WO2008056596A1 - Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist - Google Patents

Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist Download PDF

Info

Publication number
WO2008056596A1
WO2008056596A1 PCT/JP2007/071305 JP2007071305W WO2008056596A1 WO 2008056596 A1 WO2008056596 A1 WO 2008056596A1 JP 2007071305 W JP2007071305 W JP 2007071305W WO 2008056596 A1 WO2008056596 A1 WO 2008056596A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
nucleic acid
polymer
acid antimetabolite
derivative
Prior art date
Application number
PCT/JP2007/071305
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Keiichiro Yamamoto
Kazutoshi Takashio
Original Assignee
Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha filed Critical Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha
Priority to US12/312,009 priority Critical patent/US8334364B2/en
Priority to EP07831039.8A priority patent/EP2080779B1/en
Priority to JP2008543048A priority patent/JP5503872B2/ja
Publication of WO2008056596A1 publication Critical patent/WO2008056596A1/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/74—Synthetic polymeric materials
    • A61K31/785—Polymers containing nitrogen
    • A61K31/787—Polymers containing nitrogen containing heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/645—Polycationic or polyanionic oligopeptides, polypeptides or polyamino acids, e.g. polylysine, polyarginine, polyglutamic acid or peptide TAT
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/02—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids
    • C08G69/08—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids derived from amino-carboxylic acids
    • C08G69/10—Alpha-amino-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/40—Polyamides containing oxygen in the form of ether groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/48—Polymers modified by chemical after-treatment

