UA44223C2 - Спосіб лікування пацієнтів, які страждають на саркому капоші, спосіб лікування пацієнтів, які страждають на гепатит с, препарат для лікування пацієнтів, які страждають на саркому капоші, препарат для лікування пацієнтів, які страждають на вірусний гепатит с - Google Patents

Abstract

Спосіб лікування хворих, які страждають на саркому Капоші та гепатит С з використанням консенсусного лейкоцитарного інтерферону людини в терапевтично ефективних дозах. Наводиться склад фармацевтичних препаратів, що містять такий інтерферон.

Description

Интерфероньї являются подклассом цитокининов, которне проявляют противовирусную и антипролиферативную активность. На основе биохимических и иммунологических свойств человеческие интерфероньі! подразделяются на три класса: интерферон альфа (лейкоцитарньй), интерферон бета (фибробластньй) и интерферон гамма (иммунньй).

По крайней мере для 14 интерферонов альфа (разделяемьїх на подтипь! от А до Н) известнь!ї точнье аминокислотнье последовательности, установленнье путем вьделения и секвенирования ДНК, кодирующих зти полипептидь.

Интерфероньї альфа привлекают значительное внимание как потенциальнье терапевтическиє агентьі, обусловленное их противовирусной активностью и способностью ингибировать рост опухолей.

Метод очистки человеческого лейкоцитарного интерферона, вьіделенного из фракции светлого слоя кровяного сгустка клеток крови, описан в патенте США 4.503.035. Человеческий лейкоцитарньйй интерферон, приготовленньй зтим методом, содержит смесь человеческих лейкоцитарньхх интерферонов с различньми аминокислотньми последовательностями. Очищенньій материал имел удельную активность от 0,9 х 108 до 4 х 108ед/мг белка, когда бьіла использована линия, клеток бика МОВБК, и от 2 х 105 до 7,6 х 10Зед/мг белка, когда била использована линия клеток человека Ад 1732. Метод ингибирования цитопатического зффекта, применяеємьй для определения противовирусной активности, раскрьт в патенте США 4.241.174. МИзмеренная активность интерферона бьла вьічислена по отношению к стандарту сравнения для человеческого лейкоцитарного интерферона, предоставленно му

Национальньїм Институтом Здравоохранения.

Методьі конструирования рекомбинантньх ДНК плазмид, содержащих нуклеотиднье последовательности, кодирующие, по крайней мере, часть человеческого лейкоцитарного интерферона, и методь! зкспрессии в Е.соїї полипептида, имеющего иммунологическую или биологическую активность человеческого лейкоцитарного интерферона, изложень! в патенте США 4.530.901.

Создание гибридньх сгенов интерферона альфа, содержащих комбинации различньх подтипов последовательностей (например, и, А и В, А и Е), описьіваєтся в патентах США 4.414.150, 4.456.748 и 4.678.751.

Патентьї США 4.695.623 и 4.897.471 описьівают новне полипептидьі человеческого лимфоцитарного интерферона, имеющие аминокислотнье последовательности, которние содержат общие или преобладающие аминокислоть! по сравнению с найденньми в каждом таком положениий у полипептидов природньїх подтипов интерферона альфа, и обозначенньюе как "согласованнье" человеческие лимфоцитарнье интерферонь (ІМЕ-соп). Раскрьвваемье последовательности аминокислот ІМЕ-соп обозначаются как ІМЕ-сопі1, ІМЕ-соп2 и ІМЕ-соп3. Описьіваются и препарать! полученньмх генов, кодирующих ІЕМ-соп, и зкспрессия зтих генов в Е.соїї.

Очистка ІРМ-соп!, продуцируемого Е.соїї, описана Кієїп еї аїЇ. (У.СНготаїйод., 1988, 454, 205 - 215). ІЄМ-соп!, очищенньй таким образом, описан и имеет удельную активность З х 1О0Уед/мг белка, измеренную в опьте ингибирования цитопатического зффекта при использований линии клеток человека Т98а2 (Рів еї аї. 9У.Іпіепегоп Везв., 1898, 9, 97 - 114). Очищенньй ІМЕ-соп1 включает три изоформь, что определено изозлектрическим фокусированием, которне бьіли идентифицировань! какметионил-ІЕМ-соп!1, десмети-онил-ІЕМ-соп1 и десметионил-ІЕМ-соп1, у которого конечная аминогруппа блокирована ацетильной группой (Ківєїп єї а!. Агой. Віоспет. Віорпув., 1990, 276, 531 - 537).

Интерферон альфа в настоящее время разрешен в США и в других странах для лечения волосистой клеточной лейкемии, венерических бородавок, саркомьї Калоши (рак, обьічно наблюдающийся у пациентов, страдающих

СПИиДоОм) и хронических гепатитов ни А, ни В. Два препарата интерферона альфа получили разрешение для терапевтического использования: интерферон альфа-2а, продаваемьй под торговьм названием Роферон А, и интерферон альфа-2о, продаваеємьй под торговьім названием Интрон А. Аминокислотнье последовательности

Роферона А и Интрона А различаются структурно лишь по единственной позиции, но в других отношениях идентичнь аминокислотньім последовательностям интерферона альфа подтипа 2 (подтипа А).

Кроме отмеченньїх показаний интерфероньі альфа используют или испьітьївают сами по себе или в сочетаниий с химиотерапевтическими агентами при многих других расстройствах клеточной пролиферации, включая хроническую миелогенную лейкемию, множественнье миеломь!), пузьюрчатку, рак кожи (базальная клеточная карцинома и малигнизированная миелома), карциному почек, рак яичников, лимфому с низким уровнем лимфоцитов, лимфому клеток кожи и глиому. Интерферон альфа может бьіть зффективен в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами для лечения плотньїх опухолей, которне возникают в легких, толстой и прямой кишке, и рака груди (см.

Возепрего еї аї. "Ргіпсірієз апа Арріїсайопв ої Віоіодіє Тнегару" іп Сапсег: Рііпсіріє5 апа Ргасіїсе5 ої Опсоіоду, Зга єд.,

Оеміа єї а!., едв, рр.301 - 547, ВаІтег ОСІСР, Апп. РнаптасоїНег, 1990, 24, 761 - 768).

Известно, что интерфероньї альфа воздействуют на многие клеточнье функции, включая репликацию ДНК и синтез белка и РНК в равной мере в нормальньх и ненормальньїх клетках. Таким образом, цитотоксические зффекть! интерферона не ограничиваются опухолевьми или инфицированньми вирусами клетками, а проявляются и в нормальньїх, здоровьїх клетках. Как результат, в процессе терапиий интерфероном возникают нежелательнье побочнье зффектьї, особенно когда требуются вьісокие дозьї интерферона. Назначение интерферона может привести к снижению уровня красньїх клеток крови, бельїх клеток крови и тромбоцитов. Вьісокие дозьї интерферона обьічно приводят к усилению гриппо-подобньхх зффектов (например, лихорадка, утомляемость, головная боль, озноб), к желудочно-кишечньім расстройствам (например, анорексия, тошнота, понос), к головокружению и кашлю. Бьло бьї весьма полезньм снизить или устранить нежелательнье побочнье зффектьї интерферонотерапии без снижения терапевтической зффективности такой терапии.

