JP2003231648A - 生理活性物質担体用ポリマー粒子およびその製造方法 - Google Patents
生理活性物質担体用ポリマー粒子およびその製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 本発明は、粒子表面に抗体等のタンパク物
質、ＤＮＡ・ＲＮＡ等の核酸物質あるいは生理活性糖鎖
化合物等（以下、生理活性物質という）を結合させて医
学・生物学分野で使用する担体用ポリマー粒子に関す
る。さらに詳しくは粒子表面が高度に親水化されてお
り、目的としない生理活性物質の吸着（非特異吸着）が
少ない担体用ポリマー粒子に関する。 【解決手段】 水酸基またはメトキシ基を有するラジカ
ル重合性のビニル単量体を１０重量％以上含有する単量
体を重合して得られる生理活性物質担体用ポリマー粒
子。
質、ＤＮＡ・ＲＮＡ等の核酸物質あるいは生理活性糖鎖
化合物等（以下、生理活性物質という）を結合させて医
学・生物学分野で使用する担体用ポリマー粒子に関す
る。さらに詳しくは粒子表面が高度に親水化されてお
り、目的としない生理活性物質の吸着（非特異吸着）が
少ない担体用ポリマー粒子に関する。 【解決手段】 水酸基またはメトキシ基を有するラジカ
ル重合性のビニル単量体を１０重量％以上含有する単量
体を重合して得られる生理活性物質担体用ポリマー粒
子。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、粒子表面に抗体等のタ
ンパク物質、ＤＮＡ・ＲＮＡ等の核酸物質あるいは生理
活性糖鎖化合物等（以下、生理活性物質という）を結合
させて医学・生物学分野で使用する担体用ポリマー粒子
に関する。さらに詳しくは粒子表面が高度に親水化され
ており、目的としない生理活性物質の吸着（非特異吸
着）が少ない担体用ポリマー粒子に関する。
ンパク物質、ＤＮＡ・ＲＮＡ等の核酸物質あるいは生理
活性糖鎖化合物等（以下、生理活性物質という）を結合
させて医学・生物学分野で使用する担体用ポリマー粒子
に関する。さらに詳しくは粒子表面が高度に親水化され
ており、目的としない生理活性物質の吸着（非特異吸
着）が少ない担体用ポリマー粒子に関する。
【０００２】
【従来の技術】これまで、医学・生物学用途での担体用
ポリマー粒子としてはポリスチレン粒子またはカルボキ
シル基変性ポリスチレン粒子が広く使用されていた。し
かしながら、これらポリスチレン系の粒子はタンパク等
に親和性が高く、目的とする生理活性物質以外の成分を
粒子表面に吸着（これを非特異吸着という）して使用す
る上での大きな障害になっていた。これに対して、粒子
表面に目的の生理活性物質をつけたあと、残りの粒子表
面をウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）等の害の少ないタン
パクを先に吸着させておくブロッキングの手法が用いら
れているが効果は完全ではなかった。また、グリシジル
メタクリレートを単量体として多量に使用して重合して
得られた粒子がタンパク質の非特異吸着が少ないとされ
ているが（例えば特許公報2,753,762が挙げられる）、
反応性の高いエポキシ基が粒子表面に多量に存在するた
めに使用用途に大きな制限があった。
ポリマー粒子としてはポリスチレン粒子またはカルボキ
シル基変性ポリスチレン粒子が広く使用されていた。し
かしながら、これらポリスチレン系の粒子はタンパク等
に親和性が高く、目的とする生理活性物質以外の成分を
粒子表面に吸着（これを非特異吸着という）して使用す
る上での大きな障害になっていた。これに対して、粒子
表面に目的の生理活性物質をつけたあと、残りの粒子表
面をウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）等の害の少ないタン
パクを先に吸着させておくブロッキングの手法が用いら
れているが効果は完全ではなかった。また、グリシジル
メタクリレートを単量体として多量に使用して重合して
得られた粒子がタンパク質の非特異吸着が少ないとされ
ているが（例えば特許公報2,753,762が挙げられる）、
反応性の高いエポキシ基が粒子表面に多量に存在するた
めに使用用途に大きな制限があった。
【０００３】
【本発明が解決しようとする課題】本発明者は、非特異
吸着が少なく、かつ、比較的穏やかな粒子表面で医学・
生物学分野で広く使用できる担体用ポリマー粒子の開発
を目指して鋭意検討を行い、特定の構造のラジカル重合
性のビニル単量体を一定量以上使用して乳化重合するこ
とで得られる粒子が非特異吸着が少ないことを見いだし
本発明に到達した。本発明の特定の構造の単量体は一般
に水溶性が高く、これを多量に使用する乳化重合は通常
では重合安定性が劣悪となるが、本発明の製造方法を用
いると安定に合成できる。本発明で得られる担体ポリマ
ー粒子は粒子表面の化学的な活性を低く合成することが
でき、化学的に不安定な生理活性物質の生理活性を損な
わずに粒子に結合できる。また、使用者が望めば本発明
のポリマー粒子の合成の際またはその後に活性な官能基
を粒子表面に導入して生理活性物質と強固な化学結合を
行なうことも可能である。
吸着が少なく、かつ、比較的穏やかな粒子表面で医学・
生物学分野で広く使用できる担体用ポリマー粒子の開発
を目指して鋭意検討を行い、特定の構造のラジカル重合
性のビニル単量体を一定量以上使用して乳化重合するこ
とで得られる粒子が非特異吸着が少ないことを見いだし
本発明に到達した。本発明の特定の構造の単量体は一般
に水溶性が高く、これを多量に使用する乳化重合は通常
では重合安定性が劣悪となるが、本発明の製造方法を用
いると安定に合成できる。本発明で得られる担体ポリマ
ー粒子は粒子表面の化学的な活性を低く合成することが
でき、化学的に不安定な生理活性物質の生理活性を損な
わずに粒子に結合できる。また、使用者が望めば本発明
のポリマー粒子の合成の際またはその後に活性な官能基
を粒子表面に導入して生理活性物質と強固な化学結合を
行なうことも可能である。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、第一の発明と
して、下記一般式(１)で表される化合物および下記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方を１０重
量％以上含有する単量体組成物を乳化重合して得られる
生理活性物質担体用ポリマー粒子であり、第二の発明と
して、下記一般式(１)で表される化合物および下記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方の含有量
が３０重量％未満の単量体１０〜９５重量部を乳化重合
した後、下記一般式(１)で表される化合物および下記一