Definitions

  • the present invention relates to a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite, its use, and its production method.
  • nucleic acid antimetabolites have been developed for the treatment of malignant tumors or viral diseases, and cytarabine, gemcitabine, and toxifunorelin (doxifluridine) are antitumor agents (anticancer agents). ), Quercitidine, azacitidine, decitabine, nelarabine, etc. As antiviral agents, zalcitabine, lamivudine, etc. are used clinically.
  • gemcitabine has a strong cell growth inhibitory activity comparable to anticancer drugs such as paclitaxel and doxorubicin in vitro, but in the clinical setting, high dose of 1000 mg / m 2 once per body surface area is necessary.
  • Non-Patent Document 2 describes a polymer derivative in which polygnoretamic acids having an average molecular weight of about 30000 are bound to cytarabine.
  • a high molecular weight derivative of a drug exhibits a hypersensitivity reaction due to an immune reaction, and in such a case, it cannot be repeatedly administered as a drug.
  • Patent Document 1 is a polymer derivative in which cytidine derivatives are bound to polyethylene glycols
  • Non-Patent Document 3 is in which aspartic acid is branched at both ends of polyethylene glycols to bind cytarabine to them. Polymer derivatives are described.
  • Patent Document 5 describes a polymer derivative having a structure in which an amino acid is used and branched at the end of a polyethylene dallicol chain, and the drug is released after each branch undergoes a benzyl elimination reaction. .
  • all these polymer derivatives do not slow down the hydrolysis rate in plasma for several tens of hours at the longest, and the polymer derivatives themselves remain in the living body for a long time.
  • Patent Document 2 describes that a molecular force cell in which a drug is bound to a block polymer in which polyethylene glycols and polyaspartic acid are condensed is formed into a medicine.
  • Patent Document 3 describes a polymer in which an anticancer substance is bonded to a glutamic acid side chain carboxyl group of a block polymer in which polyethylene glycols and polyglutamic acid are condensed.
  • a nucleic acid antimetabolite as a drug that binds to them.
  • Patent Document 4 discloses a cancer chemotherapeutic treatment in which a water-soluble polymer derivative obtained by ester condensing a carboxyl group of a polymer of polyethylene glycol and a polycarboxylic acid and a phenolic hydroxyl group of a phenolic camptothecin is disclosed.
  • the force S which is described as being suitable for the drug, is an ester with a phenol and carboxyl group bonded, not a primary alcohol or an ester with a secondary alcohol and carboxyl group bonded! /.
  • a nucleic acid antimetabolite as a drug that also binds to these.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Publication No. 2003-524028
  • Patent Document 2 Japanese Patent No. 2694923
  • Patent Document 3 JP-A-5-955
  • Patent Document 4 International Publication Number WO2004 / 039869 Pamphlet
  • Patent Document 5 Special 2004-532289 Noriyuki
  • Non-Patent Document 1 “Cancer 'Science”, published by the Japanese Cancer Society, 2004, Vol. 95, 105 — 1 ⁇ 1 Sada (Ancer Science ⁇ Japanese Cancer Association ⁇ Vol. 95, p. 10 5- 1 11 (2004))
  • Non-Patent Document 2 “Cancer Research” (USA), American Cancer Society, 1984, Vol. 44, 25—dO (Cancer Research ⁇ American Association for Cancer Research, Vol. 44, p. 25-30 ( (1984))
  • Non-Patent Document 3 "Journal of Controlled Release” (UK), published by Elsevier, 2002, 79, 55-70 (Journal of Controlled Release, Elsevier, Vol. 79, p. 55-70 ( 2002))
  • An object of the present invention is to provide a nucleic acid antimetabolite that becomes a novel anticancer agent or antiviral agent having a higher effect at a low dose.
  • the inventors of the present invention consisted of a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite, particularly a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain.
  • the present inventors have found a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite characterized by an ester bond between the carboxyl group of the side chain of the polymer compound and the hydroxyl group of the nucleic acid antimetabolite.
  • the present invention relates to the following (1) to (; 16).
  • Polyethylene glycol moiety and polymer moiety having a carboxyl group in the side chain The carboxyl group in the side chain of such a polymer compound and the hydroxyl group of the nucleic acid antimetabolite are ester-bonded.
  • a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite is ester-bonded.
  • a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite is represented by the following general formula (1)
  • R represents a hydrogen atom or a C1-C6 alkyl group
  • A represents a hydrogen atom, a C1-C6 acyl group or a C1-C6 alkoxycarbonyl group
  • m represents an average value of 3 to 200
  • n represents an average value of 5 to 2000
  • X represents a nucleic acid antimetabolite residue, a hydroxyl group, a hydrophobic substituent
  • -N (Rl) CONH (R2) Rl and R2 may be the same or different. Substituted with a tertiary amino group! /, May! /, C;! To C6 alkyl group), and the nucleic acid antimetabolite residue and N (Rl) CONH (R2)
  • R2 A polymer derivative of a nucleic acid-based antagonist according to (1) or (2) above,
  • X is a nucleic acid antimetabolite residue
  • 0 to 95% is X is a hydroxyl group
  • 0 to 80% is X is a hydrophobic substituent
  • 5 to 80% is X —N (Rl) CONH (R2), which is a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite according to (3) above.
  • X is a nucleic acid antimetabolite residue
  • 5 to 70% is X is a hydroxyl group
  • 20 to 70% is X is a hydrophobic substituent
  • 5 to 70% is X
  • R is a C1-C4 alkyl group
  • A is a C2-C4 acyl group
  • m is 5 to 100 on average
  • n is 50 to 1000 on average
  • R force S methyl group A is acetyl group, m is 10 to 60 on average, n is 100 to 300 on average, and nucleic acid antimetabolite residue is gemcitabine or doxyfluridine residue A polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite according to (6) above.
  • hydrophobic substituent is represented by the general formula (4) [0016] [Yi 4]
  • Q represents a side chain of a neutral amino acid
  • W represents a C1-C6 alkyl group or a benzyl group
  • R force S methyl group A is acetyl group, m is 10 to 60 on average, n is 100 to 300 on average, and nucleic acid antimetabolite residue is gemcitabine residue
  • A is acetyl group
  • m is 10 to 60 on average
  • n is 100 to 300 on average
  • nucleic acid antimetabolite residue is gemcitabine residue
  • An antiviral agent comprising the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite according to any one of (1) to (13) as a medicinal ingredient.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention includes a carboxyl group of a polymer compound comprising a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain, and a hydroxyl group of the nucleic acid antimetabolite.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention has a structure in which a polyethylene glycol moiety having a high affinity for water in the outer shell and a side chain having a hydrophobic residue and a nucleic acid antimetabolite are contained in water. It is thought to form agglomerates as shells. Therefore, it can be a derivative that has the property of sustained release of a drug in an enzyme-independent manner and is therefore less affected by individual differences in the patient's therapeutic effect. In addition, the polymer derivative of the present invention selectively accumulates in the affected area and becomes a drug with higher effects and fewer side effects.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention comprises a polyethylene glycol moiety and a side chain carboxyl group of a polymer compound comprising a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain, and a nucleic acid antimetabolite. It is characterized by being obtained by dehydration condensation of a hydroxyl group of the agent with a carpositimide-based condensing agent in an organic solvent.
  • nucleic acid antimetabolite in the present invention has antitumor activity or antiviral activity.
  • nucleic acid metabolism is any one in which the nucleobase moiety is selected from the above formula (2), and the group (Rf) is selected from the above formula (3) by binding to it! /, It is a compound that is not.
  • nucleic acid antimetabolite of the present invention cytarabine, gemcitabine, doxifluridine, azacitinline having a structure represented by the following formula (6) , Tecitabine, clecitabine, non elarabine, 2'—methylidene-2'-deoxycytidine (DMDC), tezacitabine, zanocitabine, ramif, lamivudine, 5 —deoxy —5— Fluorocytidine (5, 1 DFCR), troxacitabine, 3, 1 ethynylcytidine or 2'-cyanol 2'-deoxy 1 / 3-D- arabinofuranosylcytosine (CNDAC)
  • DMDC methylidene-2'-deoxycytidine
  • CNDAC azacitinline having a structure represented by the following formula (6)
  • Tecitabine clecitabine
  • non elarabine 2'—methylidene-2'-deoxy
  • DMDC tczacitabino
  • Czalcitabine lamivudine
  • Toloxacitabine 3' etuclucidin 2′—cyanol 2′—deoxy 1 ⁇ -D- (troxacitabmej (E t hvny lcyt 1 dm e) (CNDAC)
  • CNDAC CNDAC
  • “having a carboxyl group in the polyethylene glycol moiety and side chain The polymer part having a carboxyl group in the side chain in the ⁇ polymer compound comprising a polymer part '' is a group in which the side chain having a carboxyl group is branched from the polymer main chain. Examples thereof include block type polymers in which raft type polymers and polycarboxylic acid polymers are condensed.
  • Examples of the high molecular compound in which the polymer portion having a carboxyl group in the side chain is a graft polymer include, for example, a polyethylene glycol / acrylic acid condensate and acrylic acids described in JP-A-11-279083.
  • a polymer obtained by subjecting maleic anhydride or the like to a copolymerization reaction and subjecting it to a hydrolysis reaction as necessary may be mentioned.
  • Examples of the high molecular compound in which the polymer portion having a carboxyl group in the side chain is a block polymer include a compound in which a polyethylene glycol having a terminal functional group and a polycarboxylic acid having a functional group at a terminal are bonded, Examples thereof include compounds obtained by a polymerization reaction of an amino acid activated product that starts polymerization with polyethylene glycols having an amino group at the terminal, as described in Patent Document 3.
  • Examples of the polymer having a carboxyl group in the side chain include polyacrylic acid, polymethacrylic acid, polymalic acid, and polyglutamic acid, and polyglutamic acid is preferable.
  • the "polyethylene glycol” in the present invention may be a polyethylene glycol derivative having both ends or one end modified.
  • the modifying groups at both ends may be the same or different.
  • the terminal modifying group include a C1-C6 alkyl group which may have a substituent, and preferably has a substituent! /, May! /, C;! -C4 alkyl group In
  • the C1-C6 alkyl group in the C1-C6 alkyl group which may have a substituent includes a linear, branched or cyclic C1-C6 alkyl group, and examples thereof include a methyl group and an ethyl group.
  • the substituent of the C1-C6 alkyl group which may have a substituent is not particularly limited. Examples: An amino group, a mino group, a methinoremino group, a dimethinoremino group, a ütinoremino group, a dutinoremino group, and the like are preferable, and an amino group is preferable.
  • polyethylene glycol derivatives modified at both ends are preferred.
  • Derivatives include polyethylene glycol derivatives in which one end is a C1-C4 alkyl group and the other end is an amino C1-C4 alkyl group. Particularly, one end is a methyl group and the other end is an aminopropyl group.
  • Polyethylene glycol derivatives are preferred.
  • the weight average molecular weight of the "polyethylene glycols" in the present invention is about 200 to 500,000, preferably ⁇ is 500 to about 100,000, and more preferably is about 2000 to 50,000.
  • the "polymer compound having a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain” in the present invention is preferably a block polymer, and more preferably a polyethylene glycol and a carboxyl group in the side chain.
  • Examples of the block copolymer of polyethylene glycol and a polymer having a carboxyl group in the side chain include alkoxy polyethylene glycol polyacrylic acid, alkoxy polyethylene glycol-polymethacrylic acid, or alkoxy polyethylene glycol polyglutamic acid. Preferred is methoxypolyethylene glycol-polyglutamic acid.
  • the average number of carboxyl groups per molecule of the "polymer compound comprising a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain" in the present invention is about 3 to 200, preferably Is about 5 to about 100, more preferably about 10 to 60 Degree.
  • the weight average molecular weight of the "polymer compound comprising a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in a side chain" in the present invention is about 500 to 500,000, and preferably ⁇ is 2000 to 100000. Is more preferable, and ⁇ is about 3000-50000.
  • the binding amount of a nucleic acid antimetabolite that is ester-bonded to a polymer compound comprising a polyethylene glycol moiety and a polymer moiety having a carboxyl group in the side chain is 1
  • the amount is not particularly limited as long as it is within the range of the total number of units to carboxyl groups, and may be any amount that exhibits a medicinal effect when administered in vivo! /.
  • it is 5 to 100%, more preferably 5 to 70% of the total number of carboxyl groups in the polymer portion.
  • the amount of the bond can be determined from the intensity of the ultraviolet absorption spectrum of the compound of the present invention. Further, the nucleic acid antimetabolite released by alkaline hydrolysis of the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention can also be obtained by quantifying it by, for example, high performance liquid chromatography. it can.
  • R represents a hydrogen atom or a C1-C6 alkyl group
  • A represents a hydrogen atom
  • m is an average value of 3-200
  • n is an average value of 5-2000
  • X is a nucleic acid antimetabolite residue, hydroxyl group, Hydrophobic substituents
  • — N (Rl) CONH (R2) Rl and R2 may be the same or different and substituted with a tertiary amino group! /, May! /, C;!
  • N (Rl) CONH (R2) ie, nucleic acid metabolite residues, hydroxyl groups, hydrophobicity
  • Substituents, and two or more groups selected from the group consisting of N (Rl) CONH (R2), nucleic acid antimetabolite residues and —N (Rl) CONH (R2) are essential, and others Is an optional group
  • X is a nucleic acid antimetabolite residue
  • 0 to 95% is X is a hydroxyl group
  • 0 to 80% X is a hydrophobic substituent
  • the C1-C6 alkyl group in R has the same meaning as the above alkyl group, and the preferred groups are also the same.
  • the C1-C6 acyl group in A includes, for example, formyl group, acetyl group, propionyl group, butyryl group, isobutyryl group, valeryl group, isovaleryl group, bivaloyl group or hexanol group. And preferably a C2-C4 acyl group, for example, an acetyl group or a propionyl group, more preferably an acetyl group.
  • the C1-C6 alkoxycarbonyl group in A includes, for example, a methoxycanoleboninore group, an ethoxycanoleponorele group, a propoxycaneponoreno group, an isopropoxynoporeponoreno group, n- A butoxycarbonyl group, a tert-butoxycarbonyl group, a pentoxycarbonyl group, a hexinorexic xyanolopinole group, a cyclopropoxy carbonylonole group, a cyclopentoxycarbonyl group or a cyclohexyloxycarbonyl group, A methoxycarbonyl group, an ethoxycarbonyl group, a propoxycarbonyl group, an isopropoxycarbonyl group, a butoxycarbonyl group or a tert-butoxycarbonyl group is preferable, and an ethoxycarbonyl group or a ter
  • m is an average value of 3 to 200, preferably about 5 to about 100, and more preferably about 10 to 60.
  • n is an average value of 5 to 2000, preferably about 50 to about 1000, and more preferably about 100 to 300.
  • X is a glutamic acid derivative that is a nucleic acid antimetabolite residue
  • X is a glutamic acid derivative that is a hydroxyl group
  • X is a hydrophobic substitution.
  • the glutamic acid derivative which is a group and the glutamic acid derivative whose X is —N (Rl) CONH (R2) may be bonded at random, or may be bonded by forming a block for each type of X.
  • gemcitabine is particularly preferred as a nucleic acid antimetabolite for X.
  • Examples of the hydrophobic substituent in X of the general formula (1) include various substituents, and are not particularly limited as long as they do not hinder the efficacy of the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite.
  • an ⁇ -amino acid derivative represented by the above general formula (4) [wherein Q represents a side chain of a neutral amino acid and W represents a C1-C6 aralkyl group or a benzyl group] or the above general formula ( 5) [In the formula, ⁇ is substituted with a phenyl group! /, May be! /, C; represents an! To C6 alkyl group].
  • the side chain of the neutral amino acid in Q of the general formula (4) is, for example, a hydrogen atom, a methyl group, an isopropyl group, an isobutyl group, an sbutyl group, a benzyl group, a hydroxymethyl group, or a 1 hydroxyethyl group.
  • Natural amino acid residues such as tert-butoxymethyl, benzyloxymethyl, benzyloxycarbonylmethyl, 2-benzyloxycarbonylethyl, etc.
  • isopropyl group isobutyl group, s butyl group, benzinole group, benzyloxymethyl group, benzyloxycarbonylmethyl group, 2-benzyloxycarbonylethyl group, and more preferably isopropyl group.
  • Group, benzyl group, benzoxymethyl group or 2-benzyloxycarboni A ruetyl group, particularly preferably an isopropyl group or a benzyl group.
  • Examples of the C1-C6 alkyl group in W of the general formula (4) include the same groups as those described above, and preferred groups are also the same.
  • the C1-C6 alkyl group in T of the general formula (5) has the same meaning as the above-described alkyl group, and the preferred groups are also the same.
  • Examples of the group represented by the general formula (5) include a methoxy group, an ethoxy group, an n propoxy group, an isopropoxy group, an n butoxy group, a tert butoxy group, an n pentyloxy group, an n hexyloxy group, and a cyclopropyloxy group.
  • hydrophobic substituent examples include a methylamino group, an ethylamino group, an n-propylamino group, an isopropylamino group, an n-butylamino group, an isobutylamino group, an n-pentylamino group, an n-hexylamino group, and a cyclopropylamino group.
  • cyclopentylamino group cyclohexylamino group, cyclohexylmethylamino group, dicyclohexylmethylamino group, anilino group, benzylamino group, 2 phenylethylamino group, 3 phenylpropylamino group, 4 phenylbutyl group
  • An amino group such as an amino group or a diphenylmethylamino group is also included.
  • hydrophobic substituent for X in the general formula (1) is a benzyloxy group, a 3-phenylpropoxy group, a 4-phenylbutoxy group, (1-benzyloxycarbonyl 2-methyl) propyl.
  • Amino group or (1 benzyloxycarbonyl 2-phenyl) ) Ethylamino group particularly preferably a 4-phenylbutoxy group or a (1-benzyloxycarbonyl-2-phenyl) ethylamino group.
  • N (Rl) CONH (R2) in X of the general formula (1) is not particularly limited as long as it does not hinder the efficacy of the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite.
  • Rl and R2 of -N (R1) CONH (R2) may be the same or different! /, May be substituted with a tertiary amino group! / May be represented by a C1-C6 alkyl group It is a group. More preferred are cyclohexylaminocarbonylcyclohexylamino group and isopropylaminocarbonylisopropylamino group.
  • Rl and R2 of -N (Rl) CONH (R2) the C1-C6 alkyl group of the C1-C6 alkyl group which may be substituted with a tertiary amino group is the above-mentioned
  • the meaning is the same as the alkyl group, and preferred groups are also the same.
  • the ratio that X is a nucleic acid antimetabolite residue is 5 to 95%, preferably 5 to 70% with respect to the total number of carboxyl groups in the polymer portion (a number equal to m).
  • the proportion of X being a hydroxyl group is 0 to 95%, preferably 5 to 70%, and the proportion of X being a hydrophobic substituent is 0 to 80%, preferably 20 to 70%, X Is —N (Rl) CONH (R2) is 5 to 80%, preferably 5 to 70%.
  • the carboxyl group is free or alkaline. It can be a salt type! / When obtained in the free form, it can be converted to the target salt by a known method or a method analogous thereto, and conversely, when obtained in the salt, the free form can be obtained by a known method or a method analogous thereto. Or convert to other desired salt with force S.
  • alkali salts include lithium salts, sodium salts, potassium salts, magnesium salts, ammonium salts, and triethylammonium salts.
  • the structural unit constituting the polymer part having a carboxyl group in the side chain may be any optically active substance or racemic substance when an optical isomer exists. May be a mixture of proportions! /
  • the polymer moiety having a carboxyl group in the side chain is a polygnoretamic acid derivative
  • poly L-gnoretamic acid, DD Gugglultamic acid, side chain was replaced by LL Gugglutataminate and side chain was replaced DD ——
  • the compound of the present invention which is particularly preferred as a high molecular weight molecule-inducing conductor of the nuclear nucleic acid acid metabolite antagonist antagonist agent, may be particularly preferred.
  • Examples of compounds include the compound compounds shown in Table 11 below, for example. .
  • each XX is the total total of Kaporubo boxoxy for the portion of the poplar limmer section.
  • the remainder other than those shown in the table is a hydroxyl group.
  • BBzzll represents a benbendizyl group
  • PPhhee represents a fueninyl aralaninin
  • CC HH PPhh represents a 44-fluorobutylbutyryl group.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention includes, for example, a methoxypolyethylene dariconolone polyglutamic acid block copolymer obtained according to the method described in Patent Document 3, and a nucleic acid. It can be produced by condensing a substitution agent with a ⁇ condensing agent in a solvent.
  • the solvent in the above reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • Torenen, Xylene, etc. Elements, methylene chloride, chloroform, 1,2,2-dichloroethane, halogen, bi 3 ⁇ 4 ⁇ , tetrahydrofuran, dioxane, dimethoxyethane, ethers of diethyleneglycolole dimethyletheno ⁇ , acetonitrile, propionium
  • Replacement paper (Regulation 1123 ⁇ 4 Examples include nitriles such as tolyl, amides such as dimethylformamide, dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, ureas such as 1,3-dimethylimidazolidinone, and mixed solvents of the above solvents, preferably amides. Or ureas, more preferably dimethylformamide or 1,3-dimethylenomidazolidinone.
  • the dehydrating condensing agent in the above reaction is not particularly limited as long as the condensation reaction between the hydroxyl group and the carboxyl group of the nucleoside derivative that is a nucleic acid antimetabolite proceeds.
  • Preferred examples include calpositimide condensing agents such as dicyclohexyl carpositimide, diisopropyl carpositimide, 1-dimethylaminopropyl 3-ethyl carpositimide.
  • reaction aid examples include N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole or 4-dimethylaminopyridine, or 2,6-di-tert-butyl-4-methyl. Examples include pyridine.
  • the reaction temperature of the dehydration condensation reaction is usually 4 to 60 ° C, preferably 15 to 50 ° C.
  • the reaction time is 2 hours to several days, preferably 4 to 48 hours.
  • the target compound can be isolated and purified as appropriate by appropriately applying separation means known per se, for example, concentration under reduced pressure, solvent extraction, crystallization, dialysis, chromatography and the like.
  • X is a nucleic acid antimetabolite residue, hydroxyl group, N (R1) CONH (R2) (Rl and R2 may be the same or different, and are substituted with a tertiary amino group.
  • a polymer derivative comprising a group selected from the group consisting of C1 to C6 alkyl groups which may be used).
  • the bonding mode between the polymer carrier of the polymer derivative obtained by this dehydration condensation reaction and the nucleic acid antimetabolite is almost an ester bond by using a carpositimide condensing agent.
  • the nucleic acid antimetabolite can form a bond other than the ester bond, but as long as it does not hinder the efficacy of the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite, the binding method may be mixed or alone! / ,.
  • N (Rl) CONH (R2) (wherein Rl and R2 may be the same or different and may be substituted with a tertiary amino group) may be substituted for the polymer compound carrier.
  • Rl and R2 may be the same or different and may be substituted with a tertiary amino group
  • the dehydration condensation reaction between the nucleic acid antimetabolite and the polymer compound can be carried out in the absence of the nucleic acid antimetabolite.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention has a hydrophobic substituent, for example, a methoxypolyethylene glycol-polyglutamic acid block copolymer produced according to the method described in Patent Document 3 is used.
  • the force S can be obtained by condensing the nucleoside derivative, which is an antagonist, with a dehydrating condensing agent in an organic solvent as described above.
  • the introduction of the hydrophobic substituent is performed by condensing (esterifying) the corresponding alcohol and the carboxyl group with a dehydrating condensing agent in a solvent.
  • This is performed by subjecting an alkyl halide or the like and the carboxyl group to a nucleophilic substitution reaction in a solvent in the presence of a base.
  • the hydrophobic substituent is a substituted amino group