Позтому, целью настоящего изобретения является лечение состояний, поддающихся лечению интерфероном, но при котором побочнье зффекть, обьічно обусловленнье применением интерферона альфа, значительно снижень, по сравнению с практикуемьми в настоящее время методами лечения, или полностью устраненьі. Другой целью изобретения является достижениеє повьшенного, по сравнению с практикуемьми в настоящее время методами, терапевтического зффекта лечения заболеваний интерфероном при реально не пропорциональном увеличений в частоте или вираженности нежелательньх побочньїх зффектов.

Сущность изобретения

Изобретение охватьшваєт способьї лечения различньїх состояний, поддающихся лечению интерфероном, и предусматриваєт назначение млекопитающим, преимущественно человеку, терапевтически зффективного количества "согласованного" человеческого лимфоцитарного интерферона (ІЕМ-соп). Мзобретениеє основано на том вновь открьтом факте, что ІЕМ-соп не вьізьшаєт той же степени побочньїх зффектов у пациентов, которье вьіїзьівают интерфероньі альфа. Состояния, которье могут лечиться в соответствий с настоящим изобретением, обьчно, те, которне поддаются лечению интерферонами альфа. Иньми словами, ІЕМ-соп реально полезен для лечения тех состояний, которье могут лечиться интерферонами альфа, такими как Интрон А, Типичнье состояния включают, но не ограничиваются, расстройствами клеточной пролиферации и вирусньми заболеваниями. ІЕМ-соп зффективен при леченийи расстройств клеточной пролиферации, часто обусловленньїх раковьїіми заболеваниями. Такие расстройства включают, но не ограничиваются, волосистой клеточной лейкемией и саркомой Капоши. ІЕМ-соп может бьіть полезен сам по себе или в комбинации с другими лекарственньми препаратами для лечения рака и других расстройств пролиферации. В предпочтительном варианте осуществления изобретения ІБЕМ-соп используют совместно с терапевтически зффективньм о количеством одного или более агентов, стимулирующих пролиферацию или дифференциацию клеток, таких как стимулирующий колонийи гранулоцитов фактор (0-С5Е), стимулирующий колоний гранулоцитов/макрофагов фактор (24М-С5Е), интерлейкин-1, интерлейкин-3, интерлейкин-6, зритропозтин и фактор стволовьїх, клеток. (4-СОЕ является предпочтительньїм агентом для совместного использования с ІЕМ-соп.

Вируснье заболевания, которье могут лечиться ІЕМ-соп, включают гепатит А; гепатит С; другие гепатить! ни А, ни

В; гепатит В; вирусньій герпес (ЕВ, СМІ, простой герпес); папилому; проявления, вьізваннье поксвирусами, пикорнавирусами, аденовирусами, риновирусами, вирусами НТІМ І и НТІ М ІІ и ротавирусами человека.

Хотя ранее бьло показано, что перечисленнье вьше состояния могли лечиться интерфероном, побочнье зффекть, вьізьі'ваемье таким лечением, серьезно ограничивали широкое использование зтого метода лечения. В некоторьх случаях, в таких как инфекция, вьізванная вирусом Зпштейна-Барра, побочнье зффектьі, сопровождающие лечение интерфероном альфа, фактически исключали возможность лечения. Таким образом, преимущества настоящего изобретения состоят в том, что состояния, которне можно лечить ІЕМ-соп, включают такие состояния, при которьїх лечение интерфероном альфа показьшаєт такую же зффективность, но которье не могут лечиться известньми интерферонами вследствие неблагоприятньїх побочньїх зффектов, которне перевешивают достоинства лечения. Теперь заявителем обнаружено и показано, что лечение неприродньм интерфероном, вьібранньім из "согласованньїх" интерферонов (ІЕМ-соп), приводит к существенному снижению или к устранению побочньїх зффектов, по сравнению с имеющими место при лечениий интерфероном альфа. Снижение или устранение побочньїх зффектов может бьть продемонстрировано независимо от состояний, которье подвергались лечению. Снижение или устранение побочньїх зффектов, открьтое заявителем как свойство ІЕМ-соп, не могло бьіть предсказано на основе предшествующих результатов, известньїх в данной области знаний. В настоящее время клинические результать,, представленньюе в настоящей заявке, ясно показьивают не только то, что ІЕМ-соп вьізьівает сниженнье побочнье зффекть! или не вьізьявает их вообще при той же дозировке, что и интерферон альфа, но и то, что ІЕМ-соп может назначаться в больших в З - 5 раз дозах, не вьізьівая побочньїх зффектов, ограничивающих дозировку.

Дополнительно далее показано, что ІЕМ-соп имеет одинаковую или более вьісокую активность, чем Интрон А в описанньїх вьіше показателях. В частности, ІЕМ-соп проявляет более вьісокую антипролиферативную активность, чем

Интрон А. Следовательно, лечение расстройств клеточной пролиферации при использований ІЕМ-соп обеспечиваєт повьішенную зффективность и безопасность, по сравнению с другими используемьми в настоящее время методами лечения интерфероном. Назначение терапевтических зффективньїх количеств ІЕМ-соп приводит к более бьістрому лечению или к расширению круга заболеваний, поддающихся лечению, по сравнению с применяемьми в настоящее время методами, в то время как не наблюдается соответствующего увеличения частотьї или вьраженности сопутствующих нежелательньїх побочньїх зффектов. Кроме того, терапевтически зффективнье количества ІЕМ-соп могут бить меньшими, чем количества интерферона, используемье в настоящее время в принятьїх схемах лечения.

Как результат, в некоторьїх случаях сниженнье дозь! ІЕМ-соп дают те же терапевтические результать, что и более вьісокие дозьі других интерферонов, но при уменьшенньїх или устраненньїх нежелательньїх побочньїх зффектах, сопутствующих используемьм в настоящее время методам интерферонотерапии.

ІЕМ-соп является неприродньім полипептидом, обладающим антипролиферативной активностью. Предпочтителен вариант, когда ІЕМ-соп является полипептидом, имеющим аминокислотную последовательность ІЕМ-соп1, ІЕМ-соп2 или ІЕМ-соп3. Наиболее предпочтительно, когда ІЕМ-соп имеет аминокислотную последовательность ІЕМ-соп1.

Изобретение также связано с фармацевтическими препаратами, включающими терапевтически зффективнье количества ІЕМ-соп вместе с оподходящими разбавителями, вспомогательньми веществами, носителями, консервантами и/или солюбилизаторами.

Краткое описание изобретения

На Фигурах 1 - 7 показана сравнительная антипролиферативная активность ІБЕМ-соп! и Интрона А при использований линии клеток ЕзкКої (линии волосистьїх лейкозньхх клеток), когда интерферонь добавлялись к суспензийи клеток Е5Кої! в количестве 0,1 - 0,5--1-5-10- 50 - 100нг/мл, соответственно.

На Фигуре 8 показаньй начальнье и текущие средниеє величиньї максимально переносимой дозь! (МПД), достигнутье у пациентов с саркомой Капоши, подвергнутьхх лечению Интроном А, ІЕМ-соп1 или ІЕМ-соп1 совместно с г-теаСоБ.

