JPH11218534A - 非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法 - Google Patents
非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法Info
- Publication number
- JPH11218534A JPH11218534A JP3237298A JP3237298A JPH11218534A JP H11218534 A JPH11218534 A JP H11218534A JP 3237298 A JP3237298 A JP 3237298A JP 3237298 A JP3237298 A JP 3237298A JP H11218534 A JPH11218534 A JP H11218534A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sod
- protein
- absorbent
- immunoassay
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
(57)【要約】
【課題】 検体中の抗体の測定において、ＳＯＤ融合蛋
白質が結合した免疫測定試薬に添加する非特異反応吸収
剤の提供。 【解決手段】 一般式 Ｈ2 Ｎ−Ａ−ＣＯ2 Ｈ （Ｉ）
（式中、Ａは架橋性残基である。）で表されるアミノカ
ルボン酸化合物からなる非特異反応吸収剤をＳＯＤ融合
蛋白質が結合した免疫測定試薬を用いる溶液に添加し測
定を行う。
白質が結合した免疫測定試薬に添加する非特異反応吸収
剤の提供。 【解決手段】 一般式 Ｈ2 Ｎ−Ａ−ＣＯ2 Ｈ （Ｉ）
（式中、Ａは架橋性残基である。）で表されるアミノカ
ルボン酸化合物からなる非特異反応吸収剤をＳＯＤ融合
蛋白質が結合した免疫測定試薬を用いる溶液に添加し測
定を行う。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、スーパーオキサイ
ド・ディスムターゼ（ＳＯＤ）融合蛋白質が結合した試
薬を含む免疫測定に用いる一般式 Ｈ2 Ｎ−Ａ−ＣＯ2 Ｈ （Ｉ） （Ａは架橋性残基である）で表されるアミノカルボン酸
化合物からなる非特異反応吸収剤、及びこの吸収剤を用
いる免疫測定法に関する。
ド・ディスムターゼ（ＳＯＤ）融合蛋白質が結合した試
薬を含む免疫測定に用いる一般式 Ｈ2 Ｎ−Ａ−ＣＯ2 Ｈ （Ｉ） （Ａは架橋性残基である）で表されるアミノカルボン酸
化合物からなる非特異反応吸収剤、及びこの吸収剤を用
いる免疫測定法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、検体中の抗原、抗体等を免疫測定
する方法では、対応する抗体、抗原等を免疫測定用の固
相に結合させ試薬と検体とを反応させ、この固相に免疫
反応によって免疫複合体を形成して結合する抗原、抗体
等を測定することが行われている。従って検体中の抗体
を測定する場合には、抗原を結合した固相が用いられ
る。この抗原としては、例えば生体や培養液から得られ
た天然型蛋白質、遺伝子組換え法によって製造した組換
え蛋白質、アミノ酸を縮合反応させて製造した合成蛋白
質等が知られている。近年、遺伝子組換え蛋白質（以下
組換え蛋白質という）は検体中の抗体との特異的な反応
性が高く、均一な性質を有する蛋白質を大量に製造する
ことができるため広く用いられるようになった。
する方法では、対応する抗体、抗原等を免疫測定用の固
相に結合させ試薬と検体とを反応させ、この固相に免疫
反応によって免疫複合体を形成して結合する抗原、抗体
等を測定することが行われている。従って検体中の抗体
を測定する場合には、抗原を結合した固相が用いられ
る。この抗原としては、例えば生体や培養液から得られ
た天然型蛋白質、遺伝子組換え法によって製造した組換
え蛋白質、アミノ酸を縮合反応させて製造した合成蛋白
質等が知られている。近年、遺伝子組換え蛋白質（以下
組換え蛋白質という）は検体中の抗体との特異的な反応
性が高く、均一な性質を有する蛋白質を大量に製造する
ことができるため広く用いられるようになった。
【０００３】組換え蛋白質は、目的蛋白質を発現する遺
伝子を組み込んだプラスミドを含む大腸菌を培養し、培
養液中に産生される蛋白質を精製して取得することがで
きる。その際、蛋白質を効率よく発現させるために、製
造される蛋白質の上流の発現部位にチオレドキシン（Ｔ