般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方を３０
重量％以上含有する単量体９０〜５重量部を添加して乳
化重合して得られる生理活性物質担体用ポリマー粒子の
製造方法を提供するものである。 一般式(１) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨＲ３ＣＨ２）ｎ−ＯＲ２ (式中、 Ｒ１は水素原子またはメチル基を、 Ｒ2は水素原子、メチル基またはエ チル基を、 Ｒ3は水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。) 一般式(２) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＯＣＯ−ＣＲ１＝ＣＨ２ (式中、はＲ１水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。)
して、下記一般式(１)で表される化合物および下記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方を１０重
量％以上含有する単量体組成物を乳化重合して得られる
生理活性物質担体用ポリマー粒子であり、第二の発明と
して、下記一般式(１)で表される化合物および下記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方の含有量
が３０重量％未満の単量体１０〜９５重量部を乳化重合
した後、下記一般式(１)で表される化合物および下記一
般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方を３０
重量％以上含有する単量体９０〜５重量部を添加して乳
化重合して得られる生理活性物質担体用ポリマー粒子の
製造方法を提供するものである。 一般式(１) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨＲ３ＣＨ２）ｎ−ＯＲ２ (式中、 Ｒ１は水素原子またはメチル基を、 Ｒ2は水素原子、メチル基またはエ チル基を、 Ｒ3は水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。) 一般式(２) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＯＣＯ−ＣＲ１＝ＣＨ２ (式中、はＲ１水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。)
【０００５】本発明において一般式(１)で表される化合
物の具体例としては、２−ヒドロキシエチル（メタ）ア
クリレート、２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリレ
ート、２−ヒドロキシブチル（メタ）アクリレート等の
水酸基の一置換エステルの（メタ）アクリレート類、グ
リセロールモノ（メタ）アクリレート、連鎖数２〜４０
のポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコ
ールを側鎖とする（メタ）アクリレート、２−メトキシ
エチルアクリレート、２−メトキシエチルメタクリレー
ト、２−エトキシエチルアクリレート、２−エトキシエ
チルメタクリレート、メトキシジエチレングリコール
（メタ）アクリレート、エトキシジエチレングリコール
（メタ）アクリレート、メトキシポリエチレングリコー
ル（メタ）アクリレート、エトキシポリエチレングリコ
ール（メタ）アクリレート等が挙げられる。これらのう
ち、グリセロールモノメタクリレート、グリセロールモ
ノアクリレート、２−メトキシエチルアクリレート、２
−メトキシエチルメタクリレート、２−エトキシエチル
アクリレート、２−エトキシエチルメタクリレートを用
いると乳化重合での重合安定性が良好であり、かつ、得
られる粒子の非特異吸着性がほとんどないことから本発
明にもっとも適している。この理由は定かではないが、
オリゴエチレングリコールまたはグリセロールの近接し
た二つのエーテル結合酸素がタンパクとの親和性を低下
させるためと推察される。また、２−ヒドロキシエチル
メタクリレートまたは２−ヒドロキシエチルアクリレー
トは得られる粒子の非特異吸着性が少ない点で好まし
い。また、一般式(１)中のｎが３０を超えると水系媒体
中での重合安定性が劣悪になり、本発明の粒子を合成す
ることが困難になる。
物の具体例としては、２−ヒドロキシエチル（メタ）ア
クリレート、２−ヒドロキシプロピル（メタ）アクリレ
ート、２−ヒドロキシブチル（メタ）アクリレート等の
水酸基の一置換エステルの（メタ）アクリレート類、グ
リセロールモノ（メタ）アクリレート、連鎖数２〜４０
のポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコ
ールを側鎖とする（メタ）アクリレート、２−メトキシ
エチルアクリレート、２−メトキシエチルメタクリレー
ト、２−エトキシエチルアクリレート、２−エトキシエ
チルメタクリレート、メトキシジエチレングリコール
（メタ）アクリレート、エトキシジエチレングリコール
（メタ）アクリレート、メトキシポリエチレングリコー
ル（メタ）アクリレート、エトキシポリエチレングリコ
ール（メタ）アクリレート等が挙げられる。これらのう
ち、グリセロールモノメタクリレート、グリセロールモ
ノアクリレート、２−メトキシエチルアクリレート、２
−メトキシエチルメタクリレート、２−エトキシエチル
アクリレート、２−エトキシエチルメタクリレートを用
いると乳化重合での重合安定性が良好であり、かつ、得
られる粒子の非特異吸着性がほとんどないことから本発
明にもっとも適している。この理由は定かではないが、
オリゴエチレングリコールまたはグリセロールの近接し
た二つのエーテル結合酸素がタンパクとの親和性を低下
させるためと推察される。また、２−ヒドロキシエチル
メタクリレートまたは２−ヒドロキシエチルアクリレー
トは得られる粒子の非特異吸着性が少ない点で好まし
い。また、一般式(１)中のｎが３０を超えると水系媒体
中での重合安定性が劣悪になり、本発明の粒子を合成す
ることが困難になる。
【０００６】一般式(２)で表される化合物としては、エ
チレングリコールジアクリレート、エチレングリコール
ジメタクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレ
ート、ポリエチレングリコールジメタクリレート等が挙
げられる。これらのうち、エチレングリコールジアクリ
レート、エチレングリコールジメタクリレートが生理活
性物質の非特異吸着量の低下効果が大きい点および水系
媒体中での重合安定性が良好な点で好ましい。また、一
般式(２)中のｎが３０を超えると水系媒体中での重合安
