average particle diameter and polydispersity index of compound (9)-bound SCNP were measured by dynamic light scattering (DLS), and were found to be 7.2 nm (polydispersity index 0.18).
  • DLS dynamic light scattering
  • Example 77 Production of Compound (10)-bound SCNP Obtained from 200 mg of N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(acrylic acid)] and Example 76.
  • Compound (10) 30 mg was weighed into a glass vial, 5 mL of DMF was added and dissolved, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution was dialyzed against methanol, and after distilling off the solvent, 195.8 mg of compound (10)-bound SCNP was recovered by vacuum drying.
  • the Z-average particle diameter and polydispersity index of the compound (10)-bonded SCNP were measured by dynamic light scattering (DLS) and were found to be 8.3 nm (polydispersity index 0.19).
  • Example 79 Production of compound (11)-bound SCNP Obtained from 200 mg of N 3 -poly[(benzyl acrylate)-co-(poly(ethylene glycol) methyl ether acrylate)-co-(acrylic acid)] and Example 78.
  • Compound (11) 30 mg was weighed into a glass vial, 5 mL of DMF was added and dissolved, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution was dialyzed against methanol, and after the solvent was distilled off, 198.5 mg of compound (11)-bound SCNP was recovered by vacuum drying.
  • the Z-average particle diameter and polydispersity index of the compound (11)-bound SCNP were measured by dynamic light scattering (DLS), and were found to be 8.6 nm (polydispersity index 0.25).
  • DACHPt-containing SCNPs (DACHPt-containing SCNPs prepared using the copolymer of Example 70) were administered into the tail vein (three times every other day), and the antitumor effect was evaluated from the tumor volume (4 to 5 animals per group).
  • an oxaliplatin solution (Comparative Example 1) was used and administered in the same manner. The dosage of each preparation was 8 mg/kg (3.9 mg/kg in terms of Pt) for the oxaliplatin solution as the maximum dose that could be administered, and 3 mg/kg in terms of Pt for the DACHPt-containing SCNP.
  • Figure 16 shows the change in tumor volume over time.
  • T/C was 0.4 14 days after administration [T/C: ratio of tumor volume between drug administration group (T) and control group (C)].
  • T/C ratio of tumor volume between drug administration group (T) and control group (C)].
  • T/C ratio of tumor volume between drug administration group (T) and control group (C)].
  • T/C ratio of tumor volume between drug administration group (T) and control group (C)].
  • T/C ratio of tumor volume between drug administration group (T) and control group (C)
  • oxaliplatin solution Comparative Example 1
  • T/C was 1.1 14 days after administration.
  • 14 days after administration it was confirmed that DACHPt-containing SCNP significantly inhibited tumor growth compared to Control (student's t-test).
  • the above results indicate that DACHPt-containing SCNPs have superior antitumor effects compared to oxaliplatin solutions.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)

Abstract

本発明の課題は、薬物の送達技術に利用可能な新規コポリマーを提供することにある。　本発明は、次の式（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）で示される構造単位からなるコポリマーＸに標的親和性分子が結合したコポリマーに関する。 ［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］

