WO1997007400A1

WO1997007400A1 - Reactif permettant d'etudier l'agglutination d'un virus et materiel destine a l'etude du virus

Info

Publication number: WO1997007400A1
Application number: PCT/JP1996/002304
Authority: WO
Inventors: Takeru Fujii; Hideakira Yokoyama; Hidetoshi Hamamoto
Original assignee: Teikoku Seiyaku Kabushiki Kaisha
Priority date: 1995-08-21
Filing date: 1996-08-16
Publication date: 1997-02-27
Also published as: AU6709496A; DE69631443T2; JPH11276200A; EP0974842A1; JP3840521B2; TW495610B; DK0974842T3; DE69631443D1; ZA967085B; EP0974842B1; EP0974842A4; US6060254A

Description

明細書発明の名称

ウィルス凝集検査薬およびウィルス検査用キット技術分野

本発明は、ウィルス感染者血液中に形成された抗ウィルス抗体を介さずに血液中のウィルスを直接、感度良く検出することのできるウィルス凝集検査薬および該検査薬を含むウィルス検査用キットに関するものである。本発明のウィルス凝集検査薬は、 D N Aウィルス. R N Aウィルスのいずれのタイプのウィルスにも有効であるが、特に持続性感染を引き起こすウィルスを検出するのに有効であり、なかでも、非 A非 B型肝炎の主な原因となる C型肝炎ウィルス（ H C V ) や、後天性免疫不全症候群（エイズ）ウィルス（ H I V ) の検出に有用である。背景技術

ウィルス疾患のうちでも、近年、特にその治療法が問題となっている上記 C型肝炎やエイズは、ウィルスそのものの変異が撖しく、長年の間その実体が不明であったこともあり、二次感染が多発し感染者の増加を有効に防止することができていなかった。しかしながら近年における遣伝子解析技術の著しい発展により、これらウィルスの一次構造が次々と解明されるに至って、その検出法がようやく確立され、二次感染の増大にも歯止めがかかる様になった。即ち、上述したいずれのウィルスにおいても、変異の激しい表層の蛋白質に比べて核蛋白質は一次構造をよく保っていることが分かり、更に遺伝子工学技術の発展によってこれら蛋白質の大量生産が可能になつたことから、表層の蛋白質に加えて核蛋白質を抗原として用い、患者の血清中に形成された抗ウィルス抗体を検出する方法が開発され、現在、日常検査法として普及している。

しかしながら、これらの検査法は、ウィルス感染者の体内に、ゥィルスが感染してから抗体ができるまでの期間、少なくとも 2 ~ 3 力月間は、感染の有無を判定することができず、二次感染を有効に防ぐことができないという問題を持つだけでなく、膝原病などの自己免疫疾患の場合、偽陽性が現れやすく診断がつきにくいのが現状である。また、母子感染の場合、子供は親から受け接いだ抗体を持つているために、このような抗体検査だけでは、感染しているかどうかの正確な判断が得られないという問題も残る。

一方、これらのウィルスの構成蛋白質のよかで、一次構造が比較的良く保存されている逆転写酵素（リバーストランスクリブタ一ゼ： R T ) を、ポリメラーゼチェーンリアクション（ P C R ) 法により、それらの遺伝子を增幅して検出する R T— P C R法が用いられているが、前述した抗体検出法に比べて簡便なものとは言い難い。

そこで、従来の患者血清中の抗ウィルス抗体を検出する診断法や R T - P C R法に代わって、ウィルスそのものを直接検出できる新現な方法を提供することが切呈されている。発明の開示

本発明は上記事情に着目してなされたものであって、その目的は、患者血清中に生成される抗ウイルス抗体を検出する従来の抗体検査法に代わって、抗体を介さずに直接、短時間で感度良く血清中のゥィルスを検出することのできる新規なウィルス凝集検査薬を提供することにある。

上記課題を解決することのできた本発明のウイルス凝集検査薬とは、微小固体担体の表面に、ウィルス表層の蛋白質に親和性のある分子を固定させたものであるところに要旨を有するものである。

本発明のウィルス凝集検査薬は、パルヴォウィルス、パポヴァゥィルス、ヘルぺスウィルス、 B型肝炎ウィルス等の D N Aウィルス；パラミクソウィルス、トガウィルス、レトロウイルス（エイズゥィルスゃヒト T細胞白血病ウィルス等）、 C型肝炎ウィルス等の R N Aウィルスを検出するのに有効であり、なかでも、エイズウィルスゃ C型肝炎ウィルスの検出に好適に用いられる。