  • the corresponding amine and the carboxyl group are used.
  • the solvent in the dehydration condensation reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but when dehydrating condensation of the methoxypolyethylene glycol polyglutamic acid block copolymer and the nucleic acid antimetabolite. Solvents similar to those that can be used in the above can be used, and preferred solvents are also the same.
  • the dehydration condensing agent is not particularly limited as long as the dehydration condensation reaction between alcohol and carboxy group proceeds, but preferably dicyclohexyl carbodiimide, diisopropyl carbodiimide, 1-dimethylaminopropyl 3 ethyl carbodiimide, carbonyl dioxygen. Imidazole, isobutyl chloroformate or pivalic acid chloride.
  • reaction aid examples include N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole or 4-dimethylaminopyridine, or 2,6-di-tert-butyl-4-methyl. Examples include pyridine.
  • the reaction temperature of the dehydration condensation reaction is usually 4 to 60 ° C, preferably 15 to 50 ° C.
  • the reaction time is 2 hours to several days, preferably 4 to 48 hours.
  • the solvent in the nucleophilic substitution reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • the methoxypolyethylene glycol polyglutamic acid block copolymer and the nucleic acid system are not limited. Solvents similar to those that can be used for dehydration condensation with an antimetabolite can be used, and preferred solvents are also the same.
  • the base include alkali metal carbonates such as lithium carbonate, sodium carbonate and potassium carbonate; alkali metal hydrides such as lithium hydride, sodium hydride and potassium hydride; lithium hydroxide, sodium hydroxide and water.
  • Alkali metal hydroxides such as potassium oxide; alkali metal alkoxides such as lithium methoxide, sodium methoxide, sodium ethoxide, potassium tert butoxide; triethylamine, tributylamine, N, N diisopropylethylamine, N methylmorpholine , Pyridine, 4 — (N, N dimethylamino) pyridine, N, N dimethylaniline, N, N jetylaniline, 1, 5 diazabicyclo [4. 3.
  • DBU Undecene
  • the reaction temperature of the nucleophilic substitution reaction is usually 4 to 60 ° C, preferably room temperature to 50 ° C.
  • the reaction time is 1 hour to several days, preferably 4 to 48 hours.
  • the solvent in the dehydration condensation reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but it can be used for dehydration condensation between the methoxypolyethylene glycol polyglutamic acid block copolymer and the nucleic acid antimetabolite.
  • a solvent similar to the solvent can be used, and preferred solvents are also the same.
  • the dehydrating condensing agent is not particularly limited as long as the condensation reaction between the amine and the carboxyl group proceeds, but preferably dicyclohexyl carpositimide, diisopropyl carpositimide, 1-dimethylaminopropyl 3-ethyl carpositimide, carbonyl.
  • Diimidazole Isobutyl chloroformate, Bivalic acid chloride, DMT-MM (4— (4, 6 Dimethoxy—1, 3, 5 Triazine—2 yl) —4 Methylmorpholinium chloride), TFFH (Tetramethylfluoroformamidinu) Hexafluorophosphate), 1-ethoxycarbonyl-1, 2-ethoxy-1,2,2-dihydroxyquinolinone (EE DQ) or BOP (benzotriazole-1-yloxytris (dimethinoreamino) phosphonium hexafluorophosphate) .
  • reaction aid examples include N-hydroxysuccinimide, 1-hydroxybenzotriazole or 4-dimethyla. Examples include minopyridine or 2, 6-dibutyl-4-methylpyridine.
  • the reaction temperature of the dehydration condensation reaction is usually 4 to 60 ° C, preferably room temperature to 50 ° C.
  • the reaction time is 1 hour to several days, preferably 4 to 48 hours.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention may form micelles having a polyethylene glycol moiety as an outer shell in an aqueous solution.
  • the formation of micelles can be confirmed by gel filtration chromatography (GPC) method or dynamic light scattering method.
  • a nucleic acid antimetabolite is bonded to! /, NA! /, And a carboxylate group is bonded to a hydrophobic substituent, so that micelles are easily formed.
  • the present invention also includes an antitumor agent or an antiviral agent comprising a polymer derivative of the above-described nucleic acid antimetabolite as a medicinal ingredient.
  • the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite can be administered as it is, or can be administered as a pharmaceutical composition mixed with a pharmaceutically acceptable substance.
  • the dosage form of the pharmaceutical composition may be any of injections, powders, granules, tablets, suppositories and the like. These preparations may contain various adjuvants used for pharmaceuticals, that is, carriers and other auxiliary agents, for example, additives such as stabilizers, preservatives, soothing agents, emulsifiers and the like. .
  • the content of the high molecular weight derivative of the nucleic acid antimetabolite in the preparation varies depending on the preparation. Usually, it is 0.;! To 100% by weight, preferably 1 to 98% by weight.
  • the application of the antitumor agent of the present invention comprising a polymer derivative of a nucleic acid antimetabolite as an active ingredient is not particularly limited, and examples thereof include non-small cell lung cancer, spleen cancer, gastric cancer, colon cancer, rectal cancer, It can be used for breast cancer, ovarian cancer, bladder cancer, AIDS-related positive sarcoma, etc.
  • the application of the antiviral agent of the present invention comprising a high molecular weight derivative of a nucleic acid antimetabolite as a medicinal ingredient is not particularly limited.
  • AIDS acquired immunodeficiency syndrome
  • herpes zoster simple herpes It is used for pes virus infection and the like, and can also be used for infection prevention purposes.
  • the administration method of the polymer derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention includes any of oral, injection, intrarectal administration, intraportal administration, mixing with organ perfusate, local administration to the affected organ, etc.
  • the dosage of the polymeric derivative of the nucleic acid antimetabolite of the present invention varies depending on the disease state, administration method, patient's condition, age, weight, etc. Usually, lmg to 5000 per lm 2 body surface area in terms of nucleic acid antimetabolite mg, preferably 10 mg to 2000 mg, which may be administered once or divided into several times a day. In addition, this administration can be performed every day. Repeated administration may be performed after several days to several months. Administration methods, dosages, and administration schedules other than those described above can be used as necessary.
  • a prodrug is a chemical derivative of a biologically active parent compound that releases the parent compound in vivo upon administration.
  • One end methoxy group One end 3-aminopropyl group polyethylene glycol (SUNBRIG HT MEPA-12T, manufactured by NOF Corporation, average molecular weight 12000, 7.74 g) dissolved in dimethylol sulfoxide (160 mU, ⁇ benzyl 1 L glutamate ⁇ Carboxylic anhydride (BLG— NCA, 5. lg; 30 equivalents to polyethylene glycol) was added and stirred at 30 ° C.
  • SUNBRIG HT MEPA-12T 3-aminopropyl group polyethylene glycol
  • the average polymerization number (carboxyl group number) of glutamic acid in one molecule of this compound based on the titration value using an aqueous sodium hydroxide solution was 25.81.
  • the title compound was obtained by using 29.1 equivalents of BLG-NCA to polyethylene glycol according to the method described in Reference Example 1.
  • the average polymerization number (number of carboxyl groups) of glutamic acid in one molecule of this compound based on the titration value using an aqueous sodium hydroxide solution was 26.72.
  • the title compound was obtained by using 30 equivalents of BLG-NCA with respect to polyethylene glycol according to the method described in Reference Example 1.
  • the average polymerization number (number of carboxyl groups) of glutamic acid in one molecule of this compound based on the titration value using an aqueous sodium hydroxide solution was 26.70.
  • Reference Example 4 Block copolymer of N-acetylated monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 N-acetylated amide conjugate of L-phenylalanine benzyl ester (on the carboxyl group of polyglutamic acid) (About 45%)
  • Reference Example 5 Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 N-acetylated amide conjugate of L-phenylalanine benzyl ester (polyglutamic acid About 70% of the carboxyl group)
  • Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 described in Reference Example 1 N-acetylated compound (596 mg), L-phenylalanine benzyl ester hydrochloride (193 mg) and N , N Diisopropylethanolamine (115 L) was dissolved in N, N dimethylformamide (10 mU, DMT-MM (219 mg) was added and stirred overnight at 40 ° C.
  • the compound was hydrolyzed in the same manner as in Reference Example 4, and then the benzyl alcohol released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Reference Example 4 to form an amide bond of this compound.
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the binding ratio of the Phe-OBzl group was 69.9% with respect to the carboxyl group of polyglutamic acid.
  • Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 described in Reference Example 1 N-acetylated compound (1.00 g) and 4-phenylbutyl bromide (161 mg) Dimethylformamide (dissolved in 20 mU, 1, 8 diazabicyclo [5 ⁇ 4.0] —7 undecene (DBU, 251 L) was prepared and heated at 40 ° C. Stir overnight. The reaction solution was cooled to room temperature and then added dropwise to a diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1, 250 mL).
  • DBU diazabicyclo [5 ⁇ 4.0] —7 undecene
  • Reference Example 7 Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 N-acetylated ester conjugate of 4-phenylbutylbromide (on the carboxyl group of polyglutamic acid) Synthesis of about 60%) Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 as described in Reference Example 2 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 N-acetylated product (3.73 g) and 4-phenylbutyl Dissolve bromide (1.05 g) in N, N dimethylformamide (91 mU, 1, 8-diazabicyclo [5.
  • Reference Example 8 Monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and a polymer having a polymerization number of about 26 Synthesis of block copolymer with glutamic acid N-acetylated amide conjugate of L-phenylalanine benzyl ester (about 30% with respect to the carboxyl group of polyglutamic acid)
  • Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 described in Reference Example 1 N-acetylated compound (1 OOOmg), L-phenylalanine benzyl ester hydrochloride (147mg) and N, N diisopropylethylamine (88 L) was dissolved in N, N dimethylformamide (25 mU, DMT-MM (167 mg) was added, and the mixture was stirred overnight at 40 ° C. The reaction solution was cooled to room temperature.
  • the compound was hydrolyzed in the same manner as in Reference Example 4, and then the benzyl alcohol released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Reference Example 4 to form an amide bond of this compound.
  • the bonding rate of the Phe-OBzl group was 30.8% with respect to the carboxyl group of polyglutamic acid.
  • Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 described in Reference Example 1 N-acetylated compound (596 mg), L-phenylalanine benzyl ester hydrochloride (16 lmg) and N, N diisopropylethylamine (96 U dissolved in N, N dimethylformamide (10 mU, DMT-MM (183 mg) was added and stirred overnight at 40 ° C.
  • the compound was hydrolyzed in the same manner as in Reference Example 4, and then the benzyl alcohol released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Reference Example 4 to form an amide bond of this compound.
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the binding rate of the Phe-OBzl group was 56.8% with respect to the carboxyl group of polyglutamic acid.
  • Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 described in Reference Example 3 N-acetylated compound (2 ⁇ 32 g), L-phenylalanine benzyl ester hydrochloride (770 mg) and N, N diisopropylethylamine (460 L) was dissolved in N, N dimethylformamide (40 mU, DMT-MM (877 mg) was added, and the mixture was stirred overnight at 40 ° C. The reaction solution was cooled to room temperature.
  • the compound was hydrolyzed in the same manner as in Reference Example 4, and then the benzyl alcohol released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Reference Example 4 to form an amide bond of this compound.
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the binding rate of the Phe-OBzl group was 60.4% with respect to the carboxyl group of polyglutamic acid.
  • Reference Example 11 Block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26 N-acetylated ester bond of 4-phenylbutyl bromide (carboxy group of polyglutamic acid) A block copolymer of monomethoxypolyethylene glycol having a molecular weight of about 12000 as described in Reference Example 2 and polyglutamic acid having a polymerization number of about 26. N-acetylated compound (290 mg) was added to N, N dimethylolene.
  • Honolemamide (dissolved in 7.5mU, 4 phenylbutyl bromide (64mg), 1,8-diazabicyclo [5.4.0] —7undecene (DBU, 75) at 40 ° After the reaction solution was cooled to room temperature, it was added dropwise to a diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1, lOOmL) After stirring for 30 minutes, the deposited precipitate was collected by filtration and filtered with a diisopropyl ether pipe.
  • DBU 1,8-diazabicyclo [5.4.0] —7undecene
  • Washed with ether / ethanol mixed solvent (4: 1) Dissolve the obtained product in 50% acetonitrile water, add cation exchange resin Dowex 50W (proton type, 2mU, shake for 2 hours, After filtration, the filtrate was lyophilized to obtain the title compound (305 mg).
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average value of 72
  • X represents a gemcitabine residue
  • a hydroxyl group L-phenylalanine Polymeric derivatives of nucleic acid antimetabolites that are benzyl ester residue and isopropylaminocarbonylisopropylamino group (Compound 1 in Table 1)
  • N, N dimethylformamide (10 mL) and N, N diisopropylethylamine (73 L) were added to the compound synthesized in Reference Example 4 (480 mg) and gemcitabine hydrochloride (125 mg), and the mixture was stirred at 40 ° C.
  • 4 dimethylaminopyridine (10.2 mg) and diisopropylcarpoimide (131 a U were added and stirred overnight at 40 ° C.
  • diisopropyl ether ethanol mixed solvent (4: 1, lOOmL)
  • the deposited precipitate was collected by filtration and washed with diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1).
  • the gemcitabine released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) to determine the gemcitabine content of this compound. As a result, it was found to be 8.4% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. there were. Further, when the compound of the present invention was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • the title compound (11. 36 mg) was dissolved in methanol (1. OmU), 0.5 M aqueous sodium hydroxide solution (1. OmL) was added, and the mixture was stirred for 1 hour at 40 ° C. Diluted with water to make exactly 1 OmL solution.
  • the molar ratio of isopropylaminocarbonylisopropylamino group to gemcitabine in this compound was determined from 1 H-NMR (hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum) of sodium dihydroxide / heavy water / deuterated acetonitrile and found to be 0.47. It was.
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average value of 72
  • X represents a gemcitabine residue, a hydroxyl group
  • L-phenylalanine benzyl ester residue Polymeric derivative of nucleic acid antimetabolite which is isopropylaminocarbonylisopropylamino group (Compound 2 in Table 1)
  • the gemcitabine released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1 to determine the gemcitabine content of the present compound. As a result, it was 4.0% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average power of 72
  • X represents a gemcitabine residue, a hydroxyl group, a 4-phenylbutyl alcohol residue
  • Polymer derivative of nucleic acid antimetabolite which is isopropylaminocarbonylisopropylamino group (compound 3 in Table 1)
  • N, N-dimethylformamide (20 mL) and N, N diisopropylethylamine (165 L) were added to the compound synthesized in Reference Example 6 (1027 mg) and gemcitabine hydrochloride (285 mg), and the mixture was stirred at 40 ° C.
  • 4 dimethylaminopyridine (23.2 mg) and diisopropylpropylamide (297,1 L) were added and stirred at 40 ° C.
  • the reaction solution was cooled to room temperature and then dropped into a diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1, 200 mL). After stirring for 30 minutes, the deposited precipitate was collected by filtration and washed with a diisopropyl ether-ethanol mixed solvent (4: 1).
  • the obtained product was dissolved in 50% acetonitrile water, cation exchange resin Dowex 50W (proton type, 4 mU was added, shaken for 2 hours at room temperature, the resin was filtered off, and the resin was filtered with 50% acetonitrile. The filtrate obtained was washed with water, concentrated to 1/2 volume under reduced pressure, and then lyophilized to obtain the title compound (1070 mg) This compound was hydrolyzed in the same manner as in Example 1. Thereafter, the released gemcitabine was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1. The gemcitabine content of the inventive compound was determined and found to be 9. l% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • the molar ratio of isopropylaminocarbonylisopropylamino group to gemcitabine in this compound was determined by 1 H-NMR (hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum) of sodium dihydroxide / heavy water / deuterated acetonitrile and found to be 0.55. It was.
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average power of 72
  • X represents a gemcitabine residue, a hydroxyl group, a 4-phenylbutyl alcohol residue, and isopropyl
  • Polymer derivative of nucleic acid antimetabolite that is aminocarbonylisopropylamino group (compound 4 in Table 1)
  • N, N-dimethylformamide (30 mL) and N, N diisopropylethylamine (174 L) were added to the compound synthesized in Reference Example 7 (1650 mg) and gemcitabine hydrochloride (300 mg), and the mixture was stirred at 40 ° C.
  • 4 dimethylaminopyridine (24.4 mg) and diisopropylpropylamide (313 L) were added and stirred at 40 ° C.
  • the reaction mixture was cooled to room temperature and then dropped into a diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1, 300 mL). After stirring for 30 minutes, the deposited precipitate was collected by filtration and washed with a diisopropyl ether-ethanol mixed solvent (4: 1).
  • the obtained product was dissolved in 50% acetonitrile water, added with cation exchange resin Dowex 50W (proton type, 6 mU, shaken at room temperature for 2 hours, filtered off resin, and resin was washed with 50% acetonitrile water. The filtrate obtained was concentrated to 1/2 volume under reduced pressure and then lyophilized to obtain the title compound (1678 mg).
  • the gemcitabine released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1 to determine the gemcitabine content of the present compound. As a result, it was 4.9% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • the molar ratio of isopropylaminocarbonylisopropylamino group to gemcitabine in this compound was 0.72 as determined from 1 H-NMR (hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum) of sodium hydride / heavy water / deuterated acetonitrile dissolved in sodium hydroxide. It was.
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m is 26
  • n is 272
  • X is a doxyfluridine residue
  • a hydroxyl group L-phenylalanine Polymer derivative of nucleic acid antimetabolite that is benzyl ester nore residue and isopropylaminocarbonylisopropylamino group (compound 5 in Table 1)
  • N, N dimethylformamide (10mU was added to the compound synthesized in Reference Example 8 (476mg) and doxyfluridine (123mg) and stirred at 40 ° C. (157 L) was added, and the mixture was stirred overnight at 40 ° C. The reaction mixture was cooled to room temperature and then added dropwise to a diisopropyl ether / ethanol mixed solvent (4: 1, 150 mL).
  • the free doxyfluridine was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1 to determine the doxyfluridine content of the compound of the present invention. As a result, it was 9.0% (w / w) in terms of doxyfluridine. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the content of free doxyfluridine was 0.2% or less.
  • the molar ratio of isopropylaminocarbonylisopropylamino group to doxyfluridine in this compound was determined from 1 H-NMR (hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum) of a solution dissolved in sodium dehydride / heavy water / deuterated acetonitrile, and was 0.76. It was.
  • R in the general formula (1) R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average power of 72
  • X is a gemcitabine residue
  • a hydroxyl group L-phenylalanine Polymer derivative of nucleic acid antimetabolite which is benzyl ester residue and isopropylaminocarbonylisopropylamino group (Compound 6 in Table 1)
  • the gemcitabine released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1 to determine the gemcitabine content of the present compound. As a result, it was 6.6% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • R is a methyl group
  • A is a acetyl group
  • m has an average value of 26
  • n has an average power of 72
  • X is a gemcitabine residue
  • hydroxyl group L-phenylalanine benzyl ester residue
  • Polymeric derivative of nucleic acid antimetabolite which is isopropylaminocarbonylisopropylamino group (compound 7 in Table 1)
  • This compound was hydrolyzed in the same manner as in Example 1, and then released gemcitabine was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1.
  • the gemcitabine content of the inventive compound was determined and found to be 6.12% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • the molar ratio of isopropylaminocarbonylisopropylamino group to gemcitabine in this compound was obtained from 1 H-NMR (hydrogen nuclear magnetic resonance spectrum) of a solution dissolved in sodium hydroxide / heavy water / deuterated acetonitrile, and was 0.65. It was.
  • Example 8 R is methyl group, A is acetyl group, m is 26, n has an average power of 72, X is gemcitabine residue, hydroxyl group, 4-phenylbutyl alcohol Polymer derivatives of nucleic acid antimetabolites that are residues and isopropylaminocarbonylisopropylamino groups (compound 8 in Table 1)
  • the gemcitabine released was quantified by high performance liquid chromatography (HPLC) under the same conditions as in Example 1 to determine the gemcitabine content of the present compound. As a result, it was 7.9% (w / w) in terms of gemcitabine hydrochloride. Further, when this compound was analyzed by HPLC, the free gemcitabine content was 0.2% or less.
  • Example 1 The compound of Example 1 (denoted as Compound 1 in FIG. 1), the compound of Example 2 (denoted as Compound 2 in FIG. 1), the compound of Example 4 (denoted as Compound 4 in FIG. 1) or Compound of Example 5
  • the product (denoted as compound 5 in FIG. 1) was dissolved in phosphate buffered saline ( ⁇ 7.4) to 1. Omg / mL and allowed to incubate at 37 ° C.
  • the amount of gemcitabine and doxyfluridine released was measured over time by HPLC, and the ratio of the amount of gemcitabine and doxyfluridine released to the total amount of gemcitabine and doxifluridine in the compound used was determined.
  • the results are shown in Figure 1.
  • the compounds of the present invention were shown to release the drug slowly without depending on the enzyme.
  • the compound of the present invention has a higher drug release rate in mouse plasma than in the absence of enzyme, but in mouse plasma. However, it can be seen that the polymer derivative stays for a long time and releases the drug.
  • Mouse colon cancer colon 26 tumor mass passaged subcutaneously in mice was made into a block of about 2 mm square and transplanted subcutaneously using a trocar.
  • the compound of Example 1 designated as Compound 1 in Table 2
  • the compound of Example 2 designated as Compound 2 in Table 2
  • Gemcitabine hydrochloride was dissolved in a 5% glucose injection and administered once intravenously at the doses shown in Table 2.
  • the tumor volume on the administration start date and on the 7th day after the start of administration was calculated by the following formula, and the relative tumor volume on the 7th day after the start of administration with respect to the administration start date was determined. The results are shown in Table 2.
  • the compound of the present invention has an antitumor effect equivalent to or higher than that of the control drug, gemcitabine hydrochloride, at a low dose as compared with the control drug gemcitabine hydrochloride. It is.
  • Mouse colon cancer colon 26 tumor mass passaged subcutaneously in mice was made into a block of about 2 mm square and transplanted subcutaneously using a trocar.
  • the compound of Example 3 designated as Compound 3 in Table 3
  • the compound of Example 4 designated as Compound 4 in Table 3
  • Gemcitabine hydrochloride was dissolved in a 5% glucose injection and administered once intravenously at the doses shown in Table 3.
  • the tumor volume on the administration start date and on the 8th day after the start of administration was calculated in the same manner as in Test Example 3, and the relative tumor volume on the 8th day after the start of administration relative to the administration start date was determined. The results are shown in Table 3.
  • FIG. 1 shows the time course of drug release in the absence of enzyme. ⁇ indicates Compound 1, Country indicates Compound 2, ⁇ indicates Compound 4, and X indicates Compound 5.
  • FIG. 2 shows the time course of drug release in mouse plasma.
  • ⁇ represents compound 4 and X represents compound 5.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polyamides (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)