Description

新規なコポリマー
　本発明は薬物送達技術に利用可能な新規コポリマーに関する。より詳細には腫瘍を標的とした薬剤送達キャリア用のコポリマー、当該コポリマーに抗がん剤等の生理活性物質を担持させた医薬用組成物、当該組成物を含有する医薬品に関する。
　近年、薬物を疾患部位へ効率的かつ安全に送達する技術として、ドラッグデリバリーシステム（Ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｓｙｓｔｅｍ，ＤＤＳ）に関する研究が盛んにおこなわれている。その中でも、疾患部位の構造的な特性を利用して薬物集積の選択性を高める技術として、ナノ粒子を薬物送達キャリアとしたＤＤＳの需要が高まっている。
　例えば固形がん組織においては、新生血管（腫瘍血管）の構造が正常血管と比較して未成熟であるため、血管内皮に数百ｎｍ程度の細胞間隙が生じており、物質の透過性が高い。この構造的特徴によりナノ粒子を含む高分子量体は、腫瘍血管を選択的に透過し固形がん組織に集積することが知られている。さらに、固形がん組織では高分子の排出に関与するリンパ系が機能不全を起こしているため、浸透したナノ粒子は組織内で持続的に滞留する（Ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ，ＥＰＲ効果）。一般的な低分子薬剤は血管細胞の膜透過により血管外に漏出するため、非選択的に組織に分布し、固形がん組織に集積しない。ＥＰＲ効果の方法論によれば、ナノ粒子を利用した薬物送達は、組織への分布が血管内皮細胞間隙の透過性により支配されるため、薬物の分布に固形がんへの組織選択性の向上をもたらす。それ故にＥＰＲ効果は、固形がんを標的としたナノテクノロジー応用医薬品（ナノメディシン）の開発における有力な学術的根拠となっている。
　ＥＰＲ効果における薬物の送達過程は血流を介しており、かつナノ粒子の血管外漏出プロセスは受動的であると考えられている。したがって、固形がんに対するナノ粒子の集積を最大化するためには、薬物送達キャリアとなるナノ粒子の構成成分に対して、長期の血中滞留に堪え得る分子デザインを付与することが重要である。それ故に薬物送達キャリアには、血液構成成分との非特異的相互作用、肝臓、脾臓、及び肺における細網内皮系（ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｓｙｓｔｅｍ，ＲＥＳ）による異物認識、腎臓における糸球体ろ過といった障壁を回避する能力が求められる。また、これらの障壁は、粒子径や生体適合性高分子による表面修飾といった粒子特性の最適化によって克服し得ることが知られている。例えば薬物送達キャリアの粒子径は、腎クリアランスの閾値である約６ｎｍよりも大きく、ＲＥＳによる認識を免れ得る２００ｎｍよりも小さいことが望ましい。
　また、薬物送達キャリアの粒子径は、疾患部位における組織浸透性にも影響を及ぼすことが知られている。例えば、同等の血中滞留性を示す粒子径３０ｎｍ、５０ｎｍ、７０ｎｍ及び１００ｎｍの薬物内包ナノ粒子の制がん活性が比較検討されており、粒子径３０ｎｍの薬物内包ナノ粒子は疾患部位深部まで到達することから最も高い治療効果を示すことが明らかとなっている（非特許文献１）。したがって、固形がんを標的とした薬物送達キャリア用のナノ粒子の粒子径は、腎クリアランスを回避し得る範囲で可能な限り小径であることが望ましいと考えられる。
　薬物送達キャリア用のナノ粒子としてはリポソーム、エマルジョン、又はナノパーティクルなどのコロイド分散体を用いる方法、アルブミン等の生物由来原料を用いる方法、天然多糖類等の天然高分子を用いる方法、あるいは合成高分子を用いる方法が開発されている。中でも合成高分子は、構成成分となるモノマーと合成方法を適切に選択することで、粒子径が精密に制御されたナノ粒子を調製することが可能であるため、薬物送達キャリアの構成成分として汎用されている。
　例えば、親水性セグメントと疎水性セグメントからなる両親媒性ブロック共重合体の薬物送達キャリアとしての利用方法について開示されている。該ブロック共重合体は分子間の疎水性相互作用等を駆動力として水性媒体中で自発的に会合し、コア－シェル型ナノ粒子（高分子ミセル）を形成する。該高分子ミセルの疎水性セグメントには低分子薬剤を内包若しくは結合することが可能であり、得られた薬物内包高分子ミセルは高い血中安定性を示すとともに、ＥＰＲ効果を介した固形がんへの選択的な集積により低分子薬剤の溶液投与と比較して高い制がん活性をもたらすことが知られている（特許文献１）。しかしながら高分子ミセルは、複数分子の会合体であることから、粒子径約３０ｎｍ程度が調製可能な下限値であり、腎クリアランスの影響を回避し得る粒子径１０ｎｍ付近での微細なサイズ制御は困難である。
　一方、合成高分子により形成されるナノ粒子のうち、１本鎖内の化学架橋、疎水性相互作用、イオン結合等を駆動力として粒子を形成するもの（以下、ｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ（ＳＣＮＰ）と略記する）は、粒子径２０ｎｍ以下の小径なナノ粒子を形成することが知られている（非特許文献２）。したがって、ＳＣＮＰは薬物送達キャリアとしての有用性が期待されるものの、その粒子径を精密に制御する技術はこれまで見出されていなかった。
　別の薬物送達技術としてアビジン／ビオチンの結合を利用するドラッグデリバリーシステムがある。アビジン／ストレプトアビジンとビオチンの親和性は非常に高く、その相互作用は、生化学、分子生物学、あるいは医学の分野で広く応用されている（非特許文献３、４）。さらに、その高い結合能と抗体分子とを組み合わせたドラッグデリバリーの方法およびプレターゲティング法が考案されている（非特許文献５）。
特許第３２７０５９２号公報
Ｈ．　Ｃａｂｒａｌ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｎａｔ．　Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．　６　８１５－８２３（２０１１） Ｊｏｓｅ　Ａ．　Ｐｏｍｐｏｓｏ，　Ｓｉｎｇｌｅ－Ｃｈａｉｎ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，　Ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｓ，　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（２０１７） Ｎ．　Ｓ．　Ｇｒｅｅｎ, Ａｄｖ. Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｃｈｅｍ.，２９：８５－１３３（１９７５） Ｎ．　Ｓ．　Ｇｒｅｅｎ, Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ．　１８４：５１－６７（１９９０） Ｄ．　Ｊ．　Ｈｎａｔｏｗｉｃｈ　ｅｔ　ａｌ.，Ｊ．　Ｎｕｃｌ．　Ｍｅｄ．　２８，１２９４－１３０２（１９８７）
　本発明は、腫瘍を標的とした薬剤送達キャリア用のコポリマーを提供することを課題とする。より詳しくは薬物の血中滞留性及び／又は腫瘍集積性を向上するために利用可能な薬物送達キャリア用のコポリマーを提供することを課題とする。
　本発明者らは、上述の課題を解決するために鋭意検討する中で、アクリル酸誘導体の３元共重合体が水中にてＳＣＮＰを形成する特性を見出した。また、ＳＣＮＰを２０ｎｍ以下の１０ｎｍ程度の微小なスケールにおける精密な粒子径制御が可能であるほか、腫瘍集積性が高い薬物送達キャリア用の新規ポリマーを創製することに成功した。更に、該ポリマーに抗がん剤を担持させ、大腸がん皮下移植モデルマウスに投与したところ、優れた抗腫瘍効果を確認した。さらには、プレターゲティング法に応用できるビオチン結合ＳＣＮＰを形成する前記３元共重合体誘導体の創生にも成功した。
　本発明は、以下の発明に関する。
［１］次の式（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）で示される構造単位を有するコポリマーＸに標的親和性分子が結合したコポリマー。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］
［２］前記コポリマーＸが、次の一般式（１）～（３）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］
で示される３種のモノマーの重合によって形成されるコポリマーである前記［１］記載のコポリマー。
［３］Ｒ1が水素原子である前記［１］又は［２］に記載のコポリマー。
［４］Ｒ2が水素原子である前記［１］～［３］のいずれかに記載のコポリマー。
［５］Ｒ3が水素原子である前記［１］～［４］のいずれかに記載のコポリマー。
［６］Ｒ4がメチル基である前記［１］～［５］のいずれかに記載のコポリマー。
［７］Ｒ5が置換基を有してもよいＣ6-18アリール基である前記［１］～［６］のいずれかに記載のコポリマー。
［８］Ｒ5がフェニル基である前記［１］～［７］のいずれかに記載のコポリマー。
［９］Ｒ6が、水素原子である前記［１］～［８］のいずれかに記載のコポリマー。
［１０］Ｒ6の脱離基が、次式（４）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
である前記［１］～［８］のいずれかに記載のコポリマー。
［１１］Ｒ6のリンカーが、次式（５）～（７）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
から選ばれるものである前記［１］～［８］のいずれかに記載のコポリマー。
［１２］Ｘ1が酸素原子である前記［１］～［１１］のいずれかに記載のコポリマー。
［１３］Ｘ2が酸素原子である前記［１］～［１２］のいずれかに記載のコポリマー。
［１４］Ｘ3が酸素原子である前記［１］～［１３］のいずれかに記載のコポリマー。
［１５］ｍが４～２２の整数である前記［１］～［１４］のいずれかに記載のコポリマー。
［１６］ｎが１である前記［１］～［１５］のいずれかに記載のコポリマー。
［１７］構造単位（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）の比率が、（Ａ）１質量部に対して、０．０１～１００質量部の（Ｂ）と、０．１～１００質量部の（Ｃ）で構成されている前記［１］～［１６］に記載のコポリマー。
［１８］モノマー（１）の１質量部に対して、０．０１～１００質量部のモノマー（２）と、０．１～１００質量部のモノマー（３）を重合させてなる前記［２］～［１６］のいずれかに記載のコポリマー。
［１９］数平均分子量が、５０００～１５００００である前記［１］～［１８］のいずれかに記載のコポリマー。
［２０］前記標的親和性分子が、ビオチン又はその誘導体である、前記［１］～［１９］のいずれかに記載のコポリマー。
［２１］前記標的親和性分子が、次式（ａ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
（式中、ＹはＯ又はＮＨを示す）
で表されるビオチン類残基を有する分子である、前記［１］～［１９］のいずれかに記載のコポリマー。
［２２］前記標的親和性分子が、次式（８）～（１１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
で表されるいずれかの分子である前記［１］～［１９］のいずれかに記載のコポリマー。
［２３］標的親和性分子と前記コポリマーＸとの結合が、共有結合又は非共有結合である、前記［１］～［２２］のいずれかに記載のコポリマー。
［２４］前記［１］～［２３］のいずれかに記載のコポリマーを含むｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ。
［２５］前記［１］～［２４］のいずれかに記載のコポリマーを含む医薬組成物。
［２６］プレターゲティング法に用いるための、前記［２５］に記載の医薬組成物。
　後記実施例から明らかなように、本発明のコポリマーの自己会合により得られたＳＣＮＰに抗がん剤を担持させたものは、マウス担癌モデルにおいて腫瘍増大抑制効果を示したことから、悪性腫瘍の治療剤として適用が可能である。本発明のコポリマーの自己会合により得られたＳＣＮＰに抗がん剤を担持させたものは、低用量で高い腫瘍増大抑制効果を有することから、薬理作用の増強と副作用の抑制との両立が可能な悪性腫瘍の治療剤を提供することができる。そして、本発明の標的親和性分子が結合したコポリマー（以下、標的親和性コポリマーと称することもある。）は、ビオチン／アビジンの結合を利用するドラッグデリバリー及びプレターゲティング剤として有用である。
図１は実施例１で得られたコポリマーについて、核磁気共鳴分光法（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＮＭＲ）を用いて測定した1Ｈ―ＮＭＲスペクトルを示す図である。 図２は実施例１で得られたコポリマーについて、ゲル浸透クロマトグラフィー（Ｇｅｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＰＣ）により得られたクロマトグラムを示す図である。 図３はＤＡＣＨＰｔ内包前のコポリマー（実施例６９）とＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰ（実施例７０）について、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）における粒子径測定結果（散乱強度分布）を示す図である。 図４は実施例７３で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、核磁気共鳴分光法（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＮＭＲ）を用いて測定した1Ｈ―ＮＭＲスペクトルを示す図である。 図５は実施例７３で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、ゲル浸透クロマトグラフィー（Ｇｅｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＰＣ）により得られたクロマトグラムを示す図である。 図６は実施例７３で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）における粒子径測定結果（散乱強度分布）を示す図である。 図７は実施例７５で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、核磁気共鳴分光法（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＮＭＲ）を用いて測定した1Ｈ―ＮＭＲスペクトルを示す図である。 図８は実施例７５で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、ゲル浸透クロマトグラフィー（Ｇｅｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＰＣ）により得られたクロマトグラムを示す図である。 図９は実施例７５で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）における粒子径測定結果（散乱強度分布）を示す図である。 図１０は実施例７７で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、核磁気共鳴分光法（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＮＭＲ）を用いて測定した1Ｈ―ＮＭＲスペクトルを示す図である。 図１１は実施例７７で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、ゲル浸透クロマトグラフィー（Ｇｅｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＰＣ）により得られたクロマトグラムを示す図である。 図１２は実施例７７で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）における粒子径測定結果（散乱強度分布）を示す図である。 図１３は実施例７９で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、核磁気共鳴分光法（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｒｅｓｏｎａｎｃｅ，ＮＭＲ）を用いて測定した1Ｈ―ＮＭＲスペクトルを示す図である。 図１４は実施例７９で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、ゲル浸透クロマトグラフィー（Ｇｅｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＧＰＣ）により得られたクロマトグラムを示す図である。 図１５は実施例７９で得られたビオチン結合ＳＣＮＰについて、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）における粒子径測定結果（散乱強度分布）を示す図である。 図１６はマウス大腸がん細胞株（Ｃ２６）の背部皮下移植モデルマウスにオキサリプラチン溶液、又はＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰ（実施例７０）を隔日３回投与した時の、相対腫瘍体積の変化を示す図である。
　本明細書において使用される用語は、特に言及する場合を除いて、当該分野で通常用いられる意味で使用される。以下に本発明についてさらに詳細に説明する。
　本明細書において「ナノ粒子」とは、１００ｎｍ以下の粒子径を示す構造体を指す。
　本明細書において「ｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ　（ＳＣＮＰ）」とは、１本鎖内の化学架橋、疎水性相互作用、イオン結合等を駆動力として形成されるナノ粒子を指す。２０ｎｍ以下という、ナノ粒子の中でも比較的小さい粒子径を示すことが多い。
　本明細書において「開始剤」とは、アゾ化合物や過酸化物などの熱ラジカル重合の開始剤を意味する。
　本明細書において「連鎖移動剤」とは、ラジカル重合において連鎖移動反応を生じさせる化合物を指し、好ましくはチオカルボニル基を有する化合物である。
　本明細書において「Ｃ1-3アルキル基」とは、直鎖又は分岐鎖の炭素数１～３のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基が挙げられる。
　本明細書において「Ｃ1-18アルキル基」とは、直鎖又は分岐鎖の炭素数１～１８のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基等が挙げられる。
　本明細書において「置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基」とは、炭素数３～８の環状アルキル基を意味し、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基等が挙げられる。置換基としては特に制限はないが、例えば、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基、炭素数２～６のアルキニル基、水酸基、炭素数１～６のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１～６のアルキルアミノ基、アルキル基が同一又は異なるジ炭素数１～６アルキルアミノ基、チオール基、炭素数１～６のアルキルチオ基、カルボキシル基、炭素数１～６のアルコキシカルボニル基、カルバモイル基等が挙げられる。
　本明細書において、「置換基を有してもよいＣ6-18アリール基」とは、単環式又は縮環多環式の芳香族炭化水素基を意味し、例えば、フェニル基、ナフチル基、アントラセニル基、フェナントレニル基、トリフェニレニル基、ピレニル基、クリセニル基、ナフタセニル基等が挙げられる。また、「置換基を有してもよいＣ6-14アリール基」とは、単環式又は縮環多環式の芳香族炭化水素基を意味し、例えば、フェニル基、ナフチル基、アントラセニル基、フェナントレニル基等が挙げられる。置換基としては特に制限はないが、例えば、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基、炭素数２～６のアルキニル基、水酸基、炭素数１～６のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１～６のアルキルアミノ基、アルキル基が同一又は異なるジ炭素数１～６のアルキルアミノ基、チオール基、炭素数１～６のアルキルチオ基、カルボキシル基、炭素数１～６のアルコキシカルボニル基、カルバモイル基等が挙げられる。
