JP2010122205A - 麻疹ウイルス検出方法、メンブレンアッセイ用試験具およびメンブレンアッセイ用試験キット - Google Patents
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Abstract
【解決手段】
図1に示される試験キットは、ラテラルフロー式メンブレンアッセイ法に用いられる試験キットであって、試料を収容するための試験容器1と、一端側4aから試験容器1に挿入されて用いられるメンブレンアッセイ用試験具4と、検体と混合することによって測定試料を調製するための検体処理液15を収容した検体処理容器14とを備える。このような試験キットを作製することにより、簡便に麻疹ウイルスを検出することができる。
【選択図】図1
Description
初回免疫として、アジュバント混合麻疹ウイルス抗原溶液を腹腔内、皮下又は筋肉内に注射する。注射するアジュバント混合麻疹ウイルス抗原溶液の体積は0.05ml〜1mlであることが好ましく、含まれる麻疹抗原の質量は10〜200μgであることが好ましい。アジュバントを用いない場合は、麻疹ウイルス抗原の含有量を多くして腹腔内注射することにより免疫してもよい。初回免疫から約2〜4週間毎に1〜6回追加免疫を行う。追加免疫から約1〜4週間後に、麻疹ウイルス抗原溶液を静脈注射することにより最終免疫を行う。最終免疫から約3〜5日後、マウスからの脾細胞を分離して、抗体産生細胞を得ることができる。
サンドイッチ法による麻疹ウイルスの検出においては、上記3種のモノクローナル抗体のうち一の抗体を標識される抗体として、他の抗体を固相に固定される抗体として用いることができる。使用される抗体の組み合わせは特に限定されないが、固相に固定される第1の抗体として、135−241抗体または485−525抗体を使用し、標識される第2の抗体として、91−134抗体を使用することが検出感度を向上させる観点から好ましい。なお、第1の抗体に加えて、第1および第2の抗体と異なる第3の抗体を固相に固定してもよく、135−241抗体および485−525抗体の両方を同じ固相に固定して用いる形態であってもよい。
以下、本実施形態によるメンブレンアッセイ用試験キットについて、図面を参照しながら説明する。
標識保持部材7は、試料添加用部材5に接触して配置され、麻疹抗原に特異的に結合可能であり、且つ標識された抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体(以下、標識化抗体と呼称する)と、対照用標識物質を保持する。標識化抗体は、青色ラテックス粒子で標識された抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体であり、対照用標識物質は、赤色ラテックス粒子で標識されたストレプトアビジンである。クロマト用膜担体9は、標識保持部材7に接触して配置され、上流側から順に、ライン状の判定部9Aおよび対照部9Bを有する。判定部9Aには麻疹ウイルス抗原に特異的に結合可能な抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体(以下、捕捉用抗体と呼称する)が、対照部9Bにはビオチンが固定されている。
吸収部材11は、クロマト用膜担体9と接触するように配置されている。
まず、検体処理容器14のキャップ143を開け、採取した検体をボトル141内に加え、検体処理液15と混和し、測定試料13を調製する。その後、キャップ143に代えてノズル142をボトル141の開口部に装着し、測定試料13をろ過部材44を介して試料排出口46から試験容器1に供給する。次に、試験具4を一端4aから試験容器1に挿入し、一端4aを試験容器1の底部1aに接触させる(なお、ここでいう「底部」とは、試験容器1の丸みを帯びた部分を意味する)。これにより、試験具4と試験容器1とが上下方向に位置合わせされる。この状態で、10〜20分程度放置すると、測定試料13が毛管現象により、試料添加用部材5、標識保持部材7、クロマト用膜担体9、吸収部材11を順次移動する。測定試料13が、標識保持部材7を通過する際に、標識保持部材7に保持されている標識物質(標識化抗麻疹モノクローナル抗体及び対照用標識物質)が測定試料中に溶出する。測定試料13に麻疹ウイルスが含まれていると、上述した作用により、判定部9Aには青色のラインが現れる。また、ウイルスの有無に関わらず、対照部9Bに赤色のラインが現れる。
このように、試料添加用部材5、標識保持部材7、クロマト用膜担体9及び吸収部材11には、不織布又は多孔質部材以外にも、毛管現象により試料を展開可能な種々の構造のものを用いることができる。
なお、図5に示した構成においては、ケース40の試料添加用部材5に対応する位置に設けられた開口50は、内側に向かって開口面積が小さくなるように、いわゆるテーパー状に形成されている。このような構成により、試料用添加部材5に滴下された測定試料は、開口50に一定量貯留されるため、過剰に測定試料を滴下したとしても、測定試料が試験具4から溢れにくくなっている。また、測定試料が一定量貯留されることにより、貯留された測定試料が試験具4上を順次展開していくため、少量の測定試料を定期的に滴下する手間が省け、検査を簡便に行うことができる。
まず、第1の実施形態において説明したように、検体を検体処理液37に懸濁し、測定試料を調製する。検体に麻疹ウイルスが含まれていると、検体処理液37に含まれる標識化抗体と麻疹ウイルスとが抗原抗体反応により結合し、測定試料中に麻疹ウイルス−標識化抗体からなる複合体が形成される。
