UA43820C2 - Імуносупресивна композиція та спосіб її отримання - Google Patents

Abstract

Описано фармацевтичну композицію у вигляді емульсії або розчину в органічному розчиннику, яка містить сполуку формули 1 та має імуносупресивну активність.

Description

Изобретение касается фармацевтического состава, содержащего соединениеє (или его фармакологически приемлемую соль) общей формуль! І расшифрованной ниже, характеризующееся проявлением иммуносупрессивной активности. В частности, зто изобретение касается состава змульсиий, сохраняющей стабильное змульсионное состояние в физиологическом солевом растворе для иньекций, содержащем глюкозу, в воде, фруктовом соке и подобной среде, и тем самьмм допускающей применение посредством внутривенной или внутримьішечной иньекции, путем местного назначения, например, в виде глазньїх капель, а также при различньїх других формах назначения, включая приєм через глотание и через прямую кишку, или же оно касается указанного состава в виде фармацевтически приемлемого раствора на органическом растворителе, т. е. раствора, которьй сам по себе, являясь стабильной жидкостью, создает меньше затруднений при назначений рецептур, для приема глотанием и удовлетворительно всасьвваєтся через ткани пищеварительного тракта.

Соединение приведенной ниже формульі І и его фармацевтически приемлемая соль уже известнь! как вещества, проявляющие иммуноподавляющую активность (см. вьіложеннье заявки Японии 61 (1976)- 148181 и Европейского патентного бюро М 0323042). Для указанного соединения и его соли ожидалось применение в различньїх областях медицинь, включая пересадку таких органов, как сердце, печень, почки,

КОстНЬЙй мозг, кожа, роговица глаза, легкие, поджелудочная железа, кишечник, мьішць, нервьї, конечности в (0) в Б ве: в (сн, Іа 19 и

В х щ АВ шо

В дЗ ІЗ 8 в д" в / в 18 ов'7тові? где каждая соседняя пара радикалов В' и В2, ВЗ и В, В? и В? независимо может: а) представлять собой два независимьїх атома водорода; б) образовьшвать вторую связь между соседними атомами углерода, к которьім они присоединень!: в дополнениє к сказанному вьіше В? может представлять собой группу алкила.

В' представляєт собой водород, гидроксигруппу или алкоксигруппу или же (в сочетаний с В) - оксогруппу; ВЗ и В? независимо представляют собой водород или группу гидроксила; В'Є представляєт собой водород, группу алкила, группу алкила, замещенную одной или более группами гидроксила, а также группу алкенила; группу алкенила, замешенную одной или более группами гидроксила, или же группу алкила, замешенную оксогруппой; Х означает оксогруппу, сочетание "атом водорода, гидроксигруппа", сочетание "атом водорода, атом водорода" или -СНго-;

У означаєт оксогруппу, сочетание "атом водорода, гидроксигруппа", сочетание "атом водорода, атом водорода" или М-МВ!! В"? или же М-ОВ'З; В! и В!? независимо представляєт собой атом водорода, группу алкила, арила или тозила;

ВЗ, 014, Вб, В'ЯД!", ВІВ, дя, д??, и А независимо представляют собой атом водорода или группу алкила; В? и В?! независимо представляют собой оксогруппу или же они могут независимо представлять собой сочетания "Вгба, атом водорода" и "АВ?"а, атом водорода" соответственно: На и Ва независимо представляют собой гидроксигруппу, алкоксигруппу или группу ОСНгОСН»СнНгОСНІ, или же В"а - защищенная гидроксигруппа; кроме того, В2? а и В"! а могут вместе представлять собой атомь! кислорода в зпоксидном кольце; п принимаєт значения 1, 2 и 3;

У, 82 и ВЗ дополнительно к радикалам, упомянутьм вьіше, могут бьіть вместе с атомами углерода, к которьім радикальй с зтими обозначениями присоєдинень, представлять собой насьщенное или ненасьіщенное 5- или 6б-членное гетероциклическое кольцо, содержащее М-, 5- или О-, которое может бьіть замещено одной или более группами, вьібранньіми среди групп алкила, гидрокси-, алкила, замещенного одной или более гидроксильньїми группами, алкилокси-, бензила иСНгове(Сбн5Б).

Указанное соединение | и его фармацевтически приемлемую соль получают точно так же, как зто описано в двух патентньхх заявках, упомянутьїх вьіше, в частности, из макролидов, получаємьх ферментацией микроорганизмов бігеріотусез іІзикираєпвзіз М 9993 (ЕГЕВМ ВР-927) или бігеріотусез

Нуагозсорісиє ЗИр5р. уакизНітаєпвіз М 7238 (РЕВМ ВР-928), пронумерованньїх как ЕН-90056, ЕН-900520,

ЕВн-900523, РІА-900525.

Соединение формуль і! и его фармацевтически приемлемая соль (ниже термин "соединение І!" представляеєт их обоих) с трудом растворяются в воде и, следовательно, при их использованиий в виде фармацевтического раствора рекомендуется улучшать их растворимость при помощи обьчного водорастворимого агента, способствующего растворению (такого как отиловьій спирт или полизтиленгликоль).

Однако в фармацевтическом растворе, полученном вьішеупомянутьм способом, иногда происходит кристаллизация соединения І во время разбавления назначенной дозировки жидкостной средой организма, что приводит к снижению бизффективности соединения |.