　本明細書において、「置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基」とは、環を構成する原子として炭素原子以外に窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～４個の複素原子を含む５～１０員の単環芳香族複素環基又は縮合芳香族複素環基を意味する。単環芳香族複素環基としては、例えば、フリル基、チエニル基、ピロリル基、ピリジニル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、イミダゾリル基、ピラジル基、チアリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、１，３，４－チアジアゾリル基、１，２，３－トリアゾリル基、１，２，４－トリアゾリル基、テトラゾリル基等が挙げられる。縮合芳香族複素環基としては、例えば、ベンゾフラニル基、ベンゾチオフェニル基、キノキサリニル基、インドリル基、イソインドリル基、イソベンゾフラニル基、クロマニル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、キノリル基、イソキノリニル基等が挙げられる。また、「置換基を有してもよい６～１０員へテロアリール基」とは、環を構成する原子として炭素原子以外に窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選ばれる１～４個の複素原子を含む６～１０員の単環芳香族複素環基又は縮合芳香族複素環基を意味する。単環芳香族複素環基としては、例えば、ピリジニル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基等が挙げられる。縮合芳香族複素環基としては、例えば、ベンゾフラニル基、ベンゾチオフェニル基、キノキサリニル基、インドリル基、イソインドリル基、イソベンゾフラニル基、クロマニル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、キノリル基、イソキノリニル基等が挙げられる。置換基としては特に制限はないが、例えば、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基、炭素数２～６のアルキニル基、水酸基、炭素数１～６のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１～６のアルキルアミノ基、アルキル基が同一又は異なるジ炭素数１～６のアルキルアミノ基、チオール基、炭素数１～６のアルキルチオ基、カルボキシル基、炭素数１～６のアルコキシカルボニル基、カルバモイル基等が挙げられる。
　本明細書において、「ハロゲン原子」としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。
　本明細書において「標的親和性分子」とは、アビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片に対して特異的な結合機能を有するビオチン又はその誘導体である。標的親和性分子は、本発明のコポリマーＸと静電的相互作用、水素結合、疎水的相互作用又は共有結合といった作用等により、コポリマーに担持されていればよい。
　本明細書において「プレターゲティング法」とは、癌細胞などの標的細胞へ的確に薬物を集積させる薬物送達手法である。まず、癌抗原特異的抗体分子などの分子プローブとアビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片との融合体を調製し、患者に投与することで、癌細胞にその融合体を集積させる。次に、上記アビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片に親和性を有するビオチンなどの標的親和性分子と医薬組成物とのコンジュゲートを患者に投与することによって、癌細胞へ的確に薬物を集積させる工程からなる。
　また、事前に癌抗原特異的抗体分子などの分子プローブとアビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片とのコンジュゲートと、その標的親和性分子と医薬組成物とのコンジュゲートとを結合させた複合体を調製し、この複合体を患者に投与することもできる。
　本明細書において「医薬組成物」とは、疾患の診断、予防又は治療に使用できる有効成分（薬物、生理活性物質）が本発明のコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーに静電的相互作用、水素結合、疎水的相互作用又は共有結合といった作用等により担持されているものを意味する。担持の形態としては、コポリマーＸ又は標的親和性コポリマーがナノ粒子を形成している場合、薬物が粒子表面に存している形態や薬物がナノ粒子内に内包されている形態、またはこれらの組合せ形態が挙げられる。
　本発明の一実施形態は、次の式（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）で示される構造単位を有するコポリマーＸに標的親和性分子が結合したコポリマー（標的親和性コポリマー）である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］
　本発明のコポリマーＸにおいて、構造単位（Ａ）は親水性を、構造単位（Ｂ）は疎水性を付与するユニットとしてそれぞれ機能する。また、構造単位（Ｃ）は有効成分（薬物、生理活性物質）とコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーが結合する足場として機能する。本発明のコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーは、この３種の構造単位を有することによって、水中でＳＣＮＰを形成する特性を有し、形成したＳＣＮＰが２０ｎｍ以下の微小なスケールにおける精密な粒子径制御が可能になり、腫瘍集積性が高い薬物送達キャリアとして機能する。
　構造単位（Ａ）中のＲ1は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　Ｘ1は、酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　ｍは１～１００の整数を示すが、３～１００の整数が好ましく、良好な親水性を付与する点から３～８０が好ましく、４～６０がより好ましく、４～４０がさらに好ましく、４～２２がよりさらに好ましい。
　Ｒ4は、Ｃ1-3アルキル基を示し、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ－プロピル基又はイソプロピル基であり、メチル基又はエチル基が好ましく、メチル基がより好ましい。
　構造単位（Ｂ）中のＲ2は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　Ｘ2は、酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　ｎは０～３の整数を示すが、１～３の整数が好ましく、１がより好ましい。
　Ｒ5は、水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示すが、構造単位（Ｂ）に疎水性を付与する点から、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基が好ましく、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有していてもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有していてもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有していてもよい５～１０員へテロアリール基がより好ましく、Ｃ1-18アルキル基、３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基又はＣ6-18アリール基がよりさらに好ましい。また一方で、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-14アリール基又は置換基を有してもよい６～１０員へテロアリール基も好ましい。
　ここで、置換基としては、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基及び炭素数２～６のアルキニル基から選ばれる１種又は２種以上が好ましい。
　構造単位（Ｃ）中のＲ3は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　Ｘ3は、酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　Ｒ6は、水素原子、脱離基又はリンカーを示す。この脱離基は、構造単位（Ｃ）が薬物（生理活性物質）と結合するときに脱離し得る基であり、リンカーは、構造単位（Ｃ）が薬物（生理活性物質）と結合するときに架橋に使用できる基である。これら脱離基又はリンカーとしては、置換基を有していてもよいＣ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ7-19アラルキル基が好ましい。ここで、置換基としては、例えば、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基、炭素数２～６のアルキニル基、水酸基、炭素数１～６のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１～６のアルキルアミノ基、アルキル基が同一又は異なるジ炭素数１～６のアルキルアミノ基、チオール基、炭素数１～６のアルキルチオ基、カルボキシル基、炭素数１～６のアルコキシカルボニル基、カルバモイル基等が挙げられる。これらの基のうち、リンカーとしては、置換基として、水酸基、アミノ基、チオール基、カルボキシル基などの官能基を有する基が好ましい。
　Ｒ6の脱離基の好ましい具体例としては、次式（４）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
で表される基が挙げられる。
　Ｒ6のリンカーの好ましい具体例としては、次式（５）～（７）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
　から選ばれる基が挙げられる。
　本発明のコポリマーＸは、式（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）で示される構造単位を有するコポリマーである。当該コポリマーＸはランダムコポリマーであってもよいし、ブロックコポリマーであってもよいが、好ましくはランダムコポリマーである。一分子中における各構造単位の組成比率は、（Ａ）を１質量部としたときに、（Ｂ）が０．０１～１００質量部であり、（Ｃ）が０．１～１００質量部の比率が好ましく、（Ａ）を１質量部としたときに、（Ｂ）が０．０５～１８質量部であり、（Ｃ）が０．１～２０質量部の比率がより好ましく、（Ａ）を１質量部としたときに、（Ｂ）が０．０５～４質量部であり、（Ｃ）が０．１～１６質量部の比率が特に好ましい。
　本発明のコポリマーＸの重合度は特に限定されないが、数平均分子量として、５０００～１５００００が好ましく、８０００～１５００００がより好ましい。
　本発明のコポリマーにおいて、前記のように、一般式（１）で示されるモノマーは親水性を、一般式（２）で示されるモノマーは疎水性を付与するユニットとして機能する。また、一般式（３）で示されるモノマーは薬物とコポリマーが結合する足場として機能する。一般式（２）で示される疎水性ユニットとして機能するモノマーとしては、例えば次式：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
　で示されるモノマーを例示することができる。
　一般式（１）中、Ｒ1は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　一般式（２）中、Ｒ2は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　一般式（３）中、Ｒ3は、水素原子又はＣ1-3アルキル基を示すが、水素原子又はメチル基が好ましく、また、水素原子、エチル基又はプロピル基が好ましく、水素原子がより好ましい。
　一般式（１）中、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、具体的にはメチル基、エチル基、ｎ－プロピル基又はイソプロピル基であり、メチル基又はエチル基が好ましく、メチル基がより好ましい。
　一般式（１）中、Ｘ1は酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　一般式（１）中、ｍは１～１００の整数を示すが、３～１００の整数が好ましく、良好な親水性を付与する点から３～８０が好ましく、４～６０がより好ましく、４～４０がさらに好ましく、４～２２がよりさらに好ましい。
　一般式（２）中、Ｒ5は、水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示すが、構造単位（Ｂ）に疎水性を付与する点から、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基が好ましく、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有していてもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有していてもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有していてもよい５～１０員へテロアリール基がより好ましく、Ｃ1-18アルキル基、３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基又はＣ6-18アリール基がさらに好ましい。また一方で、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-14アリール基又は置換基を有してもよい６～１０員へテロアリール基も好ましい。ここで、置換基としては、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基及び炭素数２～６のアルキニル基から選ばれる１種又は２種以上が好ましい。
　一般式（２）中、Ｘ2は、酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　一般式（２）中、ｎは０～３の整数を示すが、１～３の整数が好ましく、１がより好ましい。
　一般式（３）中、Ｒ6は、水素原子、脱離基又はリンカーを示す。これら脱離基又はリンカーとしては、置換基を有していてもよいＣ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、置換基を有していてもよいＣ7-19アラルキル基が好ましい。ここで、置換基としては、例えば、ハロゲン原子、炭素数１～６のアルキル基、炭素数２～６のアルケニル基、炭素数２～６のアルキニル基、水酸基、炭素数１～６のアルコキシ基、アミノ基、炭素数１～６のアルキルアミノ基、アルキル基が同一又は異なるジ炭素数１～６のアルキルアミノ基、チオール基、炭素数１～６のアルキルチオ基、カルボキシル基、炭素数１～６のアルコキシカルボニル基、カルバモイル基等が挙げられる。これらの基のうち、リンカーとしては、置換基として、水酸基、アミノ基、チオール基、カルボキシル基などの官能基を有する基が好ましい。
　Ｒ6の脱離基の好ましい具体例としては、次式（４）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
で表される基が挙げられる。
　Ｒ6のリンカーの好ましい具体例としては、次式（５）～（７）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
　から選ばれる基が挙げられる。
　一般式（３）中、Ｘ3は、酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示すが、酸素原子、硫黄原子又はＮＨが好ましく、酸素原子がより好ましい。
　本発明のコポリマーＸは、一般式（１）～（３）で示される３種のモノマーが共重合することによって、形成される。共重合はランダム共重合でもブロック共重合でもよいが、ランダム共重合することによって形成されるものが好ましい。３種のモノマーの配合比は、モノマー（１）の質量部を１としたときに、０．０１～１００質量部のモノマー（２）と、０．１～１００質量部のモノマー（３）を重合するのが好ましく、０．０５～１８質量部のモノマー（２）と、０．１～２０質量部のモノマー（３）を重合するのがより好ましく、０．０５～４質量部のモノマー（２）と、０．１～１６質量部のモノマー（３）を重合するのが特に好ましい。
　また、各種溶媒類が配位した「溶媒和物」も本発明のコポリマーＸに包含される。本明細書において「溶媒和物」としては、例えば水和物やエタノール和物等が挙げられる。溶媒は本発明のコポリマーＸに対し、任意の数で配位していてもよい。
　本発明のコポリマーＸは種々の公知の方法により製造することができる。製造方法は特に制限されるものではないが、例えば以下に記載する基本的な高分子の合成方法に従い、製造することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
［式中、Ｒ'は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ"は前記Ｒ4、Ｒ5又はＲ6で示される基を示す］
　本反応は、モノマー（Ｉ）に連鎖移動剤（ＩＩ）と開始剤を反応させて、ポリマー（ＩＩＩ）を製造する工程を示す。本反応は無溶媒で行うか、又はメタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等の溶媒中で行うことができ、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類を溶媒として用いることが好ましい。連鎖移動剤としては、２－（Ｄｏｄｅｃｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｙｌｔｈｉｏ）－２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｃｉｄ（ＤＤＭＡＴ）、Ｃｙａｎｏｍｅｔｈｙｌ　ｄｏｄｅｃｙｌｔｒｉｔｈｉｏｃａｒｂｏｎａｔｅ（ＣＤＴＴＣ）、２－Ｃｙａｎｏ－２－ｐｒｏｐｙｌｄｏｄｅｃｙｌ　ｔｒｉｔｈｉｏｃａｒｂｏｎａｔｅ（ＣＰＤＴＴＣ）、４－Ｃｙａｎｏ－４－［（ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｎｙｌ－ｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｙｌ）ｓｕｌｆａｎｙｌ］ｐｅｎｔａｎｏｉｃ　ａｃｉｄ（ＣＤＳＰＡ）、２－（Ｄｏｄｅｃｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｙｌｔｈｉｏ）－２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　３－ａｚｉｄｏ－１－ｐｒｏｐａｎｏｌ　ｅｓｔｅｒ（Ｎ3－ＣＴＡ）等を用いることができ、ＤＤＭＡＴ又はＮ3－ＣＴＡを用いることが好ましく、Ｎ3－ＣＴＡがさらに好ましい。連鎖移動剤を用いて重合した場合、本発明のコポリマーＸは、連鎖移動剤の構造の一部又は全部が部分的に結合した構造をとる。コポリマーＸが連鎖移動剤の構造を含む場合、適当な方法により、その構造を除去してもよい。開始剤としては、２，２'－Ａｚｏｂｉｓ－ｉｓｏｂｕｔｙｒｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＩＢＮ）、１，１'－Ａｚｏｂｉｓ（ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｃａｒｂｏｎｉｔｒｉｌｅ）（ＡＣＨＮ）、２，２'－Ａｚｏｂｉｓ－２－ｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＭＢＮ）、２，２'－Ａｚｏｂｉｓ－２，４－ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＤＶＮ）等のアゾ系重合開始剤を用いることができ、ＡＩＢＮを用いることが好ましい。反応温度は０～３００℃、好ましくは０～１５０℃、より好ましくは１～１００℃であり、反応時間は１分～４８時間、好ましくは５分～２４時間である。本反応において、構造の異なるモノマー（Ｉ）の共存下に反応を行うことで、ランダム共重合したコポリマーＸを製造することができる。
