TWI826471B - 化合物 - Google Patents

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凱薩琳 菲 赫姆利
米歇爾 安格 卡梅里諾
保羅 安東尼 史德波爾
艾瓦 伊麗薩貝 柏格曼 柏茲基斯
史考特 雷蒙德 沃克
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Abstract

一種式(I)化合物，或其醫藥鹽：

Description

化合物
本發明係關於充當MYST家族之離胺酸乙醯基轉移酶(KAT)抑制劑之化合物。
MYST家族為最大KAT家族且以酵母及哺乳動物中之創始成員命名：MOZ、Ybf2/Sas3、Sas2及TIP60(Dekker 2014)。MYST蛋白介導多種生物功能，包括基因調控、DNA修復、細胞週期調控及發育(Avvakumov 2007；Voss 2009)。MYST家族之KAT蛋白在組蛋白之轉譯後修飾中發揮關鍵作用且因此對真核生物細胞核中之染色質結構具有顯著影響(Avvakumov 2007)。該家族目前包含五種哺乳動物KAT：TIP60(KAT5；HTATIP；MIM 601409)、MOZ(KAT6A；MIM 601408；MYST3)、MORF(KAT6b；QKF；MYST4)、HBO(KAT8；HBO1；MYST2)及MOF(KAT8；MYST1)(Voss 2009)。MYST家族之此五種成員存在於人類中且已知MYST蛋白之功能失常引起癌症(Avvakumov 2007)。關於MYST家族之成員最頻繁使用之名稱為：
Figure 108121417-A0202-12-0001-354
MYST功能域
MYST蛋白用於多次單元蛋白複合物，包括介導DNA結合之銜接體，諸如ING蛋白(Avvakumov 2007)。例如，TIP60屬NuA4多蛋白複合物(其包含超過16個成員)(Zhang 2017)。然而，亦存在MOZ蛋白自身之結構內的螺旋- 轉角-螺旋DNA-結合基序之一些報道(Holbert 2007)，該基序表明直接地結合於DNA之能力。
MYST蛋白之乙醯基轉移酶活性藉由MYST域(催化域)實現。MYST域含有乙醯基-輔酶A結合基序，該基序與其他HAT一起在結構上保守；及罕見C2HC類型鋅指(Voss 2009)。包括乙醯基-CoA結合基序及鋅指之高度保守MYST域被視為此家族之酶的定義性特徵(Avvakumov 2007)。
MYST蛋白之作用
組蛋白殘基之乙醯化一般地與轉錄活化相關。然而，在一些情況下，轉錄抑制亦已歸因於MYST蛋白(Voss 2009)。已知MYST家族之個別成員參與廣泛範圍之重要生物化學相互作用：
HBO1經由組蛋白受質之乙醯化積極地調控DNA複製之起始(Avvakumov 2007；Aggarwal 2004；Doyon 2006；Iizuka 2006)，據推測其導致更易獲得之染色質構形(Avvakumov 2007，Iizuka 2006)。亦已知HBO1在乳癌之發病機理中藉由促進癌症類幹細胞之增濃(Duong 2013)且藉由經由泛素化使雌激素受體α(ERα)不穩定而發揮作用，該泛素化經由HBO1之組蛋白乙醯化活性而進行(Iizuka 2013)。HBO1亦已牽涉於急性骨髓白血病(AML)中(Shi 2015)。
TIP60(KAT5)為MYST家族之研究最多的成員。TIP60不僅在轉錄之調控中，而且在DNA損傷修復之過程中、尤其在DNA雙鏈斷裂(DSB)中發揮重要作用(Gil 2017)。TIP60可使p53、ATM及c-Myc乙醯化。TIP60及MOF在DNA損傷時特定地使p53之離胺酸120(K120)乙醯化(Avvakumov 2007)。TIP60亦已涉及對於調控T細胞(Treg)生物學很重要。FOXP3為Treg之發育及功能中的主調控因子且已顯示TIP60對FOXP3之乙醯化為FOXP3活性所必需(Li 2007，Xiao 2014)。強調此，小鼠中之條件性TIP60缺失導致糠枇狀致命自體免 疫疾病，從而模擬FOXP3基因剔除小鼠中可見之表型(Xiao 2014)。在癌症中，Treg細胞可藉由抑制針對該腫瘤之適應性免疫性而促進腫瘤進展。
第一雄性缺失(MOF；「males absent on the first」)最初在果蠅中經鑑別為劑量補償組分之一，且基於功能研究及序列分析(Su 2016)經分類為MYST家族之成員。人類直系同源物展現與果蠅MOF之顯著相似性；含有乙醯基-CoA-結合位點、染色質域(其結合組蛋白)及C2HC類型鋅指(Su 2016)。MOF為用於使組蛋白H4K16乙醯化之關鍵酶，且含MOF複合物牽涉於與癌症相關之多種必需細胞功能中(Su 2016)。除了組蛋白乙醯化之全面降低以外，哺乳動物細胞中之MOF耗盡亦可導致異常基因轉錄，尤其引起某些腫瘤抑制因子基因或致癌基因之異常表現，表明MOF在腫瘤發生中之關鍵作用(Su 2016)。例如，MOF之KAT活性已顯示為維持MLL-AF9白血病所需要且對於多種AML亞型可為重要的(Valerio 2017)。
KAT6B(Querkopf)首先在針對在胚胎發育期間調控增生與分化之間的平衡之基因之突變篩選中經鑑別(Thomas 2000)。關於KAT6B突變型等位基因純合之小鼠在大腦皮質發育中具有嚴重缺陷，該等缺陷由特定言之皮質祖細胞群體在胚胎發育期間之增生及分化兩者的嚴重降低引起。KAT6B為成體神經幹細胞群體之維持所需且為系統中調控幹細胞分化至神經元中之部分(Merson 2006)。KAT6B亦在白血病之罕見形式中發生突變(Vizmanos 2003)。
MOZ基因座在所有癌症類型當中排序為第12個最常見之經擴增區(Zack 2013)。MOZ在8p11-p12擴增子內，該擴增子在多種癌症、尤其乳房及卵巢中以約10-15%之頻率可見(Turner-Ivey 2014)。MOZ首先在急性骨髓白血病(AML)中在特異性染色體易位之檢查期間經鑑別為CREB結合蛋白(CBP)之融合搭配物(Avvakumov 2007；Borrow 1996)。MOZ KAT活性為促進MEIS1及HOXa9(典型地可見過表現於一些淋巴瘤及白血病中之蛋白質)之表現所必需。在B細胞 淋巴瘤之Eμ-Myc轉殖基因模型中可見MOZ+/-雜合子小鼠的增加之生存，其中單一MOZ等位基因之損失導致前B細胞中的Meis1及Hoxa9水準之生物學相關降低(Sheikh 2015)。
已知一些MYST之抑制劑。例如，以下腰果酸衍生物經報道(Ghizzoni 2012)為抑制TIP60(IC50=74μM)及MOF(IC50=47μM)：
Figure 108121417-A0202-12-0004-355
其他已知抑制劑包括(Zhang 2017)：
Figure 108121417-A0202-12-0004-356
Figure 108121417-A0202-12-0005-357
根據一般而言KAT且詳言之MYST在諸如癌症之疾病中的確定作用，對於此等蛋白質之新抑制劑存在需要。
本發明提供抑制MYST家族之一或多種KAT(亦即，TIP60、KAT6B、MOZ、HBO1及MOF)之活性的化合物。
本發明之第一態樣提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法方法中：
Figure 108121417-A0202-12-0005-358
 其中： R1、R2、R3及R4係獨立地選自：
(i)H；
(ii)C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，其視情況經一或多個氟基取代，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，醯基醯胺基，或一或多個氟基；
(iii)C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代；
(iv)C3-6環烷基；
(v)鹵基；
(vi)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；
(vii)氰基、NH2或NO2；及
(viii)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、氰基、羥基或甲氧基取代；Ar為苯基、萘基或C5-10雜芳基，該等基團視情況經選自以下之一或多個基團取代：
(i)C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代；
(ii)C3-6環烷基；
(iii)羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基；
(iv)鹵基；
(v)C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代；
(vi)苯氧基，其視情況經氟取代；
(vii)苯基或C5-6雜芳基
(viii)SF5或SO2CH3；
(ix)-(CH2)n-Y-，其中Y為O或CH2，且n為2或3；或
(x)C1-4烷基酯。
第一態樣亦提供包含如所定義的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑之醫藥組合物。
本發明之第二態樣提供一種癌症治療方法，其包含向需要治療之患者投與如本發明之第一態樣中所定義的化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或本發明之第一態樣之醫藥組合物。本發明之第二態樣亦提供如本發明之第一態樣中所定義的化合物或其醫藥學上可接受之鹽在製造用於治療癌症之藥劑中之用途，及如本發明之第一態樣中所定義的化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物用於癌症治療之用途。
如下文所述，如第一態樣中所定義的化合物可在癌症治療中與放射療法及/或化學療法同時或依序投與。
本發明之第三態樣提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
Figure 108121417-A0202-12-0007-359
 其中： R1、R2、R3及R4係獨立地選自：
(i)H；
(ii)C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，其視情況經一或多個氟基取代，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，醯基醯胺基，或一或多個氟基；
(iii)C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代；
(iv)C3-6環烷基；
(v)鹵基；
(vi)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；
(vii)氰基、NH2或NO2；及
(viii)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、氰基、羥基或甲氧基取代；Ar為苯基、萘基或C5-10雜芳基，該等基團視情況經選自以下之一或多個基團取代：
(i)C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代；
(ii)C3-6環烷基；
(iii)羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基；
(iv)鹵基；
(v)C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代；
(vi)苯氧基，其視情況經氟取代；
(vii)苯基或C5-6雜芳基；
(viii)SF5或SO2CH3；
(ix)-(CH2)n-Y-，其中Y為O或CH2，且n為2或3；或
(x)C1-4烷基酯；其限制條件在於：
(a)R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H，且視情況R3不為CF3；或
(b)R4為OMe；或
(c)R4為Cl，且R1、R2及R3為H，或R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H；或
(d)R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
本發明之第四態樣提供如本發明之第一或第三態樣中所定義的化合物之合成，如下文所述。
定義
除非另外規定，否則如本文所用，術語「經取代」係指具有一或多個取代基之親本基團。術語「取代基」在本文中以習知含義使用且係指共價附接至或適當時融合至親本基團之化學部分。如本文所用，措辭「視情況經取代」係指可未經取代或可經取代之親本基團。
C5-12雜芳基：如本文所用，術語「C5-12雜芳基」係指藉由自具有5至12個環原子之芳族結構移除氫原子而獲得的單價部分，該等環原子中之1至3者為環雜原子。術語『芳族結構』用於表示具有芳族特性之單環或稠環系統，且術語『環雜原子』係指氮、氧或硫原子。
在此背景中，字首(例如，C5-12、C5-6等)表示構成該芳族結構之原子的數目，或構成該芳族結構之原子的數目之範圍(無論碳原子或雜原子)。
C5-12雜芳基結構之實例包括但不限於源於以下之彼等：N1：吡咯(pyrrole/azole)(C5)、吡啶(吖嗪)(C6)；吡啶酮(C6)；吲哚(C9)；喹啉(C10)；O1：呋喃(furan/oxole)(C5)；S1：噻吩(thiophene/thiole)(C5)；N1O1：噁唑(C5)、異噁唑(C5)、異噁嗪(C6)；N2O1：噁二唑(呋呫)(C5)；N1S1：噻唑(C5)、異噻唑(C5)；N2S1：噻二唑(C5)N2：咪唑(1,3-二唑)(C5)、吡唑(1,2-二唑)(C5)、噠嗪(1,2-二嗪)(C6)、嘧啶(1,3-二嗪)(C6)(例如，胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1,4-二嗪)(C6)；苯并咪唑(C9)N3：三唑(C5)、三嗪(C6)。
鹵基：如本文所用，術語「鹵基」係指選自氟、氯、溴及碘之基團。
氰基：如本文所用，術語「氰基」係指基團-C≡N。
羥基：如本文所用，術語「羥基」係指基團-OH。
苯基：如本文所用，術語「苯基」係指藉由自具有6個碳環原子之單一芳環結構移除氫原子而獲得的單價部分(-C6H5)。
苯氧基：如本文所用，術語「苯氧基」係指藉由自苯酚之氧原子移除氫原子而獲得的單價部分(-O-C6H5)。
C1-4烷基：如本文所用，術語「C1-4烷基」係指藉由自具有1至4個碳原子之飽和烴化合物之碳原子移除氫原子而獲得的單價部分。
飽和烷基之實例包括但不限於甲基(C1)、乙基(C2)、丙基(C3)及丁基(C4)。
飽和直鏈烷基之實例包括但不限於甲基(C1)、乙基(C2)、正丙基(C3)及正丁基(C4)。
飽和分支鏈烷基之實例包括異丙基(C3)、異丁基(C4)、第二丁基(C4)及第三丁基(C4)。
C3-6環烷基：如本文所用，術語「C3-6環烷基」係指藉由自具有3至6個碳原子之飽和環狀烴化合物之碳原子移除氫原子而獲得的單價部分。C3-6環烷基之實例包括但不限於環丙基(C3)、環丁基(C4)、環戊基(C5)及環己基(C6)。
C1-4烷氧基：如本文所用，術語「C1-4烷氧基」係指藉由自具有1至4個碳原子之飽和醇化合物之氧原子移除氫原子而獲得的單價部分。其可表示為-O-C1-4烷基。C1-4烷氧基之實例包括但不限於甲氧基(C1)、乙氧基(C2)、丙氧基(C3)及丁氧基(C4)。
C1-4烷基胺甲醯基：-NHC(=O)OR，其中R為如上文所定義之C1-4烷基。C1-4烷基胺甲醯基之實例包括但不限於-N(H)C(=O)OCH3、-N(H)C(=O)OCH2CH3及-N(H)C(=O)OC(CH3)3。
醯基醯胺基：-NR(C=O)R’，其中R及R’係獨立地選自H及如上文所定義之C1-4烷基。R及R’亦可為-(CH2)n-，其中n為3或4。醯基醯胺基之實例包括但不限於-N(H)C(=O)CF3、N(H)C(=O)Me，及：
Figure 108121417-A0202-12-0011-360
C1-4烷基酯：如本文所用，術語「C1-4烷基酯」係指藉由自具有1至5個碳原子之飽和羧酸化合物之氧原子移除氫原子而獲得的單價部分。其可表示為-O-C(O)-C1-4烷基。C1-4烷基酯基之實例包括但不限於乙醯氧基 (-O-C(O)-CH3)、丙醯氧基(-O-C(O)-CH2CH3)、丁醯氧基(-O-C(O)-CH2CH2CH3)及戊醯氧基(-O-C(O)-CH2CH2CH2CH3)。
包括其他形式
除非另外規定，否則上文中包括此等取代基之熟知離子、鹽、溶劑合物及經保護形式。例如，對於羧酸(-COOH)之提及亦包括其陰離子(羧酸鹽)形式(-COO-)、鹽或溶劑合物，以及習知經保護形式。同樣，對於胺基之提及包括胺基之質子化形式(-N+HR1R2)、鹽或溶劑合物(例如，鹽酸鹽)，以及胺基之習知經保護形式。同樣，對於羥基之提及亦包括其陰離子形式(-O-)、鹽或溶劑合物，以及習知經保護形式。
鹽
製備、純化及/或處理該活性化合物之相應鹽(例如，醫藥學上可接受之鹽)可為便利的或需要的。醫藥學上可接受之鹽之實例論述於Berge 1977中。
例如，若該化合物為陰離子性的，或具有可為陰離子性之官能基(例如，-COOH可為-COO-)，則可與合適陽離子形成鹽。合適無機陽離子之實例包括但不限於鹼金屬離子(諸如Na+及K+)、鹼土金屬陽離子(諸如Ca2+及Mg2+)及其他陽離子(諸如Al+3)。合適有機陽離子之實例包括但不限於銨離子(亦即，NH4 +)及經取代銨離子(例如NH3R+、NH2R2 +、NHR3 +、NR4 +)。一些合適經取代銨離子之實例為源於以下之彼等：乙胺、二乙胺、二環己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苯甲胺、苯基苯甲胺、膽鹼、甲葡胺及緩血酸胺，以及胺基酸(諸如離胺酸及精胺酸)。常見四級銨離子之實例為N(CH3)4 +。
若該化合物為陽離子性的，或具有可為陽離子性之官能基(例如，-NH2可為-NH3 +)，則可與合適陰離子形成鹽。合適無機陰離子之實例包括但不限於源於以下無機酸之彼等：鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞硫酸、硝酸、亞硝酸、磷酸及亞磷酸。
合適有機陰離子之實例包括但不限於源於以下有機酸之彼等：2-乙醯氧基苯甲酸、乙酸、抗壞血酸、天冬胺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、肉桂酸、檸檬酸、乙二胺四乙酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、反丁烯二酸、葡糖庚酸、葡糖酸、麩胺酸、乙醇酸、羥基順丁烯二酸、羥基萘甲酸、羥基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、順丁烯二酸、蘋果酸、甲烷磺酸、黏液酸、油酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、泛酸、苯基乙酸、苯基磺酸、丙酸、丙酮酸、水楊酸、硬脂酸、丁二酸、磺胺酸、酒石酸、甲苯磺酸、三氟乙酸及戊酸。合適聚合物有機陰離子之實例包括但不限於源於以下聚合物酸之彼等：鞣酸、羧基甲基纖維素。
溶劑合物
製備、純化及/或處理該活性化合物之相應溶劑合物可為便利的或需要的。術語「溶劑合物」在本文中以習知含義用於指溶質(例如，活性化合物、活性化合物之鹽)及溶劑之複合物。若溶劑為水，則溶劑合物可便利地稱作水合物，例如單水合物、二水合物、三水合物等。
異構體
本發明之某些化合物可以一或多種特定幾何、光學、對映異構體、非對映異構體、差向異構體、阻轉異構體、立體異構體、互變異構體、構形或異頭形式存在，包括但不限於順-及反-形式；E-及Z-形式；c-、t-及r-形式；內切-及外切-形式；R-、S-及內消旋-形式；D-及L-形式；d-及l-形式；(+)及(-)形式；酮-、烯醇-及烯醇鹽-形式；順-及反-形式；順錯-及反錯-形式；α-及β-形式；軸向及赤道形式；船-、椅-、扭船-、信封-及半椅-形式；及其組合，下文中統稱作「異構體」(或「異構體形式」)。
術語「對掌性」係指具有鏡像搭配物之不可重疊特性之分子，而術語「非對掌性」係指在其鏡像搭配物上可重疊之分子。
術語「立體異構體」係指具有一致化學組成但關於原子或基團在空間中之安排不同之化合物。
「非對映異構體」係指具有兩個或兩個以上對掌性中心且分子彼此不為鏡像之立體異構體。非對映異構體具有不同物理特性，例如熔點、沸點、光譜特性及反應性。非對映異構體之混合物可根據高解析度分析程序，諸如電泳及層析來分離。
「對映異構體」係指化合物之兩種立體異構體，其彼此為不可重疊鏡像。
本文中使用之立體化學定義及慣例一般地遵循S.P.Parker編，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；及Eliel,E.及Wilen,S.,「Stereochemistry of Organic Compounds」,John Wiley & Sons,Inc.,New York,1994。本發明化合物可含有非對稱或對掌性中心，且因此以不同立體異構體形式存在。預期本發明化合物之所有立體異構體形式形成本發明之一部分，包括但不限於非對映異構體、對映異構體及阻轉異構體，以及其混合物，諸如外消旋混合物。多種有機化合物以光學活性形式存在，亦即，其具有使平面-偏振光之平面旋轉的能力。在描述光學活性化合物時，字首D及L或R及S用於表示該分子繞其對掌性中心之絕對組態。字首d及l或(+)及(-)用於指示該化合物使平面-偏振光旋轉之符號，其中(-)或l意謂該化合物為左旋的。字首為(+)或d之化合物為右旋的。關於既定化學結構，此等立體異構體為一致的，只是其彼此為鏡像。特定立體異構體亦可稱作對映異構體，且該等異構體之混合物通常稱作對映異構體混合物。對映異構體之50：50混合物係稱作外消旋混合物或外消旋體，其可在化學反應或過程中不具有立體選擇或立體特異性之情況下存在。術語「外消旋混合物」及「外消旋體」係指兩種對映異構體物質之等莫耳濃度混合物，其缺乏光學活性。
在本發明中，與R1及Cy結合之碳原子可為立體化學中心，亦即，當R1不為H且R1及Cy不同時。本發明化合物可為外消旋混合物，或可為對映異構體過量或實質上對映異構體純的。
注意，除非如下文關於互變異構體形式所論述，否則自如本文所用之術語「異構體」特定地排除結構(或構造)異構體(亦即，原子之間的連接不同而非僅原子在空間中之位置不同之異構體)。例如，對甲氧基-OCH3之提及不應解釋為對其結構異構體羥基甲基-CH2OH之提及。同樣，對鄰氯苯基之提及不應解釋為對其結構異構體間氯苯基之提及。然而，對一類結構之提及可充分包括屬於彼類之結構異構體形式(例如，C1-7烷基包括正丙基及異丙基；丁基包括正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基；甲氧基苯基包括鄰甲氧基苯基、間甲氧基苯基及對甲氧基苯基)。
上述排除不涉及互變異構體形式，例如酮-、烯醇-及烯醇鹽-形式，如在例如以下互變異構體對中：酮/烯醇(說明於下文中)、亞胺/烯胺、醯胺/亞胺基醇、脒/脒、亞硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亞硝基/羥基偶氮及硝基/異硝基。
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術語「互變異構體」或「互變異構體形式」係指可經由低能障壁互變之具有不同能量之結構異構體。例如，質子互變異構體(亦稱作質子移變互變異構體)包括經由質子遷移實現之互變，諸如酮-烯醇及亞胺-烯胺異構化。價互變異構體包括藉由一些鍵結電子之重組實現之互變。
注意，術語「異構體」特定地包括具有一或多種同位素取代之化合物。例如，H可呈任何同位素形式，包括1H、2H(D)及3H(T)；C可呈任何同位 素形式，包括12C、13C及14C；O可呈任何同位素形式，包括16O及18O；及其類似情形。
可併入至本發明化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，諸如但不限於2H(氘，D)、3H(氚)、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl及125I。多種經同位素標記之本發明化合物，例如其中併入諸如3H、13C及14C之放射性同位素之彼等。該等經同位素標記之化合物可適用於代謝研究、反應動力學研究、偵測或成像技術(諸如正電子發射斷層掃描(PET)或單一光子發射電腦斷層掃描(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析)，或適用於患者之放射性治療。經氘標記或取代之本發明治療性化合物可具有經改良之藥物代謝及藥物動力學(DMPK)特性，涉及分佈、代謝及排泄(ADME)。用諸如氘之較重同位素取代可提供由較大代謝穩定性引起之某些治療優勢，例如增加之活體內半衰期或降低之劑量需求。經18F標記之化合物可適用於PET或SPECT研究。經同位素標記之本發明化合物及其前藥一般地可藉由進行揭示於流程中或下文所述之實例及製備中的程序藉由用可容易獲得之經同位素標記試劑取代未經同位素標記試劑來製備。此外，用較重同位素、尤其氘(亦即，2H或D)取代可提供由較大代謝穩定性引起之某些治療優勢，例如增加之活體內半衰期或降低之劑量需求或治療指數的改良。應理解，在此背景中中之氘被視為取代基。該種較重同位素、特定言之氘之濃度可藉由同位素增濃因子定義。在本發明化合物中，未特定地經指定為特定同位素之任何原子均意欲表示彼原子之任何穩定同位素。
除非另外規定，否則對特定化合物之提及包括所有該等異構體形式，包括(完全地或部分地)其外消旋體及其他混合物。用於該等異構體形式之製備(例如，非對稱合成)及分離(例如，分步結晶及層析手段)之方法為此項技術中已知的，或可容易地藉由以已知方式調適本文所教示之方法或已知方法而獲得。
抑制
本發明化合物抑制MYST家族之一或多種KAT(亦即，TIP60、KAT6B、MOZ、HBO1及MOF)之活性。
本發明化合物之抑制活性有可能在MYST家族之KAT之間變化。
本發明化合物可選擇性地抑制MYST家族之一或多種KAT之活性，超過MYST家族之其他KAT，亦即該化合物對MYST家族之一或多種KAT之抑制活性可高於MYST家族之一或多種其他KAT。
本發明化合物可(選擇性地)抑制MYST家族之單一KAT之活性。因此，本發明化合物可抑制TIP60、MORF、MOZ、HBO1或MOF之活性。
本發明化合物可抑制MYST家族之兩種KAT(例如，MOZ及MORF)之活性。
本發明化合物可抑制MYST家族之三種KAT(例如，MOZ、MORF及HBO1)之活性。
本發明化合物可抑制MYST家族之四種KAT(例如，MOZ、MORF、HBO1及TIP60)之活性。
本發明化合物可抑制MYST家族之所有五種KAT之活性，因此該等化合物可抑制TIP60、MORF、MOZ、HBO1及MOF之活性。
本發明化合物可詳言之抑制MOZ及/或KAT6B及/或HBO1及/或TIP60之活性。
治療適應症
本文所揭示之化合物可在多種病症中、詳言之在癌症之治療或預防中提供治療益處。
癌症
藉由MYST家族之KAT介導之轉譯後離胺酸乙醯化的抑制劑被視為有前景抗腫瘤劑且因此可為適用治療劑，例如用於癌症之治療。該等劑亦可適用作用於展現MYST蛋白之過表現之癌症的治療之治療劑。
「癌症」可為癌症之任何形式。詳言之，癌症可包含以下任一者或多者：白血病、急性淋巴細胞白血病(ALL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、慢性骨髓白血病(CML)、非霍奇金氏淋巴瘤、霍奇金氏病、前列腺癌、肺癌、黑色素瘤、乳癌、結腸直腸癌、結腸癌、鱗狀細胞癌及胃癌。
或者，該癌症可包含腎上腺皮質癌、肛門癌、膀胱癌、血癌、骨癌、腦腫瘤、女性生殖系統癌症、男性生殖系統癌症、中樞神經系統淋巴瘤、子宮頸癌、兒童橫紋肌肉瘤、兒童肉瘤、子宮內膜癌、子宮內膜肉瘤、食道癌、眼癌、膽囊癌、胃腸道癌、毛細胞白血病、頭頸部癌、肝細胞癌、下嚥骨癌、卡波西氏肉瘤、腎癌、喉癌、肝癌、惡性纖維性組織細胞瘤、惡性胸腺瘤、間皮瘤、多發性骨髓瘤、骨髓瘤、鼻腔及副鼻竇癌、鼻咽癌、神經系統癌症、成神經細胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰臟癌、副甲狀腺癌、陰莖癌、咽癌、垂體腫瘤、漿細胞腫瘤、原發性CNS淋巴瘤、直腸癌、呼吸系統、視網膜胚細胞瘤、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟組織肉瘤、胃癌、胃癌、睾丸癌、甲狀腺癌、泌尿系統癌症、子宮肉瘤、陰道癌、血管系統、華氏巨球蛋白血症及/或威爾姆氏腫瘤。
癌症可屬特定類型。癌症類型之實例包括淋巴瘤、黑色素瘤、癌瘤(例如，腺癌、肝細胞癌、髓樣癌、乳頭狀癌、鱗狀細胞癌)、星形細胞瘤、神經膠質瘤、神經管胚細胞瘤、骨髓瘤、腦膜瘤、成神經細胞瘤、肉瘤(例如，血管肉瘤、軟骨肉瘤、骨肉瘤)。
該癌症可為MYST過表現癌症。該癌症可相對於非癌組織過表現MYST蛋白。在一些情況下，該癌症相對於非癌組織過度產生MYST mRNA。 經過表現之MYST蛋白或MYST mRNA可為MYST家族之任一KAT，亦即TIP60、KAT6B、MOZ、HBO1及MOF中之任一者。在一些實施例中，該癌症可過表現MYST家族之超過一種KAT，例如選自由TIP60、KAT6B、MOZ、HBO1及MOF組成之群的兩者或兩者以上。該癌症可為例如經由腫瘤相關Treg細胞逃避免疫識別之癌症。
或者或另外，該癌症可為溴域過表現癌症：癌細胞可相對於非癌組織過表現一或多種含溴域蛋白(本文中稱作「溴域蛋白」)。如與非癌組織相比，其可過度產生一或多種溴域mRNA。在一些情況下，該細胞中之溴域蛋白及/或mRNA水準係處於大約等於非癌細胞之水準的水準下。該癌症可過表現選自由以下組成之群之一或多種溴域蛋白；溴域蛋白(即BRD2、BRD3、BRD4、BRD7、BRD8、BRD9及BRDT)、TAF1/TAF1L、TFIID、SMARC2(亦稱作BRM)及SMARC4(亦稱作BRG1)。例如，一些結腸癌過表現BRD8。一些急性骨髓白血病細胞過表現BRD4。
作為癌症標靶之Treg細胞
Treg細胞為免疫抑制性細胞，其用於預防健康哺乳動物中之自體免疫性。然而，一些癌症用於上調Treg活性以逃避宿主免疫系統。多種腫瘤類型中之Treg浸潤與不良患者預後相關且腫瘤模型中之Treg細胞耗盡證明了增加的抗腫瘤免疫反應(Melero 2015)。宿主免疫系統之腫瘤相關Treg抑制已報道於肺癌(Joshi 2015),(Tso 2012)、乳癌(Gobert 2009；Yan 2011)、前列腺癌(Miller 2006)及胰臟(Wang X 2016)癌中。FOXP3被視為Treg細胞之Treg分化、發育及功能之主調控因子。
數項研究已證明，FOXP3之乙醯化在FOXP3蛋白之穩定性中且在調控其接近DNA之能力中發揮關鍵作用；且FOXP3乙醯化藉由KAT介導(Dhuban 2017)。TIP60介導之FOXP3乙醯化的減少已顯示減弱Treg發育，表明可能使用MYST蛋白之乙醯化活性的抑制作用來干預諸如癌症之疾病之進一步機制。
組合療法
本文所述之劑可適用於與其他抗癌療法組合。其可與化學療法或放射療法，及/或與靶向療法(包括但不限於FGFR1抑制劑及靶向核激素受體之療法)協同地起作用。例如，本文所述之劑可適用於與溴域靶向藥物(包括BET抑制劑)組合。BET抑制劑可逆地結合BET蛋白BRD2、BRD3、BRD4及BRDT之溴域。
抑制MYST家族之KAT蛋白以降低組蛋白(及本文所述之其他核蛋白)之離胺酸乙醯化程度將有可能藉由減弱DNA損傷修復(例如，DNA雙鏈斷裂(DSB)的修復)之過程而使腫瘤細胞對化學療法及放射療法敏感，因此增加化學療法及放射療法誘導之癌細胞死亡的頻率。因此，抑制MYST家族之KAT蛋白將有可能用低劑量之化學療法或放射療法充分地協同加強。
因此，在一些情況下，本文所揭示之MYST蛋白拮抗劑可聯合放射治療或化學治療方案經投與。其與放射療法及/或化學療法同時或依序經投與。合適化學治療劑及放射療法方案將可容易地由熟練人員理解。詳言之，本文所述之化合物可與低劑量之化學療法或放射療法組合。用於「低劑量」之化學療法或放射療法之適當劑量將可容易地由熟練從業者理解。
詳言之，在本申請案之化合物用於消除Treg抑制之情況下，此等化合物可與免疫檢查點抑制劑組合(Melero 2015，Wang L 2016)。此外，在消除Treg抑制之本發明化合物可與放射療法組合使用之情況下，以降低腫瘤中的Treg功能之耗盡(Persa 2015，Jeong 2016)
治療方法
本發明化合物可用於療法方法中。亦提供一種治療方法，該方法包含向需要治療之個體投與治療有效量之本發明化合物。術語「治療有效量」為足以顯示對患者之益處之量。該益處可至少為至少一種症狀之改善。所投與之實際量及投與速率及時程將取決於正在治療之疾病的性質及嚴重程度。治療處方(例如，關於劑量之決定)在一般從業者及其他醫生之職責內。
如上文所述，本文所定義之抗癌治療可作為唯一療法應用，或除了本發明化合物以外，亦可涉及習知手術或放射療法或化學療法。該化學療法可包括抗腫瘤劑之以下分類中的一或多者：-
(i)如用於醫學腫瘤學之其他抗增生/抗腫瘤藥物及其組合，諸如烷基化劑(例如，順鉑、奧沙利鉑、卡鉑、環磷醯胺、氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、替莫唑胺及亞硝基脲)；抗代謝物(例如，吉西他濱及抗葉酸鹽(諸如氟嘧啶，如5氟尿嘧啶)及替加氟、雷替曲塞、胺甲喋呤、胞嘧啶阿糖胞苷及羥基脲)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環類，如阿黴素、博來黴素、多柔比星、道諾黴素、表阿黴素、艾達黴素、絲裂黴素-C、放線菌素D及光神黴素)；抗有絲分裂劑(例如，長春花生物鹼(如長春新鹼、長春花鹼、長春地辛及溫諾平)及紫杉烷類(如紫杉醇及多西他賽(Taxotere))及馬球激酶抑制劑)；及拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素，如依託泊苷及替尼泊苷、安吖啶、拓撲替康及喜樹鹼)；
(ii)細胞抑制劑，諸如抗雌激素(例如，他莫昔芬、氟維司瓊、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬及艾多昔芬)、抗雄激素(例如，比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特及乙酸環丙孕酮)、LHRH拮抗劑或LHRH促效劑(例如，戈舍瑞林、亮丙瑞林及布舍瑞林)、孕激素(例如，乙酸甲地孕酮)、芳香酶抑制劑(例如，阿那曲唑、來曲唑、伏氯唑及依西美坦)及5*-還原酶抑制劑(諸如非那雄胺)；
(iii)抗侵襲劑(例如c-Src激酶家族抑制劑，如4-(6-氯-2,3-亞甲基二氧基苯胺基)-7-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基]-5-四氫哌喃-4-基氧基喹唑啉(AZD0530；國際 專利申請案WO 01/94341)、N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-{6-[4-(2-羥基乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基嘧啶-4-基胺基}噻唑-5-甲醯胺(達沙替尼，BMS-354825；J.Med.Chem.,2004,47,6658-6661及及4-((2,4-二氯-5-甲氧基苯基)胺基)-6-甲氧基-7-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)喹啉-3-甲腈(伯舒替尼，SKI-606；Cancer research(2003),63(2),375-81)，及金屬蛋白酶抑制劑(如馬立馬司他)、尿激酶血纖維蛋白溶酶原活化劑受體功能抑制劑或肝素酶抗體)；
(iv)生長因子功能抑制劑：例如，該等抑制劑包括生長因子抗體及生長因子受體抗體(例如，抗erbB2抗體曲妥珠單抗[HerceptinT]、抗EGFR抗體帕尼單抗、抗erbB1抗體西妥昔單抗[Erbitux，C225]及由Stern 2005揭示之任何生長因子或生長因子受體抗體；該等抑制劑亦包括酪胺酸激酶抑制劑，例如表皮生長因子家族之抑制劑(例如EGFR家族酪胺酸激酶抑制劑，諸如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉基丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，ZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6,7-雙(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃羅替尼，OSI 774)及6-丙烯醯胺基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉基丙氧基)-喹唑啉-4-胺(CI 1033)；erbB2酪胺酸激酶抑制劑，諸如拉帕替尼；肝細胞生長因子家族之抑制劑；血小板源性生長因子家族之抑制劑，諸如伊馬替尼；絲胺酸/酥胺酸激酶抑制劑(例如Ras/Raf信號傳導抑制劑，諸如法呢基轉移酶抑制劑，例如索拉非尼(BAY 43-9006))；經過MEK及/或AKT激酶之細胞信號傳導抑制劑；肝細胞生長因子家族之抑制劑；c-kit抑制劑；abl激酶抑制劑；IGF受體(胰島素樣生長因子)激酶抑制劑；極光激酶抑制劑(例如，AZD1152、PH739358、VX-680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528及AX39459)；細胞週期素依賴性激酶抑制劑，諸如CDK2及/或CDK4抑制劑；
(v)抗血管生成及抗淋巴管生成劑，諸如抑制血管內皮生長因子之效應之彼等[例如，抗血管內皮細胞生長因子A(VEGFA)抗體貝伐珠單抗(AvastinT)、抗血管內皮細胞生長因子A(VEGFA)抗體蘭尼單抗、抗VEGF適體培加他尼、抗血管內 皮生長因子受體3(VEGFR3)抗體IMC-3C5、抗血管內皮細胞生長因子C(VEGFC)抗體VGX-100、抗血管內皮細胞生長因子D(VEGFD)抗體VGX-200、血管內皮生長因子受體3(VEGFR3)之可溶性形式VGX-300及VEGF受體酪胺酸激酶抑制劑，諸如4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(凡德他尼；ZD6474；WO 01/32651內之實例2)、4-(4-氟-2-甲基吲唑-5-基氧基)-6-甲氧基-7-(3-吡咯啶-1-基丙氧基)喹唑啉(西地尼布；AZD2171；WO 00/47212內之實例240)、瓦他拉尼(PTK787；WO 98/35985)、帕唑帕尼(GW786034)、阿西替尼(AG013736)、索拉非尼及舒尼替尼(SU11248；WO 01/60814)、諸如國際專利申請案WO97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856及WO 98/13354中所揭示的彼等化合物之化合物及藉由其他機制起作用之化合物(例如，利諾胺、整合素avb3功能抑制劑及血管生成抑素)]；
(vi)血管損傷劑，諸如考布他汀A4及揭示於國際專利申請案WO 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434及WO 02/08213中之化合物；
(vii)反義療法，例如針對上文所列出之標靶之彼等，諸如ISIS 2503(抗ras反義)；
(viii)基因療法方法，包括例如置換諸如異常p53或異常BRCA1或BRCA2之異常基因的方法、基因導向酶前藥療法(GDEPT)方法(諸如使用胞嘧啶去胺酶、胸苷激酶或細菌硝基還原酶之彼等)及增加患者對化學療法或放射療法之耐受性的方法(諸如多重抗藥性基因療法)；及
(ix)免疫療法方法，包括例如增加患者腫瘤細胞之免疫原性的離體及活體內方法(諸如用諸如介白素2、介白素4或粒細胞巨噬細胞群落刺激因子之細胞因子轉染)、減少T細胞無反應性之方法、使用諸如經細胞因子轉染之樹突狀細胞之經轉染免疫細胞的方法、使用經細胞因子轉染之腫瘤細胞株的方法及使用抗個體基因型抗體之方法
投與
該活性化合物或包含該活性化合物之醫藥組合物可藉由任何便利投與途徑(全身性/外周性或在所需作用位點處)投與至個體，包括但不限於經口(例如，藉由攝取)；表面(包括例如經皮、鼻內、眼、頰及舌下)；肺(例如，藉由使用例如氣霧劑之吸入或吹入療法，例如經由口或鼻)；直腸；陰道；非經腸，例如藉由注射，包括皮下、皮內、肌肉內、靜脈內、動脈內、心內、鞘內、脊椎內、囊內、囊下、眶內、腹膜內、氣管內、表皮下、關節內、蛛網膜下、玻璃體內及胸骨內；藉由儲槽植入，例如經皮下、玻璃體內或經肌肉內。該個體可為真核生物、動物、脊椎動物、哺乳動物、齧齒動物(例如，豚鼠、倉鼠、大鼠、小鼠)、鼠科動物(例如，小鼠)、犬科動物(例如，犬)、貓科動物(例如，貓)、馬科動物(例如，馬)、靈長類動物、猿猴(例如，猴或猿)、猴(例如，狨猴、狒狒)、猿(例如，大猩猩、黑猩猩、猩猩、長臂猿)或人類。
調配物
雖然該活性化合物有可能單獨經投與，但其較佳作為醫藥組合物(例如，調配物)呈遞，該醫藥組合物包含如上文所定義之至少一種活性化合物，連同一或多種醫藥學上可接受之載劑、佐劑、賦形劑、稀釋劑、填充劑、緩衝劑、穩定劑、防腐劑、潤滑劑或熟習此項技術者熟知之其他材料，及視情況選用之其他治療或預防劑。
因此，本發明進一步提供如上文所定義之醫藥組合物，及製造醫藥組合物之方法，該等方法包含混合如上文所定義之至少一種活性化合物，連同一或多種如本文所述的醫藥學上可接受之載劑、賦形劑、緩衝劑、佐劑、穩定劑或其他材料。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受」係指在合理醫學判斷之範圍內適合與個體(例如，人類)組織接觸使用而無過量毒性、刺激、過敏性反應或其 他問題或併發症，與合理效益/風險比率相稱之化合物、材料、組合物及/或劑型。各載劑、賦形劑等在與該調配物之其他成分可相容之意義上亦必須為「可接受的」。
合適載劑、賦形劑等可發現於標準醫藥文本，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1990中。
該等調配物可便利地以單位劑型經呈遞且可藉由藥學技術中熟知之任何方法製備。該等方法包括使該活性化合物與構成一或多種附屬成分之載劑締合之步驟。一般而言，該等調配物係藉由使該活性化合物與液體載劑或經精細分散之固體載劑或兩者均勻地且緊密地締合，且接著必要時使產物成型來製備。
調配物可呈液體、溶液、懸浮液、乳液、酏劑、糖漿、錠劑、口含錠、顆粒、散劑、膠囊、藥囊、丸劑、安瓿、栓劑、子宮托、軟膏、凝膠、糊劑、乳膏、噴霧劑、薄霧、發泡劑、洗劑、油、大丸劑、舐劑或氣霧劑之形式。
適用於經口投與(例如，藉由攝取)之調配物可作為諸如膠囊、藥囊或錠劑之個別單位，各自含有預定量之該活性化合物；作為散劑或顆粒；作為水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；或作為水包油液體乳液或油包水液體乳液；作為大丸劑；作為舐劑；或作為糊劑經呈遞。
錠劑可藉由習知手段，例如視情況與一或多種附屬成分一起壓縮或模製而製得。經壓縮錠劑可藉由在合適機器中壓縮呈自由流動形式之該活性化合物來製備，該活性化合物視情況與一或多種黏合劑(例如，聚維酮、明膠、阿拉伯膠、山梨糖醇、黃蓍膠、羥基丙基甲基纖維素)；填充劑或稀釋劑(例如，乳糖、微晶纖維素、磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、滑石、矽石)；崩解劑(例如，乙醇酸澱粉鈉、交聯聚維酮、交聯羧基甲基纖維素鈉)；表面活性劑或分散劑或濕潤劑(例如，月桂基硫酸鈉)；及防腐劑(例如，對羥基苯甲酸甲酯、對羥 基苯甲酸丙酯、山梨酸)混合。經模製錠劑可藉由在合適機器中模製用惰性液體稀釋劑濕潤之粉末狀化合物之混合物而製得。該等錠劑可視情況包覆包衣或刻痕且可使用例如呈變化比例以提供所需釋放型態之羥基丙基甲基纖維素調配以便提供其中活性化合物之緩慢或控制釋放。錠劑可視情況具備腸溶包衣，以提供除胃以外之腸道部分中之釋放。
適用於表面投與(例如，經皮、鼻內、眼、頰及舌下)之調配物可經調配為軟膏、乳膏、懸浮液、洗劑、散劑、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油。或者，調配物可包含浸漬有活性化合物及視情況選用之一或多種賦形劑或稀釋劑之貼片或敷料，諸如繃帶或橡皮膏。
適用於口中之表面投與之調配物包括口含錠，其包含在調味基料(通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)中的該活性化合物；丸粒，其包含在諸如明膠及甘油或蔗糖及阿拉伯膠之惰性基料中的該活性化合物；及漱口水，其包含在合適液體載劑中之該活性化合物。
適用於表面投與至眼睛之調配物亦包括滴眼劑，其中該活性化合物溶解或懸浮於合適載劑、尤其用於該活性化合物之水性溶劑中。
適用於鼻投與之調配物(其中該載劑為固體)包括具有例如在約20至約500微米範圍內之特定大小的粗粉，其以其中採取鼻吸之方式經投與，亦即藉由經由鼻道自保持緊密接近鼻子之粉末容器快速吸入。用於作為例如鼻噴霧劑、滴鼻劑或藉由利用噴霧器進行氣霧劑投與來投與之合適調配物(其中該載劑為液體)包括該活性化合物之水性或油性溶液。
適用於藉由吸入投與之調配物包括作為來自加壓包裝之氣霧劑噴霧呈遞的彼等，使用合適推進劑，諸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯-四氟乙烷、二氧化碳或其他合適氣體。
適用於經由皮膚進行表面投與之調配物包括軟膏、乳膏及乳液。當在軟膏中經調配時，該活性化合物可視情況使用石蠟或水可混溶性軟膏基質。或者，該等活性化合物可在乳膏中用水包油乳膏基質調配。必要時，該乳膏基質之水相可包括例如至少約30% w/w之多元醇，亦即具有兩個或兩個以上羥基之醇，諸如丙二醇、丁烷-1,3-二醇、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油及聚乙二醇及其混合物。該等表面調配物可合乎需要地包括增強該活性化合物通過皮膚或其他受影響區域之吸收或滲透之化合物。該等皮膚滲透增強劑之實例包括二甲亞碸及相關類似物。
當作為表面乳液經調配時，油相可視情況僅包含乳化劑(在其他情況下稱作利泄劑)，或其可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或與脂肪及油兩者之混合物。較佳地，親水性乳化劑與充當穩定劑之親脂性乳化劑一起包括在內。亦較佳的是包括油及脂肪兩者。合起來看，具有或不具有穩定劑之乳化劑構成所謂的乳化蠟，且該蠟與油及/或脂肪一起構成所謂的乳化軟膏基質，該基質形成乳膏調配物之油性分散相。
合適利泄劑及乳液穩定劑包括Tween 60、Span 80、鯨蠟硬脂醇、肉豆寇醇、甘油單硬脂酸酯及月桂基硫酸鈉。用於該調配物之合適油或脂肪之選擇係基於實現所需的化妝品特性，因為該活性化合物在有可能用於醫藥乳液調配物中之大多數油中之溶解度可極低。因此，該乳膏應較佳地為不油膩、非染色且可洗滌產品，其具有合適稠度以避免自管或其他容器洩漏。可使用直鏈或分支鏈、一元或二元烷基酯，諸如二-異己二酸酯、異鯨蠟醇硬脂酸酯、椰子脂肪酸之丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己酯或稱作Crodamol CAP之分支鏈酯的摻合物，最後三者為較佳酯。其可單獨或組合使用，視所需特性而定。
或者，可使用高熔點脂質(諸如白色軟石蠟)及/或液體石蠟或其他礦物油。
適用於直腸投與之調配物可作為具有包含例如可可脂或水楊酸鹽之合適基質之栓劑經呈遞。
適用於陰道投與之調配物可作為子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、發泡劑或除該活性化合物以外亦含有如此項技術中已知適當之載劑的噴霧調配物經呈遞。
適用於非經腸投與(例如，藉由注射，包括皮膚、皮下、肌肉內、靜脈內及皮內)之調配物包括水性及非水性等張、無熱原質、無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、防腐劑、穩定劑、抑菌劑及使得該調配物與預期接受者之血液等張之溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑及經設計以使該化合物靶向血液組分或一或多個器官之脂質體或其他微粒系統。用於該等調配物中之合適等張媒劑之實例包括氯化鈉注射液、林格氏溶液或乳酸林格氏注射液。典型地，該活性化合物在該溶液中之濃度為約1ng/mL至約10μg/mL，例如約10ng/ml至約1μg/mL。該等調配物可在單位劑量或多劑量經密封容器(例如，安瓿及小瓶)中經呈遞，且可儲存於僅需要在使用之前即刻添加無菌液體載劑(例如，注射用水)之冷凍乾燥(凍乾)條件下。臨時注射溶液及懸浮液可自無菌散劑、顆粒及錠劑製備。調配物可呈經設計以使該活性化合物靶向血液組分或一或多個器官之脂質體或其他微粒系統之形式。
劑量
熟習此項技術者應理解，該化合物及包含該化合物之組合物的適當劑量可在患者之間變化。測定最佳劑量一般地將涉及使治療益處之水準與任何風險或有害負效應保持平衡。所選擇之劑量水準將取決於多種因素，包括但不限於特定化合物之活性、投與途徑、投與時間、該化合物的排泄速率、治療持 續時間、組合使用之其他藥物、化合物及/或材料、病狀之嚴重程度及患者之物種、性別、年齡、重量、狀況、總體健康狀況及先前病史。化合物之量及投與途徑最終將在醫師、獸醫或臨床醫師之判斷下，不過一般而言，該劑量將經選擇以在作用位點處實現局部濃度，該等局部濃度實現所需效應而不會引起實質有害負效應。
投與可在治療過程中持續地或間歇地(例如，以適當時間間隔分次給藥)以一種劑量實現。測定投與之最有效手段及劑量的方法為熟習此項技術者所熟知且將隨用於療法之調配物、療法目的、正在治療之標靶細胞及正在治療之個體變化。單一或多次投與可以藉由治療醫師、獸醫或臨床醫師選額之劑量水準及模式進行。
一般而言，該活性化合物之合適劑量在約100ng至約25mg(更典型地，約1μg至約10mg)/個體之每公斤體重/天範圍內。在該活性化合物為鹽、酯、醯胺、前藥或其類似物之情況下，所投與之量係基於親本化合物來計算且因此，欲使用之實際重量成比例地增加。
在一實施例中，該活性化合物根據以下劑量方案經投與至人類患者：約100mg，每天3次。
在一實施例中，該活性化合物根據以下劑量方案經投與至人類患者：約150mg，每天2次。
在一實施例中，該活性化合物根據以下劑量方案經投與至人類患者：約200mg，每天2次。
然而，在一實施例中，該活性化合物根據以下劑量方案經投與至人類患者：約50或約75mg，每天3次或4次。
在一實施例中，該活性化合物根據以下劑量方案經投與至人類患者：約100或約125mg，每天2次。
治療
如本文在治療病狀之背景下所用，術語「治療」一般而言係指治療及療法，而無論人類或動物(例如，在獸醫應用中)，其中實現一些所需治療效應(例如，該病狀之進展的抑制)，且包括進展速率之降低、進展速率之停止、該病狀之衰退、該病狀之改善及該病狀之治癒。亦包括作為預防措施之治療(亦即，預防(prophylaxis/prevention))。
如本文所用，術語「治療有效量」係指活性化合物或包含活性化合物之材料、組合物或劑型的彼量，當根據所需治療方案經投與時，該量有效用於產生一些所需治療效應，與合理效益/風險比率相稱。
同樣，如本文所用，術語「預防有效量」係指活性化合物或包含活性化合物之材料、組合物或劑型的彼量，當根據所需治療方案經投與時，該量有效用於產生一些所需預防效應，與合理效益/風險比率相稱。
個體/患者
該個體/患者可為動物、哺乳動物、有胎盤哺乳動物、有袋動物(例如，袋鼠、袋熊)、單孔類動物(例如，鴨嘴獸)、齧齒動物(例如，豚鼠、倉鼠、大鼠、小鼠)、鼠科動物(例如，小鼠)、兔類動物(例如，兔)、禽(例如，鳥)、犬科動物(例如，犬)、貓科動物(例如，貓)、馬科動物(例如，馬)、豬(例如，豬)、綿羊(例如，綿羊)、牛(例如，母牛)、靈長類動物、猿猴(例如，猴或猿)、猴(例如，狨猴、狒狒)、猿(例如，大猩猩、黑猩猩、猩猩、長臂猿)或人類。
此外，該個體/患者可為其發育形式中之任一者，例如胎兒。在一較佳實施例中，該個體/患者為人類。
一般合成方法
本發明化合物可藉由使用以下一般方法且使用關於實例詳細描述之程序來製備。所提及之反應條件為說明性且非限制性的，例如，熟習此項技術 者可使用廣泛範圍之合成方法來合成所需化合物，諸如但不限於文獻(例如但不限於March's Advanced Organic Chemistry：Reactions,Mechanisms,and Structure,第7版或Larock’s Comprehensive Organic Transformations：Comprehensive Organic Transformations：A Guide to Functional Group Preparations)中描述之方法。
如上文所述之式(1)化合物可藉由下文概述之合成策略來製備，其中以上定義適用。
一般合成1
流程1A說明藉由使結構G2之相關磺醯氯化合物與一級或二級胺(諸如苯并異噁唑胺G3)偶合來形成磺醯胺鍵以形成具有結構I之化合物。
Figure 108121417-A0202-12-0031-362
形成該等磺醯胺之方法將為熟習此項技術者顯而易知的，但包括例如使用合適鹼(諸如但不限於吡啶、LiHMDS、n-BuLi或NaH)及使用磺酸之經活化形式(諸如相應磺醯基鹵)。自結構G1之相應酸形成結構G2之磺醯氯可藉由例如使用亞硫醯二氯或氰尿醯氯來實現。
或者，磺酸之經活化形式(諸如但不限於具有結構G5之五氟苯基磺酸酯或三氯苯基磺酸酯)可與相關一級或二級胺(諸如苯并異噁唑胺G3)偶合(流程1B)。
Figure 108121417-A0202-12-0032-363
自相應磺醯氯G2及相關酚(R5可為例如五氟苯基或三氯苯基)形成G5中之磺酸酯可使用合適鹼(諸如但不限於吡啶或三乙胺)來實現。形成I中之磺醯胺的方法將為熟習此項技術者顯而易知的，但包括例如使用合適鹼(諸如但不限於LiHMDS)。
一般合成2
流程2A說明形成磺醯氯(諸如G2)，作為取代基，該取代基為Ar之一部分。
Figure 108121417-A0202-12-0032-364
此可藉由使具有結構G6之相關芳基化合物與例如但不限於氯磺酸反應來實現。或者，芳基化合物G6可依序經鹼(諸如但不限於n-BuLi)及二氧化硫處理以提供芳基亞磺酸鋰，該芳基亞磺酸鋰進一步由例如磺醯氯氧化以生成G2中之所需磺醯氯。產物G2可藉由熟習此項技術者已知之方法經分離，或可當場形成且立即用於後續步驟。
另外，G2中之磺醯氯可自流程2B中說明之結構G8中的芳基硫醇形成。
Figure 108121417-A0202-12-0033-365
形成G2之方法包括例如在氯化物來源(諸如但不限於氯三甲基矽烷或亞硫醯二氯)存在下使用合適氧化劑(諸如但不限於過氧化氫及硝酸鉀)。結構G8之硫醇可藉由熟習此項技術者已知之方法(包括但不限於在過渡金屬存在或不存在下之親核置換)，自結構G7之化合物(其中(X)可為鹵素)合成。
或者，芳基化合物(諸如G6)之磺醯化可生成結構G1之相應磺酸。此可藉由熟習此項技術者已知之任何合適試劑(例如三氧化硫或硫酸)來實現。
Figure 108121417-A0202-12-0033-366
磺酸G1可藉由一般合成1流程1A中概述之方法轉化為磺醯氯G2。
一般合成3
流程3A說明自具有鄰位取代基X之芳基腈(諸如結構G9)形成苯并異噁唑胺(諸如G3)。基團(X)可為但不限於鹵素，諸如氯或氟基，且經選擇以適用於所用反應。
Figure 108121417-A0202-12-0033-367
例如，起始材料G9可與肟(諸如但不限於丙酮肟)或與例如乙醯氧肟酸在合適鹼(諸如但不限於第三丁醇鉀)存在下反應，以形成苯并異噁唑胺G3。
一般合成4
Figure 108121417-A0202-12-0034-368
流程4A說明添加R7基團至結構G10之化合物(其中R6表示H或合適保護基，包括但不限於2,4-二甲氧基苯甲基(DMB)；用於移除該等保護基之方法將為熟習此項技術者已知(例如，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis,第4版))，作為取代基，該取代基為Ar之一部分。此可使用熟習此項技術者已知之任何合適偶合反應(例如，鈴木偶合)來實現。基團R7B1及X經選擇以適用於所用之偶合反應。例如，在鈴木偶合反應之情況下，(X)可為鹵素、三氟磺酸酯基或其他合適基團且B1表示合適硼化合物，包括但不限於硼酸或硼酸酯。
可用於鈴木偶合之B1之實例包括但不限於下文所示之彼等。
Figure 108121417-A0202-12-0034-370
可用於鈴木偶合之R7B1之類型包括但不限於下文所示之彼等。
Figure 108121417-A0202-12-0034-369
除了流程4A以外，(X)及(B1)之位置亦可如下文在流程4B中所示經逆轉，以生成相同最終化合物G11。類似於流程2A，由R7X及B1表示之基團經選擇以適用於所用之偶合反應。例如，在鈴木偶合反應之情況下，(X)可為鹵素、三氟磺酸酯基或其他合適基團且B1表示合適硼化合物，包括但不限於硼酸或硼酸酯。
Figure 108121417-A0202-12-0035-371
除鈴木偶合以外，可使用多種偶合反應來引入R7基團，諸如過渡金屬催化之偶合反應或例如錫(Stille類型反應)及鋅(Negishi類型反應)化合物。另外，當基團(X)為例如但不限於酚(O-H)或一級或二級胺(R’R”N-H)時，可使用Chan-Lam類型偶合。
流程4A及4B中所述之轉變亦可用結構G13中之苯并異噁唑部分上的取代基R1、R2、R3或R4進行，由下文流程4C表示。
Figure 108121417-A0202-12-0035-372
另外，在一般合成3流程3D中，可在腈前驅體G9上之磺醯胺及苯并異噁唑形成(當R1或R2或R3或R4=X或B1時)之前引入取代基R7。
一般合成5
流程5A說明添加氮連接之R8基團，作為取代基，該取代基為Ar之一部分或在苯并異噁唑部分上以生成結構G16之化合物。此可使用熟習此項技術者已知之任何合適偶合反應(例如，藉由SnAr置換或Buchwald偶合)來實現。由(X)表示之基團可為但不限於鹵素且經選擇以適用於所用之偶合反應。
Figure 108121417-A0202-12-0036-373
或者，為了合成經醚連接之化合物，可如流程5B中所示使用相似策略。此可使用熟習此項技術者已知之任何合適偶合反應(例如，藉由SnAr或Ullman類型偶合)來實現以生成具有結構G17之化合物。
Figure 108121417-A0202-12-0036-374
以上偶合均亦可經逆轉，以致所添加之基團為R8-X。
另外，在一般合成3流程3D中，可在腈前驅體G9上之磺醯胺及苯并異噁唑形成(當R1或R2或R3或R4=X時)之前引入取代基OR8或NHR8。
一般合成6
Figure 108121417-A0202-12-0036-375
流程6A說明添加胺(HNR10R11)以形成相應醯胺，作為取代基，該取代基為Ar之一部分或在苯并異噁唑部分上以生成結構G19之化合物。此可藉由使相關羧酸與一級胺或二級胺NHR10R11偶合來實現。形成該等醯胺之方法將為熟習此項技術者顯而易知的，但包括例如使用諸如HATU、HBTU、T3P及EDCI/HOBt之試劑，及使用羧酸之經活化形式，諸如相應醯基鹵、經混合酐或N-羥基丁二醯亞胺酯。醯胺G19亦可直接地自酯化合物(當R12=Alk，諸如但不限於甲基或乙基時)合成。自相應酯形成羧酸(當R12=H時)可藉由例如用諸如鹼金屬氫氧化物之鹼或酸(例如鹽酸水溶液)水解來實現。
可自醯胺化合物G19進行進一步轉化，諸如但不限於還原該醯胺以形成胺或使該醯胺脫水以形成腈。執行該轉化之方法將為熟習此項技術者已知的。
另外，在一般合成3流程3D中，可在腈前驅體G9上之磺醯胺及苯并異噁唑形成(當R1或R2或R3或R4=CO2R12,R12=Alk或H時)之前引入醯胺CONR10R11。
一般合成7