Description

明 細 書
核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体
技術分野
[0001] 本発明は、核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体、その用途及びその製造法に関す
背景技術
[0002] 悪性腫瘍あるいはウィルス性疾患の治療を目的として種々の核酸系代謝拮抗剤の 開発が行なわれ、抗腫瘍剤（抗癌剤）としてはシタラビン (cytarabine)、ゲムシタビン gemcitabineノ、トキシフノレリンン (doxifluridine)、ァケシチジン、 azacitidine)、 デシタビン（decitabine)、ネララビン（nelarabine)等力 抗ウィルス剤としてはザル シタビン（zalcitabine)、ラミブジン（lamivudine)等が臨床で使用されている。
[0003] しかし、これら核酸系代謝拮抗剤は強い in vitro活性を示すにもかかわらず、生体 内での代謝'排泄を受けやすいために本来の薬剤が持つ薬効を十分に発揮できな かったり、あるいは高投与量を必要とするものが多い。例えば、ゲムシタビンは in vit roではパクリタキセルやドキソルビシン等の抗癌剤に匹敵する強い細胞増殖抑制活 性を有するのに対し、臨床においては体表面積あたり 1回 1000mg/m2の高投与が 必要である。これは、 2 '—デォキシシチジンの代謝酵素であるシチジン脱アミノ化酵 素によって塩基の 4位ァミノ基が代謝 '失活されることにより、 in vivo利用率が低くな るためと考えられている（非特許文献 1参照）。
[0004] ポリマーに薬剤を結合させることにより、生体内における薬物動態が改善し治療効 果の向上がみられることがある。非特許文献 2には、平均分子量約 30000のポリグノレ タミン酸類とシタラビンとを結合させた高分子誘導体が記載されている。しかしながら 、薬剤の高分子誘導体には免疫反応により過敏反応を示す場合があり、その様な場 合には薬剤として繰返し投与ができなレ、。
[0005] 特許文献 1にはポリエチレングリコール類にシチジン系誘導体を結合させた高分子 誘導体が，非特許文献 3にはポリエチレングリコール類の両末端にァスパラギン酸を 分枝状に置換させそれにシタラビンを結合させた高分子誘導体が記載されている。 さらに，特許文献 5にはポリエチレンダリコール鎖の末端にアミノ酸を用レ、分岐させ， その各分岐がベンジル脱離反応を受けた後に薬剤を放出する構造を持つ高分子誘 導体が記載されている。しかし，これらすベての高分子誘導体は，血漿中での加水 分解速度が、長くても数 10時間でそれほど遅くなつておらず，高分子誘導体そのも のが，生体内に長時間滞留し，長時間にわたって内包化合物を放出しない。さらに， これら高分子誘導体は，リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)中の加水分解速度と血漿中 の加水分解速度の差が大きく，加水分解反応が生体内の酵素に大きく依存するため ,臨床上における治療効果が患者の個体差に大きく影響される可能性がある。
[0006] 特許文献 2にはポリエチレングリコール類とポリアスパラギン酸が縮合したブロック型 ポリマーに薬剤を結合した分子力 セルを形成し医薬となることが記載されている。又 、特許文献 3にはポリエチレングリコール類とポリグルタミン酸が縮合したブロック型ポ リマーのグルタミン酸側鎖カルボキシル基に抗癌性物質を結合させた高分子が記載 されている。し力、しながら、これらには結合する薬剤として核酸系代謝拮抗剤に関す る記載はない。
[0007] さらに、特許文献 4にはポリエチレングリコールとポリカルボン酸との重合体のカル ボキシル基と、フエノール性カンプトテシン類のフエノール性水酸基とを、エステル縮 合した水溶性高分子誘導体が癌化学療法に適していることが記載されている力 S、こ れらは薬剤の結合様式がフエノールとカルボキシル基が結合したエステルであり、 1 級アルコールや 2級アルコールとカルボキシル基が結合したエステルではな!/、。また 、これらにも結合する薬剤として核酸系代謝拮抗剤に関する記載はない。
[0008] 特許文献 1 :特表 2003— 524028号公報
特許文献 2：特許第 2694923号公報
特許文献 3 :特開平 5— 955号公報
特許文献 4：国際公開番号 WO2004/039869号パンフレット
特許文献 5：特表 2004— 532289号公幸
[0009] 非特許文献 1 :「キャンサー 'サイエンス」、 日本癌学会発行、 2004年、第 95巻、 105 — 1丄 1貞 (し ancer Science^ Japanese Cancer Association^ Vol. 95、 p. 10 5 - 1 11 (2004) ) 非特許文献 2 :「キャンサー 'リサーチ」（米国）、米国癌学会発行、 1984年、第 44巻、 25— dO (Cancer Research^ American Association for Cancer Resear ch、 Vol. 44、 p. 25 - 30 (1984) )
非特許文献 3 :「ジャーナル ォブ コントロールド リリース」（英国）、エルゼヴィァ発 行、 2002年、第 79巻、 55— 70頁 (Journal of Controlled Release, Elsevier, Vol. 79、 p. 55 - 70 (2002) )
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0010] 本発明の目的は、低投与量でより高い効果を有し新規な抗癌剤又は抗ウィルス剤 となる核酸系代謝拮抗剤を提供することにある。
課題を解決するための手段
[0011] 本発明者らは前記課題を解決するために鋭意研究を行なった結果、核酸系代謝 拮抗剤の高分子誘導体、特にポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシ ル基を有するポリマー部分からなる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸 系代謝拮抗剤の水酸基とがエステル結合していることを特徴とする核酸系代謝拮抗 剤の高分子誘導体を見出した。
[0012] 即ち、本発明は次の（1)〜（； 16)に関する。
(1)ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分 力、らなる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸系代謝拮抗剤の水酸基とが エステル結合していることを特徴とする核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(2)側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分がポリグルタミン酸誘導体である上 記（1)記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(3)核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体が下記一般式 (1)
[0013] [化 1]
Figure imgf000006_0001
[式中、 Rは水素原子又は C1〜C6アルキル基を示し、 Aは水素原子、 C1〜C6ァシ ル基又は C1〜C6アルコキシカルボ二ル基を示し、 mは平均値で 3〜200、 nは平均 値で 5〜2000を示し、 Xは核酸系代謝拮抗剤残基、水酸基、疎水性置換基、及び -N (Rl) CONH (R2) (Rl、 R2は同一でも異なっていてもよく 3級ァミノ基で置換さ れて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基)からなる群から選ばれ、核酸系代謝拮抗剤残 基及び N (Rl ) CONH (R2)を含む基である上記（1)又は（2)に記載の核酸系代 謝拮抗剤の高分子誘導体。
(4) mのうち 5〜95%は Xが核酸系代謝拮抗剤残基、 0〜95%は Xが水酸基、 0〜8 0%は Xが疎水性置換基、 5〜80%は Xがー N (Rl) CONH (R2)である上記（3)に 記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(5) mのうち 5〜70%は Xが核酸系代謝拮抗剤残基、 5〜70%は Xが水酸基、 20〜 70%は Xが疎水性置換基、 5〜70%は Xがー N (Rl) CONH (R2)である上記（3) に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(6) Rが C1〜C4アルキル基であり、 Aが C2〜C4ァシル基であり、 mが平均ィ直で 5〜 100、 nが平均値で 50〜1000であり、核酸系代謝拮抗剤残基が式（2)：
[化 2]
Figure imgf000007_0001
Figure imgf000007_0002
[式中、 Rfは、式（3)：
[化 3]
Figure imgf000007_0003
の置換基群より選ばれる基を示す]
で表されるレ、ずれかの核酸系代謝拮抗剤の残基である上記（3)〜（5)の!/、ずれか一 項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(7) R力 Sメチル基、 Aがァセチル基であり、 mが平均値で 10〜60、 nが平均値で 100 〜300であり、核酸系代謝拮抗剤残基がゲムシタビン又はドキシフルリジン残基であ る上記 (6)に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(8)疎水性置換基が一般式 (4) [0016] [ィ匕 4]
Figure imgf000008_0001
[式中、 Qは中性アミノ酸の側鎖を表し、 Wは C1〜C6アルキル基又はベンジル基を 示す]
で表される α アミノ酸誘導体である上記（3)〜（7)の!/、ずれか一項に記載の核酸 系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(9) Qがイソプロピル基又はべンジル基であり、 Wがべンジル基である上記（8)に記 載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(10)疎水性置換基が一般式（5)：
[0017] [化 5]
0— Τ ( 5 )
[式中、 Τはフエニル基で置換されて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基を示す] で表される基である、上記（3)〜（7)のいずれか一項に記載の核酸系代謝拮抗剤の 高分子誘導体。
(11) Tがべンジル基、 3—フエニルプロピル基、 4 フエニルブチル基又は 5—フエ二 ルペンチル基である、上記（10)に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(12) R力 Sメチル基、 Aがァセチル基であり、 mが平均値で 10〜60、 nが平均値で 10 0〜300であり、核酸系代謝拮抗剤残基がゲムシタビン残基であり、疎水性置換基が 4 フエニルブトキシ基又は（ 1 ベンジルォキシカルボニル 2 フエニル）ェチル アミノ基、 N (Rl) CONH (R2)がイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基 である、上記 (3)に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
(13)ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部 分からなる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸系代謝拮抗剤とを有機溶 媒中カルポジイミド系の縮合剤を用いてエステル結合させることで得られる、核酸系 代謝拮抗剤の高分子誘導体。 (14)上記（1)〜（； 13)の!/、ずれか 1項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体 を薬効成分として含む抗腫瘍剤。
(15)前記（1)〜（13)のいずれか 1項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体 を薬効成分として含む抗ウィルス剤。
(16)ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部 分からなる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸代謝拮抗剤のヌクレオシ ド誘導体とを、有機溶媒中カルポジイミド系の縮合剤を用いてエステル結合させるこ とを特徴とする前記（1)〜（； 12)のいずれか 1項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分 子誘導体の製造法。
発明の効果
[0018] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は、ポリエチレングリコール類部分及 び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分からなる高分子化合物のカルボキシ ル基と、核酸系代謝拮抗剤の水酸基とがエステル結合し、且つ何らかの疎水性残基 が結合した構造を有することを特徴とし、生体内において血中に長時間滞留し、核酸 系代謝拮抗剤を長時間徐放することができ、低投与量で治療効果に優れる抗癌剤 又は抗ウィルス剤として有用である。本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は 、その構造上、水中で水と親和性の高いポリエチレングリコール類部位を外殻、疎水 性残基や核酸系代謝拮抗剤を有する側鎖を内殻とした凝集体を形成すると考えられ る。したがって、酵素非依存的に薬剤を徐放する性質を有し、このため治療効果に対 する患者の個体差の影響が少ない誘導体となり得る。又、本発明の高分子誘導体は 選択的に患部に集積し、より高い効果で副作用が少ない薬剤となる。
発明を実施するための最良の形態
[0019] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は、ポリエチレングリコール類部分及 び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分からなる高分子化合物の側鎖のカル ボキシル基と、核酸系代謝拮抗剤の水酸基とを有機溶媒中カルポジイミド系の縮合 剤を用いて脱水縮合して得られることを特徴とする。
[0020] 本発明における「核酸系代謝拮抗剤」とは、抗腫瘍活性又は抗ウィルス活性を有し
、ヌクレオシド誘導体の構造を有する化合物である。より具体的には、「核酸系代謝 拮抗剤」とは、核酸塩基部分が上記式（2)から選択されるいずれかであり、それに結 合して!/、る基 (Rf )が上記式（3)から選択される!/、ずれかである化合物である。
[0021] 更に具体的には、例えば、本発明の核酸系代謝拮抗剤として、下記式 (6)に構造 を示すシタラビン（cytarabine)、ゲムシタビン（gemcitabine)、ドキシフルリジン（do xifluridine)、ァザシチンン (azacitidineリ、テシタビン、 clecitabineリ、不ララビン (n elarabine)、 2 '—メチリデン一 2 '—デォキシシチジン（DMDC)、テザシタビン（tez acitabine)、ザノレシタビン zalcitabine)、ラミフ、、シン (lamivudine)、 5 —デォキシ —5—フルォロシチジン（5，一 DFCR)、トロキサシタビン（troxacitabine)、 3，一ェ チュルシチジン（Ethynylcytidine)又は 2 '—シァノー 2 '—デォキシ 1 /3— D— ァラビノフラノシルシトシン (CNDAC)等が挙げられるが、これらに限定されない。
[0022] [化 6]
Figure imgf000010_0001
シタラビン
(cytarabine) (gemcitabine) (doxifluridine) (azacitidine) (decitabine) (nelarabine)
Figure imgf000010_0002
2'—メチリデン一 2'—デォキシシチジン テザシタビン ザレシクビン ラミブジン 5, デ キシ 5—フ 才 uシチジン
(DMDC) (tczacitabino) Czalcitabine) (lamivudine) (5 — UFCK)
Figure imgf000010_0003
トロキサシタビン 3'—ェチュルシチジン 2'—シァノー 2'—デォキシー1 β -D- (troxacitabmej ( E t hvny lcyt 1 dm e ) (CNDAC) 本発明において「ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有す るポリマー部分からなる高分子化合物」における側鎖にカルボキシル基を有するポリ マー部分としては、カルボキシル基を有する側鎖がポリマー主鎖から枝分かれしたグ ラフト型ポリマーやポリカルボン酸ポリマーが縮合したブロック型ポリマー等が挙げら れる。
[0024] 側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分がグラフト型ポリマーである前記の高 分子化合物としては、例えば、特開平 11— 279083号公報に記載のポリエチレング リコールとアクリル酸類の縮合物とアクリル酸類あるいは無水マレイン酸等とを共重合 反応に供し、必要に応じて加水分解反応に付すこと等によって得られるポリマー等が 挙げられる。
[0025] 側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分がブロック型ポリマーである前記の高 分子化合物としては、末端官能基を有するポリエチレングリコール類と末端に官能基 を有するポリカルボン酸を結合した化合物や、特許文献 3に記載されている、末端に アミノ基を有するポリエチレングリコール類で重合を開始するアミノ酸活性化物の重 合反応によって得られる化合物等が挙げられる。
[0026] 側鎖にカルボキシル基を有するポリマーとしては、例えば、ポリアクリル酸、ポリメタ クリル酸、ポリリンゴ酸又はポリグルタミン酸等が挙げられ、好ましくはポリグルタミン酸 である。
[0027] 本発明における「ポリエチレングリコール類」としては、両末端又は片末端が修飾さ れたポリエチレングリコール誘導体でもよぐその場合、両末端の修飾基は同一でも 異なっていてもよい。末端の修飾基としては、置換基を有していてもよい C1〜C6ァ ルキル基が挙げられ、好ましくは置換基を有して!/、てもよ!/、C；!〜 C4アルキル基であ
[0028] 置換基を有していてもよい C1〜C6アルキル基における C1〜C6アルキル基として は直鎖、分岐鎖又は環状の C1〜C6アルキル基が挙げられ、例えば、メチル基、ェ チル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、 tert ブチル基、ぺ ンチル基、イソペンチル基、 2—メチルブチル基、ネオペンチル基、 1 ェチルプロピ ノレ基、へキシル基、 4ーメチルペンチル基、 3 メチルペンチル基、 2 メチルペンチ ル基、 1ーメチルペンチル基、 3, 3 ジメチルブチル基、 2, 2 ジメチルブチル基、 1 , 1ージメチノレフ、、チノレ基、 1 , 2 ジメチノレフ、、チノレ基、 1 , 3 ジメチノレフ、、チノレ基、 2, 3 ージメチルブチル基、 2—ェチルブチル基、シクロプロピル基、シクロペンチル基又 はシクロへキシル基等が挙げられ、好ましくは C1〜C4アルキル基であり、例えば、メ チノレ基、ェチル基、 n プロピル基、イソプロピル基、 n ブチル基、 s ブチル基又 は t ブチル基等であり、特に好ましくはメチル基、ェチル基、 n プロピル基又はィ ソプロピル基である。
[0029] 置換基を有してもよい C1〜C6アルキル基の置換基としては特に限定されない。例 免 ( 、 ミノ基、メチノレ ミノ基、ジメチノレ ミノ基、ュチノレ ミノ基、ジュチノレ ミノ基 等が挙げられ、好ましくはァミノ基である。
[0030] 本発明においては両末端が修飾されたポリエチレングリコール誘導体が好ましぐ 具体的には、一方の末端が C1〜C6アルキル基で他方の末端がァミノ C1〜C6アル キル基であるポリエチレングリコール誘導体が挙げられ、一方の末端が C1〜C4アル キル基で他方の末端がァミノ C1〜C4アルキル基であるポリエチレングリコール誘導 体が好ましぐ特に一方の末端がメチル基で他方の末端がァミノプロピル基であるポ リエチレングリコール誘導体が好ましい。
[0031] 本発明における「ポリエチレングリコール類」の重量平均分子量としては 200〜500 000程度であり、好まし <は 500〜； 100000程度、より好まし <は 2000〜50000程度 である。
[0032] 本発明における「ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有す るポリマー部分からなる高分子化合物」として好ましくはブロック型ポリマーであり、よ り好ましくはポリエチレングリコール類と側鎖にカルボキシル基を有するポリマーのブ ロック共重合体である。
[0033] ポリエチレングリコール類と側鎖にカルボキシル基を有するポリマーのブロック共重 合体としては、例えば、アルコキシポリエチレングリコール ポリアクリル酸、アルコキ シポリエチレングリコールーポリメタクリル酸又はアルコキシポリエチレングリコール ポリグルタミン酸等が挙げられ、好ましくはメトキシポリエチレングリコールーポリグルタ ミン酸である。
[0034] 本発明における「ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有す るポリマー部分からなる高分子化合物」の 1分子あたりの平均カルボキシル基数とし ては、 3〜200個程度であり、好ましくは 5〜； 100個程度、より好ましくは 10〜60個程 度である。
[0035] 本発明における「ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有す るポリマー部分からなる高分子化合物」の重量平均分子量としては 500〜500000 程度であり、好まし <は 2000〜； 100000程度であり、より好まし <は 3000〜50000程 度である。
[0036] 本発明にお!/、て、ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有す るポリマー部分からなる高分子化合物にエステル結合している核酸系代謝拮抗剤の 結合量は、 1個〜カルボキシル基の総数の範囲内であれば特に限定されず、生体内 に投与した際に薬効を示す量であればよ!/、。好ましくはポリマー部分の総カルボキシ ル基数の 5〜； 100%、より好ましくは 5〜70%である。
[0037] 上記結合量は、本発明化合物の紫外線吸収スペクトルの強度から求めることができ る。又、本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体をアルカリ加水分解することに より遊離する核酸系代謝拮抗剤を、例えば、高速液体クロマトグラフィー等で定量す ることによつても求めることができる。
[0038] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体の代表的な化合物として、前記一般 式（1) [式中、 Rは水素原子又は C1〜C6アルキル基を示し、 Aは水素原子、 C1〜C 6ァシル基又は C1〜C6アルコキシカルボ二ル基を示し、 mは平均値で 3〜200、 n は平均値で 5〜2000を示し、 Xは核酸系代謝拮抗剤残基、水酸基、疎水性置換基 、及び— N (Rl) CONH (R2) (Rl、 R2は同一でも異なっていてもよく 3級ァミノ基で 置換されて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基）力、らなる群から選ばれる基であって、核 酸系代謝拮抗剤残基及び N (Rl ) CONH (R2)を含む基 (すなわち核酸系代謝拮 抗剤残基、水酸基、疎水性置換基、及び N (Rl) CONH (R2)からなる群から 2種 以上選ばれる基であって、核酸系代謝拮抗剤残基及び—N (Rl) CONH (R2)が必 須であり、その他が任意である基）を示し、好ましくは、 mのうち 5〜95%は Xが核酸 系代謝拮抗剤残基、 0〜95%は Xが水酸基、 0〜80%は Xが疎水性置換基、 5〜80 %は Xがー N (R1) CONH (R2)である]で表される化合物が挙げられる。
[0039] 一般式（1)中、 Rにおける C1〜C6アルキル基は上記のアルキル基と同じ意味であ り、好ましい基も同様である。 [0040] 一般式（1)中、 Aにおける C1〜C6ァシル基は、例えば、ホルミル基、ァセチル基、 プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ビバロイル 基又はへキサノィル基が挙げられ、好ましくは C2〜C4ァシル基、例えば、ァセチル 基又はプロピオニル基であり、より好ましくはァセチル基である。
[0041] 一般式（1)中、 Aにおける C1〜C6アルコキシカルボニル基は、例えば、メトキシカ ノレボニノレ基、エトキシカノレポ二ノレ基、プロポキシカノレポ二ノレ基、イソプロポキシカノレポ 二ノレ基、 n—ブトキシカルボニル基、 tert—ブトキシカルボニル基、ペントキシカルボ 二ノレ基、へキシノレ才キシカノレポ二ノレ基、シクロプロポキシカノレポ二ノレ基、シクロペンチ ルォキシカルボニル基又はシクロへキシルォキシカルボニル基が挙げられ、好ましく はメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロボ キシカルボニル基、ブトキシカルボニル基又は tert—ブトキシカルボニル基であり、よ り好ましくはエトキシカルボニル基又は tert—ブトキシカルボニル基である。
[0042] 一般式（1)中、 mは平均値で 3〜200であり、好ましくは 5〜； 100程度であり、より好 ましくは 10〜60程度である。
[0043] 一般式（1)中、 nは平均値で 5〜2000であり、好ましくは 50〜； 1000程度であり、よ り好まし <は 100〜300程度である。
[0044] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体の一般式（1)において、 Xが核酸系 代謝拮抗剤残基であるグルタミン酸誘導体、 Xが水酸基であるグルタミン酸誘導体、 Xが疎水性置換基であるグルタミン酸誘導体、及び Xがー N (Rl) CONH (R2)であ るグルタミン酸誘導体がランダムに結合していても、 Xの種類ごとにブロックを形成し て結合していてもよい。一般式（1)中、 Xにおける核酸系代謝拮抗剤として特に好ま しくは、ゲムシタビンが挙げられる。
[0045] 一般式（1)の Xにおける疎水性置換基としては種々の置換基が挙げられ、核酸系 代謝拮抗剤の高分子誘導体の薬効発現に支障をきたさない限り特に限定されない。 好ましくは上記一般式 (4) [式中、 Qは中性アミノ酸の側鎖を表し、 Wは C1〜C6ァノレ キル基又はベンジル基を示す]で表される α —アミノ酸誘導体又は上記一般式（5) [ 式中、 Τはフエニル基で置換されて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基を示す]で表され る基が挙げられる。 [0046] 一般式 (4)の Qにおいて中性アミノ酸の側鎖としては、例えば、水素原子、メチル基 、イソプロピル基、イソブチル基、 s ブチル基、ベンジル基、ヒドロキシメチル基、 1 ヒドロキシェチル基、力ルバモイルメチル基、 2—力ルバモイルェチル基等の天然型 アミノ酸残基又は tert ブトキシメチル基、ベンジルォキシメチル基、ベンジルォキシ カルボニルメチル基、 2—べンジルォキシカルボニルェチル基等のアミノ酸残基誘導 体等が挙げられ、好ましくはイソプロピル基、イソブチル基、 s ブチル基、ベンジノレ 基、ベンジルォキシメチル基、ベンジルォキシカルボニルメチル基、 2—ベンジルォ キシカルボニルェチル基等であり、より好ましくはイソプロピル基、ベンジル基、ベン ジルォキシメチル基又は 2—べンジルォキシカルボニルェチル基であり、特に好まし くはイソプロピル基又はべンジル基である。
[0047] 一般式（4)の Wにおける C1〜C6アルキル基としては前記のアルキル基と同じ基が 挙げられ、好ましい基も同様である。
[0048] 一般式（5)の Tにおける C1〜C6アルキル基は、前記のアルキル基と同じ意味であ り、好ましい基も同様である。一般式（5)で表される基としては、例えば、メトキシ基、 エトキシ基、 n プロポキシ基、イソプロポキシ基、 n ブトキシ基、 tert ブトキシ基、 n ペンチルォキシ基、 n へキシルォキシ基、シクロプロピルォキシ基、シクロペン チルォキシ基、シクロへキシルォキシ基、シクロへキシルメトキシ基、ベンジルォキシ 基、 2 フエネチルォキシ基、 3 フエニルプロポキシ基、 4 フエニルブトキシ基、 5 フエ二ルペンチルォキシ基又はジフエニルメトキシ基等が挙げられる。
[0049] 上記疎水性置換基としては、例えば、メチルァミノ基、ェチルァミノ基、 n プロピル アミノ基、イソプロピルアミノ基、 n ブチルァミノ基、イソブチルァミノ基、 n ペンチル アミノ基、 n へキシルァミノ基、シクロプロピルアミノ基、シクロペンチルァミノ基、シク 口へキシルァミノ基、シクロへキシルメチルァミノ基、ジシクロへキシルメチルァミノ基、 ァニリノ基、ベンジルァミノ基、 2 フエネチルァミノ基、 3 フエニルプロピルアミノ基、 4 フエニルブチルァミノ基又はジフエニルメチルァミノ基等のアミノ基も挙げられる。
[0050] 一般式（1)の Xにおける疎水性置換基として特に好ましいのは、ベンジルォキシ基 、 3—フエニルプロポキシ基、 4 フエニルブトキシ基、（1一べンジルォキシカルボ二 ノレー2—メチル）プロピルアミノ基又は（1一べンジルォキシカルボ二ルー 2—フエニル )ェチルァミノ基であり、殊更好ましいのは、 4 フエニルブトキシ基又は（1一べンジ ノレォキシカルボ二ルー 2—フエニル）ェチルァミノ基である。
[0051] 一般式（1)の Xにおける N (Rl) CONH (R2)は、核酸系代謝拮抗剤の高分子 誘導体の薬効発現に支障をきたさない限り特に限定されない。好ましくは、 -N (R1 ) CONH (R2)の Rl、 R2は同一でも異なって!/、てもよく 3級ァミノ基で置換されて!/ヽ てもよい C1〜C6アルキル基で表される基である。より好ましくは、シクロへキシルアミ ノカルボニルシクロへキシルァミノ基、イソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ 基 ある。