　例えば、連鎖移動剤として、アジド基を有するＮ3－ＣＴＡを用いれば、末端にアジド基を有するコポリマーＸが得られるので、後述のクリック反応により、標的親和性コポリマーの製造に有利である。
　前記のコポリマーＸに結合する標的親和性分子としては、アビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片に対して特異的な結合機能を有するビオチン又はその誘導体である。
　ビオチン又はその誘導体としては、例えば、ビオチン、ノルビオチン、ホモビオチン、イミノビオチン、オキシビオチン、チオビオチン、エチルビオチン、デスチオビオチン、ジアミノビオチン、ビオチンカルバメート、ビオチンカーボネート、トリスノルビオチンスルホキシド、ビスノルビオチンスルホキシド、ノルビオチンスルホキシド、ビオチンスルホキシド、ホモビオチンスルホキシド、ビスホモビオチンスルホキシド、トリスホモビオチンスルホキシド、ビオチンスルホン、還元型ビオチン（ビオチノール）や特開昭５８－１５４５０８号公報、国際公開第２０１４／１２９４４６号パンフレット記載の化合物等が挙げられる。また、ビオシチンやＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ社のＡｖｉｄｉｎ－Ｂｉｏｔｉｎ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｈａｎｄｂｏｏｋ記載のようなスペーサーを有した化合物を用いることもできる。さらに、天然ビオチンに対する親和性を低減させたストレプトアビジン変異体に対して高い親和性を有するビスビオチン誘導体として、国際公開第２０１５／１２５８２０号、国際公開第２０１８／１５１３０１号、国際公開第２０１９／１８９８６７号、国際公開第２０１９／２３０９０５号及び国際公開第２０２１／２１０５７３号パンフレット記載の化合物等が挙げられるが、これらに限定したものではない。
　このうち、ビオチン又はその誘導体としては、次の式（ａ）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
　（式中、ＹはＯ又はＮＨを示す）
　で表されるビオチン類残基を有する分子であるのが好ましい。
　好ましくは、次式（８）～（１１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
　より好ましくは、次式（８）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
　で示される化合物を挙げることができる。
　本発明の化合物に幾何異性体又は光学異性体が存在する場合は、それらの異性体の混合物又は分離物も本発明の範囲に含まれる。異性体の分離は常法により行うことができる。
　本発明の標的親和性コポリマーは種々の公知の方法により製造することができる。製造方法は特に制限されるものではないが、例えば以下に記載するクリック反応の合成方法に従い、製造することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
　「クリックケミストリー」は、以下の属性を有する、自然の生化学反応に似た反応に分類され、以下の特徴を有する。高収率になるまで迅速に進行する、非常に効率的な反応であり、また副生成物をまったく（又はほとんど）生成せず、かつ多官能基を許容する、非常に選択的な反応である。さらに低温（又は周囲）などの温和な反応条件下、又は水溶液中で進行する反応である。本反応は、水中又はメタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン等のエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピロリドン、アセトニトリル、酢酸エチル等の溶媒中で行うことができ、水中又はＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを溶媒として用いることが好ましい。いくつかの態様では、シクロオクチンは、ジベンゾシクロオクチン（ＤＢＣＯ）、ジフルオロベンゾシクロオクチン（ＤＩＦＢＯ）、ビアリールアザシクロオクチノン（ＢＡＲＡＣ）、ジベンゾシクロオクチン（ＤＩＢＯ）、二フッ素化シクロオクチン（ＤＩＦＯ）、一フッ素化シクロオクチン（ＭＯＦＯ）、ジメトキシアザシクロオクチン（ＤＩＭＡＣ）又はアリールレスオクチン（ａｒｙｌ－ｌｅｓｓ ｏｃｔｙｎｅ）（ＡＬＯ）であり、ジベンゾシクロオクチン（ＤＢＣＯ）を用いることが好ましい。いくつかの態様では、アルキンは、脂肪族アルキンであり、及び反応させるステップは、銅（Ｉ）触媒の存在下で実施される。いくつかの態様では、アルキンは、シクロオクチンであり、及び反応させるステップは、銅フリー条件下で実施される。反応温度は０～３００℃、好ましくは０～１５０℃、より好ましくは１～１００℃であり、反応時間は１分～４８時間、好ましくは５分～２４時間である。
　前記反応式の反応は、クリック反応の一種であるヒュスゲン環化反応（Ｈｕｉｓｇｅｎ　ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ）であり、アジドとアルキンから１，２，３－トリアゾールを形成する１，３－双極子付加環化反応である。
　製造した本発明のポリマーＸ及び標的親和性コポリマーは、高分子化学の分野において一般に知られているポリマーの単離、精製方法によって精製することができる。具体的には、例えば抽出、再結晶、硫酸アンモニウムや硫酸ナトリウムなどによる塩析、遠心分離、透析、限外濾過法、吸着クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィー、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、ゲル濾過法、ゲル浸透クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、電気泳動法、向流分配などや、これらの組合せなどの処理操作が挙げられる。
　本発明のコポリマーＸ及び標的親和性コポリマーは、種々の生理活性物質（薬物）を輸送するための担体として利用することができる。例えば、本発明のコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーに腫瘍治療薬を担持（内包）した医薬組成物は、後記する試験例において確認されたように、腫瘍の増殖を抑制することから、例えば大腸がん、十二指腸がん、胃がん、膵がん、肝がん、肺がん、子宮がん、卵巣がん等種々の癌疾患に対する予防及び／または治療剤として使用することができる。また、腫瘍集積能が高いことから、腫瘍の診断薬、造影剤として使用することができる。
　本発明のコポリマー及び標的親和性コポリマーを薬物輸送担体として使用するとき、その投与量及び投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度等を勘案して適宜選択すればよく、投与量や投与回数は限定されるべきものではないが、薬物を内包するポリマーを注射剤により静脈内注射する場合、成人一人（６０ｋｇ）当たりに対し、例えば、１回の投与において０．１２ｍｇ～１２００００００ｍｇの量を投与することが好ましく、１．２ｍｇ～１２０００００ｍｇの量を投与することがより好ましく、１２～１２００００ｍｇの量を投与することが特に好ましい。
　本発明の医薬組成物は、本発明のコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーと薬物を混合することにより製造することができる。好ましくは、本発明のコポリマー又は標的親和性コポリマーと薬物を混合して、ｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅを製造するか、本発明のコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーのｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅを製造してから薬物を混合すればよい。ｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅは、公知の方法により製造することができる。
　本発明の医薬組成物において、薬物は、静電的相互作用、水素結合、疎水的相互作用又は共有結合といった作用等により、コポリマーＸ又は標的親和性コポリマーに担持されていればよい。
　薬物としては、種々の癌疾患に用いるものであればよく、癌細胞に作用して癌細胞の増殖を抑制する抗癌剤が好ましく、例えば、代謝拮抗薬、アルキル化剤、アントラサイクリン、抗生物質、有糸分裂阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、又は抗ホルモン剤等が挙げられる。
　代謝拮抗薬として、例えば、アザチオプリン、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、フルダラビン、ペントスタチン、クラドリビン、５－フルオロウラシル（５ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦＵＤＲ）、シトシンアラビノシド（シタラビン）、メトトレキセート、トリメトプリム、ピリメタミン、又はペメトレキセド等が挙げられる。アルキル化剤としては、例えば、シクロホスファミド、メクロレタミン、ウラムスチン、メルファラン、クロラムブシル、チオテパ／クロラムブシル、イホスファミド、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ブスルファン、ジブロモマンニトール、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、ミリプラチン、サトラプラチン、トリプラチンテトラニトレート、プロカルバジン、アルトレタミン、ダカルバジン、ミトゾロミド、トラベクテジン、又はテモゾロミド等が挙げられる。アントラサイクリンとしては、例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、バルルビシン、アクラルビシン、アムルビシン、ピラルビシン等が挙げられる。抗生物質としては、例えば、ダクチノマイシン、ブレオマイシン、ミトラマイシン、アントラマイシン、ストレプトゾトシン、グラミシジンＤ、スタウロスポリン、マイトマイシン類（例えば、マイトマイシンＣ）、デュオカルマイシン類（例えば、ＣＣ－１０６５）、又はカリケアマイシン類等が挙げられる。有糸分裂阻害剤としては、例えば、メイタンシノイド類（例えば、ＤＭ０、メルタンシン（別名ＤＭ１）、ＤＭ２、ＤＭ３、ＤＭ４、又はエムタンシン）、アウリスタチン（例えば、アウリスタチンＥ、アウリスタチンフェニルアラニンフェニレンジアミン（ＡＦＰ）、モノメチルアウリスタチンＥ、モノメチルアウリスタチンＤ、およびモノメチルアウリスタチンＦ）、ドラスタチン類、クリプトフィシン類、ビンカアルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン）、タキサン類（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル）、又はコルヒチン類等が挙げられる。トポイソメラーゼ阻害剤としては、例えば、イリノテカン、トポテカン、ノギテカン、アムサクリン、エトポシド、テニポシド、ミザントロン、ミトキサントロン、ＳＮ－３８、エキサテカン、デルクステカン等が挙げられる。プロテアソーム阻害剤としては、例えば、ペプチジルボロン酸、カルフィルゾミブ、ボルテゾミブ等を挙げることができる。抗ホルモン剤としては、例えば、フルベストラント、タモキシフェン、トレミフェン等を挙げることができる。これら薬物を用いて本発明の医薬組成物に製する場合、１つ又は複数を組み合わせて用いることもでき、薬物はフリー体としてコポリマーＸ又は標的親和性コポリマーに担持されていればよい。
　本発明の医薬組成物の投与経路は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口投与製剤、注射剤または経皮投与製剤などの非経口投与製剤で投与可能であるが、例えば、動脈内注射、静脈内注射、皮下注射、筋肉内注射、腹腔内注射等の非経口投与が好ましく、動脈内注射及び静脈内注射がより好ましい。投与回数は限定されるべきものではないが、例えば、１週間平均当たり、１回～数回投与することが挙げられる。
　投与経路に適した各種製剤は、製剤上通常用いられる賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、潤滑剤、界面活性剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、溶解補助剤、防腐剤、矯味矯臭剤、無痛化剤、安定化剤、等張化剤等の製剤添加物などを適宜選択し、常法により製造することができる。
　上記各種製剤に含まれうる製剤添加物は、医薬的に許容されるものであれば特に限定されるものではない。このような製剤添加物の例として、精製水、注射用水、注射用蒸留水、医薬的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトースなどが挙げられる。使用される添加物は、各種製剤に応じて適宜選択し、単独又は組み合わせて使用することができる。
　なお注射剤は、非水性の希釈剤（例えば、ポリエチレングリコール、オリーブ油等の植物油、エタノール等のアルコール類など）、懸濁剤又は乳濁剤として調製することもできる。注射剤の無菌化は、フィルターによる濾過滅菌、殺菌剤等の配合により行うことができる。また、注射剤は、用時調製の形態として製造することができる。即ち、凍結乾燥法などによって、無菌の固体組成物とし、使用前に注射用水、注射用蒸留水又は他の溶媒に溶解して使用することができる。
　本発明の標的親和性コポリマーを用いる治療方法は、まず、癌抗原特異的抗体分子などの分子プローブとアビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片との融合体を調製し、患者に投与することで、癌細胞にその融合体を集積させる。次に、本発明の標的親和性コポリマーと抗癌剤とのコンジュゲートを患者に投与することによって、癌細胞へ的確に薬物を集積させる工程からなる。
　また、事前に癌抗原特異的抗体分子などの分子プローブとアビジン／ストレプトアビジンもしくはその変異（改変）体や機能性断片とのコンジュゲートと、本発明の標的親和性コポリマーと抗癌剤とのコンジュゲートとを結合させた複合体を調製し、この複合体を患者に投与することもできる。
　以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明する。これらの実施例は例示のために提供されたものであり、本発明の実施形態を限定するものではない。
［実施例１］ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］の製造
（１）１－Ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ（ＥＥＡ）の合成
　アルゴン雰囲気下にて、Ｅｔｈｙｌ　ｖｉｎｙｌ　ｅｔｈｅｒ（２８．７２５ｍＬ）を秤取し、氷冷下にてＰｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ（５０ｍｇ）を加えた。その後、Ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ（１７．１５ｍＬ）を加え、室温にて４８時間攪拌した。Ｈｙｄｒｏｔａｌｃｉｔｅ（３ｇ）を加えて、さらに２時間攪拌し、反応を停止した。セライトろ過後、エバポレーションにより、未反応のＥｔｈｙｌ　ｖｉｎｙｌ　ｅｔｈｅｒを除去した。重合禁止剤としてＰｈｅｎｏｔｈｉａｚｉｎｅを５００ｐｐｍとなるように加え、水素化カルシウムと共に減圧蒸留することにより精製した（蒸留温度　２８－３２℃）。得られた１－Ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅはガラスバイヤルに分取し、―３０℃にて保管した。
　13Ｃ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3），δ，ｐｐｍ：１５．２９　（－ＯＣＨ2ＣＨ3），２１．１６（－ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）），６４．９８（－ＯＣＨ2－），９６．７３（－ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）），１２８．８４（ＣＨ2ＣＨ－），１３１．４３（ＣＨ2ＣＨ－），１６６．００（－ＣＯＯ）．
（２）ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］の合成
　１００ｍｇの２－（Ｄｏｄｅｃｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｙｌｔｈｉｏ）－２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｃｉｄ（ＤＤＭＡＴ）を秤取し、Ｔｏｌｕｅｎｅ１７．３ｍＬに溶かしてＤＤＭＡＴ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＤＤＭＡＴ濃度として５．７８ｍｇ／ｍＬ）とした。同様に、２２ｍｇの２，２'－Ａｚｏｂｉｓ（２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｔｒｉｌｅ）（ＡＩＢＮ）を秤取し，Ｔｏｌｕｅｎｅ１７．３ｍＬに溶かしてＡＩＢＮ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＡＩＢＮ濃度として１．２７ｍｇ／ｍＬ）とした。別に、ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ（ｍＰＥＧＡ，エチレングリコールの繰り返し数の平均値（ｎ）は９である。）１．２９６ｇ、Ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ（ＢｎＡ）０．３９４ｇ、１－Ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ０．０３９ｇ、ＤＤＭＡＴ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　１．７３ｍＬ及びＡＩＢＮ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　１．７３ｍＬを加え、７０℃の油浴にて重合を行った。９０分経過後、重合を停止した後、反応溶液を再沈殿法またはメタノールに対し透析することでコポリマーを回収した。得られたコポリマーは基本的に粘稠体であるため、再沈殿法については、貧溶媒（ヘキサン／酢酸エチル＝７／３［ｖ／ｖ］）を加えた遠沈管に反応溶液を滴下し、遠心分離（２，０００×ｇ、５ｍｉｎ）により回収する操作を３回繰り返し、最終的に真空乾燥を行ない、ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］を１．２２３ｇ得た。
　得られたコポリマーについて、ＮＭＲを用いて測定した1Ｈ－ＮＭＲスペクトルより各モノマーの重合度、並びに数平均分子量（Ｍn,NMR）を解析した結果、ｍＰＥＧＡ（ｎ＝９）の重合度は１０２、ＢｎＡの重合度は９４、ＥＥＡの重合度は９であり、Ｍn,NMRは６５，９００であった。さらに、得られたコポリマーについて、ＧＰＣを用いて、分子量分散度（Ｍw／Ｍn）を測定した結果１．５３であった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
［測定装置と条件等］
（１）1Ｈ－ＮＭＲ測定