流程7A中之結構G20中的(X)轉化為結構G18(R12=烷基，諸如甲基或乙基)中之酯將為熟習此項技術者顯而易知的，但包括例如糖基化反應，其可在諸如但不限於PdCl2dppf.DCM之過渡金屬催化劑；及諸如但不限於甲醇或乙醇之醇溶劑存在下藉由使用一氧化碳來實現。形成結構G18中之羧酸(R=H)可藉由例如用諸如鹼金屬氫氧化物之鹼或酸(例如鹽酸水溶液)水解來實現。
Figure 108121417-A0202-12-0038-376
流程7A中之酯或酸G18可經還原為羥基化合物，諸如結構G21。用於該轉化之方法將為熟習此項技術者已知的，但包括例如使用還原劑，諸如氫化鋰鋁(關於酯及羧酸)及硼烷(關於羧酸)。
可自羥基化合物G21進行進一步轉化，諸如但不限於光延或親核取代反應。執行該轉化之方法將為熟習此項技術者已知的。
另外，在一般合成3流程3D中，可在腈前驅體G9上之磺醯胺及苯并異噁唑形成(當R1或R2或R3或R4=X時)之前引入酯基。
一般合成8
流程8A說明還原結構G22中之硝基以形成結構G23中之相應胺，作為取代基，該取代基為Ar之一部分或在苯并異噁唑部分上。
Figure 108121417-A0202-12-0038-377
將硝基還原為一級胺G23將為熟習此項技術者顯而易知的且包括但不限於使用還原條件，諸如在HCl存在下之過渡金屬(Fe、In、Zn)、在過渡金屬或過渡金屬催化劑存在下之氫化。
可自胺化合物G23進行進一步轉化，諸如但不限於醯胺鍵形成。執行該轉化之方法將類似於一般合成6中所述之彼等。
另外，在一般合成3流程3D中，可在腈前驅體G9(當R1或R2或R3或R4=NO2時)上之磺醯胺及苯并異噁唑形成之前引入胺基。
一般合成9
流程9A說明引入結構G25中之腈基，作為取代基，該取代基為Ar之一部分或在苯并異噁唑部分上。
Figure 108121417-A0202-12-0039-378
用於該轉化之方法將為熟習此項技術者顯而易知的且包括但不限於SnAr置換或過渡金屬催化之與合適氰化物試劑偶合。由結構G24中之(X)表示之基團可為但不限於鹵素、三氟甲磺酸酯基或甲磺酸酯基且經選擇以適用於所用反應。
進一步偏好
以下偏好可適用於如上所述之本發明之所有態樣，或可涉及單一態樣。該等偏好可以任何組合經組合在一起。
R 1 、R 2 、R 3 及R 4
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為H。在此等實施例中之一些中，R1、R2、R3及R4之一為H。在此等實施例中之其他中，R1、R2、R3及R4中之兩者為H。在此等實施例中之其他中，R1、R2、R3及R4中之三者為H。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，其視情況經一或多個氟基取代NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，醯基醯胺基，或一或多個氟基。
在此等實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為C1-3烷基。此外，在此等實施例中，該C1-3烷基可為甲基、乙基或丙基。此等基團可未經取代。此等基團可經一或多個氟基取代，且可經全氟化，例如CF3、C2F5。此等基團可經一個、兩個、三個、四個或五個氟基取代。在一些實施例中，此等基團可經一個；一個或兩個；或一個、兩個或三個氟基取代。
若該烷基經取代，則取代基可選自：
(i)羥基；或
(ii)未經取代C1-2烷氧基，亦即甲氧基、乙氧基；或經一或多個氟基取代之C1-2烷氧基，例如-OCH2F、-OCH2CF3；或
(iii)NH2；或
(iv)苯基；或
(v)C5-6雜芳基，例如N-吡唑基；或
(vi)C1-4烷基胺甲醯基，例如NHC(O)Me；或
(vii)醯基醯胺基，例如NHCO2Me。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代。在此等實施例中，該C1-3烷氧基可為甲氧基、乙氧基或丙氧基。此等基團可未經取代。此等基團可經一或多個氟基取代，且可經全氟化，例如OCF3、OC2F5。此等基團可經一個、兩個、三個、四個或五個氟基取代。在一些實施例中，此等基團可經一個；一個或兩個；或一個、兩個或三個氟基取代。該烷氧基可經C3-6環烷基(例如，環丙基)取代。因此，總體基團可為OCH2(環丙基)。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為C5-6環烷基。在此等實施例中，該C3-6環烷基可為環丙基、環丁基、環戊基或環己基。詳言之，該C3-6環烷基可為環丙基。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為鹵基。在此等實施例中，該鹵基可為氟、氯、溴或碘。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2獨立地選自H及甲基。在此等實施例中，該基團可選自C(O)NH2、C(O)NHCH3及C(O)N(CH3)2。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為氰基、NH2、NO2。在此等實施例中之一些中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為氰基。在此等實施例中之其他中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為NH2。在此等實施例中之其他中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為NO2。
在一些實施例中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為苯基或C5-6雜芳基，該等基團視情況經甲基、氰基、羥基或甲氧基取代。在此等實施例中之一些中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為苯基。在此等實施例中之其他中，R1、R2、R3及R4中之至少一者可為C5-6雜芳基，例如噁唑基、吡唑基、三唑基、 吡啶基及嘧啶基。該苯基或C5-6雜芳基可未經取代。在某些實施例中，該苯基可經甲基、氰基或甲氧基取代。在某些實施例中，該C5-6雜芳基可經一或多個甲基取代，以致總體基團為例如二甲基吡唑基或N-甲基吡唑基。
在一些實施例中，R4為甲氧基。
在一些實施例中，R4為甲氧基，R2為CH2OCH3或CH2OCH2CH3且R1及R3為H。
在一些實施例中，R4為甲氧基，R2為視情況經甲基或甲氧基取代之苯基，且R1及R3為H。
在一些實施例中，R4為甲氧基，R2為視情況經甲基取代之C5-6雜芳基。
在一些實施例中，R4為甲氧基且R1、R2及R3為H。
在一些實施例中，R4為氯，R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H。
在一些實施例中，R4為氯且R1、R2及R4為H。
在一些實施例中，R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
Ar
Ar係選自苯基、萘基及C5-10雜芳基，其可未經取代或經取代。
在一些實施例中，Ar為苯基。
在一些實施例中，Ar為萘基。
在一些實施例中，Ar為C5-10雜芳基。該C5-10雜芳基可選自：喹啉基、苯并噻唑基、喹喔啉基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃及苯并三唑基。在此等實施例中之某些中，Ar為喹啉基或苯并噻唑基。
在一些實施例中，Ar為基團：
Figure 108121417-A0202-12-0043-379
在一些實施例中，關於Ar之取代基為C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代。在此等實施例中，該C1-4烷基可為甲基、乙基、丙基或丁基。此等基團可未經取代。此等基團可經一或多個氟基取代，且可經全氟化，例如CF3、C2F5。若該烷基經取代，則取代基可選自：
(i)羥基；或
(ii)C1-2烷氧基，亦即甲氧基、乙氧基；或
(iii)NH2；或
(iv)C1-4烷基胺甲醯基，例如NHC(O)CH3。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為C3-6環烷基。在此等實施例中，該C3-6環烷基可為環丙基、環丁基、環戊基或環己基。詳言之，該C3-6環烷基可為環己基。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基。在此等實施例中之一些中，該取代基可為羥基。在此等實施例中之其他中，該取代基可為氰基。在此等實施例中之其他中，該取代基可為NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基，因此，該取代基可為NH2、NHCH3或N(CH3)2。在此等實施例中之其他中，該取代基可為醯基醯胺基，諸如NHCO2CH3。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為鹵基。在此等實施例中，該鹵基可為氟、氯、溴或碘。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代。在此等實施例中，該C1-3烷氧基可為甲氧基、乙氧基或丙氧基。此等基團可未經取代。此等基團可經一或多個氟基取代，且可經全氟化，例如OCF3、OC2F5。該烷氧基可經羥基取代，以致總體基團為例如OC2H4OH。該烷氧基可經C(O)NH2取代，以致總體基團為例如OCH2C(O)NH2。該烷氧基可經C3-6環烷基(例如，環丙基)取代，以致總體基團可為例如OCH2(環丙基)。該烷氧基可經苯基取代，以致總體基團為例如苯甲氧基。該烷氧基可經C5-6雜芳基(例如，吡啶基、吡唑基)取代，以致總體基團為例如OCH2(N-甲基吡唑基)或OCH2(甲氧基吡啶基)。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為苯氧基，其視情況經氟取代。在此等實施例中之一些中，該取代基可為苯氧基。在此等實施例中之其他中，該取代基可為OC6H4F。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為苯基或C5-6雜芳基。在此等實施例中之一些中，該取代基為苯基。在此等實施例中之其他中，該取代基可為C5-6雜芳基，諸如噁唑基或N-吡唑基。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為SF5或SO2CH3。在此等實施例中之一些中，該取代基為SF5。在此等實施例中之其他中，該取代基為SO2Me。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為-(CH2)n-Y-，其中Y為O或CH2，且n為2或3。此取代基在Ar為苯基時為尤其相關的，且與苯基形成部分不飽和稠環。因此，Ar可為四氫化萘基(亦即稠合環己胺)、茚滿基(亦即稠合環戊烷)、色滿基(亦即稠合四氫哌喃)或二氫苯并呋喃基。
在一些實施例中，關於Ar之取代基為C1-4烷基酯。在此等實施例中之一些中，該取代基為C(O)OCH3。在此等實施例中之其他中，該取代基為C(O)OC(CH3)3。
Ar之某些實施例可由式(Ar-1)表示：
Figure 108121417-A0202-12-0045-380
 其中Y為N或C-RA4，且Z為N或C-RA5；且RA1、RA2、RA3、RA4(若存在)及RA5(若存在)係獨立地選自H及關於Ar視情況選用之取代基。
在一些實施例中，RA2為乙基。
在一些實施例中，RA3係選自環烷基；苯氧基；苯基；C5-6雜芳基；SF5；及SO2CH3。
在一些實施例中，Ar為5-乙基-2-甲氧基苯基。
在一些實施例中，Ar為5-CF3-2-甲氧基苯基。
在一些實施例中，Ar為2,6-二甲氧基苯基。
在一些實施例中，Ar為喹啉基。此等化合物可顯示針對HBO1之選擇性活性。
在一些實施例中，R4為甲氧基，R2係選自CH2O CH3、CH2O CH2CH3及視情況經取代之苯基，且Ar為2,6-二甲氧基苯。此等化合物可顯示針對MOZ及MORF之特定活性。其中R2係選自CH2OCH3及CH2OCH2CH3之化合物可顯示針對MOZ及MORF之選擇性活性。
在一些實施例中，關於其中R1、R2、R3及R4為H之化合物，則Ar不為4-胺基苯基。
在一些實施例中，關於其中R1、R2、R3及R4為H之化合物，則Ar不為2,4,6-三甲基苯基。
在一些實施例中，關於其中R1、R2及R4為H且R3為CF3之化合物，則Ar不為2-(二氟甲氧基)苯基。
在一些實施例中，關於其中R1、R2、R3及R4為H之化合物，則Ar不為4-氟-3-甲基-苯基。
在一些實施例中，關於其中R1、R2及R3為H且R4為甲氧基之化合物，則Ar不為未經取代之萘基。
特定關注之化合物包括實例之彼等。
實例
提供以下實例以僅說明本發明且不意欲限制如本文所述之本發明之範圍。
首字母縮略詞
為方便起見，多種化學部分使用熟知縮寫來表示，包括但不限於甲基(Me)、乙基(Et)、N-丙基(nPr)、異丙基(iPr)、N-丁基(nBu)、第三丁基(tBu)、苯基(Ph)、苯甲基(Bn)、甲氧基(MeO)、乙氧基(EtO)、三甲基矽烷基(TMS)及乙醯基(Ac)。
為方便起見，多種化合物使用熟知縮寫來表示，包括但不限於甲醇(MeOH)、氘化甲醇(甲醇-d 4 )乙醇(EtOH)、異丙醇(i-PrOH)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙酸(AcOH)、乙腈(MeCN或ACN)、二氯甲烷(dichloromethane/methylene chloride，DCM)、三氟乙酸(TFA)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、四氫呋喃(THF)、二甲亞碸(DMSO)、N-甲基-2-吡咯啶酮(NMP)、氘化丙酮(丙酮-d 6 )、氘化氯仿(CDCl3)、氘化二甲亞碸(DMSO-d 6 )、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(dppf)、三乙胺(Et3N或TEA)、N,N-二異丙基乙胺(DIPEA或DIEA)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯鈀(II)(PdCl2(dppf))、反-二氯雙(三苯膦)鈀(II)(PdCl2(PPh3)2)、參(二亞苯甲基 丙酮)二鈀(0)(Pd2(dba)3)、肆(三苯膦)鈀(0)(Pd(PPh3)4)、2,4-二甲氧基苯甲基(DMB)、石油醚(Pet.醚)、雙(三甲基矽烷基)胺化鋰(LHMDS或LiHMDS)、雙(三甲基矽烷基)胺化鉀(KHMDS)、雙(三甲基矽烷基)胺化鈉(NaHMDS)、正丁基鋰(n-BuLi)、N-溴丁二醯亞胺(NBS)、N-氯丁二醯亞胺(NCS)、對甲苯磺酸吡錠(PPTS)、偶氮雙異丁腈(AIBN)、四甲基乙二胺(TMEDA)、氯化第三丁基二甲基矽烷(TBSCl)、四-正丁基氟化銨(TBAF)及偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)。
另外，TLC係指薄層層析法。
其他縮寫：保持時間(rt或Rt)、分鐘(min)、小時(h)、室溫(RT)、濃(conc.)、大氣壓(atm)、水性(aq.)、飽和(sat.)、當量(eq.)。
一般實驗詳情
除非另外規定，否則以下一般化適用。1H NMR光譜記錄於Bruker Ultrashield Plus(400MHz)或Bruker AVANCE III(400MHz)上。信號之多重性由以下縮寫指定：s，單峰；d，雙重峰；t，三重峰；q，四重峰；p，五重峰；dd，雙重峰之雙重峰；dt，三重峰之雙重峰；tt，三重峰之三重峰；br，寬峰；m，多重峰。所有觀察到之偶合常數J均以赫茲(Hz)報道。未始終觀察到可交換質子。
LCMS資料使用Agilent 6100系列Single Quad(LCMS-A)、Agilent 1260 Infinity系列UPLC/MS(LCMS-B)、Agilent 1200(LCMS-C及LCMS-D)、Waters 2695 alliance(LCMS-E)、Agilent 6120 Single Quad(LCMS-F)或質量導向HPLC-MS產生。氯同位素經報道為35Cl，溴同位素經報道為79Br或81Br或79Br/81Br兩者。
LCMS方法A(LCMS-A)：
儀器：Agilent 6100系列Single Quad LC/MS
Agilent 1200系列HPLC
泵：1200系列G1311A四元泵
自動取樣器：1200系列G1329A熱固定自動取樣器
偵測器：1200系列G1314B可變波長偵測器
LC條件：
逆相HPLC分析
管柱：Luna C8(2)5μm 50×4.6mm 100Å
管柱溫度：30℃
注射體積：5μL
溶劑A：水0.1%甲酸
溶劑B：MeCN 0.1%甲酸
梯度：歷經10min 5-100%溶劑B
偵測：254nm或214nm
MS條件：
離子源：四極
離子模式：Multimode-ES
乾燥氣體溫度：300℃
汽化器溫度：200℃
毛細管電壓(V)：2000(正)
毛細管電壓(V)：4000(負)
掃描範圍：100-1000
步長：0.1s
採集時間：10min
LCMS方法B(LCMS-B)：
儀器：Agilent 1260 Infinity系列UPLC/MS
泵：1260 Infinity G1312B二元泵
自動取樣器：1260 Infinity G1367E 1260 HiP ALS
偵測器：1290 Infinity G4212A 1290 DAD
LC條件：
逆相HPLC分析
管柱：Poroshell 120 EC-C18 2.7μm 50×3.0mm
管柱溫度：35℃
注射體積：1μL
溶劑A：水0.1%甲酸
溶劑B：MeCN 0.1%甲酸
梯度：歷經3.8min 5-100%溶劑B
偵測：在254nm及214nm下監測
MS條件：
離子源：四極
離子模式：API-ES
乾燥氣體溫度：350℃
毛細管電壓(V)：3000(正)
毛細管電壓(V)：3000(負)
掃描範圍：100-1000
步長：0.1s
採集時間：5min
LCMS方法C(LCMS-C)：
LC模型：Agilent 1200
(泵類型：二元泵，偵測器類型：DAD)
MS模型：Agilent G6110A四極
LC條件：
管柱：Xbridge-C18，2.5μm，2.1×30mm
管柱溫度：30℃
波長採集：214nm、254nm
移動相：A：0.07% HCOOH水溶液，B：MeOH
MS條件：
MS：離子源：ES+(或ES-)MS範圍：50-900m/z
裂解電壓：60乾燥氣流：10L/min
噴霧器壓力：35psi乾燥氣體溫度：350℃
Vcap：3.5kV
梯度表：
Figure 108121417-A0202-12-0050-381
樣品製備：
樣品以約0.11-1mg/mL濃度溶解於甲醇中，接著經由具有0.22μm之注射器過濾器過濾。(注射體積：1-10μL)
LCMS方法D(LCMS-D)：
LC模型：Agilent 1200
(泵類型：二元泵，偵測器類型：DAD)
MS模型：Agilent G6110A四極
LCMS條件：
LC：管柱：Xbridge-C18，2.5μm，2.1×30mm
管柱溫度：30℃
波長採集：214nm、254nm
移動相：A：0.07% HCOOH水溶液，B：MeOH
MS條件：
MS：離子源：ES+(或ES-)MS範圍：50-900m/z
裂解電壓：60乾燥氣流：10L/min
噴霧器壓力：35psi乾燥氣體溫度：350℃
Vcap：3.5kV
梯度表：
Figure 108121417-A0202-12-0051-382
樣品製備：
樣品以約0.11-1mg/mL濃度溶解於甲醇中，接著經由具有0.22μm之注射器過濾器過濾。(注射體積：1-10μL)
LCMS方法E(LCMS-E)：
設備資訊：
LC模型：Waters 2695 alliance
(泵類型：四元泵，偵測器：2996光二極體陣列偵測器)
MS模型：Micromass ZQ
LC條件：
LC：管柱：Xbridge-C18，3.5μm，2.1×50mm
管柱溫度：30℃
波長採集：214nm、254nm
移動相：A：0.07% HCOOH水溶液，B：MeOH
MS條件：
MS：離子源：ES+(或ES-)MS範圍：50-900m/z
毛細管：3kV錐孔：3V萃取器：3V
乾燥氣流：600L/h錐孔：50L/h
去溶劑化溫度：300℃
源溫度：100℃
梯度表：
Figure 108121417-A0202-12-0052-383
樣品製備：
樣品以約0.11-1mg/mL濃度溶解於甲醇中，接著經由具有0.22μm之注射器過濾器過濾。(注射體積：1-10μL)
LCMS方法F(LCMS-F)
儀器：Agilent 6120系列Single Quad LC/MS
Agilent 1200系列HPLC
泵：1200系列G1311A四元泵
自動取樣器：1200系列G1329A熱固定自動取樣器
偵測器：1200系列G1314B可變波長偵測器
LC條件：
逆相HPLC分析
管柱：Luna C8(2)5μm 50×4.6mm 100Å
管柱溫度：30℃
注射體積：1-10μL
溶劑A：水0.1%甲酸
溶劑B：MeCN 0.1%甲酸
梯度：歷經10min 0-95%溶劑B
偵測：254nm或214nm
MS條件：
離子源：四極
離子模式：Multimode-ES及APCI
乾燥氣體溫度：250℃
汽化器溫度：200℃
毛細管電壓(V)：4000(正)
毛細管電壓(V)：4000(負)
掃描範圍：100-1000
步長：0.1s
採集時間：10min
裝備型質量導向HPLC
儀器：
Waters ZQ 3100-質量偵測器
Waters 2545-泵
Waters SFO系統流體整理器
Waters 2996二極體陣列偵測器
Waters 2767樣品管理器
LC條件：
逆相HPLC分析
管柱：XBridge TM C18 5μm 19×50mm
注射體積500μL
溶劑A：水0.1%甲酸
溶劑B：乙腈0.1%甲酸
梯度：歷經10min 25-100% B
流動速率：19mL/min
偵測：100-600nm
MS條件：
離子源：單一-四極
離子模式：ES正
源溫度：150℃
去溶劑化溫度：350℃
偵測：離子計數
毛細管(KV)-3.00
錐孔(V)：30
萃取器(V)：3
RF透鏡(V)：0.1
掃描範圍：100-1000Amu
掃描時間：0.5s
採集時間：10min
氣流
去溶劑化L/h-650
錐孔L/h-100
製備型HPLC(prep.HPLC)：
儀器類型：Varian 940-LC系列；
泵類型：四元泵；
偵測器類型：二極體陣列偵測器
HPLC條件：
Waters Sunfire prep C18 OBD，5μm 19×100mm管柱，用含0.07% TFA之水中的MeOH之梯度以15mL/min之流動速率溶離。採集波長214nm、254nm。
在Merck矽膠60 F254覆鋁板上執行分析型薄層層析法，該等板使用在UV光下之螢光淬滅或基礎KMnO4浸漬液或Ninhydrin浸漬液經肉眼觀察。
執行製備型薄層層析法(製備型TLC或prep.TLC)，其中使用Tklst(China)，主要級別：(HPTLC)：8±2μm>80%；(TLC)：10-40μm。類型：GF254。藉由UV(254nm)肉眼觀察化合物。
使用Biotage Isolera純化系統執行管柱層析法，該純化系統使用Grace或RediSep®矽石筒或具有Tklst(China)，主要級別，100-200目矽膠。
使用CEM Explorer SP微波反應器實現微波照射。
必要時，無水溶劑購自Sigma-Aldrich或使用習知方法經乾燥。
除非另外規定，否則用濃HCl或HCl水溶液進行酸化。
所用之額外筒如下：
相分離器：
製造商：Biotage
產品：ISOLUTE ®相分離器(3mL，除非另外規定)
Si-胺筒：
製造商：Biotage
產品：Isolute ® NH2，1g/6mL
或
製造商：Silicycle
產品：Si-胺500mg或1g
合成中間物 i)6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I4
Figure 108121417-A0202-12-0056-384
a)4-氰基-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯I1
4-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈(3.5g，16.4mmol)、Pd(dppf)Cl2．DCM(668mg，0.82mmol)及Et3N(5.0g,49.1mmol)於MeOH(80mL)中之混合物在100℃下在CO氛圍(0.2MPa)下加熱隔夜。添加額外Pd(dppf)Cl2．DCM(340mg，0.4mmol)且繼續在CO氛圍(0.2MPa)下加熱隔夜。藉由過濾移除催化劑，用MeOH洗滌且在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至10/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.4g，74%)。LCMS-D：Rt 2.48min；m/z 216.1[M+Na]+。
b)2-氟-4-(羥基甲基)-5-甲基苯甲腈I2
在RT下在N2下向4-氰基-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯I1(2.4g，12.4mmol)於無水THF(20mL)中之溶液中逐滴添加LiBH4(THF中之2.0M溶液，12.4mL，24.8mmol)且該混合物在回流下加熱持續2h。反應用水(80mL)淬滅且該混合物用EtOAc(90mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水(100mL×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至10/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.6g，79%)。LCMS-D：Rt 1.43min；m/z 166.1[M+H]+，188.1[M+Na]+。
c)2-氟-4-(甲氧基甲基)-5-甲基苯甲腈I3
在0℃下向2-氟-4-(羥基甲基)-5-甲基苯甲腈I2(800mg，8.8mmol)及碘甲烷(3.4g,24.2mmol)於DMF(12mL)中之溶液中添加NaH(油中之60% w/w分散液，379mg，9.7mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續30min。添加水且該混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至10/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(660mg，76%)。LCMS-D：Rt 2.44min；m/z 180.1[M+H]+，202.1.1[M+Na]+。
d)6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I4
在0℃下向乙醯氧肟酸(792mg，10.6mmol)於無水DMF(20mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(1.2g，10.6mmol)且該混合物在RT下攪拌持續2h。接著添加2-氟-4-(甲氧基甲基)-5-甲基苯甲腈I3(630mg，3.5mmol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(80mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=20/1至10/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.0g，77%)。LCMS-D：Rt 1.75min；m/z 193.1[M+H]+。
ii)4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9
Figure 108121417-A0202-12-0058-385
a)4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5
向4-溴-2,6-二氟苯甲腈(6.0g,27.5mmol)於THF(100mL)中之溶液中添加甲醇鈉(1.5g，55.0mmol)且該混合物在RT下攪拌持續48h。添加水且該混合物用EtOAc(150mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=300/1至200/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.3g，68%)。LCMS-D：Rt 2.53min；m/z 251.8/253.8[M+Na]+。
b)4-氰基-3-氟-5-甲氧基苯甲酸甲酯I6
4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(4.3g，18.7mmol)、Pd(dppf)Cl2．DCM(768mg，0.94mmol)及Et3N(5.7g,56.1mmol)於MeOH(50mL)中之混合物在100℃下在CO氛圍(0.2MPa)下加熱隔夜。藉由過濾移除催化劑，用MeOH洗滌且在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=200/1至50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.9g，74%)。LCMS-D：Rt 2.41min；m/z 210.0[M+H]+，232.0[M+Na]+。
c)2-氟-4-(羥基甲基)-6-甲氧基苯甲腈I7
在RT下在N2下向LiBH4(THF中之2.0M溶液，13.9mL，27.8mmol)於無水THF(60mL)中之溶液中逐滴添加4-氰基-3-氟-5-甲氧基苯甲酸甲酯I6(2.9g，13.9mmol)於無水THF(10mL)中之溶液且該混合物在回流下加熱持續1 h。該反應用1M HCl水溶液淬滅且用EtOAc(100mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水(100mL×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.5g，100%)。LCMS-D：Rt 2.31min；m/z 182.1[M+H]+，204.1[M+Na]+。
d)2-氟-6-甲氧基-4-(甲氧基甲基)苯甲腈I8
在0℃下分成小份向2-氟-4-(羥基甲基)-6-甲氧基苯甲腈I7(2.7g，14.9mmol)及碘甲烷(10.6g,74.5mmol)於DMF(100mL)中之溶液中添加NaH(油中之60% w/w分散液，1.2g，29.8mmol)且該混合物在RT下攪拌持續30min。添加水且該混合物用EtOAc(100mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.2g，76%)。LCMS-D：Rt 2.22min；m/z 218.0[M+Na]+。
e)4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9
在RT下向乙醯氧肟酸(2.3g，30.8mmol)於無水DMF(1500mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(3.5g，30.8mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氟-6-甲氧基-4-(甲氧基甲基)苯甲腈I8(2.0g，10.3mmol)且在RT下繼續攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=20/1至10/1至3/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(580mg，27%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 6.92(d,J=0.8Hz,1H),6.65(s,1H),5.91(s,2H),4.48(s,2H),3.90(s,3H),3.32(s,3H，藉由水峰遮蔽)。LCMS-D：Rt 1.33min；m/z 209.0[M+H]+。
iii)4-硝基苯并[d]異噁唑-3-胺I10
Figure 108121417-A0202-12-0060-387
向2-氟-6-硝基苯甲腈(1.0g，6.17mmol)於DMF/H2O(32mL/32mL)中之溶液中添加乙醯氧肟酸(2.78g，37.0mmol)及K2CO3(10.23g，74.0mmol)且該混合物在70℃下加熱持續19h。添加水(200mL)且該混合物用EtOAc(100mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=30/1至1/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(380mg，35%)。LCMS-D：Rt 2.82min；m/z 180.1[M+H]+。
iv)4-甲氧基-6-(1-甲氧基乙基)苯并[d]異噁唑-3-胺I15
Figure 108121417-A0202-12-0060-386
a)4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I11
向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(2.0g，8.7mmol)於THF(40mL)中之溶液中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(3.4g，9.6mmol)、Pd(PPh3)4(201mg，0.174mmol)及LiCl(1.15g，27.0mmol)且該混合物在回流下在N2下加熱持續48h。該混合物用EtOAc稀釋且用水、5%氫氧化銨水溶液及鹽水連續地洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚 /EtOAc=200/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(1.6g，84%)。LCMS-C：Rt 2.41min；m/z 222.0[M+H]+。
b)4-乙醯基-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I12
向4-(1-乙氧基乙烯基)-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I11(1.0g，4.5mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加2M HCl水溶液(6.0mL)且該混合物在RT下攪拌持續3h。該混合物用乙醚稀釋且用飽和NaHCO3水溶液及水洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(710mg,81%)。LCMS-C：Rt 1.42min；m/z 194.0[M+H]+。
c)2-氟-4-(1-羥基乙基)-6-甲氧基苯甲腈I13
向4-乙醯基-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I12(700mg,3.6mmol)於THF(30mL)中之溶液中添加硼氫化鈉(206mg，5.4mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈無色油狀之標題化合物(675mg,95%)。LCMS-C：Rt 0.98min；m/z 196.0[M+H]+。
d)2-氟-6-甲氧基-4-(1-甲氧基乙基)苯甲腈I14
在0℃下分成小份向2-氟-4-(1-羥基乙基)-6-甲氧基苯甲腈I13(670mg，3.4mmol)及碘甲烷(1.5g,10.3mmol)於DMF(20mL)中之溶液中添加NaH(油中之60% w/w分散液，274mg，6.8mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續2h。添加水且該混合物用EtOAc(40mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(650mg,90%)。LCMS-C：Rt 1.95min；m/z 210.0[M+H]+。
e)4-甲氧基-6-(1-甲氧基乙基)苯并[d]異噁唑3-胺I15
在0℃下向乙醯氧肟酸(698mg，9.3mmol)於無水DMF(20mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(1.04g，9.3mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接 著逐滴添加2-氟-6-甲氧基-4-(1-甲氧基乙基)苯甲腈I14(650mg，3.1mmol)於無水DMF(10mL)中之溶液且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=300/1至200/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(130mg，19%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 6.90(s,1H),6.64(s,1H),5.92(s,2H),4.39(q,J=6.4Hz,1H),3.90(s,3H),3.15(s,3H),1.36(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS-C：Rt 0.73min；m/z 223.0[M+H]+。
v)4-甲氧基-6-苯基苯并[d]異噁唑-3-胺I17
Figure 108121417-A0202-12-0062-388
a)3-氟-5-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-甲腈I16
在N2下向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(6.0g，26.1mmol)及苯基硼酸(6.36g，52.2mmol)於1,4-二噁烷(200mL)及水(50mL)中之溶液中添加Pd(PPh3)4(2.99g，2.66mmol)及Na2CO3(8.29g，78.2mmol)且該混合物在100℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至50/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(5.45g，93%)。LCMS-C：Rt 2.48min；m/z 228.0[M+H]+。
b)4-甲氧基-6-苯基苯并[d]異噁唑-3-胺I17
在0℃下向乙醯氧肟酸(8.15g，23.98mmol)於無水DMF(200mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(5.5g，24.0mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加3-氟-5-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-甲腈I16(5.45g，7.99mmol)且該混合物 在60℃下加熱持續4h。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至8/1至6/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.2g，38%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.79-7.74(m,2H),7.52-7.46(m,2H),7.45-7.39(m,1H),7.26(d,J=1.1Hz,1H),6.95(s,1H),5.97(s,2H),4.00(s,3H)。LCMS-C：Rt 2.15min；m/z 241.0[M+H]+
vi)3-(3-胺基-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-6-基)苯酚I19
Figure 108121417-A0202-12-0063-389
a)3-氟-3'-羥基-5-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-甲腈I18
在N2下向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(650mg，2.8mmol)及(3-羥基苯基)硼酸(1.2g，5.6mmol)於1,4-二噁烷(40mL)及水(10mL)中之溶液中添加Pd(PPh3)4(327mg，0.28mmol)及Na2CO3(899mg，8.5mmol)且該混合物在100℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(687mg，94%)。LCMS-C：Rt 2.07min；m/z 244.0[M+H]+。
b)3-(3-胺基-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-6-基)苯酚I19
在0℃下向乙醯氧肟酸(636mg，8.5mmol)於無水DMF(60mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(952mg，8.5mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加3-氟-3'-羥基-5-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-甲腈I18(687mg，2.8mmol)且該混合物在60℃下加熱持續4h。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機 萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=1/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(282mg，39%)。LCMS-C：Rt 2.3min；m/z 257.0[M+H]+。
vii)6-(乙氧基甲基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I21
Figure 108121417-A0202-12-0064-390
a)4-(乙氧基甲基)-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I20
在0℃下分成小份向2-氟-4-(羥基甲基)-6-甲氧基苯甲腈I7(1.15g，6.4mmol)及碘乙烷(5.0g,31.7mmol)於DMF(40mL)中之溶液中添加NaH(油中之60% w/w分散液，508mg，12.7mmol)且該混合物在RT下攪拌持續30min。添加水且該混合物用EtOAc(100mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.0g，79%)。LCMS-C：Rt 2.15min；m/z 210.0[M+H]+。
b)6-(乙氧基甲基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I21
在RT下向乙醯氧肟酸(1.1g，14.3mmol)於無水DMF(50mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(1.6g，14.3mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加4-(乙氧基甲基)-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I20(1.0g,4.8mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=20/1至10/1至3/1)純化以生成呈黃色油狀之標題化合物(650mg，61%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 6.92(s,1H),6.65(s,1H),5.91(s,2H),4.53(s,2H),3.89(s,3H),3.51(q,J=7.0Hz,2H),1.17(t,J=7.0Hz,3H)。LCMS-C：Rt 0.82min；m/z 223.0[M+H]+。
viii)6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I22
Figure 108121417-A0202-12-0065-391
在RT下向乙醯氧肟酸(2.0g，26.1mmol)於無水DMF(100mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(2.9g，26.1mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(2.0g,8.7mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(296mg，14%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.32(d,J=1.2Hz,1H),6.90(d,J=1.2Hz,1H),6.04(s,2H),3.92(s,3H)。LCMS-C：Rt 1.4min；m/z 244.0[M+H]+。
ix)7-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I26
Figure 108121417-A0202-12-0065-392
a)2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I23
3-溴-2-氟苯甲腈(3.0g,15.0mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環)(11.4g，45mmol)、乙酸鉀(5.9g，60.0mmol)及Pd(dppf)Cl2(2.2g,3.0mmol)於DMSO(45mL)及1,4-二噁烷(15mL)中之混合物在105℃下在N2 下加熱持續3h。該混合物用EtOAc(30mL)稀釋且用水(30mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.9g，>100%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)2-氟-3-羥基苯甲腈I24
在N2下向2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I23(1.9g，7.6mol)於AcOH(19mL)中之溶液中逐滴添加H2O2(30%水溶液，1.9mL)且該混合物在RT下攪拌持續2h，接著傾入EtOAc及過量Na2SO3水溶液之混合物中。接著分離各層且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈灰白色蠟狀固體之標題化合物(650mg,62%)。LCMS-D：Rt 0.93min；m/z 138.1[M+H]+。
c)3-乙氧基-2-氟苯甲腈I25
向2-氟-3-羥基苯甲腈I24(360mg,2.6mmol)於DMF(30mL)中之溶液中添加Cs2CO3(4.3g，13.1mmol)及碘乙烷(1.0g，6.6mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(80mL)稀釋且用水(50mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(220mg,51%)。LCMS-D：Rt 2.31min；m/z 166.1[M+H]+。
d)7-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I26
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(300mg，4.0mmol)於DMF(15mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(450mg，4.0mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。添加3-乙氧基-2-氟苯甲腈I25(220mg，1.3mmol)於DMF(10mL)中之溶液且該混合物在30℃下加熱隔夜。添加EtOAc(80mL)且該混合物用水(50mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(170mg,70%)。LCMS-D：Rt 1.68min；m/z 179.1[M+H]+。
x)7-(環丙基甲氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I28
Figure 108121417-A0202-12-0067-393
a)3-(環丙基甲氧基)-2-氟苯甲腈I27
向2-氟-3-羥基苯甲腈I24(360mg,2.6mmol)於DMF(30mL)中之溶液中添加Cs2CO3(4.3g，13.1mmol)、KI(87mg，0.5mmol)及(溴甲基)環丙烷(880mg，6.6mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加EtOAc(80mL)且該混合物用水(50mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈紅色固體狀之標題化合物(150mg，30%)。LCMS-D：Rt 2.54min；m/z 192.1[M+H]+。
b)7-(環丙基甲氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I28
根據關於7-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I26步驟d所述之程序，自3-(環丙基甲氧基)-2-氟苯甲腈I27製備。LCMS-D：Rt 2.23min；m/z 205.1[M+H]+。
xi)6-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I32
Figure 108121417-A0202-12-0067-394
a)2-氟-4-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲腈I29
在N2下向2-氟-4-羥基苯甲腈(20g，145.9mmol)及PPTS(733mg，2.9mmol)於DCM(500mL)中之溶液中添加3,4-二氫-2H-哌喃(24.5g，292mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/0至100/2)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(27g，83%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)6-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I30
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(13.7g，182.3mmol)於DMF(60mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(20.4g，182.3mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氟-4-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯甲腈I29(13.4g,60.8mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加EtOAc(500mL)且該混合物用水(100mL×5)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(12.1g，85%)。LCMS-D：Rt 2.31min；m/z 235.1[M+H]+。
c)3-胺基苯并[d]異噁唑-6-醇I31
向6-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I30(3.5g，15mmol)於THF(50mL)中之溶液中添加2M HCl水溶液(20mL)且該混合物在RT下攪拌持續3h。該混合物用EtOAc(300mL)稀釋且用水(×2)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.1g,94%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
d)6-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I32
3-胺基苯并[d]異噁唑-6-醇I31(300mg，2mmol)、Cs2CO3(2.0g，6mmol)、KI(66mg，0.4mmol)及溴乙烷(436mg，4mmol)於DMF(30mL)中之混合物在50℃下在N2下加熱隔夜。該混合物用EtOAc(300mL)稀釋且用水(100mL×5)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱 層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(270mg，76%)。LCMS-D：Rt 0.37min；m/z 179.0[M+H]+。
xii)6-(環丙基甲氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I33
Figure 108121417-A0202-12-0069-395
根據關於6-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I32步驟d所述之程序，自3-胺基苯并[d]異噁唑-6-醇I31製備(395mg，97%)。LCMS-D：Rt 2.27min；m/z 205.1[M+H]+。
xiii)6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I36
Figure 108121417-A0202-12-0069-396
a)4-疊氮基-2-氟苯甲腈I34
4-胺基-2-氟苯甲腈(2.0g，14.7mmol)於水(4mL)、ACN(32mL)及濃HCl(10mL)中之混合物在RT下在N2下攪拌隔夜。接著逐份添加NaNO2(2.0g，29.4mmol)且在RT下繼續攪拌持續2h。該混合物冷卻至0℃，逐份添加NaN3(1.9g，29.4mmol)且在RT下繼續攪拌持續2h。添加水(50mL)且在減壓下移除大多數有機溶劑。剩餘水性混合物接著用DCM(50mL×4)萃取且經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/0至20/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.5g，62%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯甲腈I35
4-疊氮基-2-氟苯甲腈I34(500mg，3.1mmol)、乙炔基三甲基矽烷(454mg，4.6mmol)及CuI(704mg，3.7mmol)於THF(50mL)中之混合物在50℃下在N2下加熱持續24h。添加額外乙炔基三甲基矽烷(454mg，4.6mmol)且該混合物在50℃下再加熱持續24h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至10/1)純化以生成2-氟-4-(5-(三甲基矽烷基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)苯甲腈(410mg)，其溶解於TBAF於THF(50mL)中之1M溶液中且在45℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(200mg，34%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)6-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I36
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(239mg，3.16mmol)於DMF(25mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(357mg，3.18mmol)且該混合物在RT下攪拌持續2h。接著添加2-氟-4-(1H-1,2,3-三唑-1-基)苯甲腈I35(200mg，1.06mmol)於DMF(15mL)中之溶液且在RT下繼續攪拌隔夜。添加EtOAc(100mL)且該混合物用水(×5)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(150mg，70%)。LCMS-D：Rt 0.47min；m/z 202.1[M+H]+。
xiv)6-(嘧啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I39
Figure 108121417-A0202-12-0071-397
a)2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I37
4-溴-2-氟苯甲腈(1.0g,5.0mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環)(1.3g，5.0mmol)、乙酸鉀(5.9g，20.0mmol)及Pd(dppf)Cl2(2.0g,1.0mmol)於DMSO(50mL)及1,4-二噁烷(10mL)中之混合物在105℃下在N2下加熱持續3h。該混合物用EtOAc(200mL)稀釋且用水(100mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/0至50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.1g，89%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)2-氟-4-(嘧啶-2-基)苯甲腈I38