[0052] なお、ーN (Rl) CONH (R2)のRl、 R2において、 3級ァミノ基で置換されていても よい C 1〜 C 6アルキル基の C 1〜 C 6アルキル基は、前記のアルキル基と同じ意味で あり、好ましい基も同様である。
[0053] 一般式（1)中、ポリマー部分の総カルボキシル基数 (mに等しい数）に対して、 Xが 核酸系代謝拮抗剤残基である割合は 5〜95%、好ましくは 5〜70%であり、 Xが水 酸基である割合は 0〜95%、好ましくは 5〜70%であり、 Xが疎水性置換基である割 合は 0〜80%、好ましくは 20〜70%、 Xが— N (Rl) CONH (R2)である割合は 5〜 80%、好ましくは 5〜70%である。
[0054] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体において、核酸系代謝拮抗剤等が 結合してレ、な!/、側鎖カルボキシル基が存在する場合、当該カルボキシル基は遊離型 又はアルカリ類の塩型でもよ!/、。遊離型で得られた場合には公知の方法あるいはそ れに準じる方法によって目的とする塩に変換することができ、逆に塩で得られた場合 には公知の方法あるいはそれに準ずる方法により遊離型又は目的とする他の塩に変 換すること力 Sでさる。
[0055] アルカリ類の塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシゥ ム塩、アンモニゥム塩又はトリェチルアンモニゥム塩等が挙げられる。
[0056] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体における側鎖にカルボキシル基を有 するポリマー部分を構成する構造単位は、光学異性体が存在する場合は光学活性 体でもラセミ体でも任意の割合の混合体でもよ!/、。例えば、側鎖にカルボキシル基を 有するポリマー部分がポリグノレタミン酸誘導体の場合、ポリ Lーグノレタミン酸、ポリ DD ググルルタタミミンン酸酸、、側側鎖鎖がが置置換換さされれたた LL ググルルタタミミンン酸酸及及びび側側鎖鎖がが置置換換さされれたた DD—— ググルルタタミミンン酸酸がが任任意意のの割割合合でで任任意意のの結結合合順順でで結結合合ししたたポポリリママーーででよよいい。。
[0057] 本本発発明明のの核核酸酸系系代代謝謝拮拮抗抗剤剤のの高高分分子子誘誘導導体体ととししてて特特にに好好ままししいい化化合合物物ととししててはは、、 例例ええばば、、以以下下のの表表 11にに示示すす化化合合物物がが挙挙げげらられれるる。。
[0058] 表表 11ににおおいいてて、、各各 XXのの下下にに示示すす「「割割合合」」ととはは、、ポポリリママーー部部分分のの総総カカルルボボキキシシルル基基数数（（ mmにに等等ししいい））にに対対ししてて XXのの各各置置換換基基がが結結合合ししてていいるる割割合合（（％％))でであありり、、おおおおよよそそのの値値をを 示示すす。。表表にに示示ししたた以以外外のの残残余余はは水水酸酸基基ででああるる。。 BBzzllははべべンンジジルル基基、、 PPhheeははフフエエニニルルァァ ララニニンン、、 CC HH PPhhはは 44--フフエエ二二ルルブブチチルル基基をを表表すす。。 XXのの核核酸酸系系代代謝謝拮拮抗抗剤剤残残基基ととししててはは
44 88
、、シシタタララビビンン、、ゲゲムムシシタタビビンン、、ドドキキシシフフルルリリジジンン、、ァァザザシシチチジジンン、、デデシシタタビビンン、、ネネララララビビンン、、 テテザザシシタタビビンン、、 55''——デデォォキキシシーー 55 フフルルォォロロシシチチジジンン、、 22 ''——デデォォキキシシーー 22''——メメチチリリデデ ンンシシチチジジンン（（DDMMDDCC))、、 33''ーーェェチチニニノノレレシシチチジジンン、、 22'' CCーーシシァァノノーー 22''——デデォォキキシシ 11 ——ベベーータタ一一 DD ァァララビビノノフフララノノシシルルシシトトシシンン（（CCNNDDAACC))、、トトロロキキササシシタタビビンン及及びび（（一一））
Figure imgf000017_0001
[0059]
Figure imgf000018_0001
鎏替え用鉱（顧 6)
Figure imgf000019_0001
[0060] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は、 例えば、 特許文献 3記載の方法 に準じて $¾ されたメトキシポリエチレンダリコーノレ一ポリグルタミン酸ブ口ック共重合 体と、 核酸系代 剤とを、 溶媒中で τΚ縮合剤により縮合することにより製造す ることができるが、特ここ (^^ さ よい。
[0061] 上記反応における溶媒としては反応が進行する限り特に限定されなレ、。 例えば、 ト ノレェン、 キシレン等の芳！ 素類、 塩化メチレン、 クロ口ホルム、 1 , 2—ジクロ 口エタ ^のハロゲンィ ィ bi ¾^、 テトラヒドロフラン、 ジォキサン、 ジメトキシエタン 、 ジエチレングリコーノレジメチルエーテノ^のエーテル類、 ァセトニトリル、 プロピオ二
羞替え用紙（規 112¾ トリル等の二トリル類、ジメチルホルムアミド、ジメチルァセトアミド、 N メチルピロリド ン等のアミド類、 1 , 3—ジメチルイミダゾリジノン等のウレァ類又は前記溶媒の混合溶 媒等が挙げられ、好ましくはアミド類又はウレァ類であり、より好ましくはジメチルホル ムアミド又は 1 , 3—ジメチノレイミダゾリジノンである。
[0062] 上記反応における脱水縮合剤としては、核酸系代謝拮抗剤であるヌクレオシド誘導 体の水酸基とカルボキシル基との縮合反応が進行する限り特に限定されない。好ま しくはジシクロへキシルカルポジイミド、ジイソプロピルカルポジイミド、 1ージメチルァ ミノプロピル 3—ェチルカルポジイミド等のカルポジイミド系縮合剤が挙げられる。
[0063] 脱水縮合反応の際、反応補助剤を用いてもよぐ該反応補助剤としては、例えば、 N ヒドロキシスクシンイミド、 1ーヒドロキシベンゾトリアゾール又は 4ージメチルァミノ ピリジン、又は 2, 6 ジー tーブチルー 4 メチルピリジン等が挙げられる。
[0064] 脱水縮合反応の反応温度は通常 4〜60°Cであり、好ましくは 15〜50°Cである。反 応時間は 2時間〜数日であり、好ましくは 4〜48時間である。
[0065] 上記反応後、必要に応じて自体公知の分離手段、例えば、減圧濃縮、溶媒抽出、 結晶化、透析、クロマトグラフィー等を適宜適用して目的化合物を単離、精製すること ができる。
[0066] 上記の脱水縮合反応により、 Xが、核酸系代謝拮抗剤残基、水酸基、 N (R1) C ONH (R2) (Rl、 R2は同一でも異なっていてもよく 3級ァミノ基で置換されていてもよ い C1〜C6アルキル基)からなる群から選ばれる基からなる高分子誘導体が得られる 。また、この脱水縮合反応で得られる高分子誘導体の高分子担体と核酸系代謝拮抗 剤との結合様式は、カルポジイミド系縮合剤を使用することで、ほぼエステル結合とな る。核酸系代謝拮抗剤によりエステル結合以外の様式の結合ができる場合があるが 、核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体の薬効発現に支障をきたさない限り、結合様 式は混合でも単独でもよ!/、。
[0067] Xとして一 N (Rl) CONH (R2) (Rl、 R2は同一でも異なっていてもよく 3級ァミノ基 で置換されていてもよい C1〜C6アルキル基）のみを高分子化合物担体へ導入する 場合、上記の核酸系代謝拮抗剤と高分子化合物との脱水縮合反応を核酸系代謝拮 抗剤非存在下で行うことによりなし得る。 [0068] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体が疎水性置換基を有する場合、例え ば、特許文献 3に記載の方法に準じて製造されたメトキシポリエチレングリコールーポ リグルタミン酸ブロック共重合体のカルボキシル基の一部に疎水性置換基を導入して 得られるポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー 部分からなる高分子化合物の側鎖の未置換のカルボキシル基と、核酸系代謝拮抗 剤であるヌクレオシド誘導体とを前記のように有機溶媒中で脱水縮合剤を用いて縮 合して製造すること力 Sでさる。
[0069] 疎水性置換基の導入は、例えば、疎水性置換基がアルコキシ基の場合には対応 するアルコールと該カルボキシル基とを溶媒中脱水縮合剤により縮合 (エステル化） すること、又は対応するハロゲン化アルキル等と該カルボキシル基とを溶媒中、塩基 存在下で求核置換反応に供することによって為され、例えば、疎水性置換基が置換 ァミノ基の場合には対応するァミン類と該カルボキシル基とを溶媒中、脱水縮合剤に より縮合（アミド化）させることにより製造可能である。
[0070] 上記脱水縮合反応（エステル化反応）における溶媒としては反応が進行する限り特 に限定されないが、前記のメトキシポリエチレングリコール ポリグルタミン酸ブロック 共重合体と核酸系代謝拮抗剤とを脱水縮合させる際に使用できる溶媒と同様な溶媒 が使用でき、好ましい溶媒も同様である。脱水縮合剤としてはアルコールとカルボキ シル基との脱水縮合反応が進行する限り特に限定されないが、好ましくはジシクロへ キシルカルポジイミド、ジイソプロピルカルポジイミド、 1ージメチルァミノプロピル 3 ェチルカルポジイミド、カルボニルジイミダゾール、クロロギ酸イソブチル又はピバリ ン酸クロリドである。
[0071] 脱水縮合反応の際、反応補助剤を用いてもよぐ該反応補助剤としては、例えば、 N ヒドロキシスクシンイミド、 1ーヒドロキシベンゾトリアゾール又は 4ージメチルァミノ ピリジン、又は 2, 6 ジー tーブチルー 4 メチルピリジン等が挙げられる。
[0072] 脱水縮合反応の反応温度は通常 4〜60°Cであり、好ましくは 15〜50°Cである。反 応時間は 2時間〜数日であり、好ましくは 4〜48時間である。
[0073] 上記求核置換反応における溶媒としては反応が進行する限り特に限定されないが 、前記のメトキシポリエチレングリコール ポリグルタミン酸ブロック共重合体と核酸系 代謝拮抗剤とを脱水縮合させる際に使用できる溶媒と同様な溶媒が使用でき、好ま しい溶媒も同様である。塩基としては、例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸力 リウム等のアルカリ金属炭酸塩類;水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウム 等のアルカリ金属水素化物類;水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等 のアルカリ金属水酸化物類；リチウムメトキシド、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシ ド、カリウム tert ブトキシド等のアルカリ金属アルコキシド類；トリェチルァミン、トリブ チルァミン、 N, N ジイソプロピルェチルァミン、 N メチルモルホリン、ピリジン、 4 — (N, N ジメチルァミノ）ピリジン、 N, N ジメチルァニリン、 N, N ジェチルァニ リン、 1 , 5 ジァザビシクロ [4. 3. 0]ノナー5 ェン、 1 , 4ージァザビシクロ [2· 2. 2 ]オクタン（DABCO)、 1 , 8 ジァザビシクロ [5· 4. 0]— 7 ゥンデセン（DBU)等 の有機アミン類等が挙げられ、好ましくはアルカリ金属炭酸塩類、アルカリ金属水素 化物類又は有機アミン類である。
[0074] 上記求核置換反応の反応温度は通常 4〜60°Cであり、好ましくは室温〜 50°Cであ る。反応時間は 1時間〜数日であり、好ましくは 4〜48時間である。
[0075] 上記脱水縮合反応（アミド化反応）における溶媒としては反応が進行する限り特に 限定されないが、上記のメトキシポリエチレングリコール ポリグルタミン酸ブロック共 重合体と核酸系代謝拮抗剤との脱水縮合に使用できる溶媒と同様な溶媒が使用で き、好ましい溶媒も同様である。脱水縮合剤としてはァミン類とカルボキシル基との縮 合反応が進行する限り特に限定されないが、好ましくはジシクロへキシルカルポジイミ ド、ジイソプロピルカルポジイミド、 1ージメチルァミノプロピル 3—ェチルカルポジィ ミド、カルボニルジイミダゾール、クロロギ酸イソブチル、ビバリン酸クロリド、 DMT- MM (4— (4, 6 ジメトキシ— 1 , 3, 5 トリアジン— 2 ィル）—4 メチルモルホリ ニゥムクロリド）、 TFFH (テトラメチルフルォロホルムアミジニゥム へキサフルォロホス フェート）、 1—エトキシカルボニル一 2—エトキシ一 1 , 2—ジヒドロキシキノリノン（EE DQ)又は BOP (ベンゾトリァゾール一 1—ィルォキシトリス（ジメチノレアミノ）ホスホニゥ ムへキサフルォロホスフェート）である。
[0076] 上記脱水縮合反応の際、反応補助剤を用いてもよぐ該反応補助剤としては、例え ば、 N ヒドロキシスクシンイミド、 1—ヒドロキシベンゾトリアゾール又は 4—ジメチルァ ミノピリジン、又は 2, 6 ジ tーブチルー 4 メチルピリジン等が挙げられる。
[0077] 脱水縮合反応の反応温度は通常 4〜60°Cであり、好ましくは室温〜 50°Cである。
反応時間は 1時間〜数日であり、好ましくは 4〜48時間である。
[0078] なお、高分子化合物への疎水性置換基、核酸系代謝拮抗剤及び N (R1) CON H (R2)からなる群から選ばれる基の結合順は問わな!/、ので、混合して反応させても ょレ、が、多官能基を有する活性本体である核酸系代謝拮抗剤の反応及び分解を回 避するため、高分子化合物へ疎水性置換基を導入した後、核酸系代謝拮抗剤と N (Rl ) CONH (R2)を結合させるのが好まし!/、。
[0079] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は、水溶液中でポリエチレングリコー ル類部分を外殻とするミセルを形成していてもよい。ミセルの形成については、ゲル ろ過クロマトグラフィー（GPC)法又は動的光散乱法等により確認することができる。
[0080] 本発明にお!/、て、核酸系代謝拮抗剤が結合して!/、な!/、カルボキシノレ基を疎水性 置換基と結合させることによりミセルを形成しやすくなる。
[0081] 本発明には上記の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体を薬効成分として含む抗腫 瘍剤又は抗ウィルス剤も含まれる。該核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体は、そのま ま投与することも、又、医薬上許容できる物質と混合した薬学的組成物として投与す ることもできる。薬学的組成物の剤型は注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、坐剤等いか なるものでもよい。又、これらの製剤は医薬用に用いられる種々の補助剤、即ち、担 体やその他の助剤、例えば、安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等の添加剤を含有 していてもよい。
[0082] 製剤中における核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体の含量は製剤により種々異な る力 通常 0. ；!〜 100重量％、好ましくは 1〜98重量％である。
[0083] 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体を薬効成分とする本発明の抗腫瘍剤の適用は 特に限定されないが、例えば、非小細胞肺癌、勝臓癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、乳 癌、卵巣癌、膀胱癌、 AIDS関連力ポジ肉腫等に使用され得る。
[0084] 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体を薬効成分とする本発明の抗ウィルス剤の適 用は特に限定されないが、例えば、後天性免疫不全症候群 (AIDS)、帯状疱疹、単 純へルぺスウィルス感染症等に使用され、感染予防目的にも使用され得る。 [0085] 本発明の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体の投与方法として、経口、注射、直腸 内投与、門脈内投与、臓器の灌流液に混合、患部臓器への局所投与等いずれの投 与方法でも可能である力 S、好ましくは非経口的投与であり、より好ましくは注射による 静脈内投与、動脈内投与又は患部臓器への局所投与である。本発明の核酸系代謝 拮抗剤の高分子誘導体の投与量は、病状、投与方法、患者の状態、年齢、体重等 により異なる力 通常、核酸系代謝拮抗剤換算で体表面積 lm2あたり lmg〜5000 mg、好ましくは 10mg〜2000mgであり、これを 1日 1回又は数回に分けて投与して もよい。又、この投与は連日行なうこともできる力 数日から数ケ月の間をおいて反復 投与を行なってもよい。必要に応じて前記以外の投与方法、投与量、投与スケジュ ールを用いることができる。
[0086] 本発明の高分子誘導体がプロドラッグとして作用する場合も本発明に含まれる。こ こで、プロドラッグとは生物学的に活性な親化合物の化学的誘導体であって、投与す ると生体内で該親化合物を遊離するものである。
実施例
[0087] 以下に、実施例、参考例及び試験例を示し、本発明を更に詳細に説明するが、本 発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
[0088] 参考例 1 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物の合成
片末端メトキシ基片末端 3—ァミノプロピル基のポリエチレングリコール（SUNBRIG HT MEPA- 12T, 日本油脂株式会社製、平均分子量 12000、 7. 74g)をジメチ ノレスルホキシド（160mUに溶解し、 γ ベンジル一 L グルタメート Ν カルボン 酸無水物（BLG— NCA、 5. lg ;ポリエチレングリコールに対して 30当量）を加え、 3 0°Cにてー晚撹拌した。イソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 2. 4L) 撹拌下に反応液を滴下し、更に 1時間撹拌した。析出した沈殿物をろ取し、イソプロ ピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 400mL)にて洗浄した。得られた生成物 (11. 50g)を N, N ジメチルホルムアミド（180mUに溶解し、無水酢酸（3· 45mL )を加えて、 30°Cにてー晚撹拌した。イソプロピルエーテル 酢酸ェチル混合溶媒（ 4 : 1、 1. 6U撹拌下に滴下し、更に 1時間撹拌した。析出した沈殿物をろ取し、イソ プロピルエーテル 酢酸ェチル混合溶媒（4 : 1、 400mL)にて洗浄した。得られた生 成物（11 · 24g)を N, N ジメチルホルムアミド（150mUに溶解し、 5%パラジウム 炭素（55%含水、 1. 00g)を加えて、水素雰囲気下室温にて一晩撹拌した。ノ ラジゥ ム炭素をろ別した後、ろ液をイソプロピルエーテル 酢酸ェチル混合溶媒 (4 : 1、 2. 5L)撹拌下に滴下し、更に 1時間撹拌した。析出した沈殿物をろ取し、イソプロピノレ エーテル 酢酸ェチル混合溶媒 (4 : 1、 300mUにて洗浄した。得られた生成物を 蒸留水（500mL)に溶解し、 1M水酸化ナトリウム水溶液を加えて液性を pHl 1に調 整した。蒸留水を加えて最終液量を lOOOmLとし、塩化ナトリウム（50g)を加えた。こ の溶液を吸着樹脂 HP— 20ss (三菱化学製、 250mUのカラムに通塔し、 5%塩化 ナトリウム水溶液（lOOOmL)及び蒸留水（lOOOmL)にて洗浄後、 50%ァセトニトリ ル水溶液（1250mL)にて溶出した。 目的物を含む溶出画分を陽イオン交換樹脂 Do wex 50W (プロトン型、 lOOmUのカラムに通塔、溶出し、更に 50%ァセトニトリル 水（150mL)にて溶出した。 目的物を含む溶出画分を液量が約 150mLになるまで 減圧下濃縮した後、凍結乾燥して、標記化合物（6. 67g)を得た。
水酸化ナトリウム水溶液を用いた滴定値に基づく本化合物 1分子中のグルタミン酸 の平均重合数（カルボキシル基数）は、 25. 81であった。
[0089] 参考例 2 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物の合成
参考例 1に記載の方法に従い、ポリエチレングリコールに対して BLG— NCAを 29 . 1当量用いることにより、標記化合物を得た。
水酸化ナトリウム水溶液を用いた滴定値に基づく本化合物 1分子中のグルタミン酸 の平均重合数（カルボキシル基数）は、 26. 72であった。
[0090] 参考例 3 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物の合成
参考例 1に記載の方法に従い、ポリエチレングリコールに対して BLG— NCAを 30 当量用いることにより、標記化合物を得た。
水酸化ナトリウム水溶液を用いた滴定値に基づく本化合物 1分子中のグルタミン酸 の平均重合数（カルボキシル基数）は、 26. 70であった。 参考例 4 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 L—フエ二ルァラニンべンジ ルエステルとのアミド結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 45%)の 合成
参考例 1に記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数 約 26のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（596mg)、 L—フエ 二ルァラニンべンジルエステルの塩酸塩（ 128mg)及び N, N ジイソプロピルェチ ノレアミン（77 Uを N, N ジメチルホルムアミド（10mUに溶解し、 DMT— MM (1 46mg)を加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロ ピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 lOOmUに滴下した。 30分間撹拌後、 析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて 洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dow ex 50W (プロトン型、 2mL)を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂 を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮し た後、凍結乾燥して標記化合物（580mg)を得た。
本化合物を加水分解した後、遊離したベンジルアルコールを高速液体クロマトダラ フィー（HPLC)にて定量することにより、本化合物のアミド結合して!/、る Phe— OBzl 基の結合率を求めたところポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して 45. 94%であ つた。
加水分解の方法
標記化合物（12. 80mg)をメタノール（1. OmUに溶解し、 0. 5M水酸化ナトリウム 水溶液（1. OmL)を加えて 40度にて 1時間撹拌した。酢酸にて中和後、蒸留水にて 希釈して正確に 1 OmL溶液とした。
HPLCの分析条件（ベンジルアルコールの分析）
カラム： YMC Hydrosphere, 4. 6 φ X 250mm ;
カラム温度： 40°C ;
溶離液 A液： 1 %リン酸水溶液、 B液：ァセトニトリル；
グラジェント： B液0 /0 (時間、分） 0 (0)、 0 (5)、 80 (25)、 80 (35)、 stop (35. 01)； 流速： lmL/分；
検出器 (検出波長）： UV (210nm)
[0092] 参考例 5 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 L—フエ二ルァラニンべンジ ルエステルとのアミド結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 70%)の 合成
参考例 1に記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数 約 26のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（596mg)、 L—フエ 二ルァラニンべンジルエステルの塩酸塩（ 193mg)及び N, N ジイソプロピルェチ ノレアミン（115 L)を N, N ジメチルホルムアミド（10mUに溶解し、 DMT— MM ( 219mg)を加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプ 口ピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 lOOmL)に滴下した。 30分間撹拌後、 析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて 洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dow ex 50W (プロトン型、 2mL)を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂 を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮し た後、凍結乾燥して標記化合物 ½67mg)を得た。
本化合物を参考例 4と同様の方法で加水分解した後、遊離したベンジルアルコー ルを参考例 4と同様な条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量すること により、本化合物のアミド結合している Phe— OBzl基の結合率を求めたところポリグ ルタミン酸のカルボキシル基に対して 69. 9%であった。
[0093] 参考例 6 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 4 フエ二ルブチルブロミドと のエステル結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 40%)の合成
参考例 1に記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数 約 26のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（1. 00g)及び 4ーフ ェニルブチルブロミド（161mg)を N, N ジメチルホルムアミド（20mUに溶解し、 1 , 8 ジァザビシクロ [5· 4. 0]— 7 ゥンデセン（DBU、 251 L)をカロえて 40°Cにて 一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール 混合溶媒 (4 : 1、 250mL)に滴下した。 30分撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジィ ソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 6 0%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 4mU を加え、 2時間振とう、樹脂をろ去後、ろ液を凍結乾燥して、標記化合物（1. 027g) を得た。
本化合物を参考例 4と同様な条件で加水分解した後、遊離した 4-フエニルブタノ一 ルを高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本化合物の 4-フエ ニルブトキシ基の結合率を求めたところ、ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して 42. 1 %であった。
[0094] 参考例 7 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と 4 フエ二ルブチルブロミドと のエステル結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 60%)の合成 参考例 2記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 2 6のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（3. 73g)及び 4 フエ二 ルブチルブロミド（1. 05g)を N, N ジメチルホルムアミド（91mUに溶解し、 1 , 8— ジァザビシクロ [5. 4. 0]— 7 ゥンデセン（DBU、 897 し）をカロぇて40°じにてー晚 撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合 溶媒 (4 : 1、 1. 5Uに滴下した。 30分撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロ ピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァ セトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 15mUを加 え、 2時間振とう、樹脂をろ去した後、ろ液を凍結乾燥して、標記化合物（3. 80g)を 得た。
本化合物を参考例 4と同様な条件で加水分解した後、遊離した 4-フエニルブタノ一 ルを高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本化合物の 4-フエ ニルブトキシ基の結合率を求めたところ、ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して 62. 3%であった。
[0095] 参考例 8 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 L—フエ二ルァラニンべンジ ルエステルとのアミド結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 30%)の 合成