次に、調製された測定試料を、第1の実施形態において説明した手順と同様にして、試験具31の開口33に所定量滴下する。この状態で20分程度放置すると、測定試料が膜担体34を通過し、その下層に配置された吸収部材35によって吸収される。測定試料に麻疹ウイルスが含まれていると、膜担体34の判定部34Aに担持された捕捉用抗体が、標識化抗体と麻疹ウイルスとの結合部位と異なる部位を認識して麻疹ウイルスに結合し、判定部34A上に標識化抗体−麻疹ウイルス−捕捉用抗体からなる複合体が形成される。これにより、判定部34Aに青色のラインが現れる。よって、判定部34Aに青色のラインが現れたか否かを目視で判定することにより、麻疹ウイルスの存在を知ることができる。
1−1.麻疹ウイルス核タンパク質の作製
野生の各麻疹ウイルス株より抽出したRNAから、逆転写反応によって、cDNAを合成した。合成した各cDNAから、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)によって、麻疹ウイルス核タンパク質のDNA産物を合成し、小麦胚芽無細胞発現用試薬キット ENDEXT(登録商標)Wheat Germ Expression TRI-GG Kit(セルフリーサイエンス社)を用いて、キット付属のベクターにDNA産物を組み込み、麻疹ウイルス核タンパク質を発現させ、抗原液を作製した。シークエンサー(Applied Biosystems社製)及び配列解析ソフト(日立ソフト社製)を用いて、遺伝子配列解析及び予測アミノ酸配列解析を行った。ここで得られた麻疹ウイルス核タンパク質のアミノ酸配列を、配列表の配列番号1〜9に示す。以下、配列番号1のアミノ酸配列からなる麻疹ウイルス核タンパク質をAg1、配列番号2のアミノ酸配列からなる麻疹ウイルス核タンパク質を麻疹抗原Ag2というように、配列番号Nのアミノ酸配列からなる麻疹ウイルス核タンパク質をAgNと呼称する。
1−2.マウスの免疫
Advanced Biotechnologies Inc.(以下ABI社)より入手した麻疹ウイルス株(商品名:Rubeola (Measles) Virus Infected Cell Extract)60μgを含有するリン酸緩衝液(PBS)100μLにフロイント完全アジュバント(FCA)100μlを添加し、乳化させた後、FCA混合麻疹ウイルス抗原溶液を200μLを調製した。また、FCAではなくフロイント不完全アジュバント(FIA)を用いること以外は同様にしてFIA混合麻疹ウイルス抗原溶液200μLを作製した。
FCA混合麻疹ウイルス抗原溶液200μLを7週齢の雌Balb/cマウスに腹腔内投与することにより初回免疫した。初回免疫後、二週間毎にFIA混合麻疹ウイルス抗原溶液200μLを用いて追加免疫を行った。最終免疫は、アジュバントを使用せず、ABI社麻疹ウイルス株に代えて、1−1.において作製されたAg5を50μg含有するPBS500μLを静脈注射することにより行った(免疫実験1)。
ハイブリドーマを2.5×106cells/mLとなるようにHAT培地に懸濁させ、96穴プレート(コーニング社製;以下、培養用プレートとする)の各ウェルに2.5×105cell/wellとなるように分注した。培養用プレートを37度、8%CO2の恒温槽内に静置し、ハイブリドーマの培養を開始した。翌日、HAT培地を25μLずつ培養用プレートの各ウェルに添加し、さらに培養を継続した。10日間培養してハイブリドーマのコロニーを出現させたところで、モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマのスクリーニングを行った。
0.1w/v%NaN3を含む0.1M リン酸緩衝液(PBS, pH7.5)に、タンパク質濃度が0.5μg/mLとなるように希釈した麻疹ウイルス(ABI社製)を添加し、感作用麻疹ウイルス溶液を調製した。この感作用麻疹ウイルス溶液100μLを96穴プレート(NUNC社製)の各ウェルに分注した(以下、抗原固定プレートとする)。4度で一晩静置した後、0.05%の濃度でTween20を含むPBS(以下、第1緩衝液とする)で三回洗浄した。洗浄後、抗原固定プレートの各ウェルに1w/v%の濃度でBSAを含むPBS(以下、第2緩衝液とする)300μLを添加し、2〜8℃で4時間以上静置保存した。抗原固定プレートは使用時まで2〜8℃で保存した。
その結果、作製されたハイブリドーマが、抗麻疹モノクローナル抗体を産生していることが確認された。
上記1.において作製されたハイブリドーマによって産生された抗麻疹モノクローナル抗体の反応性を以下の実験によって確認した。
1−1.において作製されたAg1〜Ag9を含む抗原液を、それぞれ第2緩衝液によって10倍に希釈した。
市販の抗マウスIgG抗体と、セファロースビーズ(Amersham Biosciences社製)とを結合させた粒子を15v/v%の濃度で含有するセファロースビーズ−抗マウスIgG抗体懸濁液を調製した。このセファローズビーズ−抗マウスIgG抗体懸濁液と、Ag1〜Ag9を含む抗原液をそれぞれ第2緩衝液で0.2〜0.5μg/mLに希釈した抗原希釈液と、第2緩衝液とを等量で混合し、抗原試料調製した。
225抗体液を、0.1w/v%NaN3を含む0.1M リン酸緩衝液(PBS, pH7.5)によって10μg/mL濃度に希釈し、この225抗体希釈溶液をマイクロタイタープレート(NUNC社製)の各ウェルに100μLずつ分注し、4℃で一晩静置した。第1緩衝液を用いて各ウェルを3回洗浄したのち、各ウェルに第2緩衝液を300μLずつ分注して、ブロッキングした(以下、このマイクロタイタープレートを225抗体感作プレートと呼称する)。ブロッキング後、2〜8℃で4時間以上静置保存した。225抗体感作プレートは使用時まで2〜8℃で保存した。