定性が劣悪になり、本発明の粒子の合成が困難になる。
一般式(１)で表される化合物および一般式(２)で表され
る化合物は２種以上併用して用いることができる。
チレングリコールジアクリレート、エチレングリコール
ジメタクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレ
ート、ポリエチレングリコールジメタクリレート等が挙
げられる。これらのうち、エチレングリコールジアクリ
レート、エチレングリコールジメタクリレートが生理活
性物質の非特異吸着量の低下効果が大きい点および水系
媒体中での重合安定性が良好な点で好ましい。また、一
般式(２)中のｎが３０を超えると水系媒体中での重合安
定性が劣悪になり、本発明の粒子の合成が困難になる。
一般式(１)で表される化合物および一般式(２)で表され
る化合物は２種以上併用して用いることができる。
【０００７】本発明で使用する一般式（１）および
（２）の化合物以外の単量体としては乳化重合が可能で
あれば特に制限はない。具体例を挙げると、スチレン、
α−メチルスチレン、ビニルトルエン、ジビニルベンゼ
ン、ビニルナフタレン等の芳香族ビニル化合物；メチル
（メタ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、
ブチル（メタ）アクリレート、シクロヘキシル（メタ）
アクリレート、２−エチルヘキシル（メタ）アクリレー
ト等の（メタ）アクリル酸エステル； アクリル酸、メ
タクリル酸、イタコン酸、フマル酸、マレイン酸、無水
マレイン酸等の不飽和カルボン酸等が挙げられる。ま
た、必要に応じて、グリシジル（メタ）アクリレート、
ビニルベンジルアミン、アクリルアミドt-ブチルスルホ
ン酸、２−スルホエチルメタクリレート、クロルメチル
スチレン等の特定官能基含有単量体を使用することもで
きる。
（２）の化合物以外の単量体としては乳化重合が可能で
あれば特に制限はない。具体例を挙げると、スチレン、
α−メチルスチレン、ビニルトルエン、ジビニルベンゼ
ン、ビニルナフタレン等の芳香族ビニル化合物；メチル
（メタ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、
ブチル（メタ）アクリレート、シクロヘキシル（メタ）
アクリレート、２−エチルヘキシル（メタ）アクリレー
ト等の（メタ）アクリル酸エステル； アクリル酸、メ
タクリル酸、イタコン酸、フマル酸、マレイン酸、無水
マレイン酸等の不飽和カルボン酸等が挙げられる。ま
た、必要に応じて、グリシジル（メタ）アクリレート、
ビニルベンジルアミン、アクリルアミドt-ブチルスルホ
ン酸、２−スルホエチルメタクリレート、クロルメチル
スチレン等の特定官能基含有単量体を使用することもで
きる。
【０００８】本発明では乳化重合にあたり、前記一般式
(１)で表される化合物および前記一般式(２)で表される
化合物もしくはいずれか一方の使用割合は全単量体の１
０重量％以上、好ましくは３０重量％以上、さらに好ま
しくは４０重量％、特に好ましくは５０重量％以上であ
る。ここで前記一般式(１)で表される化合物および前記
一般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方が全
単量体の１０重量％より少ないと得られるポリマー粒子
のタンパク吸着量が高くなり、医学生物学用途での担体
としては不都合な非特異吸着が生じる。
(１)で表される化合物および前記一般式(２)で表される
化合物もしくはいずれか一方の使用割合は全単量体の１
０重量％以上、好ましくは３０重量％以上、さらに好ま
しくは４０重量％、特に好ましくは５０重量％以上であ
る。ここで前記一般式(１)で表される化合物および前記
一般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方が全
単量体の１０重量％より少ないと得られるポリマー粒子
のタンパク吸着量が高くなり、医学生物学用途での担体
としては不都合な非特異吸着が生じる。
【０００９】本発明の乳化重合において、単量体の添加
方法には特に制限はなく、一括添加して重合するほか
に、重合に従って単量体を分割してあるいは連続的に添
加することができるが、前記一般式(１)で表される化合
物および前記一般式(２)で表される化合物もしくはいず
れか一方の含有量が３０重量％未満の単量体（Ａ）１０
〜９５重量部を乳化重合した後、前記一般式(１)で表さ
れる化合物および前記一般式(２)で表される化合物もし
くはいずれか一方を３０重量％以上含有する単量体
（Ｂ）９０〜５重量部（ただし、単量体（Ａ）と単量体
（Ｂ）の合計は１００重量部とする）を添加して乳化重
合する方法が好ましい。
方法には特に制限はなく、一括添加して重合するほか
に、重合に従って単量体を分割してあるいは連続的に添
加することができるが、前記一般式(１)で表される化合
物および前記一般式(２)で表される化合物もしくはいず
れか一方の含有量が３０重量％未満の単量体（Ａ）１０
〜９５重量部を乳化重合した後、前記一般式(１)で表さ
れる化合物および前記一般式(２)で表される化合物もし
くはいずれか一方を３０重量％以上含有する単量体
（Ｂ）９０〜５重量部（ただし、単量体（Ａ）と単量体
（Ｂ）の合計は１００重量部とする）を添加して乳化重
合する方法が好ましい。
【００１０】このように、前記一般式(１)で表される化
合物および前記一般式(２)で表される化合物もしくはい
ずれか一方の含有量を乳化重合の前半を低くすること
で、乳化重合における凝集物を低減して重合安定性が大
きく改善されるほか、粒子径の制御範囲が拡大する。こ
こで、前記一般式(１)で表される化合物および前記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方の含有量
が３０重量％未満である単量体（Ａ）の使用量が１０重
量部未満で、次工程の前記一般式(１)で表される化合物
および前記一般式(２)で表される化合物もしくはいずれ
か一方を３０重量％以上含有する単量体（Ｂ）が９０重
量部を超えると、重合安定性の改良および粒径制御範囲
の拡大に関して実質的な効果が得られない。一方、前記
一般式(１)で表される化合物および前記一般式(２)で表
される化合物もしくはいずれか一方の含有量が３０重量
％未満の単量体（Ａ）が９５重量部を超え、次工程の前
記一般式(１)で表される化合物および前記一般式(２)で
表される化合物もしくはいずれか一方を３０重量％以上
含有する単量体（Ｂ）が５重量部未満になると本発明で
規定する単量体から得られるポリマー成分による粒子の
被覆が不十分となり、得られる粒子のタンパク吸着量が
高くなって、医学生物学用途での担体粒子としては不都
合な非特異吸着が生じる。
合物および前記一般式(２)で表される化合物もしくはい
ずれか一方の含有量を乳化重合の前半を低くすること