本発明に用いられるウイルスの外套蛋白質に親和性のある分子としては、抗体等の蛋白質、またはペプチドが推奨される。

また、本発明のウィルス検査用キットは、上述したウィルス凝集検査薬および陽性対照試薬を含んでなるところに要旨を有するものである。このキットには、更に陰性対照試薬を含むことが好ましい。

このうち陽性対照試薬として好ましいのは、微小固体担体の表面に、ウィルス表層の蛋白質の一部または全部を固定させたものであり、一方、陰性対照試薬として好ましいのは、ウィルス表層の蛋白質の一部または全部を含有するものである。発明を実施する為の最良の形想

本発明者らは、従来の抗体検査法に代わって、血清中のウィルスを直接検出することのできる新規な検査薬について鋭意検討したところ、感染者の血液中に存在するウィルス表層の蛋白質を介して、この領域に親和性のある分子で標識された担体が凝集することによつて、該ウィルスを直接、短時間で感度良く検出することができることを見出し、本発明を完成したのである。従って、本発明においては、表層の蛋白質を有するウィルスであって、その表層の蛋白質に親和性を有する分子が存在し、且つ該分子が固定される担体が存在するものであれば全て本発明の範囲内に包含される。

上述した様に本発明のウィルス凝集検査薬は、微小固体担体の表面に、ウィルスの外套蛋白質に親和性のある分子を固定させた点に特徴を有するものである。

尚、以下の記載では便宜上、上述した親和性のある分子を固定していない微小固体担体を未標識担体と呼び、これに対してウィルス表層の蛋白質に親和性分子を固定した担体（本発明担体）を分子標識担体と呼ぶ場合がある。

ここで、ウィルス表層の蛋白質に親和性のある分子とは、表層の蛋白質を認識して電気化学的または化学的に結合することのできる分子を意味し、その様な分子としては、例えばポリクローナル/モノクローナル抗体、 C D 4 ( H I Vにおいては、リンパ球のバインディングサイトとして知られている）等の可溶性蛋白質、ボリぺプチド等が挙げられる。尚、本発明で対象となるウィルスの様に変異が激しく抗体の作製が困難であったものについては、特定領域のぺプチドのみを抗原に用いて抗体を効率よく作製する方法が Tarn らによって提案されており、本発明においてもその適用が可能である (James P. Tam. I n Synthet ic Pe tide: Approaches to Biological Problems, ed. J. P. Tam and E. T. a i se r, Multiple antigen peptide systems: A model design for synthetic peptide vaccine and immunoassay, pages 3- 1 B, 1989, Alan R. L i s s, In )。

また、本発明に用いられる未標識担体としては、ラテックス、ゼラチン、ポリスチレン、金コロイド等、通常の凝集法に用いられる球状担体であれば特に限定されない。これら担体のサイズは、 0. 3 η π！〜 2 0 # mの範囲内であれば任意のサイズを使用することが可能であり、凝集判定方法によって好適なサイズを適宜選択し得る。例えば凝集の有無を肉眼で判定する場合には、肉眼で容易に観察することのできる 0 . 2— 3 # mのサイズを用いることが好ましく、一方、分光学的手法を用いて凝集の有無を判定する場合には 0 . 2 # m以下でも構わない。また、これらの担体は何色に着色されていても良く、どの判定方法を選択するかによって適宜決定されることが好ましい。

これらの未標識担体は、精製水や緩衝液、血清等の溶液中に予め分散させておいても良いし、あるいは凍結乾燥品を、用時、適当な溶媒（例えば精製水や緩衝液等）を加えて溶解しても良い。

次に、上述した本発明のウィルス凝集検査薬を含有するキットを用いて、ウィルスを検出する方法について説明する。

本発明のウィルス検査用キットには、上記ウィルス凝集検査薬の他に、陽性対照試薬、および必要に応じて.陰性対照試薬が含まれる。

このうち陽性対照試薬としては、通常の抗体検査法の場合と同様、標的ウイルスを有する患者血清に加熱処理や化学処理等を施して非感染性状憩とし、しかも判定可能な状態にしたものを用いることもできるが、本発明者らの研究によれば、未標識担体の表面に、ウイルス表層の蛋白質の一部または全部を固定した、いわゆる偽ウィルスモデルの使用が、より効果的であることが分かった。即ち、検査時における取扱い上の安全性や陽性対照としての品質確保等を考慮すれば、後者の偽ウィルスモデルを使用することが推奨される。