なお、ハイブリドーマMV1−225は、シスメックス株式会社によって独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センターに寄託されており、受領番号NITE BP-599が付与されている(受託日:2009年7月22日)。
ビオチン標識される抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体として、ハイブリドーマMV1−1117によって産生される1117抗体を用いた。ハイブリドーマMV1−1117は、シスメックス株式会社によって独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センターに寄託されており、受領番号NITE NP−600が付与されている(受託日:2009年7月22日)。
このとき、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体の抗原に対する反応性によって、96穴V字プレートの反応液の上清に抗原が含まれる場合と、含まれない場合とがありうる。
すなわち、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体が抗原に対して反応性がある(抗体と抗原とが結合している)場合には、反応液中にはセファロースビーズ−抗マウスIgG−抗麻疹モノクローナル抗体−抗原からなる複合体が形成される。この複合体は、セファロースビーズの重みによって96穴V字プレートのウェルにおいて沈降するため、上清には抗原が含まれない。一方、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体が抗原に対して反応性がない(抗体と抗原とが結合していない)場合には、反応液中に上記のような複合体は形成されず抗原が沈降しないため、上清には抗原が含まれることになる。
よって、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体が抗原に対して反応性を示さなかった場合には、上記の操作によって225抗体−抗原−POD標識化抗体からなる複合体が225抗体感作プレートのウェルに形成され、反応性を示した場合には、上記複合体は形成されない。
なお、上記の説明から明らかなように、吸光度Aは225抗体感作プレートのウェル上の複合体の有無を示している。すなわち、吸光度が低いほど複合体が少なく、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体と抗原との反応性が高いことを示す。
また、対照実験として、1.0μg/mL抗体液と抗原試料に換えて第2緩衝液を用いた対照試料を調製し、同様の実験を行って吸光度を測定した。ここで得られた吸光度を吸光度Cとする。
吸収率(%)={1−(A−C)/(B−C)}×100 ・・・(1)
この結果から、本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体は、麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であり、且つ、核タンパク質のアミノ酸配列の一部の置換変異によっては結合能が変化しないことがわかった。
本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体の麻疹ウイルス核タンパク質に対する結合部位を、以下の実験によって確認した。
上記1−1.において調製された麻疹ウイルス核タンパク質Ag3を含む抗原液を第2緩衝液によって0.15μg/mLに希釈し、Ag3を含む抗原試料を調製した。
上記2−1.において記載した要領と同様にして、225抗体感作プレートを作製した。この225抗体感作プレートの各ウェルに、Ag3を含む抗原試料100μLを加え、30分間攪拌した。その後、225抗体感作プレートの各ウェルを、第1緩衝液で3回洗浄した。
また、対照実験として、10μg/mL抗体液と抗原試料に換えて第2緩衝液を用いた対照試料を調製し、同様の実験を行って吸光度を測定した。ここで得られた吸光度を吸光度Fとする。
得られた吸光率を表3に、吸光率に基づく相同性の評価結果を表4に示した。表4において、「+++」は式(2)によって求められる吸光率が90%以上、「++」は50%以上、「+」は30%以上、「−」は30%であることを示している。
なお、上記実験例を例にとれば、(2)によって求められる吸光率が高ければ高いほど、2649抗体と3707抗体の、麻疹ウイルス核タンパク質に対する結合部位の相同性が高いことを意味する。
吸収率(%)={1−(D−F)/(E−F)}×100 ・・・(2)
本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体を用いて、図1に示されるようなラテラルフロー式メンブレンアッセイ用試験具を作製した。
試験具1
標識保持部材7に保持される第1のモノクローナル抗体として、320抗体を使用した。クロマト用膜担体9の判定部9Aに担持される第2モノクローナル抗体として、2649抗体と3707抗体を使用した。
まず、図1に示すように、ニトロセルロースメンブレンからなるクロマト用膜担体9の判定部9Aに、リン酸緩衝液(pH7.0)で2.0mg IgG/mLの濃度になるように希釈した3707抗体を含む抗体液を、抗体塗布機(BioDot社)を用いて1mm幅で塗布し、さらに1mm位置をずらして、同様に2649抗体を含む抗体液を塗布し、50℃で30分間乾燥させた。
