WO2022091736A1

WO2022091736A1 - 腸内細菌叢改善用組成物及び腸内腐敗物質産生抑制用組成物

Info

Publication number: WO2022091736A1
Application number: PCT/JP2021/037126
Authority: WO
Inventors: 中山保典; 清綱豊原; 石黒貴寛
Original assignee: 旭松食品株式会社
Priority date: 2020-10-29
Filing date: 2021-10-07
Publication date: 2022-05-05
Also published as: EP4249052A1; JP2022072243A

Abstract

腸内細菌叢を改善及び／又は腸内腐敗物質産生を抑制するための新規な及び／又は改善された手段の提供。イヌリンとレジスタントプロテインとを含む組成物。

Description

腸内細菌叢改善用組成物及び腸内腐敗物質産生抑制用組成物

　本発明は、腸内細菌叢改善用及び／又は腸内腐敗物質産生抑制用の組成物に関する。具体的には、レジスタントプロテインを単独又はイヌリンとの組み合わせで含む、腸内細菌叢改善用及び／又は腸内腐敗物質産生抑制用の組成物に関する。

　腸内環境を整えることは、疾病予防及び健康維持の観点から重要である。特に「大腸の奥」（下行結腸、Ｓ字結腸、及び直腸）は、腸内細菌叢を構成する腸内細菌が多く存在する重要な場所である。「大腸の奥」はアルカリ性になりやすく、有害菌が優勢な環境であるため、有害菌が産生する種々の腸内腐敗物質（アンモニア、インドール等）が蓄積しやすい。このため、「大腸の奥」は炎症を生じやすく、これが様々な疾病を引き起こす原因ともなる。「大腸の奥」における大腸がんや潰瘍性大腸炎の高い発症率にも、斯かる腸内腐敗物質及びその蓄積による炎症が関与しているとみられる。このため、「大腸の奥」における種々の側面からの改善、例えば有害菌の増殖抑制、有用菌の増殖促進等の腸内細菌叢の改善や、腸内腐敗物質の産生抑制は、種々の疾患の予防に役立つことが期待される。

　近年、腸内腐敗物質の産生抑制や腸内細菌叢の改善のために、新たな食品や医薬品等の種々の試みがなされている。例えば、特許文献１には、腸内腐敗物質の低減作用を有するビフィズス菌が開示されている。特許文献２には、腸内有害菌低減剤並びにそれを含む食品及び医薬品が開示されている。しかし、これらの技術は未だ改善の余地があり、また、特に食品についてはそのバリエーションの拡大も求められている。

　別の手段として、食物繊維も注目されている。食物繊維は、１日１８～２０ｇ以上の摂取が推奨されている栄養成分の一つである。近年、食物繊維が腸内細菌に作用して様々な健康効果をもたらすことを示す、多様な研究成果が得られている。

　国際食品規格委員会（コーデックス委員会）の栄養・特殊用途食品部会（ＣＣＮＦＳＤＵ）によれば、食物繊維は、「小腸において消化、吸収されない重合度１０以上の多糖類であり、食品中にもともと存在する可食性のもの、物理的、酵素的、化学的処理により得られたもの及び合成されたものとし、重合度３から９の多糖類の取り扱いについては各国の判断に委ねる」と定義される。しかし、食物繊維が腸内細菌に及ぼす前述の作用には、多糖類のみならず、上部消化管で消化されなかった他の食品成分残渣も、深く寄与していることが分かってきている。しかし、前述のＣＣＮＦＳＤＵによる「食物繊維」の定義には、これらの多糖類以外の成分は含まれないことになる。

　こうした観点から、食物繊維学会では、多糖類以外の成分も含む広義の食物繊維を包含する概念として、「ルミナコイド」という用語を提唱している。食物繊維学会によれば、ルミナコイドは、「ヒトの小腸内で消化・吸収されにくく、消化管を介して健康の維持に役立つ生理作用を発現する食物成分」と定義される。斯かる「ルミナコイド」の概念に包含される成分は、大きく非でんぷん系成分とでんぷん系成分とに分類される。非でんぷん系成分は、ＣＣＮＦＳＤＵの定義による狭義の「食物繊維」の他、少糖類、糖アルコール、レジスタントプロテイン、その他に分類される。一方、でんぷん系成分は、レジスタントスターチとレジスタントマルトデキストリンとに分類される。

　これらの「ルミナコイド」成分の中でも特に注目されるのが、非でんぷん系成分のうちタンパク質成分又はタンパク質複合体成分を指す「レジスタントプロテイン」である。レジスタントプロテインとしては、大豆高分子量タンパク質画分（ＨＭＦ）や大豆レジスタントプロテイン（ＳＲＰ）等の大豆由来タンパク質、そば由来タンパク質、絹由来タンパク質、酒粕由来タンパク質等が知られている。斯かるレジスタントプロテインは、非特許文献１、２に示すように、コレステロール低減等の健康促進効果を有することが知られている。

　こうした知見から、レジスタントプロテインは、健康増進作用を備えた飲食品や医薬品として、種々の用途への応用が期待されている。しかし、その詳細な作用効果については、未だ不明な点も多く、実用化に向けてその作用の更なる解明や増強が求められている。

特開２０１６－０２８５９５号公報特開２０１４－２４０４３１号公報

Kato et al., Journal of Nutritional Science and Vitaminology, (2002), Vol.48, No.1, pp.1-5 渡辺、日本醸造協会誌、2012年、第107巻、第5号、第282～291頁西村他、大豆たん白質研究、2007年、第10巻、第28号、第48～54頁

　本発明の目的の一つは、腸内細菌叢を改善及び／又は腸内腐敗物質産生を抑制するための新規な及び／又は改善された手段の提供にある。

　本発明者らは、レジスタントプロテインの作用を解明・増強すべく鋭意検討した結果、レジスタントプロテインをイヌリンと併用することで、プレボテラ属菌増殖の促進、硫化水素産生菌増殖の抑制等の種々の腸内細菌叢改善作用や、腸内腐敗物質の産生抑制作用が顕著に増強されることを見出した。また、レジスタントプロテインには、硫化水素産生菌の増殖を抑制するというこれまで知られていない作用も存在することを見出し、本発明を完成させた。