で、乳化重合における凝集物を低減して重合安定性が大
きく改善されるほか、粒子径の制御範囲が拡大する。こ
こで、前記一般式(１)で表される化合物および前記一般
式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方の含有量
が３０重量％未満である単量体（Ａ）の使用量が１０重
量部未満で、次工程の前記一般式(１)で表される化合物
および前記一般式(２)で表される化合物もしくはいずれ
か一方を３０重量％以上含有する単量体（Ｂ）が９０重
量部を超えると、重合安定性の改良および粒径制御範囲
の拡大に関して実質的な効果が得られない。一方、前記
一般式(１)で表される化合物および前記一般式(２)で表
される化合物もしくはいずれか一方の含有量が３０重量
％未満の単量体（Ａ）が９５重量部を超え、次工程の前
記一般式(１)で表される化合物および前記一般式(２)で
表される化合物もしくはいずれか一方を３０重量％以上
含有する単量体（Ｂ）が５重量部未満になると本発明で
規定する単量体から得られるポリマー成分による粒子の
被覆が不十分となり、得られる粒子のタンパク吸着量が
高くなって、医学生物学用途での担体粒子としては不都
合な非特異吸着が生じる。
【００１１】本発明の乳化重合では、いわゆるソープフ
リー重合も含み、乳化剤、界面活性剤なしの重合が可能
である。本発明では水酸基またはエーテル基（-Ｏ-で表
される基）を多量に有する親水性が高いポリマー粒子が
形成されるために、乳化剤なしのソープフリー重合でも
比較的安定に重合が可能になった。また、ソープフリー
重合では粒径が比較的大きくなり、医学、生物学用途で
の粒子の取り扱いが容易になる利点がある。本発明で乳
化剤を使用することも当然可能であり、通常の陰イオン
乳化剤、陽イオン乳化剤、非イオン乳化剤が使用でき
る。
リー重合も含み、乳化剤、界面活性剤なしの重合が可能
である。本発明では水酸基またはエーテル基（-Ｏ-で表
される基）を多量に有する親水性が高いポリマー粒子が
形成されるために、乳化剤なしのソープフリー重合でも
比較的安定に重合が可能になった。また、ソープフリー
重合では粒径が比較的大きくなり、医学、生物学用途で
の粒子の取り扱いが容易になる利点がある。本発明で乳
化剤を使用することも当然可能であり、通常の陰イオン
乳化剤、陽イオン乳化剤、非イオン乳化剤が使用でき
る。
【００１２】本発明での重合開始剤は通常の乳化重合で
使用される重合開始剤が使用できる。特に過硫酸アンモ
ニウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸カリウム等の過硫酸
塩開始剤あるいはアスコルビン酸／クメンヒドロペルオ
キシド系等のレドックス開始剤が良好に使用できる。ま
た、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、２，２’
−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）等のア
ゾ系開始剤も使用できる。特に２、２’−アゾビス（２
−メチルプロピオアミジン）２塩酸塩等のアミノ基含有
アゾ系開始剤を使用すると開始剤末端のアミノ基が粒子
表面に残留して医学生物学用途で使用するときに特定の
生理活性物質を粒子表面に化学結合で結合させることが
可能になり好ましい。
使用される重合開始剤が使用できる。特に過硫酸アンモ
ニウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸カリウム等の過硫酸
塩開始剤あるいはアスコルビン酸／クメンヒドロペルオ
キシド系等のレドックス開始剤が良好に使用できる。ま
た、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、２，２’
−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）等のア
ゾ系開始剤も使用できる。特に２、２’−アゾビス（２
−メチルプロピオアミジン）２塩酸塩等のアミノ基含有
アゾ系開始剤を使用すると開始剤末端のアミノ基が粒子
表面に残留して医学生物学用途で使用するときに特定の
生理活性物質を粒子表面に化学結合で結合させることが
可能になり好ましい。
【００１３】本発明の乳化重合においては乳化剤、界面
活性剤を用いることができ、この量で粒径の調整ができ
るが、得られる医学生物学分野向けの担体粒子として性
能を損なわないために、乳化剤、界面活性剤は可能な限
り減らすことが好ましく、これらを使用しないソープフ
リー乳化重合が好ましい。また、ソープフリー重合では
粒子径が大きくなり、担体粒子としての取り扱いが容易
になる。
活性剤を用いることができ、この量で粒径の調整ができ
るが、得られる医学生物学分野向けの担体粒子として性
能を損なわないために、乳化剤、界面活性剤は可能な限
り減らすことが好ましく、これらを使用しないソープフ
リー乳化重合が好ましい。また、ソープフリー重合では
粒子径が大きくなり、担体粒子としての取り扱いが容易
になる。
【００１４】本発明の生理活性物質担体用ポリマー粒子
は、乳化重合の後、必要があればスチームストリップ等
で残留単量体の除去を行い、ｐＨ調整、透析・限外ろ過
・遠心分離等で粒子表面を洗浄した上で医学生物学用途
での担体粒子として使用できる。従来のポリスチレン系
の担体粒子と比べて、本発明の担体粒子はタンパク、核
酸等の吸着が格段に小さいことに大きな特徴がある。こ
のため、本発明の担体粒子では目的とするタンパク等の
生理活性物質を粒子に保持させる（感作させる）ために
は主に化学結合法を用いることが好ましい。このために
感作させる生理活性物質に応じて適する官能基を有する
単量体をあらかじめ重合の際、特に重合の後半部に存在
させて粒子表面に組み込むことができる。この目的には
メタクリル酸、アクリル酸、フマル酸、イタコン酸のカ
ルボン酸モノマー、グリシジルメタクリレート等のエポ
キシ基含有モノマー、ビニルベンジルアミン、ｐ-アミ
ノスチレン等のアミノ基含有モノマー等が用いられる。
このうち、エポキシ基は重合後にその処理条件で多くの
官能基に変換することが可能であり、有用である。ま
た、本発明では特定のアミノ基を含有するラジカル重合
開始剤を用いると重合した粒子表面に開始剤残基のアミ
ノ基が存在し、タンパク・核酸・糖鎖等の生理活性物質
と化学結合させることができる。
は、乳化重合の後、必要があればスチームストリップ等
で残留単量体の除去を行い、ｐＨ調整、透析・限外ろ過
・遠心分離等で粒子表面を洗浄した上で医学生物学用途
での担体粒子として使用できる。従来のポリスチレン系
の担体粒子と比べて、本発明の担体粒子はタンパク、核
酸等の吸着が格段に小さいことに大きな特徴がある。こ
のため、本発明の担体粒子では目的とするタンパク等の