装置：ＪＮＭ－ＥＣＸ４００（４００ＭＨｚ）／日本電子
溶媒：Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ－ｄ6　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
      ０．０３％　ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ／関東化学
試料濃度：２０ｍｇ／ｍＬ
測定温度：２５℃
積算回数：２５６回
結果：図１
（２）ＧＰＣ測定
装置：ＨＰＬＣ－Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ／島津製作所
検出器：ＲＩＤ－１０Ａ　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｄｅｘ
        ｄｅｔｅｃｔｏｒ／島津製作所
カラム：ＴＳＫｇｅｌ　α－２５００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
        （カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径　７μｍ，
          排除限界分子量　５×１０3）
        ＴＳＫｇｅｌ　α－４０００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
        （カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径　１０μｍ，
          排除限界分子量　４×１０5）
        ＴＳＫｇｅｌ　ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍ／東ソー
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌの臭化リチウムを含有する
Ｎ，Ｎ－ｄｉｍｅｔｈｙｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）
温度：４０℃
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
試料濃度：６ｍｇ／ｍＬ
標準物質：Ｐｏｌｙ（ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）
          ｓｔａｎｄａｒｄ　ＲｅａｄｙＣａｌ　ｓｅｔ，
          Ｍp　８００－２，２００，０００Ｄａ／ＳＩＧＭＡ
結果：図２
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000027
［実施例２～６８］
　実施例１で用いたモノマー（ｍＰＥＧＡ、ＢｎＡ、ＥＥＡ）の種類、仕込み量、反応温度、重合時間を適宜変更し、実施例1と同様の方法を用いることにより、下表に示す、組成比率や平均分子量の異なるポリマーを製造した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000028
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000029
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000030
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000031
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000032
［実施例６９］
ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］の製造
　実施例１で得たｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］を室温にて０．５Ｎ　ＨＣｌで処理することにより、ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ基を脱離してカルボキシル基を有する３元共重合体１．１７６ｇを得た。得られた３元共重合体の水中におけるＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、８．５ｎｍ（多分散指数　０．１４）であった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
［測定装置と条件等］
（１）ＤＬＳ測定
装置：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ 
      Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図３
［実施例７０］
（１，２－ｄｉａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）ｐｌａｔｉｎｕｍ（ＩＩ）内包ＳＣＮＰの製造方法
　（１，２－ｄｉａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）ｐｌａｔｉｎｕｍ（ＩＩ）（以下、ＤＡＣＨＰｔと略記する）のＣｌ（Ｈ2Ｏ）体（ＤＡＣＨＰｔ・Ｃｌ・Ｈ2Ｏ）６５．２８ｍｇを精製水２０ｍＬに溶解し、７０℃にて２時間撹拌した。この溶液５ｍＬに対し、実施例６９で得た３元共重合体２８７．４ｍｇを添加し、５０℃にて一晩撹拌した。撹拌終了後、反応溶液を、精製水を外液として透析精製し、ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰを５ｍＬ得た。精製後に得られたＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰのＰｔ含量は誘導結合プラズマ発光分析（Ｉｎｄｕｃｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｕｐｌｅｄ　ｐｌａｓｍａ－ａｔｏｍｉｃ　ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＩＣＰ－ＡＥＳ）により測定し、７２０μｇ／ｍＬ（ＤＡＣＨＰｔとして１．１４ｍｇ／ｍＬ）であった。別途、ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰ２００μＬを凍結乾燥し、固形分濃度を算出した後、Ｐｔ含量との比をとりポリマーあたりのＰｔ結合量を算出した結果、３．４ｍｏｌ／ｍｏｌであった。また、得られたＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰのＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、８．７ｎｍ（多分散指数　０．１４）であった。ＤＡＣＨＰｔ内包前後のＳＣＮＰの粒子径を図３に示す。ＳＣＮＰの粒子径は、ＤＡＣＨＰｔ内包前後でほとんど変動しなかった。結果を下表にまとめた。
［測定装置と条件等］
（１）ＩＣＰ－ＡＥＳ測定
装置：シーケンシャル高周波プラズマ発光装置　ＩＣＰＥ－９０００／島津
      製作所
前処理装置：マイクロ波試料前処理装置　ＥＴＨＯＳ　ＥＡＳＹ
            ／マイルストーン　ゼネラル
測定波長：２１４ｎｍ
標準溶液：白金標準液（Ｐｔ１０００）　ＩＣＰ分析用／富士フィルム和光
          純薬
（２）ＤＬＳ測定
装置：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ
    　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図３
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000034
［実施例７１］
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］の製造
　実施例１で用いた連鎖移動剤ＤＤＭＡＴの代わりにＮ3－ＣＴＡを用いて合成した。１００ｍｇの２－（Ｄｏｄｅｃｙｌｔｈｉｏｃａｒｂｏｎｏｔｈｉｏｙｌｔｈｉｏ）－２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　３－ａｚｉｄｏ－１－ｐｒｏｐａｎｏｌ　ｅｓｔｅｒ　（Ｎ3－ＣＴＡ）を秤取し、Ｔｏｌｕｅｎｅ１７．３ｍＬに溶かしてＮ3－ＣＴＡ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｎ3－ＣＴＡ濃度として５．７８ｍｇ／ｍＬ）とした。同様に、１０ｍｇの２，２'－Ａｚｏｂｉｓ（２－ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐｉｏｎｉｔｒｉｌｅ）（ＡＩＢＮ）を秤取し，Ｔｏｌｕｅｎｅ７．８７ｍＬに溶かしてＡＩＢＮ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＡＩＢＮ濃度として１．２７ｍｇ／ｍＬ）とした。別に、ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ（ｍＰＥＧＡ，エチレングリコールの繰り返し数の平均値（ｎ）は９である。）２．５９２ｇ、Ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ（ＢｎＡ）０．６８４ｇ、１－Ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ０．１７２ｇ、Ｎ3－ＣＴＡ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　４．１５ｍＬ及びＡＩＢＮ／Ｔｏｌｕｅｎｅ　ｓｔｏｃｋ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　３．４６ｍＬを加え、７０℃の油浴にて重合を行った。９０分経過後、重合を停止した後、反応溶液を再沈殿法またはメタノールに対し透析することでコポリマーを回収した。得られたコポリマーは基本的に粘稠体であるため、再沈殿法については、貧溶媒（ヘキサン／酢酸エチル＝７／３［ｖ／ｖ］）を加えた遠沈管に反応溶液を滴下し、遠心分離（２，０００×ｇ、５ｍｉｎ）により回収する操作を３回繰り返し、最終的に真空乾燥を行ない、Ｎ 3 －ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］を２．６４３ｇ得た。得られたコポリマーについて、ＮＭＲを用いて測定した1Ｈ－ＮＭＲスペクトルより各モノマーの重合度、並びに数平均分子量（Ｍn,NMR）を解析した結果、ｍＰＥＧＡ（ｎ＝９）の重合度は７０、ＢｎＡの重合度は５６、ＥＥＡの重合度は１５であり、Ｍn,NMRは４４，０００であった。さらに、得られたコポリマーについて、ＧＰＣを用いて、分子量分散度（Ｍw／Ｍn）を測定した結果１．３２であった。
［実施例７２］
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］の製造
　実施例７１で得たＮ 3 －ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（１－ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）］を室温にて０．５Ｎ　ＨＣｌで処理することにより、ｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ基を脱離してカルボキシル基を有する３元共重合体２．４５５ｇを得た。得られた３元共重合体の水中におけるＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、７．５ｎｍ（多分散指数　０．１８）であった。
［実施例７３］
　ビオチン結合ＳＣＮＰの製造
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］２７５ｍｇ及び（（１Ｒ，８Ｓ，９Ｓ）－ｂｉｃｙｃｌｏ［６．１．０］ｎｏｎ－４－ｙｎ－９－ｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ（２２－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－ｉｍｉｎｏｈｅｘａｈｙｄｒｏ－１Ｈ－ｔｈｉｅｎｏ［３，４－ｄ］ｉｍｉｄａｚｏｌ－４－ｙｌ）－９－（２－（（４－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－ｉｍｉｎｏｈｅｘａｈｙｄｒｏ－１Ｈ－ｔｈｉｅｎｏ［３，４－ｄ］ｉｍｉｄａｚｏｌ－４－ｙｌ）ｐｅｎｔａｎａｍｉｄｏ）ｂｕｔｙｌ）ａｍｉｎｏ）－２－ｏｘｏｅｔｈｙｌ）－１１，１８－ｄｉｏｘｏ－３，６－ｄｉｏｘａ－９，１２，１７－ｔｒｉａｚａｄｏｃｏｓｙｌ）ｃａｒｂａｍａｔｅ１９．５ｍｇをガラスバイヤルに秤取し、ＤＭＦ　５ｍＬを添加して溶解させ、室温にて終夜攪拌した。反応溶液をメタノールに対して透析し、溶媒留去後に真空乾燥によりビオチン結合ＳＣＮＰ　２６５．７ｍｇを回収した。ビオチン結合ＳＣＮＰのＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、８．６ｎｍ（多分散指数　０．１７）であった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
［測定装置と条件等］
（１）1Ｈ－ＮＭＲ測定
装置：ＪＮＭ－ＥＣＸ４００（４００ＭＨｚ）／日本電子
溶媒：Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ－ｄ6　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
    　０．０３％　ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ／関東化学
試料濃度：２０ｍｇ／ｍＬ
測定温度：２５℃
積算回数：６０００回
結果：図４
（２）ＧＰＣ測定
装置：ＨＰＬＣ－Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ／島津製作所
検出器：ＲＩＤ－１０Ａ　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｄｅｘ
       ｄｅｔｅｃｔｏｒ／島津製作所
カラム：ＴＳＫｇｅｌ　α－２５００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
　　　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径７μｍ，
         排除限界分子量　５×１０3）
        ＴＳＫｇｅｌ　α－４０００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
　　　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径１０μｍ，
         排除限界分子量　４×１０5）
        ＴＳＫｇｅｌ　ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍ／東ソー
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌの臭化リチウムを含有するＮ，Ｎ－
        ｄｉｍｅｔｈｙｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）
温度：４０℃
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
試料濃度：６ｍｇ／ｍＬ
標準物質：Ｐｏｌｙ（ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）
          ｓｔａｎｄａｒｄ　ＲｅａｄｙＣａｌ　ｓｅｔ，
        　Ｍp　８００－２，２００，０００Ｄａ／ＳＩＧＭＡ
結果：図５
（３）ＤＬＳ測定
装置：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ
    　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図６
［実施例７４］
　（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）メチル（２－（２－（２－（３，５－ビス（６－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）ヘキサナミド）ベンザミド）エトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）の合成
　（３ａＳ，３ａ'Ｓ，４Ｓ，４'Ｓ，６ａＲ，６ａ'Ｒ）－４，４'－｛５，５'－［６，６'－（５－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチルカルボニル）－１，３－フェニリン）ビス（アザンジイル）ビス（６－オキソヘキサン－６，１－ジイル）］ビス（アザンジイル）ビス（５－オキソペンタン－５，１－ジイル）｝ビス（テトラヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－２（３Ｈ）－イミニウム）トリ（２，２，２－トリフルオロアセテート）４１５ｍｇにＤＭＦ１５ｍＬ、トリエチルアミン４４５μＬ及び（１Ｒ，８Ｓ，９Ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イルメチル　Ｎ－スクシンイミジル　カルボナート（ＢＣＮ－ＮＨＳ）９３．０ｍｇを加え、室温で２時間攪拌した。濃縮後、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（０．１％　ＴＦＡ水溶液／ＭｅＯＨ　＝　９０／１０→３０／７０）にて精製し、（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）メチル　（２－（２－（２－（３，５－ビス（６－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）ヘキサナミド）ベンザミド）エトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）（化合物（９））３０２ｍｇを得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
1Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ：８．０２（ｂｒｓ，１Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ），４．７１（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．５２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７０－３．６２（ｍ，６Ｈ），３．５９－３．５２（ｍ，４Ｈ），３．２９－３．２４（ｍ，４Ｈ），３．１９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ），２．９８（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ），２．２６－２．１０（ｍ，１０Ｈ），１．７９－１．５１（ｍ，１８Ｈ），１．４７－１．３８（ｍ，８Ｈ），１．３８－１．３０（ｍ，１Ｈ），０．９０（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ）
［実施例７５］
　化合物（９）結合ＳＣＮＰの製造
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］２００ｍｇ及び実施例７４で得た化合物（９）３０ｍｇをガラスバイヤルに秤取し、ＤＭＦ　５ｍＬを添加して溶解させ、室温にて終夜攪拌した。反応溶液をメタノールに対して透析し、溶媒留去後に真空乾燥により化合物（９）結合ＳＣＮＰ　１９７．４ｍｇを回収した。化合物（９）結合ＳＣＮＰのＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、７．２ｎｍ（多分散指数　０．１８）であった。
［測定装置と条件等］
（１）1Ｈ－ＮＭＲ測定