　即ち、本発明は例えば以下の態様を提供する。
［１］イヌリンとレジスタントプロテインとを含む組成物。
［２］腸内細菌叢改善のための［１］に記載の組成物。
［３］腸内腐敗物質産生抑制のための［１］又は［２］に記載の組成物。
［４］前記腸内腐敗物質がアンモニア又はインドールである［３］に記載の組成物。
［５］プレボテラ属菌増殖促進のための［１］～［４］のいずれか１項に記載の組成物。
［６］硫化水素産生菌増殖抑制のための［１］～［５］のいずれか１項に記載の組成物。
［７］レジスタントプロテインを含む硫化水素産生菌増殖抑制のための組成物。
［８］飲食品である［１］～［７］のいずれか１項に記載の組成物。
［９］医薬品である［１］～［７］のいずれか１項に記載の組成物。
［１０］経口又は経腸投与用の医薬品である［９］に記載の組成物。

　本発明によれば、レジスタントプロテインをイヌリンとの組み合わせで用いることで、新規な及び／又は改善された種々の腸内細菌叢改善作用及び／又は腸内腐敗物質産生抑制作用が発揮される。また、レジスタントプロテインを単独で用いることで硫化水素産生菌の増殖を抑制する作用も発揮される。

図１は、各試料についてIn vitro腸内発酵試験により得られた培養上清中のアンモニア濃度（μｇ／ｄＬ）及びインドール濃度（μｇ／ｍＬ）を示すグラフである。図２は、各試料についてIn vitro腸内発酵試験により得られた沈殿物中のプレボテラ属菌（Prevotella spp.）量を示すグラフである。Test 1については試料ＣＣを１とした相対値（／ＣＣ）、Test 2については試料ＩＣを１とした相対値（／ＩＣ）としてそれぞれ示す。図３は、各試料についてIn vitro腸内発酵試験により得られた沈殿物中のデスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）量を示すグラフである。Test 1については試料ＣＣを１とした相対値（／ＣＣ）、Test 2については試料ＩＣを１とした相対値（／ＩＣ）としてそれぞれ示す。

　以下、本発明について具体的な実施形態に基づき説明するが、本発明はこれらの形態に限定されるものではなく、その主旨を逸脱しない限りにおいて、任意の改変を加えて実施することが可能である。

［概要］
　上述のようにレジスタントプロテインには種々の腸内環境改善作用が知られている。一方、非特許文献３に示すように、レジスタントプロテインの単独摂取は腸内でのアンモニアの発生を促してしまう。非特許文献３ではペクチンとの共摂取によりアンモニアを軽減することができることが示されているものの、ベクチン以外の成分についてはあまり研究がされていない。さらに、アンモニア以外の腸内腐敗物質を軽減する効果がある成分や成分の組み合わせについてもあまり知られていない。ここで、本発明者らは、レジスタントプロテインについて、種々の検討を行った。その結果として意外にも、後述の実施例に示すように、イヌリンと併用することで、腸内腐敗物質の産生抑制作用や、プレボテラ属菌増殖の促進等、種々の腸内細菌叢改善作用が顕著に増強されることを見出した。更には、レジスタントプロテインには硫化水素産生菌の増殖を抑制するという、これまで知られていない作用も有することを見出した。本発明は、斯かる本発明者等の意外な知見に基づくものである。

　即ち、本発明の一側面は、少なくともイヌリンとレジスタントプロテインとを含む組成物（以下適宜「本発明の第１の組成物」又は単に「第１の組成物」と称する。）に関する。本発明の第１の組成物は、プレボテラ属菌の増殖促進、硫化水素産生菌の増殖抑制等、種々の態様による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制のための使用が意図される。

　また、本発明の別の側面は、少なくともレジスタントプロテインを含む組成物（以下適宜「本発明の第２の組成物」又は単に「第２の組成物」と称する。また、本発明の第１及び第２の組成物を総称して、単に「本発明の組成物」と称する場合もある。）に関する。本発明の第２の組成物も、腸内細菌叢の改善及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制に用いられるが、特に硫化水素産生菌の増殖抑制という、特定の態様による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制のための使用が意図される。

　また、本発明の更に別の側面は、本発明の第１及び／又は第２の組成物の一態様としての飲食品及び／又は医薬品としての使用や、レジスタントプロテインを単独又はイヌリンとの組み合わせで投与することによる腸内細菌叢の改善及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制のための方法等に関する。

［レジスタントプロテイン］
　本発明において「レジスタントプロテイン」とは、前述のように、「ルミナコイド」の概念に包含される非でんぷん系成分のうち、特にタンパク質成分又はタンパク質複合体成分を意味する。本発明において「ルミナコイド」とは、前述の食物繊維学会の定義に従い、「ヒトの小腸内で消化・吸収されにくく、消化管を介して健康の維持に役立つ生理作用を発現する食物成分」と定義される。

　レジスタントプロテインとしては、大豆、そば、絹、酒粕等の各種原料に由来するタンパク質が挙げられる。これらは何れも本発明に使用可能であるが、中でも大豆由来タンパク質が好ましい。大豆由来のレジスタントプロテインとしては、大豆そのものに由来するタンパク質と、大豆加工品に由来するタンパク質とが挙げられるが、何れも本発明に使用可能である。大豆加工品としては、豆腐、凍り豆腐、豆乳、大豆粉、大豆肉、大豆シリアル、大豆タンパク質（ＳＰＩ）等が挙げられるが、何れであってもよい。大豆由来のレジスタントプロテインの具体例としては、大豆高分子量タンパク質画分（ＨＭＦ）、大豆レジスタントプロテイン（ＳＲＰ）等が挙げられるが、本発明では何れを使用することも可能である。

　レジスタントプロテインとしては、前記の各種原料から単離・精製したものを用いてもよいが、レジスタントプロテインを含む前記の各種原料又はその加工品をそのまま用いてもよい。特に、本発明の組成物を飲食品とする場合は、レジスタントプロテインを含む各種原料又はその加工品の多くは飲食品又は食材の形態であるので、これらをそのまま用いることが有利である。大豆由来レジスタントプロテインの場合を例にすると、これを含む飲食品又は食材としては、豆腐、凍り豆腐、豆乳、大豆タンパク質（ＳＰＩ）、大豆粉、大豆肉、大豆シリアル等の一次加工品や、これらを含む乳製品、乳代替品、シリアル、加工肉、練り物、サプリメント等の二次加工品等を例示することができる。

　レジスタントプロテインの定量法としては、食物繊維のように規格化された定量法は存在しないものの、それに準拠する方式によって定量化することができる。例えば、測定対象となる試料が主に脂質及びタンパク質のみからなり、炭水化物等の他の成分を殆ど含まない試料の場合は、試料を脱脂処理した後、胃消化酵素及び腸消化酵素で順次処理し、処理後の残存物をタンパク質成分として定量化し、これをレジスタントプロテインの量とすることができる。また、測定対象となる試料が脂質及びタンパク質に加えて、他の非消化性・難消化性成分（例えばＣＣＮＦＳＤＵの定義による狭義の「食物繊維」等）も含む試料の場合には、前述の手法により胃消化酵素及び腸消化酵素で処理した後、残存物中のタンパク質成分量を公知のタンパク質定量法（例えばケルダール法やデュマ法等）で測定し、これをレジスタントプロテインの量とすることができる。