参考例 1記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 2 6のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（ 1 OOOmg)、 L—フエ二 ルァラニンべンジルエステルの塩酸塩（ 147mg)及び N, N ジイソプロピルェチル ァミン（88 L)を N, N ジメチルホルムアミド（25mUに溶解し、 DMT— MM (16 7mg)を加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピ ルエーテル—エタノール混合溶媒 (4 : 1、 250mL)に滴下した。 30分間撹拌後、析 出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗 浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex
50W (プロトン型、 4mL)を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮した 後、凍結乾燥して標記化合物（1070mg)を得た。
本化合物を参考例 4と同様の方法で加水分解した後、遊離したベンジルアルコー ルを参考例 4と同様な条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量すること により、本化合物のアミド結合している Phe— OBzl基の結合率を求めたところポリグ ルタミン酸のカルボキシル基に対して 30. 8%であった。
参考例 9 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポリ グルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 L—フエ二ルァラニンべンジ ルエステルとのアミド結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 55%)の 合成
参考例 1に記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数 約 26のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（596mg)、 L—フエ 二ルァラニンべンジルエステルの塩酸塩（ 16 lmg)及び N, N ジイソプロピルェチ ルァミン（96 Uを N, N ジメチルホルムアミド（10mUに溶解し、 DMT— MM (1 83mg)を加え 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピ ルエーテル—エタノール混合溶媒 (4 : 1、 lOOmL)に滴下した。 30分間撹拌した後、 析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて 洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dow ex 50W (プロトン型、 2mL)を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂 を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮し た後、凍結乾燥して標記化合物 ½30mg)を得た。
本化合物を参考例 4と同様の方法で加水分解した後、遊離したベンジルアルコー ルを参考例 4と同様な条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量すること により、本化合物のアミド結合している Phe— OBzl基の結合率を求めたところポリグ ルタミン酸のカルボキシル基に対して 56. 8%であった。
参考例 10 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポ リグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 L フエ二ルァラニンべンジ ルエステルとのアミド結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 60%)の 合成
参考例 3記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 2 6のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（2· 32g)、 L—フエニル ァラニンべンジルエステルの塩酸塩（770mg)及び N, N ジイソプロピルェチルアミ ン（460 L)を N, N ジメチルホルムアミド（40mUに溶解し、 DMT— MM (877 mg)を加え 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピノレ エーテル—エタノール混合溶媒 (4 : 1、 450mL)に滴下した。 30分間撹拌した後、析 出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗 浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex
50W (プロトン型、 lOmL)を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂 を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮し た後、凍結乾燥して標記化合物（2. 69g)を得た。
本化合物を参考例 4と同様の方法で加水分解した後、遊離したベンジルアルコー ルを参考例 4と同様な条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量すること により、本化合物のアミド結合している Phe— OBzl基の結合率を求めたところポリグ ルタミン酸のカルボキシル基に対して 60. 4%であった。 [0098] 参考例 11 分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 26のポ リグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物と、 4 フエニルブチルブロミド とのエステル結合体（ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して約 50%)の合成 参考例 2記載の分子量約 12000のモノメトキシポリエチレングリコールと重合数約 2 6のポリグルタミン酸とのブロック共重合体 N ァセチル化物（290mg)を N, N ジメ チノレホノレムアミド（7. 5mUに溶解し、 4 フエニルブチルブロミド（64mg)、 1 , 8— ジァザビシクロ [5. 4. 0]— 7 ゥンデセン（DBU、 75 し）をカロぇて40°じにてー晚 撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合 溶媒 (4 : 1、 lOOmL)に滴下した。 30分撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプ 口ピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50% ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 2mUを加 え、 2時間振とう、樹脂をろ去した後、ろ液を凍結乾燥して、標記化合物（305mg)を 得た。
本化合物を参考例 4と同様な条件で加水分解した後、遊離した 4-フエニルブタノ一 ルを高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本化合物の 4-フエ ニルブトキシ基の結合率を求めたところ、ポリグルタミン酸のカルボキシル基に対して 50. 4%であった。
[0099] 実施例 1 一般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 L—フエ二ルァラニンべンジルエステル残 基及びイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の 高分子誘導体 (表 1の化合物 1)
参考例 4で合成した化合物（480mg)及び塩酸ゲムシタビン（125mg)に N, N ジ メチルホルムアミド（lOmL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（73 L)を加え て 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（10. 2mg)及びジイソプロ ピルカルポジイミド（131 a Uを加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷 却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒（4 : 1、 lOOmL)に滴下し た。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール 混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽 イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 2mUを加え、 2時間室温で振とうした後 、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物 (453mg)を得た。
本化合物を加水分解した後、遊離したゲムシタビンを高速液体クロマトグラフィー（ HPLC)にて定量することにより、本化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸 ゲムシタビン換算で 8. 4% (w/w)であった。又、本発明化合物について HPLCで 分析したところ、遊離のゲムシタビン含量は 0. 2%以下であった。
加水分解の方法
標記化合物（11. 36mg)をメタノール（1. OmUに溶解し、 0. 5M水酸化ナトリウム 水溶液（1. OmL)を加えて 40°Cにて 1時間撹拌した。酢酸にて中和後、蒸留水にて 希釈して正確に 1 OmL溶液とした。
HPLCの分析条件 (ゲムシタビンの分析）
カラム： YMC Hydrosphere, 4. 6 φ X 250mm ;
カラム温度： 40°C ;
溶離液 A液： 1 %リン酸水溶液、 B液：ァセトニトリル；
グラジェント： B液0 /0 (時間、分） 0 (0)、 0 (5)、 80 (25)、 80 (35)、 stop (35. 01)； 流速： lmL/分；
検出器 (検出波長）： UV (210nm)
また、本化合物におけるゲムシタビンに対するイソプロピルアミノカルボニルイソプロ ピルアミノ基のモル比は重水酸化ナトリウム/重水/重ァセトニトリルに溶解したもの の1 H— NMR (水素核磁気共鳴スペクトル）から求められ、 0. 47であった。
実施例 2 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 L—フエ二ルァラニンべンジルエステル残 基及びイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の 高分子誘導体 (表 1の化合物 2)
参考例 5で合成した化合物（567mg)及び塩酸ゲムシタビン（92mg)に N, N—ジメ チルホルムアミド（15mL)及び N, N—ジイソプロピルェチルァミン（54 L)を加えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4—ジメチルァミノピリジン（7. 5mg)及びジイソプロピ ルカルポジイミド（96 L)を加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却 した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 200mL)に滴下した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノール混 合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽ィ オン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 2mUを加え、 2時間室温で振とうした後、 樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1 /2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物（539mg)を得た。
本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 4. 0% (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
実施例 3 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 4 フエニルブチルアルコール残基及び イソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の高分子 誘導体 (表 1の化合物 3)
参考例 6で合成した化合物（1027mg)及び塩酸ゲムシタビン（285mg)に N, N— ジメチルホルムアミド（20mL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（165 L)を 加えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（23. 2mg)及びジイソ プロピルカルポジイミド（297 ,1 L)を加えて 40°Cにてー晚撹拌した。反応液を室温ま で冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒（4 : 1、 200mL)に滴 下した。 30分間撹拌した後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテルーェ タノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶 解し、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 4mUを加え、 2時間室温で振と うした後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、 減圧下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物（1070mg)を得た。 本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 9. l % (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
また、本化合物におけるゲムシタビンに対するイソプロピルアミノカルボニルイソプロ ピルアミノ基のモル比は重水酸化ナトリウム/重水/重ァセトニトリルに溶解したもの の1 H— NMR (水素核磁気共鳴スペクトル）から求められ、 0. 55であった。
実施例 4 一般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 4 フエニルブチルアルコール残基及び イソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の高分子 誘導体 (表 1の化合物 4)
参考例 7で合成した化合物（1650mg)及び塩酸ゲムシタビン（300mg)に N, N— ジメチルホルムアミド（30mL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（174 L)を 加えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（24. 4mg)及びジイソ プロピルカルポジイミド（313 L)を加えて 40°Cにてー晚撹拌した。反応液を室温ま で冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒（4 : 1、 300mL)に滴 下した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテルーェタノ ール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し 、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 6mUを加え、 2時間室温で振とうし た後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減 圧下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物（1678mg)を得た。
本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 4. 9% (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
また、本化合物におけるゲムシタビンに対するイソプロピルアミノカルボニルイソプロ ピルアミノ基のモル比は重水酸化ナトリウム/重水/重ァセトニトリルに溶解したもの の1 H— NMR (水素核磁気共鳴スペクトル）から求められ、 0. 72であった。 [0103] 実施例 5 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値が 272、 Xがドキシフルリジン残基、水酸基、 L—フエ二ルァラニンべンジルエステ ノレ残基及びイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗 剤の高分子誘導体 (表 1の化合物 5)
参考例 8で合成した化合物（476mg)及びドキシフルリジン（123mg)に N, N ジ メチルホルムアミド（10mUを加えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4ージメチルァミノ ピリジン（12· 2mg)及びジイソプロピルカルポジイミド（157 L)を加えて 40°Cにて 一晩撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール 混合溶媒 (4 : 1、 150mL)に滴下した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジ イソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 3mU を加え、 2時間室温で振とうした後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて 洗浄した。得られたろ液を、減圧下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化 合物（485mg)を得た。
本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したドキシフルリジンを 実施例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより 、本発明化合物のドキシフルリジン含量を求めたところ、ドキシフルリジン換算で 9. 0 % (w/w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のドキシ フルリジン含量は 0. 2%以下であった。
また、本化合物におけるドキシフルリジンに対するイソプロピルアミノカルボニルイソ プロピルアミノ基のモル比は重水酸化ナトリウム/重水/重ァセトニトリルに溶解した ものの1 H— NMR (水素核磁気共鳴スペクトル）から求められ、 0. 76であった。
[0104] 実施例 6 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 L—フエ二ルァラニンべンジルエステル残 基及びイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の 高分子誘導体 (表 1の化合物 6)
参考例 9で合成した化合物（lOOmg)及び塩酸ゲムシタビン（21mg)に N, N ジメ チルホノレムアミド（2. 5mL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（12· 2 し）をカロ えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（1. 7mg)及びジイソプ 口ピルカルポジイミド（21. 9 し）を加ぇて40°じにてー晚撹拌した。反応液を室温ま で冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒（4 : 1、 50mL)に滴下 した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノー ル混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、 陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 lmUを加え、 2時間室温で振とうした 後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、減圧 下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物 ½3mg)を得た。
本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 6. 6% (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
実施例 7 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 L—フエ二ルァラニンべンジルエステル残 基及びイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の 高分子誘導体 (表 1の化合物 7)
参考例 10で合成した化合物（2. 50g)及び塩酸ゲムシタビン（415mg)に N, N— ジメチルホルムアミド（45mL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（241 L)を 加えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（33. 8mg)及びジイソ プロピルカルポジイミド（433 ,1 L)を加えて 40°Cにてー晚撹拌した。反応液を室温ま で冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒（4 : 1、 500mL)に滴 下した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテルーェタノ ール混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 70%ァセトニトリル水に溶解し 、透析膜 (分画分子量： 12000〜； 14000)を用いて、蒸留水（2L X 3)にて透析した. 透析した溶液を凍結乾燥して、標記化合物（2. 45g)を得た。
本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 6. 12% (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
また、本化合物におけるゲムシタビンに対するイソプロピルアミノカルボニルイソプロ ピルアミノ基のモル比は重水酸化ナトリウム/重水/重ァセトニトリルに溶解したもの の1 H— NMR (水素核磁気共鳴スペクトル）から求められ、 0. 65であった。
[0106] 実施例 8 —般式（1)で Rがメチル基、 Aがァセチル基、 mの平均値が 26、 nの平均 値力 72、 Xがゲムシタビン残基、水酸基、 4 フエニルブチルアルコール残基及び イソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ基である核酸系代謝拮抗剤の高分子 誘導体 (表 1の化合物 8)
参考例 11で合成した化合物（305mg)及び塩酸ゲムシタビン（71mg)に N, N ジ メチルホルムアミド（7· 5mL)及び N, N ジイソプロピルェチルァミン（41 ^u L)を加 えて 40°Cにて撹拌した。溶解後、 4 ジメチルァミノピリジン（5. 8mg)及びジイソプ 口ピルカルポジイミド（74 μ L)を加えて 40°Cにて一晩撹拌した。反応液を室温まで 冷却した後、ジイソプロピルエーテル エタノール混合溶媒 (4 : 1、 lOOmL)に滴下 した。 30分間撹拌後、析出した沈殿物をろ取し、ジイソプロピルエーテル エタノー ル混合溶媒 (4 : 1)にて洗浄した。得られた生成物を 50%ァセトニトリル水に溶解し、 陽イオン交換樹脂 Dowex 50W (プロトン型、 2. 5mL)を加え、 2時間室温で振とう した後、樹脂をろ去し、樹脂を 50%ァセトニトリル水にて洗浄した。得られたろ液を、 減圧下 1/2容量まで濃縮した後、凍結乾燥して標記化合物（292mg)を得た。 本化合物を実施例 1と同様の方法で加水分解した後、遊離したゲムシタビンを実施 例 1と同様の条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC)にて定量することにより、本 発明化合物のゲムシタビン含量を求めたところ、塩酸ゲムシタビン換算で 7. 9% (w /w)であった。又、本化合物について HPLCで分析したところ、遊離のゲムシタビン 含量は 0. 2%以下であった。
[0107] 試験例 1 酵素非存在下における薬剤放出性試験
実施例 1の化合物（図 1中では化合物 1と表記）、実施例 2の化合物（図 1中では化 合物 2と表記）、実施例 4の化合物（図 1中では化合物 4と表記）又は実施例 5の化合 物（図 1中では化合物 5と表記）をリン酸緩衝生理食塩水（ρΗ7· 4)に 1. Omg/mL となるように溶解し、 37°Cにて定温放置した。放出されたゲムシタビン及びドキシフル リジン量を HPLCにて経時的に測定し、使用した化合物中の全ゲムシタビン及びドキ シフルリジン量に対する放出されたゲムシタビン及びドキシフルリジン量の割合を求 めた。結果を図 1に示す。本発明の化合物は酵素に依存せずに薬剤が徐放されるこ とが示された。
[0108] 試験例 2 マウス血漿中における薬剤放出性
実施例 4の化合物（図 1中では化合物 4と表記）又は実施例 5の化合物（図 1中では 化合物 5と表記）を、リン酸緩衝生理食塩水（pH7. 4)に溶解した後、マウスより採血- 調製した血漿を 4倍量 (v/v)加えて、 37°Cにて定温放置した。 50 Lずつを経時的 に取り， 50%メタノール水（450 し）にて希釈した。メンブランフィルター（孔径 0· 45 a m)にて除タンパク処理した後、本発明化合物より放出されたゲムシタビン量を HP LCにて経時的に測定し、本発明化合物中の全ゲムシタビン量に対する、放出された ゲムシタビン量の割合を求めた。結果を図 2に示す。
[0109] 試験例 1及び試験例 2の結果を比較すると、本発明の化合物が、マウス血漿中にお いては、酵素非存在下の場合よりも、薬剤放出率が高いものの、マウス血漿中におい ても高分子誘導体として、長時間滞留し、薬剤を放出していることが伺える。
[0110] 試験例 3 担癌マウスに対する抗腫瘍効果（1)
マウス皮下で継代しているマウス大腸癌 Colon26腫瘍塊を約 2ミリメートル角のブロ ックにし、套管針を用いてマウス皮下に移植した。腫瘍移植後 7日目に実施例 1の化 合物（表 2中では化合物 1と表記）、及び実施例 2の化合物（表 2中では化合物 2と表 記）を生理食塩水で、対照薬としての塩酸ゲムシタビンを 5%ブドウ糖注射液にて溶 解し、表 2に示す投与量で静脈内に単回投与した。投与開始日及び投与開始後 7日 目の腫瘍体積を下記式により算出し、投与開始日に対する投与開始後 7日目の相対 腫瘍体積を求めた。結果を表 2に示す。
[0111] 國 腫镇体 ft ' 3) - [腫瘍の長径 (mm)〗 x [腫瘍の短径 (mm)] X [腫瘙の短径 (mm)] [0112] [表 2] 表 2 投与量
薬剤 （塩酸ゲムシタビン換算） 相対腫瘍体積 *
(mg/kg) 無処置 0 10.5 5.0
80 0.2 土 0.1
化合物 1
40 3.5 + 0.7
80 0.3 土 0.1
化合物 2
40 8.6 + 3.8
200 3.4 0.6
対照薬
100 3.9 0.5
薬剤投与開始曰の腫瘍体積を 1 .0としたときの
投与開始後 7曰目の平均相対腫瘍体積（平均 ± SD) この結果、本発明の化合物は、対照薬である塩酸ゲムシタビンと比較して低投与量 で同等以上の抗腫瘍効果を有することが明らかである。
[0113] 試験例 4 担癌マウスに対する抗腫瘍効果（2)
マウス皮下で継代しているマウス大腸癌 Colon26腫瘍塊を約2ミリメートル角のブロ ックにし、套管針を用いてマウス皮下に移植した。腫瘍移植後 7日目に実施例 3の化 合物（表 3中では化合物 3と表記）、及び実施例 4の化合物（表 3中では化合物 4と表 記）を生理食塩水で、対照薬としての塩酸ゲムシタビンを 5%ブドウ糖注射液にて溶 解し、表 3に示す投与量で静脈内に単回投与した。投与開始日及び投与開始後 8日 目の腫瘍体積を試験例 3と同様に算出し、投与開始日に対する投与開始後 8日目の 相対腫瘍体積を求めた。結果を表 3に示す。
[0114] [表 3] 表 3
薬剤 （塩酸ゲムシタビン換算） 相対腫瘍体積 *
Figure imgf000041_0001
無処置 0 1 0.3 ± 2.9
60 0.4 0.5
化合物 3
40 5.1 + 0.4
60 0.7 土 0.5
化合物 4
40 5.4 1.3
200 4.8 1.7
対照薬
40 5.3 土 1.1
'薬剤投与開始日の腫瘍体積を 1.0としたときの
投与開始後 8日目の平均相対腫瘍体積 (平均土 SD) この結果、本発明の化合物は、対照薬である塩酸ゲムシタビンと比較して低投与量 で同等以上の抗腫瘍効果を有することが明らかである。
図面の簡単な説明 [図 1]酵素非存在下における薬剤放出の経時変化を示す。 ♦は化合物 1、國は化 合物 2、△は化合物 4、 Xは化合物 5をそれぞれ表す。
[図 2]マウス血漿中における薬剤放出の経時変化を示す。 △は化合物 4、 Xは化合 物 5をそれぞれ表す。

