TWI473572B - An extract containing equol (EQUOL), a method for producing the same, an equol extraction method and an equol-containing food - Google Patents

An extract containing equol (EQUOL), a method for producing the same, an equol extraction method and an equol-containing food Download PDF

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松岡邦彥
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只野健太郎
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Description

含雌馬酚(EQUOL)之萃取物、其製造方法、雌馬酚萃取方法及含雌馬酚之食品 技術領域
本發明係關於一種由含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物萃取出有用成分之含雌馬酚萃取物以及其製造方法。此外，本發明係關於一種有效率地從雌馬酚含有物純化出高純度雌馬酚的方法。本發明更是關於一種含雌馬酚之食品素材以及含雌馬酚之食品。
 背景技術
大豆中所含異黃酮(大豆異黃酮；木質素黃酮(Daidzein)、金雀素黃酮(genistein)、黃豆素黃酮(Glycitein))與雌二醇結構類似，隨著與動情素受體(以下記為ER)結合而具有抗動情素作用及類動情素作用。從迄今之大豆異黃酮的流行病學研究及介入研究，暗示了其因抗動情素作用而具有預防乳癌及前列腺癌等激素相關性癌症的效果，且因類動情素作用而具有改善更年期障礙、停經後之骨質疏鬆症及高血脂症的效果。
近年來，指出大豆異黃酮之生理作用活性本體為木質素黃酮代謝物之雌馬酚的可能性。即，已有報告指出，雌馬酚與大豆異黃酮相較下，與ER之結合能(特別是與ERβ 結合)更強，朝乳房或前列腺組織等標的臟器之移動性顯著較高(參照非專利文獻1－4)。此外，於患者對照研究中，已報導指出乳癌、前列腺癌患者中之雌馬酚產生者明顯較 少，且亦報導指出，若將大豆異黃酮對於停經後之骨密度及脂質代謝的改善效果分為雌馬酚產生者與非產生者來進行解析，雌馬酚產生者有明顯改善。
雌馬酚係由木質素黃酮經腸內細菌代謝而產生者，但雌馬酚產生能有個人差異，已有報導指出，日本人之雌馬酚產生者的比例為約占50%。意即，日本人中約50%為無法產生雌馬酚之人(雌馬酚非產生者)，而此種人即使攝取大豆或大豆加工食品，亦無法享受到基於雌馬酚作用之有用生理效果。因此，為了使雌馬酚非產生者表現出基於雌馬酚作用之有用生理效果，直接攝取雌馬酚被認為是有效的。
【非專利文獻1】Morito K,HiroseT,Kinjo J,Hirakawa T,Okawa M,Nohara T,Ogawa S,Inoue S,Muramatsu M,Masamune Y.Interaction of phytoestrogens with estrogen receptorsα andβ .Biol Pharm Bull 24(4)：351－356,2001 【非專利文獻2】Maubach J,Bracke ME,Heyerick A,Depypere HT,Serreyn RF,Mareel MM,Keukeleire DD.Quantitation of soy－derived phytoestrogens in human breast tissue and biological fluids by high－performance liquid chromatography.J Chromatography B 784：137－144,2003 【非專利文獻3】 Morton MS,Chan PSF,Cheng C,Blacklock N,Matos－Ferreira A,Abranches－Monteiro L,Correia R,Lloyd S,Griffiths K.Lignans and isoflavonoids in plasma and prostatic fluid in men：Samples from Portugal,Hong Kong,and the United Kingdom.Prostate 32：122－128, 1997 【非專利文獻4】Tammy EH,Paul DM,Paul GF,Robert D,Stephen B,Kenneth J,Ray M,Lorraine GO,Kristiina W,Holly MS,Karen JG.Long－term dietary habits affect soy isoflavone metabolism and accumulation in prostatic fluid in caucasian men.J Nutr 135：1400－1406,2005
 發明之揭示
至今為止，本案發明人已發現，以產生雌馬酚之微生物使大豆胚軸發酵而獲得之大豆胚軸發酵物可作為含有雌馬酚之食品素材。該大豆胚軸發酵物不僅只有雌馬酚，也含有異黃酮及皂苷等源自大豆之有用成分，據此可表現出有用之生理效果，因此已確知其作為機能性素材甚為有用。再者，已確認該大豆胚軸發酵物中源自大豆胚軸之致敏原降低，作為低致敏原素材亦甚為有用。如前述，本發明人所發現之前述大豆胚軸發酵物顯示出基於含有成分之有用生理活性，且為低致敏性，因此得知其作為機能性食品素材甚為有用。
另一方面，前述大豆胚軸發酵物中之雌馬酚含量雖依製造所用之大豆胚軸種類、產生雌馬酚之微生物種類等而異，多為1重量%程度。於此，若能提供雌馬酚含有比例更提高之素材，則可因應食品形態之多樣化等，容易地提供各種類型之含雌馬酚食品。然而，迄今為止，前述大豆胚 軸發酵物本身並非習用公知，且何種手法可有效地從前述大豆胚軸發酵物萃取出包含雌馬酚之有用成分，此點亦尚未明朗化。
再者，藉前述大豆胚軸發酵物之發酵法獲得的雌馬酚含有物相較於化學合成方法具有安全性較高，且適合工業製造的優點。然而，以發酵法獲得之雌馬酚含有物亦包含雌馬酚以外之代謝產物，亦殘存有源自原料之多種成分。此外，依發酵所用原料種類而異，發酵法所得雌馬酚含有物也可能混有將成為致敏原之物質。因此，若欲將雌馬酚作為食品及藥品所使用之添加劑來加以應用，不僅是製造雌馬酚之技術，開發出高純度純化雌馬酚之技術亦是不可或缺的。但是，至目前為止，幾乎未有關於純化雌馬酚之方法被報告出，因此，需要確立一種可作工業應用、可有效且簡便地純化雌馬酚至高純度的技術。
此外，前述大豆胚軸發酵物兼具有源自大豆胚軸之苦味及源自雌馬酚之苦味，作為食品素材加以利用時，在風味上必須非常小心注意。然而，前述大豆胚軸發酵物是一種從來未被報導到的新穎食品素材，而不知何種方法可有效改善其風味。特別是，將前述大豆胚軸發酵物利用在烘烤點心時，製造時因供予燒烤步驟而容易發生風味劣化，欲使添加有前述大豆胚軸發酵物之烘烤點心呈現出良好風味乃是一種非常困難之技術課題。
於此，本發明之目的在於提供一種從含雌馬酚之大豆胚軸發酵物萃取包含雌馬酚之有用成分的萃取物以及製造 其之方法。此外，本發明之目的在於提供一種從雌馬酚含有物有效率地純化出高純度雌馬酚之方法。再者，本發明之目的在於提供一種食品素材，其含有以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得之含雌馬酚大豆胚軸發酵物或其萃取物，且風味已受到改善。另外，本發明之目的在於提供一種食品(特別是烘烤點心)，其含有該含雌馬酚大豆胚軸發酵物，且呈現出良好之風味。此外，本發明之目的在於，提供含有含雌馬酚大豆胚軸發酵物或其萃取物之各種形態的食品。
本案發明人為了解決上述課題而精心研討，意外發現：使用乙醇水溶液作為萃取溶劑而對含雌馬酚之大豆胚軸發酵物進行萃取處理，可有效率地從該大豆胚軸發酵物萃取出包含雌馬酚之有用成分。再者，亦發現對含雌馬酚之大豆胚軸發酵物依序實施使用乙醇水溶液之萃取處理及使用乙醇之萃取處理，可藉此有效率地萃取出雌馬酚及黃豆素黃酮，同時可減低造成澀味、苦味、嗆味等不快氣味之成因的皂苷含量。
再者，本案發明人發現，將含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮於pH2~6之水溶液中並回收不溶物，再使用乙醇水溶液作為萃取溶劑對如此製得之不溶物進行萃取處理，可藉此製出雌馬酚係經高濃度濃縮之含雌馬酚萃取物。
此外，本案發明人發現，藉由歷經以下(1)~(5)之操作，可有效率且簡便地純化出高純度雌馬酚，即：(1)使用乙醇 水溶液萃取處理雌馬酚含有物；(2)再使用乙醇萃取處理所得萃取物；(3)使用己烷萃取處理所得萃取物；(4)使用己烷及醚之混合液萃取處理不溶性分液；(5)將所得萃取液供予二氧化矽凝膠管柱層析，獲得含雌馬酚之分液。
再者，本案發明人發現，藉由歷經下述(i)~(iii)之操作亦可有效率且簡便地純化出高純度雌馬酚：(i)使用特定有機溶劑或其含水有機溶劑萃取處理雌馬酚含有物，濃縮所得萃取液；(ii)將所得濃縮物供予二氧化矽凝膠管柱層析，獲得含雌馬酚之分液；(iii)從所得含雌馬酚之分液去除溶劑，對所得殘留物進行再結晶化處理。
此外，本案發明人發現，若使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物分散於可可塊而成食品素材，源自含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的苦味將會受到抑制，而呈現出良好之風味。此外，亦發現此種食品素材可無損風味地利用在以烘烤點心為始之各種食品上。
再者，本案發明人成功地開發出配合有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的各種形態食品。
本發明係基於上述見解而更反覆改良而終至完成者。
本發明提供下述含雌馬酚之萃取物的製造方法。
第1－1項 一種含雌馬酚之萃取物之製造方法，包含：第I－1步驟，係使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，將含雌馬酚之大豆胚軸發酵物進行萃取處理並回收萃取液者。
第1－2項 如第1－1項之製造方法，其更包含第I－2步驟，即：從第I－1步驟所得萃取液去除萃取溶劑後，使用乙 醇作為萃取溶劑進行萃取處理，並回收萃取液者。
第1－3項 如第1－1項之製造方法，其中該第I－1步驟所使用之乙醇水溶液中的乙醇濃度為20~98容量%。
第1－4項 如第1－1至1－3項中任一項之製造方法，其中該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得者。
第1－5項 一種含雌馬酚之萃取物的製造方法，係從含雌馬酚之大豆胚軸發酵物製造含雌馬酚之萃取物，包含下述第II－1步驟及第II－2步驟，即：第II－1步驟，係使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮於水中，加入酸調整為pH2~6，並回收不溶物；及，第II－2步驟，使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，對該第II－1步驟所得不溶物進行萃取處理，並回收萃取液。
第1－6項 如第1－5項之製造方法，其中該第II－1步驟所使用之酸為乙酸。
此外，本發明提供如下所揭示之含雌馬酚萃取物。
第2－1項 一種含雌馬酚之萃取物，係使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，將含雌馬酚之大豆胚軸發酵物進行萃取處理而獲得者。
第2－2項 一種含雌馬酚之萃取物，係對含雌馬酚之大豆胚軸發酵物依序實施使用乙醇水溶液之萃取處理及使用乙醇之萃取處理而製得者。
第2－3項 一種含雌馬酚之萃取物，係以如第1－1項至第1－6項中任一項之製造方法製得者。
此外，本發明提供如下揭示之雌馬酚純化方法。
第3－1項 一種從雌馬酚含有物純化出雌馬酚之方法，包含以下第1－1步驟~第1－5步驟，即：第1－1步驟，使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，將雌馬酚含有物進行萃取處理，並回收萃取液；第1－2步驟，從該第1－1步驟所得萃取液去除溶劑後，使用乙醇作為萃取溶劑，對所得殘留物進行萃取處理，並回收萃取液；第1－3步驟，從該第1－2步驟所得萃取液去除溶劑後，使所得殘留物懸浮於己烷中，並回收不溶物；第1－4步驟，使用己烷與醚之混合液作為萃取溶劑，對該第1－3步驟所得不溶物進行萃取處理，並回收萃取液；及第1－5步驟，將前述第1－4步驟所得萃取液供予二氧化矽凝膠管柱層析，並回收含有雌馬酚之分液。
第3－2項 如第3－1項之純化方法，其中該雌馬酚含有物為含有雌馬酚之發酵物。
第3－3項 如第3－2項之純化方法，其中該含有雌馬酚之發酵物係以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得的含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
第3－4項 如第3－1至3－3項中任一項之純化方法，其中該第1－4步驟所使用之萃取溶劑為己烷與二乙醚之混合液。
第3－5項 如第3－1至3－4中任一項之純化方法，其中該第1－4步驟所使用之萃取溶劑係己烷與醚為10：90~20：80之容量比的混合液。
第3－6項 如第3－1至3－5中任一項之製造方法，其中該第1－1步驟所用乙醇水溶液中之乙醇濃度為20~98容量%。
第3－7項 一種從雌馬酚含有物純化出雌馬酚之方 法，包含下述第2－1步驟~第2－3步驟，即：第2－1步驟，係使用選自於由乙酸乙酯、醇、丙酮、二噁烷、乙腈、二乙醚及甲苯所構成群組中之至少1種有機溶劑或是其含水有機溶劑作為萃取溶劑，對雌馬酚含有物進行萃取處理，並回收萃取液者；第2－2步驟，係將該第2－1步驟所得萃取液供予二氧化矽凝膠管柱層析，而獲得含有雌馬酚之分液者；及，第2－3步驟，係從該第2－2步驟所得含雌馬酚之分液去除溶劑，對所得殘留物進行再結晶化處理，並回收析出之結晶者。
第3－8項 如第3－7項之純化方法，其於第2－3步驟中，係於使用乙酸乙酯與己烷之混合液進行再結晶處理後，更進行使用醇水溶液之再結晶處理。
本發明更提供下揭有關食品素材及利用其之食品的發明。
第4－1項 一種食品素材，係使含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物分散於可可塊而成者。
第4－2項 如第4－1項之食品素材，其中相對於該含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物100重量份，所含可可塊係佔10~2000重量份之比率。
第4－3項 如第4－1或4－2項之食品素材，其中該含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物係以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得者。
第4－4項 如第4－3項之食品素材，其中該雌馬酚產生微生物係一具有資化木質素黃酮類而產生雌馬酚之能力的微 生物，且該木質素黃酮類係選自木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中之至少1種。
第4－5項 如第4－1至4－4項中任一項之食品素材，其係呈粒狀、片狀、或平板狀。
第4－6項 一種含雌馬酚之食品，含有如第4－1至4－5項中任一項之食品素材。
第4－7項 如第4－6項之含雌馬酚之食品，其係烘烤點心。
本發明更提供下掲食品。
第5－1項 一種食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－2項 一種飲料，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－3項 一種補充品(supplement)，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－4項 一種奶油狀食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－5項 一種甜點，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－6項 一種點心，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－7項 一種調味料，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－8項 一種殺菌袋食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸 發酵物或其萃取物。
第5－9項 一種加工肉食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－10項 一種膏狀食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－11項 一種蛋加工食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－12項 一種罐頭或罐裝食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－13項 一種麵包，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－14項 一種冷凍甜點，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－15項 一種大豆加工食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－16項 一種米飯食品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－17項 一種湯品，含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物。
第5－18項 如第5－1至5－18項中任一項之食品，其中該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得者。
第5－19項 如第5－18項之食品，其中該雌馬酚產生微生物係一具有將木質素黃酮類資化而產生雌馬酚之能力的微 生物，且該木質素黃酮類係選自於由木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中之至少1種。
圖式簡單說明
第1圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含總蛋白質之結果(電泳圖)。
第2圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含主要致敏原(Gym4、Gm30K、Gm28K)之結果(電泳圖)。
第3圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含主要致敏原(7S球蛋白mix、油體蛋白(Oleosins)、胰蛋白酶抑制因子(trypsin inhibitor))之結果(電泳圖)。
第4圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及2－2之雌馬酚含量的結果。
第5圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及2－2之皂苷含量的結果。
第6圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及殘渣2之雌馬酚含量的結果。
第7圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及殘渣2之皂苷含量的結果。
第8圖顯示實施例2－1中將藉二氧化矽凝膠管柱層析溶出之溶出液供予TLC(薄層層析)分析的結果。