　例として、大豆由来レジスタントプロテインの定量化の場合、ＨＭＦ及びＳＲＰについてそれぞれ独自の定量法が知られている。これらは何れを用いてもよいが、特にＳＲＰの定量法は、実際に消化酵素を用いる方法であることから、非消化性・難消化性のタンパク質成分であるレジスタントプロテインの定量法としてより好ましい。ＳＲＰの定量法は、試料を脱脂処理した後、生体の消化条件に近い条件下でペプシン（胃消化酵素）及びパンクレアチン（腸消化酵素）で順次処理し、残存物をレジスタントプロテインとする方法である。測定対象となる試料が豆腐や分離大豆タンパク質等の場合、その成分は主に脂質及びタンパク質であり、炭水化物等の他の成分は殆ど含まれないため、前記の酵素処理で得られた残存物の量が、そのままレジスタントプロテインの含量となる。一方、他の非消化性・難消化性成分も含む試料の場合には、前記の酵素処理で得られた残存物中のタンパク質成分量を公知のタンパク質定量法で測定し、これをレジスタントプロテインの量とすればよい。

　ＳＲＰの定量法の詳細は、前述の非特許文献３に記載されているが、具体的には例えば次の手順で実施することができる。測定対象となる試料を脱脂処理した後、３ｇを坪量し、３０ｍＬの純水を加えて懸濁させる。この懸濁液を塩酸でｐＨ１．９に調整し、ペプシン０．０３ｇを加え、３７℃で５時間作用させる。次に、この懸濁液を水酸化ナトリウムでｐＨ７．２に調整し、パンクレアチン０．０９ｇを加え、３７℃で１４時間作用させる。その後、８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、処理後に残存する沈殿物を遠心分離で回収し、その質量を測定してレジスタントプロテイン量とする。処理前試料の質量に対する処理後残存物の質量（即ちレジスタントプロテイン量）の比率を求め、試料中のレジスタントプロテインの含有率とする。もし、試料中に他の非消化性・難消化性成分（狭義の「食物繊維」等）も含まれる場合には、前記の酵素処理で得られた残存物中のタンパク質成分をケルダール法やデュマ法等の公知の方法で定量し、これを用いて試料中のレジスタントプロテインの含有率を求める。

［イヌリン］
　本発明において「イヌリン」とは、フルクトースがグリコシド結合を介して重合し、その末端にグルコースが結合した多糖ポリマーである「フルクタン」の一種である。フルクタンは、Ｄ－フルクトフラノースの重合方式によって、（１）β（２→１）グリコシド結合のみで重合した直鎖状フルクタン、（２）β（２→６）グリコシド結合のみで重合した直鎖状フルクタン、及び（３）β（２→１）グリコシド結合及びβ（２→６）グリコシド結合で重合した分岐状フルクタンに分類される。従来の命名法では、前記（１）を狭義の「イヌリン」とし、前記（２）を「レバン」、前記（３）を「グラミナン」として、これらを呼び分ける場合もある。しかし、本発明では別途記載する場合を除き、前記（３）の分岐状フルクタンも、イヌリンの定義に含めるものとする。また、前記（１）の直鎖状フルクタン（すなわち狭義のイヌリン）に加えて、前記（３）の分岐状フルクタンのうちβ（２→１）グリコシド結合が９０％以上（即ちβ（２→６）グリコシド結合が１０％未満）のものを併せて「直鎖状イヌリン」と称し、前記（３）の分岐状フルクタンのうちβ（２→１）グリコシド結合が９０％未満（即ちβ（２→６）グリコシド結合が１０％以上）のものを「分岐状イヌリン」と称するものとする。

　直鎖状イヌリンとしては、限定されるものではないが、例えばチコリ、アーティチョーク、タンポポ、キクイモ等のキク科植物や、タマネギ、ニンニク、ニラ等のヒガンバナ科植物等の天然材料に由来するものが挙げられる。中でも、良質のイヌリンを高濃度に含むチコリ由来のイヌリンが好ましい。直鎖状イヌリンは、前記の天然材料から、例えば搾汁して結晶として析出させる等の方法を用いて単離・精製することができる。また、斯かるの天然材料から単離・精製された市販の直鎖状イヌリンを用いてもよい。市販のチコリ由来イヌリンの具体例としては、Frutafit^{（登録商標）}又はRaftiline^{（登録商標）}等が挙げられる。

　直鎖状イヌリンとしては、公知の酵素合成法等により合成したものを用いてもよい。市販の合成イヌリンの具体例としては、フジＦＦ^{（登録商標）}等が挙げられる。合成イヌリンのサイズとしては、限定されるものではないが、各ポリマー分子の鎖長（重合する単糖単位の数である重合度）は、通常３以上、また、通常１００以下、中でも６０以下の範囲とすることができる。また、多数のポリマー分子の集合体としての平均鎖長は、通常５以上、また、通常２０以下の範囲とすることができる。

　分岐鎖状イヌリンは、限定されるものではないが、例えばテキーラの原料である多肉質植物であるアガベ（リュウゼツラン）に豊富に含まれることが知られている（例えばJ. Agric. Food Chem., (2003), 51(27):7835-7840；J. Agric. Food Chem., (2006), 54(20):7832-7839等）。分岐鎖状イヌリンは、斯かるアガベ等の原料から、例えば国際公開第２００７／１４２３０６号等に記載の常法を用いて単離・精製することができる。典型的には、アガベの茎部分であるピーニャから、細断、搾汁、濾過、精製、濃縮、粉末乾燥等の処理を経ることにより、分岐鎖状イヌリンを含む処理物（別名「アガベイヌリン」）を得ることができる。

　イヌリンは、プレバイオティクスとして重要な役割を果たすことが知られている。ヒトを含む動物の多くは、イヌリン加水分解酵素を持たないので、摂取された食物等に含まれるイヌリンは、胃や小腸で消化吸収されることなく大腸に到達する。大腸中の腸内細菌叢には、イヌリン加水分解酵素であるイヌリナーゼを分泌する菌が含まれており、大腸に到達したイヌリンは、これらの菌の発酵作用によって分解される。斯かるイヌリナーゼを分泌する菌には、ビフィズス菌等のいわゆる善玉菌が多数含まれることから、イヌリンを摂取することにより、いわゆる善玉菌が優先的に増加し、いわゆる悪玉菌の繁殖が抑制される。また、イヌリンの発酵過程で乳酸等の有機酸が増加することから、整腸作用も生じることになる。