生理活性物質を粒子に保持させる（感作させる）ために
は主に化学結合法を用いることが好ましい。このために
感作させる生理活性物質に応じて適する官能基を有する
単量体をあらかじめ重合の際、特に重合の後半部に存在
させて粒子表面に組み込むことができる。この目的には
メタクリル酸、アクリル酸、フマル酸、イタコン酸のカ
ルボン酸モノマー、グリシジルメタクリレート等のエポ
キシ基含有モノマー、ビニルベンジルアミン、ｐ-アミ
ノスチレン等のアミノ基含有モノマー等が用いられる。
このうち、エポキシ基は重合後にその処理条件で多くの
官能基に変換することが可能であり、有用である。ま
た、本発明では特定のアミノ基を含有するラジカル重合
開始剤を用いると重合した粒子表面に開始剤残基のアミ
ノ基が存在し、タンパク・核酸・糖鎖等の生理活性物質
と化学結合させることができる。
【００１５】本発明の生理活性物質担体用ポリマー粒子
表面には直接タンパク、核酸、糖鎖物質等の生理活性物
質を結合させて使用することができるが、粒子表面に二
官能のスペーサ化合物の一端を結合させ、他方に生理活
性物質を結合させることで生理活性物質が粒子表面から
若干の距離を離すことができる。粒子がアミノ基変性粒
子である場合、このスペーサ化合物としてはエチレング
リコールジグリシジルエーテルおよびその誘導体が挙げ
られる。生理活性物質が粒子表面から離れることで、生
理活性物質の活性が大いに向上し、均一溶液中での値に
近づき、時にはそれを超えることも期待できる。本発明
の担体粒子へのタンパク、核酸、糖鎖物質等の生理活性
物質の感作法については、従来の化学結合法として通常
のプロセス（プロトコール）が適用できる。
表面には直接タンパク、核酸、糖鎖物質等の生理活性物
質を結合させて使用することができるが、粒子表面に二
官能のスペーサ化合物の一端を結合させ、他方に生理活
性物質を結合させることで生理活性物質が粒子表面から
若干の距離を離すことができる。粒子がアミノ基変性粒
子である場合、このスペーサ化合物としてはエチレング
リコールジグリシジルエーテルおよびその誘導体が挙げ
られる。生理活性物質が粒子表面から離れることで、生
理活性物質の活性が大いに向上し、均一溶液中での値に
近づき、時にはそれを超えることも期待できる。本発明
の担体粒子へのタンパク、核酸、糖鎖物質等の生理活性
物質の感作法については、従来の化学結合法として通常
のプロセス（プロトコール）が適用できる。
【００１６】
【実施例】以下に実施例をあげて本発明をさらに具体的
に説明する。なお、本実施例中において部および％は重
量基準である。 実施例１ ２Ｌガラスフラスコにイオン交換水１８００ｍｌ、乳化
剤としてドデシルベンゼンスルホン酸ソーダ０.１ｇ、
モノマーとして、スチレン３６ｇ、ヒドロキシエチルメ
タクリレート６０ｇ、ジビニルベンゼン１ｇ、メタクリ
ル酸３ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら窒素置換
をして７５℃に昇温した。７５℃になったところで開始
剤の３％過硫酸カリウム水溶液３０ｇを添加し、７５℃
で１２時間の重合を行った。重合収率９９％、300メッ
シュろ過の凝集物０．１重量％で粒子径０．３μmのポ
リマー粒子の水分散体を得た。１％水酸化ナトリウムで
ｐＨを８に調整した後、10,000rpm×15分の遠心分離で
粒子を沈降させて上澄みを捨てイオン交換水で再分散す
ることを３回繰り返して粒子の精製を行った。
に説明する。なお、本実施例中において部および％は重
量基準である。 実施例１ ２Ｌガラスフラスコにイオン交換水１８００ｍｌ、乳化
剤としてドデシルベンゼンスルホン酸ソーダ０.１ｇ、
モノマーとして、スチレン３６ｇ、ヒドロキシエチルメ
タクリレート６０ｇ、ジビニルベンゼン１ｇ、メタクリ
ル酸３ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら窒素置換
をして７５℃に昇温した。７５℃になったところで開始
剤の３％過硫酸カリウム水溶液３０ｇを添加し、７５℃
で１２時間の重合を行った。重合収率９９％、300メッ
シュろ過の凝集物０．１重量％で粒子径０．３μmのポ
リマー粒子の水分散体を得た。１％水酸化ナトリウムで
ｐＨを８に調整した後、10,000rpm×15分の遠心分離で
粒子を沈降させて上澄みを捨てイオン交換水で再分散す
ることを３回繰り返して粒子の精製を行った。
【００１７】比較例１および２
従来の担体用ポリマー粒子としてのポリスチレン粒子お
よび変性ポリスチレン粒子を得るために以下の重合を行
った。モノマーとして、スチレン１００ｇあるいはスチ
レン９７ｇとメタクリル酸３ｇを使用したほかは実施例
１と同様にして、比較例１のポリスチレン粒子および比
較例２のカルボン酸変性ポリスチレン粒子の水分散体を
得た。比較例１の粒子の粒子径は０．３μm、比較例２
の粒子の粒子径は０．２４μmであった。これらは実施
例１と同様の精製を行った。
よび変性ポリスチレン粒子を得るために以下の重合を行
った。モノマーとして、スチレン１００ｇあるいはスチ
レン９７ｇとメタクリル酸３ｇを使用したほかは実施例
１と同様にして、比較例１のポリスチレン粒子および比
較例２のカルボン酸変性ポリスチレン粒子の水分散体を
得た。比較例１の粒子の粒子径は０．３μm、比較例２
の粒子の粒子径は０．２４μmであった。これらは実施
例１と同様の精製を行った。
【００１８】実施例２−９
スチレン、ヒドロキシエチルメタクリレート、ジビニル
ベンゼン、メタクリル酸、および他の単量体の量を表１
に示す量とした以外は、実施例１と同様にして実施例２
−９の担体粒子を得た。
ベンゼン、メタクリル酸、および他の単量体の量を表１
に示す量とした以外は、実施例１と同様にして実施例２
−９の担体粒子を得た。
【００１９】
【表１】
モノマー（１）：ポリエチレングリコール(n=9)モノメ
タクリレート
タクリレート
【００２０】実施例１０〜１４、比較例３〜４
２Ｌガラスフラスコにイオン交換水１８００ｍｌ、ドデ
シルベンゼンスルホン酸ソーダ０.０５ｇ、モノマーと
して、スチレン１８.５ｇ、ジビニルベンゼン０.５ｇ、
メタクリル酸１ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら
窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったとこ
ろで３％過硫酸カリウム水溶液１０ｇを添加し、７５℃
で２時間の第一段の重合を行った。第一段のモノマー量
は２０重量部となる。２時間目にスチレン２６．５ｇ、
ヒドロキシエチルメタクリレート５０ｇ、ジビニルベン
ゼン０．５ｇ、メタクリル酸３ｇおよび ３％過硫酸カ
リウム水溶液２０ｇを添加し、引き続き７５℃で１０時
間かけて第二段の重合を行った。（第二段のモノマー量