また、本発明に用いられる陰性対照試薬としては、標的ウィルスを含まない健常者の血清、緩衝液、塩類含有水溶液、ウィルスの外套蛋白質を含有するもの等が挙げられる。これらのうち、本発明キットにおける陰性対照としての品質確保といった観点からすれば、表層の蛋白質の一部または全部を含有するものを使用することが同様の趣旨で推奨され、具体的には、精製水や緩衝液、血清等の溶液中に予め分散させておいても良いし、あるいは凍結乾燥品を、用時，適当な溶媒（例えば精製水や緩衝液等）を加えて溶解しても良い。本発明のウィルス検査用キットの具体例として、 H I V検査用キットの一例を挙げ、その使用方法を説明する。

[ H I V検査用キット ]

構成品目：

①抗 g p 1 2 0 -分子標識 L a t e X試薬、 2 m l

②陽性対照 [偽 H I V : g p l 2 0標識—金コロイド] 、

5 0 0 ^ 1

③陰性対照 [ g p l 2 0 ] 、 5 0 0 / 1

④凝集板、 2 0枚

⑤検体希釈液、 5 0 m l

使用方法：

1. 分子標識 L a t e X試薬は、室温に放置し常温に戻してから使用する。

また添加前には、泡立てない様に混和し、均一な懸状想にしておく。

2. 凝集板のサークル内に、上記分子標識 L a t e x試薬を 2 0 # 1加える。

3. その上に、挨体あるいは S性対照/陰性対照をそれぞれ、

2 0 # 1 ずつ加え、マイクロピペットの先端で均一に混和する。

4. 凝集板を手に持って、 1 ~ 2分間口一リング混和する。

5. 陽性対照試薬については、凝集像がはっきりと認められると共に、陰性対照については凝集像が認められないことを確認する。

本発明のウィルス凝集検査薬は、 D N Aウィルス、 R N Aウィルスのタイプを問わず、これらウィルスを検出するのに適用できるが、なかでも持繞性感染症を引き起こすウィルスを検出するのに好適に用いられる。具体的には、ノ、'ルヴ才ウィルス（パルヴォウィルス属に属するキルハムウィルス等）、パポヴァウィルス（パピローマウィルス厲に属するショープ乳頭腫ウィルス、ポリオ一マウィルス属に属するポリオ一マウィルス等）、ヘルぺスウィルス（単純へルぺスウィルス I型、単純へルぺスウィルス I 1型、水痘帯状疱疹ウィルス、サイトメガロウイノレス、 Epstein-Barrゥイノレス等）、へハ ' ドナウィルス（ B型肝炎ウィルス等）等の D N Aウィルス；パラミクソウィルス（ニューモウィルス属に厲する R Sウィルス、パラミクソウィルス属に属するセンダイウィルス、モルビリウィルス属に属する麻疹ウィルス等）、トガウィルス（ルビウィルス属に属する風疹ウィルス、フラヴィウィルス属に属する B 脳炎ウィルス等）、レトロウィルス（エイズウイルス、ヒト T細胞白血病ウィルス等）、ァレナウィルス（ァレナウィルス属に属するリンパ球脈絡髄膜炎ゥィルス等）、 C型肝炎ウィルス等の R N Aウィルスが挙げられ、特に、エイズウイルスや C型肝炎ウィルスを検出するのに有効である。以下、製剤例および実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、下記実施例及び試験例は本発明を制限するものではなく、前，後記の趣旨を ¾股しない範囲で変更実施することは全て本発明の技術的 ®囲に包含される。

製剤例 1

活性化ラテックスビーズ（ポリサイエンス社製、粒径 0. 2 ^ m) 懸海液に、抗 g p 1 2 0モノクローナル抗体（ l m g Zm l のほう酸緩衝液、 p H 8. 3 ) を等量混和し、 3 7 で 1時間反応させた。反応終了後、更にゥシ血清アルブミン（ 1 O m g Zm l ) を加えてその濃度が 0. 1 %になる様に調整し、未反応活性基のブロッキング化を室温で 3 0分間行った。その後、遠心操作を操り返して未反応物を除去すると共に、リン酸緩衝液（ P H 7. 4 ) に置換して、 H I V検査薬を得た。