　イヌリンの形態は制限されず、粉末状、溶液状、シロップ状等の種々の任意の形態として用いることができる。また、天然物由来のイヌリンを使用する場合には、イヌリンを含む天然物原料又はその加工品をそのまま用いてもよい。そのような天然原料としてはごぼう、キクイモなどが例示できる。一方で、幅広い食品に適用し、イヌリンとしての機能を十分に発揮させる観点からは、天然物から抽出したものを用いることがより好ましい。なお、本発明の第１又は第２の組成物を飲食品とする場合には、イヌリンが有する増粘作用を利用することにより、飲食品の増粘剤・結着剤として利用してもよい。

［組成物］
　本発明の第１及び第２の組成物は、前述のレジスタントプロテインを含有する。レジスタントプロテインの含有量は、限定されるものではなく、用途等に応じて適宜調整すればよい。一例によれば、本発明の第１及び第２の組成物におけるレジスタントプロテインの含有率は、例えば通常０．０５質量％以上、又は０．１質量％以上、又は０．２質量％以上とすることができ、また、例えば通常２５質量％以下、又は１０質量％以下、又は５質量％以下とすることができる。

　本発明の第１の組成物は、レジスタントプロテインに加えて、更に前述のイヌリンを含有する。イヌリンの含有量は、限定されるものではなく、用途等に応じて適宜調整すればよい。一例によれば、本発明の第１の組成物におけるイヌリンの含有率は、例えば通常０．１質量％以上、又は０．２質量％以上、又は０．４質量％以上とすることができ、また、例えば通常５０質量％以下、又は３０質量％以下、又は１０質量％以下とすることができる。また、本発明の第１の組成物におけるレジスタントプロテインとイヌリンとの含有比は、レジスタントプロテイン１質量部に対して、イヌリンの含有量を例えば通常０．２質量部以上、又は０．５質量部以上、又は１質量部以上とすることができ、また、例えば通常２０質量部以下、又は１０質量部以下、又は５質量部以下とすることができる。

　本発明の第１及び第２の組成物の形態は、特に制限されるものではなく、固体、半固体、溶液、懸濁液、分散液等、任意の形態とすることができる。斯かる組成物の形態は、組成物の用途等に応じて適宜選択することが可能である。

　本発明の第１及び第２の組成物の摂取量は用途、種類、摂取する個体の種、症状、年齢、性別等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。第１の組成物の場合、一例によれば、例えば体重５０ｋｇの一般的な成人に対し、１日あたり、レジスタントプロテインの重量が、例えば通常０．０２ｇ以上、、又は０．０５ｇ以上、又は０．１ｇ以上、また、例えば通常４０ｇ以下、又は２０ｇ以下、又は１０ｇ以下とすることができ、イヌリンの重量が、例えば通常０．０５ｇ以上、又は０．１ｇ以上、又は０．２ｇ以上、また、例えば通常８０ｇ以下、又は４０ｇ以下、又は２０ｇ以下とすることができる。

　本発明の第１及び第２の組成物の摂取頻度は、限定されないものの、１回の摂取でもよいが、一態様では腸内細菌叢の継続的な摂取がより好ましい。一例によれば、例えば通常週に０．５回（２週に１回）以上、又は週に１回以上、又は２回以上、また、例えば通常１日３回以下、１日２回以下、１日１回以下の頻度で摂取することができ、例えば通常１週間以上、又は２週間以上、又は４週間以上の期間にわたり、適用することもできる。また、都度摂取するものであっても、継続的に摂取するものであっても、例えば数か月の間隔を空け、年に数回断続的に摂取するものであってもよい。

　また、特に本発明の第１の組成物の場合、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の組成物として調製してももちろんよいが、レジスタントプロテインとイヌリンとを各々個別独立の組成物として調製しておき、摂取直前にそれらの個別独立の組成物を混合してから摂取してもよく、或いはそれらの個別独立の組成物を個別に摂取して体内において混合されるようにしてもよい。こうした態様でも、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の組成物として調製した場合と同様の作用効果が得られることは明らかであるから、本発明の第１の組成物の態様に含まれるものとする。

［用途］
　本発明の第１及び第２の組成物は、何れも腸内細菌叢の改善及び／又は腸内腐敗物質産生の抑制のために利用される。本発明において「腸内細菌叢」とは、ヒトや動物等の対象の腸の内部に生息している細菌群を意味する。腸内細菌叢の組成は動物種や個体によって異なるが、ヒトでは平均して約３万種類、１００兆～１０００兆個の細菌が腸内に生息して腸内細菌叢を構成し、その合計質量は１．５～２ｋｇにも達する。本発明において腸内細菌叢の「改善」とは、ヒトや動物等の対象の腸内細菌叢に含まれる１種又は２種以上の細菌の増殖を抑制又は促進して腸内細菌叢の菌組成を変更するすることにより、或いは、対象の腸内細菌叢の１種又は２種以上の細菌の１種又は２種以上の作用を抑制又は促進することにより、対象に有益な作用を発現させ、又は斯かる作用を増強することを意味する。斯かる腸内細菌叢の改善としては、これらに限定されるものではないが、プレボテラ属菌の増殖促進、硫化水素産生菌の増殖抑制等が挙げられる。一態様では、腸内細菌叢の改善の結果、硫化水素産生菌等の腸内腐敗物質を産生する細菌が減少するなどの理由により腸内腐敗物質の産生が抑制される。

　本発明において「腸内腐敗物質」とは、ヒトや動物等の対象の腸内において、腸内細菌が体内に取り込まれた窒素源や炭素源などの栄養源を代謝することにより生じる、対象に有害な物質を意味する。腸内腐敗物質の例としては、分岐鎖脂肪酸（BCFA）、アンモニア、アミン、硫化水素、フェノール、インドール、ｐ-クレゾール、メルカプタン、スカトール等が挙げられる。斯かる腸内腐敗物質が増加すると、粘液の減少や上皮細胞の乱れ等が生じ、炎症を始めとする様々な疾患を引き起こすことが報告されている。一態様では、硫化水素産生菌等の腸内腐敗物質を産生する細菌の増殖抑制により、腸内腐敗物質の産生が抑制される。