ＲＸ，特表平５−５０７２０９号）、ＳＯＤ（Ｋｕｏ，
Ｇ；Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４，３６６−３６４（１９８
９））、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳ
Ｔ，特表平１−５０３４４１号）等のプロモーター配列
を接続することが行われている。殊に肝炎ウイルス蛋白
質を産生に利用されるプロモーターとしてはＳＯＤが広
く用いられていた。その結果、ＳＯＤプロモーターを用
いる遺伝子組換え法によって取得される蛋白質には、Ｓ
ＯＤが付加した蛋白質（以下ＳＯＤ融合蛋白質という）
が得られることがあった。
伝子を組み込んだプラスミドを含む大腸菌を培養し、培
養液中に産生される蛋白質を精製して取得することがで
きる。その際、蛋白質を効率よく発現させるために、製
造される蛋白質の上流の発現部位にチオレドキシン（Ｔ
ＲＸ，特表平５−５０７２０９号）、ＳＯＤ（Ｋｕｏ，
Ｇ；Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４，３６６−３６４（１９８
９））、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳ
Ｔ，特表平１−５０３４４１号）等のプロモーター配列
を接続することが行われている。殊に肝炎ウイルス蛋白
質を産生に利用されるプロモーターとしてはＳＯＤが広
く用いられていた。その結果、ＳＯＤプロモーターを用
いる遺伝子組換え法によって取得される蛋白質には、Ｓ
ＯＤが付加した蛋白質（以下ＳＯＤ融合蛋白質という）
が得られることがあった。
【０００４】上記方法で得られたＳＯＤ融合蛋白質は粒
子と結合させて免疫測定用の試薬が製造されている。こ
の試薬では、ＳＯＤ自体が抗原性を持ち、このＳＯＤと
ヒト血清中に含まれる反応物質とがしばしば非特異反応
を起こし、その結果測定精度の高い結果が得られないと
いう問題点があった。そこで、ＳＯＤ融合蛋白質を使用
した試薬では、ＳＯＤ又は熱、酸、アルカリ等によって
物理的又は化学的に処理した変性ＳＯＤを反応系内に添
加して非特異反応を同時吸収する方法が用いられてい
た。
子と結合させて免疫測定用の試薬が製造されている。こ
の試薬では、ＳＯＤ自体が抗原性を持ち、このＳＯＤと
ヒト血清中に含まれる反応物質とがしばしば非特異反応
を起こし、その結果測定精度の高い結果が得られないと
いう問題点があった。そこで、ＳＯＤ融合蛋白質を使用
した試薬では、ＳＯＤ又は熱、酸、アルカリ等によって
物理的又は化学的に処理した変性ＳＯＤを反応系内に添
加して非特異反応を同時吸収する方法が用いられてい
た。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】これらのＳＯＤ又は変
性ＳＯＤは、疎水性が高く吸収剤として反応溶液に添加
するためには可溶化剤として界面活性剤、尿素、塩類等
を溶液に添加することが必要であった。これら可溶化剤
は、測定に関与する免疫反応とともに、吸収剤の反応も
低下させ、また添加されたＳＯＤ又は変性ＳＯＤは、溶
液中で保存すると徐々に変性が起こり吸収剤としての活
性が低下することが認められた。
性ＳＯＤは、疎水性が高く吸収剤として反応溶液に添加
するためには可溶化剤として界面活性剤、尿素、塩類等
を溶液に添加することが必要であった。これら可溶化剤
は、測定に関与する免疫反応とともに、吸収剤の反応も
低下させ、また添加されたＳＯＤ又は変性ＳＯＤは、溶
液中で保存すると徐々に変性が起こり吸収剤としての活
性が低下することが認められた。
【０００６】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは鋭
意研究した結果、前記一般式（Ｉ）で表されるアミノカ
ルボン酸化合物が、ＳＯＤ融合蛋白質を結合した免疫測
定試薬を用いた測定における優れた非特異反応吸収剤と
なることを見出し本発明を完成した。
意研究した結果、前記一般式（Ｉ）で表されるアミノカ
ルボン酸化合物が、ＳＯＤ融合蛋白質を結合した免疫測
定試薬を用いた測定における優れた非特異反応吸収剤と
なることを見出し本発明を完成した。
【０００７】また、本発明は、ＳＯＤ融合蛋白質が結合
した試薬を含む測定溶液に、前記一般式（Ｉ）で表され
るアミノカルボン酸化合物からなる免疫測定用の非特異
反応吸収剤を添加する免疫測定法を提供する。
した試薬を含む測定溶液に、前記一般式（Ｉ）で表され
