WO1997009986A1

WO1997009986A1 - Preparation lyophilisee contenant de la pge1 et son procede de production

Info

Publication number: WO1997009986A1
Application number: PCT/JP1996/002611
Authority: WO
Inventors: Hirofumi Yoshikawa; Hideki Sasaki; Junzo Seki
Original assignee: Nippon Shinyaku Co., Ltd.
Priority date: 1995-09-13
Filing date: 1996-09-12
Publication date: 1997-03-20
Also published as: US5977172A; EP0857484A4; CN1195990A; KR19990044445A; EP0857484A1; CA2231682A1

Description

明細書

P G E , 含有凍結乾燥製剤及び製法技術分野

本発明は、プロスタグランジン Ε , (以下「 P G E , J という）を含有する凍結乾燥製剤に関するものである。

背景技術

P G E , は、その強い血管拡張作用や血小板凝集抑制作用から慢性動脈閉塞症（閉塞性血栓炎（TA O) 、閉塞性動脈硬化症

( A S 0) ) 等の治療に有用な薬物として知られている。しかし、 P G E , は肺循環で急速に不活性化するため、臨床応用にあっては手技上困難な持続動脈療法や静脈内持繞点滴投与、大量投与が試みられ、それに伴う血管痛、静脈炎、全身血圧低下等の副作用が避けられなかった。

近年、 P G E i の上記欠点を克服しつつ優れた効能を引き出すため、その脂肪乳剤化が種々検討されている（特開昭 58-222014 号公報、特開平 4-69340 号公報、特開平 4-338333号公報、特開平 4 - 338334号公報、特開平 4- 338335号公報など）。実際に、特開昭 58- 222014号公報に係る P G E , 脂肪乳剤は市販されている。

上記市販の P G E , 脂肪乳剤は、 P G E , が乳剤粒子中に内包されているため P G E , の肺での不活性化が少なく、微小乳剤粒子特有の生体内分布に基づく障害血管部位へのターゲティング効果と相まつて少量で強力かつ持続的な血管拡張作用を有し、更に刺激性の改善等局所副作用も軽減された優れた P G E , 製剤である。しかし、差替え用紙（規則 26) 当該脂肪乳剤は、 P G E , の分解物を製造直後から表示 P G E , 含有値の約 2 0 %を含有しており、また 5で保存条件下においても

P G E , が 1 か月間に約 2.5%減少することが報告されており（水口和生ら、基礎と臨床、 26, 1647-1653 (1992)) 、品質及び安定性に改良の余地があると考えられる。

脂肪乳剤中の P G E , の保存安定性を確保する手段として P G E , 含有脂肪乳剤の凍結乾燥製剤化が考えられ、実際に脂肪乳剤の凍結乾燥製剤化に関して種々検討されているが（PCT W092/07552号公報、特開平 5- 43450 号公報、特開平 6- 157294号公報など）、未だ開発されるに至つていない。

ところで、薬物には各々安定な液性（ p H) 領域があり、特別な事情がない限り、当該薬物の安定性を維持するため、当該薬物の安定な液性領域で通常医薬品は開発される。 P G E , の場合には弱酸性領域で安定であることが知られており（Pharmaceutical Research, vol.5, No.8, 482-487 (1988). Pharmaceutical Research, vol. 6, No.3. 210-215 (1989))、実際に市販されている上記脂肪乳剤も弱酸性領域（ p H 4. 5〜 6. 0 ) に調整されている。

発明の開示

本発明の目的は、これまで以上に細菌学的又は熱若しくは経時的に優れた安定性を有する高品質な P G E , 含有脂肪乳剤に係る製剤を提供することにある。

本発明者らは、鋭意研究の結果、 P G E , の安定な液性領域を外し P G E , 含有脂肪乳剤の液性を中性領域に調整するという発想の転換を図ると共に、当該脂肪乳剤を凍結乾燥することによって、幸差替え用紙（規則 26) 運にも上記目的に適う製剤を見出すことができ、本発明を完成するに至った。