　本発明において「プレボテラ属菌」（Prevotella spp.）は、高い食物繊維の分解能力を有するグラム陰性の腸内細菌群である。プレボテラ属菌は、難消化性でんぷんや食物繊維が豊富な食事を長期的に摂取しているヒトの腸内に多く存在することが知られている。例えば、大麦を摂取すると、次に食事を摂取した際に血糖値が上がり難くなることが知られているが（これを「セカンドミール効果」という場合がある。）、斯かるセカンドミール効果には腸内のプレボテラ属菌が関与していることが明らかとなっている。

　本発明において「硫化水素産生菌」（別名「硫酸塩還元細菌」）は、硫酸塩を硫化物イオンに還元してエネルギーを産生し、硫化水素を発生する細菌を意味する。硫化水素産生菌の例としては、これらに限定されるものではないが、デスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）、デスルホトマキュラム属菌（Desulfotomaculum spp.）、デスルフォモナス属菌（Desulfomonas spp.）等が挙げられる。

　レジスタントプロテインとイヌリンとを含む本発明の第１の組成物は、プレボテラ属菌の増殖促進、硫化水素産生菌の増殖抑制等、種々の態様による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制のための使用が意図される。後述の実施例に示すように、レジスタントプロテインをイヌリンと併用することで、プレボテラ属菌増殖の促進等、種々の腸内細菌叢改善作用や腸内腐敗物質産生抑制が顕著に増強され、相乗効果が発揮される。斯かる知見は、従来のレジスタントプロテイン及びイヌリンに関する知見からは教示も示唆もされない、新規且つ意外な知見であるところ、本発明の第１の組成物は、斯かる新規且つ意外な知見に基づくものである。

　レジスタントプロテインを含む本発明の第２の組成物も、腸内細菌叢の改善及び／又は腸内腐敗物質産生の抑制に用いられるが、特に硫化水素産生菌の増殖抑制という、特定の態様による腸内細菌叢改善のための使用が意図される。後述の実施例に示すように、レジスタントプロテインには、硫化水素産生菌の増殖を抑制するという、これまで知られていない作用が存在する。斯かる知見は、従来のレジスタントプロテイン及びイヌリンに関する知見からは教示も示唆もされない、新規且つ意外な知見であるところ、本発明の第２の組成物は、斯かる新規且つ意外な知見に基づくものである。

［飲食品］
　本発明の組成物は、ヒト又は動物用の飲食品として利用することもできる。斯かる飲食品の形態とした本発明の組成物も、本発明の一側面を構成する。なお、飲食品の形態とした本発明の組成物を「本発明の飲食品」とも称す。また、飲食品のうち、特に動物用の飲食品を「飼料」とも称す。

　本発明の飲食品は、限定されるものではないが、保健機能食品（特定保健用食品、機能性表示食品等）であってもよく、その場合種々の態様による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制を用途とする保健機能食品であることが好ましい。一態様によれば、本発明の第１の組成物からなる本発明の飲食品は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制の各種態様の中でも、プレボテラ属菌の増殖促進及び／又は硫化水素産生菌の増殖抑制を用途とする保健機能食品であることが好ましい。一態様によれば、本発明の第２の組成物からなる本発明の飲食品は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制の各種態様の中でも、硫化水素産生菌の増殖抑制を用途とする保健機能食品であることが好ましい。なお、本発明の飲食品が保健機能食品である場合には、前述の各種態様の腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制に関する用途を、製品に表示してもよい。但し、本発明の飲食品は、もちろん保健機能食品以外の飲食品であってもよく、この場合も、各種態様の腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制、例えばプレボテラ属菌の増殖促進及び／又は硫化水素産生菌の増殖抑制等を目的として摂食される飲食品であることは何ら妨げられない。本発明の飲食品が、動物を対象とする飼料の場合も、その用途は任意であるが、前記各種態様の腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制を用途とする飼料であることが好ましい。

　本発明の飲食品の形態や種類は任意であり、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制という所望の効果が発揮される限りにおいて、限定されない。具体的に、飲食品の形態としては、固形、半固形、液状（溶液、懸濁液、分散液、相分離液等）の何れであってもよい。また、飲食品の種類としては、緑茶、ウーロン茶や紅茶等の茶飲料、コーヒー飲料、清涼飲料、ゼリー飲料、スポーツ飲料、乳飲料、炭酸飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料、発酵乳飲料、粉末飲料、ココア飲料、アルコール飲料、精製水等の飲料、バター、ジャム、ふりかけ、マーガリン等のスプレッド類、マヨネーズ、ショートニング、クリーム、ドレッシング類、パン類、米飯類、麺類、パスタ、味噌汁、豆腐、牛乳、ヨーグルト、スープ又はソース類、ベーカリー類（パン、パイ、ケーキ、クッキー、ビスケット、クラッカー等）、菓子（ビスケットやクッキー類、チョコレート、キャンディ、ケーキ、アイスクリーム、チューインガム、タブレット等）、栄養補助食品（丸剤、錠剤、ゼリー剤又はカプセル剤等の形態を有するサプリメント、グラノーラ様シリアル、グラノーラ様スネークバー、シリアルバー）等が挙げられるが、何れの形態であってもよい。また、通常の飲食品の他、錠剤、チュアブル錠、粉剤、カプセル、顆粒、ドリンク、ゲル、シロップ、経管経腸栄養用流動食等の各種形態が挙げられる。

　本発明の飲食品は、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）による所望の効果を実質的に妨げない限りにおいて、更に１種又は２種以上の他の任意の成分を含有していてもよい。斯かる他の成分としては、制限されるものではないが、例えばビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類、生薬等の活性成分や、種々の医薬添加剤、例えば各種の食品担体、賦形剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、色素、風味剤、結着剤、崩壊剤等が挙げられる。これらの成分は、何れか１種を単独で使用してもよく、何れか２種以上を任意の組み合わせ及び比率で併用してもよい。

　本発明の飲食品における各活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）の含有量は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制という所望の効果が発揮される限りにおいて限定されず、任意の量とすることができる。具体的な活性成分量は、本発明の飲食品の成分組成、用途、種類、摂食対象等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。

　本発明の飲食品の製法としては、限定されるものではないが、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）を、任意により用いられる１種又は２種以上の他の成分と共に、公知の食品製造法に従って混合及び調理することにより製造できる。具体的な製法は、本発明の飲食品の成分組成、用途、摂食対象、種類等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。或いは、既存の飲食品に、前述した本発明の組成物又は各活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）を配合することにより、本発明の飲食品を製造することもできる。一例を挙げると、大豆由来レジスタントプロテインを高濃度で含有する豆腐や凍り豆腐等の大豆加工食品に、天然物由来又は合成のイヌリンパウダーを含浸、混合、練りこむ等の手法により、レジスタントプロテイン及びイヌリンを含有する第１の組成物の態様として、本発明の飲食品を製造することができる。