乾燥後のクロマト用膜担体9をBSAを含有するリン酸緩衝液(pH7.0)に浸漬し、クロマト用膜担体9上に抗体を固定した。その後、洗浄液(SDSを含有するリン酸緩衝液(pH7.0))で洗浄し、40℃で120分間乾燥させ、クロマト用膜担体9を得た。
試料添加部材5、吸収部材11、および基材12については、上記実施形態において説明したとおりの部材を使用して、試験具1を得た。
クロマト用膜担体9の判定部9Aに担持される抗体として、3707抗体に代えて3241抗体を用いた点を除いては上記と同様にして、試験具2を得た。
5−1.培養麻疹ウイルスの検出実験
4.において作製された試験具1および試験具2を使用して、試料中の麻疹ウイルスを検出する実験を行った。
本試験例では、下記の表5に示した2種類の野生型麻疹ウイルスをVero/SLAM細胞にて培養し、得られたウイルスを1%BSAを含有するリン酸ナトリウム緩衝液で希釈したものをウイルス液として用いた。なお、IC−B株およびEdmonston株は、いずれも野生型の麻疹ウイルス株であり、IC−B株のアミノ酸配列は配列番号10に示したとおりである。また、Edmonston株のアミノ酸配列は、配列番号9によって示されたものと同じである。
ウイルス液中のウイルス濃度は、プラーク法によって定量し、その定量値をPFUで表す。各ウイルス液中のウイルス濃度は、表5に示したとおりである。PFU(plaque-forming unit)は、100%コンフルエントの細胞にウイルスを感染させ、感染させた細胞が作るプラークによって確認できるウイルス感染細胞数から算出されたウイルス数を表す単位である。なお、表5にはおいては、PFUを対数表示によって表記してある。
抗原試料約200μLをガラス試験管に滴下し、このガラス試験管に上記方法で作製した試験具1の上流(試料添加部材1)側を浸漬した状態で約10分間静置した。その後、判定部9Aにおけるラテックス粒子による呈色を肉眼で判定した。判定は、呈色が認められたものを(+)、呈色が認められなかったものを(−)として評価した。これらの結果を表5に示す。
4.において作製された試験具1および試験具2を使用して、患者から採取された検体中の麻疹ウイルスを検出する実験を行った。
なお、5−1.においては、判定部9Aに塗布される2種類の抗体液を、別々の位置に塗布して得られた試験具を使用したが、本実験例においては、2種類の抗体液を混合して得られたものを判定部9Aに塗布することにより試験具を作製し、使用した。
溶液中のウイルス濃度は、リアルタイムPCR法によって得られたCt値を、5−1.に記載の方法で定量した濃度既知試料のCT値と比較することにより算出した。
この抗原試料を用いて、5−1.に記載の手順および判定条件に基づいて、判定部9Aにおけるラテックス粒子による呈色を判定した。これらの判定結果を表6に示す。
この結果から、本実施例による試験具によって、患者検体中の麻疹ウイルスを確実に検出できることが実証された。また、この結果から、患者から検体を採取して測定試料を調製し、この測定試料とメンブレンアッセイ用試験具とを用いることにより、肉眼での判定という簡便な方法により、麻疹ウイルスを検出できることが実証された。
本実施例による抗麻疹ウイルスモノクローナル抗体の麻疹ウイルス核タンパク質に対する抗原認識部位を、以下の実験によって確認した。
グルタチオン S−トランスフェラーゼ(以下、GSTと呼称する)融合タンパク質発現用ベクターpGEX−4T−3(GEヘルスケア社製)から、制限酵素NotIによる認識配列(以下、NotI配列と呼称する)を含む配列番号1のプライマーと、制限酵素BamHIによる認識配列(以下、BamHI配列と呼称する)を含む配列番号2のプライマーとを用いてポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行い、GST配列の上流側にNotI配列を、下流側にBamHI配列を組み込んだcDNAを合成した。
上記6−1.において調製された全長核タンパク質およびTrancate1〜14の各抗原液を第2緩衝液によって希釈し、抗原試料を調製した。
1a 試験容器底部
1b 開口
3 ラベル
4 メンブレンアッセイ用試験具
4a 試験具の一端
5 試料添加用部材
7 標識保持部材
9 クロマトグラフィー用膜担体
9A 判定部
9B 対照部
11 吸収部材
12 基材
13 試料
14 検体処理容器
15 検体処理液
31 試験具
32 カバー部材
33 開口
34 膜担体
34A 判定部
35 吸収部材
Claims (14)
- 麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能な第1のモノクローナル抗体と、麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であって第1のモノクローナル抗体と異なるエピトープに結合し、且つ標識された第2のモノクローナル抗体とを用いて、検体に含まれる麻疹ウイルスを検出する麻疹ウイルス検出方法。
- 検体と、非イオン性界面活性剤を含む検体処理液とを混合して測定試料を調製する工程をさらに備え、
調製された測定試料に含まれる麻疹ウイルスを検出する請求項1に記載の麻疹ウイルス検出方法。 - 検体が、唾液、鼻汁、鼻腔拭い液、鼻腔吸引液および咽頭拭い液からなる群から選択される請求項1又は2に記載の麻疹ウイルス検出方法。
- 第1のモノクローナル抗体及び第2のモノクローナル抗体が、麻疹ウイルス核タンパク質の135位から241位のアミノ酸配列を認識して結合するモノクローナル抗体、麻疹ウイルス核タンパク質の485位から525位のアミノ酸配列を認識して結合するモノクローナル抗体、および麻疹ウイルス核タンパク質の91位から134位のアミノ酸配列を認識して結合するモノクローナル抗体からなる群から選択される、請求項1乃至3に記載の麻疹ウイルス検出方法。