Изобретение разработано с учетом приведенного обстоятельства. Предмет изобретения состоит в предложениифармацевтического состава, в частностисостава змульсий или состава раствора наорганическом растворителе, которне неприводят к кристаллизации соединения | приконтактирований последнего с жидкостной средой организма.

Предложенньй фармацевтический состав содержит в качестве активного ингредиента соединение їЇ, а кроме того, он содержит фармацевтически приемлемьй змульгатор, а также ингредиент масляной фазь!; в частности, он представляет собой водно-масляную змульсию или же состав в виде раствора в органическом растворителе.

Ниже приведено подробное описание изобретения.

Используемьй в описаний изобретения термин "низший" означаєт, если не оговорено иное, группу, содержащую 1-6 атомов углерода.

Предпочтительнье примерь "групп алкила" представляет собой остатки алифатического углеводорода с прямой или разветвленной цепочкой, например, такие, как группа низшего алкила; метил, зтил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил, неопентил, гексилии т.п.

Предпочтительнье примерь "групп алкенила" представляют собой остатки алифатического углеводорода с прямой или разветвленной цепочкой, имеющего одну двойную связь, например, такие, как группа низшего алкенила: винил, пропенил, бутенил, метил-пропенил, пентенил, гексенили т.п.

Предпочтительнье примерь "групп арила" включают, например, фенил, толил, ксилил, бутенил, метилпропенил, пентенил, гексенил и т.п.

Предпочтительнье защитнье группьі в "защищенньїх гидроксигруппах" включают такие группь!, как группа 1 - (низший алкилтио) низшего алкила, в том числе группа низшего алкилтиометила, например группа метилтиометила, зтилтиометила, пропилтиометила, изопропилтиометила, бутил-тиометила, изобутилтиометила и гексилтиометила, предпочтительнее - (С1-С4)далкилтиометила, еще лучше - группа метилтиометила, тризамещенную группу силила, такого как три(низший) алкилсилил (например, триметилсилил, тризтилсилил, трибутилсилил, а также трет.бутилдиметил-силил и тритрет.бутилсилил) или низший алкилдиарилсилил, например метилдифенил-силил, зтилдифенилсилил, пропилдифенилсилил и трет.утилдифенилсилил, предпочтительнее - такие, как группа три(Сі-

Са)алкилсилила и группа (С1-Сг2) алкилдифенилсилила, лучше всего - группа трет.бутилдиметилсилила и группа трет.бутилфенилсилила; или же группа ацила, например группа алифатического или ароматического ацила, производная от карбоновой кислотьї, сульфокислоть! или карбоминовой кислотьї, или же группа алифатического ацила, замещенная ароматической группой.

Примерами групп алифатического ацила являются такие, как группа низшего алка-ноила, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как карбоксигруппа, например формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, валерил, изовалерил, пивалоил, гексанойил, карбокси-ацетил, карбоксипропионил, карбоксибути-рил и карбоксигексанил; группа цикло(низш.)алкокси (низш.)алканоила, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как низший алкил, например циклопропилоксиацетил, циклобутилоксипропионил, циклогентилоксибутирил,метилоксиацетил, метилоксипропионил, метилоксибутирил, метилоксипентаноийл и метилоксигексаноил; группа камфаросульфонила или группа низшего алкилкарбамоила с одним или более заместителями, такими как карбоксигруппа или защищенная карбоксигруппа, например группа карбокси - низшего алкилкарбамоила: карбоксиметилкарбамоийл, карбоксизтилкарбамоил, карбоксипропилкарбамоил, карбок- сибутилкарбамоил, карбоксипентилкарбамоил и карбоксигексил-карбамоил; защищенная группа карбокси(низшего) алкилкарбамоила, такая как группа тринизший алкилсилил-низший алкокскарбонил- низший алкилкарбамоила, например: триметилсилилметоксикарбонилзтилкарбамоил, триметилсилилотоксикарбонилпропилкарбамоил, тризтилсилилотоксикарбонилпропилкарбамоил, трет.бутилдиметилсилилотоксикарбонилпропилкарбамойил, триметилсилилпропокси- карбонилбутилкарбамоил и т.п.

Примерами групп ароматического ацила являются группа аройла, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как нитрогруппа, например бензоил, толубил, ксилоил, нафтоил, нитробензоил, динитробензоил и нитронафтоил; или группа аренсульфонила, имеющая (необязательно) подходящие заместители, такие как галогень, например бензолсульфонил, толуолсульфонил, ксилолсульфонил, нафталинсульфонил, фторбензолсульфонил, хлорбензолсульфонил, бромбензолсульфонил, иодбензолсульфонил.

Примерь! групп алифатического ацила, замещенньїх ароматической группой, включают группу ар- низшего алканоила, имеющую (необязательно) один или более заместителей, таких как низшая алкоксиг- руппа или группа тригало-низшего алкила, например фенилацетил, фенилпропионил,фенилбутирил, 2- трифторметил-2-метокси-2-фенил-ацетил, 2-зоил-2--рифторметил-2-фенилацетил, а также 2- трифторметил-2-пропокси-2-фенилацетил.