装置：ＪＮＭ－ＥＣＸ４００（４００ＭＨｚ）／日本電子
溶媒：Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ－ｄ6　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
      ０．０３％　ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ／関東化学
試料濃度：２０ｍｇ／ｍＬ
測定温度：２５℃
積算回数：６０００回
結果：図７
（２）ＧＰＣ測定
装置：ＨＰＬＣ－Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ／島津製作所
検出器：ＲＩＤ－１０Ａ　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｄｅｘ
      　ｄｅｔｅｃｔｏｒ／島津製作所
カラム：ＴＳＫｇｅｌ　α－２５００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
       （カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径７μｍ，
      　排除限界分子量　５×１０3）
    　　ＴＳＫｇｅｌ　α－４０００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
       （カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径１０μｍ，
        排除限界分子量　４×１０5）
        ＴＳＫｇｅｌ　ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍ／東ソー
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌの臭化リチウムを含有するＮ，Ｎ－
        ｄｉｍｅｔｈｙｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）
温度：４０℃
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
試料濃度：６ｍｇ／ｍＬ
標準物質：Ｐｏｌｙ（ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）
          ｓｔａｎｄａｒｄ　ＲｅａｄｙＣａｌ　ｓｅｔ，
        　Ｍp　８００ － ２，２００，０００Ｄａ／ＳＩＧＭＡ
結果 ：図８
（３）ＤＬＳ測定
装置：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ
    　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図９
［実施例７６］
　（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）メチル　（２－（２－（２－（３－（３，５－ビス（（２－（２－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）エトキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ウレイド）エトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）の合成
　５－（３－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）ウレイド）－Ｎ1，Ｎ3－ビス（２－（２－（５－（（３ａＳ，３ａ'Ｓ，４Ｓ，４'Ｓ，６ａＲ，６ａ'Ｒ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）エトキシ）エチル）イソフタルアミド　トリ（２，２，２－トリフルオロアセテート）４５０ｍｇにＤＭＦ１５ｍＬ、Ｅｔ3Ｎ４７５μＬ及びＢＣＮ－ＮＨＳ９９．３ｍｇを加え、室温で２時間攪拌した。濃縮後、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（０．１％　ＴＦＡ水溶液／ＭｅＯＨ　＝　９０／１０→３０／７０）にて精製し、（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）メチル（２－（２－（２－（３－（３，５－ビス（（２－（２－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）エトキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ウレイド）エトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）（化合物（１０））３２７ｍｇを得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
1Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ：８．００（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．７１（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝４．０，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６７－３．６３（ｍ，８Ｈ），３．６２－３．５１（ｍ，１２Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，４Ｈ），３．２９－３．２７（ｍ，２Ｈ），３．２６－３．１９（ｍ，２Ｈ），２．９８（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．８Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２６－２．１０（ｍ，１０Ｈ），１．７３－１．６２（ｍ，２Ｈ），１．６１－１．４６（ｍ，８Ｈ），１．４１－１．２８（ｍ，５Ｈ），０．９０（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ）
［実施例７７］
　化合物（１０）結合ＳＣＮＰの製造
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］２００ｍｇ及び実施例７６で得た化合物（１０）３０ｍｇをガラスバイヤルに秤取し、ＤＭＦ　５ｍＬを添加して溶解させ、室温にて終夜攪拌した。反応溶液をメタノールに対して透析し、溶媒留去後に真空乾燥により化合物（１０）結合ＳＣＮＰ　１９５．８ｍｇを回収した。化合物（１０）結合ＳＣＮＰのＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、８．３ｎｍ（多分散指数　０．１９）であった。
［測定装置と条件等］
（１）1Ｈ－ＮＭＲ測定
装置：ＪＮＭ－ＥＣＸ４００（４００ＭＨｚ）／日本電子
溶媒：Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ－ｄ6　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
    　０．０３％　ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ／関東化学
試料濃度：２０ｍｇ／ｍＬ
測定温度：２５℃
積算回数：６０００回
結果：図１０
（２）ＧＰＣ測定
装置：ＨＰＬＣ－Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ／島津製作所
検出器：ＲＩＤ－１０Ａ　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｄｅｘ
  　　　ｄｅｔｅｃｔｏｒ／島津製作所
カラム：ＴＳＫｇｅｌ　α－２５００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
　 　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径７μｍ，
　　　　排除限界分子量　５×１０3）
　　　　ＴＳＫｇｅｌ　α－４０００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
　 　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径１０μｍ，
　　　　排除限界分子量　４×１０5）
　　　　ＴＳＫｇｅｌ　ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍ／東ソー
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌの臭化リチウムを含有するＮ，Ｎ－
        ｄｉｍｅｔｈｙ　ｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）
温度：４０℃
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
試料濃度：６ｍｇ／ｍＬ
標準物質：Ｐｏｌｙ（ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）
　　　　　ｓｔａｎｄａｒｄ　ＲｅａｄｙＣａｌ　ｓｅｔ，
　　　　　Ｍp　８００－２，２００，０００Ｄａ／ＳＩＧＭＡ
結果：図１１
（３）ＤＬＳ測定
装置 ：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ
　　　 Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図１２
［実施例７８］
　ジメチル　６，６'－（（５－（３－（１－（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザドデカン－１２－イル）ウレイド）イソフタロイル）ビス（アザネジル））（２Ｓ，２'Ｓ）－ビス（２－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタアミド）ヘキサノエート）　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）の合成
　（Ｒ，Ｓ，Ｓ，２Ｓ，２'Ｓ）－ジメチル　６，６'－（（５－（３－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）ウレイド）イソフタロイル）ビス（アザンジイル））ビス（２－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタナミド）ヘキサノエート）　トリ（２，２，２－トリフルオロアセテート）１６５ｍｇにＤＭＦ１０ｍＬ、Ｅｔ3Ｎ１６０μＬ及びＢＣＮ－ＮＨＳ３３．６ｍｇを加え、室温で２時間攪拌した。濃縮後、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（０．１％　ＴＦＡ水溶液／ＭｅＯＨ＝９０／１０→３０／７０）にて精製し、ジメチル　６，６'－（（５－（３－（１－（（１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）－ビシクロ［６．１．０］ノン－４－イン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザドデカン－１２－イル）ウレイド）イソフタロイル）ビス（アザネジル））（２Ｓ，２'Ｓ）－ビス（２－（５－（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）－２－イミノヘキサヒドロ－１Ｈ－チエノ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－イル）ペンタアミド）ヘキサノエート）　ジ（２，２，２－トリフルオロアセテート）（化合物（１１））１２０ｍｇを得た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
1Ｈ　ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ：７．９５（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ），７．８１（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．７２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．５２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝４．８，９．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｓ，６Ｈ），３．６５（ｓ，４Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．４４－３．３７（ｍ，６Ｈ），３．２９－３．２５（ｍ，４Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．８Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．２８－２．１０（ｍ，１０Ｈ），１．９４－１．８４（ｍ，２Ｈ），１．７９－１．３２（ｍ，２５Ｈ），０．９０（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ）
［実施例７９］
　化合物（１１）結合ＳＣＮＰの製造
　Ｎ3－ｐｏｌｙ［（ｂｅｎｚｙｌ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙｃｏｌ）　ｍｅｔｈｙｌ　ｅｔｈｅｒ　ａｃｒｙｌａｔｅ）－ｃｏ－（ａｃｒｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）］２００ｍｇ及び実施例７８で得た化合物（１１）３０ｍｇをガラスバイヤルに秤取し、ＤＭＦ　５ｍＬを添加して溶解させ、室温にて終夜攪拌した。反応溶液をメタノールに対して透析し、溶媒留去後に真空乾燥により化合物（１１）結合ＳＣＮＰ　１９８．５ｍｇを回収した。化合物（１１）結合ＳＣＮＰのＺ平均粒子径、並びに多分散指数を動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ，ＤＬＳ）により測定した結果、８．６ｎｍ（多分散指数　０．２５）であった。
［測定装置と条件等］
（１）1Ｈ－ＮＭＲ測定
装置：ＪＮＭ－ＥＣＸ４００（４００ＭＨｚ）／日本電子
溶媒：Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ－ｄ6　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
    　０．０３％　ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｓｉｌａｎｅ／関東化学
試料濃度：２０ｍｇ／ｍＬ
測定温度：２５℃
積算回数：６０００回
結果：図１３
（２）ＧＰＣ測定
装置：ＨＰＬＣ－Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ／島津製作所
検出器：ＲＩＤ－１０Ａ　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　ｉｎｄｅｘ
      　ｄｅｔｅｃｔｏｒ／島津製作所
カラム：ＴＳＫｇｅｌ　α－２５００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
 　　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径７μｍ，
　　　　 排除限界分子量　５×１０3）
　　　　ＴＳＫｇｅｌ　α－４０００　ｃｏｌｕｍｎ／東ソー
 　　　（カラムサイズ　７．８ｍｍ×３００ｍｍ，粒子径１０μｍ，
  　　　 排除限界分子量　４×１０5）
 　　　　ＴＳＫｇｅｌ　ｇｕａｒｄｃｏｌｕｍ／東ソー
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌの臭化リチウムを含有するＮ，Ｎ－
        ｄｉｍｅｔｈｙｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）
温度：４０℃
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
試料濃度：６ｍｇ／ｍＬ
標準物質：Ｐｏｌｙ（ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）
          ｓｔａｎｄａｒｄ　ＲｅａｄｙＣａｌ　ｓｅｔ，　
          Ｍp　８００－２，２００，０００Ｄａ／ＳＩＧＭＡ
結果：図１４
（３）ＤＬＳ測定
装置：Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ　ＮａｎｏＺＳ／Ｍａｌｖｅｒｎ
    　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｌｔｄ．
測定温度：２５℃
試料濃度：１０ｍｇ／ｍＬ
結果：図１５
　［比較例１］
　オキサリプラチン溶液の調製
　エルプラット点滴静注液５０ｍｇ（（株）ヤクルト本社）１ｍＬを５．９（ｗ／ｖ）％グルコース溶液５．５８ｍＬに添加し、オキサリプラチンとして７６０μｇ含有５（ｗ／ｖ）％グルコース溶液を調製した。
［試験例］薬効試験
　雌性ヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ　ｎｕ／ｎｕ，７週齢；日本チャールス・リバー（株））にマウス大腸がん細胞株Ｃ２６（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）を皮下移植した担癌モデルを薬効試験に用いた。
　ＣＯ2インキュベーター内で継代培養したマウス大腸がん細胞株Ｃ２６を液体培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ'ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ　－　ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ，Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）に懸濁し、一匹あたり細胞数として１×１０6／１００μＬとなるようにヌードマウスの背部皮下に注射した。その後約１週間ヌードマウスを飼育した後、腫瘍体積の平均値が約３０ｍｍ3に生育したところで薬剤の投与を開始した。ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰ（実施例７０のコポリマーを使用して調製したＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰ）を尾静脈内投与し（隔日３回）、腫瘍体積から抗腫瘍効果を評価した（１群４～５匹）。比較としてオキサリプラチン溶液（比較例１）を用いて、同様に投与した。各製剤の投与量は、オキサリプラチン溶液については、投与可能な最高用量として８ｍｇ／ｋｇ（Ｐｔ換算で３．９ｍｇ／ｋｇ）、ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰについては、Ｐｔ換算で３ｍｇ／ｋｇとした。
　腫瘍体積の経時変化を図１６に示した。ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰの場合、投与１４日後にＴ／Ｃ＝０．４であった［Ｔ／Ｃ：薬物投与群（Ｔ）とＣｏｎｔｒｏｌ群（Ｃ）の腫瘍体積の比］。オキサリプラチン溶液（比較例１）の場合、投与１４日後にＴ／Ｃ＝１．１であった。また、投与１４日後においてＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰはＣｏｎｔｒｏｌに比較して有意に腫瘍の増大を抑制することを確認した（ｓｔｕｄｅｎｔ'ｓ　ｔ－ｔｅｓｔ）。以上の結果は、ＤＡＣＨＰｔ内包ＳＣＮＰはオキサリプラチン溶液に比較して優れた抗腫瘍効果を有することを示している。