- 第2のモノクローナル抗体が、麻疹ウイルス核タンパク質の91位から134位のアミノ酸配列を認識して結合するモノクローナル抗体である、請求項4に記載の麻疹ウイルス検出方法。
- 麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能な第1のモノクローナル抗体が担持された判定部を含む展開用膜担体と、
麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であって第1のモノクローナル抗体と異なるエピトープに結合し且つ標識された第2のモノクローナル抗体を保持する標識保持部材とを備える、検体に含まれる麻疹ウイルスを検出するためのメンブレンアッセイ用試験具。 - 判定部は、麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であって第1および第2のモノクローナル抗体と異なるエピトープに結合する第3のモノクローナル抗体をさらに担持する請求項6に記載のメンブレンアッセイ用試験具。
- 請求項6又は7のいずれかに記載のメンブレンアッセイ用試験具と、
非イオン性界面活性剤を含み、検体と混合して測定試料を調製するための検体処理液と、を備える、測定試料に含まれる麻疹ウイルスを検出するためのメンブレンアッセイ用試験キット。 - 測定試料を収容可能であり、前記メンブレンアッセイ用試験具が挿入可能に構成された試験容器をさらに備える請求項8に記載のメンブレンアッセイ用試験キット。
- 麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能な第1のモノクローナル抗体が担持された判定部を含む膜担体を備える試験具と、
麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であって第1のモノクローナル抗体と異なるエピトープに結合し且つ標識された第2のモノクローナル抗体を含む標識液を備える、検体に含まれる麻疹ウイルスを検出するためのメンブレンアッセイ用試験キット。 - 判定部は、麻疹ウイルス核タンパク質に結合可能であって第1および第2のモノクローナル抗体と異なるエピトープに結合する第3のモノクローナル抗体をさらに担持する請求項10に記載のメンブレンアッセイ用試験キット。
- 標識液は、非イオン性界面活性剤をさらに含有する請求項10又は11のいずれかに記載のメンブレンアッセイ用試験キット。
- 独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センターに寄託された受託番号:NITE BP−563、NITE BP−564、NITE BP−565およびNITE BP−566からなる群から選択されるハイブリドーマ。
- 請求項13に記載のハイブリドーマによって産生されたモノクローナル抗体。
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014122973A1 (ja) * | 2013-02-06 | 2014-08-14 | 富士レビオ株式会社 | 標的物質の測定方法 |
JP2014523914A (ja) * | 2011-07-18 | 2014-09-18 | プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ | 操作された微生物標的化分子およびその使用 |
US10435457B2 (en) | 2015-08-06 | 2019-10-08 | President And Fellows Of Harvard College | Microbe-binding molecules and uses thereof |
US10501729B2 (en) | 2013-05-21 | 2019-12-10 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered heme-binding compositions and uses thereof |
US10513546B2 (en) | 2013-12-18 | 2019-12-24 | President And Fellows Of Harvard College | CRP capture/detection of gram positive bacteria |
US10538562B2 (en) | 2010-01-19 | 2020-01-21 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
US10551379B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-04 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for improving detection and/or capture of a target entity |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103185791B (zh) * | 2011-12-30 | 2015-03-18 | 深圳市亚辉龙生物科技有限公司 | 一种检测麻疹病毒抗体的试剂装置及其方法 |
CN104471064B (zh) * | 2012-01-20 | 2018-11-02 | 中华人民共和国香港特别行政区政府 | 副粘病毒及其用途 |