Claims

請求の範囲
[1] ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分から なる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸系代謝拮抗剤の水酸基とがエス テル結合していることを特徴とする核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[2] 側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分がポリグルタミン酸誘導体である請求項
1に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[3] 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体が下記一般式（1)：
[化 7]
Figure imgf000042_0001
[式中、 Rは水素原子又は C1〜C6アルキル基を示し、 Aは水素原子、 C1〜C6ァシ ル基又は C1〜C6アルコキシカルボ二ル基を示し、 mは平均値で 3〜200、 nは平均 値で 5〜2000を示し、 Xは核酸系代謝拮抗剤残基、水酸基、疎水性置換基、及び -N (Rl) CONH (R2) (Rl、 R2は同一でも異なっていてもよく 3級ァミノ基で置換さ れて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基)からなる群から選ばれ、核酸系代謝拮抗剤残 基及び N (Rl) CONH (R2)を含む基である請求項 1又は 2に記載の核酸系代謝 拮抗剤の高分子誘導体。
[4] mのうち 5〜95%は Xが核酸系代謝拮抗剤残基、 0〜95%は Xが水酸基、 0〜80% は Xが疎水性置換基、 5〜80%は Xがー N (Rl) CONH (R2)である請求項 3に記載 の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[5] mのうち 5〜70%は Xが核酸系代謝拮抗剤残基、 5〜70%は Xが水酸基、 20〜70 %は Xが疎水性置換基、 5〜70%は Xがー N (Rl) CONH (R2)である請求項 3に記 載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[6] Rが C1〜C4アルキル基であり、 Aが C2〜C4ァシル基であり、 mが平均値で 5〜； 10 0、 nが平均値で 50〜； 1000であり、核酸系代謝拮抗剤残基が式（2)：
[化 8]
Figure imgf000043_0001
[式中、 Rfは、式（3)：
[化 9]
Figure imgf000043_0002
の置換基群より選ばれる基を示す]
で表されるレ、ずれかの核酸系代謝拮抗剤の残基である請求項 3〜5のレ、ずれか一項 に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
Rカ^チル基、 Aがァセチル基であり、 mが平均値で 10〜60、 nが平均値で 100〜3 00であり、核酸系代謝拮抗剤残基がゲムシタビン又はドキシフルリジン残基である請 求項 6に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[8] 疎水性置換基が一般式 (4) :
[化 10]
Figure imgf000044_0001
[式中、 Qは中性アミノ酸の側鎖を示し、 Wは C1〜C6アルキル基又はベンジル基を 示す]
で表される α アミノ酸誘導体である請求項 3〜7のいずれか一項に記載の核酸系 代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[9] Qがイソプロピル基又はべンジル基であり、 Wがべンジル基である請求項 8に記載の 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[10] 疎水性置換基が一般式（5) :
[化 11]
0 ( 5 )
[式中、 Τはフエニル基で置換されて!/、てもよ!/、C；!〜 C6アルキル基を示す] で表される基である請求項 3〜7のいずれか一項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高 分子誘導体。
[11] Tがべンジル基、 3—フエニルプロピル基、 4 フエニルブチル基又は 5—フエニルぺ ンチル基である請求項 10に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[12] R力 Sメチル基、 Aがァセチル基であり、 mが平均値で 10〜60、 nが平均値で 100〜3
00であり、核酸系代謝拮抗剤残基がゲムシタビン残基であり、疎水性置換基が 4 フエニルブトキシ基又は（ 1 ベンジルォキシカルボニル 2—フエニル）ェチルァミノ 基であり、 N (Rl) CONH (R2)がイソプロピルアミノカルボニルイソプロピルアミノ 基である請求項 3に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体。
[13] ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分から なる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸代謝拮抗剤とを有機溶媒中カル ポジイミド系の縮合剤を用いてエステル結合させることで得られる、核酸系代謝拮抗 剤の高分子誘導体。
[14] 請求項;!〜 13のいずれか一項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体を薬効 成分として含む抗腫瘍剤。
[15] 請求項;!〜 13のいずれか一項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体を薬効 成分として含む抗ウィルス剤。
[16] ポリエチレングリコール類部分及び側鎖にカルボキシル基を有するポリマー部分から なる高分子化合物の側鎖のカルボキシル基と、核酸代謝拮抗剤のヌクレオシド誘導 体とを、有機溶媒中カルポジイミド系の縮合剤を用いてエステル結合させることを特 徴とする請求項;!〜 12のいずれか一項に記載の核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導 体の製造法。
PCT/JP2007/071305 2006-11-06 2007-11-01 Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist WO2008056596A1 (en)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/312,009 US8334364B2 (en) 2006-11-06 2007-11-01 High-molecular weight derivative of nucleic acid antimetabolite
EP07831039.8A EP2080779B1 (en) 2006-11-06 2007-11-01 Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist
JP2008543048A JP5503872B2 (ja) 2006-11-06 2007-11-01 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2006300361 2006-11-06
JP2006-300361 2006-11-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2008056596A1 true WO2008056596A1 (en) 2008-05-15

Family

ID=39364414

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2007/071305 WO2008056596A1 (en) 2006-11-06 2007-11-01 Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist

Country Status (5)

Country Link
US (1) US8334364B2 (ja)
EP (1) EP2080779B1 (ja)
JP (1) JP5503872B2 (ja)
TW (1) TW200836751A (ja)
WO (1) WO2008056596A1 (ja)

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009041570A1 (ja) * 2007-09-28 2009-04-02 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha ステロイド類の高分子結合体
WO2012067138A1 (ja) 2010-11-17 2012-05-24 日本化薬株式会社 新規なシチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
US8188222B2 (en) 2006-11-08 2012-05-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High molecular weight derivative of nucleic acid antimetabolite
US8323669B2 (en) 2006-03-28 2012-12-04 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of taxane
US8334364B2 (en) 2006-11-06 2012-12-18 Nipon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight derivative of nucleic acid antimetabolite
US8808749B2 (en) 2009-05-15 2014-08-19 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of bioactive substance having hydroxy group
US8920788B2 (en) 2008-03-18 2014-12-30 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of physiologically active substances
US8940332B2 (en) 2006-05-18 2015-01-27 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of podophyllotoxins
US9149540B2 (en) 2008-05-08 2015-10-06 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of folic acid or folic acid derivative
WO2016021407A1 (ja) * 2014-08-04 2016-02-11 日本化薬株式会社 核酸代謝拮抗剤が結合したポリアミノ酸誘導体
US9346923B2 (en) 2011-09-11 2016-05-24 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Method for manufacturing block copolymer
US9434822B2 (en) 2004-09-22 2016-09-06 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Block copolymer, micelle preparation, and anticancer agent containing the same as active ingredient
WO2017150256A1 (ja) 2016-03-01 2017-09-08 日本化薬株式会社 カンプトテシン類高分子誘導体を含有する医薬製剤
US9855339B2 (en) 2014-12-26 2018-01-02 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical preparation of camptothecin-containing polymer derivative
US10543281B2 (en) 2015-09-03 2020-01-28 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition containing camptothecin polymer derivative

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4757633B2 (ja) * 2003-03-20 2011-08-24 日本化薬株式会社 難水溶性抗癌剤と新規ブロック共重合体を含むミセル調製物
ES2584840T3 (es) * 2006-10-03 2016-09-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Compuesto de un derivado de resorcinol con un polímero

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02300133A (ja) * 1989-05-11 1990-12-12 Res Dev Corp Of Japan 水溶性高分子化医薬製剤
JPH05955A (ja) 1990-11-07 1993-01-08 Yasuhisa Sakurai 水溶性高分子抗癌剤及び薬物担持用担体
JP2694923B2 (ja) 1995-08-21 1997-12-24 科学技術振興事業団 水溶性高分子化医薬製剤
JPH11279083A (ja) 1998-03-30 1999-10-12 Nippon Kayaku Co Ltd 可溶化剤
US20020099013A1 (en) * 2000-11-14 2002-07-25 Thomas Piccariello Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
JP2003524028A (ja) 1999-09-23 2003-08-12 エンゾン，インコーポレーテッド ａｒａ−Ｃ及びａｒａ−Ｃ誘導体のポリマーコンジュゲート
WO2004039869A1 (ja) 2002-10-31 2004-05-13 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha カンプトテシン類の高分子誘導体
JP2004532289A (ja) 2001-02-20 2004-10-21 エンゾン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド 末端分枝高分子リンカーおよびそれを含む高分子複合体
JP2005519122A (ja) * 2002-03-05 2005-06-30 北京鍵▲凱▼科技有限公司 親水性ポリマー−マルチカルボキシルオリゴペプチドと薬剤分子との結合生成物、医薬組成物およびその薬学上の使用
WO2006120914A1 (ja) * 2005-05-11 2006-11-16 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha シチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
WO2007111211A1 (ja) * 2006-03-28 2007-10-04 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha タキサン類の高分子結合体