Среди перечисленньхх групп оацила предпочтительнь: группа оалканоила Сі-С4, имеющая (необязательно) карбоксигруппу, группу цикло( С5-Св)алкокси(С1-Са) алканоила с двумя радикалами алкила

Сі-С4 в циклоалкильной составляющей молекуль; группа камфорсульфонила; группа карбокси(С1-

Са)алкилкарбамоила, группа три- (С1-С4)алкилсилил (С1-С4)алкоксикарбонил (С1-Са4) -алкилкарбамоила; группа бензоила, имеющая (необязательно) одну или две нитрогруппь!; группа бензолсульфонила, содержащая галоген, или группа фенил(С1-С4)алканоила, содержащая (С1-Са4) -алкоксирадикал, а также группа тригало (С1і-Са4)алкила. Среди перечисленньїх наиболеепредпочтительньі, например, ацетил,

карбок-сипропионил, метилоксиацетил, камфорсуль-фонил, бензоил, нитробензоил, динитробензоил, иодобензолсульфонил, а также 2-трифторметил-2-метокси-2-фенила-цетил.

Предпочтительнье примерь! "гетероциклических групп" в насьщенном или ненасьщенном 5- или 6- членном кольце, содержащем азот, серу и/или кислород, включают группь! пирролила и тетрагидрофурила.

Фармацевтически приемлемье соли соединения формуль | включают обьчнье нетоксичнье фармацевтически приемлемье соли неорганических или органических кислот, например соль щелочного металла, а именно: натриевую соль или калиевую, соль, щелочно-земельного металла, например кальциевую или магниевую соль, а также соль аммония, или амина, например тризти-ламиновую или М- бензил-М-метиламиновую соль.

Согласно настоящему изобретению соединение формуль! | может иметь одного или более "близнецов" или входить в стереоизомерические парь! оптических или геометрических изомеров вследствиє наличия асимметричного атома углерода и двойной связи, причем подобнье "близнець" или изомерь! также относятся к области настоящего изобретения.

В качестве змульгатора предпочтительно использовать один из природньїх или синтетических змульгаторов. Среди них можно использовать различнье змульгаторьї животного или растительного происхождения. Типичнье их представители могут включать, например, лецитин яичного желтка или соевьй лецитин, а также продуктьь их гидрогенизации, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, сфингомиелин, гуммиарабик и желатин без каких-либо особьїх ограничений. В качестве синтетического змульгатора можно применять любье катионньєе, анионнье, нейоннье и подобнье поверхностно-активнье вещества (ПАВ). В особенности предпочтительно нейонное ПАВ, типичнье примерь! которого могут включать ПАВ типа касторового масла, предпочтительно в виде касторового масла, отвержденного полиоксизтиленом, причем найболее предпочтительно масло марок НСО-60, НСО-50, НСО-40, производство фирмь! "Никко кемиклз Ко" (Мікко Спетісаіє Со) с точки зрения длительной хранимости продукта. Дополнительно к сказанному вьше допускается возможность применения производного сложного зфира полиоксизтиленсорбината и жирной кислотьії, например, полисорбата-80, производного сложного зфира глицерина и жирной кислотьї, такого как монокаприлат глицерина, а также производного сложного зфира полиоксизтилена и жирной кислотьї, такого как моностеарат полиоксизтилена 40;моно- или диглицеридьі жирной кислоть! с цепочкой средней длиньі, например моно- или диглицеридь! с 6-12 атомами углерода, такие как моноглицерид или диглицерид каприловой кислоть, дигли-церид капроновой кислоть, а также полиоксизтилированньй глицерид, такой как полиоксизтилированньйй глицерид масляной

КИСЛлОтТьЬ!.

Каждьй из описанньх вьіше змульгаторов применяют в виде так назьіваемого первичного змульгатора. использование (необязательноеє) вспомогательного змульгатора таюже относится к области данного изобретения. На вид вспомогательного змульгатора никаких особьїх ограничений не налагаєтся, позтому можно использовать, например, такие типичнье представители змульгаторов, как холестерол, агар, гидроксид магния, метилцеллюлозьі и пектин. В случаях как первичного, так и вспомогательного змульгаторов каждьй из приведенньх змульгаторов можно также применять в сочетании с другим.

Что касается используемого согласно настоящему изобретению ингредиента, представляющего собой масляную фазу, то можно применять любье фармацевтически приемлемье ингредиенть!, типичнье примерьї которьїх включают без особьїх ограничений растительнье масла (соевоеє, кунжутное, хлопковое, оливковое, подсолнечное, кукурузноеє, рапсовое, кокосовое и т.п.), триглицеридь! жирньїх кислот с цепочкой средней длинь, например триглицеридь! жирньх кислот с 6-12 атомами углерода (каприловой, капроновой и лауриновой кислот), таких как препарат марок Рапазаїе 800, 810, 1000, 1200, производство фирмь! "Ниппон Юси Ко" (Мірроп Мивпі Со) а также жидкие углеводородьі, например жидкий парафин, сквален и сквалан, причем все зти вещества можно использовать в сочетаниях.

Фармацевтический состав, отвечающий настоящему изобретению, содержит ингредиенть,, перечисленньюе вьше. В частности, тонкодисперсную змульсию можно приготовить, используя лецитин, яичньЬій желток в качестве змульгатора и осевое масло в качестве ингредиента масляной фазь, что позволяет получить весьма стабильньій фармацевтический состав, содержащий соединений |.