は８０重量部） 重合収率９９％、300メッシュろ過で
の凝集物０．０１重量％で粒子径０．６５μmのポリマ
ー粒子分散体を得た。この粒子は実施例１と同様に粒子
の精製を行なった。また、第一段と第二段のモノマー種
と量を表２のとおり変えたほかは実施例１０と同様にし
て実施例１１〜１４、比較例３〜４の粒子の合成を行っ
た。実施例１１，１２，１３、１４はそれぞれ第一段の
モノマー量が１０，４０，７０、９５重量部である。比
較例３は第一段でのモノマー組成中での本発明で規定す
る一般式（１）あるいは（２）の構造の単量体の含量が
高すぎる例であり、第一段目の重合途中で凝集物が多量
に発生して重合を続けることができなかった。 比較例
４は第二段の重合でのモノマー組成中での本発明で規定
する一般式（１）あるいは（２）の構造の単量体の含量
が低すぎる例である。
シルベンゼンスルホン酸ソーダ０.０５ｇ、モノマーと
して、スチレン１８.５ｇ、ジビニルベンゼン０.５ｇ、
メタクリル酸１ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら
窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったとこ
ろで３％過硫酸カリウム水溶液１０ｇを添加し、７５℃
で２時間の第一段の重合を行った。第一段のモノマー量
は２０重量部となる。２時間目にスチレン２６．５ｇ、
ヒドロキシエチルメタクリレート５０ｇ、ジビニルベン
ゼン０．５ｇ、メタクリル酸３ｇおよび ３％過硫酸カ
リウム水溶液２０ｇを添加し、引き続き７５℃で１０時
間かけて第二段の重合を行った。（第二段のモノマー量
は８０重量部） 重合収率９９％、300メッシュろ過で
の凝集物０．０１重量％で粒子径０．６５μmのポリマ
ー粒子分散体を得た。この粒子は実施例１と同様に粒子
の精製を行なった。また、第一段と第二段のモノマー種
と量を表２のとおり変えたほかは実施例１０と同様にし
て実施例１１〜１４、比較例３〜４の粒子の合成を行っ
た。実施例１１，１２，１３、１４はそれぞれ第一段の
モノマー量が１０，４０，７０、９５重量部である。比
較例３は第一段でのモノマー組成中での本発明で規定す
る一般式（１）あるいは（２）の構造の単量体の含量が
高すぎる例であり、第一段目の重合途中で凝集物が多量
に発生して重合を続けることができなかった。 比較例
４は第二段の重合でのモノマー組成中での本発明で規定
する一般式（１）あるいは（２）の構造の単量体の含量
が低すぎる例である。
【００２１】実施例１５
２Ｌガラスフラスコにイオン交換水１８００ｍｌ、モノ
マーとして、メチルメタクリレート１９.８ｇ、ジビニ
ルベンゼン０.２ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しなが
ら窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったと
ころで重合開始剤として２、２‘−アゾビス（２−メチ
ルプロピオアミジン）２塩酸塩の３％水溶液１０ｇを添
加し、７５℃で２時間の第一段の重合を行った。第一段
のモノマー量は２０重量部となる。 ２時間目から３時
間かけて、メチルメタクリレート１９．５ｇ、グリセロ
ールモノメタクリレート６０ｇ、ジビニルベンゼン０．
５ｇおよび ２、２‘−アゾビス（２−メチルプロピオ
アミジン）２塩酸塩の１％水溶液６０ｇを連続的に添加
して第二段の重合を行った。（第二段のモノマー量は８
０重量部） ７５℃で１２時間の重合を行って、重合収
率９９％、300メッシュろ過での凝集物０．０５重量％
で粒子径０．６０μmのカチオン性のポリマー粒子分散
体を得た。この粒子は実施例１と同様に遠心精製を３回
行ったのち、抗AFPモノクロ抗体の水溶液に添加して３
８℃で緩やかに転倒攪拌することで粒子表面の開始剤残
基である活性なアミノ基と抗体のカルボキシル基が反応
し、粒子表面に抗ＡＦＰモノクロ抗体が化学結合した。
ここで得られた抗体感作粒子を化学発光ＡＦＰ免疫検査
試薬として評価した結果を表に示す。簡便な粒子への感
作操作で良好な性能の化学結合感作の粒子検査薬が得ら
れた。
マーとして、メチルメタクリレート１９.８ｇ、ジビニ
ルベンゼン０.２ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しなが
ら窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったと
ころで重合開始剤として２、２‘−アゾビス（２−メチ
ルプロピオアミジン）２塩酸塩の３％水溶液１０ｇを添
加し、７５℃で２時間の第一段の重合を行った。第一段
のモノマー量は２０重量部となる。 ２時間目から３時
間かけて、メチルメタクリレート１９．５ｇ、グリセロ
ールモノメタクリレート６０ｇ、ジビニルベンゼン０．
５ｇおよび ２、２‘−アゾビス（２−メチルプロピオ
アミジン）２塩酸塩の１％水溶液６０ｇを連続的に添加
して第二段の重合を行った。（第二段のモノマー量は８
０重量部） ７５℃で１２時間の重合を行って、重合収
率９９％、300メッシュろ過での凝集物０．０５重量％
で粒子径０．６０μmのカチオン性のポリマー粒子分散
体を得た。この粒子は実施例１と同様に遠心精製を３回
行ったのち、抗AFPモノクロ抗体の水溶液に添加して３
８℃で緩やかに転倒攪拌することで粒子表面の開始剤残
基である活性なアミノ基と抗体のカルボキシル基が反応
し、粒子表面に抗ＡＦＰモノクロ抗体が化学結合した。
ここで得られた抗体感作粒子を化学発光ＡＦＰ免疫検査
試薬として評価した結果を表に示す。簡便な粒子への感
作操作で良好な性能の化学結合感作の粒子検査薬が得ら
れた。
【００２２】
【表２】
【００２３】実施例１６
２Ｌガラスフラスコにイオン交換水１５００ｍｌ、乳化
剤としてドデシルベンゼンスルホン酸ソーダ０.１ｇ、
モノマーとして、スチレン１６.５ｇ、２−メトキシエ
チルアクリレート８０ｇ、ジビニルベンゼン０.５ｇ、
メタクリル酸３ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら
窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったとこ
ろで開始剤の３％過硫酸カリウム水溶液３０ｇを添加
し、７５℃で１２時間の重合を行った。重合収率９９
％、300メッシュろ過での凝集物０.１重量％で粒子径
０.３μmのカルボキシル基変性タイプの本発明の生理活
性物質担体用ポリマー粒子の水分散体を得た。１％水酸
化ナトリウムでｐＨを８に調整した後、10,000rpm×30
分の遠心分離で粒子を沈降させて上澄みを捨てイオン交
換水で再分散することを３回繰り返して粒子の精製を行
った。
剤としてドデシルベンゼンスルホン酸ソーダ０.１ｇ、
モノマーとして、スチレン１６.５ｇ、２−メトキシエ