Подробное описание изобретения

Мспользованньй "согласованньй" человеческий лимфоцитарньй интерферон (ІЕМ-соп) - неприродньй полипептид, которьій преобладающе включаєт теаминокислотньюе остатки, которне являются общими для всех последовательностей природньїх подтипов человеческого лимфоцитарного интерферона, и которьй включаєт в одной или более позициях, где нет аминокислот общих для всех подтипов, аминокислотьі, которне преобладающе наблюдаются в зтих позициях, и, во всяком случає, не включаєт каких-либо аминокислотньїх остатков, которье не встречаются в зтих позициях, по крайней мере, у одного природного подтипа. ІЕМ-соп охватьваєт, но не ограничиваєется аминокислотньіми последовательностями, обозначаємьми ІЕМ-сопі, ІЕМ-соп2 и ІЕМ-соп3, которье в общем раскрьїть! патентами США 4.695.111 и 4.897.471. Последовательности ДНК, кодирующие ІЕМ-соп, могут бьіть синтезировань как описано в ранее указанньх патентах или другими стандартньми методами.

Полипептидьі ІЕМ-соп являются преобладающими продуктами зкспрессии созданной последовательности ДНК, трансформированной или трансфицируемой в клетку-хозяин, особенно в Е.соїї. Таким образом, ІЕМ-соп является рекомбинантньм ІЕМ-соп. ІЕМ-соп, предпочтительно продуцируемьй в Е.соїї очищают процедурами, известньїми специалисту в данной области, и в общем описанньми Кієїп еї аЇ. (см. вьіше, Кієїп єї аїІ., 1988) для ІЕМ-соп!1.

Очищенньй ІРЕМ-соп может включать смесь изоформ, например, очищенньй ІЕМ-соп! включает смесь метионил-ІЕМ- соп1, десметионил-ІЕМ-соп1 и десметионил-ІЕМ-соп1 с блокированной терминальной аминогруппой (Ківїп еї аї!., 1990).

Однако ІЄМ-соп может включать и изолированнье индивидуальнье изоформь!. Изоформь ІЕМ-соп разделяют такими методами, как изозлектрическое фокусирование и другими, известньіми специалистам в данной области.

Предмет изобретения включаєт способ лечения состояний, излечиваемьх интерфероном альфа, при зтом снижение или устранение одного или более побочньїх зффектов, связанньїх с лечением интерфероном альфа, предусматриваєт назначение пациенту терапевтически зффективньх количеств ІЕМ-соп. Преимущественньй вариант осуществления изобретения - зто метод лечения, включающий назначение терапевтически зффективньх количеств

ІЕМ-соп1, ТЕМ-соп2 и ІЕМ-соп3. Наиболее предпочтительно назначение терапевтически зффективньх количеств ІЕМ- сопі.

Понятие "снижение или устранение одного или более побочньїх зффектов, сопутствующих назначению интерферона" должно бьіть ясньім и понятньмм специалисту в данной области. Для определения зтих показателей можно использовать некоторье из множества методов измерений частотьй и степени вьураженности побочньх зффектов, сопутствующих интерферонотерапии, или сравнивать профили побочньїх зффектов разньїх интерферонов.

Одним из подходящих интерферонов для целей сравнения с "согласованньм" интерфероном является Интрон А (интерферон альфа-2б), виіпускаемьй фирмой 5спегіпдо-Ріоцдн.

Традиционньій путь оценки вьиіраженности побочньїх зффектов - использованиє стандартной шкаль, такой как принята ВОЗ (Всемирной Организацией Здравоохранения). Шкала, которая в настоящее время широко используется клиницистами, предусматриваеєт следующие степени (уровни) побочньїх зффектов: степень |, слабая; степень І, средняя; степень І, сильная; степень ІМ, уурожающая жизни. Хотя некоторая субьективность присутствует в зтой классификации, когда отдельнье клиницистьї формируют группьї, сравнение профилей побочньх зффектов, даваемьх двумя лекарствами, может бьіть достоверньм и приемлемьм для врачей. Проводя сравнение, врачи обьічно будут видеть, приводит или нет назначение лекарства в данной дозе к достижению дозьії, ограничиваемой токсичностью. Доза, ограничиваемая токсичностью, наблюдаєтся когда пациент судит о побочном зффекте как о непереносимом. Когда зтот факт имеет место, врач может или снизить дозировку (обьічно Змлн. единиц для Интрона

А или "согласованного" интерферона) или на время отменить лекарство с последующим возобновлением назначения в той же или в более низкой дозе. В некоторьїх случаях, когда дозировка достигает дозьі, ограничиваемой токсичностью, результатом может бьіть субоптимальньй режим лечения с менееєе, чем оптимальной зффективностью.

Таким образом, другой путь доказательства снижения побочньїх зффектов - зто факт снижения числа случаев достижения дозьі, ограничиваемой токсичностью. Сравнение доз, ограничиваемьх токсичностью, для Интрона А и "согласованного" интерферона представлено в Примере 3. Хотя могут бьіть вьіполнень!і! другие измерения профилей побочньїх зффектов, результат одинаков: по сравнению с другими интерферонами, особенно с интерферонами альфа, такими как Интрон А и Роферон (фирмь! Нийтап Га НРоспеє), использование "согласованного" интерферона приводит к достижению меньшего числа доз, ограничиваеємьх токсичностью, и в общем пациенть! чувствуют себя лучше при всех дозировках лекарств, которне использовались для лечения.

Подходящие состояния для лечения ІЕМ-соп включают многочисленнье расстройства клеточной пролиферации, особенно различнье формь! рака. Зти состояния включают, но не ограничиваются, волосистой клеточной лейкемией, саркомой Капоши, хронической миелогенной лейкемией, множественньми миеломами, пузьірчаткой, раком кожи (базальной клеточной карциномой и малигнизированной миеломой), карциномой почек, раком яичников, лимфомой с низким уровнем лимфоцитов, лимфомой Т клеток кожи и глиомой.

Другие состояния, подходящие для лечения ІБМ-соп, включают различнье вируснье заболевания. Зти заболевания включают, но не ограничиваются, гепатитом А, гепатитом В, гепатитом С, гепатитом ни А, ни В (иньм, чем гепатит В или С), заболеваниями, вьізванньми вирусом Зпштейна-Барра, вирусом НІМ, вирусом герпеса (ЕВ,

СМІ, простьїм герпесом), поксвирусами, пикорнавирусами, аденовирусами, риновирусами, вирусом НТІМ І, вирусом

НТІМ її, ротавирусами человека. ІРМ-соп может бьть использован как таковой или в комбинации с другими лекарствами для лечения указанньїх заболеваний. Например, ІЕМ-соп может назначаться совместно с терапевтически зффективньми количествами одного или нескольких химиотерапевтических средств, таких как бусульфан, 5- фторурацил, зидовудин (азатимидин, АТ), лейковорин, мельфалан, преднизон, циклофосфамид, дакарбазин, цисплатин и дипиридамол. ІЕМ-соп может также назначаться совместно с цитокинами, такими как интерлейкин-2.