　なお、特に本発明の第１の組成物からなる本発明の飲食品の場合、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の飲食品として調製してももちろんよいが、レジスタントプロテインとイヌリンとを各々個別独立の飲食品として調製しておき、摂食直前にそれらの個別独立の飲食品を混合・調理等してから摂食してもよく、或いはそれらの個別独立の飲食品を個別に摂食して、体内において混合されるようにしてもよい。こうした態様でも、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の飲食品として調製した場合と同様の作用効果が得られることは明らかであるから、本発明の飲食品の態様に含まれるものとする。

　本発明の飼料の詳細は、本発明の飲食品の詳細と概ね同様であり、前述した本発明の飲食品の各種条件を適宜適用して実施することができる。

［医薬品］
　本発明の組成物は、ヒト又は動物用の医薬品として利用することもできる。斯かる医薬品の形態とした本発明の組成物も、本発明の一側面を構成する。なお、本明細書では、医薬品の形態とした本発明の組成物を「本発明の医薬品」とも称す。

　本発明の医薬品は、限定されるものではないが、種々の態様による腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制を用途とする医薬品であることが好ましい。一態様によれば、本発明の第１の組成物からなる本発明の医薬品は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制の各種態様の中でも、プレボテラ属菌の増殖促進及び／又は硫化水素産生菌の増殖抑制を用途とする医薬品であることが好ましい。一態様によれば、本発明の第２の組成物からなる本発明の医薬品は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制の各種態様の中でも、硫化水素産生菌の増殖抑制を用途とする医薬品であることが好ましい。

　本発明の医薬品は、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）による所望の効果を実質的に妨げない限りにおいて、更に１種又は２種以上の他の任意の成分を含有していてもよい。斯かる他の成分としては、制限されるものではないが、例えば各種の医薬活性成分や、ビタミン類、ミネラル類、アミノ酸類、生薬等の薬効成分、更には医薬的に許容可能な種々の医薬添加剤、例えば各種の医薬担体、賦形剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、色素、風味剤、結着剤、崩壊剤等が挙げられる。これらの成分は、何れか１種を単独で使用してもよく、何れか２種以上を任意の組み合わせ及び比率で併用してもよい。

　本発明の医薬品における各活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）の含有量は、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制という所望の効果が発揮される限りにおいて限定されず、任意の量とすることができる。具体的な活性成分量は、本発明の医薬品の成分組成、用途、投与対象、投与経路、剤形、投薬レジメン等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。

　本発明の医薬品の剤型としては、限定されるものではないが、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤、懸濁剤等の経口剤、吸入剤、経皮製剤、坐剤等の経腸製剤、点滴剤、注射剤等の非経口剤などが挙げられる。なお、液剤や懸濁剤等の液体製剤の場合は、服用直前に水又は他の適当な媒体に溶解又は懸濁する形態であってもよい。また、錠剤や顆粒剤等の場合は、その表面が周知の方法によって被覆されていてもよい。また、注射剤の場合は、必要に応じて溶解補助剤を含む滅菌蒸留水又は滅菌生理食塩水の溶液の形態であってもよい。具体的な剤形は、本発明の医薬品の成分組成、用途、投与対象、投与経路、投薬レジメン等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。

　なお、特に本発明の第１の組成物からなる本発明の医薬品の場合、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の医薬品として調合してももちろんよいが、レジスタントプロテインとイヌリンとを各々個別独立の医薬品として調合しておき、投与直前にそれらの個別独立の医薬品を混合してから投与してもよく、或いはそれらの個別独立の医薬品を個別に投与して体内において混合されるようにしてもよい。こうした態様でも、レジスタントプロテイン及びイヌリンを単一の医薬品として調製した場合と同様の作用効果が得られることは明らかであるから、本発明の医薬品の態様に含まれるものとする。

　本発明の医薬品の製法としては、限定されるものではないが、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）を、任意により用いられる１種又は２種以上の他の成分と共に、公知の製剤法に従って混合及び製剤することにより製造することができる。本発明の医薬品の具体的な製法は、本発明の医薬品の成分組成、用途、投与対象、投与経路、剤形、投薬レジメン等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。

　本発明の医薬品の投与経路は限定されないが、腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質産生抑制という所望の効果が充分に発揮される投与経路とすることが好ましい。例としては、経口投与でも経腸投与（経管投与、腸内注入投与等）が挙げられる。具体的な投与経路は、本発明の医薬品の成分組成、用途、投与対象、剤形、投薬レジメン等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。なお、前述の本発明の第１の組成物からなる本発明の医薬品において、レジスタントプロテイン及びイヌリンを個別独立の医薬品として対象に投与する場合には、これらは同じ経路で対象に投与してもよいが、異なる経路で対象に投与してもよい。

　本発明の医薬品の投薬レジメンも、限定されるものではなく、本発明の医薬品の成分組成、用途、投与対象、剤形、投与経路等に応じて、適宜適切なものを選択すればよい。なお、前述の本発明の第１の組成物からなる本発明の医薬品において、レジスタントプロテイン及びイヌリンを個別独立の医薬品として対象に投与する場合には、これらは同じ投薬レジメンで対象に同時に投与してもよいが、異なる投薬レジメンで対象に異なるタイミングで投与してもよい。

［その他］
　以上、本発明の種々の側面について説明したが、本発明はこれらの側面に限定されるものではない。当業者であれば明らかなように、上記の詳細な説明及び後述の実施例等の記載から、本発明の別の任意の側面を抽出することも可能である。

　例えば、活性成分（第１の組成物に相当する態様の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物に相当する態様の場合はレジスタントプロテイン）を、それを必要とするヒト又は動物等の対象に投与することにより、対象において各種態様の腸内細菌叢改善及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制、例えばプレボテラ属菌の増殖促進及び／又は硫化水素産生菌の増殖抑制等の作用効果を生じさせることも可能である。斯かる腸内細菌叢の改善方法及び／又は腸内腐敗物質の産生抑制方法（例えばプレボテラ属菌の増殖促進方法及び／又は硫化水素産生菌の増殖抑制方法）も、本発明の一側面を構成する。なお、先の記載から明らかなように、特に本発明の第１の組成物に相当する態様として、レジスタントプロテイン及びイヌリンを対象に投与する場合には、レジスタントプロテインとイヌリンを対象に一緒に投与してもよく、レジスタントプロテインとイヌリンを個別に対象に投与してもよい。その詳細についても、前述した通りである。

　また、本発明の組成物、特に本発明の医薬品又は飲食品の製造において、活性成分（第１の組成物の場合はレジスタントプロテイン及びイヌリン、第２の組成物の場合はレジスタントプロテイン）を使用することも、本発明の一側面を構成する。その詳細については、やはり前述した通りである。