るアミノカルボン酸化合物からなる免疫測定用の非特異
反応吸収剤を添加する免疫測定法を提供する。
【０００８】本発明の非特異反応吸収剤は、アミノ基と
カルボキル基とを有するアミノカルボン酸化合物であ
り、前記一般式（Ｉ）で表されるアミノカルボン酸化合
物中Ａは各種架橋性残基を表す。この架橋性残基として
は、置換もしくは無置換の直鎖状、分枝鎖状又は環状の
炭素数３〜１２の炭化水素基を挙げることができる。直
鎖状の炭化水素基としては、例えば炭素数３から８の炭
化水素であり１，３−プロパンジイル基、１，４−ブタ
ンジイル基、１，５−ペンタンジイル基、１，６−ヘキ
サンジイル基、１，７−ヘプタンジイル基、１，８−オ
クタンジイル基等を挙げることができる。分枝鎖及び環
状の炭化水素基としては、炭素数４〜１２の炭化水素基
であり、例えば１，３−ブタンジイル基、２−メチル−
１，５−ペンタンジイル基、２−メチル−１，６−ヘキ
サンジイル基、２−メチル−１，７−ヘプタンジイル
基、２−メチル−１，８−オクタンジイル基、
カルボキル基とを有するアミノカルボン酸化合物であ
り、前記一般式（Ｉ）で表されるアミノカルボン酸化合
物中Ａは各種架橋性残基を表す。この架橋性残基として
は、置換もしくは無置換の直鎖状、分枝鎖状又は環状の
炭素数３〜１２の炭化水素基を挙げることができる。直
鎖状の炭化水素基としては、例えば炭素数３から８の炭
化水素であり１，３−プロパンジイル基、１，４−ブタ
ンジイル基、１，５−ペンタンジイル基、１，６−ヘキ
サンジイル基、１，７−ヘプタンジイル基、１，８−オ
クタンジイル基等を挙げることができる。分枝鎖及び環
状の炭化水素基としては、炭素数４〜１２の炭化水素基
であり、例えば１，３−ブタンジイル基、２−メチル−
１，５−ペンタンジイル基、２−メチル−１，６−ヘキ
サンジイル基、２−メチル−１，７−ヘプタンジイル
基、２−メチル−１，８−オクタンジイル基、
【化１】 等を挙げることができる。さらにこれらの炭化水素基に
は置換基を有していてもよく、例えば、ハロゲン原子、
アミノ基、水酸基、メルカプト基、カルボキシル基、カ
ルバモイル基等を挙げることができる。置換基を有する
アミノカルボン酸化合物としては、例えばリジン、β−
リジン等のアミノ酸化合物から該当する化合物を選択し
て使用することもできる。
は置換基を有していてもよく、例えば、ハロゲン原子、
アミノ基、水酸基、メルカプト基、カルボキシル基、カ
ルバモイル基等を挙げることができる。置換基を有する
アミノカルボン酸化合物としては、例えばリジン、β−
リジン等のアミノ酸化合物から該当する化合物を選択し
て使用することもできる。
【０００９】非特異反応吸収剤は、免疫測定の際に反応
溶液中に添加されることができ、例えば血清希釈液中、
試薬溶液中、検体液中等に添加することができる。この
吸収剤を血清希釈液の添加する場合には、１０ｍＭ〜５
００ｍＭ程度添加し用いることが好ましい。
溶液中に添加されることができ、例えば血清希釈液中、
試薬溶液中、検体液中等に添加することができる。この
吸収剤を血清希釈液の添加する場合には、１０ｍＭ〜５
００ｍＭ程度添加し用いることが好ましい。
【００１０】本発明で使用するＳＯＤ融合蛋白質は、Ａ
型、Ｂ型、Ｃ型、Ｇ型等の肝炎ウイルス蛋白質、ＨＩＶ
−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ等の
レトロウイルス蛋白質、梅毒トレポネーマ（ＴＰ）抗原
等とＳＯＤが融合した抗原を挙げることができる。これ
らのＳＯＤ融合蛋白質は、遺伝子組換え法により製造し
た周知の組換え蛋白質を挙げることができる。
型、Ｂ型、Ｃ型、Ｇ型等の肝炎ウイルス蛋白質、ＨＩＶ
−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−Ｉ、ＨＴＬＶ−ＩＩ等の
レトロウイルス蛋白質、梅毒トレポネーマ（ＴＰ）抗原
等とＳＯＤが融合した抗原を挙げることができる。これ
らのＳＯＤ融合蛋白質は、遺伝子組換え法により製造し
た周知の組換え蛋白質を挙げることができる。
【００１１】前記ＳＯＤ融合蛋白質は、周知の免疫測定
用の固相に結合させて試薬を製造することができる。そ
の結合には、組換え蛋白質と固相の官能基を架橋剤、縮
合剤等を用いて化学結合させる方法、物理吸着法等を挙
げることができる。
用の固相に結合させて試薬を製造することができる。そ
の結合には、組換え蛋白質と固相の官能基を架橋剤、縮
合剤等を用いて化学結合させる方法、物理吸着法等を挙