Терапевтически зффективнье количества ІЕМ-соп могут назначаться в комбинации с терапевтически зффективньмм количеством одного или нескольких факторов, которне стимулируют дифференциацию миелоидньмх клеток с тем чтобьі преодолеть зффекть! миелосупрессии, наблюдающиеся в процессе лечения интерфероном. Такие агентьї включают, но не ограничиваются, фактором, стимулирующим колоний гранулоцитов ((3-С5Е), фактором, стимулирующим колонийи гранулоцитов/макрофагов (24М-С5Е), интерлейкином-1, интерлейкином-3, интерлейкином-6, зритропозтином и фактором стволовьїх клеток. Фактор стволовьїх клеток стимулирует пролиферацию молодьх гематопозтических клеток и зто бьіло описано в американской Заявке 573.616. Предпочтительньїм агентом является а-С5к.

В Примерах 1 - 3, приводимьїх ниже, показано, что ІЕМ-сопі! является зффективньм антипролиферативньм агентом в отношений волосистой клеточной лейкемии и сопутствующей синдрому приобретенного иммунодефицита человеку саркомь! Капоши.

Антипролиферативная активность ІЕМ-соп! и МИнтрона А, испьштанная на клетках ЕвзКоЇ (линии волосистьх лейкемических клеток), показана в Примере 1. Показано, что ІЕМ-сопі1 имеет более вьісокую антипролиферативную активность, чем Интрон А, в широком диапазоне концентраций. Похожие результать! били получень, когда ІЕМ-сопі бьл сравнен с Рофероном А. Зти результать! показьшвают, что ІЕМ-сопі имеет более вьісокую терапевтическую активность, когда назначаєтся при тех же концентрациях, что и Интрон А. С другой стороньі, чтобь! обеспечить терапевтическую зффективность, зквивалентную таковой Интрона А, требуются более низкие концентрации ІЕМ-соп1.

Пример 2 описьввает результать! сравнительного изучения ІЕМ-сопі! и Интрона А при лечениий сопутствующей

СПИДУ саркомьї Капоши. Бьло показано, что пациентьї, получающие ІЕМ-соп!, переносят более вьісокую дозу лекарства, чем пациентьї, получающие Интрон А. Кроме того, пациентьї, получающие одновременно ІЕМ-соп!і и (-

С5Е, переносят более вьісокие дозьі ІЕМ-соп!, чем пациентьі, получающиєе только ІЕМ-сопі (см. Фиг. 8). В зтом изучении все пациенть! получали азатимидин (АТ) как часть лечения инфекции, вьізванной вирусом НІМ. Азатимидин, назначаемьій как таковой, не зффективен в отношений саркомь! Капоши.

ІЕМ-соп! показал большую безопасность, чем Интрон А, о чем можно бьло судить по снижению частоть проявлений токсичности степени З при назначений ІЄМ-соп1. Лечение ІБЕМ-сопі! показало снижение темпов падения числа нейтрофиллов и числа нарушений функции печени, по сравнению с результатами, достигаемьми при лечений

Интроном А, в то время, как лечение ІЕМ-соп1 и г-тескаС5А полностью устраняет проявления токсичности степени З (см. Таблицу 2).

Пример 3 представляет даннье, полученнье в результате клинических испьітаний на пациентах, страдающих вирусньїм гепатитом.

Предполагаєтся, что фармацевтические препарать! включают фармацевтически зффективнье количества ІЕМ-соп совместно с фармацевтически приеємлемьми носителями, вспомогательньми веществами, разбавителями, консервантами и/или солюбилизаторами. Фармацевтические композиции ЕМ-соп включают как разбавители различнье буферньсе растворь! (например, ТРИС, ацетатньій, фосфатньйй буфера) с определенньім значением рі и ионной силь, носители (например, человеческий сьівороточньйй альбумин), солюбилизаторь! (например, твин, полисорбат) и консерванть (тимерозол, бензиловьй спирт).

В общем, компонентьї фармацевтических препаратов могут бьіть вьібрань! из обьічно используемьх для зтих целей с интерферонами и с другими антиполиферативньми или противовирусньмми агентами, которье известнь! специалистам в зтой области. Фармацевтические препарать! ІЕМ-соп вьіпускаются в виде иньекционньїх растворов или лиофилизированньїх порошков, которне растворяются перед употреблением.

Терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп может бьіть определено каждьм специалистом в зтой области, принимая во внимание такие обстоятельства, как время полужизни препаратов ІЕМ-соп, путь введения и диагноз. В общем, терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп для лечения расстройств клеточной пролиферации может составлять от 2 х 105 до 60 х 105 единиц на пациента при назначений несколько раз в неделю. Болеє низкиє дозь! зффективньі при лечений волосистой клеточной лейкемии, в то время, как более вьісокие дозьї приемлемь! для лечения саркомь! Калоши. Терапевтически зффективнье количества ІЕМ-соп обеспечивают 20 - 8095-ное уменьшение опухоли, зависящее от типа опухоли, в течение 6 месяцев. В общем, терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп для лечения вирусньїх заболеваний будет лежать в пределахоот З х 102 до 30 х 102 единиц, предпочтительно от 6 х 105 до 15 х 106 единиц на пациента, назначаємоє несколько раз (например, 2 - 7, предпочтительно З раза) в неделю.

Предпочтительньйй путь введения - введениеє в кровь млекопитающего, когда иньекции могут бьть внутривенньіми, внутримьшечньіми, подкожньми или в место поражения. Введение может бьіть также осуществлено перорально или интраназально. Соответствие назначаемого фармацевтического препарата избранному пути его введения определяеєтся специалистом в зтой области.

Следующие Примерь более полно иллюстрируют изобретениєе, но они не должнь истолковьваться как ограничивающие сферу его действия.

Пример 1

Антипролиферативная активность ІЕМ-соп!1 и Интрона А

Антипролиферативная активность ІЕМ-сопі и Интрона А бьіли определеньі на линии клеток Ев5Ко! - волосистьх клетках линии лейкозньїх клеток, вьіделенной Ог. Е. Угоиг из Медицинской школь! Индианского университета. Змл культурьї клеток ЕзКоЇ инкубировали в среде АРМІ (фирма сСірсо), содержащей 10 95 змбриональной сьіворотки теленка и 595 углекислого газа при температуре 37 градусов в течение 12 часов при посевной дозе 1 х 10'клеток/мл.

ІЕМ-соп1 или Интрон А (интерферон альфа-25 фирмь! бобрегіпд Согр.) били добавленьі! до конечной концентрации белка от 0,1 до 10Онг/мл в 100мкл средьі. Концентрация белка ІЕМ-соп! бьла определена методом Бредфорда (Вгадіюга, Апаї. Віоспет., 1976, 72, 248 - 254), в то время, как концентрация Интрона А биьіла вьічислена, исходя из его удельной активности (2 х 1053межд.ед./мг белка) и содержание белка корректировалось в процессе опьта. Число живьїх клеток подсчитьівалось через каждьсе 24 часа при удалений трипанового голубого (фирма бідта). 10Омкл ІЕМ- соп1 или Интрона А добавлялось до указанной конечной концентрации с 24 часовьми интервалами. Подсчитанное число живьїх клеток бьіло средним из 4 независимьїх зкспериментов, причем каждьй зксперимент осуществлялся в двух повторностях. Колебания в числе клеток лежали в пределах от приблизительно 595 в 24 - 48-часовьїх опьітах до приблизительно 295 при более длительньїх опьітах. Результать!, показаннье на Фиг. 1 - 7, представляют собою отношения числа живьїх клеток в присутствии или в отсутствиеє интерферона в разнье временнье интервальі и зти отношения вьіражень! в процентах.