　また、特に本発明の第１の組成物に相当する態様として、レジスタントプロテイン及びイヌリンのうち一方を含有する既存の医薬品又は飲食品に対して、レジスタントプロテイン及びイヌリンのうち他方を組み合わせることにより、既存の医薬品又は飲食品の腸内細菌叢の改善作用を増強する方法及び／又は腸内腐敗物質の産生を抑制する方法も、本発明の一側面を構成する。その詳細については、やはり前述した通りである。

　以下、本発明を実施例に則して更に詳細に説明するが、これらの実施例はあくまでも説明のために便宜的に示す例に過ぎず、本発明は如何なる意味でもこれらの実施例に限定されるものではない。

［材料及び方法］
・レジスタントプロテインの調製：
　タンパク質源として、大豆（品種名：ＢＳ１５１２、アメリカ産）、豆腐（大豆を浸漬・磨砕・加熱・ろ過して得られた豆乳に塩化カルシウムを添加し、圧縮成形したもの）、凍り豆腐（旭松食品製「新あさひ豆腐」）を用いた。タンパク質源を脱脂後水に懸濁し、懸濁液のｐＨを塩酸で１．８～２．０に調整した後、タンパク質源に対し１質量％量のペプシンを加え、３７℃、５時間処理した。反応後、反応液のｐＨを炭酸水素ナトリウムで７．２に調整し、タンパク質源の３質量％量のパンクレアチンを添加し、３７℃で１４時間反応させた。反応後、反応液のｐＨを塩酸で酸性に調整し、遠心分離後、得られた沈澱画分を水に懸濁し、懸濁液のｐＨを炭酸水素ナトリウムで７．０に調整した。この懸濁液を脱塩し、凍結乾燥した後に得られた粉末を、レジスタントプロテイン（それぞれ大豆ＲＰ、豆腐ＲＰ、及び凍り豆腐ＲＰ）とした。

・試料の調製：
　前記手順で得られた各レジスタントプロテイン（大豆ＲＰ、豆腐ＲＰ、及び凍り豆腐ＲＰ）を用い、下記の表１に記載の組成を有する各試料を調製した。なお、表１に示す％は「質量％」を意味する。また、表１に示すセルロースとしては、富士フイルム和光純薬から購入したものを使用し、イヌリンとしては、Frutafit IQ^{（登録商標）}（Sensus社製）を使用し、コントロールプロテインとしては、Nutrient Broth（Difco社製）を使用した。

・糞便懸濁液の調製：
　ヒト大腸内を模した腸内細菌叢を再現するために、豚（４～５月齢）の糞便を用いたIn vitro腸内発酵試験を採用した。豚糞便に４倍の生理食塩水を加えて混合し、メッシュを用いて濾過したものを糞便懸濁液として、使用時まで凍結保存した。

・In vitro腸内発酵試験：
　In vitro腸内発酵試験は、Bio Jr.8培養装置（エイブル）を用いて、以下の手順に従って行った。蒸留水９０ｍＬを加えた培養槽を、１２１℃で２０分間加熱滅菌した。放冷後、培養槽へ前記の糞便懸濁液を１０ｍＬ入れて混和し、一晩培養を行った。培養装置の設定条件は、温度３７℃、撹拌子回転数４００ｒｐｍとした。培養槽内のｐＨが５．５を下回った場合には、アルカリ溶液（２Ｍ水酸化ナトリウム）が自動的に滴下されるように設定した。また、培養槽内を嫌気状態に保つため、二酸化炭素ガスを充填させた。一晩培養後、前述の表１に示す各試料を、蒸留水２０ｍＬ（大塚蒸留水、大塚製薬）とともに培養槽に添加した。４８時間培養後、採取した培養上清１ｍＬを遠心分離し（１０，０００ｒｐｍ、４℃、５分）、培養上清及び沈殿物を得た。なお、本In vitro腸内発酵試験は、前述の表１に示すTest 1及びTest 2の二回に分けて実施した。各試料について、試験後に得られた培養上清及び沈殿物を用いて、下記手順によりアンモニア濃度、インドール濃度、特定細菌量、及び短鎖脂肪酸量の測定を行った。

・アンモニア濃度の測定：
　各試料について試験後に得られた培養上清を用いて、以下の手順に従ってアンモニア濃度を測定した。培養上清を蒸留水で希釈し、血液検査用アンモニアキット「アンモニア・テストワコー」（富士フイルム和光純薬）を用いて、前記キットに含まれる説明書に従い、６３０ｎｍにおける吸光度に基づく比色法によりアンモニア濃度を測定した。なお、比色用の検量線は、前記キットに含まれるアンモニア標準液を用いて、濃度０、１００、２００、３００、及び４００μｇ／ｄＬとなるように段階希釈した検量線用標準液を用いて作成した。

・インドール濃度の測定：
　各試料について試験後に得られた培養上清を用いて、以下の手順に従ってインドール濃度を測定した。インドール（富士フイルム和光純薬）を０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．５）に溶解させ、１００μｇ／ｍＬのインドール標準液を作製した。これを０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ５．５）により濃度０、０．１９５、０．７８１、３．１２５、１２．５、及び５０μｇ／ｍＬとなるように段階希釈し、検量線用標準液を調製した。発色溶液は、ｐ－ジメチルアミノベンズアルデヒド（富士フイルム和光純薬）１．４７ｇを、硫酸アルコール１００ｍＬ（９５％硫酸５．２ｍＬ＋９５％エタノール９４．８ｍＬ）に溶解させて調製した。各培養上清及び各検量線用標準液２００μＬに発色溶液を１ｍＬ加え２０分間静置した後、遠心分離（３，０００ｒｐｍ、４℃、１０分）を行い、５６８ｎｍにおける各培養上清の吸光度を測定して、検量線用標準液と比色することにより、各培養上清のインドール濃度を求めた。

・細菌量の測定：
　各試料について試験後に得られた沈殿物を用いて、リアルタイムＰＣＲ法を用いて、下記手順によりプレボテラ属菌（Prevotella spp.）及びデスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.：硫化水素産生菌）の各菌量を測定した。各沈殿物からNucleoSpin DNA Stool（Macherey-Nagel）を用いてＤＮＡを抽出した。抽出したＤＮＡ溶液について、下記の表２に示す塩基配列を有する各細菌検出用プライマーを用い、Fast SYBR Green Master Mix（Thermo Fisher Scientific）及びCFX384 Touch Real-Time Detection System（Bio-Rad）により、各細菌ＤＮＡ中の検出用の塩基配列を増幅し、各細菌量を求めた。