Claims (26)

  1. 　次の式（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）で示される構造単位を有するコポリマーＸに標的親和性分子が結合したコポリマー。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     ［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］
  2. 　前記ポリマーＸが、次の一般式（１）～（３）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
     ［式中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は同一又は異なって水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ4はＣ1-3アルキル基を示し、Ｒ5は水素原子、Ｃ1-18アルキル基、置換基を有してもよい３～８員シクロアルキル基、アダマンチル基、置換基を有してもよいＣ6-18アリール基又は置換基を有してもよい５～１０員へテロアリール基を示し、Ｘ1、Ｘ2及びＸ3は同一又は異なって酸素原子、硫黄原子又はＮ－Ｒ7を示し、Ｒ6は水素原子、脱離基又はリンカーを示し、Ｒ7は水素原子又はＣ1-3アルキル基を示し、ｍは１～１００の整数を示し、ｎは０～３の整数を示す］
    で示される３種のモノマーの重合によって形成されるコポリマーである請求項１記載のコポリマー。
  3. 　Ｒ1が水素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  4. 　Ｒ2が水素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  5. 　Ｒ3が水素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  6. 　Ｒ4がメチル基である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  7. 　Ｒ5が置換基を有してもよいＣ6-18アリール基である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  8. 　Ｒ5がフェニル基である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  9. 　Ｒ6が水素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  10. 　Ｒ6の脱離基が、次式（４）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
     で表される基である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  11. 　Ｒ6のリンカーが、次式（５）～（７）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
     　から選ばれるものである請求項１又は２に記載のコポリマー。
  12. 　Ｘ1が酸素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  13. 　Ｘ2が酸素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  14. 　Ｘ3が酸素原子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  15. 　ｍが４～２２の整数である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  16. 　ｎが１である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  17. 　構造単位（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）の比率が、（Ａ）１質量部に対して、０．０１～１００質量部の（Ｂ）と、０．１～１００質量部の（Ｃ）で構成されている請求項１又は２に記載のコポリマー。
  18. 　モノマー（１）の１質量部に対して、０．０１～１００質量部のモノマー（２）と、０．１～１００質量部のモノマー（３）を重合させてなる請求項２に記載のコポリマー。
  19. 　数平均分子量が、５０００～１５００００である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  20. 　前記標的親和性分子が、ビオチン又はその誘導体である、請求項１又は２に記載のコポリマー。
  21. 　前記標的親和性分子が、次式（ａ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
     （式中、ＹはＯ又はＮＨを示す）
    で表されるビオチン類残基を有する分子である、請求項１又は２に記載のコポリマー。
  22. 　前記標的親和性分子が、次式（８）～（１１）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
     で表されるいずれかの分子である請求項１又は２に記載のコポリマー。
  23. 　標的親和性分子と前記コポリマーＸとの結合が、共有結合又は非共有結合である、請求項１又は２に記載のコポリマー。
  24. 　請求項１又は２に記載のコポリマーを含むｓｉｎｇｌｅ　ｃｈａｉｎ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ。
  25. 　請求項１又は２に記載のコポリマーを含む医薬組成物。
  26. 　プレターゲティング法に用いるための、請求項２５に記載の医薬組成物。
PCT/JP2023/029355 2022-08-10 2023-08-10 新規なコポリマー WO2024034683A1 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022-128535 2022-08-10
JP2022128535 2022-08-10