Число живьїх клеток бьіло подтверждено измерением включения Н-тимидина в клетки Е5Кої, инкубированнье в присутствий ІЕМ-соп1 или Интрона А. После 120 часов инкубирования бьіло отобрано 200мкл суспензии клеток и она бьла инкубирована при температуре 37 градусов в течение З часов в присутствий 5тКкСі/мл3 Н-тимидина (фирмь!

АтегеПпат). Клетки бьли собрань, используя сепаратор (фирмь Сатрійде ТесПппоіоду), промьть 7 раз дистиллированной водой и 2 раза 9595-ньім зтанолом и количество включенного меченого тимидина бьіло определено с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Наблюдаєемое потребление меченого тимидина клетками ЕзкКої, инкубированньіми в течение 120 часов в присутствиий ІЕМ-соп или Интрона А, бьіло пропорционально числу живьх клеток.

Пример2

Безопасность, толерантность и зффективность ІЕМ-соп1, назначаемого пациентам, страдающим саркомой Капоши

Бьмло предпринято изучениеє степени опасности и переносимости ІЕМ-соп! и Интрона А для определения их максимально переносимой дозьі (МПД). М ІЕМ-сопі! и МИнтрон А назначались в комбинации с зидовудином (азатимидином, АТ) пациентам с саркомой Капоши, сопутствующей СПиИдДУу. Кроме того, безопасность, переносимость и максимально переносимая доза ІЕМ-соп1 определялись при его назначений в комбинации с А/Ти с продуцируемьм Е.соїї рекомбинантньм фактором, стимулирующим колонии гранулоцитов, которьійй имеет остаток метионина на конце полипептида (г-те(аС5Е). Изучались три группь! пациентов, которье, соответственно, получали: 1. ИнтронА и А2Т 2. ІЕМ-соп! и АТ

З. ТЕМ-сопі, АЯТ и г-тегаС5г.

В каждую лечебную группу включалось, по крайней мере, 12 пациентов.

А. Описание продуктов

ІЕМ-соп1 продуцировался Е.соїї при использованиий метода, описанного в патентах США 4.695.623 и 4.897471.

ІЕМ-соп1 бьл очищен общим процессом, описанньмм Кієїп еї а). (см. вьіше, Кієїп єї аі., 1988). Для подкожного назначения в данном опьте ІЕМ-соп1 бьіл приготовлен в виде стерильного белкового раствора в натрий-фосфатном буфере. Если требуется, разведение осуществляли стерильньіїм солевьм раствором.

Зидовудин (АТ) бьл получен от фирмь! Виггопдп5-М/ейсоте Со и использован как указано на вкладьше в упаковку.

Интрон А бьл получен от фирма 5спегіпд Согр. в виде стерильной ли-офилизированной формьї, которая бьла суспендирована в разбавителе, как указано на вкладьіше в упаковку. г-те(2С5Е бьл биосинтезирован Е.соїї, при использованиий метода в общем описанного в патенте США 4.810.643. г-те(аС5Е бьл приготовлен как стерильньй белковьй раствор в 10мл раствора ацетата натрия, 595 маннита и 0,00490 твина 80 с рі 4,0 и с конечной концентрацией 0,Змг/мл. Если требуется, проводилось разведение стерильнь/м 595-ньІмМ раствором глюкозь! в воде.

В. Дозировка и схема назначения

АТ. А/Т назначался всем пациентам в фиксированной дозе 100мн перорально каждьсе 4 часа и в зто время у пациента прерьівался сон для получения суммарно пяти доз или 500мг ежедневно. г-те(аС5Е. Для лечения группь! пациентов, получающих г-теїаС5Е, дозировка Іг-тейаС5Е бьла мкг/кг веса тела в день и назначалась подкожно как единичная иньекция. Если бьло необходимо, зта доза увеличивалась вьіше 1мкг/кг/день (не превьішая бмкг/кг/ день) или уменьшалась до дозьі 0,5мкг/кг;/день или меньшей для того, чтобь обеспечить абсолютное содержание нейтрофилов в пределах от 5.000 до 15.000 в куб. мм.

Интерферон. Пациенть! получали или ІЕМ-соп1 или Интрон А в соответствии с увеличивающейся дозировкой по принятой схеме. Принятая дозировка предусматривала назначение равного числа единиц активности сравниваємьх интерферонов. Однако, поскольку удельнье активности двух использованньїх интерферонов различались (2 х 1О08межд.ед/мг у Мнтрона А и по крайней мере, 1 х Т109межд.ед./мг у ІЕМ-соп!, что бьло определено по противовирусной цитотоксической пробе, описанной в патенте США 4.695.623 весовье количества белка (в мг) при принятьїх дозировках должнь бьли отличаться и Мнтрона А и ІЕМ-сопі. Использованная схема лечения с увеличением дозировок представлена в помещенной далее Таблице 1. Дозировка, вьраженная в мг белка, соответствовала уровню дозировки, витраженной в международньх единицах, для каждого интерферона, что вьітекает из данньїх Таблицьі 1.

Таблица 1

Схема увеличения дозировок Интрона А и ІЕМ-соп!

Уровень дозировки Доза х 105межд.ед.

ШИ сн ни? нЧЕОСОВВВЛІООООВНШНВІІІІІВВВО ИОВЛЗО ЛОЛИ КС СОН ПК ТС ОЇ 17611171 Г17711111111112111111117111111111111омло | 7777717171717171717110021 ниж лЛиншшинши хе нин шишку: ПІН нини: ни т я ПО Ж СТО ПОС Я ХГ ПО

Пациентам каждой из трех лечебньх групп, названньїх ранее, назначал и ІЕМ-соп1 или Интрон А при начальном первом уровне дозировки ежедневно в течение недели до перехода к следующему, более вьсокому уровню дозировки. Увеличение дозьі происходило на 8 - 15-22 - 29 - 36 - 43 - 50 - 57 дни. Увеличение дозировок продолжалось до тех пор, пока каждьй пациент достигал максимально переносимой дозьі или достигалась максимальная суточная доза в 30 х 109межд.ед. интерферона. Максимально переносимая доза для отдельного пациента определялась как уровень дозировки ниже, чем доза, ограничиваеємая токсичностью. Токсичность ранжировалось по шкале от 0 (отсутствие токсичности) до 4 (острая токсичность) при использований критериев, установленньїх Всемирной Организацией Здравоохранения и описанньїх МіПег єї. а! (Сапсег, 1981, 47, 210 - 211). Доза, ограничиваемая токсичностью, бьіла определена как З или 4 степень токсичности, которая может бьіть рассмотрена как, по крайней мере, возможно связанная с применением интерферона. Лихорадка и озноб, продолжающиеся менее 24 часов, утомляемость, головная боль или степень токсичности 2 и меньшая не принимались во внимание для установления максимально переносимой дозь, если они не бьли оцененьй как непереносимье для отдельньмх пациентов.