げることができる。
【００１２】また、本発明の非特異反応吸収剤は、免疫
測定法、例えば間接凝集免疫測定法（ＲＨＡ，ＰＡ）、
酵素免疫測定法、放射免疫測定法、イムノクロマト法、
金属コロイド粒子を標識物とした標識免疫測定法等の各
種測定法に使用することができる。
測定法、例えば間接凝集免疫測定法（ＲＨＡ，ＰＡ）、
酵素免疫測定法、放射免疫測定法、イムノクロマト法、
金属コロイド粒子を標識物とした標識免疫測定法等の各
種測定法に使用することができる。
【００１３】
【実施例】以下実施例により本発明を更に詳細に説明す
る。
る。
【００１４】実施例１ ＨＣＶ抗体間接凝集測定試薬の
製造 （ＨＣＶ抗原の調製）Ｋｕｏ，Ｇ；Ｓｃｉｅｎｃｅ，２
４４，３６６−３６４（１９８９）に記載の方法に従い
ＨＣＶ Ｃ２００蛋白質にＳＯＤを融合した蛋白質を酵
母菌により発現させ、精製してＣ２００−ＳＯＤ融合蛋
白質を得た。同様にＨＣＶ Ｃ２２−３コア蛋白質にＳ
ＯＤを融合した蛋白質を酵母菌により発現させ、精製し
てＣ２２−３−ＳＯＤ融合蛋白質を得た。
製造 （ＨＣＶ抗原の調製）Ｋｕｏ，Ｇ；Ｓｃｉｅｎｃｅ，２
４４，３６６−３６４（１９８９）に記載の方法に従い
ＨＣＶ Ｃ２００蛋白質にＳＯＤを融合した蛋白質を酵
母菌により発現させ、精製してＣ２００−ＳＯＤ融合蛋
白質を得た。同様にＨＣＶ Ｃ２２−３コア蛋白質にＳ
ＯＤを融合した蛋白質を酵母菌により発現させ、精製し
てＣ２２−３−ＳＯＤ融合蛋白質を得た。
【００１５】（ＨＣＶ融合蛋白質感作粒子の調製）リン
酸緩衝生理食塩水ＰＢＳ（ｐＨ７．２）の５（Ｖ／Ｖ）
％ゼラチン粒子（特公昭６３−２９２２３号に記載され
た方法に従い製造した粒子）の溶液２０ｍｌと１０ｐｐ
ｍタンニン酸ＰＢＳ（ｐＨ７．２）溶液２０ｍｌとを、
３７℃１０分間インキュベートした。このゼラチン粒子
を生理食塩水で１回洗浄したあとＰＢＳ（ｐＨ６．４）
で全量を２０ｍｌとしタンニン酸処理粒子ＰＢＳ溶液を
得た。前記Ｃ２００−ＳＯＤ融合蛋白質とＣ２２−３−
ＳＯＤ融合蛋白質との混合物を含むＰＢＳ（ｐＨ６．
４）で希釈したものを２０ｍｌ準備し、前記タンニン酸
処理ゼラチン粒子ＰＢＳ（ｐＨ６．４）２０ｍｌと等量
混合し３７℃で４０分間インキュベートした。この粒子
を生理食塩水４０ｍｌで１回洗浄後、１％ＮＲＳ（正常
家兎血清）を含む１０ｍｌのＰＢＳ（ｐＨ７．２）に浮
遊し、試薬容器に０．３ｍｌずつ分注し凍結乾燥を行
い、ＨＣＶ融合蛋白質感作粒子を得た。
酸緩衝生理食塩水ＰＢＳ（ｐＨ７．２）の５（Ｖ／Ｖ）
％ゼラチン粒子（特公昭６３−２９２２３号に記載され
た方法に従い製造した粒子）の溶液２０ｍｌと１０ｐｐ
ｍタンニン酸ＰＢＳ（ｐＨ７．２）溶液２０ｍｌとを、
３７℃１０分間インキュベートした。このゼラチン粒子
を生理食塩水で１回洗浄したあとＰＢＳ（ｐＨ６．４）
で全量を２０ｍｌとしタンニン酸処理粒子ＰＢＳ溶液を
得た。前記Ｃ２００−ＳＯＤ融合蛋白質とＣ２２−３−
ＳＯＤ融合蛋白質との混合物を含むＰＢＳ（ｐＨ６．
４）で希釈したものを２０ｍｌ準備し、前記タンニン酸
処理ゼラチン粒子ＰＢＳ（ｐＨ６．４）２０ｍｌと等量
混合し３７℃で４０分間インキュベートした。この粒子
を生理食塩水４０ｍｌで１回洗浄後、１％ＮＲＳ（正常
家兎血清）を含む１０ｍｌのＰＢＳ（ｐＨ７．２）に浮
遊し、試薬容器に０．３ｍｌずつ分注し凍結乾燥を行
い、ＨＣＶ融合蛋白質感作粒子を得た。
【００１６】（ＳＯＤ感作粒子の調製）遺伝子組換え法
により製造したＳＯＤを前記方法に従いタンニン酸処理
したゼラチン粒子と混合し、ＳＯＤ感作粒子を得、凍結
乾燥を行った。
により製造したＳＯＤを前記方法に従いタンニン酸処理
したゼラチン粒子と混合し、ＳＯＤ感作粒子を得、凍結
乾燥を行った。
【００１７】（血清希釈液の調製）０．１５Ｍ ＰＢＳ
（ｐＨ７．２）に１％ ＮＲＳと抗菌剤として０．１％
アジ化ナトリウムを加えた溶液を検体希釈液として用い
た。
（ｐＨ７．２）に１％ ＮＲＳと抗菌剤として０．１％
アジ化ナトリウムを加えた溶液を検体希釈液として用い
た。
【００１８】（溶解用液の調製）１％ＮＲＳを添加した
０．１５ＭＰＢＳ（ｐＨ７．２）を調製した。
０．１５ＭＰＢＳ（ｐＨ７．２）を調製した。
【００１９】（アミノカルボン酸化合物を含む検体希釈
液の調製）３本の１％ＮＲＳを添加した０．１５ＭＰＢ
Ｓ（ｐＨ７．２）溶液にｐ−アミノメチルシクロヘキサ
ンカルボン酸、ε−アミノカプロン酸又はＬ−リジンを
それぞれ加え、検体希釈液を調製した。