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024034683A1 true WO2024034683A1 (ja) 2024-02-15

Family

ID=89851678

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2023/029355 WO2024034683A1 (ja) 2022-08-10 2023-08-10 新規なコポリマー

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2024034683A1 (ja)

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003231648A (ja) * 2001-12-07 2003-08-19 Jsr Corp 生理活性物質担体用ポリマー粒子およびその製造方法
JP2009542862A (ja) * 2006-06-29 2009-12-03 インヴィトロジェン ダイナル エーエス マルチブロックポリマーを含む粒子
JP2012108460A (ja) * 2010-10-22 2012-06-07 Fujifilm Corp 感光性樹脂組成物、硬化膜の形成方法、硬化膜、有機ｅｌ表示装置、及び、液晶表示装置
JP2016122174A (ja) * 2014-08-12 2016-07-07 株式会社Ｄｎｐファインケミカル 色材分散液、カラーフィルタ用着色樹脂組成物、カラーフィルタ及び表示装置
JP2017105722A (ja) * 2015-12-08 2017-06-15 東洋インキＳｃホールディングス株式会社 皮膚貼付用粘着剤、経皮吸収性粘着剤、および経皮吸収性粘着シート
JP2017198919A (ja) * 2016-04-28 2017-11-02 東京応化工業株式会社 化学増幅型ポジ型感光性樹脂組成物
JP2022529183A (ja) * 2019-04-17 2022-06-17 アヴィディア テクノロジーズ， インコーポレイテッド リガンド提示および／または薬物送達のためのスターポリマーを製造する組成物および方法
WO2022168967A1 (ja) * 2021-02-05 2022-08-11 興和株式会社 新規なコポリマー

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003231648A (ja) * 2001-12-07 2003-08-19 Jsr Corp 生理活性物質担体用ポリマー粒子およびその製造方法
JP2009542862A (ja) * 2006-06-29 2009-12-03 インヴィトロジェン ダイナル エーエス マルチブロックポリマーを含む粒子
JP2012108460A (ja) * 2010-10-22 2012-06-07 Fujifilm Corp 感光性樹脂組成物、硬化膜の形成方法、硬化膜、有機ｅｌ表示装置、及び、液晶表示装置
JP2016122174A (ja) * 2014-08-12 2016-07-07 株式会社Ｄｎｐファインケミカル 色材分散液、カラーフィルタ用着色樹脂組成物、カラーフィルタ及び表示装置
JP2017105722A (ja) * 2015-12-08 2017-06-15 東洋インキＳｃホールディングス株式会社 皮膚貼付用粘着剤、経皮吸収性粘着剤、および経皮吸収性粘着シート
JP2017198919A (ja) * 2016-04-28 2017-11-02 東京応化工業株式会社 化学増幅型ポジ型感光性樹脂組成物
JP2022529183A (ja) * 2019-04-17 2022-06-17 アヴィディア テクノロジーズ， インコーポレイテッド リガンド提示および／または薬物送達のためのスターポリマーを製造する組成物および方法
WO2022168967A1 (ja) * 2021-02-05 2022-08-11 興和株式会社 新規なコポリマー

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103044437B (zh) 用于治疗肿瘤的两亲性缀合物纳米颗粒及制备方法、应用
CN101541347B (zh) 药物载体、其合成及其使用方法
WO2022168967A1 (ja) 新規なコポリマー
CN101501108A (zh) 用于药物递送的胶束
JP7467548B2 (ja) Ｐｅｇｍｅｍａ及び薬物担持ポリマーセグメントから構成される自己集合化ジブロックコポリマー
CN111615405B (zh) 聚合物前药及其皮下和/或肌内给药
CN101160354B (zh) 高分子型癌症治疗用药及其制造方法
US11912709B2 (en) Temozolomide compounds, polymers prepared therefrom, and method of treating a disease
WO2024034683A1 (ja) 新規なコポリマー
JP2024025749A (ja) 新規なコポリマー
WO2024034685A1 (ja) アフィボディミセル薬物複合体
TW202412846A (zh) 新穎之共聚合物
WO2024034686A1 (ja) 高分子造影剤
TW202416938A (zh) 親和體微胞(affibody micelle)藥物複合體
WO2024034684A1 (ja) 新薬物複合体
TW202412843A (zh) 新藥物複合體
Abdalla et al. Preparation of Developing Biotinylated PH-Responsive Glycopolymers as Delivery Nanocarriers for Controlling Release of Bortezomib
EA044119B1 (ru) Претерпевшие самосборку диблок-сополимеры, состоящие из pegmema и несущих лекарственное средство полимерных сегментов
CN110652592A (zh) 叶酸靶向双载药纳米粒的制备与应用
Callari Polymer Nanocarriers to Enhance the Efficiency of Platinum-Based Chemotherapeutics

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23852645

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1