在N2下向2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I37(464mg，2mmol)及2-溴嘧啶(736mg，4mmol)於水(40mL)、甲苯(40mL)及i-PrOH(10mL)中之溶液中添加Pd(dppf)Cl2(146mg，0.2mmol)及K3PO4．3H2O(1.33g，5.0mmol)且該混合物在85℃下加熱持續4h。該混合物用EtOAc(200mL)稀釋且用水(50mL)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(270mg，68%)。LCMS-D：Rt 2.38min；m/z 200.1[M+H]+。
c)6-(嘧啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I39
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(306mg，4.07mmol)於DMF(20mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(457mg，4.07mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。接著添加2-氟-4-(嘧啶-2-基)苯甲腈I38(270mg，1.36mmol)於DMF(10mL)中之溶液且在30℃下繼續加熱隔夜。該混合物用EtOAc(100mL)稀釋且用水(50mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(200mg，69%)。LCMS-D：Rt 0.38min；m/z 213.1[M+H]+，235.1[M+Na]+。
xv)5-溴苯并[d]異噁唑-3-胺I40
Figure 108121417-A0202-12-0072-398
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(23.7g，0.315mol)於DMF(800mL)中之溶液中添加t-BuOK(35.4g，0.315mol)且該混合物在15℃下攪拌持續2h。接著添加5-溴-2-氟苯甲腈(21.0g,0.105mol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(1.5L)稀釋且用水(400mL×4)洗滌。有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(19g，86%)。LCMS-D：Rt 2.13min；m/z 212.9/214.9[M+H]+。
xvi)4-溴苯并[d]異噁唑-3-胺I41
Figure 108121417-A0202-12-0072-399
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(11.25g，0.15mol)於DMF(220mL)中之溶液中添加t-BuOK(16.8g，0.15mol)且該混合物在25℃下攪拌持續1h。接著逐滴添加2-溴-6-氟苯甲腈(10.0g，0.05mol)於DMF(80mL)中之溶液且在 25℃下繼續攪拌隔夜。該混合物用水(200mL)稀釋且用EtOAc(400mL)萃取。有機萃取物用水(400mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈淺紅色固體狀之標題化合物(7.0g,66%)。LCMS-D：Rt 2.05min；m/z 212.9/214.9[M+H]+。
xvii)4-(三氟甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I42
Figure 108121417-A0202-12-0073-400
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(2.25g，30mmol)於DMF(80mL)中之溶液中添加t-BuOK(3.37g，30mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。接著添加2-氟-6-(三氟甲基)苯甲腈(1.89g，10mmol)於DMF(20mL)中之溶液且在30℃下繼續加熱隔夜。該混合物分配於EtOAc(300mL)與水(100mL)之間，分離各層且有機層用水(100mL×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至1/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.3g，64%)LCMS-D：Rt 2.19min；m/z 203.0[M+H]+。
xviii)5-溴-4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺I44
Figure 108121417-A0202-12-0073-401
a)3-溴-2-氯-6-氟苯甲腈I43
在0℃下在N2下向2-氯-6-氟苯甲腈(1.0g，6.4mmol)於三氟甲烷磺酸(10mL)中之溶液中添加NBS(1.1g，6.4mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物傾於冰上且用EtOAc(30mL×2)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc= 200/1至100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(705mg，47%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-溴-4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺I44
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(5.1g，67.8mmol)於DMF(150mL)中之溶液中添加t-BuOK(7.6g，6.4mmol)且該混合物在RT下攪拌持續2h。接著添加3-溴-2-氯-6-氟苯甲腈I43(5.3g,22.6mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(500mL)稀釋且用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.1g，52%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
xix)5-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I48
Figure 108121417-A0202-12-0074-402
a)3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲酸I45
在-78℃下在N2下向二異丙胺(5.4g，53.7mmol)於THF(150mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，23.4mL，58.5mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續1h。所得混合物在-78℃下逐滴添加至1-溴-4-氟-2-甲氧基苯(10.0g，48.8mmol)於THF(50mL)中之溶液中且繼續攪拌持續90min。CO2在-78℃下在攪拌下鼓泡通過該混合物持續20min，接著使其溫至RT且攪拌持續15min。該反應混合物用HCl調節至pH=1且該混合物用水稀釋且用DCM(500 mL)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1至30/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(8.0g，66%)。LCMS-D：Rt 2.12min；m/z 248.9/250.9[M+H]+。
b)3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲醯胺I46
3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲酸I45(8.0g，32.1mmol)及SOCl2(30mL)之混合物在85℃下加熱持續3h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物溶解於DCM(5mL)中且在0℃下逐滴添加至濃NH4OH(20mL)中。使該混合物溫至RT，攪拌持續20min，接著用DCM(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至1/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(6.8g，80%)。LCMS-E：Rt 2.24min；m/z 247.8/249.8[M+H]+
c)3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲腈I47
3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲醯胺146(6.8g，25.6mmol)及SOCl2(30mL)之混合物在80℃下加熱隔夜，接著在減壓下濃縮。殘餘物分配於水與EtOAc之間，分離各相且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至20/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(3.5g，55%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
d)5-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I48
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(3.4g，45.7mmol)於DMF(150mL)中之溶液中添加t-BuOK(5.1g，45.7mmol)且該混合物在RT下攪拌持續90min。接著添加3-溴-6-氟-2-甲氧基苯甲腈I47(3.5g，15.2mmol)於DMF(30mL)中之溶液且該混合物在70℃下加熱隔夜。該混合物用EtOAc(1000mL)稀釋且用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層 析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.2g，86%)。LCMS-D：Rt 2.24min；m/z 243.0/244.9[M+H]+。
xx)4-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I51
Figure 108121417-A0202-12-0076-403
a)2-(溴甲基)-6-氯苯甲腈I49
2-氯-6-甲基苯甲腈(2.0g，13.2mmol)、NBS(2.5g，13.8mmol)及AIBN(660mg，4.0mmol)於CCl4(60mL)中之混合物在85℃下在N2下加熱持續隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.7g，37%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)2-氯-6-(甲氧基甲基)苯甲腈I50
鈉金屬(115mg，4.8mmol)溶解於MeOH(5mL)及THF(5mL)中且該混合物在RT下攪拌持續20min。接著添加2-(溴甲基)-6-氯苯甲腈I49(560mg，2.4mmol)且該混合物在RT下攪拌持續5h。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(340mg，77%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.75-7.70(m,3H),4.82(s,2H),3.35(s,3H)。
c)4-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I51
在-78℃下在N2下向乙醯氧肟酸(422mg，5.6mmol)於DMF(25mL)中之溶液中添加t-BuOK(630mg，5.6mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。接著添加2-氯-6-(甲氧基甲基)苯甲腈I50(340mg，1.9mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜，接著在85℃下加熱隔夜。該混合物用水(70mL)稀釋且用EtOAc(100 mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(200mL×3)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOA=5/1至3/1)純化以生成呈淺黃色油狀之標題化合物(105mg，31%)。LCMS-D：Rt 1.57min；m/z 179.1[M+H]+。
xxi)4-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I53
Figure 108121417-A0202-12-0077-404
a)2-乙氧基-6-氟苯甲腈I52
2-氯-6-羥基苯甲腈(2.0g，14.6mmol)、K2CO3(6.04g，43.8mmol)及溴乙烷(2.38g，21.9mmol)於DMF(4mL)中之混合物在RT下在N2下攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(300mL)稀釋，用水(100mL×5)、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.6g，67%)。LCMS-E：Rt 5.24min；m/z 166.1[M+H]+。
b)4-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I53
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(2.18g，29mmol)於DMF(40mL)中之溶液中添加t-BuOK(3.26g，29mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-乙氧基-6-氟苯甲腈I52(1.6g,9.7mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用DCM(80mL)稀釋，用水(60mL×4)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(240mg，15%)。LCMS-E：Rt 5.05min；m/z 179.0[M+H]+。
xxii)5-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I54
Figure 108121417-A0202-12-0078-405
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(1.49mg，19.8mmol)於DMF(35mL)中之溶液中添加t-BuOK(2.23mg，19.8mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。接著添加2-氟-5-甲氧基苯甲腈(1.0g，6.6mmol)於DMF(5mL)中之溶液且該混合物在30℃下加熱隔夜。該混合物用水(70mL)稀釋且用EtOAc(100mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水(200mL×3)洗滌，接著經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(110mg,11%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
xxiii)5-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I57
Figure 108121417-A0202-12-0078-406
a)2-氟-5-羥基苯甲腈I55
2-氟-5-甲氧基苯甲腈(1.7g，1.2mmol)及比對．HCl(17g)之混合物在80℃下在N2下加熱持續5h，接著用DCM(40mL)稀釋且用2M HCl水溶液(8mL)及水(2×40mL)洗滌。有機層用K2CO3水溶液(50mL×2)萃取且經組合之水性萃取物用DCM(70mL×2)洗滌，接著用2M HCl水溶液調節至pH 3-4且用DCM(80mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(430mg,28%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙氧基-2-氟苯甲腈I56
向2-氟-5-羥基苯甲腈I55(430mg，3.1mmol)於DMF(15mL)中之溶液中添加K2CO3(1.3g，9.4mmol)且該混合物在RT下在N2下攪拌持續30min。 接著添加溴乙烷(512mg，4.7mmol)且在RT下繼續攪拌隔夜。該混合物用水(70mL)稀釋且用EtOAc(100mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(200mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=30/1至20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(480mg，92%)。LCMS-D：Rt 2.44min；m/z 166.0[M+H]+ 188.0[M+Na]+。
c)5-乙氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I57
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(645mg，8.7mmol)於DMF(35mL)中之溶液中添加t-BuOK(978mg，8.7mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。接著添加5-乙氧基-2-氟苯甲腈I56(480mg，2.9mmol)於DMF(5mL)中之溶液且該混合物在30℃下加熱隔夜。該混合物用水(60mL)稀釋且用EtOAc(80mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(150mL×2)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(400mg,77%)。LCMS-D：Rt 2.02min；m/z 179.1[M+H]+。
xxiv)6-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I59
Figure 108121417-A0202-12-0079-407
a)2-氯-4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯甲腈I58
3,5-二甲基-1H-吡唑(5g，0.052mol)、NaH(油中之60%分散液，2.6g，0.065mol)於DMF(50mL)中之混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氯-4-氟苯甲腈(6.74g，0.043mol)於DMF(50mL)中之溶液且在RT下繼續攪拌持續1h。反應用水淬滅且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(11.0g,92%)。LCMS-D：Rt 2.58min；m/z 232.1[M+H]+。
b)6-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I59
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(972mg，12.9mmol)於DMF(20mL)中之溶液中添加t-BuOK(1.45g，12.9mmol)且該混合物在30℃下加熱持續1h。接著添加2-氯-4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-1-基)苯甲腈I58(1g，4.3mmol)且該混合物在60℃下加熱持續5h。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(MeOH/DCM=1/20)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(150mg，15%)。LCMS-D：Rt 2.22min；m/z 229.1[M+H]+。
xxv)5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I60
Figure 108121417-A0202-12-0080-409
向乙醯氧肟酸(8.33g，0.11mol)於DMF(200mL)中之溶液中添加t-BuOK(12.5g，0.11mol)且該混合物在RT下攪拌持續1小時。接著添加2-氟-5-甲基苯甲腈(5g，0.37mol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮且殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=200/1至50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.0g，55%)。LCMS-D：Rt 1.75min，m/z 149.0[M+H]+。
xxvi)6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I62
Figure 108121417-A0202-12-0080-408
a)2-氟-4-(甲氧基甲基)苯甲腈I61
MeI(2.0g，13.2mmol)及NaH(油中之60%分散液，790mg，19.8mmol)於THF(50mL)中之混合物在0℃下攪拌持續10min，接著添加2-氟-4-(羥 基甲基)苯甲腈(2.0g，13.2mmol)且該混合物在RT下攪拌持續2h。反應用水淬滅且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=100/1至20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.7g，78%)。LCMS-D：Rt 2.01min；m/z 166.0[M+H]+ 187.9[M+Na]+。
b)6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I62
向乙醯氧肟酸(1.5g，9.1mmol)於DMF(50mL)中之溶液中添加t-BuOK(3.06g，27.2mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氟-4-(甲氧基甲基)苯甲腈I61(1.5g，9.1mmol)且該混合物在40℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=100/1至10/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1g，62%)。LCMS-D：Rt 0.95min，m/z 179.0[M+H]+。
xxvii)5-(三氟甲氧基)苯并[d]異噁唑-3-胺I63
Figure 108121417-A0202-12-0081-410
向乙醯氧肟酸(2.2g，0.029mol)於DMF(50mL)中之溶液中添加t-BuOK(3.28g，0.029mol)且該混合物在RT下攪拌持續1小時。接著添加2-氟-5-(三氟甲氧基)苯甲腈(2g，9.75mmol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.6g,75%)。LCMS-D：Rt 2.43min；m/z 219.0[M+H]+。
xxviii)5-甲基-6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I65
Figure 108121417-A0202-12-0081-411
a)2-氟-5-甲基-4-(噁唑-2-基)苯甲腈I64
在-70℃下在N2下向噁唑(90mg，1.31mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，1.1mL，2.66mmol)且該混合物攪拌持續10min。添加固體ZnCl2(380mg，2.79mmol)且使該混合物溫至RT。添加4-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈(200mg,0.93mmol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc 10/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(50mg，27%)。LCMS-D：Rt 2.51min；m/z 203.0[M+H]+。
b)5-甲基-6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I65
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(189mg，2.52mmol)於DMF(10mL)中之溶液中添加t-BuOK(377mg，3.26mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。接著添加2-氟-5-甲基-4-(噁唑-2-基)苯甲腈I64(170mg，0.84mmol)且該混合物在50℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(90mg，50%)。LCMS-D：Rt 2.10min；m/z 216.0[M+H]+。
xxix)7-溴苯并[d]異噁唑-3-胺I66
Figure 108121417-A0202-12-0082-412
在0℃下向乙醯氧肟酸(3.75g，0.05mol)於DMF(60mL)中之溶液中添加t-BuOK(5.6g，0.05mol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著逐滴添加3-溴-2-氟苯甲腈(5.0g，0.025mol)於DMF(90mL)中之溶液且在RT下繼續攪拌隔夜。該混合物用DCM(300mL)稀釋，用水(250mL×4)、鹽水洗滌，經無水 Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.0g,63%)。LCMS-D：Rt 2.09min，m/z 213.0/215.0[M+H]+。
xxx)7-(嘧啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I68
Figure 108121417-A0202-12-0083-413
a)2-氟-3-(嘧啶-2-基)苯甲腈I67
2-氟-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I23(1.5g，6.1mmol)、2-溴嘧啶(1.9g，12.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(1.3g，1.8mmol)及K3PO4(6.5g，24.2mmol)於水(60mL)、甲苯(60mL)及i-PrOH(15mL)中之混合物在85℃下在N2下加熱持續4h。該混合物用EtOAc(50mL)稀釋且用水(80mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=4/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(450mg，38%)。LCMS-E：Rt 4.82min；m/z 199.9[M+H]+。
b)7-(嘧啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I68
在0℃下在N2下向乙醯氧肟酸(243mg，3.2mmol)於DMF(15mL)中之溶液中添加t-BuOK(363mg，3.2mmol)且該混合物攪拌持續1h。接著逐滴添加2-氟-3-(嘧啶-2-基)苯甲腈I67(400mg，1.6mmol)於DMF(5mL)中之溶液且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(80mL)稀釋且用水(60mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(230mg,67%)。LCMS-D：Rt 0.80min，m/z 213.1[M+H]+。
xxxi)6-(1H-吡唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I70
Figure 108121417-A0202-12-0084-414
a)2-氟-4-(1H-吡唑-1-基)苯甲腈I69
4-溴-2-氟苯甲腈(400mg，2.0mmol)、1H-吡唑(177mg，2.6mmol)、CuI(381mg，2.0mmol)、K3PO4(849mg，4.0mmol)及(1S,2S)-N 1,N 2-二甲基環己烷-1,2-二胺(28mg，0.2mmol)於DMF(20mL)中之混合物在微波中在100℃下加熱持續1h。該混合物分配於EtOAc(200mL)與水(100mL)之間，分離各層且有機層用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(120mg，32%)。LCMS-D：Rt 2.20min，m/z 188.1[M+H]+。
b)6-(1H-吡唑-1-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I70
在0℃下向乙醯氧肟酸(215mg，2.9mmol)於DMF(25mL)中之溶液中添加t-BuOK(322mg，2.9mmol)且該混合物在30℃下加熱持續2h。接著添加2-氟-4-(1H-吡唑-1-基)苯甲腈I69(120mg，0.64mmol)且該混合物在30℃下加熱隔夜。該混合物分配於EtOAc(100mL)與水(50mL)之間，分離各層且有機層用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(72mg，57%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
xxxii)6-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I72
Figure 108121417-A0202-12-0084-415
a)2-氯-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯甲腈I71
2H-1,2,3-三唑(553mg，8.0mmol)及NaH(油中之60%分散液，192mg，4.8mmol)於DMF(20mL)中之混合物在0℃下攪拌持續30min，接著添加2-氯-4-氟苯甲腈(622mg，4.0mmol)於DMF(10mL)中之溶液。該混合物在0℃下攪拌持續2h，接著使其溫至RT且攪拌持續2h。該混合物分配於EtOAc(300mL)與水(100mL)之間，分離各層且有機層用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(200mg，24%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.31-8.28(m,3H),8.19-8.14(m2H)。
b)6-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I72
在0℃下向乙醯氧肟酸(221mg，2.9mmol)於DMF(25mL)中之溶液中添加t-BuOK(330mg，2.9mmol)且該混合物在30℃下加熱持續2h。接著添加2-氯-4-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯甲腈I71(200mg，0.98mmol)且該混合物在30℃下加熱隔夜。該混合物分配於EtOAc(100mL)與水(50mL)之間，分離各層且有機層用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(90mg，46%)。LCMS-D：Rt 1.93min，m/z 202.1[M+H]+。
xxxiii)6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I74
Figure 108121417-A0202-12-0085-416
a)2-氟-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I73
2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I37(494mg，2.0mmol)、2-溴吡啶(948mg，6.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(293mg，0.4mmol)及 K3PO4．3H2O(2.66g，10.0mmol)於H2O(40mL)、甲苯(40mL)及i-PrOH(10mL)中之混合物在85℃下在N2下加熱持續4h。該混合物分配於EtOAc(200mL)與水(30mL)之間，分離各層且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=30/1至10/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(190mg，48%)。LCMS-D：Rt 2.32min，m/z 199.1[M+H]+。
b)6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I74
在0℃下向乙醯氧肟酸(216mg，2.88mmol)於DMF(50mL)中之溶液中添加t-BuOK(323mg，2.88mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加-氟-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I73(190mg，0.96mmol)於DMF(10mL)中之溶液且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物分配於EtOAc(200mL)與水(50mL)之間，分離各層且有機層用水(50mL×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/0至100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(105mg，52%)。LCMS-D：Rt 0.83min，m/z 212.1[M+H]+。
xxxiv)6-溴苯并[d]異噁唑-3-胺I75
Figure 108121417-A0202-12-0086-417
在0℃下向乙醯氧肟酸(13.7g，182mmol)於DMF(60mL)中之溶液中添加t-BuOK(20.5g，182mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。接著添加4-溴-2-氟苯甲腈(12.2g，60.8mmol)於DMF(30mL)中之溶液且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物分配於EtOAc(500mL)與水(200mL)之間，分離各層且有機層用水(×2)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物 藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(8.1g，63%)。LCMS-D：Rt 2.34min；m/z 213.0/215.0[M+H]+。
xxxv)4-甲氧基-6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I77
Figure 108121417-A0202-12-0087-418
a)2-氟-6-甲氧基-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I76
4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(244mg，1.06mmol)、吡啶-2-基硼酸(195mg，1.59mmol)、CuCl(105mg，1.06mmol)、Pd(OAc)2(24mg，0.106mmol)、XPhos(100mg，0.212mmol)及Cs2CO3(1.38g，4.24mmol)於DMF(10.6mL)中之混合物在100℃下在20mL密封罐中在氮氣氛圍下加熱持續16h。該反應以相同規模再重複三次且四次反應用飽和NH4Cl水溶液淬滅，組合且用EtOAc(80mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(190mg，20%)。LCMS-C：Rt 2.13min；m/z 229.0[M+H]+。
b)4-甲氧基-6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I77
在0℃下向乙醯氧肟酸(178mg，2.37mmol)於無水DMF(20mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(266mg，2.37mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。接著添加2-氟-6-甲氧基-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I76(180mg，0.79mmol)且該混合物在40℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=200/1至100/1至60/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(70mg，37%)。LCMS-C：Rt 0.52min；m/z 242.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.73- 8.68(m,1H),8.14-8.09(m,1H),7.95-7.88(m,1H),7.70(d,J=1.0Hz,1H),7.46(s,1H),7.44-7.38(m,1H),6.01(s,2H),4.01(s,3H)。
xxxvi)4-甲氧基-7-苯基苯并[d]異噁唑-3-胺I80
Figure 108121417-A0202-12-0088-419
a)3-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I78
Br2(507mg，3.2mmol)於CCl4(4.0mL)中之溶液在-10℃下經30min之時期添加至2-氟-6-甲氧基苯甲腈(480mg，3.2mmol)及Fe(8.0mg，0.1mmol)於CCl4(4.0mL)中之溶液中且接著使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。該混合物分配於水與EtOAc之間，分離各層且有機層用飽和Na2SO3水溶液(×2)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(580mg，80%)。LCMS-C：Rt 2.12min；m/z 229.9[M+H]+。
b)2-氟-4-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-3-甲腈I79
在N2下向3-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I78(600mg，2.6mmol)、苯基硼酸(636mg，5.2mmol)及Na2CO3(829mg，7.8mmol)於1,4-二噁烷(40mL)及水(10mL)中之溶液中添加Pd(PPh3)4(300mg，0.26mmol)且該混合物在100℃下加熱隔夜。該混合物分配於水與EtOAc之間，分離各層且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(538mg，90%)。LCMS-C：Rt 2.43min；m/z 228.0[M+H]+。
c)4-甲氧基-7-苯基苯并[d]異噁唑-3-胺I80
在RT下向乙醯氧肟酸(533mg，7.11mmol)於無水DMF(30mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(797mg，7.11mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。 接著添加2-氟-4-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-3-甲腈I79(538mg，2.37mmol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至5/1)純化以生成呈橙色固體狀之標題化合物(413mg，72%)。LCMS-C：Rt 1.33min；m/z 209.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.84-7.79(m,2H),7.61(d,J=8.1Hz,1H),7.46(t,J=7.7Hz,2H),7.38-7.32(m,1H),6.67(d,J=8.2Hz,1H),4.00(s,3H)。
xxxvii)4-甲氧基-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I82
Figure 108121417-A0202-12-0089-420
a)2-氟-6-甲氧基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯甲腈I81
在N2下向3-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I78(720mg，3.31mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)-1H-吡唑(1.30g，6.26mmol)及Na2CO3(995mg，9.39mmol)於1,4-二噁烷(50mL)及水(10mL)中之溶液中添加Pd(PPh3)4(358mg，0.30mmol)且該混合物在100℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(485mg，63%)。LCMS-C：Rt 1.26min；m/z 232.0[M+H]+。
b)4-甲氧基-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I82
在RT下向乙醯氧肟酸(474mg，6.24mmol)於無水DMF(20mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(700mg，6.24mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。 接著添加2-氟-6-甲氧基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯甲腈I81(485mg，2.04mmol)且該混合物在60℃下加熱隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=50/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(225mg，45%)。LCMS-C：Rt 0.46min；m/z 245.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.19(s,1H),7.95(s,1H),7.69(d,J=8.2Hz,1H),6.74(d,J=8.2Hz,1H),6.00(s,2H),3.91(s,3H),3.90(s,3H)。
xxxviii)5-氯-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I83
Figure 108121417-A0202-12-0090-421
向-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9(300mg，1.4mmol)於DMF(10mL)中之溶液中添加NCS(192mg，1.4mmol)且該混合物在50℃下加熱持續2h。該混合物用EtOAc(100mL)稀釋且用H2O(40mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=7/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(190mg，54%)。LCMS-C：Rt 1.21min；m/z 242.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.32(s,1H),6.19(s,2H),4.55(s,2H),3.93(s,3H),3.41(s,3H)。
xxxix)4-甲氧基-6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I86
Figure 108121417-A0202-12-0090-422
a)2-(三丁基錫烷基)噁唑I84
在-78℃下在N2下向噁唑(500mg，7.25mmol)於THF(15mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，2.9mL，7.32mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續30min。接著添加三丁基氯錫烷(1.96mL，7.25mmol)且使該混合物溫至RT且攪拌持續1h。在減壓下移除溶劑且殘餘物溶解於己烷(50mL)中。所得沉澱物藉由過濾移除且濾液在減壓下濃縮以生成呈無色油狀之標題化合物(2.0g，77%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.20(s,1H),7.20(s,1H),1.59-1.49(m,6H),1.31-1.26(m,6H),1.16-1.10(m,6H),0.83(t,J=7.3Hz,9H)。
b)2-氟-6-甲氧基-4-(噁唑-2-基)苯甲腈I85
向4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I5(305mg,1.33mmol)於1,4-二噁烷(25mL)中之溶液中添加2-(三丁基錫烷基)噁唑I84(1.43g，3.98mmol)及Pd(PPh3)4(154mg，0.133mmol)且該混合物在90℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=8/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(370mg，96%)。LCMS-C：Rt 1.86min；m/z 218.9[M+H]+。
c)4-甲氧基-6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I86
在0℃下向乙醯氧肟酸(382mg，5.09mmol)於DMF(25mL)中之溶液中添加第三丁醇鉀(570mg，5.09mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氟-6-甲氧基-4-(噁唑-2-基)苯甲腈I85(370mg，1.7mmol)且該混合物在60℃下加熱持續2h。該混合物用EtOAc稀釋且用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(100mg,26%)。LCMS-C：Rt 0.57min；m/z 232.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.29(s,1H),7.56(s,1H),7.47-7.42(m,1H),7.27(s,1H),6.09(s,2H),4.00(s,3H)。
xl)6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I90
Figure 108121417-A0202-12-0092-423
a)4-氰基-3-氟苯甲醯氯I87
在0℃下向4-氰基-3-氟苯甲酸(1.0g,6.1mmol)於DCM(20mL)中之溶液中逐滴添加DMF(0.1mL)及草醯氯(1.86g，12.1mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.2g)，其無需進一步純化直接地用於下一步驟中。
b)4-氰基-N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-氟苯甲醯胺I88
在0℃下向4-氰基-3-氟苯甲醯氯I87(1.1g，6.06mmol)及Et3N(1.84g，18mmol)於DCM(20mL)中之溶液中添加2,2-二甲氧基乙胺(955mg，9.1mmol)且該混合物攪拌持續2h。該混合物傾入水中且用EtOAc萃取。有機萃取物用水及鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=1/1，v/v)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.2g，78%)。LCMS-D：Rt 1.55min，m/z 274.9[M+Na]+。
c)3-胺基-N-(2,2-二甲氧基乙基)苯并[d]異噁唑-6-甲醯胺I89
在0℃下向乙醯氧肟酸(448mg，5.95mmol)於DMF(30mL)中之溶液中逐份添加t-BuOK(889mg，7.92mmol)且該混合物攪拌持續1h。接著添加4-氰基-N-(2,2-二甲氧基乙基)-3-氟苯甲醯胺I88(500mg，1.98mmol)且該混合物在40℃下加熱隔夜。該混合物傾入水中且用EtOAc萃取。有機層用水及鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚 /EtOAc=1/1，v/v)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(380mg，72%)。LCMS-D：Rt 0.59min，m/z 287.9[M+Na]+。
d)6-(噁唑-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I90
3-胺基-N-(2,2-二甲氧基乙基)苯并[d]異噁唑-6-甲醯胺I89(240mg，0.9mmol)及P2O5(193mg，1.36mmol)於甲烷磺酸(10mL)中之混合物在微波照射下在150℃下加熱持續30min。該混合物傾入水中，用KOH水溶液製成鹼性且用EtOAc萃取。有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1，v/v)純化以生成呈固體狀之標題化合物(50mg，28%)。LCMS-D：Rt 1.57min，m/z 201.9[M+H]+。
xli)5-乙基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-磺醯氯I94
Figure 108121417-A0202-12-0093-424
a)5-乙基-2-甲氧基吡啶I91
在-78℃下在N2下向5-溴-2-甲氧基吡啶(10.2g，54.25mmol)於THF(200mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，24.0mL，60.0mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續1.5h。接著逐滴添加碘乙烷(12.7g，81.4mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續20min，接著溫至RT且攪拌持續30min。反應用水(5mL)淬滅且在減壓下移除溶劑。殘餘物溶解於DCM中，用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(2.8g，38%)。LCMS-D：Rt 1.80min；m/z 138.1[M+H]+。
b)5-乙基吡啶-2(1H)-酮I92
5-乙基-2-甲氧基吡啶I91(1.6g，11.66mmol)於濃HCl(30mL)中之溶液在100℃下加熱隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(800mg，56%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)5-乙基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮I93
5-乙基吡啶-2(1H)-酮I92(800mg，6.5mmol)、K2CO3(1.8g，13mmol)及碘乙烷(1.85g，13mmol)於MeOH(20mL)中之混合物在50℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物溶解於DCM(100mL)中，用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(500mg，56%)。LCMS-D：Rt 0.68min；m/z 138.1[M+H]+。
d)5-乙基-1-甲基-2-側氧基-1,2-二氫吡啶-3-磺醯氯I94
氯磺酸(6mL)及5-乙基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮I93(0.6g，4.37mmol)之混合物在150℃下在N2下加熱持續3h，接著使其冷卻至RT且傾於冰(100g)上。該混合物用DCM(50mL×3)萃取且經組合之有機萃取物用冰冷水洗滌兩次，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1至20/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(200mg，12%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.87-7.84(m,1H),7.71(s,1H),3.47(s,3H),2.39(q,J=7.6Hz,2H),1.09(t,J=7.5Hz,3H)。LCMS-D：Rt 1.58min；m/z 236.0[M+H]+。
xlii)5-溴-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯氯I95
Figure 108121417-A0202-12-0094-425
5-溴-2,3-二氫苯并呋喃(2.0g，10mmol)在-5℃下緩慢地添加至氯磺酸(6mL)中且該混合物在-5℃下攪拌持續30min。該混合物傾入冰冷水(100mL)中且用EtOAc(180mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(250mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=15/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.45g，48%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.80-7.76(m,1H),7.63-7.58(m,1H),4.91(m,2H),3.35(m,2H)。LCMS-D：Rt 2.74min；m/z 318.8/320.8[M+Na]+。
xliii)4,6-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-5-磺醯氯I98
Figure 108121417-A0202-12-0095-426
a)5,7-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-1-酮I96
3-(3,5-二甲氧基苯基)丙酸(5g，23.8mmol)及甲烷磺酸(24mL)之混合物在90℃下加熱持續10min，接著使其冷卻至RT且傾入水中。該混合物用10M KOH水溶液調節至pH 9且用EtOAc(×5)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.5g,76%)。LCMS-D：Rt 1.76min；m/z 193.1[M+H]+。
b)4,6-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚I97
5,7-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-1-酮I96(3.0g，15.6mmol)及三乙基矽烷(7.3g，62.4mmol)於TFA(20mL)中之混合物在RT下在N2下攪拌持續11h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.0g，72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.42(s,1H),6.29(d,J=2.0Hz,1H),3.81(s,3H),3.80(s,3H),2.89(t,J=7.5Hz,2H),2.80(t,J=7.3Hz,2H),2.13-2.02(m,2H)。
c)4,6-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-5-磺醯氯I98
在-70℃下向4,6-二甲氧基-2,3-二氫-1H-茚I97(1g，5.6mmol)及TMEDA(0.72g，6.17mmol)於正己烷(20mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M，2.5mL，6.17mmol)且使該混合物溫至0℃且攪拌持續2h。該混合物接著再冷卻至-65℃，用SO2氣體鼓泡持續20min，接著使其緩慢地溫至10℃。所得沉澱物藉由過濾經收集且用無水乙醚洗滌。該固體懸浮於正己烷(20mL)中，冷卻至0℃且逐滴添加SO2Cl2(0.83g，6.2mmol)。該混合物在0℃下在N2下攪拌持續1h，接著過濾。濾餅溶解於乙醚中且用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(550mg,35%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.72(s,1H),3.95(s,3H),3.94(s,3H),2.96(q,J=7.6Hz,4H),2.18-2.08(m,2H)。
xliv)2-甲氧基-5-苯氧基苯磺醯氯I100
Figure 108121417-A0202-12-0096-427
a)2-甲氧基-5-苯氧基苯磺酸I99
在0℃下向1-甲氧基-4-苯氧基苯(2g，10mmol)於DCM(15mL)中之溶液中逐滴添加氯磺酸(0.35mL)於DCM(10mL)中之溶液且該混合物在0℃下攪拌持續15min。該混合物緩慢地傾入冰冷水(100mL)中且接著在減壓下濃縮。殘餘物用DCM(100mL×2)沖洗且乾燥以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(560mg，40%)。LCMS-D：Rt 0.62min；m/z 281.0[M+H]+。
b)2-甲氧基-5-苯氧基苯磺醯氯I100
2-甲氧基-5-苯氧基苯磺酸I99(250mg，0.9mmol)及PCl5(284mg，1.3mmol)於POCl3(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續1h。該混合物 接著緩慢地添加至冰冷水(20mL)中且用DCM(15mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈黃色油狀之標題化合物(51mg,18%)。LCMS-D：Rt 2.72min；m/z 295.0[M-Cl+OCH3]+，317.0[M-Cl+OCH3+Na]+。
xlv)2,6-二甲氧基-3-(三氟甲基)苯磺醯氯I102
Figure 108121417-A0202-12-0097-428
a)2,4-二甲氧基-1-(三氟甲基)苯I101
在0℃下向(2,4-二甲氧基苯基)硼酸(3.0g，16.5mmol)、CF3SO2Na(18.0g，115.4mmol)、Cu(OAc)2(748mg，4.1mmol)、咪唑(281mg，4.1mmol)、2,4,6-三甲基吡啶(3.0g，33.0mmol)及NH4Cl(11.3g，206.0mmol)於水(16.5mL)及DCM(100mL)中之混合物中逐滴添加t-BuOOH(3.6mL，4.1mmol)且該混合物在RT下攪拌持續16h。接著分離各層且水層用DCM萃取。經組合之有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚)純化以生成呈油狀之標題化合物(900mg，27%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.42-7.36(m,1H),6.45-6.37(m,2H),3.79(s,3H),3.76(s,3H)。
b)2,6-二甲氧基-3-(三氟甲基)苯磺醯氯I102
在-78℃下在N2下向2,4-二甲氧基-1-(三氟甲基)苯I101(1.5g，7.3mmol)及TMEDA(0.93g，8.0mmol)於正己烷(30mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M，3.2mL，8.0mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。SO2氣體接著在-78℃下鼓泡通過該混合物持續20分鐘且接著使其溫至0℃且攪拌持續1h。所得沉澱物藉由過濾經收集且用己烷洗滌。濾餅懸浮於正己烷(30mL)中， 冷卻至0℃且逐滴添加SO2Cl2(1.1g，8.0mmol)。該混合物在0℃下攪拌持續1h且藉由過濾收集固體且用冷正己烷洗滌。濾餅溶解於乙醚中且用水洗滌。水相用乙醚萃取且經組合之有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(1.5g，68%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.90-7.84(m,1H),6.98-6.92(m,1H),4.09(s,3H),4.04(s,3H)。
xlvi)3-乙基-2,6-二甲氧基苯磺醯氯I106
Figure 108121417-A0202-12-0098-429
a)2,4-二甲氧基-1-乙烯基苯I103
1-溴-2,4-二甲氧基苯(4.0g，18.4mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(3.4g，22.1mmol)、Pd(dppf)Cl2．DCM(753mg，0.92mmol)及K2CO3(7.6g，55.2mmol)於1,4-二噁烷(40mL)及水(10mL)中之懸浮液在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物經矽藻土墊過濾且用EtOAc沖洗。濾液用水稀釋且用EtOAc(60mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚)純化以生成呈黃色油狀之標題化合物(2.6g，86%)。LCMS-D：Rt 2.28min；m/z 165.0[M+H]+。
b)乙基-2,4-二甲氧基苯I104
向2,4-二甲氧基-1-乙烯基苯I103(2.6g,15.8mmol)於EtOAc(50mL)中之溶液中添加10% Pd/C(300mg)且該混合物在RT下在H2氛圍下攪拌隔夜。催化劑藉由經矽藻土過濾移除且用EtOAc沖洗。濾液在減壓下濃縮以生成呈黃色油狀之標題化合物(2.0g,83%)。LCMS-D：Rt 2.39min；m/z 167.1[M+H]+。
c)3-乙基-2,6-二甲氧基苯磺酸I105
根據關於2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111所述之程序，自乙基-2,4-二甲氧基苯I104製備。發現所獲得之產物主要為3-乙基-2,6-二甲氧基苯磺酸。LCMS-D：Rt 2.36min；m/z 247.0[M+H]+。
d)3-乙基-2,6-二甲氧基苯磺醯氯I106
3-乙基-2,6-二甲氧基苯磺酸I105(300mg，1.22mmol)及亞硫醯二氯(6mL)之混合物在95℃下加熱持續3h，接著在減壓下濃縮以生成呈棕色油狀之標題化合物(322mg，100%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
xlvii)7-甲氧基喹啉-8-磺醯氯I107
Figure 108121417-A0202-12-0099-430
氯磺酸(1.8g，15.7mmol)在0℃下逐滴添加至7-甲氧基喹啉(500mg，3.14mmol)中且該混合物在100℃下加熱持續1h。使該混合物冷卻至RT，傾於冰上且接著用飽和NaHCO3水溶液中和。該混合物用EtOAc(30mL×3)萃取且經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(280mg,34%)。LCMS-D：Rt 0.27min；m/z 239.9[M-Cl+H2O]+
xlviii)6-甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-5-磺醯氯I108
Figure 108121417-A0202-12-0099-431
在-5℃下在N2下向5-甲氧基-2,3-二氫-1H-茚(3.1g，20.9mmol)於DCM(40mL)中之溶液中逐滴添加氯磺酸(6.5g，62.8mmol)且該混合物在-5℃下攪拌持續40min。反應用冰水(20mL)淬滅且該混合物用EtOAc(30mL×2)萃 取。經組合之有機萃取物用水(50mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.1g，60%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.77(d,J=1.1Hz,1H),6.98(s,1H),4.02(s,3H),2.99(t,J=7.5Hz,2H),2.91(t,J=7.4Hz,2H),2.19-2.10(m,2H)。
xlix)3-甲氧基-5,6,7,8-四氫萘-2-磺醯氯I109
Figure 108121417-A0202-12-0100-432
根據關於6-甲氧基-2,3-二氫-1H-茚-5-磺醯氯I108所述之程序，自6-甲氧基-1,2,3,4-四氫萘及氯磺酸製備且無需純化直接地用於下一步驟。
l)4-溴-2-甲氧基苯磺醯氯I110
Figure 108121417-A0202-12-0100-433
1-溴-3-甲氧基苯(15.0g，80mmol)在-5℃下緩慢地添加至氯磺酸(16mL)中且該混合物在-5℃下攪拌持續5min。該混合物傾入冰冷水(50mL)中且用EtOAc(80mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(150mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.6g，17%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
li)2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111
Figure 108121417-A0202-12-0100-434
在0℃下在N2下向1,3-二甲氧基苯(5.0g，36mmol)及TMEDA(4.6g，39.8mmol)於正己烷(100mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，16.0mL，39.8mmol)，同時保持內部反應溫度低於5℃。該混合物在0℃下攪拌持續20min，接著冷卻至-78℃且用SO2氣體鼓泡持續20min。接著使該混合物緩慢地溫至10℃且所得沉澱物藉由過濾經收集且用無水乙醚洗滌。該固體懸浮於正己烷(100mL)中，冷卻至0℃且逐滴添加SO2Cl2(4.9g，36mmol)於正己烷(20mL)中之溶液，同時保持內部溫度低於3℃。該混合物接著在0℃下攪拌持續1h且藉由過濾收集固體且用冷正己烷洗滌。該等固體接著分配於乙醚與水之間，分離各層且水層進一步用乙醚萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.0g,47%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.54(t,J=8.4Hz,1H),6.66(d,J=8.4Hz,2H),3.97(s,6H)。
lii)5-乙基-2-甲氧基苯磺醯氯I112
Figure 108121417-A0202-12-0101-435
1-乙基-4-甲氧基苯(5.0g，37mmol)在0℃下逐滴添加至氯磺酸(20mL)中且該混合物在RT下攪拌持續2h，接著傾於冰上且用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.6g，53%)。LCMS-D：Rt 2.70min；m/z 256.9[M+Na]+。
liii)2,4-二甲氧基-[1,1'-聯苯基]-3-磺醯氯I114
Figure 108121417-A0202-12-0102-436
a)2,4-二甲氧基-1,1'-聯苯I113
1-溴-2,4-二甲氧基苯(5.0g，23.0mmol)、苯基硼酸(3.4g，27.6mmol)、Pd(PPh3)4(1.3g，1.15mmol)及碳酸鉀(7.3g，69.0mmol)於1,4-二噁烷(30mL)及水(6mL)中之懸浮液在90℃下在N2下加熱持續16h。該混合物經矽藻土墊過濾且用EtOAc洗滌。濾液用水稀釋且用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至10/1)純化以生成呈黃色油狀之標題化合物(2.8g，57%)。LCMS-D：Rt 2.46min；m/z 215.0[M+H]+。
b)2,4-二甲氧基-[1,1'-聯苯基]-3-磺醯氯I114
在0℃下在N2下向2,4-二甲氧基-1,1'-聯苯I113(1.0g，4.70mmol)及TMEDA(601mg，5.20mmol)於正己烷(40mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，2.1mL，5.20mmol)，同時保持內部反應溫度低於5℃。該混合物在0℃下攪拌持續20min，接著冷卻至-70℃且用SO2氣體鼓泡持續20min。接著使該混合物緩慢地溫至10℃且所得沉澱物藉由過濾經收集且用無水乙醚洗滌。該固體懸浮於正己烷(40mL)中，冷卻至0℃且逐滴添加SO2Cl2(634mg，4.7mmol)於正己烷(5mL)中之溶液，同時保持內部溫度低於3℃。該混合物接著在0℃下攪拌持續1h且藉由過濾收集固體且用冷正己烷洗滌。該等固體接著分配於乙醚與水之間，分離各層且水層進一步用乙醚萃取。經組合之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(590mg, 40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.48-7.35(m,4H),7.34-7.21(m,2H),6.87(m,1H),3.76(s,3H),3.29(s,3H)。
liv)3,5-二甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-磺醯氯I116
Figure 108121417-A0202-12-0103-437
a)3,5-二甲氧基-1,1'-聯苯I115
1-溴-3,5-二甲氧基苯(5.0g，23.0mmol)、苯基硼酸(2.8g，23.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(0.57g，0.69mmol)及碳酸鉀(4.8g，34.6mmol)於1,4-二噁烷(80mL)及水(20mL)中之懸浮液在90℃下在N2下加熱持續4h。該混合物用水稀釋，用EtOAc萃取且經組合之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=500/1至200/1至100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(5.2g，100%)。LCMS-C：Rt 2.47min；m/z 215.0[M+H]+。
b)3,5-二甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-磺醯氯I116
根據關於2,4-二甲氧基-[1,1'-聯苯基]-3-磺醯氯I114所述之程序，自3,5-二甲氧基-1,1'-聯苯I115製備。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.62-7.55(m,2H),7.54-7.44(m,3H),6.81(s,2H),4.04(s,6H)。
lv)4-甲氧基-6-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I118
Figure 108121417-A0202-12-0103-438
a)2-氟-6-甲氧基-4-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)苯甲腈I117
在0℃下在N2下向2-氟-4-(羥基甲基)-6-甲氧基苯甲腈I7(500mg，2.76mmol)於無水THF(50mL)中之溶液中相繼添加NaH(油中之60% w/w分散 液，331mg，8.28mmol)、三氟甲烷磺酸2,2,2-三氟乙酯(1.9g，8.28mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h，接著使其溫至RT且攪拌隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。該反應使用2-氟-4-(羥基甲基)-6-甲氧基苯甲腈I7(100mg，0.55mmol)重複兩次且三個批次經組合且藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(577mg，57%)。LCMS-C：Rt 2.43min；m/z 263.9[M+H]+。
b)4-甲氧基-6-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I118
乙醯氧肟酸(86mg，1.14mmol)及t-BuOK(128mg，1.14mmol)於無水DMF(10mL)中之懸浮液在RT下攪拌持續1h。接著添加2-氟-6-甲氧基-4-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)苯甲腈I117(100mg,0.38mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。該反應使用2-氟-6-甲氧基-4-((2,2,2-三氟乙氧基)甲基)苯甲腈I117(400mg，1.52mmol)相應地按比例增加且兩個批次經組合且藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題產物(350mg，67%)。LCMS-C：Rt 2.08min；m/z 277.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 6.96(s,1H),6.68(s,1H),5.94(s,2H),4.74(s,2H),4.13(q,J=9.4Hz,2H),3.90(s,3H)。
lvi)6-(二氟甲氧基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I121
Figure 108121417-A0202-12-0104-439
a)4-(二氟甲氧基)-2,6-二氟苯甲腈I119
在-20℃下向KOH(22.0g，392mmol)於乙腈(30mL)及水(30mL)中之懸浮液中逐份添加2,6-二氟-4-羥基苯甲腈(3.1g，20.0mmol)、隨後(溴二氟甲 基)膦酸二乙酯(10.0g，37.4mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈無色油狀之標題化合物(4.0g,97%)。LCMS-C：Rt 2.11min；m/z 205.9[M+H]+。
b)4-(二氟甲氧基)-2-氟-6-甲氧基苯甲腈I120
向4-(二氟甲氧基)-2,6-二氟苯甲腈I119(2.52g,12.3mmol)於無水THF(30mL)中之溶液中逐份添加NaOMe(1.32g，24.57mmol)且該混合物在40℃下加溫隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(663mg，25%)。LCMS-C：Rt 2.11min；m/z 217.9[M+H]+。
c)6-(二氟甲氧基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺I121
乙醯氧肟酸(680mg，9.15mmol)及t-BuOK(1.03g，9.15mmol)於無水DMF(50mL)中之懸浮液在RT下攪拌持續1h。接著添加5-(二氟甲氧基)-1-氟-2-異氰基-3-甲氧基苯I120(663mg,3.05mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1至8/1)純化以生成呈淺橙色固體狀之標題化合物(186mg，26%)。LCMS-C：Rt 1.14min；m/z 231.0[M+H]+。
lviii)5-甲基-6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I124
Figure 108121417-A0202-12-0106-440
a)2-氟-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I122
4-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈(500mg，2.34mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環)(1.78g，2.34mmol)、乙酸鉀(918mg，9.36mmol)及Pd(dppf)Cl2(188mg，0.23mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物在回流下在N2下加熱持續3h。該混合物用水洗滌，用EtOAc(300mL)萃取且有機層用水(50mL×3)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成標題化合物(1.56g，88%)，該標題化合物無需進一步即用於下一步驟。LCMS-C：Rt 2.75min；m/z 262.0[M+H]+。
b)2-氟-5-甲基-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I123
在N2下向2-氟-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈I122(1.32g，5.1mmol)及2-溴吡啶(1.69g，7.65mmol)於1,4-二噁烷(50mL)及水(10mL)中之溶液中添加Pd(PPh3)4(589mg，0.5mmol)及Na2CO3(2.16g，20.4mmol)且該混合物在100℃下加熱持續3h。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=8/1至3/1)純化以生成呈紅色固體狀之標題化合物(440mg，88%)。LCMS-C：Rt 1.09min；m/z 213.0[M+H]+。
c)5-甲基-6-(吡啶-2-基)苯并[d]異噁唑-3-胺I124
乙醯氧肟酸(255mg，3.39mmol)及t-BuOK(381mg，3.39mmol)於無水DMF(30mL)中之懸浮液在0℃下攪拌持續1h。接著添加2-氟-5-甲基-4-(吡啶-2-基)苯甲腈I123(240mg，1.13mmol)且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=8/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(180mg，73%)。LCMS-C：Rt 0.50min；m/z 226.0[M+H]+。
lix)7-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I129
Figure 108121417-A0202-12-0107-441
a)3-溴-2-氟-5-甲基苯甲酸I125
在-78℃下在N2下向2-溴-1-氟-4-甲基苯(10.0g，53mmol)及二異丙胺(5.9g，58mmol)於無水THF(200mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，25.6mL，64.0mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續1h。添加過量固體CO2(乾冰)且在-78℃下繼續攪拌持續3h。該混合物用水(500mL)稀釋且用EtOAc(500mL)萃取。有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈棕色固體狀之標題化合物(12.3g，100%)，該標題化合物無需進一步純化即用於下一步驟。LCMS-C：Rt 2.03min；m/z 232.8[M+H]+。
b)3-溴-2-氟-5-甲基苯甲醯氯I126
在RT下在N2下向3-溴-2-氟-5-甲基苯甲酸I125(12.3g，53mmol)及DMF(4滴)於DCM(100mL)中之溶液中逐滴添加草醯氯(13.0g，106mmol)且該混合物攪拌持續2h。該混合物在減壓下濃縮以生成呈棕色固體狀之標題化合物(14.0g，100%)，該標題化合物無需進一步純化即用於下一步驟。
c)3-溴-2-氟-5-甲基苯甲醯胺I127
3-溴-2-氟-5-甲基苯甲醯氯I126(14.0g，53mmol)於DCM(100mL)中之溶液逐滴添加至30%氫氧化銨水溶液(100mL)中且該混合物攪拌持續2h。該混合物用EtOAc(200mL)稀釋，用水(200mL×3)、鹽水洗滌且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈棕色固體狀之標題化合物(12.0g，97%)，該標題化合物無需進一步純化即用於下一步驟。LCMS-C：Rt 1.01min；m/z 231.9[M+H]+。
d)3-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈I128
3-溴-2-氟-5-甲基苯甲醯胺I127(10.0g，43.0mmol)及亞硫醯二氯(15.4g，129mmol)於DMF(100mL)中之溶液在100℃下加熱持續3h。該混合物用EtOAc(200mL)稀釋且用水(400mL×5)、鹽水洗滌且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈棕色固體狀之標題化合物(5.0g，54%)，該標題化合物無需進一步純化即用於下一步驟。LCMS-C：Rt 2.50min；m/z 213.9[M+H]+。
e)7-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I129
乙醯氧肟酸(5.27g，70.2mmol)及t-BuOK(7.88g，70.2mmol)於無水DMF(200mL)中之懸浮液在0℃下攪拌持續1h。接著添加3-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈I128(5.0g，23.4mmol)且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。該混合物用EtOAc(300mL)稀釋，用水(600mL×4)、鹽水洗滌且有機層經Na2SO4乾燥，過濾且在 減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=10/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.8g，52%)。LCMS-C：Rt 0.50min；m/z 226.9[M+H]+。
合成實例 實例1-45(表A)：
Figure 108121417-A0202-12-0109-442
方法AA
LiHMDS(THF中之1M，445μL，0.445mmol)添加至4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.297mmol)於THF(3mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(0.445mmol)且該反應在室溫下攪拌持續16小時。揮發物降低至大約1mL，接著添加DCM(3mL)及水(3mL)且該混合物攪拌持續10分鐘。該混合物經傳遞通過相分離器，接著將有機部分裝載至1g Si-胺筒(Biotage)上且該筒用MeOH(6mL)洗滌，產物接著用HCl溶液(2M，1：1甲醇：1,4-二噁烷6mL)溶離。HCl洗滌物接著在真空中蒸發以生成所需產物。
方法AB
LiHMDS(THF中之1M，445μL，0.445mmol)添加至4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.297mmol)於THF(3mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(0.445mmol)且該反應在室溫下攪拌持續16小時。揮發物降低至大約1mL，接著添加DCM(3mL)及水(3mL)且該混合物攪拌持續10分鐘。該混合物經傳遞通過相分離器，接著將有機部分裝載至1g Si-胺筒(Biotage)上且該筒用MeOH(6mL)洗滌，產物接著用HCl溶液(2M，1：1甲醇：1,4-二噁烷6mL)溶離。HCl洗滌物接著在真空中蒸發以生成粗產物，該粗產物裝載至矽膠上且藉由矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成所需產物。
方法AC
LiHMDS(THF中之1M，445μL，0.445mmol)添加至4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.297mmol)於THF(3mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(0.445mmol)且該反應在室溫下攪拌持續16小時。揮發物降低至大約1mL，接著添加DCM(3mL)及水(3mL)且該混合物攪拌持續10分鐘。該混合物經傳遞通過相分離器，接著將有機部分裝載至1g Si-胺筒(Biotage)上且該筒用MeOH(10mL)洗滌，產物接著用甲醇HCl溶液(約1.25M，10mL)溶離。HCl洗滌物接著在真空中蒸發以生成所需產物。
方法AD
4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.298mmol)及磺醯氯(2eq.，0.595mmol)於吡啶(1.5mL)中之溶液在微波中在100℃下照射持續2小時。在冷卻時，反應混合物裝載至矽膠上且使用矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成所需產物。
方法AE
磺醯氯(2eq.，1.19mmol)及4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(100mg，0.593mmol)於吡啶(1.5mL)中之懸浮液在微波中在100℃下照射持續2小時。在冷卻時，該混合物裝載至矽膠上且使用矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃，接著0-40% MeOH/EtOAc)純化以生成所需產物。
方法AF
磺醯氯(2eq.，1.19mmol)及4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(100mg，0.593mmol)於吡啶(1mL)中之懸浮液在微波中在80℃下照射持續1小時。在冷卻時，該混合物裝載至矽膠上且使用矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成所需產物。
表A
Figure 108121417-A0202-12-0111-443
Figure 108121417-A0202-12-0112-444
Figure 108121417-A0202-12-0113-445
Figure 108121417-A0202-12-0114-446
Figure 108121417-A0202-12-0115-447
Figure 108121417-A0202-12-0116-448
實例46-71(表D)：
Figure 108121417-A0202-12-0116-449
方法BA
苯并[d]異噁唑-3-胺及磺醯氯於吡啶(1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾或DCM萃取(2×1mL)經收集且使用矽膠管柱層析法(EtOAc/石油精40-60℃梯度)或製備型質量導向HPLC純化以生成所需產物。關於反應組分及所用之量以及純化條件，參見表B。
方法BB
苯并[d]異噁唑-3-胺及磺醯氯於吡啶(0.5mL)中之混合物在室溫下攪拌持續64小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且一部分粗材料(50mg或更少)藉由製備型質量導向HPLC純化以生成所需產物。關於反應組分及所用之量，參見表B。
方法BC
苯并[d]異噁唑-3-胺及磺醯氯於吡啶(0.5mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且一部分粗材料(50mg或更少)藉由 質量導向製備型HPLC純化以生成所需產物。關於反應組分及所用之量，參見表B。
Figure 108121417-A0202-12-0117-450
Figure 108121417-A0202-12-0118-451
Figure 108121417-A0202-12-0119-452
方法CA
苯并[d]異噁唑-3-胺及磺醯氯於吡啶(1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時，此時添加第二部分苯磺醯氯且再攪拌持續64小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且藉由製備型質量導向HPLC(多達50mg粗材料)或藉由矽膠管柱層析法(0-40% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成所需產物。關於反應組分及所用之量以及純化條件，參見表C。
Figure 108121417-A0202-12-0119-453
Figure 108121417-A0202-12-0120-454
Figure 108121417-A0202-12-0120-455
Figure 108121417-A0202-12-0121-456
Figure 108121417-A0202-12-0122-457
Figure 108121417-A0202-12-0123-458
Figure 108121417-A0202-12-0124-459
Figure 108121417-A0202-12-0125-460
實例72-88(表E)：
Figure 108121417-A0202-12-0125-461
方法EA
NaH(礦物油中之60%，49mg，1.22mmol)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.305mmol)於THF(3.0mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.305mmol)且該反應攪拌持續16小時。揮發物降低至大約1mL，接著添加DCM(3mL)及水(3mL)且該混合物攪拌持續10分鐘。該混合物經傳遞通過相分離器，接著將有機部分裝載至1g Si-胺筒(Biotage)上且該筒用MeOH(6mL)洗滌，產物接著用HCl溶液(甲醇中之1.25M，6mL)溶離。HCl洗滌物在真空中蒸發以生成所需產物。
方法EB
NaH(礦物油中之60%，61mg，1.52mmol)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.305mmol)於DMF(3.0mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.305mmol)且該反應攪拌持續16小時。所得混合物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(0-100%石油精40-60℃，接著0-60% MeOH/EtOAc)純化以生成所需產物。
方法EC
NaH(礦物油中之60%，22mg，0.914mmol)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.305mmol)於DMF(5mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.305mmol)且該反應攪拌持續16小時。所得混合物用水(3mL)淬滅，在室溫下攪拌持續10分鐘，接著裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(0-100%石油精40-60℃，接著0-60% MeOH/EtOAc)純化以生成所需產物。
方法ED
NaH(礦物油中之60%，5或10eq.)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(100mg，0.609mmol)於THF(5.0mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.609mmol)且該反應攪拌持續16小時。所得混合物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(0-100%石油精40-60℃，接著0-60% MeOH/EtOAc)純化以生成所需產物。
方法EF
NaH(礦物油中之60%，122mg，3.05mmol)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(100mg，0.609mmol)於THF(5.0mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.609mmol)且該反應攪拌持續16小時。所得混合物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(0-100%石油精40-60℃，接著0-60% MeOH/EtOAc)純化且經分離固體在MeOH(1mL)中經音波處理且藉由過濾經收集以生成所需產物。
方法EG
NaH(礦物油中之60%，122mg，3.05mmol)添加至4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(100mg，0.609mmol)於THF(5.0mL)中之溶液中且在室溫下攪拌持續10分鐘。添加磺醯氯(1eq.，0.609mmol)且該反應在室溫下攪拌持續16小時。揮發物降低至大約1mL，接著小心地添加DCM(3mL)及水(3mL)且攪拌持續10分鐘。該混合物經傳遞通過相分離器，接著將有機部分裝載至1g Si-胺筒 (Biotage)上且該筒用MeOH(6mL)洗滌，產物接著用HCl溶液(2M，1：1甲醇：1,4-二噁烷，6mL)溶離。HCl洗滌物接著在真空中蒸發以生成所需產物。
方法EH
4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(48mg，0.29mmol)及NaH(礦物油中之60%，0.117mg，2.93mmol)於DMF(10mL)中之懸浮液在室溫下攪拌持續10分鐘，接著冷卻至-78℃。向此經冷卻混合物中添加磺醯氯(1.5eq.，0.439mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續1小時，接著溫至室溫且攪拌持續16小時。該反應混合物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃，接著0-40% MeOH/EtOAc)純化以生成固體，該固體懸浮於乙醚(25mL)中且經音波處理持續5分鐘。該固體藉由過濾經收集且經空氣乾燥以生成所需產物。
方法EI
4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(0.035g，0.21mmol)及磺醯氯(1.05eq.，0.22mmol)於吡啶(1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。用DCM(2×1mL)萃取且使用矽膠管柱層析法(0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化會生成所需產物。
方法EJ
向4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(1eq.)於THF(3mL)中之溶液中添加LiHMDS(THF中之1M，1.5eq.)。10分鐘攪拌之後，添加磺醯氯(1.5eq.)且使該反應攪拌持續17小時，在空氣中敞開。在真空中移除THF，接著添加DCM(3mL)及水(3mL)且攪拌持續10分鐘。分離各層之後，將有機部分裝載至1g Si-胺筒(Biotage)上。該筒用MeOH(6mL)洗滌，接著用MeOH(6mL)中之1.25M HCl汽提。HCl洗滌物接著在真空中蒸發以生成所需產物。
Figure 108121417-A0202-12-0128-462
Figure 108121417-A0202-12-0129-463
Figure 108121417-A0202-12-0130-464
實例89-147(表F) 方法FA
Figure 108121417-A0202-12-0130-465
在-78℃下在N2下向胺(0.5mmol，1.0eq.)於無水THF(10mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS(THF中之1M溶液，3eq.)且該混合物在-78℃下攪拌持續30min。接著逐滴添加磺醯氯(1.5eq.)於無水THF(2.0mL)中之溶液且使該混 合物溫至RT且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法或製備型TLC純化以生成標題化合物。上述條件之變化已注釋於表F中。
方法FB
Figure 108121417-A0202-12-0131-466
在N2下向胺(0.3mmol，1.0eq.)於吡啶(5mL)中之溶液中添加磺醯氯(2.0eq.)且該混合物在100℃下加熱隔夜。反應用1M HCl水溶液淬滅，接著添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，無水Na2SO4，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法或製備型TLC純化以生成標題化合物。上述條件之變化已注釋於表F中。
方法FC
Figure 108121417-A0202-12-0131-467
在-20℃下在N2下向胺(0.5mmol，1.0eq.)於無水THF(10mL)中之溶液中逐滴添加n-BuLi(己烷中之2.5M，1.5eq.)且該混合物在-20℃下攪拌持續1h。接著逐滴添加磺醯氯(1.5eq.)於無水THF(2.0mL)中之溶液且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。該殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=20/1)純化以生成標題化合物。
方法FD
Figure 108121417-A0202-12-0131-468
在-78℃下在N2下向胺(0.5mmol，1.0eq.)於無水THF(10mL)中之溶液中逐滴添加KHMDS(THF中之1M溶液，規定於表F中之當量)且該混合物在-78℃或0℃下攪拌持續30min至1h(規定於表F中)。接著逐滴添加磺醯氯(規 定於表F中之當量)於無水THF(2.0mL)中之溶液且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法或製備型TLC純化以生成標題化合物。
Figure 108121417-A0202-12-0132-469
Figure 108121417-A0202-12-0133-470
Figure 108121417-A0202-12-0134-471
Figure 108121417-A0202-12-0135-472
Figure 108121417-A0202-12-0136-473
Figure 108121417-A0202-12-0137-474
Figure 108121417-A0202-12-0138-475
Figure 108121417-A0202-12-0139-159
Figure 108121417-A0202-12-0140-160
Figure 108121417-A0202-12-0141-161
Figure 108121417-A0202-12-0142-162
Figure 108121417-A0202-12-0143-163
Figure 108121417-A0202-12-0144-164
Figure 108121417-A0202-12-0145-165
Figure 108121417-A0202-12-0146-166
Figure 108121417-A0202-12-0147-167
Figure 108121417-A0202-12-0148-168
Figure 108121417-A0202-12-0149-169
Figure 108121417-A0202-12-0150-170
Figure 108121417-A0202-12-0151-171
實例148：N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺148
Figure 108121417-A0202-12-0151-477
2,4-二甲氧基苯磺醯氯(0.18g，0.75mmol)及苯并[d]異噁唑-3-胺(0.10g，0.75mmol)於吡啶(1mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時。所得混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(4g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃，接著4g SiO2筒，0-35% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成兩個批次(78mg及5mg)之呈白色固體狀之標題化合物(總質量83mg，33%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.11(d,J=8.05Hz,1H),7.79(s,1H),7.70(d,J=8.81Hz,1H),7.57-7.50(m,1H),7.47-7.40(m,1H),7.37-7.29(m,1H),6.50(d,J=2.27Hz,1H),6.42(dd,J=2.25,8.81Hz,1H),3.98(s,3H),3.81(s,3H)。LCMS-B：rt 3.20min，m/z=356.8[M+Na]+,334.8[M+H]+。
實例149：N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺149
Figure 108121417-A0202-12-0152-205
2,6-二甲氧基苯-1-磺醯氯1111(0.088g，0.37mmol)及苯并[d]異噁唑-3-胺(0.050g，0.37mmol)於吡啶(1mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時，接著在120℃下照射持續2小時。該反應混合物裝載至矽石上且藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-35% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(3.9mg，3.1%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.30(s,1H),8.17(dt,J=1.04,8.15Hz,1H),7.55-7.47(m,1H),7.47-7.34(m,2H),7.34-7.28(m,1H),6.60(d,J=8.52Hz,2H),3.91(s,6H)。LCMS-B：rt 3.13min，m/z 334.8[M+H]+。
實例150：N-(5-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺150
Figure 108121417-A0202-12-0153-206
a)5-氯苯并[d]異噁唑-3-胺A1
第三丁醇鉀(793mg，7.07mmol)添加至乙醯氧肟酸(531mg，7.07mmol)於DMF(10mL)中之懸浮液中且在室溫下攪拌持續30分鐘。添加5-氯-2-氟苯甲腈(1.00g，6.43mmol)且該反應加熱至50℃持續1小時。在冷卻時，該反應混合物用飽和NaCl水溶液(15mL)稀釋，用EtOAc(3×100mL)萃取水層，組合有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中移除揮發物。殘餘物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(Biotage Isolera，40g SiO2筒，0-40% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(507mg，47%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=7.94(dd,J=2.1,0.6,1H),7.59-7.48(m,1H),6.51(s,1H)。
b)N-(5-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺150
5-乙基-2-甲氧基苯-1-磺醯氯(150mg，0.639mmol)及5-氯苯并[d]異噁唑-3-胺A1(108mg，0.639mmol)於吡啶(1.5mL)中之懸浮液在微波中在110℃下照射持續2小時。添加10M KOH水溶液(1mL)且所得混合物在室溫下攪拌持續4小時。該反應混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(53mg，23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=8.11(t,J=1.4,1H),7.71(d,J=2.3,1H),7.68(d,J=1.4, 2H),7.48(dd,J=8.5,2.3,1H),7.10(d,J=8.6,1H),3.72(s,3H),2.62(q,J=7.6,2H),1.16(t,J=7.6,3H)。LCMS-A：rt 6.637min；m/z 367.0[M+H]+。
實例151：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺151
Figure 108121417-A0202-12-0154-208
a)N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(苯磺醯基)苯磺醯胺A2
4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(50mg，0.298mmol)及苯磺醯氯(2eq.，0.595mmol)於吡啶(1.5mL)中之溶液在微波中在100℃下照射持續2小時。在冷卻時，反應混合物裝載至矽膠上且使用矽膠管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=7.97(d,J=8.6,1H),7.90-7.77(m,6H),7.71-7.64(m,7H),7.57(d,J=7.7,1H)。
b)N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺151
N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(苯磺醯基)苯磺醯胺A2(50mg，0.11mmol)於THF(10mL)及10M KOH水溶液(1mL)中之懸浮液在室溫下攪拌持續16小時。該反應混合物用水(25mL)稀釋且用EtOAc(3×50mL)萃取水層，經組合之有機物用鹽水(25mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾且在減壓下濃縮。所得膠狀物溶解於最少量之丙酮中，接著添加石油精40-60℃(50mL)且沉澱物經過濾且經空氣乾燥以生成呈褐色固體狀之標題化合物(10mg，29%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=7.89-7.80(m,2H),7.41-7.30(m,4H),7.26(dd,J=8.3,0.8,1H),7.10(dd,J=7.5,0.8,1H)。LCMS-A：rt 6.334min，m/z 307.0[M-H]-。
實例152：5-乙基-N-(7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺152
Figure 108121417-A0202-12-0155-210
a)7-氟苯并[d]異噁唑-3-胺A3
第三丁醇鉀(887mg，7.91mmol)添加至乙醯氧肟酸(594mg，7.91mmol)於DMF(10mL)中之懸浮液中且該反應在室溫下攪拌持續30分鐘。添加2,3-二氟苯甲腈(1.00g，7.19mmol)且該反應加熱至50℃持續1小時。在冷卻時，該反應混合物用飽和NaCl水溶液(15mL)稀釋，用EtOAc(3×100mL)萃取水層，組合有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中移除揮發物。所得膠狀物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(303mg，27%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ=7.33(dd,J=7.6,1.3,1H),7.30-7.26(m,1H),7.26-7.19(m,1H),4.45(s,2H)。LCMS-B：rt 3.371min，m/z 153.2[M+H]+。
b)5-乙基-N-(7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺152
7-氟苯并[d]異噁唑-3-胺A3(100mg，0.657mmol)及2-甲氧基-5-乙基磺醯氯I112(154mg，0.657mmol)於吡啶(2mL)中之溶液在微波中在100℃下照射持續2小時。在冷卻時，該反應混合物裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(127mg，55%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=7.91(dd,J=8.1,0.8,1H),7.73(d,J=2.3,1H),7.57(dd,J=11.9,8.0,1H),7.48(dd,J=8.5,2.3,1H), 7.38(td,J=8.0,4.1,1H),7.10(d,J=8.6,1H),3.73(s,3H),2.63(q,J=7.6,2H),1.16(t,J=7.6,3H)。LCMS-A：rt 6.429min，m/z 351.1[M+H]+。
實例153：N-(4-氯-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺153
Figure 108121417-A0202-12-0156-211
a)4-氯-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺A4
第三丁醇鉀(728mg，6.49mmol)添加至乙醯氧肟酸(487mg，6.49mmol)於DMF(10mL)中之懸浮液中且在室溫下攪拌持續30分鐘。添加2-氯-6-氟-3-甲基苯甲腈(1.00g，5.90mmol)且該反應加熱至50℃持續1小時。在冷卻時，該反應混合物用飽和NaCl水溶液(15mL)稀釋，用EtOAc(3×100mL)萃取水層，組合有機物，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空中移除揮發物。所得固體在丙酮(10mL)中經音波處理，接著添加石油精40-60℃(50mL)，沉澱物藉由過濾經收集且經空氣乾燥以生成呈白色固體狀之產物(524mg，49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=7.51(d,J=8.5,1H),7.38(d,J=8.5,1H),6.15(s,2H),2.38(s,3H)。LCMS-B：rt 3.562min，m/z 183.1[M+H]+。
b)N-(4-氯-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺153
4-氯-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺A4(100mg，0.548mmol)及2-甲氧基-5-乙基磺醯氯I112(129mg，0.548mmol)於吡啶(2mL)中之溶液在微波中在100℃下照射持續2小時。在冷卻時，該反應混合物添加至水中，將誒有過濾移 除沉澱物且濾液裝載至矽膠上且藉由管柱層析法(Biotage Isolera，24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(33mg，16%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ=10.48(s,1H),7.69-7.57(m,3H),7.48(dd,J=8.5,2.3,1H),7.15(d,J=8.5,1H),3.68(s,3H),2.60(q,J=7.5,2H),2.42(s,3H),1.15(t,J=7.6,3H)。LCMS-A：rt 6.665min，m/z 381.1[M+H]+。
實例154：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺154
Figure 108121417-A0202-12-0157-213
5-乙基-2-甲氧基苯磺醯氯I112(0.414g，1.77mmol)及4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(0.225g，1.34mmol)於吡啶(2.0mL)中之混合物在氮氣氛圍下在30℃下攪拌持續40小時。該反應經濃縮，接著用HCl水溶液(5%)進行音波處理持續2小時且收集所得沉澱物。該沉澱物使用矽膠管柱層析法(0-100%乙酸乙酯/石油精40-60℃)純化以生成呈兩個部分(A及B)之標題化合物，具有0.060g組合產量，12%產率。
部分A：產量0.038g。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 8.88(br s,1H),7.75(d,J=2.3Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,7.6Hz,1H),7.57(dd,J=8.5,0.6Hz,1H),7.49(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.42(dd,J=7.6,0.6Hz,1H),7.14(d,J=8.5Hz,1H),3.91(s,3H),2.66(q,J=7.6Hz,2H),1.21(t,J=7.6Hz,3H)。LCMS-B：rt 3.766min；m/z 367.1/369.1[M+H]+。
部分B：產量0.021g。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 8.88(br s,1H),7.75(d,J=2.3Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,7.6Hz,1H),7.59-7.55(m,1H),7.49(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.44-7.40(m,1H),7.14(d,J=8.5Hz,1H),3.90(s,3H),2.66 (q,J=7.6Hz,2H),1.21(t,J=7.6Hz,3H)。LCMS-B：rt 3.755min；m/z 367.1/369.1[M+H]+
實例155：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺155
Figure 108121417-A0202-12-0158-214
4-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(0.034g，0.200mmol)及2-甲氧基苯磺醯氯(0.092g，0.450mmol)於吡啶(1.0mL)及三乙胺(0.1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且使用製備型質量導向HPLC純化以生成標題化合物。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 7.94-7.91(dd,J=7.8,1.7Hz,1H),7.69-7.63(m,2H),7.60-7.57(dd,J=8.5,0.7Hz,1H),7.44-7.42(dd,J=7.6,0.7Hz,1H),7.25-7.22(m,1H),7.16-7.11(m,1H),3.94-3.94(s,3H)。HPLC-MS：rt 6.02min；m/z 339.16/341.18[M+H]+。
實例156：N-(4-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺156
Figure 108121417-A0202-12-0158-215
4-氟苯并[d]異噁唑-3-胺(0.032g，0.21mmol)及2-甲氧基苯磺醯氯(0.109g，0.529mmol)於吡啶(1.0mL)及三乙胺(0.1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且使用製備型質量導向HPLC純化以生成標題化合物。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 9.73-9.45(br s,1H),7.92-7.88(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.70-7.61(m,2H),7.44-7.40(d,J=8.5Hz,1H),7.25- 7.21(d,J=8.3Hz,1H),7.13-7.07(m,2H),3.95-3.91(s,3H)。HPLC-MS：rt 5.72min；m/z 323.16[M+H]+。
實例157：N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺157
Figure 108121417-A0202-12-0159-216
6-溴苯并[d]異噁唑-3-胺I75(0.039g，0.180mmol)及2-甲氧基苯磺醯氯(0.101g，0.490mmol)於吡啶(1.0mL)及三乙胺(0.1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30分鐘。所得沉澱物藉由過濾經收集且使用製備型質量導向HPLC純化以生成標題化合物。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 8.06-8.02(dd,J=8.6,0.5Hz,1H),7.90-7.87(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.85-7.83(dd,J=1.6,0.5Hz,1H),7.64-7.59(ddd,J=8.4,7.4,1.8Hz,1H),7.58-7.54(dd,J=8.6,1.6Hz,1H),7.21-7.18(dd,J=8.4,0.8Hz,1H),7.10-7.05(m,1H),3.88-3.85(s,3H)。HPLC-MS：rt 6.32min；m/z 383.1/385.2[M+H]+。
實例158：N-(6-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺158
Figure 108121417-A0202-12-0159-219
6-氯苯并[d]異噁唑-3-胺(0.033g，0.200mmol)及2-甲氧基苯磺醯氯(0.095g，0.460mmol)於吡啶(1.0mL)及三乙胺(0.1mL)中之混合物在室溫下攪拌持續16小時。該反應經濃縮且用5% HCl水溶液(1mL)稀釋且經音波處理持續最少30min。所得沉澱物藉由過濾經收集且使用質量導向製備型HPLC純化以生成標題化合物。1H NMR(400MHz，丙酮-d 6 )δ 8.12-8.07(dd,J=8.6,0.5Hz, 1H),7.91-7.87(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.68-7.65(dd,J=1.7,0.5Hz,1H),7.64-7.58(ddd,J=8.4,7.4,1.8Hz,1H),7.44-7.39(dd,J=8.6,1.7Hz,1H),7.21-7.17(m,1H),7.10-7.05(m,1H),3.88-3.86(s,3H)。HPLC-MS：rt 6.26min；m/z 339.16/341.18[M+H]+。
實例159：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)異喹啉-8-磺醯胺159
Figure 108121417-A0202-12-0160-220
4-氯苯并[ d ]異噁唑-3-胺(0.050g,0.30mmol)於無水THF(2mL)中之溶液在氮氣氛圍下冷卻至-78℃。小心地添加雙(三甲基矽烷基)胺化鋰(THF中之1.0M，0.59mL，0.59mmol)，接著該混合物在0℃下攪拌持續1小時。該混合物冷卻至-78℃，添加8-異喹啉磺醯氯(0.068g，0.30mmol)於無水THF(1mL)中之溶液且使該混合物溫至室溫。攪拌持續3小時之後，TLC指示僅存在起始材料。該混合物冷卻至-78℃，添加氫化鈉(礦物油中之60%分散液，0.059g，1.5mmol)且該混合物恢復至室溫且攪拌隔夜。添加水(10mL)且pH用HCl水溶液(2M)調節至約3。用DCM(3×20mL)萃取水相，組合有機物，乾燥(MgSO4)且在真空中移除溶劑。固體殘餘物藉由管柱層析法(Biotage Isolera，12g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃，接著0-40% MeOH/EtOAc)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.026g，24%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.31(s,1H),8.53(d,J=5.8Hz,1H),8.28-8.21(m,1H),8.09(d,J=8.2Hz,1H),7.92(d,J=5.7Hz,1H),7.89-7.82(m,1H),7.39(t,J=7.9Hz,1H),7.31(d,J=8.3Hz,1H),7.17(d,J=7.5Hz,1H)。LCMS-A：rt 5.43min；m/z 360.1[M+H]+。
實例160：N-(7-碘-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺160
Figure 108121417-A0202-12-0161-223
a)7-碘-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺A5
一部分4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9(0.121g，0.581mmol)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中且接著添加N-碘丁二醯亞胺(0.131g，0.581mmol)。在添加完成時，該反應混合物在50℃下加熱持續2h。在此時期結束時，該反應混合物傾於冰上且接著用EtOAc(15mL)稀釋。所得混合物用H2O(3×8mL)及鹽水(8mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且過濾。在減壓下移除揮發物且殘餘物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-35% EtOAc/石油精40-60℃，接著12g SiO2筒，0-25% EtOAc/石油精40-60℃)純化兩次以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(0.038g，20%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.78(s,1H),4.73(s,2H),4.54(s,2H),3.96(s,3H),3.50(s,3H)。LCMS-A：rt 3.26min，m/z 334.7[M+H]+。
b)N-(7-磺-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺160
7-碘-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺A5(0.024g，0.099mmol)及2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111(0.023g，0.099mmol)於吡啶(0.5mL)中之溶 液在微波中在110℃下照射持續2h。該反應混合物冷卻至室溫且濕式裝載至矽石筒上。殘餘物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-70% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.032g，53%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.38(t,J=8.5Hz,1H),6.86(s,1H),6.58(d,J=8.5Hz,2H),4.52(s,2H),4.04(s,3H),3.88(s,6H),3.51(s,3H)。LCMS-A：rt 5.86min，m/z 534.6[M+H]+。
實例161：N-(7-氯-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺161
Figure 108121417-A0202-12-0162-224
a)7-氯-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺A6
4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9(0.150g，0.720mmol)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中且接著添加N-氯丁二醯亞胺(96mg，0.72mmol)。在添加完成時，該反應混合物在50℃下加熱持續2小時。在此時期結束時，該反應混合物傾於冰上且接著用EtOAc(15mL)稀釋。所得混合物用H2O(3×8mL)及鹽水(8mL)洗滌，經Na2SO4乾燥且過濾。在減壓下移除揮發物且殘餘物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-40% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.0240g，14%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.77(s,1H),4.63(d,J=0.6Hz,2H),3.97(s,3H),3.49(s,3H)。
b)N-(7-氯-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯-磺醯胺161
7-氯-4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺A6(0.024g，0.099mmol)及2,6-二甲氧基苯磺醯氯1111(0.023g，0.099mmol)於吡啶(0.5mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時。該反應混合物冷卻至室溫且濕式裝載至矽石筒上。殘餘物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.0094g，21%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.20(s,1H),7.39(t,J=8.5Hz,1H),6.85(s,1H),6.59(d,J=8.5Hz,2H),4.61(d,J=0.6Hz,2H),4.04(s,3H),3.88(s,6H),3.49(s,3H)。LCMS-F：rt 6.39min，m/z 442.8[M+H]+。
實例162：5-甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)喹啉-8-磺醯胺162
Figure 108121417-A0202-12-0163-226
4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺19(0.0500g，0.240mmol)及5-甲氧基喹啉-8-磺醯氯(0.0619g，0.240mmol)於吡啶(0.500mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時。該反應冷卻至室溫且添加至DCM(10mL)中。用0.5M HCl(10mL)洗滌有機層且藉由相分離筒分離各層。在真空中乾燥所收集之有機層且殘餘物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-80% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(0.0110g，11%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.98(dd,J=4.3,1.8Hz,1H),8.64-8.53(m,2H),7.45(dd,J=8.5,4.3Hz,1H),6.91(d,J=8.4Hz,1H),6.87(d,J=0.9Hz,1H),6.54(s,1H),4.44(s,2H),4.05(s,3H),4.03(s,3H),3.36(s,3H)。LCMS-B：rt 3.49min，m/z 429.8[M+H]+。
實例163：2-羥基-6-甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺163
Figure 108121417-A0202-12-0164-229
4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-胺I9(0.0440g，0.211mmol)及2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111(0.0500g，0.211mmol)於吡啶(0.500mL)中之溶液在微波中在120℃下照射持續2小時，接著在120℃下照射持續1小時。該反應冷卻至室溫且添加至DCM(10mL)中。有機物用1M HCl(2×10mL)洗滌，接著經MgSO4乾燥。粗材料藉由矽膠層析法(24g SiO2筒，0-85% EtOAc/石油精40-60℃，接著12g SiO2筒，0-75% EtOAc/石油精40-60℃)純化兩次以生成標題化合物(1.5mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.62(s,1H),8.14(s,1H),7.33(t,J=8.4Hz,1H),6.99(q,J=0.9Hz,1H),6.70-6.61(m,2H),6.37(dd,J=8.3,1.0Hz,1H),4.51(s,1H),4.03(s,3H),3.87(s,3H),3.42(s,3H)。LCMS-A：rt 3.54min，m/z 394.8[M+H]+
實例164：6-甲氧基-N-(6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)吡啶-3-磺醯胺164
Figure 108121417-A0202-12-0164-227
6-甲氧基吡啶-3-磺醯氯(0.0540g，0.260mmol)及6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I4(0.050g，0.26mmol)於吡啶(0.500mL)中之溶液在微波中在120℃下照射持續2小時。該反應冷卻至室溫，接著溶解於DCM中且用1M HCl洗滌(×2)。有機層在真空中乾燥，接著濕式裝載至矽膠上且產物藉由管 柱層析法(24g SiO2筒，0-80% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(15.6mg，17%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.63(dd,J=0.71,2.62Hz,1H),7.99-7.89(m,2H),7.72(s,1H),7.55(s,1H),6.75(dd,J=0.71,8.94Hz,1H),4.54(s,2H),3.95(s,3H),3.50(s,3H),2.39(s,3H)。LCMS-F：rt 6.39min，m/z 348.1[M+H]+。
實例165：N-(6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)吡啶-3-磺醯胺165
Figure 108121417-A0202-12-0165-230
吡啶-3-磺醯氯(0.0462g，0.260mmol)及6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I4(0.050g，0.26mmol)於吡啶(0.500mL)中之溶液在微波中在120℃下照射持續2小時。該反應冷卻至室溫，接著濕式裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(24g SiO2筒，0-80% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(0.0220g，25%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.09(s,1H),8.83(s,1H),8.18(d,J=8.09Hz,1H),7.70(s,1H),7.57(s,1H),7.46(s,1H),4.54(s,2H),3.50(s,3H),2.40(s,3H)。LCMS-F：rt 6.12min m/z 334.1[M+H]+，332.0[M-H]-。
實例166：2,4-二甲氧基-N-(6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺166
Figure 108121417-A0202-12-0165-232
2,4-甲氧基苯磺醯氯(0.052g，0.22mmol)及6-(甲氧基甲基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I4(0.042g，0.22mmol)於吡啶(0.500mL)中之溶液在微波中在 110℃下照射持續2小時。所得混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(4g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.0413g，48%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.96(s,1H),7.83(s,1H),7.71(d,J=8.33Hz,1H),7.47(s,1H),6.48(d,J=1.82Hz,1H),6.42(d,J=8.36Hz,1H),4.50(s,2H),3.95(s,3H),3.80(s,3H),3.47(s,3H),2.37(s,3H)。LCMS-A：rt 5.78min，m/z=392.8[M+H]+，414.7[M+Na]+。
實例167：N-(6-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺167
Figure 108121417-A0202-12-0166-233
a)3-胺基苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯A9
向乙烷氧肟酸(0.629g，8.37mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加2-甲基丙-2-醇鉀(0.94g，8.4mmol)且該反應攪拌持續30小時。相繼添加4-氰基-3-氟苯甲酸甲酯(1.0g，5.6mmol)、DMF(2mL)且該反應在室溫下再攪拌持續2小時。該反應用乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取水層且經組合之有機層用水洗滌，乾燥，過濾且濃縮。粗材料藉由矽膠層析法(12g SiO2筒，0-50% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.55g，51%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.12(d,J=1.02Hz,1H),7.96(dd,J=1.24,8.29Hz,1H),7.59(dd,J=0.77,8.25Hz,1H),3.98(s,3H)。LCMS：rt 2.97min，m/z 193.0[M+H]+。
b)3-((2,4-二甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯A10
2,4-二甲氧基苯-1-磺醯氯(0.67g，2.8mmol)及3-胺基苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯A9(0.55g，2.8mmol)於吡啶(4mL)中之溶液在微波中在130℃下照射持續3小時。該反應冷卻至室溫，接著用DCM(40mL)稀釋。有機物用1M HCl(40mL)洗滌且水層用DCM(2×40mL)反萃取。在真空中乾燥經組合之有機層且殘餘物藉由管柱層析法(24g SiO2筒，0-35% EtOAc/石油精40-60℃)純化兩次以生成兩個批次之呈白色固體狀之標題化合物(0.369g，不純及0.0310g，2.8%產率，>95%純度)。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 8.13-8.06(m,2H),7.97(dd,J=1.25,8.47Hz,1H),7.86-7.80(m,1H),6.58(dq,J=2.29,4.60Hz,2H),3.95(s,3H),3.83(s,3H),3.79(s,3H)。LCMS：rt 3.26min，m/z 392.8[M+H]+，415.8[M+Na]+。
c)N-(6-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺167
在氮氣下向氫化鋰鋁粉末(0.0758g，2.00mmol)於無水THF(4mL)中之懸浮液中添加3-((2,4-二甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯A10(不純，0.392g，0.500mmol)於THF(8mL)中之溶液。該混合物在室溫下攪拌隔夜。該反應在氮氣下藉由逐滴添加濕THF、隨後1mL水經淬滅。在氣體逸出停止之後，添加0.5M HCl水溶液且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取水層。經組合之有機層用水、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥且在真空中移除溶劑。粗殘餘物藉由管柱層析法(24g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.191g，100%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.08(dd,J=0.78,8.30Hz,1H),7.77(s,1H),7.69(d,J=8.82Hz,1H),7.47(t,J=1.03Hz,1H),7.30(dd,J=1.34,8.29Hz,1H),6.49(d,J=2.26Hz,1H),6.42(dd,J=2.30,8.79Hz,1H),4.84(s,2H),3.98(s,3H),3.80(s,3H)。LCMS-B：rt 3.02min，m/z 364.8[M+H]+，386.8[M+Na]+。
實例168：3-((5-甲氧基喹啉)-8-磺醯胺基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲醯胺168
Figure 108121417-A0202-12-0168-234
a)3-胺基-5-甲基苯并[d]異噁唑6-甲酸甲酯A11
向乙烷氧肟酸(0.126g，1.69mmol)於DMF(2mL)中之溶液中添加2-甲基丙-2-醇鉀(0.19g，1.7mmol)且該反應攪拌持續30小時。相繼添加4-氰基-5-氟-2-甲基苯甲酸甲酯(0.22g，1.1mmol)、DMF(3mL)且該反應在40℃下再攪拌持續2小時。該反應用乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋。用乙酸乙酯萃取水層且經組合之有機層用水洗滌，乾燥，過濾且濃縮。粗材料藉由矽膠層析法(12g SiO2筒，0-50% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.11g，48%產率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 7.85(s,1H),7.64(t,J=0.79Hz,1H),3.92(s,3H),2.62(d,J=0.85Hz,3H)。LCMS：rt 3.02min，m/z 207.0[M+H]+。
b)3-((5-甲氧基喹啉)-8-磺醯胺基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯鹽酸鹽A12
5-甲氧基喹啉-8-磺醯氯(0.12g，0.48mmol)及3-胺基-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯A11(0.10g，0.48mmol)於吡啶(3mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時。該反應在微波中在110℃下再照射持續1.5小時。所得混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(4g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃)純化。該產物進一步藉由固相萃取(1g，Si-胺，3空隙體積MeOH、隨後4空隙體積甲醇HCl)純化。收集酸性溶離物且在真空中乾燥以生成呈淡黃色固體狀之標題化合物(17.7mg，7.9%產率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 9.40-9.33(m,2H),8.77(d,J=8.66Hz,1H),8.14-8.05(m,1H),7.91(s,1H),7.80-7.73 (m,1H),7.47(d,J=8.73Hz,1H),4.23(s,3H),3.91(s,3H),2.62(s,3H)。LCMS：rt 3.35min，m/z 427.8[M+H]+。
c)3-((5-甲氧基喹啉)-8-磺醯胺基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲醯胺168
在氮氣下向配備有磁性攪拌棒之15mL厚壁壓力管中添加3-((5-甲氧基喹啉)-8-磺醯胺基)-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲酸甲酯鹽酸鹽A12(15.0mg，0.0323mmol)、氨水溶液(甲醇中之2.0M，0.50mL，1.0mmol)及二氯化鈣(3.59mg，0.0323mmol)。密封該反應容器且在80℃下加熱持續3天。在空氣流下移除溶劑且添加氨水溶液(甲醇中之7.0M，0.50mL，3.5mmol)及二氯化鈣(3.6mg，0.032mmol)密封該反應容器且在80℃下加熱持續24小時。該反應冷卻至室溫且在真空中移除溶劑。化合物藉由管柱層析法(4g SiO2筒，0-100% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.00180g，13%產率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 9.01(dd,J=1.78,4.24Hz,1H),8.65(dd,J=1.78,8.52Hz,1H),8.43(d,J=8.47Hz,1H),7.73(d,J=12.46Hz,2H),7.57(dd,J=4.28,8.54Hz,1H),7.08(d,J=8.50Hz,1H),4.09(s,3H),2.57(s,3H)。LCMS-B：rt 3.15min，m/z 413.8[M+H]+。
實例169：N-(6-氰基-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺169
Figure 108121417-A0202-12-0169-236
a)3-胺基-5-甲基苯并[d]異噁唑-6-甲腈A13
向乙烷氧肟酸(0.176g，2.34mmol)於DMF(5mL)中之溶液中添加2-甲基丙-2-醇鉀(0.26g，2.3mmol)且該反應攪拌持續30小時。相繼添加2-氟-5-甲基-對苯二甲腈(0.25g，1.6mmol)、DMF(3mL)且該反應在室溫下攪拌隔夜。該反應用乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取水層且經組合之有機層用水洗滌，乾燥，過濾且濃縮。粗材料藉由矽膠層析法(12g SiO2筒，0-50% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(0.16g，59%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.72(s,1H),7.47(t,J=0.86Hz,1H),2.65(d,J=0.86Hz,3H)。LCMS-B：rt 2.90min，m/z 174.0[M+H]+。
b)N-(6-氰基-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺169
2,4-二甲氧基苯-1-磺醯氯(0.22g，0.92mmol)及3-胺基-5-甲基-1,2-苯并噁唑-6-甲腈A13(0.16g，0.92mmol)於吡啶(2.5mL)中之溶液在微波中在130℃下照射持續2小時。該反應置於室溫下持續50分鐘，接著在微波中在130℃下再照射持續2小時。該反應冷卻至室溫，接著用DCM(40mL)稀釋。有機物用1M HCl(40mL)洗滌且水層用DCM(2×40mL)反萃取兩次。經組合之有機層在真空中乾燥且殘餘物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(24g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成黃色固體。該固體溶解於溫MeOH及DCM中且藉由固相萃取(1g Si-胺，3空隙體積MeOH、隨後3空隙體積約1.25M甲醇氨)純化。在真空中乾燥酸性溶離物以生成白色固體。該固體溶解於MeOH中且在真空中移除MeOH(重複3次)。殘餘物藉由管柱層析法(24g SiO2筒，45% EtOAc/石油精40-60℃)再純化以生成兩個批次之呈灰白色固體狀之標題化合物(22及78mg，總質量100mg，29%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.09(s,1H),7.82(s,1H),7.72(s,1H),7.66(d,J=8.80Hz,1H),6.52(d,J=2.25Hz,1H),6.44(dd,J=2.24,8.85Hz,1H),3.98(s,3H),3.82(s,3H),2.67(s,3H)。LCMS-B：rt 3.30min，m/z=373.8[M+H]+，371.9[M-H]-。
實例170：2,4-二甲氧基-N-(5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺170
Figure 108121417-A0202-12-0171-239
2,4-二甲氧基苯-1-磺醯氯(0.0799g，0.337mmol)及5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺I60(0.050g，0.34mmol)於吡啶(1mL)中之溶液在微波中在110℃下照射持續2小時。所得混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(12g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(55.0mg，42%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.86-7.82(m,1H),7.72(d,J=8.81Hz,1H),7.37-7.28(m,2H),6.49(d,J=2.26Hz,1H),6.43(dd,J=2.29,8.82Hz,1H),3.96(s,3H),3.80(s,3H),2.47(s,3H)。LCMS-A：rt 5.66min，m/z 348.8[M+H]+，347.1[M-H]-。
實例171：N-(6-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺171
Figure 108121417-A0202-12-0171-237
a)6-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺A14
向乙烷氧肟酸(0.263g，3.50mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中之溶液中添加t-BuOK(393mg，3.50mmol)且該反應攪拌持續30分鐘。4-溴-2-氟-5-甲基苯甲腈(0.50g，2.3mmol)添加至該反應中，該反應在室溫下再攪拌持續2小時。該反應用乙酸乙酯(50mL)及水(50mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取水層且經組 合之有機層用水洗滌，乾燥，過濾且濃縮。粗材料藉由矽膠層析法(12g SiO2筒，0-50% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(0.30g，56%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.68(s,1H),7.37(s,1H),4.35(br s,2H),2.49(s,3H)。LCMS-B：rt 3.18min，m/z 229.8[M+H]+。
b)N-(6-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,4-二甲氧基苯磺醯胺171
2,4-二甲氧基苯磺醯氯(0.052g，0.22mmol)及6-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-胺A14(0.050g，0.22mmol)於吡啶(1mL)中之溶液在微波中在110℃下兩次照射持續2小時，接著在130℃下照射持續2小時。所得混合物裝載至矽膠上且產物藉由管柱層析法(4g SiO2筒，0-45% EtOAc/石油精40-60℃)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(102mg，定量產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.98-7.94(m,1H),7.70-7.65(m,2H),6.50(d,J=2.24Hz,1H),6.43(dd,J=2.26,8.82Hz,1H),3.97(s,3H),3.81(s,3H),2.51(d,J=0.87Hz,4H)。LCMS-A：rt 6.08min，m/z 426.9[M+H]+。
實例172：N-(6-(乙氧基甲基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺172
Figure 108121417-A0202-12-0172-241
在-78℃下在N2下向6-(乙氧基甲基)-4-甲氧基苯并[ d ]異噁唑-3-胺121(250mg，1.13mmol)於無水THF(25mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS(THF中之1M，4.5mL，4.5mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續2h。接著逐滴添加2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111(400mg，1.69mmol)於無水THF(2mL)中之溶液且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。該混合物用2M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過 濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(170mg，96%純度)。藉由製備型HPLC進一步純化會產生標題化合物(60mg，100%純度，13%產率)。LCMS-C：Rt 2.08min；m/z 423.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.53(s,1H),7.51(t,J=8.4Hz,1H),7.09(s,1H),6.78-6.76(m,3H),4.55(s,2H),3.91(s,3H),3.77(s,6H),3.54(q,J=6.8Hz,2H),1.19(t,J=6.8Hz,3H)。
實例173：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺173
Figure 108121417-A0202-12-0173-244
在-78℃下在N2下向4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[ d ]異噁唑-3-胺I9(3.0g，14.4mmol)於無水THF(200mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS(THF中之1M溶液，43.2mL，43.2mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續2h。接著逐滴添加2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111(5.1g，21.6mmo1)於無水THF(10mL)中之溶液且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。該混合物用2M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。該反應使用150mL THF中之4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[ d ]異噁唑-3-胺I9(2.0g，9.6mmol)重複且兩個批次經組合且藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=8/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.1g，42%)。LCMS-C：Rt 1.96min；m/z 409.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.58(s,1H),7.52(t,J=8.4Hz,1H),7.09(s,1H),6.78(d,J=8.4Hz,2H),6.76(s,1H),4.51(s,2H),3.91(s,3H),3.77(s,6H),3.33(s,3H)。
實例174：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-苯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺174
Figure 108121417-A0202-12-0174-245
在-78℃下在N2下向4-甲氧基-6-苯基苯并[d]異噁唑-3-胺I17(2.5g，10.4mmol)於無水THF(60mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS(THF中之1M溶液，31.0mL，31.0mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續2h。接著逐滴添加2,6-二甲氧基苯磺醯氯I111(3.7g，15.6mmol)於無水THF(20mL)中之溶液且使該混合物溫至0℃且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(50mL×2)洗滌。水層用1M HCl水溶液酸化至pH 3且用EtOAc(50mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=300/1)純化且進一步藉由管柱層析法(DCM/MeOH=200/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.5g，33%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.61(s,1H),7.80(d,J=7.2Hz,2H),7.50-7.44(m,5H),7.09(s,1H),6.80(d,J=8.8Hz,2H),4.02(s,3H),3.79(s,6H)；LCMS-C：Rt 2.46min；m/z 441.0[M+H]+。
實例175：3-氯-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺175
Figure 108121417-A0202-12-0174-248
向2,6-二甲氧基- N -(4-甲氧基-6-(甲氧基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺173(50mg，0.123mmol)於DMF(10mL)中之溶液中添加NCS(14mg，0.123mmol)且該混合物在50℃下加熱持續2h。該混合物接著用EtOAc(150mL)稀釋且用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉 由製備型TLC(DCM/MeOH=120/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(15mg，27%)。LCMS-C：Rt 2.21min；m/z 441.0[M+H]+。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 7.56(d,J=9.1Hz,1H),7.01(s,1H),6.91(d,J=9.1Hz,1H),6.76(s,1H),4.55(s,2H),3.99(s,6H),3.76(s,3H),3.41(s,3H)。
實例176：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(2-甲氧基苯基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺176
Figure 108121417-A0202-12-0175-250
N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(30mg，0.068mmol)、(2-甲氧基苯基)硼酸(21mg，0.135mmol)、Pd(PPh3)4(9mg，0.007mmol)及Na2CO3(22mg，0.203mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之混合物在100℃下在N2下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=1/2)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(10mg，31%)。LCMS-C：Rt 2.36min，m/z 471.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.60(s,1H),7.51(t,J=8.5Hz,1H),7.44-7.37(m,2H),7.22(s,1H),7.16(d,J=8.8Hz,1H),7.05(t,J=7.4Hz,1H),6.90(s,1H),6.79(d,J=8.6Hz,2H),3.94(s,3H),3.81(s,6H),3.79(s,3H)。
實例177：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(3-甲氧基苯基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺177
Figure 108121417-A0202-12-0176-251
N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)、(3-甲氧基苯基)硼酸(35mg，0.226mmol)、Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)及Na2CO3(36mg，0.339mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之混合物在100℃下在N2下加熱隔夜。使該混合物冷卻至RT，調節至pH 4-5，接著用水稀釋且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(8mg，15%)。LCMS-C：Rt 2.35min；m/z 471.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.63(s,1H),7.51(t,J=8.5Hz,1H),7.46(d,J=1.0Hz,1H),7.41(t,J=7.9Hz,1H),7.37-7.29(m,2H),7.07(s,1H),7.03-6.98(m,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.02(s,3H),3.84(s,3H),3.79(s,6H)。
實例178：5-乙基-2-二甲氧基-N-(7-苯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺178
Figure 108121417-A0202-12-0176-253
N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺137(100mg，0.24mmol)、苯基硼酸(60mg，0.48mmol)、Pd(dppf)Cl2(18mg，0.024mmol)及K3PO4．3H2O(260mg，0.97mmol)於甲苯(5mL)、異丙醇(2mL)及水(5mL)中之懸浮液在100℃下在N2下加熱持續2h。使該混合物冷卻至RT，用EtOAc稀釋且用水(25mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化 合物(55mg，55%)。LCMS-D：Rt 3.06min；m/z 409.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(s,1H),8.08-8.02(m,1H),7.89-7.78(m,3H),7.72(d,J=2.3Hz,1H),7.55-7.40(m,5H),7.13-7.08(m,1H),3.75(s,3H),2.61(q,J=7.5Hz,2H),1.15(t,J=7.5Hz,3H)。
實例179：5-乙基-2-二甲氧基-N-(6-苯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺179
Figure 108121417-A0202-12-0177-255
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺138(120mg，0.3mmol)、Pd(dppf)Cl2(45mg，0.06mmol)、苯基硼酸(150mg，1.2mmol)及K3PO4．3H2O(399mg，1.5mmol)於水(10mL)、甲苯(10mL)及異丙醇(5mL)中之混合物在85℃下在N2下加熱持續4h。使該混合物冷卻至RT，用水(200mL)稀釋且用乙醚(200mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(60mg，50%)。LCMS-D：Rt 3.10min；m/z 409.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),8.14-8.08(m,1H),7.87(s,1H),7.79-7.74(m,2H),7.73-7.67(m,2H),7.54-7.39(m,4H),7.12-7.07(m,1H),3.74(s,3H),2.61(q,J=7.5Hz,2H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例180：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯胺180
Figure 108121417-A0202-12-0177-256
向5-溴-N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯胺127(100mg，0.23mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加10% Pd/C(20mg)及KOAc (20mg，0.28mmol)且該混合物在40℃下在H2氛圍下攪拌持續2h，接著在RT下攪拌隔夜。過濾該混合物且在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(22mg，27%)。LCMS-D：Rt 2.32min；m/z 351.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.9(s,1H),7.76-7.62(m,2H),7.53-7.43(m,3H),6.96(t,J=7.7Hz,1H),4.50(t,J=8.8Hz,2H),3.22(t,J=8.8Hz,2H)。
實例181：N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2,3-二氫苯并呋喃-7-苯磺醯胺181
Figure 108121417-A0202-12-0178-260
a)N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙烯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-苯磺醯胺A15
向5-溴-N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯胺127(200mg，0.47mmol)於1,4-二噁烷(20mL)、EtOH(10mL)及H2O(10mL)中之溶液中添加K2CO3(206mg，1.86mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(140mg，0.93mmol)及Pd(PPh3)4(54mg，0.047mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物分配於DCM(50mL)、水(45mL)與2M HCl水溶液(5mL)之間。分離各層且有機層用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(120mg 70%)。LCMS-D：Rt 0.40min；m/z 377.0[M+H]+。
b)N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯胺181
向N-(4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙烯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-磺醯胺A15(120mg，0.32mmol)於MeOH(15mL)中之溶液中添加10% Pd/C(24mg)且該混合物在RT下在H2氛圍下攪拌隔夜。過濾該混合物且在減壓下濃縮濾液。 殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(33mg，27%)。LCMS-D：Rt 2.59min；m/z 379.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.8(s,1H),7.75-7.70(m,1H),7.69-7.63(m,1H),7.47-7.43(m,1H),7.37(s,1H),7.29(s,1H),4.46(t,J=8.7Hz,2H),3.18(t,J=8.7Hz,2H),2.56(q,J=7.6Hz,2H),1.13(t,J=7.6Hz,3H)。
實例182：N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-4-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺182
Figure 108121417-A0202-12-0179-261
a)N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基-4-乙烯基苯磺醯胺A16
向N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-4-溴-2-甲基苯磺醯胺141(200mg，0.52mmol)於甲苯(16mL)、水(8mL)及異丙醇(8mL)中之溶液中添加K2CO3(288mg，2.09mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(160mg，1.04mmol)及Pd(PPh3)4(60mg，0.052mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱持續2h。該混合物用水(50mL)及2M HCl水溶液(20mL)稀釋且用EtOAc(80mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(150mg，76%)。LCMS-D：Rt 2.47min；m/z 331.0[M+H]+，353.0[M+Na]+。
b)N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-4-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺182
向N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基-4-乙烯基苯磺醯胺A16(80mg，0.24mmol)於MeOH(10mL)中之溶液中添加10% Pd/C(16mg)且該混合物在25℃下在H2氛圍下攪拌隔夜。過濾該混合物且在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物 (20mg，25%)。LCMS-D：Rt 2.55min；m/z 333.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),8.07(d,J=8.0Hz,1H),7.79(d,J=8.0Hz,1H),7.66-7.55(m,2H),7.44-7.31(m,1H),7.01(s,1H),6.96(d,J=8.4Hz,1H),3.76(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.17(t,J=7.6Hz,3H)。
實例183：N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-3-甲氧基-[1,1'-聯苯基]-4-磺醯胺183
Figure 108121417-A0202-12-0180-262
向N-(苯并[d]異噁唑-3-基)-4-溴-2-甲基苯磺醯胺141(100mg，0.26mmol)於甲苯(7mL)、水(7mL)及異丙醇(2.5mL)中之溶液中添加K2CO3(144mg，10mmol)、苯基硼酸(64mg，0.52mmol)及Pd(PPh3)4(30mg，0.026mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱持續2h。該混合物用水(50mL)及2M HCl水溶液(10mL)稀釋且用EtOAc(70mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(55mg，46%)。LCMS-D：Rt2.79min；m/z 381.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),8.10(d,J=8.0Hz,1H),7.98(d,J=8.0Hz,1H),7.79-7.72(m,2H),7.66-7.58(m,2H),7.54-7.35(m,6H),3.89(s,3H)。
實例184：3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N-甲基苯并[d]異噁唑-7-甲醯胺184
Figure 108121417-A0202-12-0181-263
a)N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17
在0℃下在N2下向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺137(2.3g，5.5mmol)、(2,4-二甲氧基苯基)甲醇(1.4g，8.4mmol)及PPh3(3.6g，14.2mmol)於THF(400mL)中之溶液中添加DIAD(3.3g，16.4mmol)且該混合物歷經週末在RT下攪拌。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈淺藍色固體狀之標題化合物(1.0g，32%)。LCMS-D：Rt 3.35min；m/z 583.1/585.1[M+Na]+。
b)3-(N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸甲酯A18
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17(250mg，1.34mmol)於MeOH(5mL)及DMF(45mL) 中之溶液中添加Et3N(675mg，6.68mmol)及Pd(dppf)Cl2(98mg，0.13mmol)且該混合物在80℃下在CO氛圍下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物用EtOAc(50mL)稀釋，用水(50mL×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=4/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(210mg，31%)。LCMS-D：Rt 3.10min；m/z 541.2[M+H]+。
c)3-(N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N-甲基苯并[d]異噁唑-7-甲醯胺A19
3-(N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸甲酯A18(20mg，0.037mmol)及CH3NH2(EtOH中之33%溶液，4mL)之混合物在密封管中在100℃下加熱持續30min。在減壓下移除溶劑以生成標題化合物(20mg，100%)，該標題化合物無需進一步純化即用於下一步驟。LCMS-D：Rt 2.86min；m/z 540.2[M+H]+。
d)3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N-甲基苯并[d]異噁唑-7-磺醯胺184
3-(N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N-甲基苯并[d]異噁唑-7-甲醯胺A19(40mg，0.07mmol)及TFA(2mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(18mg，64%)。LCMS-D：Rt 2.35min；m/z 390.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),8.31-8.11(m,2H),8.00-7.90(m,1H),7.72(s,1H),7.52-7.41(m,2H),7.14-7.04(m,1H),3.73(s,3H),2.81(s,3H),2.62(q,J=8.0,7.6Hz,2H),1.15(t,J=7.9Hz,3H)。
實例185：3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N,N-二甲基苯并[d]異噁唑-7-甲醯胺185
Figure 108121417-A0202-12-0183-264
a)3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸甲酯A20
3-(N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸甲酯A18(150mg，0.28mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(80mg，74%)。LCMS-D：Rt 2.63min；m/z 391.1[M+H]+，413.1[M+Na]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),8.39-8.32(m,1H),8.19-8.12(m,1H),7.72(d,J=2.2Hz,1H),7.56-7.44(m,2H),7.12-7.05(m,1H),3.89(s,3H),3.71(s,3H),2.62(q,J=7.5Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
b)3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸A21
向3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸甲酯A20(200mg，0.5mmol)於MeOH(10mL)及THF(10mL)中之懸浮液中添加2M NaOH水溶液(1.28mL)且該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物用水稀釋且調節至pH 2-3。所得沉澱物藉由過濾經收集以生成呈灰白色固體狀之標題化合物(144mg，75%)。LCMS-D：Rt 2.43min；m/z 377.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 13.5(s,1H),11.8(s,1H),8.35-8.29(m,1H),8.15-8.09(m,1H), 7.72(d,J=2.3Hz,1H),7.53-7.44(m,2H),7.12-7.05(m,1H),3.71(s,3H),2.62(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
c)3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-碳醯氯A22
3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸A21(30mg，0.08mmol)及SOCl2(5mL)之混合物在85℃下在N2氛圍下加熱持續3h，接著在減壓下濃縮以生成標題化合物(31mg，100%)，該標題化合物無需進一步純化直接地用於下一步驟。
d)3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)-N,N-二甲基苯并[d]異噁唑-7-甲醯胺185
向3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-碳醯氯A22(31mg，0.08mmol)於THF(1mL)中之溶液中逐滴添加二甲胺(水中之40%溶液，2mL)且該混合物在RT下攪拌持續1h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物用水稀釋，調節至pH 2-3且用DCM(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(18mg，56%)。LCMS-D：Rt 2.36min；m/z 404.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),8.21-8.06(m,1H),7.78-7.56(m,2H),7.45(s,2H),7.17-6.97(m,1H),3.71(s,3H),3.01(s,3H),2.80(s,3H),2.61(m,2H),1.15(m,3H)。
實例186：5-乙基-N-(7-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺186
Figure 108121417-A0202-12-0184-266
3-(5-乙基-2-甲氧基苯基磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-7-甲酸A21(30mg，0.08mmol)及BH3．THF(THF中之1M溶液，3mL，3mmol)之混合物在RT下在N2氛圍下攪拌持續5h。該反應用水淬滅且在減壓下移除大部分THF。殘 餘物經調節至pH 2-3且用DCM(15mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈淺紅色固體狀之標題化合物(20mg，71%)。LCMS-D：Rt 2.35min；m/z 363.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.96-7.89(m,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.61-7.55(m,1H),7.46(dd,J=8.5,2.3Hz,1H),7.34(t,J=7.6Hz,1H),7.12-7.05(m,1H),5.39(t,J=5.7Hz,1H),4.70(d,J=5.4Hz,2H),3.73(s,3H),2.61(q,J=7.2Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例187：5-乙基-2-甲氧基-N-(7-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺187
Figure 108121417-A0202-12-0185-268
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺137(150mg，0.36mmol)於1,4-二噁烷(18mL)及水(4.5mL)中之懸浮液中添加K2CO3(150mg，1.09mmol)、甲基硼酸(45mg，0.73mmol)及Pd(dppf)Cl2(27mg，0.036mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱持續4h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物分配於EtOAc(50mL)、水(40mL)與1M HCl水溶液(15mL)之間。分離各層且有機層用0.5M HCl水溶液(40mL×2)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(20mg，16%)。LCMS-D：Rt 2.25min；m/z 347.1[M+H]+，369.1[M+Na]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.89-7.82(m,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.50-7.38(m,2H),7.25(t,J=7.6Hz,1H),7.12-7.04(m,1H),3.73(s,3H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),2.39(s,3H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例188：5-乙基-N-(7-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺188
Figure 108121417-A0202-12-0186-269
a)N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(7-乙烯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A23
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17(200mg，0.36mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL)中之懸浮液中添加4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(110mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱持續4h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物用EtOAc(30mL)稀釋且用水(25mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(95mg，52%)。LCMS-D：Rt 3.28min；m/z 509.0[M+H]+。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(7-乙烯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A24
N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(7-乙烯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A23(95mg，0.18mmol)及TFA(4mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(40mg，61%)。LCMS-D：Rt 2.78min；m/z 359.1[M+H]+
c)5-乙基-N-(7-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺188
向5-乙基-2-甲氧基-N-(7-乙烯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A24(35mg，0.098mmol)於EtOAc(5mL)中之溶液中添加10% Pd/C(7mg)且該混合物在RT下在H2氛圍下攪拌隔夜。過濾該混合物，濃縮濾液且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc 4/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，85%)。LCMS-D：Rt 2.83min；m/z 361.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.90-7.83(m,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.50-7.40(m,2H),7.28(t,J=7.6Hz,1H),7.12-7.05(m,1H),3.73(s,3H),2.80(q,J=7.5Hz,2H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),1.22(t,J=7.5Hz,3H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例189：N-(7-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺189
Figure 108121417-A0202-12-0187-271
a)N-(7-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A25
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二乙基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17(200mg，0.36mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之懸浮液中添加環丙基硼酸(61mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱持續4h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物用EtOAc(30mL)稀釋且用水(25mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(140mg，75%)。LCMS-D：Rt 3.34min；m/z 523.2[M+H]+。
b)N-(7-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺189
N-(7-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A25(140mg，0.27mmol)及TFA(6mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(80mg，81%)。LCMS-D：Rt 2.86min；m/z 373.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.81(dd,J=7.0,2.1Hz,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.50-7.43(m,1H),7.27-7.19(m,2H),7.12-7.06(m,1H),3.73(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),2.17-2.10(m,1H),1.15(t,J=7.5Hz,3H),1.04-0.97(m,2H),0.90-0.84(m,2H)。
實例190：N-(7-環己基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺190
Figure 108121417-A0202-12-0188-273
a)N-(7-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A26
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二乙基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17(200mg，0.36mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL)中之懸浮液中添加環己-1-烯-1-基硼酸(90mg，0.71mmol)、Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)及K2CO3(148mg，1.07mmol)且該混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物用EtOAc(30mL)稀釋且用水(25mL×3)洗滌。有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚 /EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(150mg，75%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)N-(7-(環已-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A27
N-(7-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A26(150mg，0.26mmol)及TFA(7mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(65mg，60%)。LCMS-D：Rt 3.64min；m/z 413[M+H]+。
c)N-(7-環已基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺190
N-(7-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A27(65mg，0.15mmol)及10% Pd/C(13mg)於EtOAc(10mL)中之混合物在RT下在H2氛圍下攪拌持續3h。過濾該混合物且濾液在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(40mg，61%)。LCMS-D：Rt 3.34min；m/z 415.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.87-7.82(m,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.49-7.41(m,2H),7.28(t,J=7.6Hz,1H),7.12-7.06(m,1H),3.72(s,3H),2.62(q,J=7.6Hz,2H),1.85-1.75(m,4H),1.75-1.67(m,1H),1.61-1.48(m,2H),1.44-1.20(m,4H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例191：5-乙基-2-甲氧基-N-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺191
Figure 108121417-A0202-12-0189-275
a)N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A29
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A17(150mg，0.27mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之混合物中添加K2CO3(110mg，0.80mmol)、(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸(67mg，0.33mmol)及Pd(dppf)Cl2(20mg，0.027mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用0.5M HCl水溶液(30mL)稀釋且有機溶劑大部分在減壓下經移除。剩餘水性混合物用DCM(40mL×3)萃取且經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(80mg，53%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺191
N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A29(80mg，0.14mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=80/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(50mg，86%)。LCMS-D：Rt 2.59min；m/z 413.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(s,1H),8.34(s,1H),8.06(s,1H),7.91-7.84(m,2H),7.72(d,J=2.3Hz,1H),7.50-7.43(m,1H),7.41-7.32(m,1H),7.13-7.06(m,1H),3.90(s,3H),3.74(s,3H),2.62(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.5Hz,3H)。
實例192：5-乙基-2-甲氧基-N-(7-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺192
Figure 108121417-A0202-12-0190-276
向N-(7-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺137(200mg，0.49mmol)於甲苯(16mL)、水(8mL)及異丙醇(8mL)中之懸浮液中添加嘧啶-5-基硼酸(181mg，1.46mmol)、K3PO4(518mg，1.95mmol)及Pd(dppf)Cl2(36mg，0.049mmol)且該混合物在90℃下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物經調節至pH 5-6且用EtOAc(20mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈棕色固體狀之標題化合物(18mg，9%)。LCMS-D：Rt 2.49min；m/z 411.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),9.34-9.18(m,2H),8.17(d,J=8.1Hz,1H),8.06(d,J=7.4Hz,1H),7.73(s,1H),7.62-7.42(m,3H),7.17-7.06(m,1H),3.75(s,3H),2.62(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例193：5-乙基-2-甲氧基-N-(6-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺193
Figure 108121417-A0202-12-0191-278
a)N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A30
在0℃下在N2下向N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺138(4.1g，10.0mmol)、(2,4-二甲氧基苯基)甲醇(2.5g，15.0mmol)及PPh3(6.6g，25.0mmol)於THF(100mL)中之溶液中添加DIAD(4.0g，20.0mmol)且 該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=50/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.0g，71%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(6-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺應胺A31
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A30(120mg，0.214mmol)、CH3B(OH)2(64mg，1.07mmol)、Pd(dppf)Cl2(31mg，0.428mmol)及K2CO3(148mg，1.07mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(72mg，68%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)5-乙基-2-甲氧基-N-(6-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺193
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(6-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A31(72mg，0.145mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(45mg，90%)。LCMS-D：Rt 2.76min；m/z 347.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.6(s,1H),7.94-7.87(m,1H),7.68(d,J=2.3Hz,1H),7.49-7.42(m,1H),7.39(s,1H),7.23-7.16(m,1H),7.13-7.05(m,1H),3.72(s,3H),2.60(q,J=7.5Hz,2H),2.43(s,3H),1.14(t,J=7.5Hz,3H)。
實例194：5-乙基-N-(6-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺194
Figure 108121417-A0202-12-0192-279
a)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(6-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A32
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A30(200mg，0.356mmol)、乙基硼酸(132mg，1.78mmol)、Pd(dppf)Cl2(52mg，0.071mmol)及K2CO3(246mg，1.78mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物分配於DCM(200mL)與水(50mL)之間。分離各層且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(120mg，67%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙基-N-(6-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺194
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(6-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A32(120mg，0.24mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌隔夜，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(80mg，94%)。LCMS-D：Rt 2.84min；m/z 361.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.6(s,1H),7.97-7.90(m,1H),7.69(d,J=2.3Hz,1H),7.49-7.37(m,2H),7.26-7.19(m,1H),7.11-7.04(m,1H),3.72(s,3H),2.73(q,J=7.6Hz,2H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),1.20(t,J=7.6Hz,3H),1.14(t,J=7.6Hz,3H)。
實例195：N-(6-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺195
Figure 108121417-A0202-12-0193-281
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺138(206mg，0.5mmol)、環丙基硼酸(215mg，2.5mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)及K2CO3(345mg，2.5mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(80mg，43%)。LCMS-D：Rt 2.86min；m/z 373.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.6(s,1H),7.91-7.85(m,1H),7.68(d,J=2.3Hz,1H),7.48-7.42(m,1H),7.27(s,1H),7.12-7.04(m,2H),3.72(s,3H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),2.10-2.00(m,1H),1.14(t,J=7.5Hz,3H),1.07-0.99(m,2H),0.83-0.75(m,2H)。
實例196：5-乙基-2-甲氧基-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺196
Figure 108121417-A0202-12-0194-282
a)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A33
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A30(120mg，0.214mmol)、(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸(54mg，0.428mmol)、Pd(dppf)Cl2(31mg，0.043mmol)及K2CO3(148mg，1.07mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物分配於DCM(150mL)與水(50mL)之間。分離各層且有機層用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法 (石油醚/EtOAc=50/1至5/1)純化以生成呈棕色固體狀之標題化合物(90mg，75%)。LCMS-D：Rt 3.05min；m/z 563.0[M+H]+。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺196
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A33(90mg，0.16mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌隔夜，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=50/1至5/1)純化以生成呈棕色固體狀之標題化合物(30mg，46%)。LCMS-D：Rt 2.57min；m/z 413.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.6(s,1H),8.29(s,1H),8.06-7.95(m,2H),7.78(s,1H),7.70(d,J=2.3Hz,1H),7.64-7.56(m,1H),7.50-7.42(m,1H),7.13-7.05(m,1H),3.87(s,3H),3.71(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),1.15(t,J=7.5Hz,3H)。
實例197：5-乙基-2-甲氧基-N-(6-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺197
Figure 108121417-A0202-12-0195-283
N-(6-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺138(100mg，0.24mmol)、嘧啶-5-基硼酸(45mg，0.36mmol)、Pd(PPh3)4(28mg，0.024mmol)及K2CO3(166mg，1.2mmol)於甲苯(8mL)、水(8mL)及異丙醇(2mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。添加2M NaOH水溶液(15mL)且該混合物在RT下攪拌持續20min。該混合物用EtOAc(20mL×2)洗滌，接著用濃HCl調節pH 2且用DCM(50mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(DCM/MeOH=30/1) 純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(15mg，15%)。LCMS-D：Rt 2.97min；m/z 411.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(s,1H),9.24(s,3H),8.21-8.15(m,1H),8.11(s,1H),7.85-7.78(m,1H),7.72(d,J=2.3Hz,1H),7.49-7.42(m,1H),7.13-7.05(m,1H),3.73(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例198：5-乙基-2-甲氧基-N-(4-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺198
Figure 108121417-A0202-12-0196-285
a)N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34
在0℃下在N2下向N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺129(2.1g，5.1mmol)、(2,4-二甲氧基苯基)甲醇(1.3g，7.7mmo1)及PPh3(3.35g，12.8mmol)於THF(200mL)中之溶液中添加DIAD(3.1g，15.3mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h，接著使其溫至RT且攪拌隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(1.2g，42%)。LCMS-D：Rt 3.40min；m/z 583.0[M+H]+。
b)N((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A35
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、甲基硼酸(43mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及水(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。該混合物經調節至pH 2-3且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水(10mL)稀釋且用DCM(25mL×3)萃取。經組合之有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EA=5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(125mg，71%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)5-乙基-2-甲氧基-N-(4-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺198
N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A35(125mg，0.26mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著用DCM(100mL)稀釋，用水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(85mg，92%)。LCMS-D：Rt 2.69min m/z 347.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.6(s,1H),7.58-7.56(m,1H),7.52-7.46(m,3H),7.18-7.14(m,2H),3.73(s,3H),2.62-2.56(m,5H),1.14(t,J=7.6Hz,3H)
實例199：5-乙基-N-(4-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺199
Figure 108121417-A0202-12-0197-287
a)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(4-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A36
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、乙基硼酸(53mg，0.71mmol)、 K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。該混合物經調節至pH 2-3且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水(15mL)稀釋且用DCM(20mL×3)萃取。經組合之有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(120mg，66%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙基-N-(4-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺199
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(4-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A36(120mg，0.23mmol)及TFA(3mL)之混合物在室溫下在N2下攪拌持續3h，接著用DCM(100mL)稀釋，用水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(75mg，89%)。LCMS-D：Rt 2.80min 361.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.5(s,1H),7.60-7.49(m,4H),7.22-7.18(m,2H),3.81(s,3H),8.09(q,J=7.6Hz,2H),2.59(q,J=7.6Hz,2H),1.25(t,J=7.6Hz,3H),1.14(t,J=7.6Hz,3H)。
實例200：N-(4-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺200
Figure 108121417-A0202-12-0198-288
a)N-(4-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A37
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、環丙基硼酸(61mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)及H2O(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。該混合物經調節至pH 2-3且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水(15mL)稀釋且用DCM(20mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(120mg，66%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)N-(4-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺200
N-(4-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A37(130mg，0.25mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下在N2下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(85mg，92%)。LCMS-D：Rt 2.81min，373.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.6(s,1H),7.58-7.57(d,J=2.0Hz,1H),7.53-7.42(m,3H),7.18-7.16(m,1H),6.86-6.84(m,1H),3.74(s,3H),2.72(m,1H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),1.14(t,J=7.6Hz,3H),1.02-0.98(m,2H),0.82-0.78(m,2H)。
實例201：N-(4-環已基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺201
Figure 108121417-A0202-12-0199-290
a)N-(4-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A38
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、環己-1-烯-1-基硼酸(90mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。在減壓下移除大部分溶劑，殘餘物用水(30mL)稀釋，調節至pH 1-2且用DCM(35mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(150mg，75%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)N-(4-(環已-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A39
N-(4-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A38(150mg，0.27mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下在N2下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(80mg，73%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)N-(4-環己基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺201
N-(4-(環己-1-烯-1-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A39(80mg，0.19mmol)及10% Pd/C(16mg)於EtOAc(10mL)中之混合物在RT下在H2氛圍下攪拌持續3h。過濾該混合物且濾液在減壓下濃縮以生成呈白色固體狀之標題化合物(75mg，94%)。LCMS-D：Rt 3.24min，415.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.5(s,1H),7.58-7.48(m,4H),7.26(d,J=7.2Hz,1H),7.19(d,J=8.8Hz,1H),3.80(s,3H),3.62-3.56(m,1H),2.59(q,J=7.6Hz,2H),1.91-1.71(m,5H),1.45-1.23(m,5H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例202：5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺202
Figure 108121417-A0202-12-0201-291
a)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A40
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸(90mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。在減壓下移除大部分溶劑，殘餘物用水(30mL)稀釋，調節至pH 1-2且用DCM(35mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(105mg，53%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺202
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A40(105mg，0.19mmol)及TFA(2mL)之混合物在RT下在N2下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=80/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(60mg，79%)。LCMS-D：Rt 2.587min，m/z 413.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.2 (s,1H),8.12(s,1H),7.90(s,1H),7.66-7.45(m,4H),7.39(d,J=7.2Hz,1H),7.13(d,J=8.4Hz,1H),3.88(s,3H),3.75(s,3H),2.58(q,J=7.6Hz,2H),1.15(t,J=7.6Hz,3H)。
實例203：5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺203
Figure 108121417-A0202-12-0202-292
a)N-(2.4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A41
N-(4-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-((2,4-二甲氧基苯甲基)氧基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A34(200mg，0.36mmol)、嘧啶-5-基硼酸(43mg，0.71mmol)、K2CO3(148mg，1.07mmol)及Pd(dppf)Cl2(26mg，0.036mmol)於1,4-二噁烷(15mL)及H2O(3mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱持續4h。在減壓下移除大部分溶劑，殘餘物用水(30mL)稀釋，調節至pH 1-2且用DCM(35mL×3)萃取。經組合之有機萃取物經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=60/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(95mg，47%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺203
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(4-(嘧啶-5-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A41(95mg，0.17mmol)及TFA(2mL)之混合物在RT下在N2下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈紅色固體狀之標題化合物(45mg，65%)。LCMS-D：Rt 2.50 min，m/z 411.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.5(s,1H),9.24(s,1H),8.97(s,2H),7.86-7.79(m,2H),7.53-7.38(m,3H),7.13-7.11(m,1H),3.75(s,3H),2.55(t,J=7.6Hz,2H),1.11(t,J=7.6Hz,3H)。
實例204：N-(5-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-3-甲氧基-5,6,7,8-四氫萘-2-磺醯胺204
Figure 108121417-A0202-12-0203-294
N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-3-甲氧基-5,6,7,8-四氫萘-2-磺醯胺113(219mg，0.5mmol)、乙基硼酸(185mg，2.5mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)及K2CO3(345mg，2.5mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(20mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物接著經調節至pH 1且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水(50mL)稀釋且用DCM(100mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=10/1至2/1)、隨後製備型TLC(石油醚/EtOAc=1/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(52mg，27%)。LCMS-D：Rt 3.06min，m/z 387.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.4(s,1H),7.83(s,1H),7.54(s,1H),7.51-7.43(m,2H),6.84(s,1H),3.71(s,3H),2.77-2.65(m,6H),1.75-1.66(m,4H),1.24(t,J=7.6Hz,3H)。
實例205：N-(5-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-3-甲氧基-5,6,7,8-四氫萘-2-磺醯胺205
Figure 108121417-A0202-12-0203-293
N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-3-甲氧基-5,6,7,8-四氫萘-2-磺醯胺113(219mg，0.5mmol)、環丙基硼酸(215mg，2.5mmol)、Pd(dppf)Cl2(73mg，0.1mmol)及K2CO3(345mg，2.5mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物接著用濃HCl調節至pH 1且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水(30mL)稀釋且用DCM(100mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=10/1至2/1)、隨後製備型TLC(石油醚/EtOAc=1/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(50mg，25%)。LCMS-D：Rt 3.07min，m/z 399.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.4(s,1H),7.68(s,1H),7.54(s,1H),7.47-7.43(m,1H),7.40-7.35(m,1H),6.84(s,1H),3.71(s,3H),2.77-2.65(m,4H),2.08-2.00(m,1H),1.74-1.66(m,4H),1.04-0.96(m,2H),0.68-0.61(m,2H)。
實例206：N-(4-氯-5-乙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺206
Figure 108121417-A0202-12-0204-295
N-(5-溴-4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺128(200mg，0.449mmol)、乙基硼酸(166mg，2.244mmol)、Pd(dppf)Cl2(66mg，0.09mmol)及K2CO3(310mg，2.244mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物接著用1M HCl水溶液調節至pH 2且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水稀釋且用DCM萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=50/1至2/1)、隨後製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化以生成呈白色 固體狀之標題化合物(15mg，9%)。LCMS-D：Rt 2.89min，m/z 395.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.4(s,1H),7.64(s,2H),7.61-7.57(m,1H),7.49-7.44(m,1H),7.15-7.10(m,1H),3.66(s,3H),2.80(q,J=7.6Hz,2H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),1.21-1.11(m,6H)。
實例207：N-(4-氯-5-環丙基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺207
Figure 108121417-A0202-12-0205-296
N-(5-溴-4-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺128(200mg，0.449mmol)、環丙基硼酸(193mg，2.244mmol)、Pd(dppf)Cl2(66mg，0.09mmol)及K2CO3(310mg，2.244mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物接著用1M HCl水溶液調節至pH 2且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水稀釋且用DCM萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)、隨後製備型TLC(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(20mg，11%)。LCMS-D：Rt 2.91min，m/z 407.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.4(s,1H),7.64-7.56(m,2H),7.52-7.44(m,1H),7.34-7.27(m,1H),7.17-7.11(m,1H),3.67(s,3H),2.60(q,J=7.6Hz,2H),2.27-2.17(m,1H),1.15(t,J=7.6Hz,3H),1.08-1.00(m,2H),0.78-0.70(m,2H)。
實例208：N-(5-環丙基-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺208
Figure 108121417-A0202-12-0206-297
N-(5-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醚胺108(100mg，0.227mmol)、環丙基硼酸(97mg，1.133mmol)、Pd(dppf)Cl2(33mg，0.046mmol)及K2CO3(156mg，1.133mmol)於1,4-二噁烷(20mL)及水(4mL)中之混合物在90℃下在N2下加熱隔夜。該混合物接著用1M HCl水溶液調節至pH 2且在減壓下移除大部分溶劑。殘餘物用水稀釋且用DCM萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠層析法(石油醚/EtOAc=50/1至3/1)、隨後製備型TLC(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，33%)。LCMS-D：Rt 2.87min；m/z 403.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.4(s,1H),7.63(d,J=2.3Hz,1H),7.50-7.45(m,1H),7.32-7.26(m,1H),7.19-7.12(m,2H),3.92(s,3H),3.81(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),2.22-2.15(m,1H),1.15(t,J=7.5Hz,3H),1.03-0.94(m,2H),0.76-0.64(m,2H)。
實例209、210及211
Figure 108121417-A0202-12-0207-298
a)第三丁基((3,5-二甲氧基苯甲基)氧基)二甲基矽烷A42
在RT下向(3,5-二甲氧基苯基)甲醇(10g，0.059mol)及咪唑(6.07g，0.089mol)於DMF(100mL)中之溶液中添加TBSCl(9.86g，0.065mol)且該混合物攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物用水洗滌，在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至10/1)純化以生成呈無色油狀之標題化合物(13g，77%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)4-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基苯亞磺酸鋰A43
在-70℃下向第三丁基((3,5-二甲氧基苯甲基)氧基)二甲基矽烷A42(5g，0.018mol)及TMEDA(2.26g，0.020mol)於正己烷(100mL)中之溶液中添加n-BuLi(己烷中之2.5M溶液，7.8mL，0.020mol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。該混合物接著再冷卻至-60℃且用SO2氧體鼓泡持續30min。所得沉澱物藉由過濾經收集且用正己烷洗滌以生成標題化合物(6.2g，100%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基苯磺醯氯A44
在0℃下向4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基苯亞磺酸鋰A43(6.2g，0.018mol)於正己烷(100mL)中之混合物中添加SO2Cl2(2.39g，0.018mol)且該混合物在0℃下攪拌持續1h。藉由過濾收集固體，用正己烷洗滌，接著溶解於EtOAc中且用水洗滌。有機層在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1至5/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(2.4g，36%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
d)4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A45
在-78℃下向4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(819mg，4.99mmol)於THF(20mL)中之溶液中添加LiHMDS(THF中之1M溶液，5.98mL，5.98mmol)且該混合物在0℃下攪拌持續30min，接著冷卻至-60℃。添加4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基苯磺醯氯A44(1.9g，4.99mmol)於THF(20mL)中之溶液且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 5且用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至20/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(170mg，7%)。LCMS-D：Rt 3.33min，m/z 509.0[M+H]+。
e)4-(羥基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺209
向4-(((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A45(170mg，0.334mmol)於THF(10mL)中之溶液中添加TBAF(175mg，0.668mmol)且該混合物在RT下攪拌持續3h。反應用1M HCl水溶液淬滅且該混合物用EtOAc萃取。有機萃取物在減壓下濃縮且殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=100/1至50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，23%)。LCMS-D：Rt 1.93min，m/z 394.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.40(s,1H),7.55(t,J=8.2Hz,1H),7.18-7.12(m,1H), 6.89-6.82(m,1H),6.72(s,2H),5.39(t,J=5.8Hz,1H),4.49(d,J=5.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.77(s,6H)。
f)4-(溴甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A46
4-(羥基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺209(1.0g，2.53mmol)、CBr4(2.52g，7.60mmol)及PPh3(1.99g，7.60mmol)於DCM(20mL)中之溶液在RT下攪拌隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=50/1至10：1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(600mg，52%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
g)4-(疊氮基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A47
4-(溴甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A46(200mg，0.44mmol)及NaN3(85mg，1.31mmol)於DMF(5mL)中之溶液在50℃下加熱持續3h。該混合物傾入水中且藉由過濾收集沉澱物。濾餅用水洗滌且經乾燥以生成呈灰色固體狀之標題化合物(100mg，54%)。LCMS-D：Rt 2.45min，m/z 420.1[M+H]+。
h)4-(胺基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并/d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺鹽酸鹽210
4-(疊氮基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A47(300mg，0.716mmol)及PPh3(207mg，0.788mmol)於THF(8mL)及EtOH(6mL)中之溶液在RT下攪拌持續3h。添加水(2mL)及濃HCl(2mL)且該混合物在55℃下加熱持續3h。在減壓下移除大多數有機溶劑且水性殘餘物用DCM洗滌。水相在減壓下濃縮以生成呈黃色固體狀之標題化合物(150mg,53%)。LCMS-D：Rt 0.38min，m/z 394.1[M+H]+。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ 7.54(t,J=8.2Hz,1H),7.06-7.01(m,1H),6.87(s,2H),6.86-6.82(m,1H),4.12(s,2H),4.07(s,3H),3.89(s,6H)。
i)N-(3,5-二甲氧基-4-(N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)胺磺醯基)苯甲基)乙醯胺211
4-(胺基甲基)-2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺鹽酸鹽210(130mg，0.33mmol)、NaHCO3(83mg，0.99mmol)及乙酸酐(101mg，0.99mmol)於THF(5mL)中之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(50mg，34%)。LCMS-D：Rt 1.93min，m/z 436.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.47(s,1H),8.36(t,J=5.8Hz,1H),7.55(m,1H),7.18-7.12(m,1H),6.89-6.81(m,1H),6.66(s,2H),4.24(d,J=5.9Hz,2H),3.94(s,3H),3.76(s,6H),1.88(s,3H)。
實例212：2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212
Figure 108121417-A0202-12-0210-299
a)2,6-二氟-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A48
在-78℃下在氮氣下向4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-胺(4.0g，24.0mmol)於THF(200mL)中之溶液中逐滴添加LiHMDS(THF中之1M溶液，31.2mL，31.2mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續3h。接著逐滴添加2,6-二氟苯基磺醯氯(10.2g，48mmol)於THF(20mL)中之溶液且使該混合物緩慢地溫至RT且攪拌隔夜。添加水且該混合物用EtOAc(200mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=6/1至2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.9g，35%)。LCMS-D：Rt 1.94min，m/z 341.1[M+H]+。
b)2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212
2,6-二氟-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A48(450mg，1.32mmol)及NaOMe(428mg，7.92mmol)於MeOH(6mL)中之混合物在120℃下加熱隔夜，接著使其冷卻至RT且過濾。濾液在減壓下濃縮且殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=50/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(100mg，21%)。LCMS-D：Rt 2.22min，m/z 353.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.6(s,1H),7.62(m,1H),7.56(t,J=8.3Hz,1H),7.18(d,J=8.4Hz,1H),7.04(d,J=8.5Hz,1H),7.00-6.92(m,1H),6.84(d,J=8.0Hz,1H),3.85(s,3H),3.80(s,3H)。
實例213：2-羥基-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺213
Figure 108121417-A0202-12-0211-300
2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212(20mg，0.06mmol)、(6-甲氧基吡啶-3-基)甲醇(50.1mg，0.36mmol)及t-BuOK(20.2mg，0.18mmol)於NMP(1mL)中之混合物在120℃下加熱持續16h。LCMS分析指示僅已形成F水解產物。該混合物用HCl水溶液調節至pH<4，用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。該程序用另一批2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212(52mg，0.15mmol)重複，兩種粗產物經組合且藉由製備型TLC(EtOAc/石油醚=1/13，接著DCM/MeOH=50/1至100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(135mg，19%)。LCMS-D：Rt 2.39min；m/z 350.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.2(s,1H),7.57(t,J=8.4Hz,1H),7.41(t,J=8.4Hz,1H),7.16(d,J=8.4Hz,1H),6.84(d,J=8.0Hz,1H),6.60-6.56(m,2H),3.91(s,3H),3.75(s,3H)。
實例214：2-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-6-(甲基胺基)苯磺醯胺214
Figure 108121417-A0202-12-0212-302
2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212(30mg，0.085mmol)、甲胺HCl(23mg，0.34mmol)及Et3N(52mg，0.51mmol)於乙醇(3mL)中之溶液在密封管中在120℃下加熱隔夜。該混合物在減壓下濃縮且殘餘物藉由製備型TLC(DCM)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(4mg，13%)。LCMS-D：Rt 2.49min；m/z 364.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.56(t,J=8.0Hz,1H),7.30(t,J=8.0Hz,1H),7.14(d,J=8.0Hz,1H),6.84(d,J=8.0Hz,1H),6.33(d,J=8.0Hz,1H),6.24(d,J=8.0Hz,1H),3.94(s,3H),3.70(s,3H),2.79(s,3H)。
實例215：2-(環丙基甲氧基)-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺215
Figure 108121417-A0202-12-0212-301
向2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212(30mg，0.08mmol)於THF(4mL)中之溶液中相繼添加t-BuOK(27mg，0.24mmol)、環丙基甲醇(17mg，0.24mmol)且該混合物在50℃下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc(20mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=1/1)純化以生成呈灰色固體狀之標題化合物(4.4mg，13%)。LCMS-D：Rt 2.54min，m/z 405.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.33(s,1H),7.57(t,J=8.0Hz,1H),7.48 (t,J=8.0Hz,1H),7.15(d,J=8.4Hz,1H),6.85(d,J=8.0Hz,1H),6.77-6.75(m,2H),3.91(s,3H),3.89(d,J=6.8Hz,2H),3.77(s,3H),0.86-0.83(m,1H),0.43-0.24(m,4H)。
實例216：2-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-6-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)苯磺醯胺216
Figure 108121417-A0202-12-0213-304
向2-氟-6-甲氧基-N-(4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺212(30mg，0.08mmol)於NMP(3mL)中之溶液中相繼添加t-BuOK(48mg，0.43mmol)、(2-甲氧基吡啶-4-基)甲醇(118mg，0.85mmol)且該混合物在RT下攪拌持續6h。該混合物用水稀釋，用1M HCl水溶液調節至pH 5-6且用EtOAc(20mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(5mg，12%)。LCMS-D：Rt2.43min，m/z 472.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.65(s,1H),8.07(d,J=5.2Hz,1H),7.51-7.39(m,2H),7.07-6.98(m,3H),6.79-6.75(m,3H),5.22(s,2H),3.84(s,3H),3.83(s,3H),3.81(s,3H)。
實例217-222(表G)
Figure 108121417-A0202-12-0213-172
Figure 108121417-A0202-12-0214-173
Figure 108121417-A0202-12-0215-174
實例223：2,6-二甲氧基-N-(4-硝基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺223
Figure 108121417-A0202-12-0215-307
在-78℃下在氮氣下向4-硝基苯并[d]異噁唑-3-胺I10(478mg，2.63mmol)於THF(9mL)中之溶液中添加LiHMDS(THF中之1M溶液，5.30mL，5.30mmol)且該混合物在-78℃下攪拌持續3h。接著添加2,6-二甲氧基磺醯氯I111(1.25g，5.27mmol)且使該混合物溫至RT且攪拌隔夜。反應用水淬滅且該混合物用EtOAc(80mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用水(100mL×3)、鹽水(50mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=1/0至50/1)純化以生成呈黃色固體狀之標題化合物(108mg，11%)。LCMS-D：Rt2.23min；m/z 380.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.2(s,1H),8.19(d,J=8.4Hz,2H),7.92(t,J=8.4Hz,1H),7.79(d,J=8.4Hz,1H),6.79(d,J=8.4Hz,2H),3.71(s,6H)。
實例224：N-(4-胺基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺224
Figure 108121417-A0202-12-0215-305
向2,6-二甲氧基-N-(4-硝基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺223(70.0mg，0.18mmol)於EtOAc(30mL)中之溶液中添加10% Pd/C(40.0mg)且該混合物在RT下在氫氣氛圍下攪拌隔夜。藉由過濾移除催化劑，用EtOAc沖洗且在減壓下濃縮濾液。對另一批2,6-二甲氧基-N-(4-硝基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯 胺223(30mg，0.079mmol)重複該程序且粗產物經組合且藉由製備型TLC(DCM/MeOH=50/1)純化兩次且藉由製備型HPLC純化兩次以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.5mg，3%)。LCMS-D：Rt2.25min；m/z 350.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,FDMSO-d 6 )δ 7.52(t,J=8.4Hz,1H),7.25(t,J=8.0Hz,1H),6.80(d,J=8.4Hz,2H),6.66(d,J=8.0Hz,1H),6.43(d,J=8.0Hz,1H),3.78(s,6H)。
實例225：N-(5-((1H-吡唑-1-基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺225
Figure 108121417-A0202-12-0216-309
a)N-(5-溴苯并[d]異嘌唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A49
在0℃下在氮氣下向N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺135(8.2g，19.9mmol)、(2,4-二甲氧基苯基)甲醇(5.03g，29.9mmol)及PPh3(13.1g，49.9mmol)於THF(400mL)中之溶液中緩慢地逐滴添加DIAD(8.06 g，39.9mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至5/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.7g，42%)。LCMS-D：Rt 3.39min，m/z 583.1[M+Na]+
b)3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A50
N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A49(1.5g，2.67mmol)、Et3N(10mL)及Pd(dppf)Cl2(732mg，1mmol)於MeOH(150mL)中之混合物在120℃下在一氧化碳氛圍(20巴)下加熱持續7h。該反應用1.7g N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A49及1.5g N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A49重複且該等混合物經組合且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=100/1至3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(2.2g，49%)。LCMS-D：Rt 3.17min，m/z 563.1[M+Na]+ c)3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸A51
向3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A50(2.2g，4.07mmol)於甲醇(30mL)中之溶液中添加3M NaOH水溶液(20mL)且該混合物在RT下攪拌隔夜。該混合物用HCl水溶液調節至pH 1且在減壓下移除溶劑。殘餘物用水(100mL)稀釋且用DCM(200mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(1.9g,89%)。LCMS-D：Rt 2.99min，m/z 549.1[M+Na]+。
d)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(5-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A52
在0℃下在氮氣下向3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸(800mg，1.52mmol)A51於THF(5mL)中之溶液中緩慢地逐滴添加BH3．THF(THF中之1M溶液，10mL，10mmol)且使該混合物溫至RT且攪拌持續2h。該混合物冷卻至0℃且該反應藉由緩慢添加甲醇(20mL)來淬滅。在減壓下移除溶劑且殘餘物用水稀釋且用DCM(200mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/0至40/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(700mg，90%)。LCMS-D：Rt 2.99min，m/z 513.1[M+H]+。
e)N-(5-((1H-吡唑-1-基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A53
在0℃下在氮氣下向N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-N-(5-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺A52(200mg，0.39mmol)及Et3N(197mg，1.95mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加甲烷磺醯氯(89mg，0.78mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1.5h，接著無需處理及分離直接地用於下一步驟。
在0℃下在氮氣下向吡唑(133mg，1.95mmol)於DMF(20mL)中之溶液中逐份添加t-BuOK(219mg，1.95mmol)且該混合物在RT下攪拌持續1.5h。接著緩慢地添加含有甲烷磺酸(3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲酯(假定0.39mmol)之反應混合物且所得混合物在RT下攪拌持續30min。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機萃取物用水(×3)、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(60mg，27%)。LCMS-D：Rt 3.01min，m/z 563.2[M+H]+。
f)N-(5-((1H-吡唑-1-基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺225
N-(5-((1H-吡唑-1-基)甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A53(60mg，0.107mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，68%)。LCMS-D：Rt6.03min，m/z 412.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(s,1H),7.89(s,1H),7.85(d,J=2.0Hz,1H),7.68(d,J=2.0Hz,1H),7.58-7.49(m,3H),7.46(dd,J=8.4,2.0Hz,1H),7.08(d,J=8.8Hz,1H),6.31(t,J=2.0Hz,1H),5.54(s,2H),3.68(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例226：N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺三氟乙酸酯226
Figure 108121417-A0202-12-0219-310
a)3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺A54
3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸A51(600mg，1.14mmol)及亞硫醯二氯(5mL)之混合物在85℃下加熱持續1.5h，接著在減壓下濃縮。殘餘物溶解於DCM(3mL)中且在0℃下逐滴添加至濃NH4OH(10mL)中且該混合物在RT下攪拌持續30min。在減壓下移除大部分溶劑且殘餘物用水(20mL)稀釋。所得沉澱物藉由過濾經收集，用水洗 滌兩次且經乾燥以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(400mg，67%)。LCMS-D：Rt 2.86min，m/z 526.2[M+H]+。
b)N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A55
3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺A54(400mg，0.76mmol)及BH3．THF(THF中之1M溶液，20mL)之混合物在75℃下在氮氣下加熱隔夜。該混合物接著冷卻至0℃且該反應藉由緩慢添加甲醇(10mL)來淬滅。在減壓下移除溶劑且殘餘物用水稀釋且用DCM(100mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/1至10/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(150mg，39%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
c)N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺三氟乙酸酯226
N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A55(50mg，0.098mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=10/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，86%)。LCMS-D：Rt 1.93min，m/z 362.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(br s,1H),8.53(br s,3H),8.11(s,1H),7.83(d,J=8.4Hz,1H),7.70-7.68(m,2H),7.48(d,J=8.0Hz,1H),7.12(d,J=8.8Hz,1H),4.13(s,2H),3.71(s,3H),2.64(q,J=7.6Hz,2H),1.17(t,J=7.6Hz,3H)。
實例227：((3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)胺基甲酸甲酯227
Figure 108121417-A0202-12-0221-311
a)((3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)胺基甲酸甲酯A56
在0℃下向N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A55(70mg，0.137mmol)及Et3N(69mg，0.685mmol)於DCM(20mL)中之溶液中逐滴添加氯甲酸甲酯(39mg，0.411mmol)且該混合物在RT下攪拌持續20min。在減壓下移除溶劑且殘餘物用水稀釋且用DCM萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=100/0至40/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，43%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)((3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)胺基甲酸甲酯227
((3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)胺基甲酸甲酯A56(30mg，0.0558mmol)及TFA(3mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(15mg，64%)。LCMS-D：Rt 2.45min，m/z 420.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(s,1H),7.91(s,1H),7.79(t,J=5.6Hz,1H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),7.55-7.43(m,3H),7.09(d,J=8.4Hz,1H),4.29(d,J=6.0Hz,2H),3.73(s,3H),3.58(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例228：N-((3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)乙醯胺228
Figure 108121417-A0202-12-0222-312
a)N-((3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)乙醯胺A57
在0℃下在氮氣下向N-(5-(胺基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A55(100mg，0.195mmol)及Et3N(98mg，0.975mmol)於DCM(10mL)中之溶液中添加乙醯氯(31mg，0.391mmol)且該混合物在RT下攪拌持續30min。該混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(60mg，56%)，該標題化合物直接地用於下一步驟。
b)N-((3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)乙醯胺228
N-((3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-基)甲基)乙醯胺A57(60mg，0.108mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=40/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，68%)。LCMS-D：Rt2.35min，m/z 404.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.7(br s,1H),8.55(br s,1H),7.85(s,1H),7.69(s,1H),7.47-7.39(m,3H),7.06(d,J=7.2Hz,1H),4.33(d,J=3.6Hz,2H),3.72(s,3H),2.60(q,J=6.8Hz,2H),1.91(s,3H),1.17(t,J=6.8Hz,3H)。
實例229：5-乙基-N-(5-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺229
Figure 108121417-A0202-12-0223-313
a)3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A58
3-((N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A50(435mg，0.8mmol)及TFA(9mL)之混合物在RT下攪拌持續3h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(200mg，89%)。LCMS-D：Rt 2.69min，m/z 391.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.9(br s,1H),8.82(s,1H),8.18(dd,J=9.2,1.6Hz,1H),7.72-7.70(m,2H),7.48(dd,J=8.8,2.0Hz,1H),7.10(d,J=8.8Hz,1H),3.90(s,3H),3.71(s,3H),2.64(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
b)3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-用酸A59
向3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A58(220mg，0.56mmol)於THF/MeOH(10mL/10mL)中之溶液中添加2M NaOH水溶液(1.4mL，2.8mmol)且該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物溶解於水(10mL)中且該溶液經調節至pH 2-3。所得沉澱物藉由過濾經收集以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(180mg，85%)。LCMS-D：Rt2.51min，m/z 377.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 13.2(s,1H),11.86(s,1H),8.78(s,1H),8.16(dd,J=8.8,1.2Hz,1H),7.71-7.66(m,2H),7.47(dd,J=8.4,1.6Hz, 1H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),3.70(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
c)5-乙基-N-(5-(羥基甲基)苯并[d]異噁唑-3-基)-2-甲氧基苯磺醯胺229
3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸A59(50mg，0.13mmol)及BH3．THF(THF中之1M溶液，5mL，5mmol)之混合物在RT下在氮氣下攪拌持續5h。該反應用水(10mL)淬滅且在減壓下移除大部分THF。水性殘餘物經調節至pH 2-3且用DCM(15mL×3)萃取。經組合之有機層經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(30mg，62%)。LCMS-D：Rt2.46min，m/z 363.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.6(s,1H),7.98(s,1H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),7.53(s,2H),7.46(dd,J=8.4,2.0Hz,1H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),5.35(t,J=5.6Hz,1H),4.59(d,J=5.6Hz,2H),3.72(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例230：3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)-N-甲基苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺230
Figure 108121417-A0202-12-0224-314
3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸甲酯A58(50mg，0.13mmol)及甲胺(EtOH中之33%溶液，5mL)之混合物在密封管中在90℃下加熱持續80min。在減壓下移除溶劑且殘餘物藉由製備型TLC純化以生成呈淺黃色固體狀之所需產物(18mg，36%)。LCMS-D：Rt 2.39min，m/z 390.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(s,1H),8.53-8.51(m,2H),8.03(d,J=8.8Hz,1H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),7.62(d,J=8.8Hz,1H),7.42(d,J=8.0 Hz,1H),7.06(d,J=8.4Hz,1H),3.69(s,3H),2.81(d,J=4.4Hz,3H),2.62(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例231：3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)-N,N-二甲基苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺231
Figure 108121417-A0202-12-0225-317
3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲酸A59(70mg，0.19mmol)於亞硫醯二氯(10mL)中之溶液在85℃下在氮氣下加熱持續3h。該混合物接著在減壓下濃縮以生成3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-碳醯氯，其溶解於THF(2.5mL)中且用二甲胺(水中之40%溶液，5mL)處理。該混合物在RT下攪拌隔夜。在減壓下移除大部分THF且水性殘餘物經調節至pH 2-3。沉澱物藉由過濾經收集以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(60mg，80%)。LCMS-D：Rt2.40min，m/z 404.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.13(s,1H),7.71-7.63(m,3H),7.48(dd,J=8.8,2.0Hz,1H),7.10(d,J=8.8Hz,1H),3.70(s,3H),3.01(s,3H),2.96(s,3H),2.63(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例232：3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺232
Figure 108121417-A0202-12-0225-319
向根據關於3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)- N,N-二 甲基苯并[ d ]異噁唑-5-甲醯胺231所述之程序製備的3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-碳醯氯(63mg，0.16mmol)於THF(2.5mL)中之溶液中添加濃NH4OH (5mL)且該混合物歷經週末在RT下攪拌。在減壓下移除大部分THF且水性殘餘物經調節至pH 2-3。所得沉澱物藉由過濾經收集以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(37mg，62%)。LCMS-D：Rt2.33min，m/z 376.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.8(s,1H),8.49(s,1H),8.04(d,J=7.6Hz,2H),7.69(d,J=2.4Hz,1H),7.54(d,J=8.4Hz,2H),7.36(d,J=6.8Hz,1H),7.02(d,J=8.4Hz,1H),3.68(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例233：N-(5-氰基苯并[d]異噁唑-3-基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺233
Figure 108121417-A0202-12-0226-321
3-((5-乙基-2-甲氧基苯基)磺醯胺基)苯并[d]異噁唑-5-甲醯胺232(22mg，0.058mmol)於POCl3中之溶液在110℃下在氮氣下加熱隔夜。反應用冰水(25mL)淬滅且該混合物用DCM(35mL×2)萃取。經組合之有機萃取物用水(50mL×3)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮以生成呈淺黃色固體狀之標題化合物(19.8mg,90%)。LCMS-D：Rt2.61min，m/z 358.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 12.0(s,1H),8.54(s,1H),8.07(d,J=8.8,1.2Hz,1H),7.86(d,J=8.8Hz,1H),7.73(d,J=2.0Hz,1H),7.49(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.11(d,J=8.4Hz,1H),3.70(s,3H),2.65(q,J=7.6Hz,2H),1.17(t,J=7.6Hz,3H)。
實例234：5-乙基-2-甲氧基-N-(5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺234
Figure 108121417-A0202-12-0226-322
a)N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A60
N-(5-溴苯并[d]異噁唑-3-基)-N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基苯磺醯胺A49(112mg，0.2mmol)、甲基硼酸(60mg，1mmol)、Pd(dppf)Cl2(29mg，0.04mmol)及K2CO3(138mg，1mmol)於1,4-二噁烷(10mL)及水(2mL)中之混合物在90℃下在氮氣下加熱隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物用水(30mL)稀釋且用EtOAc(100mL)萃取。有機萃取物用水、鹽水洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(60mg，61%)。LCMS-D：Rt 2.72min，m/z 347.2[M-DMB]+。
b)5-乙基-2-甲氧基-N-(5-甲基苯并[d]異噁唑3-基)苯磺醯胺234
N-(2,4-二甲氧基苯甲基)-5-乙基-2-甲氧基-N-(5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺A60(60mg，0.12mmol)及TFA(5mL)之混合物在RT下攪拌持續4h，接著在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=2/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(30mg，71%)。LCMS-D：Rt2.72min，m/z 347.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.78(s,1H),7.69(d,J=2.0Hz,1H),7.49-7.44(m,3H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),3.72(s,3H),2.61(q,J=7.6Hz,2H),2.40(s,3H),1.16(t,J=7.6Hz,3H)。
實例235-238(表H)
Figure 108121417-A0202-12-0227-175
Figure 108121417-A0202-12-0228-176
實例239-242(表I) 方法IA：
Figure 108121417-A0202-12-0228-324
向胺(0.2mmol，1.0eq.)於吡啶(2mL)中之溶液中添加磺醯氯(1.5eq.)且該混合物在微波照射下在120℃下加熱持續2h。該混合物分配於水與EtOAc之間，分離各層且有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC純化以生成標題化合物。上述條件之變化已注釋於表I中。
Figure 108121417-A0202-12-0229-177
Figure 108121417-A0202-12-0230-178
實例243：N-(6-(3-氰基苯基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺243
Figure 108121417-A0202-12-0230-326
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加(3-氰基苯基)硼酸(34mg，0.226mmol)、Na2CO3(36mg，0.339mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=100/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(24mg，46%)。LCMS-C：Rt2.44min，m/z 466.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.70(s,1H),8.34(s,1H),8.16(d,J=7.5Hz,1H),7.90(d,J=7.7Hz,1H),7.70(t,J=7.8Hz,1H),7.57(s,1H),7.51(t,J=8.4Hz,1H),7.19(s,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.03(s,3H),3.78(s,6H)。
實例244：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺244
Figure 108121417-A0202-12-0231-328
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加甲基硼酸(14mg，0.226mmol)、Na2CO3(36mg，0.339mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(8mg，19%)。LCMS-C：Rt2.18min，m/z 379.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.45(s,1H),7.49(t,J=8.5Hz,1H),6.97(s,1H),6.77(d,J=8.5Hz,2H),6.70(s,1H),3.91(s,3H),3.77(s,6H),2.42(s,3H)。
實例245：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(吡啶-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺245
Figure 108121417-A0202-12-0231-327
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加吡啶-4-基硼酸(28mg，0.226mmol)、Na2CO3(36mg，0.339mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化 以生成呈白色固體狀之標題化合物(22mg，44%)。LCMS-C：Rt0.58min，m/z 442.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.75(s,1H),8.69(d,J=5.3Hz,2H),7.84(d,J=5.3Hz,2H),7.63(s,1H),7.50(t,J=8.4Hz,1H),7.20(s,1H),6.78(d,J=8.5Hz,2H),4.03(s,3H),3.78(s,6H)。
實例246：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(吡啶-3-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺246
Figure 108121417-A0202-12-0232-329
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)吡啶(47mg，0.226mmol)、Na2CO3(36mg，0.339mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(9mg，18%)。LCMS-C：Rt0.77min，m/z 442.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.67(s,1H),9.02(d,J=2.5Hz,1H),8.63(dd,J=4.8,1.6Hz,1H),8.21(dt,J=8.0,2.0Hz,1H),7.56(s,1H),7.54-7.48(m,2H),7.17(s,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.03(s,3H),3.79(s,6H)。
實例247：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺247
Figure 108121417-A0202-12-0233-331
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.113mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸(35mg，0.226mmol)、Na2CO3(36mg，0.339mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=60/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(45mg，85%)。LCMS-C：Rt 2.33min，m/z 472.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.61(s,1H),8.63(d,J=2.6Hz,1H),8.15(dd,J=8.7,2.6Hz,1H),7.51(t,J=8.5Hz,1H),7.47(s,1H),7.10(s,1H),6.94(d,J=8.6Hz,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.02(s,3H),3.91(s,3H),3.79(s,6H)。
實例248：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(3-甲氧基-5-甲基苯基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺248
Figure 108121417-A0202-12-0233-330
a)2-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環A61
1-溴-3-甲氧基-5-甲基苯(500mg，2.49mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環)(1.9g，7.49mmol)、乙酸鉀(977mg，9.96mmol)及 Pd(dppf)Cl2(196mg，0.25mmol)於1,4-二噁烷(20mL)中之混合物在回流下在N2下加熱持續3h。該混合物用EtOAc(300mL)稀釋，用水(50mL×3)洗滌且有機層經Na2SO4乾燥，過濾，在減壓下濃縮。殘餘物藉由管柱層析法(石油醚/EtOAc=20/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(300mg，49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.08(s,1H),6.94(d,J=2.6Hz,1H),6.87(s,1H),3.73(s,3H),2.30-2.25(m,3H),1.28(s,12H)。
b)2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(3-甲氧基-5-甲基苯基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺248
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.11mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加2-(3-甲氧基-5-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環A61(55mg，0.22mmol)、K2CO3(61mg，0.44mmol)及Pd(PPh3)4(13mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用1M HCl水溶液調節至pH 4-5且用EtOAc萃取。經組合之有機萃取物用水、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(4.3mg，8%)。LCMS-C：Rt2.56min，m/z 485.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.62(s,1H),7.51(t,J=8.5Hz,1H),7.43(s,1H),7.18(s,1H),7.10(s,1H),7.05(s,1H),6.83(s,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.02(s,3H),3.81(s,3H),3.79(s,6H),2.36(s,3H)。
實例249：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(2-甲氧基吡啶-4-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺249
Figure 108121417-A0202-12-0234-332
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.11mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之溶液中添加(2-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(33mg，0.22mmol)、Na2CO3(35mg，0.33mmol)及Pd(PPh3)4(13mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物傾入水中且用DCM萃取。經組合之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(5mg，10%)。LCMS-C：Rt2.29min，m/z 472.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.71(br s,1H),8.26(d,J=5.4Hz,1H),7.59(s,1H),7.50(t,J=8.5Hz,1H),7.42(dd,J=5.4,1.6Hz,1H),7.25(s,1H),7.16(s,1H),6.78(d,J=8.5Hz,2H),4.02(s,3H),3.90(s,3H),3.78(s,6H)。
實例250：2,6-二甲氧基-N-(4-甲氧基-6-(5-甲氧基吡啶-3-基)苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺250
Figure 108121417-A0202-12-0235-333
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(50mg，0.11mmol)於1,4-二噁烷(4mL)及水(1mL)中之溶液中添加3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)吡啶(52mg，0.22mmol)、Na2CO3(35mg，0.33mmol)及Pd(PPh3)4(13mg，0.011mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物傾入水中且用DCM萃取。經組合之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型HPLC純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(5mg，10%)。LCMS-C：Rt2.25min，m/z 472.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.67(s,1H),8.63(s,1H),8.38(d,J=2.7Hz,1H),7.81-7.79 (m,1H),7.59(s,1H),7.51(t,J=8.5Hz,1H),7.18(s,1H),6.79(d,J=8.5Hz,2H),4.04(s,3H),3.94(s,3H),3.79(s,6H)。
實例251：N-(6-(3-氰基-5-甲氧基苯基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺251
Figure 108121417-A0202-12-0236-334
a)3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈A62
3-溴-5-甲氧基苯甲腈(500mg,2.35mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環)(1.8g，7.07mmol)、乙酸鉀(923mg，9.4mmol)及Pd(dppf)Cl2．DCM(196mg,0.24mmol)之混合物在回流下在N2下加熱持續4h。添加水且該混合物用EtOAc(20mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(EtOAc/石油醚=1/5)純化以生成呈黃色油狀之標題化合物(600mg，98%)。LCMS-C：Rt 2.66min；m/z 260.0[M+H]+。
b)N-(6-(3-氰基-5-甲氧基苯基)-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺251
向N-(6-溴-4-甲氧基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺89(415mg，0.94mmol)於1,4-二噁烷(80mL)及水(20mL)中之溶液中添加3-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯甲腈A62(500mg，2.82mmol)、Na2CO3(399mg，3.77mmol)及Pd(PPh3)4(116mg，0.1mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。經組合之有機萃 取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(DCM/MeOH=30/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(40mg，8.6%)。LCMS-C：Rt2.48min，m/z 495.9[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.69(br s,1H),7.89(s,1H),7.67(s,1H),7.57(m,1H),7.49(s,2H),7.15(s,1H),6.77(d,J=8.5Hz,2H),4.02(s,3H),3.90(s,3H),3.77(s,6H)。
實例252：2,6-二甲氧基-N-(5-甲基-7-苯基苯并[d]異噁唑-3-基)苯磺醯胺252
Figure 108121417-A0202-12-0237-335
向N-(7-溴-5-甲基苯并[d]異噁唑-3-基)-2,6-二甲氧基苯磺醯胺239(50mg，0.117mmol)於1,4-二噁烷(8mL)及水(2mL)中之溶液中添加苯基硼酸(22mg，0.176mmol)、Na2CO3(50mg，0.468mmol)及Pd(PPh3)4(14mg，0.012mmol)且該混合物在回流下在N2氛圍下加熱隔夜。該混合物用水稀釋且用EtOAc(30mL×3)萃取。經組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由製備型TLC(石油醚/EtOAc=3/1)純化以生成呈白色固體狀之標題化合物(40mg，80%)。LCMS-C：Rt 2.49min；m/z 425.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.87-7.80(m,2H),7.67-7.55(m,2H),7.48(t,J=7.7Hz,2H),7.42-7.32(m,2H),6.69(d,J=8.4Hz,2H),3.70(s,6H),2.45(s,3H)。
分析 蛋白質製備 KAT5
分子生物學：編碼人類KAT5同功異型物之胺基酸殘基2至461(Uniprot Q92993-2)的密碼子最佳化DNA序列(用於大腸桿菌中之表現)由GenScript USA Inc(Piscataway,New Jersey,USA)合成。此序列接合至經設計以編 碼N端六組胺酸標籤、隨後菸草蝕紋病毒蛋白酶(TEV)裂解位點及隨後KAT5序列之經修飾pET43a大腸桿菌表現載體中。所得蛋白質序列列於下文。
Figure 108121417-A0202-12-0238-179
Figure 108121417-A0202-12-0238-181
蛋白質表現：為了產生重組KAT5蛋白，表現質體經轉型至大腸桿菌BL21 DE3菌株中且在37℃下在補充有100μg/mL安比西林及50μM鋅之1L體積超級肉湯(TB)中在震盪下生長，直至達到OD600 0.8。培養物經轉換至18℃且藉由添加異丙基β-D-1-硫代哌喃半乳糖苷至0.5mM最終濃度來誘導蛋白質表現且該等培養物再震盪隔夜持續16小時。在表現之後，細胞培養物在5000 x g下離心持續20min且細胞集結粒經冷凍儲存於-20℃下。
蛋白質純化：蛋白質純化藉由使用6mL緩衝液/1g細胞之比率在溶解緩衝液(50mM Hepes pH 7.4、500mM NaCl、5mM咪唑、5%[v/v]甘油、0.1%[w/v]CHAPS、2mM 2-巰基乙醇、3mM MgCl2、0.5mg/mL溶菌酶、全能核酸酶核酸內切酶[EMD Millipore]、1mM PMSF、無EDTA complete蛋白酶抑制劑錠劑[Roche])中解凍細胞集結粒(25g濕重)經起始。細胞進一步藉由使用Misonix液體處理器(6×30秒脈衝，幅度60[70瓦特])進行音波處理而溶解且接著在4℃ 下在48,000 x g下離心。上清液(細胞溶解產物)與以Q緩衝液(20mM Hepes pH 7.4、1M NaCl)預平衡之20mL Q-Sepharose FF樹脂(GE Healthcare)混合。來自Q-Sepharose FF之未結合部分接著用以IMAC洗滌緩衝液(20mM hepes pH 7.4、500mM NaCl、35mM咪唑)預平衡之5mL cOmplete His-標籤純化樹脂(Roche)培育。該樹脂用IMAC洗滌緩衝液洗滌，且結合之KAT5用IMAC溶離緩衝液(20mM hepes pH 7.4、500mM NaCl、300mM咪唑)溶離。IMAC溶離之蛋白質立即使用2 x HiPrep 26/10去鹽管柱(GE Healthcare)串聯地去鹽至儲存緩衝液(50mM檸檬酸鈉pH 6.5、500mM NaCl、5%[v/v]甘油)中。經去鹽蛋白質進一步藉由傳遞通過在儲存緩衝液中預平衡之HiLoad 26/60 Superdex 75管柱經純化。最後，KAT5蛋白使用Amicon Ultra離心過濾器單元(Utra-15 MWCO 10kDa)經濃縮至1.5mg/mL，在液氮中速凍且儲存於-70℃冷凍器中。
KAT6A
分子生物學：編碼人類KAT6A之胺基酸殘基507至778(Uniprot Q92794-1)的DNA序列藉由PCR經擴增，且接合至經設計以編碼NusA溶解性標籤、隨後六組胺酸標籤及菸草蝕紋病毒蛋白酶(TEV)裂解位點及隨後KAT6A序列之經修飾pET大腸桿菌表現載體中。所得蛋白質序列列於下文。
Figure 108121417-A0202-12-0239-479
Figure 108121417-A0202-12-0239-336
Figure 108121417-A0202-12-0240-338
蛋白質表現：為了產生重組KAT6A蛋白，表現質體經轉型至大腸桿菌BL21 DE3菌株中且在37℃下在補充有100μg/mL安比西林之1L體積超級肉湯(TB)中在震盪下生長，直至達到OD600 0.8。培養物經轉換至18℃且藉由添加異丙基β-D-1-硫代哌喃半乳糖苷至0.5mM最終濃度來誘導蛋白質表現且該等培養物再震盪隔夜持續16小時。在表現之後，細胞培養物在5000 x g下離心持續20min且細胞集結粒經冷凍儲存於-20℃下。
蛋白質純化：蛋白質純化藉由使用5mL緩衝液/1g細胞之比率在溶解緩衝液(25mM Tris-HCl pH 7.8、500mM NaCl、5mM DTT、0.01%[v/v]Triton-X 100、5%[v/v]甘油、2mM MgCl2、10mM咪唑、0.5mg/mL溶菌酶、全能核酸酶核酸內切酶[EMD Millipore]、1mM PMSF、無EDTA complete蛋白酶抑制劑錠劑[Roche])中解凍細胞集結粒(40g濕重)經起始。細胞進一步藉由3次傳遞(在15000psi下)通過冰冷卻之Avestin C5細胞壓碎器而溶解且接著在4℃下在48,000 x g下離心。上清液(細胞溶解產物)經由5μm過濾器過濾且使用Profinia親和力層析純化系統(Bio-Rad)應用於以IMAC洗滌緩衝液(25mM Tris-HCl pH 7.8、500mM NaCl、5mM DTT、0.01%[v/v]Triton-X 100、5%[v/v]甘油、20mM咪唑)預平衡之5mL HiTrap IMAC Sepharose FF管柱(GE Healthcare)上。該IMAC 管柱接著用IMAC洗滌緩衝液洗滌，且結合之KAT6A蛋白用IMAC溶離緩衝液(25mM Tris-HCl pH 7.8、500mM NaCl、5%[v/v]甘油、5mM DTT、250mM咪唑)溶離。IMAC溶離之蛋白質進一步藉由傳遞通過在儲存緩衝液(25mM Tris-HCl pH 7.8、500mM NaCl、5mM DTT、5%[v/v]甘油)中預平衡之HiLoad 26/60 Superdex 200管柱經純化。最後，KAT6A蛋白使用Amicon Ultra離心過濾器單元(Utra-15 MWCO 10kDa)經濃縮至
Figure 108121417-A0202-12-0241-349
1mg/mL，在液氮中速凍且儲存於-70℃冷凍器中。
KAT6B獲自SignalChem，目錄ID：K315-381BG
KAT7
分子生物學：編碼人類KAT7之胺基酸殘基325至611(Uniprot O95251-1)的密碼子最佳化DNA序列由GenScript USA Inc(Piscataway,New Jersey,USA)合成。此序列接合至經設計以編碼N端六組胺酸標籤、隨後菸草蝕紋病毒蛋白酶(TEV)裂解位點及隨後KAT7序列之經修飾pET43a大腸桿菌表現載體中。所得蛋白質序列列於下文。
Figure 108121417-A0202-12-0241-339
Figure 108121417-A0202-12-0241-340
蛋白質表現：為了產生重組KAT7蛋白，表現質體經轉型至大腸桿菌BL21 DE3 RIL菌株中且在37℃下在補充有100μg/mL安比西林及50μM鋅之1L體積超級肉湯(TB)中在震盪下生長，直至達到OD600 0.8。培養物經轉換 至18℃且藉由添加異丙基β-D-1-硫代哌喃半乳糖苷至0.5mM最終濃度來誘導蛋白質表現且該等培養物再震盪隔夜持續16小時。在表現之後，細胞培養物在5000 x g下離心持續20min且細胞集結粒經冷凍儲存於-20℃下。
蛋白質純化：蛋白質純化藉由使用10mL緩衝液/1g細胞之比率在溶解緩衝液(50mM Hepes pH 7.5、300mM NaCl、5mM咪唑、0.05%[v/v]Brij 35、10%[v/v]甘油、3mM MgCl2、0.5mg/mL溶菌酶、全能核酸酶核酸內切酶[EMD Millipore]、1mM PMSF、無EDTA complete蛋白酶抑制劑錠劑[Roche])中解凍細胞集結粒(10g濕重)經起始。細胞進一步藉由使用Misonix液體處理器(6×30秒脈衝，幅度60[70瓦特])進行音波處理而溶解且接著在4℃下在48,000 x g下離心。上清液(細胞溶解產物)用以IMAC洗滌緩衝液1(25mM Hepes pH 7.5、800mM NaCl、5mM咪唑、10%[v/v]甘油、5mM DTT、0.01%[v/v]Brij 35、50mM精胺酸、50mM麩胺酸)預平衡之1mL cOmplete His-標籤純化樹脂(Roche)培育。該樹脂依序用IMAC洗滌緩衝液1及IMAC洗滌緩衝液2(25mM hepes pH 7.5、300mM NaCl、20mM咪唑、10%[v/v]甘油、5mM DTT、0.01%[v/v]Brij 35、50mM精胺酸、50mM麩胺酸)洗滌。經結合KAT7蛋白用IMAC溶離緩衝液(25mM hepes pH 7.5、200mM NaCl、500mM咪唑、10%[v/v]甘油、5mM DTT 0.01%[v/v]Brij 35、50mM精胺酸、50mM麩胺酸)溶離。溶離蛋白直接地經收集至4體積去鹽緩衝液(50mM檸檬酸鈉pH 6.5、200mM NaCl、0.01%[v/v]Brij 35、10%[v/v]甘油、5mM DTT)中以使最終咪唑濃度達到100mM。IMAC溶離之蛋白質立即使用2x HiPrep 26/10去鹽管柱(GE Healthcare)串聯地去鹽至去鹽緩衝液中。經去鹽蛋白質進一步藉由傳遞通過在儲存緩衝液(50mM檸檬酸鈉pH 6.5、200mM NaCl、10%[v/v]甘油、5mM DTT)中預平衡之HiLoad 26/60 Superdex 75管柱經純化。最後，KAT7蛋白使用Amicon Ultra離心過濾器單元(Utra-15 MWCO 10kDa)經濃縮至3.5mg/mL，在液氮中速凍且儲存於-70℃冷凍器中。
KAT8
分子生物學：編碼人類KAT8之胺基酸殘基177至447(Uniprot Q9H7Z6-1)的密碼子最佳化DNA序列(用於大腸桿菌中之表現)由Thermo Fisher Scientific GENEART GmbH(Regensberg,Germany)合成。此序列接合至經設計以編碼N端六組胺酸標籤、隨後菸草蝕紋病毒蛋白酶(TEV)裂解位點及隨後KAT8序列之pPROEX Hta大腸桿菌表現載體中。所得蛋白質序列列於下文。
Figure 108121417-A0202-12-0243-343
Figure 108121417-A0202-12-0243-342
蛋白質表現：為了產生重組KAT8蛋白，表現質體經轉型至大腸桿菌BL21 DE3菌株中且在37℃下在補充有100μg/mL安比西林之1L體積超級肉湯(TB)中在震盪下生長，直至達到OD600 0.8。培養物經轉換至18℃且藉由添加異丙基β-D-1-硫代哌喃半乳糖苷至0.5mM最終濃度來誘導蛋白質表現且該等培養物再震盪隔夜持續16小時。在表現之後，細胞培養物在5000 x g下離心持續20min且細胞集結粒經冷凍儲存於-20℃下。
蛋白質純化：蛋白質純化藉由使用3mL緩衝液/1g細胞之比率在溶解緩衝液(20mM Hepes pH 7.5、500mM NaCl、5mM咪唑、5%[v/v]甘油、0.01%[v/v]Triton-X 100、5mM 2-巰基乙醇、2mM MgCl2、0.5mg/mL溶菌酶、全能核酸酶核酸內切酶[EMD Millipore]、1mM PMSF、無EDTA complete蛋白酶抑制劑錠劑[Roche])中解凍細胞集結粒(34g濕重)經起始。細胞進一步藉由3次傳遞(在15000psi下)通過冰冷卻之Avestin C5細胞壓碎器而溶解且接著在4℃下在 48,000 x g下離心。上清液(細胞溶解產物)經由0.2μm過濾器過濾且使用Profinia親和力層析純化系統(Bio-Rad)應用於以IMAC洗滌緩衝液1(20mM Hepes pH 7.5、500mM NaCl、0.5mM TCEP、5mM咪唑)預平衡之5mL HiTrap IMAC Sepharose FF管柱(GE Healthcare)上。該IMAC管柱接著依序用IMAC洗滌緩衝液1及IMAC洗滌緩衝液2(20mM Hepes pH 7.5、500mM NaCl、0.5mM TCEP、10mM咪唑)洗滌且結合之KAT8蛋白用IMAC溶離緩衝液(20mM Hepes pH 7.5、500mM NaCl、0.5mM TCEP、500mM咪唑)溶離。IMAC溶離之蛋白質進一步藉由傳遞通過在儲存緩衝液(20mM Hepes pH 7.5、500mM NaCl、1mM TCEP)中預平衡之HiLoad 26/60 Superdex 200管柱經純化。最後，KAT8蛋白使用Amicon Ultra離心過濾器單元(Utra-15 MWCO 10kDa)經濃縮至
Figure 108121417-A0202-12-0244-350
0.2mg/mL，在液氮中速凍且儲存於-70℃冷凍器中。
乙醯基轉移酶生物化學分析
為了測定測試化合物對KAT酶活性之抑制作用，在384孔低體積分析板中以8μL體積進行分析反應。該等反應在分析緩衝液(100mM Tris-HCl pH 7.8、15mM NaCl、1mM EDTA、0.01% Tween-20、1mM二硫蘇糖醇及0.01% m/v雞蛋白蛋白)中執行。
反應用1μM乙醯基輔酶A、100nM藉由有限生物素化標記之全長重組組蛋白(KAT6A、KAT6B、KAT7：H3.1，KAT5、KAT8：H4)、分別10/5/8/40/20nM KAT5/KAT6A/KAT6B/KAT7/KAT8酶及乙醯基-離胺酸特異性抗體(H3.1：Cell Signaling Technology，H4：Abcam)建立。在DMSO中製備測試化合物之11點稀釋系列；使用針工具將100nL體積轉移至含有受質之分析板中，接著添加酶以開始反應。陽性(無化合物，僅DMSO)及陰性(省略AcCoA)對照反應包括於同一板上且接受與經化合物處理之孔相同之量的DMSO。在添加所有試劑之後，該等板經黏性密封件密封且在室溫下培育持續90min。接著添加額外4 μL含有AlphaScreen®蛋白A受體珠粒及抗生蛋白鏈菌素供體珠粒(PerkinElmer,Waltham,MA)之分析緩衝液至8μg/mL之最終濃度。在培育持續2小時之後，該等板使用EnVision 2103多標記板式讀取器(PerkinElmer)以HTS AlphaScreen®模式讀數。藉由計算在同一板上相對於對照物關於各反應之百分比抑制(%I)(%I=(I-CN)/(CP-CN)，其中CN/CP分別為陰性/陽性反應之平均值)，接著使%I數據對化合物濃度[I]擬合為%I=(A+((B-A)/(1+((C/[I])^D))))，其中A為下漸近線，B為上漸近線，C為IC50值，且D為斜率，自原始讀數獲得ICS0值。
結果顯示於下表1至5中：
表1(TIP60-KAT5)
Figure 108121417-A0202-12-0246-182
Figure 108121417-A0202-12-0247-183
表2(MOZ-KAT6A)
Figure 108121417-A0202-12-0248-184
Figure 108121417-A0202-12-0249-185
表3(HBO-KAT7)
Figure 108121417-A0202-12-0250-186
Figure 108121417-A0202-12-0251-187
Figure 108121417-A0202-12-0251-188
表5(QKF-KAT6B)
Figure 108121417-A0202-12-0252-189
組蛋白H3離胺酸23乙醯化生物標記物分析
化合物在以下分析中針對其抑制組蛋白H3K23標記物之乙醯化的能力經測試：
細胞株U2OS在RPMI培養基及10%胎牛血清中以9,000個細胞/孔之密度接種於96孔光學品質組織培養板中，且使其在標準培養條件(攝氏37度，5% CO2)下黏附持續24小時。在此時期結束時，吸出該培養基。在DMSO中製備之化合物稀釋液添加至培養基中，其中陰性對照孔經預留以僅用DMSO處理且100%抑制陽性對照物接受10μM濃度之有效抑制劑化合物(例如，cas 2055397-28-7、苯甲酸、3-氟-5-(2-吡啶基)-、2-[(2-氟苯基)磺醯基]醯肼)(Baell,J.、Nguyen,H.N.、Leaver,D.J.、Cleary,B.L.、Lagiakos,H.R.、Sheikh,B.N.、Thomas.T.J.,Aryl sulfonohydrazides,WO2016198507A1,2016)，且200μL轉移至細胞中。在培育持續24小時之後，細胞在室溫下用PBS中之3.7%甲醛固定持續20分鐘，用含有0.1% Tween 20之磷酸鹽緩衝生理食鹽水洗滌(5×5分鐘)且用含有0.1% TritonX100之Odyssey阻斷緩衝液(LI-COR,Lincoln,NE)阻斷。添加在含有0.1% Tween 20之Odyssey阻斷緩衝液中之抗H3K23ac特異性抗體(Abcam ab177275)且在攝氏4度下培育持續16小時。在洗滌(如上)之後，添加經Alexa647染料(LifeTechnologies)及Hoechst 33342(1μg/mL，SigmaAldrich)標記之第二抗體用於1小時培育。板如先前經洗滌且在PerkinElmer Phenix高含量成像平台上讀數。使用Columbus圖像分析管線，藉由Hoechst 33342染色定位個別細胞核且自相同區域中之Alexa647相關強度計算乙醯化水準。所得平均強度/細胞相對於 同一板上之對照物直接地經轉化為百分比抑制且數據針對四參數邏輯模型進行擬合以測定50%抑制濃度(IC50)。
結果顯示於下表6中：
Figure 108121417-A0202-12-0253-190
組蛋白H3離胺酸14乙醯化生物標記物分析
化合物在以下分析中針對其抑制組蛋白H3離胺酸14標記物之乙醯化的能力經測試：細胞株U2OS在補充有10%胎牛血清及10mM Hepes之RPMI培養基中以3,000個細胞/孔之密度接種於384孔光學品質組織培養板中。使細胞在標準培養條件(攝氏37度，5% CO2)下黏附持續24小時。在此時期結束時，細胞用無血清培養基洗滌。在DMSO中製備之化合物稀釋液添加至無血清培養基中，其中陰性對照孔經預留以僅用DMSO處理且100%抑制陽性對照物接受10μM濃度之有效抑制劑化合物(例如，(Z)-4-氟-N-((3-羥基苯基)磺醯基)-5-甲基-[1,1'-聯苯基]-3-甲酸肼)。在培育持續24小時之後，細胞在室溫下用PBS中之4%甲醛固定持續15分鐘，用磷酸鹽緩衝生理食鹽水洗滌且用含有0.2% TritonX100及2% BSA之阻斷緩衝液阻斷。添加在阻斷緩衝液中之抗H3K14ac特異性抗體(Cell Signalling Technologies)且在攝氏4度下培育隔夜。在洗滌之後，在室溫下添加經AlexaFluor 488染料(ThermoFisher)及Hoechst 33342(1μg/mL，Life Technologies)標記之第二抗體用於2小時培育。板經洗滌且在PerkinElmer Opera HCS高含量成像平台上讀數。使用Columbus圖像分析管線，藉由Hoechst 33342染色定位個別細胞 核且自相同區域中之AlexaFluor 488相關強度計算乙醯化水準。所得平均強度/細胞相對於同一板上之對照物經轉化為百分比抑制且數據針對四參數邏輯模型進行擬合以測定50%抑制濃度(IC50)。
結果顯示於下表7中：
Figure 108121417-A0202-12-0254-191
H2A.Z離胺酸7乙醯化生物標記物分析
化合物在以下分析中針對其抑制組蛋白H2A.Z離胺酸7乙醯化標記物之能力經測試：細胞株U2OS在補充有10%胎牛血清及10mM Hepes之RPMI培養基中以3,000個細胞/孔之密度接種於384孔光學品質組織培養板中。使細胞在標準培養條件(攝氏37度，5% CO2)下黏附持續24小時。在此時期結束時，細胞用無血清培養基洗滌。在DMSO中製備之化合物稀釋液添加至無血清培養基中，其中陰性對照孔經預留以僅用DMSO處理且100%抑制陽性對照物接受30μM濃度之有效抑制劑化合物對映異構體1 7-碘-N-(2-(噁唑-2-基)-2-苯基乙基)-2H-苯并[e][1,2,4]噻二嗪-3-甲醯胺1,1-二氧化物，其為2018年8月31日申請之同在申請中之申請案GB1713962.7的化合物146。在培育持續24小時之後，細胞在室溫下用PBS中之4%甲醛固定持續15分鐘，用磷酸鹽緩衝生理食鹽水洗滌且用含有0.2% TritonX100及2% BSA之阻斷緩衝液阻斷。添加在阻斷緩衝液中之抗H2A.ZK7ac 特異性抗體(Abcam)且在攝氏4度下培育隔夜。在洗滌之後，在室溫下添加經AlexaFluor 488染料(ThermoFisher)及Hoechst 33342(1μg/mL，Life Technologies)標記之第二抗體用於2小時培育。板經洗滌且在PerkinElmer Opera HCS高含量成像平台上讀數。使用Columbus圖像分析管線，藉由Hoechst 33342染色定位個別細胞核且自相同區域中之AlexaFluor 488相關強度計算乙醯化水準。所得平均強度/細胞相對於同一板上之對照物經轉化為百分比抑制且數據針對四參數邏輯模型進行擬合以測定50%抑制濃度(IC50)。
結果顯示於下表8中：
Figure 108121417-A0202-12-0255-192
發明陳述
1.一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法方法中：
Figure 108121417-A0202-12-0255-344
 其中R1、R2、R3及R4係獨立地選自：
(i)H；
(ii)C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基， C1-2烷氧基，其視情況經一或多個氟基取代，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，醯基醯胺基，或一或多個氟基；
(iii)C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代；
(iv)C3-6環烷基；
(v)鹵基；
(vi)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；
(vii)氰基、NH2或NO2；及
(viii)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、氰基、羥基或甲氧基取代；Ar為苯基、萘基或C5-10雜芳基，該等基團視情況經選自以下之一或多個基團取代：
(i)C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代；
(ii)C3-6環烷基；
(iii)羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基；
(iv)鹵基；
(v)C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代；
(vi)苯氧基，其視情況經氟取代；
(vii)苯基或C5-6雜芳基；
(viii)SF5或SO2CH3；
(ix)-(CH2)n-Y-，其中Y為O或CH2，且n為2或3；或
(X)C1-4烷基酯。
2.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為H。
3.如陳述第1項或陳述第2項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4之一為H。
4.如陳述第1項或陳述第2項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之兩者為H。
5.如陳述第1項或陳述第2項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之三者為H。
6.如陳述第1項或陳述第2項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H。
7.如陳述第1項至第6項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，其視情況經一或多個氟基取代，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，醯基醯胺基，或一或多個氟基。
8.如陳述第7項之供使用之化合物，其中該C1-3烷基未經取代。
9.如陳述第7項之供使用之化合物，其中該C1-3烷基係經全氟化。
10.如陳述第7項之供使用之化合物，其中該C1-3烷基經選自以下之基團取代：
(i)羥基；
(ii)C1-2烷氧基：
(iii)NH2；
(iv)苯基；
(v)C5-6雜芳基；
(vi)C1-4烷基胺甲醯基；及
(vii)醯基醯胺基。
11.如陳述第1項至第10項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代。
12.如陳述第11項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基未經取代。
13.如陳述第11項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經全氟化。
14.如陳述第11項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經C3-6環烷基取代。
15.如陳述第1項至第14項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C3-6環烷基。
16.如陳述第15項之供使用之化合物，其中該C3-6環烷基為環丙基。
17.如陳述第1項至第16項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為鹵基。
18.如陳述第1項至第17項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2獨立地選自H及甲基。
19.如陳述第1項至第18項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者係選自氰基、NH2及NO2。
20.如陳述第19項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為氰基。
21.如陳述第19項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為NH2。
22.如陳述第19項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為NO2。
23.如陳述第1項至第22項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、氰基、羥基或甲氧基取代。
24.如陳述第23項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為苯基，其視情況經甲基或甲氧基取代。
25.如陳述第23項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C5-6雜芳基，其視情況經一或多個甲基取代。
26.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為甲氧基，R2為CH2OCH3或CH2OCH2CH3且R1及R3為H。
27.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為甲氧基，R2為視情況經甲基或甲氧基取代之苯基，且R1及R3為H。
28.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為甲氧基，R2為視情況經甲基取代之C5-6雜芳基。
29.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為甲氧基，R2為視情況經甲基取代之C6雜芳基。
30.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為甲氧基且R1、R2及R3為H。
31.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為氯，R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H。
32.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R4為氯且R1、R2及R4為H。
33.如陳述第1項之供使用之化合物，其中R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
34.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為苯基，其可未經取代或經取代。
35.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為萘基，其可未經取代或經取代。
36.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為經取代苯基。
37.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為C5-10雜芳基，其可未經取代或經取代。
38.如陳述第37項之供使用之化合物，其中該C5-10雜芳基係選自：喹啉基、苯并噻唑基、喹喔啉基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃及苯并三唑基。
39.如陳述第37項之供使用之化合物，其中該C5-10雜芳基為喹啉基或苯并噻唑基。
40.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為基團：
Figure 108121417-A0202-12-0260-345
41.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經C1-4烷基取代，該C1-4烷基視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代。
42.如陳述第41項之供使用之化合物，其中該C1-4烷基未經取代。
43.如陳述第41項之供使用之化合物，其中該C1-4烷基係經全氟化。
44.如陳述第41項之供使用之化合物，其中該C1-4烷基經選自以下之基團取代：
(i)羥基；
(ii)C1-2烷氧基：
(iii)NH2；及
(iv)C1-4烷基胺甲醯基。
45.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經C3-6環烷基取代。
46.如陳述第45項之供使用之化合物，其中該C3-6環烷基為環己基。
47.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基取代。
48.如陳述第47項之供使用之化合物，其中該取代基為羥基。
49.如陳述第47項之供使用之化合物，其中該取代基為氰基。
50.如陳述第47項之供使用之化合物，其中該取代基為NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基。
51.如陳述第47項之供使用之化合物，其中該取代基為醯基醯胺基。
52.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經鹵基取代。
53.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經C1-3烷氧基取代，該C1-3烷氧基視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代。
54.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基未經取代。
55.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經全氟化。
56.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經羥基取代。
57.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經C(O)NH2取代。
58.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經C3-6環烷基取代。
59.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經苯基取代。
60.如陳述第53項之供使用之化合物，其中該C1-3烷氧基係經C5-6雜芳基取代。
61.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經視情況經氟取代之苯氧基取代。
62.如陳述第61項之供使用之化合物，其中Ar係經苯氧基取代。
63.如陳述第61項之供使用之化合物，其中Ar係經OC6H4F取代。
64.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經苯基或C5-6雜芳基取代。
65.如陳述第64項之供使用之化合物，其中Ar係經苯基取代。
66.如陳述第64項之供使用之化合物，其中Ar係經C5-6雜芳基取代。
67.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經SF5或SO2CH3取代。
68.如陳述第67項之供使用之化合物，其中Ar係經SF5取代。
69.如陳述第67項之供使用之化合物，其中Ar係經SO2CH3取代。
70.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經-(CH2)n-Y-取代，其中Y為O或CH2，且n為2或3。
71.如陳述第70項之供使用之化合物，其中Ar為苯基。
72.如陳述第33項至第39項中任一項之供使用之化合物，其中Ar係經C1-4烷基酯取代。
73.如陳述第72項之供使用之化合物，其中Ar係經C(O)OCH3取代。
74.如陳述第72項之供使用之化合物，其中Ar係經C(O)OC(CH3)3取代。
75.如陳述第1項至第33項及第41項至第74項中任一項之供使用之化合物，其中Ar由式(Ar-1)表示：
Figure 108121417-A0202-12-0262-346
 其中Y為N或C-RA4，且Z為N或C-RA5；且RA1、RA2、RA3、RA4(若存在)及RA5(若存在)係獨立地選自H及關於Ar視情況選用之取代基。
76.如陳述第75項之供使用之化合物，其中RA2為乙基。
77.如陳述第75項之供使用之化合物，其中RA3係選自環烷基；苯氧基；苯基；C5-6雜芳基；SF5；及SO2CH3。
78.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為5-乙基-2-甲氧基苯基。
79.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為5-CF3-2-甲氧基苯基。
80.如陳述第1項至第33項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為2,6-二甲氧基苯基。
81.如陳述第1項之供使用之化合物，其限制條件在於當：R1、R2、R3及R4為H時，Ar不為4-胺基苯基。
82.一種醫藥組合物，其包含如陳述第1項至第81項中任一項之化合物及醫藥學上可接受之賦形劑。
83.一種癌症治療方法，其包含向需要治療之患者投與如陳述第1項至第81項中任一項之化合物或如陳述第82項之醫藥組合物。
84.如陳述第83項之方法，其中該化合物與放射療法及/或化學療法同時或依序投與。
85.一種如陳述第1項至第81項中任一項之化合物用於製造用於治療癌症之藥劑的用途。
86.如陳述第1項至第81項中任一項之化合物或如陳述第82項之醫藥組合物，其用於癌症治療。
87.如陳述第86項之化合物或醫藥組合物，其中該治療係用於與放射療法及/或化學療法同時或依序投與。
88.如陳述第1項至第81項中任一項之化合物或其醫藥鹽。
89.如陳述第88項之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H。
90.如陳述第89項之化合物，其中R3不為CF3。
91.如陳述第89項之化合物，其中R3不為經取代C1-3烷基。
92.如陳述第89項之化合物，其中R3為乙基或丙基。
93.如陳述第89項之化合物，其中R3不為視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、苯基、C5-6雜芳基、C1-4烷基胺甲醯基、醯基醯胺基或經一或多個氟基取代之C1-3烷基。
94.如陳述第88項之化合物，其中R4為甲氧基。
95.如陳述第88項之化合物，其中R4為氯，且R1、R2及R3為H。
96.如陳述第88項之化合物，其中R4為氯，且R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H。
97.如陳述第88項之化合物，其中R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
98.如陳述第88項之化合物，其限制條件在於當：R1、R2及R3為H，且R4為甲氧基時，Ar不為未經取代之萘基。
99.如陳述第88項之化合物，其限制條件在於當：R1、R2、R3及R4為H時，Ar不為2,4,6-三甲基苯基。
100.如陳述第88項之化合物，其限制條件在於當： R1、R2及R4為H，且R3為CF3時，Ar不為2-(二氟甲氧基)苯基。
101.如陳述第88項之化合物，其限制條件在於當：R1、R2、R3及R4為H時，Ar不為4-氟-3-甲基-苯基。
102.如陳述第88項之供使用之化合物，其限制條件在於當：R1、R2、R3及R4為H時，Ar不為4-胺基苯基。
103.一種如陳述第88項至第102項中任一項之化合物之合成方法。
104.如陳述第1項之供使用之化合物，其中：R1、R2、R3及R4係獨立地選自：
(i)H；
(ii)C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基、C1-2烷氧基、NH2、苯基、C5-6雜芳基、C1-4烷基胺甲醯基、醯基醯胺基或一或多個氟基；
(iii)C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代；
(iv)C3-6環烷基；
(v)鹵基；
(vi)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；
(vii)氰基、NH2、NO2；
(viii)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、羥基或甲氧基取代；Ar為苯基、萘基或雜芳基，該等基團視情況經選自以下之一或多個基團取代：
(i)C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代；
(ii)C3-6環烷基；
(iii)羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；醯基醯胺基；
(iv)鹵基；
(v)C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代；
(vi)苯氧基，其視情況經氟取代；
(vii)苯基、C5-6雜芳基
(viii)SF5、SO2CH3；
(ix)-(CH2)n-Y-，其中Y為O或CH2，且n為2或3。
105.如陳述第104項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H。
106.如陳述第104項或第105項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基、C1-2烷氧基、NH2、苯基、C5-6雜芳基、C1-4烷基胺甲醯基、醯基醯胺基或一或多個氟基。
107.如陳述第104項至第106項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代。
108.如陳述第104項至第107項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C3-6環烷基。
109.如陳述第104項至第108項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為鹵基。
110.如陳述第104項至第109項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2獨立地選自H及甲基。
111.如陳述第104項至第110項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者係選自氰基、NH2及NO2。
112.如陳述第104項至第111項中任一項之供使用之化合物，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、羥基或甲氧基取代。
113.如陳述第104項之供使用之化合物，其中：
(a)R4為甲氧基，R2為CH2OCH3或CH2OCH2CH3且R1及R3為H；
(b)R4為甲氧基，R2為視情況經甲基或甲氧基取代之苯基，且R1及R3為H；
(c)R4為甲氧基，R2為視情況經甲基取代之C5-6雜芳基；
(d)R4為甲氧基且R1、R2及R3為H；
(e)R4為氯，R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H；
(f)R4為氯且R1、R2及R4為H；或
(g)R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
114.如陳述第104項至第113項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為：
(a)苯基，其可未經取代或經取代；
(b)萘基，其可未經取代或經取代；或
(c)C5-10雜芳基，其可未經取代或經取代。
115.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經C1-4烷基取代，該C1-4烷基視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代。
116.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係羥C3-6環烷基取代。
117.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基取代。
118.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經鹵基取代。
119.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經C1-3烷氧基取代，該C1-3烷氧基視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代。
120.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經視情況經氟取代之苯氧基取代。
121.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經苯基或C5-6雜芳基取代。
122.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經SF5或SO2CH3取代。
123.如陳述第114項之供使用之化合物，其中Ar係經-(CH2)n-Y-取代，其中Y為O或CH2，且n為2或3。
124.如陳述第104項至第113項中任一項之供使用之化合物，其中Ar由式(Ar-1)表示：
Figure 108121417-A0202-12-0268-347
 其中Y為N或C-RA4，且Z為N或C-RA5；且RA1、RA2、RA3、RA4(若存在)及RA5(若存在)係獨立地選自H及關於Ar視情況選用之取代基。
125.如陳述第124項之供使用之化合物，其中：
(a)RA2為乙基；或
(b)RA3係選自環烷基；苯氧基；苯基；C5-6雜芳基；SF5；及SO2CH3。
126.如陳述第104項至第113項中任一項之供使用之化合物，其中Ar為：
(a)5-乙基-2-甲氧基苯基；
(b)5-CF3-2-甲氧基苯基；或
(c)2,6-二甲氧基苯基。
127.如陳述第104項至第126項中任一項之化合物或其醫藥鹽。
128.如陳述第127項之化合物，其中：
(a)R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H；
(b)R3不為CF3；
(c)R3不為經取代C1-3烷基；
(d)R3為乙基或丙基；
(e)R3不為視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、苯基、C5-6雜芳基、C1-4烷基胺甲醯基、醯基醯胺基或經一或多個氟基取代之C1-3烷基；
(f)R4為甲氧基；
(g)R4為氯，且R1、R2及R3為H；
(h)R4為氯，且R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H；或
(i)R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
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Figure 108121417-A0202-11-0001-351

Claims (13)

  1. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
    Figure 108121417-A0305-02-0273-1
     其中：R1、R2、R3及R4係獨立地選自：(i)H；(ii)C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，或醯基醯胺基；(iii)C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或經一或多個氟基取代；(iv)C3-6環烷基；(v)鹵基；(vi)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；(vii)氰基、NH2或NO2；及(viii)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、羥基或甲氧基取代； Ar為苯基，其視情況經選自以下之一或多個基團取代：(i)C1-4烷基，其視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或經一或多個氟基取代；(ii)C3-6環烷基；(iii)羥基；氰基；NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基；(iv)鹵基；(v)C1-3烷氧基，其視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或經一或多個氟基取代；(vi)苯氧基，其視情況經氟取代；(vii)苯基或C5-6雜芳基；或(viii)SF5或SO2CH3；且其中R1、R2、R3及R4中之至少一者不為H。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷基，其視情況經以下取代：羥基，C1-2烷氧基，NH2，苯基，C5-6雜芳基，C1-4烷基胺甲醯基，或醯基醯胺基。
  3. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為C1-3烷氧基，其視情況經C3-6環烷基或一或多個氟基取代。
  4. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1、R2、R3及R4中之至少一者為(a)C3-6環烷基；(b)CORC，其中RC係選自NRN1RN2，其中RN1及RN2係獨立地選自H及甲基；(c)氰基、NH2或NO2；或(d)苯基或C5-6雜芳基，其視情況經甲基、羥基或甲氧基取代。
  5. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：(a)R4為甲氧基，R2為CH2OCH3或CH2OCH2CH3，且R1及R3為H；(b)R4為甲氧基，R2為視情況經甲基或甲氧基取代之苯基，且R1及R3為H；(c)R4為甲氧基，R2為視情況經甲基取代之C5-6雜芳基；(d)R4為甲氧基且R1、R2及R3為H；(e)R4為氯，R2為C1-3烷基或溴，且R1及R3為H；或(f)R3為C1-3烷基且R1、R2及R4為H。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ar係經C1-4烷基取代，該C1-4烷基視情況經羥基、C1-2烷氧基、NH2、C1-4烷基胺甲醯基或一或多個氟基取代。
  7. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ar係經C1-3烷氧基取代，該C1-3烷氧基視情況經羥基、C(O)NH2、C3-6環烷基、苯基、C5-6雜芳基或一或多個氟基取代。
  8. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ar係經以下取代(a)C3-6環烷基；(b)羥基；(c)氰基；(d)NRN3RN4，其中RN3及RN4係獨立地選自H及甲基；或醯基醯胺基；(e)視情況經氟取代之苯氧基；(f)苯基或C5-6雜芳基；或(g)SF5或SO2CH3。
  9. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Ar為：(a)5-乙基-2-甲氧基苯基；(b)5-CF3-2-甲氧基苯基；或(c)2,6-二甲氧基苯基。
  10. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑。
  11. 一種如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項10之醫藥組合物之用途，其係用於製備治療癌症之藥劑。
  12. 如請求項11之用途，其中該癌症係選自白血病、急性淋巴細胞白血病(ALL)、急性骨髓白血病(AML)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、慢性骨髓白血病(CML)、非霍奇金氏淋巴瘤、霍奇金氏病、前列腺癌、肺癌、黑色素瘤、乳癌、結腸直腸癌、結腸癌、鱗狀細胞癌及胃癌。
  13. 如請求項11之用途，其中該藥劑係與放射療法及/或化學療法同時或依序投與。
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