После завершения цикла увеличения дозировок пациентам назначалась поддерживающая терапия, состоящая в ежедневном назначений лекарств пациентам, достигшим максимально переносимой дозь и получавшим максимальную дозу 30 х 10Ємежд.ед., если она бьіла достигнута. Поддерживающая терапия продолжалась до тех пор,

пока болезнь прогрессировала или пока не возникли какие-либо обстоятельства, служащие основанием для исключения пациента из опьта.

В процессе поддерживающей терапии допускалось дваждьй снижать дозировку интерферона вследствиє проявления токсичности. После двукратного снижения дозировок в дальнейшем не допускалось изменений в дозировках интерферона и пациентьї, нуждающиеся в дальнейших уменьшениях доз, вьіводились из исследования.

Исключения из зтого порядка допускались тогда, когда проявлением ограничивающей дозу токсичности являлась нейтропения (абсолютное число нейтрофилов много меньше 1000 в куб.мм и падение их числа наблюдалось за 2 дня приблизительно в течениеє недели). В зтом случає допускалось оставлениє пациента в исследований без дальнейшего снижения дозировки интерферона, но при зтом пациентам, не получавшим ранее г-тейаС5БЕ, начиналась терапия г-текаСоЕ в дозе 1мкг/кг веса в день, вводимой подкожно. Для пациентов, уже получавших г- теїаС5Е, назначаємая доза г-те(аСоЕ бьла увеличена до следующего, более вьісокого уровня (увеличение дозь 1мкг/кг/день).

С. Отбор пациентов

В изучениє бьіло вовлечено 49 пациентов. Отдельнье пациенть! отбирались для опьта лишь после их согласия и при соответствии критериям отбора. Значимье критерии для отбора в опьт - зто серологически подтвержденная НІМ инфекция, гисто-патологически доказанная саркома Капоши с умеренньми кожньми или стоматическими поражениями, приемлемьй иммунологический статус (что характеризуется уровнем СО 4 лимфоцитов) и лечение азатимидином менеєе года.

Среди аргументов в пользу исключения пациентов из опьїта - повторньйй случай проявления токсичности степени

З или более вьісокой в период увеличения дозировок; третий случай достижения дозьі, ограничиваемой токсичностью, после того, как у конкретного пациента определена максимально переносимая доза и пациент находился на поддерживающем лечении; прогрессивное развитие саркомь! Капоши.

О. Определение максимально переносимой дозь ІЕМ-соп! и Интрона А

Используя схему увеличения дозьі, описанную вьіше, в течение 1 - 9 недель, последующую поддерживающую терапию и снижение дозь, бьіли определень!ї соответствующие первая и текущая средние максимально переносимье дозь! для пациентов всех лечебньх групп, которне представлень! на Фиг. 8.

Каждая группа состояла из 15 пациентов. У пациентов группьі 1 (Интрон А и АТ) первая максимально переносимая доза достигалась в процессе увеличения дозировок и составляла 9 х 10бмежд.ед., а текущая максимально переносимая доза составляла б х 10б6межд.ед.; у пациентов группьї 2 (ІЕМ-соп!7 и АТ) первая максимально переносимая доза равнялась 15 х 109межд.ед.; у пациентов группьі З первая и текущая максимально переносимньге дозь бьли равнь, соответственно, 24 х 109межд.ед. и 21 х 105межд.ед.

Е. Оценка безопасности лечения Интроном А и ІЕМ-соп1

Безопасность лечения Интроном А и ІЕМ-соп! определялась по наличию или отсутствию резко вьтіраженньмх неблагоприятньїх зффектов, что требовало снижения дозировки интерферона. Результать! суммировань! в Таблице 2.

Таблица 2

Токсичность, обусловливающая снижение дозировок в трех лечебньх группах б

Частота случаєеєв (5)

Интрон А ІЕМ-сопіж / ТЕМ-сопі --г-тес Сх

Степень 2

Непереносимость 20 НУ 70 65 (гриппо-подобнье синдромі) !

Степень 3

Нейтропения 40 ІО 0.

Степень З

Функция печени 30 І0 (о, ж Сумма процентов в случає лечения ПЕМ-сопі и ТЕМ-сопі 4-г-те( СО не достигаєт 100 95,поскольку некоторве пациентьї достигали макси- мально переносимой дозьі 30х1О? межд.ед. без проявления у них не- благоприятньїх зффектов.

С того момента, когда опьїт бьл начат, пациенть! не исключались из опьіта по причине проявления токсичности, очевидно связанной с назначением Интрона А или ІЕМ-соп1.

Е. Определение зффективности лечения ІЕМ-соп1 и Интроном А

Противоопухолевая реакция. Противоопухолевая реакция оценивалась после четьрех месяцев лечения, используя критерии, применяемье Исследовательской клинической группой Онкологического комитета по изучения

СПида (Кгоулп ві. а). 9. Сіїп. Опсо1!., 1989, 7, 1201 - 1207).

Иммуннье функции. Подсчет СО 4 лимфоцитов осуществляли в процессе опьїта ежемесячно в течение шести месяцев для иммунного ответа у пациентов на НІМ инфекцию.

Во всех трех лечебньїх группах у пораженньїх саркомой Капоши противоопухолевая реакция и уровень СО 4 лимфоцитов бьіли зквивалентньми.

Пример З

Безопасность, переносимость и зффективность ІЕМ-соп1, назначаемого пациентам, страдающим гепатитом С (НСМ)

Повьішение переносимой дозьі. Лечение интерферонами типа 1 вьізьівает отдельнье побочнье зффекть, которье могли ограничить абсолютньсе дозьї, назначаемье для лечения специфических заболеваний. Зти побочнье зффекть включают: гриппо-подобнье симптомь!, понос, миелосупрессию, признаки повьішенной функции печени и изменения психического статуса. Зти токсические проявления классифицировались в соответствии со шкалой Всемирной

Организации Здравоохранения как степень І! (слабая), степень І! (умеренная), степень Ії (сильная) и степень ІМ (угрожающая жизни). Токсические проявления при лечении интерфероном типа 1 могут ранжироваться от степени | до степени ІМ. Если токсичность интерферона типа 1 в процессе лечения оценивается пациентом или врачом как непереносимая, то должна бьть снижена дозировка или изменена схема назначения. Изменения дозировок могут привести к субоптимальному режиму лечения, которьй обеспечиваеєт результать меньшие, чем оптимально зффективньсе. "Согласованньій" интерферон позволяет достигнуть оптимальной дозировки и сохранять ее в процессе лечения без проявления какой-либо токсичности, связанной с принятой дозировкой.

Клинические испьітания "согласованного" интерферона для лечения хронического инфекционного гепатита С бьли начатьй с изучения зффекта различньх доз лекарства. Сведения о пациентах, подвергавшихся лечению "согласованньім" интерфероном бьіли сравненьі! со сведениями о пациентах с тем же заболеванием и с такими же демографическими характеристиками, подвергавшихся лечению интерфероном альфа-2а (Рофероном) или интерфе- роном альфа-2Б5 (Интроном А) одним и тем же руководителем исследований.