С другой стороньії, при приготовлений состава в виде раствора на органическом растворителе в качестве фармацевтического состава, отвечающего настоящему изобретению, можно использовать любой из органических растворителей лишь бь в нем растворялось соединение и он сам бьлобь фармацевтически приемлемьм, причем предпочтителен зтиловьій спирт. В данном случає предпочтительньій змульгатор может представлять собой касторовое масло, отвержденное полиоксизтиленом, например масло марки НСО-60, или синтетический змульгатор, такой как полиоксизтилированньй глицерид, например полиоксизтилированньй глицерид масляной кислоть.

Предпочтительньім ингредиентом масляной фазьї может служить упомянутьйй ранее триглицерид жирной кислоть! с цепочкой средней длиньі. В зтом случає соединение І растворяют в смешанном растворителе, содержащем органический растворитель и триглицерид жирной кислоть! с цепочкой средней длинь). Или же соединение | сначала растворяют в органическом растворителе, после чего к раствору добавляют триглицерид жирной кислотьії с цепочкой средней длиньі, а затем вводят синтетический змульгатор и осуществляют перемешиваниє до полной гомогенности. В отношений синтетического змульгатора предполагаєтся, что триглицерид жирной кислотьії с цепочкой средней длинь! образует змульсию, контактируя с "распускающим" раствором, и зто улучшает поглощение соединений ! раствором.

Триглицерид жирной кислоть! с цепочкой средней длиньі обладает превосходной способностью растворять соединение | по сравнению с триглицеридом жирной кислоть! с длинной цепочкой (например, оливковь!м маслом), однако он не смешиваєтся с синтетическим змульгатором и не позволяеєет получить гомогенньй фармацевтический раствор. С учетом изложенного в раствор вместе с другими ингредиентами вводят органический растворитель, причем предпочтителен зтиловьій спирт, что способствуєт получению гомогенной смеси триглицерида жирной кислотьії (с цепочкой средней длинь) и синтетического змульгатора, а также снижению вязкости раствора в целом, благодаря чему обеспечиваєтся гибкость назначения (облегчающая применениєе) фармацевтического состава.

В дополнение к ингредиентам, указанньм вьше, можно также применять вместе с ними агент, регулирующий осмотическое давление, согласно соответствующей характеристике живого организма, в которьй вводят предлагаєемьй состав. Такой вариант также относится к области настоящего изобретения.

Упомянутьїй агент, регулирующий осмотическое давление, может также включать, например, сахарньй спирт, такой как глицерин, сорбитол, инозитол, ксилитол и маннитол. Кроме того, в состав можно подмешать, если зто потребуеєется, антисептики, например хлорид бензалкония, те или инье видь параоксибензоатов, хлоридную соль бензотония и хлорбутанола.

Как бьло указано вьше, состав, отвечающий настоящему изобретению, представляєт собой фармацевтический состав, содержащий соединение І, змульгатор и ингредиент масляной фазь в качестве главньїх компонентов. Ниже дань! пояснения относительно содержания каждого из главньїх ингредиентов.

Содержание соединения | желательно варьировать в зависимости от дозировки, в которой применяют предложенньй состав. Рекомендуется содержание соединения І 0,05-50 мг/мл для внутривенной иньекции, 1-50 мг/мл - для внутримьшечной иньекции, 0,1-50 мг/мл - для глазньїх капель, 0,1-50 мг/мл - для назначения через глотание. Данньій ингредиент можно разбавлять водньіми средами, например водой, физиологическим солевьм раствором, раствором для иньекции, содержащим глюкозу, фруктовь!м соком или молоком согласно дозировке, в которой применяют предлагаемьй раствор, так что по сравнению с приведенньїми вьіше значениями концентрация соединения | снижаеєтся.

Конкретное ограничение относительного количества ингредиента масляной фазьі, подмешиваємого к фармацевтического составу, не устанавливаєтся, однако предпочтительно подмешивать ингредиент масляной фазьй в виде змульсиий, содержащей 5-5095 (мас. доли), предпочтительно 5-2095 указанного ингредиента.

Содержание змульгатора в случає состава для иньекций или глазньхх капель предпочтительно составляет 0,5-5095 (мас. доли), предпочтительнее - 1-3095, а еще лучше -2-2095 от массьі используемого ингредиента масляной фазь.

В случае микстурь для оприема внутрь зто содержание составляет 110-400 мас. долей, предпочтительнее 50-200 мас. долей, а еще лучше 80-120 мае. долей на 100 мас. долей ингредиентов масляной фазь.

Кроме того, в случаеє состава в виде раствора на органическом растворителе зтот растворитель применяют в количестве 0,002-2 мл, предпочтительнее 0,01-1 мл, а еще лучше - 0,02-0,5 мл на 1 мг соединения |.

Фармацевтический состав можно также получить с использованием соединений, описанньх в следующих документах: в Европейской патентной заявке ЕР-А-353678, патентной заявке Япониий М 2- 74330, 1990, международной патентной заявке РСТ/24890/01262 (Великобритания), Европейской патентной заявке ЕР-А-413532, международной патентной заявке РСТ/ЛРУО1/00314 (Япония), патентньїх заявках

Великобританий М 90129636, 9014136.7, 9014136.7, 9014681.2, 9014880.0, 9014881.8, 9016115.9, 9016115.9, 9016693.5, Европейских патентньїх заявках М ЕР-А 32865, ЕР-А-349061, ЕР-А-358508, ЕР-А- 364031, ЕР-АЗб4032, ЕР-А-378317, ЕР-А-378320, ЕР-А-378321, ЕР-А-388153, ЕР-А-396399, ЕР-А-396400,

ЕР-А-399579, ЕР-А-43242, ЕР-А-А28365, ЕР-А-356399, ЕР-А-402931, ЕР-А-427680, заявке Великобританий

М 2225576 А.