液の調製）３本の１％ＮＲＳを添加した０．１５ＭＰＢ
Ｓ（ｐＨ７．２）溶液にｐ−アミノメチルシクロヘキサ
ンカルボン酸、ε−アミノカプロン酸又はＬ−リジンを
それぞれ加え、検体希釈液を調製した。
【００２０】実施例２ 抗ＨＣＶ抗体の間接凝集法によ
る測定 実施例１で調製した凍結乾燥品のＨＣＶ融合蛋白質感作
粒子又はＳＯＤ感作粒子は溶解用液をそれぞれに４ｍｌ
加え復元をして用いた。９６ウェルＵ底のマイクロプレ
ートの第１穴目にドロッパーなどを用い血清希釈液を１
００μｌ滴下し、第２穴から第３穴（定量試験の場合は
第１２穴まで）に２５μｌずつ血清希釈液を滴下する。
第１穴目に検体２５μｌをマイクロピペットで加え、２
５μｌ用ダイリュータで攪拌しながら順に次穴に２５μ
ｌずつ液を送り連続した２Ｎ希釈系列を作る。第２穴目
に未感作粒子を２５μｌ滴下し、第３穴目（定量試験の
場合は第３穴から第１２穴まで）に感作粒子を２５μｌ
滴下し混合後、蓋をかぶせ室温で２時間静置し反応像を
形成させた。
る測定 実施例１で調製した凍結乾燥品のＨＣＶ融合蛋白質感作
粒子又はＳＯＤ感作粒子は溶解用液をそれぞれに４ｍｌ
加え復元をして用いた。９６ウェルＵ底のマイクロプレ
ートの第１穴目にドロッパーなどを用い血清希釈液を１
００μｌ滴下し、第２穴から第３穴（定量試験の場合は
第１２穴まで）に２５μｌずつ血清希釈液を滴下する。
第１穴目に検体２５μｌをマイクロピペットで加え、２
５μｌ用ダイリュータで攪拌しながら順に次穴に２５μ
ｌずつ液を送り連続した２Ｎ希釈系列を作る。第２穴目
に未感作粒子を２５μｌ滴下し、第３穴目（定量試験の
場合は第３穴から第１２穴まで）に感作粒子を２５μｌ
滴下し混合後、蓋をかぶせ室温で２時間静置し反応像を
形成させた。
【００２１】抗ＳＯＤ抗体陽性血清、抗ＨＣＶ抗体陽性
血清及び抗ＨＣＶ抗体陰性血清の検体について、実施例
１で調製した５０ｍＭのｐ−アミノメチルシクロヘキサ
ンカルボン酸、ε−アミノカプロン酸又はＬ−リジンを
含む検体希釈液用いて測定を行った。その測定結果を表
１〜３に示す。また、比較例として、アミノカルボン酸
化合物を含まない検体希釈液で同一検体について測定
し、その結果を表１〜３に併せ記載する。
血清及び抗ＨＣＶ抗体陰性血清の検体について、実施例
１で調製した５０ｍＭのｐ−アミノメチルシクロヘキサ
ンカルボン酸、ε−アミノカプロン酸又はＬ−リジンを
含む検体希釈液用いて測定を行った。その測定結果を表
１〜３に示す。また、比較例として、アミノカルボン酸
化合物を含まない検体希釈液で同一検体について測定
し、その結果を表１〜３に併せ記載する。
【００２２】
【表１】
【００２３】
【表２】
【００２４】
【表３】
【００２５】これらの表からＳＯＤに起因する非特異反
応に対してのみ反応を抑制し、抗ＨＣＶ抗体陽性血清又
は陰性血清に対しては影響が無いことがわかった。
応に対してのみ反応を抑制し、抗ＨＣＶ抗体陽性血清又
は陰性血清に対しては影響が無いことがわかった。
【００２６】
【発明の効果】本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるア
ミノカルボン酸化合物をＳＯＤ融合蛋白質が結合した試
薬を含む測定の溶液中に添加すると、固相化抗原又は標
識化抗原への非特異結合が低減するため、検体中の測定
対象物を感度よく測定することができる。また、前記一
般式（Ｉ）で表されるアミノカルボン酸化合物は、溶液
中で安定であるため、その吸収剤として効果が長時間持
続する。
ミノカルボン酸化合物をＳＯＤ融合蛋白質が結合した試
薬を含む測定の溶液中に添加すると、固相化抗原又は標
識化抗原への非特異結合が低減するため、検体中の測定
対象物を感度よく測定することができる。また、前記一
般式（Ｉ）で表されるアミノカルボン酸化合物は、溶液
中で安定であるため、その吸収剤として効果が長時間持
続する。
Claims (5)
- 【請求項１】 スーパーオキサイド・ディスムターゼ
（ＳＯＤ）融合蛋白質が結合した試薬を含む免疫測定に
用いる一般式 Ｈ2 Ｎ−Ａ−ＣＯ2 Ｈ で表されるアミノカルボン酸化合物からなる非特異反応
吸収剤（Ａは架橋性残基である）。 - 【請求項２】 架橋性残基が置換もしくは無置換の直鎖
状、分枝状又は環状の炭素数３〜１２の炭化水素基であ
る請求項１記載の吸収剤。 - 【請求項３】 アミノカルボン酸化合物がε−アミノカ
プロン酸、ｐ−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸
又はリジンである請求項２記載の吸収剤。 - 【請求項４】 蛋白質が、遺伝子組換え肝炎ウイルス抗
原である請求項１ないし３のいづれか１項に記載の吸収
剤。 - 【請求項５】 請求項１ないし４記載のいづれか１項に
記載の吸収剤を用いる免疫測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03237298A JP3520757B2 (ja) | 1998-01-30 | 1998-01-30 | 非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03237298A JP3520757B2 (ja) | 1998-01-30 | 1998-01-30 | 非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11218534A true JPH11218534A (ja) | 1999-08-10 |
| JP3520757B2 JP3520757B2 (ja) | 2004-04-19 |
Family
ID=12357125
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03237298A Expired - Fee Related JP3520757B2 (ja) | 1998-01-30 | 1998-01-30 | 非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3520757B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011257243A (ja) * | 2010-06-08 | 2011-12-22 | Shino-Test Corp | 試料中のｃ反応性蛋白質の測定試薬、測定方法及び測定範囲の拡大方法 |
| WO2019026569A1 (ja) * | 2017-08-01 | 2019-02-07 | 藤倉化成株式会社 | 不溶性担体粒子を含有する免疫測定試薬の劣化防止手段 |
| CN110720038A (zh) * | 2017-08-01 | 2020-01-21 | 藤仓化成株式会社 | 含有不溶性载体颗粒的免疫测定试剂的劣化防止的手段 |
-
1998
- 1998-01-30 JP JP03237298A patent/JP3520757B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011257243A (ja) * | 2010-06-08 | 2011-12-22 | Shino-Test Corp | 試料中のｃ反応性蛋白質の測定試薬、測定方法及び測定範囲の拡大方法 |
| WO2019026569A1 (ja) * | 2017-08-01 | 2019-02-07 | 藤倉化成株式会社 | 不溶性担体粒子を含有する免疫測定試薬の劣化防止手段 |
| CN110720038A (zh) * | 2017-08-01 | 2020-01-21 | 藤仓化成株式会社 | 含有不溶性载体颗粒的免疫测定试剂的劣化防止的手段 |
| US11668704B2 (en) | 2017-08-01 | 2023-06-06 | Fujikura Kasei Co., Ltd. | Degradation preventing means for immunoassay reagent containing insoluble carrier particles |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3520757B2 (ja) | 2004-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108051585B (zh) | 一种均相免疫检测试剂盒、检测方法及其应用 | |
| CN108700584A (zh) | 标记复合物及其制备方法、试剂盒、应用和检测系统 | |
| JP3363166B2 (ja) | 相互に対する極めて高い特異的親和性を有するペプチド対をイン・ビトロ診断分野に使用する方法 | |
| JP3840521B2 (ja) | ウイルス検出方法およびウイルス検査用キット | |
| TWI757328B (zh) | 使用以相異方式將抗原固定化之承載抗原不溶性承載粒子之抗體測定法、抗體測定用試劑 | |