План исследований. Изучение бьіло осуществлено по крайней мере на 30 пациентах, инфицированньїх вирусом гепатита С и проявляющих повьішенньй (по крайне мере, в 1,5 раза вьіше границ нормьї) уровень аланинтрансферазь

(аланинтрансфераза - фермент печени); при зтом превьішением границ нормь! в данном исследований считалась величина ЗоОмиллиединиц/мл.

Кроме того, зффективность ІЕМ-соп1! оценивалась измерением противовирусной активности, виіполненньм РОСА анализом, и определением содержания аланинтрансферазьії в процессе лечения. Затем литературнье даннье о клиническом изучений вирусного гепатита при использованийи других рекомбинантньїх интерферонов альфа, особенно интерферона альфа-2а (Роферона) и интерферона альфа-25 (Интрона А) бьіли сравнень с результатами настоящего исследования в отношений безопасности и изменений уровня аланинтрансферазь.

Подходящие пациенть! бьіли зачисленьї в одну из групп, получающих разньсе дозьї ІЕМ-соп1, указаннье в Таблице 3.

Таблица З

Доза ТЕМ-сопі Недельная доза? Число пациентов . в миллионах единиц (млн.ед.) 3 3. 5 б 3 5 9 3 5 12: З З 3 5 ж Прием доз разделялся по крайней мере 49 часами

Дозировки в одной группе менялись после изменения дозировок в другой группе с интервалом в две недели. Пять пациентов бьіли включень в первую группу и их состояние оценивалось как безопасное, если в течение двух недель проявлений токсичности ІІЇ или более вьісокой степени, приписьіваемьх ІЕМ-соп!1, не наблюдалось; пять пациентов бьли включеньі в следующую группу (бмлн.ед.). Однако, если у какого-либо пациента наблюдались проявления токсичности ПІ или более вьісокой степени, приписьтваемьсе ІЕМ-соп1, три дополнительньїх пациента включались в первую группу и их состояние оценивалось в течениє двух недель. Если у дополнительно включенньмх в исследование пациентов не наблюдалось проявлений токсичности І или более вьісокой степени, приписьіваемьх ІЕМ-соп1, пациенть! затем включались в следующую группу (бмлн.ед.), но если у какого-либо из дополнительно включенньх в исследование пациентов наблюдались проявления токсичности ІІ или более вьісокой степени, приписьтваемьсе ІЕМ- соп1,, пациенть! не включались в следующую группу, характеризующуюся назначением более вьісокой дозь! лекарства (бмлн.ед.). Увеличение дозировок в группах до 9 - 12-15 - 18 - 24млн.ед. происходило в соответствии с правилами, описаннькми вьіше. Кроме того, если два или более пациентов испьітьввали проявления токсичности Ії или более вьісокой степени, приписьіваемье ІРМ-сопі!, при каком-либо уровне дозировки, дополнительнье пациенть! не включались в зту группу; для пациентов уже находящихся на стадии исследования в зтой группе или в группе с более вьісокой дозировкой лекарства, дозировка снижалась до уровня, ниже такого, при котором у двух или более пациентов наблюдались проявления токсичности І или более вьісокой степени. Однако, могло бьіть продолжено введение в зксперимент дополнительньйх пациентов (до общего числа 10 дополнительньїх пациентов) при уровне дозировки ниже той, при которой два или более проявления токсичности ІІІ или более вьісокой степени имели место.

Если пациент в какой-либо группе достигал проявлений токсичности. ПШ или более вьісокой степени, приписькваемьх ІЕМ-соп!, в процессе или в течение двух недель после начальной оценки, назначение ІРЕМ-соп!1 отменяется до снижения проявлений токсичности до ІІ или болеє низкой степени. Лечение затем возобновляют при следующем, более низком уровне дозировки лекарства. Если пациент получал дозу лекарства в Змлн.ед. в то время, как возникли проявления токсичности Ії степени, лечение могло бьіть продолжено при дозировке 2млн.ед. Если у какого-либо пациента возникли проявления токсичности ІМ степени, связанньюе с ІЕМ-соп1!, пациент исключался из зксперимента. Допускалось три раза снижать у пациентов дозировки в процессе лечения (но при снижений дозировки не ниже 2млн.ед.) Для некоторьїх пациентов требуется четьтре раза снижать уровень дозировок для того, чтобь проявления токсичности бьіли исключеньі в процессе исследования. Лихорадка и озноб, продолжающиеся менее 34 часов, утомляемость, головная боль или проявления токсичности І или более низкой степени токсичности не считались проявлениями ограничивающей дозу токсичности, если они не признавались непереносимьми для отдельньїх пациентов. Лекарство вводилось в домашних условиях самим пациентом или с посторонней помощью (после успешного завершения обучения).

Состояние пациентов оценивалось на третий месяц опо тесту, основанному на изменениях уровня аланинтрансферазь.

Результатьі. Пациенть! включались в опьіт и распределялись в описаннье ранее группьі. Доза, ограничиваемая токсичностью, не наблюдалась у каких-либо пациентов в течение первьїх двух недель при дозах З - 6 - 9 - 12млн.ед.

Одна доза, ограничиваемая токсичностью, проявилась у одного пациента, получавшего 15млн.ед. в течение первьх двух недель лечения. Наблюдаємая токсичность бьла ІІ степени непереносимости с гриппо-подобньіми симптомами.

Зтому пациенту дозировка бьіла снижена до 12млн.ед.

Доза интерферона альфа-2, ограничиваемая токсичностью для периода в 12 недель лечения для каждой группь! пациентов, и состояние пациентов бьіли следующими.

Таблица 4

Доза ІЕМ-сопі 9о доз,ограничиваємьх Токсичность (млн.ед.) токсичностью п-4 3 6; - п-5 б о - п-5 9 0) - п-5 12 20 Гриппо-подобная п-52Бж 415 20 Гриппо-подобная п-19 3 млн.ед. интерфе- рона альфа-2 32 Гриппо-подобная

Как видно из приведенной Таблиць 4, пациентьї, получавшие ІЕМ-соп1 в дозах от З до 15млн.ед. З раза в неделю, достигали дозьі, ограничиваемой токсичностью, реже, чем пациентьї, получавшие интерферон альфа-2. Поскольку альфа-2 исследовался лишь при уровне дозировки Змлн.ед. в принятьїх в данном случає единицах, невозможно провести клиническое сравнениеє при более вьісоких уровнях дозировок интерферона альфа-2. Однако, можно полагать, что число доз, ограничиваєемьїх токсичность, будет существенно вьіше для интерферона альфа-2 при более вьісоких дозировках.

Таблица 5

Реакция после 12 недель лечения

Доза ІЕМ-сопі Норма реакции? (млн.ед.) п-5 б 60 5 п-5 9 80 б п-5 12 60 5 п-4 15 75 б п-19 3 млн.ед, интерферона альфа-2 47 Ф "Ж Полная и частичная реакции

Как видно из приведенной Таблиць! 5, у пациентов, получавших ІЕМ-сопі! в дозах от З до 15млн.ед. З раза в неделю, норма реакции аланинтрансферазь! бьла, по крайней мере, так же благоприятна, как наблюдалось при использований интерферона альфа-2.