チルアクリレート８０ｇ、ジビニルベンゼン０.５ｇ、
メタクリル酸３ｇを入れ、１２０ｒｐｍで攪拌しながら
窒素置換をして７５℃に昇温した。７５℃になったとこ
ろで開始剤の３％過硫酸カリウム水溶液３０ｇを添加
し、７５℃で１２時間の重合を行った。重合収率９９
％、300メッシュろ過での凝集物０.１重量％で粒子径
０.３μmのカルボキシル基変性タイプの本発明の生理活
性物質担体用ポリマー粒子の水分散体を得た。１％水酸
化ナトリウムでｐＨを８に調整した後、10,000rpm×30
分の遠心分離で粒子を沈降させて上澄みを捨てイオン交
換水で再分散することを３回繰り返して粒子の精製を行
った。
【００２４】実施例１７−２３
スチレン、2-メトキシエチルアクリレート、2-メトキシ
エチルメタクリレート、メトキシホ゜リエチレンク゛リコール(n=9)メタクリレー
ト、メトキシホ゜リエチレンク゛リコール(n=23)メタクリレート、エチレンク゛リコールシ゛アクリ
レート、ホ゜リエチレンク゛リコール(n=9)シ゛メタクリレート、ジビニルベンゼ
ン、メタクリル酸の量を表または表３に示すとおりとし
た以外は、実施例１６と同様にして実施例１７−２３の
担体粒子を得た。
エチルメタクリレート、メトキシホ゜リエチレンク゛リコール(n=9)メタクリレー
ト、メトキシホ゜リエチレンク゛リコール(n=23)メタクリレート、エチレンク゛リコールシ゛アクリ
レート、ホ゜リエチレンク゛リコール(n=9)シ゛メタクリレート、ジビニルベンゼ
ン、メタクリル酸の量を表または表３に示すとおりとし
た以外は、実施例１６と同様にして実施例１７−２３の
担体粒子を得た。
【００２５】
【表３】
【００２６】評価例（タンパク、核酸の物理吸着量の評
価） 実施例１で調製した本発明の生理活性物質担体用ポリマ
ー粒子（粒子径0.3μｍ）の10％水分散液0.1ml（粒子固
形分量10mg）を１ｍｌリン酸生理食塩水(PBS)で３回遠
心洗浄した後、それぞれをウシ血清アルブミン20mg、ヒ
トIgG 20mg、カゼイン20mgまたはcalf DNA（粗精製）1m
gを溶解したPBSに入れ各１ｍｌとした。上記の粒子とタ
ンパク、または、粒子と核酸の混合液を２５℃で２時間
インキュベートした後に、遠心分離し、上澄を220-320n
mでの吸光度測定を行って粒子に未吸着の液相中のタン
パクまたは核酸の濃度を定量し、これから粒子への吸着
量を計算した。ペレットはPBSで３回遠心洗浄し、最終
的に0.1mlのPBSに分散させた。同様にして実施例２−１
５および比較例１−４で得られた粒子についても評価を
行った。結果を表４−６に示す。本発明の生理活性物質
担体用ポリマー粒子は従来のポリスチレン系の担体粒子
と比べて格段にタンパク、核酸の吸着量が少ないことが
分かる。
価） 実施例１で調製した本発明の生理活性物質担体用ポリマ
ー粒子（粒子径0.3μｍ）の10％水分散液0.1ml（粒子固
形分量10mg）を１ｍｌリン酸生理食塩水(PBS)で３回遠
心洗浄した後、それぞれをウシ血清アルブミン20mg、ヒ
トIgG 20mg、カゼイン20mgまたはcalf DNA（粗精製）1m
gを溶解したPBSに入れ各１ｍｌとした。上記の粒子とタ
ンパク、または、粒子と核酸の混合液を２５℃で２時間
インキュベートした後に、遠心分離し、上澄を220-320n
mでの吸光度測定を行って粒子に未吸着の液相中のタン
パクまたは核酸の濃度を定量し、これから粒子への吸着
量を計算した。ペレットはPBSで３回遠心洗浄し、最終
的に0.1mlのPBSに分散させた。同様にして実施例２−１
５および比較例１−４で得られた粒子についても評価を
行った。結果を表４−６に示す。本発明の生理活性物質
担体用ポリマー粒子は従来のポリスチレン系の担体粒子
と比べて格段にタンパク、核酸の吸着量が少ないことが
分かる。
【００２７】評価例（担体粒子から化学発光法AFP免疫
検査試薬の作製と評価） 実施例１で調製したカルボキシル基変性タイプの本発明
の生理活性物質担体用ポリマー粒子の10％水分散液（粒
子径0.3μｍ）0.1ml（粒子固形分量10mg）を１ｍｌリン
酸生理食塩水(PBS)で３回遠心洗浄した後、固形物に
０．１ｍＭ塩酸水溶液（ｐＨ＝５．５）を添加して遠心
分離処理する操作を３回繰り返すことにより、粒子の洗
浄処理を行った。その後、１−エチル−３−ジメチルア
ミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（同仁化学社製）５
ｍｇを溶解した０．１ｍＭ塩酸水溶液０．１ｍＬを添加
し、40℃で２時間攪拌し、更に、抗AFPモノクロ抗体0.
１ｍｇを溶解した０．１ｍＭ塩酸水溶液を０．１ｍＬを
添加し、室温で１時間攪拌した後、1重量%カセ゛イン溶液
０．1mlを加え、室温で１４時間攪拌することより、粒
子の表面に抗AFPモノクロ抗体を固定化した粒子を調製
した。次いで、このAFP抗体粒子を含む溶液を遠心分離
処理し、固形物に０．１重量％牛血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）を含むｐＨ７．２のリン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）を添
加して遠心分離処理する操作を３回繰り返すことによ
り、未反応のAFP抗体を除去し、実施例１の担体粒子を
もちいた抗体感作粒子を得た。最終粒子固形分は１％に
調製した。実施例２−１５および比較例１−４の粒子に
ついても同様の操作を行い抗体を感作した。上記調製し
た抗体感作粒子10μlにAFP抗原、0, 10, 50, 100, 500n
g/mlを添加し、室温で１０分静置した後、アルカリフォ
スフォターゼ標識したAFP抗体コンジュゲット２００μ
ｇを加え、室温で１０分反応させた。未反応物を除去す
るために、粒子をPBSで４回遠心洗浄した。最終的に沈
降固形分（粒子）を100μｌのルミパルスAMPPD基質液
（アダマンチル−１,２−ジオキセタンフォスフェイト
試薬液、富士レビオ（株）） に分散し、５分後の化学
発光値を測定した。結果を表４−６に示す。
検査試薬の作製と評価） 実施例１で調製したカルボキシル基変性タイプの本発明
の生理活性物質担体用ポリマー粒子の10％水分散液（粒
子径0.3μｍ）0.1ml（粒子固形分量10mg）を１ｍｌリン
酸生理食塩水(PBS)で３回遠心洗浄した後、固形物に
０．１ｍＭ塩酸水溶液（ｐＨ＝５．５）を添加して遠心
分離処理する操作を３回繰り返すことにより、粒子の洗
浄処理を行った。その後、１−エチル−３−ジメチルア
ミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（同仁化学社製）５
ｍｇを溶解した０．１ｍＭ塩酸水溶液０．１ｍＬを添加
し、40℃で２時間攪拌し、更に、抗AFPモノクロ抗体0.