［結果及び考察］
・結果：
　以上の試験及び測定により各試料について得られたアンモニア濃度、インドール濃度、及び特定細菌量を下記の表３及び添付の図１～３に示す。

・アンモニア濃度及びインドール濃度：
　上記の表３及び添付の図１のグラフに示すアンモニア濃度及びインドール濃度の結果を検討すると、まずTest 1によれば、凍り豆腐ＲＰをイヌリンと共に含有するＩＫ群では、イヌリンを含有するが凍り豆腐ＲＰを含有しないＩＣ群、又は、凍り豆腐ＲＰを含有するがイヌリンを含有しないＣＫ群と比較して、アンモニア濃度及びインドール濃度の減少が認められた。ここで、イヌリンと凍り豆腐ＲＰとの組み合わせの負方向の相乗効果を、以下の式（１）により算出した。

　上記式（１）に従って計算すると、アンモニア濃度についてのＩＫ群の負方向の相乗効果は、（６７１．２－４．４）／｛（６７１．２－１５１．８）／２＋（６７１．２－５７２．６）／２｝＝２．１６倍となった。また、インドール濃度についてのＩＫ群の負方向の相乗効果は、（１．３４－０．３１）／｛（１．３４－０．８７）／２＋（１．３４－１．７０）／２｝＝１８．７２倍となった。即ち、アンモニア濃度及びインドール濃度の何れについても、ＩＫ群における負方向の相乗効果が確認された。従って、イヌリンと凍り豆腐ＲＰとの組み合わせによって、腸内腐敗物質（アンモニア及びインドール）の産生が抑制されたことが分かる。特に、ＩＫ群とＣＫ群の対比からは、凍り豆腐ＲＰによる腸内腐敗物質（アンモニア及びインドール）の産生抑制作用が、イヌリンを組み合わせることで大幅に増強され、相乗効果が得られていることが分かる。

　次に、Test 2によれば、大豆ＲＰ、豆腐ＲＰ、及び凍り豆腐ＲＰをそれぞれイヌリンと共に含有するＩＤ群、ＩＴ群、及びＩＫ群では、イヌリンを含むがレジスタントプロテインを含まないＩＣ群と比較して、アンモニア濃度及びインドール濃度の減少が認められた。従って、レジスタントプロテインとして凍り豆腐ＲＰだけではなく、大豆ＲＰ及び豆腐ＲＰを用いた場合についても、イヌリンとの組み合わせによって、アンモニア及びインドール産生が抑制されたことが示された。

・プレボテラ属菌（Prevotella spp.）量：
　上記の表３及び添付の図２のグラフに示すプレボテラ属菌（Prevotella spp.）量の結果を検討すると、まずTest 1によれば、凍り豆腐ＲＰをイヌリンと共に含有するＩＫ群では、イヌリンを含有するが凍り豆腐ＲＰを含有しないＩＣ群、又は、凍り豆腐ＲＰを含有するがイヌリンを含有しないＣＫ群と比較して、プレボテラ属菌（Prevotella spp.）量の増加が認められた。ここで、イヌリンと凍り豆腐ＲＰとの組み合わせの正方向の相乗効果を、以下の式（２）により算出した。

　上記式（２）に従って計算すると、ＩＫ群の正方向の相乗効果は、表３に示す各値より、４．５７／（０．７０／２＋０．７８／２）＝６．１８倍となった。よって、ＩＫ群における正方向の相乗効果が確認され、イヌリンと凍り豆腐ＲＰとの組み合わせによってプレボテラ属菌（Prevotella spp.）の増殖が促進されたことが示された。特に、ＩＫ群とＣＫ群の対比からは、凍り豆腐ＲＰによるプレボテラ属菌（Prevotella spp.）の増殖促進作用が、イヌリンを組み合わせることで大幅に増強され、相乗効果が得られていることが分かる。

　次に、Test 2によれば、大豆ＲＰ、豆腐ＲＰ、及び凍り豆腐ＲＰをそれぞれイヌリンと共に含有するＩＤ群、ＩＴ群、及びＩＫ群では、イヌリンを含むがレジスタントプロテインを含まないＩＣ群と比較して、プレボテラ属菌（Prevotella spp.）の増加が認められた。従って、レジスタントプロテインとして凍り豆腐ＲＰだけではなく、大豆ＲＰ及び豆腐ＲＰを用いた場合についても、イヌリンとの組み合わせによって、プレボテラ属菌（Prevotella spp.）の増殖が促進されたことが示された。

・デスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）量：
　上記の表３及び添付の図３のグラフに示すデスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）量の結果によれば、Test 1では、イヌリンもレジスタントプロテインも含まないＣＣ群と比較して、イヌリンを含むがレジスタントプロテインを含まないＩＣ群、凍り豆腐ＲＰを含むがイヌリンを含まないＣＫ群、及び凍り豆腐ＲＰとイヌリンを共に含むＩＫ群では、何れもデスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）量の減少が認められた。また、Test 2では、イヌリンを含むがレジスタントプロテインを含まないＩＣ群と比較して、大豆ＲＰ、豆腐ＲＰ、及び凍り豆腐ＲＰをそれぞれイヌリンと共に含有するＩＤ群、ＩＴ群、及びＩＫ群では、培養上清中デスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.）量の減少が認められた。よって、レジスタントプロテイン（凍り豆腐ＲＰ、大豆ＲＰ、及び豆腐ＲＰ）によって、硫化水素産生菌（デスルフォビブリオ属菌（Desulfovibrio spp.））の増殖が抑制されたことが示された。

　本発明は、腸内細菌叢改善作用及び／又は腸内腐敗物質産生抑制作用が求められる産業分野、特に医薬品及び飲食品の分野において、極めて高い利用可能性を有する。

Claims

　イヌリンとレジスタントプロテインとを含む、組成物。
　腸内細菌叢改善のための、請求項１に記載の組成物。
　腸内腐敗物質産生抑制のための、請求項１又は２に記載の組成物。
　前記腸内腐敗物質がアンモニア又はインドールである、請求項３に記載の組成物。
　プレボテラ属菌増殖促進のための、請求項１～４のいずれか１項に記載の組成物。
　硫化水素産生菌増殖抑制のための、請求項１～５のいずれか１項に記載の組成物。
　レジスタントプロテインを含む硫化水素産生菌増殖抑制のための組成物。
　飲食品である、請求項１～７のいずれか１項に記載の組成物。
　医薬品である、請求項１～７のいずれか１項に記載の組成物。
　経口又は経腸投与用の医薬品である、請求項９に記載の組成物。