Пример 1.

В качестве соединения | применяли соединениеє, в котором:

В", ве, 8, ВЗ представляют собой водород;

ВУ. ВУ - группь! гидроксила;

В!- группа аллила;

В, В", В!Є, В", ВВ, дя, дог - группь! метила; дго « сочетаниє ВгсСа и Н, где В?ба -метоксигруппа;

В?! т сочетаниє В?! а и Н, где В"! а - группа гидроксила;

Х. У - кислород; п - 2;

ВЗ и В" образуют вторичную связь между соседними атомами углерода, к которьмм они присоединень.

Перечисленнье символь! графически соединеньї сплошньми линиями, тогда как пунктирнье линий означают двойнье связи. Данное соединение применяли в свободном виде. Оно обладает превосходной иммуносупрессивной активностью и далее обозначено как ЕК 506.

Соединение ЕК 506 в количестве 0,5 г смешивали с 200 г соевого масла и 24 г лецитина яичного желтка. Смесь нагревали при 80"С до получения гомогенного раствора.

Пример 2.

Воду в количестве 1,6 л, содержащую 2,595 глицерина, вводили в условиях нагревания при 70-807С в гомогенньій раствор, полученньй в примере 1. Из зтой смеси готовила змульсию перемешиванием в течение 30 мин с частотой 600 1/мин в смесителе-гомогенизаторе ТК, производство фирмь! "Токусю Кика

Коге Ко", Япония (Токизпи Кіка Кодуо Со), поддерживая температуру 70-80"С. Далее приготовление змульсиий продолжали при 75-807С с использованием гомогенизатора "Монтон Гаурин" (Мапіоп Сашгіп), производство одноименной фирмь), США, под давлением 4500 фунт/кв. дюйм и 10-кратном числе проходов. После охлаждения змульсиий до комнатной температурьї добавляли дистиллированную воду с целью доведения количества раствора до 2 л.

Пример 3.

После размешивания соединения ЕК 506 в количестве 0,5 г в 100 мл имеющейся в продаже жирной змульсиий для внутривенной "7 иньекции, торговая марка "Интралипид (Іпігаїїрій) 1090", производство фирмьї! "Опу-ка Сзйяку" (Оїзика беїуаки), в течение ночи при комнатной температуре смесь фильтровали через фильтр с просветом ячеек 0,45 мкм, производство фирмь! "Микропор Ко" (Місгороге Со), с целью получения жирной змульсий (для внутривенной иньекции), содержащей соединение ЕК 506 в концентрации 0,293 мг/мл.

Пример 4.

Бьіли приготовленьії и подвергнутьь сравнению на переносимость при закапьшваний в глаз крьсь раствор (сравнительньй пример), суспензия (сравнительньй пример) и змульсия (пример З осуществления изобретения). Полученньєе результать! представлень в табл. 1.

Как показано в таблице, змульсия примера . З характеризуєется превосходной переносимостью при закапьівании в глаз крьсс. Бьіл сделан вьівод о том, что в змульсий, отвечающей настоящему изобретению, активньій ингредиент не вьшпадаєт в осадок при контактирований с жидкостью организма. Условия назначения: 5 капель по 10 мкл. В табл. 1 приведеньї! концентрации в ткани каждого вида через 1 ч после назначения (п - 4 среднее значение «т стандартное отклонение).

Пример 5.

Змульсию соединения ЕК5БОб, полученную в примере 3, и суспензию, содержащую 30 г тонкодисперсного порошка ЕК 506 в 100 мл физиологического солевого раствора (размерьї частиц в суспензиий ЕК 506: 10,3 мкм), назначали каждой крьсе внутрь через глотание, после чего оценивали поглощение ЕК 506 при поступлений в организм через глотание.

Зксперименть! по поглощению проводили по следующей методике.

Крьс (самць серийной линии 50 возрастом 8 нед. и массой тела 300 г), некормленьх с предшествующих суток, закрепляли в положениий лежа на спине и вводили им через пасть пробу состава из расчета 1 мг на 1 кг живого веса через зонд (одна проба расходовалась на 4 крьіс). Через установленнье промежутки времени 1/2, 1,2, 4, 8 и 24 ч из бедренной аортьї животньїх при помощи прикрепленного устройства (саппціа) отбирали пробь крови по 0,2 мл, которне после добавления 195 гепарина хранили в холодильнике. После их оттайвания концентрацию ЕК 506 во всех пробах крови определяли методом знзимного иммуноиспьтания.

Бьло установлено, что в случає змульсии, отвечающей настоящему изобретению, пик поглощения для

ЕК 506 появлялся бьістреє и при более вьісоких концентрациях препарата в крови по сравнению со случаем назначения суспензии.

Пример 6.

ЕК 506 2 мг неОо-60 100 мг

Зтиловьй спирт 062 мл

Триглицерид жирной кислоть! со средней длиной цепочки торговая марка "Мигриол 812" (Мідгіо! 812), производство фирмь! "Гуле АГ" (Низ АС) До 1 мл

Пример 7.

Бьіла изучена стабильность полученного в примере 6 состава, представляющего собой раствор на зтиловом спирте, при хранении (см. табл. 2)

Значения в скобках показьівают величину рН раствора, разбавленного в 5 раз водой. По данньїм табл. 2, можно сделать вьівод о возможности длительного хранения полученного в примере 6 состава в виде раствора на зтиловом спирте.

Пример 8.

ЕК 506 2 МГ

Полиоксизтилированной глицерид масляной кислоть, "Лабрафил» (І абгаїї),

М1944С5 производство фирмь! "Гатт фассе Ко" (Саце Газзе Со) 420 мг

Глицерид жирной кислоть! со средней длиной 400 мг цепочки

Зтиловьй спирт До 1 мл

Состав, содержащий указанньюе вьіше ингредиентьі и способньій при использованиий образовьвать змульсию, готовили как обьічно

Пример 9.

ЕК 506 1 мг

Моноглицерид каприловой кислоть! 0,2 мл

Триглицерид жирной кислотьї со средней 0,6 мл длиной цепочки

Зтиловьй спирт До 1 мл

Состав, содержащий указаннье вьше ингредиенть! и способньй при использований образовьвать змульсию, готовили как обьічно.

Зффект настоящего изобретения.

Так как фармацевтический состав, отвечающий настоящему изобретению, не оприводит к кристаллизации активньїх ингредиентов при контактирований с жидкостью организма, то бьіл сделан вьівод о том, что состав отличается превосходной стабильностью. Кроме того, такой фармацевтический состав имеет то преимущество, что он по вкусу детям, причем дозировку можно легко регулировать.

Фармацевтическая рецептура, отвечающая настоящему изобретению, благодаря фармацевтической активности трициклического соединения І! пригодна для лечения и профилактики заболеваний, связанньх с расстройством иммунитета, например, при пересадках органов тканей: сердца, почек, печени, костного мозга, кожи, роговиць, легких, поджелудочной железьї, кишечника, конечностей, мьішц, нервов, и в случаях аналогичньїх расстройств, связанньїх с антагонизмом собственньх тканей с прививаєемьми, например, при пересадке костного мозга; автоиммунньїх расстройств, таких как ревматоидньй артрит, системньй туберкулез кожи(зритематоз), тироидит Хасимото (Назпітоїо), множественньй склероз, тяжелая миастения; диабет, тип. 1 и т.п., а также иньїх заболеваний, вьізванньїх патогенньїми микроорганизмами.

Кроме того, трициклические соединения | опригодньй также для лечения и профилактики воспалительньїх и гиперпролиферативньїх заболеваний кожи, а также кожньїх проявлений заболеваний, вьізванньїх иммунньіми расстройствами, таких как псориаз, атонический дерматит, контактньійй дерматит и другие зкзематические дерматитьі, себоррейньй дерматит, Гіснеп ріапиз, пузьірчатка кожи, буллоиднье разновидности пузьірчатки (ршШіоиве Ретрпідоіїй), зпидермологическая буллоза, уртикария (пИєїісапа), анжедема (апдіоєдетав), сосудистье заболевания, зритема, кожньй осинофилиаз, зритематозная волчанка, прьіщи и очаговое обльсение; различньїх глазньїх заболеваний, в том числе автоиммунньїх заболеваний, включая такие, как, например, кератоконьюктивит, "ячмень", увеит, связанньй с болезнью Бесета (Вепсеї), кератит, герпетический кератит, конусообразная роговица, вирождение зпителия роговицьії, лейкома роговиць, глазная пузьірчатка, язва Мурена (Моогеп), склерит, офтальмопатия Грейвса (Стаме5), синдром Фогта-

Коянаги-Харадь (Моді-Коуападі-Нагада), саркоидозии т.п.; заболеваний, затрудняющих дьхание, включая такиє, как астма, например бронхиальная астма, аллергическая астма, астма при вдохе, астма при вьіїдохе, пиілевая астма; в особенности хроническая или застарелая астма, например возрастная, а также повьішенная раздражимость верхних дьіхательньх путей; бронхитьи т.п.; воспалений слизистьїх оболочек и кровеносньїх сосудов, включая такие, как язва желудка, повреждения сосудов, вьізваннье ишемическими заболеваниями и тромбозом, ишемические кишечнье заболевания, воспалительнье кишечньюе заболевания, знтероколит с омертвлением тканей, поражения кишечника, вьізваннье тепловьми ожогами, заболевания, обусловленнье лейкотриеном В; кишечньїх воспалений и разновидностей аллергии, таких как болезнь Целиака (Соеїїас), проктит, зоснофильньй гастрознтерит, мастоцитоз, болезнь Крона (Стопп) и язвенньсе колить!; пищевьх аллергических заболеваний с симптоматическими проявлениями далеко за пределами желудочно-кишечного тракта - в виде мигрени, ринита и зкземь!; почечньїх заболеваний, таких как межтканевьй нефрит; синдрома Гудпесчура (Сюодравіцгє), ге-молитическо-уремического синдрома и диабетической нефропатии; заболеваний нервной системь!ї, таких как множественньій миозит (туозіїіє), синдром Гиллена-Барре (Сцйаїп-Ваїтє), болезнь Меньера (Мепієгедо и радикулопатия; зндокринньїх заболеваний, таких как гипертероидизм и базедова (Вагедому/) болезнь; заболеваний крови, таких как аплазия чистьїх (риге) красньїх кровяньїх телец, анемия, вьізванная аплазией, гипопластическая анемия, идиопатическая тромбоцитопе-ническая пурпура (ригрига), автоиммунная гемолитическая анемия, агранулоцитоз и анеритроплазия; костньїх заболеваний, таких как остеопороз; заболеваний дьїхательньїх путей, включая такие как саркоидоз, "волокнистое легкое" и идиопатическая внутритканевая пневмония; других заболеваний кожи, помимо упомянутьх вьіше, включая дерматомиозит, обьічную лейкодермию, обьічньйй ихтиоз, аллергическую светораздражимость и кожную Т-клеточную лимфозу; заболеваний кровеносной системь!, таких как аритериосклероз, атеросклероз, аортитньій синдром, узловатьй полиартрит и миокардоз; коллагенньїх заболеваний, таких как склеродерма, гранулема Уздженера (М/едепег) и синдром

Сьогрена (5іодгеп); адипоза; зосинофильного фашиита; цинготньїх заболеваний, таких как повреждения десен, вьмпадение зубов, крошение зубов, повреждение надкостниць и зубной костной ткани; нефротического синдрома: гломерулонеф-рита и т.п.; обльісения мужского типа и старческого обльісения; мьішечной дистрофии; пиодермь и синдрома Сезари (5елгагу); заболеваний, обусловленньїх активньім кислородом, в том числе повреждений органов ишемического характера, например поражений тканей сердца, печени, почек, пищеварительного тракта при их хранений и пересадке, а также ишемических заболеваний, например тромбоза, инфаркта миокарда; внутрикатневьїх заболеваний, таких как зндотоксиновьій шок, псевдомембранньй колит, вьізванньй приемом лекарства или облучением; почечньїх заболеваний: острой ишемической почечной недостаточности, хронической почечной недостаточности; легочньїх заболеваний, включая токсиноз, вьізванньій кислородом в легких или же таким лекарством, как паракорт (рагасогі), блеомицинь! (рієотусіпв); рак легких, змфизему легких; глазньїх заболеваний (помимо упомянутьх вьіше): катаракта, сидероз, ретинит, пигментоз, старческое макулярное вьірождение, стекловидное рубцевание, щелочное жжение роговиць! (Согпеаї аїКаїї ригп).

Таблица!

Вид лекарства Раствор Суспензия, размер Змульсия (жирная частиц 6,5 мкм змульсия для внут- ривенной иньекции)

Рецептура:

ЕКБОб 0,05 мг 1 мг 0,293 мг

НРМО 3,5 3,5 -

Д - маннитол - - -

Полисорбат 80 10 - -

Гидрофосфат нат- 0,184 0,184 - рия

Дигидрофосфат 15,47 15,47 - натрия фосфорная к-та 0,0032 0,0032 -

Хлорид натрия 2,88 2,88 -

Хлорид бензалко- 0,2 0,2 - ния

Соевое масло - - 100

Лецитин яичного - - 12 желтка

Глицерин - - 25

Дистиллированная до 1 мл до 1 мл до 1 мл вода глазу крьІсь нг/г 192,9 -- 48,5 141,2 21,7 762,8 - 60,6 2,6 - 1,8 2,5-0,7 26,2 -- 3,2 не обнаруж. не обнаруж. 190,7

Таблица2

Форма (вид): состав на зтиловом спирте (рецептура при примера 6)

ЕКБОб 2 МГ нСо-60 100мг

Безводньй зтиловьй спирт 0,2 мг

Триглицерид жирной кислотьї со средней длиной цепочки до 1 мл

Первоначальн. 100(4,87)

Зо с З сут. 89,3 сут. 84,3 сут. 75,9 (4,42) бос 10 сут. 95,3 17 сут. 942 1 мес. 88,8 (4,45) 45" 1 мес. 99,2 (4,77)

З мес. 96,4 (4,54)

Знергия активации, ккал/моль 22,9

Теодо, прогноз для т-рьі 2570 4,4 года

Claims (11)

1. Иммуносупрессивная композиция, содержащая трициклическое соединение формульі 1 в в 5 наз в (сн), ВІЗ х й ОВОВ'Ї шо В Фвре 89 в д в й щи 18 ов'тові? где каждая пара соседних- радикалов В! и Б2, ВЗ и 7, В» и ВУ независимо представляют собой два соседних атома водорода или образуют двойную связь между соседними атомами углерода, к которьім они присоединень!; В? может представлять алкильную группу; В" - водород, гидроксигруппа, защищенная гидрокси- или алкикосигруппа или в сочетании с В! - оксогруппа; ВЗ и 29 независимо - водород или гидроксигруппа; Во - водород, алкильная группа, алкильная группа, замещенная одной или болеє гидроксильньми группами, алкенильная группа или алкенильная группа, замещенная одной или более гидроксильньми группами, или алкильная группа, замещенная оксогруппой; Х - оксогруппа, сочетание атом водорода и гидроксигруппа, сочетание атом водорода и атом водорода или - Ссно-; У - оксогруппа, сочетание атом водорода и гидроксигруппа, сочетание атом водорода и атом водорода или М- В"В"», или М - ОВ; А" и ВЗ независимо - атом водорода, алкильная группа, арильная или тозиальная группа; В, В'Є, В», ВІЄ, В", ВВ, ВЗ, Д?? ий ДЗ независимо - атом водорода или алкильная группа; ВО и в! независимо - оксогруппа, или же они могут незовисимо представлять собой сочетания (222 и атом водорода) и (Баг? и атом водорода) соответственно; ВО и 2! независимо - гидроксигруппа, алкоксигруппа или группа ОСНгОСН»СНгОСснН» или же Ва"! - -защищенная гидроксигруппа; кроме того, Ва?? и Ва?! могут вместе представлять собой атомь! кислорода в зпоксидном кольце; п е1,2 или 3, в дополнениє к значениям, указанньм вьше, М, Б? и ВЗ вместе с атомами углерода, в котором они присоединеньі, могут составлять 5 - или 6 - членное гетероциклическое кольцо, содержащее М-, 5- или О-, которое может бьть насьшщенньм или ненасьщенньм и которое может бьть замещено одной или более группами, вьібранньіми из алкила, гидрокси, алкила, замещенного одной или более гидроксильньми группами, алкоксигруппь!, бензила и - СНо бе (Св Н5), или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемьсе целевье добавки, отличающаяся тем, что в качестве целевьхх добавок она содержит змульгатор, вьібранньй из группьї, включающей лецитин яичного желтка, соевьй лецитин, продукт их гидрогенизации, фосфатизилхолин, фосфатизилсерин, сфингомиелин, гуммиарабик, желатину, касторовое масло, отвержденное полиоксизтиленом, сложньій зфир полиоксизтиленсорбитана и жирной кислотьі, сложньій зфир глицерина и жирной кислоть!, сложньій зфир полиоксизтилена и жирной кислоть!ї, моно- или диглицеридь! жирньїх кислот с цепочкой средней длиньії и полиоксизтилированньй глицерид, и липофильньй агент, вьібранньій из группьї, включающей соевое, кунжутное, хлопковоєе, саффлоровоеє, кукурузное, рапсовоеє, арахисовое масла, триглицеридь!ї жирньх кислот с цепочной средней длинь! и жидкие углеводородь, при содержаний соединения 1 0,05 - 50 мг/мл, липофильного агента - 5 - 20 мас. 95 и массовом соотношений змульгатор: липофильньй агент 0,5 -400:100.

2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что она представляет собой змульсию или раствор.

З. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит фармацевтически приемлемьй органический і растворитель в количестве 0,002 - 2 мл, предпочтительно 0,01 - 1 мл или 0,02 - 0,5 мл, на 1 мг соединения 1 и представляєт собой раствор.

4. Композиция по п. 3, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит воду и представляет собой змульсию типа масло в воде. в которой "маслом" является раствор по п. 3.

5. Композиция по пп. З и 4, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемьм органическим растворителем является зтанол.

6. Композиция по пп. 1-5, отличающаяся тем, что в трициклическом соединении 1 каждая пара соседних радикалов ВЗ и В, ВЗ и 9 может образовьшвать еще одну связь между атомами углерода, к которьм присоєдинень!; З и Е2З независимо - атомь! водорода; В? - гидроксигруппа; В"? - метил, зтил, пропил или алкил; Х - сочетаниє из двух атомов водорода или оксогруппа; У - оксогруппа; каждьй из радикалов Б, В», В'!Є, В", ВВ, ВД": и р22 - метильная группа; А и В?! независимо - сочетания 2? и атом водорода или Б" и атом водорода, в которьїх Баг? и Ва?! - соответственно гидрокси- или алкоксигруппь, или Ва?" -защищенная гидроксигруппа; М-1 или 2.

7. Композиция по пп. 1 - б, отличающаяся тем, что в трициклическом соединений 1 В" - атом водорода, гидроксигруппа или защищенная гидроксигруппа; Х - оксогруппа, 29 - метоксигруппа, Ва?! - гидроксигруппа или защищенная гидроксигруппа.

8. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что трициклическое соединение 1 представляєт собой 17-аллил, -1, 14-дигидрокси-12- І2- (4-гидрокси-З-метоксициклогексил)-1-метил-винил|-23, 25-диметокси-13,19,21,27- тетраметил-11,28- диокса-4-азатрицикло(22,3,1,029)- октакоз-18-ен-2,3,10,16-тетраон или 17-зтил-1,14- дигидрокси-12-(2-(4-гидрокси -3- метоксициклогексил)-1-метилвинилі - 23,25, диметокси-13,19,21, 27-тетраметил- 11,28-диокса-4-азатрицикло (22,3,1.059-октакоз-18-ен-2,3,10,16-тетраон.

9. Способ получения иммуносупрессивной композиции, включающий смешение трициклического соединения формуль! 1 или его фармацевтически приемлемой соли с фармацевтически приемлемьми целевьми добавками, отличающийся тем, что в качестве целевьїх добавок используют змульгатор и липофильньй агент по п. 1 и смешение осуществляют при соотношений компонентов, указанньх в п. 1.

10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что в качестве целевой добавки дополнительно используют фармацевтически приемлемьїй органический растворитель.

11. Способ по п. 9 или 10, отличающийся тем, что полученнье композиции смешивают с водой с образованием змульсий.