依據本發明之含雌馬酚之萃取物的製造方法，可從含 雌馬酚之大豆胚軸發酵物有效率地萃取出包含雌馬酚之有用成分，進而製造出作為機能性食品素材甚有用的含雌馬酚之萃取物。此外，藉由對含雌馬酚之大豆胚軸發酵物依序實施使用乙醇水溶液之萃取處理及使用乙醇之萃取處理，可獲得含高濃度雌馬酚及黃豆素黃酮且皂苷(令人不快氣味之成因)減低的含雌馬酚之萃取物。因此，該含雌馬酚之萃取物具有不致對風味造成不良影響而可配合於食品中之優點。
此外，依據本發明之純化方法，可簡便且有效率地從雌馬酚含有物獲得高純度雌馬酚。特別是，即使雌馬酚含有物中混有與雌馬酚結構類似之異黃酮，本發明之純化方法可除去該等異黃酮而高純度地純化出雌馬酚。因此，本發明之純化方法適合使用在從含有多量異黃酮之含雌馬酚的發酵物中純化出雌馬酚。
再者，使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物分散至可可塊而成的本發明食品素材在含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的同時，苦味仍受到抑制而具有良好之風味。此外，本發明之食品素材具有可利用於各種食品卻不會伴有風味惡化的優點。另外，即使以粒狀或片狀形式將習知之食品素材配合至烘烤點心中，由於烘烤步驟使得食品素材所含成分有擴散至烘烤點心整體的傾向，有時無法獲得所需之風味。相對於此，本發明之食品素材係藉由可可塊使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物處於被包住之狀態，因此，即使以粒狀或片狀利用在烘烤點心上，亦可抑 制食品素材所含有效成分之擴散，可呈現所期望之風味。
再者，依照本發明之各種形態的食品，可享受基於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的有用生理作用。
另外，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物中，由於大豆胚軸所含致敏原減低，本發明之食品素材及各種形態之食品亦具有大豆過敏症人士亦可安全攝取之優點。
 本發明之最佳實施型態
茲就本發明說明如下。
1.含有雌馬酚之萃取物的製造方法
本發明提供一種使用含雌馬酚之大豆胚軸發酵物作為原料來製造含雌馬酚之萃取物的方法。具體來說，本發明之含有雌馬酚之萃取物的製造方法大致分為後述之第I方法及第II方法等2種手法。茲就本發明製造方法中用作原料的含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物以及第I方法及第II方法之具體內容詳述於下。
含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物 本發明之含有雌馬酚之萃取物的製造方法係使用含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物作為原料。以下就含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物加以說明。
含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物係指：以雌馬酚產生微生物使大豆胚軸發酵而獲得之大豆胚軸發酵物。
使用於製造該含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物的雌馬酚產生微生物係使用具有資化木質素黃酮類而產生雌馬酚之 能力(代謝活性)的微生物，且該木質素黃酮類係選自木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中至少1種。於此，具體來說，木質素黃酮配糖體可列舉如大豆苷(Daidzin)、丙二醯大豆苷(Malonyl Daidzin)及乙醯大豆苷等。
前述雌馬酚產生微生物僅需為食品衛生上可接受且具有上述能力者即可，未特別受限，可使用習用公知或以通常方法篩選者。例如，已知於格氏乳球菌(Lactococcus garvieae )等隸屬於乳球菌屬之微生物；中間鏈球菌(Streptococcus intermedius )、星狀鏈球菌(Streptococcus constellatus )等隸屬於鏈球菌屬之微生物；卵形類桿菌(Bacteroides ovatus )等隸屬於類桿菌屬之微生物之中存有具雌馬酚產生能之微生物。雌馬酚產生微生物之中，較佳者可列舉如乳球菌屬及鏈球菌屬等之乳酸菌，更佳者可列舉如隸屬於乳球菌屬之乳酸菌，而尤佳者可列舉如格氏乳球菌。舉例來說，可以有無雌馬酚產生能作為指標而從人類糞便中離析出雌馬酚產生微生物。至於前述雌馬酚產生微生物，本案發明人等業已寄存有從人類糞便離析並經鑑定之菌株，即，乳球菌20－92(FERM BP－10036號)、鏈球菌E－23－17(FERM BP－6436號)、鏈球菌A6G225(FERM BP－6437號)及類桿菌E－23－15(FERM BP－6435號)，本發明可使用該等寄存菌株。該等寄存菌株中，乳球菌20－92可適於使用。
該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物可使用大豆胚軸作為發酵原料而製出。大豆胚軸係指大豆發芽時會成為幼芽、幼 根之部分，已知含有多量木質素黃酮配糖體及木質素黃酮等木質素黃酮類。本發明所使用之大豆胚軸以所含木質素黃酮類未明顯損失為限，大豆產地及加工之有無並未特別受到限制。例如，可為生鮮狀態者；從業已供加熱處理、乾燥處理、蒸煮處理等之大豆分離出者；以及將從未加工大豆分離出之胚軸供加熱處理、乾燥處理或蒸煮處理等者中之任一者皆可。此外，使用之大豆胚軸亦可為業已供脫脂處理及脫蛋白處理者。另，所使用之大豆胚軸形狀1並未特別受限，可為粉末狀、經粉碎或破碎之粒狀或塊狀。從更有效率地產生雌馬酚之觀點來看，宜使用粉末狀之大豆胚軸。
將適量之水加入大豆胚軸調整水分含量，於其中接種前述雌馬酚產生微生物以進行大豆胚軸之發酵處理。
添加於大豆胚軸之水量可依所用雌馬酚產生微生物之種類及發酵槽之種類等而適宜地設定。通常僅需於發酵開始時使大豆胚軸與水以下述比例共存即可：相對於大豆胚軸(乾燥重量換算)100重量份，水為400~4000重量份，且宜為500~2000重量份，更宜為800~1000重量份。
此外，大豆胚軸發酵時，以促進發酵效率及提高發酵物之風味等作為目的，成為發酵原料之大豆胚軸中可依需要而添加酵母萃取、聚蛋白腖、肉精等氮源；葡萄糖、蔗糖等碳源；磷酸鹽、碳酸鹽、硫酸鹽等無機鹽；維生素類；胺基酸等營養成分。特別是使用具有將精胺酸轉換為鳥胺酸之能力者(以下，記為「鳥胺酸．雌馬酚產生微生物」) 作為雌馬酚產生微生物時，可於大豆胚軸中添加精胺酸進行發酵，可藉此使所得發酵物含有鳥胺酸。此時，舉例來說，精胺酸之添加量可例示如：相對於大豆胚軸(乾燥重量換算)100重量份，精胺酸為0.5~3重量份程度。此外，可以雌馬酚產生能與從精胺酸轉換為鳥胺酸之轉換能作為指標，以習知之篩選方法獲得鳥胺酸．雌馬酚產生微生物。舉例而言，鳥胺酸．雌馬酚產生微生物可選自格氏乳球菌，其具體例可列舉如乳球菌20－92(FERM BP－10036號)。
再者，就所使用發酵原料(大豆胚軸含有物)之pH而言，僅需可使雌馬酚產生微生物生育即可，並未特別受限，但從可使雌馬酚產生微生物良好增殖的觀點來看，宜將發酵原料之pH預先調整至8~7程度，且較宜為8.3~8.8程度。
此外，所使用之發酵原料(大豆胚軸含有物)更可事先添加包含前述木質素黃酮類之異黃酮。藉由如前述般於發酵原料中預先另行添加異黃酮，可使所得大豆胚軸發酵物中之雌馬酚含量更為提高，而進一步提升其有用性。
大豆胚軸之發酵可於因應所用雌馬酚產生微生物之生育特性的環境條件下實施。舉例來說，只要是使用前述具體列舉之雌馬酚產生微生物，大豆胚軸之發酵即係於厭氧性條件下進行。
此外，發酵溫度僅需為適合雌馬酚產生微生物生育之條件即可，舉例來說，可列舉如20~40℃，宜為35~40℃，更宜為38~38℃。
發酵時間可依雌馬酚產生量、木質素黃酮類殘存量、 雌馬酚產生微生物之種類等而適當設定，但通常為1~10日，且宜為2~7日，更宜為3~5日。
以上述條件發酵處理而獲得之大豆胚軸發酵物已有雌馬酚產生並蓄積，可表現雌馬酚之有用生理作用。就大豆胚軸發酵物中之雌馬酚含量而言，係依所用雌馬酚產生微生物及發酵條件等而異，一般而言，以大豆胚軸發酵物之平均乾燥重量計(令大豆胚軸發酵物之乾燥重量為1g時)，含有雌馬酚為1~20mg，且宜為2~12mg，更宜為5~8mg。
該含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物中，除了雌馬酚以外，亦含有：大豆苷、丙二醯大豆苷、乙醯大豆苷、木質素黃酮及二氫木質素黃酮等之木質素黃酮類(以下，將該等成分記為「木質素黃酮類」)；染料木苷(genistin)、丙二醯染料木苷、乙醯染料木苷、金雀素黃酮、二氫金雀素黃酮等之金雀素黃酮類(以下將該等成分記為「金雀素黃酮類」)；黃豆苷(Glycitin)、丙二醯黃豆苷、乙醯黃豆苷、黃豆素黃酮、二氫黃豆素黃酮等之黃豆素黃酮類(以下將該等成分記為「黃豆素黃酮類」)等之各種異黃酮，且亦可表現出該等異黃酮之有用生理活性。含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物中之異黃酮(包含雌馬酚)含量係依所使用之雌馬酚產生微生物及發酵條件等而異，但一般而言，可例示如：含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的乾燥重量每1g，異黃酮為5~20mg，且宜為5~15mg，更宜為8~15mg程度。
此外，含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物即使在雌馬酚以外之異黃酮組成之點上，亦具有與大豆胚軸不同之組成。 特別是，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物中之金雀素黃酮類的總含有率以含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的異黃酮總量計，低至15重量%以下，且宜為12重量%以下；從異黃酮組成之觀點來看，與發酵前之大豆胚軸相較亦較有利。另，金雀素黃酮類是一種擔憂會作為內分泌擾亂物質而作用之異黃酮，於食品素材中之濃度以儘量減少為宜(Young HJ,Jodi F,Kimberly FA,Daniel RD,William GH.Effects of dietary daidzein and its metabolite,equol,at physiological concentrations on the growth of estrogen－dependent human breast cancer(MCF－7)tumors implanted in ovariectomized athymic mice.Carcinogenesis 127(4)：856－863,2006參照)。
具體來說，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物可例示如以下之異黃酮組成者(以下之單位「mg」表示大豆胚軸發酵物每1g(乾燥重量)之各異黃酮總量)：雌馬酚：1~20mg，宜為2~12mg木質素黃酮類：0.1~30mg，宜為0.1~1.5mg金雀素黃酮類：0.05~2.5mg，宜為0.05~2mg黃豆素黃酮類：0.1~4mg，宜為2~3.5mg。
此外，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物所含各異黃酮之組成比率係例示如以下所示範圍(以下之單位「重量%」表示，相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物所含全部異黃酮之合計量的比例)：雌馬酚：30~75重量%，且宜40~70重量%，更宜為45~70重量%； 木質素黃酮類：1~20重量%，且宜為2~15重量%，更宜為4~12重量%；金雀素黃酮類：0.1~20重量%，且宜為1~15重量%，更宜為1~10重量%；黃豆素黃酮類：10~50重量%，且宜為15~35重量%，更宜為25~35重量%。
該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物含有習知技術無法實現之組成的異黃酮，因此其亦可換言為具有前述異黃酮組成之異黃酮含有物質。
製造具有前述組成之異黃酮的含雌馬酚之大豆胚軸發酵物時，特別適合使用乳球菌20－92(FERM BP－10036號)作為雌馬酚產生微生物。
再者，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物亦具有源自大豆胚軸之皂苷。含雌馬酚之大豆胚軸發酵物中之皂苷以含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之每乾燥重量1g計，所含皂苷為10~80mg，且宜為20~50mg，更宜為30~40mg。
此外，如前所述，使用鳥胺酸．雌馬酚產生微生物且將精胺酸添加於大豆胚軸再進行發酵而獲得之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物中含有鳥胺酸。此種含雌馬酚之大豆胚軸發酵物所含鳥胺酸之含量，具體來說可例示如：含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的每乾燥重量1g，鳥胺酸佔5~2mg，且宜為8~15mg，更宜為9~12mg程度。
以前述條件發酵處理而獲得之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物可直接以發酵後之狀態供予本發明之製造方法，但亦 可依需要供予乾燥處理製成乾燥固態物狀後再供至本發明之製造方法。
此外，以前述條件發酵處理獲得之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物亦可於後述之第I－1步驟前先供予脫脂處理等之前處理。脫脂處理可藉由萃取溶劑使用己烷之處理來進行。
1－1.第I方法之製造方法
第I法之製造方法中，係藉由進行下述第I－1步驟來進行含雌馬酚之萃取物的製造。茲就第I法之製造方法詳述於下。
第I－1步驟 本第I方法之含雌馬酚之萃取物製造方法包含：第I－1步驟，係使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，將含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物進行萃取處理，並回收萃取液。
本第I－1步驟所使用之乙醇水溶液(乙醇與水之混合液)可列舉如：乙醇濃度佔20~98容量%，且宜95~45容量%，更宜85~85容量%。藉由滿足此種濃度範圍，可從含有雌馬酚之大豆胚軸發酵物中有效率地萃取包含雌馬酚之有用成分。
第I－1步驟之萃取處理中，舉例來說，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(乾燥重量換算)每1重量份可使用乙醇水溶液1~1000重量份(宜2~500重量份，更宜為5~20重量份)。
第I－1步驟中萃取處理之處理條件並未特別受限，但可藉冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等進行。具體來說，於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物加入乙醇水溶液，以常溫1分鐘以 上(宜常溫5分鐘~48小時)進行靜置或攪拌即可。
如此進行萃取處理後，藉由回收萃取液即可獲得含雌馬酚之萃取物。具體來說，萃取液之回收可採用過濾及離心分離等習知方法。
如此經第I－1步驟回收之萃取液含有雌馬酚及黃豆素黃酮類的有用成分，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物所含油分降低。如前述第1I－1步驟所得萃取液可直接以液狀或除去萃取溶劑製成固狀而作為含雌馬酚之萃取物配合於食品或藥品中。此外，前述第I－1步驟所得萃取液亦可直接以液狀或去除萃取溶劑製成固狀而供予雌馬酚之純化。
於第I－1步驟回收之萃取液中，除了雌馬酚及黃豆素黃酮類以外，亦同時含有皂苷，其係造成澀味、苦味、嗆味等不快氣味之成因。為了去除該皂苷並提高包含雌馬酚之有用成分的濃度，第I－1步驟所回收之萃取液宜更供予後述之第I－2步驟。
第I－2步驟 第I－2步驟係由第I－1步驟所得萃取液去除萃取溶劑後，使用乙醇作為萃取溶劑使其進行萃取處理，並回收萃取液。
於第I－2步驟中，可藉由乾燥處理等習知方法，從第I－1步驟所得萃取液中去除萃取溶劑。
使用乙醇作為萃取溶劑，將從第I－1步驟所得萃取液去除萃取溶劑而獲得之固態物(以下，有時記為「原料固態物」)進行萃取處理。第I－2步驟中作為萃取溶劑使用之乙醇係未 添加水之乙醇，亦可為吸收有無法避免之水蒸氣者。
第I－2步驟之萃取處理中，舉例來說，原料固態物(乾燥重量換算)每1重量份可使用乙醇1~1000重量份，且宜為5~500重量份，更宜為5~20重量份。
第I－2步驟中之萃取處理之處理條件亦未特別受限，可以冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等來進行。具體來說，於原料固態物加入乙醇，以常溫1分鐘以上(宜常溫5分鐘~48小時)進行靜置或攪拌即可。此外，亦可於第I－2步驟之萃取處理中進行超音波處理，可藉此提高雌馬酚之回收率。
如此進行萃取處理後，可藉由回收萃取液而進一步獲得含雌馬酚之萃取物。具體來說，萃取液之回收可採用過濾或離心分離等習知方法。
如此於第I－2步驟回收之萃取液因包含雌馬酚及黃豆素黃酮類之有用成分比例提高且皂苷含量減低，與第I－1步驟所得萃取液相較下，其有用性更提高。前述第I－2步驟所得萃取液可直接以液狀或去除萃取溶劑製成固態狀而作為含雌馬酚之萃取物，配合至食品或藥品中。此外，前述第I－2步驟所得萃取液亦可直接以液狀或去除萃取溶劑製成固態狀而供予雌馬酚之純化。另，從提高含雌馬酚之萃取物的保存安定性之觀點來看，第I－2步驟所得萃取液宜去除萃取溶劑製成固態狀。
第I方法所得含雌馬酚之萃取物的組成及用途 前述第I－1步驟或第I－2步驟所得萃取液中，以其乾燥固態部分之總量(100重量%)計，平均含有雌馬酚0.2~40重量 %(宜0.4~24重量%，更宜1~18重量%)。此外，前述第I－1步驟或第I－2步驟所得萃取液中，以其乾燥固態部份之總量計，平均含有黃豆素黃酮類0.01~8重量%(宜0.08~5重量%，更宜0.2~3重量%)。
前述第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物含高濃度雌馬酚，可表現基於雌馬酚之有用活性。具體來說，前述第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物對於預防及改善更年期障礙、骨質疏鬆症、前列腺肥大、代謝症候群(metabolic syndrome)等疾病或症狀、低減血中膽固醇值、美白、改善挫瘡、整腸、改善肥胖以及利尿等上甚為有用。由於表現出此種有用活性，前述第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物可配合至食品或藥品中加以使用。
將前述第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物添加至食品來使用時，舉例來說，該含雌馬酚之萃取物可配合至飲料、顆粒、細粒、膠囊、錠劑、粉末、乳製品、口香糖(gum)、膠狀點心(gummy)、布丁、條狀點心(bar)及其他固態食品等。配合該含雌馬酚之萃取物的食品除了可用作一般食品外，可作為特定保健用食品、營養輔助食品、機能性食品、病患食品等。含有本發明大豆胚軸發酵物之食品特別是作為營養輔助食品甚有用處。此外，就含有前述第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物的食品而言，具體例係如後述。
將第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物配合 於食品時，該食品中之該含雌馬酚之萃取物的配合比例可依照該食品之種類、雌馬酚含量、攝取對象之年齡及性別、所期待之效果等來加以適當設定。舉一例來說，相對於前述食品100g，含雌馬酚之萃取物(乾燥重量換算)以總量計係可佔0.1~90g的比例。
此外，將第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物配合至藥品時，該含雌馬酚之萃取物可調製成錠劑、丸劑、粉劑、液劑、懸浮劑、乳劑、顆粒劑、膠囊劑、栓劑等形態之藥品。配合有該含雌馬酚之萃取物的藥品作為更年期障礙(更年期不定之違和、骨質疏鬆症、高血脂症)、骨質疏鬆症、前列腺肥大、代謝症候群等疾病或症狀之預防或改善劑、血中膽固醇值之減低劑、整腸劑、肥胖改善劑、利尿劑等甚為有用。特別是，含有該含雌馬酚之萃取物的藥品適合使用在預防或治療中高年齡女性更年期不定之違和以及伴隨停經之症狀(如骨質疏鬆症、更年期障礙等)上。
至於配合有第I－1步驟或第I－2步驟所得含雌馬酚之萃取物的藥品投藥量，係依含雌馬酚之萃取物中的雌馬酚含量、投藥對象之年齡及體重、症狀、投藥次數等而異，無法統一規定，舉例來說，成人1日平均投藥量可相當於：含雌馬酚之萃取物以乾燥重量換算計係1~2000mg(且宜5~1000mg，更宜40~50mg)的量。特別是，可將含雌馬酚之萃取物的每日投藥量設定成投予2~30mg之雌馬酚量。
1－2.第II方法之製造方法
第II方法之製造方法係藉由進行下述第II－1步驟及第 II－2步驟來製造含雌馬酚之萃取物。茲就第II方法之製造方法詳述於下。
第II－1步驟 於本第II方法之製造方法中，首先使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮於水並添加酸而調整至pH2~6，並回收不溶物(第II－1步驟)。換言之，本第II－1步驟係於含有酸之水溶液(pH2~6)中使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮，並回收不溶物。
於本第II－1步驟中，係使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮於水，再加入酸而調整至pH2~6。
本第II－1步驟所添加之酸可為有機酸或無機酸。有機酸之種類以可調整至前述pH範圍為限，並未特別受到限制，可列舉如：檸檬酸、L－酒石酸、富馬酸、L－抗壞血酸、葡糖酸、乙酸、乳酸、DL－蘋果酸、草酸、甲酸、丙酸、酪酸及甲磺酸等。此外，無機酸之種類以可調整至前述pH範圍為限，亦未特別受到限制，可列舉如：鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸等。該等酸之中，以乙酸、鹽酸、硫酸為佳。
第II－1步驟中，使用在使含雌馬酚之大豆胚軸發酵物懸浮的水量可列舉如：相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(乾燥重量換算)1重量份，水為3~30重量份，且宜為5~20重量份。
於第II－1步驟中，係於pH2~6之水溶液中混合含雌馬酚之大豆胚軸發酵物，以室溫30分鐘以上(宜常溫2小時~24小時)靜置或攪拌即可。
如此處理後，因雌馬酚殘存於不溶物中，可藉由回收不溶物而回收雌馬酚。具體來說，不溶物之回收可藉過濾或離心分離等習知方法進行。
前述第II－1步驟所得不溶物係供至以下之第II－2步驟。
第II－2步驟 對前述第II－1步驟所得不溶物使用乙醇水溶液作為萃取溶劑以進行萃取處理，並回收萃取液(第II－2步驟)。
前述第II－1步驟所得不溶物無論是乾燥物或未經乾燥物均可供予本第II－2步驟。然而，使用不溶物之未乾燥物時，宜測定水分含量並考慮該水分量來調整後述之乙醇水溶液的水分量。
本第II－2步驟所使用之乙醇水溶液(乙醇與水之混合液)可列舉如乙醇濃度50~95容量%(宜70~90容量%)。藉由滿足此種濃度範圍，可從前述第II－2步驟所得不溶物有效率地萃取出含雌馬酚之有用成分。
舉例來說，前述第II－1步驟所得不溶物(乾燥重量換算)每1重量份可使用乙醇水溶液2~30重量份(宜4~10重量份)以進行第II－2步驟中之萃取處理。
第II－2步驟實施之萃取處理之處理條件並未特別受限，可以冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等進行。具體來說，於前述第II－1步驟所得不溶物中加入乙醇水溶液，以常溫30分鐘以上(宜常溫1~50小時)進行靜置或攪拌即可。
如此進行萃取處理後，藉由回收萃取液即可獲得含有雌馬酚之分液。具體來說，萃取液之回收可藉過濾或離心 分離等習知方法進行。
前述第II－2步驟所回收之萃取液由於雌馬酚已濃縮至高濃度，且更含有黃豆素黃酮類等有用成分，與含雌馬酚之大豆胚軸發酵物相較下有用性更提高。前述第II－2步驟所得萃取液可直接以液狀或去除萃取溶劑製成粉末狀而作為含雌馬酚之萃取物，配合至食品或藥品中。此外，前述第II－2步驟所得萃取液亦可直接以液狀或去除萃取溶劑製成粉末狀而更供予雌馬酚之純化。另，從提高含雌馬酚之萃取物的保存安定性之觀點來看，第II－2步驟所得萃取液宜去除萃取溶劑製成粉末狀。另外，可藉前述第I方法之第I－2步驟中之去除溶劑相同的條件來實施從第II－2步驟所得萃取液去除萃取溶劑，且宜藉噴霧乾燥法進行。
第II方法所得含雌馬酚之粉末的組成及用途 使前述第II方法所得萃取液(前述步驟之第II－2步驟所得萃取液)乾燥，可藉此以90%以上之回收率回收雌馬酚，而製得相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係含10倍量程度濃度的含雌馬酚之粉末。如此製得之含雌馬酚之粉末因雌馬酚濃度提高，具有可更有效表現基於雌馬酚之有用活性的優點。前述第II方法所得含雌馬酚之粉末的用途及使用方法等，係與前述第I方法所得含雌馬酚之萃取物相同。
2.雌馬酚之純化方法
此外，本發明提供一種從雌馬酚含有物純化出雌馬酚之方法。具體來說，本發明之雌馬酚純化方法可大別為後述之第1方法及第2方法等2種手法。茲就供予本發明純化方 法之雌馬酚含有物以及第1方法及第2方法的具體內容詳述於下。
雌馬酚含有物 於本發明之純化方法中，供純化處理之雌馬酚含有物僅需含有雌馬酚即可，並未特別受限，可為藉化學合成法而合成有雌馬酚之反應產物，亦可為藉發酵法而產生有雌馬酚之發酵物。發酵法所得含雌馬酚之發酵物含有多種與雌馬酚結構類似之異黃酮，但本發明之純化方法具有可從該等異黃酮中有效分離出雌馬酚之優點。鑒於此種優點，供予本發明純化方法之雌馬酚含有物的一較佳例可列舉如含雌馬酚之發酵物。
茲就含雌馬酚之發酵物說明如下。
可使用雌馬酚產生微生物並依照習知方法進行發酵，而製出含雌馬酚之發酵物。具體來說，將雌馬酚產生微生物，即具有將木質素黃酮類(選自木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中之至少1種)資化而產生雌馬酚之能力(代謝活性)的微生物接種於含該木質素黃酮類之發酵原料(供發酵之原料)，再使其於該微生物之生育環境下發酵(培養)，即可製得含雌馬酚之發酵物。
前述雌馬酚產生微生物係使用前述「1.含雌馬酚之萃取物的製造方法」中「含雌馬酚之大豆胚軸發酵物」一欄所載之雌馬酚產生微生物。
此外，含木質素黃酮類之發酵原料僅需含木質素黃酮類即可，並未特別受限，但從安全性之觀點來看，以可用 作食品素材者為宜。具體來說，含木質素黃酮類之發酵原料可列舉如大豆、大豆胚軸、大豆胚軸之萃取物、豆腐、炸豆腐、豆乳、納豆、醬油、味噌、天貝(tempe)、紅花苜蓿(red clove)或其萃取物、紫苜蓿或其萃取物等。該等之中，由於大豆胚軸含有豐富木質素黃酮類，而宜作為含木質素黃酮類之發酵原料。
此外，含木質素黃酮類之發酵原料更可添加含前述木質素黃酮類之異黃酮。如前述，藉由預先另行添加異黃酮於發酵原料中，可更提高所得發酵物中之雌馬酚含量。
再者，含木質素黃酮類之發酵原料可以促進發酵效率等之目的而依需要添加酵母萃取、聚蛋白腖、肉精等氮源；葡萄糖、蔗糖等碳源；磷酸鹽、碳酸鹽、硫酸鹽等無機鹽；維生素類；胺基酸等營養成分。
製造含雌馬酚之發酵物時，發酵原料之水分量、發酵時間、發酵溫度、發酵環境等發酵條件依雌馬酚產生微生物之種類、發酵原料種類、雌馬酚產生量、木質素黃酮類殘存量等加以適當設定即可。
本發明純化方法所使用之雌馬酚含有物宜為前述「1.含雌馬酚之萃取物的製造方法」一欄所載之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
2－1.第1方法之純化方法
第1方法之純化方法係藉由進行下述第1－1步驟~第1－5步驟來進行雌馬酚之純化。茲就第1方法之純化方法詳述於下。
第1－1步驟 本第1方法之純化方法係先使用乙醇水溶液作為萃取溶劑，將雌馬酚含有物進行萃取處理並回收萃取液(第1－1步驟)。
舉例來說，本第1－1步驟所使用之乙醇水溶液可列舉如：乙醇濃度為20~98容量%，且宜為45~95容量%，更宜為45~80容量%。藉由滿足此種濃度範圍，可有效率地從雌馬酚含有物中萃取雌馬酚。
第I－1步驟之萃取處理中，舉例來說，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(乾燥重量換算)每1重量份可使用乙醇水溶液1~1000重量份(宜2~500重量份，更宜為5~20重量份)。
第I－1步驟中萃取處理之處理條件並未特別受限，但可藉冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等進行。具體來說，於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物加入乙醇水溶液，以常溫1分鐘以上(宜常溫5分鐘~48小時)進行靜置或攪拌即可。
如此進行萃取處理後，藉由回收萃取液即可獲得含雌馬酚之萃取物。具體來說，萃取液之回收可採用過濾及離心分離等習知方法。
於第I－1步驟回收之萃取液中，除了雌馬酚及黃豆素黃酮類以外，更同時含有黃豆素黃酮類等異黃酮及皂苷。
前述第I－1步驟所回收之萃取液將供予後述之第I－2步驟。
第1－2步驟 由第I－1步驟所得萃取液去除萃取溶劑後，對所得殘留 物使用乙醇作為萃取溶劑進行萃取處理，並回收萃取液(第1－2步驟)。
於本第1－2步驟中，從第1－1步驟所得萃取液去除萃取溶劑、以乙醇對所得殘留物進行萃取處理以及萃取液之回收等，均以與前述「1.含雌馬酚之萃取物的製造方法」之第I方法中之第I－2步驟相同的條件實施。
前述於第1－2步驟回收之萃取液的皂苷含量減低，但除了雌馬酚以外，亦含黃豆素黃酮類等之異黃酮。
前述第1－2步驟所得萃取液將供予以下第1－3步驟。
第1－3步驟 從前述第1－2步驟所得萃取液去除萃取溶劑後，使所得殘留物懸浮於己烷，並回收不溶物(第1－3步驟)。
於第1－3步驟中，可藉減壓蒸餾、乾燥等習知方法，從第1－2步驟所得萃取液去除萃取溶劑。
對從第1－2步驟所得萃取液去除萃取溶劑而獲得之殘留物(以下，有時將其記為「第2原料殘留物」)添加己烷並使其懸浮。
就第1－3步驟中之己烷添加量而言，舉例來說，第2原料殘留物(乾燥重量換算)每1重量份可使用己烷1~50重量份(宜5~10重量份)進行添加。
於第1－3步驟中，將第2原料殘留物懸浮於己烷之處理條件亦未特別受限，舉例來說，可藉冷浸、溫浸等浸漬法等來進行。具體而言，於第2原料殘留物中添加己烷，以常溫5分鐘以上(宜常溫3分鐘~1小時)進行靜置或攪拌即可。 如此於己烷中進行懸浮後，因雌馬酚不溶化，可藉由回收不溶物而獲得含雌馬酚之固態成分。具體而言，不溶物之回收可以過濾及離心分離等習知方法進行。
就由實施前述第1－3步驟，而從第1－2步驟所得萃取液中去除脂溶性之夾雜物質。第1－3步驟所得不溶物將供至以下第1－4步驟。
第1－4步驟 對前述第1－3步驟所得不溶物使用己烷與醚之混合液作為萃取溶劑進行萃取處理，並回收萃取液(第1－4步驟)。
於第1－4步驟中，就作為萃取溶劑的成分之一來使用之醚而言，其種類並未特別受限，但可列舉如：二甲醚、甲基乙基醚及二乙醚等。該等醚可使用單一種，亦可組合2種以上使用。從有效率地純化雌馬酚的觀點來看，前述醚之中，以二乙醚為宜。
此外，第1－4步驟使用之己烷與醚之混合液中，己烷與醚之混合比並未特別受限，但從提高所純化之雌馬酚純度的觀點來看，可例示如：己烷與醚之容量比為10：90~20：80，且宜為30：70~25：75。
舉例來說，前述第1－3步驟所得不溶物(乾燥重量換算)每1重量份可使用己烷與醚之混合液50~5000重量份(宜200~1000重量份)來進行第1－4步驟中之萃取處理。
第1－4步驟實施之萃取處理之處理條件亦未特別受限，舉例來說，可藉冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等來進行。具體來說，於前述第1－3步驟所得不溶物中加入己烷及 醚之混合液，以常溫10分鐘以上(宜常溫15分鐘~30小時程度)進行靜置或攪拌即可。
如此進行萃取處理後，藉由回收萃取液可更獲得雌馬酚。具體來說，萃取液之回收可採用過濾及離心分離等習知方法。
第1－5步驟 將前述第1－4步驟所得萃取液供予二氧化矽凝膠層析，回收含有雌馬酚之分液(第1－5步驟)。
本第1－5步驟中之二氧化矽凝膠管柱層析只要是將使用二氧化矽凝膠作為充填劑之管柱用作分離床(co1umn bed)的層析即可，可為任一樣式。該二氧化矽凝膠管柱層析可具體列舉如：使溶劑以重力落下而流送之開管式層析(Open Column Chromatography)、以泵使溶劑流送之快速管柱層析(flash column chromatography)、高速液體層析(HPLC)等。該等之中，尤以開管式層析及快速管柱層析於工業上容易實施而較理想。
從使雌馬酚純化度更提高之觀點來看，本第1－5步驟之二氧化矽凝膠管柱層析所用移動層(展開溶劑)宜使用己烷與醚之混合液。於此，移動層所用之醚的種類並未特別受限，可列舉如二甲醚、甲基乙基醚及二乙醚等。該等醚可單獨使用1種，亦可組合2種以上使用。從更提高雌馬酚之純化度的觀點來看，前述醚宜為與前述第1－4步驟之己烷與醚的混合液所用之醚相同者。本第1－5步驟中利用二氧化矽凝膠管柱層析所致雌馬酚之溶出宜以梯度法進行，即，將 前述第1－4步驟所使用之己烷與醚之混合液相同組成者作為開始時的移動層，並使該混合液之醚比率逐漸提高。藉由如前述般使移動層中之醚比率逐漸提高，雌馬酚將隨著己烷與醚之比率為40：80~20：80(宜30：70~25：50)之移動層，與其他夾雜物分離並溶出。因此，可透過回收二氧化矽凝膠管柱層析所溶出之含雌馬酚的分液，獲得高度純化之雌馬酚。再藉減壓蒸餾、乾燥等習知方法，從前述第1－5步驟所回收之含雌馬酚的分液去除萃取溶劑，即可獲得夾雜物已大致去除之純化為高純度的固態狀雌馬酚。
2－2.第2方法之純化方法
第2－1步驟 本第2方法之純化方法中，係先使用選自於由乙酸乙酯、醇、丙酮、二噁烷、乙腈、二乙醚及甲苯所構成群組中之至少1種有機溶劑或其含水有機溶劑作為萃取溶劑，對雌馬酚含有物進行萃取處理，並濃縮所得萃取液(第2－1步驟)。
於第2－1步驟中，萃取溶劑可使用選自乙酸乙酯、醇、丙酮、二噁烷、乙腈、二乙醚及甲苯所構成群組中之至少1種純有機溶劑，但從有效率萃取雌馬酚之觀點來看，宜使用於該等有機溶劑中加水而成之含水有機溶劑。
於此，具體而言，作為萃取溶劑使用之前述醇可例示如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇等。
前述含水有機溶劑中之有機溶劑濃度可列舉如80~99容量%，且宜為90~97容量%。藉由滿足前述濃度範圍，可 獲得雌馬酚含有率較高之萃取液。
本第2－1步驟所使用之萃取溶劑較佳者可列舉如含水乙酸乙酯。
萃取之處理條件亦未特別受限，舉例來說，可以冷浸、溫浸等浸漬法等進行。具體而言，於雌馬酚含有物加入萃取溶劑，以常溫30分鐘以上(宜常溫1小時~50小時)進行靜置或攪拌即可。
第2－1步驟實施之萃取處理之處理條件亦未特別受限，舉例來說，可以冷浸、溫浸等浸漬法、滲透法等進行。
如前述進行萃取處理後，因雌馬酚會被萃取至萃取液中，可藉由供至過濾及離心分離等固液分離手法來回收萃取液。接著，將所得萃取液供予減壓濃縮等濃縮手法，獲得雌馬酚濃縮物。所得雌馬酚濃縮物將供予以下之第2－2步驟。
第2－2步驟 將前述第2－1步驟所得雌馬酚濃縮物供予二氧化矽凝膠管柱層析，獲得含雌馬酚之分液(第2－2步驟)。
於本第2－2步驟中，前述第2－1步驟所得雌馬酚濃縮物可直接供予二氧化矽凝膠管柱層析。
此外，前述第2－1步驟中以含有醇之水溶性溶劑進行萃取處理時，於濃縮萃取液後，宜更對該濃縮物加入5－10容量倍之乙酸乙酯與等量之水混合，之後分取乙酸乙酯分液並濃縮，供予管柱層析。
本第2－2步驟中之二氧化矽凝膠管柱層析只要是將使 用二氧化矽凝膠作為充填劑之管柱用作分離床(co1umn bed)的層析即可，可為任一樣式。該二氧化矽凝膠管柱層析可具體列舉如：使溶劑以重力落下而流送之開管式層析、以泵使溶劑流送之快速管柱層析、高速液體層析(HPLC)等。該等之中，尤以開管式層析及快速管柱層析於工業上容易實施而較理想。
本第2－2步驟之二氧化矽凝膠管柱層析所用移動層宜使用乙基醚或乙酸乙酯所構成之溶液(以下記為溶液A)與正己烷、石油醚或正庚烷所構成之溶液(以下記為溶液B)之混合溶液。該混合液中相對於溶液A之溶液B的混合比可例示如：相對於溶液A每1容量份，溶液B為2~50容量份，且宜為3~10容量份。
如此，將前述第2－1步驟所得萃取液供予二氧化矽凝膠管柱層析，即可回收含雌馬酚之分液。
前述於第2－2步驟所得之含雌馬酚之分液將供予以下第2－3步驟。
第2－3步驟 從前述第2－2步驟所得含雌馬酚之分液去除溶劑，對所得殘留物進行再結晶化處理，回收析出之結晶(第2－4步驟)。
為了從前述第2－2步驟所得含雌馬酚之分液去除溶劑，可藉減壓濃縮等習知溶劑去除方法進行。
本第2－3步驟之再結晶化處理所使用之溶劑僅需可使用於雌馬酚之再結晶化即可，未受特別限制，但可使用乙醇與水之混合液(乙醇水溶液)、乙酸乙酯、乙酸乙酯與己烷 之混合液以及乙醇與己烷之混合液。該等之中，較佳之溶劑可列舉如乙酸乙酯與己烷之混合液及乙醇水溶液。再結晶處理所使用之乙酸乙酯與己烷之混合液可具體例示如乙酸乙酯：己烷之容量比為10：1~1：10之混合液。此外，再結晶處理所使用之乙醇水溶液的乙醇濃度可列舉如30~90容量%，且宜為40~70容量%。藉由使用前述濃度範圍之乙酸乙酯與己烷之混合液或乙醇水溶液進行再結晶化，可獲得更高純度之雌馬酚。
本第2－3步驟之再結晶化處理可依一般方法實施。舉例來說，前述第2－2步驟所得含雌馬酚之分液去除溶劑而獲得殘留物，加入再結晶用之溶劑並於加溫下使其溶解，之後使其冷卻，即可析出雌馬酚之結晶。再者，為了順利且有效率地進行雌馬酚之結晶析出，亦可撥種雌馬酚之結晶種。
再結晶化處理之溫度條件可依所使用溶劑之沸點及凝固點來適當決定，一般而言，可於溶劑之沸點溫度附近使原料溶解，再以0~25℃程度使結晶析出。
3.食品素材
此外，本發明提供一種含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物係分散於可可塊中之食品素材。茲將本發明之食品素材區分為含有成分等說明如下。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物及其萃取 本發明之食品素材所用含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係與前述「1.含雌馬酚之萃取物的製造方法」一欄中所載之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物相同。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物可直接以發酵後之狀態使用在本發明之食品素材上，此外，亦可依需要供予乾燥處理製成乾燥固態物狀，再使用於本發明之食品素材中。從提高含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之保存安定性的觀點來看，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物宜先以加熱乾燥處理製成固態狀。此外，經加熱乾燥處理之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物亦可依需要而供予粉末化處理而製成粉末狀。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之萃取物係指，將前述含雌馬酚之大豆胚軸發酵物作溶劑萃取而獲得之含有雌馬酚的萃取物。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之萃取物並未特別受限，但宜為依照前述「1.含雌馬酚之萃取物的製造方法」一欄所載之製造方法而獲得之含雌馬酚之萃取物，且更宜為以前述第I方法之製造方法製出的含雌馬酚之萃取物。
於本發明中，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的萃取物可以液狀直接使用，但仍宜去除溶劑製成固態狀再使用。
本發明之食品素材中，使用含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物均可，但從營養學上之觀點來看，宜為含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
可可塊(cacao mass) 可可塊係將可可豆供予發酵步驟、焙炒步驟及磨碎步驟而可獲得之食品原料，被當為巧克力之原料來使用。本發明之食品素材所用可可塊僅需為可用作食品原料者即可，並未特別受限。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物與可可塊之配合比例 於本發明之食品素材中，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物與可可塊之配合比並未特別受限，但從可具有更良好之風味的觀點來看，可列舉如：相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)100重量份，可可塊為10~2000重量份，且宜為20~900重量份，更宜為20~400重量份。特別是若於使用含雌馬酚之大豆胚軸發酵物時，可列舉如：相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(乾燥重量換算)100重量份，可可塊為100~2000重量份，且宜為200~900重量份，更宜為200~400重量份。
此外，本發明之食品素材可僅由含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物以及可可塊所構成，但除了該等成分以外，如後述，亦可含有其他配合成分。此二成分之配合比例相對於本發明之食品素材總量，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物與可可塊之合計量宜佔40~100重量%，且較宜60~95重量%，更宜70~95重量%。以此種比例含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物及可可塊，可於具有良好風味之同時，有效表現出基於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的有用生理活性。
任意配合成分 本發明之食品素材除了(A)含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物及(B)可可塊以外，以不妨礙本發明效果為限，亦可含有其他配合成分。
可配合於本發明之食品素材的成分可列舉如砂糖、海 藻糖、乙醯磺胺酸鉀、木醣醇、蔗糖素(sucralose)、赤藻糖醇(erythritol)、阿斯巴甜、麥芽糖等甜味劑；可可脂、植物性油脂等油脂；大豆卵磷脂等乳化劑、香料；香料製劑；牛奶；水等。
食品素材之形狀 本發明之食品素材形狀並未特別受限，可為粉末狀、粒狀、片狀、平板狀等，可依所使用之食品種類而加以適當設定。從可使本發明之食品素材的食感活用在食品中的觀點來看，宜為粒狀或片狀，特別是每1粒或每1片平均為30~1000mg程度的粒狀或片狀。
本發明之食品素材的製造方法 將含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物、可可塊、及所需其他配合成分以可使可可塊所含可可脂熔融之溫度(宜30~50℃)條件下混合，接著冷卻固化而調製出本發明之食品素材。如此，可調製出可可塊中分散有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的本發明食品素材。
本發明之食品素材可依需要供予破碎、粉碎、整粒等處理，以成形為所需形狀。此外，本發明之食品素材亦可於製造時以擠壓造粒方式進行成形。
前述食品素材之用途 本發明之前述食品素材被用以作為含雌馬酚食品的製造原料或食品添加劑，而被配合於各種食品中。即，本發明更提供一種含前述食品素材之含雌馬酚食品。
該含雌馬酚之食品並未特別受限，舉例而言，可列舉 如烘烤點心、冷凍點心等食品形態。
前述烘烤點心可列舉如方塊米餅(Arare)、御柿餅(Okaki)等米菓類；鬆餅、威化餅等小麥煎餅類；軟餅(biscuit)；小甜餅(cookie)；硬餅乾(cracker)；派(pie)；蛋糕；多拿茲；麵包等。此外，前述冷凍點心可列舉如冰淇淋、到冰、冰棒等。
前述含雌馬酚之食品中，可列舉烘烤點心作為較佳形態之例。舉例來說，以大豆粉末作為原料而製得之烘烤點心而言，因其除含有雌馬酚以外更綜合地含有源自大豆之有用成分，有用性高且可達到更佳之保健效果。
以大豆粉末作為原料而製得之烘烤點心的較佳例可列舉如：不含麵粉且配合大豆粉末、蛋、奶油等而製得之烘烤點心。此種小甜餅所使用之大豆粉末以供加熱處理等，使脂肪加氧酶(lipoxygenase)失活或減弱化，且大豆味消失或減輕者為佳。舉例來說，將大豆粉末100重量份、蛋0~35重量份、奶油10~85重量份、所需形狀之本發明食品素材0.1~50重量份及適量其他配合成分混合於適量水中而製成混合原料(生料)，將其成形為預定形狀並以2~80分鐘、80~250℃程度烘焙，即可製得前述烘烤點心。
就該含雌馬酚之食品所含本發明食品素材之配合比例而言，並未特別受限，可依本發明食品素材中之雌馬酚含量、該含雌馬酚之食品的形態等加以適當設定。舉一例來說，可例示如：以該含雌馬酚之食品的原料總量計，使本發明之食品素材佔3~30重量%(宜5~20重量%，更宜5~8重量 %)之比例。此外，該含雌馬酚之食品所含雌馬酚比例可例示如：以該含雌馬酚之食品的原料總量計，使雌馬酚佔0.002~0.1重量%(宜0.004~0.05重量%，更宜0.005~0.03重量%)的範圍。以此種比例含有本發明之食品素材，可使含雌馬酚之食品保持良好風味，同時有效享受基於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的有用生理活性。
除了本發明之食品素材以外，以預定量混合該食品之其他原料，依該食品之種類適當供予成形、烘焙、冷卻等步驟，即可製得該含雌馬酚之食品。
該含雌馬酚之食品含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物，而含有以雌馬酚為始之各種有用生理活性物質，因此可展現各種生理活性及藥理活性。故而該含雌馬酚之食品除了作為一般食品之外，可作為特定保健用食品、營養輔助食品、機能性食品、病患食品等來使用。含有本發明大豆胚軸發酵物之食品特別是作為營養輔助食品甚為有用。
舉例而言，該含雌馬酚之食品在預防或改善更年期障礙、骨質疏鬆症、前列腺肥大、代謝症候群等疾病或症狀、減低血中膽固醇值、美白、改善挫瘡、整腸、改善肥胖、利尿等上甚為有用。其中，該含雌馬酚之食品特別是在預防或改善中高齡女性更年期不定之違和以及伴隨停經之症狀(如骨質疏鬆症、更年期障礙等)上甚有用。
該含雌馬酚之食品的每日平均攝取量可依該食品中之雌馬酚含量、攝取者年齡及體重、攝取次數等而加以適當設定。
4.各種形態之食品
此外，本發明可提供含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之各種形態食品。本發明所提供之具體食品形態可列舉如飲料、補充品、奶油狀食品、甜點、點心、調味料、殺菌袋食品、食用加工肉品、揉合食品、蛋加工食品、罐頭或罐裝食品、麵包、冷凍點心、大豆加工食品、米飯食品及湯品等。
茲就本發明所使用之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、其萃取物及本發明之食品形態詳述如下。
含雌馬酚之大豆胚軸發酵物及其萃取物 本發明所使用之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物係與前述「3.食品素材」所使用者相同。
本發明之食品無論是含有前述含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物均可，但較宜含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
食品形態 含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物在預防或改善更年期障礙、骨質疏鬆症、前列腺肥大、代謝症候群等疾病或症狀、減低血中膽固醇值、美白、改善挫瘡、整腸、改善肥胖及利尿等用途上甚有用，特別是在預防或改善中高齡女性之更年期不定之違和以及伴隨停經之症狀(如骨質疏鬆症、更年期障礙等)的用途上甚有用。因此，本發明之各種形態食品亦可供用以作為以前述用途為目的之機能性食品。即，本發明之含有大豆胚軸發酵物的食品除了作 為一般食品之外，可作為特定保健用食品、營養輔助食品、機能性食品、病患食品等來使用。本發明之含有大豆胚軸發酵物之食品在作為營養輔助食品上特別有用。
茲就本發明所提供之具體食品形態加以具體說明。
(１)飲料 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的飲料。
本發明之飲料種類並未特別受限，可列舉如：果汁飲料；蔬果汁；氣泡水、可樂、果汁碳酸飲料、薑汁汽水(ginger ale)、蘋果汁(cider)及蘇打等之碳酸飲料；運動飲料等之清涼飲料水；咖啡、咖啡牛奶等之咖啡飲料；紅茶、綠茶、烏龍茶等之茶飲料；可可亞；乳酸菌飲料；牛奶、果汁牛奶、酸乳飲料等之乳飲料；啤酒、燒酒、威士忌、雞尾酒、調味燒酒等之酒精飲料等。
本發明飲料中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、飲料種類、所期待之效果等來加以適當設定。舉例來說可例示如：於飲料中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.02~15重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.2~0.5重量%)之比例。
(2)補充品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之補充品。
本發明之補充品種類並未特別受限，可列舉如軟膠囊 (soft gel)、錠劑、粉劑等。該等之中，較佳者可列舉如軟膠。在軟膠及粉劑的情況下，宜以將其預定量收容在膠囊中之狀態來提供。
本發明之軟膠的較佳實施態樣之一可例示如：於含有明膠、水及甘油之軟膠囊中添加含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物者。另，除了前述成分之外，軟膠囊亦可含有大豆油、蜜蠟、卵磷脂及β胡蘿蔔素等添加劑。
本發明補充品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、補充品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於補充品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔2~100重量%之比例。
(3)奶油(cream)狀食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之奶油狀食品。
本發明之奶油狀食品的種類並未特別受限，可列舉如泡沫奶油、卡士達奶油、奶油、鮮奶油、咖啡奶精等。
本發明之奶油狀食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、奶油狀食品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於奶油狀食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.15~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(4)甜點(dessert) 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之甜點。
本發明之甜點種類並未特別受限，可列舉如優格、果凍、布丁及慕斯等。
本發明甜點中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、甜點種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於甜點中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.15~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)的比例。
(5)點心 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之點心。
本發明之點心不論西式點心或日式點心的差異，包含烘烤點心及蒸煮點心等各色點心。具體來說，本發明之點心可例示如：糖果、麥芽糖、焦糖、普澤餅(Pretzel)、錠片、口香糖、巧克力、小甜餅、豆菓子、鬆餅、起司硬餅乾、膠狀點心(gummy)、煎餅、洲濱餅(Suhama)、千菓子、羊羹、饅頭、蕨餅、雪藏蛋糕(pound cake)、蘋果派餡、零嘴(snack)點心及御柿餅等。該等點心之中，較佳實施態樣之一可列舉如含有大豆粉之烘烤點心。
本發明點心中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其 萃取物中之雌馬酚含量、點心種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於點心中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.01~99重量%(宜0.04~38重量%，更宜0.08~18重量%)之比例。
(6)調味料 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之調味料。
本發明之調味料種類並未特別受限，舉例來說可列舉如：烤肉醬、蒲燒醬、花枝珍味之調味料、番茄醬、醬油、沾醬、芝麻醬、零嘴調味料及醬油等。
本發明調味料中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、調味料種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於調味料中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.04~40重量%(宜0.2~8重量%，更宜0.4~4重量%)之比例。
(7)殺菌袋食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之殺菌袋食品(retort pouch)。
本發明之殺菌袋食品種類並未特別受限，可列舉如咖哩、燉牛肉、燉菜(stew)、肉醬、白醬等之醬素；中華丼、牛丼、親子丼等丼素；麻婆豆腐素、炊飯素等之調味料材料等。
本發明殺菌袋食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或 其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、殺菌袋食品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於殺菌袋食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.003~4重量%(宜0.01~0.8重量%，更宜0.03~0.4重量%)之比例。
(8)食用加工肉品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之食用加工肉品。
本發明食用加工肉品之種類並未特別受限，可列舉如：香腸(乾式、半乾式、玻洛尼亞、法蘭克福、維也納、煙燻)、肝醬、培根、燻肩肉(shoulder bacon)、火腿、漢堡肉、肉丸子等。
本發明之食用加工肉品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、食用加工肉品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於食肉加工食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.02~0.4重量%(宜0.1~0.8重量%，更宜0.2~0.4重量%)之比例。
(9)揉合食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之揉合食品。
本發明之揉合食品種類並未特別受限，可列舉如魚板 及竹輪等。
本發明揉合食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、揉合食品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於揉合食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(10)蛋加工食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之蛋加工食品。
本發明之蛋加工食品種類並未特別受限，可列舉如高湯調味煎蛋、厚煎蛋、蛋包(omelet)、炒蛋等。
本發明蛋加工食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、蛋加工食品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：蛋加工食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(11)罐頭或罐裝食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之罐頭或罐裝食品。
本發明之罐頭或罐裝食品種類並未特別受限，可列舉如：柑橘及桃子等之水果罐頭；鮪魚、沙丁魚等海產罐頭；果醬等之罐頭；湯品等之罐頭；醬汁等之罐頭等。
本發明之罐頭或罐裝食品中的含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、罐頭或罐裝食品種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於罐頭或罐裝食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(12)麵包 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之麵包。
本發明之麵包種類並未特別受限，可列舉如：吐司、法國麵包、調理麵包、哈密瓜麵包、紅豆麵包、奶油麵包、果醬麵包、捲麵包、牛角麵包(croissant)等。
本發明麵包中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、麵包種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於麵包中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.01~50重量%(宜0.05~0.8重量%，更宜0.1~0.3重量%)之比例。
(13)冷凍點心 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的冷凍點心。
本發明之冷凍點心種類並未特別受限，可列舉如冰淇淋、雪霜(sherbet)等。
本發明冷凍點心中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、冷凍點心種類、所期待之效果等而加以適當設定。舉例來說可例示如：於冷凍點心中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~5重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(14)大豆加工食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的大豆加工食品。
本發明大豆加工食品之種類並未特別受限，可列舉如豆腐、炸油豆腐、雁擬(Ganmodoki)、湯葉(Yuba)、納豆、豆乳等。
本發明大豆加工食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、大豆加工食品種類、所期待之效果等加以適當設定。舉例來說可例示如：於大豆加工食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.03~0.5重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.3~0.5重量%)之比例。
(15)米飯食品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的米飯食品。
本發明米飯食品之種類並未特別限制，可列舉如炒飯、Pilaf、粥、栗子糯米飯、白飯、紅豆飯、五目飯等。
本發明米飯食品中之含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、米飯食品種類、所期待之效果等加以適當設定。舉例來說可例示如：於米飯食品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.01~2.5重量%(宜0.02~0.5重量%，更宜0.04~0.25重量%)之比例。
(16)湯品 本發明提供一種含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之湯品。
本發明之湯品種類並未特別受限，可列舉如玉米奶油湯、清肉湯(consommsoup)、菜麵濃湯(minestrone soup)、洋蔥湯及濃湯等。
本發明湯品中含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的含有比例並未特別受限，可依該大豆胚軸發酵物或其萃取物中之雌馬酚含量、湯品種類、所期待之效果等加以適當設定。舉例來說可例示如：於湯品中，大豆胚軸發酵物或其萃取物(乾燥重量換算)佔0.02~15重量%(宜0.1~1重量%，更宜0.2~0.5重量%)之比例。
【實施例】
茲就參考例、實施例等詳細說明本發明於下，但本發明不侷限於該等例示。
參考例1－1~1－3 製造含雌馬酚之大豆胚軸發酵物
如表1所示組成，混合粉末狀大豆胚軸、精胺酸及水，調製出大豆胚軸溶液(原料)。於該大豆胚軸溶液5ml中植入 乳球菌20－92菌株(FERM BP－10036號)，於厭氧條件下以37℃進行96小時靜置培養。培養後，將所得發酵液(培養液)以100℃、1分鐘之條件加熱殺菌後，以80℃之條件進行乾燥處理，更以均質儀進行粉末化處理，而獲得粉末狀之大豆胚軸發酵物。
茲將培養96小時後之培養液中的生菌數及pH、粉末狀大豆胚軸發酵物之取得量、及粉末狀大豆胚軸發酵物中之雌馬酚濃度示於表1。從此結果確認，使用雌馬酚產生菌使粉末狀大豆胚軸發酵可高效率地產生雌馬酚。
參考例1－4 製造含雌馬酚之大豆胚軸發酵物
於含有粉末狀大豆胚軸10重量%及L－精胺酸0.1重量%之大豆胚軸溶液5ml中植入乳球菌20－92菌株(FERM BP－10036號)，於厭氧條件下以37℃靜置培養96小時，以進行發酵處理。培養後，將所得發酵液(培養液)以100℃、1分鐘之條件加熱殺菌後，以80℃之條件進行乾燥處理，更 以均質儀進行粉末化處理，而獲得粉末狀之大豆胚軸發酵物。
分析作為原料使用之粉末狀大豆胚軸(表2及3中記為發酵前)及所得粉末狀大豆胚軸發酵物(表2及3中記為發酵後)之含有成分。大豆異黃酮類之分析結果示於表2，營養成分之分析結果示於表3。從此結果亦可確認，藉乳球菌20－92菌株使大豆胚軸發酵，可製造含高含量雌馬酚之大豆胚軸發酵物。此外，確認使用棉子糖(raffinose)及水蘇糖(stachyose)等寡糖則在發酵前後含量為相同程度，幾乎不受發酵之影響。另一方面，已確認精胺酸會因發酵處理而轉變為鳥胺酸。因此，得知於大豆胚軸添加精胺酸並以乳球菌20－92菌株進行發酵處理，不僅可產生雌馬酚，亦可產生鳥胺酸。
參考例1－5~1－11 製造含雌馬酚之大豆胚軸發酵物
除了使用與前述參考例1－3不同之7批粉末狀大豆胚軸以外，以與前述參考例1－3相同之條件製造粉末狀大豆胚軸發酵物(參考例1－5~1－11)。分析所得大豆胚軸發酵物所含異黃酮組成。將結果示於表4。從此結果亦可確認，參考例1－5~1－11之大豆胚軸發酵物之雌馬酚含量高，含有習知技術無法實現之組成的異黃酮。
參考試驗例1 致敏原之確認試驗
已知大豆胚軸含有Gym4、Gm30K、Gm28K、7S球蛋白mix(β－組大豆球蛋白(β－conglycinin))、油體蛋白、胰蛋白酶抑制因子等致敏原。於此，藉下述試驗來判定前述參考例1－1所製造含雌馬酚之大豆胚軸發酵物中是否存有致敏原。
首先，將參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物適 量添加於萃取緩衝液(Tris HCl pH 7.5，含1M EDTA，含有適量蛋白質分解酶素抑制劑)，充分攪拌後萃取水溶性成分。接著，以過濾去除固態成分，獲得萃取液。使用BIO－RAD社製之蛋白質分析系統檢測如此製得之萃取液所含總蛋白質，此外，亦以西方墨點法檢測所得萃取液所含主要致敏原(Gym4、Gm30K、Gm28K、7S球蛋白mix、油體蛋白、胰蛋白酶抑制因子)。此外，作為對照，使用大豆子葉粉末及大豆胚軸粉末取代大豆胚軸發酵物，以相同方法進行總蛋白質及致敏原之檢測。
茲將結果示於第1~3圖。第1圖顯示總蛋白質之檢測結果，第2圖顯示Gym4、Gm30K、及Gm28K之檢測結果，第3圖則顯示7S球蛋白mix、油體蛋白及胰蛋白酶抑制因子之檢測結果。
從此一結果可確認，含雌馬酚之大豆胚軸發酵物中，大豆或大豆胚軸所含主要致敏原已減低。
實施例1：製造含雌馬酚之萃取物
實施例1－1 以第I方法製造含雌馬酚之萃取物 將以與參考例1－3相同條件製造之粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物1g添加於表5所示萃取溶劑20ml，以室溫振盪120分鐘。之後，以離心分離去除殘渣(以下記為殘渣1)，回收萃取液(以下記為萃取液1－1)。接著，使用蒸發器(evaporator)使所得萃取液1－1乾涸後，加入5ml乙醇，以室溫振盪10分鐘。之後，以離心分離去除殘渣(以下記為殘渣2)，回收萃取液(以下記為萃取液1－2)。使用蒸發器使所得 萃取液1－2乾涸後，獲得固態狀萃取物。
此外，對殘渣1再次添加相同組成之萃取溶劑20ml，以室溫振盪120分鐘。之後，以離心分離去除殘渣，回收萃取液(以下，記為萃取液2－1)。使用蒸發器使所得萃取液2－1乾涸後，添加5ml乙醇，以室溫振盪10分鐘。之後以離心分離去除殘渣，回收萃取液(以下記為萃取液2－2)。使用蒸發器使所得萃取液2－2乾涸，獲得固態狀萃取物。
將萃取液1－1及1－2、萃取液2－1及2－2以及殘渣2供予薄層層析(TLC)分析(移動相在檢測雌馬酚時使用己烷：氯仿：乙酸乙酯＝1：1：1(容量比)，檢測皂苷時使用乙酸乙酯：丙醇：氯仿：甲醇：0.9%KCl＝25：25：25：10：9(容量比))，測定皂苷含量與雌馬酚含量。此外，測定從萃取液1－2所得固態狀萃取物之重量及其所含雌馬酚濃度。結果示於第4~7圖及表8。第4圖顯示以TLC分析萃取液1－2及2－2中之雌馬酚含量的結果；第5圖顯示以TLC分析萃取液1－2及2－2中之皂苷含量的結果；第8圖顯示以TLC分析萃取液1－2及殘渣2中之雌馬酚含量的結果；第7圖顯示以TLC分析萃取液1－2及殘渣2中之皂苷含量的結果。
由此結果得知，若以乙醇萃取含雌馬酚之大豆胚軸發酵物，將含有多量油分，且雌馬酚之回收率降低。另一方 面，則確認：若以乙醇水溶液萃取含雌馬酚之大豆胚軸發酵物，將抑制油分之混入，而以高回收率獲得雌馬酚。特別是，若以乙醇濃度為75容量%之乙醇水溶液，雌馬酚回收率將顯著提高。此外，得知75容量%乙醇萃取可將脂肪分之萃取抑制至最小限度。
此外，由於殘渣2中檢測出高濃度皂苷，已確認可將萃取液1－1之溶劑除去物供予乙醇之萃取處理，藉此可不致減少雌馬酚量而去除皂苷。
實施例1－2 以第I方法製造含雌馬酚之萃取物 除了使用與前述參考例1－3不同批之粉末狀大豆胚軸以外，已與前述參考例1－3相同之條件製造粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
將該粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物30g添加至70容量%乙醇水溶液(於水30ml加入乙醇至100ml)或90容量%乙醇水溶液(於水10ml加入乙醇至100ml)150ml，以室溫攪拌8小時。之後，過濾去除殘渣後，更以與萃取溶劑相同組成之乙醇水溶液約20ml洗淨殘渣，回收濾液及洗淨液而獲得萃取液。
接著，減壓濃縮所得萃取液而獲得固態狀萃取物。
測定所得固態狀萃取物之重量及其所含之雌馬酚、木質素黃酮、二氫木質素黃酮、金雀素黃酮、二氫金雀素黃酮、黃豆素黃酮、二氫黃豆素黃酮之濃度。茲將結果示於表7及8。
從此結果得知，若以乙醇水溶液萃取含雌馬酚之大豆胚軸發酵物，除可以高回收率獲得雌馬酚外，亦可獲得黃豆素黃酮。另一方面，其他異黃酮在萃取物中濃度極低。
實施例1－3 以第I方法製造含雌馬酚之萃取物 除了使用與前述參考例1－3不同批之粉末狀大豆胚軸外，以與前述參考例1－3相同之條件製造粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物。
於該粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物50g中加入純 水7ml混合後，更加入正己烷250ml並以室溫攪拌7小時。過濾回收不溶物，更以60℃進行7小時乾燥，獲得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的脫脂粉末46.6g。
將前述脫脂粉末20g添加至80容量%乙醇水溶液(於水20ml中加入乙醇至100ml)或90容量%乙醇水溶液(於水10ml中加入乙醇至100ml)100ml中，以室溫攪拌14小時。之後，藉過濾去除殘渣後，更以與萃取溶劑相同組成之乙醇水溶液約10ml洗淨殘渣，回收濾液及洗淨液而獲得萃取液。
接著，以60℃乾燥所得萃取液6小時，獲得固態狀萃取物。
測定所得固態狀萃取物之重量及其所含雌馬酚、木質素黃酮、二氫木質素黃酮、金雀素黃酮、二氫金雀素黃酮、黃豆素黃酮、二氫黃豆素黃酮之濃度。結果示於表9及10。
從此結果得知，即使預先將含雌馬酚之大豆胚軸發酵物作脫脂處理，仍與前述實施例1－2相同，可以高回收率獲得雌馬酚。
實施例1－4 以第II方法製造含雌馬酚之萃取物 除了使用與前述參考例1－3不同批之粉末狀大豆胚軸外，以與前述參考例1－3相同之條件製造粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(雌馬酚濃度：6.2 mg/g)。將該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物80g懸浮於水900ml，一邊攪拌一邊加入乙 酸約5ml，將pH調整為約4.0調整後，以室溫靜置24小時。之後，藉離心分離回收不溶物，使其乾燥而獲得不溶物50.33g。
接著，於前述不溶物50.33g中添加乙醇水溶液(乙醇濃度75容量%)250ml，以室溫攪拌2日。之後，減壓過濾去除殘渣，回收濾液。接著，使用蒸發器使所得濾液乾涸，獲得含雌馬酚之粉末7.53g。
如此製得之含雌馬酚粉末中含有60.0mg/g之雌馬酚濃度，相對於起始原料之含雌馬酚大豆胚軸發酵物的6.2mg/g雌馬酚含量為約10倍量，雌馬酚回收率為91%。
實施例2：雌馬酚之純化
實施例2－1：以第1方法純化雌馬酚 除使用與前述參考例1－3不同批之粉末狀大豆胚軸以外，以與前述參考例1－3相同之條件，製造粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(雌馬酚濃度：6.2 mg/g)。將該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物10g添加至、50容量%乙醇水溶液50ml，以室溫振盪2小時。之後，以離心分離(2500rpm，25分鐘)去除殘渣(以下，記為殘渣1)，回收萃取液(以下記為萃取液A－1)。接著，對殘渣1添加50容量%乙醇水溶液50ml，以室溫振盪1小時。之後，以離心分離(2500rpm，25分鐘)去除殘渣，回收萃取液(以下記為萃取液A－2)。接著，混合萃取液A－1與萃取液A－2，使用蒸發器使其乾涸，獲得殘留物(以下記為殘留物1)。
於前述所得殘留物1中添加約50ml乙醇，於室溫進行超 音波處理一邊進行振盪。之後，以離心分離(1000rpm，10分鐘)去除殘渣，回收萃取液(以下記為萃取液B)。使用蒸發器使所得萃取液B乾涸，獲得殘留物(以下記為殘留物2)約1g。
接著，於1g殘留物2添加己烷10ml，以室溫振盪30分鐘。之後以離心分離(1000rpm，10分鐘)去除萃取液，回收不溶物0.3g。
於所得不溶物0.3g添加己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝2：3；容量比)2ml，以室溫振盪30分鐘。之後，以離心分離(1000rpm，10分鐘)去除殘渣，回收萃取液。將所得萃取液於下述條件下供予二氧化矽凝膠層析。
管柱 ：於內徑2cm之管柱中充填二氧化矽凝膠。
移動層 ：依序流動己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝40：80；容量比)200mL；己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝30：70；容量比)200mL；己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝25：75；容量比)200mL；己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝20：80；容量比)200mL；及己烷200mL。
毎50mL地回收管柱溶出之溶液。己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝30：70；容量比)及己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝25：75；容量比)所溶出之分液合計含有約40mg之雌馬酚(回收率80%)，其乾燥固態部份之平均雌馬酚純度為99.9%。此外，將TLC分析本二氧化矽凝膠層析所 溶出分液之結果示於第8圖。如第8圖所示，確認己烷與二乙醚之混合液(己烷：二乙醚＝30：70；容量比)及己烷與二乙醚混合液(己烷：二乙醚＝25：75；容量比)所溶出之分液含有雌馬酚，其純化度亦甚高。此外，供予第8圖各巷之試料係如表11所示。
實施例2－2：以第2方法純化雌馬酚 除使用與前述參考例1－3不同批之粉末狀大豆胚軸以外，以與前述參考例1－3相同之條件製造粉末狀含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(雌馬酚濃度：6.2 mg/g)。將該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物100g添加於95容量%乙酸乙酯水溶液500ml，以室溫攪拌4小時。之後，濾別不溶物，更以80ml乙酸乙酯洗淨該不溶物。將所得洗淨液與濾液一起減壓濃縮，回收12g油狀物。使所得油狀物12g於下述條件下供予二氧化矽凝膠層析。
管柱：使用己烷於內徑2cm之管柱填充二氧化矽凝膠70g。
移動層：流通己烷500ml後，流通乙酸乙酯與己烷之混合液(乙酸乙酯：己烷＝1：5(容量比))。
從如此回收之含雌馬酚溶出液餾除溶劑，而獲得黃色結晶狀之固態物630mg。
將所得黃色結晶狀固態物添加於乙酸乙酯2ml並加熱至約80℃使其溶解，更添加己烷8ml混合後，冰冷下攪拌30分鐘，使雌馬酚結晶析出。過濾回收析出之雌馬酚結晶，將其以己烷洗淨後，乾燥而獲得含雌馬酚之固態部分530mg(淡黃色結晶)。
再將該淡黃結晶530mg加入4ml乙醇水溶液(乙醇濃度62.5容量%)，於約80℃加熱溶解，再以10℃靜置12小時，以進行雌馬酚之再結晶化，進行過濾及乾燥，獲得白色針狀雌馬酚結晶390mg。
所得雌馬酚結晶之乙醇25℃的旋光度[α]D 25 為－21.6°，融點為188－190℃，而確認已純化出將近100%純度之雌馬酚。
實施例3：含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物之食品素材及含有其之食品
實施例3－1 製造含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物與可可塊之食品素材 於使可可塊加熱熔融之狀態，以1：3(重量比)之比率混合以參考例1－3相同條件製造之含雌馬酚大豆胚軸發酵物以及可可塊後，使其冷卻而製得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物分散於可可塊中之食品素材。
以10位官能檢查員就如此製造之食品素材的味覺呈現加以評估，所有的官能檢查員均評估為：源自含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的苦味已受到抑制而風味良好。
實施例3－2 含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之萃取物的食品素材 於使可可塊加熱熔融之狀態下，以1：24(重量比)之比率混合實施例1－1中使用75Et所獲得之萃取液2－1乾涸而成的固態狀萃取物(以下記為75Et萃取物)與可可塊後，冷卻而獲得75Et萃取物分散於可可塊中之食品素材。
以10位官能檢查員就如此製造之食品素材的味覺呈現加以評估，所有的官能檢查員均評估為：源自75Et萃取物的苦味已受到抑制而風味良好。
實施例3－3 烘烤點心 將表12所示原料，以成型機使所得混合原料成形為長方形(約1.5cm×1.5cm×10cm)，以180℃烤箱烘焙，製造烘烤菓子。
以10位官能檢查員就所得烘烤點心的味覺呈現加以評估，所有的官能檢查員均評估為：源自含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的苦味受到抑制，可感受到良好之巧克力風味，並可感到烘烤點心原本之良好味覺呈現。
比較例3－1 烘烤點心 除了添加巧克力片5g及與實施例1－3相同條件製造之含雌馬酚大豆胚軸發酵物1g以取代片狀之實施例3－1所得食品素材以外，以與前述實施例3－3相同之條件製造烘烤點心。
以10位官能檢查員就點心之味覺呈現加以評估，所有的官能檢查員均評估為：味覺呈現受損，源自含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的苦味受到擴散到整體中。
實施例3－4 烘烤點心 除了等量片狀之實施例3－2所得食品素材以取代片狀之實施例3－1所得食品素材以外，以與前述實施例3－3相同之條件製造烘烤點心。
以10位官能檢查員就所得烘烤點心的味覺呈現加以評估，所有的官能檢查員均評估為：源自75Et萃取物之苦味 受到抑制，可感受到良好之巧克力風味，並可感到烘烤點心原本之良好味覺呈現。
實施例4：含有含雌馬酚之大豆胚軸發酵物或其萃取物的各種食品
實施例4－A 飲料 以下，就本發明飲料之製造例列舉具體例。
實施例4－A－1 氣泡水 調製下述組成之薄荷風味糖漿液，將該薄荷風味糖漿液與碳酸水以3：1之容量比混合，獲得氣泡水。
薄荷風味糖漿液之組成
實施例4－A－2 氣泡水 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.034Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以調製薄荷風味糖漿液以外，以與前述實施例4－A－1相 同之條件製造氣泡水。
實施例4－A－3 無果汁柑橘碳酸飲料 調製下述組成之柑橘風味糖漿液，將該柑橘風味糖漿液與碳酸水以9：11容量比混合，獲得無果汁柑橘碳酸飲料。
柑橘風味糖漿液之組成
實施例4－A－4 無果汁柑橘碳酸飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.025Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以調製柑橘風味糖漿液以外，以與前述實施例4－A－3相同之條件無果汁柑橘碳酸飲料。
實施例4－A－5 低卡可樂 調製下述組成之可樂糖漿液，將該可樂糖漿液與碳酸水以8：12容量比混合，獲得無糖可樂。
可樂糖漿液之組成
實施例4－A－6 低卡可樂 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.03Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以調製可樂糖漿液以外，以與前述實施例4－A－5相同之條件製造低卡可樂氣泡水。
實施例4－A－7 蘋果碳酸飲料 調製下述組成之蘋果風味糖漿液，以13：7容量比混合該蘋果風味糖漿液與碳酸水，獲得蘋果碳酸飲料。
蘋果風味糖漿液之組成
實施例4－A－8 蘋果碳酸飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.03Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以調製蘋果風味糖漿液以外，以與前述實施例4－A－7相同之條件製造蘋果碳酸飲料。
實施例4－A－9 葡萄碳酸飲料 調製下述組成之葡萄風味糖漿液，並以9：11容量比混合該葡萄風味糖漿液與碳酸水，獲得葡萄碳酸飲料。
葡萄風味糖漿液之組成
實施例4－A－10 葡萄碳酸飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.03Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以調製葡萄風味糖漿液以外，以與前述實施例4－A－1相同之條件製造葡萄碳酸飲料。
實施例4－A－11 蘋果汁飲料 製造下述組成之蘋果汁飲料。
實施例4－A－12 蘋果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－11相同之條件製造蘋果汁飲料。
實施例4－A－13 柑橘果汁飲料 製造下述組成之柑橘果汁飲料。
實施例4－A－14 柑橘果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵 物以外，以與前述實施例4－A－13相同之條件製造柑橘果汁飲料。
實施例4－A－15 低卡果汁飲料 製造下述組成之低卡果汁飲料。
實施例4－A－16 低卡果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－15相同之條件製造低卡果汁飲料。
實施例4－A－17 無糖加味水(near－water) 製造下述組成之無糖加味水。
實施例4－A－18 無糖加味水 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－17相同之條件製造無糖加味水。
實施例4－A－19 運動飲料 製造下述組成之運動飲料。
實施例4－A－20 運動飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－19相同之條件製造運動飲料。
實施例4－A－21 抹茶牛奶飲料 製造下述組成之抹茶牛奶。
實施例4－A－22 抹茶牛奶飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－21相同之條件製造抹茶牛奶飲料。
實施例4－A－23 無糖優酪乳 製造下述組成之無糖優酪乳。
實施例4－A－24 無糖優酪乳 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－23相同之條件製造無糖優酪乳。
實施例4－A－25 滅菌乳酸菌飲料 製造下述組成之滅菌乳酸菌飲料。
實施例4－A－26 滅菌乳酸菌飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－25相同之條件製造滅菌乳酸菌飲料。
實施例4－A－27 低卡酸乳飲料 製造下述組成之低卡酸乳飲料。
實施例4－A－28 低卡酸乳飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－27相同之條件製造低卡酸乳飲料。
實施例4－A－29 草莓牛奶飲料 製造下述組成之草莓牛奶飲料。
實施例4－A－30 草莓牛奶飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－29相同之條件製造草莓牛奶飲料。
實施例4－A－31 脫脂加工乳 製造下述組成之脫脂加工乳。
實施例4－A－32 脫脂加工乳 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－31相同之條件製造脫脂加工乳。
實施例4－A－33 霜淇淋蘇打 製造下述組成之霜淇淋蘇打。
實施例4－A－34 霜淇淋蘇打 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.025Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－33相同之條件製造霜淇淋蘇打。
實施例4－A－35 抹茶牛奶飲料 製造下述組成之抹茶牛奶飲料。
實施例4－A－36 抹茶牛乳飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－35相同之條件製造抹茶牛奶飲料。
實施例4－A－37 純紅茶(straight tea) 製造下述組成之純紅茶。
實施例4－A－38 純紅茶 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－37相同之條件製造純紅茶。
實施例4－A－39 蘋果汁飲料 製造下述組成之蘋果汁飲料。
實施例4－A－40 蘋果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－39相同之條件製造蘋果汁飲料。
實施例4－A－41 清涼飲料 製造下述組成之清涼飲料。
實施例4－A－42 清涼飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－41相同之條件製造清涼飲料。
實施例4－A－43 柑橘果汁飲料 製造下述組成之柑橘果汁飲料。
實施例4－A－44 柑橘果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－43相同之條件製造柑橘果汁 飲料。
實施例4－A－45 蘋果汁飲料 製造下述組成之蘋果汁飲料。
實施例4－A－46 蘋果汁飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－45相同之條件製造蘋果汁飲料。
實施例4－A－47 蔬果汁 製造下述組成之蔬果汁。
實施例4－A－46 蔬果汁 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵 物以外，以與前述實施例4－A－47相同之條件製造蔬果汁。
實施例4－A－47 運動飲料 製造下述組成之運動飲料。
實施例4－A－48 運動飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－47相同之條件製造運動飲料。
實施例4－A－49 烏龍茶 製造下述組成之烏龍茶。
實施例4－A－50 烏龍茶 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－49相同之條件製造烏龍茶。
實施例4－A－51 檸檬茶 製造下述組成之檸檬茶。
實施例4－A－52 檸檬茶 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－51相同之條件製造檸檬茶。
實施例4－A－53 奶茶 製造下述組成之奶茶。
實施例4－A－54 奶茶 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－53相同之條件製造奶茶。
實施例4－A－55 咖啡飲料 製造下述組成之咖啡飲料。
實施例4－A－56 咖啡飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－55相同之條件製造咖啡飲料。
實施例4－A－57 可可牛奶飲料 製造下述組成之可可牛奶飲料。
實施例4－A－58 可可牛奶飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－57相同之條件製造可可牛奶飲料。
實施例4－A－59 抹茶牛奶飲料 製造下述組成之抹茶牛奶飲料。
實施例4－A－60 抹茶牛奶飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－59相同之條件製造抹茶牛奶飲料。
實施例4－A－61 酸乳飲料 製造下列組成之酸乳飲料。
實施例4－A－62 酸乳飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－61相同之條件製造酸乳飲料。
實施例4－A－63 含維生素飲料 製造下述組成之含維生素飲料。
實施例4－A－64 含維生素飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－63相同之條件製造含維生素飲料。
實施例4－A－65 紅豆湯 製造下列組成之紅豆湯。
實施例4－A－66 紅豆湯 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－65相同之條件製造紅豆湯。
實施例4－A－67 綠茶 製造下述組成之綠茶。
實施例4－A－68 綠茶 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－67相同之條件製造綠茶。
實施例4－A－69 柑橘果汁粉末飲料 製造下述組成之柑橘果汁粉末飲料。
實施例4－A－70 柑橘果汁粉末飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－69相同之條件製造柑橘果汁粉末飲料。
實施例4－A－71 胺基酸飲料 製造下述組成之胺基酸飲料。
實施例4－A－72 胺基酸飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－71相同之條件製造胺基酸飲料。
實施例4－A－73 豆乳飲料 製造下述組成之豆乳飲料。
實施例4－A－74 豆乳飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－73相同之條件製造豆乳飲料。
實施例4－A－75 營養飲料 製造下述組成之營養飲料。
實施例4－A－76 胺基酸飲料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－A－71相同之條件製造營養飲料。
實施例4－B 補充品 以下，就本發明補充品之製造例列舉具體例。
實施例4－B－1 軟膠囊 使用含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(參考例1－3)、明膠、甘油、檸檬酸、大豆油、蜜蠟、卵磷脂、β胡蘿蔔素及水，依常法製造軟膠囊。
實施例4－B－2 軟膠囊 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－B－1相同之條件製造軟膠囊。
實施例4－C 奶油狀食品 以下就本發明之奶油狀食品製造例列舉具體例。
實施例4－C－1 泡沫奶油 製造下述組成之泡沫奶油。
實施例4－C－2 泡沫奶油 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－C－1相同之條件製造泡沫奶油。
實施例4－C－3 咖啡奶精 製造下述組成之咖啡奶精。
實施例4－C－4 咖啡奶精 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－C－3相同之條件製造咖啡奶精。
實施例4－C－5 卡士達奶油 製造下述組成之卡士達奶油。
實施例4－C－6 卡士達奶油 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－C－5相同之條件製造卡士達奶油。
實施例4－C－7 卡士達奶油 製造下述組成之卡達奶油。
實施例4－C－8 卡士達奶油 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05kg/來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵 物以外，以與前述實施例4－C－7相同之條件製造卡士達奶油。
實施例4－D 甜點 以下就本發明之甜點製造例列舉具體例。
5實施例4－D－1 硬優格 使上記組成原料均質化後，添加起始優格、啟動優格並發酵，以製造硬優格。
實施例4－D－2 硬優格 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－1相同之條件製造硬優格。
實施例4－D－3 軟優格 使下述組成原料均質化後，添加啟動優格使其發酵而製得軟優格。
實施例4－D－4 軟優格 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－3相同之條件製造軟優格。
實施例4－D－5 白桃果凍 使用下述成分作為原料，依照果凍之一般製造方法，製造白桃果凍。
實施例4－D－6 白桃果凍 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－5相同之條件製造白桃果凍。
實施例4－D－7 葡萄柚果凍 使用下述成分作為原料，依照果凍一般之製造方法製 造葡萄柚果凍。
實施例4－D－8 葡萄柚果凍 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－7相同之條件製造葡萄柚果凍。
實施例4－D－9 咖啡凍 使用下述成分作為原料，依照果凍之一般製造方法製造咖啡凍。
實施例4－D－10 咖啡凍 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－9相同之條件製造葡萄柚果凍。
實施例4－D－11 草莓牛奶凍 使用下述成分作為原料，依照果凍一般之製造方法，製造草莓牛奶果凍。
實施例4－D－12 草莓牛奶凍 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－D－11相同之條件製造草莓牛奶凍。
實施例4－E 點心 以下就本發明點心之製造例列舉具體例。
實施例4－E－1 硬糖果 使用下述成分作為原料，依照硬糖果之一般製造方法來製造硬糖果。
實施例4－E－2 硬糖果 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－1相同之條件製造硬糖果。
實施例4－E－3 生薑糖 使用下述成分作為原料，依照一般製糖方法製造生薑糖。
實施例4－E－4 生薑糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－3相同之條件製造生薑糖。
實施例4－E－5 草本喉糖 使用下述成分作為原料，依照一般製糖方法製得草本喉糖。
實施例4－E－6 草本喉糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物 以外，以與前述實施例4－E－5相同之條件製造草本喉糖。
實施例4－E－7 檸檬軟膠糖 使用下述成分作為原料，依照膠狀糖果的一般製造方法，製得檸檬軟膠糖。
實施例4－E－8 檸檬軟膠糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－7相同之條件製造檸檬軟膠糖。
實施例4－E－9 太妃糖 使用下述成分作為原料，依照太妃糖之一般製造方法來製造太妃糖。
實施例4－E－10 太妃糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－9相同之條件製造太妃糖。
實施例4－E－11 普澤餅 混合下述成分調製成生料，將其置於烤箱烘焙而製出普澤餅。
實施例4－E－12 普澤餅 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得 之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－11相同之條件製造普澤餅。
實施例4－E－13 薄荷錠 使用下述成分作為原料，依照錠片之一般製造方法來製造薄荷錠。
實施例4－E－14 薄荷錠 除了配合實施例1－1中使用75Et 獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－13相同之條件製造薄荷錠。
實施例4－E－15 優格錠 使用下述成分作為原料，依照錠片之一般製造方法製得優格錠。
實施例4－E－16 優格錠 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－15相同之條件製造優格錠。
實施例4－E－17 檸檬錠 使用下述成分作為原料，依照錠片之一般製造方法製造檸檬錠。
實施例4－E－18 檸檬錠 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－17相同之條件製造檸檬錠。
實施例4－E－19 薄荷口香糖 使用下述成分作為原料，依照口香糖之一般製造方法來製造薄荷口香糖。
實施例4－E－20 薄荷口香糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－19相同之條件製造薄荷口香糖。
實施例4－E－21 蘋果泡泡糖 使用下述成分作為原料，依照泡泡糖之一般製造方法製得蘋果泡泡糖。
實施例4－E－22 蘋果泡泡糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－21相同之條件製造蘋果泡泡糖。
實施例4－E－23 草莓口香糖 使用下述成分作為原料，依照口香糖一般之製造方法來製造草莓口香糖。
實施例4－E－24 草莓口香糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－23相同之條件製造草莓口香糖。
實施例4－E－25 巧克力 使用下述成分作為原料，依照巧克力之一般製造方法製得巧克力。
實施例4－E－26 巧克力 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－25相同之條件製造巧克力。
實施例4－E－27 草莓風味巧克力 使用下述成分作為原料，依照巧克力之一般製造方法製得草莓風味巧克力。
實施例4－E－28 草莓風味巧克力 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5g來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－27相同之條件製造草莓風味巧克力。
實施例4－E－29 小甜餅 混合下述成分製成生料，使其於烤箱烘焙而製得小甜餅。
實施例4－E－30 小甜餅 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－29相同之條件製造小甜餅。
實施例4－E－31 包子皮 使用下述成分，依照包子皮之一般製造方法而製得包子皮。
實施例4－E－32 包子皮 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－31相同之條件製造包子皮。
實施例4－E－33 蘋果派餡 使用下述成分製造蘋果派餡。
實施例4－E－34 蘋果派餡 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－33相同之條件製造蘋果派餡。
實施例4－E－35 雪藏蛋糕 混合下述成分調製生料，使其於烤箱烘焙而製得雪藏蛋糕。
實施例4－E－36 雪藏蛋糕 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代 含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－35相同之條件製造雪藏蛋糕。
實施例4－E－37 蕨餅 使用下述成分製造蕨餅。
實施例4－E－38 蕨餅 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－37相同之條件製造蕨餅。
實施例4－E－39 豆菓子 使用下述成分製造豆菓子。
實施例4－E－40 豆菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.75重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－39相同之條件製造豆菓子。
實施例4－E－41 豆菓子 使用下述成分製造豆菓子。
實施例4－E－42 豆菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物1.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－41相同之條件製造豆菓子。
實施例4－E－43 豆菓子 使用下述成分製造豆菓子。
實施例4－E－44 豆菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物2.25重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－43相同之條件製造豆菓子。
實施例4－E－45 豆菓子 使用下述成分製造豆菓子。
實施例4－E－46 豆菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.75重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－45相同之條件製造豆菓子。
實施例4－E－47 生麩菓子 使用下述成分製造生麩菓子。
實施例4－E－48 生麩菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物1.25重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－47相同之條件製造生麩菓子。
實施例4－E－49 鬆餅(濃味型) 使用下述成分，依照鬆餅之一般製造方法製得鬆餅(濃味型)。
實施例4－E－50 鬆餅(濃味型) 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－49相同之條件製造鬆餅(濃味型)。
實施例4－E－51 鬆餅(原味) 使用下述成分，依照鬆餅之一般製造方法製得鬆餅(原味)。
實施例4－E－52 鬆餅(原味) 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－51相同之條件製造鬆餅(原味)。
實施例4－E－53 起司硬餅乾 使用下述成分，依照一般製造方法製得起司硬餅乾。
實施例4－E－54 起司硬餅乾 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－53相同之條件製造起司硬餅乾。
實施例4－E－55 羊羹 使用下述成分，依照一般製造方法製得羊羹。
實施例4－E－56 羊羹 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸 後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－55相同之條件製造羊羹。
實施例4－E－57 軟小甜餅 使用下述成分，依照一般製造方法製得軟小甜餅。
實施例4－E－58 軟小甜餅 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－57相同之條件製造軟小甜餅。
實施例4－E－59 仙貝 使用下述成分，依照一般製造方法製得仙貝。
實施例4－E－60 仙貝 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－59相同之條件製造仙貝。
實施例4－E－61 洲濱餅 使用下述成分，依一般製造方法製得洲濱餅。
實施例4－E－62 洲濱餅 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－61相同之條件製造洲濱餅。
實施例4－E－63 千菓子 使用下述成分，依照一般製造方法製造千菓子。
實施例4－E－64 千菓子 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－63相同之條件製造千菓子。
實施例4－E－65 水果軟膠糖 使用下述成分，依照一般製造方法製造水果軟膠糖。
實施例4－E－66 水果軟膠糖 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－E－65相同之條件製造水果軟膠糖。
實施例4－E－67 含大豆粉之烘烤點心 除了1.25重量%含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(參考例1－3)及25重量%大豆粉之外，混合適量之葡萄乾、奶油、砂糖、蛋、柑橘皮、鳳梨、難消化性糊精、可可塊、杏仁碎粒、可可粉、食鹽、膨脹劑及香料，使所得混合原料(100重量%)以成型機成形為長方形(約1.5cm×1.5cm×10cm)，以烤箱烘焙180℃而製得含大豆粉之烘烤點心。
實施例4－E－68 含大豆粉之烘烤點心 除了使用係配合有實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.25重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物的混合原料以外，以與前述實施例4－E－67相同之條件製造含大豆粉之烘烤點心。
實施例4－F 調味料 以下，就本發明之調味料製造例列舉具體例。
實施例4－F－1 烤肉醬 製造下述組成之烤肉醬。
實施例4－F－2 烤肉醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－1相同之條件製造烤肉醬。
實施例4－F－3 番茄醬 製造下述組成之番茄醬。
實施例4－F－4 番茄醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－3相同之條件製造番茄醬。
實施例4－F－5 醬油 製造下述組成之醬油(天婦羅醬油)。
實施例4－F－6 醬油 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－5相同之條件製造醬油。
實施例4－F－7 沾醬 以7：3重量比混合下述組成之水相與油相，而製得沾醬(分離型)。
實施例4－F－8 沾醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－7相同之條件製造沾醬(分離型)。
實施例4－F－9 涮涮鍋之芝麻醬 製造下述組成之涮涮鍋芝麻醬。
實施例4－F－10 涮涮鍋芝麻醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－9相同之條件製造涮涮鍋芝麻醬。
實施例4－F－11 烤肉醬(味噌口味) 製造下述組成之烤肉醬(味噌口味)。
實施例4－F－12 烤肉醬(味噌口味) 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－11相同之條件製造烤肉醬(味噌口味)。
實施例4－F－13 零嘴調味料(snack seasoning) 製造下述組成之零嘴調味料。
實施例4－F－14 零嘴調味料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－13相同之條件製造零嘴調味料。
實施例4－F－15 乳化醬油 製造下述組成之乳化醬油。
實施例4－F－16 乳化醬油 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸 發酵物以外，以與前述實施例4－F－15相同之條件製造乳化醬油。
實施例4－F－17 沾醬 製造下述組成之沾醬(乳化型)。
實施例4－F－18 沾醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－17相同之條件製造沾醬(乳化型)。
實施例4－F－19 蒲燒醬 製造下述組成之蒲燒醬。
實施例4－F－20 蒲燒醬 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－19相同之條件製造蒲燒醬
實施例4－F－21 花枝珍味之調味料 製造下述組成之花枝珍味調味料。
實施例4－F－22 花枝珍味之調味料 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－F－21相同之條件製造花枝珍味之調味料。
實施例4－G 殺菌袋食品 以下，就本發明之殺菌袋食品製造例列舉具體例。
實施例4－G－1 殺菌袋咖哩 依定法製造下述組成之殺菌袋咖哩。
實施例4－G－2 殺菌袋咖哩 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－G－1相同之條件製造殺菌袋咖哩。
實施例4－G－3 殺菌袋中華丼素 依定法製造下述組成之殺菌袋中華丼素。
實施例4－G－4 殺菌袋中華丼素 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－G－3相同之條件製造殺菌袋中華丼素。
實施例4－H 食用加工肉品 茲就本發明之食用加工肉品製造例列舉具體例如下。
實施例4－H－1 香腸 使用下述組成原料，依照香腸之一般製造方法而製得香腸。
肉部
實施例4－H－2 香腸 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－H－1相同之條件製造香腸。
實施例4－H－3 煙燻香腸 以18：1之比例混合下述組成之肉部與調味料，依照煙燻香腸之一般製造方法來製造煙燻香腸。
肉部
實施例4－H－4 煙燻香腸 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－H－3相同之條件製造煙燻香腸。
實施例4－H－5 漢堡肉 依定法製造下述組成之漢堡肉。
實施例4－H－6 漢堡肉 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－H－5相同之條件製造漢堡肉。
實施例4－I 揉合食品 以下列舉本發明之揉合食品製造例的具體例。
實施例4－I－1 炸魚板 使用下述組成原料，依照炸魚板之一般的製造方法而製得炸魚板。
實施例4－I－2 炸魚板 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－I－1相同之條件製造炸魚板。
實施例4－J 蛋加工食品 以下就本發明之蛋加工食品之製造例列舉具體例。
實施例4－J－1 厚煎蛋 使用下述組成之原料，依照厚煎蛋之一般製造方法製造厚煎蛋。
實施例4－J－2 厚煎蛋 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸 發酵物以外，以與前述實施例4－J－1相同之條件製造厚煎蛋。
實施例4－K 罐頭或罐裝食品 以下，就本發明之罐頭或罐裝食品之製造例列舉具體例。
實施例4－K－1 柑橘罐頭 將下述組成之糖漿與柑橘果肉封罐，以製得柑橘罐頭。
實施例4－K－2 柑橘罐頭 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－K－1相同之條件製造柑橘罐頭。
實施例4－L 麵包 以下就本發明麵包之製造例列舉具體例。
實施例4－L－1 吐司 使用下述組成之生料製造吐司。
中種
實施例4－L－2 吐司 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05Kg來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－L－1相同之條件製造吐司。
實施例4－M 冷凍點心 以下，就本發明冷凍點心之製造例列舉具體例。
實施例4－M－1 冰淇淋 製造下述組成之冰淇淋。
實施例4－M－2 冰淇淋 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－M－1相同之條件製造冰淇淋。
實施例4－N 大豆加工食品 以下，就本發明之大豆加工食品製造例列舉具體例。
實施例4－N－1 納豆 將蒸大豆99.8重量份與含雌馬酚之大豆胚軸發酵物(參考例1－3)0.4重量份混合，接種納豆菌進行發酵，而製得納豆。
實施例4－N－2 納豆 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－N－1相同之條件製造納豆。
實施例4－N－3 豆腐 製造下述組成之豆腐。
實施例4－N－4 豆腐 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－N－3相同之條件製造豆腐。
實施例4－O 米飯食品 以下，就本發明米飯食品之製造例列舉具體例。
實施例4－O－1 粥 使用下述組成原料，依照粥之一般製造方法而製得粥。
實施例4－O－2 粥 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－O－1相同之條件製造粥。
實施例4－O－3 栗子糯米飯 使用下述組成之原料，依一般製造方法製得栗子糯米飯。
實施例4－O－4 栗子糯米飯 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.5重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－O－3相同之條件製造栗子糯米飯。
實施例4－P 湯品 以下，就本發明湯品之製造例列舉具體例。
實施例4－P－1 玉米奶油湯 使用下述組成之原料，依照湯品一般之製造方法，製得玉米奶油湯。
實施例4－P－2 玉米奶油湯 除了配合實施例1－1中使用75Et獲得之萃取液1－2乾涸後的固態狀萃取物0.05重量份來取代含雌馬酚之大豆胚軸發酵物以外，以與前述實施例4－P－1相同之條件製造玉米奶油湯。
第1圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含總蛋白質之結果(電泳圖)。
第2圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含主要致敏原(Gym4、Gm30K、Gm28K)之結果(電泳圖)。
第3圖顯示檢測參考例1－1所得含雌馬酚之大豆胚軸發酵物、大豆子葉及大豆胚軸所含主要致敏原(7S球蛋白mix、油體蛋白(Oleosins)、胰蛋白酶抑制因子(trypsin inhibitor))之結果(電泳圖)。
第4圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及2－2之雌馬酚含量的結果。
第5圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及2－2之皂苷含量的結果。
第6圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及殘渣2之雌馬酚含量的結果。
第7圖顯示實施例1－1中以TLC分析萃取液1－2及殘渣2之皂苷含量的結果。
第8圖顯示實施例2－1中將藉二氧化矽凝膠管柱層析溶出之溶出液供予TLC(薄層層析)分析的結果。

Claims (9)

  1. 一種可可塊(cacao mass)用於減低含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之苦味的用途。
  2. 如申請專利範圍第1項之用途，其中相對於含雌馬酚之大豆胚軸發酵物100重量份，所含可可塊係占10~2000重量份之比率。
  3. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係以產生雌馬酚之微生物使大豆胚軸發酵而得者。
  4. 如申請專利範圍第2項之用途，其中該含雌馬酚之大豆胚軸發酵物係以產生雌馬酚之微生物使大豆胚軸發酵而得者。
  5. 如申請專利範圍第3項之用途，其中前述產生雌馬酚之微生物係一具有將木質素黃酮類資化而產生雌馬酚之能力的微生物，且該木質素黃酮類係選自於由木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中之至少1種。
  6. 如申請專利範圍第4項之用途，其中前述產生雌馬酚之微生物係一具有將木質素黃酮類資化而產生雌馬酚之能力的微生物，且該木質素黃酮類係選自於由木質素黃酮配糖體、木質素黃酮及二氫木質素黃酮所構成群組中之至少1種。
  7. 如申請專利範圍第1~6項中任一項之用途，其是使可可塊摻合在含有前述含雌馬酚之大豆胚軸發酵物之食品。
  8. 如申請專利範圍第7項之用途，其食品係呈粒狀、片狀或板狀。
  9. 如申請專利範圍第7項之用途，其食品係一烘烤點心。
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Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10297827B2 (en) 2004-01-06 2019-05-21 Sion Power Corporation Electrochemical cell, components thereof, and methods of making and using same
US7358012B2 (en) 2004-01-06 2008-04-15 Sion Power Corporation Electrolytes for lithium sulfur cells
CN102919738B (zh) * 2007-06-13 2016-05-11 大塚制药株式会社 含雌马酚的提取物、其制备方法、雌马酚的提取方法及含雌马酚的食品
EP2684470A4 (en) * 2011-03-11 2014-12-10 Meiji Co Ltd DRINK RESISTANT TO PHOTODEGRADATION
US8735002B2 (en) 2011-09-07 2014-05-27 Sion Power Corporation Lithium sulfur electrochemical cell including insoluble nitrogen-containing compound
JP6123789B2 (ja) * 2012-03-08 2017-05-10 味の素株式会社 スパイス香増強
WO2014091988A1 (ja) * 2012-12-11 2014-06-19 キッコーマン株式会社 豆乳発酵エキスおよび胚軸発酵エキス
US9577289B2 (en) 2012-12-17 2017-02-21 Sion Power Corporation Lithium-ion electrochemical cell, components thereof, and methods of making and using same
WO2014095324A1 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Unilever N.V. Tea-based beverage
TR201802639T4 (tr) 2012-12-19 2018-03-21 Unilever Nv Bitki parankimal dokusundan elde edilen selüloz mikrofibrilleri içeren, içime hazır çay bazlı içecek.
JP6142197B2 (ja) * 2013-03-29 2017-06-07 栃木県 オルニチンを富化した納豆の製造方法
AT13662U1 (de) * 2013-07-30 2014-05-15 Wiesbauer Österreichische Wurstspezialitäten Gmbh Wurstware
RU2016129367A (ru) * 2013-12-19 2018-01-24 Нестек С.А. Пастообразный или жидкий кулинарный вкусоароматический концентрат
AU2015333634B2 (en) * 2014-10-14 2020-04-30 Ausio Pharmaceuticals, Llc Anhydrous crystalline form of S-equol
JP2017200451A (ja) * 2016-05-06 2017-11-09 株式会社ノエビア 飲料
JP7068816B2 (ja) * 2017-12-15 2022-05-17 大塚製薬株式会社 エクオールおよびコラーゲンペプチドを含有する経口組成物
JP7469778B2 (ja) 2018-10-29 2024-04-17 一博 舘田 エクオールを有効成分として含む腸内細菌に対する抗菌剤
WO2020160545A1 (en) 2019-02-01 2020-08-06 Averatek Corporation Coating of nano-scaled cavities
JP2021153429A (ja) * 2020-03-26 2021-10-07 不二製油株式会社 植物性たんぱく質の製造方法及び風味改善方法
JPWO2021235278A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25
CN112028946A (zh) * 2020-08-06 2020-12-04 佳格食品(中国)有限公司 从植物油饼粕中提取黄酮素的方法以及制备马雌酚的方法
JP7422056B2 (ja) 2020-11-17 2024-01-25 株式会社ダイセル エクオール含有食品組成物およびその製造方法
JP7359973B2 (ja) 2020-12-24 2023-10-11 株式会社ダイセル エクオールの経口による血中吸収性を向上させる方法及びβ－シクロデキストリンからなるエクオールの血中吸収促進剤
EP4316255A1 (en) * 2021-03-30 2024-02-07 Fuji Oil Holdings Inc. Oily food product
CN113321485B (zh) * 2021-05-28 2022-06-24 湖南恩捷前沿新材料科技有限公司 一种硫银锗矿型硫化物固态电解质的制备方法
WO2023199929A1 (ja) * 2022-04-13 2023-10-19 株式会社ダイセル エクオールの製造方法
WO2023224042A1 (en) * 2022-05-20 2023-11-23 Suntory Holdings Limited Packaged food or beverage, method of producing packaged food or beverage, use of xanthophyll in production of packaged food or beverage, and oral composition
WO2023224040A1 (en) * 2022-05-20 2023-11-23 Suntory Holdings Limited Packaged food or beverage, method of producing packaged food or beverage, use of polyphenol in production of packaged food or beverage, and oral composition

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW200510542A (en) * 2003-06-30 2005-03-16 Otsuka Pharma Co Ltd Equol-producing lactic acid bacteria-containing composition
CN1681386A (zh) * 2002-07-24 2005-10-12 儿童医院医疗中心 含有对映体牛尿酚的组合物和产物及其制备方法

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2590647A (en) 1949-11-25 1952-03-25 Elmer K Pettibone Soybean powder bases and products
GB1154139A (en) * 1967-04-12 1969-06-04 Ajinomoto Kk Process for Preparing a Sour Milk Beverage or Yoghurt.
US4207315A (en) * 1976-10-20 1980-06-10 University Patents, Inc. Process for treating proliferative skin diseases using certain diamino compounds
JPS6049751A (ja) * 1983-08-29 1985-03-19 Ajinomoto Co Inc 食品組成物
US4816407A (en) * 1985-10-11 1989-03-28 Sepracor Inc. Production of low-ethanol beverages by membrane extraction
JPS63243013A (ja) * 1987-03-31 1988-10-07 Maruzen Kasei Kk 保湿剤
FI872147A (fi) * 1987-05-15 1988-11-16 Suomen Sokeri Oy Fiskfoder, foerfarande foer framstaellning av detsamma och utfodringsfoerfarande.
JP3181650B2 (ja) 1991-12-27 2001-07-03 オリエンタルバイオ株式会社 動脈硬化予防食品
EP0656786B2 (en) * 1992-05-19 2014-04-23 Novogen Research Pty Ltd Use of isoflavone phyto-oestrogen extracts of soy or clover
JPH07163295A (ja) * 1993-12-13 1995-06-27 Fuji Oil Co Ltd チョコレート
JP3374686B2 (ja) 1996-12-17 2003-02-10 不二製油株式会社 大豆蛋白・ココア顆粒
US6060070A (en) 1997-06-11 2000-05-09 Gorbach; Sherwood L. Isoflavonoids for treatment and prevention of aging skin and wrinkles
JP3998293B2 (ja) * 1997-06-18 2007-10-24 株式会社ヤクルト本社 ヘリコバクター・ピロリ菌抑制剤
AU735713B2 (en) * 1997-08-08 2001-07-12 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Isoflavone-containing composition
US20010018197A1 (en) 1997-12-23 2001-08-30 Protein Technologies International, Inc. Method for producing ultrapure vegetable protein materials
ES2232107T3 (es) * 1998-01-12 2005-05-16 Nichimo Kabushiki Kaisha Proceso para la preparacion de compuestos de isoflavona.
JP3253017B2 (ja) * 1998-08-12 2002-02-04 不二製油株式会社 大豆胚軸加工品を用いる食品
JP2000095710A (ja) 1998-09-21 2000-04-04 Taisho Pharmaceut Co Ltd カカオ末を配合した経口用固形製剤
IT1302262B1 (it) * 1998-09-24 2000-09-05 Rodolfo Migliavacca Procedimento per la produzione di estratti di soia
NZ511812A (en) 1998-11-25 2003-11-28 Nutri Pharma As Method of lowering lipid, triglyceride, total cholesterol and LDL-cholesterol serum levels and increasing the HDL/LDL cholesterol ratio thereby treating cardiovascular disease
ATE259646T1 (de) 1998-11-25 2004-03-15 Nutri Pharma As Zusammensetzung enthaltend sojaprotein, diätfasern und phytoestrogen sowie ihre verwendung zur vorbeugung und/oder behandlung von typ ii diabetes, des metabolischen syndroms und assozierten kardiovaskulären erkrankungen
US20030113390A1 (en) 1998-11-25 2003-06-19 Hoie Lars Henrik Composition comprising soy protein, dietary fibers and a phytoestrogen compound and use thereof in the prevention and/or treatment of various diseases
ES2316350T3 (es) 1999-02-26 2009-04-16 SHIONOGI & CO., LTD. Capsulas blandas masticables con propiedades mejoradas de administracion y procedimiento para producirlas.
GB9909357D0 (en) 1999-04-24 1999-06-16 Glaxo Group Ltd Medicament carrier
JP2001045989A (ja) * 1999-08-05 2001-02-20 Snow Brand Milk Prod Co Ltd ゼリー状食品
CN1096456C (zh) 2000-06-08 2002-12-18 蒋宇扬 连续提取大豆异黄酮、低聚糖、皂甙的工艺
WO2001095901A1 (en) 2000-06-14 2001-12-20 Alla Shapiro Radioprotective agents
US6565864B2 (en) * 2000-12-28 2003-05-20 Unilever Home & Personal Care Usa, A Division Of Conopco, Inc. Skin care product containing retinoids and phytoestrogens in a dual compartment package
DE10118999A1 (de) 2001-04-18 2001-11-08 Fritz Reiners Verwendung von hormonfreien Kombinationspräparaten zur Vorbeugung und Behandlung von klimakterischen Beschwerden bei Männern
JP2004533831A (ja) * 2001-06-13 2004-11-11 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー イソフラボノイド産生植物の植物の一部のイソフラボノイド特性を変化させる方法
SE0103211D0 (sv) 2001-09-27 2001-09-27 Pharmacia Ab New formulations and use thereof
US20030119879A1 (en) * 2001-10-15 2003-06-26 Thomas Landh Nicotine and chocolate compositions
WO2003097037A1 (fr) * 2002-05-20 2003-11-27 Fuji Oil Company, Limited Substance attenuant les symptomes allergiques
US7029883B2 (en) * 2002-06-04 2006-04-18 Eastmedicine Limited Preparation of an Auricularia auricula polysaccharide and its use in mammals
EP1569636B1 (en) * 2002-10-29 2017-12-13 Colorado State University Research Foundation Use of equol for treating androgen mediated diseases
US8580846B2 (en) 2002-10-29 2013-11-12 Brigham Young University Use of equol for ameliorating or preventing neuropsychiatric and neurodegenerative diseases or disorders
JP3991225B2 (ja) * 2003-03-25 2007-10-17 大塚食品株式会社 大豆発酵食品およびその製造法
SE0300830D0 (sv) 2003-03-26 2003-03-26 Pharmacia Ab New formulations and use thereof
SE0300831D0 (sv) 2003-03-26 2003-03-26 Pharmacia Ab New formulations and use therof
JP4610525B2 (ja) * 2003-06-30 2011-01-12 大塚製薬株式会社 エクオール産生乳酸菌含有組成物
WO2005023021A1 (ja) * 2003-09-02 2005-03-17 Bbk Bio Corporation ダイエット食品
US8287897B2 (en) 2003-09-12 2012-10-16 Ryukakusan Co., Ltd. Bitterness-masking particulate jelly beverage
US20050260303A1 (en) 2004-03-08 2005-11-24 Tritch Daniel L Sports drink
WO2005089567A1 (en) 2004-03-17 2005-09-29 Nestec S.A. Compositions and methods for reducing or preventing obesity
US7303778B2 (en) * 2004-04-27 2007-12-04 Solae, Llc Low carbohydrate coating system for breaded foods
WO2006001344A1 (ja) 2004-06-24 2006-01-05 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. イソソルビド含有ゼリー製剤
US20060024408A1 (en) * 2004-08-02 2006-02-02 Cicci Matthew A Nutrition bar for adolescent consumers
JP2006069898A (ja) * 2004-08-31 2006-03-16 Fuji Oil Co Ltd 腎機能改善組成物
JP4811760B2 (ja) 2004-12-27 2011-11-09 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 ダイゼイン資化によるエコール生成能を改善するための腸内細菌およびその利用
US20060165812A1 (en) 2005-01-21 2006-07-27 Amershire Investment Corporation Method and topical formulation for treating headaches
US20060269508A1 (en) * 2005-03-29 2006-11-30 Trejo Amy V Means for regulating the cosmetic appearance and/or health of human keratinous tissue
US7528267B2 (en) 2005-08-01 2009-05-05 Girindus America, Inc. Method for enantioselective hydrogenation of chromenes
US7696363B2 (en) 2005-12-02 2010-04-13 Yasoo Health Inc. Preparation of flavonoid compounds
MY169554A (en) 2005-12-06 2019-04-22 Otsuka Pharma Co Ltd Equal-containing fermentation product of soybean embryonic axis, and method for production thereof
JP2007215406A (ja) 2006-02-14 2007-08-30 Fuji Oil Co Ltd 大豆胚軸を利用した健康食品
US20080089941A1 (en) 2006-06-01 2008-04-17 Mower Thomas E Fucoidan compositions and methods
US20100029994A1 (en) * 2006-12-01 2010-02-04 E. I. Du Pont De Nemours And Company Production of butenes and derivatives therefrom from dry ethanol
CN102919738B (zh) 2007-06-13 2016-05-11 大塚制药株式会社 含雌马酚的提取物、其制备方法、雌马酚的提取方法及含雌马酚的食品
JP5306768B2 (ja) * 2008-10-21 2013-10-02 株式会社永谷園 オルニチンを含有する味噌の製造方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1681386A (zh) * 2002-07-24 2005-10-12 儿童医院医疗中心 含有对映体牛尿酚的组合物和产物及其制备方法
TW200510542A (en) * 2003-06-30 2005-03-16 Otsuka Pharma Co Ltd Equol-producing lactic acid bacteria-containing composition

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JP7121872B1 (ja) 2022-08-18
JP6892972B2 (ja) 2021-06-23

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