１ｍｇを溶解した０．１ｍＭ塩酸水溶液を０．１ｍＬを
添加し、室温で１時間攪拌した後、1重量%カセ゛イン溶液
０．1mlを加え、室温で１４時間攪拌することより、粒
子の表面に抗AFPモノクロ抗体を固定化した粒子を調製
した。次いで、このAFP抗体粒子を含む溶液を遠心分離
処理し、固形物に０．１重量％牛血清アルブミン（ＢＳ
Ａ）を含むｐＨ７．２のリン酸塩緩衝液（ＰＢＳ）を添
加して遠心分離処理する操作を３回繰り返すことによ
り、未反応のAFP抗体を除去し、実施例１の担体粒子を
もちいた抗体感作粒子を得た。最終粒子固形分は１％に
調製した。実施例２−１５および比較例１−４の粒子に
ついても同様の操作を行い抗体を感作した。上記調製し
た抗体感作粒子10μlにAFP抗原、0, 10, 50, 100, 500n
g/mlを添加し、室温で１０分静置した後、アルカリフォ
スフォターゼ標識したAFP抗体コンジュゲット２００μ
ｇを加え、室温で１０分反応させた。未反応物を除去す
るために、粒子をPBSで４回遠心洗浄した。最終的に沈
降固形分（粒子）を100μｌのルミパルスAMPPD基質液
（アダマンチル−１,２−ジオキセタンフォスフェイト
試薬液、富士レビオ（株）） に分散し、５分後の化学
発光値を測定した。結果を表４−６に示す。
【００２８】
【表４】
【００２９】
【表５】
【００３０】
【表６】
【００３１】
【発明の効果】本発明により、粒子表面に目的とする抗
体・核酸・糖鎖物質等の生理活性物質を結合させ、か
つ、非特異吸着の少ない担体用ポリマー粒子が提供され
る。また、本発明の特定モノマーを一定量以上使用する
乳化重合では重合安定性が悪くなることがあるが、本発
明の実施対応項で示したように重合の後半で特定モノマ
ーを増やすことで解決できた。本発明の担体粒子を用い
ることで、これまでより高い感度でかつ検知濃度範囲の
広いラテックス診断薬、特定のＤＮＡ・ＲＮＡを捕捉、
精製、濃縮する特異核酸捕捉粒子、特定のタンパク分離
粒子、ＤＮＡ転写制御因子タンパクの捕集粒子等を調整
することができる。さらにこれら粒子をカラムに詰める
と、特定の生理活性物質を検知、捕集するアフィニティ
クロマトができる。またこれら粒子をプレートに並べて
使用することも可能である。本発明の生理活性物質担体
用ポリマー粒子の表面に医薬候補物質を結合させ、これ
をカラムに詰める、またはろ紙や薄層ゲルに担持させ
る、さらにはプレートに点着させたところに、細胞分解
物あるいはタンパクを流して粒子に親和性のある成分を
分別・分離することができる。これにより、医薬候補物
質と相互作用する生体部位を探知することができる。あ
るいは逆に、本発明の生理活性物質担体用ポリマー粒子
の表面に特定のタンパク、核酸、糖鎖等の生理活性物質
を結合させ、これを詰めたカラム、ろ紙、薄層ゲルまた
はプレートに医薬候補物質を流して粒子に親和性のある
成分を分別・分離することで医薬物質をスクリーニング
することができる。
体・核酸・糖鎖物質等の生理活性物質を結合させ、か
つ、非特異吸着の少ない担体用ポリマー粒子が提供され
る。また、本発明の特定モノマーを一定量以上使用する
乳化重合では重合安定性が悪くなることがあるが、本発
明の実施対応項で示したように重合の後半で特定モノマ
ーを増やすことで解決できた。本発明の担体粒子を用い
ることで、これまでより高い感度でかつ検知濃度範囲の
広いラテックス診断薬、特定のＤＮＡ・ＲＮＡを捕捉、
精製、濃縮する特異核酸捕捉粒子、特定のタンパク分離
粒子、ＤＮＡ転写制御因子タンパクの捕集粒子等を調整
することができる。さらにこれら粒子をカラムに詰める
と、特定の生理活性物質を検知、捕集するアフィニティ
クロマトができる。またこれら粒子をプレートに並べて
使用することも可能である。本発明の生理活性物質担体
用ポリマー粒子の表面に医薬候補物質を結合させ、これ
をカラムに詰める、またはろ紙や薄層ゲルに担持させ
る、さらにはプレートに点着させたところに、細胞分解
物あるいはタンパクを流して粒子に親和性のある成分を
分別・分離することができる。これにより、医薬候補物
質と相互作用する生体部位を探知することができる。あ
るいは逆に、本発明の生理活性物質担体用ポリマー粒子
の表面に特定のタンパク、核酸、糖鎖等の生理活性物質
を結合させ、これを詰めたカラム、ろ紙、薄層ゲルまた
はプレートに医薬候補物質を流して粒子に親和性のある
成分を分別・分離することで医薬物質をスクリーニング
することができる。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ｃ０８Ｆ 290/06 Ｃ０８Ｆ 290/06
Ｆターム(参考） 4C076 AA95 CC41 EE10 EE48 EE59
4J011 AA05 KA04
4J015 AA01 AA03
4J027 AC03 AC04 AC06 BA04 BA05
BA06 BA07 BA08 BA09 BA14
BA18 BA20 CD07
4J100 AB00Q AB02Q AB03Q AB04Q
AB07Q AB08Q AB16Q AJ02Q
AJ08Q AJ09Q AK32Q AL03Q
AL08P AL08Q AL09P AL10Q
AL62P AL66P AM21Q BA02P
BA03P BA05P BA06P BA08P
BA29Q BA56Q BC04Q CA04
FA03 FA20 JA51
Claims (6)
- 【請求項１】 下記一般式(１)で表される化合物および
下記一般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方
を１０重量％以上含有する単量体を重合して得られるこ
とを特徴とする生理活性物質担体用ポリマー粒子。 一般式(１) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨＲ３ＣＨ２）ｎ−ＯＲ２ (式中、 Ｒ１は水素原子またはメチル基を、 Ｒ2は水素原子、メチル基またはエ チル基を、 Ｒ3は水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。) 一般式(２) ＣＨ２＝ＣＲ１−ＣＯ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＯＣＯ−ＣＲ１＝ＣＨ２ (式中、はＲ１水素原子またはメチル基を、ｎは１〜３０の数を示す。) - 【請求項２】 前記一般式(１)で表される化合物および
前記一般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方
を３０重量％以上含有する単量体を重合して得られる請
求項１記載の生理活性物質担体用ポリマー粒子。 - 【請求項３】 前記一般式(１)で表される化合物がグリ
セロールモノメタクリレート、グリセロールモノアクリ
レート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、２−ヒ
ドロキシエチルアクリレート、２−メトキシエチルアク
リレート、２−メトキシエチルメタクリレート、２−エ
トキシエチルアクリレートおよび２−エトキシエチルメ
タクリレートである請求項１記載の生理活性物質担体用
ポリマー粒子。 - 【請求項４】 前記一般式(２)で表される化合物がエチ
レングリコールジアクリレートおよびエチレングリコー
ルジメタクリレートであることを特徴とする請求項１記
載の生理活性物質担体用ポリマー粒子。 - 【請求項５】 前記一般式(１)で表される化合物および
前記一般式(２)で表される化合物もしくはいずれか一方
の含有量が３０重量％未満の単量体（Ａ）１０〜９５重
量部を乳化重合した後、前記一般式(１)で表される化合
物および前記一般式(２)で表される化合物もしくはいず
れか一方を３０重量％以上含有する単量体（Ｂ）９０〜
５重量部（ただし、単量体（Ａ）と単量体（Ｂ）の合計
は１００重量部とする）を添加してさらに乳化重合する
ことを特徴とする生理活性物質担体用ポリマー粒子の製
造方法。 - 【請求項６】 アミノ基を有するアゾ系ラジカル重合開
始剤の存在下に乳化重合を行うことを特徴とする請求項
５記載の生理活性物質担体用ポリマー粒子の製造方法。
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