Family Cites Families (90)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1467587A (en) * 1974-07-11 1977-03-16 Nestle Sa Preparation of an asparagine or a glutamine
GB8500209D0 (en) 1985-01-04 1985-02-13 Ceskoslovenska Akademie Ved Synthetic polymeric drugs
JPS6296088A (ja) 1985-10-22 1987-05-02 Kanebo Ltd 抗腫瘍性物質の製法
US4734512A (en) 1985-12-05 1988-03-29 Bristol-Myers Company Intermediates for the production of podophyllotoxin and related compounds and processes for the preparation and use thereof
CH667874A5 (fr) 1985-12-19 1988-11-15 Battelle Memorial Institute Polypeptide synthetique biodegradable et son utilisation pour la preparation de medicaments.
JPS6310789A (ja) 1986-07-01 1988-01-18 Nippon Kayaku Co Ltd 新規ポドフイロトキシン誘導体
JPS6323884A (ja) 1986-07-17 1988-02-01 Nippon Kayaku Co Ltd 新規ポドフイロトキシン誘導体
JPS6461423A (en) 1987-09-02 1989-03-08 Nippon Kayaku Kk Water-soluble polymeric carcinostatic agent
JPS6461422A (en) 1987-09-02 1989-03-08 Nippon Kayaku Kk Water-soluble polymeric carcinostatic agent
US5543390A (en) * 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
JPH05117385A (ja) 1991-10-31 1993-05-14 Res Dev Corp Of Japan ブロツク共重合体の製造法、ブロツク共重合体及び水溶性高分子抗癌剤
KR940003548U (ko) 1992-08-14 1994-02-21 김형술 세탁물 건조기
US5614549A (en) 1992-08-21 1997-03-25 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
JP3270592B2 (ja) 1992-10-26 2002-04-02 日本化薬株式会社 ブロック共重合体−抗癌剤複合体医薬製剤
JP3268913B2 (ja) 1992-10-27 2002-03-25 日本化薬株式会社 高分子担体
JPH06206830A (ja) 1992-10-27 1994-07-26 Nippon Kayaku Co Ltd ブロック共重合体−薬剤複合体及び高分子ブロック共重合体
FR2698543B1 (fr) 1992-12-02 1994-12-30 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouvelles compositions à base de taxoides.
DE4307114A1 (de) 1993-03-06 1994-09-08 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von Umsetzungsprodukten aus Polyasparaginsäureamid und Aminosäuren und ihre Verwendung
JPH06296088A (ja) 1993-04-08 1994-10-21 Canon Inc 電子機器
JPH06310789A (ja) 1993-04-21 1994-11-04 Sumitomo Heavy Ind Ltd エキシマーレーザー用予備電離ピンの位置調整装置
JP3220283B2 (ja) 1993-05-14 2001-10-22 アドバンス電気工業株式会社 流量センサー
US5880131A (en) 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5840900A (en) 1993-10-20 1998-11-24 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
JPH0848766A (ja) 1994-05-30 1996-02-20 Mitsui Toatsu Chem Inc 重合体及びその製造方法
US5571889A (en) * 1994-05-30 1996-11-05 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Polymer containing monomer units of chemically modified polyaspartic acids or their salts and process for preparing the same
US5552517A (en) * 1995-03-03 1996-09-03 Monsanto Company Production of polysuccinimide in an organic medium
SG50747A1 (en) 1995-08-02 1998-07-20 Tanabe Seiyaku Co Comptothecin derivatives
DK0932399T3 (da) * 1996-03-12 2006-05-15 Pg Txl Co Lp Vandoplöselige paclitaxel-prodrugs
JP4420472B2 (ja) 1996-04-15 2010-02-24 旭化成株式会社 薬物複合体
US5877205A (en) 1996-06-28 1999-03-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Parenteral paclitaxel in a stable non-toxic formulation
AU710156B2 (en) 1996-07-15 1999-09-16 Kabushiki Kaisha Yakult Honsha Taxane derivatives and drugs containing the same
AU729077B2 (en) 1996-08-26 2001-01-25 Transgene S.A. Cationic lipid-nucleic acid complexes
ATE236657T1 (de) * 1997-05-09 2003-04-15 Deutsches Krebsforsch Konjugat, umfassend einen folsäureantagonisten und einen träger
EP1037649B1 (en) 1997-12-17 2009-09-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US6153655A (en) 1998-04-17 2000-11-28 Enzon, Inc. Terminally-branched polymeric linkers and polymeric conjugates containing the same
JPH11335267A (ja) 1998-05-27 1999-12-07 Nano Career Kk 水難溶性薬物を含有するポリマーミセル系
IN191203B (ja) 1999-02-17 2003-10-04 Amarnath Prof Maitra
US6207832B1 (en) 1999-04-09 2001-03-27 University Of Pittsburgh Camptothecin analogs and methods of preparation thereof
US20010041189A1 (en) 1999-04-13 2001-11-15 Jingya Xu Poly(dipeptide) as a drug carrier
US6713454B1 (en) 1999-09-13 2004-03-30 Nobex Corporation Prodrugs of etoposide and etoposide analogs
US6380405B1 (en) 1999-09-13 2002-04-30 Nobex Corporation Taxane prodrugs
DE60019435T2 (de) 1999-09-14 2006-02-23 Tepha, Inc., Cambridge Therapeutische anwendung von polymere die gamma-hydroxybutyrat enthalten
SG147286A1 (en) 1999-10-12 2008-11-28 Cell Therapeutics Inc Manufacture of polyglumate-therapeutic agent conjugates
US20030054977A1 (en) * 1999-10-12 2003-03-20 Cell Therapeutics, Inc. Manufacture of polyglutamate-therapeutic agent conjugates
JP3523821B2 (ja) 2000-02-09 2004-04-26 ナノキャリア株式会社 薬物が封入されたポリマーミセルの製造方法および該ポリマーミセル組成物
EP1267871A2 (en) 2000-02-29 2003-01-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with anti-tumor podophyllotoxin derivatives
PL358335A1 (en) 2000-03-17 2004-08-09 Cell Therapeutics, Inc. Polyglutamic acid-camptothecin conjugates and methods of preparation
US20020161062A1 (en) 2001-11-06 2002-10-31 Biermann Paul J. Structure including a plurality of cells of cured resinous material, method of forming the structure and apparatus for forming the structure
JP2003535066A (ja) 2000-06-02 2003-11-25 エイドジェノシスク テクニスク ホクシューレ チューリッヒ 薬学的活性化合物の制御された送達のための共役付加反応
WO2002006279A1 (en) 2000-07-17 2002-01-24 Oxigene Inc Efficient method of synthesizing combretastatin a-4 prodrugs
ATE437647T1 (de) * 2001-02-16 2009-08-15 Cellgate Inc Transporter mit beabstandeten arginin-teilchen
DK1361895T3 (da) 2001-02-20 2008-02-18 Enzon Inc Endegruppeforgrenede polymere linkere og polymere konjugater indeholdende disse
US7138490B2 (en) 2001-06-20 2006-11-21 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Block copolymer reduced in impurity content, polymeric carrier, pharmaceutical preparations in polymeric form and process for the preparation of the same
CA2463902A1 (en) 2001-10-26 2003-05-01 Oxigene, Inc. Functionalized stilbene derivatives as improved vascular targeting agents
DE60222804T2 (de) 2001-12-21 2008-07-03 Vernalis (Cambridge) Ltd., Abington 3-(2,4)dihydroxyphenyl-4-phenylpyrazole und deren medizinische verwendung
US6596757B1 (en) 2002-05-14 2003-07-22 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising polyethylene glycol-containing taxanes and their therapeutic use
JP2003342168A (ja) 2002-05-24 2003-12-03 Nano Career Kk 注射用薬物含有ポリマーミセル製剤の製造方法
JP2003342167A (ja) 2002-05-24 2003-12-03 Nano Career Kk カンプトテシン誘導体の製剤およびその調製方法
JP4270485B2 (ja) 2002-05-28 2009-06-03 第一三共株式会社 タキサン類の還元方法
JP2004010479A (ja) * 2002-06-03 2004-01-15 Japan Science & Technology Corp ブロック共重合体とアンスラサイクリン系抗癌剤を含む新規固型製剤及びその製造法
GB0228417D0 (en) 2002-12-05 2003-01-08 Cancer Rec Tech Ltd Pyrazole compounds
GB0229618D0 (en) 2002-12-19 2003-01-22 Cancer Rec Tech Ltd Pyrazole compounds
JP4921162B2 (ja) 2003-02-11 2012-04-25 ヴァーナリス（ケンブリッジ）リミテッド 熱ショックタンパク質の阻害剤としてのイソオキサゾール化合物類
JP4757633B2 (ja) * 2003-03-20 2011-08-24 日本化薬株式会社 難水溶性抗癌剤と新規ブロック共重合体を含むミセル調製物
AU2004224530A1 (en) 2003-03-26 2004-10-07 Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. Intravenous nanoparticles for targenting drug delivery and sustained drug release
GB0309637D0 (en) 2003-04-28 2003-06-04 Cancer Rec Tech Ltd Pyrazole compounds
GB0315111D0 (en) 2003-06-27 2003-07-30 Cancer Rec Tech Ltd Substituted 5-membered ring compounds and their use
US20070004674A1 (en) 2003-08-22 2007-01-04 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Remedy for diseases associated with immunoglobulin gene translocation
FR2862536B1 (fr) 2003-11-21 2007-11-23 Flamel Tech Sa Formulations pharmaceutiques pour la liberation prolongee de principe(s) actif(s), ainsi que leurs applications notamment therapeutiques
NZ549010A (en) 2004-01-07 2010-07-30 Seikagaku Kogyo Co Ltd Hyaluronic acid derivative and drug containing the same
BRPI0515573A (pt) * 2004-09-22 2008-07-29 Nippon Kayaku Kk copolìmero por blocos, preparação de micela e agente anticáncer contendo a mesma como o ingrediente ativo
JP2006120914A (ja) 2004-10-22 2006-05-11 Matsushita Electric Ind Co Ltd 部品吸着ノズル、並びに部品実装装置及び部品実装方法
EP2298748B1 (en) 2004-11-18 2016-07-20 Synta Pharmaceuticals Corp. Triazole compounds that modulate HSP90 activity
EP1857446B1 (en) 2005-03-09 2013-05-01 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Derivatives of 3-(2,4-dihydroxyphenyl)-1,2,4-triazole useful in the treatment of cancer
EP1857489A4 (en) * 2005-03-09 2010-06-23 Toray Industries MICROPARTICLE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION
US8399464B2 (en) * 2005-03-09 2013-03-19 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha HSP90 inhibitor
JPWO2006115293A1 (ja) 2005-04-22 2008-12-18 国立大学法人 東京大学 ｐＨ応答性高分子ミセルの調製に用いる新規ブロック共重合体及びその製造法
US20090275732A1 (en) 2005-05-12 2009-11-05 Ichiro Hirotsu Agent for improving circulatory disorder
EP1948240A2 (en) * 2005-08-19 2008-07-30 Endocyte, Inc. Ligand conjugates of vinca alkaloids, analogs and derivatives
JP4975297B2 (ja) 2005-10-20 2012-07-11 山佐株式会社 スロットマシン
JP2007182407A (ja) 2006-01-10 2007-07-19 Medgel Corp 徐放性ハイドロゲル製剤
AU2007252678A1 (en) 2006-05-18 2007-11-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of podophyllotoxin
CN101489592A (zh) 2006-07-19 2009-07-22 日本化药株式会社 考布他汀的高分子量偶联物
ES2584840T3 (es) 2006-10-03 2016-09-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Compuesto de un derivado de resorcinol con un polímero
JP5503872B2 (ja) 2006-11-06 2014-05-28 日本化薬株式会社 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体
EP2090607B1 (en) * 2006-11-08 2015-05-20 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist
EP2206502B1 (en) * 2007-09-28 2018-09-12 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of steroid
EP2258397B1 (en) * 2008-03-18 2017-10-11 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of physiologically active substance
WO2009136572A1 (ja) * 2008-05-08 2009-11-12 日本化薬株式会社 葉酸若しくは葉酸誘導体の高分子結合体
WO2010131675A1 (ja) * 2009-05-15 2010-11-18 日本化薬株式会社 水酸基を有する生理活性物質の高分子結合体

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02300133A (ja) * 1989-05-11 1990-12-12 Res Dev Corp Of Japan 水溶性高分子化医薬製剤
JPH05955A (ja) 1990-11-07 1993-01-08 Yasuhisa Sakurai 水溶性高分子抗癌剤及び薬物担持用担体
JP2694923B2 (ja) 1995-08-21 1997-12-24 科学技術振興事業団 水溶性高分子化医薬製剤
JPH11279083A (ja) 1998-03-30 1999-10-12 Nippon Kayaku Co Ltd 可溶化剤
JP2003524028A (ja) 1999-09-23 2003-08-12 エンゾン，インコーポレーテッド ａｒａ−Ｃ及びａｒａ−Ｃ誘導体のポリマーコンジュゲート
US20020099013A1 (en) * 2000-11-14 2002-07-25 Thomas Piccariello Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
JP2004532289A (ja) 2001-02-20 2004-10-21 エンゾン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド 末端分枝高分子リンカーおよびそれを含む高分子複合体
JP2005519122A (ja) * 2002-03-05 2005-06-30 北京鍵▲凱▼科技有限公司 親水性ポリマー−マルチカルボキシルオリゴペプチドと薬剤分子との結合生成物、医薬組成物およびその薬学上の使用
WO2004039869A1 (ja) 2002-10-31 2004-05-13 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha カンプトテシン類の高分子誘導体
WO2006120914A1 (ja) * 2005-05-11 2006-11-16 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha シチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
WO2007111211A1 (ja) * 2006-03-28 2007-10-04 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha タキサン類の高分子結合体

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Journal of Controlled Release", vol. 79, 2002, ELSEVIER, pages: 55 - 70
CANCER RESEARCH, AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, vol. 44, 1984, pages 25 - 30
CANCER SCIENCE, JAPANESE CANCER ASSOCIATION, vol. 95, 2004, pages 105 - 111
See also references of EP2080779A4

Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9434822B2 (en) 2004-09-22 2016-09-06 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Block copolymer, micelle preparation, and anticancer agent containing the same as active ingredient
US8323669B2 (en) 2006-03-28 2012-12-04 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of taxane
US8940332B2 (en) 2006-05-18 2015-01-27 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of podophyllotoxins
US8334364B2 (en) 2006-11-06 2012-12-18 Nipon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight derivative of nucleic acid antimetabolite
US8188222B2 (en) 2006-11-08 2012-05-29 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High molecular weight derivative of nucleic acid antimetabolite
USRE46190E1 (en) 2007-09-28 2016-11-01 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of steroids
WO2009041570A1 (ja) * 2007-09-28 2009-04-02 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha ステロイド類の高分子結合体
US8703878B2 (en) 2007-09-28 2014-04-22 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of steroids
US8920788B2 (en) 2008-03-18 2014-12-30 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha High-molecular weight conjugate of physiologically active substances
US9149540B2 (en) 2008-05-08 2015-10-06 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of folic acid or folic acid derivative
US8808749B2 (en) 2009-05-15 2014-08-19 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer conjugate of bioactive substance having hydroxy group
US9018323B2 (en) 2010-11-17 2015-04-28 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Polymer derivative of cytidine metabolic antagonist
WO2012067138A1 (ja) 2010-11-17 2012-05-24 日本化薬株式会社 新規なシチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
JP5856069B2 (ja) * 2010-11-17 2016-02-09 日本化薬株式会社 新規なシチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
US9346923B2 (en) 2011-09-11 2016-05-24 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Method for manufacturing block copolymer
WO2016021407A1 (ja) * 2014-08-04 2016-02-11 日本化薬株式会社 核酸代謝拮抗剤が結合したポリアミノ酸誘導体
US9855339B2 (en) 2014-12-26 2018-01-02 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical preparation of camptothecin-containing polymer derivative
US9993569B2 (en) 2014-12-26 2018-06-12 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical preparation of camptothecin-containing polymer derivative
US10543281B2 (en) 2015-09-03 2020-01-28 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition containing camptothecin polymer derivative
WO2017150256A1 (ja) 2016-03-01 2017-09-08 日本化薬株式会社 カンプトテシン類高分子誘導体を含有する医薬製剤

Also Published As

Publication number Publication date
JP5503872B2 (ja) 2014-05-28
EP2080779A1 (en) 2009-07-22
JPWO2008056596A1 (ja) 2010-02-25
US20090281300A1 (en) 2009-11-12
TW200836751A (en) 2008-09-16
US8334364B2 (en) 2012-12-18
EP2080779A4 (en) 2012-02-29
EP2080779B1 (en) 2016-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2008056596A1 (en) Polymeric derivative of nucleic acid metabolic antagonist
JP5000512B2 (ja) シチジン系代謝拮抗剤の高分子誘導体
JP5548365B2 (ja) 核酸系代謝拮抗剤の高分子誘導体
US8920788B2 (en) High-molecular weight conjugate of physiologically active substances
EP2641605B1 (en) Polymer derivative of cytidine metabolism antagonist
WO2010131675A1 (ja) 水酸基を有する生理活性物質の高分子結合体
US20100004403A1 (en) High-Molecular Weight Conjugate of Combretastatins
JPH10513187A (ja) 高分子量のポリマーを基剤とするプロドラッグ
JP2005519122A (ja) 親水性ポリマー−マルチカルボキシルオリゴペプチドと薬剤分子との結合生成物、医薬組成物およびその薬学上の使用
JPWO2009041570A1 (ja) ステロイド類の高分子結合体
KR20150107650A (ko) 신규한 양이온성 폴리포스파젠 화합물, 폴리포스파젠-약물 컨쥬게이트 화합물 및 그 제조 방법

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 07831039

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2008543048

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2007831039

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 12312009

Country of ref document: US