JP6734053B2 (ja) * | 2013-07-25 | 2020-08-05 | 古河電気工業株式会社 | イムノクロマトグラフィー用試験片、これに用いられる展開液、およびこれを用いたイムノクロマトグラフィー |
CN105699643B (zh) * | 2016-03-08 | 2017-07-21 | 湖北工业大学 | 病原菌样本分析前预处理液及预处理方法 |
CN112730853A (zh) * | 2020-12-15 | 2021-04-30 | 深圳天辰医疗科技有限公司 | 抑制素b检测试剂盒和抑制素b的检测方法 |
CN117129691A (zh) * | 2023-08-28 | 2023-11-28 | 无锡百泰克生物技术有限公司 | 一种检测唾液中人绒毛膜促性腺激素的试纸条及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07509783A (ja) * | 1992-10-30 | 1995-10-26 | ティー セル ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 試料中の全分子の測定及びそれに基づく方法 |
JPH0961429A (ja) * | 1995-08-24 | 1997-03-07 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 抗モルビリウイルス属ウイルス抗体の簡易診断試薬 |
JP2005534907A (ja) * | 2002-07-29 | 2005-11-17 | アイ−スタット コーポレーション | 多重ハイブリッドイムノアッセイ |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE155890T1 (de) * | 1992-04-24 | 1997-08-15 | Us Gov Health & Human Serv | Nachweis von maservirus-specifischer antikörpern durch gebrauch von rekombinanten maserproteinen |
JP3840521B2 (ja) * | 1995-08-21 | 2006-11-01 | Aspion株式会社 | ウイルス検出方法およびウイルス検査用キット |
CN1207569C (zh) * | 1997-08-04 | 2005-06-22 | 株式会社先端生命科学研究所 | 用于测定含病毒样品的方法、病毒测定方法和诊断试剂盒 |
EP1015886A1 (en) * | 1997-09-01 | 2000-07-05 | Claude P. Muller | Detection of measles virus-specific antibodies |
WO2005027964A1 (en) * | 2003-09-15 | 2005-03-31 | Id Biomedical Corporation Of Quebec | Measles subunit vaccine |
EP1718972A4 (en) * | 2004-02-17 | 2009-05-27 | Binax Inc | METHOD AND KITS FOR PROOFING MULTIPLE DISEASES |
US7465587B2 (en) * | 2004-12-03 | 2008-12-16 | Genzyme Corporation | Diagnostic assay device |
TWI294036B (en) * | 2005-02-24 | 2008-03-01 | Tzu Chi Buddhist General Hospital | A method for screening compounds against flaviviruses infection by using persistent virus-infected cell systems |
US7951384B2 (en) * | 2005-08-05 | 2011-05-31 | University Of Massachusetts | Virus-like particles as vaccines for paramyxovirus |
-
2009
- 2009-08-12 JP JP2009187024A patent/JP2010122205A/ja active Pending
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- 2009-08-28 US US12/550,102 patent/US20100055675A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07509783A (ja) * | 1992-10-30 | 1995-10-26 | ティー セル ダイアグノスティックス,インコーポレーテッド | 試料中の全分子の測定及びそれに基づく方法 |
JPH0961429A (ja) * | 1995-08-24 | 1997-03-07 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 抗モルビリウイルス属ウイルス抗体の簡易診断試薬 |