| JP2007510165A (ja) | 結合アッセイ成分 | |
| WO2009084369A1 (ja) | Ｈｉｖ－１抗原の検出用試薬及び検出方法 | |
| JPH05504400A (ja) | 抗体または抗原の併用アッセイ | |
| JPH02253162A (ja) | 特異的結合能を有する物質と結合したエクオリンを用いる検出法 | |
| JP4975601B2 (ja) | Ｈｃｖ抗体測定用試薬キット及びｈｃｖ抗体測定方法 | |
| JPH11218534A (ja) | 非特異反応吸収剤及び該吸収剤を用いる免疫測定法 | |
| JP3889045B2 (ja) | Ｈｉｖを検出するためのペプチド | |
| Jin et al. | Use of α-N, N-bis [carboxymethyl] lysine-modified peroxidase in immunoassays | |
| JPS59176675A (ja) | 酵素免疫測定用試薬 | |
| JP2001305139A (ja) | 特異的結合体 | |
| JP2651438B2 (ja) | 酵素標識抗体感作ラテックス及びそれを用いた酵素免疫測定法 | |
| JPH06281652A (ja) | 抗体及び抗原の検出方法 | |
| EP0529057B1 (en) | Denatured vehicular proteins to improve enzyme linked immunosorbent assays | |
| JP4975600B2 (ja) | Ｈｃｖ抗体測定用試薬キット及びｈｃｖ抗体測定方法 | |
| JPH0740031B2 (ja) | 免疫学的測定方法 | |
| JPH0346565A (ja) | 磁性体を利用した酵素免疫測定法 | |
| WO2023213758A1 (en) | Hiv gp41 variants for immunodiagnostic assays | |
| JP2021124314A (ja) | フルオレセインを介したＨＢｅ抗体検出方法及び検出試薬 | |
| JPH0933528A (ja) | 免疫分析用反応試薬及びその製造方法 | |
| JP2001343387A (ja) | 複合体を形成する物質の測定方法及び測定試薬 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Effective date: 20040113 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20040126 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
| R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 4 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080213 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090213 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 6 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100213 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100213 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110213 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120213 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120213 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (prs date is renewal date of database) |
Year of fee payment: 9 Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130213 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |