JPH032565A - 免疫学的分析方法 - Google Patents
免疫学的分析方法Info
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- JPH032565A JPH032565A JP13675989A JP13675989A JPH032565A JP H032565 A JPH032565 A JP H032565A JP 13675989 A JP13675989 A JP 13675989A JP 13675989 A JP13675989 A JP 13675989A JP H032565 A JPH032565 A JP H032565A
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、免疫学的反応により試料中に存在する抗原、
抗体を検出するための免疫学的分析方法に関するもので
ある。
抗体を検出するための免疫学的分析方法に関するもので
ある。
感染症の疾患においては、患者の血液中に抗原としての
病原体すなわちウィルス、細菌などが存在したり、その
抗原に対する抗体が存在する。例えばB型肝炎疾患にお
いては、感染時期によってHBs抗原、HBS抗体、I
IBc抗体、HBe抗原、HB。
病原体すなわちウィルス、細菌などが存在したり、その
抗原に対する抗体が存在する。例えばB型肝炎疾患にお
いては、感染時期によってHBs抗原、HBS抗体、I
IBc抗体、HBe抗原、HB。
抗体上いった抗原、抗体が種々の割合で存在する。
このB型肝炎の検査方法の一つとして1(BS抗体を固
相した赤血球と試料とを反応させることにより赤血球の
凝集反応を生じさせて試料中の1(BS抗原の有無を判
定するものがある。しかし、こうして判定した結果HB
、抗原陰性、HBs抗体陰性でありながらHBc抗体陽
性という場合がある。したがって、■BS抗原の測定だ
けでなく、HBC抗体の測定をもする必要がある。この
IIBc抗体の測定方法としでは、HBc抗原を固相し
た赤血球と試料とを反応させることによって、赤血球の
凝集反応により試料中のHBc抗体の有無を判定するの
である。
相した赤血球と試料とを反応させることにより赤血球の
凝集反応を生じさせて試料中の1(BS抗原の有無を判
定するものがある。しかし、こうして判定した結果HB
、抗原陰性、HBs抗体陰性でありながらHBc抗体陽
性という場合がある。したがって、■BS抗原の測定だ
けでなく、HBC抗体の測定をもする必要がある。この
IIBc抗体の測定方法としでは、HBc抗原を固相し
た赤血球と試料とを反応させることによって、赤血球の
凝集反応により試料中のHBc抗体の有無を判定するの
である。
こうした従来の測定方法は、1種類の抗原、抗体を固相
した固相粒子を用いて血液中に存在する抗原、抗体の検
出を行うというものであり、この場合は所望の検出対象
抗原、抗体は1種類だけである。したがって、所望の検
出対象抗原、抗体が数種である場合は、数種の項目を個
別に測定していくことが必要であり、数種の項目の測定
結果により始めて特定の疾患の有無が判定できるという
場合は限られた測定では適正な疾患判定ができず問題で
ある。
した固相粒子を用いて血液中に存在する抗原、抗体の検
出を行うというものであり、この場合は所望の検出対象
抗原、抗体は1種類だけである。したがって、所望の検
出対象抗原、抗体が数種である場合は、数種の項目を個
別に測定していくことが必要であり、数種の項目の測定
結果により始めて特定の疾患の有無が判定できるという
場合は限られた測定では適正な疾患判定ができず問題で
ある。
本発明は、上記問題点を解決すべく提案されるもので、
測定工数の削減を図るとともに感度よく疾患等の有無を
判定できる免疫学的分析方法を提供することを目的とし
たものである。
測定工数の削減を図るとともに感度よく疾患等の有無を
判定できる免疫学的分析方法を提供することを目的とし
たものである。
〔課題を解決するための手段および作用〕本発明は、上
記目的を達成するため試料中の分析すべき抗原または抗
体の有無を、所要の固相粒子と反応させ、反応後の固相
粒子の凝集パターンによって判定する免疫学的分析方法
において、抗原または抗体を固相した第1の固相粒子と
、上記抗原または抗体とは異種の抗原または抗体を固相
した第2の固相粒子とを試料と反応させるようにした免
疫学的分析方法、 および試料中の分析すべき抗原または抗体の有無を、所
要の固相粒子と反応させ反応後の固相粒子の凝集パター
ンによって判定する免疫学的分析方法において、少なく
とも2種以上の抗原または抗体を固相した固相粒子、あ
るいは抗原およびこの抗原とは異種の抗原に対する抗体
を固相した固相粒子を試料と反応させるようにした免疫
学的分析方法としたものである。
記目的を達成するため試料中の分析すべき抗原または抗
体の有無を、所要の固相粒子と反応させ、反応後の固相
粒子の凝集パターンによって判定する免疫学的分析方法
において、抗原または抗体を固相した第1の固相粒子と
、上記抗原または抗体とは異種の抗原または抗体を固相
した第2の固相粒子とを試料と反応させるようにした免
疫学的分析方法、 および試料中の分析すべき抗原または抗体の有無を、所
要の固相粒子と反応させ反応後の固相粒子の凝集パター
ンによって判定する免疫学的分析方法において、少なく
とも2種以上の抗原または抗体を固相した固相粒子、あ
るいは抗原およびこの抗原とは異種の抗原に対する抗体
を固相した固相粒子を試料と反応させるようにした免疫
学的分析方法としたものである。
第1の発明によれば試料中に分析すべき抗原または抗体
のいずれかが存在する場合は、混合粒子のうぢのいずれ
か一方の固相粒子が上記抗原または抗体と反応して凝集
し、上記抗原、抗体の両方が存在する場合は混合粒子全
体が抗原、抗体と反応して強く凝集するので、能率よく
かつ適正な疾患の判定ができる。
のいずれかが存在する場合は、混合粒子のうぢのいずれ
か一方の固相粒子が上記抗原または抗体と反応して凝集
し、上記抗原、抗体の両方が存在する場合は混合粒子全
体が抗原、抗体と反応して強く凝集するので、能率よく
かつ適正な疾患の判定ができる。
また第2の発明では固相粒子は試料中の数種の抗原、抗
体を介して凝集するので、これを光学的または肉眼的手
段により観察して抗原、抗体の存在を確認できる。
体を介して凝集するので、これを光学的または肉眼的手
段により観察して抗原、抗体の存在を確認できる。
本発明の各実施例において抗原または抗体を固相するの
に用いられる粒子は、人間や動物の赤血球、細菌、カオ
リン、活性炭粉末、ポリスチレン、ポリトルエンラテッ
クス、アガロース、デキストラン、セルロース、ゼラチ
ン、ポリアクリルアミド等の一般の凝集反応に用いる各
種の粒子である。
に用いられる粒子は、人間や動物の赤血球、細菌、カオ
リン、活性炭粉末、ポリスチレン、ポリトルエンラテッ
クス、アガロース、デキストラン、セルロース、ゼラチ
ン、ポリアクリルアミド等の一般の凝集反応に用いる各
種の粒子である。
一方、抗原、抗体は、例えばHB、血液型、HLA等で
あるが、本発明では少なくとも2種以上の抗原、抗体を
或いは抗原およびこれとは異種の抗原に対する抗体を用
いるので、型特異性を示すような抗原系、抗体系を有す
るもので互いに反応し合わないものを用いる。
あるが、本発明では少なくとも2種以上の抗原、抗体を
或いは抗原およびこれとは異種の抗原に対する抗体を用
いるので、型特異性を示すような抗原系、抗体系を有す
るもので互いに反応し合わないものを用いる。
そして、抗原、抗体を粒子に固相する方法としては、物
理的吸着、化学的結合等の公知の方法を用いて行えばよ
い。
理的吸着、化学的結合等の公知の方法を用いて行えばよ
い。
凝集パターンの観察方法としては、肉眼による目視観察
や、反応容器底面に形成された凝集パターンに光を照射
し散乱光または透過光をディテクタで検知するといった
方法を用いればよい。
や、反応容器底面に形成された凝集パターンに光を照射
し散乱光または透過光をディテクタで検知するといった
方法を用いればよい。
次に本発明の第1実施例として、HBS抗体固相粒子と
HBo抗原固相粒子におけるHBs抗原、HB。
HBo抗原固相粒子におけるHBs抗原、HB。
抗体の測定について説明する。先ず、抗HB、抗体固相
粒子を作成するのであるが、(1)ポリアクリルアミド
性の粒径約4μmの粒子VCO1050(日本ゼオン社
製)の1%濃度粒子400μβに、0,01%Aize
n Victoria Pure BLUB Boil
(保土谷化学工業社製)を含む0.01%ポリビニル
アルコール(和光純薬社製)水溶液200μmを添加し
混合する。(2)次に前記(1)の混合液を0.15M
Nacl と0.旧%ザンコシネー)LN(日光ケミカ
ルズ社製)を含む0.01MTris−Hcl pH7
,5(以下Tris−2Sと称す)1顎で2、500r
pm x3minの遠心で3回洗浄し、’l”ris−
2sを400μβ添加する。(3)次にタンニン酸(牛
丼化学社製)をTrIS−2Sで50μg/誦の濃度に
調整し、その400μlと(2)で調整した粒子懸濁液
400 μlを混合し37℃で1時間インキユーベーシ
ョンする。
粒子を作成するのであるが、(1)ポリアクリルアミド
性の粒径約4μmの粒子VCO1050(日本ゼオン社
製)の1%濃度粒子400μβに、0,01%Aize
n Victoria Pure BLUB Boil
(保土谷化学工業社製)を含む0.01%ポリビニル
アルコール(和光純薬社製)水溶液200μmを添加し
混合する。(2)次に前記(1)の混合液を0.15M
Nacl と0.旧%ザンコシネー)LN(日光ケミカ
ルズ社製)を含む0.01MTris−Hcl pH7
,5(以下Tris−2Sと称す)1顎で2、500r
pm x3minの遠心で3回洗浄し、’l”ris−
2sを400μβ添加する。(3)次にタンニン酸(牛
丼化学社製)をTrIS−2Sで50μg/誦の濃度に
調整し、その400μlと(2)で調整した粒子懸濁液
400 μlを混合し37℃で1時間インキユーベーシ
ョンする。
(4)次に(3)をTris−231−で2.500r
pm X3m1nの遠心で4回洗浄して液を除去後、T
ris−23800μβを添加する。(5)次に118
.抗体をTris−23で0.20 μg/彪の濃度に
調整し、その400 μlと(4)の400 μlを混
合し37℃で1時間インキュベーションする。
pm X3m1nの遠心で4回洗浄して液を除去後、T
ris−23800μβを添加する。(5)次に118
.抗体をTris−23で0.20 μg/彪の濃度に
調整し、その400 μlと(4)の400 μlを混
合し37℃で1時間インキュベーションする。
(6)次に(5)を0.1 %ウシ血清アルブミン(B
S A)(ベーリンガーマンハイム社製)を含むTr
is2S lydで2.500rpm X3m1nの遠
心分離機で3回洗浄して液を除去後、0.01%BSA
を含むTris−231mlを添加する。
S A)(ベーリンガーマンハイム社製)を含むTr
is2S lydで2.500rpm X3m1nの遠
心分離機で3回洗浄して液を除去後、0.01%BSA
を含むTris−231mlを添加する。
以上が抗HB、抗体固相粒子の作成工程であり、次にH
Bc抗体固相粒子の作成工程について説明する。先ず前
者の作成工程のうち(1)〜(4)についてと同様の工
程を行う。次にHBC抗原をTris−2sで20μg
/mj2の濃度に調整し、その400 μlと上記抗1
1B5抗体固相粒子の作成工程(1)〜(4)で作成し
た400 μlの粒子懸濁液を混合し、37℃で1時間
インキュベーションする。次に0.1 %ウシ血清アル
ブミン(BSA)(ベーリンガーマンハイム社製)を含
むTris−2S 1 dで2.500rpm x
3 minの遠心で3回洗浄して上澄液を除去後、0,
1%BSAを含むTris−231−を添加する。
Bc抗体固相粒子の作成工程について説明する。先ず前
者の作成工程のうち(1)〜(4)についてと同様の工
程を行う。次にHBC抗原をTris−2sで20μg
/mj2の濃度に調整し、その400 μlと上記抗1
1B5抗体固相粒子の作成工程(1)〜(4)で作成し
た400 μlの粒子懸濁液を混合し、37℃で1時間
インキュベーションする。次に0.1 %ウシ血清アル
ブミン(BSA)(ベーリンガーマンハイム社製)を含
むTris−2S 1 dで2.500rpm x
3 minの遠心で3回洗浄して上澄液を除去後、0,
1%BSAを含むTris−231−を添加する。
以上がHBc抗原固相粒子の作成工程であり、次に2種
の特異性の異なるリガンドをそれぞれ表面に固定化した
固相粒子を混合して得られる混合粒子の作成工程につい
て説明する。先ず上述した(1)〜(4)の工程で得ら
れた未固相粒子500μlと抗HB、抗体固相粒子50
0μβを混合して抗HBs抗体固相粒子(I)とした。
の特異性の異なるリガンドをそれぞれ表面に固定化した
固相粒子を混合して得られる混合粒子の作成工程につい
て説明する。先ず上述した(1)〜(4)の工程で得ら
れた未固相粒子500μlと抗HB、抗体固相粒子50
0μβを混合して抗HBs抗体固相粒子(I)とした。
さらに抗HBc抗体の未固相粒子500μβとHBc抗
原固相粒子500μlを混合する。さらに上記混合した
抗HBs抗体固相粒子(I ”) 500μβとHBc
抗原固相粒子(II)500.clとを混合して混合固
相粒子(III)とした。
原固相粒子500μlを混合する。さらに上記混合した
抗HBs抗体固相粒子(I ”) 500μβとHBc
抗原固相粒子(II)500.clとを混合して混合固
相粒子(III)とした。
次にHBs抗原、抗日Bc抗体の希釈ザンプル系列の作
成工程について説明する。先ずHBS抗原(1μg/−
)を0,1%BSAを含むTris−23で1/2〜1
1512の希釈系列を作成し1(BS抗原サンプル溶液
(八)とした。さらに抗HBc抗体(1μg/ml)を
0.1%BSAを含むTris−2Sで1/2〜115
12の希釈系列を作成し抗HB、抗体サンプル溶液(B
) とした。さらに上記+1BS抗原の希釈系列と抗
日Bo抗体の希釈系列とを172〜11512のサンプ
ル溶液のそれぞれにつき等量づつ混合して混合サンプル
溶液(C) とした。
成工程について説明する。先ずHBS抗原(1μg/−
)を0,1%BSAを含むTris−23で1/2〜1
1512の希釈系列を作成し1(BS抗原サンプル溶液
(八)とした。さらに抗HBc抗体(1μg/ml)を
0.1%BSAを含むTris−2Sで1/2〜115
12の希釈系列を作成し抗HB、抗体サンプル溶液(B
) とした。さらに上記+1BS抗原の希釈系列と抗
日Bo抗体の希釈系列とを172〜11512のサンプ
ル溶液のそれぞれにつき等量づつ混合して混合サンプル
溶液(C) とした。
次にHBs抗原、抗HBC抗体の検出を行うのであるが
、検出を行うには先ずHBs抗原のサンプル溶液(A)
、抗HBc抗体のサンプル溶液(B) 、(八)と(B
)の混合サンプル溶液(C)の3種のサンプル溶液をそ
れぞれ25μβづつV底マイクロプレート(オリンパス
光学工業社製)へ分注する。次に抗11Bs抗体固相粒
子(■)、HBo抗原固相粒子(II)、(I)と(I
I)の混合固相粒子(III>を25μβづつV底マイ
クロプレートへ分注する。60分後、マイクロプレート
のウェルの底に各種の反応パターンが形成されるが、固
相粒子が一様に広がったパターンを陽性(十)、−様に
底面に貼りついた様に広がったパターンを陽性(+I−
)、底面の中心に濃く集まったパターンを陰性(−)、
底面の中心に薄く集まったパターンを牛腸性(±)とし
て凝集の有無を判定するのである。
、検出を行うには先ずHBs抗原のサンプル溶液(A)
、抗HBc抗体のサンプル溶液(B) 、(八)と(B
)の混合サンプル溶液(C)の3種のサンプル溶液をそ
れぞれ25μβづつV底マイクロプレート(オリンパス
光学工業社製)へ分注する。次に抗11Bs抗体固相粒
子(■)、HBo抗原固相粒子(II)、(I)と(I
I)の混合固相粒子(III>を25μβづつV底マイ
クロプレートへ分注する。60分後、マイクロプレート
のウェルの底に各種の反応パターンが形成されるが、固
相粒子が一様に広がったパターンを陽性(十)、−様に
底面に貼りついた様に広がったパターンを陽性(+I−
)、底面の中心に濃く集まったパターンを陰性(−)、
底面の中心に薄く集まったパターンを牛腸性(±)とし
て凝集の有無を判定するのである。
第1表〜第3表は、それぞれHBS抗原のサンプル溶液
(A)、抗HBo抗体のサンプル溶液(B)、(A>と
(B)の混合サンプル溶液(C)の凝集の有無を判定し
た結果を示したものである。これによると、第1表、第
2表 第2表 に明らかなように、HBs抗原のみのサンプル溶液(A
)、抗11Bc抗体のみのサンプル溶液(B)に対し混
合固相粒子(III)はクリーンな陽性(十)パターン
を示し、未反応の固相粒子による陰性(−)パターンは
ほとんどδ忍められなかった。
(A)、抗HBo抗体のサンプル溶液(B)、(A>と
(B)の混合サンプル溶液(C)の凝集の有無を判定し
た結果を示したものである。これによると、第1表、第
2表 第2表 に明らかなように、HBs抗原のみのサンプル溶液(A
)、抗11Bc抗体のみのサンプル溶液(B)に対し混
合固相粒子(III)はクリーンな陽性(十)パターン
を示し、未反応の固相粒子による陰性(−)パターンは
ほとんどδ忍められなかった。
方、第3表に示すように前記(A)と(B)の混合サン
プル溶液(C)に対しては混合固相粒子(TII)は、
特に強い凝集反応による陽性(+)が8忍められた。
プル溶液(C)に対しては混合固相粒子(TII)は、
特に強い凝集反応による陽性(+)が8忍められた。
このようにHB、抗原のみのサンプル溶液、抗HBc抗
体のみのサンプル溶液かあるいは両者の混合サンプル溶
液かによって反応パターンが明らかに異なるので、これ
を肉眼的または光学的に観察すれば試料中の抗原、抗体
の存在の有無を定性的かつ感度よく測定できる。
体のみのサンプル溶液かあるいは両者の混合サンプル溶
液かによって反応パターンが明らかに異なるので、これ
を肉眼的または光学的に観察すれば試料中の抗原、抗体
の存在の有無を定性的かつ感度よく測定できる。
次に本発明の第2実施例である抗HB、抗体HBc抗原
固相粒子を用いたllB5抗原、HBc抗体の測定につ
いて説明する。(1)ポリアクリルアミド性の粒子線4
μmの粒子VCO1,050(日本上オン社製)の1%
濃度粒子400μAに、001%Aizen Vict
oria Pure BLUB B[lH(保土谷化学
工業社製)を含む0.01%ポリビニルアルコール(和
光純薬社製)水溶液200μβを添加し混合する。(2
)次に前記(1)の混合液を0.15MNacl と0
.旧%ザンコシネートLN(日光ケミカルズ社製)を含
む0.01MTris−Hcl pH75(以下Tri
s−23と称す) 1mf!で2.500rpm x
3m1nの遠心で3回洗浄し、Tris−23を40
0μ!添加する。(3)次にタンニン酸く牛丼化学社製
)をTris−23で50μg/mi!の濃度に調整し
、その400μpと(2)の400 μ矛を混合し37
℃で1時間インキニーベーションする。(4)次に(3
)をTris−2S 1 mf2で2、500rpm
x 3m1nの遠心で4回洗浄して液を除去後、Tr
is−25800μ(!を添加する。(5)次に抗11
B5抗体をTris−2Sて20μg/mffの濃度に
調整する。(6)さらにIIBc抗原をTris−23
で、20μg/d濃度に調整する。(7)次に」二記(
5)、(6)による抗HB、抗体とHBc抗原300μ
βづつを混合し、十分攪拌する。(8)次に上記(1)
〜(4)による工程で作成した粒子懸濁液400μβと
上記(7)の工程で作成した液400μβを混合し、3
7℃で1時間インキュベートした。(9)次に上記(8
)で調整した粒子懸濁液を0.1%ウシ血清アルブミン
(BSA) (ベーリンガーマンハイム社製)を含む
Tris−2S 1 mf!で2.500rpm x
3 minの遠心で3回洗浄して液を除去後、0、I
BSAを含むTris2S1mlを添加し、抗11B、
抗体 1(B、抗原固相粒子を調整した。
固相粒子を用いたllB5抗原、HBc抗体の測定につ
いて説明する。(1)ポリアクリルアミド性の粒子線4
μmの粒子VCO1,050(日本上オン社製)の1%
濃度粒子400μAに、001%Aizen Vict
oria Pure BLUB B[lH(保土谷化学
工業社製)を含む0.01%ポリビニルアルコール(和
光純薬社製)水溶液200μβを添加し混合する。(2
)次に前記(1)の混合液を0.15MNacl と0
.旧%ザンコシネートLN(日光ケミカルズ社製)を含
む0.01MTris−Hcl pH75(以下Tri
s−23と称す) 1mf!で2.500rpm x
3m1nの遠心で3回洗浄し、Tris−23を40
0μ!添加する。(3)次にタンニン酸く牛丼化学社製
)をTris−23で50μg/mi!の濃度に調整し
、その400μpと(2)の400 μ矛を混合し37
℃で1時間インキニーベーションする。(4)次に(3
)をTris−2S 1 mf2で2、500rpm
x 3m1nの遠心で4回洗浄して液を除去後、Tr
is−25800μ(!を添加する。(5)次に抗11
B5抗体をTris−2Sて20μg/mffの濃度に
調整する。(6)さらにIIBc抗原をTris−23
で、20μg/d濃度に調整する。(7)次に」二記(
5)、(6)による抗HB、抗体とHBc抗原300μ
βづつを混合し、十分攪拌する。(8)次に上記(1)
〜(4)による工程で作成した粒子懸濁液400μβと
上記(7)の工程で作成した液400μβを混合し、3
7℃で1時間インキュベートした。(9)次に上記(8
)で調整した粒子懸濁液を0.1%ウシ血清アルブミン
(BSA) (ベーリンガーマンハイム社製)を含む
Tris−2S 1 mf!で2.500rpm x
3 minの遠心で3回洗浄して液を除去後、0、I
BSAを含むTris2S1mlを添加し、抗11B、
抗体 1(B、抗原固相粒子を調整した。
+1BS抗原、抗ll5o抗体の各希釈ザンプル系列の
作成は第1実施例と同様に行った。
作成は第1実施例と同様に行った。
次にHBs抗原、抗HBc抗体の検出を行った。先ずH
B、、抗原のサンプル溶液、抗HBc抗体のサンプル溶
液、両者の混合サンプル溶液を25μβづつV底マイク
ロプレー■へ分注した。次に上記(9)の工程で作成し
た抗HBS抗体HBC抗原固相粒子を25μβづつ、■
底マイクロプレートへ分注した。60分後、マイクロプ
レートのウェルの底に形成された各種の凝集パターンを
第1実施例と同様の方法で観察をした。
B、、抗原のサンプル溶液、抗HBc抗体のサンプル溶
液、両者の混合サンプル溶液を25μβづつV底マイク
ロプレー■へ分注した。次に上記(9)の工程で作成し
た抗HBS抗体HBC抗原固相粒子を25μβづつ、■
底マイクロプレートへ分注した。60分後、マイクロプ
レートのウェルの底に形成された各種の凝集パターンを
第1実施例と同様の方法で観察をした。
本実施例の場合は、HBS抗原、抗HB、抗体のいずれ
か一方または両方を含む128倍希釈までのサンプル溶
液の全てに、陰性の凝集パターンを生じた。本実施例に
よれば固相粒子が感度よく反応して各種パターンの凝集
を生じさせるので、試料中のHBs抗原、HBc抗体の
存在を測定できる。
か一方または両方を含む128倍希釈までのサンプル溶
液の全てに、陰性の凝集パターンを生じた。本実施例に
よれば固相粒子が感度よく反応して各種パターンの凝集
を生じさせるので、試料中のHBs抗原、HBc抗体の
存在を測定できる。
本発明は以上の実施例に限定されるものではなく、幾多
の変更、変形が可能である。例えば、第1実施例におい
て混合する固相粒子の割合を1対1としたが、必要に応
じてその割合を変えてもよい。また、粒径、材質等が同
一の固相粒子により混合固相粒子を作成しているが、固
相する抗原または抗体の種類に応じて混合する固相粒子
の粒径、材質、色調を異ならせてもよい。こうすること
によって凝集した固相粒子によるパターンのサイズ、形
状、色調等により、試料中の抗原、抗体の種類の識別が
可能となる。
の変更、変形が可能である。例えば、第1実施例におい
て混合する固相粒子の割合を1対1としたが、必要に応
じてその割合を変えてもよい。また、粒径、材質等が同
一の固相粒子により混合固相粒子を作成しているが、固
相する抗原または抗体の種類に応じて混合する固相粒子
の粒径、材質、色調を異ならせてもよい。こうすること
によって凝集した固相粒子によるパターンのサイズ、形
状、色調等により、試料中の抗原、抗体の種類の識別が
可能となる。
また、第1実施例、第2実施例では固相する抗原または
抗体の質量割合を1対1としているが、この割合も必要
に応じて変更してもよい。さらに固相するのは2種類の
抗原、抗体に限定されず、3種類以上の抗原、抗体を固
相粒子に別個にあるいはいっしょに固相してもよい。
抗体の質量割合を1対1としているが、この割合も必要
に応じて変更してもよい。さらに固相するのは2種類の
抗原、抗体に限定されず、3種類以上の抗原、抗体を固
相粒子に別個にあるいはいっしょに固相してもよい。
以−ヒの如く本発明によれば抗原または抗体を固相した
第1の固相粒子と、上記抗原または抗体とは異種の抗原
または抗体を固相した第2の固相粒子を所要の試料と反
応させるようにしたので、少ない工数で試料中の異種の
抗原または抗体のいずれか1種を含むか、複数種を含む
かを凝集の有無により判定できる。
第1の固相粒子と、上記抗原または抗体とは異種の抗原
または抗体を固相した第2の固相粒子を所要の試料と反
応させるようにしたので、少ない工数で試料中の異種の
抗原または抗体のいずれか1種を含むか、複数種を含む
かを凝集の有無により判定できる。
また、2種以上の抗原または抗体を固相した固相粒子あ
るいは抗原およびこの抗原とは異種の抗原に対する抗体
を固相した固相粒子を所要の試料と反応させるようにし
たので、試料中の複数種の抗原、抗体のいずれかを含ん
でいれば凝集反応が生じ、分析すべき抗原、抗体の有無
を判定できる。
るいは抗原およびこの抗原とは異種の抗原に対する抗体
を固相した固相粒子を所要の試料と反応させるようにし
たので、試料中の複数種の抗原、抗体のいずれかを含ん
でいれば凝集反応が生じ、分析すべき抗原、抗体の有無
を判定できる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、試料中の分析すべき抗原または抗体の有無を、所要
の固相粒子と反応させ、反応後の固相粒子の凝集パター
ンによって判定する免疫学的分析方法において、 抗原または抗体を固相した第1の固相粒子と、上記抗原
または抗体とは異種の抗原または抗体を固相した第2の
固相粒子とを試料と反応させるようにした免疫学的分析
方法。 2、試料中の分析すべき抗原または抗体の有無を、所要
の固相粒子と反応させ反応後の固相粒子の凝集パターン
によって判定する免疫学的分析方法において、 少なくとも2種以上の抗原または抗体を固相した固相粒
子、あるいは抗原およびこの抗原とは異種の抗原に対す
る抗体を固相した固相粒子を試料と反応させるようにし
た免疫学的分析方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP13675989A JPH032565A (ja) | 1989-05-30 | 1989-05-30 | 免疫学的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP13675989A JPH032565A (ja) | 1989-05-30 | 1989-05-30 | 免疫学的分析方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH032565A true JPH032565A (ja) | 1991-01-08 |
Family
ID=15182842
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP13675989A Pending JPH032565A (ja) | 1989-05-30 | 1989-05-30 | 免疫学的分析方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH032565A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008029873A1 (fr) * | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Nitto Boseki Co., Ltd. | procédé de détermination d'antigène et d'anticorps dirigé contre l'antigène et réactif de détermination utilisé à cet effet |
JP2009543084A (ja) * | 2006-07-13 | 2009-12-03 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 免疫抑制薬に関する均一系二重受容体凝集アッセイ |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5924256A (ja) * | 1982-07-31 | 1984-02-07 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | 免疫学的測定方法及び試薬 |
JPS6038656A (ja) * | 1983-08-10 | 1985-02-28 | Green Cross Corp:The | 赤血球凝集反応試薬 |
JPS6281567A (ja) * | 1985-10-07 | 1987-04-15 | Showa Denko Kk | 粒子凝集反応を用いる定量方法 |
-
1989
- 1989-05-30 JP JP13675989A patent/JPH032565A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5924256A (ja) * | 1982-07-31 | 1984-02-07 | Mochida Pharmaceut Co Ltd | 免疫学的測定方法及び試薬 |
JPS6038656A (ja) * | 1983-08-10 | 1985-02-28 | Green Cross Corp:The | 赤血球凝集反応試薬 |
JPS6281567A (ja) * | 1985-10-07 | 1987-04-15 | Showa Denko Kk | 粒子凝集反応を用いる定量方法 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009543084A (ja) * | 2006-07-13 | 2009-12-03 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 免疫抑制薬に関する均一系二重受容体凝集アッセイ |
WO2008029873A1 (fr) * | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Nitto Boseki Co., Ltd. | procédé de détermination d'antigène et d'anticorps dirigé contre l'antigène et réactif de détermination utilisé à cet effet |
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