JP2005534907A (ja) * | 2002-07-29 | 2005-11-17 | アイ−スタット コーポレーション | 多重ハイブリッドイムノアッセイ |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6013028057; Virology Vol.210, 1995, p456-465 * |
Cited By (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11059874B2 (en) | 2010-01-19 | 2021-07-13 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
US11203623B2 (en) | 2010-01-19 | 2021-12-21 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
US10538562B2 (en) | 2010-01-19 | 2020-01-21 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
US11059873B2 (en) | 2010-01-19 | 2021-07-13 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered opsonin for pathogen detection and treatment |
JP2014523914A (ja) * | 2011-07-18 | 2014-09-18 | プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ | 操作された微生物標的化分子およびその使用 |
JP2019077687A (ja) * | 2011-07-18 | 2019-05-23 | プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ | 操作された微生物標的化分子およびその使用 |
US11795212B2 (en) | 2011-07-18 | 2023-10-24 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered microbe-targeting molecules and uses thereof |
US10526399B2 (en) | 2011-07-18 | 2020-01-07 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered microbe-targeting molecules and uses thereof |
US10865235B2 (en) | 2011-07-18 | 2020-12-15 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered microbe-targeting molecules and uses thereof |
JPWO2014122973A1 (ja) * | 2013-02-06 | 2017-01-26 | 富士レビオ株式会社 | 標的物質の測定方法 |
WO2014122973A1 (ja) * | 2013-02-06 | 2014-08-14 | 富士レビオ株式会社 | 標的物質の測定方法 |
US10551379B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-04 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for improving detection and/or capture of a target entity |
US10501729B2 (en) | 2013-05-21 | 2019-12-10 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered heme-binding compositions and uses thereof |
US11312949B2 (en) | 2013-05-21 | 2022-04-26 | President And Fellows Of Harvard College | Engineered heme-binding compositions and uses thereof |
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US11034744B2 (en) | 2013-12-18 | 2021-06-15 | President And Fellows Of Harvard College | CRP capture/detection of gram positive bacteria |
US10513546B2 (en) | 2013-12-18 | 2019-12-24 | President And Fellows Of Harvard College | CRP capture/detection of gram positive bacteria |
US11718651B2 (en) | 2013-12-18 | 2023-08-08 | President And Fellows Of Harvard College | CRP capture/detection of gram positive bacteria |
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