陽性対照としては、 0. 3 mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、バキュ口バイラスで発現させたリコンビナント g p 1 2 0を反応させて標識したものを調裂し、陰性対照としては、該リコンビナント g p i 2 0をリン酸緩街液（ p H 7. 4 ) に溶解したものを調製した。

製剤例 2

アビジン標識ラテックスビーズ（Molecular Probe 社製）懸痴液に、ピオチニル化した抗 N S ( H C V ) モノクローナル抗体を等量混和し、 3 7てで 1時間反応させることにより H C V検査薬を謂裂した。陽性対照としてはリコンビナント N Sを、陰性対照としてはヒトアルブミンを夫々金コロイドに標識して用いた。尚、 N S とは non structure protein の略称である ₀

製剤例 3

アルデヒド基修飾ポリスチレンビーズ（ Inter facial Dynamics社製. 粒径 0. 2 # m) 懸 S液と抗 g p 1 2 0モノクローナル抗体 ( l m g Z m l精製水）を等量混和し、更に、トリェチルァミン ( 1 0 ra g m 1 精裂水）を、その濃度が 0. 1 %になる様に加え、室温で 1 時間反応させることにより H I V検査薬を調製した。陽性対照ノ陰性対照の調製は、製剤例 1 に準じて行った。

製剤例 4

マレイミド化金コロイド（Molecular Probe 社製，粒径 3 n m ) に、抗 N S (H C V ) モノクローナル抗体を用いて調製した S H基導入 F a b ' 抗体を反応させることにより H C V検査薬を調製した < 陽性/陰性対照の調製は、製剤例 2に準じて行った。

製剤例 5 アミノ基修飾ラテックスビーズ（ Inter facial Dynamics社製，粒径 0. 2 iL m ) をダルタールアルデヒドで処理した後抗 g p 1 2 0 モノクローナル抗体（ 1 m gノ m 1 のほう酸緩衝液、 p H 8. 3 ) を等量混和し、反応させた。反応終了後、トリェチルァミンで未反応活性基をブロックして H I V検査薬を得た。陽性対照 Z陰性対照の調製は、製剤例 1 に準じて行った。

製剤例 6

活性化ラテックスビーズ（Polysciences社製，粒径 2 ;/ m ) 懸¾液に、バキュ口バイラスで発現したリコンビナント C D 4 ( 1 0 0 g /m 1 のほう酸緩街液， p H 8. 3 ) を等量混和し、 3 7てで 1 時間反応させることにより H I V検査薬を調製した。陽性 Z陰性対照の謂製は、製荊例 1 に準じて.行った。

製剤例 7

金コロイド（Polysciences社製. 粒径 0. 0 3 # 111) 懸«液に、抗 g p 1 2 0ポリぺプチド溶液を等量混和した後、 3 7てで 1 時間反応させることにより H I V検査薬を調製した。陽性/陰性対照の調製は、製剤例 1 に準じて行った。

製剤例 8

活性化ラテックスビーズ（Po sciences社製，粒径 0. 2 # m) 懸 S液に、抗 N S (H C V ) モノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7 で 1時間反応させることにより H C V検査薬を調製した < 陪性ノ陰性対照の調製は、製剤例 2に準じて行った。

製剤例 9

活性化ラテックスビーズ（Polysciences社製. 粒径 0. 2 # m ) 懸濁液に、抗 H B Vモノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7 てで 1 時間反応させることにより H B V検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 mの金コロイド（NanoProbe 社製）に H B S抗原を反応させて標識したものを調製し、陰性対照としては、ヒト血清アルブミンを金コロイドに反応させて標識したものを調製した。

製剤例 1 0

活性化ラテックスビーズ（Polysc iences社裂，拉径 0. 2 m ) 懸 «液に、抗単純ヘルぺスゥィルス I 型モノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7てで 1時間反応させることにより単純へルぺスウィルス I型検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 # mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、ベロ細胞で培養した単純へルぺスウィルス I 型を部分精製したものを反応させ、標¾したものを調裂した。陰性対照の調製は、製剤例 9に準じて行った。

製剤例 1 1

活性化ラテックスビーズ（Polysc iences社製. 粒径 0. 2 μ χη ) 懸濁液に、抗単純へルぺスウィルス I I型モノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7てで 1 時間反応させることにより単純へルぺスウィルス I I型検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 # mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、ベロ細胞で培養した単純へルぺスウィルス I I型を部分精製したものを反応させ、標識したものを調製した。陰性対照の調製は、製剤例 9 に準じて行った。

製剤例 1 2

活性化ラテックスビーズ（Po sciences社製，粒径 0. 2 # m ) 懸 S液に、抗水痘帯状疱疹ウィルス I I型モノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7 で 1 時間反応させることにより水痘帯状疱疹検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、ヒト繳維芽細胞で培養した水痘帯状疱疹ウィルスを部分精製したものを反応させ、標識したものを調製した。陰性対照の調製は、製剤例 9に準じて行った。

製剤例 1 3

活性化ラテックスビーズ（Polysciences社製，粒径 0. 2 # m ) 懸 «3液に、抗サイトメガロウィルスモノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7 で 1 時間反応させることによりサイトメガロウイルス検査薬を謂製した。

B&性対照としては、 0. 3 # mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、ヒト雄維芽細胞で培養したサイトメガロウイルスを部分精製したものを反応させ、標識したものを調製した。陰性対照の調裂は、製剤例 9に準じて行った。

製剤例 1 4

活性化ラテックスビーズ（Polysciences社製，粒径 0. 2 m ) 懸濁液に、抗 Epstein-Barrウィルスそノクロ一ナル抗体液を等量混和した後、 3 7 で 1 時間反応させることにより Epstein-Bar rウイルス検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 μ mの金コロイド（Nan oP robe 社製）に、感染細胞から Epstein- Barrウィルスを部分精裂したものを反応させ、標識したものを調製した。陰性対照の調製は、製剤例 9に準じて行った。

製剤例 1 5

活性化ラテックスビーズ（ Polysciences社製，粒径 0. 2 // m ) 懸濁液に、抗麻疹ウィルスモノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7てで 1 時間反応させることにより麻疹ウィルス検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、感染細胞から麻疹ウィルスを部分精製したものを反応させ、標識したものを調製した。陰性対照の調製は、製剤例 9に準じて行つた。

製剤例 1 6

活性化ラテックスビーズ（Polysciences社製. 粒径 2 # m ) 懸 S液に、抗ヒト T細胞白血病ウィルス（H T L V— 1 ) モノクローナル抗体液を等量混和した後、 3 7 で 1時間反応させることによりヒト T細胞白血病ゥィルス検査薬を調製した。

陽性対照としては、 0. 3 mの金コロイド（NanoProbe 社製）に、感染細胞からヒト T細胞白血病ウィルスを部分精製したものを反応させ、標識したものを調 Sした。陰性対照の調製は、製剤例 9 に準じて行った。

例 1

培養された H I V保存株（ H T L V - MI B ) を用いて、製剤例 7に準じて作製した H I V検査薬の感度試験を行った。尚、この保存株の培養上清は、既知の H I V抗体検査薬（セロディア H I V、富士レビォ社製）では陰性を示す。試験を実施するに当たっては、製剤例 7に記載の陽性対照では陽性を示し、陰性対照では陰性を示すことを確認すると共に、 H I V— 2型である L A V - 2には全く反応しないことを確認したうえで、この保存株の培養上清を種々の希釈倍率で希釈し、製剤例 7の検査薬と反応させた。その結果を表 1に示す。以下の表では、表中、 +は降性を、 -は陰性を、夫々示す。 H I V (雜倍率） 101 102 !03 ，。4 105 1。6 gpl20/培清

C陰 ¾¾f照:） gp，20/金コロイド（対照）

+ + + + + +

lOO/tg protein/ml

HTLV -mB(HIV-l)保 #¾培¾±清

+ + + + +

(104-5個 TC I D_seZml)

LAV-2(HIV-2)保養上清

(10*-5佃 TC I D_s, ml) の希釈倍率下においても、感度良く検出することができた。尚、

H T L V - I I I B保存ウィルス（ 1 0 " ⁵ 個 T C I D _s。/m l ) の希釈限界倍率は 1 0⁵ 倍であり、この希釈倍率は、ウィルスが存在すると考えられる限界値であった。

実施例 2

製剤例 7の H I V検査薬を用い、 H T L V - M I B保存株の培養上清（ 1 0 *— ^s 個 T C I D _{S 0}/m 1 ) を非働化したヒト血清で 1 0 倍ずつ順次希釈した場合の感度を調べた。その結果を表 2に示す。

表 2 非港化ヒト血清での希釈倍率 101 102 Ιθ3 10⁴ 1。5 1θ6

HTLV- BIB (10^-5個 TCID_s。Zml) + + + +

一表 2の結果から明らかな様に、本発明の検査薬を用いれば H I V をヒト血清のみで 1 0. 0 0 0倍希釈してもその感度に彭饕を及ぼすことがなく検出可能であることが分かった。

実施例 3

製剤例 8の H C V検査薬を用い、表 3に示す種々の患者由来の血清に対する感度試験を行った。その結果を表 3に併記する。

表 3

* SLE _:全身 tt!E斑性ループス表 3に示す様に、本発明の H C V検査薬を用いれば、 C型肝炎のみを特異的に検出できることが分かった。

実施例 4

製剤例 9の H B V校査薬を用い、表 4 に示す種々の患者由来の血清に対する感度試験を行った。その結果を表 4に併記する。表 4

* SLE：全斑性ルーブス表 4に示す様に、本発明の H B V検査薬を用いれば, B型肝炎のみを特異的に検出できることが分かった。実施例 5

表 5に示す種々のウィルス検査薬を用い、表 5 に示す種々の陽性対照に対する特異性試験を行った。その結果を表 5 に併記する。

表 5

表 5 に示す様に、本発明の検査薬を用いれば、対象となるウィルスのみを特異的に検出できることが分かった。

実施例 6

表 6 に示す種々のウイルス検査薬を用い、表 6に示す種々の陽性対照に対する特異性試験を行った。その結果を表 6に併記する。

表 6

表 6 に示す様に、本発明の検査薬を用いれば、対象となるウィルスのみを特異的に検出できることが分かった。

実施例 7

表 7 に示す種々のウィルス検査薬を用い、表 7 に示す種々の患者由来の血清に対する感度試驗を行った。その結果を表 7に併記する _c

表 7

表 7 に示す様に、本発明の検査薬を用いれば、対象となるウィルスのみを特異的に検出できることが分かった。産業上の利用可能性

本発明は以上のように構成されており、従来の抗体検査法に比べて、以下の様な優れた利点を有するものである。

①本発明では抗体を介さずに直接ウィルスを検出するものであるから、従来の抗体検査法の様に、患者の血清中に抗体が形成されるまで（約 2 〜 3力月）のタイムラグを埋めることができ、感染後、速やかに標的ウィルスを検出することが可能になる。

②母子感染経路によつて感染した子供や膠原病などの自己免疫疾患患者等の様に、従来の抗体検査法ではウィルスの検出か困難であつた場合においても、感度良く検出することができる。

③從来の抗体検査法では検出不可能であつた感染力のあるウィルスを感度良く検出することができる。

④従来の抗体検査法では、陽性対照として標的ウィルスを有する患者血清を用いなければならなかったのに対し、本発明によれば、微小固体担体の表面に、ウイルス表層の蛋白質を固定させたものを使用することができるので、検査側の安全性を確保するといつた観点からも非常に推奨される。

Claims

請求の範囲

1. 微小固体担体の表面に、ウィルス表層の蛋白質に親和性のある分子を固定させたものであることを特徴とするウィルス凝集検査薬。

2. 前記ウィルスが、 D N Aウィルスまたは R N Aウィルスである請求項 1 に記載のウィルス凝集検査薬。

3. 前記 D N Aウィルスが、パルヴォウィルス、パポヴァウィルス、ヘルぺスウィルスまたは B型肝炎ウィルスである請求項 2 に記載のウィルス凝集検査薬。

4. 前記 R N Aウィルスが、パラミクソウィルス、トガウィルス、レトロウィルスまたは C型肝炎ウィルスである請求項 2 に記載のゥィルス凝集検査薬。

5. 前記レトロウイルスが、エイズウイルスまたはヒト T細胞白血病ウィルスである請求項 4 に記載のウイルス凝集検査薬。

6. 前記親和性のある分子が、蛋白質またはペプチドである請求項 1 ~ 5のいずれかに記載のウィルス凝集検査薬。

7. 請求項 1 〜 6のいずれかに記載のウィルス凝集検査薬、および隙饪对照試楽を宫んてなることを特徴とするウィルス挟査 ffl午ッ

8. 更に、陰性対照試薬を含んでなる請求項 7 に記載のウィルス検査用キット。

9. 前記陽性対照試薬が、微小固体担体の表面に、ウィルス表層の蛋白質の-一部または全部を固定させたものである請求項 7 または 8 に記載のウィルス検査用キット。

1 0. 記陰性対照試薬が、ウィルス表層の蛋白質の一部または全部を含有するものである請求項？〜 9のいずれかに記載のウィルス検査用キット。