即ち、本発明は、 P G E , 、油成分、乳化剤、及び水を含み液性 ( P H) が中性領域の範囲内である脂肪乳剤から導かれる、 P GE , 含有凍結乾燥製剤に閩するものある。かかる P G E , 含有凍結乾燥製剤を P H 7. 0の水（例えば、蒸留水、精製水）で再構築（復元）すると、その液性は、多少変動があるものの、凍結乾燥前の脂肪乳剤の液性と実質的に同じ P Hを示す。従って、本発明は、 P G E , 、油成分、及び乳化剤を含有し、 p H 7. 0の水で再構築（復元）した直後の液性（p H) が中性領域の範囲内であることを特徴とする P G E ) 含有凍結乾燥製剤に関するものであると換言することができる。

以下、本発明を詳述する。

本発明に係る油成分としては、例えば、植物油、動物油、中性脂質（モノ、ジ、トリグリセライド）、合成油脂、ステロール誘導体等を挙げることができ、具体的には、植物油として大豆油、綿実油、菜種油、胡麻油、コーン油、落花生油、サフラワー油等を、動物油として魚油等を、中性脂質としてトリオレイン、トリリノレイン、トリパルミチン、トリステアリン、トリミリスチン、トリァラキドニン等を、合成脂質としてァゾン等を、ステロール誘導体としてコレステリルォレート、コレステリノレリノレート、コレステリノレミリステート、コレステリルバルミテート、コレステリルァラキデート等を挙げることができる。これらは 2種以上であってもよい。好ましい油成分としては、トリグリセライドゃこれを主成分とする植物差替え用紙（規則 26) 油を挙げることができる。実用的には大豆油が好ましく、特に高純度に精製された精製大豆油が好ましい。

凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の当該油成分の含有率は、油成分の種類や他の構成成分等によって異なるが、 0. l 〜 3 0 w Zv %の範囲内が適当であり、 l Z O wZv ^の範囲内が好ましい。

本発明に係る乳化剤としては、医薬製剤に使用される乳化剤であれば特に制限されるものではなく、例えば、リン脂質、非イオン性界面活性剤などを挙げることができる。具体的にリン脂質としては- ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールァミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルセリン、スフインゴミエリン、レシチン等を挙げることができる。また、水素添加されたリン脂質を用いることもできる。非イオン性界面活性剤としては、ポリアルキレングリコール（例えば、平均分子量 1 0 0 0〜 1 0 0 0 0. 好ましくは 4 0 0 0〜 6 0 0 0のボリエチレングリコール）、ポリォキシアルキレン共重合体（例えば、平均分子量 1 0 0 0〜 2 0 0 0 0、好ましくは 6 0 0 0〜 1 0 0 0 0のポリオキシエチレン—ポリオキシプロピレン共重合体）、硬化ヒマシ油ポリオキシアルキレン誘導体（例えば、硬化ヒマシ油ポリオキシエチレン一（20)—エーテル、同—（40)—エーテル、同—（100) —エーテル等）ヒマシ油ポリオキシアルキレン誘導体（例えば、ヒマシ油ポリオキシエチレン - (20)—エーテル、同 - (40)—エーテル、同 - (100) —エーテル等 ) 等を挙げることができる。これらは 2種以上であってもよい。好ましい乳化剤としては、卵黄ホスファチジルコリン、卵黄レシチン差替え用紙（規則 26) 大豆レシチンを挙げることができる。実用的には卵黄レシチン、大豆レシチンが好ましい。なお、本発明においては通常市販されているリン脂質で充分に本発明の目的を達成することができる。

凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の当該乳化剤の含有率は、乳化剤の種類や他の構成成分等によって異なるが、 0. 0 1 〜 3 0 wZv^の範囲内が適当であり、 0. l〜 2 0 wZv %の範囲内が好ましい。

なお、油成分と乳化剤との重量比（油成分乳化剤）は 0. 1〜 2 0の範囲内が適当であり、 0. 4〜 6. 0の範囲内が好ましく、 0. 8〜 1 . 2 (特に 1 ) の範囲内であるものがより好ましい。当該比率が 1 付近の組み合わせは、優れた D D S ( ドラッグ · デリバリー · システム）効果を有すると共に、ろ過滅菌が可能な、乳剤粒子の平均粒子径が 7 0 n m以下の脂肪乳剤を得ることができる。

当該比率は、再溶解液の量にかかわらず、再溶解後においても凍結乾燥前と実質変わらない。

本発明に係る水は、乳剤粒子の媒体となるもの、或いは脂肪乳剤の形態を保つものであり、かかる水としては一般に注射用水（注射用蒸留水）を挙げることができる。

本発明に係る凍結乾燥前の脂肪乳剤は、凍結乾燥製剤中の P G E I の安定性を増加させるため、液性を中性領域に調整されていることを最大の特徴とする。ここで中性領域とは、一般的に考えられる P H 7前後の液性領域をいい、具体的には p H 6. 5〜 7. 5の液性領域、好ましくは p H 6. 7〜 7. 3の液性領域を挙げることができる。 p Hの調整には、医薬製剤において一般に使用される p H 差替え用紙（規則 26) 調整剤を用いることができる。 p H調整剤としては、無機酸、無機塩基、有機酸、有機塩基、緩衝剤を挙げることかできる。具体的には、塩酸、硫酸、リン酸、ホウ酸、クェン酸、コハク酸、酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリゥム、トリエタノールァミン、リン酸緩衝剤等を挙げることができる。但し、使用する油成分、乳化剤等の種類や含有率によっては、 P H調整剤を用いなくても中性領域になつている場合があり、この場合には P H調整を行う必要がない。

本発明に係る凍結乾燥製剤を中性水で再構築した直後の液性は、多少変動があるものの、凍結乾燥前の脂肪乳剤の液性と実質的に同じ p Hを示すので、中性領域の範囲内の p Hを示し、具体的には p H 6. 5〜 7. 5又は p H 6. 7〜 7. 3の範囲内である。

P G E , は本発明に係る製剤の有効成分であり、 P G E , の凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の含有率は、本発明に係る脂肪乳剤の構成成分や P G E , の用途等によって異なるが、 0. 1 〜

5 0 0 〃 gZm lの範囲内が適当であり、 1 〜 1 0 0 // gZm lの範囲内が好ましい。

本発明では、凍結乾燥ケーキ等を保護するために必要に応じ賦形剤（凍結乾燥助剤）を加えることができる。かかる賦形剤としては糖類、アミノ酸、無機塩等を挙げることができる。糖類としては、単糖類、二糖類、多糖類、糖アルコールを挙げることができ、具体的には、単糖類としてグルコース、フルクトース等を、二糖類としてマルトース、ラクトース、シュクロース、トレノヽロース等を、多糖類としてデキストラン、澱粉、マルトトリオース等を、糖アルコ差替え用紙（規則 26) ールとしてマンニット、ソルビット、グリセリン等を挙げることができ、単糖類、二糖類が好ましく、特にマルトースが好ましい。マルトースを含有させると、再溶解によって凍結乾燥前の乳剤粒子の平均粒子径と粒子径分布を有する脂肪乳剤にほぼ復元することができる。アミノ酸としては、グリシン等を挙げることができ、無機塩としては、塩化ナトリウム、塩化力リウ厶等を挙げることができる _c これら賦形剤も 1種類に限られず、適時数種類を組み合わせて使用することができる。なお、無機塩、特に塩化ナトリウムは脂肪乳剤の凝集や融合を抑制することもできる。

凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の当該糖類の含有率は、糖類や他の構成成分等によって異なるが、 l〜 3 0 wZv%の範囲内が適当であり、 3〜 2 0 wZv%の範囲内が好ましい。凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の当該ァミノ酸の含有率は、アミノ酸や他の構成成分等によって異なるが、 1〜 3 O wZv %の範囲内が適当であり、 3〜 2 0 w v %の範囲内が好ましい。凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中の当該無機塩の含有率は、無機塩や他の構成成分等によって異なるが、 0. 5〜 5 wZ V %の範囲内が適当である

さらに本発明では、必要に応じて乳化補助剤や乳化安定化剤を添加することができる。これら乳化補助剤、乳化安定化剤としては、炭素数 6〜 2 2の直鎖状又は分技状の飽和又は不飽和脂肪酸、具体的には、ステアリン酸、ォレイン酸、リノール酸、パルミチン酸、リノレン酸、ミリスチン酸やこれらの塩（例えば、アルカリ金属塩 (ナトリゥム塩、力リゥム塩など）、アル力リ土類金属塩（カルシ差替え用紙（規則 26) ゥム塩など）等、炭素数 2〜 2 2の第一級脂肪族ァミン又は第二級脂肪族ァミン、具体的には、エタノールァミン、プロピルァミン、ォクチルァミン、ステアリルァミン、ォレイルァミン等、リジン、ヒスチジン、オル二チン、アルギニン等の塩基性アミノ酸、コレステロールゃコレスタノール等のステロール類、ホスファチジン酸やガングリオシド、ステアリルァミン等の荷電物質などを挙げることができる。これらは、 1種類に限ることなく、適宜数種類を組み合わせて使用することができる。

凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤中のこれら添加剤の含有量は、その目的に応じて異なるが、通常 2wZv %以下、好ましくは l w Zv %以下である。これら添加剤を含有しなくても本発明の目的を充分に達成することができる。

その他、医薬製剤に使用しうる酸化防止剤、防腐剤、等張化剤、緩衝剤、安定化剤等の添加剤及び補助物質、栄養物質等も必要に応じて添加することができる。具体的には、安息香酸、ァスコルビン酸、トコフエロール等を挙げることができる。これらは通常適当量含有することができ、 1 0 wZ V %以下で充分である。

本発明に係る、凍結乾燥前及び再溶解後の脂肪乳剤は、油成分及び乳化剤を主成分とする乳剤粒子から構成され、 P G E , は、その乳剤粒子に内包されていると考えられる。当該乳剤粒子は極めて微細であり、平均粒子径にして 5〜 5 0 O nmの範囲内である。但し、平均粒子径が 2 5 O nm以下であるものが好ましく、平均粒子径が 5〜 7 O nmの範囲内、特に 5〜 5 O nmの範囲内であるものがより好ましい。平均粒子径が 5 ~ 7 0 nmの範囲內であるものは、差替え用紙（規則 26) 0 . のメンブランフィルターを実質的に 1 0 0 %通過することができ、加熱滅菌によらずともろ過滅菌で十分に対応することができる。ろ過滅菌を採用すると、加熱滅菌に由来する分解物の産生を抑えることができ、不純物の少ない製剤を得ることができる。なお、ろ過滅菌は加熱滅菌に比べて滅菌力が劣るので、菌の増殖が懸念されるが、菌の増殖は凍結乾燥製剤とすることによって十分に抑制することができる。

本発明に係る凍結乾燥製剤は、 P G E , 、油成分、乳化剤、及び水等を含む、液性（ ρ Η ) が中性領域の範囲内である脂肪乳剤を常法により凍結乾燥することによつて製造することができる。なお、油成分、乳化剤、水、中性領域、脂肪乳剤等は、前記と同義である以下、本発明に係る凍結乾燥製剤の一製法を詳しく説明する。まず、凍結乾燥前の P G E , 含有脂肪乳剤を調製する。かかる脂肪乳剤は、例えば、前記含有率に相当する所定量の油成分に、 P G Ε , 、乳化剤、及びその他の添加剤等を適宜添加し、例えば加熱して均質化し、更に適量の水を加えて常用のホモミキサーやホモジナィザ一、超音波ホモジナイザー、またマイクロフルイダィザー（商

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ασ名）ナノマイザ一（商品名）、アルティマイザ一（商 D αO名）マントン一ガウリン型高圧ホモジナイザ一等の乳化機により、前記範囲内にある所望の平均粒子径を有する乳剤粒子になるまで乳化処理をすればよい。製造上の都合によっては、脂肪乳剤の生成後に、 P G E , 、油成分、乳化剤、乳化補助剤、及び乳化安定化剤以外の成分（例えば、陚形剤や p H調整剤）を加えてもよい。 p H調整は. P H調整剤以外の成分を加えた後であれば、乳化処理の前でも後で差替え用紙（規則 26) もよい。

次いで、得られた脂肪乳剤を常法により凍結乾燥処理すれば、本発明に係る凍結乾燥製剤を調製することができる。凍結乾燥処理は, 常法により行なうことができる。例えば、脂肪乳剤を滅菌後、所定量をバイアル瓶に分注する。約一 4 0〜- 2 0 °Cの条件で予備凍結を約 2時間程度行い、約 0〜 1 0 "Cで減圧下に一次乾燥を行い、次いで、約 1 5〜 2 5 °Cで減圧下に二次乾燥して凍結乾燥する。そして、一般的にはバイアル内部を窒素ガスで置換し、打栓して凍結乾燥製剤を得る。

本発明に係る凍結乾燥製剤は、任意の適当な溶液（再溶解液）の添加によって極めて容易に再溶解し、凍結乾燥前の脂肪乳剤に再構築することができる。このような再溶解液としては、注射用水、生理食塩水、その他一般輸液を挙げることができる。この再溶解液の液量は、用途等によって異なり特に制限はないが、凍結乾燥前の液量の 0 . 5〜 2倍量、又は 5 0 0 m l 以下が適当である。

本発明に係る凍結乾燥製剤を注射用水等により再溶解したものを. 注射など非経口投与することができる。特に静脈内投与が好ましい, 投与形態は、治療目的等によって異なるが、 1 日 1 回ワンショットや 1 日 3回のような分割投与、静脈内持続注入等を挙げることがでさる o

本発明に係る凍結乾燥製剤は、 P G E , が有する効能の範囲内で用いることができる。例えば、慢性動脈閉塞性疾患、進行性全身性硬化症、全身性エリテマトーデス、糖尿病、振動病などの治療剤として用いることができる。差替え用紙（規則 26) 発明を実施するための最良の形態

以下、実施例、試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明がこれらによってなんら限定されるものではない。

実施例 1

精製大豆油 1 0 g、精製卵黄レシチン 1 . 8 g、 P G E , 0. 5 m gを約 4 0 °Cで加温混合し、これにマルトースを 1 0 %含有する水溶液約 8 0 m 1 を加え、ホモジナイザーで撹拌し粗分散液とした c 得られた粗分散液に 1 0 %のマルトース含有水溶液を更に加え、水酸化ナトリウムで p Hを 7. 0に調整し、 1 0 0 m l に定容した。この粗分散液を水冷下、マントン一ガウリン型ホモジナイザーを用い、合計圧 5 0 0 k g / c m ³ の加圧下で 1 0回通過させ乳化した。これにより均質化された P G E , 含有脂肪乳剤を得た。この乳剤の平均粒子径は光散乱光度測定装置（D L S - 7 0 0型、大塚電子社製、以下同じ）により測定したところ 2 0 3 n mであった。そして、得られた乳剤を 1 m 1 バイアルに 1 m 1 ずつ分注し、凍結乾燥を行つて本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。かかる凍結乾燥は、共和式凍結乾燥機（R L - 2 0 MB、共和真空社製）を用い、 — 4 0でで 2時間予備凍結をした後、 0でで減圧下に 1 0時間一次乾燥し、 2 5てで減圧下に 5時間二次乾燥することにより行った。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を加えて再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解は極めて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径差替え用紙（規則 26) は 2 1 O nmであった。 p H 7. 0の蒸留水で l m l の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 6. 9であった。

実施例 2

ォレイン酸を 0. 2 4 g添加した以外は、実施例 1 と同様に処理して平均粒子径 1 9 5 nmの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を加えて冉溶解（ l m l の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解は極めて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 2 0 1 nmであった。 ρ Η 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 6. 7であった。

実施例 3

精製大豆油 5 g、精製卵黄レシチン 5 g、及び P G E , 0. 5 m gを約 4 0てで加温混合し、これに、マルトースを 1 0 %含有する水溶液約 8 0 m 1 を加え、ホモジナイザーで撹拌し粗分散液とした < 得られた粗分散液に 1 0 %のマルトース含有水溶液を更に加え、水酸化ナトリウムで p Hを 7. 0に調整し、 1 0 O m l に定容した。この粗分散液を水冷下、ナノマイザ一（L A— 3 1型、ナノマイザ一社製）で高圧乳化し、均質化された極めて微細な P G E , を含有する脂肪乳剤を得た。乳剤粒子の平均粒子径は、光散乱光度測定装置により測定したところ 3 3 nmであった。得られた乳剤を 0. 2 mのメンブランフィルタ一でろ過滅菌した後、 l m 1 バイアルに差替え用紙（規則 26) 1 m 1 ずつ分注し、凍結乾燥を行って本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。かかる凍結乾燥は、共和式凍結乾燥機（R L— 2 0 MB, 共和真空社製）を用い、一 4 0でで 2時間予備凍結をした後、 0 °Cで減圧下に 1 0時間一次乾燥し、 2 5てで減圧下に 5時間二次乾燥することにより行った。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 3 4 n mであった。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 7. 0であった。

実施例 4

ォレイン酸を 0. 2 4 g添加した以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 8 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 4 0 n mであった。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 P H 6. 9であった。

実施例 5

差替え用紙（規則 26) 精製卵黄レシチンを 3 gにした以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 4 2 nmの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 4 1 であつた。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 6. 8であった。

実施例 6

精製卵黄レシチンを大豆レシチンにした以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子怪 4 3 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したところ, 溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂防乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 4 5 n mであった。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 7. 3であった。

実施例 7

p Hを 6. 5にした以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 5 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係差替え用紙（規則 26) る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤をほぼ復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 3 5 n mであった。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 6. 5であつた。

実施例 8

p Hを 7. 5に調整した以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 4 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから本発明に係る凍結乾燥製剤を得た。凍結乾燥状態は、極めて良好で一切の欠け、割れ、収縮等の不良は認められなかった。注射用水を添加して再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したところ、溶解はきわめて速やかに終了し、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径及び粒子径分布にほとんど変化は認められず凍結乾燥前の脂肪乳剤を復元した。なお、再溶解後の乳剤粒子の平均粒子径は 3 6 n mであった。 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 7. 4であった。

比較例 1

p Hを 6. 0に調整した以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 5 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから凍結乾燥製剤を得た。なお、 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 6. 1 であった。

差替え用紙（規則 26) 比較例 2

p Hを 5. 0に調整した以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 4 n mの乳剤粒子からなる脂肪乳剤を得、これから凍結乾燥製剤を得た。なお、 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 p H 5. 1 であった。

比較例 3

p Hを 8. 5に調整した以外は、実施例 3 と同様に処理して平均粒子径 3 6 n mの乳剤粒子からなる脂防乳剤を得、これから凍結乾燥製剤を得た。なお、 p H 7. 0の蒸留水で 1 m 1 の脂肪乳剤に再構築した直後の当該脂肪乳剤の液性は、 P H 8. 4であった。

試験例 1 保存安定性試験（ 1 )

実施例 3、 7、 8 と比較例 1、 2、 3の各凍結乾燥製剤について 4 0でで 1 力月保存後の P G E , 残存率を調べた。その結果を表 1 に示す。なお、 P G E , 残存率は、保存期間経過後、各凍結乾燥製剤に注射用水を加え再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したものについて調べた。

表 1

表 1 に示すように、凍結乾燥前脂肪乳剤を弱酸性領域（ p H 5. 0、 6. 0 ) や弱アルカリ性領域（ p H 8. 5 ) に調整して力、差替え用紙（規則 26) ら製造された凍結乾燥製剤中の P G E , と比べて、凍結乾燥前脂肪乳剤を中性領域（ ρ Η 6. 5〜 7. 5 ) に調整してから製造された本発明凍結乾燥製剤中の P G Ε . の安定性は著しく高かった。

試験例 2 保存安定性試験（ 2 )

実施例 3で得られた本発明に係る凍結乾燥製剤について、市販の脂肪乳剤（リプル（登録商標））とともに、 4 0 で 1週間保存後の P G E , 残存率を調べた。その結果を表 2に示す。なお、実施例 3の本発明凍結乾燥製剤の P G Ε , 残存率は、保存期間経過後、当該凍結乾燥製剤に注射用水を加え再溶解（ 1 m l の脂肪乳剤に再構築）したものについて調べた。

表 2

表 2に示すように、実施例 3の本発明凍結乾燥製剤に含有されている P G E , の安定性は、市販の脂肪乳剤に含有されている P G E の安定性と比較して著しく高かった。

発明の効果

本発明に係る P G E , 含有凍結乾燥製剤は、凍結乾燥前脂肪乳剤の液性を中性領域に調整しない脂肪乳剤から導かれた P G E , 含有凍結乾燥製剤に比べて P G E , の安定性が著しく高い。また、本発明では、凍結乾燥前脂肪乳剤の液性を中性領域にしているので、脂肪乳剤中の加水分解による遊離脂肪酸の増加を抑えられ、脂肪乳剤粒子の安定性（粒子径及び粒子径分布の維持）も高い。

乳剤粒子の平均粒子径が 5〜 7 0 n mである脂肪乳剤から導かれ差替え用紙（規則 26) た本発明凍結乾燥製剤は、市販されている液状タイプの脂肪乳剤と比べて、水分を含まないこと（ P G E , の加水分解等の抑制）及び凍結乾燥前にろ過滅菌が可能なこと（加熱滅菌による P G E , の不必要な熱分解の抑制）などから保存性 · 安定性が極めて優れておりまた不純物（分解物）が顕著に少ない。

以上のように本発明によれば高品質の P G E , 含有医薬品を提供することができる。

差替え用紙（規則 26)

Claims

請求の範囲

1 . プロスタグランジン E iCP G E J 油成分、乳化剤、及び水を含み液性（ P H) が中性領域の範囲内である脂肪乳剤から導かれる、 P G E , 含有凍結乾燥製剤。

2. 油成分の含有率が 0. 1 〜 3 0 V %の範囲内であり、乳化剤の含有率が 0. 0 1 〜 3 0 ^ノ¥ %の範囲内でぁる請求項 1 記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

3. 脂肪乳剤粒子の平均粒子径が 5〜 7 0 n mの範囲内である請求項 1 又は 2記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1 又は 2記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

4. 油成分と乳化剤との重量比（油成分 Z乳化剤）が 0. 8〜 1 . 2の範囲内である請求項 3記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 3記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

5. 油成分が植物油又はトリグリセライドであり、乳化剤がリン脂質又は非ィォン性界面活性剤である請求項 1 〜 4のいずれかに記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1 〜 4記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

6. 植物油が大豆油であり、リン脂質が卵黄レシチンである請求項 5記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 5記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

7. 液性が p H 6. 5〜 7. 5の範囲内である請求項 1 〜 6のいずれかに記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1 〜 6記載の差替え用紙（規則 26) P G E , 含有凍結乾燥製剤。

8. さらに糖類を含む請求項 1 〜 7のいずれかに記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1 〜 7記載の P G Ε , 含有凍結乾燥製剤 <

9. 糖類の含有率が 1 〜 3 0 w_ V %の範囲内である請求項 8 記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 8記載の P G E：含有凍結乾燥製剤。

1 0. 糖類がマルト—スである請求項 8又は 9記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 8又は 9記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 1 . さらに脂肪酸及び Z又はコレステロールを含む請求項 1 〜 1 0のいずれかに記載の脂肪乳剤から導かれる当該請求項 1 〜 1 0 記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 2. プロスタグランジン E ,(P G E ,)、油成分、及び乳化剤を含有し、 p H 7. 0の水で再構築（復元）した直後の液性（ p H) が中性領域の範囲内であることを特徵とする P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 3. 再溶解後の油成分の含有率が 0. l 〜 3 0 wZv %の範囲内であり、乳化剤の含有率が 0. 0 1 〜 3 0 w/ V %の範囲内である請求項 1 2記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 4. 再溶解後の脂肪乳剤粒子の平均粒子径が 5〜 7 0 n mの範囲内である請求項 1 2又は 1 3記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 5. 再溶解後の油成分と乳化剤との重量比（油成分 Z乳化剤）が 0. 8〜 1 . 2の範囲内である請求項 1 4記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 6. 油成分が植物油又はトリグリセライドであり、乳化剤がリ差替え用紙（規則 26) ン脂質又は非イオン性界面活性剤である請求項 1 2〜 1 5のいずれかに記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 7. 植物油が大豆油であり、リン脂質が卵黄レシチンである請求項 1 6記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

1 8. p H 7. 0の水で再構築した直後の液性が p H 6. 5〜

7. 5の範囲内である請求項 1 2〜 1 7のいずれかに記載の P G E 含有凍結乾燥製剤。

1 9. さらに糖類を含む請求項 1 2〜 1 8のいずれかに記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

2 0. 再溶解後の糖類の含有率が 1 〜 3 0 wZ V %の範囲内である請求項 1 9記載の脂肪乳剤から導かれる P G E , 含有凍結乾燥製剤。

2 1 . 糖類がマルトースである請求項 1 9又は 2 0記載の P G E：含有凍結乾燥製剤。

2 2. さらに脂肪酸及び Z又はコレステロールを含む請求項 1 2 〜 2 1 のいずれかに記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤。

2 3. プロスタグランジン E !(P G E ,)、油成分、乳化剤、及び水を含む、液性（ ρ Η) が中性領域の範囲内である脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする P G Ε , 含有凍結乾燥製剤の製法。

2 4. 油成分の含有率が 0. 1 〜 3 0 V %の範囲内であり、乳化剤の含有率が 0. 0 1 〜 3 0 wZv %の範囲内である請求項 2 3記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徵とする当該請求項 2 3記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

2 5. 脂肪乳剤粒子の平均粒子径が 5〜 7 0 n mの範囲内である差替え用紙（規則 26) 請求項 2 3又は 2 4記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 3又は 2 4記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法 <

2 6. 油成分と乳化剤との重量比（油成分ノ乳化剤）が 0. 8〜 1 . 2の範囲内である請求項 2 5記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 5記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

2 7. 油成分が植物油又はトリグリセライドであり、乳化剤がリン脂質又は非ィォン性界面活性剤である請求項 2 3〜 2 6のいずれかに記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徵とする当該請求項 2 3〜 2 6記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

2 8. 植物油が大豆油であり、リン脂質が卵黄レシチンである請求項 2 7記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 7記載の？〇 £ , 含有凍結乾燥製剤の製法。

2 9. 液性が p H 6. 5〜 7. 5の範囲内である請求項 2 3〜

2 8のいずれかに記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 3〜 2 8記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

3 0. さらに糖類を含む請求項 2 3〜 2 9のいずれかに記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 3〜 2 9記載の P G E i 含有凍結乾燥製剤の製法。

3 1 . 糖類の含有率が 1 〜 3 0 wZ V %の範囲内である請求項

3 0記載の脂防乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 3 0記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

3 2. 糖類がマルトースである請求項 3 0又は 3 1 記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 3 0又は 3 1記載の

差替え用紙（規則 26) P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

3 3. さらに脂肪酸及び/又はコレステロ一ルを含む請求項 2 3 〜 3 2のいずれかに記載の脂肪乳剤を凍結乾燥することを特徴とする当該請求項 2 3〜 3 2記載の P G E , 含有凍結乾燥製剤の製法。

差替え用紙（規則 26)