Вьше бьло показано, что лечение ІЕМ-соп! приводит к благоприятньм результатам при более вьсокой переносимости лекарства, по сравнению с лечением интерфероном альфа-2.

Поскольку настоящее изобретение бьло описано в границах предпочтительного варианта воплощения, допускаєется, что при его использований специалистами будут иметь место вариантьй и модификации идеий изобретения. Позтому имеется в виду, что приводимая формула изобретения охватьввает все такие равноценнье варианть, которье включаются в обьем заявленного изобретения. ,

Що Фиг. 1 50 - я 40 ще - о . І

Е ге щя я 30 ще є на) і о о

Е | й

Я го Є

Ге ре - ж ще)

Е й

ЕХ 10 о зе Й 0 20040080 80 100120. 140

Время /часн/ ' ч-- 0 ІРмМоеопі 0,1 нг/мл --- Интрон А 0,1 нг/мл

- виг. 2 во 8 40

Ф в с: є 30 ше й м й 7 -5- и: т 20

С: я с | . бо 10 за . 60. 80 100 120 140 ! : Время /часн/

Я. ІЯМ-сопї 0,5 нг/мл -ЖШ- Интрон А 0,5 нг/мл

Тв!

оФфиг. З й бо о 50 ши й -

Ге) м . т 40 о (4; - « їз ев 30 й ке -

Ф . щі . що 20 о | я зе ! | . 60 80 100 120 140

Время /часн/ -С0- тТЕм-сопі 1 нг/мл шо -ЖШЕБ- Интрон А 1 нгимл

Фиг. 4 , бо 50 с. ш Я о - Ко

ЕЕ -.

Ге Й . 5; . я 40 (те) е о о х й 30 я ш щ .

Ф с

Не, , т . о . зе 80406080 100120. 140 й Время/часн/ --- ТемМ-сті 5 нг/мл й -ЖЕ- Интрон А 5 нг/мл офис. 5 - | ! о в ! що 50 с і. (95) . - щ- в інн щ- що 40 ге - о що ве | й

Зо : 60... 80 100 120 140 :

Время /часн/ --- ТЕмМ'єсп'! 10 нг/мл ' -ЖЕЕ Интрон А 10 нг/мл. -

ФИГ. б 80 - Н 70 , - | | Я 2 т 60 м . в о шо в БО | ще - п -

Ф оо ж 7 " - зе й 30 8280....40 60 80 100. 120 140

Время /часн/ -С- теМ-солі 50 нг/мл то -Ш- Интрон А 50 нг/мл "7

ФИГ. 7 ' : во 70 ше шо я о во т І

Фу (тв)

Еч о . о ко БО й ; ре) ; є що ки -

Ф

Я 40 щ 5 | . о ве - 20. 4060 80 100 120140

Время /часн/ ши -0271- ТЕМ-сопі 100 нг/мл - --МШі Интрон А 100 нг/мл ні

Й . зо фФ

Иг. ш і

Е . ! й т

Га

У , них

Б Кох

Г-) о ще | й ;

І.

ЕЕ цк ех п

Е 1 о - 0 У що | . і.

Пе

Сх не м . 5 рік го не ще ща їх сх ще шо о 5 сх . и. 5 нн щи ще в

Зо

Я

5 . що не / Кох С хз тва Зоо с ооо пет М с ке .

І М он ПД Й ; хх що : і Х б т що щи , кий щу - : 5 ая і ;

МП і

Claims (24)

1. Способ лечения пациентов, страдающих саркомой Капоши, отличающийся тем, что назначают ІЕМ-соп, вьібранньй из ІЕМ-соп 1, ІЕМ-соп 2 и ІЕМ-соп З, в терапевтически зффективньїх количествах.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ІЕМ-соп являєтся продуктом зкспрессии зкзогенной последовательности ДНК прокариотов.

З. Способ по п. 1, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЄМ-соп назначают перорально, внутривенно, внутримьшечно, подкожно, интраназально или в место поражения.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп составляеєт от 2х106 до 30х1092 единиц на пациента.

5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп составляєт от бх105 до 15х109 единиц на пациента.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включает назначение терапевтически зффективного количества химиотерапевтического агента.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно включаєт назначение терапевтически зффективного количества стимулирующего колонийи гранулоцитов фактора.

8. Способ лечения пациентов, страдающих гепатитом С, отличающийся тем, что назначают ІЕМ-соп, вьібранньй из ІЕМ-соп 1, ТЕМ-соп 2 и ІРМ-соп 3, в терапевтически зффективньх количествах.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что ІЕМ-соп является продуктом зкспрессии зкзогенной последовательности ДНК прокариотов.

10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЄМ-соп назначают перорально, внутривенно, внутримьшечно, подкожно, интраназально или в место поражения.

11. Способ по п. 8, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп составляет от 2х105 до 30х1092 единиц на пациента.

12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что терапевтически зффективное количество ІЕМ-соп составляет от 6х105 до 15хХх1092 единиц на пациента.

13. Способ по п. 8, отличающийся тем, что дополнительно включает назначение терапевтически зффективного количества химиотерапевтического агента.

14. Способ по п. 8, отличающийся тем, что дополнительно включаєт назначение терапевтически зффективного количества стимулирующего колонии гранулоцитов фактора.

15. Препарат для лечения пациентов, страдающих саркомой Капоши, отличающийся тем, что содержит ІЕМ-соп, вьібранньй из группьі ІЕМ-соп 1, ІЕМ-соп 2 и ІРМ-соп 3, в терапевтически зффективном количестве и фармацевтически приемлемьй разбавитель, вспомогательное вещество, носитель, консервант или солюбилизатор.

16. Препарат по п. 15, отличающийся тем, что ІРМ-соп является продуктом озкспрессии зкзогенной последовательности ДНК прокариотов.

17. Препарат по п. 15, отличающийся тем, являєтся пригодньмм для назначения перорально, внутривенно, внутримьішечно, подкожно, интраназально или в место поражения.

18. Препарат по п. 15, отличающийся тем, что представляєт собой иньекционньй раствор.

19. Препарат по п. 15, отличающийся тем, что включаєт терапевтически зффективное количество стимулирующего колонийи гранулоцитов фактора 1-С5Е, составляющее от 0,5 до 6 мкг/кг/день.

20. Препарат для лечения пациентов, страдающих вирусньім гепатитом С, отличающийся тем, что содержит ІЕМ-соп, вьібранньй из группьі ІЕМ-соп 1, ІЕМ-соп 2 и ІРМ-соп 3, в терапевтически зффективном количестве и фармацевтически приемлемьй разбавитель, вспомогательное вещество, носитель, консервант или солюбилизатор.

21. Препарат по п. 20, отличающийся тем, что ІЕМ-соп является продуктом озкспрессии зкзогенной последовательности ДНК прокариотов.

22. Препарат по п. 20, отличающийся тем, являєтся пригодньмм для назначения перорально, внутривенно, внутримьішечно, подкожно, интраназально или в место поражения.

23. Препарат по п. 20, отличающийся тем, что представляєт собой иньекционньй раствор.

24. Препарат по п. 20, отличающийся тем, что включаєт терапевтически зффективное количество стимулирующего колонийи гранулоцитов фактора 1-С5Е, составляющее от 0,5 до 6 мкг/кг/день.